РНК из пекарских дрожжей: выделение, фракционирование, биологическая активность тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Ямковая, Татьяна Витальевна

• Ямковая, Татьяна Витальевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Ямковая, Татьяна Витальевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структура и функции дрожжевой РНК

1.2. Выделение РНК из пекарских дрожжей

1.3. Гидролиз дрожжевой РНК

1.4. Использование мономеров дрожжевой РНК для синтеза лекарственных препаратов

1.4.1. Аденозин

1.4.2. Инозин.

1.4.3. Гуанозин.

1.4.4. Цитидин.

1.4.5. Уридин.

1.5. Биологическая активность дрожжевой РНК.

1.5.1. Иммуномодуляция

1.5.2. Стимуляция метаболизма

1.5.3. Детоксикация

1.5.4. Стимуляция репарации, роста и размножения клеток

1.5.5. Токсичность

1.6. Клиническое применение дрожжевой РНК

1.7. Биологическая активность и клиническое применение высокополимерной дрожжевой РНК.

1.8. Резюме

Глава II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Экспериментальные животные

2.2. Материалы

2.3. Аналитические методы

2.4. Препаративные методы

2.4.1. Выделение суммарной РНК из пекарских дрожжей

2.4.2. Выделение высокополимерной РНК из пекарских дрожжей (йариант 1).,,,.

2.4.3. Выделение высоко- и низкополимерной РНК из пекарских дрожжей (вариант 2).

Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Выделение суммарной РНК из пекарских дрожжей

3.2. Выделение фракций РНК различной степени полимерности из пекарских дрожжей

3.3. Иммобилизация и некоторые свойства иммобилизованных ферментов нуклеинового обмена из ядов змей

3.4. Биологическая активность РНК из пекарских дрожжей.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «РНК из пекарских дрожжей: выделение, фракционирование, биологическая активность»

Актуальность проблемы. Дрожжевая РНК представляет собой смесь полирибонуклеотидов разных молекулярных масс. Высокополимерная составляющая дрожжевой РНК биологически наиболее активна и является, например, специфическим стимулятором биосинтеза белка в кроветворных и иммунокомпетентных органах крыс - селезенке, почках, тимусе и костном мозге (Панин J1.E., Харьковский А.В., 1995; Панин JI.E., Харьковский А.В., 1997). Этот препарат с фирменным названием Полирибонат в последнее время используется в ветеринарии (Соколов В.Д. и др., 1992; Ноздрин Г.А., Донченко А.С., 1997; http://www.vettorg.ru/catalog/item.php?id=627). Биологические испытания показали, что он является иммуномодулятором и адъювантом (Ред. Масычева В.И. Сб. науч.трудов сотр. НИКТИ БАВ, 1996). Завершены доклинические и 1 фаза клинических испытаний Полирибоната в качестве адъювантного средства. Проведены также его клинические испытания на больных хронической лейкопенией (Масычева В.И. и др., 1997). Полученные результаты свидетельствуют о выраженном иммуномодулирующем и лейкостимулирующем эффекте.

Натриевая соль низкополимерной дрожжевой РЖ (нуклеинат натрия) давно применяется в медицине при лечении широкого круга заболеваний: от вирусных инфекций до расстройств памяти (Брехман И.И., 1976; Лазарева Д.Н., Алехин Е.К., 1985; Земсков В.М. и др., 1985; Земсков A.M., Земсков В.М., 1991; Крылов И.А. и др., 1992; Ершов Ф.И., 1998). тРНК используется в научных исследованиях. Мономеры РНК в виде нуклеозидов и 5Ч-I мононуклеотидов имеют самостоятельное значение и могут служить исходными соединениями для синтеза олигонуклеотидов, нуклеозид-5ч-трифосфатов и ряда лекарственных препаратов (Земсков В.М. и др., 1985).

Несмотря на большой интерес к дрожжевой РНК, описанные в литературе способы выделения ее высокополимерной фракции недостаточно эффективны и требуют совершенствования. Классический способ выделения РНК фенольной экстракцией (Holley R.W., 1963; Филиппович Ю.Б. и др., 1982) в препаративных масштабах неприменим из-за проблем с утилизацией отходов Экстракция додецилсульфатом натрия (ДДС-Na) в условиях, предложенных Крестфилдом и соавт. (Crestfield A.M. et al., 1955), приводит к получению препаратов, разрушающихся при \ продолжительном хранении, вероятно, из-за неполной инактивации рибонуклеаз. Добавки ингибиторов рибонуклеаз не решают проблему и удорожают процесс.

Цель работы - создать методическую базу для организации на ее основе безотходного производства чистой биологически активной высокополимерной дрожжевой РНК на основе использования доступных реагентов и оборудования путем оптимизации отдельных процедур получения и фракционирования экстрактов дрожжевой биомассы. I

Задачи исследования:

1. Изучить влияние на процесс лизиса клеток дрожжей различных ПАВ, концентрации наиболее эффективного ПАВ, температуры, времени и присутствия ингибитора рибонуклеаз (ЭДТА). Оптимизировать условия лизиса.

2. Разработать новые способы выделения суммарной РНК из пекарских дрожжей и получения ее фракций различной степени полимерности, в том числе высокополимерной. Исследовать возможность замены высокоскоростного центрифугирования на простое отстаивание.

3. Разработать экономичный способ получения нуклеозидов и мононуклеотидов путем гидролиза некондиционных партии и отходов производства дрожжевой РНК иммобилизованными ферментами нуклеинового обмена из ядов змей.

4. Провести оценку биологической активности суммарной и высокополимерной дрожжевой РНК в экспериментах in vivo.

Научная новизна полученных результатов.

Детально изучены условия лизиса клеток дрожжей и оптимизированы методы извлечения РНК из лизата. На основе этих исследований предложены три новых способа выделения высокополимерной РНК из дрожжей. Лизис биомассы проводили разработанным нами методом: 2,5%-ным раствором ДДС-Na при 100°С в течение > 40 мин.

Впервые при выделении высокополимерной РНК вместо центрифугирования в качестве основного приема фракционирования лизатов предложено использовать отстаивание, которое можно проводить как на холоду (0-4°С), так и при комнатной температуре. Скорость

I отстаивания можно регулировать изменением состава дисперсионной среды.

Впервые для высаливания высокополимерной РНК из осветленного лизата был применен 3 М NaCl. Из оставшейся фракции выделена низкополимерная РНК осаждением соляной кислотой.

Разработан принципиально новый метод дробного осаждения РНК этанолом, с помощью которого из суммарной РНК выделена высокополимерная и тРНК-подобная фракции.

Физико-химические свойства высокополимерной РНК превосходят таковые, получаемые по традиционным процедурам, особенно это касается близкого к нулевому прироста КРФ.

Фосфодиэстеразы из ядов кобры и гюрзы иммобилизованы на CNBr-активированной сефарозе 4В с выходом 80-90%. Показана возможность длительной эксплуатации колонок с иммобилизованными ферментами (по крайней мере, в течение двух месяцев).

Исследована биологическая активность трех препаратов РНК из пекарских дрожжей: суммарной РНК и высокополимерной РНК с разными распределениями по молекулярным массам. Впервые показано, что препараты РНК различной стспепи полимерности и чистоты действуют на разные органы и ткани крыс, стимулируя избирательно в них биосинтез белка. I

Научно-практическое значение работы. Проведенные исследования позволяют значительно упростить технологию выделения и фракционирования дрожжевой РНК. Особенно это касается нового метода дробного осаждения РНК этанолом и нового способа выделения двух фракций РНК: высоко- и низкополимерной путем простого отстаивания. Замена центрифугирования на быстрое отстаивание при комнатной температуре позволяет не только упростить технологический процесс, но и снизить затраты на электроэнергию и оборудование.

С Обнаруженное в работе избирательное воздействие препаратов дрожжевой РНК различной степени полимерности и чистоты на разные органы и ткани лабораторных животных после дальнейшего исследования может послужить основой для создания новых лекарственных средств.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Эффективный лизис клеток пекарских дрожжей достигается при обработке 2.5%-ным раствором ДДС-Na при 100°С в течение > 40 I мин.

2. Выделение высокополимерной РНК из лизата пекарских дрожжей может быть осуществлено в течение < 4 сут методом седиментации при 1 g и комнатной температуре.

3. Суммарная и высокополимерная дрожжевая РНК могут быть осаждены из осветленного лизата пекарских дрожжей 3 М NaCl.

4. Дробное осаждение 36%-ным этанолом позволяет осуществлять фракционирование суммарной РНК пекарских дрожжей по молекулярной массе.

5. Иммобилизация (Ьос&одиэстепаз из ялов кобпы и гюрзы на CNBr

А А X 1 1 активированной сефарозе 4В может быть осуществлена с выходом по активности 80-90%.

6. Препараты дрожжевой РНК различной степени полимерности и чистоты действуют на разные органы и ткани крыс. Высокополимерная РНК с молекулярным распределением 250-700 нуклеотидов избирательно стимулирует биосинтез белка в клетках красного костного мозга.

Апробация результатов исследования. Основные положения диссертации доложены на XLIII Международной научной студенческой конференции «Студент и научно-технический прогресс» (Новосибирск, 2005), на Второй научно-практической конференции «Актуальные проблемы медицинской биотехнологии» (Анапа, 2005), на IX Дальневосточной школе-конференции по актуальным проблемам химии и биологии (Владивосток, 2005) и на 4-ом съезде «Союза биотехнологов России» (Пущино, 2006). По теме диссертации имеется 7 печатных работ.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Ямковая, Татьяна Витальевна

выводы

1. На основе оптимизации отдельных стадий процесса выделения РНК создана методическая база для организации безотходного производства высокополимерной РНК из пекарских дрожжей путем лизиса биомассы с помощью ДДС-Na посредством ее продолжительной (> 40 мин) обработки при 100°С в растворе 2,5%-ного детергента с последующим разделением двух фаз методом быстрого отстаивания при комнатной температуре, осаждением целевого продукта из верхней фазы 3 М NaCl и промывки осадка этанолом.

2. Длительная обработка суспензии дрожжей ДДС-Na при повышенной температуре приводит к полной инактивации рибонуклеаз, что подтверждается низким содержанием кислоторастворимой фракции в продукте и практическим отсутствием прироста этой фракции при длительном его хранении.

3. Разработанный комплекс процедур позволяет получать препараты дрожжевой РНК различного качества: суммарную РНК, высокополимерную РНК, низкополимерную РНК и фракцию РНК, близкую по размерам к тРНК.

4. Разработан способ иммобилизации фосфодиэстераз из ядов кобры и гюрзы с выходом 80-90% и операционной стабильностью > 2 мес на CNBr-активированной сефарозе 4В.

5. Исследована in vivo биологическая активность суммарной РНК и высокополимерной РНК с разными распределениями по молекулярным массам. Препараты различной степени полимерности и чистоты действуют на разные органы и ткани крыс, увеличивая в них скорость биосинтеза белка. На сигнал суммарной РНК откликаются печень, почки, легкие, надпочечники и селезенка. Высокополимерная РНК с молекулярным распределением 100-500 нуклеотидов стимулирует печень и почки. Высокополимерная РНК с молекулярным распределением 250-700 нуклеотидов избирательно активирует клетки красного костного мозга.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Для выделения высокополимерной РНК в препаративных коммерческих целях до сих пор используется метод Крестфилда и соавт., опубликованный в 1955 г. Поэтому в настоящей работе он был выбран в качестве прототипа. В результате проведенных нами исследований была ^ создана методическая база для организации на ее основе безотходного производства высокополимерной дрожжевой РНК с рекордными характеристиками. Мы рассчитываем, что простота предложенной технологии позволит относительно легко довести ее масштабы до малотоннажного уровня. На рис. 30 приведены технологические схемы, поясняющие наши достижения.

Как видно из рисунка, главным отличием метода (б) от метода (а) является длительное кипячение суспензии дрожжей с ДДС-Na на стадии лизиса. Эта модификация позволяет инактивировать большую часть эндо- и экзогенных рибонуклеаз и получить в результате более высокомолекулярный целевой продукт не деградирующий при хранении. Кроме того, в методе (б) для осаждения и промывки РНК вместо этанола используется более удобный в работе 3 М NaCl. На заключительных же стадиях переосаждения и дробного фракционирования в методе (б) этанола используется мало.

Что касается метода (в), то он включает в себя все преимущества метода (б), но отличается от методов (а) и (б) по двум позициям. А именно, f все процедуры по методу (в) проводятся не при 0-4°С, как в случае методов а) и (б), а при комнатной температуре. Эта модификация существенно снижает энергозатраты на поддержание пониженных температур. Кроме того, в методе (в) не используются центрифуги, что существенно упрощает

Рис. 30. Технологические схемы выделения высокополимерной РНК дрожжей: а - методом Крестфилда и соавт., б и в - нашими методами (б - с использованием центрифуги (см. раздел 2.4.1), в - методом отстаивания (см. раздел 2.4.3)). и удешевляет аппаратное оформление процесса и дополнительно снижает затраты энергии.

Подводя итоги настоящего исследования, следует отметить, что в результате целенаправленной оптимизации нами были разработаны достаточно простые способы выделения из пекарских дрожжей биологич^ки активной г.уммяпнпй и иысокополименной РНК. Попутно j "1 1 «/ были получены: низкополимерная РНК, тРНК-подобная фракция, олигорибонуклеотиды и ассоциаты РНК с полисахаридами и белками. Дешевизна и доступность исходного сырья, а также экологическая чистота использованных реактивов (ДДС-Na, NaCl, этанол и дистиллированная вода) позволяют надеяться, что разработанные нами методы будут положены в основу промышленной технологии получения суммарной и высокополимерной дрожжевой РНК и продуктов из нее. Некондиционные партии и отходы РНК могут быть утилизированы путем гидролиза их до нуклеозидов и 5"-мононуклеотидов с помощью иммобилизованных нами фосфодиэстераз из ядов кобры и гюрзы и 5'-нуклеотидазы из яда кобры.

Полученная предлагаемыми способами дрожжевая РНК обладает биологической активностью. При этом препараты суммарной РНК и высокополимерной РНК с разными распределениями по молекулярным массам действуют на разные клетки - мишени. Специфичность биологического действия разных препаратов РНК является существенно новым результатом и заслуживает последующего подробного изучения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Ямковая, Татьяна Витальевна, 2007 год

1. Авакумов В.М., Кузнецова Л.В., Кругликова Р.П. Фармакологические и лечебные свойства (ЬосЛалена // Хим.-Ааомап. жупн. 1980. - Т. 14. - № 2.11' л 1 • * ±-С. 117-120.

2. Аликин Ю.С., Клименко В.П., Щелкунов И.С., Щелкунова Т.И. Препараты РНК потенциальные противоинфекционные средства в рыбоводстве // Сб. науч. трудов сотр. ИМБТ ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор». -Бердск, 2006.-С. 169-191.

3. Аликин Ю.С., Кашперова Т.А., Белявская В.А., Юшков Ю.Г., Чимитов В.Д., Понюхов В.А. Применения пробиотиков и иммуномодуляторов для профилактики вирусных заболеваний птиц // Сб. науч. трудов сотр. ИМБТ ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор». Бердск, 2006. - С. 192-236.

4. Алтунина В.К., Василенко С.К., Коржов В.А., Сандахчиев Л.С. Выделение и характеристика растворимой РНК из пивных дрожжей // Биохимия. 1964. - Т. 29. - Вып. 1. - С. 53-57.

5. Амиров Н.Ш., Кольцов П.А., Трубицина И.Е., Шабанова М.Е., Аронов Л.С. Энкад в лечении язвенной болезни // Тезисы докладов на 1 Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство». М, 1992. - С. 436.

6. Айсберга С.Э., Ирген A.M., Брод И.И. Способ получения рибонуклеозид-5ч-трифосфатов или сахарофосфатов // А.с. 522190 (СССР). -1976.-Б.И. №27.-С. 76.

7. Арион В.Я., Бекман Э.М., Баранова О.А. Средство «Риботим», обладающее иммунотропным действием и способ его получения // Патент РФ 95122136.-Опубл. 10.11.1997.

8. Арион В.Я., Слугин И.В. Биопрепарат для устранения и профилактики вторичного иммунодефицита и способ его получения // Патент РФ 2128999. -Опубл. 20.04.1999.

9. Барай В.Н., Кухарская Т. А., Зинченко А.И. Получение высокоочищенной РНК из дрожжей с помощью ионов кальция // Прикладная биохимия и микробиология. 1995. - Т. 31. - № 5. - С. 494-497.

10. Барай В.Н., Кухарская Т.А., Зинченко А.И. Химико-ферментативный гидролиз РНК до нуклеозидов // Прикладная биохимия и микробиология. -1997.-Т. 33.-№3.-С. 314-316.

11. Барай В.Н., Логачева И.А., Цвигун И.В., Зинченко А.И., Трухачева Т.В., Монастырева Н.В., Шкуматов В.М., Михайлопуло И.А. Получение рибонуклеиновой кислоты из клеток дрожжей // А.с. № SU 1708845 А1. -Опубл. 30.01.92.-Бюл.№ 4.

12. Баронинь И.Б., Иргена A.M., Ниедра И.Ю., Страздыня Р.Э. Способ получения рибонуклеиновой кислоты // А.с. 215429 (СССР). Опубл. 03.04. 1968. - Б.И. -№ 13.-С. 66.

13. Брехман И.И. Человек и биологически активные вещества. JL: Наука, 1976. - 29с.

14. Бринкманис Р.А., Иргена A.M., Рубенис О.С., Лиепиня В.А. Способ ' получения биологически активных веществ // А.с. 465417 (СССР). 1975.1. Б.И.№ 12.-С. 55.

15. Брод И.И., Гайлума М.А., Мовшович С.М. Способ получения нуклеозидов. // А.с. 393277 (СССР). 1973. - Б.И. № 33. - С. 91.

16. Боол И.И. Лулзика Р.А. Микстайс У.Я. Способ получения аттенозинх . . , „ . . J Г 15ч-трифосфата. // А.с. 72290 (СССР). 1980. - Б.И. № 11. - С. 83.

17. Будовский Э.И., Грачев М.А. Метод выделения транспортной РНК из пекарских дрожжей // Вопр. мед. химии. 1964. - Т. 10. - Вып. 4. - С. 431f433.

18. Вишневская З.А., Райт В.К., Ямковой В.И. Методические рекомендации к практическим работам по биохимии. Новосибирск: НГУ, 1995. - 44с.

19. Врацких J1.B., Гаева JI.B., Комарова Н.И., Ямковой В.И. Полинуклеотидкиназа бактериофага Т4. I. Тестирование, иммобилизация // Биотехнология. 1991. - № 4. - С. 50-53.

20. Грибанов О.Г., Перевозчикова Н.А., Гусев А.А. Способ выделения и очистки нуклеиновых кислот // Патент РФ 96124403. Опубл. 20.02.1999.

21. Григорьева Э.В., Рыкова В.И. Взаимодействие специфических ядерных протеогликанов с олигорибонуклеотидами // Доклады Академии наук. 1997. - Т. 356. - №5. - С. 693-695.

22. Гунин В.А., Крылов И.А., Манаков М.Н., Мельниченко Е.Г. Способ получения рибонуклеиновой кислоты и очищенного дрожжевого экстракта //Патент№92001860/13. Опубл. 07.10.1996.

23. Досон Р., Эллиот У., Джонс К. Справочник биохимика. М.: Мир, 1991. - С. 464-465. (Dawson R, Elliott D, Elliott W, Jones K. Data for biochemical research. Clarendon Press, Oxford. 1986).

24. Ершов Ф.И. Антивирусные препараты. M.: Медицина, 1998. - С. 147151.

25. Жолобак Н.М., Карпов А.В., Рыбалко C.JL, Антоненко С.В., Барбашева Е.В. Сравнительная характеристика цитотоксичности интерферон-индуцирующего комплекса дрожжевая РНК-тилорон // Антибиотики и химиотерапия. Киев, 1999. - Т. 44. - Вып. 4. - С. 21-24.

26. Земсков A.M. Детоксицирующий эффект РНК. // Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1980в. - № 3. - С. 80-83.

27. Земсков A.M. Индукция препаратами РНК повторного иммунологического ответа // Иммунология. 1980а. - № 1. - С. 71-74.

28. Земсков A.M. Некоторые механизмы действия адъювантов // Иммунология. 1982. - № 1. - С. 6-12.

29. Земсков A.M. Стимуляция первичного и вторичного иммунных ответов дрожжевой NaPHK // Микробиологический журнал. 19806. - Т. 2. -№ 2. - С. 219-225.

30. Земсков A.M., Земсков В.М. Острый шигеллез: роль нуклеиновых кислот и в инфекции и иммунитете (новая концепция). Воронеж: Изд. ВГУ, 1991.-136с.

31. Земсков A.M., Земсков В.М., Петров А.В., Никитин А.В. К механизму стимуляции иммуногенеза нуклеинатом натрия // Иммунология. 1981. -№1. - С. 52-55.

32. Земсков В.М. Адъювантные действия нуклеиновых кислот и бактериальных эндотоксинов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1972а. - № 3. - С. 16-23.

33. Земсков В.М. Влияние дрожжевой РНК на исход экспериментальной инфекции у мышей // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии, 1969, - № 8, - С, 84-87.

34. Земсков В.М. Натрия нуклеинат как иммуномодулятор // Тезисы докладов на 1 Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство». М: 1992. С. 96.

35. Земсков В.М. О роли нуклеиновых кислот в инфекции и иммунитете // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 19706. - № 12. - С. 65-69.

36. Земсков В.М. Повышение антиинфекционной резистентности у мышей при помощи гетерологичной РНК // Журн. микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1970а. - № 2. - С. 33-37.

37. Земсков В.М. Повышение неспецифической устойчивости животных к стафилококку официальными препаратами РНК // Журн. Микробиологии, эпидемиологии и иммунологии. 1975. - № 3. - С. 122-126.

38. Земсков В.М. Усиление противоинфекционной резистентности организма препаратами нуклеиновых кислот // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 19726. - № 4. - С. 71-74.

39. Земсков В.М., Барсуков А.А., Безносенко С.А., Писклова Э. Активирование спонтанной миграции лейкоцитов нуклеинатом натрия // Иммунология. -1981. № 3. - С. 51-55.

40. Земсков В.М., Лидак М.Ю., Земсков A.M., Микстайс У.Я. // Низкомолекулярная РНК: получение, гидролиз и применение в медицине. -Рига: Зинатне, 1985. 191с.

41. Зидермане А.А., Кравченко И.М. Влияние циклоцитидина на экспериментальные опухоли и лейкозы // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. Рига: Зинатне, 19806. - Вып. 9. - С. 5-8.

42. Зидермане А.А., Кравченко И.М. Изучение противолейкозного и противоопухолевого действия тиогуанина в эксперименте Экспепиментальная и клиническая Лапмакотешпия. Рига: Зинатне. 1980а.1 АЛА '- Вып. 9. С. 36-39.

43. Идельсон Л.И., Коротеева Г.П., Клиновицкая Л.П. Применение аденозин-5'-монофосфата при острой перемежающейся порфирии и свинцовой интоксикации. // Клин. Медицина. 1973. - № 1. - С. 50-94.

44. Карабун П.М., Ефимов А.С. Применение рибонуклеиновой кислоты в комплексном лечении больных сахарным диабетом // Врачебное дело. -1975,-№4.-С. 11-15.

45. Комарова Н.И., Медяникова Л.В., Троцкий Н.Ф., Яцухина И.Я., Ямковой В.И. Выделение нуклеаз из яда среднеазиатской кобры Naja naja oxiana // Биотехнология. 1992. - № 3. - С. 35-38.

46. Кочетков Н.К., Будовский Э.И., Свердлов Е.Д., Симукова Н.А., Турчинский М.Ф., Шибаев В.Н. Органическая химия нуклеиновых кислот. -М.: Химия, 1970.-720с.

47. Крылов И.А. Микробные полинуклеотиды для синтеза лекарственных средств // Тезисы докладов на всерос. науч. конф. «Актуальные проблемы создания новых лекарственных средств». СПб, 1996. - С. 18-19.

48. Крылов И.А., Красноштанова А.А., Рукинова Т.А. Разработка основ технологии переработки отходов мясоперерабатывающей и пищевой промышленности // Окружающая среда для нас и будущих поколений. -Самара, 2000. - С. 52-53.

49. Крылов И.А., Маркина Н.С., Красноштанова А.А., Гунин В.А., Манаков М.Н. Выбор оптимальной схемы получения дрожжевой РНК в условиях современных биохимзаводов БВК и лизина // Биотехнология. -1992.-№2. -С. 81-83.

50. Лазарева Д.Н., Алехин Е.К. Стимуляторы иммунитета. М.: Медицина, 1985. - С. 71-79.

51. Лактионов П.П., Тамкович С.Н., Симонов П.А., Рыкова Е.Ю., Власов В.В. Способ выделения рибонуклеиновых кислот // Патент РФ 2232810. -Опубл. 20.07.2004.

52. Липфорд Г.Б., Бауэр Ш., Вагнер X. Иммуностимулирующие G, U -содержащие олигорибонуклеотиды // Патент РФ 2004132209. Опубл. 10.06.2005.

53. Майчук Ю.Ф., Поздняков В.И., Галегов Г.А., Бикбулатов P.M. Противовирусная активность 5-бромуридина в эксперименте и его терапевтическая эффективность при герпесвирусной инфекции глаз // Вопр. Вирусологии. 1973. - № 4. - С. 408-411.

54. Малета Ю.С., Тарасов В.В. Математические методы статистического анализа в биологии и медицине. М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1981. - 176с.

55. Масычева В.И., Лосева М.И., Садовская О.Б., Улыбина В.А. Полирибонат в терапии хронических лейкопений // 4 Рос. Нац. Конгр. «Человек и лекарство». М., 1997. - С. 274

56. Минченко А.Г. Козыпипкий В.Г. Изменение биосинтеза РНК и ультраструктуры клеток печени под влиянием рибонуклеината натрия // Фармакология и токсикология. 1978. - № 4. - С. 454-458.

57. Мирзабеков А.Д., Векстерн Т.В., Баев А.А. Олигонуклеотиды рибонуклеазного гидролизата суммарной транспортной РНК пекарских дрожжей // Биохимия. 1965. - Т. 30. - Вып. 4. - С. 825-835.

58. Николаева Л.Ф., Лысенко Л.Т., Макарова Г.Е. Влияние инозина на течение инфаркта миокарда // Клин. Медицина. 1975. - № 7. - С. 50-56.

59. Николин В.П. Усиление иммунитета к сингенной опухоли мышей в результате воздействия на ее препаратом гетерологичной РНК // Новосибирск: Изв. Сиб. Отд. АН СССР, 1972. № 10. - Вып. 2. - С. 143-146.

60. Ноздрин Г.А., Аликин Ю.С., Подгорный В.Ф. Повышение неспецифической резистентности и профилактика иммунодефицитовмолодняка крупного рогатого скота с помощью полирибоната // Сб. науч. трудов сотр. ИМБТ ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор». Бердск, 2006. - С.250-267.

61. Ноздрнн Г.А., Донченко А.С. Пути повышения естественной резистентности новорожденных телят // Актуальные вопросы ветеринарии. -Новосибирск, 1997. С. 4-5.

62. Панин Л.Е Хяпьков^ий А.В Специфический стимулятоп биосинтеза белка в кроветворных и иммунекомпетентных органах // Патент РФ 2045270. Опубл. 10.10.95. - Б.И. № 28.

63. Панин Л.Е., Харьковский А.В. Влияние стимуляторов мононуклеарной фагоцитирующей системы на биосинтез белка в органах и тканях крыс // Эксперим. и клин, фармакол. 1997. - Т.60. - №2. - С.49-52.

64. Петерсоне И.О., Блюгер Н.А., Григалинович Г.А., Клингман Л.Е., Берзиня Д.А., Лукашенко А.П. Токсикологическое изучение циклоцитидина // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. Рига: Зинатне, 1980. -Вып. 9.-С. 31-35.

65. Преображенская М.Н. Поиск противоопухолевых препаратов среди аналогов компонентов нуклеиновых кислот // Журн. Всесоюз. Хим. о-ва им. Д.И.Менделеева. 1973. - Т. 18. - № 6. - С. 643-656.

66. Пуховская Н.М., Долгих A.M., Верета Л.А. Способ получения препаратов суммарной РНК // Патент РФ 2048519. Опубл. 20.11.1995.

67. Райт В.К., Халимская Л.М., Ямковой В.И. Методики выделения ферментов. Новосибирск: НГУ, 1986. - С. 15-18.

68. Ред. Збарский И.Б., Дебов С.С. Химия и биохимия нуклеиновых кислот. Л.: Медицина, 1968. - С. 92

69. Ред. Масычева В.И. Сб. науч. трудов сотр. НИКТИ БАВ, 1996.

70. Реутова Е.А. Морфологические исследования влияния полирибоната на органы гомеостатического обеспечения // Автореф. дис. на соиск. учен, степ. канд. вет. наук: 16.00.02 Новосиб. гос. аграр. ун-т. - Новосибирск, 2001.-20 с.

71. Рослякова Е.Ю., Сысоева Г.М., Фадина В.А., Аликин Ю.С. Некоторые биологические эгЬгЬекты ппожжевых РНК // Сб. няуч -rnvnoR готп ИМБТ11 ' 1 - - —1- — -г - — —

72. ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор». Бердск, 2006. - С.148-168.

73. Рыкова В.И., Любинский О.А., Скобельцина Л.М. Характеристика РНК, связанной с протеогликанами в печени крыс // Отчетная сессия ИЦИГ СО РАН, труды 1999. Новосибирск, 2000. - С. 59-63.

74. Семенишин Е.М., Троцкий В.И., Брод И.И., Рубенис О.С. Исследование кинетики и математическое описание процесса экстрагирования рибонуклеиновых кислот // Химическая технология. -1991.-Вып. 2.-С. 77-79.

75. Сингер М., Берг П. Гены и геномы. М.: «Мир», 1998. - Т.1. - С. 52.

76. Синицын А.П., Клибанов A.M., Клесов А.А., Мартинек К. Зависимость стабильности иммобилизованной глюкоамилазы от способа иммобилизации // Прикладная биохимия и микробиология. 1978. - Т. 14. -Вып. 2. - С. 236-242.

77. Соколов В.Д., Андреева Н.Л., Соколов А.В. Иммуностимуляторы в ветеринарии // Ветеринария. 1992. - №7-8. - С. 49-50.

78. Страйер Л. Биохимия. Том.З. М: Мир, 1985. - С. 47-48.

79. Трухачева Т.В., Губина Л.П., Ермоленко Т.М., Дидоренко А.И., Петров П.Т., Царенков В.М. Иммуномодулирующие препараты на основенуклеиновых кислот тпатшгшонные и новые технологии // 2-й1 ' ' '

80. Международный съезд «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». СПб: Изд-во Регион. Фонд «Адапт», 19986. С. 166-168.

81. Филиппович Ю.Б., Егорова Т.А., Севастьянова Г.А. Практикум по общей биохимии. М.: Просвещение, 1982. С. 157-184.

82. Фролова Л.Ю., Киселев Л.Л. Биохимия. 1963. - № 28. - 722с.

83. Фукс Б.Б., Константинова И.В. Цитохимия иммуногенеза в ординарных и экстремальных условиях. М., 1973. - 340с.

84. Фукс Б.Б., Шерешевская С.Ф., Левина Ф.Г., Шабанова И.Е. О специфическом лечебном эффекте рибонуклеотидов при тапеторетинальных дистрофиях // Вести. АМН СССР. 1971. - № 7. - С. 63-68.

85. Фукс Б.Б., Шерешевская С.Ф., Попова Л.М., Шнапер А.Л. Заместительный лечебный эффект рибонуклеотидов при некоторых болезнях // Бюл эксперим. биологии и медицины. 1969. - № 9. - С. 23-26.

86. Фукуми М. Лечебное средство для цереброспинальных растройств // Патент № 62-129219. Опубл. 06.11.1987.

87. Хаги Х.Б., Мейрен Д.В., Гилев А.П. Биохимические и биофармацевтические исследования циклоцитидина // Экспериментальная и клиническая фармакотерапия. Рига: Зинатне, 1980. - Вып. 9. - С. 24-30.

88. Чучаев В.М. Бахвалов О.В. Хмельнипкий А.Г. Мензопова НИ., Сандахчиев Л.С. Выделение транспортной РНК из дрожжей // Прикладная биохимия и микробиология. 1967. - Т. 3. - Вып. 3. - С. 336-340.

89. Шахова Т.В., Майорова Г.И., Нестеренко Е.А., Орлова Т.В. Получение и выделение ферментного комплекса 5'-экзонуклеазы и щелочной фосфатазы Actinomyces coelicolor II Биотехнология. 1988. - Т.4. - № 4. - С. 501-505.

90. Шахова Т.В., Хомякова Г.И., Фридман Т.Ф. Способ получения нуклеозидов // А.с. (СССР). 1982. - Б.И. № 28. - С. 121.

91. Шкиль Н.Н., Шкиль Н.А., Аликин Ю.С. Применение РНК содержащих иммуностимуляторов для лечения микоплазмоза молодняка крупного рогатого скота // Сб. науч. трудов сотр. ИМБТ ФГУН ГНЦ ВБ «Вектор». Бердск, 2006. - С.237-168-249.

92. Щербакова Э.Г., Земсков В.М., Соболев В.Р. и др. Гистологическое изучение перитонеальных макрофагов, активированных нуклеинатом натрия //Антибиотики. -1981,- № 3. С. 119-121.

93. Ямковой В.И. Практикум по биохимии. Новосибирск: НГПУ, 2002а. -Ч. 1.-С. 111-116.

94. Ямковой В.И. Практикум по биохимии. Новосибирск: НГПУ, 20026. -Ч. 1. -С. 117-122.

95. Ямковой В.И. Курс лекций по биохимии. Ч. 1. Биомолекулы. -Новосибирск: НГПУ, 2001. 77с.

96. Янчевский В.К., Вовнянко Е.К., Головченко В.Н. Дрожжевой белок -значительный резерв повышения ресурсов пищевого белка // Тезисыдокладов на всесоюзной конф. «Достижения биотехнологии -агропромышленному комплексу». Черновцы, 1991а. - Т. 1. - С. 130-131.

97. Янчевский В.К, Вовнянко Е.К., Головченко В.Н., Соломко Г., Мицик В. Безотходная технология // Пищевая и перерабатывающая промышленность. 1993. - Вып. 9. - С. 4.

98. Янчевский В.К., Вовнянко Е.К., Маринчепко Л.В., Антонюк В.П, Применение мембранной техники в технологии комплексной переработки дрожжей сахаромицетов // Тезисы докладов на 2-ой Респ. конф. - Киев, 19916. - С. 113.

99. Ambrus J.L., Ambrus С.М., Odake К. et. al. Clinical and experimental studies on adenine, various nucleosides and their analogs in hematology // Annu. N.Y. Acad. Sci. 1975. - V. 255. - P. 435-467.

100. Beluhan S., Marie V. Problems of nucleic acid content reduction in yeasts and preparation of mononucleotides // Prehramb. Tehnol. i Biotehnol. Rev. -1992.-N. 30.-P. 25-30.

101. Benaiges M.D., Lopez-Santin J., Sola C. Production of 5'-ribonucleotides by enzymatic hydrolysis of RNA // Enzyme Microb. Technol. 1990. - V. 12.-N. 2. - P. 86-89.

102. Bloch A. Biphasis inhibition of growth by combinations of 6-mercaptopurine riboside (MPR) and guanosine (GR) // Proc. Amer. Assoc. Cancer Res. 1970. - V. 11. - P. 9-13.

103. Cambi J.D., Rogers P.L. Multistage continuous cultivation of Candide utilis on splent sulphite liquor // J. Fermentation Technol. 1976. - V.54. - N. 6. -P. 437-449.

104. Chia L.L., McLaughlin C.S. The half-life of mRNA in Saccharomyces cerevisiae // Mol.Gen. Genet. 1979. - V. 170. - P. 137-144.

105. Chomczynski P., Sacchi N. Single-step method of RNA isolation by acid guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform extraction // J. Anal. Biochem. -1987.-V. 162.-N. l.-P. 156-159.

106. Crestfield A.M., Smith K.C., Allen F.W. The preparation and characterization of ribonucleic acids from yeast // J. Biol. Chem. 1955. - V. 216. -N. l.-P. 185-193.

107. Diaz-Ruiz J.R., Kaper J.M. Isolation of viral double-stranded RNAs using LiCl fractionation procedure // Prep. Biochem. 1978. - V. 8. - P. 1-17.

108. Dimroth K., Witzel H., Hulsen W., Mirbach H. Uber die hidrolysc von ribonucleinsauren in gegenwart von metallhydroxyden // Liebigs Ann. Chem. 1959.-Bd. 620. -H. 1.-S.94.

109. Dobbeling U., Boni R., Haffner A., Dummer R., Burg G. Method for simultaneous RNA and DNA isolation from biopsy material, culture cells, plants and bacteria // BioTecniques. 1997. - V. 22. - N. 1. - P. 88-90.

110. Domdey H., Apostol В., Lin R.J., Newman A., Brody E., Abelson J. Lariat structures are in vivo intermediates in yeast pre-mRNA splising // Cell. 1984. -V. 39.-N.3.-P. 611-621.

111. Elion G.B., Furman P.A., Fuge J.A. Selectivity of action of an antiherpetic agent 9-(2-hydroxyethoxymethyl)guanine // Proc. Nat. Acad. Sci. 1977. -V. 74. -P. 5716-5720.

112. Enesco N.E. Fate of 14C-RNA infected into mice // Experimental Cell Res. 1966. - V. 42.-N.3.-P.640.

113. Etaix E., Orgel L.E. Phosphorylation of nucleotides in aqueous solution using trimetaphosphate: formation of nucleoside triphosphates // J. Carbohydr. Nucleotides, Nucleosides. 1978. - V. 5. - N. 2. - P. 91-110.

114. Feinberg В., McLaughlin C.S. Isolation of yeast mRNA and in vitro translation in a yeast cell-free system // In: Yeast: A Practical Approach (I. Campbell and J.H. Duffus, eds.), Oxford: IRL Press, 1988. P. 147-161.

115. Franklin R.M. Purification and properties of the replicative intermediate of the RNA bacteriophage R17 // Proc. Natl. Acad. Sci. 1966. - V. 55. - P. 15041511.

116. Fujimoto Y. Ribonucleosides // Japan 76-40,079, 01 Nov 1976. C.A. -1977. - V. 86. - N. 21. - P. 498. - 155901.u.

117. Galand P., Ledoux L. Uptake of exogenous ribonucleic acid by ascitis tumor cells. 2. Relations between RNA uptake and the cellular metabolism // Experientia, Cell Res. 1966. - V. 43. - N. 2. - P. 391-397.

118. Gasior E„ Herrera F., Sadnik I., McLaughlin C.S., Moldave K. The preparation and characterization of a cell-free system from Saccharomyces cerevisiae that translates natural messenger ribonucleic acid // J. Biol. Chem. -1979. V. 254. - P. 3965-3969.

119. Greenfield I.L. Compositions, methods, and kits for isolating nucleic acids using surfactant and proteases // US Patent 7,001,724. 21.02.2006.

120. Grigorieva E.V., Rykova V.I. Nuclear proteoglycans of mouse liver cells: specific interaction with G-rich oligonucleotides // Protein Sci. 1995. - V. 4. -Suppl. l.-P. 106.

121. Hayes D.H. The hydrolysis of ribonucleic acid with aqueous formamide // J. Chem. Soc. 1960. - N. 3. - P. 1184-1187.

122. Holland M. J., Hager G.L., Rutter W.J. Characterization of purified poly(adenylic acid)-containing messenger RNA from Saccharomyces cerevisiae II Biochemistry. 1977. - V. 16. - P. 8-16.

123. Holley R.W. Large-scale preparation of yeast "Soluble" ribonucleic acid I I Biochem.and Biophys. Research Com. 1963. - V. 10. - N. 2. - P. 186-188.

124. Hrynink W. Cytarabine for herpes virus infections // J. Amer. Med. Assoc. -1972.-V. 219.-P. 715-718.

125. Hudspeth M.E.S., Schumard D.S., Tatti K.M., Grossman L.I. Rapid purification of yeast mitochondrial DNA in high yield // J. Biochim. Biophys. Acta. 1980. - V. 610. - N. 2. - P. 221-228.

126. Juel-Jensen B.E. Herpes simplex and zoster // Brit. Med. J. 1973. - V. 1. -P. 406-410.

127. Juel-Jensen B.E. Severe generalized primary herpes treated with cytarabine // Brit. Med. J. 1970. - V. 2. - P. 154-157.

128. Kanai F., Sato S., Imamura S., Hisada Y. Extraction of yeast ribonucleic acid // Japan, Kokai 76-73,192, 24 Jun 1976. C.A. - 1976. - V. 85. - N. 22. - P. 383. - 157973x.

129. Kandel J. Isolation and detection of double-strander RNA from fungi // Methods Enzymol. 1979. - V. 60. - P. 549-554.

130. Kirby K.S. A new method for the isolation of ribonucleic acids from mammalian tissues // Biochem. J. 1956. - V. 64. - N. 3. - P.405.

131. Kirby K.S. Isolation and characterization of ribosomal ribonucleic acid // Biochem. J. 1965. - V. 96. - P. 266-269.

132. Koch H., Friesen J.D. Individual messenger RNA half lives in Saccharomyces cerevisiae II Mol. Gen. Genet. 1979. - V. 170. - P. 129-135.

133. Kormanec J., Farkasovsky M. Isolation of total RNA from yeast and bacteria and detection of rRNA in Northern Blots // BioTechniques. 1994. - V. 17. - N. 5. - P. 839-842.

134. Krayevsky A.A., Watanabe K.A. Modified nucleotides as anti-AIDS drugs: current status and perspective M: Bioinform, 1993. - 210 p.

135. Kreutzfeldt C., Witt W. Structural biochemistry. Ribonucleic acids // In: Biotechnology handbook. 4. Saccharomyces (Tuite M.F., Oliver S.G., eds.), N.Y.: Plenum Press, 1991. P. 254-277.

136. Laemmli I J.K. // Nature, 1970.- - V. 227. - P. 680-685.

137. Lessor R.A., Leonard N.J. Synthesis of 2v-deoxynucleosides by deoxygenation of ribonucleosides // J. Org. Chem. 1981. - V. 46. - P. 4300-4301.

138. Littlewood R., Shaffer В., Davies J. Mutants of Saccharomyces cerevisiae with reduced levels of ribonuclease activity // Genetics. 1971. - V. 68. - P. 39.

139. Lowry O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the folin phenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - V. 193. - P. 265-275.

140. Maniatis Т., Fritsch E.F., Sambrook J. Molecular cloning: a laboratory manual. N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, 1982.

141. Manna F., Massardo D.R., Del Giudice L., Alifano P., Wolf K. A simple and inexpensive method for RNA extraction from yeasts // Trends Genet. 1996.- V. 12.-N. 9.-P. 337.

142. Mans R.J., Novelli G.D. Measurement of incorporation of radioactive aminoacid into protein by filter-paper disc method // J. Arch. Biochem. Biophys. -1961.-V. 94.-P. 48-53.

143. McEntee C.M., Hudson A.P. Preparation of RNA from unspheroplasted yeast cells (Saccharomyces cerevisiae) // Anal. Biochem. 1989. - V. 176. - N. 2.- P. 303-306.

144. McLaughlin C.S., Warner J.R., Edmonds M., Nakazato H., Vaughan M.H. Polyadenylic acid sequences in yeast messenger RNA // J.Biol.Chem. 1973. - V. 248.-P. 1466-1471.

145. Mitchell D.J., Bevan E.A. ds-RNA killer systems in yeast // In: Yeast Biotechnology (Berry D.R., Russell I., Stewart G.G., eds.), London: Allen and Unwin, 1987.-P. 104-155.

146. Monier R., Stephenson M.L., Zamechnik P.C. The preparation and some properties of a low molecular weight ribonucleic acid from baker's yeast // J.лIOAn \r /14 D 1 9

147. D1W Willi 11. UH-'plljo. nviu. 1 y\J\J. — T . . 1 . 1 IJ.

148. Nakao Y. Microbial production of nucleic acid end substances. Tokyo: Kodansha, 1976. - P. 87-103.

149. Nobumitsu Y., Tadao N., Masashi N., Saburo S. Nucleosides. // Japan 6616,369, 1966.-C.A.- 1967. V. 66. - N. 1. - P. 313. - 2734q.

150. Noguchi S., Shimura G. 5'-Ribonucleotide. // Japan, Kokai 77-18,892, 12 Feb 1977. C.A. - 1977. - V. 87. -N. 1. - P. 180. - 2035k.

151. Ojaniemi H., Evengard В., Lee D.R., Unger E.R., Vernon S.D. Impact of RNA extraction from limited samples on microarray results // BioTechniques. -2003,-V. 35.-N. 5.-P. 968-973.

152. Oliver S.G., McCready S.J., Holm C., Sutherland P., McLaughlin C.S., Cox B.S. Biochemical and physiological studies of the yeast virus-like particle // J. Bacteriol. 1977. - V. 130. - P. 1303-1309.

153. Petracek J., Dostalek P., Susek M. Zpusob vyroby technickeho preparatu RNA z pivovarskych kwasnic // Patent N 275820. Publ. 20.12.1991.

154. Raies A., Lawrence F., Robert-Gero M., Loche M., Cramer R. Effect of 54-deoxy-54-S-isobutyl adenosine on polyoma virus replication // FEBS Letters, 1976.-V. 72.-N. l.-P. 48-52.

155. Robins M.J., Wilson J.S. Smooth and efficient deoxygenation of secondary alcohols. A general procedure for the conversion of ribonucleosides to 2V-deoxynucleosides //J. Amer. Chem. Soc. 1971. - V. 103. - P. 932-933.

156. Robins R.K. Nucleosides and nucleotides: past, present, future // Annu. N. Y. Acad. Sci. 1975. - V. 255. - P. 597-610.

157. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. Molecular cloning: a laboratory manual. N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, 1989. - V. 2.-P. 13.45 - 13.53.

158. Schmitt M.E., Brown T.A., Trumpower B.L. A rapid and simple method for preparation of RNA from Saccharomyces cerevisiae II Nucleic Acids Res. -1990. V. 18. - N 10. - P 3091-3092.

159. Scott J.H., Schekman R. Lyticase; endoglucanase and protease activities that act together in yeast cell lysis // J. Bacteriol. 1980. - V. 142. - P. 414-420.

160. Sherman M.F., Fink G.R., Hicks J.B. Methods in Yeast Genetics. N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratories, Cold Spring Harbor, 1983.

161. Sogin S.J., Saunders C.A. Fluctuation in polyadenylate size and content in exponential- and stationary-phase cells of Saccharomyces cerevisiae II J. bacterial. 1980. - V. 144. - P. 74-81.

162. Sowa T. Microbial Production of nucleic acid end substances. Tokyo: Kodansha, 1976. - P. 112-114.

163. Sripati C.E., Groner Y., Warner J.R. Methylated blocked 5'-termini of yeast mRNA // J.Biol.Chem. 1976. - V. 251. - P. 2898-2904.

164. Sripati C.E., Warner J.R. Isolation, characterization and translation of mRNA from yeast // Methods Cell Biol. 1978. - V. 20. - P. 61-81.

165. Sved S.C. The metabolism of exogenous ribonucleic acids injected into mice // Canad. J. Biochem. 1965. - V. 43. - N. 7. - P. 949.

166. Szybalski W. X-Ray sensitization by halopyrimidines // Cancer Chemotherapy Rep. -1974. V. 58. - P. 539-557.

167. Tuite M.F., Oliver S.G. RNA preparation // In: Biotechnology handbook. 4. Saccharomyces (Tuite M.F., Oliver S.G., eds.), N.Y.: Plenum Press, 1991. P. 290-319.

168. Umbreit J.N. A small RNA is associated with dermatan sulfate proteoglycan // Anticancer Res. 1996a. - V. 16. - N. 4. - P. 1899-1914.

169. Umbreit J.N. Proteoglycans and glycosaminoglycans during maturation of the mouse mammary gland I I Anticancer Res. 1996b. - V. 16. - N. 5. - P. 30133029.

170. Verwoerd T.C., Dekker B.V.V., Hoekema A. A small-scale procedure for the rapid isolation of plant RNAs // J. Nucleic Acids Res. 1989. - V. 17. - N. 6.1. Г» ЛТ/'Л1. Г. /.JUi,

171. Wang Т., Zhang N., Du L. Isolation of RNA of high quality and yield from Ginkgo biloba leaves // Biotechnology Letters. 2005. - V. 27. - N. 9. - P. 629633.

172. Welsh J.D., Leibowitz M.J., Wickner R.B. Virion dependent RNA polymerase from Saccharomyces cerevisiae // Nucl. Acids Res. 1980. - V. 8. - P. 2349-2359.

173. Whitley R.J., Tucker B.C., Kinkel A.W. et. al. Pharmacology, tolerance and antiviral activity of vidarabine monophosphate in humans // Antimicrobial Agents, Chemotherapy. 1980. - V. 18. - N. 5. - P. 709-715.

174. Yatani K., Nakayama K., Honda H. Adenosine 5"-triphosphate // Japan 70-f 01,268, 16 Jan 1979. C.A. - 1970. - V. 72. - N. 21. - P. 446. - 111787t.