Разработка новых пиридин-содержащих макроциклических и ациклических комплексонов как компонентов радиофармпрепаратов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Щукина Анна Алексеевна

• Щукина Анна Алексеевна
• кандидат наук
• 2024

Оглавление диссертации кандидат наук Щукина Анна Алексеевна

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Подходы к синтезу ациклических лигандов

2.1.1. Синтез гибких полиаминных лигандов

2.1.2. Введение жестких фрагментов в структуру ациклических лигандов

2.2. Комплексообразующие свойства ациклических лигандов

2.3. Применение комплексонов в качестве компонентов радиофармпрепаратов

2.3.1. Бифункциональные производные хелаторов и их конъюгаты с векторными молекулами

2.3.2. Применяемые в клинической практике радиофармпрепараты на основе радионуклидных комплексов

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

3.1. Синтез комплексонов

3.1.1. Синтез пиридинсодержащих макроциклических комплексонов

3.1.2. Синтез полиаминных ациклических комплексонов

3.1.3. Синтез пиридинсодержащих ациклических комплексонов

3.1.4. Синтез бифункциональных комплексонов

3.2. Исследование комплексообразующих свойств лигандов

3.2.1. Исследование комплексообразующих свойств пиколинатных лигандов

3.2.2. Исследование комплексообразующих свойств ацетатных лигандов

3.2.3. Исследование комплексообразующих свойств ацетамидных лигандов

3.3. Бифункциональные хелаторы как компоненты радиофармпрепаратов

4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

5. ВЫВОДЫ

6. ПРИЛОЖЕНИЕ

7. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ПУБЛИКАЦИЙ АВТОРА ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ

АПТЭС - 3-(аминопропил)триэтоксисилан (аминосилановый аппрет) БФХ - Бифункциональные производные хелаторов ВЭЖХ Высокоэффективная жидкостная хроматография Д2ЭГФК - Ди(2-этилгексил)фосфорная кислота д - Дублет

ДМФА - N, N - Д имети л формамид

ДМСО - Диметилсульфоксид

ДНК - Дезоксирибонуклеиновая кислота

ЖМКО - Принцип жёстких и мягких кислот и оснований Пирсона ИК - Инфракрасный

ИЭР - Ионизация при электрораспылении

кв — Квадруплет

КЧ - Координационное число

ЛПЭ - Линейная передача энергии

м - Мультиплет

м. д. — Миллионная доля

МАЛДИ - Матрично-активированная лазерная десорбция МРТ - Магнитно-резонансная томография Нозил - 2-нитробензолсульфонил

ОФЭКТ - Однофотонная эмиссионная компьютерная томография

ПСМА - Простатспецифический мембранный антиген

ПЭТ Позитронно-эмиссионная томография

РЗЭ - Редкоземельные элементы

РСА — Рентгеноструктурный анализ

РФП - Радиофармпрепарат

с — Синглет

с.уш. - Уширенный синглет т - Триплет

ТГФ - Тетрагидрофуран

ТМС - Тетраметилсилан

Тозил - и-толуолсульфанильная группа

ТСХ - Тонкослойная хроматография

ТФУ - Трифторуксусная кислота

ФБС — Фетальная бычья сыворотка

ЭХГ — Эпихлоргидрин

ЯМР — Ядерный магнитный резонанс

Вое - /иреот-бутоксикарбонильная группа

COSY - Двумерная гомоядерная корреляционная спектроскопия

DIPEA - Диизопропилэтиламин

DFT — Теория функционала электронной плотности

DMAP 4-диметиламинопиридин

DOTA - 1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7,10-тетрауксусная кислота

DTPA - Диэтилентриаминпентауксусная кислота

ЕС - Двойной электронный захват

EDC - 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид

EDTA - Этилендиаминтетрауксусная кислота (Трилон Б)

HATU - Гексафторфосфат азабензотриазол тетраметилуроний

HEPES — 4-(2-Гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновая кислота

НМВС - Двумерная гетероядерная корреляционная спектроскопия через

несколько связей

НМТА - Гексаметилентетрамин

HOBt - Гидроксибензотриазол

HSQC Двумерная гетероядерная корреляционная спектроскопия через одну химическую связь

in vitro — лат. «в стекле», в искусственных условиях вне организма

in vivo — лат. «в (на) живом», в условиях эксперимента на живом организме

NHS - N-гидроксисукцинимид

ORTEP - Представление молекулярной структуры, определенное методом дифракции рентгеновских лучей

SHF@Si02 - Наночастицы гексаферрита стронция, покрытые диоксидом кремния

TBAI - Йодид тетрабутиламмония

ТСЕР - Трис(2-карбоксиэтил)фосфин

TMSBr - Бромотриметилсилан

Т]/2- Период полураспада

Еа _ - Альфа-распад

Eß+ - Позитронный распад

Ер- - Бета-распад

J - Константа спин-спинового взаимодействия L - Лиганд

log К - Логарифм константы устойчивости комплекса

М - Катион металла; Молекулярный ион (в масс-спектрах); Единица измерения концентрации (моль/л)

m/z - Отношение массы к заряду (в масс-спектрах) Ру - Пиридин 8 - Химический сдвиг

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка новых пиридин-содержащих макроциклических и ациклических комплексонов как компонентов радиофармпрепаратов»

1. ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Координационные соединения нашли широкое применение во многих областях науки благодаря возможности селективного связывания катионов металлов лигандами. Одним из важных применений координационных соединений является ядерная медицина, где комплексные соединения лигандов с радионуклидами используются в качестве фрагментов радиофармпрепаратов для лечения и диагностики онкологических заболеваний. Практически значимые комплексоны подразделяются на два больших класса: макроциклические и ациклические соединения. В области ядерной медицины за последние несколько десятилетий было разработано много ациклических и макроциклических хелатирующих лигандов для различных радионуклидов, главным образом на основе ациклического лиганда DTPA (диэтилентриаминпентауксусная кислота) и макроциклического DOTA (1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7,10-тетрауксусная кислота). Однако остается актуальной проблема поиска новых комплексонов, так как существующие в настоящее время хелаторы все еще обладают рядом недостатков, ограничивающих их медицинское применение, поэтому применяемые в практике терапевтические радиофармпрепараты немногочисленны. В последние годы работы по получению новых радиофармпрепаратов активно расширяются в связи с разработкой новых методов диагностики с использованием радиоизотопов, в связи с этим резко увеличивается потребность в новых хелатирующих агентах. Кроме того, для создания таргетного радиофармпрепарата необходимо связать комплекс радионуклида с биомолекулой, обеспечивающей направленную доставку активного компонента в опухолевые клетки, поэтому важной задачей является разработка бифункциональных производных лигандов, содержащих группы для конъюгации хелатора и молекулы-вектора.

Степень разработанности темы исследования. Накоплен обширный материал по синтезу и комплексообразующим свойствам лигандов в области радиофармпрепаратов в виде публикаций, научных работ и обзоров в научных журналах. За годы изучения этих соединений было показано, что структура

лиганда и тип хелатирующих групп влияют на устойчивость, стехиометрию комплексов и селективность к различным катионам металлов, что определяет их возможность применения в составе радиофармпрепаратов. В литературе описаны ациклические и макроциклические хелаторы для применения в области ядерной медицины, а также изучены их комплексообразующие свойства. Тем не менее, многие хелаторы имеют недостатки, такие как медленная кинетика комплексообразования и невысокая кинетическая инертность образуемых комплексов. Поэтому задача данного исследования состояла в разработке новых хелаторов с различными хелатирующими группами и исследовании их комплексообразующих свойств для оценки возможности применения в составе радиофармпрепаратов.

Цель и задачи работы. Целью данной работы является синтез и исследование новых пиридинсодержащих ациклических и макроциклических хелаторов, перспективных для применения в составе радиофармпрепаратов.

Задачами данной работы явились: 1) разработка методов получения новых ациклических полиаминных и пиридинсодержащих комплексонов с различными хелатирующими группами (ацетатные, пиколинатные, фосфонатные, сукцинаматные, пиридильные, ацетамидные); 2) синтез макроциклических хелаторов на основе азакраун-эфиров; 3) изучение комплексообразующих свойств полученных хелаторов с катионами ва , У , В1 , № , Си^ , ЪсС и РЬ" различными физико-химическими методами анализа; 4) разработка бифункциональных комплексонов для радиофармацевтического применения.

Научная новизна.

• Синтезирован ряд неописанных ранее ациклических полиаминных и пиридинсодержащих хелаторов и макроциклических хелаторов на основе азакраун-эфиров.

• Разработан новый метод введения комбинированных хелатирующих групп (пиридильные, ацетатные, фосфонатные, сукцинаматные, ацетамидные) в структуру ациклических полиаминных лигандов.

• Изучены комплексообразующие свойства полученных лигандов с катионами Ga3f, Y,+, Bi3+, Ni2H, Cu2+, Zn2 и Pb2+, определена структура образующихся комплексов и измерены константы устойчивости, проанализирована устойчивость образующихся комплексов в зависимости от структуры, состава лиганда и координационных характеристик металла.

• Проведено тестирование кинетической инертности синтезированных комплексов ацетатных и пиколинатных лигандов in vitro, проанализирована зависимость устойчивости комплексов в биологической среде от их структуры.

• Показана возможность модификации пиридинового кольца карбоксильными функциональными группами и создание бифункциональных производных макроциклических хелаторов, которые были конъюгированы с наночастицами.

Теоретическая и практическая значимость работы.

• Предложен подход к синтезу ациклических лигандов из азакраун-эфиров, позволяющий получать хелаторы, комбинирующие в своем составе хелатирующие группы различного типа.

• Выявлены хелаторы с включением пиридинового фрагмента, образующие устойчивые комплексы in vitro с Ga3+, Y,+, Bi,+, перспективные для использования в составе радиофармпрепаратов.

• Предложены методы введения карбоксильных функциональных групп в состав хелаторов с ацетатными хелатирующими группами для конъюгирования с биомолекулой.

Методология и методы диссертационного исследования основаны на анализе литературных данных, разработке методов синтеза лигандов из коммерчески доступных реагентов. Полученные соединения были охарактеризованы с использованием физико-химических методов анализа,

1 13 31

включая Н, С, Р ЯМР спектроскопию, в том числе двумерную, масс-спектрометрию, элементный анализ, ИК-спектроскопию. Комплексообразование синтезированных лигандов с катионами металлов изучалось с использованием 'Н ЯМР-спектроскопии, в том числе двумерной, масс-спектрометрии, ВЭЖХ-

ю

анализа, потенциометрического титрования, спектрофотометрического титрования, РСА, DFT-расчетов, исследований in vitro и in vivo.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Синтез ряда новых макроциклических и ациклических комплексонов с ацетатными, пиколинатными, фосфонатными, сукцинаматными, пиридильными и ацетамидными хелатирующими группами.

• Макроциклизация полиаминов в амидные пиридинсодержащие азакраун-соединения в качестве метода защиты первичных аминогрупп.

• Синтез бифункциональных производных комплексонов.

• Изучение комплексообразующих свойств полученных хелаторов с катионами Ga3+, Y3+, Bi'+, NÍ2+, Cu2+, Zn2+ и Pb2+ с применением ряда методов физико-химического анализа.

• Оценка полученных комплексонов как потенциальных компонент радиофармпрепаратов.

Личный вклад автора. Автор диссертации участвовал в анализе литературных данных, обсуждении задач, решаемых в диссертационной работе, подготовке и проведении экспериментов, разработке методик синтеза новых соединений, проведении физико-химических исследований, интерпретации полученных результатов и их обобщении, формулировке основных научных выводов, а также в написании научных публикаций и представлении докладов по теме диссертации на конференциях различного уровня.

Данная работа выполнена при финансовой поддержке грантов РНФ № 16-13-10226, 19-73-20187, 19-53-18010X19, 21-73-20158, 23-13-00424, 23-73-01270, а также ГЗ №075-00277-24-00, тема FFSF-2022-0017.

Автор выражает особую благодарность к.х.н. Зубенко А.Д., к.х.н. Черниковой Е.Ю., д.х.н. Федорову Ю.В., к.х.н. Егоровой Б.В., Иконниковой И.С., Карноуховой В.А., Хабировой С.Ю., к.х.н. Алешину Г.Ю., к.х.н. Ларенкову A.A., Бубенщикову В.Б., к.х.н. Митрофанову A.A., Меньшикову М.А., Тарасенко О.В., а также коллективам лабораторий №107 и №135 и лаборатории микроанализа №118

за участие в постановке экспериментов и обсуждении полученных результатов на разных этапах работы.

Степень достоверности полученных результатов обеспечивалась использованием совокупности современных физико-химических методов установления строения и исследования свойств полученных соединений; отсутствием противоречий между выводами, сделанными в результате выполнения работы, и известными литературными данными; экспертной оценкой редакционных коллегий высокоцитируемых журналов, в которых были опубликованы результаты данной работы.

Апробация работы. По материалам диссертации опубликовано 9 статей (7 - в отечественных и иностранных научных изданиях, рекомендованных ВАК, 2 - в журнале, включенном в РИНЦ) и 14 тезисов докладов. Основные результаты данной работы были представлены на следующих конференциях: «New Emerging Trends in Chemistry» Conference (NewTrendsChem-2023) (Ереван, Армения, 2023); Всероссийская конференция с международным участием «Идеи и наследие А.Е. Фаворского в органической химии» (Санкт-Петербург, Россия, 2023); 2nd International symposium «Noncovalent interactions in synthesis, catalysis and crystal engineering» (Москва, Россия, 2022); XXV Всероссийская конференция молодых ученых-химиков (с международным участием) (Нижний Новгород, Россия, 2022); IX Молодежная конференция ИОХ РАН (Москва, Россия, 2021); Всероссийская конференция «Марковниковские чтения: Органическая химия от Марковникова до наших дней» (WSOC-2021, WSOC-2022), (Сочи, Россия, 2021, 2022); «MENDELEEV 2021» The XII International Conference on Chemistry for Young Scientists (Санкт-Петербург, Россия, 2021); Открытый конкурс-конференция научно-исследовательских работ по химии элементоорганических соединений и полимеров «ИНЭОС OPEN CUP» (Москва, Россия, 2019, 2021); «Актуальные аспекты химической технологии биологически активных веществ» (Москва, Россия, 2020); Всероссийская конференция «Марковниковские чтения: Органическая химия от Марковникова до наших дней» (WSOC-2020) (Красновидово, Россия, 2020); International Conference «Chemistry of

12

Organoelement Compounds and Polymers 2019» (Москва, Россия, 2019); XV Международный конгресс молодых ученых по химии и химической технологии «МКХТ-2019» (Москва, Россия, 2019).

Объем и структура работы. Диссертационная работа общим объемом 252 страницы состоит из введения, литературного обзора, обсуждения результатов, экспериментальной части, выводов и приложения и содержит 57 схем, 10 таблиц и 250 рисунков. Список литературы включает 177 наименований.

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

Структура данного литературного обзора включает в себя три раздела. Первый раздел посвящен методам получения ациклических комплексонов с различными хелатирующими группами. Подходы к синтезу макроциклических комплексонов ранее были подробно рассмотрены в обзоре [1]. Во втором разделе описано исследование комплексообразования хелаторов с катионами радионуклидов для оценки их возможности применения в качестве компонентов радиофармпрепаратов. Третий раздел включает в себя описание структур и свойств бифункциональных хелаторов, методов их конъюгации с векторными молекулами, а также рассмотрение уже используемых в клинической практике радиофармпрепаратов на основе комплексов макроциклических и ациклических лигандов с радионуклидами.

2.1. Подходы к синтезу ациклических лигандов

Большинство ациклических хелаторов можно разделить на два класса: основанные на гибкой полиаминной цепочке и более структурно жесткие лиганды. Открытая структура лигандов обеспечивает конформационную подвижность и быстрое хелатирование катионов металлов, а введение жесткого фрагмента в состав молекулы приводит к увеличению кинетической устойчивости образуемых комплексов.

В синтезе ациклических лигандов часто необходимо использование селективных защитных групп первичных аминов в присутствии вторичных, что является сложной синтетической задачей. Часто используемое введение бензильных и нозильных защитных групп не позволяет полностью защитить терминальные аминогруппы. Например, реагенты для защиты первичных аминов, такие как фенилбис(2-тионо-1,3-тиазолин-3-ил)фосфиноксид или трифенилфосфин-2,2'-дипиридилдисульфид, перед использованием требуют многостадийного синтеза [2,3]. В статьях [4-6] хемоселективное 1Ч-ацилирование первичных аминов проводили в присутствии вторичных аминов при обработке

аци л цианидами. Также катализируемое рутением ацилирование первичных аминов нитрилами в присутствии воды протекает хемоселективно в присутствии вторичных аминов [7]. Удаление бензильных групп происходит каталитическим гидрированием над Рё/С в среде МеОН-5% АсОН или обработкой гидразином, но процедура очистки сложна. Этилтрифторацетат, который реагирует только с первичными аминогруппами с образованием трифторацетамидов, является важной защитной группой первичных аминов [8]. Трифторацетамидная группа легко гидролизуется в присутствии слабого основания (например, К2С03), что ограничивает применение такого рода защитной группы для соединений, участвующих в реакциях в основных средах. Тритилхлорид как альтернатива трифторацетильной защитной группе для защиты линейных тетрааминов, более устойчив в основных средах [9].

Лиганд ЕБТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) является одним из старейших и популярных лигандов и имеет широкий спектр применений не только в области ядерной медицины, но и в фотографии, косметике, чистящих средствах, производстве синтетических смол и т.п. Лиганд обладает высоким сродством к ионам щелочноземельных металлов и тяжелых металлов, образуя достаточно устойчивые комплексы [10,11]. Он продается по всему миру под 30 различными торговыми марками, и его использование в мире постоянно растет [12]. Разработано множество методов получения ЕОТА, например, одним из методов получения является взаимодействие этилендиамина, NaCN и формалина в присутствии щелочи при температуре 60-150°С, как показано на схеме 1 [13].

2.1.1. Синтез гибких полиамиииых лигандов

Схема 1

/ \ + 4№СИ + 4НСНО Н7И ГШ,

он", н2о

/ \

КаООС

СОО№

ЕПТЛ-4Ш, 40-50%

Самым популярным ациклическим лигандом в области ядерной медицины в настоящее время является DTPA (диэтилентриаминпентауксусная кислота), который применяется в составе многих радиофармпрепаратов [14—17]. Способы получения DTPA весьма разнообразны [18]. Например, DTPA можно получить из гидроксиацетонитрила и диэтилентриамина (Схема 2) [19].

Схема 2

NC.

HCl 1 5 NaOH

+ 5HOCHXN -. NC^lSr"^

N NH2 - - - ^ - | |

H NC^ ! CN 5H=°

NaOOC-_

HOOC^

NaOOC N "-'" ^ N COONa NaOOC"^ „ ^COONa

1ЮОС Ч'ООП

DTPA, 95% (3 стадии)

Одним из популярных открытоцепных лигандов в литературе в настоящее время является лиганд Н4ое1ара (1Ч,1\Г-бис(6-карбокси-2-

пиридилметил)этилендиамин-М,№-диуксусная кислота). Первый синтез Н4ое1ара был опубликован Плата-Иглесиасом с сотр. в 2004 г. [20]. Комплексен получали в пять стадий из диметилового эфира 2,6-пиридиндикарбоновой кислоты с использованием реакции восстановительного аминирования. Однако данная реакция осложняется образованием побочных продуктов в фрагменте пиколиновой кислоты, защищенном метиловым эфиром, путем превращения их в смесь карбоновых кислот и первичных спиртов под действием №ВН4. При алкилировании соединения 5 этилбромацетатом в кипящем МеСМ в присутствии Ма2СОз наблюдалось образование лактамов и межмолекулярных побочных продуктов, однако алкилирование трет - бут и л о в ы м эфиром бромуксусной кислоты в аналогичных условиях дает соединение 6 с выходом 26%. Снятие защиты с метилового и Ш£>еш-бутилового эфиров с помощью 6 М НС1 приводило к получению лиганда Н^^ара. Кроме того из прекурсора 5 путем кислотного гидролиза в 6 М НС1 получали ациклический лиганд Н2с1ес1ра [21,22]. При этом в статье [23] лиганд Н4ос1ара был синтезирован Ы-алкилированием прекурсора 5

шреш-бутиловым эфиром бромуксусной кислоты при комнатной температуре в ацетонитриле с последующим снятием защиты метилового и /»/? ««-бутилового эфиров 6 М НС1, что увеличивает общий выход на двух последних стадиях до 59% по сравнению с описанной ранее методикой с использованием кипящего ацетонитрила (21%) [20] (Схема 3). Использование более мягких условий алкилирования требует более длительного времени реакции (несколько дней), но значительно повышает выход реакции, что, скорее всего, минимизирует образование лактамов и солей четвертичного аммония в результате полиалкилирования.

Схема 3

/ \ _ / \ _ /—\ ])1^ВН4,МеОН _ЫаВН4,МеОН

МеООС N СООМе f СООМе \ //

О 3,70%

СООМе СООМе

4, 80%

6М НС1, д

/ ВиООС—у /—V /—СОО/-Ви НООС^. ,—V /— СООН ВгСНХООг-Ви, V V ш НС1 д / ^н НН №2СОэ, MeCN \__' \_л ,=<

о О О

А или Ткомн. , , ,_, ___

СООМе СООМе СООН НООС СООН НООС

6, 21 -59 % (2 стадии) Н40<*ара, 81 % Н2(1е[1ра, 53%

Из-за популярности этого лиганда были усовершенствованы методы его синтеза. Орвиг с сотр. разработали синтез Н4ос1ара, а также Н2(1ес1ра, основанный на нозил-защищенном этилендиамине [24] (Схема 4). Повышенная лабильность защитной группы шрет-бутилового эфира привела к некоторому разложению во время синтеза, что частично отвечает за снижение выхода. Кроме того, во время хроматографии с использованием метанола из бутилового

эфира образовывался некоторый продукт метилового эфира, что приводило к образованию побочных продуктов и снижению выхода [23,24].

N0,

N Т00/-Ви

О-Л

02Ы 028-НЫ №N1—Э02 N02

Н

Вг

-К №

^ На2С03,ДМФА, 80 °С \

СООг-Ви СООг-Ви 7, 55%

ЯН

-Ш HN

\ N N

/-ВиООС—■у /-х ^СООг-Ви

->/ V

ВгСН,СОО(-Ви

' > ч

// \МеС1Ч, Ш2С03, 60 "С \ //

К,С03, ТГФ, 50 °С СООг-Ви С00;-Ви 8. 80%

СР3СООН, СН2С12 -ИН ЬП^-

ноос-

СООг-Ви СОО?-Ви

9,96%

СР3СООН, СН2С12 -л г-СООН

/—нгч—.

( N 1>/ \

м г

СООН ноос Н2(Ыра, 67%

N N

СООН ноос Н4о«ара. 74 %

Был разработан новый улучшенный трехстаднйный путь синтеза Н4ос1ара, представленный на схеме 5. Этилендиамин-1ч[,К-диуксусную кислоту защищали с получением диметилового эфира 10, а затем алкилировали метиловым эфиром 6-(бромметил)пиколиновой кислоты с дальнейшим снятием защиты метилового эфира с помощью 6М НС1 с получением лиганда Н4ос1ара. Суммарный выход по такой методике достигает ~50 % за три стадии [25]. Для сравнения первые две стратегии позволяют достигать выхода до 30% за пять стадий.

Схема 5

вОС!,, МеОН

у-NN NN-^ д

НООС СООН

МсООС

-ИХ Г1Х-

10, 99%

1 N СООМе

Вг

СООМс

Ка2СОэ, ТГФ, 50°

МеООС—\ /—х /—СООМе

6М НС1

НООС^ /—у /—СООН

^ >г-

СООН ноос Н4ос*ара, 63%

В статье [26] хелатор Н4о^ара был синтезирован с использованием бензильных защитных групп (Схема 6). Данный метод позволяет обойти проблему восстановления групп метилового эфира пиколиновой кислоты при восстановительном аминировании, избегая использования боргидрида натрия. Единственной серьезной проблемой является лабильность пиколинатных групп к гидрированию, поэтому порядок реакции был оптимизирован для проведения стадии дебензилирования только в присутствии шрет-бутил ацетатных групп. Относительно простой пятистадийный синтез Н4ос1ара проводится с суммарным выходом ~12%.

Схема 6

ВгСН,СОО;-Ви,

^РН<'МеОН ^¿ГнЬ-д Ка^МеСЫ

" <3 — ^ ^¡Г

^ 12,49% ^ ^ 13 93% \=/

^ г-ВиООС—\ ^ /—СОО/-Ви Н00С^ ^ ^С00Н

К С00Ме Д/ У-д 6МНС1.Д ¿-ВиООС—^ /—\ /— СООг-Ви Вг _/ \_ _^ /={

Н Н N2,003,МсСК \ М\=/

бо°с I I V -

14, 87%

СООН НООС СООМе СООМе

6, 39% Н4оаара, 75 %

Разрабатываются новые и эффективные способы функционализации лигандов для конъюгации с биологическими векторами (например, пептидами и антителами), поэтому авторов [27] интересовал подход «клик-химии» к функционализации путем включения 1,2,3-триазольных колец, которые можно было бы синтезировать посредством 1,3-диполярного циклоприсоединения алкинов и азидов Хьюсгена. Хелатор Ниагара (Схема 7) был разработан как развитие подхода «от клик реакции к хелатированию», впервые предложенного Миндтом и его коллегами для конъюгации «за один шаг» [28,29], поскольку триазольные кольца будут служить не только удобными связующими звеньями между хелатором и биовекторами, но также и хелатирующими группами для связывания крупных ионов металлов, таких как и 1д13+. Бензильные

19

группы используются для дальнейшего связывания с вектором в случае бифункциональных производных, а на данном этапе чтобы облегчить синтез, характеристику и исследование комплексов металлов. Учитывая потенциальные проблемы, с которыми можно столкнуться при масштабировании и коммерциализации, авторы [27] разработали стратегию синтеза с использованием защитных групп для синтеза Н2а/ара. С этой целью была использована новая стратегия с использованием защиты NМ'-трет-буюксикарбопильной (Вое) группы (Схема 7) с последующим алкилированием Вос-защищенного промежуточного соединения 15 пропаргилбромидом.

Схема 7

О г— % О

H->N NH, xrrtl / \ А Br . „ „ \ / \ .A.

Т1Ф t-BuO^ HN"X)t-Bu -t-Bu<X__N N Ot-Bu

'w-NH HN Ot-Bu -1 "V

NaOtBu, TBAI, II

n о и NaOtBu, TBAI, м

-Vi ° 15,50% MeCN °

u А

t-BuO О Ot-Bu

CH2C12

N COOMe

16, 75%

N N CF3COOH н H

\ /-\ /-= Br

"P

Na2C03, McCN

17, 87%

COOMe COOMe

18, 62%

OH

W

N

1) B11N3, HO^A.0 о iT^PN-A ^N-Cu(OAc)2, ^ IJ N-Хгл^ ^

.. ... >h

2) Ыа23,ТГФ/Н20

N3 COOH HOOC

H2azapa, 44%

Хелатор H2hox синтезировали по реакции восстановительного

аминирования между 8-гидроксихинолин-2-альдегидом и этилендиамином в одну

стадию с выходом 87% (Схема 8) [30]. При синтезе H4octox лиганд H2hox был

алкилирован шрет-бутиловым эфиром бромуксусной кислоты с последующим

удалением защиты трет-бутилового эфира с использованием 6М HCl. Защита

фенольной группы при этом не требуется, так как электрофильность вторичной

аминогруппы выше, чем у кислорода в 8-гидроксихинолине [31], Введение в

структуру дополнительно пиридильных групп может улучшить

20

комплексообразование металл-лиганд и предоставить более мягкие донорные атомы для связывания промежуточных ионов металлов с точки зрения теории жестких и мягких кислот и оснований (ЖМКО) Пирсона. Поэтому был предложен синтез лиганда Н2руЬох, который включает одну стадию алкилирования Н2Иох 2-бромметилпиридином с количественным выходом (Схема 8) [32].

Схема 8

гмн2 ЕЮН, 60°С

ОН 2) №ВН4, ЕЮН

ВгСН2СООг-Ви, NaHC03, MeCN

50 °С *"

/-ВиООС

СОО/-Ви

Н,Ьох, 87%

Вг

МаНС03, МсСЫ 40 °С

6М НС1 60 °С

НООС—ч у-^ ^СООН

Н,р\1тх 62% 114<>с(ох, 97%

Синтез ациклического хелатора Н6рЬо$ра с суммарным выходом 70—75%

проводили по реакции Кабачника-Филдса из описанного ранее метального производного 5 (Схема 9) [33,34].

Схема 9

Н3Р03, (СН20)п

(НО)2ОР у

НС1, д

РО(ОН)2

СООМе

соон соон

НбрИояра, 70%

Стратегия для синтеза хелатора Н6с1арра заключалась в последовательном введении хелатирующих групп в этилендиамин с использованием бензильных защитных групп (Схема 10) [35].

1) Г4) , МеОН, Д А ^

^тЛсООМе

О НЫ^ Вг 4

ЫН2 2) ШВНф МеОН

(Л К2СО;„МеСТ4, Д < N

3)3мнс1 \ / \=/ {

12,95% СООМе СООМе

20, 57%

, , \ ^соон ноосл Р \ г-СООН

он но

Р<1/С, АсОН \_// ,__

(СН30)п

СООМе СООМе 6М нс|-л

соон соон

5' 90% н6(1арра. 1К%

Метод получения хелатора Н6ерру (Схема 11) основан на алкилировании диметилового эфира этилендиаминдиуксусной кислоты 10 отдельно синтезированным диэтил((6-(бромметил)пиридин-2-ил)метил)фосфонатом с гидролизом сложноэфирных групп в 12М НС1 на последней стадии [34].

Схема 11

МеООС—у /-^ / СООМе НООС^, /-\ /—СООН

Г 1 / ^ \ /—г/ иЦ

МеООС у/ СООМе *_^ <Х N \ / м

н Н N»200}, MeCN, \ / \ /

10 40°с /в™ пУ \ „ / \

(ЕЮ)2ОР 21,42% РО(ОЕ1)2 (НО)2ОР РО(ОН)2

Н„срру 75 %

Авторы [36] синтезировали лиганд НВЕБ (N,N'-6^(2-гидроксибензил)этилендиамин-1Ч,1Ч'-диуксусная кислота), содержащий фенольные и карбоксильные хелатирующие группы. Синтез проводили путем превращения Ы^,-ди(2-гидроксибснзил)этилсндиамина в диамид посредством реакции с формальдегидом и ИСК с последующим гидролизом. Из-за сложности гидролиза реакцию проводили с использованием ионов Бе с дальнейшим добавлением 8-гидроксихинолина для хелатирования Ре (Схема 12).

Схема 12

ОН „он

НСН0 ^чг5^ ЕЮН, ЫаОН, он

О

не™ ^ „ А см н2о2 л. А^н, '>ре3+

О

н0>4/ МаНБОз, 5-10°С 2,НС,ОД,ЕЮН

„ .... - НВЕП, 55%

22, 97% 23. 22%

Для получения комплексона Н4НВЕОра аналогично предыдущим методам сначала были синтезированы исходный метиловый эфир 6-(бромметил)пиколиновой кислоты и производное этилендиамина. Производное 24 было синтезировано по реакции алкилирования в присутствии К2СОэ и К1 для облегчения реакции нуклеофильного замещения. Снятие защиты с карбоксильных групп проводили в кислых условиях, что позволяет получить лиганд Н_|НВЕП)ра с общим выходом 43% (Схема 13) [37].

Схема 13

24, 69% Н4НВЕОра, 62%

Авторы статьи [38] проводили синтез декадентатного лиганда Н41раеп в пять стадий из пиридин-2,6-дикарбоновой кислоты и этилендиамина с общим выходом 21% (Схема 14). Чтобы улучшить общий выход синтеза, были оптимизированы условия реакции между этилендиамином и метиловым эфиром 6-(хлорметил)пиколиновой кислоты. Выход полупродукта 25 при этом был увеличен с 40% до 70% при использовании К2С03 со свежеперегнанным этилендиамином и ацетонитрилом в безводных условиях. В этих условиях снижается образование побочного продукта омыления, снижающего выход реакции.

Схема 14

СООМе МеООС СООН НООС

25,40-70% Н^расп, 80%

Лиганды различного размера 29-31 на основе диаминов, содержащие ииридильные группы, были синтезированы через получение основания Шиффа с последующей реакцией восстановленного полупродукта с N-(2-бромоэтил)фталимидом (Схема 15) [39].

Схема 15

II,N.

NH, 2) NaBH4, Д

п= 1,2,3

Yn -еюн сх

-Вг

К2СОэ, MeCN, Д

HNb^NH 11=1,2,3

26-28, 89-91%

2) HCl, Д

H,N

,N

n= 1,2,3

29-31, 77-83% N

Хелаторы Вп2ОТЗА, Н5с1есаох, Н5с1ееара

диэтилентриамина (Схема 16).

Схема 16

были получены из

I J , ЕЮН, Д

BrCH,COOf-Bu

2) NaBH4

ГТ N J н

соон

CFjCOOH

H

CO"J^O ^r CO"—го

, D.,nnr f-RnOOr ГГ.„./

32,63%

MeCN Na2C03, ^^ ,_BuOQC

NO,

5Г

Na2C03, ТГФ

HOOC HOOC

Bn2DT3A, 79%

HN

J

f-BuOOC i-BuOOC 34. 30%

H„ Pd/C

AcOH J|

Г N 4COOMe

Br COOH

COOf-Bu f

г na;co> mecn-60 °c ^-v-n-^n^-n

-- LA ( ) Й.

J 2) SM HCl, Д T COOH HOOC

COOH COOH

H5decapa. 32%

0,N 02S-H^ H _ Ö ...... ö

so2 no2 V/ 2)

l)BrCH,COO/-Bu,

K-2C03, MeCN, Д

r

I) T"N OH

KjCO,, MeCN, Д

Br

SH

K.2COj, CH3CN, Д

HN NH

f-BuOOC f-BuOOC 2) 6M HCl, ТГФ, 50°C 36. 54%

^COOH

- .x N.. л N N ||

jM ( ) N.

f COOH HOOC

OH HO

H.decaox, 30%

Вп2БТЗА был получен в три стадии с общим выходом 23%. Диэтилентриамин частично защищали по концевым аминогруппам с помощью восстановительного аминирования бензальдегидом с последующим алкилированием 32 шреш-бутиловым эфиром бромуксусной кислоты и удалением защиты с помощью трифторуксусной кислоты [40]. Комплексон Н5с1есаох был синтезирован в пять стадий путем введения нозильной защитной группы в

диэтилентриамин и алкилированием 35 трет-бутиловым эфиром бромуксусной кислоты с последующим снятием защиты и введением дополнительных координирующих групп [41]. Хелатор Н5с1есара был синтезирован аналогично Н4ос1ара с использованием защитной группы ГЧ-бензила. Пятистадийный синтез Н^есара был осуществлен с общим выходом ~2,5% [26].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Щукина Анна Алексеевна, 2024 год

- - •

■ im •

* . —

nh hn

О ЫХ p'r

\ur ^—o

_/ —p,-O ,

' ° О—'

S» (

JL_

i

J 8.01

Ji.

3.08 1

4-00 I

1.W I

Jl

■ i.........i ■

■i.........i '

Chemical Shift (ppm)

Рисунок П28 - Спектр 'Н-ЯМР соединения 19 в CDC13.

nh hn

\ P. N N X 0'r~" ч O-P—^ v-i P.-O ,

Vo ' * aJ

103. Ю

I

148.28

I

54 14

I

47 2345-75 S: 771 I

170 160 150 140 130 120 110 100 90 SO 70 60 50 40 30 20 10 Ctiemicat Shift (ppm)

Рисунок П29 - Спектр ,3С-ЯМР соединения 19 в CDC13

2552 O^Af/^O

ПН HN е

—\ О НХ О 'г-

О-Р—' \—с Р,-о / Vo ' ■ о—*

Ч 1 ' 1 1 1 ' ' 1 1 I ' ' 1 1 I 1 ' 1 ' .........I . . I M I I ' " ........... .........I I I I I I I I I I I......I < I I I

150 100 SO О -50 -100 -150 -200 -250

Chemical Shift (ppm)

оДХо

nh hn

0J

« I

Рисунок П31 - Спектр HMBC соединения 19 в CDCI3.

4;

N4 Н*Г 5

P. гД °

НО-Р-^ \_г Sj-P.-OH

НО Г ОН

3.« Hi

JJU

8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 40 3.5 3.0 2.5

Chemical Shift (ppm)

Рисунок П32 - Спектр 'Н-ЯМР соединения 20 в D2O.

1S6-4? | Ы7.1!в

VW

NH Hfr 5

L ^N N-i .0

IHMkll|Wp||'Pli;MlM>MllMM|PUITIM<|MII]IHIflM<^IMI|lHMfMM|l4l|JIM|nil|tlM|MM]>MI|l<Mf'llM4MfP<lltPHI|IMI|PllhfHM|IMipiM|lMI|1MI|1l||)lll

170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 Chemical Shift (ppm)

ч

НО-1

но

Оу-Сц0

нму

N а Р -Р-ОН

7 •

он

пЯШРЯ

СЬеткса! БЫ! (ррт)

31,

Рисунок П34 - Спектр Р-ЯМР соединения 20.

N4 NN

О. Я .О

-»"V-

1 |

»

—1 1

= г

I

1 1

5

*

• 1

I

*

— 1

*

-2-

9.0 65 80 7 5 Л 5 6.0 5 5.0 « $ 4.0 3.5 30 2.5

Рисунок П35 - Спектр НЭрС соединения 20 в 020.

$оон соон

аЬо

УК,

>1Ч|....|..1 I ..........I.......... ■ ■ '

6.0 6.5 5.0 45 СЬеписа! 5 МО (ррт)

i

i s * 1 1

S3 17

PncyHOK 1137 - CneKTp l3C-^IMP coe^HHeHHii 21 b D20.

110 2 06 1 80 1 88 3.77 3 99 4 07

LLLLJ LL U LJ U UU

...... ................. . I I | I I I I ( I I I 'I .......... I ......I. I ■ ........I 'I 'I | I I m I I I I ............I.....It, I | I.'.«.....I I ■ ■

8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 30 Corneal Shift (ppmj

PiicyiiOK 1138 - CneKTp 'PkHMP coefli-iHeHHH 22 b D2O.

141.39

I

127,89^25.17 I

165.64 [

146.29

I

166 49

15p 09

14027

129.

49,07

I S

36.30

I

Chemical Shift (ppm)

PncyHOK IT39 - CneKTp l3C-iIMP coc^micnna 22 b D2O.

2.7a 1

7.37 j ai s 57 8.40 it,"-

JÎLl

il

Î.M2.04 1.9S1.9Í 4.04 4.034.004 06

L U IL U U UU

.....I.........I.........I.........I.........I...... " I.........|i ...п'ч i.........i.........i.........i.........i.........i

85 6.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 Chemical Shift (ppm)

Рисунок П40 - Спектр Н-ЯМР соединения 23 в D2O.

51.03 36-5?

11111IIIPIIIЧI11111I M I■I M 11 11 M P 11 I II 11 11 I III11 11 M P 11 P1 I I IP I I I II M I I 4 11 I■11fI IP IfI 4 I 11 PI I 11 I 1I 11 I IP 11 II I 1I M I 11 11 P1III ГI IPI I 11 11■I I 11 11 I IP11 11 M I I M I 11 M

152 144 13ö 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48 40 32

Chemical Shift (ppm)

Рисунок П41 - Спектр 13С-ЯМР соединения 23 в D20.

N ^ i ■—' NH¡

US i. 11 '6HCI

а л XJ •6HCI 1 1 А «1

- 4 * 1

i . â

— \ I 1 *

*

—г

1

1

1

Г 1 1

- •

г

-- 1 г

j

I

100 =

11 30 M

Рисунок П43 - Спектр HSQC соединения 23 в DiO.

7.92

S 598 45

7.87 7,«

2.052 04 0 98 5.06 2.00 ü U U U U

.......I

I ■ ■ P I I ■ I ■ I I ■ I M I ■ M ■ ] M ■ ■ I I I M I I I I I I I I I I f I I Fl p I ■ I I P I Fl I P I

85 80 7,5 7.0 65 60 5.5

Chemical Shift (ppm)

Рисунок П44 - Спектр 'Н-ЯМР соединения 24 в D2O.

5 26 84 1^126.30

147, Т7

I «

152.37 1.

I

, № ЗУ'

3629

I

125.22

I

48 11

I

.......I.........I.........I.......... .. .. ............. ............. ... .......

152 144 138 128 120 112 1 04 96 88 Chemical SMt (ppm)

4.06 4.0^"4,l»

(У o^

. JJu_Л_L

1

ü_jüaL

Рисунок П46 - Спектр H-COSY соединения 24 в D20.

сУ сУ ^ i

V > !

Т i , 1 •*

■4

* 1

i

í

i 1

— 1 1

i

ь,

- i

Рисунок П47 - Спектр HSQC соединения 24 в D2O.

<А о , 0 ^

" 75s740 г.10

J_ÜlL

г.ОО 2-031.97 2.12 4 06 8.09 4.184 083.72 36.76

UbUU U U и II и

11II i ■ 11 i ■ 11 м 111111 I I 11 ■ 1111 11 г 111 I I 11 11 11111 ¡ I III I I I I 11 11 I ■ 111 111 I 11 I I I I 11 ] 11 м 11 11 11 I I 11 I 11 м 111 I 11 I I 11 11 1111111111 I м I I I 11 1111 11 11 м ¡ I I I г 111111 I 11 ч 11

8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5,5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 Chemical Shift (ppm)

26.11 I

■4«, Л

1 о^

56 07 [

140.79 136 22 ,,, „ 170,57 I | 122.711

100.19

I

61 02 53

60 72

И_1

52.85 451 52

£

Рисунок П49 - Спектр 13С-ЯМР соединения 25 в СЭСЬ

СЦ V**

1,У VI

■у "-1

11. л . 1

3

л

л?

II ■ ■

• -

90 »5 вЛ 7.1 7.0 £5 6.0 55 50 4 5 4.0 35 3.0 1-5 2-0 1.5 1.0 П (до)

Рисунок П50 - Спектр 'Н-СОБУ соединения 25 в СБСЬ.

^ о .

> 0 Ы н ^ н*О

п ° V V-, ¿у О

4

V V-v *

7,55 7 36'05

J1L

5,76 3 36 4.1711.62

Ы uu

38.79 U

3.00 2.99 3.04 2 99

u и u и

■ •ll|llll|llll|HII|IMl|tl4l|lll1|riir|IPII|>l1>|1>l1|rillt<'1l|>ll'Jll,l|1l'lll,"|,"4",l|"Mlllll|,"ll,li,|l,lilll"|"l,lll"1i,lilM,l|,Mll,"l1,l1l'"> 8 5 8.0 7.5 7.0 6 5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0

Chemical Shift <ppm)

Рисунок П52 - Спектр 'Н-ЯМР соединения 26 в CDCI3

»Vv Сц

170,53 1,1878

170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30 20 Chemical Shift (ppm)

Рисунок П53 - Спектр °С-ЯМР соединения 26 в CDCI3.

а о,

° V V

°т< °T< ^

1

ъ о,

N-Ч-N ^^ W ^ N л^О

V v>Y V

.ajJLjl

05 LO 7.5 7 0 41

Рисунок П55- Спектр HSQC соединения 26 в CDCb

NH3

8 37 7 si I 73í|

_J_LJL

3.13

I

_jj_J.

KJ

1 96 2.03 2.04 2.21 U U OJ

"I.........J.........I...................I'"

6.5 8.0 7.5 7.0 8.5

3-62 7.77 11,95 L _ _J

■"J"" .........I.........I.........I.........I...................I.........

5.5 5.0 4.5 40 3.5 3.0 25 2.0 Chemical Shirt (ppm)

Рисунок П56 - Спектр Н-ЯМР соединения 27 в D20.

„Г 3 Г®

.1 ft .. ^

57,62

I

52 3651 65

I 111I II111 P11II IIIЧII I IIII 11II I II I IP 111 I 11II I 11<1IIIIIPl|11II 111MIIIIII I 111 I IIII I IIII |IIIPIIIP11III 111 PIII I III1 PIIIJ II11 III IP III I 11II111 И IIIIIIII 11III IIII IIIIPI 11II1 III

190 180 170 160 150 140 130 120 110 100 90 80 70 60 50 40 30

Chemical Shift (ppm)

мн, г-кн, г^

^сгУ НН!

, А А

Рисунок П58 - Спектр Н-СОБУ соединения 27 в 020.

чн, / ын, (¿0

н '

во тл

Рисунок П59 - Спектр Н8С>С соединения 27 в Б20.

о «.Л» °

ннр^-нр О

1Л7 7.34

, - р.

2 99 3 06 6.09 Ы и

......................................................................................................................

8.5 80 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 40 3.5 3.0 25 2.0 0>«пкз1 (ррт)

JWY^NHj ''-"ГА^ЧЛ*", О

104 176 166 160 152 144 136 126 120 112 104 96 06 60 72 64 56 4а

OeiflicHl Shrfl Ippm)

Рисунок П61 - Спектр 13С-ЯМР соединения 28 в D20.

О л О

NH, f^NHj Г N HjN'S О

Q^1---

а1 Ъ

7 0 6.5 6.0 S.S 5 0 <5 4.0 15 10 2.5 2,0

Рисунок П62 - Спектр H-COSY соединения 28 в D20.

0 п 0

Й 5 в 0 7 5 7.0 6.5 6.0 5.5 S.6 4.5 4.0 1.5 З.С U 2.0

о тип]

0 'Sí? Vi

OH N^l

_JLjL

j-4j

3.03

Jl_LLLL

9.0 8.5 8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 50 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5

Chemical Shift (ppm)

Рисунок П64 - Спектр 1Н-ЯМР соединения 29 в D20.

""n^V О

0 'St?

OH N J

147.20

I

55.03

I

127,00

I

1M66 t 151.54

54.71 ' 50.12 49.01

I r>

iiil|ilil|4iii^Ri**|ia**|*iia|iiii^ii*i^iiii|iiii|iiii|p*ai|iiai|iii*|«iii|iiii|ii*i|iiiiiiiii|aiiF{iiik|i*iP|iiiP|lipi|iipi|fivi|iiPi|iiii|iiii|iPfi|iPii|iai«|iiii|i4iR|iir

176 16S 160 152 144 136 128 120 112 104 96 88 80 72 64 56 48

Chemical Shíft (ppm)

Рисунок П65 - Спектр 13С-ЯМР соединения 29 в D20.

^Jl

Рисунок П67 - Спектр HSQC соединения 29 в DjO.

о 1301S °

он он

Jllfi

г. to 2.34 1-23 5.37 1.67 u u u u

1.68 4.208.38 4 14 4 03 8 35 U U U U U l_l

• i | i i > i i i i • i j • • > •; • > > i i i i i > | i i i i i i m • i i < >< r '< • i i i i > i i • i > i [ • г m i i > i i | m i i i i i i < i • < < • i • > i > i > > i • i i i i i | i m i i > i > i i • < • i i i ' > < i " " > '

85 80 7.5 70 85 60 55 5.0 45 4.0 3.5 30 Chemical Shift (ppm)

Рисунок П68 - Спектр 'Н-ЯМР соединения 30 в D2O.

о 0

OH,af^OH "1[^'N"t)0-JS ОН

Sf^rV5 4*1 "«a 5564

I<11>I■111>'111■1111•1111'I ■ I■>I■I'>■11r >■1111т11111411>111■I>11•I<I>11111> r111■1111■111>IM11>I■I>■■>11111111•11Г11111111T'<> >11<I>11>I■I<I> <111111 ■ II11111 •

170 160 1б0 110 130 130 110 100 90 60 70 60 50 40 эо Chemical SWtl (ppm!

Lj_

Рисунок П70 - Спектр H-COSY соединения 30 в D20.

он г* он ои

(У -7НИ

LdJ

.л1 ê* +

'Л

« 0

7 5 7 0 fi .s

Рисунок П71 - Спектр HSQC соединения 30 в D20.

100 i

9.5 9.0