Роль генетического полиморфизма рецептора эндотоксина в функциональных ответах клеток врожденного иммунитета тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат биологических наук Тумкина, Марина Евгеньевна

• Тумкина, Марина Евгеньевна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Тумкина, Марина Евгеньевна

Список условных сокращений

Введение

I. Обзор литературы

1. Эндотоксиновый шок

1.1 Этиология и патогенез

1 ^Характеристика клеточного воспалительного ответа

1.2.1 Праймирование и активация фагоцитов

1.2.2 Образование активных форм кислорода фагоцитами

1.2.3 Цитокиновый каскад 22 1.3Элиминация эндотоксина

2. Структурные и функциональные элементы эндотоксина 25 2.10-антиген 25 2.2Кор 26 2.3ЛипидА

3. Белки, участвующие в переносе эндотоксина на его истинный рецептор

3.1 Белок, связывающий LPS (LBP)

3.2CD

4. Роль рецепторов семейства TLR в проведении сигнала эндотоксина 31 4.1 Toll 32 4.2TLR2 и TLR4 35 4.3Другие представители семейства TLR 36 4.4Краткая характеристика Toll-like белков 37 4.5Пути внутриклеточной сигнализации TLR

4.5.1 Доминирующие сигнальные пути TLR

4.5.2 Роль протеинкиназы С в проведении сигнала эндотоксина

5. Генный полиморфизм TLR4 у человека и мыши

II. Материалы и методы исследования

1. Образование радикалов кислорода фагоцитами мыши и человека при стимуляции эндотоксином in vivo и in vitro

2. Экспрессия мРНК сигнального рецептора эндотоксина TLR4 в фагоцитах мыши и человека при воздействии LPS

III. Результаты

1. Изучение функциональной активности фагоцитов на примере образования активных форм кислорода при воздействии эндотоксина

1.1 Образование АФК фагоцитами крови при введении эндотоксина in vivo

1.2 Образование АФК перитонеальными фагоцитами, стимулированными in vivo зимозаном

1.3 Образование АФК мононуклеарными клетками и моноцитами при стимуляции эндотоксином in vitro

1.4 Выявление содержания различных изоформ протеинкиназы С в моноцитах крови человека с помощью стандартных агентов

2. Изучение полиморфизма альтернативного сплайсинга TLR

2.1 Выявление основных форм мРНК тТ1г4 и hTLR

2.2 Определение способности праймеров специфически выявлять контакт между различными экзонами HTLR

2.3 Экспрессия вариантов сплайсинга гена mTlr

2.4 Особенности экспрессии вариантов сплайсинга гена hTLR

IV. Обсуждение результатов 90 Выводы 97 Список литературы

СПИСОК УСЛОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ

АФК - активные формы кислорода ДАГ - диацилглицерин

ДВС - диссеминированное внутрисосудистое свертывание

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт к.о. - килооснований

ЛВП - липопротеины высокой плотности

Мм - молярная масса мРНК - матричная РНК (рибонуклеиновая кислота) ПЦР - полимеразная цепная реакция СПИД-синдром приобретенного иммунодефицита ССВО - синдром системного воспалительного ответа УФ - ультрафиолет цАМФ - циклический аденозинмонофосфат ЭДТА - этилендиаминтетроацетат bp (base pair) - пар оснований

BPI (bactericidal/permeability-increasing protein) - белок, усиливающий бактерицидность/проницаемость

CD 14 (claster designation) - групповая метка

ECSIT (evolutionarily conserved signaling intermediate in Toll pathways) -эволюционно консервативный сигнальный интермедиат в путях белка Toll ERK (extracellular-signal-regulated kinase) - киназа, регулируемая внеклеточным сигналом fMLP (formyl-met-Iey-phe) - пептид формил-метионил-лейцил-фенилаланин hTLR4 (human TLR4) - ген TLR4 человека IL-1Р - интерлейкин-1 р lNF-y - интерферон-у iNOS (inducible NO-syntase) - индуцибельная NO-синтаза

IRAK (IL-1 reccptor accessory protein kinase) - протеинкиназа, связанная с рецептором интерлейкина-1 JNK - Jun N-терминальная киназа

LBP (lipopolysaccharide-binding protein) - белок, связывающий LPS LC (lucigenin) - люцигенин LM (luminol) - люминол

LPS (lipopolysaccharide) - липополисахарид, эндотоксин

МАРК (mitogen-activated protein kinase) — протеинкиназа, активированная митогеном

MIF (migration inhibitory factor) - фактор, ингибирующий миграцию mTlr4 (mouse Tlr4) - ген Tlr4 мыши

NADPH (nicotinamide adenine dinucleotide phosphate H) - восстановленная форма никотинамидадениндинуклеотид фосфата

NF-кВ (nuclear factor - кВ) - ядерный фактор кВ

NIK (NF-кВ induced kinase) - киназа, индуцирующая NF-кВ

PAF (platelet activation factor) - фактор активации тромбоцитов

PI 3-киназа (phosphatidylinositol 3-кта8е)-фосфатидилинозитол 3 киназа

РКС (protein kinase С) - протеинкиназа С

РМА (phorbol-12-miristate-13-acetate) - форбол-12-миристат-13-ацетат PRR (pathogen recognition receptors) - рецепторы, распознающие патогены

ТАК-1 (TGFp-associated kinase 1) - киназа 1, связанная с TGFP

TGF-P (transforming growth factor P) - трансформирующий фактор роста р

TLR4 (Toll-like receptor 4) - То11-подобный рецептор

TNF-a (tumor necrosis factor a) - фактор некроза опухоли a

TRAF6 (TNF-receptor-associated factor) - фактор, связанный с рецептором

Zym (zymosan) - зимозан

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль генетического полиморфизма рецептора эндотоксина в функциональных ответах клеток врожденного иммунитета»

На сегодняшний день проводится большое количество исследований, посвященных бактериальному сепсису и связанному с ним септическому шоку. Это обусловлено высоким уровнем заболеваемости и летальности при данном патофизиологическом синдроме. Септический шок является ведущей причиной смертности в отделениях интенсивной терапии, причем около 50% летальных случаев обусловлено септическим шоком грамотрицательного происхождения (182, 105). В США ежегодно летальность при сепсисе составляет около 40% от числа заболевших, количество которых приближается к 750,000 человек (24). По данным Евросоюза, тяжелый сепсис и септический шок обусловливает до 146,000 смертей в год. Статистические данные свидетельствуют о том, что септический шок занимает 13 место в списке наиболее частых причин смерти (180).

Высокий уровень смертности и развитие тяжелых осложнений при септическом шоке связаны с отсутствием специфической терапии. В случае, если септический шок вызван грамотрицательными микроорганизмами, он возникает вследствие активации эндотоксинами патологических процессов, приводящих к рефрактерной гипотензии и полиорганной недостаточности, которые характеризуют синдром эндотоксинового шока. Применение бактерицидных антибиотиков при этом неадекватно: разрушение клеточной стенки грамотрицательных бактерий способствует высвобождению еще больших количеств эндотоксина (139, 5), играющего главную патогенетическую роль в этом синдроме. Моноклонарные антитела к эндотоксину или провоспалительным цитокинам (TNF-a и др.) признаны слабоэффективными в лечении грамотрицательного сепсиса (142). Наиболее часто применяется симптоматическая терапия, однако восполнение жидкости или препараты адреналина, применяемые на стадии развития необратимых симптомов септического шока, не купируют системную гипотонию, что связано с потерей чувствительности клеток к воздействию вазоактивных агентов (180, 118). В связи с вышесказанным, на сегодняшний день проблема терапии септического шока остается неразрешенной и требует поиска адекватных молекулярных мишеней воздействия.

В настоящее время широко изучается молекулярный патогенез эндотоксинового шока, тем не менее, многие его компоненты еще недостаточно исследованы вследствие сложности сигнальных каскадов эндотоксина и большого количества участвующих в них молекул. В частности, отсутствует исчерпывающая информация в вопросах взаимодействия LPS с клетками-мишенями, его внутриклеточных сигнальных каскадов и механизмов клеточной защиты организма.

Поскольку мишенями эндотоксина являются в основном клетки врожденного иммунитета (фагоциты), характер их функционального ответа во многом определяет развитие патофизиологических изменений в организме при сепсисе. Основной функцией фагоцитов является распознавание и удаление из организма чужеродных агентов. Поэтому активация этих клеток эндотоксином сопровождается усилением образования токсичных радикалов кислорода и провоспалительных цитокинов. Преимущественная выработка провоспалительных медиаторов относительно противовоспалительных может, в конечном счете, приводить к развитию синдрома системного воспалительного ответа, предшествующего септическому шоку (143). Такая неадекватная реакция фагоцитов может наблюдаться в случае, если клетки находятся в состоянии предактивации (праймирования), т.е. способны к выраженной активации при воздействии стимулирующим агентом (141). Механизм праймирования ответственных клеток неясен, и его роль в развитии осложнений сепсиса недостаточно изучена, среди российских публикаций эти данные практически отсутствуют.

Открытие в конце 90-х годов клеточного рецептора эндотоксина TLR4 (Toll-like rcceptor 4) значительно продвинуло исследователей в понимании взаимодействия эндотоксина с клетками и проведения его токсического сигнала. До этого было известно, что эндотоксин в крови взаимодействует с белком, связывающим LPS, LBP, и этот комплекс переносится на белок CD14, заякоренный на поверхности клеток-мишеней LPS (158). Было установлено участие CD 14 в сигнализации эндотоксина, но отсутствие у этого белка трансмембранного домена не позволяло назвать его рецептором эндотоксина. Позднее было доказано, что TLR4 является обязательным условием сигнализации эндотоксина, его активация запускает сложную систему взаимодействия сигнальных молекул, что приводит к проявлению токсических эффектов эндотоксина (53).

Обнаружено, что белок TLR4 полиморфен и его разновидности обладают различной чувствительностью к эндотоксину (53, 150), что может обусловливать разную патофизиологическую реакцию у пациентов со сходным анамнезом и, соответственно, различные способы ее коррекции. Некоторыми авторами была показана экспрессия различных форм мРНК гена TLR4, образующихся в результате альтернативного сплайсинга во время транскрипции (96, 150). Последовательность мРНК, кодирующая белок TLR4, который выполняет функцию сигнального рецептора LPS, в настоящее время не установлена. Роль экспрессии других вариантов мРНК TLR4 в клетках-мишенях в ответ на воздействие эндотоксина также неизвестна. В связи с вышесказанным, была сформулирована цель настоящего исследования.

Цель исследования.

Изучить некоторые особенности функционального ответа клеток врожденного иммунитета мыши и человека на воздействие эндотоксина в опытах in vivo и in vitro.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучить биологическую активность различных доз эндотоксинов при воздействии in vivo по функциональным ответам фагоцитов мыши.

2. Оценить функциональную активность моноцитов человека в зависимости от структуры эндотоксинов и условий их воздействия in vitro по образованию радикалов кислорода.

3. Установить наличие рецептора эндотоксина TLR4 в клетках врожденного иммунитета мыши и человека по экспрессии его мРНК при воздействии эндотоксина.

4. Выявить возможные полиморфные варианты мРНК TLR4 и исследовать особенности их экспрессии у мыши и человека.

Научная новизна.

• В работе проведена оценка и сопоставление функциональных ответов клеток врожденного иммунитета на организменном, клеточном и генетическом уровнях при воздействии бактериальным эндотоксином.

• С помощью стандартных стимулирующих агентов осуществлен поиск некоторых внутриклеточных мишеней воздействия эндотоксина. Показано модулирующее влияние эндотоксина на внутриклеточный фермент протеинкиназу С, который не является компонентом основного из известных сигнальных путей LPS. Также установлено, что активация клеток эндотоксином иницируется при предварительной стимуляции протеинкиназы С.

• Впервые обнаружено 4 варианта альтернативного сплайсинга гена TLR4 в моноцитах человека. Проведена оценка роли различных вариантов мРНК TLR4 человека в условиях воздействия эндотоксином.

• На основании полученных результатов предложена и клонирована последовательность мРНК TLR4, кодирующая полноценный белок, который выполняет функцию сигнального рецептора эндотоксина.

Практическая значимость работы.

Проведенные исследования расширяют известные данные о некоторых особенностях влияния эндотоксина на клетки-мишени и подчеркивают первостепенную роль функционального состояния клеток врожденного иммунитета в патогенезе септического шока. Полученные результаты создают предпосылку для использования данных методик в оценке вероятности развития выраженной воспалительной реакции у конкретного человека.

Выявление последовательности мРНК, ответственной за образование функционального белка TLR4, дает возможность для разработки новых методов коррекции сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, на генетическом уровне.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Эндотоксин грамотрицательных бактерий сложным образом влияет на активность клеток врожденного иммунитета. При внутрибрюшинном введении он оказывает отложенный во времени (сутки) системный эффект, в то время как при непосредственном воздействии на клетки эндотоксин вызывает праймирование фагоцитов в более краткие сроки (14 часа). В обоих случаях для проведения эффекта эндотоксина было необходимо наличие белка плазмы LBP.

2. Эндотоксин и форболовый эфир оказывают взаимное модулирующее влияние на активацию моноцитов. В качестве общей внутриклеточной мишени их воздействия предложен фермент протеинкиназа С, участвующий в сигнальных путях обоих агентов.

3. Обнаружено 4 варианта альтернативного сплайсинга гена TLR4 человека и подтверждена экспрессия 2 вариантов альтернативного сплайсинга гена Т1г4 мыши.

4. Предложена последовательность мРНК, кодирующая сигнальный пептид TLR4, которая представлена экзонами 1-3-4. Высказано предположение о регуляторной роли экспрессии мРНК TLR4, содержащей стоп-кодон.

Апробация работы.

Материалы диссертации были представлены на VII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2000), II Российском Конгрессе по патофизиологии (Москва, 2000), Международной конференции «Критические технологии в реаниматологии» (Москва, 2003), Пироговской студенческой научной конференции (Москва, 2003), X Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 2003), Научно-практической конференции «Инфекционные и паразитарные болезни в современном обществе. Клинико-лабораторное обеспечение инфектологии» (Москва, 2003), VII Всероссийском Форуме им. акад. В.И. Иоффе с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (2003), Conference for young scientists, PhD students and students on molecular biology and gcnetics (Киев, 2003), III конференции молодых ученых России с международным участием «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (Москва, 2004).

Публикации.

По материалам диссертации опубликовано 11 печатных работ.

Объем и структура диссертации.

Диссертация изложена на 119 страницах машинописного текста и иллюстрирована 26 рисунками и 2 таблицами. Состоит из введения, 4 глав (Обзор литературы, Материалы и методы, Результаты, Обсуждение результатов), выводов, списка использованной литературы, включающего 190 источников.

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Тумкина, Марина Евгеньевна

ВЫВОДЫ.

1. Установлено, что через 3-5 часов после внутрибрюшинного введения сублетальной дозы (1 мг/кг) эндотоксина S.typhimurium мышам линии C57BI/6 количество перитонеальных фагоцитов снижалось в 1,5-2 раза. Кроме того, через сутки после данного воздействия наблюдалась активация образования супероксидного анион-радикала фагоцитами крови. Эти результаты свидетельствуют о системном характере эффектов эндотоксина.

2. Выявлено, что in vitro при прямом воздействии высоких доз (0,5 - 1 мкг/мл) различных эндотоксинов {S.typhimurium и E.coli 026:В6) на мононуклеарные фагоциты не происходило их активации. Форболовый эфир (1 мкМ) индуцировал ответ моноцитов человека на воздействие этих эндотоксинов.

3. Показано, что добавление различных эндотоксинов (10 нг/мл) к моноцитам в среде, содержащей плазму (10%), потенцировало образование АФК, стимулированное форболовым эфиром (эффект праймирования). Эти данные указывают на наличие общих внутриклеточных мишеней воздействия LPS и РМА, к которым может относиться протеинкиназа С.

4. Показано, что усиление экспрессии мРНК рецептора эндотоксина TLR4 в моноцитах человека и праймирование этих клеток происходило в первые часы (1-4 ч) воздействия эндотоксина.

5. Впервые обнаружена экспрессия 4 форм мРНК гена TLR4 человека и подтверждена экспрессия 2 вариантов мРНК гена Т1г4 мыши, образующихся в результате альтернативного сплайсинга экзонов.

6. Установлено преобладание мРНК с экзонами 1-3-4 при воздействии эндотоксина E.coli 026:В6 (1 мкг/мл) на моноциты человека. Последовательность экзонов 1-3-4 является наиболее вероятной формой мРНК TLR4, соответствующей функционально полноценному белку TLR4 человека.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Тумкина, Марина Евгеньевна, 2004 год

1. Бартенева Н.С. Молекулярная и клеточная регуляция инфекционного иммунитета. М., 1985. - С. 62-71.

2. Белобородов В.Б. Сепсис: что делать? // Медицина для всех. 1998. - №51. И).

3. Белобородов В.Б., Джексенбаев О.Ш. Эндотоксины грамотрицательных бактерий, цитокины и концепция септического шока: современное состояние проблемы // Анестезиология и реаниматология. 1991. - № 4. -С. 41-43.

4. Берридж М.Дж. Молекулярные основы внутриклеточной коммуникации // В мире науки. 1985. - № 12. - С. 99-109.

5. Гельфанд Б.Р., Гологорский В.А., Бурневич С.З., Гельфанд Е.Б. О тактике антибактериальной терапии при абдоминальном сепсисе у хирургических больных // Антибиотики и химиотерапия. 1999. - №5. - С. 3-6.

6. Грачев С.В., Асташкин Е.И. Острая почечная недостаточность, вызванная сепсисом. Роль бактериальных факторов и цитокинов // Лечение почечной недостаточности / Николаев А.Ю., Милованов Ю.С. М.: МИА, 1999. - С. 13-38.

7. Грачев С.В., Асташкин Е.И., Прохоренко И.Р. и др. Липополисахарид фотосинтезирующих бактерий подавляет ингибиторное действие эндотоксина на систему цитохрома Р-450 мышей С57В1/6 in vivo II ДАН -1998. Т. 362. - №2. - С. 277-279.

8. Каньшина Н.Ф. Бактериальный (эндотоксиновый) шок: Обзор литературы //Архив патологии. 1980. -т.42, вып.5. - С. 71-74.

9. Лиходед В.Г., Ющук Н.Д., Яковлев М.Ю. Роль эндотоксина грамотрицательных бактерий в инфекционной и неинфекционной патологии // Архив патологии. 1996. -№2. - С. 8-13.

10. Ю.Лобзин Ю.В. Руководство по инфекционным болезням // СПб: Фолиант, 2000. 932 с.

11. П.Миронов П.И., Альес В.Ф. Молекулярные аспекты системного воспалительного ответа при сепсисе. //Новости науки и техн. Сер. Мед. Вып. Реаниматол. и интенсив, терапия. Анестезиол. /ВИНИТИ 2000. №4 -С. 3-12.

12. Прохоренко И.Р. Особенности биологической активности липополисахарида из фотосинтезирующей бактерии Rhodobacler capsulatus: Дисс. д-ра биол. наук. М., 1999.

13. Ройт А. и др. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000. - 582 с.

14. Рябиченко Е.В., Бондаренко В.М. Механизмы синергического летального действия липополисахарида энтеробактерий и стафилококкового энтеротоксина типа А // Журн. микробиол. 1998. - №4. - С. 80-85.

15. Турпаев К.Т. Роль окиси азота в передаче сигнала между клетками // Молекулярная биология. 1998. - Т. 32. - №4. - С. 581-591.

16. Тэйлор Б.С., Аларсон J1.X., Биллиар Т.Р. Индуцибельная синтаза оксида азота в печени: регуляция и функции // Биохимия. 1998. - Т. 63, вып. 7. -С. 905-923.

17. Яковлев М.Ю. Роль системной эндотоксинемии в физиологии и патологии человека // Сборник трудов 1-ой сессии РМАПО. М. - 1995. — с. 10—11.

18. Ярилин А.А. Основы иммунологии. М.: Медицина, 1999. - 608 с.

19. Akira S., Takeda К., Kaisho Т. Toll-like receptors: critical proteins linking innate and acquired immunity. Nat Immunol 2001; 2: 675-680.

20. Anderson K.V., Jurgens G., Nusslein-Volhard C. Establishment of dorsal-ventral 1 polarity in the Drosophila embryo: genetic studies on the role of the Toll gene product. Cell 1985; 42: 779-789.

21. Arbour N.C., Lorenz E., Schutte B.C. et al. TLR4 mutations arc assotiatcd with endotoxin hyporcsponsivencss in humans. Nat Genet 2000; 25: 187-192.

22. Baeuerle P.A. The inducible transcription activator NF-kappa B: regulation by distinct protein subunits. Biochim Biophys Acta 1991; 1072: 63-80.

23. Belvin M.P., Anderson K.V. A conserved signaling pathway: the Drosophila toll-dorsal pathway. Annu Rev Cell Dev Biol 1996; 12: 393-416.

24. Bernard G.R., Vincent J.-L., Laterre P.-F. et al. Efficasy and safety of recombinant human activated protein С for severe sepsis. The New England Journal of Medicine 2001; 344(10): 699-709.

25. Beutler B. & Poltorak A. Positional cloning of Lps, and the general role of tolllike receptors in the innate immune response. European Cytokine Network 2000; 11(2): 143-152.

26. Beutler B. & Poltorak A. Sepsis and evolution of the innate immune response. Crit Care Med 2001; 29(7Suppl): S2-6.

27. Bcutlcr B. & Poltorak A. The sole gateway to endotoxin response: how Lps was identified as TLR4, and its role in innate immunity. Drug Metabolism and Disposition 2001; 29: 474-478.

28. Bone R.C. Gram-negative sepsis: a dilemma of modern medicine. Clin Microb Rev 1993; 6(1): 57-68.

29. Bone R.C., Grodzin C.J., Balk R.A. Sepsis: a new hypothesis for pathogenesis of the disease process. Chest 1997; 112(1): 235-243.

30. Brightbill H.D. & Modlin R.L. Toll-like receptors: molecular mechanisms of the mammalian immune response. Immunology 2000; 101: 1-10.

31. Burns K., Martinon F., Esslingcr C. et al. MyD88, an adapter protein involved in interleukin-1 signaling. J Biol Chem 1998; 273: 12203-12209.

32. Cadroy Y., Dupouy D., Boncu B. & Plaisancie H. Polymorphonuclear leukocytes modulate tissue factor production by mononuclear cells: role of reactive oxygen species. The Journal of Immunology 2000; 164: 3822-3828.

33. Calandra T. & Bucala R. Macrophage migration inhibitory factor (MIF): a glucocorticoid counter-regulator within the immune system. Crit Rev Immunol 1997; 17: 77-88.

34. Cao Z., Xiong J., Takeuchi M. et al. TRAF6 is a signal transducer for interleukin-1. Nature 1996; 383: 443-446.

35. Caramalho I., Lopcs-Carvalho Т., Ostler D. et al. Regulatory T cells selectively express toll-like receptors and are activated by lipopolysaccharide. J Exp Med 2003; 197(4): 403-411.

36. Cavaillon J.M. The non-specific nature of endotoxin tolerancc. Trends Microbiol 1995;3:320-324.

37. Cebon J., Layton J.E., Maher D. et al. Endogenous haematopoietic growth factors in neutropenia and infection. Brit J Haematol 1994; 86: 265-274.

38. Chow J.C., Young D.V., Golcnbock D.T. et al. Toll-like rcccptor-4 mediates lipopolysaccharide-induced signal transduction. J Biol Chem 1999; 274: 1068910692.

39. Chuang T.-H., Ulevitch R.J. Cloning and charactcrization of a sub-family of human toll-like receptors: hTLR7, hTLR8, and hTLR9. Eur Cytokine Netw 2000; 11:372-378.

40. Chuang T.-H., Ulevitch R.J. Identification of hTLRlO: A novel human Toll-like rcccptor preferentially expressed in immune cells. Biochim Biophys Acta 2001; 1518: 157-161.

41. Condliffe A.M., Kitchcn E. & Chilvers E.R. Neutrophil priming: pathophysiological consequences and underlying mcchanisms. Clinical Science 1998; 94: 461-471.

42. Cornell R.P. Restriction of gut-derived endotoxin impaires DNA synthesis for liver regeneration. Am J Physiol 1985; 249(5 Pt 2): R563-569.

43. Cotran R.S., Robbins S.L., Kumar V. Robbins pathologic basis of disease. 5th ed./Saunders, 1994. - 1400 p.

44. Coutinho A., Forni L., Melchers F., Watanabe T. Genetic defect in responsiveness to the В cell mitogen lipopolysaccharide. Eur J Immunol 1977; 7(5): 325-328.

45. Couturier С., Jahns G., Kazatchkine M.D., Haeffner-Cavaillon N. Membrane molecules which trigger the production of interleukin-1 and tumor necrosis factor-alpha by lipopolysaccharide-stimulated human monocytes. Eur J Immunol 1992; 22(6): 1461-1466.

46. Cusumano V., Mancuso G., Genovese F. et al. Neonatal hypersusceptibility to endotoxin correlates with increased tumor necrosis factor production in mice. J Infect Dis 1997; 176: 168-176.

47. Dandona P., Thusu K., Cook S. et al. Oxidative damage to DNA in diabetes mellitus. Lancet 1996; 347: 444-445.

48. Daniele R., Singh H., Appert H.E. et al. Lymphatic absorbtion of intraperitoneal endotoxin in the dog. Surgery 1970; 67(3): 484-487.

49. Ditter В., Urbaschek R., Urbaschek B. Ability of various absorbents to bind endotoxins in vitro and to prevent orally induced endotoxemia in mice. Gastroenterology 1983; 84(6): 1547-1552.

50. Downey H.S., Han J. Cellular activation mechanisms in septic shock. Front Biosci 1998;3:468-476.

51. Du S., Zhang Y., Wei Z. et al. Regulation of lipopolysaccharide-induced inducible nitric oxide synthase gene expression by protein kinase C. Zhonghua Yi Xue Za Zhi 2002; 82(21): 1488-1492.

52. Du X., Poltorak A., Silva M. & Beutler B. Analysis of TLR4-mediated LPS signal transduction in macrophages by mutational modification of the receptor. Blood Cells Molecules & Diseases 1999; 25(6): 328-338.

53. Du X., Poltorak A., Wei Y. et al. Three novel mammalian toll-like receptors: Gene structure, expression, and evolution. Eur Cytokine Netw 2000; 11: 362371.

54. Dziarski R., Ulmer A.J., Gupta D. Interactions of bacterial lipopolysaccharide and peptidoglycan with mammalian CD 14 // Glycomicrobiology, edited by Doyle R.J. Kluwer Academic/Plenum Publishers, New York, 2000. P. 145186.

55. Eggleton P., Reid K.B.M. Lung surfactant proteins involved in innate immunity. CurrOpin Immunol 1999; 11: 28-33.

56. Elsbach P, Weiss J. The bactericidal/permeability-increasing protein (BPI), a potent element in host-defence against gram-negative bacteria and lipopolysaccharide. Immunobiology 1993; 187(3-5): 417-429.

57. Faulkner K. & Fridovich I. Luminol and lucigenin as dctcctors for 02'\ Free Radical Biol Med 1993; 15: 447-451.

58. Fisher M., Levine P.H., Wcincr B.H. et al. Monocyte and polymorphonuclear leukocyte toxic oxygen metabolite production in multiple sclerosis. Inflammation 1988; 12: 123-131.

59. Flegel W.A., Wolpl A., Mannel D.N. & Northoff H. Inhibition of endotoxin-induced activation of human monocytes by human lipoproteins. Infect Immun 1989; 57(7): 2235-2245.

60. Fong Y., Marano M.A., Moldawer L.L. et al. The acute splanchnic and peripheral tissue metabolic response to endotoxin in humans. J Clin Invest 1990; 85: 1896-1904.

61. Frantz S., Kobzik L., Kim Y.D. et al. Toll (TLR4) expression in cardiac myocytes in normal and failing myocardium. J Clin Invest 1999; 104: 271-280.

62. Gathiram P., Gaffin S.L., Wells M.T. & Brock-Utne J.G. Superior mesenteric artery occlusion shock in cats: modification of the endotoxemia by antilipopolysaccharide antibodies (anti-LPS). Circ Shock 1986; 19(2): 231-237.

63. Gay N.J., Keith F.J. Drosophila Toll and IL-1 receptor (letter). Nature 1991; 351:355-356.

64. Ge Y., Ezzell R.M. & Warren H.S. Localization of endotoxin in the rat intestinal epithelium. The Journal of Infectious Diseases 2000; 182: 873-881.

65. Gimbrone Jr. M.A. Vascular endothelium in health and disease // Molecular Cardiovascular Mcdicinc, Scicntific American Mcdicinc/Habcr, 1995. P. 4961.

66. Gimbrone Jr. M.A., Nagel Т., Topper J.N. Biomechanical activation: an emerging paradigm in endothelial adhesion biology. J Clin Invest 1997; 99: 1809-1813.

67. Glauser M.P., Heumann D., Baumgartner J.D. & Cohen J. Pathogenesis and potential strategies for prevention and treatment of septic shock: an update. Clin Invest Dis 1994; 8: S205-216.

68. Golenbock D.T., Liu Y., Millham F.H. et al. Surface expression of human CD 14 in Chinese hamster ovary fibroblasts imparts macrophage-like responsiveness to bacterial endotoxin. J Biol Chem 1993; 268(29): 2205522059.

69. Gordon S. Development and distribution of mononuclear phagocytes: relevance to inflammation. В книге: Inflammation: Basic principles and clinical correlates, 3rd ed./Gallin & Snyderman. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia; 1999.-P. 35-55.

70. Grun M., Liehr H., Rasenack U. The importance of intestinal endotoxins for the rise of toxic liver lesions from galactosamine. Vcrh Dtsch Gcs Inn Med 1976; 82Ptl: 251-260.

71. Grunwald U., Fan X., Jack R.S. Monocytes can phagocytose Gram-negative bacteria by a mechanism dependent on CD 14. J Immunol 1996; 157: 41194125.

72. Guha M., Mackman N. LPS induction of gene expression in human monocytes. Cellular Signaling 2001; 13: 85-94.

73. Hallman M., Ramct M. & Ezekowitz R.A. Toll-like receptors as sensors of pathogens. Pediatr Res 2001; 50: 315-321.

74. Hambleton J., Weinstein S.L., Lem L. & DeFranco A.L. Activation of c-Jun N-tcrminal kinase in bacterial lipopolysaccharide-stimulated macrophages. Proc Natl Acad Sci USA 1996; 93: 2774-2778.

75. Hammann K.P., Hopf H.C. Monocyte constitute the only peripheral blood cell population showing an increased burst activity in multuple sclerosis patients. Int Archs Allergy Appl Immun 1986; 81: 230-234.

76. Hampton R.Y., Golcnbock D.T., Penman M. et al. Recognition and plasma clearance of endotoxin by scavenger receptors. Nature 1991; 352(6333): 342344.

77. Han J., Lee J.D., Tobias P.S. & Ulevitch R.J. Endotoxin induces rapid protein tyrosine phosphorylation in 70Z/3 cells expressing CD 14. J Biol Chem 1993; 268: 25009-25014.

78. Hansen M.K., Nguyen K.T., Fleshner M. et al. Effects of vagotomy on scrum endotoxin, cytokines, and corticosterone after intraperitoneal lipopolysaccharide. Am J Physiol. Regulatory Integrative Comp Physiol 2000; 278: R331-R336.

79. Hashimoto C., Hudson K.L., Anderson K.V. The Toll gene of Drosophila, required for dorsal-ventral embryonic polarity, appears to encode a transmembrane protein. Cell 1988; 52: 269-279.

80. Haslett C., Guthrie L.A., Kopaniak M.M. et al. Modulation of multiple neutrophil functions by preparative methods or trace concentrations of bacterial lipopolysaccharide. Am J Pathol 1985; 119: 101-110.

81. Hayashi F., Smith K.D., Ozinsky A. et al. The innate immune response to bacterial flagellin is mediated by Toll-like receptor 5. Nature (London) 2001; 410: 1099-1103.

82. Haziot A., Chen S., Ferrero E. et al. The monocyte differentiation antigen, CD14, is anchored to the cell membrane by a phosphatidylinositol linkage. J Immunol 1988; 141(2): 547-552.

83. Haziot A., Ferrero E., Kontgen F. et al. Resistance to endotoxin shock and rcduced dissemination of gram-negative bacteria in CD14-deficient mice. Immunity 1996; 4(4): 407-414.

84. Hemmi H., Takcuchi O., Kawai T. et al. A Toll-like receptor recognizes bacterial DNA. Nature (London) 2000; 408: 740-745.

85. Herrera-Velit P., Knutson K.L. & Reiner N.E. Phosphatidylinositol 3-kinase-dependcnt activation of protein kinase in bacterial lipopolysaccharide-treated human monocytes. The Journal of Biological Chemistry 1997; 272(26): 16445-16452.

86. Herrera-Velit P., Reiner N.E. Bacterial lipopolysaccharide induces the association and coordinate activation of p53/561yn and phosphatidylinositol 3-kinase in human monocytes. J Immunol 1996; 156: 1157-1165.

87. Hewett J.A., Roth R.A. Hepatic and extrahepatic pathobiology of bacterial lipopolysaccharides. Pharmacological reviews 1993; 45(4): 381-411.

88. Hibbert M.L., Sumiya M., Summerfield J.A. et al. Association of variants of the gene for mannose-binding lectin with susceptibility to meningococcal disease. Lancet 1999; 353: 1049-1053.

89. Hoshino K., Takeuchi O., Kawai T. et al. Toll-like receptor 4 (TLR4)-deficient mice are hyporesponsive to lipopolysaccharide: evidence for TLR4 as bps gene product. J Immunol 1999; 162: 3749-3752.

90. Hu J., Jacinto R., McCall C., Li L. Regulation of IL-1 receptor-associated kinases by lipopolysaccharide. J Immunol 2002; 168(8): 3910-3914.

91. Hwang D. Modulation of the expression of cyclooxygenase-2 by fatty acids mediated through Toll-like receptor 4-derivcd signaling pathways. FASEB J 2001; 15:2556-2564.

92. Jones R.D., Hancock J.T. & Morice A.H. NADPH oxidase: a universal oxygen sensor? Free Radical Biology & Medicine 2000; 29(5): 416-424.

93. Joseph C.K., Wright S.D., Bornmann W.G. et al. Bacterial lipopolysaccharide has structural similarity to ccramidc and stimulates ceramide-activated protein kinase in myeloid cells. J Biol Chem 1994; 269: 17606-17610.

94. Kawai Т., Adachi O., Ogawa T. et al. Unresponsiveness of MyD88-deflcient mice to endotoxin. Immunity 1999; 11: 115-122.

95. Khan A.U., Wilson T. Reactive oxygen species as cellular messengers. Chemistry & Biology 1995; 2: 437-445.

96. Kiechl S., Lorenz E., Reindl M. et al. Toll-like receptor 4 polymorphisms and atherogenesis. N Engl J Med 2002; 347: 185-192.

97. Kiley S.C. & Parker P.J. Differential localization of protein kinase С isozymes in U937 cells: evidence for distinct isozyme functions during monocyte differentiation. Journal of Cell Science 1995; 108: 1003-1016.

98. Kirschning C.J., Wcschc H., Merrill Ayres T. & Rothe M. Human Toll-like receptor-2 confcrs responsiveness to bacterial lipopolysaccharide. J Exp Med 1998; 188:2091-2097.

99. Kitchens R.L., Ulevitch R.J. & Munford R.S. Lipopolysaccharidc (LPS) partial structures inhibit responses to LPS in a human macrophage cell linewithout inhibiting LPS uptake by a CD14-mediatcd pathway. J Exp Med 1992; 176: 485-494.

100. Knaus W.A., Harrell F.E., La Brecque J.F. et al. Use of predicted risk of mortality to evaluate the efficacy of anticytokine therapy in sepsis. The rhlL-lra Phase III Sepsis Syndrome Study Group. Crit Care Med 1996; 24: 46-56.

101. Kopp E., Medzhitov R., Carothers J. et al. ECSIT is an evolutionarily conserved intermediate in the Toll/IL-1 signal transduction pathway. Genes Dev 1999; 13:2059-2071.

102. Kopp E.B., Medzhitov R. The Toll-receptor family and control of innate immunity. CurrOpin Immunol 1999; 11: 13-18.

103. Kuhns D.B., Long P.D., Gallin J.I. Endotoxin and IL-1 hyporesponsiveness in a patient with recurrent bacterial infections. J Immunol 1997; 158: 39593964.

104. Lamping N., Dettmer R., Schroder N.W.J, et al. LPS-binding protein protects mice from septic shock caused by LPS or gram-negative bacteria. J Clin Invest 1998; 101: 2065-2071.

105. Lemaitre В., Nicolas E., Michaut L. et al. The dorsoventral regulatory gene cassette spatzle/Toll/cactus controls the potent antifungal response in Drosophila adults. Cell 1996; 86: 973-983.

106. Lemaitrc В., Reichhart J.M., Hoffmann J.A. Drosophila host defense: differential induction of antimicrobial peptide genes after infection by various classes of microorganisms. Proc Natl Acad Sci USA 1997; 94: 14614-14619.

107. Liu M.K., Herrera-Velit P., Brownsey R.W., Reiner N.E. CD14-dependent activation of protein kinase С and mitogen-activated protein kinases (p42 and p44) in human monocytes treated with bacterial lipopolysaccharide. J Immunol 1994; 153(6): 2642-2652.

108. Lorenz E., Mira J.P., Frees K.L., Schwartz D.A. Relevance of mutations in the TLR4 receptor in patients with gram-negative septic shock. Arch Intern Med 2002; 162(9): 1028-1032.

109. Lorenzen D.R., Gtinther D., Pandit J. et al. Neisseria gonorroeae porin modifies the oxidative burst of human professional phagocytes. Infection and Immunity 2000; 68(11): 6215-6222.

110. Macarthur H., Westfall T.C., Riley D.P. et al. Inactivation of cathccholamines by superoxide gives new insights on the pathogenesis of septic shock. Natl. Acad. Sci. USA 2000; 97(17): 9753-9758.

111. Malinin N.L., Boldin M.P., Kovalenko A.V. & Wallach D. МАРЗК-related kinase involved in NF-kappaB induction by TNF, CD95 and IL-1. Nature (London) 1997; 385: 540-544.

112. Marshall J.C., Watson R.W.G. Apoptosis in the resolution of systemic inflammation // Yearbook of Intensive Care and Emergency Medicine. Berlin: Springer-Verlag/Vincent, 1997.-P. 100-108.

113. May M.J., Ghosh S. IkappaB kinases: kinsmen with different crafts. Science 1999; 284(5412): 271-273.1.l

114. Medzhitov R. & Janeway Jr. C.A. Innate immune recognition: mechanisms and pathways. Immunol Rev 2000; 173: 89-97.

115. Medzhitov R., Janeway Jr. C.A. Innate immunity: the virtues of a nonclonal system of recognition. Cell 1997; 91: 295-298.

116. Medzhitov R., Prcston-Hurlburt P., Janeway Jr. C.A. A human homologue of the Drosophila Toll protein signals activation of adaptive immunity. Nature 1997; 388: 394-397.

117. Medzhitov R., Preston-Hurlburt P., Kopp E. et al. MyD88 is an adaptor protein in the hToll/IL-1 receptor family signaling pathways. Mol Cell 1998; 2: 253-258.

118. Mellor H. & Parker P.J. The extended protein kinase С superfamily. Biochem J 1998; 332(Pt 2): 281-292.

119. Members of the American College of Chest Physicians/Socicty of Critical Care Medicine Consensus Conference: Definitions of sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis. Crit Care Med 1992; 20(6): 864-874.

120. Morrison D.C., Silvcrstcin R., Bright S.W. et al. Monoclonal antibody to mouse lipopolysaccharide receptor protects mice against the lethal effccts of endotoxin. J Infect Dis 1990; 162(5): 1063-1068.

121. Miillcr J.M., Ziegler-Heitbrock H.W., Baeuerle P.A. Nuclear factor kappa B, a mediator of lipopolysaccharide effects. Immunobiology 1993; 187(3-5): 233256.

122. Munford R.S. & Hall C.L. Detoxification of bacterial lipopolysaccharides (endotoxins) by a human neutrophil enzyme. Science 1986; 234: 203-205.

123. Muzio M., Polentarutti N., Bosisio D. et al. Toll-like receptors: a growing family of immune receptors that are differentially expressed and regulated by different leukocytes. J Leukoc Biol 2000; 67: 450-456.

124. Nakanishi H., Brewer К.A., Exton J.H. Activation of the zeta isozyme of protein kinase С by phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate. J Biol Chcm 1993; 268(1): 13-16.

125. Nichols B.J., Kenworthy A.K., Polishchuk R.S. et al. Rapid cycling of lipid raft markers between the cell surface and Golgi complex. J Cell Biol 2001; 153: 529-541.

126. O'Neill L.A., Greene C. Signal transduction pathways activated by the IL-1 receptor family: ancient signaling machinery in mammals, insects, and plants. J Leukocyte Biol 1998; 63: 650-657.

127. Obcrhoffcr M., Karzai W., Mcicr-Hcllmann A., Reinhart K. Procalcitonin. A new diagnostic parameter for severe infections and sepsis. Anaesthesist 1998; 47(7): 581-587.

128. Ognibcne F.P., Martin S.E., Parker M.M. Adult respiratory distress syndrome in patients with severe neutropenia. N Engl J Med 1986; 315: 547551.

129. Ohashi K., Burkart V., Flohe S., Kolb H. Cutting edge: heat shock protein 60 is a putative endogenous ligand of the Toll-like receptor 4 complex. J Immunol 2000; 164: 558-561.

130. Olcay I., Kitahama A., Miller R.H. et al. Reticuloendothelial dysfunction and endotoxemia following portal vein occlusion. Surgery 1974; 75(1): 64-70.

131. Otero A.J., Linares M. Monoclonal antibodies in the treatment of sepsis caused by Gram-negative microorganisms. Rev Cubana Med Trop 1998; 50(1): 31-35.

132. Ozinsky A., Underhill D.M., Fontenot J.D. et al. The repertoire for pattern recognition of pathogens by the innate immune system is defined by cooperation between Toll-like receptors. Proc Natl Acad Sci USA 2000; 97: 13766-13771.

133. Patrick D.A., Moore F.A., Moore E.E. et al. Neutrophil priming and activation in the pathogenesis of post injury multiply organ failure. New Horizons 1996; 4: 194-210.

134. Petros A.J., Marshall J.C., van Saene H.K.F. Should morbidity replace mortality as an endpoint for clinical trials in intensive care? Lancet 1995; 345: 369-71.

135. Pinsky M.R., Vincent J.-L., Deviere J. et al. Serum cytokine levels in human septic shock: relation to multiple-system organ failure and mortality. Chest 1993; 103:565-575.

136. Planas M. & Garcia A. Lipid peroxidation in critical patients. Nutr Hosp 1997; 12:233-236.

137. Poltorak A., He X., Smirnova I. et al. Defective LPS signaling in C3H/HeJ and C57Bl/10ScCr mice: mutations in Tlr4 gene. Science 1998; 282(5396): 2085-2088.

138. Poltorak A., Smirnova I., He X. et al. Genetic and physical mapping of the Lps locus: Identification of the Toll-like 4 receptor as a candidate gene in the critical region. Blood Cells Molecules Dis 1998; 240: 340-355.

139. Pugin J., Schucrcr-Maly C.-C., Leturcq D. et al. Lipopolysaccharide activation of human endothelial and epithelial cells is mediated by lipopolysaccharide-binding protein and soluble CD 14. Proc Natl Acad Sci USA 1993; 90(7): 2744-2748.

140. Qureshi S.T., Gros P., Malo D. Host resistance to infection: genetic control of lipopolysaccharide responsiveness by Toll-like receptor genes. TIG 1999; 15(8): 291-294.

141. Qureshi S.T., Lariviere L., Leveaue G. et al. Endotoxin-tolerant mice have mutations in Toll-like rcccptor 4 (Tlr4). J Exp Med 1999; 189: 615-625.

142. Rehli M., Poltorak A., Schwarzfischer L. et al. PU.l and interferon consensus sequence-binding protein regulate the myeloid expression of thehuman Toll-like receptor 4 gene. The Journal of Biological Chemistry 2000; 275(13): 9773-9781.

143. Rietschel E.T., Brade H., Hoist O. et al. Bacterial endotoxin: chemical constitution, biological recognition, host response, and immunological detoxification. CurrTop Microbiol Immunol 1996; 216: 39-81.

144. Rock F.L., Hardiman G., Timans J.C. et al. A family of human receptors structurally related to Drosophila Toll. Proc Natl Acad Sci USA 1998; 95: 588593.

145. Romaschin A.D., Foster D.M., Walker P.M. & Marshall J.C. Let the cells speak: neutrophils as biologic markers of the inflammatory response. Sepsis 1998; 2: 119-125.

146. Roumen R.M.H., Redl H., Schlag G. et al. Inflammatory mediators in relation to the development of multiply organ failure in patients after severe blunt trauma. Crit Care Med 1995; 23: 474-480.

147. Schumann R.R., Leong S.R., Flaggs G.W. et al. Structure and function of lipopolysaccharide-binding protein. Science 1990; 249: 1429-1431.

148. Schuster J.M. & Nelson P.S. Toll receptors: an expanding role in our understanding of human disease. Journal of Lcukocyte Biology 2000; 67: 767773.

149. Schutt C. Molecules in focus: CD14. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology 1999; 31: 545-549.

150. Schwartz D.A. The genetics of innate immunity. Chest 2002; 121(3 Suppl.): 62S-68S.

151. Shimazu R., Akashi S., Ogata H. et al. MD-2, a molecule that confers lipopolysaccharide responsiveness on Toll-like reccptor-4. J Exp Med 1999; 189: 1777-1782.

152. Smiley S.T., King J.A., Hancock W.W. Fibrinogen stimulates macrophage chemokine secretion through Toll-like reccptor 4. J Immunol 2001; 167: 28872894.

153. Smirnova I., Hamblin M.T., McBride C. et al. Excess of rare amino acid polymorphisms in the Toll-like receptor 4 in humans. Gcnetics 2001; 158: 1657-1664.

154. Smirnova I., Poltorak A., Chan E. KL. et al. Phylogenetic variation and polymorphism at the Toll-like receptor 4 locus (TLR4). Genome Biology 2000; 1(1): research002.1-002.10.

155. Sultzcr B.M. & Castagna R. Inhibition of activated nonresponder C3H/HeJ lymphocytes by lipopolysaccharide endotoxin. Infect Immun 1988; 56: 30403045.

156. Takeuchi O., Akira S. Toll-like receptors; their physiological role and signal transduction system. International Immunopharmacology 2001; 1: 625-635.

157. Tanabe Т., Otani H., Mishima K. et al. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced oxyradical production in rheumatoid synovial cells. Jpn J Pharmacol 1997; 73:347-351.

158. Taniguchi Т., Takata M., Ikeda A. et al. Failure of germinal center formation and impairment of response to endotoxin in tumor necrosis factor alpha-deficient mice. Lab Invest 1997; 77(6): 647-658.

159. Termeer C., Benedix F., Sleeman J. et al. Oligosaccharides of Hyaluronan activate dendritic cells via Toll-like receptor 4. J Exp Med 2002; 195: 99-111.

160. Tschaikowsky K., Sittl R., Braun G.G. et al Increased / Met-Leu-Phe receptor expression and altered superoxide production of neutrophil granulocytes in septic and post traumatic patients. J Clin Invest 1993; 72: 1825.

161. Ulevitch R.J. & Tobias P.S. Recognition of Gram-negative bacteria and endotoxin by the innate immune system. Current Opinion in Immunology 1999; 11: 19-22.

162. Ulcvitch R.J. Recognition of bacterial endotoxins by receptor-dependent mechanisms. Adv Immunol 1993; 53: 267-289.

163. Ulevitch R.J., Johnston A.R., Wcinstcin D.B. New function for high density lipoproteins. Isolation and characterisation of a bacterial lipopolysaccharide-high density lipoprotein complex formed in rabbit plasma. J Clin Invest 1981; 67(3): 827-837.

164. Ulevitch R.J., Mathison J.C., Schumann R.R. & Tobias P.S. A new model of macrophage stimulation by bacterial lipopolysaccharide. J Trauma 1990; 30(12 Suppl): S189-192.

165. Vcspasiano M.C., Lewandoski J.R., Zimmerman J.J. Longitudinal analysis of neutrophil superoxide anion generation in patients with septic shock. Crit Care Med 1993;21:666-672.

166. Victor V.M. & De la Fuente M. Changes in the superoxide production and other macrophage functions could be related to the mortality of mice with endotoxin-induced oxidative stress. Physiol Res 2003; 52: 101-110.

167. Vladimirova O., Lu F.M., Shawver L. & Kalman B. The activation of protein kinase С higher production of reactive oxygen species by mononuclear cells in patients with multiple sclerosis than in controls. Inflammation Research 1999; 48:412-416.

168. Werdan К. Pathophysiology of septic shock and multiple organ dysfunction syndrome and various therapeutic approaches with special emphasis on immunoglobulins. Therapeutic Apheresis 2001; 5(2): 115-122.

169. Williams M.J., Rodriguez A., Kimbrell D.A., Eldon E.D. The 18-Wheeler mutation reveals complex antibacterial gene regulation in Drosophila host defense. EMBO J 1997; 16: 6120-6130.

170. Woltmann A., Hamann L., Ulmer A.J. et al. Molecular mcchanisms of sepsis. Langenbeck's Arch Surg 1998; 383: 2-10.

171. Wong P.M.C., Chung S.-W. & Sultzer B.M. Genes, receptors, signals and responses to lipopolysaccharide endotoxin. Scand J Immunol 2000; 51: 123127.

172. Wright S.D. Innate recognition of microbial lipids // Inflammation: Basic principles and clinical correlates, 3rd ed./Gallin & Snyderman. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, 1999. P. 525-534.

173. Wright S.D. Toll, a new piece of the puzzle of innate immunity. J Exp Med 1999; 189: 605-609.

174. Wright S.D., Ramos R.A., Tobias P.S. et al. CD 14, a receptor for complexes of lipopolysaccharide (LPS) and LPS binding protein. Science 1990; 249: 14311433.

175. Wyckoff T.J.O., Raetz C.R.H., Jackman J.E. Antibacterial and antiinflammatory agents that target endotoxin. Trends in Microbiology 1998; 6 (4): 154-159.

176. Yamaoka S., Courtois G., Bessia C. et al. Complementation cloning of NEMO, a component of the IkappaB kinase complex essential for NF-kappaB activation. Cell 1998; 93(7): 1231-1240.

177. Yang R.B., Mack M.R., Gray A. et al. Toll-like receptor-2 mediates lipopolysaccharidc-induced cellular signaling. Nature 1998; 395: 284-288.

178. Yoshida S., Goto Y., Miyamoto H. et al. Assotiation of Lps gene with natural resistance of mouse macrophages against Legionella pneumophila. FEMS Microbiol Immunol 1991; 4(1): 51-56.

179. Zarembcr K.A., Godowski P.J. Tissue expression of human Toll-like receptors and differential regulation of Toll-like receptor mRNAs in leucocytes in response to microbes, their products, and cytokines. J Immunol 2002; 168: 554-561.

180. Zeitz M., Hope U., Wust B. et al. Absence of complement fixing antibodies against lipopolysaccharides from Escherichia coli in a subgroup of patients with Crohn's disease. Gut 1987; 28(11): 1460-1466.1. Благодарности.

181. Я выражаю свою искреннюю благодарность всем тем, кто помогал мне и просто был рядом в этот важный для меня жизненный период.

182. Прежде всего, я хочу поблагодарить моего научного руководителя, профессора Сергея Витальевича Грачева, не только за прекрасные условия для работы и возможность стажировки, но и за чуткое отношение.

183. Я благодарю также профессора Евгения Ивановича Асташкина, который очень много помогал мне и сделал множество полезных и необходимых замечаний по работе.

184. Большое спасибо коллективу лаборатории экстремальных состояний НИЦ ММА им. И.М. Сеченова, где была выполнена эта работа, за понимание, помощь и поддержку.

185. Я искренне признательна моему реценденту Елисеевой Светлане Васильевне, потратившей время на прочтение диссертации и сделавшей важные замечания.

186. Отдельные слова благодарности хочу адресовать доктору Andreas Pahl, под руководством которого был выполнен фрагмент работы, посвященный изучению генетического полиморфизма рецептора TLR4.

187. Я также благодарю моих родных и близких.