Разработка систем направленной терапии эстрогензависимых опухолей на основе фрагментов альфа-фетопротеина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Моллаев Мурад Довлетович

• Моллаев Мурад Довлетович
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Моллаев Мурад Довлетович

Список сокращений

Введение

Литературный обзор

1.1. Некоторые опухолевые заболевания органов женской репродуктивной системы

1.2. Антрациклиновые антибиотики

1.3. Опухолеассоциированные антигены

1.4. Рецептор-опосредованный эндоцитоз

1.5. Альфа-фетопротеин человека и его рецепторы

1.6. Современные разработки в области систем доставки доксорубицина

Результаты и обсуждение

2.1. Получение рекомбинантных фрагментов АФП

2.2. Исследование функциональной активности полученных фрагментов АФП

2.3. Синтез конъюгатов домена III АФП с анионной меткой и доксорубицином

2.4. Исследование функциональной активности конъюгатов

Экспериментальная часть

3.1 Реактивы и оборудование

3.2. Получение рекомбинантых белков

3.3. Концентрирование и анализ белковых образцов

3.4. Культивирование эукариотических клеток

3.5. Проточный цитофлуориметрический анализ

3.6. Синтез ^цис-аконитил доксорубицина

3.7. Синтез конъюгатов рекомбинантных фрагментов АФП с доксорубицином с использованием цис-аконитового ангидрида

3.8. Синтез конъюгатов рекомбинантных фрагментов АФП с доксорубицином с использованием БРБР и РБРИ

3.9. Исследования стабильности и функциональной активности конъюгатов

Заключение

Выводы

Публикации автора по теме диссертации

Список литературных источников

Приложение А

Список сокращений

4T1 - линия клеток карциномы молочной железы мыши ABC - аденозинтрифосфат-связывающие кассеты AcN - ацетонитрил

AFPpep(N) - пептид PWGVALQTMKQEFLINLVKQKPQITD (количество тандемных повторов последовательности, разделенных PLDD)

BCA - бицинхониновая кислота

CAA - цис-аконитовый ангидрид

CAA-DOX-CAA цис-аконитил доксорубицин (смесь изомеров) DNR - даунорубицин DOX - доксорубицин

EDC - 1-этил-3-(3-диметиламинопропил) карбодиимид

EEA- антиген ранних эндосом

EPI - эпирубицин

FITC - флуоресцина изотиоционат

GSH - глутатион восстановленная форма

GSSG - глутатион окисленная форма

His-tag - гексагистидиновая метка (HHHHHH)

HSA - сывороточный альбумин человека

IDA - идарубицин

LB - питательная среда Luria Bertani

MALDI - матрично-активированная лазерная десорбция/ионизация MCF-7 - линия клеток аденокарциномы молочной железы человека

MCF-7Adr - резистентная к антрациклинам линия клеток аденокарциномы молочной железы человека

MFI - средняя интенсивность флуоресценции MMP - матричные металлопротеазы MW - маркеры молекулярных масс NHS - N-гидроксисукцинимид

PaP3 - возможный пластид-липид-ассоциированный белок 3 PDPH - 3-(2-пиридилтио)пропионил гидразид SOB - супероптимальная питетельная среда

SOC - супероптимальная питетельная среда, подавляющая катаболиты

pGlu(N) - последовательность аминокислот EEEEVE (количество тандемных повторов последовательности)

PPG - пропаргил

PurF - аминофосфорибозилтрансфераза

Q - четвертичный аммоний (в контексте хроматографических сорбентов) или квадруполь (в контексте масс-спектрометрии)

rbdAFP - рецептор-связывающий (С-концевой, III) домен альфа-фетопротеина человека RT-PCR - полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией SK-OV-3 - линия клеток аденокарциномы яичника человека SP - сульфопропил

SPDP - №сукцинимидил-З-(2-пиридилтио)пропионат

SUMO - маленький убиквитин-подобный модификатор

TAF12 - фактор инициации транскрипции TFIID субъединица

TOF - времяпролетный детектор

АДФ - аденозиндифосфат

а.к. - аминокислота

АТФ - аденозинтрифосфат

АФП (AFP) - альфа-фетопротеин человека

АФПР - рецепторы альфа-фетопротеина

БСА - бычий сывороточный альбумин

ВИЧ - вирус иммунодефицита человека

ВОЗ - Всемирная Организация Здравоохранения

ГЭБ - гематоэнцефалический барьер

ДСН (SDS) - додецилсульфат натрия

ЖКТ - желудочно-кишечный тракт

ИПТГ - изопропил-b-тио-D-галактопиранозид

КД - круговой дихроизм

КЖ - культуральная жидкость

ЛС - лекарственное средство

МС/МС (MS/MS) - тандемная масс-спектрометрия

НАДФН - никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный

ОАА - опухолеассоциированный антиген ОП - оптическая плотность

ОФ ВЭЖХ - обращено-фазовая высокоэффективная жидкостная хроматография

ПААГ - полиакриламидный гель

ПФ - подвижная фаза

ПЦР - полимеразная цепная реакция

ПЭГ - полиэтиленгликоль

РЯ - рак яичников

ТМБ - 3,3',5,5'-тетраметилбензидин

ТФУ - трифторуксусная кислота

УФ - ультрафиолет

ФСБ - фосфтно-солевой буфер

ХГВ - хроматография гидрофобных взаимодействий ЭДТА - этилендиаминтетраацетат

Введение

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка систем направленной терапии эстрогензависимых опухолей на основе фрагментов альфа-фетопротеина»

Актуальность проблемы

Опухолевые заболевания остаются одной из наиболее значимых проблем современной медицины. По данным ВОЗ только в 2020 году от онкозаболеваний в мире погибло около 10 млн. человек [1]. Многие годы основными методами лечения онкобольных остаются: хирургическое удаление опухоли, химиотерапия, радионуклидная и фотодинамическая терапия. К сожалению, недостаточная специфичность действия препаратов и развивающиеся тяжелые побочные эффекты, зачастую, сильно ограничивают эффективность лечения, а также становятся причиной осложнений.

На сегодняшний день низкомолекулярные цитотоксические лекарственные средства (ЛС) нередко используются в комбинации с препаратами на основе биомолекул, как правило, пептидной природы. На фармацевтическом рынке появляются новые противоопухолевые препараты на основе рекомбинантных моноклональных антител, способных селективно связывать молекулярные мишени на поверхности опухолевых клеток или в их микроокружении. Опсонизация терапевтическими антителами способствует привлечению эффекторных клеток, модулирует активность иммунной системы или ингибирует связывание факторов роста и их рецепторов. Разрабатываются системы доставки низкомолекулярных цито- и фототоксических лекарственных средств, включающие в себя: терапевтический агент, матрицу или линкер, а также векторный мотив, например, антитело, обеспечивающий селективное накопление препарата в опухолевых клетках или микроокружении. Такой подход зачастую позволяет снизить токсические эффекты по отношению к нормальным тканям организма, не обладающим экспрессией целевого опухолеассоциированного антигена, и повысить терапевтический эффект за счет увеличения локальной концентрации ЛС в опухолевых клетках и тканях. Другим преимуществом систем направленной доставки ЛС является возможность частичного преодоления лекарственной устойчивости за счет активного механизма интернализации и отсутствия АВС-зависимого эффлюкса.

В последние несколько десятилетий, альфа-фетопротеин (АФП), известный как сывороточный маркер гепатоцеллюлярной карциномы, карцином желудка и кишечника, а также его С-концевой домен, активно рассматриваются как потенциальные векторные молекулы для доставки ЛС в опухолевые клетки, поскольку экспрессия как самого АФП, так и его канонического рецептора (АФПР) значительно увеличивается при опухолевых заболеваниях [2-4]. Полученный ранее рекомбинантный С-концевой домен АФП показывал высокую специфичность интернализации различными линиями опухолевых клеток человека, в частности клетками рака молочной железы и яичника. Однако, ввиду ограниченной

растворимости, белок был склонен к преципитации при синтезе конъюгатов с липофильными цитотоксическими веществами [5]. Повышение растворимости, а также фолдинг рекомбинантных белков в цитоплазме Escherichia coli, часто достигаются путем экспрессии в составе гибридных белков. Помимо целевого полипептида, такие белки содержат дополнительный домен (фьюжн-партнер), способствующий растворимости или формированию вторичных структур. Как правило, фьюжн-партнеры имеют большую молекулярную массу и, следовательно, часто негативно влияют на активность коэкспрессируемого целевого белка и подлежат последующему гидролизу специфичными протеазами [6-8]. Поиск коротких генетически кодируемых пептидных последовательностей, способствующих фолдингу белков в E. coli, может привести к снижению негативного эффекта на активность целевого белка и является актуальной задачей исследования.

В качестве альтернативного опухолеспецифичного вектора может быть использован 26-ти аминокислотный пептид рецептор-связывающего фрагмента АФП, не имеющий в своем составе цистеинов, образующих дисульфидные связи. Таким образом, можно избежать сложностей рефолдинга и поддержания стабильности вторичной структуры. К сожалению, твердофазный синтез больших пептидов характеризуется невысоким выходом и, следовательно, является дорогостоящим. Рекомбинантная экспрессия, с другой стороны, затруднена высокой протеолитической активностью по отношению к небольшим белкам и пептидам, экспрессируемым в растворимом виде в цитоплазму. Как правило, стабильной экспрессии пептидов можно добиться путем использования фьюжн-партнеров, однако, также известны методы мультимерной экспрессии повторяющихся пептидных последовательностей, разделяемых сайтами протеолитического или химического гидролиза. В таких случаях на 1 моль гибридного белка приходится несколько молей конечного продукта, а масса удаляемых в процессе гидролиза пептидных фрагментов, если таковые присутствуют, значительно меньше массы фьюжн-партнеров. Использование сайтов протеолитического гидролиза ограничивается низкой стабильностью и высокой стоимостью специфических ферментов, а также их чувствительностью к условиям реакции. Таким образом, невозможно проводить гидролиз в денатурирующих условиях или в присутствии детергентов, в то время как мультимерные пептиды склонны к агрегации. Химический гидролиз лишен этих недостатков, однако, как правило, значительно менее специфичен и приводит к образованию большого количества родственных примесей, в том числе окисленных и ацилированных производных, вследствие влияния агрессивных условий среды. Подбор условий мягкого селективного химического гидролиза пептидов, допускающего использование хаотропных веществ и детергентов, является актуальной задачей исследования.

При создании систем направленной доставки ЛС с использованием векторных молекул, эндоцитируемых опосредованно через АФПР, важно, чтобы действующее вещество могло высвобождаться из конъюгатов в эндосомальных компартментах, поскольку известно, что значительная часть комплекса АФП-АФПР рециклирует обратно на мембрану, аналогично комплексу сывороточного альбумина и его рецептора [9]. Также, крупные векторные молекулы зачастую сильно снижают активность действующих веществ, в первую очередь за счет экранирования части молекулы и стерических затруднений при связывании с терапевтической мишенью. Использование линкерных последовательностей, способных быстро подвергаться гидролизу в эндосомах, при этом сохраняющих высокую стабильность в сыворотке крови, является перспективным решением вышеописанных проблем, а сравнение in vitro эффективности таких систем - перспективной задачей исследования.

Степень разработанности научной тематики. В предшествующих данной работе исследованиях было показано, что АФП человека имеет специфический рецептор, гиперэкспрессированный на поверхности некоторых опухолевых клеточных линий, преимущественно эстрогензависимых. Перспективность использования АФП и его функциональных фрагментов в качестве векторных молекул описана в нескольких российских и зарубежных исследованиях на примерах полноразмерного АФП и его рекомбинантного домена III с гексагистидиновой меткой [4, 5]. Недостатками описанных в литературе систем доставки являются низкая растворимость конъюгатов с липофильными веществами, отсутствие или неконтролируемое высвобождение активного компонента, а также сложности получения векторной молекулы. Известно множество пептидных последовательностей, способствующих повышению растворимости и изменению локализации экспрессии рекомбинантных белков в E. coli. Возможность использования EEEEVE повторов для данной цели ранее не была описана. Путь эндоцитоза АФП был определен как клатрин-зависимый на основании данных микроскопических исследований. Анализ эндоцитоза АФП и его домена III с использованием современных ингибиторов различных путей эндоцитоза ранее не проводился. Известно, что АФП может взаимодействовать с хемокиновым рецептором CXCR4, однако, не было показано, может ли такое взаимодействие интерферировать с SDF1a/CXCR4 зависимым хемотаксисом.

Цель исследования. Разработка систем направленной доставки лекарственных средств в опухолевые клетки на основе рекомбинантных фрагментов альфа-фетопротеина человека и кислотолабильных линкеров.

Задачи исследования

1) Разработка генно-инженерных конструкций, штаммов-продуцентов фрагментов альфа-фетопротеина человека. Разработка схемы и оптимизация условий проведения биопроцесса, рефолдинга и очистки рекомбинантных продуктов.

2) Анализ экспрессии, структуры и специфической активности полученных белков.

3) Синтез и анализ конъюгатов домена III АФП (с 4 дополнительными EEEEVE метками на С-конце) с доксорубицином, полученных с использованием кислотолабильных линкеров.

4) Исследование специфической активности полученных систем направленной доставки лекарственных средств на моделях in vitro.

Научная новизна.

• Впервые получены рекомбинантные фрагменты АФП человека: домен III АФП без аффинных меток; производное домена III АФП с анионной (pGlu4) меткой и 26-ти аминокислотный пептид рецептор-связывающей последовательности. Описано влияние EEEEVE меток на in vivo фолдинг рекомбинантного белка в E. coli и показано, что введение 4 повторов EEEEVE метки приводит к смещению локализации экспрессии рекомбинантного домена III АФП в сторону цитоплазматической фракции, а также способствует правильному формированию вторичной структуры белка. Обнаружены наиболее доступные для модификаций аминогруппы домена III АФП, а именно, аминогруппы Glyl, Lys21, Lys63.

• Получены конъюгаты домена III АФП с анионной (pGlu4) меткой и доксорубицином. Проведено сравнение влияния линкеров различной химической природы на скорость высвобождения цитотоксического агента в культуре клеток. Впервые показано, что линкер на основе пиридилдитиопропионатов, содержащий дисульфидную связь, способствует повышению скорости гидролиза конъюгата как внутриклеточно, так и в присутствии лизосомального экстракта по сравнению с классическим цис-аконитовым линкером, посредством которого формируется кислотолабильная сложноэфирная связь. Увеличение скорости гидролиза конъюгата способствует накоплению доксорубицина в ядре клеток, где он проявляет свою специфическую активность, что позволяет увеличить эффективность действия такой системы доставки.

• Показано повышение цитотоксической активности доксорубицина в составе

конъюгата в отношении резистентной к доксорубицину клеточной линии, по сравнению со

свободным препаратом, что указывает на частичное преодоление лекарственной

устойчивости. Обнаружена побочная реакция формилирования N-концевого пролина при

гидролизе DjP муравьиной кислотой. Показано ингибирование SDF1a/CXCR4

9

опосредованного хемотаксиса нативным АФП и его рекомбинантным фрагментом в высоких концентрациях.

Теоретическая и практическая значимость. Получены генно-инженерные конструкции и штаммы-продуценты домена III АФП, соответствующего фрагменту 376-609 а.к. полноразмерного белка (NP_001125.1), а также содержащего от 1 до 4 анионных EEEEVE меток. Подобраны условия очистки домена III АФП без меток и содержащего 4 метки EEEEVE на С-конце. Сконструированы плазмидные векторы, кодирующие рекомбинантные мультимеры 26-ти аминокислотного фрагмента рецептор-связывающей последовательности АФП, содержащих от 1 до 14 мономерных фрагментов. Обнаружена экспрессия мультимеров, содержащих от 2 до 5 мономерных фрагментов. Оптимизированы условия получения мультимера (5 мономерных фрагментов), а также последующего гидролиза до мономера PWGVALQTMKQEFLINLVKQPQITD. Все исследуемые фрагменты АФП были охарактеризованы и обладали способностью к специфичному связыванию и эндоцитозу АФПР+ опухолевыми клетками, соответственно, они могут найти применение в качестве опухолеспецифичных векторных молекул в системах доставки ЛС. Разработан метод синтеза и показана in vitro эффективность конъюгата домена III АФП (с 4 EEEEVE метками на С-конце) и доксорубицина, с использованием пиридилдитиопропионатов. Конъюгат является перспективным для дальнейшего применения в качестве терапевтического агента для лечения опухолевых заболеваний, характеризующихся экспрессией АФПР. Ингибирование SDF1a/CXCR4 опосредованного хемотаксиса нативным АФП и его рекомбинантным фрагментом указывает на ингибирование CXCR4-опосредованных прометастатических сигналов, что является дополнительным преимуществом разработанной системы доставки.

Методология и методы исследования. Для решения поставленных задач в работе был применён комплекс современных физико-химических и биологических методов исследования, в том числе хроматография, проточная цитофлуориметрия, биоорганический синтез, электрофорез, флуоресцентная микроскопия, пролиферативный тест, тест клеточной миграции, методы генной инженерии, круговой дихроизм, масс-спектрометрия.

Основные положения, выносимые на защиту

1) Получены и охарактеризованы рекомбинантные фрагменты АФП человека, обладающие тропностью к опухолевым клеткам линий MCF7 и SK-OV-3.

2) Введение EEEEVE меток на С-конец рекомбинантного домена III АФП может менять локализацию экспрессии у E. coli с телец включения на цитоплазматическую.

3) Эндоцитоз рекомбинантного домена III АФП носит комплексный характер, при этом значительная часть белка транспортируется по клатрин-зависимому пути.

4) Нативный АФП и его рекомбинантный домен III ингибируют SDF1a/CXCR4 зависимый хемотаксис.

5) Синтезированы новые конъюгаты домена III АФП с доксорубицином. Проведено сравнение линкеров, показаны преимущества направленной системы in vitro на эстрогензависимых клеточных моделях.

Апробация работы. Основные результаты работы были представлены на Международном конгрессе "Биотехнология: состояние и перспективы развития" (Россия, Москва, 2021), VIII Международной научно-практической конференции молодых ученых: биофизиков, биотехнологов, молекулярных биологов и вирусологов (Россия, Новосибирск, 2021), IV Международной научно-практической конференции Scientific Research In XXI Century (Оттава, Канада, 2020), 43rd FEBS Congress (Чешская Республика, Прага, 2018), Х Международной конференции молодых ученых по химии "Менделеев 2017" (Россия, Санкт-Петербург, 2017), 21-й Международной Пущинской Школе-конференции Молодых Учёных "Биология - наука 21 века" (Россия, Пущино, 2016), XXIII Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых "Ломоносов 2016" (Россия, Москва, 2016).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 11 печатных работ, в том числе 4 статьи в реферируемых научных журналах, 7 тезисов докладов на российских и международных конференциях.

Личный вклад автора. Автором проведен анализ литературы, разработаны методы получения рекомбинантных белков, проанализирована их структура и свойства, синтезированы и исследованы конъюгаты с противоопухолевым препаратом на их основе. Автором выполнена интерпретация и описание всех полученных результатов, сформулированы цель, задачи и выводы диссертационной работы, подготовлены материалы публикаций в научных журналах и тезисы конференций.

Структура и объем диссертации. Работа изложена на 142 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, изложения результатов и их обсуждения, описания методов исследования, заключения, выводов, списка литературы, который включает 248 источников, и приложения. Основной текст диссертации содержит 39 рисунков и 13 таблиц. Приложение содержит 12 рисунков и 1 таблицу.

Литературный обзор

1.1. Некоторые опухолевые заболевания органов женской репродуктивной системы

Злокачественные новообразования являются большой группой заболеваний, наблюдаемых во всех частях человеческого организма, и характеризуются быстрым ростом клеток аномального фенотипа. Такие клетки обладают аномальной способностью к делению и инвазии других органов и тканей в процессе метастазирования. Именно метастазирование является основной причиной смерти от опухолевых заболеваний и главным ограничением эффективности хирургических методов лечения. На сегодняшний день, рак является второй по распространенности причиной смерти в мире. Ориентировочно, каждая шестая смерть является следствием развития опухоли [10]. По предварительным данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), только в 2020 году в России диагностировано более 300 тысяч новых случаев опухоли у женщин, значительная часть которых представлена раком органов репродуктивной системы (рис. 1).

Рис. 1. Ориентировочное количество новых случаев опухолевых заболеваний различных локализаций в 2020 году, Российская Федерация, женщины, все возрастные группы. Данные ВОЗ [1].

Многие годы рак молочной железы (РМЖ) остается одним из наиболее диагностируемых опухолевых заболеваний в России и в мире [1,11]. Повышенные риски развития РМЖ обычно коррелируют с возрастом, личным и семейным анамнезом заболеваний груди, репродуктивными факторами, генетической предрасположенностью и факторами окружающей среды [12]. Существует множество различных типов РМЖ, среди которых

12

карциномы наиболее распространены, а саркомы, ангиосаркомы и другие встречаются реже. Существует гипотеза, что формирование клеточной гетерогенности в поражениях молочной железы берет начало в программе развития нормального органа, и что гетерогенность карциномы молочной железы может возникать в результате неопластической трансформации эпителиальных, миоэпителиальных или даже стволовых клеток, которые обладают способностью дифференцироваться в эпителиальные или миоэпителиальные клетки [13,14]. Около 5-10% случаев РМЖ имеет наследственную природу, характеризующуюся мутациями BRCA1, BRCA2, реже ATM, TP53, CHEK2, PTEN, CDH1, STK11, PALB2 [15-17]. Многие из этих мутаций также связаны с повышенным риском развития других опухолевых заболеваний, включая злокачественные новообразования в яичниках и матке [16]. На основе паттернов экспрессии выделяют 4 типа РМЖ: люминальный, характеризующийся экспрессией генов люминальных клеток, включая рецептор эстрогена (ER) и цитокератины (CK) 8/18, при этом HER-2/neu (ERBB2) отрицательный; ERBB2 тип, характеризующийся высокой экспрессией генов ERBB2 и GRB7 в ампликоне 17q22.24, при этом низкими уровнями ER; опухоли нормального подтипа РМЖ экспрессируют гены не свойственные базальным эпителиальным и жировым клеткам и практически не экспрессируют гены люминального типа; опухоли базально-подобного типа характеризуются высокой экспрессией CK 5/6 и 17, ламинина и связывающего жирные кислоты белка 7, при этом отрицательные по ER и большинству ко-экспрессируемых с ним продуктов генов [13]. В экспериментах на мышиной модели показано, что туморогенными свойствами обладает субпопуляция клеток с характерным фенотипом ESA+CD44+CD24-/lowLin-. Всего 100 таких клеток могут сформировать опухоль, в то время как десятки тысяч клеток альтернативных фенотипов не могут. При этом в сформированной опухоли наблюдаются клетки как ESA+CD44+CD24-/lowLin-, так и других фенотипов [18]. Таким образом, предполагается, что все 4 разных подтипа РМЖ формируются из одних и тех же клеток предшественников. В других работах рассматривается альтернативная гипотеза, при которой разные фенотипы РМЖ имеют разных предшественников, однако, данное предположение менее обосновано и встречает аргументированную критику [13]. Важную роль в ингибировании апоптоза клеток РМЖ играет высокая экспрессия транскрипционного фактора NF-kB/Rel. Прямое ингибирование NF-kB/Rel микроинъекцией IkB-a-GST фьюжна in vitro приводит к апоптозу [19].

Современные подходы к терапии РМЖ часто включают неоадъювантную и адъювантную химиотерапию антрациклинами и препаратами таксанового ряда [12]. Неоадъювантная химиотерапия применяется для первичного уменьшения размера крупной опухоли перед операцией, что иногда позволяет сохранить орган. У женщин, получающих

неоадъювантную терапию, реже наблюдаются метастазирования в локальные лимфоузлы после хирургии [20]. Адъювантная химиотерапия проводится для удаления остаточных локальных и метастатических новообразований с целью снижения вероятности рецидива. Текущие рекомендации по адъювантной гормональной и химиотерапии после хирургического лечения инвазивного рака молочной железы различаются в зависимости от фенотипа по гормональным рецепторам и HER-2/neu [20,21].

Поскольку молочная железа не является жизнеобеспечивающим органом, она может быть полностью или частично удалена хирургически. Таким образом, пациенты имеют сравнительно высокую выживаемость, однако, операционное вмешательство может приводить к различным осложнениям в сердечно-сосудистой, опорно-двигательной и других системах. Не исключается риск возникновения психоэмоциональных осложнений в результате снижения качества жизни, а также рецидива и метастазирования [16,22].

Рак яичников (РЯ), напротив, является наиболее летальной среди гинекологических опухолей, при этом встречается значительно реже, чем РМЖ. Большинство карцином яичника берет начало не в яичниках, а с трансформации клеток фаллопиевых труб или с эндометрия, проходящего через них. РЯ представляет из себя гетерогенное заболевание, состоящее из опухолей разных типов с различными клиническими особенностями [23]. Гетерогенный характер значительно усложняет типирование болезни. В литературе описывается 2 большие группы (I и II), различающиеся агрессивностью и молекулярно-генетически [23]. Менее агрессивная I группа более генетически стабильна и характеризуется специфическими мутациями для гистологически различных типов клеток. В низко злокачественных серозных карциномах I группы мутации KRAS, BRAF, ЕЯВВ2 встречаются приблизительно в 2 из 3 случаев. Эндометриоидные карциномы низкой степени злокачественности имеют аберрации в сигнальном пути Wnt, включая соматические мутации СТККВ1, РТЕК и Р1К3СА. Больше половины муцинозных карцином характеризуются мутацией KRAS. Светлоклеточная карцинома уникальна высоким процентом активирующих мутаций Р1К3СА. Серозная карцинома высокой степени злокачественности, являющаяся прототипом РЯ II группы, характеризуется очень частыми мутациями ТР53 (> 80% случаев) и амплификацией ССКЕ1, при этом мутации, характерные для большинства опухолей I группы встречаются редко [2325]. Именно серозная карцинома II группы высокой степени злокачественности является наиболее диагностируемой и редко обнаруживается на ранних этапах заболевания.

Широко распространенным методом лечения РЯ является химиотерапия производными платины в сочетании с таксанами. Однако, в мультицентровом исследовании было показано преимущество первичной циторедуктивной хирургии перед неоадьювантной

химиотерапией на III стадии заболевания [26]. Первичная циторедуктивная хирургия обеспечивает более высокую выживаемость у отдельных пациентов. С другой стороны, неоадъювантная химиотерапия ассоциируется с меньшими операционными и послеоперационными осложнениями, а также с отсутствием необходимости в длительных госпитализациях. Случаи прогрессии заболевания в интервалах между приемом производных платины с таксанами ассоциируются с плохим прогнозом. В таких ситуациях рассматриваются альтернативные режимы химиотерапии, в том числе с препаратами антрациклинового ряда, а также участие пациентов в клинических исследованиях или полную остановку активного лечения [27].

Разработка новых препаратов и подходов к лечению РМЖ и РЯ постепенно приводит к увеличению качества и продолжительности жизни пациентов. На сегодняшний день, эффективность терапии все еще сравнительно невысокая, что сохраняет актуальность продолжения научных исследований в этом направлении.

1.2. Антрациклиновые антибиотики

Антрациклиновые антибиотики являются одним из наиболее изученных классов природных продуктов микробиологического происхождения. Первые представители веществ антрациклинового ряда (доксорубицин и даунорубицин) были выделены из Streptomyces peucetius в 60-ых годах XX века [28-31]. Данные соединения являются гликозидными ароматическими поликетидами (рис. 2) и обладают цитотоксической активностью.

Рис. 2. Основные представители препаратов антрациклинового ряда. DOX - доксорубицин, DNR - даунорубицин, EPI - эпирубицин, IDA - идарубицин [32].

I

I

Все эти соединения имеют характеристический хромофор - 7,8,9,10-тетрагидро-5,12-нафтаценофенон и один или более дезокси-углеводный остаток, соединенный с C7 O-гликозидной связью. Гены, ответственные за биосинтез как антрациклиновых агликонов, так и дезокси-углеводных фрагментов, были обнаружены в кластерах на смежных фрагментах ДНК, что значительно облегчило их молекулярно-генетические исследования. Биосинтез поликетидного фрагмента берет начало в последовательных реакциях конденсации Клайзена между ацил-тиоэфирами, катализируемых minPKS. Далее под действием кеторедуктазной активности происходит восстановление некоторых карбонильных групп до гидроксидов с последующим формированием циклов, катализируемых различными циклазами и ароматазами. Финальным этапом формирования первых стабильных метаболитов (акланоновой и ногалоновой кислот) является ферментативное окисление гидрокси-группы до карбонила C12 [33,34]. Дальнейший биосинтез аклавинона из акланоновой кислоты включает метилирование и формирование цикла А с последующим восстановлением карбонильной группы при С7. Даунорубицин биосинтезируется из аклавинона путем нескольких реакций окисления, присоединения углеводного остатка к С7 с образованием O-гликозидной связи, метилирования гидроксида при С4, гидролиза метилового эфира при С10 [33]. Путем случайного мутагенеза продуцирующих DNR S.peucetius с использованием К-нитрозо-N-метил уретана был получен продуцент нового соединения, получившего название адриамицин, в дальнейшем ставшего известным как DOX [31]. Новое вещество обладало улучшенными по сравнению с DNR фармакологическими свойствами [35] и уже в 1974 году было зарегистрировано в качестве противоопухолевого ЛС, которое активно используется и в современной клинической практике. Несмотря на то, что уже к 2004 году было синтезировано более 2000 структурных вариантов антрациклинов, клиническую значимость получили только несколько из них, а именно DNR, DOX, EPI, IDA и валрубицин [36]. Эпирубицин, являющийся изомером доксорубицина был получен синтетически из адриамицинона [37]. Позднее, той же группой был синтезирован 4-деметоксидаунорубицин, получивший в дальнейшем название идарубицин [38]. Валрубицин (N-трифлуороацетиладриамицин-М-валериат) был синтезирован из даунорубицина другой группой исследователей [39].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Моллаев Мурад Довлетович, 2023 год

Список литературных источников

1. Статистика заболеваемости и смертности Global Cancer Observatory [Электронный ресурс] / Официальный сайт Global Cancer Observatory. International Agency for Cancer Research. WHO. - 2021. - Режим доступа: https://gco.iarc.fr.

2. Moro R. The alpha-fetoprotein receptor (RECAF): Characterization and potential uses for cancer diagnosis and therapy / R. Moro // Alpha-Fetoprotein: Functions and Clinical Applications. - 2016. - V. 14. - P. 241-275.

3. Tcherkassova J. Binding characterization of the targeting drug AIMPILA to AFP receptors in human tumor xenografts / J. Tcherkassova, S. Tsurkan, G. Smirnova, J. Borisova, R. Moro, H. Treshalina // Tumor Biology - 2017. - V. 39. - № 10. - P. 1-11.

4. Posypanova G.A. Recombinant alpha-fetoprotein C-terminal fragment: The new recombinant vector for targeted delivery / G.A. Posypanova, N.V. Gorokhovets, V.A. Makarov, L.V. Savvateeva, N.N. Kireeva, S.E. Severin, E.S. Severin // J. Drug Target. -2008. - V. 16. - № 4. - P. 321-328.

5. Yabbarov N.G. A new system for targeted delivery of doxorubicin into tumor cells / N.G. Yabbarov, G.A. Posypanova, E.A. Vorontsov, S.I. Obydenny, E.S. Severin // J. Control. Release. - 2013. - V. 168. - № 2. - P. 135-141.

6. Zorko M. Production of recombinant antimicrobial peptides in bacteria. / M. Zorko, R. Jerala // Methods Mol. Biol. - 2010. - V. - 618. - P. 61-76.

7. Marblestone J.G. Comparison of SUMO fusion technology with traditional gene fusion systems: Enhanced expression and solubility with SUMO / J.G. Marblestone // Protein Sci. - 2006. - V. 15. - № 1. - P. 182-189.

8. Hwang P.M. Targeted expression, purification, and cleavage of fusion proteins from inclusion bodies in Escherichia coli / P.M. Hwang, J.S. Pan, B.D. Sykes // FEBS Letters. -2014. - V. 588. - № 2. - P. 247-252.

9. Mizejewski G.J. Alpha-fetoprotein Structure and Function: Relevance to Isoforms, Epitopes, and Conformational Variants / G.J. Mizejewski // Exp. Biol. Med. - 2001. - V. 226. - № 5. - P. 377-408.

10. Опухолевые заболевания ВОЗ [Электронный ресурс]. / Официальный сайт ВОЗ. -2022. - Режим доступа: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/cancer.

11. Siegel R.L. Cancer statistics / R.L. Siegel, K.D. Miller, A. Jemal // CA. Cancer J. Clin. -2018. - V. 68. - № 1. - P. 7-30.

12. Shah R. Pathogenesis, prevention, diagnosis and treatment of breast cancer / R. Shah, K. Rosso, D. Nathanson // World Journal of Clinical Oncology. - 2014. - V. 5. - № 3. - P. 283298.

13. Bosch A. Triple-negative breast cancer: Molecular features, pathogenesis, treatment and current lines of research / A. Bosch, P. Eroles, R. Zaragoza, J.R. Vina, A. Lluch // Cancer Treatment Reviews. - 2010. - V. 36. - № 3. - P. 206-215.

14. Gusterson B.A. Distribution of Myoepithelial Cells and Basement Membrane Proteins in the Normal Breast and in Benign and Malignant Breast Diseases / B.A. Gusterson, M.J. Warburton, D. Mitchell, M. Ellison, A.M. Neville, P S. Rudland // Cancer Res. - 1982. - V. 42. - № 11. - P. 4763-4770.

15. Collins L.G. The influence of family history on breast cancer risk in women with biopsy-confirmed benign breast disease: Results from the nurses' health study / L.G. Collins, H.J. Baer, R.M. Tamimi, J.L. Connolly, G.A. Colditz, S.J. Schnitt // Cancer. - 2006. - V. 107. -№ 6. - P. 1240-1247.

16. Feng Y. Breast cancer development and progression: Risk factors, cancer stem cells, signaling pathways, genomics, and molecular pathogenesis / Y. Feng, M. Spezia, S. Huang, C. Yuan, Z. Zeng, L. Zhang, X. Ji, W. Liu, B. Huang, W. Luo, B. Liu, Y. Lei, S. Du, A. Vuppalapati, H.H. Luu, R.C. Haydon, T.-C. He, G. Ren // Genes and Diseases. - 2018. - V. 5. - № 2. - P. 77-106.

17. Narod S.A. BRCA mutations in the management of breast cancer: The state of the art / S.A. Narod // Nature Reviews Clinical Oncology. - 2010. - V. 7. - № 12. - P. 702-707.

18. Al-Hajj M. Prospective identification of tumorigenic breast cancer cells / M. Al-Hajj, M.S. Wicha, A. Benito-Hernandez, S.J. Morrison, M.F. Clarke // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. -2003. - V. 100. - № 7. - P. 3983-3988.

19. Sovak M.A. Aberrant nuclear factor-Kb/Rel expression and the pathogenesis of breast cancer / M.A. Sovak, R E. Bellas, D.W. Kim, G.J. Zanieski, A.E. Rogers, A.M. Traish, G.E. Sonenshein // J. Clin. Invest. - 1997. - V. 100. - № 12. - P. 2952-2960.

20. Rastogi P. Preoperative chemotherapy: Updates of national surgical adjuvant breast and bowel project protocols B-18 and B-27 / P. Rastogi, S.J. Anderson, H.D. Bear, C.E. Geyer,

107

M.S. Kahlenberg, A. Robidoux, R.G. Margolese, J.L. Hoehn, V.G. Vogel, S.R. Dakhil, D. Tamkus, K.M. King, ER. Pajon, M.J. Wright, J. Robert, S. Paik, E.P. Mamounas, N. Wolmark // Journal of Clinical Oncology. - 2008. - V. 26. - № 5. - P. 778-785.

21. Francis P. Adjuvant chemotherapy with sequential or concurrent anthracycline and docetaxel: Breast International Group 02-98 randomized trial / P. Francis, J. Crown, A.D. Leo, M. Buyse, A. Balil, M. Andersson, B. Nordenskjöld, I. Lang, R. Jakesz, D. Vorobiof, J. Gutiérrez, G. van Hazel, S. Dolci, S. Jamin, B. Bendahmane, R.D. Gelber, A. Goldhirsch, M. Castiglione-Gertsch, M. Piccart-Gebhart // J. Natl. Cancer Inst. - 2008. - V. 100. - № 2.

- P.121-133.

22. Figueiredo M.I. Breast cancer treatment in older women: Does getting what you want improve your long-term body image and mental health? / M.I. Figueiredo, J. Cullen, Y.-T. Hwang, J.H. Rowland, J.S. Mandelblatt // J. Clin. Oncol. - 2004. - V. 22. - № 19. - P. 40024009.

23. Kurman R.J. The origin and pathogenesis of epithelial ovarian cancer: A proposed unifying theory / R.J. Kurman, I.M. Shih // Am. J. Surg. Pathol. - 2010. - V. 34. - № 3. - P. 433-443.

24. Cho K.R. Ovarian Cancer / K.R. Cho, I.-M. Shih // Annu. Rev. Pathol. Mech. Dis. - 2009.

- V. 4. - № 1. - P. 287-313.

25. Kuo K.T. Frequent activating mutations of PIK3CA in ovarian clear cell carcinoma / K.-T. Kuo, T.-L. Mao, S. Jones, E. Veras, A. Ayhan, T.-L. Wang, R. Glas, D. Slamon, V.E. Velculescu, R.J. Kuman, I.-M. Shih // Am. J. Pathol. - 2009. - V. 174. - № 5. - P. 15971601.

26. Meyer L.A. Use and effectiveness of neoadjuvant chemotherapy for treatment of ovarian cancer / L.A. Meyer, A.M. Cronin, C.C. Sun, K. Bixel, M.A. Bookman, M C. Cristea, J.J. Griggs, C.F. Levenback, R.A. Burger, G. Mantia-Smaldone, U.A. Matulonis, J.C. Niland, D.M. O'Malley, A.A. Wright // J. Clin. Oncol. American Society of Clinical Oncology. -2016. - V. 34. - № 32. - P. 3854-3863.

27. Wright A.A. Neoadjuvant chemotherapy for newly diagnosed, advanced ovarian cancer: Society of Gynecologic Oncology and American Society of Clinical Oncology Clinical Practice Guideline / A.A. Wright, K. Bohlke, D.K. Armstrong, M.A. Bookman, W.A. Cliby, R.L. Coleman, D.S. Dizon, J.J. Kash, L.A. Meyer, K.N. Moore, A.B. Olawaiye, J. Oldham, R. Salani, D. Sparacio, W.P. Tew, I. Vergote, M.I. Edelson // Gynecol. Oncol. - 2016. - V. 143. - № 1. - P. 3-15.

28. Grein, A. Descrizione e classificazione di un attinomicete (streptomyces peucetius sp. nova) produttore di una sostanza ad attivita antitumorale-La / A. Grein, C. Spalla, G. Canecazz, A. Dimarco // Giornale di Microbiologia. - 1963. - V. - 11. - № 2. - P. 109.

29. Arcamone F. Structure and Physicochemical Properties of Adriamycin (Doxorubicin) / F. Arcamone, G. Cassinelli, G. Franceschi, S. Penco, C. Pol, S. Redaelli, A. Selva // International Symposium on Adriamycin. Springer Berlin Heidelberg. - 1972. - P. 9-22.

30. Dubost M. Rubidomycin: A New Antibiotic With Cytostatic Properties / M. Dubost // Cancer Chemother. Rep. - 1964. - V. 41. - P. 35-36.

31. Arcamone F. Adriamycin, 14-hydroxydaimomycin, a new antitumor antibiotic from S. Peucetius var. caesius / F. Arcamone, G. Cassinelli, G. Fantini, A. Grein, P. Orezzi, C. Pol, C. Spalla // Biotechnol. Bioeng. - 1969. - V. 11. - № 6. - P. 1101-1110.

32. McGowan J.V. Anthracycline Chemotherapy and Cardiotoxicity / J.V. McGowan, R. Chung, A. Maulik, I. Piotrowska, J.M. Walker, D.M. Yellon // Cardiovasc. Drugs Ther. -2017. - V. 31. - № 1. - P. 63-75.

33. Metsa-Ketela M. Anthracycline Biosynthesis: Genes, Enzymes and Mechanisms / M. Metsa-Ketela, J. Niemi, P. Mantsala, G. Schneider // Antracycline Chemistry and Biology I. - 2007. - P. 101 -140.

34. Katz L. Polyketide Synthesis: Prospects for Hybrid Antibiotics / L. Katz, S. Donadio // Annu. Rev. Microbiol. - 1993. - V. 47. - № 1. - P. 875-912.

35. Blum R.H. A new anticancer drug with significant clinical activity / R.H. Blum, S.K. Carter // Ann. Intern. Med. - 1974. - V. 80. - № 2. - P. 249-259.

36. Minotti G. Anthracyclines: Molecular advances and pharmacologie developments in antitumor activity and cardiotoxicity / G. Minotti, P. Menna, E. Salvatorelli, G. Cairo, L. Gianni // Pharmacological Reviews. - 2004. - V. 56. - № 2. - P. 185-229.

37. Arcamone F. Synthesis and Antitumor Properties of New Glycosides of Daunomycinone and Adriamycinone // J. Med. Chem. 1975. - V. 18. - № 7. - P. 703-707.

38. Arcamone F. Synthesis and antitumor activity of 4 demethoxydaunorubicin, 4 demethoxy 7,9 diepidaunorubicin, and their p anomers / F. Arcamone, S. Penco, A. Vigevani, S. Redaelli, G. Franchi, A. Di Marco, A.M. Casazza, T. Dasdia, F. Formelli // Cancer Treat. Rep. - 1976. - V. 60. - № 7. - P. 829-834.

39. Israel M. N-Trifluoroacetyladriamycin-14-valerate, an Analog with Greater Experimental Antitumor Activity and Less Toxicity than Adriamycin / M. Israel, E.J. Modest, E. Frei // Cancer Res. - 1975. - V. 35. - № 5. - P. 1365-1368.

40. Kiyomiya K.I. Mechanism of specific nuclear transport of adriamycin: The mode of nuclear translocation of adriamycin-proteasome complex / K.I. Kiyomiya, S. Matsuo, M. Kurebe // Cancer Res. - 2001. - V. 61. - № 6. - P. 2467-2471.

41. Wojcik C. Intracellular localization of proteasomes / C. Wojcik, G.N. DeMartino // International Journal of Biochemistry and Cell Biology. - 2003. - V. 35. - № 5. - P. 579589.

42. Di Marco A. DNA complexing antibiotics: daunomycin, adriamycin and their derivatives / A. Di Marco, F. Arcamone // Arzneimittel-Forschung. - 1975. - V. 25. - № 3. - P. 368-374.

43. Rabbani A. Effects of anthracycline antibiotic, daunomycin on thymus chromatin: The role of chromosomal proteins / A. Rabbani, J. Davoodi // Gen. Pharmacol. - 1994. - V. 25. - № 4. - P. 787-793.

44. Buzun K. DNA topoisomerases as molecular targets for anticancer drugs / K. Buzun, A. Bielawska, K. Bielawski, A. Gornowicz // Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. - 2020. - V. 35. - № 1. - P. 1781-1799.

45. Seoane J.A. Chromatin regulators mediate anthracycline sensitivity in breast cancer / J.A. Seoane, J.G. Kirkland, J.L. Caswell-Jin, G R. Crabtree, C. Curtis // Nat. Med. - 2019. - V. 25. - № 11. - P. 1721-1727.

46. Studzian K. Inhibition of RNA synthesis in vitro and cell growth by anthracycline antibiotics / K. Studzian, M. Wasowska, M.K. Piestrzeniewicz, D. Wilmanska, L. Szmigiero, I. Oszczapowicz, M. Gniazdowski // Neoplasma. - 2001. - V. 48. - № 5. - P. 412-418.

47. Pereira G.C. Cardiac cytochrome c and cardiolipin depletion during anthracycline-induced chronic depression of mitochondrial function / G.C. Pereira, S.P. Pereira, L.C. Tavares, F.S. Carvalho, S. Magalhäes-Novais, I.A. Barbosa, M.S. Santos, J. Bjork, A.J. Moreno, K.B. Wallace, P.J. Oliveira // Mitochondrion. - 2016. - V. 30. - P. 95-104.

48. Vizcaino C. Sp1 transcription factor: A long-standing target in cancer chemotherapy / C. Vizcaino, S. Mansilla, J. Portugal // Pharmacology and Therapeutics. - 2015. - V. 152. - P. 111-124.

49. Ruiz-Ruiz C. Characterization of p53-mediated up-regulation of CD95 gene expression upon genotoxic treatment in human breast tumor cells / C. Ruiz-Ruiz, G. Robledo, E. Cano, J.M. Redondo, A. Lopez-Rivas // J. Biol. Chem. - 2003. - V. 278. - № 34. - P. 31667-31675.

50. Müller I. Anthracycline-derived chemotherapeutics in apoptosis and free radical cytotoxicity (Review) / I. Müller, D. Niethammer, G. Bruchelt // International journal of molecular medicine. - 1998. - V. 1. - № 2. - P. 491-494.

51. Bose R. Ceramide synthase mediates daunorubicin-induced apoptosis: An alternative mechanism for generating death signals / R. Bose, M. Verheij, A. Haimovitz-Friedman, K. Scotto, Z. Fuks, R. Kolesnick // Cell. - 1995. - V. 82. - № 3. - P. 405-414.

52. Scott A.M. Antibody therapy of cancer / A.M. Scott, J.D. Wolchok, L.J. Old // Nature Reviews Cancer - 2012. - V. 12. - № 4. - P. 278-287.

53. Nieto Gutierrez A. GPCRs: Emerging anti-cancer drug targets / A. Nieto Gutierrez, P.H. McDonald // Cellular Signalling - 2018. - V. 41. - P. 65-74.

54. Kumar B. Promising Targets in Anti-cancer Drug Development: Recent Updates / B. Kumar, S. Singh, I. Skvortsova, V. Kumar // Curr. Med. Chem. - 2017. - V. 24. - № 42. - P. 4729-4752.

55. Bach P.B. FDA approval of tisagenlecleucel: Promise and complexities of a $475 000 cancer drug / P.B. Bach, S.A. Giralt, L.B. Saltz // JAMA - Journal of the American Medical Association. - 2017. - V. 318. - № 19. - P. 1861-1862.

56. Slamon D. Ten year follow-up of BCIRG-006 comparing doxorubicin plus cyclophosphamide followed by docetaxel (AC^-T) with doxorubicin plus cyclophosphamide followed by docetaxel and trastuzumab (AC^TH) with docetaxel, carboplatin and trastuzumab (TCH) in HER2+ early breast cancer / D.J. Slamon, W. Eiermann, N.J. Robert, J. Giermek, M. Martin, M. Jasiowka // Cancer Research. - 2016. -V. 76. - № 4. - P. S5-04.

57. Fehrenbacher L. NSABP B-47 (NRG oncology): Phase III randomized trial comparing adjuvant chemotherapy with adriamycin (A) and cyclophosphamide (C) ^ weekly paclitaxel (WP), or docetaxel (T) and C with or without a year of trastuzumab (H) in women with node-positive or high-risk node-negative invasive breast cancer (IBC) expressing HER2 staining intensity of IHC 1+ or 2+ with negative FISH (HER2-Low IBC) / L. Fehrenbacher, R.S. Cecchini, C.E. Geyer Jr, P. Rastogi, J.P. Costantino, J.N. Atkins, J.P.

Crown, J. Polikoff, J.F. Boileau, L. Provencher, C. Stokoe // Cancer Research. - 2018. - V. 78. - № 4. - P. GS1-02.

58. Paluch-Shimon S. Neo-adjuvant doxorubicin and cyclophosphamide followed by paclitaxel in triple-negative breast cancer among BRCA1 mutation carriers and non-carriers / S. Paluch-Shimon, E. Friedman, R. Berger, M. Papa, M. Dadiani, N. Friedman, M. Shabtai, D. Zippel, M. Gutman, T. Golan, A. Yosepovich // Breast Cancer Res. - 2016. - V. 157. -№ 1. - P. 157-165.

59. Marth C. ENGOT-ov-6/TRINOVA-2: Randomised, double-blind, phase 3 study of pegylated liposomal doxorubicin plus trebananib or placebo in women with recurrent partially platinum-sensitive or resistant ovarian cancer / C. Marth, I. Vergote, G. Scambia, W. Oberaigner, A. Clamp, R. Berger, C. Kurzeder, N. Colombo, P. Vuylsteke, D. Lorusso, M. Hall // Eur. J. Cancer. - 2017. - V. 70. - P. 111-121.

60. Tempfer C.B. A phase I, single-arm, open-label, dose escalation study of intraperitoneal cisplatin and doxorubicin in patients with recurrent ovarian cancer and peritoneal carcinomatosis / C.B. Tempfer, U. Giger-Pabst, V. Seebacher, M. Petersen, A. Dogan, G.A. Rezniczek // Gynecol. Oncol. - 2018. - V. 150. - № 1. - P. 23-30.

61. Culine S. Randomized phase III trial of dose-dense methotrexate, vinblastine, doxorubicin, and cisplatin (dd-MVAC) or gemcitabine and cisplatin (GC) as perioperative chemotherapy for muscle invasive urothelial bladder cancer (MIUBC): Preliminary results of the GETUG/AFU V05 VESPER trial on toxicity and pathological responses / S. Culine, G. Gravis, A. Flechon, M. Soulie, L. Guy, B. Laguerre, N. Mottet, F. Joly, Y. Allory, V. Harter, C. Pfister // J. Clin. Oncol. - 2020. - V. 38. - № 6. - P. 437-437.

62. Pfister C. Design of a randomized controlled phase III study of dose dense methotrexate, vinblastine, doxorubicin and cisplatin (dd-MVAC) or gemcitabine and cisplatin (GC) as peri-operative chemotherapy for patients with locally advanced transitional cell cancer of the bladder. The French GETUG/AFU V05 VESPER trial / C. Pfister, V. Harter, Y. Allory, F. Radvanyi, S. Culine, G. Grawis, G. Pignot, A. Flechon, J.P. Fendler, C. Chevreau, M. Soulié // Contemp. Clin. Trials Commun. - 2020. - V. 17. - P. 100536.

63. Calvo E. Antitumor activity of lurbinectedin (PM01183) and doxorubicin in relapsed small-cell lung cancer: Results from a phase I study / E. Calvo, V. Moreno, M. Flynn, E. Holgado, M.E. Olmedo, M.L. Criado, C. Kahatt, J.A. Lopez-Vilariño, M. Siguero, C. Fernandez-Teruel, M. Cullell-Young // Ann. Oncol. - 2017. - V. 28. - № 10. - P. 2559-2566.

64. Tap W.D. Olaratumab and doxorubicin versus doxorubicin alone for treatment of soft-tissue sarcoma: an open-label phase 1b and randomised phase 2 trial / W.D. Tap, R.L. Jones, B.A. Van Tine, B. Chmielowski, A.D. Elias, D. Adkins, M. Agulnik, MM. Cooney, M.B. Livingston, G. Pennock, MR. Hameed // Lancet. - 2016. - V. 388. - № 10043. - P. 488497.

65. Ryan C.W. PICASSO III: A phase III, placebo-controlled study of doxorubicin with or without palifosfamide in patients with metastatic soft tissue sarcoma / C.W. Ryan, O. Merimsky, M. Agulnik, J.Y. Blay, S.M. Schuetze, B.A. Van Tine, R.L. Jones, A.D. Elias, E. Choy, T. Alcindor, V.L. Keedy // J. Clin. Oncol. - 2016. - V. 34. - № 32. - P. 3898-3905.

66. Trucco M.M. A phase II study of temsirolimus and liposomal doxorubicin for patients with recurrent and refractory bone and soft tissue sarcomas / M.M. Trucco, C.F. Meyer, K.A. Thornton, P. Shah, A.R. Chen, B.A. Wilky, M.A. Carrera-Haro, L.C. Boyer, MF. Ferreira, U. Shafique, J.D. Powell // Clin. Sarcoma Res. - 2018. - V. 8. - № 1. - P. 1-9.

67. Sherman E.J. Radiation therapy and low dose doxorubicin in thyroid cancer: A phase II study / E.J. Sherman, P.B. Romesser, A.L. Ho, S.S. Baxi, N. Riaz, S.M. McBride, S. Chan, R.M. Tuttle, D.G. Pfister, N.Y. Lee // J. Clin. Oncol. - 2016. - V. 34. - № 15. - P. 61006100.

68. Jayarangaiah A. Therapeutic options for advanced thyroid cancer / A. Jayarangaiah, G. Sidhu, J. Brown, O. Barrett-Campbell, G. Bahtiyar, I. Youssef, S. Arora, S. Skwiersky, S.I. McFarlane // Int. J. Clin. Endocrinol. Metab. - 2019. - V. 5. - № 1. - P. 026-034.

69. Vu K. Romidepsin plus liposomal doxorubicin is safe and effective in patients with relapsed or refractory T-cell lymphoma: Results of a phase I dose-escalation study / K. Vu, C.H. Wu, C.Y. Yang, A. Zhan, E. Cavallone, W. Berry, P. Heeter, L. Pincus, M.J. Wieduwilt, B.M. William, C. Andreadis // Clin. Cancer Res. - 2020. - V. 26. - № 5. - P. 1000-1008.

70. Davies A. ACCEPT - combining acalabrutinib with rituximab, cyclophosphamide, doxorubicin, vincristine and prednisolone (R-CHOP) for Diffuse Large B-cell Lymphoma (DLBCL): study protocol for a Phase Ib/II open-label non-randomised clinical trial / A. Davies, S. Barrans, C. Burton, K. Mercer, J. Caddy, F. Chinnery, L. Day, D. Fernando, K. Ardeshna, G. Collins, J. Radford // F1000Research. - 2020. - V. 9. - P. 941.

71. Zhou X. Multiagent therapy with pomalidomide, bortezomib, doxorubicin, dexamethasone,

and daratumumab ("Pom-PAD-Dara") in relapsed/refractory multiple myeloma / X. Zhou,

M.J. Steinhardt, D. Grathwohl, K. Meckel, K. Nickel, H.B. Leicht, F. Krummenast, H.

113

Einsele, L. Rasche, K M. Kortum // Cancer Med. - 2020. - V. 9. - № 16. - P. 5819-5826.

72. Kovacs S.B. Venetoclax in combination with carfilzomib, doxorubicin and dexamethasone restores responsiveness in an otherwise treatment-refractory multiple myeloma patient / S.B. Kovacs, J. Luan, S.M. Dold, A. Weis, M. Pantic, J. Duyster, R. Wasch, M. Engelhardt // Haematologica. - 2020. - V. 105. - № 3. - P. E138-E140.

73. Mei Q. Camrelizumab Plus Gemcitabine, Vinorelbine, and Pegylated Liposomal Doxorubicin in Relapsed/Refractory Primary Mediastinal B-Cell Lymphoma: A SingleArm, Open-Label, Phase II Trial / Q. Mei, W. Zhang, Y. Liu, Q. Yang, J.E. Rasko, J. Nie, J. Liu, X. Li, L. Dong, M. Chen, Y. Zhang // Clin. Cancer Res. - 2020. - V. 26. - № 17. - P. 4521-4530.

74. Capeloa T. Metabolic and non-metabolic pathways that control cancer resistance to anthracyclines / T. Capeloa, Z. Benyahia, L.X. Zampieri, M.C. Blackman, P. Sonveaux // Seminars in Cell and Developmental Biology. - 2020. - V. 98. - P. 181-191.

75. Staubert C. Rewired metabolism in drug-resistant leukemia cells: A metabolic switch hallmarked by reduced dependence on exogenous glutamine / C. Staeubert, H. Bhuiyan, A. Lindahl, O.J. Broom, Y. Zhu, S. Islam, S. Linnarsson, J. Lehtio, A. Nordstrom // J. Biol. Chem. - 2015. - V. 290. - № 13. - P. 8348-8359.

76. Todor I.N. Metabolic changes during development of Walker-256 carcinosarcoma resistance to doxorubicin / I.N. Todor, N.Y. Lukianova, Y.V. Shvets, Y.V. Lozovska, V.F. Chekhun // Exp. Oncol. - 2015. - V. 37. - № 1. - P. 19-22.

77. Liu H. Fatty acid synthase causes drug resistance by inhibiting TNF-a and ceramide production / H. Liu, X. Wu, Z. Dong, Z. Luo, Z. Zhao, Y. Xu, J.T. Zhang // J. Lipid Res. -2013. - V. 54. - № 3. - P. 776-785.

78. Todor I.N. The lipid content of cisplatin- and doxorubicin-resistant MCF-7 human breast cancer cells / I.N. Todor, N.Y. Lukyanova, V.F. Chekhun // Exp. Oncol. - 2012. - V. 34. -№ 2. - P. 97-100.

79. Franco R. The central role of glutathione in the pathophysiology of human diseases / R. Franco, O.J. Schoneveld, A. Pappa, M.I. Panayiotidis // Archives of Physiology and Biochemistry. - 2007. - V. 113. - № 4-5. - P. 234-258.

80. Drozd E. Up-regulation of glutathione-related genes, enzyme activities and transport proteins in human cervical cancer cells treated with doxorubicin / E. Drozd, J. Krzyszton-

114

Russjan, J. Marczewska, J. Drozd, I. Bubko, M. Bielak, K. Lubelska, K. Wiktorska, Z. Chilmonczyk, E. Anuszewska, B. Gruber-Bzura // Biomed. Pharmacother. - 2016. - V. 83.

- P. 397-406.

81. Marinello J. Anthracyclines as Topoisomerase II Poisons: From Early Studies to New Perspectives / J. Marinello, M. Delcuratolo, G. Capranico // Int. J. Mol. Sci. - 2018. - V. 19.

- № 11. - P. 3480.

82. Sala V. Signaling Pathways Underlying Anthracycline Cardiotoxicity / V. Sala, A. Della Sala, E. Hirsch, A. Ghigo // Antioxid. Redox Signal. - 2020. - V. 32. - № 15. - P. 10981114.

83. Sawicki K.T. Preventing and Treating Anthracycline Cardiotoxicity: New Insights / K.T. Sawicki, V. Sala, L. Prever, E. Hirsch, H. Ardehali, A. Ghigo // Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. - 2021. - V. 61. - P. 309-332.

84. Thorn C.F. Doxorubicin pathways: Pharmacodynamics and adverse effects / C.F. Thorn, C. Oshiro, S. Marsh, T. Hernandez-Boussard, H. McLeod, T.E. Klein, R.B. Altman // Pharmacogenet. Genomics. - 2011. - V. 21. - № 7. - P. 440-446.

85. Sterba M. Oxidative stress, redox signaling, and metal chelation in anthracycline cardiotoxicity and pharmacological cardioprotection / M. Sterba, O. Popelovâ, A. Vâvrovâ, E. Jirkovsky, P. Kovarikovâ, V. Gersl, T. Simunek // Antioxidants and Redox Signaling -2013. - V. 18. - № 8. - P. 899-929.

86. Reichardt P. Risk-benefit of dexrazoxane for preventing anthracycline-related cardiotoxicity: Re-evaluating the European labeling / P. Reichardt, M.D. Tabone, J. Mora, B. Morland, R.L. Jones // Future Oncology. - 2018. - V. 14. - № 25. - P. 2663-2676.

87. Asselin B.L. Cardioprotection and safety of dexrazoxane in patients treated for newly diagnosed T-cell acute lymphoblastic leukemia or advanced-stage lymphoblastic non-Hodgkin lymphoma: A report of the Children's Oncology Group randomized trial Pediatric Oncology Group 9404 / B.L. Asselin, M. Devidas, L. Chen, V.I. Franco, J. Pullen, M.J. Borowitz, R.E. Hutchison, Y. Ravindranath, S.H. Armenian, B.M. Camitta, S.E. Lipshultz // J. Clin. Oncol. - 2016. - V. 34. - № 8. - P. 854-862.

88. Smith L.A. Cardiotoxicity of anthracycline agents for the treatment of cancer: Systematic review and meta-analysis of randomised controlled trials / L.A. Smith, V.R. Cornelius, C.J. Plummer, G. Levitt, M. Verrill, P. Canney, A. Jones // BMC Cancer. - 2010. - V. 10. - №

1. - P. 337.

89. Rafiyath S.M. Comparison of safety and toxicity of liposomal doxorubicin vs. conventional anthracyclines: a meta-analysis / S.M. Rafiyath, M. Rasul, B. Lee, G. Wei, G. Lamba, D. Liu // Exp. Hematol. Oncol. - 2012. - V. 1. - № 1. - P. 10.

90. Shepard R.C. Liposomal annamycin, a next generation anthracycline that overcomes MDR and has no cardiotoxicity with preliminary efficacy in the treatment of R/R AML / R.C. Shepard // Hematol. Rep. - 2020. - V. 12. - № s1.

91. Воробьев Н.А. Практические рекомендации по лекарственному лечению рака предстательной железы / Н.А. Воробьев, Д.А. Носов, О.А. Гладков, И.А. Королева, В.Б. Матвеев // Злокачественные опухоли. - 2016. - Т. 4. - № 2. - С. 343-352.

92. Malyankar U.M. Tumor-associated antigens and biomarkers in cancer and immune therapy / U.M. Malyankar // International Reviews of Immunology. - 2007. - V. 26. - № 3-4. - P. 223-247.

93. Garnett M.C. Targeted drug conjugates: Principles and progress / M.C. Garnett // Advanced Drug Delivery Reviews. - 2001. - V. 53. - № 2. - P. 171-216.

94. Hammarstrom S. The carcinoembryonic antigen (CEA) family: Structures, suggested functions and expression in normal and malignant tissues / S. Hammarstrom // Semin. Cancer Biol. - 1999. - V. 9. - № 2. - P. 67-81.

95. Graziano D.F. Tumor antigens and tumor antigen discovery / D.F. Graziano, O.J. Finn // Cancer treatment and research. - 2005. - V. 123. - P. 89-111.

96. Quintas-Cardama A. Chronic myeloid leukemia: Diagnosis and treatment / A. Quintas-Cardama, J.E. Cortes // Mayo Clinic Proceedings. - 2006. - V. 81. - № 7. - P. 973-988.

97. Traub L.M. Regarding the Amazing Choreography of Clathrin Coats / L.M. Traub // PLoS Biol. - 2011. - V. 9. - № 3. - P. e1001037.

98. Kaksonen M. Mechanisms of clathrin-mediated endocytosis / M. Kaksonen, A. Roux // Nature Reviews Molecular Cell Biology. - 2018. - V. 19. - № 5. - P. 313-326.

99. Rappoport J.Z. Focusing on clathrin-mediated endocytosis / J.Z. Rappoport // Biochem. J. - 2008. - V. 412. - № 3. - P. 415-423.

100. Sahay G. Endocytosis of nanomedicines / G. Sahay, D.Y. Alakhova, A.V. Kabanov//

Journal of Controlled Release. - 2010. - V. 145. - № 3. - P. 182-195.

116

101. Alberts B. Molecular Biology of the Cell 6th ed./ B. Alberts, A. Johnson, J. Lewis, D. Morgan, M. Raff, K. Roberts, P. Walter - New York: Garland Science, 2017 - 1464 p.

102. Donaldson J.G. Multiple Roles for Arf6: Sorting, Structuring, and Signaling at the Plasma Membrane / J.G. Donaldson // Journal of Biological Chemistry. - 2003. - V. 278. - № 43. -P.41573-41576.

103. Naslavsky N. Convergence of non-clathrin- and clathrin-derived endosomes involves Arf6 inactivation and changes in phosphoinositides / N. Naslavsky, R. Weigert, J.G. Donaldson // Mol. Biol. Cell. - 2003. - V. 14. - № 2. - P. 417-431.

104. Howes M.T. Clathrin-independent carriers form a high capacity endocytic sorting system at the leading edge of migrating cells / M.T. Howes, M. Kirkham, J. Riches, K. Cortese, P.J. Walser, F. Simpson, M.M. Hill, A. Jones, R. Lundmark, M.R. Lindsay, D.J. Hernandez-Deviez // J. Cell Biol. - 2010. - V. 190. - № 4. - P. 675-691.

105. Sandvig K. Clathrin-independent endocytosis: Mechanisms and function / K. Sandvig, S. Pust, T. Skotland, B. van Deurs // Current Opinion in Cell Biology. - 2011. - V. 23. - № 4.

- P.413-420.

106. Kumari S. Endocytosis unplugged: Multiple ways to enter the cell / S. Kumari, S. Mg, S. Mayor // Cell Research. - 2010. - V. 20. - № 3. - P. 256-275.

107. Haga Y. CtBP1/BARS is an activator of phospholipase D1 necessary for agonist-induced macropinocytosis / Y. Haga, N. Miwa, S. Jahangeer, T. Okada, S.I. Nakamura // EMBO J.

- 2009. - V. 28. - № 9. - P. 1197-1207.

108. Terentiev A.A. Alpha-fetoprotein: A renaissance / A.A. Terentiev, N.T. Moldogazieva // Tumor Biology. - 2013. - V. 34. - № 4. - P. 2075-2091.

109. Sauzay C. Alpha-foetoprotein (AFP): A multi-purpose marker in hepatocellular carcinoma / C. Sauzay, A. Petit, A.M. Bourgeois, J.C. Barbare, B. Chauffert, A. Galmiche, A. Houessinon // Clinica Chimica Acta. - 2016. - V. 463. - P. 39-44.

110. Moldogazieva N. Relationship between structure and function of alpha-fetoprotein: conformational status and biological activity / N. Moldogazieva, A. Terent'ev, K. Shaitan // Biomed. Khim. - 2005. - V. 51. - № 2. - P. 127-151.

111. Mizejewski G.J. Protein Binding and Interactions with Alpha-Fetoprotein (AFP): A Review of Multiple AFP Cell Surface Receptors, Intracytoplasmic Binding, and Inter- Molecular

Complexing Proteins / G.J. Mizejewski // Journal of Molecular and Cellular Biology Forecast. - 2019. - V. 2. - № 1. - P. 1016.

112. Bei R. Alpha-fetoprotein is an autoantigen in hepatocellular carcinoma and juvenile Batten disease / R. Bei, G.J. Mizejewski // Front. Biosci. - 2020. - V. 25. - № 4. - P. 4840.

113. Pak V.N. Selective targeting of myeloid-derived suppressor cells in cancer patients through AFP-binding receptors / V.N. Pak // Future Science OA. - 2019. - V. 5. - № 1.

114. Chen L. Relationship between expression of the human alpha-fetoprotein gene and DNA methylation status of the promoter region / L. Chen, W. Wang, Q. Jin, R. Wang, W. Hu // Chinese J. Clin. Oncol. - 2006. - V. 3. - № 5. - P. 364-369.

115. Jasirwan C.O.M. The alpha-fetoprotein serum is still reliable as a biomarker for the surveillance of hepatocellular carcinoma in Indonesia / C.O.M. Jasirwan, A. Fahira, L. Siregar, I. Loho // BMC Gastroenterol. - 2020. - V. 20. - № 1. - P. 215.

116. Li D. AFP-L3: A new generation of tumor marker for hepatocellular carcinoma / D. Li, T. Mallory, S. Satomura // Clinica Chimica Acta. - 2001. - V. 313. - № 1-2. - P. 15-19.

117. Yan J.-X. The diagnostic value of serum carcino-embryonic antigen, alpha fetoprotein and carbohydrate antigen 19-9 for colorectal cancer / J.-X. Yan, L.-N. Wang, Y.-R. Wang // J. Cancer Res. - 2014. - V. 10. - № 8. - P. 307.

118. Erdal H. Combination of DKK1 and AFP improves diagnostic accuracy of hepatocellular carcinoma compared with either marker alone / H. Erdal, O. Gul Utku, E. Karatay, B. £elik, §. Elbeg, i. Dogan // Turk J Gastroenterol. - 2016. - V. 27. - P. 375-381.

119. Zhang G. Combined analysis of AFP and HCCR-1 as an useful serological marker for small hepatocellular carcinoma: A prospective cohort study // Dis. Markers. Hindawi Limited, 2012. - V. 32. - № 4. - P. 265-271.

120. Zhang C. Direct determination of the tumor marker AFP via silver nanoparticle enhanced SERS and AFP-modified gold nanoparticles as capturing substrate / G. Zhang, S.A. Ha, H.K. Kim, J. Yoo, S. Kim, Y.S. Lee, S.Y. Hur, Y.W. Kim, T.E. Kim, Y.G. Park, J. Wang // Microchim. Acta. - 2018. - V. 185. - № 2. - P. 1-6.

121. Mizejewski G.J. Alpha-Fetoprotein (AFP) and Gastric Cancer: Why is Lethality More Prevalent in AFP-Secreting than NonSecreting Tumors? / G.J. Mizejewski // Canc Ther. Oncol Int J. - 2018. - V. 9. - № 1. - P. 555753.

122. Laderoute M. The identification, isolation and characterization of a 67 kilodalton, PNA-reactive autoantigen commonly expressed in human adenocarcinomas / M. Laderoute, D. Willians, T. Wegmann, M. Longenecker // Anticancer Res. - 1994. - V. 14. - P. 1233-1246.

123. Kanevsky V.Y. Isolation and characterization of AFP-binding proteins from tumor and fetal human tissues / V.Y. Kanevsky, L.P. Pozdnyakova, O.A. Aksenova, S.E. Severin, V.Y. Katukov, E S. Severin // IUBMB Life. - 1997. - V. 41. - № 6. - P. 1143-1151.

124. Villacampa M.J. Alpha-fetoprotein receptors in a human breast cancer cell line / M.J. Villacampa, R. Moro, J. Naval, C. Failly-Crepin, F. Lampreave, J. Uriel // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1984. - V. 122. - № 3. - P. 1322-1327.

125. Посыпанова Г.А. Использопание белковых и пептидных векторов для избирательной доставки противоопухолевых препаратов и терапевтических олигонуклеотидов в опухолевые клетки: дис. ... д-ра биол. наук: 03.01.04 / Посыпанова Галина Ароновна.

- М., 2013. - 256 с.

126. Moro R. A novel receptor protein shows promise for detecting a wide range of malignancies / R. Moro, J. Tcherkassova, E. Song, G. Shen, R. Moro, R. Schmid, X. Hu, A. Kummer, C.Chen // IVD Technol. Mag. - 2005. - P. 1-6.

127. Lin B. Alpha-Fetoprotein Binding Mucin and Scavenger Receptors: An Available BioTarget for Treating Cancer / B. Lin, Q. Wang, K. Liu, X. Dong, M. Zhu, M. Li // Front. Oncol. - 2021. - V. 11. - P. 625936.

128. Koneru M. A phase I clinical trial of adoptive T cell therapy using IL-12 secreting MUC-16ecto directed chimeric antigen receptors for recurrent ovarian cancer / M. Koneru, R. O'Cearbhaill, S. Pendharkar, D R. Spriggs, R.J. Brentjens // J. Transl. Med. - 2015. - V. 13.

- № 1. - P. 1-11.

129. Nejabat M. Combination therapy using Smac peptide and doxorubicin-encapsulated MUC 1-targeted polymeric nanoparticles to sensitize cancer cells to chemotherapy: An in vitro and in vivo study / M. Nejabat, F. Eisvand, F. Soltani, M. Alibolandi, S.M. Taghdisi, K. Abnous, F. Hadizadeh, M. Ramezani // Int. J. Pharm. - 2020. - V. 587. - P. 119650.

130. Cordone I. Overexpression of syndecan-1, MUC-1, and putative stem cell markers in breast cancer leptomeningeal metastasis: A cerebrospinal fluid flow cytometry study / I. Cordone, S. Masi, V. Summa, M. Carosi, A. Vidiri, A. Fabi, A. Pasquale, L. Conti, I. Rosito, C.M. Carapella, V. Villani // Breast Cancer Res. - 2017. - V. 19. - № 1. - P. 1-10.

Mizejewski G.J. Review of the Third Domain Receptor Binding Fragment of Alphafetoprotein (AFP): Plausible Binding of AFP to Lysophospholipid Receptor Targets / G.J. Mizejewski // Curr. Drug Targets. - 2016. - V. 18. - № 7. - P. 874-886.

132. Mizejewski G.J. The alpha-fetoprotein (AFP) third domain: a search for AFP interaction sites of cell cycle proteins / G.J. Mizejewski // Tumor Biol. - 2016. - V. 37. - № 9. - P. 12697-12711.

133. Butterfield L.H. Alpha fetoprotein DNA prime and adenovirus boost immunization of two hepatocellular cancer patients / L.H. Butterfield, J.S. Economou, T.C. Gamblin, D.A. Geller // J. Transl. Med. - 2014. - V. 12. - № 1. - P. 86.

134. Luo X. Selection of a Clinical Lead TCR Targeting Alpha-Fetoprotein-Positive Liver Cancer Based on a Balance of Risk and Benefit / X. Luo, H. Cui, L. Cai, W. Zhu, W.C. Yang, M. Patrick, S. Zhu, J. Huang, X. Yao, Y. Yao, Y. He // Front. Immunol. - 2020. - V. 11. - P. 623.

135. Luo X. Selecting clinical lead of TCRs targeting alpha-fetoprotein-positive liver cancer on balance of risk and benefit / X. Luo, H. Cui, L. Cai, W. Zhu, W.C. Yang, M. Patrick, S. Zhu, J. Huang, X. Yao, Y. Yao, Y. He // Cancer Research. - 2020. - V. 80. - № 16. - P. 6589.

136. Butterfield L.H. A phase I/II trial testing immunization of hepatocellular carcinoma patients with dendritic cells pulsed with four a-fetoprotein peptides / L.H. Butterfield, A. Ribas, V.B. Dissette, Y. Lee, J.Q. Yang, P. De la Rocha, S.D. Duran, J. Hernandez, E. Seja, D M. Potter, W.H. McBride // Clin. Cancer Res. - 2006. - V. 12. - № 9. - P. 2817-2825.

137. Butterfield L.H. Spontaneous and vaccine induced AFP-specific T cell phenotypes in subjects with AFP-positive hepatocellular cancer / L.H. Butterfield, A. Ribas, D.M. Potter, J.S. Economou // Cancer Immunol. Immunother. - 2007. - V. 56. - № 12. - P. 1931-1943.

138. Liu H. Targeting alpha-fetoprotein (AFP)-MHC complex with CART-cell therapy for liver cancer / H. Liu, Y. Xu, J. Xiang, L. Long, S. Green, Z. Yang, B. Zimdahl, J. Lu, N. Cheng, L.H. Horan, B. Liu // Clin. Cancer Res. - 2017. - V. 23. - № 2. - P. 478-488.

139. Liu H. ET1402L1-CART, a T cell therapy targeting the intracellular tumor antigen AFP, demonstrates potent antitumor activity in hepatocellular carcinoma models / H. Liu, Y. Xu, J. Xiang, L. Long, S. Green, Z. Yang, J. Lu, N. Cheng, L.H. Horan, B. Liu, S. Yan // Cancer Research. - 2016. - V. 76. - № 14. - P. 2299.

140. Peng M. Safety and efficacy of repeated intra-hepatic artery and intravenous infusion of ET140202, a novel anti-AFP/MHC complex T-cell, in advanced hepatocellular carcinoma / M. Peng, N. Li, C. Chang, Y. Yao, B. Xu, Y. Zhang, H. Liu, B. Nejadnik, Q. Song, C. Liu // J. Clin. Oncol. - 2019. - V. 37. - № 15. - P. e14013.

141. Liu C. ET140202 t-cells: A novel therapy targeting AFP/MHC complex, that is both safe and effective in treating metastatic hepatocellular carcinoma / C. Liu, H. Liu, Y. Wang, X. Zhang, F. Fan, R. Wang, K. Qu, B. Nejadnik, B. Shi, C. Liu // J. Clin. Oncol. - 2019. - V. 37. - № 15. - P. e15614.

142. Pollard L.C. A randomised, double-blind, placebo-controlled trial of a recombinant version of human a-fetoprotein (MM-093) in patients with active rheumatoid arthritis / L.C. Pollard, J. Murray, M. Moody, E.J. Stewart, E.H. Choy // Ann. Rheum. Dis. - 2007. - V. 66. - № 5. - P.687-689.

143. Dudich E. MM-093, a recombinant human a-fetoprotein for the potential treatment of rheumatoid arthritis and other autoimmune diseases / E. Dudich // Current Opinion in Molecular Therapeutics. - 2007. - V. 9. - № 6. - P. 603-610.

144. Moro R. Increased alpha-fetoprotein receptor in the serum of patients with early-stage breast cancer / R. Moro, J. Gulyaeva-Tcherkassova, P. Stieber // Curr. Oncol. - 2012. - V. 19. - № 1. - P. e1.

145. Tsurkan S. New drug AIMPILA targeted to AFP receptor: Oral anticancer therapy and biodistribution in vivo / S. Tsurkan, J. Tcherkassova, V. Gorbunova, H. Treshalina, E.Y. Grigorieva // Journal of Clinical Oncology. - 2018. - V. 36. - № 15. - P. e24232.

146. Smirnova G.B. Sensitivity of human tumors with various expression of recaf receptor to afp-containing complex of aimpila in vivo / G.B. Smirnova, S.A. Tsurkan, Y.A. Borisova, J.R. Tcherkassova, V.I. Romanenko, M.S. Kalishian, H.M. Treshalina // Russ. J. Oncol. -2017. - V. 22. - № 5. - P. 288-291.

147. Belyaev N.N. Daunorubicin conjugated with alpha-fetoprotein selectively eliminates myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) and inhibits experimental tumor growth / N.N. Belyaev, N. Abdolla, Y.V. Perfilyeva, Y.O. Ostapchuk, V.K. Krasnoshtanov, A. Kali, R. Tleulieva // Cancer Immunol. Immunother. - 2018. - V. 67. - № 1. - P. 101-111.

148. Pak V.N. Magic Targets for Magic Bullet / V.N. Pak // Clin. Oncol. Res. Reports. - 2020. -V. 1. - № 1. - P. 1-3.

149. Pak V.N. a-fetoprotein-binding toxins and teratogens against cancer / V.N. Pak // Therapeutic Delivery. - 2019. - V. 10. - № 1. - P. 1-3.

150. Pak V.N. The use of a-fetoprotein for the delivery of cytotoxic payloads to cancer cells / V.N. Pak // Therapeutic Delivery. - 2014. - V. 5. - № 8. - P. 885-892.

151. Feldman N.B. Antitumor activity of alpha-fetoprotein conjugate with doxorubicin in vitro and in vivo / N.B. Feldman, S.M. Kiselev, N.V. Gukasova, G.A. Posypanova, S.V. Lutsenko, S.E. Severin // Biochem. - 2000. - V. 65. - № 8. - P. 967-971.

152. Severin S.E. Antitumor activity of conjugates of the oncofetal protein alpha-fetoprotein and phthalocyanines in vitro / S.E. Severin, G.A. Posypanova, V.Y. Katukov, I.I. Shmyrev, Y.M. Luzhkov, G.K. Gerasimova, O.S. Zhukova, G.N. Vorozhtsov, O.L. Kaliya, E.A. Lukyanets, ES. Severin // IUBMB Life. - 1997. - V. 43. - № 5. - P. 1081-1089.

153. Sotnichenko A.I. Water-soluble 2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin complex with human a-fetoprotein: Properties, toxicity in vivo and antitumor activity in vitro / A.I. Sotnichenko, S.E. Severin, G.A. Posypanova, N.B. Feldman, M.I. Grigor'ev, E.S. Severin, R.V. Petrov // FEBS Lett. - 1999. - V. 450. - № 1-2. - P. 49-51.

154. Savitsky A.A. Cytotoxic Action of Conjugates of a-Fetoprotein and Epidermal Growth Factor with Photoheme, Chlorines, and Phthalocyanines / A.A. Savitsky, N.V. Gukasova, S.G. Gumanov, N.B. Feldman, E.A. Luk'yanets, A.F. Mironov, R.I. Yakubovskaya, S.V. Lutsenko, S.E. Severin // Biochemistry. Biokhimiia. - 2000. - V. 65. - № 6. - P. 732-736.

155. Nikolskaya E.D. Development of target delivery system based on actinomycin class drugs and recombinant alpha-fetoprotein / E.D. Nikolskaya, O.A. Zhunina, N.G. Yabbarov, V.I. Shvets, B.I. Krugliy, E.S. Severin // Dokl. Biochem. Biophys. - 2017. - V. 473. - № 1. - P. 148-150.

156. Mizejewski G.J. Does alpha-fetoprotein contribute to the mortality and morbidity of human hepatocellular carcinoma? A commentary / G.J. Mizejewski // J. Hepatocell. Carcinoma. -2016. - V. 3. - P. 37-40.

157. Zheng Y. Effects of alpha-fetoprotein on the occurrence and progression of hepatocellular carcinoma / Y. Zheng, M. Zhu, M. Li // Journal of Cancer Research and Clinical Oncology. - 2020. - V. 146. - № 10. - P. 2439-2446.

158. Posypanova G.A. The receptor binding fragment of alpha-fetoprotein is a promising new vector for the selective delivery of antineoplastic agents / G.A. Posypanova,V.A. Makarov,

122

M.V. Savvateeva, A.V. Bereznikova, E.S. Severin // J. Drug Target. - 2013. - V. 21. - № 5. - P.458-465.

159. Sharapova O.A. High-efficient expression, refolding and purification of functional recombinant C-terminal fragment of human alpha-fetoprotein / O.A. Sharapova, N.V. Pozdnykova, D.K. Laurinavichyute, M.S. Yurkova, G.A. Posypanova, A.N. Fedorov, S.E. Severin, E.S. Severin // Protein Expr. Purif. - 2010. - V. 73. - № 1. - P. 31-35.

160. Sharapova O.A. Isolation and characterization of the recombinant human a-fetoprotein fragment corresponding to the C-terminal structural domain / O.A. Sharapova, N.V. Pozdnyakova, D.K. Laurinavichyute, M.S. Yurkova, G.A. Posypanova, S.M. Andronova, A.N. Fedorov, S.E. Severin, E.S. Severin // Russ. J. Bioorganic Chem. - 2010. - V. 36. - № 6. - P. 696-703.

161. Dong P. Innovative nano-carriers in anticancer drug delivery-a comprehensive review / P. Dong, K.P. Rakesh, H.M. Manukumar, Y.H. Mohammed, C.S. Karthik, S. Sumathi, P. Mallu, H.L. Qin // Bioorganic Chemistry. - 2019. - V. 85. - P. 325-336.

162. Jahangirian H. A review of small molecules and drug delivery applications using gold and iron nanoparticles / H. Jahangirian, K. Kalantari, Z. Izadiyan, R. Rafiee-Moghaddam, K. Shameli, T.J. Webster // International Journal of Nanomedicine. - 2019. - V. 14. - P. 16331657.

163. Liu Y.L. A review of magnet systems for targeted drug delivery / Y.L. Liu, D. Chen, P. Shang, D C. Yin // Journal of Controlled Release. - 2019. - V. 302. - P. 90-104.

164. George A. Natural biodegradable polymers based nano-formulations for drug delivery: A review / A. George, P.A. Shah, P.S. Shrivastav // International Journal of Pharmaceutics. -2019. - V. 561. - P. 244-264.

165. Barclay T.G. Review of polysaccharide particle-based functional drug delivery / T.G. Barclay, C M. Day, N. Petrovsky, S. Garg // Carbohydrate Polymers. - 2019. - V. 221. - P. 94-112.

166. Gong X. Phosphorus and Nitrogen Dual-Doped Hollow Carbon Dot as a Nanocarrier for Doxorubicin Delivery and Biological Imaging / X. Gong, Q. Zhang, Y. Gao, S. Shuang, M M. Choi, C. Dong // ACS Appl. Mater. Interfaces. - 2016. - V. 8. - № 18. - P. 1128811297.

167. Le D.H. Potato virus X, a filamentous plant viral nanoparticle for doxorubicin delivery in

123

cancer therapy / D.H. Le, K.L. Lee, S. Shukla, U. Commandeur, N.F. Steinmetz // Nanoscale. - 2017. - V. 9. - № 6. - P. 2348-2357.

168. Swiech O. Water-soluble galactosamine derivative of P-cyclodextrin as protective ligand and targeted carrier for delivery of toxic anthracycline drug / O. Swiech, A. Krzak, M. Majdecki, A. Tr^binska-Stryjewska, M. Wakula, P. Garbacz, W. Gasiorowska, R. Bilewicz // Int. J. Pharm. - 2020. - V. 589. - P. 119834.

169. Pooresmaeil M. Synthesis of photoluminescent glycodendrimer with terminal P-cyclodextrin molecules as a biocompatible pH-sensitive carrier for doxorubicin delivery / M. Pooresmaeil, H. Namazi, R. Salehi // Carbohydr. Polym. - 2020. - V. 246. - P. 116658.

170. Jafarzadeh-Holagh S. Self-assembled and pH-sensitive mixed micelles as an intracellular doxorubicin delivery system / S. Jafarzadeh-Holagh, S. Hashemi-Najafabadi, H. Shaki, E. Vasheghani-Farahani // J. Colloid Interface Sci. - 2018. - V. 523. - P. 179-190.

171. Saha C. Anthracycline drugs on modified surface of quercetin-loaded polymer nanoparticles: A dual drug delivery model for cancer treatment / C. Saha, A. Kaushik, A. Das, S. Pal, D. Majumder // PLoS One. - 2016. - V. 11. - № 5. - P. e0155710.

172. Bajwa N. Targeted anticancer drug delivery through anthracycline antibiotic bearing functionalized quantum dots / N. Bajwa, M.N. Kumar, K. Jain, J.N. Kumar // Artif. Cells, Nanomedicine, Biotechnol. - 2016. - V. 44. - № 7. - P. 1774-1782.

173. Zhao X. Design and Development of Graphene Oxide Nanoparticle/Chitosan Hybrids Showing pH-Sensitive Surface Charge-Reversible Ability for Efficient Intracellular Doxorubicin Delivery / X. Zhao, Z. Wei, Z. Zhao, Y. Miao, Y. Qiu, W. Yang, X. Jia, Z. Liu, H. Hou // ACS Appl. Mater. Interfaces. - 2018. - V. 10. - № 7. - P. 6608-6617.

174. Hu D. PH-triggered charge-reversal silk sericin-based nanoparticles for enhanced cellular uptake and doxorubicin delivery / D. Hu, Z. Xu, Z. Hu, B. Hu, M. Yang, L. Zhu // ACS Sustain. Chem. Eng. - 2017. - V. 5. - № 2. - P. 1638-1647.

175. Kumar K. Natural tripeptide capped pH-sensitive gold nanoparticles for efficacious doxorubicin delivery both: in vitro and in vivo / K. Kumar, P. Moitra, M. Bashir, P. Kondaiah, S. Bhattacharya // Nanoscale. - 2020. - V. 12. - № 2. - P. 1067-1074.

176. Zhou X.X. pH-responsive polymeric micelles self-assembled from amphiphilic copolymer modified with lipid used as doxorubicin delivery carriers / X.X. Zhou, L. Jin, R.Q. Qi, T. Ma // R. Soc. Open Sci. - 2018. - V. 5. - № 3. - P. 171654.

124

177. Feng S. pH-responsive charge-reversal polymer-functionalized boron nitride nanospheres for intracellular doxorubicin delivery / S. Feng, H. Zhang, C. Zhi, X.D. Gao, H. Nakanishi // Int. J. Nanomedicine. - 2018. - V. 13. - P. 641-652.

178. Pikabea A. pH-controlled doxorubicin delivery from PDEAEMA-based nanogels / A. Pikabea, E. Villar-Alvarez, J. Forcada, P. Taboada // J. Mol. Liq. - 2018. - V. 266. - P. 321329.

179. Zohreh N. Hydrazine-modified starch coated magnetic nanoparticles as an effective pH-responsive nanocarrier for doxorubicin delivery / N. Zohreh, S.H. Hosseini, A. Pourjavadi // J. Ind. Eng. Chem. - 2016. - V. 39. - P. 203-209.

180. Birhan Y.S. Fabrication of redox-responsive Bi(mPEG-PLGA)-Se2 micelles for doxorubicin delivery / Y.S. Birhan, B.Z. Hailemeskel, T.W. Mekonnen, E.Y. Hanurry, H.F. Darge, A T. Andrgie, H.Y. Chou, J.Y. Lai, G.H. Hsiue, H.C. Tsai // Int. J. Pharm. - 2019. -V. 567. - P. 118486.

181. Zhang H. Functional nanoparticles of tea polyphenols for doxorubicin delivery in cancer treatment / H. Zhang, Z. Yi, Z. Sun, X. Ma, X. Li // J. Mater. Chem. B. - 2017. - V. 5. - № 36. - P. 7622-7631.

182. Kumar K. Efficacious Doxorubicin Delivery Using Glutathione-Responsive Hollow Non-phospholipid Vesicles Bearing Lipoyl Cholesterols / K. Kumar, L. Yadav, P. Kondaiah, S. Chaudhary // ChemMedChem. - 2019. - V. 14. - № 18. - P. 1633-1640.

183. Nguyen T.T.T. Hierarchical self-assembly of heparin-PEG end-capped porous silica as a redox sensitive nanocarrier for doxorubicin delivery / T.T.T. Nguyen, T.V. Tran, N.Q. Tran, C.K. Nguyen, D.H. Nguyen // Mater. Sci. Eng. C. - 2017. - V. 70. - № 2. - P. 947-954.

184. Asadi H. Dual responsive nanogels for intracellular doxorubicin delivery / H. Asadi, S. Khoee // Int. J. Pharm. - 2016. - V. 511. - № 1. - P. 424-435.

185. Benito E. Structurally simple redox polymersomes for doxorubicin delivery / E. Benito, L. Romero-Azogil, E. Galbis, M.V. de-Paz, M.G. Garcia-Martin // Eur. Polym. J. - 2020. - V. 137. - P. 109952.

186. Fathi M. Dual thermo-and pH-sensitive injectable hydrogels of chitosan/(poly(N-isopropylacrylamide-co-itaconic acid)) for doxorubicin delivery in breast cancer / M. Fathi, M. Alami-Milani, M.H. Geranmayeh, J. Barar, H. Erfan-Niya, Y. Omidi // Int. J. Biol. Macromol. - 2019. - V. 128. - P. 957-964.

125

Hang C. NIR and UV-responsive degradable hyaluronic acid nanogels for CD44-targeted and remotely triggered intracellular doxorubicin delivery / C. Hang, Y. Zou, Y. Zhong, Z. Zhong, F. Meng // Colloids Surfaces B Biointerfaces. - 2017. - V. 158. - P. 547-555.

188. Wu M. Reduction/photo dual-responsive polymeric prodrug nanoparticles for programmed siRNA and doxorubicin delivery / M. Wu, J. Li, X. Lin, Z. Wei, D. Zhang, B. Zhao, X. Liu, J. Liu // Biomater. Sci. - 2018. - V. 6. - № 6. - P. 1457-1468.

189. Son S. Carboxymethyl dextran-based hypoxia-responsive nanoparticles for doxorubicin delivery / S. Son, N.V. Rao, H. Ko, S. Shin, J. Jeon, H.S. Han, T. Thambi, YD. Suh, J.H. Park // Int. J. Biol. Macromol. - 2018. - V. 110. - P. 399-405.

190. Khatoon S. Hypoxia-Responsive Mesoporous Nanoparticles for Doxorubicin Delivery / S. Khatoon, H.S. Han, J. Jeon, N.V. Rao, D.W. Jeong, M. Ikram, T. Yasin, G.R. Yi, J.H. Park // Polymers. - 2018. - V. 10. - № 4. - P. 390.

191. Eskandari P. Gold-capped mesoporous silica nanoparticles as an excellent enzyme-responsive nanocarrier for controlled doxorubicin delivery / P. Eskandari, B. Bigdeli, M. Porgham Daryasari, H. Baharifar, B. Bazri, M. Shourian, A. Amani, A. Sadighi, B. Goliaei, M. Khoobi, A.A. Saboury // J. Drug Target. - 2019. - V. 27. - № 10. - P. 1084-1093.

192. Fernando I.R. Esterase- and pH-responsive poly(ß-amino ester)-capped mesoporous silica nanoparticles for drug delivery / I.R. Fernando, D.P. Ferris, M. Frasconi, D. Malin, E. Strekalova, MD. Yilmaz, M.W. Ambrogio, MM. Algaradah, MP. Hong, X. Chen, M.S. Nassar // Nanoscale. - 2015. - V. 7. - № 16. - P. 7178-7183.

193. Zheng Y. Enrichment-Triggered prodrug activation demonstrated through mitochondria-Targeted delivery of doxorubicin and carbon monoxide / Y. Zheng, X. Ji, B. Yu, K. Ji, D. Gallo, E. Csizmadia, M. Zhu, M R. Choudhury, L.K. De La Cruz, V. Chittavong, Z. Pan // Nat. Chem. - 2018. - V. 10. - № 7. - P. 787-794.

194. Tacar O. Doxorubicin: An update on anticancer molecular action, toxicity and novel drug delivery systems / O. Tacar, P. Sriamornsak, C.R. Dass // Journal of Pharmacy and Pharmacology. - 2013. - V. 65. - № 2. - P. 157-170.

195. Li S. Transferrin conjugated nontoxic carbon dots for doxorubicin delivery to target pediatric brain tumor cells / S. Li, D. Amat, Z. Peng, S. Vanni, S. Raskin, G. De Angulo, A.M. Othman, R.M. Graham, R.M. Leblanc // Nanoscale. - 2016. - V. 8. - № 37. - P. 1666216669.

196. Hoes M.F. Iron deficiency impairs contractility of human cardiomyocytes through decreased mitochondrial function / M.F. Hoes, N. Grote Beverborg, J.D. Kijlstra, J. Kuipers, D.W. Swinkels, B.N. Giepmans, R.J. Rodenburg, D.J. van Veldhuisen, R.A. de Boer, P. van der Meer // Eur. J. Heart Fail. - 2018. - V. 20. - № 5. - P. 910-919.

197. Aisen P. Transferrin receptor 1 / P. Aisen // Int. J. Biochem. Cell Biol. - 2004. - V. 36. - № 11. - P. 2137-2143.

198. Chen Z. Apoferritin Nanocage for Brain Targeted Doxorubicin Delivery / Z. Chen, M. Zhai, X. Xie, Y. Zhang, S. Ma, Z. Li, F. Yu, B. Zhao, M. Zhang, Y. Yang, X. Mei // Mol. Pharm. - 2017. - V. 14. - № 9. - P. 3087-3097.

199. Thankappan H. Efficient synthesis of cRGD functionalized polymers as building blocks of targeted drug delivery systems / H. Thankappan, A. Zelcak, D. Taykoz, V. Bulmus // Eur. Polym. J. - 2018. - V. 103. - P. 421-432.

200. Zhu Y. CRGD-functionalized reduction-sensitive shell-sheddable biodegradable micelles mediate enhanced doxorubicin delivery to human glioma xenografts in vivo / Y. Zhu, J. Zhang, F. Meng, C. Deng, R. Cheng, J. Feijen, Z. Zhong // J. Control. Release. - 2016. - V. 233. - P. 29-38.

201. Figueiredo P. Angiopep2-functionalized polymersomes for targeted doxorubicin delivery to glioblastoma cells / P. Figueiredo, V. Balasubramanian, M.A. Shahbazi, A. Correia, D. Wu, C.G. Palivan, J.T. Hirvonen, H.A. Santos // Int. J. Pharm. - 2016. - V. 511. - № 2. - P. 794-803.

202. Han S. A novel synergetic targeting strategy for glioma therapy employing borneol combination with angiopep-2-modified, DOX-loaded PAMAM dendrimer / S. Han, H. Zheng, Y. Lu, Y. Sun, A. Huang, W. Fei, X. Shi, X. Xu, J. Li, F. Li // J. Drug Target. -2018. - V. 26. - № 1. - P. 86-94.

203. Zhang B. LDLR-mediated peptide-22-conjugated nanoparticles for dual-targeting therapy of brain glioma / B. Zhang, X. Sun, H. Mei, Y. Wang, Z. Liao, J. Chen, Q. Zhang, Y. Hu, Z. Pang, X. Jiang // Biomaterials. - 2013. - V. 34. - № 36. - P. 9171-9182.

204. Liang M. Enhanced blood-brain barrier penetration and glioma therapy mediated by T7 peptide-modified low-density lipoprotein particles / M. Liang, C. Gao, Y. Wang, W. Gong, S. Fu, L. Cui, Z. Zhou, X. Chu, Y. Zhang, Q. Liu, X. Zhao // Drug Deliv. - 2018. - V. 25. -№ 1. - P.1652-1663.

205. Li J. Targeting the brain with PEG-PLGA nanoparticles modified with phage-displayed peptides / J. Li, L. Feng, L. Fan, Y. Zha, L. Guo, Q. Zhang, J. Chen, Z. Pang, Y. Wang, X. Jiang, V.C. Yang // Biomaterials. - 2011. - V. 32. - № 21. - P. 4943-4950.

206. Wan X.M. Identification of nose-to-brain homing peptide through phage display / X.M. Wan, Y.P. Chen, W.R. Xu, W.J.Yang, LP. Wen // Peptides. - 2009. - V. 30. - № 2. - P.

343-350.

207. Van Rooy I. Identification of peptide ligands for targeting to the blood-brain barrier / I. Van Rooy, S. Cakir-Tascioglu, P.O. Couraud, I.A. Romero, B. Weksler, G. Storm, W.E. Hennink, R.M. Schiffelers, E. Mastrobattista // Pharm. Res. - 2010. - V. 27. - № 4. - P. 673682.

208. Gao H. Glioma-homing peptide with a cell-penetrating effect for targeting delivery with enhanced glioma localization, penetration and suppression of glioma growth / H. Gao, Z. Yang, S. Zhang, S. Cao, Z. Pang, X. Yang, X. Jiang // J. Control. Release. - 2013. - V. 172. - № 3. - P. 921-928.

209. Chen C. Peptide-22 and Cyclic RGD Functionalized Liposomes for Glioma Targeting Drug Delivery Overcoming BBB and BBTB / C. Chen, Z. Duan, Y. Yuan, R. Li, L. Pang, J. Liang, X. Xu, J. Wang // ACS Appl. Mater. Interfaces. - 2017. - V. 9. - № 7. - P. 58645873.

210. Alli S. Brainstem blood brain barrier disruption using focused ultrasound: A demonstration of feasibility and enhanced doxorubicin delivery / S. Alli, C.A. Figueiredo, B. Golbourn, N. Sabha, M Y. Wu, A. Bondoc, A. Luck, D. Coluccia, C. Maslink, C. Smith, H. Wurdak // J. Control. Release. - 2018. - V. 281. - P. 29-41.

211. Park J. Evaluation of permeability, doxorubicin delivery, and drug retention in a rat brain tumor model after ultrasound-induced blood-tumor barrier disruption / J. Park, M. Aryal, N. Vykhodtseva, Y.Z. Zhang, N. McDannold // J. Control. Release. - 2017. - V. 250. - P. 77-85.

212. Zhang Y. Poly(ethylene glycol) shell-sheddable TAT-modified core cross-linked nano-micelles: TAT-enhanced cellular uptake and lysosomal pH-triggered doxorubicin release / Y. Zhang, Y. Xiao, Y. Huang, Y. He, Y. Xu, W. Lu, J. Yu // Colloids Surfaces B Biointerfaces. - 2020. - V. 188. - P. 110772.

213. Yang Y. Reduction-sensitive CD44 receptor-targeted hyaluronic acid derivative micelles

for doxorubicin delivery / Y. Yang, Y. Zhao, J. Lan, Y. Kang, T. Zhang, Y. Ding, X. Zhang, L. Lu // Int. J. Nanomedicine. - 2018. - V. 13. - P. 4361-4378.

214. Li X. Improved efficacy of doxorubicin delivery by a novel dual-ligand-modified liposome in hepatocellular carcinoma / X. Li, W. Diao, H. Xue, F. Wu, W. Wang, B. Jiang, J. Bai, B. Lian, W. Feng, T. Sun, W. Yu // Cancer Lett. - 2020. - V. 489. - P. 163-173.

215. Pi F. RNA nanoparticles harboring annexin A2 aptamer can target ovarian cancer for tumor-specific doxorubicin delivery / F. Pi, H. Zhang, H. Li, V. Thiviyanathan, D.G. Gorenstein, A.K. Sood, P. Guo // Nanomedicine Nanotechnology, Biol. Med. - 2017. - V. 13. - № 3. -P. 1183-1193.

216. Kotcherlakota R. Engineered fusion protein-loaded gold nanocarriers for targeted co-delivery of doxorubicin and erbB2-siRNA in human epidermal growth factor receptor-2+ ovarian cancer / R. Kotcherlakota, D.J. Srinivasan, S. Mukherjee, M.M. Haroon, G.H. Dar, U. Venkatraman, C.R. Patra, V. Gopal // J. Mater. Chem. B. - 2017. - V. 5. - № 34. - P. 7082-7098.

217. Meng L. Trastuzumab modified silica nanoparticles loaded with doxorubicin for targeted and synergic therapy of breast cancer / L.X. Meng, Q. Ren, Q. Meng, Y.X. Zheng, M.L. He, S.Y. Sun, Z.J. Ding, B.C. Li, H.Y. Wang // Artif. Cells, Nanomedicine, Biotechnol. -2018. - V. 46. - № 3. - P. S556-S563.

218. Hyun H. Engineered beta-cyclodextrin-based carrier for targeted doxorubicin delivery in breast cancer therapy in vivo / H. Hyun, S. Lee, W. Lim, D. Jo, J.S. Jung, G. Jo, S.Y. Kim, D.W. Lee, S. Um, D.H. Yang, H.J. Chun // J. Ind. Eng. Chem. - 2019. - V. 70. - P. 145151.

219. Wu Y.P. Folate-Conjugated Halloysite Nanotubes, an Efficient Drug Carrier, Deliver Doxorubicin for Targeted Therapy of Breast Cancer / Y.P. Wu, J. Yang, H.Y. Gao, Y. Shen, L. Jiang, C. Zhou, Y.F. Li, R.R. He, M. Liu // ACS Appl. Nano Mater. - 2018. - V. 1. - № 2. - P. 595-608.

220. Baneshi M. A novel theranostic system of AS1411 aptamer-functionalized albumin nanoparticles loaded on iron oxide and gold nanoparticles for doxorubicin delivery / M. Baneshi, S. Dadfarnia, A.M. Shabani, S.K. Sabbagh, S. Haghgoo, H. Bardania // Int. J. Pharm. - 2019. - V. 564. - P. 145-152.

221. Aghanejad A. Mucin-1 aptamer-armed superparamagnetic iron oxide nanoparticles for

targeted delivery of doxorubicin to breast cancer cells / A. Aghanejad, H. Babamiri, K. Adibkia, J. Barar, Y. Omidi // Biolmpacts. - 2018. - V. 8. - № 2. - P. 117-127.

222. Obayemi J.D. LHRH-Conjugated Drugs as Targeted Therapeutic Agents for the Specific Targeting and Localized Treatment of Triple Negative Breast Cancer / J.D. Obayemi, A.A. Salifu, S.C. Eluu, V.O. Uzonwanne, S.M. Jusu, C.C. Nwazojie, C.E. Onyekanne, O. Ojelabi, L. Payne, C M. Moore, J.A. King // Scientific Reports. - 2020. - V. 10. - № 1. - P. 8212-8212.

223. Varshosaz J. Targeted delivery of doxorubicin to breast cancer cells by magnetic LHRH chitosan bioconjugated nanoparticles / J. Varshosaz, F. Hassanzadeh, H.S. Aliabadi, F.R. Khoraskani, M. Mirian, B. Behdadfar // Int. J. Biol. Macromol. - 2016. - V. 93. - P. 11921205.

224. De Ric Frottin F. The Proteomics of N-terminal Methionine Cleavage*S / F. Frottin, A. Martinez, P. Peynot, S. Mitra, R.C. Holz, C. Giglione, T. Meinnel // Mol. Cell. proteomics. - 2006. - V. 5. - № 12. - P. 2336-2349.

225. Pace C.N. A Helix Propensity Scale Based on Experimental Studies of Peptides and Proteins / C.N. Pace, J.M. Scholtz // Biophysical journal. - 1998. - V. 75. - № 1. - P. 422427.

226. Dockal M. The three recombinant domains of human serum albumin. Structural characterization and ligand binding properties / M. Dockal, D.C. Carter, F. Ruker // J. Biol. Chem. - 1999. - V. 274. - № 41. - P. 29303-29310.

227. Perticaroli S. Rigidity, secondary structure, and the universality of the boson peak in proteins / S. Perticaroli, J.D. Nickels, G. Ehlers, A.P. Sokolov // Biophys. J. - 2014. - V. 106. - № 12. - P. 2667-2674.

228. Sherman W. Use of an induced fit receptor structure in virtual screening / W. Sherman, H.S. Beard, R. Farid // Chemical Biology and Drug Design. - 2006. - V. 67. - № 1. - P. 83-84.

229. Miotto M. Insights on protein thermal stability: a graph representation of molecular interactions / M. Miotto, P.P. Olimpieri, L. Di Rienzo, F. Ambrosetti, P. Corsi, R. Lepore, G.G. Tartaglia, E. Milanetti // Bioinformatics. - 2019. - V. 35. - № 15. - P. 2569-2577.

230. Moro R. Peptides That Bind the Alpha-Fetoprotein (AFP) Receptor and Uses Thereof [Патент] / R. Moro / US20120270238A1 USA. - 2010.

231. Piszkiewicz D. Anomalous cleavage of aspartyl-proline peptide bonds during amino acid sequence determinations / D. Piszkiewicz, M. Landon, E.L. Smith // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1970. - V. 40. - № 5. - P. 1173-1178.

232. Shen W.C. Cis-aconityl spacer between daunomycin and macromolecular carriers: A model of pH-sensitive linkage releasing drug from a lysosomotropic conjugate / W.C. Shen, H.J.P. Ryser // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1981. - V. 102. - № 3. - P. 1048-1054.

233. Meldal M. Cu-Catalyzed Azide-Alkyne Cycloaddition / M. Meldal, C.W. Torn0e // Chem. Rev. - 2008. - V. 108. - № 8. - P. 2952-3015.

234. Bidlack W.R. Casarett & Doull's Toxicology: The Basic Science of Poisons, 6th ed. / W.R. Bidlack // J. Am. Coll. Nutr. - 2002. - V. 21. - № 3. - P. 289-290.

235. Russel R. Dietary reference intakes : Vitamin A, vitamin K, arsenic, boron, chromium, copper, iodine, iron, manganese, molybdenum, nickel, silicon, vanadium, and zinc / R. Russell, J.L. Beard, R.J. Cousins, J.T. Dunn, G. Ferland, K. Hambidge, S. Lynch, J.G. Penland, A C. Ross, B.J. Stoecker, J.W. Suttie // J. Am. Diet. Assoc. - 2001. - V. 101. - № 3. - P. 797.

236. Green M.R. Molecular Cloning: a Laboratory Manual. 4th ed. / M.R. Green, J. Sambrook. - New York: Cold spring harbor laboratory press, 2012. - 2028 p.

237. Inoue H. High efficiency transformation of Escherichia coli with plasmids / H. Inoue, H. Nojima, H. Okayama // Gene. - 1990. - V. 96. - № 1. - P. 23-28.

238. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature. - 1970. - V. 227. - № 5259. - P. 680-685.

239. Koontz L. TCA precipitation / L. Koontz // Methods in Enzymology. - 2014. - V. 541. - P. 3-10.

240. Smith P.K. Measurement of protein using bicinchoninic acid / P.E. Smith, R.I. Krohn, G.T. Hermanson, A.K. Mallia, F.H. Gartner, M. Provenzano, E.K. Fujimoto, N.M. Goeke, B.J. Olson, D C. Klenk // Anal. Biochem. - 1985. - V. 150. - № 1. - P. 76-85.

241. Schagger H. Tricine-SDS-PAGE / H. Schagger // Nat. Protoc. - 2006. - V. 1. - № 1. - P. 1622.

242. Boyum A. Isolation of mononuclear cells and granulocytes from human blood. Isolation of monuclear cells by one centrifugation, and of granulocytes by combining centrifugation and

sedimentation at 1 g / A. Boyum // Scand. J. Clin. Lab. Investig. - 1968. - V. 97. - P. 77-89.

243. Denizot F. Rapid colorimetric assay for cell growth and survival. Modifications to the tetrazolium dye procedure giving improved sensitivity and reliability / F. Denizot, R. Lang // J. Immunol. Methods. - 1986. - V. 89. - № 2. - P. 271-277.

244. Adler J. Quantifying colocalization by correlation: The Pearson correlation coefficient is superior to the Mander's overlap coefficient / J. Adler, I. Parmryd // Cytom. Part A. - 2010. - V. 77A. - № 8. - P. 733-742.

245. Gusakov A.V. Mass spectrometry in the study of extracellular enzymes produced by filamentous fungi / A.V. Gusakov, M.V. Semenova, A.P. Sinitsyn // Journal of Analytical Chemistry. - 2010. - V. 65. - № 14. - P. 1446-1461.

246. Whitmore L. DICHROWEB, an online server for protein secondary structure analyses from circular dichroism spectroscopic data / L. Whitmore, B.A. Wallace // Nucleic Acids Res. -2004. - V. 32. - P. W668-W673.

247. Whitmore L. Protein secondary structure analyses from circular dichroism spectroscopy: Methods and reference databases / L. Whitmore, B.A. Wallace // Biopolymers. - 2008. - V. 89. - № 5. - P. 392-400.

248. Abdul-Gader A. A reference dataset for the analyses of membrane protein secondary structures and transmembrane residues using circular dichroism spectroscopy / A. Abdul-Gader, A.J. Miles, B.A. Wallace // Bioinformatics. - 2011. - V. 27. - № 12. - P. 1630-1636.

Приложение А

[000

3000

2000

1000

0

Рис. А1. Спектр фрагментации (МЛЬБ1-М8/М8) пептида 1217 Да, фрагмента гЬёЛБР.

[000

5000

4000

3000

2000

1000

0

Рис. А2. Спектр фрагментации (МЛЬБ1-М8/М8) пептида 1968 Да, фрагмента гЬёЛБР.

^ли

11

Ап

пЛА

34

250

500

/50

2000

2250

x104-"

2 .0 -

дШ.

bJh

Jjj

U

Ja

ди!,

JkJklA

250 500 750 1000 1250 1500 1750 2000 2250 2500

Рис. А3. Спектр фрагментации (MALDI-MS/MS) пептида 2249 Да, фрагмента rbdAFP.

»д!

¡i

Ulli

^WmIWJ*

i

U»

Рис. А4. Спектр фрагментации (MALDI-MS/MS) пептида 3457 Да, фрагмента rbdAFP.

.5

0.5

8000

ÖUUU

12

32

32

32

32

34

34

м

34

4000

2000

500

000

1500

2000

2500

3000

3500

4000

0,75

0,35- _

0,300,25 -----

0,200,15- -ITTZ__""""-""-" —-—

0,100,050,00 -I-1-т-1-i-1-i-1-i-1-1-1-i-1-i-1-1

20 30 40 50 60 70 80 90

T, °C

Рис. А5. Изменение оптической плотности при 220 нм от температуры для рекомбинантных доменов III (rbdAFP, rbdAFPpGlu4, rbdAFP-histag) и полноразмерного нативного АФП.

Рис. А6. Электрофореграмма образцов гидролиза АБРрер5. А1 - Ж 24ч; А2 - Ж 48ч; А3 - Ж 72ч; А4 - Ж 96ч; А5 - Ж 120ч; Б1 - К 0,5ч; Б2 - К 1ч; Б3 - К 2ч; Б4 - К 3ч; Б5 - К 4ч; Б6 - К 5ч; Б7 - К 6ч; Б8 - К 8ч; Б9 - К 10ч; Б10 - альфа цепь инсулина (2.5 кДа); В1 - альфа цепь инсулина (2.5 кДа); В2 - Л 24ч; В3 - Л 48ч; В4 - Л 72ч; В5 - М 24ч; В6 - М 48ч; В7 -М 72ч; В8 - Г 72ч; В9 - АБРрер5; Г1 - АБРрер5; Г2 - Е 24ч; Г3 - Е 48ч; Г4 - Е 72ч; Г5 - Е 96ч; Г6 - Е 120ч; Д1 - З 0,5ч; Д2 - З 1ч; Д3 - З 2ч; Д4 - З 3ч; Д5 - З 4ч; Д6 - З 5ч; Д7 - З 6ч; Д8 - З 8ч; Д9 - З 10ч; Д10 - альфа цепь инсулина (2.5 кДа); Е1 - АБРрер5; Е2 - И 0,5ч; Е3 - И

1ч; Е4 - И 2ч; Е5 - И 3ч; Е6 - И 4ч; Е7 - И 5ч; Е8 - И 6ч; Е9 - И 8ч; Е10 - И 10ч. Описания условий гидролиза приведены в таблице 10 экспериментальной части работы.

Рис. А7. Спектр (MALDI-MS/MS) фрагментации формил-PLEHHHHH.

Таблица А1. Пептиды, обнаруженные в гидролизной смеси ЛРРрер5 методом ВЭЖХ-МС/МС.

Rt [мин1 Измеренное т^ Моноизотопная масса z А т^ ||)|)111| Интенсивность 8соге Последовательность Модификации

1,11 118,0864 117,0790 1 0,88 12 190 31,0 Ь.У.К

15,02 937,9925 1873,9760 2 -2,96 3 898 16,4 -^ОУЛЬОТМКОЕРЫКЬ

15,06 618,6003 2470,3770 4 -1,95 16 810 40,3 -^ОУЛЬОТМКОЕРЬЕЧЬУКОК.Р

15,14 605,9355 3024,6470 5 -1,92 7 732 19,3 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.-

15,14 757,1676 3024,6470 4 -1,96 1 907 000 57,5 -^0УЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.-

15,17 1009,2208 3024,6470 3 -2,09 299 500 56,8 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.-

15,21 728,4109 2909,6201 4 -1,91 96 970 63,1 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б

15,21 970,8787 2909,6201 3 -1,97 18 360 48,2 -^0УЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б

15,21 970,8787 2909,6201 3 -1,97 18 360 48,2 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б

15,32 764,1659 3052,6420 4 -2,50 450 300 47,0 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 1

15,36 735,4093 2937,6150 4 -2,42 22 340 46,9 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 1

15,36 735,4093 2937,6150 4 -2,42 22 340 46,9 -^0УЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 1

15,65 764,1660 3052,6420 4 -2,27 444 300 50,3 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 8

15,65 1018,5522 3052,6420 3 -2,34 81 540 51,2 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 8

15,69 735,4090 2937,6150 4 -2,71 20 220 40,2 -^0УЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 10

15,69 980,2080 2937,6150 3 -4,41 4 866 18,8 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 8

15,69 980,2080 2937,6150 3 -4,41 4 866 18,8 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 10

15,69 980,2080 2937,6150 3 -4,41 4 866 18,8 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 8

15,69 980,2080 2937,6150 3 -4,41 4 866 18,8 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 10

15,81 771,1638 3080,6369 4 -3,43 83 200 43,0 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 1, 8

16,20 1018,5520 3052,6420 3 -2,60 34 540 40,7 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 21

16,20 1018,5520 3052,6420 3 -2,60 34 540 44,2 -^0УЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 19

16,27 739,0802 2214,2235 3 -2,12 9 206 50,4 -^ОУЛЬОТМКОЕРЬЕЧЬУК.О

16,36 1027,8834 3080,6369 3 -2,71 8 196 15,1 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 1, 21

16,63 1027,8830 3080,6369 3 -3,10 7 936 20,6 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 8, 19

16,63 1027,8830 3080,6369 3 -3,10 7 936 17,9 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 10, 21

18,04 1018,5544 3052,6420 3 -0,15 167 400 47,0 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 10

18,04 1018,5544 3052,6420 3 -0,15 167 400 59,6 -^ОУЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01ТБ.- Формил: 1

18,07 980,2118 2937,6150 3 -0,49 11 460 25,0 -^0УЛЬ0ТМК0ЕРЬЕЧЬУК0КР01Т.Б Формил: 1