Разработка способа снижения содержания органических ксенобиотиков мясных продуктов на основе исследования их свойств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.16, кандидат химических наук Дмитриев, Михаил Александрович

• Дмитриев, Михаил Александрович
• кандидат химических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат химических наук Дмитриев, Михаил Александрович

Введение.

1. Глава I. Литературный обзор.

1.1. Органические ксенобиотики мясных продуктов.

1.1.1. Классификация опасных химических соединений в пищевых продуктах.

1.1.2. Поликонденсированные ароматические углеводороды.

1.1.3. Гетероциклические ароматические амины.

1.1.4. Нитрозамины и биогенные амины.

1.2. Метаболизм органических ксенобиотиков в организме человека.

1.3. Причинно-следственные связи возникновения органических ксенобиотиков в мясных продуктах.

1.4. Способы снижения содержания органических ксенобиотиков в мясных продуктах.

1.5. Стиль питания и здоровье человека.

1.6. Методы исследования органических ксенобиотиков в мясных продуктах.

1.6.1. Химико-аналитические методы.

1.6.2. Биологические испытания на высших животных.

1.6.3. Биологические методы на одноклеточных организмах и клеточных культурах.

1.7. Биохимические методы исследования.

1.8. Традиции в приготовлении мясных блюд.

2. Глава II. Экспериментальные исследования. Объекты и методы.

2.1. Объекты исследования.

2.2. Биологический метод.

2.3. Биохимический метод.

2.4. Физико-химические приборные методы.

3. Глава III. Комплексные исследования ПАУ в модельных мясных продуктах и оценка коптильных ароматизаторов.

3.1. Проблема полициклических ароматических углеводородов в мясных продуктах.

3.2. Сравнительные биологические и биохимические исследования.

3.2.1. Схема исследования.

3.2.2. Первый этап - экспрессное исследование на инфузориях Paramecium caudatum.

3.2.3. Второй этап - пролонгированный опыт на Tetrahymena pyriformis.

3.2.4. Третий этап исследования - оценка прироста культуры инфузорий на модельных мясных продуктах через 72 часа экспозиции.

3.2.5. Четвертый этап - изучение активности пепсина в пробах модельных мясных продуктов.

3.3. Аналитические исследования коптильных ароматизаторов и модельных мясных продуктов.

3.3.1. Исследование коптильных ароматизаторов.

3.3.2. Аналитическое исследование модельных мясных продуктов.

4. Глава IV. Исследование модельных систем, содержащих гетероциклические ароматические амины.

4.1. ГАА в модельных системах.

4.2. Биологическая оценка модельных растворов с помощью автоматизированного биотеста на инфузориях Те^аИутепа рупй)гпш.

4.3. Сравнительная биологическая оценка жареного продукта на инфузориях Те^аЪушепа рупАмтшз.

4.4. Аналитическое определение ГАА в модельных растворах

4.5. Аналитическое определение ГАА в модельном жареном продукте.

5. Глава V. Исследование воздействия биогенных аминов, нитрита и нитрата натрия на простейших.

5.1. Определение чувствительности инфузорий к биогенным аминам, нитриту и нитрату натрия.

5.2. Исследование роста культуры Те^аИутепа рупйтшз на модельных средах, содержащих биогенные амины, нитрит и нитрат натрия.

5.3. Изучение воздействия БА, нитрита и нитрата натрия на активность пепсина.

6. Глава VI. Теоретическое рассмотрение и методология оптимального выбора композиционного состава добавок, повышающих безопасность мясных продуктов.

6.1. Обоснование выбора добавок.

Изучение традиционных рецептур пряностей для мясных

6.2. блюд.

6.3. Анализ структурно-химического состава компонентов выбранной смеси.

6.4. Механизм действия антиоксидантов и оценка антиоксидантной активности пряностей.

6.5. Исследование действия на живую клетку смеси пряностей.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка способа снижения содержания органических ксенобиотиков мясных продуктов на основе исследования их свойств»

Актуальность исследования органических ксенобиотиков в мясных продуктах. Один из самых важных факторов, определяющих уровень здоровья человека, является качество его питания. Среди всех заболеваний, как следствий нарушения питания, ведущая роль по тяжести и количеству принадлежит канцерогенезу. Известно, что в 35% случаев возникновения опухолей [1] причинами являются органические ксенобиотики пищевых продуктов. К этим ксенобиотикам относятся гетероциклические ароматические амины (ГАА), поликонденсированные ароматические углеводороды (ПАУ), нитрозамины (НА) и биогенные амины (БА).

Жесткая тепловая обработка мясных продуктов (особенно открытый огонь) способствует не только получению вкусных блюд, но и является причиной образования в них мутагенных факторов, таких как ПАУ и ГАА. По некоторым данным [2] самые сильные мутагенные/канцерогенные химические соединения пищевых продуктов это - гетероциклические ароматические амины (ГАА). Это чрезвычайно мощные мутагены. В гепатоцитах человека ГАА трансформируются и становятся фактором, запускающим процесс канцерогенеза.

Изучение органических ксенобиотиков в пищевых продуктах базируется на количественном определении их с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии и хромато-масс-спектрометрии. Эти исследования имеют высокую себестоимость и сопряжены с трудоемкими и длительными процессами пробоподготовки. Оптимизация методологии исследований для обеспечения безопасности пищи состоит в рациональном сочетании дорогих аналитических и интегральных биологических методов. К ним относятся испытания на живых организмах - от одноклеточных до млекопитающих.

Такой подход особенно привлекателен для изучения пищевых продуктов, во-первых, тем, что позволяет существенно сократить время и затраты на проведение исследований и, во-вторых, кроме обнаружения тех или иных соединений, выявляет действие на живой организм всего комплекса органических соединений, присутствующих в исследуемом объекте.

Совершенствование методических основ определения и идентификации ГАА, ПАУ и других ксенобиотиков пищевых продуктов позволит повысить эффективность мониторинговых санитарных исследований, а также оптимизировать разработку новых технологий и новых видов пищевых продуктов. Это, в свою очередь, будет способствовать повышению качества пищевых продуктов и, соответственно, здоровью людей.

Цель и задачи исследования. Цель работы заключалась в создании методического подхода к исследованию органических ксенобиотиков в составе пищевых композиций и разработка способа снижения их образования в мясных продуктах. В соответствии с поставленной целью решались следующие задачи:

- установить соответствие результатов биологических, биохимических и аналитических исследований разных групп ксенобиотиков (ПАУ, ГАА, биогенные амины) на модельных системах;

- определить особенности воздействия на живую клетку модельных систем рассматриваемых классов ксенобиотиков в сочетании с природными антиоксидантами;

- провести анализ традиционно используемых рецептур пряностей и оптимизировать составы смесей пряностей, обеспечивающих снижение количества ПАУ и ГАА в мясных продуктах;

- оценить антиоксидантную способность выбранной смеси пряностей;

- провести сравнительное исследование модельного мясного продукта, содержащего рассматриваемые ксенобиотики с добавкой выбранной смеси пряностей и контрольного образца без добавок и разработать рекомендации по получению готовой мясной продукции с пониженным содержанием ПАУ иГАА.

Научная новизна. Экспериментально установлена возможность использования простейших эукариот в качестве тест-объектов для исследования основных групп органических ксенобиотиков (ПАУ, ГАА и биогенных аминов) мясных продуктов.

Предложен двухэтапный способ оценки безопасности на двух видах простейших - Paramecium caudatum и Tetrahymena pyriformis.

Разработан системный подход к оптимизации смесевых рецептур сухих пряностей.

Экспериментально доказано положительное действие смеси сухих пряностей на увеличение безопасности мясных продуктов и снижение скорости окислительных процессов при хранении.

Практическая значимость диссертационной работы заключается в создании методологии исследования и скрининговой оценки качества мясных продуктов, а также способа повышения их безопасности. Разработана экономически эффективная, экспрессная методика анализа содержания ПАУ и ГАА в мясной продукции. Определены и рекомендованы оптимальные дозы введения компонентов специй, обеспечивающих снижение содержания вредных веществ в пищевых рецептурах на основе мясного сырья. Выполненными исследованиями установлена практическая возможность выработки продукции с безопасным содержанием ПАУ и ГАА.

Разработанный подход повышает достоверность, снижает трудоемкость и стоимость исследований безопасности пищевых продуктов.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Результаты сравнительных исследований ПАУ биологическим (на простейших), биохимическим и аналитическим методами в мясных модельных продуктах и коптильных ароматизаторах.

2. Результаты сравнительных исследований воздействия ГАА на клеточном уровне.

3. Результаты исследований содержания биогенных аминов, нитрата и нитрита натрия на простейших (инфузорий).

4. Алгоритм выбора оптимального состава смеси пряностей.

5. Результаты оценки положительного воздействия выбранной смеси пряностей на живую клетку.

Апробация работы. Основные положения и результаты работы были обсуждены на 5-ой международной научно-технической конференции «Пища, экология, человек» (Москва, 2003 г); конференции МГУПБ «Технологии живых систем» (Москва, 2003 г); 2-ой Каспийской международной экологической конференции (Турция, Стамбул, 2004 г); научно-практической конференции «Развитие масло-жировой, маслодельной и сыродельной промышленности» (Москва, 2005 г); конференции МГУПБ «Технологии живых систем» (Москва, 2006 г); 9-ой международной конференции «Интеграция в мясную промышленность России современных методов управления качеством и прослеживаемости», ВНИИМП им. Горбатова (Москва, 2006).

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 13 печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, приложения и списка литературы, содержащего 86 источников, в том числе 24 работы зарубежных авторов, и приложения, содержит 159 страниц машинописного текста, 57 рисунков, 22 таблицы.

Заключение диссертации по теме «Экология», Дмитриев, Михаил Александрович

ВЫВОДЫ

1. В результате проведения комплексных исследований пищевых органических ксенобиотиков (ПАУ, ГАА, биогенных аминов) с использованием модельных систем подтверждена возможность получения интегральной биологической оценки безопасности мясных продуктов на простейших эукариотах.

2. При изучении разных способов получения копченых мясопродуктов показана необходимость биологической оценки безопасности как самих продуктов, так и коптильных препаратов, используемых в технологиях бездымного копчения.

3. Установлено, что реакции простейших на ксенобиотики в составе мясопродуктов обусловлены свободнорадикальными механизмами некоторых стадий метаболизма ПАУ, ГАА и биогенных аминов в живой клетке. Для ингибирования элементарных свободнорадикальных реакций предложено использование смесей натуральных пряностей, рецептура которых составляется на основе системного анализа пряных смесей традиционно используемых в различных странах.

4. Изучение антиоксидантной активности пряностей и специй в составе мясопродуктов по методу Свифта, показало, что смеси некоторых пряностей способствуют уменьшению интенсивности свободнорадикальных процессов и снижению скорости образования ПАУ, ГАА и биогенных аминов в технологиях получения мясных продуктов.

5. Разработан методический подход, обеспечивающий снижение негативного действия рассмотренных ксенобиотиков на живую клетку и установлено положительное влияние смеси пряностей на рост культуры инфузорий.

6. Апробирован и усовершенствован метод оценки безопасности продуктов, представляющий собой автоматизированный биотест на двух видах простейших - Paramecium caudatum и Tetrahymena pyriformis.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Дмитриев, Михаил Александрович, 2007 год

1. International Agency for Research on Cancer: IARC monographs on the evaluation of carcinogenic risks to humans, Vol.56, Lyon, France: World Health Org., Intl. Agency for Research in Cancer, 1993.

2. Sugimura T. Overview of carcinogenic heterocyclic amines // Muation Research. 1997! - V. 375. - P. 211 - 219.

3. Лебедев A.T. Масс-спектрометрия в органической химии. СПб.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 493 с.

4. Бродский Е.С. Аппаратура для хромато-масс-спектрометрии. Современное состояние и тенденции развития // Партнеры и конкуренты. -2002. № 11.-С.37-39.

5. Барановски Т, Гибински К., Кокот Ф., Лукасик С, Новак С., Орловски М., Шпет К., Щеклик Э. Клиническая ферментология. Варшава: Польское гос. мед. изд., 1966.-491 с.

6. Gry J., Vahl М., Nielsen Р/А/ Mutagens in Fried Meat// Publ.No.139, National Food Administrationm, Copenhagen, Denmark, (in Danish), 1986.

7. Skog К. Cooking procedures and food mutagens: a literature review // Food and Chemical Toxicology. 1993. -V. 31. - P. 655 - 675.

8. Ким Г.Н., Ким И.Н., Мезенова О.Я. Канцерогенные вещества коптильного дыма и копченых продуктов // Калининград: КГТУ, 2005. 187

9. Курко В.И. Химия копчения // М.: Пищевая промышленность, 1969 343 с.

10. Исидоров В.А. Введение в химическую экотоксикологию: учеб. пособие. -СПб: Химиздат, 1980. 144 с.

11. ENVIRONMENTAL HEALTH CRITERIA 202. SELECTED NON-HETEROCYCLIC POLICYCLIC AROMATIC HYDROCARBONS // INTERNATIONAL PROGRAMME ON CHEMICAL SAFETY, World Health Organization Geneva, 1998, 702p.

12. Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов. Санитарно-эпидемиологические правила и нормы // СанПиН 2.3.1078-01, Издание официальное. Минздрав России, М., 2002, с. 19.

13. Клар Е. Полициклические углеводороды // Изд.»Химия», М., 1971 ,т. 1,0.138-160

14. Henderson В.Е. Summary report of sixth symposium on Cancer Registries and Epidemiology in the Pacific Basin // J. Natl. Cancer Inst. 1990. - V. 82. - P. 1186-1190.

15. Белицкий Г.А. (1999). Прогноз канцерогенности фармакологических средств и вспомогательных веществ в краткосрочных тестах // Ведомости фармкомитета. 1999. - N1.-C. 18-31.

16. Knize M.G., Shen N.H., Felton J.S. A comparison of mutagen production in fried ground chicken and beef: effect of supplemental creatine // Mutagenesis. -1988.-V. 3.-N. 3.- P. 503 -508.

17. Ohgaki H., Takayma S., Sugimra Т., Carcinogencities of heterocyclilic amines in cooked food // Mut. Res. 1991. - V. 259. - N 2. - P. 399 - 410.

18. Felton J.A., Knize M. G. Heterocyclic amine mutagens/carcinogens in food. Handbook of Experemental Pharmacology / Ed. C.S.Cooper, P.L. Grover. Berlin: Springer-Verland, 1990. - P. 471 - 502

19. Environmental health criteria 202. Selected non-heterocyclic polycyclic aromatic hydrocarbons . International programme on chemical safety. Geneva: World Health Organization, 1998. - 702 p.

20. Соляков A.A. Влияние тепловой кулинарной обработки и способов подготовки полуфабрикатов на содержание гетероциклических ароматических аминов в жареных мясных кулинарных изделиях: автореф. дисс.канд. техн. наук. -М., 1998.-28 с.

21. Takahashi M., Wakabayashi К., Nagao M., Yamamoto M., Masui T. Quantification IQ and MelQx heterocyclic aromatic amines in beef extracts by liquid chromatography with electrochemical detection // Carcinogenesis. 1999. - V.10. -P. 1175- 1182.

22. Endmods C.G., Sethi S.K., Yamaizumi Z., Kasai H., Nishimura S., McCloskey J.A. Analysis of mutagens from cooked foods by directly combined liquid chroma-tography-mass spectrometry // Environmental helth Perspectives. -1986. V. 67. -N1. - P. 35-40.

23. Костюковский Я.Л., Меламед Д.Б. Канцерогенные нитрозамины. Образование, свойства, анализ // Успехи химии. 1988. - Т. 57. - N 5. - С. 626 -655.

24. Sen N.P., Seaman S., Miles W. Volatile nitrosamines in various cured meat products. Effect of cooking and recent trends // J. Agric. Food Chem. 1979. -У21.- P. 1354- 1359.

25. Нитраты, нитриты и N-нитрозосоединения. Женева: ВОЗ, 1981. - 118 с.

26. Soler А.А., Salas J., Chaparro M. Miniaturized analytical method for the detection of amine production by microorganisms // J. Rapid Meth. and Autom. Microbiol.-1995.-V. 3. -N4.- C. 267-273.

27. Иванкин A.H., Костенко Ю.Г., Дмитриев M.A. и др. Биогенные метаболиты в системе экологического мониторинга безопасности сырья и продовольствия // Экологические системы и приборы. 2004. - № 8. - С. 5 - 11.

28. Эскин И.А., Щедрина Р.Н. Физиология и биохимия биогенных аминов. -М.: Медицина, 1969. 106 с.

29. Куценко С. А. Основы токсикологии. СПб:Фолиант, 2004. - 720с.

30. Юрин В.М. Основы ксенобиологии: учеб. пособие. Минск: Новое знание, 2002. - 267 с.

31. Ляхович В.В., Цырлов И.Б. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков. Новосибирск: Наука, 1981. - 240 с.

32. Парк Д.Б. Биохимия чужеродных соединений. М.: Медицина, 1973. -288 с.

33. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека. Т. 1 -М.: Мир, 2004.-С. 14.

34. Арчаков А.И. Микросомальное окисление. М.: Наука, 1975. - 327 с.

35. Advances in Drug Metabolism in Man // Ed. G.V. Pacifici, G.N. Fracchia. -Brussels; Luxembourg: Europ. Comis., 1995. 834 p.

36. Ляхович B.B., Цырлов И.Б. Индукция ферментов метаболизма ксенобиотиков. Новосибирск: Наука, 1981. - 240 с.

37. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Со-росовский образовательный журнал. 2000. - Т. 6. - № 12. - С. 13 - 19.

38. Overvik Е., Kleman М., Berg I., Gustavsson J. A. Influence of creatine, amino acids and water on the formation of the mutagenic heterocyclic amines found in cooked meat // Carcinogenesis. -1989. V. 10. - P. 2293 - 2301.

39. Макаров H.B., Дмитриев M.A., Попова H.B. и др. Биогенные амины в ферментированной колбасе // Материалы пятой международной научно-технической конференции «Пища, Экология, человек». -М.: МГУПБ, 2003. -Москва.-С. 4.

40. Розанцев Э.Г., Дмитриев М.А., Бершова Т.М. Сравнительная характеристика содержания биогенных аминов в рыбных продуктах // Рыбная промышленность. -2005. -№3.- С. 12- 15.

41. Круглякова КЕ, Шишкина ЛН. "Общие представления о механизме действия антиоксидантов". Сб. научн. статей "Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo". Москва, Наука, 1992,с.5-8.

42. А.В.Евсеев, В.Л.Ковалёва, И.А.Крылов, Э.А.Парфёнов Комплексные соединения N-ацетил-Ь-цистеина с биометаллами как факторы самозащитыбиологических систем // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, М., Изд. РАМН, 2006 г., Том 142, № 7 ИЮЛЬ, с. 26

43. Березовский В.М. Химия витаминов // М., ПИЩЕВАЯ ПРОМЫШЛЕННОСТЬ, 1973г, 633с.

44. Solyakov A., Skog К., Jagerstad М Polar and non-polar heterocyclic amins process flavors ingredients, bouillon concentrates and a residue // Food and Chemical Toxicology. -1998. In press preprint.

45. Шилина H.M., Конь И.Я. Роль пищевых веществ в функционировании системы антиоксидантной защиты организма II Вопросы детской диетологии. -2003.-Т. 1. № 4. - С. 53-57.

46. Wollowski, I, Rechkemmer G, Pool-Zobel BL. Protective role of probiotics and prebiotics in colon cancer //Am. J. Clin. Nutr. 2001. - V. 73. - P. 451S - 455S.

47. Воробьева Л.И. Пропионовокислые бактерии. M.: Изд-во МГУ, 1995. -288 с.

48. Рощина Т.М. Хроматография в физической химии // Соросовский образовательный журнал. 2000. Т. 6. - № 8. - С. 39 - 46.

49. Бэйли Дж. Методы химии белков. М.: Мир, 1965. - 318 с.

50. Гармаш А.В. Введение в спектроскопические методы анализа. Оптические методы анализа. М.: Химия, 1995. - 264 с.

51. Карасек Ф. Клемент Р. Введение в хромато-масс-спектрометрию: Пер. с англ. -М.: Мир, 1993. 237 с.

52. Садек П. Растворители для ВЭЖХ . Пер. с англ., М.: Бином. Лаборатория знаний, 2006. - 704с.

53. Жуленко В.Н., Рабинович М.И. Ветеринарная токсикология. М.: КОЛОСС, 2004.- 384 с.

54. Mortelmans К., Zeiger Е. The Ames Salmonella. Microsome mutagenicity test// Mutat.Res., 2000. V.455. P.29-60.

55. Методы первичного выявления генетической активности загрязнителей среды с помощью бактериальных штаммов (методические указания). МЛ 985, 34 с.

56. Бурковский И.В. Основы экологии свободноживущих инфузорий: авто-реф. дисс.док. биол. наук.-М., 1985.-40 с.

57. Ирлина И .С. Температурные адаптации у простейших: автореф. дисс. канд. биол. наук. Л., 1964. - 20 с.

58. Селивановская С.Ю., Маслов А.П., Наумова Р.П. Токсикологическое тестирование сточных вод, подлежащих биологической очистке, с помощью ресничных инфузорий Euplotes patella и Paramecium caudatum. //ж.Химия и технология воды, 1993,15,9-10, с.686-688.

59. Беленький Н.Г. Биологическая ценность продуктов животного происхождения как основа выбора рациональной технологии их производства // в кн. Повышение качества продуктов животноводства, М., 1978, с. 10-39

60. ГОСТ 13496.7-97 «Зерно фуражное, продукты его переработки, комбикорма. Методы определения токсичности»

61. Виноходов Д.О. Токсикологические исследования кормов с использованием инфузорий // СПб, 1995, 80с.

62. Ose Y., Sato Т. Testing for the toxicity of chemical Tetrahimena pyriformis // Sciens of Total Environment, 1985,43, p. 149-157

63. Определение токсичности металлсодержащих отходов. Инструкция 2.1.7.11-12-3-2004-2004. Минск: Мин. Здрав. Респ. Беларусь. - 25 с.

64. Долгов В.А. Методические аспекты и практическое применение ускоренной биологической оценки кормов, продуктов животноводства и других объектов ветеринарно-санитарного контроля: автореф. дисс. . докт. вет. наук. -М., 1992. -40'с.

65. Гроздов А.О. Определение общей токсичности на инфузориях парамециях // Комбикорма, №4,1994, с.24-26

66. Богдан A.C. Методические рекомендации. Комплексная биологическая оценка объектов природного и искусственного происхождения на Tetrahimena pyriformis // МЗ Беларусь, 1996,14с.

67. Черемных Е.Г., Долгов В.А., Иванова Г.В. Инфузории и корма // Комбикорма. 2006. - № 6. - С. 61 - 64.

68. Заридзе Д.Г. Эпидемиология, механизмы канцерогенеза и профилактика рака // Тез. III съезд онкологов и радиологов стран СНГ,Минск, май,2004 г.

69. Асатиани B.C. Биохимическая фотометрия. М.: Изд. АН СССР, 1957. -С. 248-253.

70. Варфоломеев СД. Биосенсоры // Соросовский образовательный журнал, № 1,1997, с.45-49

71. Будников Г.К. Биосенсоры как новый тип аналитических устройств // Соросовский образовательный журнал. 1996. № 12. С. 26-32.

72. Биосенсоры: основы и приложения // Под ред. Э. Тернера и др. М.: Мир, 1992. 614 с.

73. Похлебкин В.В. Все о пряностях // М., Центрполиграф, 1997,322с

74. Эдуард Алькаев. Пряности, специи и приправы. М.: Центрполиграф, 2001 г. 448 с.

75. Васант Лад, Давид Фроули Травы и специи // М., изд. «Саттва», 2001, 235с.

76. Лекарственные и пряные травы. Под ред. Клевенской Т.М., Борисова М.Б., М., ACT-2000., 96с.

77. Черемных Е.Г. Автоматизированная биотехническая система оценки безопасности пищевых продуктов и кормов: автореф. дисс. канд. техн. наук. М.: МГУПБ, 2005. - 23 с.

78. AVerMedia EZCapture Software Development Kit//www.avermedia.com.tw

79. Методичка искусственный желудок82. http://www.chem.agilent.com

80. Дымогенератор Я5-ФКЕ. Донецкий завод «Продмаш» // www.jsc-prodmash.ukrbiz.net

81. Иванова Е.Г., Васильева A.B., Беленикина O.A., Кантере В.М., Мухамеджанова A.A. Биотест токсичности кормов // Птицеводство. 1999. - № 5. - С.42 -43. л 4 ,

82. С I J.- О? KtUroCMCVC Gm« VA CS

83. Модельный раствор для ГАА üи aw fr^t maVi>< b^et\ ь^сМ s^cu^

84. A Sdwily ; h,6,bis- L FircUv 4*4 k JCoftST-{393

85. Системы подготовки проб методом твердофазной экстракции // http://analytec.com.ua/theory