Регуляция активности глутатионредуктазы из печени крысы при токсическом гепатите и действии гепатопротекторов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Агарков, Александр Алексеевич

• Агарков, Александр Алексеевич
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Агарков, Александр Алексеевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Токсическое поражение печени

1.1.1. Общая характеристика гепатитов

1.1.2. Механизм токсического поражения печени четыреххлористым 14 углеродом

1.2. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная система 16 1.2.1. Образование свободных радикалов

1.2.2. Образование активных форм кислорода и пероксидное 17 окисление липидов

1.2.3. Роль свободнорадикального окисления в норме и при 21 патологии

1.2.4. Антиоксидантная система защиты

1.3. Антиоксидантные свойства тиоктовой кислоты

1.4. Восстановленный глутатион, как компонент антиоксидантной 25 системы

1.5. Характеристика глутатионредуктазы из различных источников

1.5.1. Катализируемая реакция

1.5.2. Исследование генов, кодирующих глутатионредуктазу, и ее 29 субклеточное распределение

1.5.3. Исследование структуры глутатионредуктазы

1.5.4. Распространение и очистка глутатионредуктазы

1.5.5. Молекулярная масса глутатионредуктазы

1.5.6. Зависимость активности глутатионредуктазы от концентрации 39 субстрата и кофермента

1.5.7. Влияние рН и температуры на скорость реакции, 39 катализируемой глутатионредуктазой

1.5.8. Регуляция активности глутатионредуктазы

1.5.9. Активность глутатионредуктазы при действии 46 неблагоприятных факторов и патологии

1.5.10. Перспективы практического применения глутатионредуктазы

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Создание модели экспериментального токсического гепатита

2.2.2. Определение активности ферментов

2.2.3. Получение субклеточных фракций гепатоцитов

2.2.4. Определение количества белка

2.2.5. Выделение и очистка глутатионредуктазы из печени крыс

2.2.5.1. Экстракция фермента

2.2.5.2. Фракционирование белков с помощью сульфата аммония

2.2.5.3. Гель-фильтрация на сефадексе G

2.2.5.4. Ионообменная хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе

2.2.5.5. Концентрирование фракций фермента

2.2.5.6. Гель-хроматография на Toyopearl HW

2.2.6. Исследование кинетических характеристик и регуляции 56 активности фермента

2.2.7. Аналитический электрофорез

2.2.8. Определение молекулярной массы фермента

2.2.9. Экстракция тотальной РНК тризоловым методом

2.2.10. Электрофорез РНК

2.2.11. Обратная транскрипция

2.2.12. ПЦР-амплификация в режиме реального времени

2.2.13. Определение уровня экспрессии генов

2.2.14. Электрофорез ДНК

2.2.15. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. АКТИВНОСТЬ, СУБКЛЕТОЧНАЯ 63 ЛОКАЛИЗАЦИЯ И ОЧИСТКА

ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ В НОРМЕ, ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И ДЕЙСТВИИ ГЕПАТОПРОТЕКТОРОВ

3.1. Исследование активности глутатионредуктазы из печепи крыс в норме, при токсическом гепатите и введении протекторов при патологии

3.2. Исследование субклеточной локализации глутатионредуктазы

3.3. Очистка глутатионредуктазы из печени крыс исследуемых 65 групп

ГЛАВА 4. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА И КИНЕТИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ КАТАЛИТИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ В НОРМЕ, ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И ДЕЙСТВИИ ВЕЩЕСТВ-ПРОТЕКТОРОВ

4.1. Молекулярная масса глутатионредуктазы

4.2. Исследование кинетических параметров каталитического 74 действия глутатионредуктазы в норме, при экспериментальном токсическом гепатите и действии гепатопротекторов

4.3. Влияние концентрации ионов водорода на активность 82 глутатионредуктазы из печени крыс в норме, при экспериментальном токсическом гепатите и при введении гепатопротекторов

4.4. Исследование влияния температуры на активность 84 глутатионредуктазы из печени крыс в норме, при патологии и при введении гепатопротекторов

ГЛАВА 5. РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ 91 ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫСЫ В НОРМЕ, ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И ДЕЙСТВИИ ГЕПАТОПРОТЕКТОРОВ 5.1. Влияние интермедиатов пентозофосфатного пути на активность глутатионредуктазы

5.2. Влияние интермедиатов цикла Кребса на активность 99 глутатионредуктазы

5.3. Влияние нуклеотидфосфатов на активность 112 глутатионредуктазы

5.4. Участие ионов металлов в регуляции активности 123 глутатионредуктазы в норме, при токсическом поражении печени и введении гепатопротекторов на фоне развития патологии

5.4.1. Влияние ионов магния на активность глутатионредуктазы

5.4.2. Влияние ионов Са , Си" на активность глутатионредуктазы

5.4.3. Влияние ионов железа на активность глутатионредуктазы

5.5. Влияние тиоктовой кислоты и восстановленного глутатиона 140 на активность глутатионредуктазы в норме, при токсическом гепатите и при введении гепатопротекторов

ГЛАВА 6. ЭКСПРЕССИЯ ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ В 143 ПЕЧЕНИ КРЫСЫ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ И ДЕЙСТВИИ

ГЕПАТОПРОТЕКТОРОВ ПРИ ПАТОЛОГИИ

6.1. Выделение тотальной РНК из печени крысы

6.2. Обратная транскрипция и полимеразная цепная реакция

6.3. Оценка уровня экспрессии с гена глутатионредуктазы в норме, 145 при токсическом гепатите и при введении гепатопротекторов при патологии

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Регуляция активности глутатионредуктазы из печени крысы при токсическом гепатите и действии гепатопротекторов»

Актуальность работы. Известно, что большинство патологических процессов протекает на фоне образования активных форм кислорода (АФК) и усиления свободнорадикального окисления (СРО) биосубстратов. В ответ на это происходит активизация антиоксидантной системы (АОС) клетки. АОС л представлена низкомолекулярными соединениями — ловушками радикалов, к которым относят витамины А, С, Е и К, биофлавоноиды, низкомолекулярные тиолы, а также антиоксидантными ферментами (супероксиддисмутаза (СОД), глутатионпероксидаза (ГП), глутатионредуктаза (ГР), каталаза и т.д.). Учитывая то обстоятельство, что большинство известных патологических состояний сопровождаются усилением СРО, повреждающим белковые структуры, молекулы ДНК и липидов [62, 150, 223] и ослаблением активности АОС, весьма актуальной представляется оценка состояния этих систем с целью ранней диагностики и обоснованного лечения заболеваний.

Действие многочисленных химических веществ на организм человека сложно и многообразно. К числу ксенобиотиков с наиболее высокой степенью избирательной гепатотоксичности относятся хлорированные углеводороды, типичным представителем которых является тетрахлорметан (СС14). Имеющиеся данные свидетельствуют, что развитие СС14-гепатита сопряжено с интенсификацией СРО [5, 63]. Организм человека и животных располагает целым рядом сложных биохимических систем (метаболизма ксенобиотиков, антирадикальной защиты и т.д.), во многом определяющих чувствительность к действию токсинов разного строения. К их числу относится и глутатионовая система. Она принимает участие в реализации целого ряда важнейших физиологических процессов. Так, глутатион, являющийся компонентом данной системы, выступает в качестве резерва цистеина в клетке и воздействует на функциональную активность лимфоцитов, обеспечивая иммунный ответ организма. Кроме того, данный тиол оказывает влияние на синтез белков теплового шока, а также на биохимические превращения витаминов С, Е, липоевой кислоты и убихинона. Регуляция тиол-дисульфидного равновесия, углеводного, липидного, белкового и нуклеинового обменов, а также поддержание гемоглобина эритроцитов в восстановленном состоянии — неотъемлемые функции глутатионовой АОС. Последняя может принимать участие и в поддержании оптимального состояния биологических мембран, в реализации механизмов программируемой клеточной гибели и, что немаловажно, в процессах детоксикации и аптиоксидантной защите [58]. Глутатионредуктазная/глутатионпероксидазная (ГР/ГП) система является важнейшим компонентом антиоксидантной защиты организма (АОЗ) [16], поддерживающим на стационарном уровне интенсивность протекания свободнорадикального окисления (СРО) [16, 20, 103]. Благодаря функционированию ГР/ГП системы в клетках млекопитающих обеспечивается детоксикация гидроперекисей и перекисей, являющихся основным источником гидроксильпого радикала, образующегося в реакции Фентона в присутствии ионов Fe2+ [73, 314].

ГР (КФ 1.6.4.2) - распространенный флавиновый фермент, катализирущий обратимое НАДФН-зависимое восстановление окисленного глутатиона (GSSG) [46]. Биологическая роль ГР заключается в поддержании высокой внутриклеточной концентрации восстановленного глутатиона (GSH) без увеличения его синтеза. В последнее время значительное внимание уделяется созданию специфических ферментных биотест-систем с использованием ГР для оценки целевой биологической активности адаптогенной и антиоксидантной направленности в фармакологически активных веществах [12].

В настоящее время в литературе имеются данные относительно некоторых каталитических свойств фермента из тканей животных [283, 284] и человека [188, 189] в условиях нормы. Однако, особенности функционирования данного фермента при патологии печени остаются не исследованными.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилось исследование каталитических свойств и регуляции активности ГР из печени крыс в норме, при экспериментальном токсическом гепатите (ЭТГ) и введении веществ - протекторов: тиоктовой кислоты (ТК) и GSH, при патологии.

В связи с поставленной целью решались следующие задачи: ' 1. Определение активности и субклеточной локализации ГР из печени крыс в норме, при развитии токсического гепатита и действии ТК и GSII;

2. Получение гомогенных ферментных препаратов ГР из печени контрольных и подвергнутых токсическому гепатиту животных, а также крыс, которым при патологии вводили вещества-протекторы;

3. Сравнительная характеристика кинетических параметров каталитического действия ГР из печени крыс в норме, в условиях развития патологического процесса, вызванного введением СС14, и действия веществ, обладающих протекторными свойствами при патологии;

4. Исследование регуляции • активности фермента из печени крыс в норме, при развитии токсического гепатита и введении веществ — протекторов под действием метаболитов цикла Кребса;

5. Изучение участия интермедиатов пентозофосфатного пути (ПФП) в регуляции активности ГР из печени крыс в норме, при развитии токсического гепатита и введении ТК и GSH при патологии;

6. Изучение участия ионов металлов и нуклеотидфосфатов в регуляции активности фермента из печени крыс в норме, при развитии токсического гепатита и введении ТК и GSH;

7.Изучение количественной экспрессии гена ГР в печени крыс в норме, при токсическом гепатите и действии гепатопротекторов при патологии.

Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование особенностей регуляции активности ГР в условиях развития оксидативного стресса при ЭТГ у крыс. Разработаны способы очистки и получены гомогенные препараты ГР из печени контрольных и подвергнутых токсическому гепатиту крыс, а также животных, которым при развитии патологии вводили вещества-протекторы. Выявлены особенности экспрессии фермента и дана сравнительная характеристика его каталитических и регуляторных свойств в норме, патологическом состоянии и при введении тиоктовой кислоты и восстановленного глутатиона при токсическом поражении печени. Впервые установлено, что введение протекторов сопровождается изменением активности и уровня экспрессии фермента, возрастающих при токсическом гепатите, в сторону значений в норме. Полученные данные представляют собой интерес с точки зрения регуляции образования АФК за счет изменений активности ГР, взаимосвязанных с модификацией экспрессии, а также кинетических и регуляторных свойств фермента под действием ионов металлов, интермедиатов цикла Кребса, пентозофосфатного пути, нуклеотидфосфатов. Проведенные исследования способствуют расширению и углублению фундаментальных представлений о механизмах регуляции образования АФК с помощью одного из ключевых ферментов антиоксидантной системы в условиях развития токсического гепатита и действия протекторов.

Практическая значимость.

Разработанные способы очистки ГР могут применяться для получения ферментных препаратов в производственных и лабораторных условиях. Специфические ферментные биотест-системы in vitro, основанные на использовании ГР, могут применяться как в медицине, так и в фармации [12, 76]. Результаты исследования регуляции активности глутатионзависимых ферментов, к числу которых относится ГР, могут использоваться для контроля за состоянием антирадикальной защиты, дифференциальной диагностики, объективизации контроля эффективности терапии, прогнозирования течения некоторых заболеваний [12].

Материалы работы используются в учебном процессе на биолого-почвенном факультете Воронежского государственного университета при чтении курсов «Биохимия человека», «Свободнорадикальные процессы»,

Медицинская биохимия», а также спецкурсов по аналитической биохимии и энзимологии. Кроме того, материалы работы используются при проведении практикумов, выполнении курсовых и дипломных работ студентами Воронежского госуниверситета.

Апробация работы. Основные результаты, полученные при выполнении диссертационной работы, представлены в межрегиональном сборнике научных работ «Организация и регуляция физиолого-биохимических процессов» (Воронеж, 2006), на научно-практической конференции «Новая технологическая платформа биомедицинских исследований (биология, здравоохранение, фармация)» Ростов-на-Дону, 2006), на 20-м съезде Физиологического общества им. И.П. Павлова при РАН (Москва, 2007), на 3-ей Всероссийской научно-методической конференции «Пути и формы совершенствования фармацевтического образования. Создание новых физиологически активных веществ» (Воронеж, 2007), на международной научной конференции, посвященной 100-летию со дня рождения профессора Е.В. Сапожниковой (Саранск, 2008), в материалах Всероссийской научной конференции «Диагностика, терапия, профилактика социально значимых заболевай человека» Российской академии естествознания (Москва, 2008), на Международной студенческой биологической конференции, посвященной 90-летию Ереванского государственного университета и 75-летию факультета биологии (Ереван, 2009), на Всероссийской научно-практической конференции студентов и молодых учёных «Актуальные вопросы медицинской науки», (Ярославль, 2009), на Всероссийской научной конференции учащихся, студентов и молодых ученых "Научное творчество XXI века", (Красноноярск, 2009), на Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология. Биомедицинская инженерия и технология современных социальных практик», (Курск, 2009), на II Всероссийском с международным участием конгрессе студентов и аспирантов-биологов "Симбиоз, Россия - 2009", (Пермь, 2009), на 13-ой Международной Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология — наука XXI века» (Пущино, 2009), на Международной научно-практической конференции «Современные проблемы гуманитарных и естественных наук» (Москва, 2009), на Российской научно-практической конференции «Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии» (Челябинск, 2009), а также на ежегодной научной отчетной конференции преподавателей и сотрудников Воронежского госуниверситета (Воронеж, 2009).

Публикации. Основные результаты диссертационной работы.изложены в 18 публикациях - в 5 статьях и 13 тезисах.

На защиту выносятся следующие положения:

1. В условиях интенсификации СРО при ЭТГ происходит увеличение активности и уровня экспрессии ГР в печени крыс, которые снижаются при введении животным ТК и GSH при патологии. При этом субклеточная локализация, молекулярная масса, рН-оптимум и электрофоретическая подвижность фермента не изменяются.

2. С использованием гомогенных ферментных препаратов выявлена модификация некоторых кинетических и физико-химических параметров каталитического действия ГР: Км, EdK.,, температурного оптимума, термостабильности. Введение гепатопротекторов приводит к изменению значений исследованных параметров в сторону нормальных величин.

3. При ЭТГ происходят изменения регуляции активности ГР интермедиатами пентозофосфатного пути и цикла Кребса, нуклеотидфосфатами, ионами некоторых металлов. Ряд модификаций регуляторных свойств ГР, характерных для фермента из пораженной гепатотоксином печени, такие как уменьшение чувствительности к ингибирующему действию изоцитрата, ионов Fe2+ и Fe3+, усиление активирующих эффектов цитрата и АМФ, очевидно, могут способствовать увеличению активности фермента при патологии.

4. С учётом полученных данных по исследованию функционирования ГР в печени крысы при токсическом гепатите и действии гепатопротекторов предложена гипотетическая схема, отражающая регуляцию активности исследуемого фермента, принимающего участие в контроле интенсивности СРО в патологическом состоянии.

Структура и объем работы. Диссертация представлена на 222 страницах текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения полученных результатов (6 глав), заключения, выводов, списка литературы (343 источника) и приложения. Иллюстративный материал включает 59 рисуноков и 9 таблиц. В приложении содержится 26 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Агарков, Александр Алексеевич

ВЫВОДЫ

1. Удельная активность ГР в печени крыс, возрастающая более чем в 2,0 раза при ЭТГ, снижается при введении животным ТК и GSH в 1,5 и 1,4 раза соответственно.

2. С использованием гомогенных ферментных препаратов выявлено, что для ГР из печени контрольных, подвергнутых токсическому гепатиту крыс, а также животных, которым вводили гепатопротекторы при патологии, характерны одинаковые значения электрофоретической подвижности (0,23±0,01), молекулярной массы (104±5,2 кДа), рН-оптимума (7,42±0,31), а также гомодимерная субъединичная структура.

3. Значение температурного оптимума ГР в норме составило 35°С, в то время как фермент из печени крыс, подвергнутых ЭТГ, и животных, которым вводили ТК и GSH на фоне патологии, характеризуется температурным оптимумом, составляющим 40°С.

4. Значение Еакт для фермента из печени интактных животных составляет 26,7 кДж/моль, из пораженной гепатотоксином печени - 6,2 кДж/моль. Введении ТК и GSH на фоне патологии сопровождалось изменением данного параметра в сторону нормы и характеризовалось значениями 11,1 кДж/моль и 9,9 кДж/моль соответственно.

5. Обнаружено, что значения Км по субстрату и коферменту возрастают для фермента, выделенного из печени крыс с токсическим гепатитом в 3 и 8 раз соответственно по сравнению с контрольной группой животных. Введение гепатопротекторов приводит к изменению значений в сторону нормальных величин.

6. В регуляции активности ГР могут принимать участие ионы ряда

•у j | ^ | | 9+ 3+ 2+ металлов (Mg , Са , Cu~ , Fe , Fe ). Ионы Mg оказывают активирующий эффект на фермент. Ионы Са в норме, при ЭТГ и введении ТК на фоне патологии активируют фермент, а при введении GSH крысам с ЭТГ -ингибируют по бесконкурентному типу (Kj=0,2 мМ). Действие ионов Fe2+ на

ГР из печени крыс в норме и при токсическом гепатите характеризуется неконкурентным типом ингибирования, в то время как при введении ТК и GSH — смешанным. Смешанный тип ингибирования ионами Fe характерен для фермента из печени всех исследованных групп животных.

7. Выявлены особенности регуляции активности фермента в условиях нормы, при токсическом гепатите и при введении ТК и GSH под действием ряда метаболитов ЦТК: изоцитрата, цитрата, оксалоацетата.

8. Показано участие АТФ, АМФ, АДФ, НАДН в регуляции ГР-активности в норме, при токсическом гепатите и при введении веществ-протекторов. Установлено, что в условиях развития ЭТГ и введения протекторов происходит изменение чувствительности фермента к действию данных метаболитов.

9. Обнаружены различия в регуляции активности фермента интермедиатами пентозофосфатного пути: глюкозо-6-фосфатом, рибозо-5-фосфатом, в норме, при токсическом гепатите и введении веществ-протекторов на фоне развития патологии.

10. Установлено, что при ЭТГ происходит увеличение уровня транскриптов с гена ГР в печени крыс в 3 раза относительно нормы. При действии протекторов при патологии имеет место уменьшение экспрессии гена ГР. Введение ТК приводит к снижению экспрессии гена ГР более чем в 2 раза, при введении GSH уровень экспрессии снижается на 98%, по сравнению со значением при ЭТГ.

11. На основании результатов исследования функционирования ГР предложена гипотетическая схема, отражающая особенности регуляции активности фермента при патологии и действии веществ-протекторов.

158

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Согласно полученным результатам при токсическом гепатите происходит увеличение удельной активности ГР печени крыс более чем в 2,0 раза по сравнению с контрольной группой животных. Известно, что возрастание интенсивности свободнорадикального окисления при патологии может приводить к изменению структуры и каталитических свойств многих ферментов [53] в том числе, вероятно, и ГР. Введение ТК и GSH животным с патологией способствует снижению удельной активности ГР в 1,5 и в 1,4 раза соответственно по сравнению с группой животных с токсическим гепатитом, приближая ее к уровню активности фермента в норме.

Наряду с этим, установлено, что при ЭТГ происходит увеличение уровня транскриптов с гена ГР в печени крыс в 3 раза относительно нормы. Введение ТК и GSH животным с ЭТГ приводит к уменьшению экспрессии гена ГР более чем в 2,0 раза по сравнению с уровнем при патологии в первом случае и на 98% — во втором, что, очевидно, связано с проявлением антиоксидантного действия использованных гепатопротекторов, проявляющемся в торможении интенсивности свободнорадикальных процессов при ЭТГ и снижении степени индукции гена ГР.

С использованием электрофоретически гомогенных ферментных препаратов ГР выявлено, что ряд физико-химических свойств фермента при патологии и действии протекторов пе меняется: рН-оптимум, молекулярная масса, субъединичная структура, электрофоретическая подвижность, субклеточная локализация. Полученные данные позволяют предполагать, что изменения активности фермента, выделенного из печени крыс при патологии, а также при введении веществ-протекторов животным с токсическим гепатитом не сопряжены с изменением распределения активности ГР между цитоплазматической и митохондриальной фракциями клетки и реализацией ассоциативно-диссоциативного механизма регуляции активности, связанного с изменением субъединичного состава. Однако, при экспериментальном токсическом гепатите выявлена модификация как некоторых кинетических параметров каталитического действия, так и регуляторных свойств фермента. При токсическом гепатите наблюдалось снижение сродства фермента и к субстрату, и к коферменту в 3 и 8 раз соответственно по сравнению с ферментом, выделенным из печени интактных крыс. Введение протекторов на фоне патологии сопровождалось изменением значений констант Михаэлиса-Ментен в сторону контрольных значений. Несмотря на тот факт, что наряду с увеличением активности фермента при патологии по сравнению с нормой наблюдается снижение сродства фермента к субстрату, отношение Vmax/Км, отражающее эффективность функционирования фермента, возрастает. Данный параметр незначительно снижается при введении ТК и GSH. Необходимо отметить, что ингибирование субстратом было характерно только для фермента из печени крыс с токсическим гепатитом и при введении протекторов на фоне патологии. Ингибирующий эффект НАДФН выявлен для ГР из печени крыс всех исследованных групп.

Установлены различия в температурных оптимумах действия ГР: оптимальная температура действия фермента сдвигается в сторону более высоких значений при токсическом гепатите и введении веществ-протекторов крысам с патологией по сравнению с интактными животными. Исследование воздействия высоких температур на ГР, выделенную из печени животных с токсическим гепатитом показывает ее меньшую термоустойчивость по сравнению с ферментом из печени контрольной группы крыс. Вероятно, это может быть связано со структурными изменениями молекулы фермента, происходящими вследствие ишемического повреждения ткани печени, вызванного экспериментальным токсическим гепатитом. Однако, введение протекторов способствовало увеличению устойчивости к действию высоких температур по сравнению с ГР, выделенной из печени крыс с экспериментальным токсическим гепатитом. Кроме того, величина энергии активации ГР существенно снижается при патологии, что может иметь значение для повышения активности фермента. Введение веществ-протекторов, по • всей видимости, способствует стабилизации структуры ГР, что отражается на значениях Еакт, а также термоустойчивости возрастающих в этих условиях. Изменения регуляции активности ГР, наблюдаемые в условиях интенсификации СРО, по отношению к интермедиатам пентозофосфатного пути и цикла Кребса, нуклеотидфосфатам, ионам некоторых металлов свидетельствует о модификации ряда регуляторных свойств фермента при патологии печени. Можно предположить, что изменение регуляции активности ГР' может рассматриваться в рамках реализации физико-химического механизма адаптационной реакции к повышению концентрации АФК, сопровождающем развитие патологии. Введение веществ, обладающих протекторными свойствами, животным с патологией ведет к изменению многих исследованных параметров в сторону нормы, что может являться, следствием снижения данными соединениями уровня свободнорадикальных процессов, реализующегося как за счет их прямого антиоксидантного действия, так и участия в стимулировании компонентов антиоксидантных систем организма. Изменение активности ГР и ряда свойств фермента, возможно,- происходит за счет перестроек в структуре молекулы фермента.

На основании результатов проведенных исследований предложена гипотетическая схема (рис. 59), отражающая регуляцию активности ГР , обеспечивающей контроль интенсивности СРО при патологии и действии веществ-протекторов. Согласно данной схеме, представленной на рис. четыреххлористый углерод, проникая в печень, инициирует развитие свободнорадикальных процессов, приводящих к повреждению клеточных структур. Интенсификация СРО приводит к нарушению функционального состояния клеточных мембран и увеличению их проницаемости и как следствие к повреждению гепатоцитов печени [47, 160]. Вместе с тем, при токсическом гепатите происходит мобилизация АОС организма, в которой важное место занимает ГР/ГП система. Очевидно, активация ГР некоторыми метаболитами может способствовать повышению его активности при патологии.

Известно, что при развитии оксидативного стресса происходит изменение концентраций метаболитов, участвующих в реализации функционирования центральных метаболических процессов в клетке за счет снижения интенсивности их протекания [260]. В данных условиях, изменение регуляторных свойств фермента может быть следствием модификации его микроокружения. Так, нами была выявлена большая степень чувствительности ГР к ингибирующему действию рибозо-5-фосфата в условиях нормы чем при патологии. При этом в норме константа ингибирования составила 1,1 мМ. Введение веществ-протекторов сопровождалось изменением значений константы ингибирования в сторону нормальных величин. Обнаружено более интенсивное ингибирование фермента изоцитратом в норме, чем при патологии. В первом случае константа ингибирования составила 0,25 мМ, тип ингибирования -конкурентный, во втором - ингибирование имело смешанный характер, Ki — 1,20 мМ. При введении ТК на фоне патологии данный метаболит ингибировал ГР-активность во всем диапазоне исследованных концентраций, в то время как при введении GSH животным с токсическим гепатитом изоцитрат не оказывал значительного влияния. По-видимому, особенности регуляции активности ГР субстратом ИДГ - реакции могли бы способствовать повышению активности фермента в патологическом состоянии. Установлено, что цитрат при интоксикации крыс СС14 и при введении ТК на фоне патологии активирует ГР во всем диапазоне исследованных концентраций, что, вероятно, может иметь регуляторное значение в условиях повышения содержания цитрата в клетке при развитии оксидативного стресса, сопровождающего развитие токсического гепатита [180]. Причем, по отношению к ГР из печени интактных животных и крыс, которым вводили GSH на фоне патологии, цитрат выступает в качестве ингибитора фермента. При концентрациях оксалоацетата более 0,45 мМ наблюдается активация ГР из печени крыс контрольной группы и при введении GSH на фоне патологии более чем на 20%, в то время как для фермена из пораженной гепатотоксином печени и при введении ТК животным с токсическим гепатитом характерно ингибирование ферментативной активности. Очевидно, особенности регуляции активности фермента при развитии патологии могут иметь определенное значение для сопряжения его функционирования с другими метаболическими путями.

Выявлено, что в условиях нормы АТФ активирует фермент во всем диапазоне исследованных концентраций. Однако, при экспериментальном токсическом гепатите и при введении ТК и GSH животным с патологически измененной печенью данный метаболит оказывал ингибирующее действие. Исследование влияния АДФ на скорость протекания ферментативной реакции выявило активацию ГР как в условиях нормы и токсического гепатита, так и при введении ТК и GSH на фоне патологического процесса. Однако, наибольший активирующий эффект характерен для фермента из печени крыс контрольной группы. Напротив, АМФ оказывает больший стимулирующий эффект на ГР-активность в условиях патологии по сравнению с нормой. При введении протекторов животным с токсическим гепатитом данный интермедиат практически не оказывал влияния. НАДН в условиях нормы и при введении ТК и GSH на фоне токсического гепатита оказывает ингибирующее действие. Однако, данный метаболит активирует фермент из печени крыс, подвергнутых экспериментальному токсическому гепатиту в концентрациях до 0,42 мМ более чем на 40%, хотя дальнейшее увеличение концентрации интермедиата также вызывает ингибирование ГР-активности по бесконкурентному типу.

Согласно полученным данным ионы кальция оказывают более выраженное активирующее влияние на фермент при патологии, чем в норме и при введении ТК животным с токсическим гепатитом. Однако, при введении GSH выявлен ингибирующий эффект. Ионы железа ингибируют ГР-активность во всех условиях эксперимента. Обнаружено, что ионы Си2+ снижают активность ГР, причем большее торможение ферментативной активности наблюдается для фермента, выделенного из печени контрольных крыс.

Таким образом, для ГР, выделенной из печени животных в норме, при токсическом гепатите и введении ТК и GSH при патологии характерно существование разнообразных механизмов регуляции активности под действием ряда физико-химических факторов и интермедиатов клеточного обмена, способных обеспечивать изменение ферментативной активности при токсическом гепатите и, вероятно, играть роль в реализации адаптивных процессов на клеточном уровне в условиях изменения уровня генерирования АФК. Введение протекторов может способствовать нормализации процессов, протекающих в патологически измененной печени, что также может отражаться на каталитических свойствах и регуляции активности ГР. Полученные данные позволяют предполагать, что изменение интенсивности протекания ГР-реакции, при патологии и введении веществ-протекторов может влиять на интенсивность СРО путём регуляции уровня восстановленного глутатиона за счёт модификации параметров каталитического действия и механизмов метаболитной регуляции активности и регуляции экспрессии данного фермента.

Июцнтрят

Оксйлогщетят

НАДФ-ИД1>

6- ф о с фогл мкон ят

НАДФ

2-о кс о глут я р Я1.

НАДФ

НАДФ!

НАДФ

НАДФ

Рнбоэо-5-фосф;

Снижение эффекта

НАДФ

НАДН

О-фос фогл!т: озолактон

ГбФДГ СНк ► I л ю козо-6-фосфаг юцитряп^ НАДФН' и vt-ген с и фнкяци я СРО

Усиление генерации АФК

Нарушение метаболически* процессов п клетке

АТФ

Гибель клетки

ОН + ОН + Fe*-*-. f Реакция Фел^оля )

НгО: + Кс*

Условные обозначения: ( П )- активирующий (ингибирующий) эффект в норме; О (О ) - активирующий (ингибирующий) эффект при экспериментальном токсическом гепатите-О ( ф ) - активирующий (ингибирующнй) эффект при введении тиоктовой кислоты при токсическом гепатите; активирующий (ингибирующий) эффект при введении «остановленного глутатиона при патологии.

Рис. 59. Гипотетическая схема, отражающая регуляцию активности глутатионредуктазы при патологии и действии веществ - протекторов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Агарков, Александр Алексеевич, 2009 год

1. Абдулаев Н.Х. Печень при интоксикации гепатотропными ядами / Н.Х.Абдулаев, Х.Я.Каримов. - Ташкент: Медицина УзСССР, 1989. - 25 с.

2. Активированные кислородные метаболиты в монооксидазных реакциях / В.В. Ляхович и др. // Бюллетень СО РАМН. 2005. - Т. 4, № 118. -С. 7-12.

3. Александров В .Я. Клетки, макромолекулы и температура / В.Я. Александров. Л.: Наука, 1975.-293 с.

4. Александров В.Я. Функциональные изменения конформации белков и денатурация / В.Я. Александров // Реактивность клеток и белки. Л., 1985.-С. 127-139.

5. Антиоксидантные системы в тканях мышей линии SAM (Senescence Accelerated Mice), характеризующейся ускоренным процессом старения / А.А. Болдырев и др. // Биохимия. 2001.-Т.66, №10. - С.1430-1437.

6. Арчаков А.И. Окисление чужеродных соединений и проблемы токсикологии /А.И.Арчаков, И.И.Карузина // Вест.АМН СССР. 1988. -№.1.-С. 14-24.

7. Бактерицидная активность и хемилюминесценция мононуклеарных фагоцитов животных (Обзор) / В. С. Гуткин и др. // Сельскохозяйственная биология. 1986, № 6. - С.78-86.

8. Биленко М.В. Ишемическое и реперфузионное повреждение органов /М.В. Биленко. М.: Медицина, 1989. - 368 с.

9. Ю.Бойко Е.Р. Показатели рибофлаиновой обеспеченности организма и активность глутатионоредуктазы у жителей европейского Севера России / Е.Р. Бойко, О. Нильсен, С.Г.Бойко // Физиология человека. -2004. Т.30, №2. - С. 122 - 128.

10. П.Болдырев А.А. Окислительный стресс и мозг / А.А. Болдырев // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 7, № 4. - С. 21-28.

11. Бустаманте Д. Метаболизм а-липоевой кислоты в печени при различных формах патологии / Д. Бустаманте, Д. Лодж, Л. Маркоччи // Международный медицинский журнал. 2001. — № 2. - С. 133-142.

12. Н.Владимиров Ю.А. Биологические мембраны и незапрограммированная смерть клетки / Ю.А. Владимиров // Соросовский Образовательный Журнал. 2000.-Т.6, №9,- С.2-9.

13. Владимиров Ю.А. Кальциевые насосы живой клетки / Ю.А. Владимиров // Соросовский Образовательный журнал. 1998. - №3.-С.20-27.

14. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 252с.

15. П.Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах / Ю.А. Владимиров // Соросовский Образовательный Журнал. 2000. -Т.6, №12. - С.13-19.

16. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в живых системах / Ю.А. Владимиров, О.А. Азизова, А.И Деев // Итоги науки и техники. Серия Биофизика. ВИНИТИ, 1991. - Т. 29. - С. 1-252.

17. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран / Ю.А. Владимиров // Биофизика. 1987.-Т.32, №5.-С.830-844.

18. Влияние витамина D3 и экдистероиа на свободно радикальное окисления липидов / А.И. Кузьменко и др. // Биохимия. - 1997. - Т.62, вып.6. -С.712-715.,

19. Влияние гранулоцит-колониестимулирующего фактора "Granocyte" на генерацию активных форм кислорода нейтрофилами in vitro / Е.И. Коваленко и др. // Биополимеры и клетка. 1998. - Т. 14, №6. - С.544-548.

20. Влияние мелатонина на оксидативный статус, содержание цитрата и активность аконитатгидратазы в печени крыс при токсическом гепатите / А.Н. Пашков и др. II Проблемы эндокринологии. 2005. -Т. 51, №6.-С. 41-43.

21. Гродзинский A.M. Краткий справочник по физиологии растений / A.M. Гродзинский, Д.М. Гродзинский. Киев: Наукова думка, 1973. - 273 с.

22. Губский Ю.И. Коррекция химических поражений печени / Ю.И. Губский. Киев: Здоровье, 1989. - 156с.

23. Девяткина Т.А. Особенности процессов перекисного окисления липидов в различных тканях при остром стрессе и его коррекция пирацетамом и церебролизином / Т.А. Девяткина, Е.М. Важничая, Р.В. Луценко // Биохимия. 2000. - Т.4. - С. 38-41.

24. Деримедведь JI. В. Антиоксиданты в кардиологии: характеристика наиболее применяемых средств / Л.В. Деримедведь // Провизор. 1998. -№ 13. - С.64-67.

25. Делянин Н.В. Механизмы антиоксидантной защиты организма при изменении режима кислородного обеспечения / Н.В. Делянин, A.M. Герасимов // Материалы международной научной конференции. -Гродно, 1993.-С. 18-19.

26. Детерман Г. Гель-хроматография / Г. Детерман. -М.: Мир, 1970. 252 с.

27. Диксон М. Ферменты: в 3-х т. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982. -Т. 2. - 515 с.

28. Диксон М. Ферменты: в 3-х т. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982. -Т. 3. - 605 с.

29. Донцов В.И. Галавит — новый иммуномодулятор с биоактивирующим и регенерирующим эффектом / В.И. Донцов, А. А. Подколзин // Ежегодник национального геронтологического центра. 2001. - Вып. 4.-С. 70-80.

30. Досон Р. Справочник биохимика / Р. Досон, Д. Элиот. М: Мир, 1991. -462 с.

31. Дубинина Е.Е. Биологическая роль супероксидного анионрадикала и супероксиддисмутазы в тканях организма / Е.Е. Дубинина // Успехи современной биологии. 1989. - Т. 108, №1. — С.3-12.

32. Дэвис Г. Электрофорез / Г. Дэвис. М.: Мир. - 1970. - 56 с.

33. Еремин А.Н. Влияние полидисульфида галловой кислоты на активность и стабильность каталазы в разных средах / А.Н. Еремин, Ю.П. Лосев, Д.И. Метелица // Биохимия. 2000. - Т.65, №2.-С.298-308.

34. Журавлев А. И. Развитие идей Б. Н. Тарусова о роли цепных процессов в биологии / А. И. Журавлев // Биоантиокислители в регуляцииметаболизма в норме и при патологии: Труды МОИП. М., 1982. -T.LVII. - С.3-36.

35. Зайцев В.Г. Методологичесикие аспекты исследований свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма / В.Г. Зайцев, В.И. Закревский // Вестник Волгоградской медицинской академии. 1998. - Вып.4. — С.49-53

36. Иванов М. Инактивация глутатионредуктазы хинонами и нитрозокарбомидами / М. Иванов, И. Липчук // Укр. биохимия животных 1993. -№56. - С.97-100.

37. Интенсивность свободнорадикальных процессов и регуляция активности цитоплазматической N AD Р и з о цитр атд е гидр о ге н аз ы в кардиомиоцитах крысы в норме и при ишемии / Л.В. Медведева и др. // Биохимия. - 2002. - Т. 67, № 6. - С. 838-849.

38. Каган В.Е. Проблема анализа эндогенных продуктов пероксидного окисления липидов / В.Е. Каган, О.Н. Орлов, JI.JI. Прилипко // Итоги науки и техники. Сер. Биофизика. 1986. - Т. 18, №4. - С. 136.

39. Карпищенко А.С. Медицинская технология и лабораторная диагностика: Справочник в 2 т. Т. 1. Медицинские и лабораторные технологии / А.С. Карпищенкою СПб: Интермедика, 1999. - 650 с.

40. Карташова О .Я. Моделирование патологических процессов в печени /

41. Я. Карташова; под ред. А.Ф. Блюгер. Рига: Звайгзне, 1975. - 180 с.

42. Кахговер Н. Б. Глутатион-Б-трансферазы ферменты детоксикации / Н. Б. Кахговер, Ю. В. Хмелевский // Укр. биохим. журн. - 1983. - Т. 55 ,№1. С. 86-92

43. Кения М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе / М.В. Кения, А.И. Лукаш, Е.П. Гуськов // Успехи современной биологии. 1993. - Т. 113, вып. 4. - С. 456-469.

44. Козачок Н.Н. Применение липоевой кислоты (берлитиона) в клинической практике / Н. Н. Козачок, М. Н. Селюк. (http://m-l.com.ua/issues.php?aid=124).

45. Козлов Ю.П. Свободнорадикальное окисление липидов в биомембранах в норме и патологии / Ю.П. Козлов // Биоантиокислители. М., 1975. - С. 5-14.

46. Козлов Ю.П. Свободные радикалы и их роль в нормальных и патологических процессах / Ю.П. Козлов. М.: Наука, 1973. - 174 с.

47. Колесниченко Л.С. Изменение активности ферментов метаболизма глутатиона при иммобилизованном стрессе и их возможное значение / Л.С. Колесниченко, Н.С. Манторова, Л.А. Шапирова // Патол. физиология и эксперим. терапия. 1990. - №4. — С. 9-13.

48. Кондрашова М.Н. Отрицательные аэроионы и активные формы кислорода / М.Н. Кондрашова // Биохимия. 1999. - Т. 64, №3. - С. 430432.

49. Косенко Е.А. Активность антиокислительных ферментов в печени и мозге снижается в ранние сроки диабета, и это снижение зависит от функционирования NMDA-рецепторов / Е.А. Косенко, А.Ю. Каминский, Ю.Г. Каминский. (http://www.medi.ru/).

50. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии / Г.А. Кочетов. М.: Высш. шк., 1980. - 272 с.

51. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский Образовательный Журнал. 1999. -Т.38, №1. - С.2-7.

52. Кулинский В.И. Биологическая роль глутатиона / В.И. Кулинский, Л.С. Колесниченко // Успехи совр. биол. 1990. - Т.110, №1(4). - С.20-33.

53. Кулинский В. И. Структура, свойства, биологическая регуляция глутатионпероксидазы / В.И. Кулинский, JI. С. Колесниченко // Успехи совр. биол.-1993. Т. 113, №1. - С. 107-122.

54. Курганов Б.И. Анализ колоколообразных рн-зависимостей скоростей ферментативных реакций / Б.И. Курганов, Е.В. Петушкова // Биохимия. 1992. - Т. 57,№3. - С. 348-361.

55. Кухтина Е.Н. Влияние железа, цинка, меди на процессы перекисного окисления липидов / Е.Н. Кухтина, Н.Н. Глущенко // Биохимия. 1996. -Т. 61, №6.-С. 993-997.

56. Панкин В.З. Свободнорадикальные процессы в норме и при патологических состояниях : пособие для врачей / В.З. Ланкин, А.К.Тихазе, Ю.Н. Беленков. 2-е изд. -М.: Мир, 2001. - 78 с.

57. Левенкова М.В. Свойства и регуляция активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в условиях оксидативного стресса при токсическом поражении печени крыс: дис. . к-та биол. наук / М.В. Левенкова. Воронеж, 2006. - 180 с.

58. Ллойд Э. Справочник по прикладной статистике / Э. Ллойд, У. Ледерман. М.: Финансы и статистика, 1990. - С. 493-513.

59. Лукьянова Л. Д. Кислородзависимые процессы в клетке и ее функциональное состояние / Л.Д. Лукьянова, Б.С. Балмуханов, А.Т. Уголев. -М.: Наука, 1982. 301 с.

60. Любицкий О.Б. Определение антиоксидантной активности биологических жидкостей хемилюминесцентным методом: Автореф. дис. . канд. биол. наук / О.Б. Любицкий Воронеж, 1996. - 25 с.

61. Мауэр Г. Диск-электрофорез / Г. Мауэр. М.: Мир, 1971. - 222 с.

62. Метаболизм а-липосвой кислоты в печени при различных формах патологии/ Д. Бустаманте и др. // Международный медицинский журнал.-2001.-№2-С. 133 -142.

63. Метаболические предикторы гепатоксического действия тетрахлорметана у крыс / Г.И. Блажиевская и др. // Токсикол. вести. -1998. -№ 1.-С.21 -22.

64. Мешкова Н.П. Практикум по биохимии / Н.П. Мешкова, С.Е. Северин. М.: Мир, 1979.-430 с.

65. H2O2 ингибирует рост цианобактерий / В.Д. Самуйлов и др. // Биохимия. 1999. - Т.64, №1. - С.60-67.

66. Об участии свободных активных форм кислорода в ферментативном перекисном окислении липидов в биомембранах / В. Е. Каган и др. // Биофизика. 1979. - Т.44, №3. - С.482-489.

67. Пат. 94026117 РФ, МКИ G09B23/28. Способ создания модели гепатита и цирроза печени млекопитающих / Я.В. Кауров, Г.А. Бояринов, В.П. Смирнов. 1996.

68. Пат. 2194077 Российская Федерация. Способ выявления веществ с потенциальной иммуномодулирующей активностью in vitro с применением НАДФН-оксидазной тест-системы. / В.А. Быков, М.Ф. Минеева, Н.Б. Попова. — 2002.

69. Передача клеточного сигнала и модуляция свободно радикального окисления новым пептидомиметиком у глутамил - гистамином / М.А. Бабижаев и др. // Биохимия. - 1999. - Т64, №5. - С.612-627.

70. Перекисное окисление и стресс / В.А. Барабой и др.. СПб.: Наука, 1992.- 148 с.

71. Пострецепторное образование активных форм кислорода в клетках, не являющихся профессиональными фагоцитами / И. А. Гамалей и др. // Цитология. 1999. - Т. 41, № 5. - С.394-399.

72. Прайер У. Свободные радикалы в биологии: в 2-х т. / У. Прайер. М.: Мир, 1979.-Т. 1.-311 с.

73. Протас А.Ф. Активность антиоксидантных ферментов и уровень свободнорадикальных процессов в ядрах клеток нейронов при низких дозах облучения / А.Ф. Протас // Биополимеры и клетка. 1996. -Т.12,№ 3 — С.47-53.

74. Прохорова М.И. Методы биохимических исследований (липидный и энергетический обмен) / М.И. Прохорова. JL: Ленинградский университет. - 1982. - 272 с.

75. Роль глутатионзависимых пероксидаз в регуляции утилизации липопероксидов в злокачественных опухолях / Э.Г. Горожанская и др. //Биохимия.-2001.-Т.66, вып. 2.-С. 273-278.

76. Роль процессов свободнорадикалыюго окисления в патогенезе инфекционных болезней / А.П. Шепелев и др. // Вопросы медицинской химии. 2000. - № 2. - С. 156-167.

77. Саванина Я.В. Накопление тиоловых соединений и изменения активности глутатионредуктазы и глутатионпероксидазы в клеткахцианобактерии Anacystis nidulsns / Я.В.Саванина, А.Ф. Лебедева, Е.Л. Барский // Вестник МГУ. 2004. - Сер. 16, № 2. - С.30-34.

78. Сидорова В.Ф. Регенерация печени у млекопитающих / В.Ф. Сидорова, З.А. Рябинина, Е.М. Лейкина. Л.: Медицина, Ленинградское отд-ние, 1966.-210 с.

79. Система глутатиона в эритроцитах и плазме крови при вирусных гепатитах / В.И. Кулинский и др. // Биомед. химия. 2007. - № 1, Т.53. -С.91-98.

80. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло / В.П. Скулачев // Соросовский Образовательный Журнал. 1996. - №3. - С.4-16.

81. Скулачев В.П. Пероксид водорода сенсор легких и кровеносных сосудов и их роль в антиоксидантной защите организма / В.П. Скулачев//Биохимия. - 2001. - Т. 66, №10. - С. 1425-1429.

82. Скулачев В.П. Снижение внутриклеточной концентрации 02 как особая функция дыхательных систем клетки / В.П. Скулачев // Биохимия. 1994. - Т.59, №12.-С.1910-1912.

83. Старикович Л.С. Исследование эффекта последствия малых доз ионизирующих излучений на активность ферментов антиоксидантной защиты эритрона белых крыс / Л.С. Старикович, Т.В.Выговская, Г.Я. Клевета // Радиационная Биология. 2004. - № 7. - С. 103-105.

84. Уайт А. Основы биохимии: в 2 т. / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит ; перевод с англ. -М.: Мир, 1981. Т. 1. -468.

85. Федорова Н.Ю. Состояние системы глутатионпероксидазы-глутатионредуктазы в стимулированном к регенерации органе и еероль в клеточной пролиферации: дис. . канд. биол. наук / Н.Ю. Федорова. Воронеж, 1999. - 186 с.

86. Фильченков А.А. Апоптоз и рак / А.А.Фильченков, Р.С.Стоика. Киев: Морион, 1999.- 184 с.

87. Хайлова JI.C. Липоевая кислота / Л.С. Хайлова, A.M. Юркевич, С.Е. Северин. (http://www.xumuk.ru/encyklopedia/2337.html).

88. Храпова Н.Г. Перекисное окисление липидов и системы, регулирующие его интенсивность / Н.Г. Храпова// Биохимия липидов и их роль в обмене веществ, 1981. С.147-155.

89. Чернов Н.Н. Латентная форма глутатионредуктазы в печени крыс // Биохимия. 1986. - Т. 51, вып. 5. - С. 762-769.

90. Чеснокова Н.П. Молекулярно-клеточные механизмы инактивации свободных радикалов в биологических системах / Н.П. Чеснокова, Е.В. Понукалина, М.Н. Бизенкова // Успехи современного естествознания. 2006. - № 7. - С. 29-36.

91. Шаронов Б.П. Окисление церулоплазмина гипохлоритом, потеря голубой окраски и сохранение оксидазной активности / Б. П. Шаронов, Н. Ю. Говорова // Биохимия. 1990. - Т.55, №6. - С.1145-1148.

92. Шишкина Л.Н. Связь повреждения мембраны с процессом перекисного окисления липидов при слабых воздействиях / Л.Н. Шишкина, М.А. Смотряева // Биохимия. 2000. - Т.45, №5. - С.844-852.

93. Щербак А.В. Метаболическая терапия: доказуемые перспективы, оправдавшиеся надежды / А. В. Щербак // Здоровье Украины. 2002. -№ 10.-С. 37-59.

94. A comparison of glutathione reductase and glutathione peroxidase activities in patients with rheumatoid arthritis and healthy adults / J. Braven et al. //British J. of Rheumatology. 1989. - V.8. - P. 212-215.

95. A critical revaluation of some assay methods for superoxide dismutase activity / S. Goldstein et al. // Free Radic. Biol. And Med. 1988. - V.4, №5. - P.295-303.

96. Adibhatla R.M. Effects of citicoline on phospholipid and glutathione levels in transient cerebral ischemia / M.R. Adibhatla, J.F. Hatcher, RJ. Dempsey // The J. of the American Heart Association. 2001. - V.32. -P.2376-2381.

97. Altering kinetic mechanism and enzyme stability by mutagenesis of the dimer interface of glutathione reductase / A. Bashir et al. // Biochem. J. 1995. -V. 312.-P. 527-533.

98. Analyses of glutathione reductase hypomorphic mice indicate a genetic knockout / K. Lynette et al. // Toxicological Sciences. 2004. -V.82.-P. 367-373.

99. Anderson N. Oxiding and restore semireactions glutathionereductase from E.coli / N.Anderson, G. Nerski // Biochemistry. 1994. - V.35,№23. -P.5727-5732.

100. Anderson N. The structure NADPH-bind motive. Effect is determined by evolution / N.Anderson, G. Nerski // Biochemistry. 1994. - V.33,№54. -P.13888-13895.

101. An insulin sensitizer improves the free radical defense system potential and insulin sensitive in high fructose fed rats / P. Faure et al. // Diabetes. 1999. - V.48, №2. - P.353-357.

102. A study of the kinetic mechanism followed by glutathione reductase from mycelium of Phycomyces blakesleeanus / S. Montero et al. // Biochim Biophys Acta. 1982. - V.3,№ 705. - P. 348-356.

103. A study of the kinetic mechanism followed by glutathione reductase from mycelium of Phycomyces blakesleeanus / S. Montero et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1990. - V. 278. - P. 52-59.

104. Attenuation of hyperoxia-induced growth inhibition in H441 cells by gene transfer of mitochondrially targeted glutathione reductase / J. Donough et al. // Cell Mol. Biol. 2000. - V. 22. - P. 732-738.

105. Balance between oxidative damage and proliferative potential in an experimental rat model of CCI4 induced cirrhosis: protective role of adenosine administration / R. Hernandez-Vunoz et al. // Hepatology. -1997. - V.26, №5. -P.l 100-1110.

106. Balz F. Molecular and biological mechanisms of antioxidant action / F. Balz // The FASEB Journal. 1999. - V. 13. - P. 963-964.

107. Barrett J. Moniezia expansa glutathione reductase: Purification and properties / J. Barrett, M.J. McCallum // The Hague. 1992. - № 7. - P. 183.

108. Berkson В. M. A conservative triple antioxidant approach to the treatment of hepatitis C. Combination of alpha lipoic acid (thioctic acid), silymarin, and selenium: three case histories / В. M. Berkson // Med. Klin. -1999.-V. 94.-P. 84-89.

109. Becker K. Glutathione reductase of Plasmodium falciparum: Structural comparison with the human hosts'enzyme / K. Becker, S. Muller, B. Bergmann // Ann. Trop. Med. and Parasitol. 1996,- V.90, № 4. - P.431.

110. Becker К. Inhibition of human glutathione reductase by S-nitrosoglutathione / K. Becker, M.Gui, R.Schirmer // Biochem. 1995. -V.234, № 2. - P.472-478.

111. Biochemical response in intestine and gills of Carassius auratus gibelio to acute manganese (II) intoxication / S. Paraschiv et al. // Rev. Roum. Chim. 2006.-T.51,№ 12. - P. 1175-1179

112. Bishop G.M. Zinc stimulates the production of toxic reactive oxygen species (ROS) and inhibits glutathione reductase in astrocytes / G.M. Bishop, R. Dringen, S.R. Robinson // Free Radic. Biol. Med. 2007. - V. 42, №8.-P. 1222-1230.

113. Blumenthal S.A. Inhibition of gluconeogenesis in rat liver by lipoic acid. Evidence for more than one site of action / S.A. Blumenthal // Biochem. J. 1984. - V. 219, № 3. p. 773-780.

114. Bohme C.C. Kinetic characterization of glutathione reductase from the malarial parasite Plasmodium falciparum. Comparison with the human enzyme / C.C. Bohme, L. D Arscott., K. Becker // J. Biol. Chem. 2000. -V.275, №48. - P. 37317-37323.

115. Burt A.D. Diagnostic and interpretation of steatosis and steatohepatitis / A.D.Burt, A. Mutton, C.P. Day // Semin. Diagn. Pathol. 1998. -№ 15. -P. 246-258.

116. Carcia-Femandez A.J. Changes in glutathione-redox balance induced by hexachlorocyclohexane and lindane in CHOK1 cells / A.J. Carcia-Fernandez, A.E. Bayoumi, Y. Perez Pertejo // Xenobiotica. 2000. - No.l 1. -C. 240-250.

117. Carlberg I. Purification and characterization of glutathione reductase from calf liver. An improved procedure for affinity chromatography on 2, 5-ADP-Sepharose 4B / I. Carlberg, B. Mannervik // Anal. Biochem. — 1981. — V. 116.-P.531-536.

118. Carlberg I. Purification and characterization of the flavoenzyme glutathione reductase from rat liver / I. Carlberg , B. Mannervik // J. Biol. Chem. 1975. - V. 14,№ 250. - P.5475-5480.

119. Carreau J.P. Biosynthesis of lipoic acid via unsaturated fatty acids / J.P. Carreau // Meth. Enzmol. 1979. - № 62. - P. 152-158.

120. Catalase, superoxide dismutase, and glutathione peroxidase activities in various rat tissues afier carbon tetrachloride intoxication / S. Szymonik-Lesiuk et al. // J. Hepatobiliaru Pancreat. Surg. 2003. - V.10, №4. -P.309-315.

121. Cettns N. Distribution of the multiple forms of glutathione reductase in plant pea leaves / N. Cettns // Planta. 1990. - V. 186, №1. - P.278-284.

122. Characterization of glutathione amide reductase from Chromatium gracile (Identification of a novel thiol peroxidase (Prx/Grx) fueled by glutathione amide redox cycling) / V. Bjorn et al. // The J. of Biol. Chem. -2001. V. 276, № 24. - P. 20890-20897.

123. Characterization of glutathione reductase from Chromatium gracile / V. Bjorn et al. // The J. of Biol. Chem. 2002. - V. 275, № 29. - P. 20825-20827.

124. Characterization and physiological function of glutathione reductase in Euglena gracilis / S. Shigeoka et al. // Biochem. J. 1987. - V. 242. -P. 511-515.

125. Charles E. M. Hepatic glutathione reductase I. Purification and general kinetic properties / E. M. Charles, G.R. Langdon // The J. of Biol. Chem. 1962. - V. 237, № 5. -P.1589-1595.

126. Charles E. M. Hepatic Glutathione Reductase II. PHYSICAL PROPERTIES AND MECHANISM OF ACTION / E. Mize Charles, E.T. Thompson, G.R. Langdon // The J. of Biol. Chem. 1962. - V. 237, № 5. -P.1596-1600.

127. С. K. Tuggle glutathione reductase is not required for maintenance of reduced glutathione in Escherichia coli K-12 / K.C. Tuggle, A J. Fuchs // J. of Bacteriology. 1985.-V. 162, № l.-P. 448-450.

128. Chrungoo V.J. Differential biochemical response of freshly isolated rat hepatocites to paracetamol, carbon tetrachloride and D-galactosamine toxicity / V.J.Chrangoo, K. Singh, J. Singh // Indian J. Exp. Biol. 1997. -V.35, № 6. - P.603-610.

129. Chung P. M. Inhibition of glutathione disulfide reductase by glutathione / P. M. Chung, R. E. Cappel, H. F. Gilbert // Arch Biochem. Biophys. 1991. -V. 288. - P. 48-53.

130. Clifford A. Effect of prolonged storage on the activities of superoxide dismutase, glutathione reductase, and glutathione peroxidase / A. Clifford, F. Al-Awadi, S. Olusi // Clin. Chem. 2000. - V.46, № 4. - P.566-567.

131. Cloning, sequencing and regulation of the glutathione reductase gene from the Cyanobacterium Anabaena PCC 7120 / J. Fanyi et al. // The J. of Biol. Chem. 1995. - V. 270, № 39. - P. 22882-22889.

132. Colman R. F. On the role of flavin adenine dinucleotide and thiol groups in the catalytic mechanism of yeast glutathione reductase / R. F Colman, S. Black // J. Biol. Chem. 1965. - V. 240, № 4. - P. 1796-1803.

133. Conn E. E. Glutathione reductase of wheat germ / E. E. Conn, B. Vennesland // J. Biol. Chem. 1951. - V. 21. - P. 17-28.

134. Cooper T.G. Mitochondria and glyoxysomes from castor been endosperm / T.G. Cooper, И. Beevers // J. Biol. Chem. 1969. - V. 244, №13.-P. 3507-3513.

135. Crystal structure of the antioxidant enzyme glutathione reductase inactivated by peroxynitrite / N. Savvides Savvas et al. // The J. of Biol. Chem. 2002. - V. 277, № 4. - P. 2779-2784.

136. Cytosolic triglycerides and oxidative stress in central obesity: the missing link between excessive atherosclerosis, endothelial dysfunction, and beta-cell failure. I S.J. Bakker et. al. // Atherosclerosis. 2000. - V. 148, № I. - P. 17-21.,

137. Das U.N. Beneficial effect(s) of n-3 fatty acids in cardiovascular diseases: but, why and how / U.N. Das // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids. 2000. - V. 63, №6. -P. 351-362.

138. Denaturation and reactivation of dimeric human glutathione reductase an assay for folding inhibitors / A. Nordhoff et al. // Eur. J. of Biochem. -1997.-V. 245.-P. 273-282.

139. De novo synthesis of glutathione is required for both entry into and progression through the cell cycle / M. Poot et. al. // J. Cell. Physiol. -1995.-V. 163.-P. 555-560.

140. Deonarain M.P. Escherichia coli. Engineering suface charge. 2 A method for purifying heterodimers of E. coli glutathione reductase / M.P. Deonarain, N.S. Scrutton, N.R. Perham // Biochemistry. 1992. - № 5. -P.1498-1504.

141. Deonarain M.P. Directed mutagenesis of the redox-active disulphide bridge in glutathione reductase from Escherichia coli / M.P. Deonarain, N.S. Scrutton, A. Berry // Proc. Biol. Sci. 1990. - V. 241, № 1302. - 1990. -P. 179-186.

142. Depressed erythrocyte glutathione reductase activity in sickle cell disease / N. V. Raj et al. // The American J. of Clinical Nutrition. 1983. -V. 38. - P.884-887.

143. Detection of glutathione reductase after electrophoresis on native or sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gels / W.-C. Hou et al. // Electrophoresis. 2004. - V. 25. - P. 2926-2931.

144. Diagnostic evaluation of carbon tetrachloride- induced rat hepatic cirrhosis model / G.P. Lee et al. // Anticancer Res. 2005. - V.25, № 2A.- P.1029-1038.

145. Differential expression of glutathione reductase and cytosolic glutathione peroxidase, GPX1, in developing rat lungs and kidneys / T. Fujii et al. // Free Radic. Res. V. 36, №10. - 2002. - P. 1041-1049.

146. Different responses of cytosolic and mitochondrial glutathione in rat livers after ethylene oxide exposure / T. Katoh et al. // Toxicology Letters.- 1990.-V. 54, №2-3.-P. 235-239.

147. Dinitrosyl-dithiol-iron complexes, nitric oxide (NO) carriers in vivo, as potent inhibitors of human glutathione reductase and glutathione-S-transferase / M. A. Keese et al. // Arch, of Biochem. and Biophys. 2000.- V. 378,1. l.-P. 123-130.

148. Duzova H. Neutrophil superoxide anion production, and CAT and GSSGR activity in patients with tuberculosis / H. Duzova, D. Asma, M.H. Emre //New Microbiol. 2003. - V.3.№ 26. - P. 289-298.

149. Early midsonal oxidative stress preceding cell death in hypoperfused rat liver / M. Suematsu et al. // Gastroenterology. 1992. - V.103,№ 3. -P.994-1001.

150. Effects of chronic variable stress on oxidative stress in rat cerebral cortex / L. Manoli et al. // Rev. Farm, e bioquim. Univ. Sao Paulo. 1998. -№34. - P. 188.

151. Effect of oral dosing vehicles on the subchronic hepatotoxicity of carbon tetrachloride in the rat / K. P. Koporec et al. // J. Toxicol. Environ.Health. 1995. - V.44,№ 1. - P. 13-27.

152. Effect of route and pattern of exposure on the pharmacokinetics and acute hepatotoxicity of carbon tetrachloride / U.Y. Sanzgiri et al. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1995.- V. 134,№ 1. - P. 148-154.

153. Endotoxin induces glutathione reductase activity in lungs of mice / D. C. Hamburg et al.//Pediatr Res. 1994. - V. 35. - P. 311-315.

154. Erat M. Purification and characterization of glutathione reductase from bovine erythrocytes. / M. Erat, H. Sakiroglu, M. Ciftci // J. Biol. Chem. /- 1998.-V. 10, № 273. P.5744-5751.

155. Erat M. Purification of glutathione reductase from chicken liver and investigation of kinetic properties / M. Erat, H. Demir, H. Sakiroglu // Appl. Biochem. Biotechnol. 2005 - V.2, № 125. - P. 127-138.

156. Evaluation of oxidative stress during apoptosis and necrosis caused by carbon tetrachloride in rat liver / F. Sun et al. // Biochim. Biophys. Acta. -2001. V.1535, № 2. - P.186-191.

157. Evidence of hepatocyte apoptosis in rat liver after the administration of carbon tetrachloride / J. Shi et al. // Am. J. Pathol. 1998. - V.153. -P.515-525.

158. Expression and enzyme activity of glutathione reductase is upregulated by Fe-deficiency in graminaceous plants / K. Bashir et al. // Plant Mol. Biol. V. 65. - 2007. - P. 277-284.

159. Expression of recombinant human glutathione reductase in eukaryotic cells after DNA-mediated gene transfer / S. Cholin et al. // Biochem. Med. Metab. Biol. 1993. - V. 49. - P. 108-113.

160. Evidence for a novel mechanism of time-resolved flavin fluorescence depolarization in glutathione reductase / A. W. van den Berg Petra et al. // Biophys. J. 2004. - V.87. - P.2577-2586.

161. Fairlamb A. Pathways to drug discovery / A. Fairlamb // Biochemist.-1996. -V. 18, № 1. -P.ll-16.

162. Farber P.M. Recombinant Plasmodium falciparum glutathione reductase is inhibited by the antimalarial dye methylene blue / P.M. Farber, L.D. Arsott , C.H. Williams // FEBS Lett. 1998. - V.422, № 3. - P.311-314.

163. Flavin Fluorescence Dynamics and Photoinduced Electron Transfer in Escherichia coli Glutathione Reductase / A. W. van den Berg Petra et al. // Biophysical Journal. 1998. - V. 74. - P 2046-2058.

164. Freminet A. Carbohydrate and acid metabolism during acute hypoxia in rats blood and heart metabolites / A. Freminet // Сотр. Biochem. and Physiol. 1981. - V.70, №3. - P.427-430.

165. Gene cloning and expression of cytosolic glutathione reductase in rice (Oryza Sativa L.) / Kaminaka Hironori et al. // Plant. Cell Physiol. 1998. - V.39,№ 12.-P. 1269-1280.

166. Gene structure for mouse glutathione reductase, including a putative mitochondrial targeting signal / T. Tamura et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. - V. 237. - P. 419-422.

167. Gene transfer of mitochondrially targeted glutathione reductase protects H441 cells from t-butyl hydroperoxide-induced oxidant stresses / J. Donough et al. // Cell Mol. Biol. 1999. - V. 20. - P. 256-263.

168. Gerard-Monnier D. Metabolism and antioxidant function of glutathione / D. Gerard-Monnier, J. Chaudiere // Pathol. Biol. (Paris). -1996.-V. 44.-P. 77-85.

169. Ghibelli L. Non-oxidative loss of glutathione in apoptosis via GSH extrusion / L. Ghibelli, S. Coppola, G. Ratilio // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995. - V. 216. - P. 313-320.

170. Glutathione reductase activity and isoforms in leaves and roots of wheat plants subjected to cadmium stress / G.G. Yannarelli et al. // Phytochemistry. 2007. - V. 68, № 4. -P.505-512.

171. Glutathione reductase: comparison of steady-state and rapid reaction primary kinetic isotope effects exhibited by the yeast, spinach, and Escherichia coli enzymes / Vanoni M.A. et all. // Biochemistry. 1990. -V. 29. - P. 5790-5796.

172. Glutathione reductase from human erythrocytes: ammo-acid sequence of the structurally known FAD-binding domain / R. Untucht-Grau et al. // Eur. J. Biochem. 1981,-V. 120.-P. 407-419.

173. Glutathione reductase from human erythrocytes. The sequences of the NADPH domain and of the interface domain / R.L. Krauth-Siegel et al. // Eur. J. Biochem. 1982. - V. 121. - P. 259-267.

174. Glutathione reductase from pea leaves: response to abiotic stress and characterization of the peroxisomal isozyme / M.C. Romero-Puertas et al. // New Phytol. 2006. - V. 170. - P. 43-52.

175. Glutathione reductase inhibition and methylated arsenic distribution in Cdl mice brain and liver / V. M. Rodry'guez et al. // Toxicolog. sciences. -2005.-V.84.-P. 157-166.

176. Glutathione reductase in leaves of cowpea: cloning of two cDNAs, expression and enzymatic activity under progressive drought stress, desiccation and abscisic acid treatment / D. Contour-Ansel et al. //Annals, of Botany.-2006.-V. 98.-P. 1279-1287

177. Glutathione reductase in wheat grain. 1. Isolation and characterization / F. De Lamotte et al. // J. Agric. Food Chem. 2000. - V. 48. - P. 49784983.

178. Glutathione reductase is expressed at high levels in pancreatic islet cells / Yuki Nagaoka et al. // Redox Report. 2004. - V. 9, № 6. - P. 11791183.

179. Greer S. Glutathione reductase from Escherichia coli: cloning and sequence analysis of the gene and relationship to other flavoprotein disulfide oxidoreductases / S.Greer, R.N. Perham // Biochemistry. 1986. - V. 25. - P. 2736-2742.

180. Guo Z. Spontaneous hypomorphic mutations in antioxidant enzymes of mice / Z. Guo, K.Higuchi, M.Mori // Free Radic. Biol. Med. 2003. - V. 35.-P. 1645-1652.

181. Gutierrez-Correa J. Inactivation of yeast glutathione reductase by Fenton systems: effect of metal chelators, catecholamines and thiol compounds / J. Gutierrez-Correa, A.O. Stoppani // Free Radic. Res. 1997. -V. 27, №6.-P. 543-555.

182. Halliwel B. Free radicals, reactive oxygen species, and human disease: a critical evaluation with special reference to atherosclerosis / B. Halliwel // Br. J. Exp. Pathol. 1989. - V. 70. - P. 737-757.

183. Hernandes A. Stability to ozone in grades of tobacco / A. Hernandes, U. Moony // Agr. and Biochem. 1990. - V.54, № 51. - P. 1062-1065.

184. Hikiche N. A molecular dynamics study of glutathione reductase / N. Hikiche, M. Paulin, M. Hanst // J. Mol. Struct. Theochem. 1995. - № 5. -P.243-254.

185. Hinson J.A. Phase II enzymes and bioactivation / J.A.Hinson, P.G.Forkert // Can. J. Physiol Pharmacol. 1995. - V.73, № 10. - P.1407-1413.

186. Hirichi N. A molekular dynamics study of glutathione reductase // N. Hirichi, M. Pauliko, M. Hansz // S. Mol. Stuct. Theochem. 1995. - V.335. - P. 243-254.

187. Horse-liver glutathione reductase: purification and characterization / C. Garcia-Alfonso et al. // Int. J. Biochem. 1993. - V.l,№ 25.- P.61-68.

188. Huang J. Distribution of glutathione and glutathione-related enzyme systems in mitochondria and cytosol of cultured cerebellar astrocytes and granule cells / J. Huang, M.A. Philbert // Brain Res. V.680, № 1-2. - 1995. -P. 16-22.

189. Hwavg C. Oxidized redox state of glutathione in the endoplasmic reticulum / C. Hwavg, A.J. Sinsky, H.F. Lodish // Science. 1992. - № 257. -P. 1496-1502.

190. Immunohistochemical study of glutathione reductase in rat ocular tissues at different developmental stages / T. Fujii et al. // The Histochemical Journal. V.33. - 2001. - P. 267-272.

191. Increase of lipid hydroperoxides in liver mitochondria and inhibition of cytochrome oxidase by carbon tetrachloride intoxication in rats / K. Ikeda et al. //Free. Radic. Res. 1998. - V.28,№ 4. -P.403-410.

192. Increased oxidative stress in the RAW 264.7 macrophage cell line is partially mediated via the S-nitrosothiol-induced inhibitionof glutathione reductase / U. Butzer et al. // FEBS. 1999. -1. 445. - P. 274-278.

193. Inhibition of glutathione reductase by dinitrosyl-iron-dithiolate complex / Boese Matthias et al. // Biochem. and Mol. Biol. 1997. - V. 272, №35.-P. 21767-21773.

194. Inverted tandem duplication of 8pl2 p23.1 in a child with increased activity of glutathione reductase / N.C. Nevin et al. // Journal of Medical Genetics. - 1990. - V. 27. - P. 135-136.

195. Jimenez A. Role of the ascorbate-glutathione cycle of mitochondria and peroxisomes in the senescence of pea leaves./ A Jimenez, J. A. Hernandez, G. Pastori // Plant Physiol. 1998. - V. 118, № 4. - P. 1327-1335.

196. Johnston D.E. Mechanism of early carbon tetrachloride toxicity in cultured rat hepatocytes / D.E.Johnston, C. Kroening // Pharmacol. Toxicol. 1998.-V.83,№ 6.-P.231-239.

197. Johnson A.S. Antioxidant enzyme response to hypericin in EMT6 mouse mammary carcinoma cells / A.S. Johnson, R. Pardini // Free Radic. Biol, and Med. 1998. - V.24, № 5. - P. 817-826.

198. Karplus P. A. A crystallographic study of the glutathione binding site of glutathione reductase at 0.3-nm resolution / P. A. Karplus, E. F. Pai, G. E. Schulz // Eur. J. Biochem. 1989. - V. 178. - P. 693-703.

199. Karplus P.A. Refined structure of glutathione reductase at 1,54 A resolution / P.A. Karplus, G.E. Schulz // J. Mol. Biol. -1987. V. 195. - P. 701-729.

200. Karplus P. A. Substrate binding and catalysis by glutathione reductase as derived from refined enzyme: substrate crystal structures at 2 A resolution / P. A. Karplus, G. E. Schulz// J. Mol. Biol. 1989. - V. 210. - P. 163-180.

201. Kinase activation via a glutathione reductase-mediated mechanism -terminal 2 fluid shear stress attenuates hydrogen peroxide-induced c-jun NH / Yamamoto Kei et al. // The J. of the American Heart Association. 2002. -V.91.-P. 712-718.

202. Kinetic characterization of glutathione reductase from the malarial parasite Plasmodium falciparum comparison with the human enzyme / C.C. Bome et al. // The J. of Biol. Chem. 2000. - V. 275, № 48. - P. 3731737323.

203. Kliukiene R. Photoinactivation of tiypanothione reductase and glutathione reuctase by Al-phthalocyanine tetrasulfonate and hematoporphyrin / R. Kliukiene, A. Maroziene, N. Cenas // Biochem. and Biophys. Res. Commun. 1996. - V.218, № 2. - P.629-632.

204. Kowaltowski A.J. Mitochondrial damage induced by conditions of oxidative stress / A.J. Kowaltowski, A.E. Vercesi // Free Radical Biology & Medicine. 1999. -V. 26. - P. 463-471.

205. Krauth-Siegel R. Glutathione reductase from human erythrocytes / R. Krauth-Siegel, R. Blatherpicl, H. Salch // Eur. J. Biochem.- 1982. V. 121, № 2. - P. 259-267.

206. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature.-1970.-V. 227.-P. 680-685.

207. Lawrense A. Micromethods in signale muscle tibeis / A. Lawrense, A. Helen, M. Deniese // Anal. Biochem.- 1988. V.172, № 2. - P. 575-579.

208. Lee W.M. Drug-induced hepatotoxicity / W.M. Lee // New England Journ. Med. 1995,-V.333,№ 17.-P. 1118-1127.

209. Le Trang N. Purification of glutathione reductase from gerbil liver in two steps / N. Le Trang, K.K. Bhargava, A. Cerami // Anal. Biochem. -1983.-V. 133.-V. 94-99.

210. Liberos V. Purification and characteristic glutathione reductase from Rodospirillum rubrum / V. Liberos, J. Padro // Arch. Biochem. Biophys. -1992.-№ 1. P.234-253.

211. Lipoic and dihydrolipoic acid as antioxidants: a critical evaluation / B.C. Scott et al.//Free Rad Res.-V. 1994. V.20. - P. 119-133.

212. Long-term ethanol administration enhances age-dependent modulation of redox state in different brain regions in the rat: Protection by acetyl carnitine / V. Calabrese et al. // S. Mol. Stuct. Theochem. 1995. - V. 335. - P. 243-254.

213. Long-trem ethanol administraion enhances age-dependent modulation of redox state in brain and peripheral organs of rat: Protection by acetyl carnitine / G. Scapagnini et al. // Int. J. Tissue React. 2002. - № 3. - P.89-96.

214. Lopez-Barea J. Mouse-liver glutathione reductase. Purification, kinetics, and regulation. / J. Lopez-Barea, C.Y. Lee // Eur. J. Biochem. -1979. V.2,№ 98 - P.487-499.

215. Low activity of superoxide dismutase and high activity of glutathione reductase in erythrocytes from centenarians / Helle R. Andersen et al. // Age and Ageing. 1998. - V.27. - P.643-648.

216. Lower antioxidant capacity and elevated p53 and p21 may be a link between gender disparity in renal telomere shortening, albuminuria, and longevity / J.L. Tarry-Adkins et al. // Am. J. Physiol. Renal Physiol-2006. -V. 290, №2. -P. 509-516.

217. Low red blood cell glutathione reductase and pyridoxine phosphate oxidase activities not related to dietary riboflavin: selection by malaria / B. B. Anderson et al. // The American J. of Clinical Nutrition. 1993. - V.57. -P. 666-672.

218. Lowry O.H. Protein measurement with the Folin-Phenol reagent / O.H. Lowry, N.J. Rosebrough, A.L. Farr, R.J. Randall // J. Biol. Chem. -1951. V.194, №1. - P.265-271.

219. Lukasik I. Activity of Se-independent glutathione peroxidase and glutathione reductase within cereal aphid tissues / I. Lukasik, S. Golawska // Biol. Lett. V. 44, № 1.- 2007.- P. 31-39.

220. Mahtab S. S Hepatic glutathione reductase and riboflavin concentrations in experimental deficiency of thiamin and riboflavin in rats / S.S. Mahtab, D. Bamji // J. Nutr. 1972. - V. 102. - P. 443-448.

221. Malshet V.G. Fluorescent products of lipid peroxidation. I. Structural requirement for fluorescence in conjugated schiff bases / V.G. Malshet, A.L. Tappel // Lipids. 1973. - V.8, №4. - P. 194-198;

222. Mannervik B. A branching reaction mechanism of glutathione Reductase / B. Mannervik // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1973. - V. 53.-P. 1151-1158.

223. Mapson L. W. Glutathione reductase from germinated peas / L. W. Mapson, F. A. Isherwood //Biochem. J. 1963. -V. 54. - P. 173-191.

224. Mass spectrometric sequencing of proteins silver-stained polyacrylamide / A. Shevchenco et al. // Anal. Chem. 1996. - V.68. -P.850-858.

225. Massey V. On the reaction mechanism of yeast glutathione Reductase / V. Massey, C.H. Jr. Williams // J. Biol. Chem. 1965. - V. 240. - P. 4470-4480.

226. Mata A.M. Purification by affinity chromatography of glutathione reductase (EC 1.6.4.2) from Escherichia coli and characterization of suchenzyme / A.M. Mata, M.C. Pinto, J. Lopez-Barea // J. Naturforsch. 1984. -V. 39, №9-10. -P. 908-915.

227. Mbemba F. Subcellular localization modification with ageing of glutathione, glutathione reductase activities in human fioblasts / F. Mbemba, A. Houbion, M. Raes // Biochim. and Biophys. acta: Gen-Sulj. 1985. -V.838, №4.-P. 211-220.

228. McCallum M.J. The purification and properties of glutathione reductase from the cestode Moniezia expansa / M.J. McCallum, J. Barrett // Int. J. Biochem. Cell Biol. 1995. -V. 27. - P. 393-401.

229. Mechanistic studies on a novel, highly potent gold-phosphole inhibitor of human glutathione reductase / M. Deponte et al. // J. Biol. Chem. -2005. V. 280,1. 21. - P.20628-20637.

230. Mechanisms of caemloplasmin biosynthesis in normal and cooperdeficient rats / J. D. Gitlin et al. // Biochem. J. 1992. - V.282, №23. -P.835-839.

231. Metals are directly involved in the redox interconversion of Saccharomyces cerevisiae glutathione reductase / J. Peinado et al. // Molecular and Cellular Biochem. 1991. - V. 101, № 2. - P. 175-187.

232. Miki T. Oxidative stress response in yeast: purification and characterization of glutathione reductase from Hansenula mrakii / T. Miki, Y. Tsujimoto, S. Miyabe // Biosci., Biotechnol. and Biochem. 1996. -V.60,№ 7.-P. 1207-1209.

233. Millerand H. peroxide modification of monoalkylated glutathione reductase stabilization of an active-site cysteine-sulfenic acid / H. Millerand, A. Claibornej // J. Biol. Chem. 1991. - V. 266, № 29. - P. 19342-19350.

234. Mitochondrial targeting of glutathione reductase requires a leader sequence / Tamura Toshiya et al. // Biochem. And Biophys. Res. Commun. 1996. - V.222, № 3. - P.659-663.

235. Molecular characterization and expression of Onchocerca volvulus glutathione reductase / S. Muller et al. // Biochem. J. V. 325. - 1997. - P. 645-651.

236. Molecular organization of the glutathione reductase gene in Drosophila melanogaster / M. Candas et al. // Arch, of Biochem. and Biophys. V. 339, № 2. - 1997. - P. 323-334.

237. Molecular responses to photooxidative stress in Pinus sylvestris II. differential expression of Cu,Zn-superoxide dismutases and glutathione reductase / S. Kaipinski et al. // Plant Physiol. 1993. - V.103. - P. 13851391.

238. Morgan P.E. Inhibition of glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenase by peptide and protein peroxides generated by singlet oxygen attack / P.E. Morgan, T.D. Roger, M.J. Davies // Eur. J. Biochem. -2002.-V. 269.-P. 1916-1925.

239. Ng M.C. Purification and properties of glutathione reductases from bovine ciliary body / M.C. Ng, H. Shichi // Exp. Eye Res. 1986. - V. 43. -P. 477- 489.

240. Nitric oxide inhibits phtofrin(R)-induced lipid peroxidation in murine leukemia cells / Eric E. Kelley et al. // Photochem. and Photobiol. 1999. -V.69.-P10.

241. Nuclear and nucleolar glutathione reductase, peroxidase, and transferase activities in liver of male and female fischer-344 rats / K. Rogers Lynette et al. // Tozicological sciences. 2002. - V. 69. - P. 279-285.

242. Ochalska-Czepulis M. Glutathione reductase activity of chromatin isolated from mouse spleen nuclei / M. Ochalska-Czepulis, S.Bitny-Szlachto //Int J Biochem. 1981.-V. 13.-P. 519-521.

243. Ogus H. Human jejunal glutathione reductase: purification and evaluation of the NADPH- and glutathione-induced changes in redox state / H. Ogus, N. Ozer // Biochem. Med. Metab. Biol. 1991. - V.l, № 45. -P.65-73.

244. Ookhtens M. Role of the liver in interorgan homeostasis of glutatione and cystine / M. Ookhtens, N. Kaplowitz // Sem. Liver Dis. 1998. -№ 18. -P. 313-329.

245. Oxidative stress response in yeast: purification and characterization of glutathione reductase from Hansenula mrakii / T. Miki et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 1996. - V.7, № 60. - 1207-1209.

246. Pai E.F. The catalytic mechanism of glutathione reductase as derived from x-ray diffraction analyses of reaction intermediates / E.F. Pai , G.E. Schulz // J. Biol. Chem. 1983. - V. 3,№ 258. - P. 1752-1757.

247. Pajovic S.B. Effects of progesterone and estradiol benzioate on glutathione dependent antioxidant enzyme activities in the brain of female rats / S.B. Pajovic, Z.S. Saicic, M.B. Spasic // Gen. Physiol, and Biophys. -1999.-V.l8, № 1. -P.35-44.

248. Pantili E. Distribution of glutathione peroxidases and glutathione reductase in rat brain mitochondria / E. Pantili, G. Sandri, L. Ernster // FEBS Lett. 1991.-V.290,№ 12.-P. 35-37.

249. Passwater R.A. Lipoic Acid / R.A. Passwater // The Metabolic Antioxidant. New Canaan, CT: Keats Publishing, Inc. - 1995. - P. 1-47.

250. Patel M. P. Enterococcus faecalis glutathione reductase: purification, characterization and expression under normal and hyperbaric 02 conditions / M. P. Patel, J. Marcinkeviciene, J. S. Blanchard // FEMS Microbiol. Lett. -1998.-V. 166.-P. 155-163

251. Paulikova H. Effect of heparin and dextran sulfate on the activity of glutathione reductase from yeast / H. Paulikova, I. Petrickova, M. Antalik // Biochem. and Mol. Biol. Int. 1996. - V.38, № 6. - P. 1117-1126.

252. Pelkonen О. Inhibition and induction of human cytochrome P450 (CYP) enzymes / O.Pelkonen, J.Maenpaa, P.Taavitsainen // Xenobiotica. -1998. — V.28, № 12.-P. 1203-1253.

253. Perham R.N. New enzymes for old: redesigning the coenzyme and substrate specificities of glutathione reductase / R.N. Perham, N.S. Scrutton, A. Berry//Bioessays V. 3, № 10. - 1991. -P. 515-525.

254. Peroxynitrite modification of glutathione reductase: modeling studies and kinetic evidence suggest the modification of tyrosines at the glutathione disulfide binding site / D. Francescutti et al. // Protein Engineering. 1996. -V. 9, №2.-P. 189-194.

255. Pick U. Glutathione reductase and lipoamide dehydrogenase have opposite stereospecificities for a-lipoiacid enantiomeus / U. Pick, N. Haramaki, A. Constantinescu // Biochem. and Biophys. Res. Commun. -1995. V.206, № 2. -P. 724-730.

256. Plastidial glutathione reductase from Haynaldia villosa is an enhancer of powdery mildew resistance in wheat {Triticum aestivum) / Ya-Ping Chen et al. // Plant Cell Physiol. V. 48, № 12. - 2007. - P. 1702-1712.

257. Platelet surface glutathione reductase-like activity / David W. Essex et al. // J. Hemostasis, Thrombosis, And Vascular Biology. 2004. - V. 104, № 5. - P. 1383-1385.

258. Processing of Gene Expression Data Generated by Quantitative RealTime RT-PCR / P. Y. Muller at al. // BioTechniques. 2002. - V. 32, №6. — P.354-360.

259. Purification and characterization of glutathione reductase from Rhodospirillum rubrum / C.A. Libreros-Minotta et al. // Arch. Biochem. Biophys. 1992. - V. 298. - P. 247-253.

260. Purification of glutathione reductase from bovine brain, generation of an antiserum, and immunocytochemical localization of the enzyme in neural cells / J.M. Gutterer et al. // J. Neurochem. 1999. - V. 73. - P. 14221430.

261. Purification of glutathione reductase from porcine erythrocytes by the use of affinity chromatograpHy on 2',5'-ADP-sepHarose 4B and crystallization of the enzyme / V. Boggaram et all. // Anal. Biochem. -1979.-V. 98.-P. 335- 340.

262. Purification of multiple forms of glutathione reductase from pea (Pisum sativum L.) seedlings and enzyme levels in ozone-fumigated pea leaves / N.R. Madamanchi et al. // Plant Physiology. 1992. - V. 100, №1. -P. 138-145.

263. Purification, properties, and oligomeric structure of glutathione reductase from the cyanobacterium Spirulina maxima / J.L. Rendon et al. // Arch Biochem. Biophys.- 1986. V.l,№248. - P.215-223.

264. Rachdan D. Glutathione Reductase from Human Cataract Lenses can be Revived by Reducing Agents and by a Molecular Chaperone, alpha -Crystallin / D. Rachdan, M.F. Lou, J.J. Harding // Curr Eye Res. 2005. -№30V.10. - P. 919-925.

265. Rail T. W. Glutathione reductase of animal tissues / T. W. Rail, A.L. Lehninger // J. Biol. Chem. 1952. - V. 9. - P. 119-130.

266. Rao P. Oxygen radicals and their scavenging systems / P. Rao. M. Cohen, H. Mueller.-N.Y.: Elsevier. 1983.-V. 15. - P. 357-360/

267. Ray S.D. A hepatotoxic dose of acetaminophen modulates expression of BCL 2, BCL - X (L), and BCL - X(S) during apoptotic and necrotic death of mouse liver cells in vivo / S.D.Ray, N.A.Jena // Arch.Toxicol. -2000. - V.73, № 10-11.-P. 594-606.

268. Ray L.E. Isolation and some characteristics of glutathione reductase from rabbit erythrocytes (38548) / L.E. Ray, J.M. Prescott // Exp. Biol, and Med. 1975. - V. 148. - P.402-409.

269. Reduced cellular glutathione reductase activity and increased adhesion molecule expression in endothelial cells cultured with maternal plasma from women with preeclampsia / Y. Zhang et al. // J. Soc. Gynecol. Investig. — 2006. V. 13, № 6. - P.412-417.

270. Reed D. J. Glutathione: toxicological implications / D. J. Reed // Ann. Rev. Pharmacol. Tox. 1990. - V. 30. - P. 603-663.

271. Refined mapping of the gene for glutathione reductase on human chromosome 8 / W. Gutensohn et al. // Hum. Genet. V. 43. - 1978. - P. 221-224.

272. Regulation of horse-liver glutathione reductase / C. Garcia-Alfonso et al. // Int. J. Biochem. 1993. - V. 25, № 4. -P.513-520.

273. Robert E. A glutathione reductase from Escherichia coli / E. A. Robert // The Journal, of Biol. Chem. 1955. - V. 26. - P. 77-85.

274. Robin J. Mockett overexpression of glutathione reductase extends survival in transgenic Drosophila melanogaster under hyperoxia but not normoxia / J.R. Mockett, S.S. Rajindar, C.O. William // The FASEB J. -1999.-V. 13. P. 1733-1742.

275. Role of active site tyrosine residues in catalysis by human glutathione reductase / R. L. Krauth-Siegel et all. // Biochemistry. 1998. - V. 37. -P. 13968-13977

276. Rosenburg H.R. Effects of a-lipoic acid on vitamin С and vitamin E deficiencies / H.R. Rosenburg, R.Culik // Arch Biochem Biophys. 1959. -V.80.-P. 86-93.

277. Rost M. Luminol and lucigenin amplified chemiluminescence and lipid-peroxidation with brain microsomes from rats during ontogenic development / M. Rost, E. Karge, W. Klinger // Experimental and Toxicol. Pathol. 1998. - T.50, №3. - P.253-255.

278. Salfur F. Induction of selenium glutathione reductase at Chlamidomonas / F. Salfur, V. Sisian, N. Vertub // Mol. Biol. 1992. -V.67, №16. - P.439-444.

279. Savvides Savvas N. Kinetics and crystaiiographic analysis of human glutathione reductase in complex with a xanthene inhibitor / N. Savvas Savvides, S. Karplus, P. Andrew // J. Biol. Chem. 1996. - V.271, № 12. -P. 8101-8107.

280. Schaedle M. Chloroplast glutathione reductase / M. Schaedle, A.J. Bassham // Plant Physiol. 1977. - V. 59. - P. 1011-1012.

281. Schirmer R.H. Structural compassion of the flavoenzyme glutathione reductase with other proteins / R.H. Schirmer // Biomol. Struct. 1978. -V.l, № 6. -P.33-38.

282. Scholich H. Antioxidant activity of dihydrolipoate against microsomal lipid peroxidation and its dependence on a-tocopherol / H. Scholich, M.E. Muiphy, H. Sies //Biochem. Biophys. Acta.- 1989. V.l001. - P. 256-261.

283. Schulr G.E. High resolution structure and catalytieaction of human glutathione reductase / G.E. Schulr, A. Karplus // Biochem. Soc. Trans. -1988.-V.12,№2.-P.81-84.

284. Schulz G.E. FAD-binding site of glutathione reductase / G.E. Schulz, R.H. Schirmer, E.F. Pai // J. Mol. Biol. 1982. - V. 160. - P. 287-308.

285. Scott E. Purification and properties of glutathione reductase of human erytrocytes / E. Scott, I.W. Duncan, V. Eksrand // J. Biol. Chem. — 1963. — V. 238.-P. 3928-3933.

286. Sergeev P. V. // Effects of sex hormones and antihormones on the activity of redox system enzymes of human erythrocyte glutathione / P. V. Sergeev, S. A. Chukaev, Yu. A. Korovkina // Bull, of Experim. Biol, and Med. 1997. - V. 124, № 2. - P. 786-788.

287. Serrano A. Occurrence of two isoforms of glutathione reductase in the green alga Chlamydomonas reinhardtii / A. Serrano, A. Llobell // Planta. -1993. -V. 190, № 2. -P. 199-205.

288. Serrano A. Purification and properties of glutathione reductase from the Cyanobacterium anabaena sp. strain 7119 / A. Serrano, J. Rivas, M. Losada // J. Bacteriol. 1984. - V. 158. - P.317-324.

289. Sharma S. P. Existence of bluish-with fluorescing agepidment-prlipofuscin / S. P. Sharma, T. J. James // Free Radic. Biol. And Med.1991. V. 10, №6.-P.443-444.

290. Skulachev V.P. Membrane-linked systems preventing superoxide formation / V.P. Skulachev // Bioscience Reports. 1997. - V.17. - P.347-366.

291. Staal G.E. The reaction mechanism of glutathione reductase from human erythrocytes / G.E. Staal, C. Veeger // Biochim Biophys Acta. -1969.-V. 185. — P.49-62.

292. Stelmaszynska T. Possible involvement of mieloperoxidese in lipid peroxidation / T. Stelmaszynska, E. Kukovetz, G. Egger // Int. J. Biochem.1992. V.24, № 1. -P.121-128.

293. Stoll V.S. Glutathione reductase turned intj trypanothione reductase: Structural analysis of an engineered change in substrate specificity /V.S. Stoll, S.J. Simpson, L.R. Krauth-Siegel // Biochemistry. 1997. - V.36, № 21. - P.6437-6447.

294. Structural, spectroscopic and catalytic activity studies on glutathione reductase reconstituted with FAD analogues / U. Ermler et al. // European J. of Biochem. 1991. -V. 199. - P. 133-138.

295. Stuart R.L. Isoniazid toxicity in health care workers / R.L. Stuart, J.Wilson, M.L.Grayson // Clin. Infect. DIS. 1999. - V.28, № 4. - P. 895897.

296. Studies of the mechanism of the UVA light-dependent loss ofglutathione reductase activity in human lenses / М/ Linetsky et al. //

297. Pediatric Research. 1994. - V. 35. - P. 311-315.

298. Styblo M. In vitro inhibition of glutathione reductase by arsenotriglutatione / M. Styblo, D. Thomas // Biochem. Pharmacol. 1995. -V. 49, № 7. - P.971-977.

299. Sugiyama K. Inhibition of glutathione reductase chinones / K.Sugiyama, A. Tyasy // Planta. 1993'. - V.45,№ 4. - P.1456-1463.

300. Sundari P.N. Does oxidative stress damage play role in the pathogenesis carbon tetrachloride-indused liver injury in the rat / P.N. Sundari, G. Wilfred, B. Ramakrishna // Biochim. Biophys. Acta. 1997. -Y.1362, № 2-3. — P.169-176.

301. Suttle N.F. Cooper olificienci in ruminants; recent developments / N.F. Suttle // Yet. Res. 1986. - V.l 19, №21. - P.519-522.

302. Taniguchi M. Similarities between rat liver mitochondrial and cytosolic glutathione reductases and their apoenzyme accumulation in riboflavin deficiency / M. Taniguchi, Т. Hara, FI. Honda // Biochem Int. -1986.-V. 13. -P.447-454.

303. Tayarani I. Enrymatic Protection against peroxidative damage in isolated brain capillaries / I. Tayarani, H. Chaediere, H. Lefancennier // J. Neurochem.- 1987. V.48, № 5. - P. 1399-1402.

304. The antioxidant effect of DL-alpha-lipoic acid on copper-induced acute hepatitis in Long-Evans Cinnamon (LEC) rats / H. Yamamoto et al. //Free Radic Res.-2001.-V. 34, № l.-P. 69-80.]

305. The role of iron in the inactivation of bovine lactate dehydrogenase (LDH) and yeast glutathione reductase (GR) / L.A. Cardoso et al. // Rev. Farm. Bioquim. Univ. Sao Paulo. 1998. - V.34. - P. 108.

306. Theodore W. R. Glutathione reductase of animal tissues / W. R. Theodore, L.A. Lehninger // The J. of Biol. Chem. 1952. - V.3. - P. 119130.

307. The unique glutathione reductase from Xanthomonas campestris: gene expression and enzyme characterization / S. Loprasert et al.. // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2005. - V. 331. - P.1324-1330.

308. Picaud T. Electrostatic Control of the Isoalloxazine Environment in the Two-electron Reduced States of Yeast Glutathione Reductase / T. Picaud, A. Desbois // The J., of Biol. Chem.- 2002. V. 277, № 35 - P. 31715-31721.

309. Thicme K. Three-dimensionae structure of glutathione reductase / K. Thicme, E. Pai, R. Schirmer // J. Mol. Biol. 1981. - V. 152, № 4. - P.763-782.

310. Three-dimensional structure of glutathione reductase at 2 A resolution / R. Thieme et al.//J. Mol. Biol. 1981. - V. 152.-P. 763-782.

311. Ulusu N. N. Purification and kinetic properties of glutathione reductase from bovine liver / N. N. Ulusu B. Tandogean // Mol. Cell Biochem. 2007. - V. 303. - P. 45-51.

312. Vander J.D. Inactivation of glutathione reductase by 4-hydroxynonenal and other endogenous aldehydes / J.D. Vander, L.A. Hunsaker, J.T. Vander // Biochem. Pharmacol. 1997. - V.5, № 8. -P.l133-1140.

313. Williams A.C. Functional significance of the pentose phosphate pathway and glutathione reductase in the antioxidant defenses of humansperm / A.C. Williams , W.C.L. Ford // Biology of reproduction. 2004. -V.71. - P.1309-1316.

314. Willmore W.G. Purification and properties of glutathione reductase from liver of the anoxia-tolerant turtle, Trachemys scripta elegans / W.G. Willmore, K.B. Storey // Mol. Cell Biochem. 2006. - V. 297. - P. 139149.

315. Wingsle G. Differential redox regulation by glutathione of glutathione reductase and Cu,Zn-superoxide dismutase gene expression in Pinus sylvestris L. needles / G. Wingsle, S. Karpinski // Planta. 1996. - V.198, № 1. -P.151-157.

316. Wingsle G. Regulation of gene glutathione reductase in Pinus sylvestris / G. Wingsle, S. Karpinski // Pianta. 1997. - V.168, №5. -P.191-195.

317. Wolz P. Neuroprotective effects of alpha-lipoic acid and its enantiomers demonstrated in rodent models of focal cerebral ischemia / P. Wolz, J. Krieglstein // Neuropharmacology. 1996. - V. 35. - P. 369-375.

318. Woods J.S. Up-regulation of glutathione synthesis in rat kidney by methyl mercury / J.S. Woods, M.E. Ellis // Biochem. Pharmacol. 1995. -№ 50. — P.1719-1724

319. Wong K.K. Glutathione reductase: solvent equilibrium and kinetic isotope effects / K.K. Wong , M.A. Vanoni, J.S. // Blanchard Biochemistry. -1988. V.18,№27. - P.7091-7096.

320. Yoshino К. Ингибирование ферментных активностей алифатическими альдегидами, образованными из липидных пероксидов / К. Yoshino // Numazu kogyo koto senmon gakko kenkyu hokoku. 1995. - V.45, № 30. - P.l 11-115.