Роль энтомопатогенных нематод в регуляции численности вредных видов насекомых тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.11, кандидат биологических наук Мохамад М.А. Хабиес

• Мохамад М.А. Хабиес
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Мохамад М.А. Хабиес

Введение.

1. Видовой состав паразитических нематод вредных видов насекомых.

1.1. Особенности распространения и уровень естественного заражения вредных видов.И

1.2. Роль паразитических нематод в рехуляции численности вредных видов.

2. Биологические и экологические особенности развития паразитических нематод.

2.1. Факторы, активирующие и лимитирующие деятельность природных популяций нематод.

2.1.1 Круг хозяев.

2.1.2. Роль субстрата и возраста хозяина.

2.1.3. Потенциал устойчивости к абиотическим факторам.

2.1.4. Влияние температуры и влажности.

2.1.5. Роль почвы.

2.1.6. Влияние стрессовых воздействий на жизнеспособность и активность энтомопатогенных нематод.

2.1.7. Инвазионная активность.

3. Функциональная роль бактерий в нематодном комплексе.

3.1. Биология нематодно-бактериального комплекса.

3.2. Внутривидовая конкуренция.

4. Методы культивирования нематод.

4.1. Культивирование in vivo.

4.2. Культивирование in vitro.

5. Энтомопатогенные нематоды как фактор биологической борьбы.

5.1. Нематодные препараты.

5.1.1. Водные суспензии.

5.1.2. Комплексные препараты.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль энтомопатогенных нематод в регуляции численности вредных видов насекомых»

Интенсификация сельскохозяйственного производства с целью получения необходимых продуктов питания для населения земного шара, численность которого постоянно возрастает, создала немало проблем, связанных с охраной окружающей среды. В частности, уровень пестицидной нагрузки на местность при защите собираемого урожая в ряде случаев стал оказывать отрицательное воздействие на полезную энтомофауну, участвующую в естественной регуляции численности вредных видов, и, следовательно, эффективность ее. Более того, у ряда видов возникла резистентность к химическим препаратам. Возросли потери продукции. Это вызвало необходимость повышения дозы препарата и получения их новых форм. Так, для борьбы с оранжерейной белокрылкой (Тпа1еигос1е5 уарогайогит) пришлось использовать концентрации пиретроидов в 2000 раз больше, чем к моменту их внедрения в производство. Применение новых препаратов, их чередование не всегда радикально исправляло положение. Число вредных видов, приобретающих устойчивость к различным пестицидам, продолжает увеличиваться, особенно среди Двукрылых, Бабочек, Жесткокрылых и Клещей. Поэтому важной задачей в настоящее время является разработка и внедрение в производство приемов, актививизирующих естественные механизмы регуляции численности вредных видов, и замена в применяемых системах защиты пестицидных обработок биологическими средствами, ограничивающими их развитие (Помазков, Заец, 1998). Попытки использовать одни виды организмов для подавления или ограничения развития других делались давно.

Нематоды являются широко распространенными обитателями планеты. Они встречаются в почве и донных субстратах пресных водоемов всех материков, населяют океаны до самых предельных глубин, а также приспособились к паразитированию в различных животных и растениях, связаны со многими видами насекомых, и, в меньшей степени, клещей. Эти связи разнообразны, не все еще достаточно изучены и варьируют по уровню от чисто случайных взаимодействий до облигатного паразитизма.

Первые сведения о заболеваниях насекомых, вызванных нематодами, были известны более 350 лет назад (Gaugier, 1988). Наиболее ранние работы по этой проблеме относятся к прошлому столетию. Анализ имеющейся информации свидетельствует о том, что наиболее перспективными для использования в биологической борьбе с вредителями являются нематоды семейств Steinernematidae и Heterorhabditidae (Poinar, 1978, Wouts, 1985). Представители этой группы впервые выделены из личинок пилильщика Capholia abietis в 1923 г. в Германии, в бывшем СССР из гусениц озимой совки в 1926 г. (Кирьянова, Краль, 1969). В 1929 г. В США была описана Steinernema glaseri из японского жука Popillia japónica (Glaser, 1932). Этот вид при заражении вызывал быструю гибель хозяина. После инвазии большинство особей насекомых - вредителей погибает в пределах 24 - 60 часов.

Позже выявлены и другие виды штейнернем. Период интенсивного их изучения начался с середины 50-х годов XX столетия (Dutky, Hough, 1955, Nickle, 1977, Poinar, 1979, Reid, 1996). Только для одного вида Heterorhabditis bacteriophora (табл. 1) уже известно около 50 видов насекомых, в которых нематода способна паразитировать (Doucet, 1994).

Таблица 1

Число повреждаемых паразитической нематодой Н. bacteriophora вредных видов насекомых*

Порядок Семейство Вид Стадия личинка нимфа куколка имаго разные

14 57 87 64 5 3 49 10 таблица составлена на основании работ Турьянова, Мифтахова, 1997, Doucet, 1994 и др.

Эти нематоды отмечены и на вредителях шампиньонов (Peters, 1995, Dergham, 1995, Scheepmaker et al., 1997, Jaworska, 1999), муравьях- Solenopsis sp. (Donald et al., 1996). Большинство их видов являются факультативными паразитами и они не поражают теплокровных.

В настоящее время круг представителей вредной энтомофауны (насекомые, клещи), у которых выявлены паразитические виды нематод, постоянно расширяется и насчитывает сотни видов.

Для многих видов энтомопатогенных нематод показано существование конкурентных и хищнических отношений с другими почвенными организмами, ограничивающими их активность к внедрению в жертву (Strong et al., 1999).

Разработка методик массового разведения нематод позволила создать основу для производства биоинсектицидов (Glaser, 1931, Glaser et al., 1940). В последние 20 - 30 лет в США и Западной Европе наблюдается интенсивное формирование научных групп исследователей нематод насекомых. Отмечается активное внедрение на рынок энтомопатогенных нематодных биопестицидов (Агасьева и др., 1990, Pye et al., 1986, Akhurst et al., 1990, Akhurst, 1990, Vanninen, 1990, Zimmerman et al., 1990, Kaya, 1993). Однако до широкого их внедрения в производство еще далеко. Ряд видов нематод, достаточно активно использовавшихся на первых порах для их получения, затем были исключены из-за низкой эффективности (Спиридонов, 2001). В то же время у нематод, как агентов биологической защиты, безусловно, есть будущее, для реализации которого необходимо углубленное изучение особенностей их жизнедеятельности и экологии, а также проблем культивирования, накопления и хранения.

Заключение диссертации по теме «Защита растений», Мохамад М.А. Хабиес

9. Выводы:

1. В естественных условиях Султаната Оман установлен высокий уровень распространения на почвенных стадиях вредных видов насекомых энтомопатогенных нематод (27,9 — 46,4%). Во всех случаях в трупах доминировали виды 2 родов - Heterorhabditis и Steinernema. Наиболее широкий их видовой состав и численность отмечались на полях, занятых люцерной и многолетними травами.

2. Анализ погибших особей насекомых (фиксированных, сухих и свежесобранных) показал возможность определения их зараженности нематодами, независимо от их состояния. Однако по сухим образцам выявляется значительно меньший процент (не более зараженных 6%) проб.

3. Частота встречаемости энтомопатогенных нематод в условиях Султаната Оман достигает в среднем 30% (112 позитивных образцов из 401 просмотренных). Наилучшими сроками для отбора образцов на зараженность насекомых являются март-апрель и сентябрь-октябрь.

4. Нами выявлен новый для науки вид Steinernema salalah, названный впоследствие Steinernema abbasi, приоритет по которой подтвержден специалистами Natural History in Britain (Лондон, Великобритания).

5. Сравнительное изучение биологических особенностей (условия размножения, чувствительность к градиентам среды - температуре и влажности) показало перспективность выделенного изолята как основы для создания биопрепаратов. Для местного изолята S. abbasi (f. salalah) отмечена сравнительно большая численность и эффективность инвазии по показателю ЛД5о(17,9 - 20,3) в пределах 30-35 С0.

6. Найдено, что в качестве альтернативного биологического субстрата для разведения и накопления инвазионных личинок нематод можно использовать гусениц хлопковой совки - Helicoverpa armígera, Spodoptera exigua и S. littorallis.

7. Определены оптимальные нормы расхода инвазионных стадий при инфицировании гусениц хлопковой совки (300 шт./мл) и подобраны среды для ее разведения, основой которых являются сельскохозяйственные и пищевые отходы (стержни початков кукурузы, рисовые отруби и арахисовый жмых).

8. Оценка чувствительности инвазионных стадий местной популяции

8. аЬЬаБ1 к новым перспективным формам пестицидов, в том числе гербицидам показала, что они дифференцировано влияют на жизнеспособность вида. Вместе с тем, инвазионные личинки при контакте с ними снижают инфекционность несущественно. Сохранение инвазионной активности на уровне 42,9 - 80,6% позволяет использовать энтомопатогенных нематод, их живые препараты в целях повышения эффективности против вредителей в комплексе с химическими соединениями.

9. Расчеты показывают, что использование биологических нематодных препаратов экономически и экологически более выгодно, чем применение химических обработок. Биологическая эффективность энтомопатогенных нематод находится в пределах 60 %. Рентабельность от их применения на 80% выше, чем от пестицидов.

6. Заключение

Оценка существующей информации показывает, что паразитические нематоды способны играть важную роль в регуляции численности вредных видов членистоногих. Постепенно наука расширяет свои знания о круге поражаемых ими представителей вредной фауны. Накапливаются сведения об особенностях их биологии и взаимодействия с живыми организмами. Отрабатываются методики по искусственному разведению энтомопатогенных/ форй, их накоплению, созданию препаративных форм, способных к длительному хранению без утраты своей активности. Однако остаются нерешенными вопросы географического распространения отдельных видов, оценки их эффективности как для местных биотипов, так и для космополитических форм, физиологических рас вредителей. Практически исследования этих группы нематод находится в начальной стадии.

7. Цели и задачи исследования

Анализ литературных сведений показал, что использование энтомопатогенных препаратов является перспективным с точки зрения эффективности контроля за развитием популяций вредных видов и их экологичности. Однако выбор паразитических видов невелик. Недостаточно изучены условия применения препаратов и их форм в разных климатических зонах. В связи с этим, нами были поставлены следующие цели:

- определить видовой состав паразитических нематод в Омане;

- отработать методику их выявления на мертвом, сухом и фиксированном материале;

- апробировать методы культивирования нематод в искусственных условиях и оценить их технологичность для массового производства;

- дать экономическую оценку применения нематодных биопрепаратов против вредителей.

8. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ 8.1. Материалы и методы исследований

Работа над темой выполнялась в течение 1994-2002 гг. в лаборатории Agricultural Research Staition (г. Salalah, Султанат Оман) и 2002-2005 гг. на кафедре защиты растений РУДН. По ряду разделов исследования проводились совместно с М. Abbas (National Res.Centre, Egypt), S. Elawad (Univesity of Reading, Berkshire), W. Ahmad (Aligarh Muslim University, India) A. Reid (International Institute of Parasitology, St. Albans), которым автор выражает большую благодарность за практическую помощь и консультации.

Анализ насекомых и почвенных образцов на содержание в них энтомопатогенных видов нематод проводили в лабораторных условиях в Омане. Почву отбирали с сентября 1998 г. по февраль 1999 г. объемом 100 г на глубине 13-16 см на плантациях, сходных по агротехнике, pH и физико-химическим показателям. Образцы помещали в пластиковые пакеты и отправляли в лабораторию. Содержание энтомопатогенных нематод в почвенных пробах определяли с помощью приманок из гусениц Galleria mellonella (Bedding, Akhurst, 1975). Гусениц на зараженность их нематодами просматривали ежедневно. Погибшие экземпляры переносили в чашки Петри с влажной фильтровальной бумагой до проявления визуальных признаков инвазии. Зараженность живых и мертвых особей нематодами определяли под микроскопом после мацерирования их препаровальными иглами в капле воды или 25% растворе Рииджера. Контролировали появление и численность личиночной стадии в расчете на 1 особь G. mellonella. Продолжительность анализа в зависимости от вида энтомопатогенных нематод составляла 7-11 дней. Одновременно отмечалась температура почвы в момент взятия пробы, возделываемая на участке культура и встречаемые на ней основные вредители.

Разведение модельного объекта - большой вощинной моли (Galleria mellonella) проводили в лаборатории по методике White (1927) в чашках Петри при температуре 22-26°С. Гусениц G. mellonella помещали сверху или снизу маленького контейнера, помещенного в чашках Петри с автоклавированным песком, и хранили в лаборатории при температуре 18-20°С и влажности 20-65%. Их использовали в экспериментах по гибридизации и при оценке действия химических препаратов на жизнеспособность и инвазионную активность энтомопатогенных нематод. Повторность 4-х кратная.

При гибридизации инвазионные личинки S. abbasi, S. scapterisci и S. riobravis после стерилизации в 1% растворе хиамина в течение 15 мин. инъецировали (каждого вида попарно) в гусениц G. mellonella. Контроль вода. В каждом варианте по 40 повторностей. Длительность анализа 6 дн.

Эффективность нематодных препаратов оценивали в процентах гибели гусениц (в 3-кратной повторности) после опрыскивания суспензией инвазионных личинок нематод в концентрации 1000-2000 особей/мл. В качестве контроля служила вода. В лабораторных условиях гусениц после обработки их суспензией нематод инкубировали при 23°С в течение 3 дней, затем их расчленяли в 25% растворе Ringera на фильтровальной бумаге в чашках Петри, закрытых пленкой Parafilm (Goude et al., 1995).

Модельные опыты с нематодами ставились в стеклянных лизиметрах по 1000-1500 см3, в каждый из которых помещали гусениц большой вощинной моли - G. mellonella и содержали при 18-26°С и влажности 20-65% (Hubeis, 1995, 1999, 2000).

Изоляция суммарной геномной ДНК из близкородственных видов энтомопатогенных нематод (S. carpocapsae, S. scapterisci и S. riobravis) и нового вида из рода Steinernerna проводилась по Ried и Hominick (1992). Выделение фрагментов их профиля из лизатов взрослых самок S. kushidai и Steinernema sp.n. из Омана для оценки степени полиморфизма выполняли согласно Joyce et al. (1994). Амплификации подвергали 100 mM очищенной ДНК (или 5 fxl нематодного лизата) с соответствующими добавками и 8 частями Tag полимеразы. Использовался праймер ITS, синтезированный Pharmacia Biotech (Vrain et al., 1992). Продукты амплификации разделяли электрофорезом в 1,5% агарозном геле (Магнате е1 а1., 1989) при 5 у/см в течение 3,5 час. Окрашивание фрагментов проводилось бромистым этидием (Машайэ а а1., 1989).

Анализ вариабельности результатов проводился в 8А8-компьютерной программе.

8.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ 8.2.1. Распространение энтомопатогенных нематод

Нематодная инфекция встречается довольно часто. Практически каждый вид может быть инвазирован их особями. Так, при анализе сборов, сделанных кафедрой защиты растений РУДН на Кубе, нами выявлена зараженность различных отрядов насекомых (табл. 5).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Мохамад М.А. Хабиес, 2006 год

1. Артюховский А. Почвенные мерметиды: систематика, биология, использование //Из-во Воронежского ун-та, 1990. 160 с.

2. Безрученок Н., Микульская Н. Энтомопатогенные нематоды: состояние и перспективы использования в борьбе с вредными насекомыми в Беларуси //Ж. Защита растений, в.25, 2000.- С. 53 59. О 3

3. Васильева-Некрасова С., Метлицкий О. Энтомопатогенные нематоды в защите садов и ягодников от вредителей (в условиях Подмосковья) //В сб. Производство экологически безопасной продукции растениеводства, Пущино, 1997.-С. 101-106.

4. Блинова С. Энтомопатогенные нематоды-паразиты вредителей леса. Семейство рабдитиды //М.: Наука, 1982.-133 с.

5. Веремчук Г. О массовом разведении энтомопатогенного нематодно-бактериального комплекса//Паразитология. Т.6, вып. 4, 1972.- С. 376-380.

6. Данилов Л., Карпова Е., Шиловская Т. Энтомопатогенные нематоды против капустных мух //Ж. Защита растений, 1995, N7.- С.40.

7. Данилов Л., Махоткин А., Зверев А., Махоткина Л. Вредная черепашка и энтомопатогенные нематоды //Ж. Защита и карантин растений, N3, 2000.- С. 46.

8. Кирьянова Е., Кралль Э. Паразитические нематоды растений и меры борьбы с ними.- Л.: Наука, 1969.-443 с.

9. Малахов В. Нематоды: строение, развитие, классификация и филогения //М.: Наука, 1984. 215 с.

10. Микульская Н., Безрученок Н. Перспективы использования

11. Л б.Пушпя М., Агасъева И., Исмашов В. Новые препаративные формы //Ж.

12. AS.Рубцов И. Мерметиды. Классификация, значение, использование //Л.:

13. Наука. 1978. 207 с. ¿19.Слободянюк О. Энтомопатогенные нематоды двукрылых. Отряд

14. Barbercheck M., Kaya H. Effect of host condition and soil texture on host finding by the entomogenous nematodes Heterorhabditis bacteriophora

15. Rhabditida: Heterorhabditidae) and Steinernema carpocapsae (Rhabditida: Steinernematidae) //Environ. Entomol., N20, 1991, pp. 582 589.

16. Bartlett P. Plant quarantine experience of Liriomyza spp. In England and Wales //Liriomyza conf. on leaf-mining flies in cultivated plants, Montpeller, 1993, pp. 23 -30. 31. Beavers J., McCoy C., Kaplan D. Natural enemies of subterranean

17. Diaprepes abbreviatus (Coleoptera: Curculionidae) larvae in Florida //Environ. Entomol., N12, 1983, pp. 840 843.

18. Bedding R. Low cost in vitro mass production of Neoaplectana and Heterorhabditis species (Nematoda) for field control of insect pests //Nematologica, N27, 1981, pp. 109- 114.

19. Bedding R. Large scale production, storage and transport of the insect- parasitic nematodes Neoaplectana spp. and Heterorhabditis //Ann. Appl. Biol.,N104, 1984, pp. 117 120.

20. Bedding R. Logistic and strategies for introducing rentomopathogenic nematode technology into developing countries //Entomopathogenic nematodes in biological control< ed.R.Gaugler et al.,

21. CRC Press, Boca Raton, Florida, 1990, pp.365. <35. Bedding R., Akhurst R. A simple technique for the detection of insectpathogenic nematodes in soil //Nematologica, N21, 1975, pp.109 110.----------

22. A%\Braasch H., Apel K. Zu einem ungewöhnlichen massenauftreten der holzwespe Sirex juvencus an kiefern undihrer parasitierung durch nematoden der gattung Deladenus //Nachr. Blatt, b.49, N3, ss. 57 59.r

23. Cabanillas E., Poinar G. Steinernema riobravis n.sp. (Rhabditida:

24. Steinernematidae) from Texas //Fundam.appl. Nematol. 1994, v.l7.№2.pp. 123131.,

25. Cabanillas E.,Raulston J. Impact of Steinernema riobravis (Rhabditida: Steinernematidae) on the control of Helicoverpa zea in corn //J. of Economic. Entomology. 1995.v.88.pp.58-64.

26. Cantelo W., Nickle W. Susceptibility of prepupae of the Colorado potato beetle to entomopathogenic nematodes //J.of Entomol. Sei., v. 27, N1, 1992, pp. 37 -43.

27. Campbell L., Gaugier R. Mechanisms for exsheathment of entomopathogenic nematodes //Int. J. Parasitol., N21, 1991, pp.219 224.

28. Cordon R., Chippett S., Tilley S. Effect of two carbamates on infective juveniles of Steinernema carpocapsae all strain and S. feltiae umea strain

29. J.Nematology.-v.34.-1996.-pp. 310-317.C53r Cranshaw W., Zimmerman R. Insect parasitic nematodes //Home and Garden, N5573.

30. Dolmans N. Biological control of the black vine weevil (Otiorhynchus sulcatus) with a nematode (Heterorhabditis sp.) //Meded.Fac.Landbouwwet.Rijksuniv.Gent, N48, 1983, pp. 417 420.

31. Environ. Entomol. N25, 1996, pp. 174 178.h

32. Dutky S., Hough W. Note on a parasitic nematode from codling moth larvae Carpocapsa pomonella (Lepidoptera: Olecethcutidae) //Proc.Entomol.Soc. Wash.-v. 57,N5. 1955 .-P. 244.

33. V. Dutky S., Thompson J., Cantwell G. A technique for the mass propogation of the DD-136 nematode //J. Insect Pathol., N6, 1964, pp. 417 422.

34. EpskyN., Capinera S. Quantification of infasion of two strains of Steinernema carpocapsae into three Lepidoptera larvae //J. of Nematology. 1993.

35. Ferguson C., Schroeder P., Shields E. Persistence vertical distribution and activity of entomopathogenic nematodes in alfalfa shout beetle (Coleoptera: Curculionidae) infected fields //Environ. Entomol., N24, 1995, pp. 149- 158.

36. KFinney J., Harding J. Some factors affecting the use of Neoaplectana sp. for mosquito control //Mosq.News, v.41, 1981, pp. 798 799.

37. Forrest J., Spigel Y., Robertson W. A possible role of aphids of potato cyst nematode Globodera rostochiensis in host finding /Nematologica, N34, 1988, pp. 173 181.

38. Fuxa J., Agudelo-Silva F, Richter A. Effect of host age and nematode strain on susceptibility of Spodoptera frugiperda to Steinernema feltiae//J. Nematol, N20, 1988, pp.91 95.

39. Gabanillas H., George O., PoinarJ., RaulstonJ. Steinernema riabravis n.sp. (Rhabditida: Steinernematidae) from Texas //Fundam.

40. Appl. Nematol, v.l7,N2, 1994, pp. 123- 131.7l4. Gaugler R. Biological control potential of neoaplectanid nematodes //J.Nematol. N13, 1981, pp. 241 249.A

41. Gaugler R. Entomogenous nematodes and prospects for genetic improvement //In:Invertebrate Pathology and Cell culture, ed. K.Maramoroch, New York, Academic, 1987, pp. 457 484.

42. Gaugler R. Ecological consideration in the biological control of soil-inhabiting insect pests with entomopathogenic nematodes //Agric. Ecosyst. Environ., v. 24, 1988, pp. 351-360.

43. Gaugler R., Kaplan B., Alvarado J., Montoyo J., Ortega M. Assessment of Bacillus thuringensis serotype 14 and Steinernema feltiae for control of the Simulium vectors of onchocerciasis in Mexico //Entomophaga, N28, 1983,pp. 309-315.V

44. Gaugler R., Kaya H. Entomopathogenic nematodes in biological control //CRC Press, Boca Raton. 1990. 365 p.

45. Gaugler R., LeBeckL., Nakagaki B., Boush G. Orientation of the entomogenous nematode Neoaplectana carpocapsae to carbon dioxide //Environ. Entomol. N9, 1980, pp. 649 652.

46. Gaugler R., Molloy D. Field evalution of nematodes Neoaplectana•^Jcarpocapsae as biological control agent of blackflies (Diptera: Simuliidae) //Mosq. News, v. 41, 1981, pp. 459 464.V

47. Georgis R. Formulation and application technology //See Ref. V.68, 1990, pp. 173 191.

48. Georgis R., Gaugler R. Predictability in biological control using entomopathogenic nematodes //J. Econ. Entomol., N84, 1991, pp. 713 720.

49. Georgis R., Hague N. Nematodes as biological insecticides //Pestic. Outlook,1. N2, 1991, pp.29-32. Pi

50. Georgis R., Mullens B., Meyer J. Survival and movement of insect parasitic nematodes in poultry manure and their infectivity against Musca domestica //J. Nematol., N19,1987, pp. 292 295.

51. Georgis R., Poinar G. Effect of soil texture on the distribution and infectivity of Neoaplectana carpocapsae (Nematoda: Sreinernematidae) //J. NematoL, N15, 1983, pp. 308 311.86: Georgis R., Poinar G. Field effectiveness of entomophilic nematodes

52. Neoaplectana and Heterorhabditis //See Ref., v. 108, 1989, pp. 213 224.ql87 .Gorsuch A. Regulations for the enforcement of the Federal Insecticide,

53. Glaser R. The cultivation of nematode parasitic of an insect //Science, v.73, N3, 1931, pp. 614-615.

54. Glaser R., McCoy E., Girth M. Biology and economic importance of a nematode parasitic in insects //Parasitol.- V.26, N 6, 1940, pp. 479 495.V

55. Glazer I. Survival and efficacy of Steinernema carpocapsae in an exposed enviroment //Biocontrol Sci. and Techn., N2, 1992, pp. 101 107.

56. Glazer I., Navon A. Activity and persistence of entomoparasitic nematodes tested against Heliothis armigera (Lepidoptera: Noctuidae). //J. of econom. Entom.

57. V 83, 1989, pp.1795- 1800.qV

58. Glazer L, Klein M, Navon A., Nakache Y. Comparison of efficacy of entomopathogenic nematodes combined with antidesiccants applied by canopy sprays against three cotton pests (Lepidoptera: Noctuidae) //J.Econ. Entomol., v.85, 1992, pp. 1636- 1641.

59. Glenister C. Beneficial nematodes for biological control of insect pests // Intern. Plant Prop.Soc., v.40, 1991, pp. 543 547.

60. Goude D., Hague N. Control of sciarids in glass and propagation houses with Steinernema feltiae //Brighton Crop Prot. Conf.: Pest and diseases, N3, 1994, pp. 1073 1078.

61. Glazer I. Invasion rate as a measure of infectivitsof steinernematid and heterorabditid nematodes to insects //J. Invert. Pathol., N50, 1992, pp. 90 94.

62. Griffin C., Moore S., Doowns M. Occurrence of insect parasitic nematodes (Steinernematidae, Heterorhabditidae) in the Republic of Ireland //Nematologica, v.37. 1991. pp.92-100.

63. HaraA., Gaugler R., Kaya H., LeBeckL. Natural populations of entomopathogenic nematodes (Rhabditida: Heterorhabditidae, Steinernematidae) from the Hawaiian Islands //Environ. Entomol., N20, 1991, pp. 211 216.

64. Howarth F. Environmental impacts of classical biological control //Ann.Rev.Entomol., N36, 1991, pp. 485-509.u

65. Hubeis M. Entomopathogenic Nematode from Oman //Univ.of Read.,1995, pp. 1-2.1 l(f. Hubeis M. First record of entomopathogenic nematode Heterorhabditis bacteriophora (Heterorhabditidae: Rhabditida) in Oman

66. Arabian of organization of Agr.development., 1998, Sept.l 1, p.211.V1H. Hubeis M. Preliminary studies on entomopathogenic nematode in Nejd area Sultanate of Oman 111 Arab. Cong, of Plant Prot. 22-26 oct., Amman, Jordan, 2000.- pp. 462-463.M

67. Yl.Hubeis M. Nematode possessing greater pesticidal qualities discovered //Oman Daily observer, 1997.aJL

68. Yi.Hubeis M. Insect-killing plant found in Salalah // Times of Oman, 1997.D1 .Hubeis M. New Steinernema nematode species from Oman, as a natural enemy against insects //J. Sei. Res. Agr. Sei. Sultan Qaboos Univ., v. 3, 1998, p.117. &

69. Johnigk S., Ehlers R. Juvenile development and life cycle of Heterorhabditis bacteriophora and H. indica //Nematology, v.l, N3, 1999, pp. 251 -260.

70. Joyce S., Reid A., Hague N. Application of polymerase chain reaction (PCR) methods to identification of entomopathogenic nematodes //In: Proc. Symp.

71. Workshop, St. Patrick's College, Ireland, 1994, DG XII, pp. 178-187.-----

72. Kaya H. Susceptibility of early larval stages of Pseudaletia unipuncta and

73. Spodoptera exigua (Lepidoptera: Noctuidae) to the entomogenous nematode

74. Steinernema feltiae (Rhabditida: Steinernematidae) //J. Invertebr. Pathol., N46, ^ 1985, pp. 58 62.

75. Kaya H. Deseases caused by nematodes //In: Epizootiology of insect diseases, ed. J. Fuxa, New York, 1987, pp. 453 - 470. ^130/) Kaya H. Soil ecology //See Ref., N68, 1990, pp. 93 - 115.

76. Kaya H. Entomopathogenic nematodes in biological control of insects //See Ref^Nll, 1990, pp. 189- 198.

77. Kaya H., Gaugier R. Entomopathogenic nematodes //Ann. Rev. Entomol., 19937 pp. 181 -206.

78. Klein M. Use of Bacillus popilliae in Japanese beetle control //In: Use of pathogens in scarab pest management (ed. T. Jackson et al.), Andover, 1992, pp. 179- 189.

79. Klein M. Biological control of scarabs with entomopathogenic nematodes //In: Nematodes and the biological control of insect pests (ed. R.Bedding et al.), CRISO, Melbourne, Australia, 1993, pp. 49 58.

80. Kondo E. Size-related susceptebility of Spodoptera litura (Lepidoptera: Noctuidae) larvae to entomogenous nematode Steinernema feltiae (DD-13 6) //ApjM. Entomol.Zool., N22, 1987, pp. 560 569.1. AhCf.Kbndo E.

81. Kung S., Gaugier R., Kaya H. Influence of soil pH and oxygen on persistence of Steinernema spp. //J. Nematol., N 22, 1990, pp. 440 445.

82. Pathol., N57, 1991, pp. 242 249. A

83. Liu Jie, LiuNanxin, Xie Ruchuang, Zhang Yiqing, Yin Chunshou. Applications of a Steinernema nematode against peach fruit-borer in apple orchards // Acta Phytoph. Sinica, v. 21, N3, 1994, pp. 221 224.n

84. Macdonald W. Critical factors required by the nematode Steinernema feltiae for the control of the leafminers Liriomyza huidobrensis, L. bryoniae and Chromatomyia syngenesiae //Ann. Appl. Biol., N127, 1935, pp. 329 341.

85. Maniatis T., Fritsch E., Sambrook J. Molecular cloning. A laboratory manual, USA, 1989, v.6, N1-6, pp. 19.

86. Mankau R. Biological control of nematode pests by natural enemies //Ann.

87. Rev. Phytopathol., N18, 1980, pp. 415 440.C141 .Mason J. Taxonomy, infectivity and survival of entomopathogenic nematodes (Heterorhabditidae) //Ph. D.Thesis, Imperial College, London, 1992.

88. Mclnnes D., Tschinkel W. Mermithid nematode parasitism of Solenopsis ants (Himenoptera: Formicidae) of Northern Florida//Ecolog. Popyl. Biol.,v.89,N2, pp. 231 -237.

89. Miller P. Respiration-aerial gas transport //In: The physiology of insects (ed. M.Rockstein), Academic, New York, v. 2, 1964.lis

90. Miller P. The regulation of breathing in insects //Adv. Insect Physiol., v. 3,1966, pp. 279-344.f14h.Moyle P., Kaya H. Dispersal and infectivity of the entomogenous nematode Neoaplectana carpocapsae Weiser (Rhabditida: Steinernematidae) in sand //J.

91. Nematol., N13, 1981, pp. 295 300.•Jl

92. P'oinar G., Jansson H. Infection of Neoaplectana and Heterorhabditis îabditida: Nematoda) with the predatory fimgi, Monacrosporium ellipsosporum and Arthrobotrys oliogospora (Moniliales: Deuteromyces) //Rev. Nematol., N9, 1986, çp. 241 -244.

93. G., KozodiE. Neoaplectana glaseri and N. anomaly: sibling species or parallelism //Revue de Nematologie, N11, 1988, pp. 13 19.rf'flb 1<71. Poinar G., Thomas G. Laboratory guide to insect pathogens andfV^ parasites /N.-Y.: Plenum Press, 1984./ a f----

94. Popiel I., Hominick W. Nematodes as biological control agents:

95. Part II. Adv. Parasitol.v. 31, 1992, pp. 381 -433.1,73" *J Rao Y., Rao P., Varma A., Israel P. Tests with an insect parasitic nematode DD-136 (Nematoda: Steinernematidae) against the rice stem borer

96. Quintela E., McCoy C. Pathogenicity enhancement of Metarhizium anisopliae and Beauveria bassiana to first instars of Diapreres abbreviatus (Coleoptera: Curculionidae) with sublethal doses of imidacloprid //Environ.Entomol., N26, 1997, pp. 1173 1182.

97. Rovesti L., Deseo K. Compatibility of chemical pesticides with the entomopathogenic nematodes Steinernema feltiae Filipjev and S. carpocapsae Weiser (Nematoda: Steinernematidae) //Nematologica, N36, 1990, pp. 237-245.

98. Saringer G. et al. Possibilities of biological control using entomopathogenic nematodes against Leptinotarsadecemlineata and Athalia rosae L. larvae //48 Intern.Symp.on crop protect., PTS I IV

99. UO.Strong D., Whipple A., Denis B. Model selection for a subterranean tropic cascade: root-feeding caterpillars and entomopathogenic nematodes //Ecology, v.80, N8, 1999, p.p. 2750-2761.11

100. Vanninen I. Depletion of endogenous lipid reserves in Steinernema feltiae and Heterorabditis bacteriophora and effect on infectivity //In: Proc. Int. Colloq. Invertebr„Pathol. Microb. Control. 5th, 1990, p.232.

101. Vrain T., WakarchukD., Levesque A., Hamilton R. Intraspecific DNA ^ restriction fragment length polymorphisms in Xiphinema americanum group //Fundang, Appl. Nematol. 1992.-№15.- pp. 563-574.

102. A ^t. Williams E., Macdonald O. Critical factors reguired by the nematode Steinernema feltiae for the control of the leafminers Liriomyza huidobrensis, Liriomyza bryoniae and Chromatomyia syngenesiae //Ann. Appl. Biol, v. 127,1995, pp. 329-341.to I

103. WolfL., Hainsworth F. Temporal pattern of feeding by hummingbirds //Anim. Behav, N25, 1977, pp. 976 988.•201. Womersley C. Dehydration survival and anhydrobiotic potential //See Ref, N68, 1990, pp. 117- 137.

104. WoodringJ., Kaya H. Steinernematid and heterorabditid nematodes: a handbook of techniques //South.Coop.Ser. Bull.Arkans. Agric. Exp. Stn. Favetteville, v. 331, 1988, pp. 869 874.

105. Wouts W. Biology, life cycle and redescription of Neoplectana bibionis Bovien (Nematoda: Steinernematidae) //J.ofNematology, 1980.-№12.-pp.62-72.

106. Wouts W. Nematode parasites of Lepidopterans //Plant and Insect Nem^todp v. 18, 1985, pp. 655 691.

107. Wright R., Agudelo-Silva F., Georgis R. Soil applications of steinernematid and heterorabditid nematodes for control of Colorado potato beetles Leptinotarsa decemlineata //J. Nematology, v. 19, N2, 1987, pp. 201 206.

108. Wu H., Chow Y. Susceptibility of Pieris rapae crucivora (Lepidoptera: Pieridae) to the imported entomogenous nematode Steinernema feltiae //Bull. Inst. Zool. Acad. Sin. (Taipei), N28, 1989, pp. 237 244.

109. Xia Orong, Li Suchun. The lethal effect of entomophagous nematode Taishan 1 on the larvae and pupae of cotton bollworm //J. Plant Ptotect., v. 22, N3,1994, pp. 228-230.1. V <

110. Zhang Maoxin, Liang Guangwen. Studies on the population system control Steinernema carpocapsae (Weiser) against flea beetle Phyllotrata striolata (Fabricius) (Coleoptera: Chrysomelidea) // Acta Phytoph.Sinica, v. 27, N4, 2000, pp. 333 -337.