Разработка способа разделения хитозана на низкомолекулярные фракции и изучение их биологических свойств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Кузнецов, Петр Александрович

• Кузнецов, Петр Александрович
• кандидат биологических наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кузнецов, Петр Александрович

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1.Физико-химические свойства хитозана

1.2.Производные хитозана

1.3.Способы получения олигосахаридов хитина и хитозана

1.3.1. Ферментативное расщепление

1.3.2. Физическая деструкция

1.3.3. Химическая деструкция

1.4.Фракционирование хитозана

1.5 .Хроматографическое фракционирование

1.6 .Ультрафильтрация:

1.7.Дробное осаждение и экстракция

1.8.Применение низкомолекулярного хитозана в медицине и ветеринарии

1.9.Использование низкомолекулярного хитозана в других областях народного хозяйства

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1.Объекты исследований, исходные материалы и химические реагенты

2.2.Методы исследования

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1.Фракционирование хитозана.

3.2. Определение острой токсичности фракций хитозана

3.3. Изучение влияния низкодисперсного хитозана на иммунный статус и динамику привесов молодняка КРС при энтеральном введении

3.4. Изучение адъювантных свойств хитозана

3.5. Исследование влияния низкомолекулярного хитозана на показатели иммунобиологической резистентности молодняка КРС при подкожном введении

3.5.1 Изучение влияния сочетанного применения хитозана и противопастереллезной вакцины на показатели неспецифической резистентности молодняка КРС

3.5.2. Изучение влияния хитозана на специфический иммунный ответ молодняка КРС вакцинированного против пастереллеза

4. ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка способа разделения хитозана на низкомолекулярные фракции и изучение их биологических свойств»

Актуальность темы. Хитозан является продуктом деацетилирования хитина, который относится к числу наиболее распространенных в природе органических соединений. Хитин является структурным полисахаридом экзоскелета ракообразных (крабы, креветки, криль). Хитин имеется также в кутикуле насекомых, клеточных стенках некоторых грибов и бактерий.

Хитозан в настоящее время используется в различных областях народного хозяйства. Особого внимания заслуживает применение его в ветеринарии и медицине. Установлено, что хитозан является слабым аллергеном, обладает достаточно низкой токсичностью и пирогенностью (Скрябин К.Г., Вихорева Г.А., Варламов В.П., 2002; Быкова В.М., Немцев С.В., 2002; Allan G.G., Peyron ML, 1989).

Хитозан способен образовывать гели в слабокислых растворах (рН 5-6). Кроме того, он может создавать пленку на коже и раневых поверхностях, а таюке на слизистой оболочке желудочно-кишечного тракта, обладает высокой адсорбционной емкостью, способен выводить токсичные вещества, стимулирует клеточный и гуморальный иммунитет (Албулов А.И., Самуйленко А.Я., Шинкарев С.М., Фролова М.А., 2001; Червинец В.М., Бондаренко В.М., Комаров Б.А, 2002; Muzzarelli R.A.A., 1998). Эти свойства хитозана могут быть использованы для создания средств лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний у сельскохозяйственных животных, приносящих большой экономический ущерб.

В процессе выделения хитозан подвергается воздействию химических реагентов (щелочей и кислот) при очень жестких условиях. В результате получают полимеры с широким молекулярно-массовым распределением, трудно поддающимися стандартизации. В зависимости от содержания в составе препарата фракций с различными молекулярными массами хитозан может проявлять в той или иной степени сорбционные, иммуномодулирующие, бактериостатические, фунгистатические, противовоспалительные и другие свойства (Ильин Л.А., Андрианова И.Е., Глушков В.А., 2003; Червинец В.М., Албулов А.И., Червинец Ю.В, 2006). Качества хитозана с неконтролируемой полидисперсностью малопредсказуемы и плохо поддаются стандартизации (Гамзазаде А.И., 1999; Варламов В.П., Ильина А.В., 2003; Szumilewicz J., Meller W.,2002).

В то же время для медицины, ветеринарии, пищевой биотехнологии необходим хитозан с определенными характеристиками и свойствами, которые в значительной степени определяются степенью чистоты продукта, его молекулярной массой, степенью деацетилирования и токсичностью.

Цели и задачи исследований. Целью настоящей работы являются разработка способа фракционирования хитозана и получение образцов с заданными молекулярными массами и узким молекулярно-массовым распределением, а также изучение биологических свойств полученных фракций. В соответствии с этим были поставлены задачи:

1. Разработать способ фракционирования хитозана.

2. Получить и охарактеризовать отдельные фракции хитозана.

3. Определить острую токсичность полученных фракций.

4. Изучить воздействие хитозана на организм молодняка КРС при энтеральном введении.

5. Исследовать адъювантные свойства хитозана на лабораторных животных.

6. Изучить влияние парентерального введения хитозана на иммунобиологическую реактивность молодняка сельскохозяйственных животных.

Научная новизна работы. Определены оптимальные параметры фракционирования и на их основе разработан способ получения фракций хитозана. Показано, что для разделения хитозана на фракции наилучшим образом подходят ультрафильтрационные мембраны на основе ацетата целлюлозы, в то же время при применении полисульфоновых мембран и мембран на основе сополимера акриловой кислоты и винилового спирта разделение хитозана практически не происходит, что связано с особенностями материалов данных мембран. Получены фракции хитозана с низким значением индекса полидисперсности и молекулярной массой пика в заданном диапазоне.

1. Показано, что фракции хитозана с молекулярной массой <5, 5-10, 10-20, 20-50, 50-100, 100-150, 150-300 и более 300 кДа обладают низкой токсичностью, которая повышается с увеличением молекулярной массы.

2. Установлено, что использование хитозана с низким индексом полидисперсности позволяет усиливать его биологическое действие, что выражается в увеличении привесов молодняка КРС, по сравнению с применением полифракционных препаратов.

3. В опытах на мышах показано, что использование фракционированного хитозана в качестве адъюванта обеспечивает выработку антител к бычьему сывороточному альбумину (БСА) на уровне или выше известных масляных и минеральных адъювантов.

4. Показано, что подкожное введение фракционированного хитозана молодняку КРС во время вакцинации против пастереллеза стимулирует антителообразование и положительно влияет на показатели клеточного иммунитета.

Практическая значимость работы.

1. Разработан способ получения фракций хитозана с низким значением индекса полидисперсности и молекулярной массой пика в заданном диапазоне. Наработаны опытные партии низкомолекулярных фракций хитозана для использования в качестве иммуномодуляторов и адъювантов.

2. Показано, что применение хитозана с низким значением индекса полидисперсноти позволяет усилить его биологические свойства, что дает возможность получать больший экономический эффект от применения этого препарата.

3. Показана возможность и перспективность использования хитозана в качестве адъюванта при вакцинации.

4. Выявлен стимулирующий эффект фракционированного хитозана на клеточный и гуморальный иммунитет при подкожном . введении молодняку КРС, что дает возможность использовать этот препарат в качестве иммуномодулятора.

Апробация результатов. Основные результаты проведенных исследований были доложены:

• на пятой международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарно-биологических препаратов» (Щелково, 2003);

• на международной научно-практической конференции молодых ученых «Научные основы производства ветеринарно-биологических препаратов» (Щелково, 2004);

• на международной конференции «Ветеринарная медицина 2005: современное состояние и проблемы обеспечения благополучия животноводства» (г. Ялта, 2005);

• на международной научно-практической конференции «Перспективы и проблемы развития промышленной биотехнологии в рамках единого экономического пространства стран содружества» (Минск - Нарочь, май 2005);

• на седьмой международной научно-практической конференции «Научные основы производства ветеринарно-биологических препаратов» (Щелково, 2005);

• на восьмой Международной конференции «Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана» (Казань, 2006);

• на заседании секции «Ветеринарная биотехнология» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (Щелково, 2008).

Публикации. По теме диссертации и материалам проведенных исследований опубликовано 15 статей в сборниках международных научно-практических конференций и симпозиумов, отечественных специализированных журналах, в том числе 4 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, литературного обзора, методической части, раздела с обсуждением экспериментальных результатов, выводов, списка литературы и приложения. Работа изложена на 129 страницах машинописного текста, содержит 11 таблиц и 12 рисунков. Список использованной литературы включает 232 источника, из которых 110 отечественных. Основные положения, выносимые на защиту.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Кузнецов, Петр Александрович

ВЫВОДЫ

1. Разработан способ фракционирования хитозана на ацетат-целлюлозных мембранах с размером пор от 5 кДа до 300, кДа позволяющий получать препараты с низким индексом полидисперсности (2,1-3,5) и требуемыми свойствами.

2. Определена зависимость токсичности хитозана от его молекулярной массы. Наименьшей токсичностью обладают фракции полимера до 20 кДа.

3. Установлено, что энтеральное введение телятам сукциноила хитозана (ММ 80 кДа, СДА - 85-90%) в условиях повышенного содержание радиоцезия в кормах позволяет увеличить прирост массы тела животных на 9-10%.

4. Показано, что подкожное введение лабораторным мышам сукциноила хитозана (молекулярная масса 210 кДа, СДА 75-92 %) в качестве адъюванта дает возможность получать иммунный ответ на БСА на уровне или выше известных масляных и минеральных адъювантов.

5. Показано, что сукциноил хитозана стимулирует развитие естественной и специфической резистентности у молодняка крупного рогатого скота. Разработаны рекомендации по применению хитозана для профилактики и лечения иммунодефицитов молодняка сельскохозяйственных животных.

6. Выявлены иммуномодулирующие свойства фракции сукциноила хитозана с молекулярной массой 80 кДа и СДА 85-90%. Подкожное введение хитозана при вакцинации молодняка крупного рогатого скота против пастереллеза способствовало развитию долгосрочного и формированию местного иммунитета, а также увеличению титров специфических антител в 2,4 раза по сравнению с контролем.

7. Оценка состояния иммунобиологической реактивности организма молодняка крупного рогатого скота показала, что у животных наблюдаются нарушения функций иммунной системы: снижение уровня палочкоядерных нейтрофилов и отсутствие адаптационных резервов поглотительной способности нейтрофилов. Применение хитозана способствовало активизации механизмов, обеспечивающих поглощение чужеродного материала нейтрофилам, и тем самым обусловило усиление общей резистентности молодняка К PC.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кузнецов, Петр Александрович, 2008 год

1. Агеев Е.П., Вихорева Г.А., Голуб М.А., Матушкина Н.Н. Транспортные свойства хитозановых пленок // Новые достижения в исследовании хитина и хитозана. Материалы 5 международной конференции. Под ред.: В.П. Варламова и др. -М.: ВНИРО, 1999. -с.205-206.

2. Авторское свидетельство 1090409 (РФ) МКИЗ А 61 К 39/00, №3429.198/28-13. Способ определения иммунологического состояния организма. /Понякина И.Д., Лебедев К.А., Васенович М.И. и др. Заявл. 23.04.82; опубл. 07.05.84, Бюл. №17. -с. 111-113.

3. Базт М.Р., Вихорева Г.А., Гальбрайх Л.С. Образование амидных связей в карбоксиметиловом эфире хитозана // Хим. волокна. №5. -М., 1990.с.5-6.

4. Белоцкий С.М:, Авталион Р.Р. Воспаление и иммунный ответ в таблицах и рисунках // М.: Гончарь., 2006. 64 стр.

5. Блатун JI. А. Флегмоны и абсцессы — современные возможности лечения // Мед. Научно-практический журнал. Лечащий врач: -Вып. 01. -2002. -с. 25-27.

6. П.Быкова В.М., Немцев С.В. Сырьевые источники и способы получения хитина и хитозана // В кн.: Хитин и хитозан: получение, свойства и применение. Под ред.: К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. -М : Наука, 2002.-С.7-23.

7. Бычков А.В., Бьпсова В.М., Кривошеина Л.И. Применение «Хитана» в; клинической практике // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы 7 международной конференции. Под ред.: В.П. Варламова и др.-М.: ВНИРО, 2003.-с.156-157.

8. Бэм Э. Простая радиальная иммунодиффузия по Манчини // Иммунологические методы.- М.: Мир. 1987.- С. 49-57.

9. Варламов В.П., Стояченко И.А. Ферментативный гидролиз хитозана //

10. Совершенствование производства хитина и хитозана из панцирьсодержащих отходов криля и пути их использования. Материалы 3 Всесоюзной конференции. -М.: ВНИРО, 1992. с.56-62.

11. Гальбрайх JI.C., Вихорева Г.А., Горбачева И.Н., Скорикова Е.Е., Колядка М.Г. Влияние рН среды на структуру и свойства гидрогелей -полиэлектролитных комплексов хитозана // Всесоюзн. научн.-техн. конф.: тезисы докл. Суздаль, 1990. - с. 179-180.

12. Гамзазаде А.И., Скляр А.М., Рогожин С.В. // Высокомол. Соед.-Т. А27. №6,1985.-с. 1179-1183;

13. Гамзазаде А.И., Скляр А.М., Рогожин С.В., Павлова С.А. // Высокомол. Соед. Т. А23. №3,1981. -с. 594-597

14. Гамзазаде А.И. Производные хитина/ хитозана контролируемой структуры в качестве потенциально новых биоматериалов : Дис. . д-ра хим. наук : 03.00.23, 02.00.06 : М., 2005 363 с. РГБ ОД, 71:05-2/84

15. Гаркави JI.X., Квакина Е.Б., Уколова М.А. Адаптационные реакции и резистентность организма. Ростов-на-Дону: Изд-во Ростовского ун-та, 1990. -224 с.

16. Гартман О.Р. Способ и термодинамика получения хитина и хитозана // Дис. канд. хим. наук. -Барнаул: Алтайский государственный университет, 1998. -115 с.

17. Герасименко Д.В. Ферментативное получение низкомолекулярного хитозана и изучение его антибактериальных свойств // Дисс. на соискание ученой степени к. биол. наук. -Щелково, 2005. -133 с.

18. Гладышев Д.Ю., Скорикова Е.Е., Вихорева Г.А., Гальбрайх Л.С.,

19. Григорьева Е.Э., Овсепян A.M., Панов Б.П. Получение и исследованией строения продуктов карбокосиметилирования хитина и хитозана // 6 Всесоюзн., конф. по физ. и химии целлюлозы: тезисы докл. Минск, 1990. - с.249.

20. Гладышев Д.Ю., Скорикова Е.Е., Вигорева Г.А., Гальбрайх JI.C. Свойства карбоксиметилового эфира хитозана // Тезисы докл. третьей Всесоюзн. конф. Водорастворимые полимеры и их применение. -Иркутск, 1987.-c.141.

21. Дубинская A.M., Добротворская А.Е. Применение хитина и его производных в медицине // Химико-фармацевтический журнал. Т.23, №5. -1989. -с. 623-628.

22. Ершов Б.Г., Исаков О.В., Рогожин С.В., Гамзазаде А.И. Радиационно-химические превращения хитозана // Докл. АН СССР. -Т.295, №5. 1987. -с. 1152-1156.

23. Жибинов В.И. Применение лизосомально-катионного теста // Ветеринария. -№8. 1983. с.30-31.

24. Заявка 2-240101 Япония, МКИ С 08 Б 37/08, А 61 К 7/00. Способ получения сульфонированного хитозана / Комияма Н., Сано X., Мупасаки К., Мацунага А. (Япония). J61-63033; 3аявл.14.03.89; Опубл. 25.09.90.

25. ЗЗ.Заявка 62-4702 Япония, МКИ С 08 В 37/08. Получение водорастворимого акрилоилированного хитозана / Ито X., Сано X., Сибасаки Д. (Япония). -№60-142710; Заявл. 28.06.85; Опубл. 10.01.87.

26. Заявка 63-120701 Япония, МКИ С 08 В 37/08. Получение хитозана низкой молекулярной массы / Морита И., Камино К. (Япония). № 61-267989; Заявл. 11.11.86; 0публ.25.05.88.

27. Заявка 2-22301 Япония, МКИ С 08 В 37/08. Способ получения водорастворимого хитозана / Камааяма X., Сэкигути Т. (Япония). -№63171796; Заявл. 12.07.88; Опубл. 25.10.90.

28. Заявка 2-11601 Япония, МКИ С 08 В 37/08. Способ получения хитозана низкого молекулярного веса / Накамура Т. (Япония). №63-159364;

29. Заявл. 29.06.88; Опубл. 16.01.91.

30. Заявка 2-41301 Япония, МКИ С 08 В 37/08. Способ получения водорастворимого хитозана / Иноуэ Т. (Япония). №63-191933; Заявл. 30.07.88; Опубл. 9.02.90.

31. Заявка 61-21102 Япония, МКИ С 08 В 37/08. Способ получения хитозановых олигосахаридов / Нандзе Ф., Токумаке С., Сакаи К. (Япония). -№59-143783; Заявл. 10.07.84; Опубл. 29.01.86.

32. Заявка 61-268626 Япония. МКИ А 61 К 31/715. Противомикробные препараты / Судзуки С., Судзуки М., Катаяма X. (Япония). №60-109854; Заявл. 22.05.85; Опубл. 28.11.86.

33. Заявка 59-46223 Япония. МКИ А 61 К 31/73, 31/63.Противомикробные препараты / Такамуцо Т., Китао Е., Кохати К. (Япония). №57-150398; Заявл. 30.08.84; Опубл. 15.03.84.

34. Заявка 62-59207 Япония. МКИ А 61 К 9/52, А 61 К 9/16. Липосомы, содержащие олигомеры хитина или хитозана / Судзуки С., Судзуки М., Катаяма X. (Япония). №60-100036; Заявл. 10.05.85; Опубл. 19.02.90.

35. Заявка 2-48508 Япония. МКИ А 01 63/00, С 08 В 37/08. Физиологически активный промотор / Аонума Т. (Япония). №63-199720; Заявл. 10.08.88; Опубл. 19.02.90

36. Заявка 59-27826 Япония. МКИ А 61 К 31/715, А 61 К 35/56. Противоопухолевый препарат / Судзуки С., Отава И., Хасимото К. (Япония). №57-137929; Заявл. 10.08.82; Опубл. 14.02.84.

37. Заявка 59-27827 Япония. МКИ А 61 К 31/715; А 61 К 35/65.

38. Противомикробный препарат / Судзуки С., Огава Й., Хасимото К., Окура Я., Судзуки С. (Япония). №57-137929; Заявл. 10.08.82; Опубл. 14.02.84.

39. Заявка 1-208347 Япония. МКИ С 04 В 14/30, С 04 В 14/36.Твердеющая композиция / Ито М. (Япония). №63-34673; Заявл. 16.02.88; Опубл. 22.08.89.

40. Заявка 62-43129 Япония. МКИ С 08 В 37/08, А 61 L 15/01. Губчатый хитин / Мотосуги К., Ямагути Я., Кибунэ К. (Япония). №62-19496; Заявл. 28.01.87; Опубл. 2.08.88

41. Заявка 1-294627 Япония. МКИ А 61 К 31/73. Препарат для лечения заболеваний печени / Хирамори Т., Нисимура Т. (Япония). №63-126165; Заявл: 24.05.88; Опубл. 28.11.89.

42. Заявка 63-2924 Япония. МКИ А 61 К 9/12, А 61 К 9/10. Средство против эпидермофитии / Морита И. (Япония). №61-145944; Заявл. 20.06.86; Опубл. 7.01.88.53.3аявка 64-61429 Япония. МКИ А 61 К 47/00. Противораковый препарат /

43. Хакигава А. (Япония). -№62-216168; Заявл. 29.08.87; Опубл. 8.03.89. 54.Заявка 56-133344 Япония. МКИ С 08 L 5/08, С 08 L 89/00. Новые композиционные материалы / Косуги А., Като К., Фунахаян Н. (Япония). №55-36712; Заявл. 21.03.80; Опубл. 19.10.81.

44. Иванов В.П., Крапивин И.А. Программа для статистической обработки результатов зоотехнических, физиологических и биохимических исследований // Новые формы и методы обучения студентов.- Кострома, 1994.- ч.2, с.90-91.

45. Ильина А.В., Ткачёва Ю.В., Варламов В.П. Деполимеризация высокомолекулярного хитозана ферментным препаратом целловиридин Г20х // Прикл. Биохим. Микробиол. Т.38, №1. - 2002. - с.5-13.

46. Ильина А.В., Варламов В.П. Влияние степени ацетилирования на ферментативный гидролиз хитозана препаратом целловиридин Г20х //

47. Прикладная биохимия и микробиология. -Т.39, №3. -2003. -с.273-277.

48. Ильина А.В., Ткачева Ю.В., Варламов В.П. Деполимеризация высокомолекулярных хитозанов ферментным препаратом целловеридин Г.20Х. // Прикладная биохимия и микробиология. Т.38, № 2. - 2002. - с. 132-135.

49. Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных. -Мн.:Ураджай, 1986. -183 с.

50. Каймыш И.Ф. Физико-химические свойства хитозана и возможности его практического использования // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы 5 конференции. -М.: ВНИРО, 1999. -с.230-231.

51. Кильдеева Н.Р., Бабак В.Г., Вихорева Г.А., Агеев Е.П. и др. Новый подход к созданию материалов с контролируемым выделением лекарственного вещества. Вестник МГУ. Химия. -Т41, № 6. -2000. с. 423425

52. Котельникова Т.А., Агеев Е.П., Вихорева Г.А., Смирнов М.А. Сорбционные свойства хитозанов по данным обращенной газовой хроматографии // Материалы 7 международной конференции. Под ред.:

53. В.П. Варламова и др. -М.: ВНИРО, 2003. -с.323-327

54. Кудряшов Л.И., Сенченкова Т.М. Выделение и установление строения продуктов радиолиза глюкозамина и N-ацетилглюкозамина // Радиационная химия углеводов. '-Т.44, №6. -1974. -с.1389-1393.

55. Куликов С.Н., Чирков С.Н., Ильина А.В., Лопатин С.А., Варламов В.П. Влияние молекулярной массы хитозана на его противовирусную активность в растениях // Журн. прикладной биохимии и биотехнологии. -Т.42, №2. -2006. -с.224-228.

56. Макаревич Н.А. Лизосомально-катионный тест для оценки уровня резистентности организма крупного рогатого скота // Ветеринария. -№5.1988. -с.26-28.

57. Марквичева Е.А. Хитозан и его производные в биоинкапсулировании // В кн.: Хитин и хитозан: получение, свойства и применение. Под ред.: К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова: -М.: Наука, 2002. -с.315-327.

58. Медуницин Н.В. // Вакцинология. — М.,1999. — С. 272.

59. Методика выявления специфического антитела с использованием твердофазного носителя // Минздрав СССР, РАМН. 1989г.

60. Меньшиков В.В. (ред.) Лабораторные методы исследования в клинике.-М.: Медицина, 1987,- 246 с.

61. Методические указания по применению унифицированных биохимических методов исследования крови, мочи и молока в ветеринарных лабораториях.-М.: ВАСХНИЛ, 1981.- 85 с.

62. Мезенова О .Я., Лысова А.С., Григорьева Е.В. Гаммарус балтийский -потенциальный источник получения хитина и хитозана. // Материалы седьмой международной конференции. Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. -М.: ВНИРО, 2003. с. 32-33

63. Мышкина Л.А., Петухова Т.Е., Левина О.И., Рабинович О.З., Левчук Т.Н., Кивман Г.Я. Ранозаживляюшие покрытия на основе хитозан-коллагенового комплекса // 2 Российск. нац.конгресс "Человек илекарство". -1992. с.229.

64. Насибов С.М., Гамзазаде А.И., Рогожин С.В., Андрианова И.П., Рабовский А.В., Морозова А.А. Влияние модификации поверхности активированных угольных волокон на сорбцию липопротеинов // Хим.-фарм. ж. Т.22, №1. - 1988. - с.84-89.

65. Немцев С.В., Адвиненко И.Д., Варламов В.П., Скрябин К.Г.// Хитин и хитозан. Получение, свойства, применение. Материалы шестой международной конференции. М.: ВНИРО, 2001. -с. 94.

66. Немцев С.В., Зуева О.Ю., Исмаилов В.Я., Варламов В.П. Кутикула жуков станет новым источником хитина и хитозана. // Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы седьмой международной конференции. -М.: ВНИРО, 2003. с. 36-38.

67. Немцев С.В., Али Салем Омер // Технология переработки гидробионтов. Материалы международной конференции. -М.: ВНИРО, 1994. -с 125-127.

68. Нудьга Л.А. Производные хитина и хитозана и их свойства. // Хитин и хитозан. Получение, свойства, применение. М:Наука, 2002.- с. 141-142.

69. Нудьга Л.А., Петрова В.А., Денисов В.М., Петропавловский Г.А. Аллилирование хитозана // ЖПХ. №1. - 1991. - с.229-232.

70. Нудьга Л.А, Плиско Е.А., Данилов С.Н. В-алкилирование хитозана // ЖПХ. Т.23, №12. - 1973. -с.2756-2760.

71. Нудьга Л.А., Плиско Е.А., Данилов С.Н, О-алкилирование хитозана // ЖПХ. 1973. - Т.23, №12. - с.2752-2756.

72. Нудьга JI.A. Биоматериалы на основе хитина и хитозана // Совершенствование производства хитина и хитозана из панцирьсодержащих отходов криля и пути их использования. Материалы третьей Всесоюзной конференции. М., 1992. - с. 41

73. Пат. RU 02144768 С1 20000127. Композиция на основе водных растворов хитозана против пирикуляриоза риса. / Тютерев С.Л., Тарлаковский С.А., Здрожевская С.Д., Евстигнеева Т.Д. Попова Э.В. Заявл. 15.06.1999, опубл. 27.01.2000.

74. Пат. 02076712 С1 19971227. Средство, обладающее антикоагулянтной и антитромбической активностью. / Дрозд Н.Н., Макаров В.А., Шера И., Башков Г.В., Гальбрайх Л.С., Вихорева Г.А., Горбачева И.Н. Опубл. 27.12.1997

75. Пат. 02228758 С1 0040520. Способ мембранного диализа гнойно-воспалительных заболеваний. / Винник Ю.С., Якимов С.В. , Карапетян Г.Э., Большаков И.Н., Кухарская Л.К. Заявл. 17.02.2003. Опубл. 20.05.2004

76. Пат. 02196587 С1 20030120. Способ лечения деструктивной формы панкреатита. / Большаков И.Н., Насибов С.М., Приходько А.А., Винник Ю.С., Зыкова Л.Д., Бичурина Т.Б. Заявл 10.08.2001. Опубл. 20.01.2003.

77. Пат. 02225712 С1 20040320. Средство для терминальной анестезии. / Арзамасцев А.П., Кацнель Е.М., Лапенко В.Л., Николаевский В.А., Никитский А.С., Сливкин А.И. Заявл. 20.09.2002. Опубл. 20.03.2004.

78. Пат. 02057760 С1 19960410. Олигомер хитина и хитозана и способ его получения./ЕтсукоНаКао. Заявл. 29.08.1989. Опубл. 10.04.1996.

79. Пат. 02073016 С1 19970210. Способ получения низкомолекулярного водорастворимого хитозана. / Варламов В.П., Стояченко И.А., Буданов М.В. Заявл. 31.12.1992. Опубл. 10.02.1997.

80. Пат. РФ № 2144040 от 07.04.1998. Способ получения натриевой соли сукцината хитозана. / Комаров Б.А., Албулов А.И., Белов М.Ю., Самуйленко А.Я., Фоменко А.С., Шинкарев С.М., Трунов A.M.

81. Пат. РФ №2147204 от 16.06.95 «Способы обработки спермы быка», с. 9.

82. Пат. РФ № 2204402 от 14.06.2001. Способ получения фитохитодезов. / Комаров Б.А., Албулов А.И., Трескунов К.А., Погорельская Л.В., Червинец В.М.

83. Пахмутов И.А., Ульянова М.С. Оценка функциональной активности нейтрофилов крови животных // Ветеринария. -№3. -1984. -с. 68-69.

84. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. и др. Оценка иммунного статуса человека при массовых обследованиях (Методология и методические рекомендации). М.: Медицина, 1989. -153 с.

85. Плиско Е.А., Нудьга JI.A., Данилов С.Н. Хитин и его химические превращения // Успехи химии. Т.46, №6. - 1977. -с. 1470-1478.

86. Плиско Е.А., Щелкунова Л.И., Нудьга Л.А. Изменение свойств хитозана под действием у-излучения // ЖПХ. Т.50, №9.- 1977. -с. 20402044.

87. Самойлова Н.А., Рыженков В.Е., Ямсков И.А. Хитозансодержащий гиполипидемический энтеросорбент // Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана. Материалы 5 международной конференции. Под ред.: В.П. Варламова и др. -М.: ВНИРО, 1999. -с.191-193.

88. Скляр A.M. Исследование гидродинамических и реологических свойств растворов полимергомологов хитозана и его хлористоводородной соли // Автореф. дисс. на соискание уч. степени к.х.н. 12111173 ДСП, от 18.06.81.-М.: ИНЭОС АН СССР, 1981.

89. Столбушкина П.П., Вихорева Г.А., Банникова Г.Е., Дрозд Н.Н., Макаров В.А. Сульфатирование низкомолекулярного хитозана //Материалы седьмой международной конференции. Современныеперспективы в исследовании хитина и хитозана. -М.: ВНИРО, 2003. с. 50-52

90. Тесленко А .Я., Попов В.Г. Хитин и его производные в биотехнологии // Обзор, информ. Главное управление микробиологической промышленностисти при Совете Министров СССР. -М., 1982,- 40 с.

91. Терещенко В.Г. Применение фитохитодеза в кардиологической реани-мации // Фитотерапия и лазеротерапия в ХХЗ веке. Материалы научной конференции. Черноголовка, 1999. -с. 86-88.

92. Тютерев СЛ. научные основы индуцированной болезнеустойчивости растений. Спб, 2002. -328с.

93. Тютерев С.Л., Якубчик М.С., Тарлаковский С.А., Выцкий В.А. // Хитозан биологически активное безопасное средство, повышающее устойчивость растений к болезни. Спб, 1994.

94. Тютерев* С.Л. Молекулярные механизмы действия хитозана в качестве средства, повышающего болезнеустойчивость растений // Материалы седьмой международной конференции. Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана. -М.: ВНИРО, 2003. -с. 118.

95. Фомичев Ю. П., Донник И. М., Федоров Ю. Н. и др. Эффективность применения энтеросорбентов при выращивании молодняка крупного рогатого скота в техногенных зонах России // Аграрная Россия. №5. -2004. -с. 45-48.

96. Фомичев Ю.П., Пучков Ю.Н. Влияние хитозана на выведение радионуклеидов из организма и рост телят // Новые достижения висследовании хитина и хитозана. Материалы 6 международной конференции. Под ред.: В.П. Варламова и др. -М.: ВНИРО, 20.01. -с. 375376.

97. Хаитов Р.Б., Пинегин Б.В., Истамов Х.И. Экологическая иммунология. -М.:ВНИРО, 1995. -219 с.

98. Червинец В.М., Комаров Б.А. Способ лечения хронического гастрита, язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки. Патент РФ №2150271. Приоритет от 13.10.1999.

99. Чумаченко В.Е., Высоцкий А.М., Сердюк Н.А., Чумаченко В.В. Определение естественной резиситентности и обмена веществ у сельскохозяйственных животных. Киев: Урожай, 1990. -136 с.

100. Шубич М.Г., Медникова В.Г. NBT тест у детей в норме и при гнойно-бактериальных инфекциях // Лаб. дело. -№1. - 1978. -с. 663-666.

101. Шубич М.Г., Нестерова И.В., Старченко В.М. Тест с нитроснним тетразолием в оценке иммунологического статуса детей с гнойно-септическими заболеваниями // Лаб. дело. №7. -1980. -с. 342-344.

102. Шинкарев С.М. Разработка и усовершенствование промышленных технологий получения препаратов на основе хитозана для лечения и профилактики болезней животных // Диссертация на соискание уч.степени кандидата биологических наук. -Щелково, 2001. -с. 12.

103. Эрнст JI.K., Злочевский Ф.И., Ерохин В.А., Клецкр Н.Г. и др. Энтомологический метод утилизации органических отходов животноводства. Пчеловодство. -№ 5. -2001. -с. 51-57

104. Allan G.G., Peyron М. Chitin and Chitosan: Sources, Chem., Biochem., Phys. Prop., and Appl. // Proc. 4th Int. Cont. Trondhum. 1989. - p.443-466.

105. Argulles-Monal W., Peniche C.C. Preparations of novel polyampholyte from chitosan and citric acid // Macromol. Chem. Rapid. Commun. V.14, №12. - 1993.-P.735-740.

106. Berth G., Dautzenberg H. The degree of acetylation of chitosans and its effect on the chain conformation in aqueous solution // Carbohydr. Polym. -V.47. -2002. -P.39-51.

107. Byun H.G., Kim Y.T., Park P.J., Kim S.K. Chitooligosaccharides as a novel p-secretase inhibitor//Carbohydr. Polym. -V.61. -2005. -P. 198-202.

108. Chen R.H., Chang J.R., Shyur J.S. Effects of ultrasonic conditions and storage in acidic solutions on changes in molecular weight and polydisersity of treated chitosan // Carbohydr. Res. -V.299. -1997. -P.287-294.

109. Cachi Prof.T. Gradual release of anti-caner drugs using chitosan // Techno Japan. V.22, №5. - 1989. -P.1100.

110. Domszny J.G., Roberts G.A.F. Evaluation of infared spectroscopic techniques for analysing chitosan. // Macromol. Chem. -V. 186, № 8. -1985. -P. 1671-1677.

111. Dutkicwicz Y., Szosland L., Kukharka M. Structure-bioactivity relationship of chitin derivatives. The effect of solid chitin derivatives on bloodcoagulation // J. Bioact. and Compat. Polym. V.5, №3. - 1990. - P.293-304.

112. Dutkicwicz Y., Yudkicwicz L., Kukharka M. Some properties of chitosan-heparin complex // 33rd IUPAC Int. Symp. Macromol. Montreal. -8-13 July 1990. - Book Abstr. - P.326.

113. Fosher В., Massoli A., Torn G. High-molecular-weight chitosan 6-0-sulfate synthesis, ESR and NMR characterisation // Macromol.Chem. -V.187, №1. 1986. - P.2609-2620

114. Fukamizo Y., Kramer K. Mechanism of chitin hydrolysis by thebinary chitinase system in insect moulting fluid // Insect Biochem. V.15, №2. - 1985. -P. 141-145.

115. Fukuda H., Kikuchi Y. Polyelectrolyte Complexes of Sodium Dextran Sulfate with Chitosan // Macromol. Chem. V.118, №10. - 1977. - P.2895-2899.

116. Gamzazade A.I., Shlimak V.M., Sklar A.M., Shtikova E.V., Pavlova S.A., Rogojin S. V. // Acta Polymeries -V.36, № 8. -1985. -P. 420

117. Grant W.D., Fermor T.R., Wood D.A. Production of bacterial cell walls during growth of agaricus bisporus on Bacillus subtillis // J. Gen. Microbiol. -V.30, №4. -1984. P.761-769.

118. Girand-Guille M.M., Bouligand Y. Chitin-protein molecular organization in atropod // In Chitin in Nature and Technology. Ed. By Muzzarelli R.A.A., C. Janniaux, Gooday G.W. Plenum Press, New York and London. 1986. -P. 29-35.

119. Giambrone J.J. et al. Field trials with an oil emulsion infectious bursal disease vaccine in broiler breeder pullets // Poultry Science, -vol. 63., -1984.,1. P. 2162-2166.

120. Hadwiger L.A., Beckman J.M., Adams M.J. Localization of fungal components in the Pea-Fusarium interaction detected immunochemically with anti-chitosan and anti-fungal cell wall antisera // Plant Physiology. V.67. -1981. - P.170-175.

121. Hans Selye. A Syndrome Produced by Diverse Nocuous Agents // J Neuropsychiatry Clin Neurosci. N 10. -1998. -P 230-231.

122. Hirano S., Koishibara Y. , Kitaura S., Yaneko T. Ghitin biodegradation in sand dunes //Biochem. Syst. Ecol. -V.19, №5. 1991. - P. 379-384.

123. Hirano S., Kondo Y., Fuketa M. Structure and properties of some chitosan-Halogen complexes // Chitin-chitosan Proc. Int. Conf. 2nd. 1982. -P.57-62.

124. Hirano S., Noishiki Y. The blood compability of chitosan and N-acyl-chitosan // J. Biomed. Mater. Res. V.19, №14. - 1985. -P.413-417.

125. Hong Lin, Haiying Wang, Changhu Xue, Mei Ye, Preparation of chitosan oligomers by immobilized papain // Enzyme and Microbial Technology 31 (2002), P 588-592 (№36)

126. Holt L. B. Quantitative studies in diphtheria prophylaxis: an attempt to derive a mathematical characterization of the antigenicity of diphtheria prophylactic //Biometrics. -Vol. 11, № 1. -1955. -P. 83-94.

127. Hudson S.M., Kim B.B. Chitosan acetate polymers // Polym. Prepr. American Chem. Soc. V.31, №1 . - 1990. -P.629-630.

128. Hua Zang, S.H. Neay. In vitro degradation of chitosan by a commertial enzyme preparation effect on molecular weight and degree of deacetilation //

129. Biomaterials. -V. 22. -2001. -P. 1653-1658.

130. Isogai A. Molecular mass distribution of chitin and chitosan // In book: Chitin handbook. Ed.: R.A.A. Muzarelli, M.G. Peter Italy: Atec, Grottamare. -1997. -P.103-108.

131. Jeon Y.J., Kim S.K. Production of chitooligosaccharides using an ultrafiltration membrane reactor and their antimicrobial activity // Carbohydr. Polym. -V.41. -2000. -P. 133-141.

132. Juang R-S., Shao H-J. A simplified equilibrium model for sorbtion of heavy metal ions from aqueous solutions on chitosan // Water Research. -V.36, N12. -2002. -P.2999-3008.

133. ICim K.K., Escobedo J.O., St.Luce N.N., Rusin O., Wong D., Stongin R.M. Postcolumn HPLC detection of monosaccharides with a chemosensor // Organic Letters. -V.5, №26. -2003. -P.5007-5010.

134. Kumar A.B.V., Gowda L.R., Tharanthan R.N. Non-specific depolymerization of chitozan by pronase and characterization of the resultanr products // Eur. J. Biochem. -V. 271. -2004. -P. 713-723.

135. Kikuchi Y., Kubota N. Permeability control of polyelectrolyte complex membrane Including chitosan derivative as component // Bull. Chem. Soc. Jap. V.61, №8. - 1988. - P.2943-2974.

136. Kaifu K., Komai T. Wetting characterstics and blood clothing on surfaces of acylated chitins // J. Biomed. Mater. Res. V.16, №6. - 1982. -P.757-766.

137. Kawashima Y., Kasai A. Preparation of a prolonged release tablets of aspirin with chitosan // Chem. and Pharm. Bull. V.33, №5. - 1985. - P.2107-2113

138. Kauss H., Jeblick W., Young D.H. Chitin deacetylase from the plant pathogen colletotrichum lindemuthianum // Plant Sci. Lett. V.28. - 1982/83. -p.231.

139. Kurita K. Studies on Chitin. IV.Evidence for Formation of Block and Random Copolymers of N-acetyl-L-glucosamine and D-glucosamine by hetero- and homogeneous hydrolyses // Macromol. Chem. -V.178. — 1977. -P.3197-3202.

140. Kurita K., Ikikawa M., Ishizeki S., Fujisaki H., Iwakura I. Studies on chitin. VIH. Modification reactions of chitin in highly swollen state with aromatic cyclic carbohylic acid anhydrides // Macromol. Chem. V.183. -1982.-P.l 162-1166.

141. Kea-Yong K., Dong-Sun M. Wound covering material from chitosan-N-vinylpyrrolidone copolymer // YUPAC 32th Int.Symp.Macromol., Kyoto. -1988.-P.105.

142. Kochanska В., Kedzia A. Suscebility of Candida, Geotrichum and Rhodotorula to chitosan ascorbat // Chitosan in Pharmacy and Chemistry. Eds.: R.A.A.Muzzarelli, C. Muzzarelli. Atec. Italy. -2002. -P. 165-170

143. Komazawa H., Saiku J., Nishikawa N., Yoneda I. // Clin. Exp. Metastasis. -V. 11, № 6. -1993. -P. 482-491.

144. Latlief.S.L. Effects of chitin and its derivatives as coagulation aid // J. Appl. Polym. Sci. V.27. -1982. - P.4467-4470.

145. Lin H., Wang H., Xue C., Ye M. Preparation of chitosan oligomers by immobilized papain // Enzyme and Microbial Technology. -V.31. -2002. -P.588-592.

146. Lim S.-H., Hudson S.M. Review of chitosan and its derivatives as antimicrobal agents and their uses as textile chemicals // J. Macromol. Sci. -V.43, №2. -2003. -P.223-269

147. Liu X.F., GuanY.L., Yang D.Z., Li Z., Yao K.D. Antibacterial action of chitosan and carboxymethylated chitosan// J.Appl. Polym. Sci. -V. 79. -2001.p.-1324-1335

148. Lopatin S.A., Ilyin M.M, Pustobaev V.N., Bezchetnikova Z.A., Varlamov V.P., Davankov V.D. Mass-soectromeric analysis of N-acetylchitooligosaccharides prepared through enzymatic hydrolysis of chitosan• // Anal. Biochem. -V.227. -1995. -P.285-288.

149. Moore G.K., Roberts G.A.P. Reaction of chitosan: П. Preparation and reactivity or N-acyl derivatives of chitosan// Int: J. Biol. Macromol. V.3 . -1981.-P.292-296.

150. Malewska-Bartcsak M., Zetany T. Badania nad wykorzystanien chitosanu z kryla arttyczeniu medycznym // Pr. Inct. wtok. №31. -1981. -P.87-102. • ' v \ ^ ;

151. Miyasakl S., Ihii R., Nadai T. The use of chitin and chitosan as a drug carriers // Chem. and Pharm.Bull. V.91, №10. - 1981. - P.30677-3069,

152. Muzzarelli R.A.A., Tanfani F. N-permethylation of chitosan and the preparation of N-trimethylchitosan iodide // Garbohydr.Polym. V.5, №4. -1985. - P.297-307.

153. Muzzarelli R.A.A., Muzzarelli C., Tarsi R., Miliani M., Gabbanelli F., Cartolari M: Fungistatic activity of modified chitosans against Saprolegnia parasitica// Biomacromolecules. -V. 2. -2001. -P. 165-169

154. Muzzarelli R.A.A. Chitin. Oxford: Pergamon Press. -1977. -309 p.181; Muzzarelli R.A.A. et al. Partial depolimerization of chitosans with aid of papain. // Chitin enzymology. Edited by Muzzarelli R.A.A., Atec, Italy. -2001. -P. 63-71. .

155. Muzzarelli R.A.A. Хитозан per os / Пер. с. англ. -Н.Новгород: Вектор-ТиС, 2001. -с. 196-197.

156. Malaeh М., Charlet G., Arul J. Depolymerisation of chitosan // In-book: Chitin and chitosan in life and science. Ed.: T. Uragimi, K. Kurita, T. Fukamizo. Tokyo: Kodasha Scientific LTD. -2001. P.28-35.

157. Ottoy M.H., Varum K.M., Christensen B.E., Anthonsen M.W., Smidsrod O. Preparative and sise-exclusion chromatography of chitosans // Carbohydr. Polym. -V.31. -1996. -P.253-261.

158. Park, Pyo-Jam, Lee H., Kim S. Preparation of hetero-chitooligosaccharides and their antimicrobisl activity on Vibrio parahaemolyticus // J. Microbiol. Biotechnol. -V.14, №1. -2004. -P.41-47.

159. Pat. 4, 804, 750 USA, CI. С 07 H 1/00. Protection of water-soluble chitin-oligomers by partial hydrolysis of chitin/Nishimura Tatsumi, Eto Eiichl, Yamada Toyofumi (USA). №382-456; 13.07.90; 24.06.92.

160. Pat. 4, 950, 751 USA, CI. С 07 H 1/00. Depolymerisation and sulfation of polysaccharides /Naggi A., Torn G. (USA). -№536-128; 2.06.89; 21.08.90.

161. Pat. 2, 640, 628 France, CI. С 07 H 13/02. Preparation of 0-(l-4)-olygomers of 2-acetamido-2-deoxyglucoses and a-galactoses as drags / Defaue C., Gadelle A., Pedersen C. (France). 16.12.88; 22.01.90.

162. Pat.4, 952, 618 USA. CL A 61 15/00, С 08 L 1/00. Hydrocolloidal adgesive composition / Olsen Roger A. (USA). №189614; 3.05.88; 28.08.90

163. Pat. 4, 952, 618 USA. CI A 61 L 15/00, С 08 L 1/00. Hydrocolloidal adhesive composition / Olsen R.A. (USA). -№524117; 3.05.88; 28.08.90.

164. Pat. 6060429. Composition and method for controlling plant diseases caused by fungi, / Ben-Shalom Noach, Elad Yigal, Fallik Elazar, Pinto Rivka. 09.05.2000.

165. Pat. 6306835. Biocidal chitosan derivatives. / Daly, William H., Manuszak-Guerrini, Melissa А. Заявл. 16.09.1998, опубл. 23.10.2001.

166. Pat. 6492350. Chitin oligosaccharides and/or chitosan oligosaccharides for preventing or treating common cold or treating pain. / Konno, Allen I.,

167. Gauthier, Jay H., Matahira, Yoshiharu. Заявл. 12.01.2001. Опубл. 10.12.200 X .

168. Pat. 6391318. Vaccine compositions including chitosan for intranasal administration and use thereof. // Ilium Lisbeth, Chatfield Steven Neville. Заявл. 01.06.1998, опубл. 21.05.2002.

169. Roberts R.L., Cabib E. Serratia marcesces chitinase: one-step purification and use for the determination of chitin // Anal. Biochem. -V.12'7 -1982. -P. 402.

170. Rabbea EX, Badawy M.E.-T., Stevens C.V., Smagghe G., Steurbaut "W. Chitosan as antimicrobal agent: applications and mode of action. // Biomacromolecules. -V. 4, № 6. -2003. -P. 1457-1465

171. Reinicke В., Bluemel R., Giesbrecht P. Reduced degradabillty Ъу lysozyme of staphylococcal cell walls after chloramphenical treatment // Arch. Microbiol. V 99, №23. - 1983,- P. 184.

172. Radhika Desikan, Sohelia A.-H.-Makerness, John T.Hancock, Steven J.Neil. Regulation of the Arabidopsis Transcriptome by Oxidative Stress. Plant Physiol. -V.127.-2001.-P 159-172

173. Richards R.L., Hayre M.D., Hockmeyer W.T., Alving C.R. Liposomes, lipid A, and aluminum hydroxide enhance the immune response to a synthetic malaria sporozoite antigen // Infection Immunology. №56(3). -1988. — p. 682-686.

174. Roller S., Covill N. The antifungal properties of chitosan in laboratory media and apple juice // Int. J. Food Microbiol. -V. 47, № 1-2. -1999. -P 67-77.

175. Rhoades J., Roller S. Antimicrobal actions of degraded and native chitosan against spoilage organisms in laboratory media and foods // A.ppl Environ. Microbiol. -V.66, №1. -2000. -P. 80-86

176. Suzuki К., Mikami Т., Okawa Y. Antitumor effect of N-hexaacetylchitohexaoze and chitohexose // Carbohydr. Res. -V.15.1. 1986. -P. 403-408.

177. Sirica А.Е., Woodman R.G. Aggregation of leucomic cells In vitro by chitosan and derivatives // Fed. Proceed.- V.29, №2. 1970. - P. 396-411.

178. Sawayanagi Y., Nambu N. Use of chitosan for substained-release preporations of water-soluble drugs // Chem. and Pharm. Bull.- V.30, №11.1982.- P.4213-4216.

179. Terbojevich M., Cosani A. Molecular weight determination of chitin and chitosan // In book: Chitin handbook. Ed.: R.A.A. Muzarelli, M.G. Peter Italy: Atec, Grottamare. -1997. -P.87-101.

180. Schatz C., Viton C., Delair Т., Pichot C., Domard A. Typical physicochemical behaviors of chitosan in aqueous solution // Biomacromol. -V.4. -2003. -P.641-648.

181. Sorlier P., Denuziere A., Viton C., Domard A. Relation between the degree of acetylation and the electrostatic properties of chitin and chitosan // Biomacromolecules. -V.2, №3. -2001. -P.765-772.

182. Sorlier P., Viton C., Domard A. Relation between properties and degree of acetylation of chitosan: role of aging // Biomacromolecules. -V.3 -2002. -P.1336-1342.

183. Savard Т., Beaulieu C., Boucher I., Champagne C.P. Antimicrobal action of hydrolyzed chitosan against spoilage yeasts and lactic acid bacteria of fermented vegetables // J. FoodProt. -V. 65, № 5. -2002. -P. 828-833

184. Sasaki C., Kristiansen A., Fukamizo Т., Varum K.M. Biospecific fractionation of chitosan//Biomacromolecules. -V.4. -2003. -P.1686-1690.

185. Tian C., Jun Y., Rongnan X., Yan X. Water-solubility of partly N-acetylated chltosans // Chin. J. Appl. Chem. V.6, №3. - 1989. - P.90-92.

186. Tan-Tian R., Ynoue K., Mashida Y., Sannad Т., Nagai T. Chitin and chitosan derivatives for directly compressed tablets-of water-soluble drug // J. Pharm. Sci. and Technol. V.48, №4. - 1988. - P.318-321.

187. Tsai G.-J., Hwang S.-P. In vitro and in vivo antibacterial activity if shrimp chitosan against some intestinal bacteris // Fisheries Sci. -V. 70. -2004. -P. 675-681

188. Tsai G.-J.,Su W.-H., Chen H.-C., Pan C.-L. Antimicrobal activity of shrimp chitin and chitosan from differenttreatments of fish preservation // Fisheries Science. -V. 68, № i. -2002. -P. 170-177.

189. Tsai G.J., Zhang S.L.,Shieh P.L. Antimicrobal activity of a low-molecular-weight chitosan obtained from cellulase digestion of chitosan // J. Food Prot. -V. 67, №2,- 2004. -P. 396-398.

190. Todorovic Z., Grigolon L.B., Domard A., Franco T.T. Molecular weight reduction of chitosan monitored by GPC and viscometry // In book: Advances in chitin science. Ed.: I. Boucher, K. Jamieson, A. Retnakaran. Canada:

191. Monreal, 9<*ICCC. V.7. -2003. -P.80-83.

192. Tizard I.R. Veterinsry immunology. An Introducion. Six edition. -2000.-482 p.

193. Ura W.H., Doszi J.,Keknan P.B. Antacid and antiulker properties of the polysaccharide chitosan in the rat // Proc. Soc.Exptl. Biol. Med. V.115, №4. -1964.-P.1108-1112.

194. Wang W., Bo S., Li S., Qin W. Determination of the Mark-Houwink equation for chitosans with different degree of deacetylation // Int. J. Biol. Macromol.-V. 13, Ж5. 1991. -P.281-285.

195. Yamada H. , Imoto T. A convinient synthesis of glicolchitin, a substrate of lysozime // Carbohydr. Res. V.92, №1. - 1981. -P.160-163.

196. Young M.E., Bell R.L., Carroad P. A. Kinetics of Chitinase production. 1. Chitin hydrolysis //Biotechnol. andBioeng. -V.15, №2. -1985. P. 141-145.

197. You H.J., Park K.H., Kim Y.H., Kim Y.J., Choi J.H., Lee S.H. Separation and purification of low molecular weight chitosan using multi-step membrane separation process. US Patent 5.730.876., 2002.

198. Yang F., Cui X., Yang X. Interaction of low-molecular-weight chitosan with mimic membrane studied by electrochemical methods and surface plasmon resonance //Biophys. Chem. -V. 99, № 1. -2002. -P. 99-106.

199. Zhang M., Tan Т., Yuan H., Rui C. Insecticidal and fungicidal activities of chitosan and oligo-chitosan // J. Bioact. Compat. Polym. -V. 18. -2003. -P. 391-400

200. Engvall E., Perlmann P. Enzyme-linked immunosorbent assay. Quantitation of specific antibodyes by enzyme-labelled antiimmunoglobulin in antigen-coated tubes // J. Immunol. V. 109. - 1972. - P. 129-135.

201. Варламов В.П., Банникова Г.Е., Андрианова И .Е., Глушков В.А и др.

202. Hirano S., Seino Н., Akiyama Y., Nonaka I. Chitosan a biocompatible material for oral and intravenous administration // Progress in biomedical polymers. -New York, 1990. P. 283-290