Разработка технологии получения хитозана с использованием физико-химических закономерностей щелочного гидролиза хитинсодержащего сырья тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.04, кандидат технических наук Рипачева, Елена Николаевна

• Рипачева, Елена Николаевна
• кандидат технических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат технических наук Рипачева, Елена Николаевна

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Современные технологии переработки хитинсодержащего 8 сырья

1.1.1. Получение хитина

1.1.2. Получение хитозана

1.2. Структура и свойства хитина, хитозана и их производных

1.3. Химический гидролиз хитина и хитозана

1.3.1. Щелочной гидролиз хитина и хитозана

1.3.2. Кислотный гидролиз хитина и хитозана

Глава 2. Экспериментальная часть

2.1. Характеристика объектов исследования

2.1.1. Хитинсодержащее сырье

2.1.2. Хитин

2.1.3. Хитозан 94 2.1.4 Мономеры хитина и хитозана (М-ацетил-О-глюкозамин и

D - глюкозамин)

2.2. Методы исследования

2.2.1. Анализ химической чистоты хитинсодержащего сырья и 96 продуктов его переработки

2.2.2. Синтез ацетилированных производных хитина, хитозана и 102 D-глюкозамина

2.2.3. Синтез карбоксиметильных производных хитина

2.2.4. Определение молекулярной массы полисахаридов

2.2.4.1. Определение молекулярной массы хитозана вискозиметри- 104 ческим методом

2.2.4.2. Определение молекулярной массы и молекулярномассового распределения методом эксклюзионной ВЭЖХ карбоксиметильных производных хитина и хитозана

2.2.5. Методика количественного определения восстанавливаю- 111 щих Сахаров

2.2.6. Методика количественного определения М-ацетил-О- 112 глюкозамина

2.2.7. Определение степени деацетилирования хитозана

2.2.7.1. Определение степени деацетилирования хитозана методом 115 потенциометрического титрования

2.2.7.2. Определение степени деацетилирования хитина и хитозана 119 методом инфракрасной спектроскопии

2.2.8. Определение степени кристалличности

Глава 3. Результаты и их обсуждение

3.1. Щелочной гидролиз мономеров хитина и хитозана N- 125 ацетил-О-глюкозамина и D -глюкозамина

3.2. Щелочное деацетилирование хитина и хитозана

3.2.1. Совершенствование методики определения степени деаце- 13 8 тилирования методом инфракрасной спектроскопии

3.2.2. Зависимость изменения степени деацетилирования от сте- 143 пени кристалличности хитина

3.3. Деполимеризация хитина и хитозана при щелочном деаце- 156 тилировании

3.3.1. Совершенствование методики определения молекулярной 156 массы

3.3.2. Влияние кислорода на скорость щелочной деполимериза- 161 ции

3.3.3. Влияние природы щелочей и неорганических солей

3.3.4. Влияние природы растворителей на кинетику деполимери- 167 зации хитина и хитозана

3.3.5. Механизм деполимеризации

Глава 4. Разработка технологии получения высокомолекулярного 171 хитозана с высокой степенью деацетилирования

4.1. Обоснование рациональных режимов технологических 171 процессов

4.2. Технология получения хитозана и его характеристики

4.3. Расчет экономической эффективности технологии получе- 184 ния высокомолекулярного хитозана с высокой степенью деацетилирования

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии получения хитозана с использованием физико-химических закономерностей щелочного гидролиза хитинсодержащего сырья»

Актуальность темы

Разработка комплексных малоотходных технологий переработки морских гидробионтов, в частности, промысловых ракообразных, составляет одну из главных задач современного развития рыбохозяйственного комплекса.

Основным продуктом утилизации больших объемов отходов переработки ракообразных является хитин, который вследствие плохой растворимости не нашел широкого применения. Химический гидролиз хитина представляет собой важнейший метод модификации этого природного полисахарида с целью получения хитозана. В отличие от хитина, хитозан растворим в разбавленных органических кислотах, что открывает большие возможности для его использования.

Наиболее перспективным направлением в области изучения хитина является получение высокомолекулярного хитозана с равномерным распределением ацетилированных звеньев вдоль макромолекулярной цепи. Такой хитозан находит более широкое применение в медицине (лечение ожогов, инфекций, изготовление стоматологических материалов), сельском хозяйстве (для борьбы с вредителями и болезнями растений), пищевой промышленности (производство пищевых продуктов с хитозаном в качестве биологически активной добавки), биотехнологии (получение пленок микрокапсулирование), т. к. является более высокорастворимым по сравнению с хитозаном, имеющим блочное (случайное) распределение ацетилированных звеньев.

Поэтому совершенствование существующих и разработка новых технологий переработки хитинсодержащего сырья с целью получения хитозана с заданными свойствами на основе закономерностей щелочного гидролиза хитина является актуальной задачей.

Цель работы

Цель данной работы - разработка технологии получения хитозана из хитинсодержащего сырья на основании изучения щелочного гидролиза хитина.

Для достижения поставленных целей сформулированы следующие задачи:

1. Изучение кинетических закономерностей щелочного гидролиза хитина.

2. Изучение кинетических закономерностей щелочного гидролиза мономеров хитина и хитозана - N-ацетил-О-глюкозамина и D-глюкозамина.

3. Определение параметров технологических процессов разработанной технологии получения хитозана.

4. Изучение влияния природы щелочи, неорганических солей, атмосферы воздуха, кислорода и азота на степень полимеризации и деацетилирования хитина и хитозана.

5. Производственная апробация и разработка нормативной документации

6. Расчет экономической эффективности усовершенствованной технологии.

Научная новизна

Впервые рассчитаны константы скоростей реакций щелочного гидролиза мономеров хитина и хитозана - D-глюкозамина и N-ацетил-О-глюкозамина.

Установлен механизм щелочного гидролиза хитина, хитозана, N-ацетил-О-глюкозамина и D-глюкозамина.

Разработана методика определения молекулярной массы и молекулярно-массового распределения хитина и хитозана с помощью эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии, усовершенствована методика определения степени деацетилирования хитозана с помощью ИК-спектроскопии.

Установлено, что степень кристалличности хитина и хитозана оказывает незначительное влияние на скорость деацетилирования.

Практическая значимость работы

Разработана технология получения хитозана из хитинсодержащего сырья на основе изучения закономерностей щелочного гидролиза хитинсодержащего сырья и определены параметры технологических процессов.

На основании опытно-промышленных испытаний, проведенных на базе ООО «НТЦ Экобиотек-Мурманск» (г. Мурманск), разработано и утверждено изменение к технологической инструкции по получению хитозана из хитинсодержащего сырья с использованием щелочного гидролиза. На базе ООО «НТЦ Экобиотек-Мурманск» выработана опытная партия хитозана, произведенная в соответствии с предложенной технологией.

Рассчитан экономический эффект от внедрения предложенной технологии.

Подана заявка на изобретение № 200613923321/(042778), приоритет от 07.11.2006 г.

Автор защищает

- усовершенствованную технологию получения хитозана из хитинсодер-жащего сырья с использованием закономерностей щелочного гидролиза хитина;

- результаты изучения кинетических закономерностей щелочного гидролиза хитина и хитозана и их мономеров - №ацетил-0-глюкозамина и D-глюкозамина;

- вероятный механизм щелочного гидролиза хитина, хитозана, N-ацетил-D-глюкозамина и D-глюкозамина;

- методику определения средней молекулярной массы хитина и хитозана с помощью эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии;

- данные по изучению влияния природы щелочи, неорганических солей, атмосферы воздуха, кислорода и азота на степень полимеризации и деацетилирования хитина и хитозана;

- результаты исследования влияния кристалличности хитина и хитозана на степень деацетилирования;

- результаты производственной апробации разработанной технологии щелочного гидролиза хитинсодержащего сырья;

- изменение к технологической инструкции на разработанную технологию;

- технико-экономические показатели эффективности разработанной технологии.

Заключение диссертации по теме «Технология мясных, молочных и рыбных продуктов и холодильных производств», Рипачева, Елена Николаевна

193 ВЫВОДЫ

1. Разработана технология получения хитозана с заданными свойствами с использованием установленных закономерностей щелочного гидролиза хитина и хитозана. Предложенная технология исключает стадию получения хитина как промежуточного продукта, хитозан получают непосредственно из хитинсодержащего сырья. Определены параметры технологических процессов разработанной технологии.

2. Установлено, что степень кристалличности хитина и хитозана в сухом и влажном состоянии оказывает значительно меньшее влияние на скорость деацетилирования, чем возможность образования гидратной оболочки вокруг макромолекул полисахарида, которая препятствует нуклеофильной атаке гидроксид ионом и замедляет скорость реакции.

3. Показано, что при щелочном гидролизе хитина и хитозана кислород и гидроксид-ион не являются инициаторами расщепления гликозидной связи. Выявлены практически одинаковые закономерности в изменении молекулярной массы хитина при его гидролизе в растворах NaOH, КОН, NaCl, Nal, KI. Расщепление гликозидной связи в щелочной среде происходит по механизму нуклеофильного замещения SN1.

4. Разработана методика определения средней молекулярной массы хитина и хитозана с помощью эксклюзионной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), усовершенствована методика определения степени деацетилирования хитозана с помощью ИК-спектроскопии.

5. Предложена схема щелочного гидролиза мономеров хитина и хитозана - D-глюкозамина и N-ацетил-О-глюкозамина. Рассчитаны константы скоростей реакций гидролиза.

6. Разработано изменение к технологической инструкции по изготовлению хитозана для промышленной переработки к ТУ № 9289-005-4820317803.

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Рипачева, Елена Николаевна, 2007 год

1. Акопова, Т. А. Химические превращения хитина и хитозана в твердом состоянии при механическом воздействии : автореф. дис. . канд. хим. наук / Т. А. Акопова. М., 2001. - 24 с.

2. Беленький, Б. Г. Хроматография полимеров / Б. Г. Беленький, Л. 3. Виленчик. М. : Химия, 1978. - 344 с.

3. Быкова, В. М. Сырьевые источники и способы получения хитина и хитозана / В. М. Быкова, С. В. Немцев // Хитин и хитозан : получение, свойства и применение / под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. М., 2002. - С. 7-23.

4. Вихорева, Г. А. Синтез и свойства водорастворимых производных хитина : автореф. дис. д-ра хим. наук / Г. А. Вихорева. -М., 1998. 34 с.

5. Влияние размола на структуру и свойства хитозана / Т. А. Акопова и др. // Высокомолекулярные соединения. 1996. - Т. 38, № 2. - С. 263-268.

6. Гальбрайх, Л. С. Хитин и хитозан : строение, свойства, применение / Л. С. Гальбрайх // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 7, № 1. -С. 51-56.

7. Гамзазаде, А. И. Структурная неоднородность как фактор изменчивости свойств хитина и хитозана / А. И. Гамзазаде // Хитин и хитозанполучение, свойства и применение / под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. М., 2002. - С. 112-118.

8. Гетероциклические соединения. Т. 5 : пер. с англ. / под. ред. Р. Эльдерфилда. М. : Мир, 1996. - 464 с.

9. ГОСТ 7636-85. Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа. Введ. 1985 -М.: Изд-во стандартов, 1985. - 141 с.

10. Двойное лучепреломление в потоке и вязкость растворов хитозана в уксусной кислоте при различной ионной силе / С. Я. Любина и др. // Высокомолекулярные соединения. 1983. - Т. 25, № 7. - С. 1467-1472.

11. Деацетилирование хитина в гомогенных условиях / С. В. Немцев и др. // Прикладная биохимии и микробиология. 2002. - Т. 38, № 6. - С. 609-615.

12. Казицына, Л. А. Применение УФ-, ИК-, ЯМР- и масс-спектроскопии в органической химии / Л. А. Казицына, Н. Б. Куплетская. -М.: Изд-во Моск. ун-та, 1979. 240 с.

13. Кочетков, Н. К. Химия углеводов / Н. К. Кочетков, А. Ф. Бочков. -М.: Химия, 1967.-627 с

14. Кулезнев, В. Н. Химия и физика полимеров : учебник для хим,-технол. вузов / В. Н. Кулезнев, В. А. Шершнев. М. : Высшая школа, 1988. -312 с.

15. Куприна, Е. Э. Способы получения и активации хитина и хитозана / Е. Э. Куприна, С. В. Водолажская // Хитин и хитозан : получение, свойства и применение / под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. -М, 2002.-С. 44-63.

16. Куприна, Е. Э. Современные тенденции в способах получения и применения хитина и хитозана / Е. Э. Куприна, И. Ю. Козлова, К. Г. Тимофеева // Информ. пакет. Сер. «Обработка рыбы и морепродуктов» / ВНИЭРХ. М., 1999. - Вып. Ill (I). - С. 1-60.

17. Марч, Дж. Органическая химия : реакции, механизмы и структура. В 4 т. Т. 2 : углубленный курс для унив. и хим. вузов : пер. с англ. / Дж. Марч. М.: Мир, 1987. - 504 с.

18. Маслова, Г. В. Теория и практика получения хитина электрохимическим способом / Г. В. Маслова // Хитин и хитозан : получение, свойства и применение / под ред. К. Г. Скрябина, Г. А. Вихоревой, В. П. Варламова. -М., 2002. С. 24-43.

19. Немцев, С. В. Способы получения хитина и хитозана / С. В. Немцев // Совершенствование производства хитина и хитозана из панцирьсодержащих отходов криля и пути их использования : материалы третьей всесоюзной конф. / ВНИРО. -М., 1992. С. 7-15.

20. Новиков, В. Ю. Кинетика реакции образования Б(+)-глюкозамина при кислотном гидролизе хитина / В. Ю. Новиков // Журнал прикладной химии. 1999. - Т. 72, № 1. - С. 147-152.

21. Новиков, В. Ю. Химический гидролиз хитина и хитозана / В. Ю. Новиков // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана : материалы Седьмой Междунар. конф. (Санкт-Петербург-Репино, 15-18 сент. 2003 г.) / ВНИРО. М., 2003. - С. 38-42.

22. Новиков, В. Ю. Способ получения гидрохлорида D(+)-глюкозамина / В. Ю. Новиков, A. JI. Иванов // Журнал прикладной химии. -1997. Т. 70, № 9. - С. 1543-1547.

23. Новиков, В. Ю. Кинетика реакции дезацетилирования хитина и хитозана / В. Ю. Новиков, Т. А. Орлова, И. Э. Воронина // Изв. вузов. Пищевая технология. 1990. - № 5. - С. 64-67.

24. Новиков, В. Ю. Многократное использование раствора гидроокиси натрия для дезацетилирования хитина / В. Ю. Новиков, Т. А. Орлова, Н. И. Волкова // Рыбное хозяйство. 1988. - № 12. - С. 76-78.

25. Нудьга, Л. А. Получение хитозана и его производных и исследование их свойств / JI. А. Нудьга : автореф. дис. . канд. хим. наук. -Л., 1979.-21 с.

26. Нудьга, Л. А. Получение хитозана и изучение его фракционного состава / Л. А. Нудьга, Е, А. Плиско, С. Н. Данилов // Журнал общей химии. -1971. Т. 41, № 11. - С. 2555-2559.

27. Орлова, Т. А. Технология получения продуктов и биологически активных веществ из морских гидробионтов // Т. А. Орлова, В. С. Зензеров. -Апатиты: Изд. КНЦ РАН, 2004. 277 с.

28. Пат. 45-13599 Япония, МКИ 26 F 0. Получение хитозана из хитина / Fujita Т. ; Нихон суйсан кабусики кайся. № 70-13599 ; заявл. 03.09.66 ; опубл. 15.05.70.- 15 с.

29. Пат. 4199496 США, МКИ2 А 23 J 1/04, НКИ 260/112 R. Process for the recovery of chemicals from the shells of crustacea / Peniston Q. P., Johnson E. L.; Seattle, WA. № 565849 ; заявл. 07.04.1975 ; опубл. 22.04.1980. - 17 с.

30. Пат. 3862122 США, МКИ С 08 В 37/08, НКИ 260/211 R. Method of recovering chitosan and other by-products from shellfish waste and the like / Peniston Q. P., Johnson E. L. № 226661 ; заявл. 16.02.72 ; опубл. 21.01.75. - 9 с.

31. Пат. 4066735 США, МКИ2 С 01 F 11/46, НКИ 423/159. Process for demineralization of crustacea shells / Peniston Q. P., Johnson E. L. № 742130 ; заявл. 15.11.1976 ; опубл. 03.01.1978. - 5 с.

32. Петров, А. А. Органическая химия : учебник для вузов / А. А. Петров, X. В. Бальян, А. Т. Трощенко. СПб. : Иван Федоров, 2002. - 624 с.

33. Плиско, Е. А. Хитин и его химические превращения / Е. А. Плиско, JI. А. Нудьга, С. Н. Данилов // Успехи химии. 1977. - Т. 46, № 8. -С. 1470-1488.

34. Прокопов, А. А. N-производные хитозана и пленки на их основе : дис. . канд. техн. наук / А. А. Прокопов. Л., 1985. - 146 с.

35. Рентгенографическое изучение структуры хитозана / И. Н. Горбачева и др. // Высокомолекулярные соединения. 1988. - Т. 30, № 12. -С. 2512-2515.

36. Розенталь, А. Д. Биотехнологические основы переработки панциря антарктического криля : дис. . канд. биол. наук / А. Д. Розенталь. Д., 1988. -102 с.

37. Семиохин, И. А. Кинетика гомогенных химических реакций / И. А. Семиохин, Б. В. Страхов, А. И. Осипов. М.: Изд-во Моск. ун-та, 1986. - 232 с.

38. Смит, А. Прикладная ИК-спектроскопия : пер. с англ. / А. Смит. -М.: Мир, 1982.-328 с.

39. Технология рыбы и рыбных продуктов : учебник для вузов / В. В. Баранов и др.; под ред. А. М. Ершова. СПб.: ГИОРД, 2006. - 944 с.

40. Утеушев, Р. Р. Разработка технологии комплексной переработки панцирьсодержащего сырья из ракообразных Волго-Каспийского региона : автореф. дис. . канд. техн. наук / Р. Р. Утеушев ; АГТУ. Астрахань, 2006. -25 с.

41. Шмид, Р. Неформальная кинетика: В поисках путей химических реакций : пер. с англ. / Р. Шмид, В. Н. Сапунов. М.: Мир, 1985. - 264 с.

42. Aiba, S.-i. Studies of chitosan: 3. Evidence for the presence of random and block copolymer structures in partially N-acetylated chitosans / S.-i. Aiba // International Journal of Biological Macromolecules. 1991. - Vol. 13, No. 1. - P. 40-44.

43. Alkaline N-deacetylation of chitin enhanced by flash treatments. Reaction kinetics and structure modifications / B. Focher, P. L. Beltrame, A. Naggi, G. Torri // Carbohydrate Polymers. 1990. - Vol. 12, No. 4. - P. 405-418.

44. Anthonsen, M. W. Solution properties of chitosans: conformation and chain stiffness of chitosans with different degrees of N-acetylation / M. W. Anthonsen, К. M. Varum, O. Smidsrod // Carbohydrate Polymers. 1993. - Vol. 22, No. 3. - P. 193-201.

45. Application and properties of chitosan / Q. Li, E. T. Dunn, E. W. Grandmaison, M. F. A. Goosen // Journal of Bioactive and Bompatible Polymers. 1992. - Vol. 7, No. 4. - P. 370-397.

46. Araki, Y. A pathway of chitosan formation in Mucor rouxii. Enzymatic deacetylation of chitin / Y. Araki, E. Ito // European Journal of Biochemistry. -1975.-Vol. 55, No. 1.-P. 71-78.

47. Austin, P. R. Beta-chitin from squid: new solvents and plasticizers / P. R. Austin, J. E. Castle, C. J. Albisetti // Chitin and Chitosan: Sources, Chem.,

48. Biochem., Phys. Prop, and Appl.: Proc. 4th Int. Conf., Trondheim, Aug. 22-24, 1988. London, New York, 1989. - P. 749-755.

49. BeMiller, J. N. Alkaline degradation of amino sugars / J. N. BeMiller, R. L. Whistler // The Journal of Organic Chemistry. 1962. - Vol. 27, No. 4. - P. 1161-1164.

50. Capon, B. The preparation of chitin oligosaccharides / B. Capon, R. L. Foster // Journal of the Chemical Society. Section C. 1970. - No. 12. - P. 16541655.

51. Chang, K. L. B. HPLC analysis of N-acetyl-chito-oligosaccharides during the acid hydrolysis of chitin / K. L. B. Chang, J. Lee, W.-R. Fu // Journal of Food and Drug Analysis. 2000. - Vol. 8, No. 2. - P. 75-83.

52. Chen, X.-G. Chemical characteristics of O-carboxymethyl chitosans related to the preparation conditions / X.-G. Chen, H.-J. Park // Carbohydrate Polymers. 2003. - Vol. 53, No. 4. - P. 355-359.

53. Chitin/chitosan transformation by thermomechanochemical treatment including characterization by enzymatic depolymerization / A. Pelletier et al. // Biotechnology and Bioengineering. 1990. - Vol. 36, No. 3. - P. 310-315.

54. Chitosan and modified chitosan membranes. 1. Preparation and characterization / H. S. Blair, J. Guthrie, Т. K. Law, P. Turkington // Journal of Applied Polymer Science. 1987. - Vol. 33, No. 2. - P. 641-656.

55. Chitosans from Euphausia superba. 1: Solution properties / M. Terbojevich et al. // Carbohydrate Polymers. 1992. - Vol. 18, No. 1. - P. 35-42.

56. Chitosans from Euphausia superba. 2: Characterization of solid state structure / B. Focher et al. // Carbohydrate Polymers. 1992. - Vol. 18, No. 1. -P. 43-49.

57. C-N.m.r. studies of the acetylation sequences in partially N-deacetylated chitins (chitosans) / К. M. Varum, M. W. Anthonsen, H. Grasdalen, O. Smidsrod // Carbohydrate Research. 1991. - Vol. 217. - P. 19-27.

58. Deacetylation of chitin at low temperature by a novel alkaly impregnation technique / S. S. V. Rao, K. P. Yashodha, N. S. Mahendrakar, P. Puttarajappa // Indian Journal of Technology. 1987. - Vol. 25, No. 4. - P. 194196.

59. Domard, A. Preparation and characterization of fully deacetylated chitosan / A. Domard, M. Rinaudo // International Journal of Biological Macromolecules. 1983. - Vol. 5, No. 1. - P. 49-52.

60. Domszy, J. G. Evaluation of infrared spectroscopic techniques for analysing chitosan / J. G. Domszy, G. A. F. Roberts // Die Makromolekulare Chemie.- 1985.-Vol. 186,No. 8.-P. 1671-1677.

61. East, G. C. Wet spinning of chitosan and the acetylation of chitosan fibers / G. C. East, Y. Qin // Journal of Applied Polymer Science. 1993. - Vol. 50, No. 10.-P. 1773-1779.

62. Foster, A. B. Application of ethylenediaminetetra-acetic acid in the isolation of crustacean chitin / A. B. Foster, R. H. Hackman // Nature. 1957.t Vol. 180, No. 4575.-P. 40-41.

63. Gardner, К. H. Refinement of the structure of beta-chitin / К. H. Gardner, J. Blackwell // Biopolymers. 1975. - Vol. 14, No. 8. - P. 1581-1595.

64. Gilson, E. Das Chitin und die Membranen der Pilzzellen / E. Gilson // Berichte der deutschen chemischen Gesellschaft. 1895. - Vol. 28, No. 1. - P. 821-822.

65. Heterogeneous N-deacetylation of chitin in alkaline solution / K. L. B. Chang, G. Tsai, J. Lee, W.-R. Fu // Carbohydrate Research. 1997. - Vol. 303. -P. 327-332.

66. Highly deacetylated chitosan and its properties / S. Mima, M. Miya, R. Iwamoto, S. Yoshikawa // Journal of Applied Polymer Science. 1983. - Vol. 28, No. 6.-P. 1909-1917.

67. Imoto, T. A simple activity measurement of lisozyme / T. Imoto, K. Yagishita // Agricultural and Biological Chemistry. 1971. - Vol. 35, No. 7. - P. 1154-1156.

68. Khan, T. A. Reporting degree of deacetylation values of chitosan: the influence of analytical methods / T. A. Khan, К. K. Peh, H. S. Chang // Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Science. 2002. - Vol. 5, No. 3. - P. 205-212.

69. Kurita, K. Controlled functionalization of the polysaccharide chitin / K. Kurita // Progress in Polymer Science. 2001. - Vol. 26, No. 9. - P. 1921-1971.

70. Kurita, K. Studies on chitin, 3. Preparation of pure chitin, poly(N-acetyl-D-glucosamine), from the water-soluble chitin / K. Kurita, T. Sannan, Y. Iwakura // Die Makromolekulare Chemie. 1977. - Vol. 178, No. 9. - P. 25952602.

71. Lusena, С. V. Preparation and viscosity of chitosan / С. V. Lusena, R. C. Rose // J. Fish. Res. Board of Canada. 1953. - Vol. 10. - P. 521-522.

72. Mazeau, K. Molecular and crystal structure of a high-temperature polymorph of chitosan from electron diffraction data / K. Mazeau, W. Winter, H. Chanzy // Macromolecules. 1994. - Vol. 27, No. 26. - P. 7606-7612.

73. Minke, R. The structure of alpha-chitin / R. Minke, J. Blackwell // Journal of Molecular Biology. 1978. -Vol. 120, No. 2.-P. 167-181.

74. Miyazaki, S., Ishii K. Nagai T. The use of chitin and chitosan as drug carries // Chem. and Pharm. Bull.-1981.- Vol. 29, No. 10.- P. 3067-3069.

75. Molecular and crystal structure of the anhydrous form of chitosan / T. Yui et al. // Macromolecules. 1994. - Vol. 27, No. 26. - P. 7601-7605.

76. Muzzarelli, R. A. A. Chitin / R. A. A. Muzzarelli. Oxford, New York et al. : Pergamon Press, 1977. - 309 p.

77. N-Acetyl group distribution in partially deacetylated chitins prepared under homogeneous conditions / H. Sashiwa, H. Saimoto, Y. Shigemasa, S. Tokura // Carbohydrate Research. 1993. - Vol. 242. - P. 167-172.

78. No, H. K. Preparation and characterization of chitin and chitosan a review / H. K. No, S. P. Meyers // Journal of Aquatic Food Product Technology. -1995.-Vol. 4, No. 2.-P. 27-52.

79. Nordtveit, R. J. Degradation of fully water-soluble, partially N-acetylated chitosans with lysozyme / R. J. Nordtveit, К. M. Varum, O. Smidsrod // Carbohydrate Polymers. 1994. - Vol. 23, No. 4. - P. 253-260.

80. Novikov, V. Yu. Hydrolysis of chitin and chitosan / V. Yu. Novikov // 9th International Chitin-Chitosan Conference. Montreal, Quebec, Canada. August 27th-30lh, 2003: Book of abstracts. Montreal, Quebec, Canada, 2003. - P . 41.

81. Novikov, V. Yu. The hydrolysis of chitin and the preparation of D(+)-glucosamine hydrochloride / V. Yu. Novikov // Chitosan in Pharmacy and Chemistry / Ed. by R. A. A. Muzzarelli and C. Muzzarelli. Atec, Italy, 2002. - P. 505-510.

82. Ogawa, K. Crystallinity of partially N-acetylated chitosans / K. Ogawa, T. Yui // Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 1993. - Vol. 57, No. 9. -P. 1466-1469.

83. Molecular and crystal structure of hydrated chitosan / K. Okuyama et al. // Macromolecules. 1997. - Vol. 30, No. 19. - P. 5849-5855.

84. On the influence of deacetylation process on the physicochemical characteristics of chitosan from squid chitin / A. Tolaimate et al. // Polymer. -2000. Vol. 41, No. 7. - P. 2463-2469.

85. Ottoy, M. H. Compositional heterogeneity of heterogeneously deacetylated chitosans / M. H. Ottoy, К. M. Varum, O. Smidsrod // Carbohydrate Polymers. 1996. - Vol. 29, No. 1. - P. 17-24.

86. Paralikar, К. M. Electron diffraction study of alfa-chitin / К. M. Paralikar, R. H. Balasubramanya // Journal of Polymer Science Part C: Polymer Letters. 1984. - Vol. 22, No. 10. - P. 543-546.

87. Pilot scale lactic acid fermentation of shrimp wastes for chitin recovery / L. A. Cira, S. Huerta, G. M. Hall, K. Shirai // Process Biochemistry. 2002. -Vol. 37, No. 12.-P. 1359-1366.

88. Preapration and solubility in acid and water of partially deacetylated chitins / Y.-W. Cho, J. Jang, C. R. Park, S.-W. Ко // Biomacromolecules. 2000. -Vol. 1,No. 4.-P. 609-614.

89. Purchase, E. R. D-Glucosamine hydrochloride / E. R. Purchase, С. E. Braun // Organic Syntheses. 1946. - Vol. 26. - P. 36-37.

90. Reissig, J. L. A modified colorimetric method for the estimation of N-acetylamino sugars / J. L. Reissig, J. L. Strominger, L. F. Leloir // The Journal of Biological Chemistry. 1955. - Vol. 217, No. 2. - P. 959-966.

91. Roseman, S. N-Acetylation of the hexosamines / S. Roseman, J. Ludowieg // Journal of the American Chemical Society. 1954. - Vol. 76, No. 1. -P. 301-302.

92. Rudall, K. N., The chitin system / K. N. Rudall, N. Kenchington // Biochemistry Revolution.- 1973.- Vol. 49, No 4.- P. 597-636.

93. Sakurai, K. Crystal structure of chitosan. I. Unit cell parameters / K. Sakurai, M. Takagi, T. Takahashi // Сэръи гаккайси, Sen-i gakkaishi = J. Soc. Fiber Sci. and Technol., Jap. 1984. - Vol. 40, No. 7. - P. 114-121.

94. Sannan, T. Studies on chitin, 1. Solubility change by alkaline treatment and film casting / T. Sannan, K. Kurita, Y. Iwakura // Die Makromolekulare Chemie. Short Communications. 1975. - Vol. 176, No. 4. - P. 1191-1195.

95. Sannan, Т. Studies on chitin, 2. Effect of deacetylation on solubility / T. Sannan, K. Kurita, Y. Iwakura // Die Makromolekulare Chemie. 1976. - Vol. 177, No. 12.-P. 3589-3600.

96. Sannan, T. Studies on chitin. V. Kinetics of deacetylation reaction / T. Sannan, K. Kurita, Y. Iwakura // Polymer Journal. 1977. - Vol. 9, No. 6. - P. 649-651.

97. Sashiwa, H. Chemical modification of chitin and chitosan. 2: Preparation and water soluble property of N-acylated or N-alkylated partially deacetylated chitins / H. Sashiwa, Y. Shigemasa // Carbohydrate Polymers. 1999. -Vol.39, No. 2.-P. 127-138.

98. Specificity in acid hydrolysis of chitosans/ К. M. Varum et al. // Advances in Chitin Science / Ed. by A. Domard, C. Jeuniaux, R. Muzzarelli, G. Roberts.- 1996.-Vol. l.-P. 173-183.

99. Squid chitin as a potential alternative chitin source: deacetylation behavior and characteristic properties / K. Kurita et al. // Journal of Polymer Science. Part A, Polymer Chemistry. 1993. - Vol. 31, No. 2. - P. 485-491.

100. Structural aspects of the swelling of beta-chitin in HC1 and its conversion into alpha-chitin / Y. Saito et al. // Macromolecules. 1997. - Vol. 30,No. 13.-P. 3867-3873.

101. Structure of beta-chitin or parallel chain systems of poly-beta-(l-4)-N-acetyl-D-glucosamine/ J. Blackwell et al.// ACS Symp. Ser.- 1980,- Vol. 141.- P. 315.

102. Takeda, M. Chitin adsorbent in thin-layer chromatography for separation of phenols and aminoacids/ M.Takeda, T. Tamida T. // Shimonoseki University Fish. 1969. - Vol. 18. - P.36-44.

103. Varum, К. M. Acid hydrolysis of chitosans / К. M. Varum, M. H. Ottoy, 0. Smidsrod // Carbohydrate Polymers. 2001. - Vol. 46, No. 1. - P. 8998.

104. Wang, T. Selected properties of pH-sensitive, biodegradable chitosan-poly(vinyl alcohol) hydrogel / T. Wang, M. Turhan, S. Gunasekaran // Polymer International. 2004. - Vol. 53. - P. 911-918.

105. Yaghobi, N. Enhancement of chitin's degree of deacetylation by multistage alkali treatments / N. Yaghobi, H. Mirzadeh // Iranian Polymer Journal. -2004.-Vol. 13, No. 2.-P. 131-136.