Разработка методов и технических средств идентификации мяса на основе ДНК- и иммунодиагностики тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.06, кандидат биологических наук Узунян, Давид Григорьевич

• Узунян, Давид Григорьевич
• кандидат биологических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Узунян, Давид Григорьевич

ВВЕДЕНИЕ.

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Идентификация продукции в современных условиях технического регулирования.

1.2. Методы идентификации мясного сырья и мясной продукции.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Цель и задачи исследований.

2.2. Материалы и методы исследований.

2.2.1. Методика определения видовой принадлежности мяса на основе иммунодиффузии.

2.2.2. Выделение и очистка ДНК из мяса и нетермообработанных мясных продуктов с помощью тест-набора SureFood® PREP Animal.;.

2.2.3. Выделение и очистка ДНК из мяса и мясных продуктов, подвергнутых термической обработке с помощью тест-набора SureFood® PREP Animal 37 X.

2.2.4. Методика идентификации мяса птицы на основе амплификации с последующей ДНКгибридизацией

2.2.5. Получение меченных ДНК-зондов с помощью полимеразной 42 цепной реакции.

2.2.6. Методика по определению видовой принадлежности мяса с помощью тест-систем и технических средств укладки на 43 основе генных зондов, меченных биотином.

2.2.7. Идентификация мяса методом «рассеянной» затравки и 45 последующей ДНК-гибридизацией.

2.2.8. Методика изучения эффективности идентификации мяса после температурной обработки.

2.2.9. Статическая обработка результатов

2.3. Результаты исследований.

2.3.1. Совершенствование методов идентификации мяса птицы на 46 основе иммунодиффузии.

2.3.2. Совершенствование методов идентификации мяса птицы с использованием стандартизованных по международным требованиям тест-систем на основе ДНК-диагностики.

2.3.3. Разработка опытного образца укладки тест-систем и технических средств определения видовой принадлежности мяса.

2.3.4. Сравнительный анализ методов идентификации мяса при различных условиях температурной обработки.

2.3.4.1. Влияние условий хранения мяса на эффективность методов 62 видовой идентификации на основе ДНК-диагностики и иммунодиффузии.

2.3.4.2. Влияние термической обработки мяса на эффективность 74 методов идентификации.

3. Обсуждение результатов.

Предложения для практики

Выводы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методов и технических средств идентификации мяса на основе ДНК- и иммунодиагностики»

Актуальность темы

Повышение защиты рынка от опасной и контрафактной продукции является одной из главных целей проходящей в настоящее время реформы технического регулирования.

В этой связи, разработка эффективных методов и тест-систем идентификации мяса способствует исключению из торговли недоброкачественной и фальсифицированной продукции, представляющей серьезную угрозу для здоровья населения.

При идентификации используются различные методические подходы, основанные на органолептических показателях, электрофоретическом анализе белков, биохимических, гистологических исследованиях (Хвыля С.И. и др., 1994; Писарева В.М., 1996; Кузнецова Т.Г., 1997; Kim Н. et al, 1986; Jman I.M., 1990; Rehben H., 1990; Helle A. et al., 1996; Taylor H. et al. 2000).

Экспрессны и достаточно специфичны тест-системы на основе иммунологического анализа (Серегин И.Г. и др., 1997; Mecedo-Silva ., Bardos S.F., 2000).

Методы ДНК-диагностики показали себя весьма чувствительными и специфичными способами идентификации мяса, позволяющими проводить анализ термообработанных образцов (Комаров A.A., Обухов И.Л., 2000; Комаров A.A., 2001, Комарова И.Н.,2005; Chikuni К. et al., 1990; Hunt D.J., 1997; Kappes S.M. et al., 1997; Jamamato M. et al., 1998; Tortaglia M. et al., 1998; Buntjer J.B., Lamine A., 1999; Lockhart D.J., Winzeier E.A., 2000).

Однако, актуальными остаются задачи оптимизации методов и тест-систем применительно к конкретным видам мяса, а также к различным образцам сырья и продукции. При этом задачи гармонизации критериев и методов оценки безопасности и качества продукции предусматривают как внедрение уже известных стандартизованных по международным требованиям тест-систем идентификации, так и разработку новых методов и тест-систем, отвечающих ' международный стандартам. Существует необходимость разработки как высокочувствительных и специфичных арбитражных методов для специализированных лабораторий, так и экспрессных тест-систем и технических средств для нестационарного анализа, например, для ветсанэкспертизы на рынках, предприятиях мясоперерабатывающей промышленности, холодильных комбинатах при приемке сырья и продукции.

Весьма важным является изучение влияния биологических и физико-химических факторов, возникающих при хранении и термической обработке мяса, на эффективность методов и тест-систем идентификации.

Научная новизна '. • ' 'и, * . ».

Проведено совершенствование методов идентификации мяса птицы с использованием стандартизованных по международным требованиям тест-систем на основе ДНК- и иммунодиагностики. Показана высокая чувствительность и специфичность методов на основе амплификации, ДНК-гибридизации и иммуноферментного анализа, позволяющих проводить идентификацию до 0,1% мяса птицы в сырье и продуктах питания, в том числе термообработанных. Чувствительность идентификации мяса птицы методом иммунодиффузии составляла 5%.

В результате исследований разработан опытный образец портативной укладки тест-систем и технических средств определения видовой принадлежности мяса на основе ДНК-гибридизации и иммунодиффузии.

В состав технических средств укладки входят: минитермостат с автономным источником питания от 12 В, позволяющий проводить реакции ДНК-гибридизации и иммунодиффузии, автоматические дозаторы, мембранные фильтры 0,45 мкм, пассивный холодильник с пробирками и флаконами для хранения реагентов.

На основе ДНК-гибридизации с ДНК-зондами, меченными биотином, разработаны опытные образцы тест-системы для определения видовой принадлежности мяса в нестационарных условиях. В состав тест-системы входят реагенты для выделения ДНК и постановки реакции гибридизации.

Тест-системы на основе ДНК-гибридизации с ДНК-зондами, .меченными биотином, позволяли определять до 1% искомой ДНК в смешанных мясных фаршах.

Проведен сравнительный анализ влияния способов технологической обработки мяса на эффективность методов идентификации. Показаны преимущества методов на основе ДНК-диагностики и возможности их использования после процедуры * размораживания/оттаивания и после термической обработки.

Положения, выносимые на защиту.

- Исследования по совершенствованию методов определения видовой принадлежности мяса птицы с использованием стандартизованных по международным требованиям тест-систем на основе иммунодиффузии и ДНК - диагностики.

- Разработка опытного образца портативной укладки тест-систем и технических средств определения видовой принадлежности мяса на основе ДНК-гибридизации и иммунодиффузии.

-Определение чувствительности и специфичности методов идентификации мяса на основе иммунодиффузии и ДНК-диагностики.

- Проведение сравнительного анализа влияния условий хранения и термической обработки мясной продукции на эффективность методов идентификации.

Практическая ценность.

На основании результатов исследований разработаны:

Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе иммунодиффузии» утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии 18.03.2004г.).

Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе ДНК-диагностики» (утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии 18.03.2004г.).

Методические рекомендации по определению видовой принадлежности мяса с помощью тест-систем и технических средств укладки на основе генных зондов, меченных биотином (утверждены Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии, 09.11.2005 г.).

- Технические условия 9388-004-7703052541-2005 Укладка тест-систем и технических средств определения видовой принадлежности мяса на основе генных зондов, меченных биотином (Утверждены ГНУ ВНИИВСГЭ 28.11.2005 г.).

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены на:

- V Международной конференции «Актуальные проблемы ветеринарной медицины, ветеринарно-санитарного контроля и биологической безопасности сельскохозяйственной продукции» (Москва, 2004 г.).

- заседании Ученого совета ВНИИВСГЭ (2005 г.);

- межлабораторном совещании ВНИИВСГЭ (2006г.);

- Международной научно - практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных» Москва, МГУ ПБ, 2006 г.

Публикации. Результаты исследований отражены в 4 научных статьях.

Положения, выносимые на защиту.

- Исследования по гармонизации методов определения видовой принадлежности мяса птицы с использованием стандартизованных по международным требованиям тест-систем на основе иммунодиффузии и ДНК - диагностики.

- Разработка опытного образца портативной укладки тест-систем и технических средств определения видовой принадлежности мяса на основе ДНК-гибридизации и иммунодиффузии.

-Определение чувствительности и специфичности методов идентификации мяса на основе иммунодиффузии и ДНК-диагностики.

- Проведение сравнительного анализа влияния условий хранения и термической обработки мясной продукции на эффективность методов идентификации.

Структура и объем работы.

Диссертация состоит из введения, литературного обзора, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических предложений, списка использованной литературы и приложений.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная санитария, экология, зоогигиена и ветеринарно-санитарная экспертиза», Узунян, Давид Григорьевич

ВЫВОДЫ

1. Проведено совершенствование методов идентификации мяса птицы и говядины с использованием стандартизованных по международным требованиям тест-систем на основе амплификации с последующей ДНК-гибридизацией и детектированием по иммуноферментному типу, а также на основе иммунодиффузии.

2. Показана высокая чувствительность и специфичность методов на основе амплификации с последующей гибридизацией, позволяющего проводить идентификацию до 0,1% мяса птицы: курицы, утки, индоутки и говядины в сырье и продуктах питания, в том числе термообработанных.

3. Чувствительность и специфичность метода на основе иммунодиффузии позволяет проводить идентификацию до 5% мяса птицы и говядины в сырье и сырых продуктах животного происхождения

4. Разработаны опытные образцы тест-систем и технических средств в виде укладки для идентификации мяса на основе ДНК-диагностики и иммунодиффузии и методики амплификация с рассееной затравкой с последующей ДНК-гибридизацией, позволяющие проводить анализ от автономного источника питания.

5. Разработана модифицированная методика идентификации мяса птицы и говядины, с использованием тест-систем и технических средств на основе ДНК-гибридизации с применением биотинилированных ДНК-зондов.

6. Чувствительность метода составляла 1% и позволяла проводить идентификацию в фаршевых смесях.

7. В результате экспериментальных исследований по влиянию различных способов технологической обработки мясного сырья на показатели чувствительности и специфичности методов идентификации мяса птицы и говядины показана преимущества метода на основе ДНК-диагностики и возможности их использования после размораживания/оттаивания и после термической обработки.

8. Разработаны методические рекомендации по идентификации мяса и мясопродуктов на основе ДНК-диагностики и иммунодиффузии сприменением стандартизованных по международным требованиям тест-систем, а также разработанных тест-систем и технических средств укладки.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Узунян, Давид Григорьевич, 2006 год

1. Александрова H.A. и др. Методы оценки качества мяса и мясопродуктов за рубежом // М., 1997, с. 156.

2. Алехина JI.B., Андреенко В.И., Ивашов В.И. Современные методы анализа качества мяса и мясопродуктов // Мясная промышленность, АгроНИИТЭИММП, М., 1991, с. 35.

3. Беляев E.H., Тутельян В.А. Качество и безопасность продуктов детского питания в России: медико-биологические требования и результаты мониторинга // Вопросы питания, 1996, № 5, с. 8-12.

4. Боровков М.Ф., Швец О.М., Кириллов А.К. Определение видовой принадлежности мяса животных// Методическое пособие.-М.: АМБагро, 1998, с.34.

5. Бурков В.И., Боровков М.Ф., Колесниченко И.С., Касаткин B.C. Ветсанэкспертиза мяса и жира диких животных и пернатой дичи // Ветеринария, Москва, 2003, №2, с. 55 60.

6. Бутко М.П. Организация и современные методы проведения ветеринарно-санитарной экспертизы. Киев 1984.

7. Бутко М.П., Шапкина Л.П. Санитарно-гигиенические проблемы экспертизы мяса пернатой дичи // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.90.

8. Ю.Версан В.Г. Актуальные проблемы введения в действие Федерального закона «О техническом регулировании» // Стандарты и качество, 2003, № 5, с. 30-32.

9. П.Витт C.B., Сапоровская М.Б., Беликов В.Н. Об анализе аминокислот методом газо-жидкосткой хроматографии // Журнал аналитической химии, 1966, т. 21, № 2, с. 227-231.

10. Гинцбург A.JI. Генодиагностика инфекционных заболеваний // Журнал микробиологии, эпизоотологии и иммунологии, 1998, № 3, с. 86-95.

11. Гугушвили Н.Н., Гудиев В.Г., Сенченко Б.С. Определение видовой принадлежности мяса домашних и диких птиц люминесцентным и фотоколориметрическим методами // Профилактика и лечение болезней животных, вып. 387 (415).-Краснодар, 2001, с. 160-163.

12. И.Долгов В.А., Лавина С.А. Методические аспекты оценки качества и безопасности пищевой продукции и продовольственного сырья // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса «Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.162.

13. Донченко Л.В., Надыкта В.Д. Безопасность пищевого сырья и продуктов питания // М., Пищепромиздат, 1999, с. 352.

14. Донченко Л.В., Надыкта В.Д. Безопасность пищевой продукции // М., Пищепромиздат, 2001, с.525.

15. Дубцова Г.Н., Кирюхина М.Н., Дубцов Г.Г. Мясные кулинарные изделия, обогащенные растительным белком // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.166-168.

16. Езерская Е.Я. Анализ видовой принадлежности мяса и мясопродуктов //Ветеринария, № 6.-М., 2001, с.45.

17. Езерская Е.Я., Галочкин В.А. Идентификация видоспецифичных мышечных белков сельскохозяйственных животных и птицы.// Сельскохозяйственная биология. Сер.биология животных, 1999, № 6, с.3-9.

18. Журавская Н.К., Алехина JI.T., Опряшенкова JI.M. Исследование и контроль качества мяса и мясопродуктов//М., Агропромиздат, 1985, с. 296.22.3аяс Ю.Ф. Качество мяса и мясопродуктов // М., Легкая и пищевая промышленность, 1981, с. 312.

19. Кабанова Е.М. Определение видовой принадлежности мяса домашних и диких животных.// Автореферат диссертации кандидата ветеринарных наук, Чуваш, с.-х. акад. Чебоксары, 1999, с.23.

20. Карелин А.И., Макаров В.А., Боровков М.Ф. Словарь ветеринарных, зоогигиенических и санитарных терминов. М.: Росагропромиздат., 1990.

21. Комаров A.A. Методы оценки качества и безопасности кормов и кормовых добавок // Ветеринария, №1,2001, с. 51-56.

22. Комаров A.A., Обухов И.Л. Определение видовой принадлежности мясных ингредиентов в кормах для собак и кошек методом ПЦР //

23. Восьмой международный конгресс по проблемам ветеринарной медицины мелких домашних животных. М.', 2000, е., 27-28.

24. Комаров A.A., Обухов И.Л., Сорокина М.Ю., Панин А.Н. Определение видовой принадлежности тканей жвачных животных.// Ветеринария 2000., №3., с. 59-62.

25. Комаров A.A., Панин А.Н., Вылегжанина Е.С. Методы контроля анаболиков в продукции животноводства // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса «Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.251-252.

26. Комарова И.Н. / Разработка ПЦР тест-систем для видовой идентификации и количественной оценки мясного сырья в составе мелкоизмельченных полуфабрикатов и готовых мясных продуктов/ автореферат, Москва,2005.

27. Кривононосов М.В. Организация защиты качества продуктов питания // Международный медицинский журнал (г. Харьков), 1998, 4, № 4, с. 104106.

28. Крылова Н.И., Лесковская Ю.Н. Физико-химические методы исследования продуктов животного происхождения // М., Пищевая промышленность, 1968., с. 316.

29. Кузнецова Т.Г. Оценка морфологических свойств мясного сырья и колбасных изделий по микроструктурным показателям // М., Автореферат диссертации кандидата ветеринарных наук, 1997.

30. Лабораторные исследования в ветеринарии: химико-токсикологические методы. Под. ред. Антонова Б.И. // М.: Агропромиздат, 1989, с. 319.

31. Лори Т.А. Наука о мясе // М., Пищевая промышленность, 1973, с. 198.

32. Маниатис Т, Фритч Э., Сэмбрук Дж. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование // М., изд. «Мир»., 1994, с. 159-172.

33. Могильный М.П., Калашнова Т.В. Пути повышения качества продуктов питания // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 363-364.

34. Морозова E.H. /Гармонизация критериев и методов оценки качества и безопасности продуктов животного происхождения/ автореферат, Москва, 2005.

35. Мысик А.Т., Белова С.М., Фомичев Ю.П. и др. Справочник по качеству продуктов животноводства // М., Агропромиздат, 1986, с. 254.

36. Нечаев А.П. Научные основы и технологические решения получения жировых продуктов для здорового и лечебно-профилактического питания // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 377-379.

37. Николаева М.А., Лычников Д.С., Неверов А.Н. Идентификация и фальсификация пищевых продуктов // М., Экономика, 1996, с. 84-95.

38. Парук А.П., Курмакаева Т.В. Использование биофизических методов при определении фальсификаций мяса // Практик, Москва, 2004, № 7-8, с.14-17.

39. Писарева В.М, Кононенко А.Б., Галкин A.B., Морозова E.H. Тихомирова Т.А., Маргиева С.А., Соколова Ю.Н. /Видовая принад-лежность мяса на основе ДНК-диагностики// «Практик», № 3-4,2004 г., стр. 30-33

40. Писарева В.М. Идентификация белков животного происхождения в пищевых продуктах электрофоретическим методом // Диссертация на/ соискание ученой степени кандидата биологических наук. Москва 1999.

41. Попова М.Ю., Булыгина Е.С., Кузнецов Б.Б., Жаринов А.И., Рогов И.А., Скрябин К.Г. Определение содержания и выделение ПЦР-пригодной ДНК из коммерческих препаратов переработки сои // Биотехнология, Москва, 2003, № 2, с. 86-94.

42. Поляков A.A. Ветеринарная санитария // М., "Колос"., 1989, с. 14-24

43. Правила проведения сертификации пищевых продуктов и продовольственного сырья.//М., 1999.

44. Производственно-технический контроль и методы оценки качества мяса и птицепродуктов. Под ред. Горбатова В.М. // М., «Пищевая промышленность», 1974, с. 274.

45. Рогов И.А. Новые технологии производства продуктов здорового питания // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 440-441.

46. Родин В.И. Сравнительная оценка методов ветеринарно-санитарного контроля пищевого сырья и готовых продуктов.// Материалы международной научно-технической конференции «Пищевой белок и экология». М. 2000, с. 188-189.

47. Романенко Г. А. Обеспечение качества и безопасности сельскохозяйственной продукции // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса «Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.444-445.

48. Романов Г.А. Генетическая инженерия растений и пути решения проблемы биобезопасности // Физиология растений, Москва, 2000, том 47, №3, с. 342-353.

49. Руководство по методам анализа качества и безопасности пищевых продуктов. Под редакцией Скурихина И.М., Тутеляна В.А. // М., Изд. «Брандес», « Медицина», 1998, с. 232.

50. Самуйленко А.Я., Кузнецов Д.П., Кузнецова C.B. иммуноферментный анализ в ветеринарной медицине // Ветеринария, № 12, с. 20-24.

51. Санитарные правила и нормы. СанПиН 2.3.2.1078-01 Гигиенические требования к качеству и безопасности продовольственного сырья и пищевых продуктов // М., 2001.

52. Сассон А. Биотехнология: свершения и надежды // М., изд. «Мир», 1987, с. 47-64.

53. Сафронова A.M., Батурин А.К., Старовойтов M.JI. Анализ потребления мясопродуктов населением России // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с.464-466.

54. Светличкин В.В. Теоретическое обоснование и разработка тест-систем ускоренной оценки безопасности и качества объектов ветеринарно-санитарного контроля/ Автореферат диссертации -М., 2002, с. 40.

55. Светличкин В.В. / Совершенствование контроля качества и безопасности продуктов животного происхождения в соответствии с требованиями Федерального закона «О техническом регулировании»// Труды ВНИИВСГЭ.

56. Светличкин В.В. Сертификация животноводческой продукции // Материалы международной научной конференции «Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии, Москва, 1999, с. 21-31.

57. Светличкин В.В., Писарева В.М., Кононенко А.Б. / Определение видовой принадлежности мяса и мясопродуктов на основе иммуно-диффузии//«Практик», 2004, № 7-8, стр. 28-31.

58. Сенченко Б.С., Кабанова Е.М. Определение видовой принадлежности мяса по температуре вспышки наружного и внутреннего жира некоторых видов животных.// Кубанский государственный аграрный университет, 1999, Вып.375,с.119-121.

59. Сингер М., Берг П. Гены и геномы.-М.: Мир, 1998.-T.1, с. 392

60. Системы анализа рисков и определения критических контрольных точек: НАССР/ХАССП // Москва, 2002, с.593.

61. Скалинский Е.И., Белоусов A.A. Микроструктура мяса.// М., Пищевая промышленность, 1978, с. 155-175.

62. Слесаренко H.A., Курмакаева Т.В., Якушев C.B. Морфологические критерии определения видовой принадлежности мяса.// Современные вопросы интенсификации кормления, содерж. животных и улучшения качества продуктов животноводства, М.,1999, с.103-105.

63. Смирнов А.М, Светличкин В.В. Ветеринарно-санитарная и экологическая безопасность продукции животноводства// «Аграрный вестник Урала»,2006, № 3 (33), с.51-55.

64. Смирнов A.M., Симецкий М.А., Таланов Г.А. Состояние и перспективы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии // Ветеринария, 2001, № 10, с. 3-7.

65. Сорокина М.Ю. Разработка тест-систем для определения видовой принадлежности тканей жвачных животных методом полимеразной цепной реакции (ПЦР): Автореферат диссертации -М., 2004, с. 19.

66. СтентГ. Молекулярная генетика//М., изд. «Мир», 1974, с. 535.

67. Татулов Ю. Качество свинины одного из основных видов сырья мясной промышленности // Свиноводство, 1997, № 6, с. 24-26.

68. Технология мяса и мясопродуктов. Под ред. Рогова И.А. // ВО «Агропромиздат», 1988, с. 756.

69. Фомичев Ю.П. Техническое регулирование и контроль качества молока в процессе производства // Практик, Москва, 2004, № 7-8, с.8 -13.

70. Фрумгарц Л.Ф., Киприянов С.М., Калачиков С.М. и др. Получение флуоресцентной меченой ДНК и использование ее в качестве зонда при молекулярной гибридизации // Биоорганическая химия, 1986, №11, с. 1508-1513.

71. Хвыля С.И. Микроструктурный анализ, идентификация и фальсификация мясных продуктов// Пищевая промышленность, 1998, № 5, с. 68-69.

72. Хвыля С.И. Соевые белковые продукты и возможности их идентификации // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 539-540.

73. Хвыля С.И., Авилов В.В., Кузнецова Т.Г. Практическое применение гистологических методов анализа// Мясная промышленность, 1994, №6, с. 9-11.

74. Херрингтон С., Макги Дж. Молекулярная клиническая диагностика // М, изд. «Мир», 1999, с.558.

75. Чан Т.В.Т. Гибридизация нуклеиновых кислот // В кн. Молекулярная клиническая диагност., методы, М., 1998, изд. «Мир», с. 374-394.

76. Черданцев В.П. Управление качеством элемент политики государства// «Аграрный вестник Урала»,2006, № 3 (33), с. 16-20.

77. Черняева М.Н. Анализ видовой принадлежности мяса и мясопродуктов. // Ветеринария, 2001, №6, с.47-50.

78. Чумак P.M. Иммуноферментный анализ и рекомбинантные антигены // Лаб. Диагностика, 1999, № 3, с. 3-6.

79. Ю2.Чуркина И.В., Сазонова А.А., Черепанов С.В., Смирнов А.Ф. Геномная дактилоскопия кур с использованием в качестве зонда ТГ-обогащенной минисателлитной ДНК // Сельскохозяйственная биология, 1995, №2, с. 53-55.

80. ЮЗ.Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекулярно-генетический анализ биотопов // В кн. Молекулярная клиническая диагностика. Методы. М., изд. «Мир», 1999, с. 395-425.

81. Экологическая биотехнология (Под ред. Форстера К.Ф., Вейза Д.А.) // Л., изд. «Химия», 1990, с. 21-39.

82. Яшин Я.И., Яшин А.Я. Анализ пищевых продуктов и напитков с помощью хроматографических методов // Сб.трудов 7-го всероссийского конгресса « Здоровое питание населения России» Москва, 2003, с. 595596.

83. Abraham J., Rajulu P.V. Species identification in unprocessed meats through agarose isoelectric focusing of urea-extracted proteins and myoglobin // Indian J.anim.Sc., 1992, v. 62, № 1, p. 69-74.

84. Adessi C., Matton G., Turcatti G., Mermod J., Mayer P., Kawashima E. Solid phase DNA amplification: characterisation of primer attachment and amplification mechanisms // Nucleic Acids Research, 2000, 28,20, p. 87.

85. Agrowal S., Cristodoulou C., Gait M. Efficient methods for attaching nonradioactive labels to the 5 ends of syntheticaligodeoxy ribonucleotides // Nucl. Acid. Res. 1986. V. 14, p. 6227-6245.

86. Araki H. Et al. Histochemical properties of muscle fiber in breiler chickens // Jap. Soc of Sci Fish. 1993, v.34, № 2, p. 137-144.

87. Bauer F., Rippel-Rachle B. Tierartenidentifizierung bei Fleisch und Fleischwaren.//Wien.tierarztl.Mschr., 1998, Jg.85,H.8.-S.260-266.

88. Beard J. Gene probes Locate waterborne diseases // New Sei, 1987, № 1562, p. 237.

89. Beneke B., Hagen M. Eignung der PCR (Polymerase-Ketten-Reaktion): Tierartennachweis in erhitzten Fleischerzeugnissen.// Fleischwirtschaft, 1998, Jg.78,N 9.-S.1016-1019.

90. Bennet H.S. The structure and functional muscle // Academic Press, New York, v.l, 1960, p. 137.

91. Berger C., Melchers F. In situ hybridization ofmRNA molecule in single cells // Annu rep, 1985, Basel Inst. Immunol, Basel, p. 1-10.

92. Calvo J.H.,Zaragoza P.,Osta R. Random amplified polymorphic DNA fingerprints for identification of species in poultry pate // Poultry Sc., 2001, v. 80, №4, p. 522-524.

93. Cassiman I. Diagnosis of genetic diseases by probes // Acta clin. Belg, 1988, p. 181-184.

94. Chikuni K, Matsunaga T, Tanabe R. Determination of mitochondrial cytochrome B gene sequence for red deer and the differentiation of closely related deer meat // Meat Sei, 1990, v. 49, № 4, p. 379-385.

95. Church R.B. Method for study of hybridization and reassociation of nucleic acids axtracted from cells of higher animals // In: Molecular techniques and approach in developmental biology, ed. by M. J. Chrispeels. N. Y., 1973, p. 223-301.

96. Codex Alimentarius// Vol. 10, FAO, WHO, 1991,223 p.

97. Codex Alimentarius Volume Ten. Meat and'meat products including soups and broths // Vol. 10, FAO, WHO, 1994,222 p.

98. Codex Alimentarius Volume Thirteen. Methods of analysis and sampling // Vol. 13, FAO, WHO, 1994,134 p.

99. Cooper M.G. Species identification of meat product by standard methods // Ed.Patt., 1985, v 6, p. 135-141.

100. Cox K.H., DeLeon D.V., Angerer L.M. Detection of mRNAs in sea unchin embryos by in situ hibridization using asymmetric RNA probes // Developmental Biology, 1987, v. 101, p.485-502.

101. De Ley I., Cattoir H., Reynaerts A. The quantitative measurement of DNA hybridization from renaturatiun rates // Europ. J. Biochem., 1970, v. 12, p.133-142.

102. Denhardt D.T. A membrane filter technique for the detection of complementery DNA // "Biochem. Biophys. Res. Commun.", 1966, v.23, p. 641-646.

103. Ding H.,Xu R.-J.,Chan D.K.O. Identification of broiler chicken meat using a visible/near-infrared spectroscopic technique // J.Sc.Food Agr., 1999, v. 79, № 11, p. 1382-1388.

104. Erlich H.A. PCR technology.// Stockton Press, New York, 1989.

105. Fairbrother K.S.,Hopwood A.J.,Lockley A.K.,Bardsley R.G. Meat speciation by restriction fragment length polymorphism analysis using an alpha-actin cDNA probe//Meat Sc., 1998, v.50,№ i,p. 105-114.

106. Fei S.,Okayama T.,Yamanoue M.,Nishikawa I.,Mannen H.,Tsuji S. Species identification of meats and meat products by PCR // Anim.Sc.Technol., 1996, v.67,№ 10. p. 900-905.

107. Fleming I., Lumbley J. Validation of new techniques for the analysis of foods // Food Sciens and technology today, v. 9., № 2,1995, p. 84-85.

108. Forster A., Modness J., Skingle D. Non-radioactive hybridization probes prepared by chemical labeling of DNA and RNA with novel reagent, photobiotin // Nuc. Acid Res., 1985, № 3, p.745.

109. Gillespie D., Spiegelman S. A quantive assay for DNA-RNA hybrids with DNA-RNA immobilized on a membrane // J. Molecul. Biol., 1965, v. 12, p.829-842.

110. Gudibande R., Kenten J. Electrochemiluminescen T-label for DNA probe assays // Biotechnol Adv, 1997, v. 15, № 3-4, p. 721.

111. Harbing S., Harbing M. Detection of DNA via an ion channel switch biosensor // Analytical Biochemistry, 2000,282, p. 70-79.

112. Harris S., JonetD. Optimisation of the PCR// Brit. J. Biomid. Sei., 1997, v. 54, №3, p. 166-173.

113. Hayashi K. Manipulation of DNA by PCR. In. PCR the Polimerase chain reaction, Eds // Mullis K.B., Ferre F. & Gibbs R.A., Birkhauser, 1994, p. 3-14.

114. HO.Heinert H.H. et al. The analysis of the beef forcemeat on the contents of the alimentary components // Fleischwirtschaft, 1980, v. 2, p. 421-240.

115. Heinzelmann R. Beurteilung von Eber-, Zwitter-und Kryptorchiden (Binneneber) fleisch.// Fleischwirtschaft, 1999, Jg.79,N 9.-S.34-39.

116. Helle N. Et al. Methods of allocation DNA from chicken. // Arch. Fur Lebensmittelhygiene, 1996, v. 3, № 2, p. 48-51.

117. Herrick J., Michalet X., Conti C., Schurra C., Bensimon A. Quantifying single gene copy number by measuring fluorescent probe lengths on combed genomic DNA // Proc. Natl. Acad. Sei., 2000, v. 97 (1), p 222-227.

118. Hoffmann K. Identification and determination of meat and foreign proteins by means of dodecylsulfat poliacrylamid gel electrophoresis // Ann. Nutr. Alim., v. 31, № 2,1997, p. 207-215.

119. Hopmar A., Wiegant J., Tesser G. A no-radioactive in situ hybridization method based on mercurated nucleic acid'probes and sulfhydryl-hapten ligands // Nucl. Acud. Res., 1986, v. 14, № 16, p. 6471-6488.

120. Hopwood A.J., Fairbrother K.S., Lockley A.K., Bardsley R.G. An actin gene-related polymerase chain reaction (PCR) test for identification of chicken in meat mixtures // Meat Sc., 1999, v. 53, № 4, p. 227-231.

121. ISO 9001. Quality systems models for quality assurance in design, 1987, pp. 6-8.

122. Jannsen E. Method adapted to PhastSystem // Z. Lebensm. Unterrs. Forsh.,-1986.-V. 182,-p.479-483.

123. Jremstein M. and Hognes D. Colony hybridization: A method for the isolation of cloned DNAs that contain a specific gene // Proc. Nail. Acad. Sei. USA, 1975, p. 3961-3965.

124. Kim H. et al. Applying of different methods for allocation DNA // J. of Food Sei., 1986, v. 5, № 3, p. 68-71.

125. King N.L. Kurt L. Analysis of raw beef samples for adulterant meat species by enzyme staining of isoelectric focusing gels // J. Food Sei.,—1982.-v.47,-p.1608-1612.

126. Kofoth M. Aktuelles aus der internationalen Fleischforschung // Fleischwirtschaft, 1999, № 8, p. 68-69.

127. Koh M.C.,Lim C.H.,Chua S.B.,Chew S.T.,Phang S.T.W. Random amplified polymorphic DNA (RAPD) fingerprints for identification of red meat animal species // Meat Sc., 1998, v. 48, № 3/4, p. 275-285.

128. LeProust E., Pellois J., Yu P., Zhang H., Gao X. Digital light-detected synthesis. A microarray platform that permits rapid reaction optimization on a combinatorial basis // Journal of Combinatorial Chemistry, 2000, 2, p. 349354.

129. Liberona H.E., Moxham J.M., Timbs D.V. Qualitty controlprocedures in an automated serological testing laboratory // N.Z. Vet. J., 1978, 26, № 23, p. 60, 65-66.

130. Longer P. Enzymatic synthesis of biotin-labelekl polynucleotides novel nucleic acid affinity probes // Proc. Natl. Acad. Sci USA, 1981, №11, p. 6633.

131. Lowiy O.H., Rosebrough N.J., Farr A.L. et al. The classical and sensitive methods for measuring the concentration of proteins // J. Biol. Chemistry., v. 193, 1951, p. 265-270.

132. Ludke H.,Bargholz J.,Leiterer M. Wertbestimmende und Einige toxische Inhaltsstoffe in Fleisch und Verarbeitungsprodukten von Pute und Schwein. Schr.-R // Verb.Dt.Landw.Unters.Forsch.-Anst., Darmstadt, 1993, № 37, -S. 669-672.

133. Macedo-Silva A.,Barbosa S.F.C.,Alkmin M.G.A.,Vaz A.J.,Shimokomaki M., Tenuta-Filho A. Hamburger meat identification by dot-ELISA // Meat Sc., 2000, v. 56, № 2, p. 189-192.

134. Marmur J., Doty P. Heterogeneity in deoxyribonucleic acids. I. Dependens on composition of the configurational stbility of deoxyribonucleic acid // Nature, 1959, v.183, p.1427-1431.

135. Marmur J., Doty P. Thermal renaturation of deoxyribonucleic acid. // J. Molecul. Biol., 1961, v.3, p.585-594.

136. Martin R., Haza A.I., Horales P. Detection and quantification of goats chees in ewes chees using a monoclonal antibody and two ELISA formats // J. Sc. Food Agr. 1997, v.79, № 7, p. 35-41.

137. Martm R. H. Non-radioactive techiques for the labelling of nucleic acids // Biotech. Adv., 1991, v.9, p. 185-196.

138. Moio L., DiLuccia A., Addeo F. Fast isoelectric focusing of milk proteins on small ultrathin polyacrylamide gel containing urea // Electrophoresis. 1989, v.10, p.535-539.

139. Moio L., Sasso M.L., Chianese L., Addeo F. Rapid detection of bovin milk in ovine, caprine and water buffalo milk or cheese by gel isoelectric focusing on PhastSystem. // Ital. J. Food Sci., 1990, v.3, p. 71-176.

140. New analytical system to improve food quality management // Int. Labmate, 2001,25, №7, p. 36.171.0uchterlony 0. // Progress in Allergy. 1958, v. 6, p. 30

141. Partis L.,Croan D.,Guo Z.,Clark R.,Coldham T.,Murby J. Evaluation of a DNA fingerprinting method for determining the species origin of meats // Meat Sc., 2000, v. 54, № 4, p. 369-376.

142. Paz de Pena M., Concepción Cid M., Bello J. A method for identification of frozen meat used for production of cooked ham // Meat Sc., 1998, v. 48, № 3/4, p. 257-264.

143. Ranki M. Sandweich hybridization as a convmient method for detection ofnucleic acids in crude samples // Gene, 21,1983, p. 77.

144. Rehbein H., Kress G., Schmidt T. Application of PCR-SSCP to cpecies identification of fishery products // J. of the Sci of Food and Agrie., 1997, v. 74, №1, p. 35-41.

145. Rehben H. Electrophoretic techniques for species identification of fichery products. -Z, Lebensm. Unters Forsch., 1990,'v. 191, p. 1-38.

146. Renand G. Perspectives d'amélioration genetique de la qualité de la viande // Elevages belges, 1993, № 12, p. 9-11.

147. Renz M., Kiirz C. A colorimetric method for DNA hybridization // Nlicleic Acids Res., 1984. v. 12, № 8, p. 13435-13444.

148. Saiki R.K., Walsh P.S., Levenson C.H., Erlich H.A. Genetic ahalisis of amplified DNA with immobilized sequence-specific oligonucleotide probes // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1989, vol. 86, p. 6230-6234.

149. Sakurai M., Hikono H., Ohta M. Production and characterization of monoclonal antibodyes that zecognize bovine kit zeceptor //Veter. Immunol. Immunopathol. 1997, v. 68, № 2/4, p. 101-112.

150. Sausem J. Detection of specific sequences among DNA fragments separated by gel electroohoresis // J.Molec.Biolog., 1975, 98, p. 503.

151. Seymour C. Electrophoresis technology: food and reverage analysis // Food Tech. Europe, 1993, Sept/Nov., p.127-152.

152. Skarpeid H.-J.,Moe R.E.,Indahl U.G. Detection of mechanically recovered meat and head meat from cattle in ground beef mixtures by multivariate analysis of isoelectric focusing protein profiles // Meat Sc., 2001, v. 57, № 3, p. 227-234.

153. Smith D.M. Immunoassays in Process Control and Speciation of Meats // Food technologi, 1995, № 2, p. 116-117.

154. Sperner B., Schalch B., Gabert J., Greil B., Stolle A Einsatz des Salmotyre fleischsaft ELIS A // Fleischwirtschaft, 1999, № 8, p. 81-84.

155. Swatland H.J. Early PSE detection.Ontario swine research rev // Guelph,1997,1997, p. 50-51.

156. Tartaglia M., Saulle E., Pestaloza S. Detection of bovine mitochondrial DNA in ruminant feeds: a molecular approach to test for the presence of bovine-derived material // Journal of food protection, vol. 61, № 5, 1998, p. 513-518.

157. Taylor A. Et al. Extraction and ESI-CID-Ms/Ms analysis of myoglobins fran different meat species // Food Sci. &Techn. Tod., 2000, v. 69, № 1, p. 81-86.

158. Tchen P., Ranki M. Time-resolved fluoromentri, a sensitive method to quantify DNA-hybrids // Nucl. Acid Res., 1986, № 2, p. 1017-1028.

159. Todd D., Creelan J. L., MeNulty M. S. Dot-hybridization assay for chicken anemia agent using a cloned DNA probe // J. Clin. Microbiol, 1991, v.29, № 5, p. 933-939.

160. Varga C.,Strelec V.,Volk M. Poultry meat in the production of meat products // Agriculture, 2000, v. 6, № 1, p. 49-52.

161. Vermer Wheelock. Food safety: A key issue for consumers // Int. J. Dairy Technol., 1998, 51, №1, p. 11-14.

162. Vo-Dinh t., Anarie J., Isola N., Landis D., Wintenberg A., Ericson M. DNA biochip using a phototransistor integrated circuit // Analytical Chemistry, 1999,71, p. 358-363.

163. Vollenhofer S., Burg K., Schmidt J., Kroath H. Genetically modified organisms in foods screening and specific detection by polymerase chain reaction// J.Agric.Food Chem/1999,47 (12): 5038-5043.

164. Westin L., Xu X., Miller C., Wang L., Edman C., Nerenberg M. Anchored multiplex amplification on a microelectronic chip array // Nature Biotechnology, 2000,18, 2, p. 199-204.

165. Wolf C., Burgener M.,Hubner P.,Luthy J. PCR-RFLP analysis of mitochondrial DNA: differentiation of fish species // Food Sc.Technol., 2000, v.33, №2, p. 144-150.

166. Wolf C.,Rentsch J.,Hubner P. PCR-RFLP analysis of mitochondrial DNA: a reliable method for species identification // J.agr.Food Chem., 1999, v. 47, № 4, p. 1350-1355.

167. Yamanaka M.,Kudo T.,Itagaki Y.,Sato S.,Nakamura T. Sex identification of beef by polymerase chain reaction // Anim Sc J., 1999, v.70, № 8, p. 111-113.

168. Yman I. M. Meat and fish species identification by isoelectric focusing // Food laboratory news, v.6, N2,1990, p. 28-45.

169. Zimmermann S., Zehner R.,Mebs D. Tierartenidentifizierung aus Fleischproben mittels DNA-Analyse // Fleischwirtschaft, 1998, Jg.78, № 5.-p.530-533.