Разработка технологии получения хитиновых олигосахаридов и применения их для интенсификации процессов культивирования дрожжей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Максимова, Екатерина Вячеславовна

• Максимова, Екатерина Вячеславовна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Максимова, Екатерина Вячеславовна

1. Стр.

ВВЕДЕНИЕ.5

- актуальность проблемы; 5

- цель работы; 7

- научная новизна; 8

- практическая ценность и промышленная реализация результатов исследований; 10

- объем и структура работы;

- основное содержание работы. 12-

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 14

1.1.Компонентный состав и проницаемость клеточных стенок дрожжей.14

1.2.Интенсификация роста дрожжевых клеток с использованием биостимуляторов. 21

1.3.Биологически активные материалы на основе хитина панцирей ракообразных.31

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии получения хитиновых олигосахаридов и применения их для интенсификации процессов культивирования дрожжей»

Актуальность проблемы. В последние годы во всем мире наблюдается значительный интерес к биотехнологическим процессам, в которых целевые продукты синтезируются в ходе жизнедеятельности клеток микроорганизмов. Клетки при этом растут, развиваются, потребляют питательные вещества и энергию. При решении проблемы удовлетворения потребности населения в полноценном белке мы обратили внимание на то, что многие микроорганизмы обладают высокими скоростями синтеза биомассы и белков. В этом плане значительный интерес представляют дрожжи, поскольку для них характерны достаточно высокие темпы роста, быстрое накопление биомассы и белков, а в связи с достаточно большими размерами их клеток они удобны для использования в промышленных масштабах. Белки дрожжей по аминокислотному составу соответствуют белкам животных. Дрожжи можно также рассматривать как: источник для получения ряда очень ценных препаратов медицинского и ветеринарного назначения, а также для получения таких целевых продуктов, как этанол. Основной стадией получения биомассы является стадия выращивания дрожжей, в процессе которой создаются условия для накопления максимального количества биомассы требуемого качества. Одной из предпосылок разработки интенсивных технологических процессов получения биомассы является обеспечение максимальной скорости роста культуры при минимальном содержании субстрата на выходе из ферментера, т.е. максимальная продуктивность ферментера должна коррелировать с полнотой исчерпания субстрата и минимальным накоплением в среде побочных продуктов метаболизма [23], что достигается при точном соответствии скорости подачи субстрата предельной способности клеток утилизировать его в данных условиях культивирования [178].

Питательные среды и источники энергии в крупномасштабном производстве могут оказывать серьезное тормозящее влияние на ход биотехнологических процессов. Интенсификации процесса биосинтеза биомассы и целевых продуктов при использовании дрожжей способствует введение в питательную среду биостимуляторов. При этом интенсификация биотехнологических производств осуществима путем ускорения метаболических процессов, включающих десятки и сотни ферментных реакций, устранения всякого рода «узких мест», приводящих к ингибированию ферментативных реакций, снижению скоростей массопереноса субстратов и продуктов и т.д.

Следует учитывать, что потребность микроорганизмов в биостимуляторах не абсолютна и может меняться в зависимости от состава питательной среды и условий культивирования (рН, температура и др.). В связи с этим выявление стимуляторов и условий их действия на популяцию чрезвычайно важно для достижения максимальной продуктивности, при минимальных затратах.

В процессе их использования, помимо интенсифицирующего рост клеток действия, следует учитывать и другие показатели: качество получаемого продукта и затраты на применение стимулятора. В затраты прежде всего входят стоимость самого стимулятора, стоимость его транспортировки, дозировки и длительность его воздействия на технологический процесс, т.е. необходимо учитывать экономическую эффективность использования тех или иных стимуляторов.

Применение биостимуляторов приводит к более полному потреблению компонентов питательной среды, что позволяет организовать технологический процесс по замкнутому циклу, снизить нагрузки на очистные сооружения и тем самым повысить экологическую чистоту производства. Больше того, они, как правило, повышают качество биомассы, что проявляется в увеличении содержания белка в биомассе и улучшении других показателей, а также позволяют увеличивать выпуск целевых продуктов, образующихся в процессе жизнедеятельности дрожжей, в частности, этанола.

В настоящее время разработка технологий получения и применения высокоэффективных биостимуляторов при культивировании клеток для осуществления биотехнологических процессов синтеза, гидролиза, окисления, перегруппировок и др., чрезвычайно актуальна, главным образом, применительно к крупнотоннажным производствам. Это объясняется тем, что использование их позволяет получать значительный экономический эффект без каких-либо затрат для введения дополнительного оборудования и изменения технологических схем производства. При этом было выявлено, что наиболее эффективно использование композиционных биостимуляторов, включающих ряд биологически активных компонентов, синергически усиливающих действие друг друга. В этом плане оказалась перспективным включение в состав таких композитов водорастворимых хитиновых олигосахаридов (ХОС) со степенью полимеризации 3-8, получаемых прямой деполимеризацией хитина. В связи с этим разработка методов их анализа, оптимизация технологии их получения и использование для интенсификации биотехнологических процессов представляет научный интерес и имеет важное практическое значение.

Следует отметить, что исследования проводились с дрожжами Saccharomyces cerevisiae, выращиваемых на зерновом сусле. Однако как методические подходы, так и полученные нами результаты могут быть использованы при конверсии различных субстратов, т.е. при решении общих вопросов, относящихся к крупнотоннажной биотехнологии, в медицинской и микробиологической промышленности.

Цель и задачи исследования. Целью настоящих исследований является разработка технологии получения хитиновых олигосахаридов, научное обоснование их включения в состав композиционных биостимуляторов для создания высокопроизводительных биотехнологических процессов культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae на гидролизатах зерносырья.

В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи: -разработка новой, упрощенной методики анализа водорастворимых продуктов, образующихся в результате деградации хитина;

-проведение исследований по разработке эффективной технологии получения олигосахаридов хитина (хитодекстринов - ХД) на основе сернокислотной деградации хитина крабов и разработка принципиальных схем получения различных продуктов на основе получаемого гидролизата;

-наработка в камеральных условиях партий хитиновых олигосахаридов и проведение испытаний на их безвредность, безопасность и биологическую активность;

-исследование влияния хитиновых олигосахаридов на процессы генерации дрожжей Saccharomyces cerevisiae и сбраживания зернового сусла, а также на рост овощных культур;

-разработка высокоэффективных композиционных биостимуляторов роста дрожжевых клеток и спиртообразования, включающих биологически активные хитиновые олигосахариды;

-апробация и внедрение основных результатов исследований в промышленных условиях культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae.

Научная новизна работы заключается в создании нового направления в исследованиях, касающихся интенсификации процессов получения биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae повышенной биологической ценности, а также продукта жизнедеятельности дрожжевых клеток - этанола, с использованием композиционных биостимуляторов (КБС). При этом в процессе исследований получены новые научные результаты методического, теоретического и прикладного характера:

1. Разработана новая упрощенная методика оценки содержания водорастворимых хитиновых продуктов, получаемых в результате как кислотного, так и ферментативного гидролиза хитин-хитозанов. В соответствии с этой методикой весь анализ от внесения раствора вещества до колориметрирования проводят в одной и той же пробирке, благодаря использованию на стадии гидролиза малых объемов (0,2 мл) всех растворов, азеотропной смеси HCL и неполной нейтрализации кислотного гидролизата, что обеспечило значительную точность и воспроизводимость получаемых результатов. Впервые проведено комбинирование двух методов анализа хитиновых продуктов, из которых один позволяет оценивать общее содержание водорастворимых компонентов хитина, а другой его мономер, N - АГА. Это позволило охарактеризовать эффективность кислотного гидролиза хитина и качество гидролизата.

2. Показана принципиальная возможность получения в одну стадию водорастворимых биологически активных олигосахаридов хитина с оптимальной степенью полимеризации (3-8), - хитодекстринов (ХД) с широким спектром биологической активности.

3. Установлено стимулирующее действие ХД на рост дрожжевых клеток, спиртообразование, а также на рост овощных культур и прорастание семян.

4. Научно обоснована необходимость разработки и состав композиционных биостимуляторов ростка клеток на основе отобранных в процессе скрининга биологически активных соединений, способных интенсифицировать метаболизм дрожжевых клеток.

5. Впервые выявлено стимулирующее действие высокоэффективных КБС на процессы дрожжегенерации и спиртового брожения при культивировании дрожжей Saccharomyces cerevisiae на средах с зерновым суслом; показано, что использование КБС в сверхмалых оказывает стимулирующее действие на физиологическую активность, морфофизиологическое состояние, рост и размножение, продуктивность и бродильную способность этих дрожжей. Впервые показано, что КБС в периодических и непрерывных режимах, в лабораторных и промышленных условиях способны в значительной степени интенсифицировать рост дрожжевых клеток, что проявлялось в улучшении основных технологических показателей производства (увеличение продуктивности культуры, снижение расходных коэффициентов по субстрату) и качества получаемого продукта. В процессах спиртообразования стимулирующее действие высокоэффективных КБС проявлялось в улучшении морфо-физиологического состояния дрожжевых клеток и увеличении их количества [в дрожжегенераторах;] в значительном сокращении времени спиртообразования, в более глубоком и ускоренном потреблении сухих веществ, снижении количества недоброженных углеводов бражки, увеличении выхода спирта от потребленного крахмала зер-носырья при соответствии качества спирта марке «Люкс».

6. Установлено существенное увеличение общей активности КБС по сравнению с суммарной активностью отдельных компонентов при значительном снижении удельного расхода последних за счет их синергического действия.

Практическая ценность работы заключается в разработке и практической реализации высокопроизводительных, энерго- и ресурсосберегающих - биотехнологических процессов получения высококачественной биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae и этанола с использованием композиционных биостимуляторов роста клеток:

1. Разработана эффективная технология прямой деполимеризации хитина панцирей крабов действием на него концентрированной серной кислотой, которая позволяет не только получать в одну стадию биологически активные хитиновые олигосахариды с оптимальной степенью полимеризации (3-8) и выпускать два новых продукта, но и избежать многих экологических проблем, связанных с необходимостью утилизации больших количеств едких отходов, образующихся при получении БАВ на основе хитина в соответствии с другими известными технологиями.

2. Разработаны технологическая схема получения на основе гидролизата хитина водорастворимого биологически активного препарата - хитодекстрин-1 (ХД-1) и безотходная технологическая схема, позволяющая создать экологически чистое производство с ресурсосберегающей технологией частично растворимого биологически активного препарата - хитодекстрин-2 (ХД-2, или соли-хит).

3. Выявление значительной биологической активности хитиновых олиго-сахаридов позволило широко рекомендовать их использование в различных об ластях народного хозяйства в качестве активного стимулятора роста и развития растений, молодняка животных и птицы, бифидобактерий, дрожжевых клеток, процессов спиртообразования.

4. Использование КБС в условиях крупнотоннажных производств получения биомассы и этанола позволяет получать значительный экономический эффект без каких-либо затрат для введения дополнительного оборудования и изменения технологических схем производства. Так, внедрение КБС при производстве кормового белкового продукта «Провита» на Новополоцком заводе БВК (Республика Беларусь) позволило существенно улучшить все технологические показатели производства, улучшить качество биомассы дрожжей-сахаромицетов и получить годовой экономический эффект от использования КБС-1 в размере 352 млн. руб./год, а от КБС-2 - 645 млн.руб./год.

Более полное потребление субстрата и продуктов метаболизма в кулыу-ральной жидкости в присутствии биостимуляторов позволяет значительно снижать сброс загрязнений на очистные сооружения и тем самым достигать существенного улучшения экологической обстановки на заводах по производству БВК на основе зерносырья. Сокращение времени брожения в условиях спиртовых заводов позволяет увеличить коэффициент использования оборудования, так как увеличивает количество технологических циклов каждого бродильного чана, а, следовательно, и общую мощность завода.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на: IV Всероссийской конференции «Производство и применение хитина и хитозана», ВНИРО, Москва, 25-28 апреля, 1995, 57-59; IV съезде общества биотехнологов России, Пущино, 6-7 декабря, 2006; Международной научно-практической конференции «Биотехнология. Вода и пищевые продукты», Москва, Россия 1113 марта 2008.

Публикации. Материалы диссертации отражены в 9. печатных работах, в том числе получен патент РФ.

Объем и структура работы. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, изложенной в 5 главах; выводов и списка литературы, включающего 239 работ, в том числе 181 отечественных и 58

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Максимова, Екатерина Вячеславовна

ВЫВОДЫ.

Разработка научных основ получения и практическая реализация в промышленных условиях композиционных биостимуляторов позволили создать высокопроизводительные ресурсосберегающие биотехнологические процессы получения высококачественной биомассы дрожжей-сахаромицетов и такого целевого продукта, как этанол.

В процессе исследований:

1 .Разработана унифицированная колориметрическая методика, позволяющая осуществлять массовые анализы как общего количества всех водорастворимых хитиновых продуктов, так и отдельно мономера N - АГА для характеристики эффективности кислотного гидролиза хитина и качества получаемого гидролизата.

2.Разработана новая, экономичная и эффективная технология получения в одну стадию водорастворимых фракций биологически активных хитиновых олигосахаридов из хитина ракообразных животных прямой деполимеризацией его концентрированной серной кислотой. Установлено, что разработанная технология не только обеспечивает значительное снижение расхода реактивов, но и позволяет устранять многие экологические проблемы, связанные с необходимостью утилизации больших количеств едких отходов, образующихся при получении БАВ на основе хитина в соответствии с другими известными технологиями.

3. Разработаны 2 технологические схемы, позволяющие получать следующие биологически активные продукты на основе хитина ракообразных животных:

-водорастворимый препарат - хитодекстрин-1 (ХД-1), представляющий собой смесь мономера (N - ацетил - Д - глюкозамина) и нескольких хитиновых олигомеров со степенью полимеризации 3-8;

-частично растворимый препарат - «хитодекстрин-2» (ХД-2, или солихит), получаемый по безотходной технологии и содержащий, наряду с водорастворимыми олигосахаридами, коллоидный хитин и сульфат кальция.

4. Выявлена высокая биологическая активность хитиновых олигосахаридов: в процессах культивирования дрожжей Saccharomyces cerevisiae при выращивании дрожжей на среде с мелассой в присутствии 5 ■ 10"3 -5 ■ 10"5 % солихита к объему питательной среды относительный прирост биомассы составил 17-19%, белка - 4,3-6,3%, при выращивании на среде с л г зерновым сырьем в присутствии 1-10" 1 * 10" % солихита относительный прирост биомассы составил 3 - 6,5%, белка - 4,8 - 7,0%; в процессах спиртообразования на средах с зерновым суслом выявлено повышение бродильной активности дрожжей в присутствии 5 • 10"4 % солихита, что проявилось в увеличении крепости бражки, снижении несброжен-ных углеводов и увеличении выхода спирта на 1,1 - 0,62% по сравнению с контрольными вариантами: токсикологические исследования выявили полную безвредность и безопасность хитодекстрина для использования как в медицинской практике, так и в животноводстве, птицеводстве и растениеводстве; выявлена значительная бифидогенная активность препарата для преодоления дисбиоза кишечника и стимуляции иммунитета (при выращивании некоторых штаммов бифидобактерий in vitro достигнуто 100 - кратное увеличение биомассы; в условиях in vivo показана высокая эффективность в нормализации кишечного микробиоценоза, нарушенного введением антибиотиков); показано, что введение незначительных количеств ХД в рацион цыплят позволяет создавать высокоэффективные композиции и тем самым снижать дозировки и расходы наиболее дорогостоящих добавок.

5.Показано, что солихит является активным стимулятором роста и развития растений, что проявилось в 66%-ной прибавке биомассы таких овощных культур, как салат, и увеличении прорастания семян столовой свеклы на 57-60%.

6. Проведенный нами скрининг биостимуляторов, а также отработка технологии получения хитодекстрина и обнаружение его способности синер-гически усиливать действие других биологически активных компонентов, позволили создать высокоэффективные композиционные биостимуляторы, что позволило значительно повысить биологическую активность и резко снизить удельный расход изученных стимуляторов за счет их синергического действия (синергический эффект) в КБС. Выявлено, что в композициях стимуляторов природа и концентрации отдельных компонентов оказывали существенное влияние на технологические показатели процесса выращивания качество биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae; при этом наиболее важные показатели биотехнологического процесса культивирования биомассы претерпевали изменения в целом в благоприятную сторону лишь при определенных количественных соотношениях их в композиции. Установлено, что в зависимости от необходимости решения различных задач можно изменять биологическую активность композиционных биостимуляторов, изменяя состав и соотношение отдельных компонентов.

7.Разработанные нами композиционные биостимуляторы были испытаны как в лабораторных, так и промышленных условиях, в периодическом и непрерывном режимах, для получения биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae на средах с гидролизатами зерносырья. Испытания KBCi и ЬСБСг в лабораторных условиях позволили снизить остаточные РВ на 50-85%, повысить концентрацию биомассы на 6-20%, повысить относительное содержание сырого протеина на 15-20%. Внедрение КБС и КБС2 на Новополоцком заводе БВК (Республика Беларусь) позволило существенно интенсифицировать процесс выращивания дрожжей-сахаромицетов, улучшить технологические показатели, увеличить продуктивность, снизить расходные показатели, улучить качество готового продукта по содержанию белка и других компонентов. При использовании КБС при производстве кормового продукта «Прови-та» увеличилась скорость выращивания биомассы: время выращивания снижалось с 8 часов, до 6,5-7,0 часов (на 10-20 %); проток увеличился с 13 до 21 м3/час (24-39% отн.). Расходный коэффициент по зерносырью снизился на 8,4-11,4% отн. Суточная выработка «Провита» на одном аппарате возрастала на одном аппарате на 26-33 т/сутки (32-40% отн.); при этом содержание сырого протеина возросло на 3,5%, а белка по Барнштейну на 5,0-5,2% .

-Годовой экономический эффект при получении провита (биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae) в условиях РУП Новополоцкого завода БВК составляет:

- от использования КБС-1 - 352127760 руб./год; от КБС-2 -645567500 руб./год.

8.В лабораторных и промышленных условиях выявлено стимулирующее действие КБС на процессы дрожжегенерации и спиртового брожения, что проявлялось в улучшении морфофизиологического состояния дрожжевых клеток и увеличении их количества в дрожжегенераторах, сокращении времени спиртообразования на 10-18 часов; более глубоком и ускоренном потреблении сухих веществ; снижении количества недоброженных углеводов бражки; увеличении выхода спирта от потребленного крахмала зерносырья на 0,6-2%. Ускорение брожения (сокращение времени брожения) в условиях спиртовых заводов позволяет увеличить коэффициент использования оборудования, так как увеличивает количество технологических циклов каждого бродильного чана, а, следовательно, и общую мощность завода. Испытания показали перспективность использования КБС в спиртовой промышленности, поскольку позволяют снижать время спиртообразования, увеличивать выпуск спирта и улучшать его качество.

Таким образом, использование композиционных биостимуляторов в условиях крупнотоннажных производств как получения биомассы, так и спирта позволяет получать значительный экономический эффект без каких-либо затрат для введения дополнительного оборудования и изменения технологических схем производства как за счет увеличения скорости роста культуры, так и увеличения выхода целевого продукта от используемого субстрата, при одновременном улучшении качества получаемых целевых продуктов.

1.4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

В результате изучения патентных и научно-технических литературных сведений отечественных и зарубежных ученых установлена возможность использования разнообразных биологически активных соединений в качестве стимуляторов роста микроорганизмов, в частности, дрожжей. Однако, при этом было выявлено, что подавляющее большинство публикаций касалось интенсификации роста дрожжей рода Candida на сравнительно бедных синтетических средах и прежде всего дрожжей парафинокисляющих, крупнотоннажное производство биомассы которых (БВК, или «Паприн») бурно развивалось в нашей стране в течение 30 лет. Интенсификация процесса получения паприна с использованием биостимуляторов позволяла получать значительный экономический эффект.

К началу нашей работы на территории бывшего СССР производство паприна было практически полностью ликвидировано, а заводы уничтожены, за исключением завода БВК в г. Новополоцке (Республика Беларусь). На этом единственном, неразрушенном заводе БВК было организовано производство биомассы дрожжей Saccharomyces cerevisiae на гидролизатах зерно-сырья - «Провита». На территории России в настоящее время имеется значительное количество биотехнологических производств, связанных с культивированием дрожжей Saccharomyces cerevisiae на таких углеводсодержащих средах, как меласса или гидролизаты растительного сырья, главным образом, зерносырья. Эти производства направлены либо на получение биомассы, либо таких целевых продуктов, как этанол. Однако технология получения этих продуктов на большинстве заводов остается еще не совершенной, она нуждается в значительной интенсификации, поскольку время культивирования дрожжей остается достаточно продолжительным, расходные коэффициенты велики, а качество биомассы часто не соответствовало предъявляемым требованиям. Кроме того, в связи с резким повышением цен на зерносырье и электроэнергию, интенсификация таких производств для улучшения технологических показателей становится особенно актуальной.

Анализ двух метаболических систем, а именно культивирования дрожжей-сахаромицетов на средах с мелассой и зерносырьем и парафино-кисляющих дрожжей рода Candida на синтетических средах с очищенными жидкими парафинами, показал, что технологические приемы, разработанные ранее для получения паприна, не могли быть использованы непосредственно для решений поставленных перед нами задач. Это было обусловлено целым рядом отличий, связанных прежде всего со спецификой углеводородного типа питания. Особенностью биохимии таких дрожжей является стадия первичного окисления н-алканов, которые относятся к инертным химическим веществам, а именно, первичное окисление парафинов осуществляется содержащей цитохром Р-450 монооксигеназной системой в микросомальной мембранной фракции. Найдено, что цитохром Р-450 индуцируется лишь у алканокисляющих дрожжей; при росте на интермедиатах максимальное его содержание в клетках в 3-4 раза меньше, чем при росте на гексадекане. При выращивании дрожжей-сахаромицетов на этаноле и глюкозе Р-450 не индуцировался совсем.

Это оказывает существенное влияние на технологические показатели роста и компонентный состав биомассы и клеточных стенок дрожжей. Кроме того, состав синтетических питательных парафин- или углеводсодержащих сред несопоставимо более бедный по сравнения со средами с мелассой и зерносырьем. В связи с этим многие из тех компонентов, которые могли бы стимулировать рост парафинокисляющих дрожжей, уже входят в состав мелассы или гидролизатов зерносырья.

Для эффективного решения возникших проблем был необходим новый комплексный подход с использованием экологически безопасных технологий и натуральных биорегуляционных средств.

Нами разработаны новые, более совершенные технологические решения интенсификации процессов культивирования микроорганизмов с использованием композиционных биостимуляторов (КБС).

Выявление в процессе скрининга стимуляторов значительной биологической активности различных соединений, полученных на основе хитина, и обнаружение способности хитиновых олигосахаридов синергически усиливать действие других ценных биологически активных компонентов послужили обоснованием необходимости проведения углубленных исследований по отработке методов анализа и технологии получения этих соединений.

Отработана технология получения в одну стадию водорастворимых хитиновых олигосахаридов действием на хитин ракообразных животных концентрированной серной кислотой. На основе этой технологии разработаны технологические схемы для получения двух продуктов: полностью растворимого хитодекстрина-1 и частично растворимого хитодекстрина-2, которые различались как по способу их получения, так и по составу.

В результате проведенных наукоемких экспериментально-практических работ, медицинских, биологических и клинических исследований и наблюдений в стационарных условиях выявлены высокая эффективность, безопасность и целесообразность широкого применения новых натуральных препаратов-хитиновых олигосахаридов- для людей, животных, растений и микроорганизмов.

ХД обладают полифункциональными свойствами и широким спектром практического применения. Их использование, в частности, дает возможность предотвратить и снизить загрязнение среды обитания вредными веществами и токсичными для живых организмов соединениями.

С целью интенсификации биотехнологических процессов нами были разработаны методы нанобиотехнологии, заключающиеся в том, что сконструированные композиции из отдельных, наиболее перспективных биологиче ски активных соединений на молекулярном уровне - композиционные биостимуляторы (КБС) - при использовании в сверхмалых дозах (1-10"8-1-10"10%) позволяют целенаправленно управлять биохимическими процессами различных организмов и регулировать состав и свойства получаемых продуктов. Выявлена хорошая воспроизводимость результатов в лабораторных и промышленных условиях, соответствие проведенных исследований мировому уровню и современным научным тенденциям. Использование КБС приводит к существенному увеличению рентабельности действующих заводов. Так, в промышленных условиях (Новополоцкий завод БВК, республика Беларусь) интенсификация процесса получения дрожжевой биомассы («Провита») позволила получить экономический эффект от использования КБС-1-352127760 руб./год; КБС-2-645567500 руб/год. При этом существенно улучшалось качество готового продукта, что проявлялось прежде всего в увеличении содержания как сырого протеина, так и истинного белка. Использование КБС в промышленных условиях на 16 спиртовых заводах позволило получить значительный экономический эффект, поскольку приводило к увеличению выхода спирта от крахмала зерносырья на 1,5-2,0%, и существенному увеличению производства спирта в опытных вариантах (чанах) по сравнению с контрольными. Существенный экономический эффект дает также сокращение времени брожения, поскольку при этом увеличивается коэффициент использования оборудования, так как увеличивается количество технологических циклов каждого бродильного чана, а, следовательно, общая мощность завода. При этом также улучшается качество получаемого этанола, поскольку в нем снижается количество нежелательных примесей.

Универсальная, доступная и малозатратная нанобиотехнология основана на новых принципах революционной значимости для биотехнологической промышленности.

От известных в мире и применяемых в промышленных условиях технологий разработанная нами технология отличается простотой, дешевизной, высоким ресурсосберегающим эффектом, экологической безопасностью для обслуживающего персонала, потребителей и окружающей среды.

Технологические процессы исключают длительные многоступенчатые операции, дополнительный ввод дорогостоящего оборудования и изменения технологических схем.

В результате исследований получены новые научно-обоснованные, достоверные выводы и практические рекомендации, которые имеют огромное теоретическое и прикладное значение.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Максимова, Екатерина Вячеславовна, 2009 год

1. 22. А.с. 1084298. 1984. - кл. С12 1/38; С12 1/22; БИ 13.2. 23. А.с. 1113405. кл. С12. - 1/16, С12 1/26, С12Р, 1/72-БИ 34.- С.70.3. 31. А.с. 1641021. 1994. - кл. С12 1/38. - БИ 13.

2. Бабенко Ю.С., Кукушкина Н.В., Гниломедова Л.Е., Черногор Н.П. Применение комплекса литических ферментов Streptomyces recifensis subs-lyticus 2435 для гидролиза биомассы и стимуляции роста// Биотехнология. -1990. № 1. - с.52-55.

3. Барахтенова Л.А., Николаевский B.C. Влияние сернистого газа на фотохимическую активность и фотофосфорилирование у Сг и С4 растений// Изв. АН СССР. сер. биол. - 1983. - № 1. - с. 90-99.

4. Баталкин Г.А.//Влияние физиологически активных веществ гумусовой природы на рост продуцентов микробного белка. Автореф.канд.дисс., Киев-1987.

5. Белов А.П., Рачинский В.В. «Роль глюканов и маннанов клеточной стенки дрожжей рода Candida в морфогенезе клетки. // Тезисы VII съезда Всесоюзного микробиологического общества. — 1985. т.2. - «Физиология, биохимия и организация микроорганизмов.» - с. 20.

6. Белов А.П., Каменев А.С. Роль компонентов клеточной стенки дрожжей рода Candida в морфологии клетки// Микробиология. 1986. - т.55. - вып.З - с.473-476.

7. Белозерский А.Н., Проскуряков Н.И. // Практическое руководство по биохимии растений. М.; Советская наука. 1951.

8. Беляева М.И., Куприянова Ф.Г., Ульянова М.Н. Влияние нуклеазы Serratia marcenscens на размножение Candida tropicalis //Микробиология. -1977. т.46. - вып.2. - с.300.

9. Биоактивные вещества из морских макро- и микроорганизмов и наземных растений Дальнего Востока. Мат-лы науч. конф. Владивосток, (ред. Стонск В.А. Владивосток; Дальнаука, 2001. - с. 241.

10. Брагинцева JI.M. /Грибы источник биологически активных ве-щестъ//Успехи мед. микологии, т.1. Мат. Первого Всероссийского конгресса по мед. микологии, Москва, 2003. - с. 24-44.

11. Бурлакова Е.Б., Эмануэль Н.М. Роль антиокислителей в физико-химических процессах регулирования роста клеток.//В кн.: Физико-химические основы авторегуляции в клетках. М.: Наука. 1968. - с.44-45.

12. Бурлакова Е.Б. //Тез. докл. V Всес. биохим. съезда. Киев 1986. -М.: Наука. - 1985. - т.2. - с.110.

13. Бурлакова Е.Б. //Биохим. механизмы действия АО. Тез. докл. V Всес. биохим. съезда. 1986. - т.1. - с.85.

14. Бурлакова Е.Б., Кондаров А.А., Худяков И.В. Воздействие химических агентов в сверхмалых дозах на биологические объекты// Изв. АН СССР, сер.биол. 1990. - « 2. - с. 184-193.

15. Бурлакова Е./Сверхмалые дозы большая загадка природы//Наука в технологии и промышленности// 2002 (3(10) - Щ1), - с.24-27.

16. Вагабов В.М.//Биосинтез углеводных компонентов клеточной стенки дрожжей. Пущино. 1988.

17. Ванюшин Б.Ф. Молекулярные механизмы действия фитогормо-нов.//Сельскохозяйственная биология. —1985. № 5. - с. 110-112.

18. Винаров А.Ю. Применение поверхностно-активных веществ в процессах ферментации.//Биотехнология. 1986. - № 5. - с.39-45.

19. Винаров А.Ю. Исследование структуры потоков и математическое моделирование промышленного биореактора.//Биотехнология. 1987 г. - том 3. - № 5. - с.667-674.

20. Воробьева Г.И., Сушкова В.И., Фелоненко В., Спирина С., Салеева И. /Дрожжи-сахаромицеты в кормопроизводстве//Комбикорма. № 6. - 2005. - с.59.

21. Воробьева Г.И. с соавт./ штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae ОН-1 BKIIM-y-2492//RU 2039813 CI, 20.07.1995. др. 10225289. 25.08.1998.

22. Галаев Ю.В., Кибальникова П.И. Исследование влияния органических перекисей на рост дрожжей, культивируемых на основе н-парафинов.// Рукопись депонирована в ВНИТИ 4 января. 1985. - № 136. - с.85.

23. Галынкин В.А., Аак О.В., Хадеева В.В. Связывание высокомолекулярных сланцевых кислот дрожжевой клеткой.// В сб. Получение и применение регуляторов роста. Межвуз.сб.научн. тр. JI.: ЛТИ им.Ленсовета. 1986. -с.77-79.

24. Гололобов А.Д. Биохимия углеводородного питания дрожжей. Диссертация на соискание ученой степени докт.биол.наук., Москва. - 1973.

25. Горлова И.С. Влияние липидов на рост дрожжей и состав биомассы при ассимиляции углеводородов.//Автореферат канд.дисс.биол.наук 1984. -Ленинград.

26. Государственный стандарт ГОСТ 28179-89. Дрожжи кормовые -паприн.

27. Государственный стандарт ГОСТ 28178-89. Методы испытаний.

28. Градова Н.Б., Диканская Э.М., Михалева В.В.//Использование углеводородов дрожжами. Обзор. М. 1971. - ОНТИТЭИмикробиопром.

29. Градова Н.Б.//Физиологические особенности углеводородокисляю-щих дрожжей рода Candida и селекция производственных штаммов. Авто-реф. на соиск. докт. биол. наук. Москва. - 1976.

30. Грачева И.М., Гаврилова Н.Н., Иванова Л.А.//Технология микробных белковых препаратов, аминокислот и жиров. М.: Пищ. пром-сть. 1980. -с.448.

31. Гуринова В.В., Орлова А.И. Влияние гиббереллина на размножение и жизнедеятельность дрожжей.//Прикл.биох. и микробиол. 1974. т. 10. — вып. 1. - с.161-165.

32. Гусельникова Т.В., Павлов А.А., Безруков М.Г., Градова Н.Б. Влияние термообработки на фракционный состав белков дрож-жей.//Биотехнология. —1988. -т.4. № 4. - с.509-511.

33. Гусельникова Т.В., Белов А.П. Содержание белка и свободных аминокислот в утлеводородокисляющих дрожжах в зависимости от азотного пи-тания.//Изв. ТСХА. 1988. - № 6. - с.130-134. Москва. - ВО «Агропромиз-дат».

34. Гусельникова Т.В., Белов А.П., Градова Н.Б. Влияние дрожжевого автолизата на содержание и распределение свободных аминокислот в клетках дрожжей рода Candida . //Микробиология. 1989. - т.58. - вып.2. - с.202-2-5.

35. Давтян М.А., Авакян А.С., Навасардян JI.A. Стимулирование роста дрожжей клеточным экстрактом.//Биол.ж.Армении. 1984.-t.57. ■ № 7. -с.574-577.

36. Дерканосов Н.И., Чувашева К.К., Гарманова Е.Л. Эффективность использования стимуляторов роста в дрожжевом производст-ве.//Хлебопекарная и кондитерская промышленность. —1983. № 10. - с.44-46.

37. Дерканосов А.Н. Об использовании гидролизатов кукурузного экстракта в дрожжевой промышленности.//Хлебопекарная и кондит.пром-сть. -1985. 12. - с.28-29.

38. Дише 3. Цветные реакции гексозаминов.// В кн.: Методы химии углеводов (Под ред. Кочеткова Н.К. М.: Мир. 1967. - с.52.

39. Дурнев А.Д. Серединин С.Б. Антиоксиданты как средства защиты генетического аппарата.//Химико-фарм. журнал. 1990. - № 2. - с.92-100.

40. Егоренкова Г.Н., Белов А.П. Структурная оргнизация клеточных стенок у дрожжей рода Candida.//MHKpo6mxnorM. 1984. - т.53. - вып.2. -с.300-304.

41. Забродский А.Г. Использование мелассной барды в биотехнологии.//Биотехнология. 1989. - т.5. - №3. - с.353-357.

42. Кислухина О.В., Калунянц К.А., Аленова Д.Ж.//Ферментативный лизис микроорганизмов. Алма-Ата. «Рауан». - 1990.

43. Кольцова Э.В., Мальцев Н.И., Гайденко В.П.//Проблемы сырьевого обеспечения микробиологических производств. Обзор. М.: ВНИИСЕНТИ. -1986. - с.32.

44. Конев С.В., Гаврилов В.Б., Орехова Т.А., Матус В.К. «Кооперативная гибель дрожжевых клеток при озон-индуцированном сбросе протонного градиента на мембране .//ДАН СССР. 1985. - т.281. - с.454-457.

45. Конев С.В. Гаврилов В.Б., Шалькевич Л.К.: Матус В.К. Энергозависимая стабилизация протонного градиента на мембране дрожжей при действии низших доз озона.//Биофизика. 1988. -т.ЗЗ. -№1. - с.152-153.

46. Конев С.В., Мельникова A.M., Катус В.К. Молекулярно-мембранные механизмы стимулирования и ингибирования метаболической активности дрожжей озоном//15-ный Междунар.спец.симпозиум по дрожжам: Рига. 30 сент. - 6 окт. 1991. - с. 67.

47. Коновалов С.А., Максимов В.И. Ферменты, катализирующие первичное окисление насыщенных углеводородов.// ЖВХО им.Д.И.Менделеева. 1972. - т.ХУП. - №5. - с.538-544.

48. Коновалов С.А., Максимов В.И. Особенности обмена веществ у микроорганизмов.//Микробиол.синтез (Труды института «ВНИИсинтезбе-лок»), 1974. - вып.7. - с. 18-31.

49. Любецкая и др. /Получение биологически активных веществ с помощью грибных ферментов//Биотехнология 2002. - № 6. - с.68-69.

50. Заключение о клиническом испытании в лаб. иммунологии клинической больницы ЦМСЧ-119 хитодекстрина. 17.01.2001. подп. Клин. Иммунолог д.м.н., Хоробрых В.В.

51. Зайдель А.И.Юлементарные оценки ошибок измерения. 1967. -JL: «Наука».

52. Захарова И.Я., КосенкоЛ.В .//Методы изучения микробных полисахаридов. Киев: Наукова думка. 1982. - С.35.

53. Зуев Е.Т., Брагинцева Л.М., Воробьева Г.И. и др./Штамм гриба Fusarium sumbucinum продуцент биол. акт. Веществ//Патент 2259209 Россия, МПК7 А61К 35/84, А234 1/0 54; 27.08.05г. Бюл. 24.

54. Каменев А.С., Белов А.П. Роль глюканов и маннанов в формировании упругих свойств клеточной стенки дрожжей.//Изв. ТСХА. 1986. -вып. 1. - с. 187-190.

55. Колганов А.И. и др./Зав-сть влияния РНКазы Вас. Inter на рост пекарских дрожжей от конц. Экзог. Фермента//Микробиология. 2000. - 69. -№ 4. - с.478 -482.

56. Колпаков А.И./Влияние, рибонуклеазы Bacillus intermedius на свойства дрожжей S. cerevisiaeZ/Прикл. биох. И микроб. 2000, - № 4 - с.479-483.

57. Краузова В.И., Ильченко А.П., Шарышев А.А., Лозинов А.Б. Возможные пути окисления высших спиртов мембранными фракциями дрожжей, выращенных на гексадекане и гексадеканоле.//Биохимия. 1985. - т.50. - №5.-с.726.

58. Ксенофонтов Б.С., Селифонтова В.С.//Способы обработки отходов микробиологических производств и их технико-экономическое обоснование. Москва., ВНИИСЭНТИ. -1989.

59. Кулаева О.Н.//Цигокинины, их структура и функция. Изд-во «Наука», Москва. — 1973. с.264.

60. Кулаева О.Н., Чайлахян М.Х. Тенденции и перспективы развития исследований по фитогормонам (По материалам X Международной конференции по ростовым веществам растений).//Успехи соврем.биологии. -1980. т.90. - № 2(5). - с.308-313.

61. Кулаева О.Н.//Гормональная регуляция физиологических процессов у растений на уровне синтеза РНК и белка. 41-е Тимирязевское чтение. М.: Наука. 1982.-с.83.

62. Кулаева О.Н.//Фитогормоны как регуляторы активности генетического аппарата и синтеза белка у растений.//Новые направления в физиологии растений/Отв. ред.Курсанов A.JI. М.: «Наука». 1985. - с.62-84.

63. Куприянова Ф.Г., Давыдова М.Н., Кузнецова Н.Н., Винтер В.Г. Стимуляция размножения дрожжей Candida tropicalis экзогенными нуклеаза-ми.//Биологические науки. 1982. - № 10. - с.91-94.

64. Кузнецов А.Е., Сорокодумов С.Н., Винаров А.Ю. и др./Способ получения биомассы дрожжей//Пат. 2268924 Россия, МПК7 C12N 1/00, C12N 1/16, 27.01.06. Бюл. N03.

65. Лилов Д.Ц., Божинова И.Д., Панделиев С.Г., Христов Х.Д., Андо-нова Т.А., Зозикова Е.И. «Влияние и ингибиторы ростовых процессов у растений, Москва., «Наука». 1988. - с.89-97.

66. Любимова Н.В./Лектины в процессе межклеточного узнавания при фитофторах картофеля.//Автореф. дис. докт.биол.наук. М.: Ин-т биохимии им. А.Н.Баха РАНЕ. 1991. -с.55.

67. Максименко О.А., Зюкова JI.A. и др. Метод одновременного определения различных моносахаридов в биологических объек-тах.//Аналитическая химия. 1971. -т.24. - в.12. - с.2467-2471.

68. Максименко О.А., Зюкова JI.A., Федорович P.M. Определение общего количества углеводов в кормовых дрожжах антроновым мето-дом.//Прикл.биох. и микробиол. —1971. т.УП. - вып.2. - с.139-144.

69. Максименко О.А., Зюкова Л.А., Федорович P.M. Определение общего количества углеводов в сухих дрожжах.//Прикл. Биох. И микробиол. -1975,-№11.-с.127-131.

70. Максимов В.И., Каверзнева Е.Д. О характере действия лизоцима на олигосахариды, являющиеся фрагментами хитина.//Биохимия. 1965. - т.ЗО. - с.1007.

71. Максимов В.И., Каверзнева Е.Д. О характере действия лизоцима на олигосахариды являющиеся фрагментами хит ина.// Микробиол. синтез (Труды института «ВНИИсинтезбелок»), 1974. - вып.7. - с.3-12.

72. Максимов В.И., Мосин В.А. Простой метод обнаружения и выделения олигосахаридов, фрагментов хитозана, после ионообменной хроматографии.// Изв. АН СССР. Сер.хим. 1969. - № 11. - с.2579.

73. Максимов В.И., Зашихина Д.В./Биотехнология. 1994. - 2. - с.2628.

74. Максимов В.И., Каверзнева Е.Д., Кравченко Н.А. /Биохимия 30.-1007.-1965.

75. Максимов В.И., Тепелина О.М./Хитодекстрин как субстрат и затравка в реакции лизоцима с олигосахаридами//Биохимия. 1966.-t.31,-вып.5.-с.918-923.

76. Максимов В.И./Докл. АН СССР. 1967.- с.172-210.

77. Максимов В.А. с соавт. Регулятор роста растений.//А.с. № 1730754.1992.

78. Максимов В.И., Денисов В.М., Макаров М.В./Способ получения водорастворимых олигосахаридов//Авт. св. СССР № 1571047, кл. С08 В 37/08. Приоритет от 24.03.88. опубликовано 15.06.90. Бюл. № 22.

79. Максимов В.И., Смирнова Ю.В., Зашихина Д.В., Савченков С.Н., Мосин В.А./Способ получения водорастворимых олигосахаридов. Патент № 2057761. С08В 37/08 Приоритет от 23.04.93г. Опубликован БИ № 10 за 1996г.

80. Максимов В.И., Родоман В.Е., Максимова Е.В./Способ получения водорастворимых олигосахаридов. Патент на изобретение № 2126012,С1 :С07 Н 3/06, С08 В 37/00, 37/08. Приоритет от 17.03.97. Опубликован 10.02.09. Бюл. №4.

81. Максимов В.И., Родоман В.Е., Максимова Е.В./Метод определения гексозаминов в хитиновых гидролизатах/ЯТрикл. биох. и микробиол. 1999.-т.35.-№ 2.-с.227-230.

82. Максимов В.И., Максимова Е.В., Родоман В.Е./Экологические аспекты переработки хитинового сырья//Тез. IV Всероссийской конференции «Производство и применение хитина и хитозана». ВНИРО, Москва, 25-26 апреля 1995г.

83. Максимов В.И., Родоман В.Е./Хитиновые олигосахариды для преодоления дисбиоза кишечника и стимуляции иммунитета//Тез. VII съезда Всерос. об-ва эпидемиологов, микробиологов и паразитологов, 1998.-Т.1.-с.271-272.

84. Максимов В.И. Углеводные стимуляторы бифидобакгерий. //Биотехнология, 2991. № 6. с.3-7.

85. Максимов В.И., Смирнова Ю.В. Сернокислотно-ферментативная переработка хитина. //Биотехнология, 1993. № 10. с.26-30.

86. Максимов В.И., Мосин В.А., Максимова Г.Н., Воробьева Г.И. Метод определения {3 глюканазной активности.//Прикл. Биох. и микробиол. 1975. - t.XI. - в.З,- с.455-459.

87. Максимов В.И., Тепелина О.М. Хитодекстрин как субстрат и затравка в реакции лизоцима с трисахаридом.//Биохимия. 1966-Т.31. - с.918.

88. Максимов В.И., Мосин В.А., Максимова Г.Н. /Синергизм действия модельной смеси ферментов//Микробиол. пром.- 1980. № 3. - с.8-10.

89. Максимов В.И., Смирнова Ю.В./Сернокислотно-ферментативная переработка хитина//Биотехнология, 1993. № 10. - с.26-30.

90. Максимов В.И., Родоман В.Е./Хитин как сырье для получения глюкозаминовой добавки к пище//Материалы VI Межд. конф. «Новые перспективы в исслед. хитина и хитозана». Москва-Щелково, 22-24 окт. 2001.-с.208-212.

91. Максимов В.И., Родоман В.Е., Лунцевич В.Г./Фитоактивные хитиновые соединения/ЯТриклад.биохим. и микробиол. 1997. - т.ЗЗ. - №4- с. 355-362.

92. Максимов В.И., Родоман В.Е., Воскун С.Е., Быков В.П., Фурман Д.И./Препарат на основе хитина «солихит» для лечения кишечного дисбакте-риоза у животных//Матер. 5-ой конфер. по хитину и хитозану. Щелково. 2527 мая 1999 г. Изд. ВНИРО. с.164-168.

93. Максимов В.И.//Успехихимии.1973.т.42.-№11.-с.2073-2094.

94. Максимов В.И.//Успехи соврем.биологии.01980.-т.89.-№1.-с.41-57.

95. Максимов В.И.//Прикл. биохимия и микробиология. 1988.-т.24,-b.3.c.291-304.

96. Максимов В.И.//Прикл. биох. микробиол. 1982.-т.18.-с.659-663.

97. Максимов В.И.//Биотехнология, 1989. т.5.-с.607-611.

98. Максимов В.И., Крушев Л.Г., Савченков С.М. / Биотехнология, 1992. № 4. - с.60-62.

99. Максимова Г.Н., Винаров А.Ю./Использование биостимуляторов в процессе получения биомассы кормовых дрожжей: Микробиологическое производство: Обзоры. Информ. М.:ВНИИСЭНТИ Минмедпрома СССР, 1990.-Вып. 3.

100. Максимова Г.Н./Интенсификация биотехнологических процессов получения дрожжевой биомассы повышенного качества.//Диссертация, д.б.н. 1995.

101. Максимова Г.Н., Мосин В.А., Максимов В.И., Воробьева Г.И. Глюкан-хитиновый комплекс клеточных стенок парафинокисляющих дрож-жей//Прикл.биох. и микробиол.-1982.-т.18.-В.4.-с.529-534.

102. Максимова Г.Н./Действие сульфита на клетки микроорганизмов (обзор)//Биотехнология. 1994.-№2- с.19-22.

103. Максимова Г.Н., Винаров А.Ю., Казанцев Ю.Е., Воронова Е.А., Гаврилов В.Б./Исследование действия полигиббереллинового препарата и его композиции с сульфитом натрия на рост парафинокисляющих дрож-жей.//Биотехнология.-1994.-№ 3. —с. 17-23.

104. Максимова Г.Н., Галдина JI.B., Сергеева JI.M., Воробьева Г.И., Григорьева С.П. Динамика роста дрожжей на средах с компонентами окисленных парафинов.//Микробиол. пром. 1979. - № ЗА. - с.4-7.

105. Максимова Г.Н., Винаров А.Ю.//Использование биостимуляторов в процессе получения биомассы кормовых дрожжей. Обзорная информация. ВНИИСЭНТИ НП «Медбиоэкономика». М., 1990. Вып.З.

106. Малек И., Фенцл ЗУ/Непрерывное культивирование микроорганизмов. Теоретические и методические основы./Пер. с англ. М.: Пищевая промышленность. - 1968. - 544с. - с.68-75.

107. Мелконян А.Б.//Роль аминокислот семейства глутаминовой кислоты в метаболизме различных источников углерода дрожжами. Диссертация на соиск.уч.ст. канд.биол.наук. Москва. - 1980.

108. Морозова К.А./Разработка биотехнологии препаратов кислых про-теаз на основе высокоактивного мутантного пггамма aspergillus oiyzae 107 для использования в производстве спирта//Диссертация на соиск.к.т.н. М.-2006.

109. Мшпке И.В.//Микробные фитогормоны в растениеводстве. 1988. - Рига. «Зинатне».

110. Муромцев Г.С., Агнистикова В.Н.//Гормоны растений гиббереллины. М. - 1973. - с.269.122122. Муромцев Г.С., Агнистикова В.Н.//Гиббереллины.-М. 1984. -с. 207.

111. Наумова Г.В., Кособокова Р.В., Райцина Г.И., Лях В.В., Кореневич Н.Л. Биологически активные препараты из торфа.//Получение и применение регуляторов роста; межвуз. сб. науч.трудов.-Ленинград. 1968.

112. Отчет «Экспериментальное изучение аллергенных свойств хито-декстрина». Лаб. прикладной иммунофармакологии, зав.лаб.Е.Р.Рубцова.

113. Отчет лаб. прикл. иммунофармакологии (зав.лаб. «Биотехнология» Е.Р.Рубцова) «Исследование влияния хитодекстрина на реакции клеточного иммунитета 1992. НПО «Биотехнология».

114. Отчет по теме: «Исследование активации хитодекстрином клеточного иммунитета» НПО «Биотехнология», науч.рук. Виха Г.В.

115. Отчет по теме: «Исследование бифидогенного действия хитодекстрина» Ивановский гос.мед.ин-т. Науч. исслед. Центр. Утв.-проректор по науч.работе проф. Р.Р.Шилаев. 1992.

116. Отчет «Испытания высокоэффективных композиций при кормлении цыплят на Марьинской птицефабрике». 1992.

117. Отчет об экспериментальном исследовании общетоксического действия хитодекстрина. Рук. лаб. токсикологии лек. препаратов ВНИИ Биотехнологии д.б.н. Г.Г. Порошенко. Утв. Зам. дир. ВНИИ Биотехнологии М.Р. Мукумов. 7.10.1991г.

118. Отчет по доклинической оценке безопасности препарата «Хито-декстрин». Рук-ль зав.лаб. «Оценки репродуктивной безопасности лекарственных средств» АО «Биотехнология», к.м.н. Скосырева A.M. Утв. Зам.директора АО «Биотехнология» М.Р. Мукумов 12.12.1992г.

119. Отчет по х/д № 646 (1990): «Разработка экспериментального образца хитодекстрина и изучение его в качестве регулятора роста и иммуностимулятора» Утв. Зам.Ген. директора НПО «Биотехнология» Ю.А. Белогор-цев.

120. Отчет «Медико-биологические исследования хитодекстрина»

121. Проверка влияния ХД на клеточный иммунитет.

122. Определение антителообразующих клеток (АОК).

123. Изучение адьювантного действия ХД.

124. Отчет «Заключение о клиническом испытании в лаборатории иммунологии клинической больницы ЦМСЧ-119 хитодекстрина.

125. Решетник О.А., Ежкова Г.О., Каневская Е.Г., Кирпичников П.А./Регуляция антиоксидантом роста, состава и физико-химических характеристик липидов Saccharomyces cerevisiae//Доклады Акад.наук (ДАН) -1996.-т.346.-№5.-с.705-707.

126. Римарева Л.В., Оверченко М.Б., Игнатова Н.И., Кадиева

127. A.Т./Мультиэнзимные системы для повышения эффективности спиртового производства/ТМикробные биокатализаторы и перспективы развития ферментных технологий в перерабатывающих отраслях АПК.-М.: Пищепромиз-дат, 2004. С.209-215.

128. Римарева Л.В., Оверченко М.Б. Роль протеаз в спиртовом броже-нии//Микробные биокатализаторы для перерабатывающих отраслей АПК.-М.: ВНИИПБТ.2006.-с. 127-137.

129. Патент ГДР №205695.- 1982, кл.С12, 1/28.

130. Петрухина М.Е., Максимов В.И., Лунцевич В.ГУ/Достижения био-технологии-аграрнопромышленному комплексу. Черновцы: Черновицкий го-суд.университет им. Ю.Федьковича.-1991.-т.1.-с.76.

131. Петрухина М.Т., Максимов В.И., Бордак М.Н., Лунцевич

132. B.Г.//Хитодекстрин-перспективный регулятор роста растений. Экологически безопасные и беспестицидные технологии получения растениеводческой продукции: Пущино.-1994.-с.229-231.

133. Петрухина М.Т., Максимов В.И., Лунцевич В.Г., Бордак М.Н./Перспективы использования хитодекстрина в растениеводстве//Матер. 5-щй конфер. по хитину и хитозану. Щелково. 25-27 мая 1999г. Изд. ВНИРО. -с.98-101.

134. Победимский Д.Г., Решетник О.А., Шишкина Л.Н., Ершов В.В., Бурлакова Е.Б. Антиоксиданты как стимуляторы роста промышленных микроорганизмов.//Биоантиоксидант; Ш Всесоюзная конференция, 27-29 июня 1989, Москва, т.1. с.87-88.

135. Полевой В .В .//Фитогормоны. Л., 1982. - с.248.

136. Покровский А. А. Медико-биологический аспект исследования углеводородных дрожжей.//Медико-биологические исследования углеводородных дрожжей (1964-1970гг.) М.: Наука. 1972. - с.59-70.

137. Павловец Н.М., Яковлев В.И., Старикова Е.К., Станчинскене Э.С., Исаев В.А. Влияние стимуляторов из оксидата сланцев на биосинтез амила-зы.//Получен, и применен, регулятор.роста». Л.,-1986.-е.59-62.

138. Павловец Н.М., Сухаревич В.И., Яковлев В.И. и др. Влияние Лен-технина на биосинтез гидролитических ферментов.//Микробиол.пром-сть,-1983.-№ З.-с.П.

139. Петрова И.С., Винцюнайте М.М. Определение протеолитической активности ферментных препаратов микробиологического происхожде-ния.//Прикл. биох. и микроб. 1966. - т.2. - в.З. - с.322-327.

140. Перт С.Д.//Основы культивирования микроорганизмов и клеток. -М.: Мир. 1978. - с.103-104.

141. Работнова И.Л.//Роль физико-химических условий (рН и гНг) в жизнедеятельности микроорганизмов. 1957. -Изд-во АН СССР, Москва.

142. Работнова И.Л. и Позмогова И.Н.//Хемостатное культивирование и ингибирование роста микроорганизмов. «Наука», М,- 1979.

143. Решетник О.А., Мингалеева З.Ш., Победимский Д.Г.Влияние панкреатической дезоксирибонуклеазы на рост дрожжей рода Candida при различных способах культивирования./ЛГр.хим.-техн.ин-та,-1985. № 135. -с.33-36.

144. Решетник О.А., Мингалеева З.Ш., Победимский Д.Г. Влияние ан-тиоксиданта на рост дрожжей рода Candida при различных способах культи-вирования.//Биотехнология. 1986. - № 2. - с.60-63.

145. Римарева JI.B., Войнарский И.Н., Устинников Б.А., Яровенко B.JL, Коновалов С.А. Влияние протеолитических ферментов на физиологическое состояние и размножение дрожжей.//Ферм. и спиртовая пром-сть. 1983. - № 2. - с.36-39.

146. Решетник О.А., Киселева З.Ш., Ежкова Г.О./Интенсификация процесса выращивания пекарских дрожжей на мелассе//Межд. конф. «Науч.-техн.прогресс в перерабатывающих отраслях АПК», Москва 16-18 мая. 1995.-с.136.

147. Щз Э. Химическая микробиология. Издательство «Мир», Москва.-1971.

148. Рухлядева А.П., Горячева М.Г. Метод определения активности амилолитическихферментов.//Ферм. и спирт.пром-сть, 1966,-№ 1.-С.9-12.

149. Рябчук В.А., Помазкова В.А., Федорович Р.М. Аминокислотный состав кормовых дрожжей, выращенных на углеводородах.// Приклад.биох. и микроб.-1971. т.7.-вып.2.-с. 134.

150. Самойлов П.М. Энергетические процессы при окислении н-алканов у микроорганизмов.//Успехи биолог.химии. 1978. -т.19.-с.130-150.

151. СанПин 2.3.2.560-96. Москва-1997. Код 516.-c.260.

152. Саубенова М.Г. Полисахариды дрожжевых организмов.-Алма-Ата: Наука. 1976.

153. Соболева И.С., Крицкий М.С. Низкомолекулярные соединения нуклеотидной природы в регуляции онтогенеза грибов.//Успехи микробиоло-гии.-1987.-№ 21.-C.59-87.Москва «Наука».

154. Спирин А.С. Спектрофотометрическое определение суммарного количества нуклеиновых кислот.//Биохимия.-1958.-т.23.-№ 5.-е.656-661.

155. Сухаревич В.И. Научные основы использования синтетических углеводов и продуктов окисления горючих сланцев в процессе микробиологического синтеза. Автореф.докт.дис. Jl.-1984.-c.378.

156. Теодозакис Д., Эддерли Б., Фокс Б. Лечение артрита и артроза.-СПб' Питер Ком. 1999.-c.256.

157. Торев А.К.//Промыпшенная технология за производство на мицел от висши гръби. София, 1973., Издательство на Българската Академия на наукате. Селскостопанска Академия «Георги Димитров», Лабортория по микология и биохимия Пловдив.

158. Тулякова Т.В. и др./Способ производства хдебопекарских дрож-жей//А.с. СССР 2016896, 5 С 12 N 1/16; 28.01.92.

159. Феофилова Е.П. Образование хитина микроскопическими гриба-ми.//Биол.науки.-1981 .-№ 6. -с.5-20, № ll.-c.5-26.173/а. Феофилова Е.П.//Клеточная стенка грибов. М.: Наука.-1983.с.248.

160. Фостер Дж.//Использование углеводородов для роста и развития микроорганизмов. Доклад на заседании Моск.отдел.Всес.микробиол.об-ва при АН СССР, 6-7 января 1964.

161. Хавезов И., Зецалев Д.//Атомно-адсорбционный анализ.-JI.: Химия. 1983.

162. Хорушкин В.В. Интенсификация процесса выращивания кормовых дрожжей добавлением частичноокисленного н-парафина.//Микроорганизмы-продуценты биологически активных веществ. Тезисы докладов конференции молодых ученых.-Рига,-1984.-с. 102.

163. Шеламова С.А., Дерканосова Н.М., Янышева Н.В./К вопросу о влиянии липидов на жизнедеятельность дрожжей//Биотехнол.на рубеже двух тысячелетий: Мат.межд.науч.конф., Саранск, 12-15 сент., 2001, с.155-156.

164. Шкидченко А.Н. Физиологическое состояние дрожжей при кинетическом, физиологическом и метаболическом типах лимитирования .//В сб.: Рост микроорганизмов. Пущино.-1984.-с.118.

165. Штрейблова Е. Архитектоника клеточных стенок дрожжей. //Изв. АН СССР, сер.биол. 1977.-№ 3.-С.410-421.

166. Юрьев Д.Н., Квасенков О.И., Ратников А.Ю./Способ получения хлебопекарных дрожжей// А.С. № 2119951, 6 С12 N 1/18., 03.07.97г.

167. Яковлева Е.П., Алексеева Л.Е., Кузнецова О.С., Корнилов А.И., Сухаревич В.И. Природа стимулирующих веществ, содержащихся в продуктах жизнедеятельности дрожжеподобных грибов .//Микробиология, 1986.-т.55.-в.2.-с.198.

168. Bartnicki-Garcia S., //Cell wall chemistry. Morphogenesis and Taxonomy of fungi.-Ann.Rev. Microbiol.-1968-p.87-108.

169. Bartnicki-Garcia S., Lippman E.//Inhibition of mucor rouxii by polyoxin D: effect on chitin synthetase and morphological development//-J.Gen.Microbiol.-1972,-71,-p.301-309.

170. Beattie B.S., Finzi E.//Proc. 5th INT, Symp. Yeast.Toronto,-1981,-p.351-355.

171. Bell D.Y., Northcote D.H.//Y.Chem.Soc.//,-1950„ N 3- p.1944.

172. Boiler T.//Chitin in NatureTechol. N.Y.: Plenmn Press.-1986.-p.223230.

173. Boot R.G., van Acterberg T.A.E., van Aken B.E. et al Strong induction of members of the chitinase family of proteins in atherosclerosis.//Arterioscler. Tromb. Vase Biol., 1999. V. 19. P. 687-694.

174. Cabib E. //The synthesis and degradation of chiiIrt//Adv.Enzymology-1987.-V.59-p.59-101.

175. Chaplin M.F., Kennedy J.F.//Carbohydrate Analysis, a practical Approach. Oxford-Washington: JRL. Press.-1986.P.174-176/

176. Chitin and chitosan: Speciality Biopolymers for Foods, medicine, and Industry.-1989.-N5A.

177. Chitin: Natyral for the 21th Centyru//Atlanta: Peachtree-Dunwoody Road, 1995.-20 p.

178. Decleire M.-, De Cat W., Van Huynh N.,//Enzyme and mikrobiol Technol.//-1987.-V.9.-N5-p.300-302.

179. De Nobel Y.G., Dijkers C., Hooijbegg E. and Klis F.M.// Increased cell Wall porosity in Saccharomyces cerevisiae after Treatment with Dithiotheitol or EDTA//J.Gen.Microbioi.-1989.-N 135.-p.2077-2084.

180. Doyle R.Y., Chaloupka Y., Y. Vinter V., Turnover of cell wall in Microorganisms//Microbiological Reviews. Dec.-1988.-p.554-567.

181. Duffus Y.H., Levic., Manners D.Y. Yeast cell wall glucans Adv.Nficrobiol. Physiol.-1982.-V.23.-p. 151-181.

182. Farkas V. Biosynthesis of cell walls of fungi //Microbiol.Rev.-1979.-V.43.-p.l 17-144.

183. Farkas V. Fungal cell walls; tneir structure biosynthesiss and biotechnological aspects .//Acta Biotech.-1990.-V.20.-p.225-238.

184. Fa. Y.-H.P.,Demain A.L. Dependence of betaine stimulation of vitamin B12 overproduction on protein synthesis//Appl.Env/MICR.-1984.-N 47.(3)-p.l067-1069.

185. Folch Y., Less V., Stanley G.H., A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues//Y. Biol. Chem.-1957.-V.226.-p.497-501.

186. Grosskoff D.J., Felix J., Boiler T.// Plant Phusiol.-1991.-V.138.-N 6,-p/741-746.

187. Hackman R.H.//Austral.j. Biol.Sci.-1962.-V.12.- N 3.-p. 526-537.

188. Hadwiger L.A., Eristensky В., Rigglema R.C.//Chitin, chitosan, and Related Enzymes N.Y.; Acad/P^ess 1984, p. 291-302. //Bioprocess Fechnol. 1987-V.9.-N 7.-Р.4-6.

189. Jakubowski \\^йо1с!//Действие окислительного стресса на Sac. Cerevisiae/Post.boil.komorki, 1998/-25, N 3.-C.429-447 (Обзор).

190. Jicku V., Ludvik J., Cejkova A., Krumphanzi V.Biotin dificincy in yeast electron microscopic analysis//Zeitschr.allg.Mikrob. 1982.-V. 22 (6)- p/389-393.

191. Kauss H., Jeblick W., Domard A.//Planta.-1989.-v.l78/-N 3/-P.385392.

192. Kendzo L.F., Hadniger LA.//Exp. Mycol. 1984.-vol.8.-N 3, c. 276-281.

193. R. Lambert, F. Zilliken//ABB.-1965.vol.ll0, N 3.-p.544-550.

194. Lehle L. Biosynthesis pf mannoprotein in fungi//Encyclopedia of plant physiology. Berlin: Springer Verlag. 1981-v. 133.-p. 459-483.

195. Lowry O.M., Rosebrough H.Y., Fars A.D.,Randal R.L. Protein measarment with the Folin phenol reagent//J.Biol.Chem.-1951.-v.l93.-p.265-270.

196. McCarty M.F. Glucosamine may retard atherogenesis by promoting endothelial production of heparan sulphate proteoglycans. //Med. Hypotheses, 1997. V. 48, N2. p. 245-251.

197. Menshov V.A., Shishkina L.N./Механизм действия H202 на активность винных дрожжей/ZVitis: Vitienlat. and Enol. Absir. 1999.-38.-N 4.-c. 29.

198. Muzzarelli R.A.A., Chitin, 1977. Pergamon Press.

199. Muzzarelli R.A.A., Biagini G., 1993. Role and fate of exogenous chitosans in human wound tissues.//Chitin enzymology, Eur. Chitin Soc., Ancona, 1993. P. 187-196.

200. Nelson N. 1944 J.Biol. Chem., 153,375.

201. Nortcote D.H. The structure and organization of the poll saccharides о yeast// in Proc. Symp. Chem. and Biochem. of fungi and yeast. Butter. Worths., London, Pure Appl. Chem.-1963.-7-p.669.

202. Olsen R., Schwartzmiller D., Weppner W., Winandy R. Biomedical application of chitin and its derivatives.// Chitin, Chitosan, Int. Conf., 4th, Trodheim, Norway, 1988,-London, N.Y., 1989. p.813-828.

203. Panjo L.K., Zhang J.J.// j.Nematol.-l993.-v.25.-N 4.-p.526-540.

204. Parodi AJ.Biosynthetic mechanisms for cell envelope polysaccharides// Yeast cell envelopes; biochistry, biophysics and ultrastructure. Boca Ratonadaton: CRC Press.- 1982.-V.2.-p.47-77.

205. Patil S.G., Patil B.G//Chitin supplement speeds up the ethanol production in cane melasses fermentation/ZEnzyme Microbiol. Technol.-1989.-vol.ll.-N l.-p.38-43.

206. Patil S.G.,Gokhale D.V. and Patil B.G./Novel supplements enhance the efeancl production in cane molasses fermentation by recycling yeast cell/ZBiotechnology Letters, V.l 1/-N 3.-1989.-p.2/3-216.

207. Phaff H.I.ImThe Yeast.Physiology and bijchemistry (pf yeast:2.-New Yjrk,-1971.-p.l35.

208. Rising F.Y., Strominger F., Zelors L.F.//F/ Biol.Chem.-1955.-V.217.-p. 959.

209. Robert N.K., Selitrennikoff C.P.//J.Gen.Microbiol. 188.-V. 134.-N l/-p. 169-176.

210. Rut M., Stros F. Stimulace rustu Candida utilis amoniakalnum ekstraktem ziskanym pri shizovani obsahu nukleinovyck kyselin//Kvasny Prum.-1980.-26.(3).-p.57-64.1. V/

211. Rybarova J., Cerny V., Reisinger J.Kultivace Kvasinky Candida utilis na etanolovem substratu. 4.1 dace stimulujicich latek z melasovych vypalku/ZKvansky prumysl.-1979.-r.25.-c.9.s.200-202,207-209.

212. Salyers A.A. Activities of polysaccharide-degrading bacteria in the human colon.// In: Dietary Fiber: Chemistry, Physiology, and Health Effects (Eds. D. Kritchevsky, C. Bonfield, J.W. Anderson). Plenum Press, N.Y. and London, 1990. P. 187-194.

213. Sentandreu R., Herrero E., Martines-Garcia J.P., Larriba G. Biogenesis of the yeast cell walI//Subcellular Biochemistry. N.y.: Plenum Press.-1984.-V.10.-p.193-235.

214. Spreen K.A., Zikakis J.P., Austin P.R.//Chitin, chitosan/ Relat. Enzymes.-1984.-P.57-75. Acad. Press. Jnc., Orlando E.L. 1984.

215. Suzuki S., Watanabe Т., Mikami Т., Matsumoto Т., Suzuki M.//Adv. In Chitin and Chitosan, Eds. Brine С J. et ai, Elsevier Sci. Publ., 1992. p. 96-105.

216. Ulsen R., Schwartzniller D., Weppner W., Ninandy R.// Chitin and chitosan-N.Y.: Acad. Press.-1989.-p.813-828.

217. Vojtkova-Lepsikova Anna, Kossaczka Zuzana, Machova//Vitamin effects on yeast growth utilizing sugar mixture from xylose residual//Biologia-1987.-V.42.-N 3.-p.259-265.

218. Weiner M.L.//Adv. Chitin Chitosan.-London.-N.y-. Elsevier appl. Sci. 1992. P. 663-670.

219. Yeast cell envelopes, biochemistry, biophysica a. ultrastructure, V.l, CRG Press, Fla.-1981.

220. Zabrodskij A.C., OsoVik A.U., Psevorskaya V.J., Kaljuznyi Farosjuk D.D. Ferment. Spirt. Prum.-1975.b.20 c.3.

221. Zlotnik H., Fernandez M.P., Bowers В., Cabib E. Saccharomyces cerevisiae mannoproteins from an external cell wall Layer that determines wall porosity//J.Bacteriol.-1984.-V. 159.-p. 1018-1026.

222. Zeichmeister L., Toth U. Zur Kenntnis der hydrolyse von Chitin mit salzsaure (I. Mitteil).-Ber. Deutsch. chem. Qes.-l 93 l.-b.64.-s.2028-2035.

223. МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ '

224. Белорусский' научно-исследовательский санитарно-гигиенический -. , : • ИНСТИТУТ ~ ••• • ^fr^s. УТВЕРВДАЮ , • • Директор .Белорусского. .• ;•; -/J "

225. Кого санитарно-гигие-- •• 1 ического-:института;, i ; 'ОшаЯ В. А. Стельмах"' марта 1996 года ! \

226. Токсиколога-гигиеническая "оценка препарата Хитодекстрин включала экспертизу имеющейся научно-технической литературы , а также экспериментальные исследования на лабораторных животных.

227. Хитодекстрин получают из хитина панцырей ракообразных животных !чкрабоЕ и креветок; путем обработки серной кислотой,.

228. ЛД50 для белых мышей и крыс при внутрижелудочном введении более 25000 мг/кг. Клиническая картина интоксикации характеризовалась гиподинамией и нарушениями со стороны желудочно-кишечного тракта. Гибели ливотных не отмечено.

229. ЛДзо хитодекстрина при внутрибрюшинном введении белым крысам составляет 1т/кг массы тела.

230. При трехкратном нанесении хитодекстрина на неповрежденную кожу белых крыс в дозе 5000 мг/кг не наблюдалось гибели животных и раздра

231. Следовательно,'; хитодекстрин.в.'условиях: многократного воздействия > нахвосты бельк крыс не обладает обще токсическим и раздражающим дейс-^твием.'/: " ' " ' '•.-•

232. Изучение ингаляционного воздействия хитодекстрина

233. Ингаляционное воздействие хитодекстрина изучали в .'условиях' ежед- . невной -в течение месяца затравки белых крыс в концентрации 160,2 мг/м3 Контрольные животные получали в;эквивалентных объемах воду.

234. Ингаляционное воздействие хитодекстрина не вызывает проявления признаков интоксикации и гибели подопытных животных.

235. Не обнаружена статистически достоверных изменений.показателей . выделительной■системы почек (табл. 5).

236. Не■зарегистрировано изменений изученных биохимических показателей: содержания в'крови глюкозы, в сыворотке■крови-общего белка, общих липидоз, общего .холестерина, активности лактатдегидрогеназы, каталазы, фруктоза-!,5-дкфосфатальдолаз (табл.6).

237. Л|||Щ}ка^ывает' общетоксичеокого действия.

238. Р ЕКО'МЕ н-д А Д ИИ "•-,;•:;•.'.:

239. К-работе допускаются лица, достигшие 18-летнего.возраста, проще дшие инструктаж по технике безопасности,, промышленной санитарии, противопожарной профилактике, обученныебезопасным методам работы.

240. Ведущий научный сотрудник, " канд.мед.наук

241. Старший научный сотрудник, канд. мед. наук.

242. Старший научный сотрудник, ■f;' канд. биол. наук • •

243. А.Алексашина Н.А.Каган А.И,Крысанова'1. ПРОТОКОЛ

244. Результатов исследования по определению токсичности композиционного биостимулятора (КБС)

245. Организация исполнитель: ВНИИ ветеринарной санитарии, гигиеныи экологии.

246. Аттестат аккредитации № РОСС RU. ООО 1.21 .П040 от 25 октября 2001 г.

247. Объект исследования: композиционный биостимулятор (КБС),состоящий из отдельных биостимуляторов, оказывающих синергический эффект на рост ^ развитие дрожжей при концентрациях 10 -10 от каждого исходного.

248. Препарат получен в ФГУП ГосНИИсинтезбелок.

249. Вид животных: белые мыши с массой тела 18-20г

250. Результаты исследований: За период наблюдений отклонений отфизиологической нормы не наблюдали при максимально вводимой дозе 20 г/кг массы тела. Клиническая картина не выражена. Патологических изменений во внутренних органах не обнаружено.

251. Заключение: На основании проведенных исследований установлено,что композиционный биостимулятор (КБС) НЕ ТОКСИЧЕН.1. В.Г. Иванов1. В.И.Дорожкин

252. Гл. научный сотрудник лаборатории Токсикологии и санитарии кормов, Доктор ветеринарных наук

253. Зав. Лаборатории токсикологии и санитарии кормов, профессорктораяополоцкий завод БВК |йг Э.Э.Сандар W // 2005 г.и1. АКТиспытаний по интенсификации процесса биоконверсии зерносырья в промышленном биореакторе

254. Работа проводилась в соответствии с договором №18-228/05-06 по теме "Интенсификация процесса биоконверсии зерносырья культурой S.cerevisiae diastaticus ВКПМ-У-1218 в условиях промышленного производства".

255. В период испытаний использовали культуру S.cerevisiae diastaticus ВКПМ-У-1218.

256. Испытания биостимулятора в условиях Новополоцкого завода проводили в несколько этапов, каждый из которых различался способом подачи и количеством подаваемого стимулятора.

257. В качестве контрольного периода был взят период с 01.09. по2009.2005.

258. На первом этапе композиционный биостимулятор подавали в виде водного раствора (t° = 60-70°С) в ферментеры ФО-2/1 и ФО-3/2 после подачи в них инокуля. ,та (в соответствии с технологической инструкцией по применению биостимулятора роста клеток).

259. Активированная суспензия из аппарата ФО-2/1 передавалась в аппарат ФО-3/2, в который также подавали биостимулятор. Активированная культура из ФО-3/2 передавалась в промышленный аппарат.

260. Анализ работы аппаратов чистой культуры выявил существенное снижение длительности ферментации в присутствии биостимулятора (см.табл.1).

261. В процессе испытаний в отделении чистой культуры проведен анализ работы промышленного ферментера ФО-4/Ю.

262. Основные усредненные технологические показатели процесса ферментации в период испытаний представлены в табл. 2.

263. В период испытаний состояние культуры в промышленном ферментере также оценивалось как хорошее по состоянию цитоплазмы и количеству почкующихся клеток.

264. Наблюдали некоторое улучшение работы очистных сооружений, что проявилось в снижении сбрасываемых на биопруды ХПК, фосфатов, сульфатов, азота и взвешенных веществ.

265. Это позволило рекомендовать внедрить разработанную технологию для получения "Провита" в условиях РУП "Новополоцкий завод БВК".

266. От ФГУП ТосНИИсинтезбелок": От РУП "Новополоцкийзавод БВК":д.б.н., профессор зав.лаб. с/х биотехнологии ^ Г.И.Воробьева1. Главный технологд.б.н., вед.науч.сотр. лаб.с/х биотехнологии ФГУП 'ТосНИИсинтезбелокк1. Ведущий инженер1. SI

267. Анализ работы ферментеров ОЧК в присутствии биостимуляторов

268. Период Ферментер Кратность Длительность Снижениеп/п накопления ферментации длительностичасы) часы % отн.

269. Контроль ФО-2/1 10 14 ч. 10 мин.

270. Опыт 1 ФО-2/1 2 8 ч. 30 мин. 5 ч. 40 м. (-43 %) (21.09)

271. Опыт 2 ФО-2/1 1 8 ч. 15 мин. 6 ч. (-43 %) (11.10.05)1. Контроль1. ФО-3/12514 ч.1.я ферментация) 11 ч. (последующие)1. Опыт 1 (23.09-26.09)1. ФО-3/2106 часовснижение на 5-8 часов6. Опыт 21. ФО-3/2 118 часовснижение на 3-6 часов

272. Анализ работы промышленного ферментера в контрольный (01.09.05 20.09.05) и опытные периоды испытания стимуляторов2109. 26.09 и 11.10. - 21.10.05)

273. РВ общ./своб. Время выращивания Расчетная Расх. коэф-ициент по зерно -сырьюп/п Вариант Вход Выход % утилизации Проток м /час АСВ % производительность ТАСВ сут.

274. Контроль (01.09-20.09) 41/7,5 6,7 83,7 58,9 7,8 8,1 114,5 1,548

275. Опыт 1 (21.0926.09.05) 39/9,3 6 84.7 59,0 7,6 8,4 118,9 1,48

276. Опыт 2 (11.1020.10.05) 39/7,9 7,8 80.0 62,3 7,7 8,4 125,6 1,475

277. Качество готового продукта в период испытаний по интенсификации процесса биоконверсии зерносырья в промышленном биореакторе (октябрь 2005 г.)п/п Наименование показателей Ед. изм. Контроль 1.09 20.09 Опыт 1 21.09-25.09.05 Опыт 2 11.10-20.10.05

278. Гран. Пор. Гран. Пор. Гран. Порош.

279. Мае. доля влаги % П,4 10,5 10,75 10,25 10,05 10,3

280. Мае. доля сырого протеина % 41,2 41,7 39,8 40.7 42,5 42

281. Мае. доля по Барнштейну % 28,8 29.4 30,8 30,8 31,6 32,3

282. Мае. доля золы % 4,1 4,12 4.1 4,16 4,1 4,0

283. Мае. доля сырого жира % 6,2 6,8 7,0 7Д 6,7 6,7

284. Контроль 54 8 - 8,2 - 1,48 - 39,8 - 29 - 80,7 -

285. КБС1 67 24 7,2 -10 8,9 8,5 1,42 -8,4 41,2 3,5 30,8 6,2 106,7 32,2 352 127 760з: КБС2 75 38,9 6,6 -17,5 8,6 4,9 1,37 -11,6 42,1 5,8 30,6 5,5 113,7 40,9 645 567 560

286. Плановый выпуск провита 31000 тонн

287. Расходный коэффициент по зерносырью на производство провита 1,48 т/т Стоимость 1 тонны зерносырья 189 316 руб.

288. Вариант с использование КБС 1. 1,48 -1,42 = 0,06 * 189 316 * 31 000 = 352 127 760 руб. Вариант с использование КБС 2. 1,48- 1,37 = 0,11 * 189 316*31 000 = 64^ 1 Главный эконол1. Заместитель на11. Платонова Е.В.

289. СОГЛАСОВАНО» Заместитель директора ШНИИПБТ» фофессор дерева 2008г.

290. ТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ИНСТРУКЦИЯ

291. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНЫХ КОМПОЗИЦИОННЫХ БИОСТИМУЛЯТОРОВ-КБС (КОМПОЗИЦИОННЫХ АКТИВАТОРОВ БИОЛОГИЧЕСКИХ СИСТЕМ КАБС) НА СПИРТОВЫХ ЗАВОДАХ .1. Москва 20081. АКТ №2.

292. Промышленных испытаний по интенсификации производства спирта.

293. Краткая характеристика Дубровского спиртового завода:

294. Производственная мощность составляет 2500 дал. спирта в сутки.

295. В период испытаний завод работал на зерновом сырье рожь. Средний показатель крахмала составлял в период испытаний 54,8%.

296. В качестве производственной культуры на заводе используются сухие дрожжи компании «Фермиол», Франция.

297. Производство спирта осуществляется по классической технологии: подготовка крахмалсодержащего сырья; разваривание; осахаривание разваренной массы; приготовление дрожжей; сбраживание осахаренного сусла; выделение спирта из бражки и его ректификация.

298. На заводе используется 2-х ступенчатая Мичуринская схема высокотемпературного (138-140 град. С) разваривания измельченного сырья.

299. Применяемые ферментные материалы:- Диазим Х4 (11,4 литра на т/уел. крахмала);- Глюкозим JI400 (1,15 литра на тонну крахмала);- Амилекс JIT (0,4 литра на тонну крахмала);- Брюзайм -целюлаза (0,07 литра на тонну крахмала);

300. Кроме того, в дрожжанку дополнительно подаётся Протеаза 106 (0,1 литра на дрожжанку).

301. На заводе применяется периодический способ брожения. Время брожения в среднем составляет 60 64 часа.

302. Бродильное отделение оборудовано 9 бродильными чанами с рабочим объёмом бражки 100 куб.м. Геометрический объём чанов 130 куб.м.

303. Для борьбы с инфекцией применяется средство «Фриконт», который задаётся в дрожжанки при их складке в количестве 10 грамм на дрожжанку.

304. Выделенный на бражной колонне спирт подаётся на ректификацию.

305. Анализ качества спирта осуществляется:- физико-химический (типовыми растворами) лабораторией филиала;- газохроматографический в Центральной лаборатории ОАО «Брянскспиртпром».

306. Технология и цель испытаний.

307. КАБС при испытаниях подавался в виде раствора в дрожжанку перед подачей дрожжей из неё в бродильный чан.

308. Испытания проводились в один этап:

309. Контрольные шесть чанов (без КАБС) закладывались по два чана в начале, середине и в конце испытаний.

310. Параметры процессов сведены в Таблицу №1.

311. В таблице 2 приведены усреднённые параметры брожения по каждому виду КАБС и контролю.

312. Динамика процессов (кривые отброда и крепости) приведены на Рис. 1. для каждого из видов КАБС и контроля как усреднённые.

313. Начальные условия: сырьё, ферменты, объёмы дрожжей и сусла, концентрации, температура, начальная кислотность и другие параметры контрольных чанов аналогичны чанам с КАБС.

314. В связи с поставленной целью решались следующие задачи:

315. Выбор оптимального варианта КАБС;

316. Анализ результатов испытаний:

317. Начиная с 24 час. брожения, через каждые 4 часа определялись показатели крепости и отброда.

318. В конце процесса брожения для каждого чана определялись следующие параметры:- не гидролизованный крахмал;- не сброженные углеводы;- выход спирта;

319. Объём бражки после залива определяется с помощью мерной линейки.

320. Чаны с КАБС VI и КАБС - V , начиная с 40 часов брожения показали более высокую крепость как в процессе брожения, так и в конце его.

321. Выход спирта (См. Таблицу 2) в чанах с КАБС в среднем выше контроля в зависимости от вида активатора в диапазоне от 8 до 47,4 дал, или от 0,85 до 6,69 %.

322. Проведенные испытания показали проявление интенсифицирующих свойств на всех видах КАБС.

323. Наиболее эффективным оказался КАБС -VI, применение которого способствует увеличению выхода спирта на 6,7% относительно контроля.fjq

324. Применение КАБС способствует улучшению качества спирта, снижая концентрацию примесей уже на этапе зрелой бражки, что облегчает работу ректификационного оборудования и способствует более высоким потребительским свойствам готовой продукции.

325. Считаем целесообразным применение КАБС VI для интенсификации процесса спиртового брожения с целью увеличения выхода спирта и улучшению его качества.

326. О г ОАО «БРЯНСКСПИРТПРОМ»:1. От ООО «ФЕРМАТА»:1. Главный технолог:д. б. н., профессор:

327. Боброва»ковц М.И. Начальник Центральной лаборатории:1. Воробьёва Г.И.д. б. н.1. Максимова Г.Н.

328. Зав. произволе 1вом ф-л «Дубровский»

329. Макарова Е.А. Начальник лаборатории ф-л «Дубровский»1. Казакова Л.Д.1. Директор1. Глухих С.А.