РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ БАКТЕРИАЛЬНОГО БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ОЧИСТКИ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ ОТ МЕТАНОЛА тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Венков Дмитрий Александрович

• Венков Дмитрий Александрович
• кандидат наук
• 2017

Оглавление диссертации кандидат наук Венков Дмитрий Александрович

Введение

1 Обзор литературы

1.1 Использование метанола в газовой промышленности

1.2 Свойства метанола

1.3 Метилотрофия

1.4 Специализированные биопрепараты

2 Материалы и методы исследования

2.1 Микроорганизмы

2.2 Плотные и жидкие питательные среды

2.3 Приготовление рабочей культуры

2.4 Экспериментальные животные

2.5 Материалы, растворы, реактивы

2.6 Технологическое оборудование

2.7 Методы исследований

3 Результаты экспериментов и обсуждение

3.1 Выбор штаммов микроорганизмов и компонентов биопрепарата

3.1.1 Выбор штаммов микроорганизмов

3.1.2 Выбор компонентов биопрепарата

3.2 Конструирование биопрепарата

3.3 Эколого-биологические исследования

3.3.1 Токсикологические исследования и установление класса опасности биопрепарата

3.3.2 Биотестирование на гибробионтах

3.4 Вариант аппаратурно-технологической линии получения 108 биопрепарата методом контактно-сорбционного

обезвоживания на глауконите

3.5 Разработка технических условий на биопрепарат «БИОМ-М» 109 и технологического регламента на промышленный выпуск биопрепарата

3.6 Разработка технологического регламента применения 111 биопрепарата в полевых условиях

3.7 Полевой опыт по очистке от метанола загрязненной

местности газодобычи

4.Заключение

5. Выводы

5.1 Рекомендации и перспективы дальнейшей разработки темы

4.2 Практические предложения

6. Список литературы

7. Приложения

7.1 Паспорта штаммов

7.2 Нормативная документация

7.3 Акты испытаний

7.4 Патенты

7.5 Технологическая схема производства биопрепарата «БИОМ-М»

7.6 Отчеты

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ БАКТЕРИАЛЬНОГО БИОПРЕПАРАТА ДЛЯ ОЧИСТКИ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ ОТ МЕТАНОЛА»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Одним из важнейших условий развития страны и повышения качества жизни населения является функционирование и развитие экономически эффективного, соответствующего экологическим требованиям топливно энергетического комплекса. По данным Министерства энергетики Российской Федерации добыча природного и попутного нефтяного газа составило 640,2 млрд куб. м в 2016 г., что выше уровня 2015 г. на 0,7 %. Вопросы деструкции метанола приобретают все большее значение в связи с расширением производства и транспортировки газа, в ходе чего образуются твердые гидраты, способные вызывать серьезные проблемы, связанные с нарушением указанных технологических процессов.

В технологических процессах добычи, подготовки и транспорта газа твердые газовые гидраты вызывают серьезные проблемы, связанные с нарушением указанных технологических процессов. Традиционным и основным методом борьбы с гидратообразованием в газовой промышленности является использование ингибитора гидратообразования - метанола. Удельные расходные показатели потребления метанола в качестве ингибитора гидратообразования непосредственно зависят от состава добываемого природного газа, а также от технологии подготовки природного газа к транспорту (Грунвальд А.В., 2007, Wang et al., 2011).

Для предупреждения образования гидратов в стволах скважин используют традиционные методы: поддержание безгидратных режимов, предупреждение отложений гидратов и подача ингибитора (метанола) на забой скважины.

Расход метанола увеличивается с ростом давления и уменьшением температуры. Для характерных термобарических условий эксплуатации шлейфов на северных месторождениях теоретический расход метанола может изменяться в

-5

довольно широких пределах (от 0 до 300 г/1000 м газа). На практике же необходим дополнительный запас в 20-25 % по расходу метанола при ингибировании шлейфов с целью устранения опасности появления гидратов в коллекторе.

Основным методом предупреждения гидратообразования на установках подготовки природного газа к транспорту, так же как и в случае борьбы с гидратообразованием в системах промыслового сбора углеводородного сырья, является ввод ингибитора гидратообразования (метанола). Взамен чистого метанола практически с той же антигидратной эффективностью можно использовать технические сорта, а также его водные растворы.

Однако использование ингибиторов на основе метанола имеет ряд серьезных недостатков, к которым, прежде всего, относятся:

- очень высокая токсичность (как при действии паров, так и при попадании на кожные покровы и внутрь организма), а также высокая пожароопасность;

- возможность выпадения солей при смешивании с сильно минерализованной пластовой водой и, как следствие, солеотложения в промысловых коммуникациях;

- эффект ускоренного роста кристаллогидратов в присутствии разбавленных водных растворов метанола недостаточной концентрации для предупреждения гидратообразования;

- высокая упругость паров метанола (нормальная температура кипения ~ 65 °С), связанная с этим его очень высокая растворимость в сжатом природном газе и, соответственно, повышенный удельный расход метанола.

Метанол - сильный яд, действующий преимущественно на нервную и сосудистую системы. На объектах газовой промышленности разрешается использовать метанол только как средство предотвращения или разрушения кристаллогидратных пробок в аппаратах, приборах и газопроводах, а также для обработки призабойных зон газовых скважин. При этом очень большое количество операций с метанолом в ходе одной поставки. Каждая операция -потенциальный риск срыва всей поставки и возможной транспортной аварии и, соответственно, розлива метанола и загрязнения окружающей среды.

Многочисленные операции по сливу - наливу метанола увеличивают риск загрязнения окружающей среды и отравления обслуживающего персонала; перевозка метанола автотранспортом на большие расстояния в условиях Крайнего Севера требует наличия достаточно качественной и разветвленной сети автомобильных дорог, отсутствие или недостаточное качество которых может вести к автомобильным авариям, розливу метанола и загрязнению окружающей среды. Тем более вероятность аварии увеличивается с ростом потребления метанола в качестве ингибитора гидратообразования.

Крупнейшим потребителем метанола в Российской Федерации является газодобывающая отрасль. Объем потребления метанола в газовой промышленности России к 2030 г. составит более 1 млн. тонн в год.

Высокая токсичность метанола и его пожароопасность обуславливают необходимость строгого соблюдения требований техники безопасности, что практически сводит к минимуму возможность отравлений метанолом подготовленного технического персонала. Тем не менее всегда существует вероятность аварии на любом этапе применения метанола в качестве ингибитора гидратообразования на том или ином объекте газовой промышленности и, как следствие, розливов метанола, загрязнение окружающей среды и отравления персонала (Гриценко А.И. и др., 1999).

В настоящее время для очистки воды от метанола предлагается использовать стандартные технологии очистки, такие, как активный ил. Недостатками их являются низкая скорость деградации и необходимость дополнительной очистки образующихся органических соединений.

К биодеградации метанола способны также многие микроорганизмы (бактерии, дрожжи, микроскопические грибы). При этом основными агентами биодеградации метанола являются бактерии .

Аэробные метилотрофные бактерии составляют особую физиологическую группу микроорганизмов, обладающих уникальной способностью строить все клеточные компоненты из С1-соединений (метана, метанола, метилированных

аминов, дихлорметана и др.), которые являются токсичными природными и антропогенными загрязнителями (Мурзаков Б.Г. и др., 2006)

Задачей, решаемой авторами, стало создание универсального и эффективного биопрепарата-метанолдеструктора.

Технической задачей было создание композиции микроорганизмов, способных не только перерабатывать метанол, но и сопутствующие нефтепродукты (газовый конденсат), и одновременно облагораживать обработанную среду.

Степень разработанности.

Все известные технологии утилизации метанола сопряжены с большими экономическими затратами и угрозой загрязнения окружающей среды. В связи с этим, разработка, создание и применение новых экономичных и экологичных приёмов и методов выделения метанола из биотехнологической среды являются одной из важных задач промышленной биотехнологии. Очевидно, что актуальной проблемой для совершенствования технологии очистки загрязненных метанолом территорий является использование микроорганизмов, способных не только перерабатывать метанол, но и сопутствующие нефтепродукты (газовый конденсат).

Цель работы. Целью настоящего исследования являлась разработка технологии получения бактериального биопрепарата для очистки окружающей среды от метанола.

Для достижения поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

- научно обосновать и разработать технологию получения биопрепарата «БИОМ-М»;

- разработать технологическую схему получения биопрепарата «БИОМ-М»;

- провести доклинические и эколого-биологические исследования;

- определить критические концентрации метанола в воде и почве, позволяющих использовать биопрепарат;

- оценить возможность применения биопрепарата в средах с повышенным

содержанием соли;

- провести полевой опыт по очистке от метанола загрязненной местности;

- разработать и утвердить нормативно-техническую документацию на производство препарата «БИОМ-М».

Научная новизна. Впервые на основании консорциума бактерий иммобилизованных на природном глауконите разработан биопрепарат «БИОМ-

3 3

М», предназначенный для очистки загрязненной метанолом (до 100 см /дм ) в присутствии соли (до 100 г/кг) почвы, воды и технологических конструкций хранения и переработки метанола с одновременным восстановлением физико -химических свойств и естественного биоценоза почв и акваторий.

Научная новизна работы подтверждена положительным решением о выдаче патента на изобретение «Препарат для утилизации метанола «БИОМ-М» и способ его получения».

Теоретическая и практическая значимость работы. Практическая значимость работы заключается в том, что разработанный биопрепарат «БИОМ-М» позволяет эффективно проводить биоремедиацию территорий, загрязненных метанолом. Создана технология КСО, позволяющая получать сухой биопрепарат, предназначенный для очистки загрязненной метанолом почвы и воды.

В практику экологической очистки территорий от метанола введен биопрепарат «БИОМ-М», получен Сертификат соответствия на его серийный выпуск, Экологический сертификат для применения.

Разработаны технические условия, промышленный регламент и технологический регламент применения биопрепарата «БИОМ-М».

Основные положения, выносимые на защиту:

- технология получения биопрепарата для очистки окружающей среды от метанола с применением глауконита «БИОМ-М»;

- критические концентрации метанола в воде и почве, позволяющие использовать биопрепарат;

- возможность применения биопрепарата «БИОМ-М» в средах с повышенным содержанием соли;

- результаты полевого опыта по очистке от метанола загрязненной местности с

использованием разработанного биопрепарата «БИОМ-М».

Степень достоверности и апробация результатов. Результаты работы докладывались и вошли в ежегодные отчеты ФГБОУ ВО МГАВМиБ-МВА им. К.И. Скрябина. Материалы диссертационного исследования изложены в докладе на XXV международной конференция «Развитие науки в XXI веке». Разработанный препарат «БИОМ-М» прошел полевые испытания на территории газодобывающей компании, расположенной в Пуровском районе Ямало-Ненецкого автономного округа, показав высокую эффективность очистки местности от метанола.

Получены Сертификат соответствия, Экологический сертификат и Экспертное Заключение о соответствии требованиям «Единых санитарно-эпидемиологических и гигиенических требований к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю)», утвержденным решением Комиссии таможенного союза № 299 от 28.05. 2010 г. гл. II. разд. 15.

Достоверность выводов основывается на значительном объеме на значительном объеме полученных соискателем экспериментальных данных. Статистическую обработку результатов экспериментов проводили общепринятым методом. Расчеты и построение технологических таблиц и схем осуществляли с помощью программы «Microsoft Office Excel 2010», входящей в пакет программ «Microsoft Office 2010».

Соответствие диссертации паспорту специальности. Выполненная диссертационная работа соответствует пунктам 1, 2, 3, 4, 5, 7 и 8 паспорта специальности 03.01.06 - Биотехнология (в том числе бионанотехнологии).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 печатных работы, в том числе 3 статьи в рецензируемых научных журналах из списка ВАК, а также 1 статья в сборнике докладов научных конференций. Получено положительное решение Российского агентства по патентам и товарным знакам.

Объем и структура диссертации. Диссертация представлена на 164 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, объекты и методы исследования, результаты и их обсуждение, заключение, выводы, практические рекомендации, список сокращений и условных обозначений, список литературы и приложения. Работа содержит 22 рисунка и 32 таблицы. Список литературы включает 131 источник, из которых 55 отечественных и 76 зарубежных авторов.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Использование метанола в газовой промышленности

Техногенные газовые гидраты могут образовываться в нижеперечисленных системах добычи газа: в призабойной зоне, в стволах скважин, в шлейфах и внутрипромысловых коллекторах, в системах промысловой и заводской подготовки газа, а также в магистральных газотранспортных системах. В технологических процессах добычи, подготовки и транспорта газа твердые газовые гидраты вызывают серьезные проблемы, связанные с нарушением протекания этих процессов.

Для борьбы с гидратами разработан ряд методов, показанных на рис. 1, в том числе и методы, использующие химические реагенты - ингибиторы гидратообразования [10].

Рис. 1. Методы борьбы с техногенным гидратообразованием в газопромысловых и газотранспортных системах.

Наиболее распространенным методом предупреждения гидратообразования в системах сбора является ввод ингибитора гидратообразования (метанола).

Расход метанола увеличивается с ростом давления и уменьшением температуры. Для характерных термобарических условий эксплуатации шлейфов на северных месторождениях теоретический расход метанола может изменяться в довольно

-5

широких пределах (от 0 до 300 г/1000 м газа). На практике же необходим дополнительный запас в 20-25 % по расходу метанола при ингибировании шлейфов с целью устранения опасности появления гидратов в коллекторе.

Основным методом предупреждения гидратообразования на установках подготовки природного газа к транспорту, так же как и в случае борьбы с гидратообразованием в системах промыслового сбора углеводородного сырья, является ввод ингибитора гидратообразования (метанола).

В настоящее время на действующих месторождениях Крайнего Севера России в качестве ингибитора гидратообразования используется практически только метанол. Метанол - широко распространенный антигидратный реагент, используемый как для предупреждения гидратообразования, так и для ликвидации возникающих по каким-либо причинам гидратных отложений (несплошных гидратных пробок).

Он также постоянно рекомендуется как ингибитор гидратообразования и на вновь проектируемых месторождениях Надым-Пур-Тазовского региона и группы месторождений п-ова Ямал. Метанол используется на Оренбургском, Карачаганакском и Астраханском ГКМ, в составе природного газа которых присутствует сероводород и диоксид углерода, а также на большинстве ПХГ, ГРС и шельфовых ГКМ.

Повсеместное использование метанола в качестве ингибитора гидратообразования на газодобывающих предприятиях России обусловлено следующими причинами:

- относительно низкой стоимостью (по сравнению с другими ингибиторами гидратообразования), широко развитой промышленной базой. Производство метанола может быть развернуто непосредственно в местах потребления -газовых промыслах;

- высокой технологичностью процесса ввода и распределения метанола в

требуемые участки технологической цепочки; отпадает необходимость в блоке приготовления реагента, что, например, является характерной особенностью применения ингибиторов неэлектролитов;

- наивысшей среди известных ингибиторов антигидратной активностью, сохраняющейся даже при низких температурах;

- очень низкой температурой замерзания концентрированных растворов метанола и исключительно малой их вязкостью даже при температурах ниже -50 °С;

- сравнительно малой растворимостью метанола в нестабильном конденсате, особенно при контакте нестабильного газового конденсата с отработанным (насыщенным) водным раствором метанола, концентрацией менее 50 мас. %;

- некоррозионностью метанола и его водных растворов;

- наличием достаточно простых технологических схем регенерации отработанных растворов;

- принципиальной проработанностью в настоящее время вопросов утилизации и захоронения промышленных стоков, содержащих метанол, в связи с постоянно возрастающими требованиями к охране окружающей среды;

- высокой эффективностью реагента не только для предупреждения гидратообразования, но и при ликвидации возникающих при нарушениях технологического режима несплошных гидратных пробок (отложений) в промысловых коммуникациях (скважинах, шлейфах, коллекторах, АВО, теплообменном оборудовании).

Взамен чистого метанола практически с той же антигидратной эффективностью можно использовать технические сорта, а также его водные растворы.

Однако использование ингибиторов на основе метанола имеет ряд серьезных недостатков, к которым прежде всего относятся:

- очень высокая токсичность (как при действии паров, так и при попадании на кожные покровы и внутрь организма), а также высокая пожароопасность;

- возможность выпадения солей при смешивании с сильно

минерализованной пластовой водой и, как следствие, солеотложения в промысловых коммуникациях;

- эффект ускоренного роста кристаллогидратов в присутствии разбавленных водных растворов метанола недостаточной концентрации для предупреждения образования гидратов;

- высокая упругость паров метанола (нормальная температура кипения ~ 65 °С), связанная с этим его очень высокая растворимость в сжатом природном газе и, соответственно, повышенный удельный расход метанола [1,6,7,8,10,13,14,15,18,22,23,24,25,26,29,31,39,51,54].

Промышленная и экологическая безопасность работы с метанолом на объектах газовой промышленности

Безопасность работы с метанолом на объектах газовой промышленности России определяется различного рода документами (инструкции, санитарные правила, правила безопасности, ГОСТы), указанными в Сборнике документов по безопасности работы с метанолом на объектах газовой промышленности России [19,20,42].

Основным документом указанного сборника, регламентирующим применение метанола, является Инструкция о порядке получения от поставщиков, перевозки, хранения, отпуска и применения метанола на объектах газовой промышленности, утвержденная заместителем Министра газовой промышленности М.И. Агапчевым 7 июля 1975 года и согласованная с Минздравом СССР N 122-19/134-4 от 27.05.75 и МВД СССР 14.05.75 [42].

В инструкции рассматриваются основные этапы процесса доставки и применения метанола на объектах газовой промышленности, где требуется строгое соблюдение мер безопасности работы с метанолом:

- допуск к работе с метанолом;

- приемка метанола от железной дороги и его перевозка на склад;

- хранение метанола на складах;

- учет и отпуск метанола со склада;

- использование метанола на газопромысловых объектах, магистральных

газопроводах, станциях подземного хранения газа, кустовых базах сжиженного газа;

- списание метанола;

- меры безопасности при транспортировке метанола по метанолопроводу.

Общие требования Инструкции, предъявляемые к безопасности применения

метанола на различных объектах газовой промышленности, заключаются в следующем.

На объектах газовой промышленности разрешается использовать метанол только как средство предотвращения или разрушения кристаллогидратных пробок в аппаратах, приборах и газопроводах, а также для обработки призабойных зон газовых скважин.

Порядок применения метанола на технологические нужды определяется в соответствии с утвержденными проектами обустройства газовых месторождений, «Правилами технической эксплуатации магистральных газопроводов» и «Правилами безопасности в нефтегазодобывающей промышленности».

Ответственность за обеспечение необходимых условий для правильной организации работ с метанолом и контроль за соблюдением настоящей Инструкции возлагается на руководителей предприятий.

Руководители объединений и управлений обязаны специальным приказом определить предприятия, в которых разрешается создание базовых складов метанола, а также обеспечить места и условия его содержания на производственных объектах.

Существующая сегодня транспортная схема обеспечения метанолом добывающих предприятий ОАО «Газпром» и независимых недропользователей в Надым-Пур-Тазовском регионе достаточно сложна и включает в себя несколько этапов:

- залив метанола в специализированные железнодорожные цистерны на заводе-изготовителе;

- транспортировка метанола по железной дороге до железнодорожной станции назначения (Коротчаево);

- транспортировка метанола в железнодорожных цистернах на базу ООО «Газкомплектимпекс»;

- перелив метанола на терминале базы ООО «Газкомплектимпекс» из железнодорожных цистерн в стационарные емкости для хранения;

- возврат порожних специализированных железнодорожных цистерн на завод-изготовитель метанола;

- подготовка метанола к его использованию на объектах добычи природного газа (добавление к метанолу чернил или одоранта);

- перелив метанола из стационарной емкости в специализированную, автомобильную цистерну;

- транспортировка метанола автотранспортом до базы метанола на газодобывающем предприятии;

- перелив метанола из специализированной автомобильной цистерны в стационарную специальную емкость на базе метанола газодобывающего предприятия;

- возврат порожних специализированных автомобильных цистерн на базу ООО «Газкомплектимпекс»;

- перелив из стационарной емкости на базе метанола газодобывающего предприятия в автоцистерны и развоз метанола на конкретные объекты потребления.

Однако анализ этой схемы показывает следующие недостатки:

- очень большое количество операций с метанолом в ходе одной поставки. Каждая операция - потенциальный риск срыва всей поставки и возможной транспортной аварии и, соответственно, розлива метанола и загрязнения окружающей среды;

- при транспортировке метанола как железнодорожным, так и автомобильным транспортом требуется соблюдение особых мер безопасности, которые предусмотрены в соответствующих нормативных документах, регламентирующих транспортировку метанола;

- наличие промежуточного склада хранения требует соблюдения

специальных мер, которые предусмотрены в соответствующих нормативных документах, регламентирующих хранение метанола;

- многочисленные операции по сливу - наливу метанола увеличивают риск загрязнения окружающей среды и отравления обслуживающего персонала;

- перевозка метанола автотранспортом на большие расстояния в условиях Крайнего Севера требует наличия достаточно качественной и разветвленной сети автомобильных дорог, отсутствие или недостаточное качество которых может вести к автомобильным авариям, розливу метанола и загрязнению окружающей среды.

Высокая токсичность метанола и его пожароопасность обуславливают необходимость строгого соблюдения требований техники безопасности, что практически сводит к минимуму возможность отравлений метанолом подготовленного технического персонала. Тем не менее, всегда существует вероятность аварии на любом этапе применения метанола в качестве ингибитора гидратообразования на том или ином объекте газовой промышленности и, как следствие, розливов метанола, загрязнения окружающей среды и отравления персонала. Тем более вероятность аварии увеличивается с ростом потребления метанола в качестве ингибитора гидратообразования.

С учетом роста в ближайшей перспективе доли валанжинского газа в общем объеме добываемого природного газа, а также повышенного расхода метанола при предотвращении гидратообразования на установках НТС, используемых для подготовки валанжинского газа, вопрос расходных показателей метанола становится актуальным.

В настоящее время основная добыча газа (более 90 %) на северных месторождениях России осуществляется за счет разработки чисто газовых залежей - главным образом сеноманского продуктивного горизонта. Достаточно упомянуть только такие уникальные месторождения-супергиганты, как Медвежье, Уренгойское и Ямбургское. В стадии проектирования и разработки находится ряд крупных чисто газовых месторождений Западной Сибири и п-ова Ямал, намеченных к освоению уже в ближайшие годы.

Основные требования к качеству товарного природного газа, транспортируемого по магистральным газопроводам, регламентируются ОСТом 51.40-93 «Газы горючие природные, поставляемые и транспортируемые по магистральным газопроводам. Технические условия».

Для предотвращения образования гидратов используется метанол - по существу, предотвращение гидратообразования является одним из элементов подготовки газа к транспорту. При этом, чем ниже температура реализации технологических процессов добычи, сбора и промысловой подготовки газа, тем выше вероятность образования гидратов и тем больше ингибиторов, а именно метанола, требуется для предотвращения процесса выпадения гидратов [4,5,12,55].

С точки зрения гидратообразования рассмотренные выше технологии подготовки газа к транспорту неравнозначны. При прочих равных условиях детандерные технологии обеспечивают подготовку газа при более низких температурах по сравнению с другими рассмотренными выше технологиями. Поэтому для реализации и поддержания процесса подготовки газа по детандерной технологии требуются более высокие расходы метанола.

В зависимости от используемой технологии подготовки природного газа к транспорту, а также от состава добываемого природного газа, расходные показатели потребления метанола в качестве ингибитора гидратообразования также различаются.

Исходя из опыта эксплуатации различных установок подготовки газа, можно принять следующие расходные показатели потребления метанола:

- сеноманский газ - адсорбционная или абсорбционная осушка, средние

-5

удельные показатели потребления метанола составляют 30-50 г/1000 м обрабатываемого газа;

- сеноманский газ - низкотемпературная сепарация с детандер-компрессорным агрегатом «среднего давления», средние удельные показатели

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Венков Дмитрий Александрович, 2017 год

6. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алиев, А.Г. Особенности промысловой подготовки газа и конденсата на Карачаганакском НГКМ и пути их решения / А.Г. Алиев, Р.Н. Исхаков. - М.: ВНИИЭгазпром, 1988. -27 с.

2. База данных по опасным веществам [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://rpohv.ru/lang/en

3. Безбородов, А.М. Ферментативные процессы в биотехнологии / А.М. Безбородов, Н.А. Загустина, В. О. Попов. - М.: Наука, 2008.- 335 с.

4. Бекиров, Т.М. Сбор и подготовка к транспорту природных газов / Т.М. Бекиров, А.Т. Шаталов. - М.: Недра, 1986.- 261 с.

5. Бекиров, Т.М. Промысловая и заводская обработка природных и нефтяных газов / Т.М. Бекиров. - М.: Недра, 1980. -293 с.

6. Бухгалтер, Э.Б. Предупреждение и ликвидация гидратообразования при подготовке и транспорте нефтяного и природного газов / Э.Б. Бухгалтер. - М.: ВНИИОЭНГ, 1982. Вып.10 (34).- 41 с.

7. Временная инструкция по приготовлению и использованию хлористого кальция в качестве ингибитора гидратообразования. - М.: ВНИИГАЗ,

1968.- 22 с.

8. Временное методическое руководство по предупреждению и ликвидации гидратных пробок в нефтяных скважинах. - Тюмень: СибНИИНП, 1984.

9. Гальченко, В.Ф. Метанотрофные бактерии / В.Ф. Гальченко.- М.: ГЕОС, 2001. - 500 с.

10. Гриценко, А.И. Сбор и промысловая подготовка газа на северных месторождениях России / А.И. Гриценко, В.А. Истомин, А.Н. Кульков, Р.С. Сулейманов. - М.: ОАО «Издательство «Недра», 1999. - 473 с.

11. Грунвальд, А.В. Использование метанола в газовой промышленности в качестве ингибитора гидратообразования и прогноз его потребления в период до 2030 г. / А.В. Грунвальд // Нефтегазовое дело.- 2007.- № 2.- С. 23.

12. Гухман, Л.М. Подготовка газа северных газовых месторождений к дальнему транспорту / Л.М. Гухман. - Л.: Недра, 1980. - 161 с.

13. Девликамов, В.В. Борьба с гидратами при эксплуатации газлифтных скважин: Учебное пособие / В.В. Девликамов, М.М. Кабиров, А.Р. Фазлутдинов. -Уфа: УфНИИ, 1984. - 80 с.

14. Дегтярев, Б.В. Борьба с гидратами при эксплуатации газовых скважин в северных районах / Б.В. Дегтярев, Э.Б. Бухгалтер. - М.: Недра, 1976. - 197 с.

15. Дегтярев, Б.В. Борьба с гидратами при эксплуатации газовых скважин в районах Севера / Б.В. Дегтярев, Г.С. Лутошкин, Э.Б. Бухгалтер. - М.: Недра,

1969. - 119 с.

16. Диканская, Э.М. Биотехнологический потенциал метилотрофных бактерий и пути его реализации / Э.М. Диканская. - Сб. науч. трудов «Биохимия и физиология микроорганизмов». ОНТИ НЦБИ АН СССР, Пущино, 1987.- С. 142158.

17. Ермилова, Е.В. Молекулярные аспекты адаптации прокариот / Е.В.

Ермилова.- СПб.: Изд-во СПбГУ, 2007. - 298 с.

18. Жданова, Н.В. Осушка углеводородных газов / Н.В. Жданова, А.Л. Халиф. - М.: Химия, 1984. - 192 с.

19. Инструкция о порядке получения от поставщиков, перевозки, хранения, отпуска и применения метанола на объектах газовой промышленности. 1975 г.

20. Инструкция по расчету нормативов потребления метанола для использования в расчетах предельно допустимых или временно согласованных сбросов метанола для объектов ОАО "ГАЗПРОМ" ВРД 39-1.13-010-2000.-Москва, 2000.

21. Информация по химическим веществам [Электронный ресурс] -Режим доступа: http://chemfinder.cambridgesoft.com

22. Истомин, В.А. Аналитический библиографический указатель литературы по газовым гидратам (1983-1987 гг.) / В.А. Истомин, В.С. Якушев, В.В. Карпюк. - М.: ВНИИГАЗ, 1988. - 246 с.

23. Истомин, В.А. Газовые гидраты в природных условиях / В.А. Истомин, В.С. Якушев. - М.: Недра, 1992. - 235 с.

24. Истомин, В.А. Предупреждение и ликвидация газовых гидратов в системах сбора и промысловой обработки газа и нефти / В.А. Истомин. - М.: ВНИИЭгазпром, 1990. - 214 с.

25. Калтелин, Н.Д. Инструкция по промышленному применению технологии предупреждения образования гидратных пробок в газовых скважинах на предприятиях Главтюменнефтегаза. РД-39-5-768-82. / Н.Д. Калтелин, А.Г. Малышев. - Тюмень, СибНИИНП: 1982. - 19 с.

26. Коротаев, Ю.П. Борьба с гидратами при транспорте природных газов / Ю.П. Коротаев, А.М. Кулиев, Р.М. Мусаев. - М.: Недра, 1973. 136 с.

27. Клейтон, Г.Д. Производственная гигиена и токсикология Патти / Г.Д. Клейтон, Ф.Е. Клейтон. - США: John Wiley & Sons Inc, 1978. 5-е издание.- 453 с.

28. Ланиган, С. Сводный отчет по оценке безопасности метилового спирта / С. Ланиган. - International Journal of Toxicology., 2001. Т. 20. - 22 с.

29. Макогон, Ю.Ф. Временная инструкция по предупреждению и ликвидации гидратов в системах добычи и транспорта газа / Ю.Ф. Макогон, А.Г. Малышев, А.Д. Седых, К.Л. Унароков, Ю.И. Топчев. - М.: ВНИИГАЗ, 1983.-132 с.

30. Малашенко, Ю.Р. Биология метанобразующих и метанокисляющих микроорганизмов / Ю.Р. Малашенко, Ю. Хайер, У. Бергер, В.А. Романовская, Ф.В. Мучник.- Киев: Паукова думка. 1993. - 255 с.

31. Малышев, А.Г. Особенности пробкообразования в фонтанных скважинах Северо-Варьеганского месторождения. В сб.: Нефтепромысловое дело, сер. Экспресс-информация / А.Г. Малышев, В.А. Хорошилов. - М.: ВНИИОЭНГ, 1986. Вып. 1. - с. 8.

32. Мурзаков, Б.Г. Выделение метилотрофных бактерий из микробиоценоза метанолсодержащих вод / Б.Г. Мурзаков, Г.С. Акопова, П.А. Маркина // Газовая промышленность. -2006. -№3. -С.83-85.

33. Международная программа химической безопасности, метанол, критерий здоровья окружающей среды, ВОЗ, 1997 г. [Электронный ресурс] -Режим доступа: http://www.portal.pmnch.org/ipcs/publications/icsc/ru/

34. Нельсон, Б.К. Тератологическая оценка метанола и этанола при высоких вдыхаемых дозах у крыс / Б.К. Нельсон // Фундаментальная и прикладная токсикология.- Т5. -С. 1-12.

35. Нэнси Дж. Боллинджер Руководство NIOSH по опасным химическим веществам. Национальный Институт Охраны Труда / Нэнси Дж. Боллинджер, Х. Роберт Шютц и др. - 1987.

36. Опасные материалы. Руководство по противопожарной защите, 13-е издание. Австралийский комитет по строительным нормам (ABCB), Канберра, 2005 г. - 203 с.

37. Пиневич, А.В. Микробиология. Биология прокариотов: Учебник в 3 т., 2-е изд / А.В. Пиневич. - СПб.: Изд-во СПбГУ. 2007.

38. Подгорский, B.C. Физиология и метаболизм метанолусваивающих дрожжей / B.C. Подгорский.- Киев: Паукова думка. 1982. - 152 с.

39. Природные и техногенные газовые гидраты: Сборник научных трудов/Под редакцией А.И. Гриценко, В.А. Истомина. - М.: ВНИИГАЗ, 1990. -210 с.

40. Романовская, В.А. Систематика метилотрофных бактерий / В.А. Романовская, М.С. Столяр, Ю.Р. Малашенко.- Киев: Наукова думка. 1991. - 212 с.

41. Скулачев, В.П. Энергетика биологических мембран / В.П. Скулачев.-М.: Наука, 1989. - 564 с.

42. Сборник документов по безопасности работы с метанолом на объектах министерства газовой промышленности. Под редакцией заместителя начальника Управления охраны труда, военизированных частей и охраны предприятий Министерства газовой промышленности Яновича А.Н., 1987 г. [Электронный ресурс]- Режим доступа: http://docs.cntd.ru/document/1200003073

43. Троценко, Ю.А. Биотехнологический потенциал аэробных метилотрофных бактерий: настоящее и будущее / Ю.А. Троценко, Н.В. Доронина, В.Н. Хмеленина// Прикл. биохим. микробиол.- 2005.- №41. - С. 433-441.

44. Троценко, Ю.А. Экстремофильные метанотрофы / Ю.А. Троценко, В.Н. Хмеленина. - Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН. 2008. - 206 с.

45. Троценко, Ю.А. Экстремофильные метанотрофы / Ю.А. Троценко, В.Н. Хмеленина.- ОНТИ ПНЦ РАН, Пущино, 2008. - 208 с.

46. Троценко, Ю.А. Аэробные метилобактерии / Ю.А. Троценко, Н.В. Доронина, М.Л. Торгонская. - Пущино: ОНТИ ПНЦ РАН, 2010. - 325 с.

47. Троценко, Ю.А. Биология и биотехнология аэробных метилотрофов/ Ю.А. Троценко, Н.В. Доронина, В.Н. Хмеленина, О. Понаморева.- Тула :ТулГУ. 2010.

48. Троценко, Ю.А. Аэробные метилобактерии / Ю.А. Троценко, Н.В. Доронина, М.Л. Торгонская. - ОНТИ ПНЦ РАН, Пущино, 2010. - 325 с.

49. Троценко, Ю.А. Метилотрофные дрожжи / Ю.А. Троценко, М.Л. Торгонская. - М.: «ТР-Принт», 2011. - 313 с.

50. Труды Института микробиологии имени С.Н. Виноградского РАН.

Выпуск XIII. К 100-летию открытия метанотрофии / Под ред. В.Ф. Гальченко.-М.: Наука. 2006. - 343 с.

51. Фазлутдинов, А.Р. Исследование причин образования гидратов газлифтных скважин в интервалах многолетнемерзлых пород и разработка способов борьбы с ними : автореф. дис. ... канд. техн. наук / А.Р. Фазлутдинов. -Тюмень, ЗапСибНИГНИ, 1988. - 22 с.

52. Федоров, Д.Н. Фитосимбиоз аэробных метилобактерий: новые факты и гипотезы / Д.Н. Федоров, Н.В. Доронина, Ю.А. Троценко // Микробиология 80.2011.- С.435-446.

53. Форсберг, К. Руководство по быстрому выбору противохимической защитной одежды / К. Форсберг. - 3-е изд. Нью-Йорк, Ван Ностранд Reinhold, 1997.

54. Хорошилов, В.А. Предупреждение и ликвидация гидратных отложений при добыче нефти. - Нефтепромысловое дело / В.А. Хорошилов, А.Г. Малышев. - М.: ВНИИОЭНГ, 1986.- Вып. 15(122). - 55 с.

55. Чуракаев, А.М. Газоперерабатывающие заводы и установки / А.М. Чуракаев. - М.: Недра, 1994. - 333 с.

56. Anthony, C. The Biochemistry of methylotrophs/ C. Anthony. - London: Acad. Press. 1982. - 404 p.

57. Bachhawat, A.K., Thakur A., Kaur H., Kumar A., Yadav A. (2009) Glutathione production in yeast. In: Satyanarayana T., Kunze G. (Eds.) Yeast biotechnology: diversity and applications, vol. 259. Ch. 13. Dordrecht: Springer Science + Business Media B.V., p.259-280.

58. Baerends R.J.S., De Hustler E., Geertman J.-M.A., Daran J.-M., Van Maris A.J.A., Veenhuis M., Van der Klei I.J., Pronk J.T. (2008) Engineering for analysis of a Saccharomyces cerevisiae strain that uses formaldehyde as an auxiliary substrate. Appl. Environ. Microbiol. 74: 3182-3188.

59. Bélanger L., Figueira M.M., Bourque D., Morel L., Béland M., Laramée L., Groleau D., Miguez C.B. (2004) Production of heterologous protein by Methylobacterium extorquens in high cell density fermentation. FEMS Microbiol. Lett. 231: 197-204.

60. Bodrossy, L. Methane utilizing bacteria and their biotechnological applications / L. Bodrossy, K.L. Kovacs // Indian J. Experim. Biol.-1994. - № 32. -Р. 443-449.

61. Bothe, H. Heterotrophic bacteria growing in association with Methylococcus capsulatus (Bath) in a single cell protein production process / H. Bothe, K.M. Jensen, A. Mergel, J. Larsen, C. Jorgensen, L. Jorgensen // Adv. Appl. Microbiol.-2002. -№ 59. - Р. 33-39.

62. Bourque, D. High-cell-density production of poly-P-hydroxybutyrate (PHB) from methanol by Methylobacterium extorquens: production of high-molecularmass PHB / D. Bourque, Y. Pomerleau, D. Groleau // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1995. - №44. - P. 367-376.

63. Chet, I. Biological control of fungal pathogens / I. Chet, J. Inbar // Appl. Biochem. Biotech. - 1994. -№ 48. - Р. 37-43.

64. Clark, D.S. Enantioselective oxidation of 2-methyl-1-alkanols by alcohol oxidase from methylotrophic yeasts / D.S. Clark, S. Geresh, R. DiCosmo // Bioorg. Medic. Chem. Lett. - 1995.- № 5. - P. 1383-1388.

65. Cos, O. Operational strategies, monitoring and control of heterologous protein production in the methylotrophic yeast Pichia pastoris under different promoters: A review / O. Cos, R. Ramón, J.L. Montesinos, F. Valero // Microb. Cell Fact. - 2006. -№ 5. -P. 17.

66. Cregg, J.M. Recombinant protein expression in Pichia pastoris / J.M. Cregg, J. Lin Cereghino, J. Shi, D.R. Higgins // Mol. Biotechnol.- 2000.-№ 16. - P. 2352.

67. Dalton, H. Implication of the nature of methane monooxygenase on carbon assimilation in methanotrophs. In: Poole R.K., Dow C.S. (Eds.) Microbial gas metabolism, mechanistic, metabolic and biotechnological aspects. London: Acad. Press. 1985. - p. 201-208.

68. De Boer, L. Biosynthesis of aromatic amino acids in Nocardia sp. 239: effects of amino acid analogues on growth and regulatory enzymes / L. De Boer, G. Grobben, J.W. Vrijbloed, L. Dijkhuisen // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1990. - № 33. - P. 183-189.

69. Eisenberg, A. Pyruvic acid production using methylotrophic yeast transformants as catalyst / A. Eisenberg, J.E. Seip, J.E. Gavagan, M.S. Payne, D.L. Anton, R. DiCosimo // J. Mol. Catalysis B: Enzymatic. - 1997. - № 2. - P. 223-232.

70. Flanagan, W.P. Biodegradation of dichloromethane in a granular activated carbon fluidizedbed reactor. Water Environ. Res. - 1998.- 70. -P. 60-66.

71. Gellissen, G. New yeast expression platforms based on methylotrophic Hansenula polymorpha and Pichia pastoris and on dimorphic Arxula adeninivorans and Yarrowia lipolytica - a comparison / Gellissen G., Kunze G., Gaillardin C., Cregg J.M., Berardi E., Veenhuis M., Van der Klei I. // FEMS Yeast Res. - 2005.-№ 5. - P. 10791096.

72. Gidijala, L. An engineered yeast efficiently secreting penicillin // L. Gidijala, J.A.K.W. Kiel, R.D. Douma at all // PLoS ONE. - 2009.-№ 4.-P.8317.

73. Goeller, K. Protection of a model enzyme (lactate dehydrogenase) against heat, urea and freeze-thaw treatment by compatible solute additive / K. Goeller, E.A. Galinski // J. Mol. Catal. B. Enzymic. - 1999. -№ 7.-P. 37-45.

74. Gonchar, M.V. Microbial O2- and H2O2-electrode sensors for alcohol assays based on the use of permeabilized mutant yeast cells as the sensitive bioelements / M.V. Gonchar, M.M. Maidan, O.M. Moroz, J.R. Woodward, A.A. Sibirny // Biosens. Bioelectron. - 1998.- №13. - P. 945-952.

75. Gonchar, M. A new oxidase-peroxidase kit for ethanol assays in alcoholic beverages / M.Gonchar, M.Maidan, H.Pavlishko, A.Sibirny // Food Technol. Biotechnol.- 2001.-№ 39. - P.37-42.

76. Graf, R. The multifunctional role of ectoine as a natural cell protectant / R.Graf, S.Anzali, J.Buenger, F.Pfluecker, H.Driller // Clinics Dermatol.- 2008.-№ 26. -P. 326-333.

77. Guelce H., Guelce A., Kavanoz M., Coscun H., Yildiz A. A new amperometric enzyme electrode for alcohol determination. Biosens.- Bioelectron.-2002.-17: 517-521.

78. Hall, E.A.H. Exploring sensors to monitor some environmental discharges. In: Nikolelis D.P., Krull U.J., Wang J., Mascini M. (Eds.) Biosensors for direct monitoring of environmental pollutants in field. London: Kluwer Acad. Publ., 1998.- P. 227-237.

79. Hammer, G., Harrison D.E.F. Single cell protein: the technology, economics and future potential. In: Harrison D.E.F., Higgins I.J., Watkinson R. (Eds.) Hydrocarbons in biotechnology.- London: Heyden, 1980. - P. 59-73.

80. Hanson, A.D. One-carbon metabolism in higher plants. Ann. Rev. Plant Physiol / A.D.Hanson, S. Roje // Plant Mol. Biol. -2001.- 52. P. 119-137.

81. Hartner, F.S. Regulation of methanol utilization pathway genes in yeasts / F.S. Hartner, A. Glieder // Microb. Cell Fact. - 2006.-№ 5. - P. 39.

82. Higgins, I.J. New findings in methane-utilizing bacteria highlight their importance in the biosphere and their commercial potential / I.J. Higgins, D.J. Best, R.C. Hammond // Nature. -1980.- 286.-P.561-564.

83. Hou, C.T. Growth and polysaccharide production by Methylocystis parvus OBBP on methanol / C.T. Hou, A.I. Laskin, R.N. Patel // Appl. Environ. Microbiol. -1978.-№37.-P. 800-804.

84. Indiragandhi, P. Induction of defense responses in tomato against Pseudomonas syringae pv. tomato by regulating the stress ethylene level with Methylobacterium oryzae CBMB20 containing 1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase / P.Indiragandhi, R.Anandham, K.Kim, W.Yim, M.Madhaiyan, T.Sa // World J. Microbiol. Biotech. - 2008. - №24.-P.1037-1045.

85. Ishikawa, K. Medium composition suitable for L-lysine production by Methylophilus methylotrophus in fed-batch cultivation / K.Ishikawa, Y.Toda-Murakoshi, F. Ohnishi, K.Kondo, T. Osumi, K.Asano // J. Biosci. Bioeng. - 2008.-106. - P.574-579.

86. Izumi, Y. L-serine production by a methylotroph and its related enzymes / Y. Izumi, T.Yoshida, S.S. Miyazaki, T. Mitsunaga, T. Ohshiro, M. Shimao, A.Miyata, T.Tanabe // Appl. Microbiol. Biotechnol.- 1993.- 39. - P.427-432.

87. Kanamaru, K. 2-O-Methyl-D-mannose in an extracellular polysaccharide from Hyphomicrobium sp / Kanamaru K., Iwamura Y., Mikami Y., Obi Y., Kisaki T. // Agric. Biol. Chem. - 1982.- 46.- P. 2419-2424.

88. Kato, N. Dihydroxyacetone production from methanol by a dihydroxyacetone kinase deficient mutant of Hansenula polymorpha / Kato N., Kobayashi H., Shimao M., Sakazawa C. // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 1986.- 23: 180-186.

89. Keppler, F. Methane emissions from terrestrial plants under aerobic conditions / Keppler F., Hamilton J.T.G., Brass M., Roeckmann T.// Nature. -2006.-439. -P.187-191.

90. Khmelenina, V.N. Osmoadaptation in halophilic and alkaliphilic methanotrophs / Khmelenina V.N., Kalyuzhnaya M., Sakharovsky V.G., Suzina N.E., Trotsenko Y.A., Gottschalk G. // Arch. Microbiol. - 1999.- 172. - P.321-329.

91. Lacava, P.T. Detection of siderophores in entophytic bacteria Methylobacterium spp. associated with Xilella fastidiosa subsp. Pauca / Lacava P.T., Silva-Stenico M.E., Araujo W.L. Simionato A.V.C., Carrilho E., Tsai S.M., Azevedo J.L. // Pesq. Agropec. Bras.- 2008.- 43.-P. 521-528.

92. Large P.J., Bamforth C.B. Methylotrophy and biotechnology / New York: Longman Scientific & Technical. John Wiley & Sons Inc. 1988. 303 p.

93. Little, C.K. Trichloroethylene biodegradation by a methane-oxidizing bacterium / Little C.K., Palumbo A.V., Herbes S.E., Lidstrom M.E., Tyndall E.R.L., Gilmer P.J. // Appl. Environ. Microbiol.- 1988.- 45.-P.951-956.

94. Macauley-Patrick, S. Heterologous protein production using the Pichia pastoris expression system / Macauley-Patrick S., Fazenda M.L., McNeil B., Harvey L.M. // Yeast.- 2005.- 22.-P. 249-270.

95. Madhaiyan, M. Growth promotion and induction of systemic resistance in rice cultivar Co-47 (Oryza sativa L.) by Methylobacterium sp / Madhaiyan M., Poonguzhali S., Senthilkumar M., Seshadri S., Chung H., Yang J., Sundaram S., Sa T. // Bot. Bull. Acad. Sin.- 2004.- 45. - P.315-324.

96. Methane and methanol utilizers / Eds.: J.C. Murrell, H. Dalton // New York: Plenum Press. 1992. 286 p.

97. Misaki, A. D-Allose-containing polysaccharide synthesized from methanol by Pseudomonas sp / Misaki A., Tsuburaya Y., Kakuta M. // Carbohydrate Res. -1979.- 75.-P.8-19.

98. Nakagawa, T., Regulation of two distinct alcohol oxidase promoters in the methylotrophic yeast Pichia methanolica / T.Nakagawa, A.Inagaki, T.Ito, S. Fujimura, T.Miyaji, H.Yurimoto, N.Kato, Y.Sakai, N. Tomizuka // Yeast. - 2006.-№ 23. - P. 1522.

99. Nichols, P.D. Accumulation of polyhydroxybutirate in a methane-enriched, halogenated hydrocarbon-degrading soil column: implications for microbial community structure and nutritional status / P.D. Nichols, D.C. White // Hydrobiologia.- 1989.176/177. - P.369-377.

100. Odac, D. Carboxyl esterase-alcohol oxidase based biosensor for the aspartame determination / D.Odac, S. Timur, A.Telefoncu // Food Chemistry. - 2004.-84.-P.493-496.

101. Odom J.M. (2006) Antioxidant activity from methanotrophic biomass. US Patent № 20060045871.

102. Oh, D.B. Glycoengineering of the methylotrophic yeast Hansenula polymorpha for the production of glycoproteins with trimannosyl core N-glycan by blocking core oligosaccharide assembly / D.B.Oh, J.S.Park, M.W.Kim, S.A.Cheon, E.J.Kim, H.Y.Moon, O.Kwon, S.K. Rhee, H.A. Kang // Biotechnol. J. - 2008.-3.-P. 659-668.

103. Oren, A. Halophilic microorganisms and their environments / A. Oren. -Dordrecht: Kluwer Acad. Publ. 2002.-545 p.

104. Orita, I. Bifunctional enzyme fusion of 3-hexulose-6-phosphate synthase and 6-phospho-3-hexuloisomerase / I. Orita, N. Sakamoto, N. Kato, H. Yurimoto, Y. Sakai // Appl. Microbiol. Biotechnol. - 2007. - 76. - P.439-445.

105. Osawa, F. Efficient production of L-lactic acid by Crabtree-negative yeast Candida boidinii / F.Osawa, T.Fujii, T.Nishida, N.Tada, T.Ohnishi, O.Kobayashi, T.Komeda, S.Yoshida // Yeast.- 2009 -№26. - P. 485-496.

106. Paryzhak S., Demkiv O., Gayda G. Enzyme- and cells-based biosensors for assay of formaldehyde in vaccines. In: Proc. 2nd Polish-Ukrainian Weigl Conference «Microbiology in the XXI century». Warsaw Agricult. Univ. SGGW, Warsaw, 2007. - P. 170-173.

107. Popov, V.O. NAD+-dependent formate dehydrogenase / V.O. Popov, V.S. Lamzin // Biochem. J. -1994.-301: 625-643.

108. Reshetnikov, A.S. Characterization of the ectoine biosynthesis genes in obligate haloalkalotolerant methanotroph Methylomicrobium alcaliphilum 20Z / A.S. Reshetnikov, V.N. Khmelenina, Y.A. Trotsenko // Arch. Microbiol. - 2006.- 184. - P. 286-296.

109. Ryabova, O.B. Xylose and cellobiose fermentation to ethanol by the thermotolerant methylotrophic yeast Hansenula polymorpha / O.B. Ryabova, O.M. Chmil, A.A. Sibirny // FEMS Yeast Res.- 2003. -№ 4. - P. 157-164.

110. Sakai, Y. Biotechnological application of cellular functions of the methylotrophic yeast / Y. Sakai, Y. Tani, N. Kato // J. Mol. Catalysis B Enzymatic. -1999. - № 6.-P.161-173.

111. Schaefer, J.K. Bacterial cycling of methyl halides / J.K. Schaefer, L.G. Miller, R.S. Oremland, J.C. Murrell // Adv. Appl. Microbiol. - 2007.-№61. -P.307-346.

112. Sibirny V., Demkiv O., Sigawi S., Paryzhak S., Klepach H., Korpan Y., Smutok O., Nisnevich M., Gayda G., Nitzan Y., Puchalski C., Gonchar M. Formaldehyde oxidizing enzymes and genetically modified yeast Hansenula polymorpha cells in monitoring and removal of formaldehyde. In: Einschlag F.S.G. (Ed.) Waste water - evaluation and management, Ch. 6. Rijeka: InTech Publ., 2011. -P. 115-154.

113. Sigawi, S., Smutok O., Gayda G. Enzyme and yeast-cell based bioreactors for formaldehyde removal from air. In: Proc. the 46th Conference of IIChE. Haifa, 2010. - 39p.

114. Skrede, A. Bacterial protein on natural gas: a new potential feed ingredient for dogs evaluated using the blue fox as model / A. Skrede, O. Ahlstreom // J. Nutr. -2002.-№ 132. -P. 1668S-1669.

115. Smutok, O. A reagentless bienzyme amperometric biosensor based on alcohol oxidase/peroxidase and an Os-complex modified electrodeposition paint / O. Smutok, B. Ngounou, H. Pavlishko, G. Gayda, M. Gonchar, W. Schuhmann // Sensors Actuators B: Chem. - 2006. -№ 113.-P. 590-598.

116. Stasiuk, N.L. Human arginase I from the recombinant yeast Hansenula polymorpha: isolation and characterization of the enzyme / N.L. Stasiuk, G.Z. Gayda, L.P. Koval'chuk, O.V. Stasyk, M.V. Gonchar // Ukr. Biochim. Zh.-2010.-№ 82.-P.14-21.

117. Sulter, G. Occurrence of peroxisomal membrane proteins in methylotrophic yeasts grown under different conditions / G. Sulter, L. Looyenga, M. Veenhuis, W. Harder // Yeast. - 1990.-№ 6. -P. 35-43.

118. Takayama T., Endo F., Nozawa T., Masuda Y., Mori M., Kanayama T. (1978) Process for producing a polysaccharide using Pseudomonas polysaccharogenes M-30. US Patent 4230800.

119. Tani, Y. Production of useful chemicals by methylotrophs/ Y. Tani // Biotechnology.- 1991.-№18.-P. 253-270.

120. Tishkov, V.I. Pilot scale production and isolation of recombinant NAD+-and NADP+-specific formate dehydrogenases / V.I. Tishkov, A.G. Galkin, V.V. Fedorchuk, P.A. Savitsky, A.M. Rojkova, H. Gieren, M.- R. Kula // Biotechnol. Bioeng.-1999.- №64.-P. 188-193.

121. Tsujimoto, N. L-lysine biosynthetic pathway of Methylophilus methylotrophus and construction of an L-lysine producer / N. Tsujimoto, Y. Gunji, Y. Ogawa-Miyata, M. Shimaoka, H. Yasueda // J. Biotechnol.- 2006.- №124. - P. 327-337.

122. Trotsenko, Y.A. Production of metabolites by methylotrophic yeasts / Y.A. Trotsenko, L.V. Bystrykh // Biotehcnol. Adv.- 1990.-№ 8.-P. 105-119.

123. Ubiyvovk V.M., Ananin V.M., Malyshev A.Y., Kang H.A., Sibirny A.A. (2011) Optimization of glutathione production in batch and fed-batch cultures by the wild-type and recombinant strains of the methylotrophic yeast Hansenula polymoprha. BMC Biotech. 11: 8.

124. Ueda, S. Synthesis of poly(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyvalerate) from methanol and n-amyl alcohol by the methylotrophic bacteria Paracoccus denitrtificans and Methylobacterium extorquens / S. Ueda, S. Matsumoto, A. Takagi, T. Yamane // Appl. Environ. Microbiol. - 1992.-№ 58. - P. 3574-3579.

125. Van Dien S.J., Okubo Y., Hough M.T., Korotkova N., Taitano T., Lidstrom M.E. (2003) Reconstruction of C3 and C4 metabolism in Methylobacterium extorquens AM1 using transposon mutagenesis. Microbiology. 149: 601-609.

126. Verduyn, C. A simple, sensitive, and accurate alcohol electrode / C. Verduyn, J.P. Van Dijken, W.A. Scheffers // Biotechnol. Bioeng. - 1983. -№ 25.-P. 1049-1055.

127. Wang, Q. Potential Approaches to Improving Biodegradation of Hydrocarbons for Bioremediation of Crude Oil Pollution / Q. Wang, S. Zhang, Y. Li, W. Klassen // Journal of Environmental Protection.- 2011.- N 2.- P. 47-55.

128. Westlake, R. Large-scale continuous production of single cell protein. Chem. Ing. Tech. - 1986.- 58. - P.934-937.

129. Woodward, J. Biochemistry and applications of alcohol oxidase from methylotrophic yeasts. In: Codd G.A., Dijkhuisen L., Tabita F.R. (Eds.) Autotrophic microbiology and one-carbon metabolism. Dordrecht: Kluwer Acad. Publ.- 1990.- P. 193-225.

130. Yurimoto, H. Yeast methylotrophy: metabolism, gene regulation and peroxisome homeostasis / H. Yurimoto, M. Oku, Y. Sakai // Int. J. Microbiol.- 2011.-ID 101298: 1-8.

131. Zhao, S. The microbial production of polyhydroxybutyrate from methanol / S. Zhao, C. Fan, X. Hu, J. Chen, H. Feng // Appl. Biochem. Biotechnol. - 1993. -№ 39/40. - P. 191-199.

7. ПРИЛОЖЕНИЯ

7.1 Паспорта штаммов

И

а г

■В «В шт а» ш 5

Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов

ФГУП ГосНИИГенетика

Н Россия Моспа. 117545.1-ым Доромм проезд 1. ФГУПГосНУМГемепка ■ ВКПМ в (495) 3151210; фане |495) 315 07 74, Эп почта Лрт®депеЛа т

5 "3. 2016 г

ПАСПОРТ ШТАММА, ВЫДАВАЕМОГО ИЗ КОЛЛЕКЦИИ

Штамм выдан: ЗАО «Альфахимпром» Регистрационный номер в коллекции: ВКПМ В-3780 Название штамма: АстеЮЬааег сакоасеисив 134

Происхождение штамма: сточные воды производства фенолформальдегидных смол Культурально-морфологическне признаки штамма: грамотрицательные палочки, спор не образуют, аэробы.

Область промышленного применения штамма: деструкция метанола, фенола и формальдегида.

Условия культивирования штамма (состав среды, температура и т. д.):МПА; среда Ь: (г/л): дрож. экстракт-5,0; пептон-15,0; ЫаС1-5,0; агар-15,0; вода дист-1,0 л., 1-25-28°С

Сведения о безопасности использования штамма:

Штамм ВКПМ В-3780 АстеШЬа^ег сакоасеПсш 134 не является генетически модифицированным штаммом.

Штамм ВКПМ В-3780 АстеЮЬас1ег сакоасеПсия 134 не относится к микроорганизмам, патогенным для человека согласно классификации микроорганизмов, приведенной в Санитарных правилах СП 1.3.2322-08. Работа со штаммом ВКПМ В-3780 Асте1оЬас1ег

са1соасеЦсиз 134 не требует специальных мер предосторожности

• • •

Директор ВКПМ Ьу&'Л '

д.б.н., проф. /ИИ^^Сц^ * ' Синеокий С.П.

\ .4. . .

• Претензии по качеству штамма ~прйнимаюЬ1ся в письменном виде в течение двух месяцев, начиная с даты выдачи паспорта.

• Штамм предоставляется без права передачи третьим лицам.

Всероссийская Коллекция ¡9 Промышленных Микроорганизмов

ФГУП ГосНИИГенетика

В Россия, Мосты 117545.1-ын Дорожным проеад I. ФГУПГосНШГеигтма ■ ВКПМ * (495) 3151210: факс [phone], Эп почта Лрт®9епе1*а ш

$5

2016 г

ПАСПОРТ ШТАММА, ВЫДАВАЕМОГО ИЗ КОЛЛЕКЦИИ

Штамм выдан: ЗАО «Альфахимпром» Регистрационный номер в коллекции: ВКПМ В-5603 Название штамма. МеЛу^Ьааегшт эр. 1К

Таксономическая идентификация указывается в соответствии с данными, представленными депозитором без подтверждения молекулярно-генетическим анализом.

Происхояздсние штамма: почва, выделен в 1987 году из ассоциации м/о, утилизирующих метанол методом накопительных культур с использованием метанола в качестве единственного источника С.

Условия культивирования штамма (состав среды, температура и т. д.): (г/л):. КН2РО4. -3,0, КН2Р04.-3,0,МН4Ш3- 1,0, МвС12-0,1, »метанол-5,0мл, агар- 15,0, вода диет,- 1,0л рН=7,6, *Метанол добавить после стерилизации, I -30° Инкубация 2-4 суток. Культурально-морфологические признаки штамма: грамотрицательные палочки, подвижные.

Область промышленного применения штамма: деструкция метанола

1К не является генетически

Сведения о безопасности использования штамма:

Штамм ВКПМ В-5603 МеЛу1оЬааепит эр. модифицированным штаммом.

Штамм МеЛуЬЬа^епит эр. 1К не относится к микроорганизмам, патогенным для человека согласно классификации микроорганизмов, приведенной в Санитарных правилах СП 1.3.2322-08. Работа со штаммом не требует специальных мер предосторожности

Директор ВКПМ д.б.н., проф.

Синеокий С.П.

Претензии по качеству шта^та ърфцшсротся с письменном виде в течение двух

месяцев, начиная с даты выдачи >К&£сгрта.

Штамм предоставляется без права-передачи третьим лицам.

Для подтверждения таксономической идентификации рекомендуется провести молекулярно-генетическую идентификацию штамма

Всероссийская Коллекция Промышленных Микроорганизмов

ФГУП Го сНИ И Генетика

К Россия. Моема. 117545.1-ый Дорожный проем. 1. ФГУПГосНИИГгнггига -ВКПМ, ¥ (455) 3151210; факс [phone]: Эл. почта: vkpm3seneirka.ru:

9 7. fl s- 2016

Форма ВКПМ-П

2016 г

ПАСПОРТ ШТАММА, ВЫДАВАЕМОГО ИЗ КОЛЛЕКЦИИ

Штамм выдан: ЗАО «Альфахимпром» Регистрационный номер в коллекции: ВКПМ В-607 Название штамма: Bacillus megaterium

Таксономическая идентификация указывается в соответствии с данными, представленными депозитором без подтверждения молекулярно-генетическим анализом Происхождение штамма: ВКМ В-396

Культурально-морфологические признаки штамма: клетки - крупные палочки с закругленными концами, расположенные одиночно, парами,цепочками. Колонии серовато-белого цвета, матовые. Условия культивирования штамма (состав среды, температура и т. д.): L-среда (г/л): дрож. экстракт - 5,0, пептон - 15,0, NaCl - 5,0, агар - 15,0, вода диет. - 1,0л, 30С

Сведения о безопасности использования штамма:

Штамм Bacillus megaterium ВКПМ В-607 не является генетически модифицированным штаммом.

Штамм Bacillus megaterium ВКПМ В-607 относится к микроорганизмам, непатогенным для человека, согласно классификации микроорганизмов, приведенных в Санитарных правилах СП 1.3.2322-08. Работа со штаммом Bacillus megaterium ВКПМ В-607 не требует специальных мер предосторожности.»* '

Директор ВКПМ Проф.

H лг v» " " * , vv, v

ff As /(«Kl, ff* ■

I

Синеокий С.П.

Претензии по качеству штамма принимаются в течение двух месяцев, начиная с даты выдачи паспорта.

* Штамм предоставляется без права передачи третьим лицам.

• Для подтверждения таксономической идентификации рекомендуется провести молекулярно-генетическую идентификацию штамма.

7.2 Нормативная документация

ЗАКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «Альфахимпром»

ОКП 92 9199 Группа С 04

(ОКС 65.080)

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Генерального директора ЗАО «Альфахимпром»

Аникин

57 и

« Я?»: ^^г-^20 1 6 Г.

БИОПРЕПАРАТ БИОМ-М

ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ ТУ 9291-002-26447891-2016

(Вводятся впервые)

Дата введения в действие - 27.05.2016 г.

РАЗРАБОТАНО ЗАО «Альфахимпром»

Москва 2016

собственность ООО «Альфахимпром»: не копировать, не передавать организациям и частным лицам

ЗАКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «Альфахимпром»

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Генерального директора ЗАО «Альфахимпром»

C.B. Аникин

2016Г.

ПРОМЫШЛЕННЫЙ РЕГЛАМЕНТ Производства биопрепарата БИОМ-М

ПР-002-26447891-2016

(Вводится впервые)

Дата введения в действие - 27.05.2016 г.

РАЗРАБОТАНО ЗАО «Альфахимпром»

Москва

_2016_

собственность ООО «Альфахимпром»: не копировать, не передавать организациям и частным лицам

ЗАКРЫТОЕ АКЦИОНЕРНОЕ ОБЩЕСТВО «Альфахимпром»

ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ РЕГЛАМЕНТ

ОЧИСТКИ РАЗЛИЧНЫХ СРЕД И ПОВЕРХНОСТЕЙ. ЗАГРЯЗНЕННЫХ МЕТАНОЛОМ БИОПРЕПАРАТОМ БИОМ-М

ТР 002-26447891-2016

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Генерального директора

ЗАО «Альфахимпром»

_

C.B. Аникин

Дата введения в действие - 09.03.2016 г.

РАЗРАБОТАНО

ЗАО «Альфахимпром»

Москва 2016

ПАСПОРТ БЕЗОПАСНОСТИ «БИОМ-М» (Согласно ГОСТу Р 12.1.052-97)

Биопрепарат БИОМ

ООО «Альфахимпром»

Россия. 109316, г. Москва, Остаповский проезд, д.

3, стр. 23

[phone], (495) 66547-75, многоканальный, [phone] (24ч)

[e-mail], [e-mail], www.ahimprom.ru

Наименование: БИОМ

Действующее вещество (состав препарата): ассоциация микробных масс живых природных почвенных и метанолутилизирующих штаммов микроорганизмов Bacillus megaterium ВКПМ В-607; Methylobacterium sp. ВКПМ В-5603; Acinetobacter calcoaceticus ВКПМ В-3780 иммобилизованная на природном минерале из класса листовых силикатов (группа гидрослюд) - глауконите (КОЕ 109 мкл/г).

Препаративная форма: порошок.

Упаковка: биопрепарат БИОМ-М расфасован в трехслойные бумажные, в тканые или полиэтиленовые мешки по ГОСТ Р 53361, ГОСТ 30090 и ГОСТ 17811 массой нетто 1, 2, 5, 10, 25, 50 кг, в контейнеры мягкие полимерные типа «биг-бэг» вместимостью до 1 м3, банки, ведра, бочки и другую упаковку, не ухудшающую потребительских свойств, массой нетто от 1кг до 1000 кг.

Виды опасного воздействия и условия возникновения - действующее вещество и основные компоненты препаративной формы являются продуктами природного происхождения, малотоксичны для человека и живых объектов окружающей среды.

ПДК препарата в воздухе рабочей зоны по ГОСТ 12.1.005:5x104 КОЕ/ куб. м по концентрации клеток продукта, для глауконита 6 мг/м3.

ПДК или ОДК в почве: нет необходимости, т.к. бактерии биопрепарата являются естественными компонентами почвенных сообществ микроорганизмов. ПДК в атмосфере и воде: нет сведении.

Меры первой помощи: препарат нетоксичен в опытах на лабораторных животных и не может вызывать острых отравлений.

При случайном попадании препарата в организм необходимо профилактически сделать следующее: при попадании в рот - прополоскать водой, при проглатывании - промыть желудок; при попадании и органы дыхания - вывести пострадавшего на свежий воздух; при попадании в глаза - промыть водой и закапать альбуцид; при попадании на кожу - промыть водой с мылом. При недомогании обратиться к врачу, лечение симптоматичное. Меры и средства обеспечения пожаро-взрыво-безопасности: препарат взрыво-пожаро-безопасен.

Правила обращении и хранения - все работы с препаратом производятся с использованием индивидуальных средств защиты: халат или комбинезон х/б; очки защитные по ГОСТ 12.4.013, или защитные щитки но ГОСТ 12.4.023, респиратор но ГОСТ 12.4.28, перчатки резиновые или хлопчатобумажные.

Вес работники должны соблюдать правила личной гигиены.

Хранить в сухом, изолированном помещении в исправной таре снабженной этикеткой с указанием наименования препарата и даты изготовления. Гарантированный срок хранения 24 месяца при температуре от -20 до 25° С

Физические и химические свойства - физические состояние - порошок, От серого до светло зеленого, без запаха; рН водного раствора - 6,5-7,5

Стабильность и химическая активность - химически не активен, не обладает коррозионным воздействием на металлы.

Токсичность - 1ЛЭ5о для мышей > 6750 мг/кг и для крыс > 3375 мг/кг. ГОСТ 19433-88. Острая ингаляционная токсичность ЬО 50 - не установлена.

Раздражающее и резорбтивное действие на кожу и слизистые оболочки не установлены. Признаков специфической сенсибилизации не установлено; концентрация 7,8Т04 КОЕ/м3 принята по показателям аллергенности за недействующую. Кумулятивные свойства: нет сведений.

Воздействие на окружающую среду: действующее вещество и основные компоненты препарата являются продуктами природного происхождения, малотоксичны для человека и животных объектов окружающей среды, препарат применяется в низкой дозировке и возможность загрязнения живых объектов окружающей среды исключена. Утилизация и/или ликвидация (удаление) отходов: специальных приемов не требует. Требования по безопасности при транспортировке: препарат транспортируют всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозки, утвержденными Постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации Минздрава РФ от 8 ноября 2001 года № 34 «Гигиенические требования к хранению, применению и транспортировке пестицидов и агрохимикатов. Санитарные правила и нормы СанПиН 1.2.1077-01» Международное и национальное законодательство: этикетка соответствует требованиям Закона РФ «О защите прав потребителей».

Дополнительная информация - при составлении паспорта безопасности использованы:

Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны.

Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности.

Заместитель Генерального директора ЗАО «Альфахимпром»

7.3 Акты испытаний

7.4.Патенты

Форма Xs 94 ИЗ. П.М, ПО-2016

Федеральная служба по интеллектуальной собственности

Федеральное государственное бюджетное учреждение

«Федеральный институт промышленной собственности» ' (ФНПС)

Бсрсжковскаи наб.. 3», корп. 1, Москва. Г-59. ГСП-3.1259«

Телефон [phone] Факс [phone]

УВЕДОМЛЕНИЕ О ПРИЁМЕ И РЕГИСТРАЦИИ ЗАЯВКИ

20.12.2016 080628 2016150217

Дата поступления Входящий ЛЬ Регистрационный №

ДАТА ПОСТУПЛЕНИЯ ИМ*«*»--

орклоилм janyiMttro» ЯШ

(21) РЕГИСТРАЦИОННЫЙ «

входящий N

(83) ДАТА ПЕРЕВОДА неддутролмод шин и тшюи^вяум ,му

О (86)

wrssss?

пилгляящым ыЛаыствоч)

□(87)

международной шти

от

□ («7)

(мшвршл

ЗАЯВЛЕНИЕ тикп Российской Федерации на изобретение

АДРЕС ДЛЯ ПЕРЕПИСКИ —« ^

193313, Саикт-Петербург, ул. Подвойского, д 14. к.1 ив. 741 Ку>нецо«¥ В А

Телефон: I 9119152786 Фане

E-mail vlkkuxnecov9mall.ru

АДРЕС ДЛЯ СЕКРЕТНОЙ ПЕРЕПИСКИ

В Федеральную службу по интеллектуальной собственности Бережковская наб.. д. 30. корп. I, г. Москва, i -59. ГСП-3, 125993, Российская Федераииа

(54) НАЗВАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ ПРЕПАРАТ ДЛЯ УТИЛИЗАЦИИ МЕ ГЛНОЛА «БИОМ-М» И СПОСОБ ЕГО ПОЛУМЕНИЯ

(71) ЗАЯВИТЕЛЬ

Акционерное общество «Альфах и миром»

Алрес: России, 109316, Москва г, пр. Остаповский, л.З, стр.23

□изобретение создано и счет средств федерального бюджета

Заявитель является. □ государственным заказчиком □ муниципальным заказчиком исиолинтель работ Оттт*

□ исполнителем работ по:

□ государственному контракту □ муниципальному контракту

заказчик работ (уамя* Контракт от /А

(74) ПРЕДСТАВИТЕЛЕЙ) ЗАЯВИТЕЛЯ

НЮСЛвдмвГ - л

kWMV « Фг(V/XlK-KOi МММ « СМП М11М4/

Фамилия, имя, отчество (последнее - при наличии) КУЗНЕЦОВ Виктор Александрович Адрес

193313, С. Петербург, ул. Подвойского, д.14, к.1, кв. 741

Срок представительства ttctu * ншп» прыижжмз д km/и сро* можчт яг у*ат*1*ых/

ИДЕНТИФИКАТОРЫ ЗАЯВИТЕЛЯ

ОГРН 5137746238339 КПП 772201001 ИНН 7722830035

КОД СТРАНЫ

RU

Вштентный поверенный

□ прелегмнтель пп доверенности

□ лрелстмитед, по шону

Телефон: [phone]» Факс

Алрес электронной почти: vikku/tKco* a nuil.ni

3/

о;л

22 2016 1*40 6075

Общее количество документов в листах 31 Лнцо. зарегистрировавшее документы Сергеева Н.Н.

Из них: - количество листов комплекта изображений изделия (д№Я промышленного образца) 0

Количество платежных документов 0

Сведения о состоянии делопроизводства по заявкам размещаются ни сайте ФНПС по адресу «www.fips.ru» а разделе « Информационные ресурсы / Открытые реестры»

7.5 Технологическая схема производства биопрепарата «БИОМ-М»

7.6. Отчеты

VIц ¡¡нстер [.-тип сельскиго лший^та Госсинскои Фс не ранни Федеральное государственное бюджетное обрн^иииплмьнш; учреждение высшего прифессыииа^ыюго образовании «Московски* государственная академия кетернпарной медицины и биотехнологии имени К,И, Скрябина»

О НАУЧНО-ИССЛКЛОНА Ч'КЛЬСЖОЙ РДКОТК

«/токсикологически исследования еезопаспосш

биопрепарата «биом-м» и определение класса опасности»

Нйу^ЛЬШ руководитель

ОТЧЕ 1

д-р биолог, наук, проф.

| ",. М.Ю. Волков

Москва, 2015