Роль индукторов дифференцировки в комбинированной терапии злокачественных новообразований тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Каршиева, Саида Шамильевна

• Каршиева, Саида Шамильевна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Каршиева, Саида Шамильевна

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Введение.

1.2 Краткая характеристика индукторов дифференцировки.

1.3 Основные мишени индукторов дифференцировки и механизмы их цитодифференцирущего действия.

1.4 Эффективность цитодифференцирующих агентов в комбинированной терапии злокачественных новообразований.

Глава 2. Материалы и методы

2.1 Клеточные линии, методы их культивирования и оценки пролиферирующей и дифференцировочной активностей.

2.2 Перевиваемые опухоли мышей и человека, методы их трансплантации и оценки противоопухолевого эффекта.

2.3 Препараты, дозы, способ и режим их введения.

2.4 Методы световой и электронной микроскопии.

2.5 Метод проточной ДНК-цитометрии.

Результаты и их обсуждение

Глава 3. Изучение цитодифференцирующих свойств различных индукторов на экспериментальных гемобластозах in vitro.

3.1 Влияние ПТРК, ДМСО и Der на дифференцировку клеток линии NB4.

3.2 Влияние ПТРК, ДМСО и Der на дифференцировку клеток линии HL60.

Глава 4. Изучение цитодифференцирующих свойств различных индукторов на экспериментальных гемобластозах in vivo

4.1 Разработка модели дифференцирующегося гемобластоза на мышах.

4.2 Влияние ПТРК, РФН и Der на рост перевиваемого эритробластоза Френд.

Глава 5. Изучение цитодифференцирующих свойств различных индукторов на клетках меланомы животных и человека.

5.1 Влияние ПТРК и Der на дифференцировку клеток меланомы человека линии MS.

5.2 Влияние Der и ИН-А на дифференцировку клеток мышиной меланомы линии В16.

5.3 Влияние Der и ИН-А на дифференцировку клеток меланомы человека линии Ме15.

Глава 6. Эффективность комбинированной терапии меланомы животных и человека с использованием цитодифференцирующих агентов

6.1 Влияние Der и ЦП на рост мышиной меланомы В16.

6.2 Влияние Der и РФН на рост ксенографтов меланомы Ме16 человека.

6.3 Влияние Der h DTIC на рост ксенографтов меланомы Ме17 человека.

Обсуждение результатов

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль индукторов дифференцировки в комбинированной терапии злокачественных новообразований»

Актуальность исследования?

Самостоятельное:- применение; цитодифференцирующих агентов (ЦДА)г в онкологии связано с: доказанным феноменом программированной гибели некоторых злокачественных клеток путем запуска терминальной дифференцировки [ 1, 94]. На примере натурального метаболита витамина А --полностью трансретиноевой кислоты (ГП'РК) - показано; что этот агент, запуская;, терминальную дифференцировку в клетках острого промиелоцитарного лейкоза. (Ol IJI), останавливает их пролиферацию и индуцирует апоптоз: Данные доклинического изучения продемонстрировали перспективность, поиска,: новых оригинальных агентов в ряду производных ПТРК, например;-. 13-цис-ретиноевой кислоты. Другим: давно» известным' примером': использования? ЦДА в онкологии?, является запуск дифференцировки; клеток иммунозависимых опухолей: под влиянием иммунобиологических агентов; - цитокинов; Показана; эффективность применения? препаратов a-2-интерферона. (а2-ИФН) при; волосатоклеточном лейкозе, диссеминированной меланоме и раке почки. [2, 22, 23, 27]. Среди новых цитодифференцирующих агентов наиболее интересны, и перспективны низкомолекулярные . соединения: [99,108]. В настоящем исследовании углубленно изучено одно из соединений этого типа - новый отечественный оригинальный псевдопептид дикарбамин (Der), представляющий собой 2-(имидазол-4-ил)-этанамид пентандиовой-Т,5 кислоты.

Анализ эффективности лекарственного лечения- некоторых форм рака, в числе которых меланома, рак почки и ОГ1Л, показывает, что, несмотря на увеличение числа лекарственных средств различных групп, результаты, остаются неудовлетворительными. В последнее время интенсивно изучается возможность включения ЦДА, в схемы, комбинированного лечения с целью повышения эффективности лечения: Особо актуально- использование малотоксичных ЦДА [1011, 47, 60; 123]. При комбинировании ЦДА с химиотерапией существует опасность снижения эффективности лечения за счет уменьшения пролиферативного пула опухолевых клеток. В.-связи с этим, представляется актуальным экспериментальное доклиническое изучение новых схем комбинированной терапии злокачественных опухолей с использованием индукторов дифференцировки. Цель исследования

Выявить роль индукторов дифференцировки в эффективности противоопухолевой терапии на моделях опухолей животных и человека. Задачи исследования:

1. Выявить in vitro и in vivo на моделях гемобластоза и меланомы степень модификации эффективности комбинированного лечения индукторами дифференцировки при различных схемах применения.

2. Определить in vivo влияние цитодифференцирующих агентов ПТРК, РФН и Der на опухолевый рост и эффективность некоторых схем комбинированной химиотерапии на моделях экспериментальных, гемобластозов и меланом.

3. Исследовать in vitro и in vivo возможный механизм антипролиферативного и противоопухолевого действия индукторов дифференцировки на клеточном и тканевом уровнях.

Методы исследования:

Методы культивирования клеток, методы экспериментальной химиотерапии, иммунофлуоресцентные методы, метод проточной цитофлуориметрии, методы световой и электронной микроскопии, биологические методы оценки эффективности препаратов в опытах на экспериментальных моделях опухолевого роста; статистическая обработка результатов.

Научная новизна

Впервые разработана модель перевиваемого дифференцирующегося гемобластоза на мышах с использованием культуры клеток DS19 эритробластоза Френд (ЭБФ), адекватная для доклинического изучения ЦДА in vivo. Впервые на перевиваемом ЭБФ и меланомах мышей и человека in vitro и in vivo изучены свойства известных ЦДА ПТРК, а2-ИФН и нового Der в монорежиме и/или в различных сочетаниях, а также в комбинации с дакарбазином (DTIC') или цисплатином (ЦП). Впервые установлен диапазон разовых терапевтических доз Der 0,5-4,5 мг/кг при 5-30-кратном введении per os для лечения опухолей мышей и 1,5-4,5 мг/кг при 5-10-кратном per os введении для лечения ксенографтов опухолей человека. Впервые найдены эффективные комбинации и подобраны режимы введения изученных ЦДА (Der, а2-ИФН и ПТРК) и противоопухолевых цитостатиков. Установлен синергизм Der и а2-ИФН при последовательном введении на ЭБФ и при одновременном введении на ксенографтах меланомы человека Meló. Найдено аддитивное усиление эффективности ЦП и DTIC при сочетании с Der и Der с ПТРК при последовательном введении. Впервые найдены оптимальные концентрации ПТРК, а2-ИФН и Der для проявления антипролиферативного и цитодифференцирующего действия на культурах клеток меланомы человека MS и Ме15, а также эффективные дозы in vivo на ЭБФ в монорежиме и в комбинациях. Впервые установлено, что антипролиферативное и противоопухолевое действие ПТРК, а2-ИФН, ДМСО и Der сопряжено со следующими проявлениями цитодифференцировки: изменение фенотипического профиля клеток (промиелоцитарный лейкоз человека NB4, HL60) интенсификацией меланиногенеза (культуры клеток меланомы человека MS и Ме15, и п/к ксенографты Meló); увеличение активности апоптоза, снижение активности митоза и возрастание зоны некроза в опухолях мышей и человека (гемобластоз ЭБФ, меланома В J б, Meló, Ме17); перераспределение клеток по фазам клеточного цикла - задержка клеток в стационарной фазе G¿/G; и накопление в фазе S без выхода в. митоз (гемобластозы NB4, HL60, меланомы В16, Meló, MelT). Научно-практическая значимость

В результате исследований' получены новые данные о свойствах различных цитодифференцирующих агентов на моделях опухолевого роста, имеющие фундаментальное значение. Установлены новые феномены антипролиферативной активности ПТРК, препаратов а2-ИФН и Der на культурах клеток меланомы, человека и животных MS, Ме15, В16, а также антипролиферативной и противоопухолевой активности Der на культурах клеток ОПЛ, перевиваемых гемобластозе и меланомах животных и человека.

Полученные новые экспериментальные данные о способности Der ингибировать пролиферацию клеток и опухолевый рост меланомы животных и человека с увеличением выживаемости, о синергизме между препаратами а2-ИФН' и Der и об аддитивном усилении эффективности ЦП, DTIC и ПТРК в сочетании с Der являются перспективными для клинического изучения. Связь темы диссертации с планом научных работ ГУ РОНЦ РАМН

Диссертационная работа полностью соответствует основным научным и практическим направлениям ГУ РОНЦ РАМН. Тема работы утверждена Ученым советом НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей ГУ РОНЦ РАМН.

Положения, выносимые на защиту

Индукторы дифференцировки, ПТРК и Der, способны запускать дифференцировку клеток острого промиелоцитарного лейкоза человека NB4 и HL60 и оказывать антипролиферативный эффект, модулируя экспрессию дифференцировочных и пролиферативного антигенов, а также изменяя распределение клеток по фазам клеточного цикла.

Результаты экспериментального изучения противоопухолевой активности ПТРК, а2-ИФН и Der в монорежиме и в комбинации друг с другом и в разных режимах введения на модели опухолевого роста эритробластозе Френд.

Der и а2-ИФН проявляют синрегизм, подавляя in vitro пролиферацию клеток мышиной меланомы В16 и меланомы человека Ме15.

Результаты экспериментального изучения противоопухолевой активности Der в монорежиме и в сочетании с химиотерапией (цисплатин, дакарбазин) и в разных режимах введения на моделях опухолевого роста. Апробация работы

Основные положения диссертации доложены на- заседании Ученого Совета*НИИ ЭДиТО ГУ РОНЦ им.Н.Н.Блохина РАМН, 2006 г.; на VI и VII Всероссийскою научно-практической, конференции «Отечественные противоопухолевые препараты», (М/о, с-з «Московский», 2007, 2008 гг.); на Российской конференции, по меланоме с международным участием, проводимой совместно с Европейской' школой онкологии и Всемирной рабочей группой по меланоме (Москва, 2008 г.); 7 июня 2008< г. на ' межлабораторной, конференции НИИ ЭДиТО с участием лаб. клеточного иммунитета, лаб. фармакокенетики,, лаб. комбинированной терапии опухолей, лаб. фармакологии и токсикологии, лаб. экспериментальной диагностики и биотерапии опухолей, лаб. синтетических противоопухолевых веществ, а также лаборатории фармакологии и химиотерапии ГУ НИИНА им. Г.Ф.Гаузе РАМН. Публикации

По материалам диссертации опубликовано 6 научных работ, в том числе 4 научные статьи в рецензируемых журналах и 2 тезисов. Объем и структура диссертации

Диссертация, изложена на 151 страницах машинописного текста и состоит из введения, «обзора литературы», «материалов и методов», 4-х глав собственных результатов, выводов, списка литературы, списка сокращений. Список литературы включает 138 публикаций, из них 42 отечественных и 96 иностранных. Работа иллюстрирована 62 рисунками и 34 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Онкология», Каршиева, Саида Шамильевна

выводы

1. Цито дифференцирующие агенты (ЦДА) дикарбамин и диметилсульфоксид в отличие от полностью трансретиноевой кислоты модифицируют фенотип клеток линий NB4 и HL60 острого промиелоцитарного лейкоза человека (ОПЛ) на промежуточных этапах дифференцировки, сдвигая её в сторону гранулоцитов и/или моноцитов, статистически значимо уменьшая экспрессию маркеров CD33, CD38, и CD54 и увеличивая экспрессию маркеров CDllb, CD15 и CD18 без запуска терминальной миелоидной дифференцировки.

2. Антипролиферативное действие ЦДА на клетки линий NB4 и HL60 проявляется снижением их митотической активности с уменьшением экспрессии пролиферативного антигена Ki67, а также 2-3-кратным перераспределением клеток из пролиферативной S-фазы в стационарную Go/Gi-фазу клеточного цикла. Антипролиферативная активность препаратов убывает в ряду: ПТРК>ДМСО>Осг.

3. В монорежиме ЦДА достоверно ингибируют рост эритробластоза Френд (ЭБФ) при 2-3-кратном уменьшении митотической активности и увеличении клеточного апоптоза и зоны некроза; воспроизводимость и уровень эффекта убывают в ряду РФН>Осг>ПТРК.

4. Комбинированная терапия ЭБФ при одновременном введении РФН и ПТРК неэффективна, но эффективна при последовательным введении РФН и Der (цитокин - первый) или двух индукторов Der и ПТРК (терминальный индуктор — последний). Терапевтический выигрыш проявляется синергическим усилением торможения роста опухоли с длительной стабилизацией процесса при 1,5-2-кратном уменьшении числа клеток с митозами и 2-4-кратном увеличении числа клеток с признаками апоптоза и зоны некроза.

5. ИН-А и Der статистически значимо и дозозависимо уменьшают пролиферативную фракцию клеток меланом В16 и Ме15 в 2-2,7 раза; ИН-А проявляет синергизм с Der при 3-5-кратном усилении антипролиферативного действия.

6. Der в диапазоне доз 1,5-4,5- мг/кг статистически значимо ингибирует рост меланомы мышей В16 и меланом человека Ме16 и Ме17 на 51-93% с увеличением продолжительности жизни мышей на 29-41%; эффективность реализуется путем перераспределения'клеток из пролиферирующей фракции в стационарную, снижения митотической активности в 1,2-2,5 раза, с 1,5-5-кратным увеличением клеток с признаками апоптоза и зоны некроза, а также интенсификации меланиногенеза в меланинсинтезирующих клетках (ИИМ=19,0).

7. Одновременное комбинированное применение цисплатина с цитодифференцирующим агентом Der приводит к достоверному повышению эффективности лечения мышей с меланомой»В16; терапевтический выигрыш проявляется увеличением'торможения роста-опухоли и продолжительности жизни.

8. Последовательное комбинированное применение DTIC с цитодифференцирующим агентом1 Der (1-2 курса) приводит к достоверному повышению эффективности лечения ксенографтов беспигментной метастазирующей в легкие меланомы человека Ме17; терапевтический выигрыш проявляется усилением ингибирующего-действия на рост опухоли с частичной регрессией опухоли и увеличением продолжительности жизни мышей.

9. Одновременная комбинированная длительная терапия ксенографтов пигментированной меланомы человека Ме16 РФН на фоне Der приводит к синергическому усилению эффективности и продолжительному ингибированию роста опухоли.,

10. Схемы комбинированного лечения с использованием цитодифференцирующих агентов ПТРК, РФН! или- Der не сопровождаются лимитирующими побочными эффектами.

ОБЩИЕ ЗАКЛЮЧЕНИЕ Комплексное исследование: влияния ПТРК, ДМСО и; Der на фенотииический профиль и функциональную активность клеток ОПЛ человека линии NB4 и HL60 позволяет заключить, что каждый из изученных ЦДА способен запускать дифференцировку клеток, причем; терминальную -только Г1ТРК. Как и следовало ожидать, клетки NB4, в которых присутствует аберрантная форма рецептора ретиноевой кислоты RARLa, оказались наиболее чувствительными к действию ITTPK. Это объясняется механизмом действия ПТРК, который! подробно; описан в обзоре литературы. ДМСО в отличие от ПТРК не вызывает полное созревание нейтрофилов из клеток NB4; но существенно сдвигает дифференцировку в сторону гранулоцитов и/или моноцитов. Der в широком диапазоне концентраций способен запускать дифференцировку на дискретном этапе ранних миелоидных предшественников. При этом модуляция экспрессии антигена CD33 Bt клетках лейкоза NB4 свидетельствует о том, что, скорее всего, происходит сдвиг блока дифференцировки на несколько ступеней. Отсутствие этого эффекта в клетках лейкоза 1TL60, в которых нет специфической хромосомной транслокации t(15;17), подтверждает, что Der способен ингибировать пролиферацию только тех клеток; в которых присутствует аберрантная? форма рецептора. С другой стороны, эта неполная дифференцировка не сопряжена с модуляцией антигенов зрелых гранулоцитов; таких как CD 15 и CDllb, и с изменением адгезионного профиля клеток (CD54). В результате она является функционально незавершенной, так как не сопровождается изменением фагоцитарной активности и способности клеток к хемолюминисценции. Таким образом, дифференцировка гемопоэтических клеток, которая запускается препаратом- Der, отличается от процессов, индуцируемых какПТРК, так и ДМСО; Анализ эффективности ЦДА на ЭБФ в монорежиме и под контролем гистологических изменений в ЭБФ показал, что в РФН не вызывает достоверного противоопухолевого эффекта, а Г1ТРК или Der достоверно кратковременно* ингибируют роет опухоли на 59 и 65%,. соответственно. Комбинации IITPlODcr, DcrHPOH или Dcr-i-ПТРК малоэффективны по воздействию на рост опухолевого' узла. Наиболее эффективною из; всех изученных сочетаний была; комбинация- РФШ-Dcr, что выражалось в достоверном ТРО-67% и длительной стабилизации роста опухоли.

Гистологические изменениям в опухоли? полностью подтверждают терапевтическую' эффективность указанных агентов и их сочетаний по основным показателям дифференцировки клеток ЭБФ- которые проявляются, во взаимоусилении; направления дифференцировки с перераспределением-бластных клеток,, а также в увеличении процессов некротической; и апоптотической гибели клеток, например; увеличение зоны; некроза до 4050% и числа; клеток; с. признаками; апоптоза в 2-3 раза. Более; значительные; гистологические изменения? получены при; монотерапии Der или- ПТРК,, а также при« различных; их сочетаниях независимо' от последовательности введения: На основании данных терапевтических опытов и гистологических исследований п/к ЭБФ после применения Der, ПТРК и РФН в монорежиме и в различных комбинациях следует считать .перспективными для дальнейшего изучения комбинации- Der и РФН в прямой и обратной последовательности введения, а также Der и ПТРК с введением первым Der. Неудачи при? комбинации Der и ПТРК могут быть следствием общих мишеней для их цитодифференцирующего действия^

Опыты по изучению цитодифференцирующего действия Der, ИН-А и ПТРК на клетки мышиной меланомы В16 и меланом человека MS и Ме15, показалщ что Der и ИН-А в относительно высоких концентрациях дозозависимо замедляют пролиферацию клеток в течение 72 часов, не влияя на их выживаемость. При; этом сочетание Der и ИН-А. усиливает ингибирующий эффект препаратов на клетки. ПТРК и Der в относительно низких- концентрациях увеличивают фракцию клеток меланомы, MS с высокой степенью мелкогранулярной зернистости в 3 раза относительно интактных клеток.

Замедление скорости пролиферации и запуск меланинсинтезирующей функции клеток отдельных видов меланомы, животных и человека, которые проявляются* при достижимых концентрациях всех 3-х указанных агентов, свидетельствуют о неспецифическом цитодифференцирующем действии на клетки этой- опухоли. Анализ полученных результатов дает возможность выявить общие и различные стороны цитодифференцирующего эффекта Der, ИН-А и ПТРК на использованные тест-системы. Прежде всего, видно, что Der и ИН-А не только близки, по уровню-антипролиферативной активности и относительно высоким ингибирующим концентрациям, но, возможно, имеют разные мишени на клетке, т.к. их сочетание привело к существенному снижению-пролиферации меланомы. Аналогичные данные получены для'Осг и ПТРК. Оба препарата индуцируют образование мелкогранулированной-зернистости в клетках меланомы, что свидетельствует о восстановлении меланинсинтезирующей- функции и, соответственно, о запуске клеточной дифференцировки; но ■ без существенного влияния, на интенсивность роста клеток и их> морфологию, т.е не проявляют цитотоксичности.

Проведенные исследования показали, что результаты опытов in vitro не однозначны, т.к. не всегда цитодифференцирующее действие изученных агентов сопровождается замедлением пролиферации или, что лучше, остановкой роста меланомы, как, например, на клетках MS. Поскольку указанные эффекты реализуются при* достижимых in vivo концентрациях, была проведена серия опытов с изучением эффективности всех 3-х ЦДА на перевиваемых меланомах животных и человека.

В экспериментах на различных моделях меланомы животных и человека выявлена эффективность индукторов дифференцировки: известного препарата РФН и нового - Der и установлены оптимальные дозы и режимы применения. Показано, что терапевтический эффект РФН в отношении пигментированной' меланомы человека Ме16 реализуется при разовой дозе 100 тыс. ME/кг. при 5-дневном* курсе лечения и проявляется в незначительном и кратковременном ингибировании роста опухоли.

Терапевтический эффект Der реализуется при пероральном применении в разовых дозах 1,5-4,5 мг/кг в режиме 5-30 дневного курса и характеризуется• ингибированием роста опухоли на 51-93%, в ряде случаев с увеличением продолжительности жизни мышей на 29-41%. Для мышей с меланомой В16 оптимальной является схема применения Der в разовых дозах 1,5-4,5 мг/кг с введением в течение 15-30 дней. Эффективные суммарные дозы должны быть более 22,5 мг/кг. Для* мышей с ксенографтами меланомы человека оптимальной схемой является длительное (не менее 5-10 дней) введение в разовой дозе 4,5 мг/кг. Более высокую чувствительность мышиной меланомы В16 к действию Der можно объяснить отсутствием иммунологического компонента эффекта препарата у иммунодефицитных мышей. Предварительные исследования, проведенные в лаборатории клеточного иммунитета (рук. проф. М.В.Киселевский) показали, что Der является эффективным индуктором лимфокинактивированных клеток (JIAK) (неопубликованные данные). Во всех экспериментах с моделями меланомы терапия РФН или Der не вызывала каких-либо^ побочных или токсических эффектов.

Механизм ингибирующего противомеланомного действия изучен только для нового препарата Der. Его действие иллюстрирует распределение клеток по фазам клеточного цикла и их функциональное состояние (способность к меланиногенезу, активность митозов и апоптоза). Для всех 3-х использованных моделей меланомы показано, что Der реализует свой ингибирующий эффект путем усиления в 1,5-6,0 раз некротической гибели опухолевых клеток и в 1,5-5,0 раз активности апоптоза. Такое повреждающее действие Der, возможно, связано, с его способностью снижать доли пролиферирующих клеток и увеличивать долю-клеток в стационарной фазе Go/Gj; индекс пролиферации снижается в 2 раза. Для пигментированной меланомы человека' Ме16 показано, что Der осуществляет свое цитодифференцирующее действие также за счет усиления меланинсинтезирующей функции клеток в 14 раз.

Комбинированная химиотерапия ЦП в сочетании с последующим введением цитодифференцирующего препарата Der в разовой дозе 1,5 мг/кг при лечении пигментированной метастазирующей мышиной меланомы В16 оказалась достоверно более эффективной в сравнении с монохимиотерапией как по торможению роста опухоли на 63-76%, так и в 2 раза по выживаемости мышей. Примененный в субтерапевтической разовой дозе Der реализовал в этом эксперименте свойства модификатора эффективности цитостатика.

При комбинированном лечении пигментированной меланомы человека Ме16 одновременное использование * 2-х цитодифференцирующих агентов i Der в разовой дозе 1,5 мг/кг и РФН в сравнениигс монотерапией каждым из препаратов, хотя и не позволило добиться высокого противоопухолевого эффекта, но-способствовало стабилизации роста в течение по меньшей мере 2-х недель после окончания терапии*. Der и РФН проявили синергизм при лечении меланомы.

Комбинированная химиотерапия. DTIC беспигментной метастазирующей меланомы человека Ме17 в. сочетании с последующим введением Der в разовой дозе 4,5 мг/кг достоверно более эффективна, чем монохимиотерапия. Это выражалось в усилении ингибирования роста опухоли в 1,5 раза, частичной регрессии опухоли и увеличении продолжительности жизни мышей на 29%.

Цитодифференцирующая терапия меланомы с использованием РФН или Der эффективна. РФН проявляет синергизм с Der при лечении меланомы. Der оказывает противомеланомное действие в широком диапазоне доз при длительном пероральном применении путем перераспределения клеток из пролиферирующей фракции в стационарную, снижения их митотической активности, усиления процесса апоптоза и увеличения зоны некроза а также увеличения степени дифференцировки клеток путем интенсификации меланиногенеза. Поскольку Der прошел клинические испытания по 1 фазе, выявленная1- его противомеланомная активность дает основания для клинического испытания препарата в монорежиме по 2 фазе в качестве средства поддержания ремиссии у пациентов с исчерпанными возможностями лечения.

Использование цитодифференцирующих препаратов друг с другом или после химиотерапии при лечении диссеминированной меланомы может привести к существенному повышению эффективности. Для повышения эффективности интерферонотерапии может быть рекомендована комбинация с одновременным применением РФН и Der. Эффективность комбинированной химиотерапии ЦП или DTIC в сочетании с Der (применение между курсами химиотерапии) может служить основанием для клинических испытаний по 2 фазе в качестве средства повышения эффективности лечения у пациентов с диссеминированной меланомой

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Каршиева, Саида Шамильевна, 2009 год

1. Абелев Г.И. Дифференцировка и опухолевый фенотип в клетках лейкозов и лимфом.- В кн.: Клиническая онкогематология./ под ред. Волковой М.А., М., Медицина, 2001 Г.-С.116-123.

2. Акимов М.А., Гершанович М.Л. Клиническая оценка эффективности современных режимов химиотерапии первой, второй и третьей линии у больных диссеминированной меланомой кожи.//Вопросы онкологии.- т. 47.- №4.- 2001 г.- С. 428-434.

3. Атауллаханов Ф.И. Каскады ферментативных реакций и их роль в биологии.//Сор. Обр. Жур.-2000 г.-т.6.-№7.-С. 2-10.

4. Барышников А.Ю., Кадагидзе З.Г., Махонова Л.А. и соавт. Иммунологический фенотип лейкозной клетки.- М.: Медицина, 1989.-С. 239.

5. Белоусова А.К. Молекулярно-биологические подходы к терапии опухолей.- М., ВИНИТИ, 1993 Г.-206 с.

6. Богданов А. А. Теломеры и теломераза //Сор. Обр. Жур.-1998.-№ 12.-С. 12-18.

7. П.Волкова Т. О. Цитотоксическое и апоптогенное действие индукторов дифференцировки клеток линии К562.//Автореферат канд. дисс.-Карелия.-2001 г.

8. Гланц С. Медико-биологическая статистика.- М., Практика, 1999 г.- 459 с.

9. Н'.Демидов JI.B:, Харкевич Г.Ю. Адъювантное лечение больных меланомойкожи.//Практическая онкология:- т. 8.- №4.- 2001 г.- С. 42-48.

10. Кадагидзе З.Г. Цитокины.//Практическая онкология.-2003 г.-т 4.-№3-С. 131-139.

11. Козлов В.К., Молчанов^ O.E., Жаринов Г.М. Иммунотерапия рекомбинантными цитокинами в лечении онкологических больных.//Сборник «Успехи клинической иммунологии и аллергологии»/ под ред. Караулова А.В.-2002 г.- том З.-С 263-279.

12. Копнин Б.П. Мишени действия онкогенов и опухолевых супрессоров: ключ к пониманию базовых механизмов канцерогенеза.//Биохимия.-2000 г.-т.65.-С 5-33.

13. Копнин Б.П. Основные свойства неопластической клетки и базовые механизмы их возникновения.- В кн.: Канцерогенез./под ред. Заридзе Д.Г., М., Медицина, 2004 г.-С 86-102.

14. Кулинский В.И. Передачи и трансдукция гормонального сигнала в разные части клетки.-Сор. Обр. Жур.- 1997 г., стр. 14-19.

15. Маркина И.Г., Тупицын H.H., Андреева Л.Ю. Использование иммунофенотипирования для совершенствования- диагностики, и прогнозирования; результатов терапии- острых нелимфобластных лейкозов.//РБЖ.-2002 г.-№1:-т.К-С 3-13;

16. Носов Д.А. Лекарственное; лечение диссеминированного рака почки: достижения: и перспективы.//Практическая онкология.- 2005 г.-т. 6;- №3.-с. 178-185.

17. Рафальский В;В. Клиническое применение препаратов интерферона: справочное пособие. Смоленск., CFMA, «Русич-Принт», 1997 г.- 233 с.

18. Ревазова Е С., Соловьев Ю.Н., Пучкова Г.П. и соавт. Трансплантация опухолей человека бестимусным мышам//Вестник АМН СССР.-1978 г.-№5.-стр. 42-46.

19. Рукавицын O.A. Роль иммунотерапии в лечении больных заболеваниями крови.//Вопросы онкологии.-2002 г.-т. 48.-№2.-С. 186-192.

20. Рукавицын O.A., Поп В.П. Хронические лейкозы.-М., БИНОМ Лаборатория знан ий, 2004 Г.-240 с.

21. Савченко В .Г., Паровнчникова Е.Н Лечение острых лейкозов (клиническое исследование). М., «МЕДпресс-информ», 2004 г.-с. 224.

22. Сотирис К., Альпидовский В .К., Семенова Е.А./Механизмьъ действия интерферона- при лечении хронического миелолейкоза.-Вестник Российского Университета* Дружбы народов.- Серия «Медицина».-№1.-1999 г.-С. 115-117.

23. Трещалин И.Д., Небольсин В.Е., Бодягин Д.А. и соавт.//Витам новый модификатор токсичности циклофосфамида.- 2-й Съезд онкологов.-Экспериментальная химиотерапия.- Киев.-1999 г.-р.289.

24. Трещалина Е.М. Противоопухолевая! активность веществ природного^ происхождения.-М., «Практическая медицина», 2005 Г.-272 с.

25. Уоррел Р.П. мл. Индукторы клеточной дифференцировки. В кн.: Биологические методы лечения онкологических заболеваний./под ред. ДеВита В.Т., Хэллмана С. Мл., Розенберга С. А., М., «Медицина», 2002 г,-936 с.

26. Утешев Д.Б., Коростелев С.А., Сторожаков Г.И. и соавт. Ретиноевая кислота как фактор дифференцировки клеток гемопоэза.//Современная онкология.-2001 г.-т. 3.-№2.- С. 48-51.

27. Хесин Я:Е., Наровлянская А.Н., Амченкова A.M. Система интерферонов в норме и патологии. Москва.-1996 г., стр. 39-50;

28. Хомерики С.Г. Процессы регенерации в слизистой оболочке желудка и канцерогенез. Опубликовано на сайте http://www.gastrosite.ru

29. Эммануэль, Н.М. Кинетика экспериментальных опухолевых процессов.-М., «Наука», 1977г.- 416 с.

30. Экспериментальная оценка противоопухолевых препаратов в СССР и США.-Под ред. Софьиной З.П., Сыркина А.Б., Голдина А, Кояйна А.-М.: Медицина.-1979 Г.-296 с.

31. Якубовская Р.И. Современные подходы к биотерапии рака.//РБЖ.-2002 г.-№3.-т.1.-С 5-14.

32. A1-Janadi A., Chandana S.R., Conley В.А. Histone deacetylation : an attractive target for cancer therapy?// Drugs R. D:- v. 9.- №6.- 2008.- P. 69-83.

33. Anticancer Drug Development Guide. Preclinical screening, clinical trials, and approval. Second edt.//edt. by B.A.Teicher and P.A.Andrews.-Humana Press.-Totowa.-New Jersey.-2004.-p.450

34. Barroga E., Kadosawa Т., Okumura M. et al. Influence of vitamin D and retinoids on the induction of functional differentiation in vitro of canine osteosarcoma clonal cells.//Vet. J.-2000.-V. 159.-№2.-p.l86-193.

35. Bartolini G., Ammar K., Mantovani B. et al. Retinoids and cancer: antitumor effect of ATRA and of a new derivative of retinoic acid, IIF, on colon carcinoma cell lines CaCo-2 and HT-29.//Anticancer Res.-2004.-v. 24.-№3a.-p. 1779-1783.

36. Bazzoni F., Beutler B. Tumor necrosis factor ligand and receptor families.//N. Engl. J. Med.-1996.-v. 334.-p.l717-1725.

37. Bazzoni F., Beutler B. How do- tumor necrosis factor receptors work?//J. Inflamm: 1995.-45.-v. 4.-p. 221-238.

38. Boulaire J., Fotedar A., Fotedar R. The functions of the cdk-cyclin kinase inhibitor^ 1WAE1.//Pathol Bioli(^aris).-2000:-v. 48.-№3;-p: 190-202.

39. Caraglia M., Marra M., Pelaia G. et al. Alpha-interferon and its effects on signal transduction pathways.//!. CelLPhysiol.-2005:-v. 202.-№2.-p. 323-335.

40. Cheson B.D., Casualty P.A., Head D.R. et al. Report of the National Cancer Institute-sponsored workshop; on definitions^ of diagnosis and'response in acute myeloidleukemia.//J: Clin; 0ncol;-1990:-v.8>№5;-p; 8L3-819

41. Choi S:H., Kang H.K., Im E.O. et al. Inhibition»of cell- growth and1 telomerase activity of breast cancer cells, in vitro by retinoic: acids.//Int. J: 0ncol.-2000.-v. 17.-№5.-p. 971-976.

42. Du C., Ei Dî, EinY. efealLDifferentiationiofihumamnasophar^Tigeabcarcinomat xenografts and repression of telomerase activity induced: by arsenic trioxidè://NatltMédv Ji India^2004;-v. 17.-№21rp: 67-70;

43. Dusso A.S., Brown A.J:, Slatopolsky E. Vitamim Di/ZArm J! Physiol. Renal; Physiol.-2005.-v. 289:-jYp1 .-p. 8-28.

44. Elstner E., Heber D., Koeffler HiP: 20-Epi-vitamin- D3 analogs. ■ Potent modulators of proliferation^ and differentiation , of breast cancer; cell lines in vitro.//Adv. Exp. Med. Biol. 1996.-v. 399;-p. 53-70;

45. Friend: C. Cell free transmission; in adult Swiss mice of disease having: the. character of a leukemia // Ji Exp Medi -1957.-№105:-P:.3,07-318.

46. Fujiwara M., Okayasu L, Takemura- T. Telomerase activity significantly correlates with chromosome alterations, cell differentiation, and proliferation in: lung adenocarcinomas.//Mod. Pathol.-2000.-v.13-p. 7.-p. 723-729.

47. Gattei V., Bernabei P. A., Pinto A. et al. Phorbol ester octeoclast-like differentiation of a novefhuman leukemic ; cell? line (EE,G 29:1):// The journal of * cell biology.- 1992,- v. 116,- №2.- P. 437-447.

48. Garg L.O., Brown J.C. Frienderythroleukemia celldifferentiation:inductionby retinoids.//Differentiation.rl983;-v. 25.-№l.-p: 79-831

49. Glasow A., Prodromou N., Xu K. ef alt Retinoids and myelomonocytic growth factors cooperatively^ activate:RARA\and' inducehumammyeloid leukemiascelf differentiation via MAP kinase pathways.// Blood. 2005.- Jan.-v. 105.-№1 .-p. 341-349.

50. Grant S., Bhalla K., Weinstein B: et al. Recombinant human interferon sensitizes resistant myeloid leukemic cells to induction of terminal differentiation.// Biochem: Biophys. Res. Gommun.-1985.-v. 130.-№l.-p. 379388. ,

51. Gross II The Friend virus./ In.: Oncogenic viruses.-1970.-№14.-P. 553-587.

52. Handbook of flow cytometry methods./Edited by Robinson J.P.-Paperback-1993.- p. 116-117.

53. He R.Y., Breitman T.R. Retinoic acid inhibits sodium butyrate-induced monocytic differentiation of HL60 cells while synergistically inducing granulocytoid differentiation.//Eur. J. Haematol.-1991 .-v. 46.-№2.-p. 93-100.

54. Horvath G.M. The Jak-STAT pathway stimulated by interferon alpha or interferonibeta;//Sci. STKE.-2004'l-v. 23:-№260i-p.l0-15;. •

55. Johnson C., Cook C., Furans P. In vivo suppression of erythropoiesis by tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha): reversal with exogenous erythropoietin (EPO).//Exp Hematol. 1990:-Feb.-v. 18.-№2.-p.l09-13.

56. Jung S., Lee Y., Pakkala S. et al. l,25(OH)2-16ene-vitamin D3 is a potent antileukemic agent with low potential to cause hypercalcemia.//Leuk. Res.-1994,-v. 18.-№6.-p. 453-463.

57. Kark J.D., Smith A.H., Harnes C.G., Serum vitamin A (retinol) and cancer incidence in Evans Counti, Georgia.//Ji Natl. Cancer Inst. -1981.-v. 66.-p. 7-16.

58. Kogan S.C. Curing APL: differentiation or destruction?// Cancer Cell.- 2009,-v. 1.- №15.- P. 7-8.

59. Koller E., Krieger O. Kasparu H. et all Restoration of all-trans-retinoic acid sensitivity by interferon in acute promielocytic leukaemia.//Lancet.- 1991.-v. 388.-p. 1154.

60. Kreutz M., Andreesen R. Induction of human monocyte to macrophage maturation in vitro by 1,25-dihydroxyvitamin D3 .//Blood.-1990.-v.76.-№3 .-p. 2457-2461.

61. Kumagai T., Shih L., Hughes S. et al. 19-Nor-l,25(OH)2D2 (a novel, noncalcemic vitamin D analogue), combined with arsenic trioxide, has potentantitumor activity against myeloid' leukemia.//Cancer Res.-2005.-Mar.-v. 65.-№6.-p.2488-2497.

62. Kunisada M., Budiyanto. A., Bito T. et al. Retinoic acid,suppresses telomerase activity in HSC-1 human cutaneous squamous cell carcinoma. //Br. J. Dermatol.-2005.-v. 152.-№3.-p. 435-443.

63. Liu L., Lai S., Andrews L., Tollefsbol T. Genetic and'epigenetic modulation of telomerase activity in development and disease:/Gene.-2004.-v. 340.-№l.-p. 110.

64. Lotan R., Lotan D. Stimulation of melanogenesis in a human melanomas cell line by retinoids.// Cancer Res.-1980.-v. 40.-№9.- P: 3345-3350.

65. Lotem J!, Sachs L. Epigenetic and plasticity of differentiation in normal- and cancer stem sells. //Oncogene.-2006.-№ 25.-P: 7663-7672.

66. Love W. K., Berletch J. B., Andrews L.G. Epigenetic regulation of telomerase in retinoid-induced differentiation of human, leukemia cells.// Int. J. Oncol.-2008.- v. 3.-№32.- Pi 625-631.

67. Ma PI., Urquidi V., Wong'J: et al. Telomerase reverse-transcriptase promoter regulation during myogenic differentiation of human RD rhabdomyosarcoma cells.//Mol. Cancer. Res.-2003.-v. l.-№10.-p. 739-746.

68. Mariadason J. M. HDACs and HDAC inhibitors in colon cancer.// Epigenetics.-2008.- v. l.-№3. P. 28-37.

69. Marks P., Richon V., Breslow R. et al. Histone deacetylase inhibitors as new cancer drugs.//Curr. Opin. 0ncol.-200r.-v. 13.-№6.-p. 477-483.

70. Marks PA, Richon VM, Rifkind RA. Histone deacetylase inhibitors:inducers of differentiation or apoptosis of transformed cells.// J. Natl. Cancer Inst.-2000.-v. 92.-№15.-p. 1210-1216.

71. Martínez-Iglesias O., Ruiz-Llorente L., Sánchez-Martínez R. Histone deacetylase inhibitors: mechanism of- action and therapeutic use in cancer.// Clin. Transí. Oncol.- 2008.-V. 7,- №10.- P. 395-398.

72. Masciulli R., Testa U., Barben T. et al. Combined vitamin D3/retinoic acid induction, of human promyelocytic cell lines: enhanced phagocytic cell maturation and hybrid granulomonocytic phenotype.//Cell Growth Differ.-1995.-V. 6.-№5.-p. 493-503.

73. Matsui W., Smith B., Vala M. et ah Requirement for myeloid growth factors in the differentiation of acute promyelocytic leukemia.//Br. J. Haematol.-2005.-Mar.-v. 128.-№6.-p. 853-862.

74. Mehta K. Retinoids as regulators of gene transcription.// J.1 Biol. Regul. Homeost. Agents.-2003.-v. 17.-№l.-p. 1-12.

75. Monneret C. Histone deacetylase inhibitors.// Eur. J. Med. Chem.-2005.-v.40,-№l.-p.l-13.

76. Moro. A., Perea S., Pantoja, C. et al. IFNalpha 2b induces apoptosis and' proteasome-mediated degradation of p27Kipl in a human lung cancer cell line.//Oncol. Rep.-2001.-Mar-Apr.-v.8.-№2.-p.425-429.

77. Moon R.C., Mehta R.G., Rao K.V. Retinoids and cancer in experimental animals.-in book The Retinoids/ by Sporn M.B., Roberts A.B., Goodman D.S.- Orlando, FL Academic Press, 1993.-p 573-596.

78. Munster P., Troso-Sandoval T., Rosen N. et al. The histone deacetylase inhibitor suberoylanilide hydroxamic acid induces differentiation of human breast cancer cells.//Cancer Res.-2001.-v. 61.-№23.-p: 8492-8497.

79. Polliack A., Leizerowitz R., Barak V. et al. Effects of retinoic acid and phorbol ester on lymphocytes and monocytes in B-lymphocytic leukemia.//Isr. J. Med. Sci.-1988:-v. 24(9-10).-p. 522-532.

80. Quaroni A., Tian J., Seth P. et al. p27(Kipl) is an inducer of intestinal epithelial cell differentiation.//Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 2000.-0ct.-v.279.-№4.-p. 1045-1057.

81. Reiss M., Pitman S., Sartorially A. Modulation of the terminal differentiation of human squamous carcinoma cells in vitro by all-trans retinoic acid.//J. Natl. Cancer Inst.-1985.-v. 74.-p. 1015-1023.

82. Rowley J., Golomb H., Dougherty C. 15/17 translocation, a consistent chromosomal change in acute promyelocytic leukaemia.//Lancet.-1977.-v. 1.-№8010.-p. 549-550.

83. Ryningen A., Stapnes C., Paulsen K et al. In vivo biological effects of ATRA in the treatment of AML.// Expert Opin Investig Drugs.-2008.- v. 11.-№17.-P. 1623-1633.

84. Sokoloski J. A., Beardsley G.P., Sartorelli A.C. Mechanism of the induction of the differentiation of HL-60 leukemia cells by antifolates.//Cancer Commun.-1989.-v.-l.-№3.-p. 199-207.

85. Stinson S.F., Reznik G., Danohoe R. Effect three retinoids on tracheal carcinogenesis with N-methil-Nitrosourea in hamster.//J. Natl. Cancer Inst.-1981.-v. 66.-p. 947-951.

86. Sun G.L. Treatment of acute promyelocytic leukemia (APL) with all-trans retinoic acid (ATRA): a report of five-year experience.//Zhonghua Zhong Liu Za Zhi.-1993.-v. 15.-№2.-p. 125-129.

87. Supino R., Mariani M., Colombo A. et al. Comparative studies on the effects of doxorubicin and differentiation inducing agents on B16 melanoma cells.//Eur. J. Cancer.-1992,-v. 28A.-№4-5.-p. 778-783.

88. Szeps M., Erickson S., Gruber A. et al. Effects of interferon-alpha on cell cycle regulatory proteins in leukemic cells.//Leuk. Lymphoma.-2003.-v. 44.-№6.-p. 1019-1025.

89. Thomas G., Chomienne C., Balitrand N. et al. Granulocytic differentiation induced by retinoic acid in HL-60 cells is associated with changes in adenylate cyclase activity.//Anticancer Res.-1986.-v. 6.-№4.-p. 857-860.

90. Thullberg M., Bartkova J., Khan S., at al. Distinct versus redundant properties among members of the INK4 family of cyclin-dependent kinase inhibitors.//FEBS Lett.-2000.-v. 470.-№2.-p.l61-166.

91. Vogelstein Bi,, Fearon-E., Hamilton S. et al. Genetic alterations during colorectal-tumor development.//N. Engl. J. Med.-1988.-v. 319.-№9.- p. 525532.

92. Waddington C.H. The strategy of the genes.-L.-1957.- p. 262.

93. Wang A, Zeng R, Huang H. Retinoic acid and sodium butyrate as cell cycle regulators in the treatment of oral squamous carcinoma cells.//Oncol. Res.-2008.- v. 4.-№17.- P. 175-182.

94. Warrel R.P. Retinoid resistance.//Lancet.-1993.-v. 341.-p. 126.

95. Wigington D.P., Urben C.M., Strugnell S.A. et al. Combination study of 1,24(S)-dihydroxyvitamin D2 and chemotherapeutic agents on human breast and prostate cancer cell lines.// Anticancer Res. 2004 Sep-Oct;24(5A):p. 2905-2912.

96. Xu D., Gruber A., Bjorkholm M. et al. Suppression of telomerase reverse transcriptase (hTERT) expression in differentiated- HL-60 cells: regulatory mechanisms.//Br. J. Cancer.-1999.-v. 80.-№8.-p. 1156-1161.

97. Xu D., Erickson S., Szeps M. et al. Interferon alpha down-regulates telomerase reverse transcriptase and telomerase activity in human malignant and nonmalignant hematopoietic cells.//Blood.-2000.-v. 96.-№13.-p. 4313

98. Zhang X.K., Liu Y., Lee M.O. Retinoid receptors in human lung cancer and breast cancer.//Mutat. Res.-1996.-v. 350.- №l.-p. 267-277.

99. Zhu J., Shi X., Tong J. 3 retinoic acid isomers on proliferation and differentiation properties of APL cell line-NB4.//Zhonghua Yi Xue Za Zhi.-1995,-v. 75.-№3.-p. 155-158.4318.