Разработка методологии и оптимизации приготовления аутологичных противоопухолевых вакцин для лечения больных диссеминированной меланомой кожи и раком почки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат медицинских наук Данилов, Алексей Олегович

• Данилов, Алексей Олегович
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Данилов, Алексей Олегович

Перечень использованных сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ: Современные представления о роли вакцинотерапии в лечении больных злокачественными новообразованиями.

1.1 Современная классификация методов биотерапии злокачественных новообразований.

1.2. Механизмы противоопухолевого иммунного ответа.

1.2.1 Механизмы формирования иммунного ответа и уклонения опухолевых клеток от иммунного надзора.

1.2.2 Современная классификация опухолевых антигенов.

1.3 Принципы создания аутологичных противоопухолевых вакцин.

1.3.1 Приготовление и ведение монокультуры опухолевых клеток.

1.3.2 Культивирование клеток меланомы и рака почки.

1.3.3 Возможности стимуляции специфического Т-кпеточного иммунного ответа как способ повышения эффективности вакцин.

1.3.4 Блокада пролиферации опухолевых клеток с использованием ионизирующий радиации.

1.4 Возможности применения аутологичных клеточных вакцин, основанных на модифицированных и немодифицированных опухолевых клетках для лечения онкологических больных.

1.4.1 Вакцины на основе опухолевых клеток с адъювантом.

1.4.2 Вакцины на основе генетически модифицированных опухолевых клеток.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

2.1 Материал.

2.1.1 Характеристика больных меланомой кожи и раком почки, получавших вакцинотерапию на основе аутологичных модифицированных опухолевых клеток.

2.1.2 Характеристика больных меланомой кожи и раком почки, получавших вакцинотерапию на основе аутологичных опухолевых клеток с адъювантом ИЛ-1Р.

2.2 Методы.

2.2.1 Дезагрегация фрагментов опухолевой ткани для получения первичной клеточной культуры, пригодной для культивирования.

2.2.1.1 Дезагрегация клеток трипсином.

2.2.1.2 Дезагрегация клеток коллагеназой.

2.2.1.3. Механическая дезагрегация клеток.

2.2.2 Определение жизнеспособности выделенных опухолевых клеток.

2.2.3 Культивирование опухолевых клеток.

2.2.3.1 Технология культивирования опухолевых клеток.

2.2.3.2 Клонирование опухолевых клеток в мягком агаре.

2.2.3.3 Иммуноцитохимическое окрашивание опухолевых клеток на присутствие тканеспецифических антигенов.

2.2.4 Замораживание и хранение культур опухолевых клеток.

2.2.5 Блокада пролиферации опухолевых клеток.

2.2.6 Трансфекция опухолевых клеток.

2.2.6.1 Липосомная трансфекция.

2.2.6.2 Электропорация.

2.2.7 Электрофорез в ДНС-ПААГ и иммуноблот-анализ.

2.2.8 Приготовление вакцин на основе аутологичных опухолевых клеток с адъювантом.

2.2.9 Приготовление вакцин на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag 7.

2.2.10 Методы оценки состояния иммунной системы пациентов.

2.2.11 Методы оценки токсичности и клинической эффективности противоопухолевой вакцинотерапии.

2.2.12 Статистические методы обработки полученных результатов.

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Разработка оптимальных условий получения культур опухолевых клеток.

3.1.1 Дезагрегация фрагментов опухолевой ткани.

3.1.2 Изучение факторов, влияющих на культивирование опухолевых клеток.

3.1.3 Подбор условий замораживания культур опухолевых клеток.

3.2 Оптимизация условий проведения трансфекции геном tag 7 опухолевых клеток.

3.2.1 Анализ экспрессии репортерных генов в опухолевых клетках после электропорации.

3.2.2 Анализ экспрессии репортерных генов в опухолевых клетках после липофекции.

3.2.3 Анализ экспрессии гена tag 7 в опухолевых клетках.

3.3 Оценка токсичности и клинической эффективности вакцин на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag 7.

3.3.1 Оценка токсичности и клинической эффективности вакцинотерапии генетическими модифицированными опухолевыми клетками.

3.3.2 Оценка иммунологической эффективности вакцинотерапии генетически модифицированными опухолевыми клетками.

3.4 Оценка токсичности и клинической эффективности вакцин на основе аутологичных опухолевых клеток с адъювантом ИЛ-1р.

3.4.1 Оценка токсичности и клинической эффективности вакцинотерапии на основе опухолевых клеток с адъювантом ИЛ-1р.

3.4.2 Оценка иммунологической эффективности вакцинотерапии на основе опухолевых клеток с адъювантом ИЛ-1 р.

ГЛАВА 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методологии и оптимизации приготовления аутологичных противоопухолевых вакцин для лечения больных диссеминированной меланомой кожи и раком почки»

Актуальность проблемы. В последние годы благодаря значительным достижениям в области генетики, молекулярной и клеточной биологии обозначились новые перспективные подходы к биотерапии злокачественных новообразований. Такие известные факты, как спонтанный регресс злокачественной опухоли, нередко весьма значительная продолжительность безрецидивного периода после ее хирургического удаления, многократно доказанная на различных моделях сенсибилизация лимфоцитов больного к опухолевым клеткам и способность лизировать их, по крайней мере, in vitro, убедительно свидетельствуют в пользу того, что иммунная система играет важную роль на некоторых этапах патогенеза опухоли [33, 127, 140, 198]. Это положение является отправной точкой для различных новейших молекулярно-биологических приемов воздействия на клеточный и гуморальный иммунитет онкологических больных. Поэтому особенно активно разрабатываются методы, направленные на активацию естественного противоопухолевого иммунитета (методы активной специфической иммунотерапии), в том числе вакцинотерапия. В отличие от профилактических вакцин против инфекционных агентов, для которых индукция нейтрализующего гуморального иммунитета является наиболее значимым звеном, основное направление противоопухолевой вакцинации сфокусировано на развитии антиген-зависимого Т-лимфоцитарного ответа [207]. По литературным данным, одним из эффективных способов генерации специфического противоопухолевого иммунитета является создание вакцин на основе аутологичных модифицированных опухолевых клеток [2, 21, 289]. Модификация опухолевых клеток используется для усиления их иммуногенности, что позволяет индуцировать клоногенную пролиферацию эффекторных клеток и/или усиливать уже существующий противоопухолевый иммунный ответ. В качестве одного из наиболее перспективных молекулярно-биологических подходов к созданию противоопухолевых вакцин рассматривается введение в опухолевую клетку генов некоторых цитокинов (ИЛ-2, 7, 12; ГМ-КСФ и др.). После блокады пролиферативных способностей облучением такие модифицированные клетки могут в течение месяца существовать в организме, продуцируя ци-токины, стимулирующие противоопухолевый иммунитет [13]. Одним из подобных агентов для вакцинотерапии опухолей считается недавно выделенный и клонированный белок Tag 7 [149, 158]. Еще одним достаточно перспективным направлением повышения иммуногенности считается введение в процессе вакцинации аутологич-ными опухолевыми клетками лимфокинов и их индукторов, таких как ИЛ-1, 2 и др., для привлечения и активации иммунокомпетентных клеток [233]. В ряде клинических исследований установлено, что методы вакцинотерапии наиболее эффективны при лечении больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки. При этом результаты сопоставимы с современной химио-иммунотерапией [22, 144, 274]. Однако до настоящего времени такие подходы всё еще не имеют широкого применения в клинической практике из-за трудоемкости процессов приготовления вакцин и их высокой стоимости.

В связи с вышеизложенным оптимизация методов усиления противоопухолевого иммунитета с помощью аутологичных противоопухолевых вакцин с адъюван-том и генетически модифицированных опухолевых клеток представляется актуальной научно-практической задачей.

Цель и задачи исследования. Цель работы - улучшение результатов лечения больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки на основе усовершенствования методов получения аутологичных модифицированных и немодифицированных вакцин. Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:

1. Апробировать различные методы получения культур опухолевых клеток из операционного материала больных диссеминированной меланомой кожи и метастатическим раком почки.

2. Выявить оптимальные условия культивирования опухолевых клеточных линий путем подбора необходимого набора питательных сред и их компонентов.

3. Оптимизировать методы модификации опухолевых клеток для повышения их иммуногенности, используя невирусные методы трансфекции.

4. Оптимизировать различные методы консервации опухолевых клеточных линий, предназначенных для приготовления соответствующих вакцин, без потери антигенности в процессе длительного курса лечения больных.

5. Оценить эффективность и токсичность аутологичных вакцин с адъю-вантом ИЛ-1 р и вакцин на основе аутологичных опухолевых клеток, модифицированных геном tag 7, в лечении больных диссеминированной меланомой кожи и раком почки.

Научная новизна. Впервые проведен сравнительный анализ различных методов получения клеточных культур из опухолевых клеток больных диссеминирован-ной меланомой и метастатическим раком почки, их хранения, иммуногенности после различных методов модификации.

Впервые представлены клинические данные по оценке эффективности и токсичности вакцин, полученных на основе аутологичных опухолевых клеток, трансфе-цированных геном tag 7 и вакцин на основе опухолевых клеток с адъювантом ИЛ-1 р.

Практическая значимость работы. Приготовление вакцин является, по существу, производством лекарственного препарата, что требует выработки четких технологических условий по оптимизации и стандартизации процессов их приготовления в соответствующем клиническим требованиям санитарном режиме. В результате данного комплексного экспериментально-клинического исследования сформулированы рекомендации по стандартизации получения аутологичных противоопухолевых вакцин на основе модифицированных и немодифицированных опухолевых клеток.

Апробация работы. Результаты исследования обсуждались на научных конференциях НИИ онкологии им.проф.Н.Н.Петрова, материалы диссертации были доложены на обществе онкологов Санкт-Петербурга и Ленинградской области; на I Всероссийской научно-практической конференции «Биотерапия рака» (Москва, 2002); на Международной конференции «Проблемы онкоиммунологии: научные и прикладные аспекты» (Киев, 2003); на Международном форуме «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (Санкт-Петербург, 2003).

Заключение диссертации по теме «Онкология», Данилов, Алексей Олегович

ВЫВОДЫ

1. В результате сравнения ферментативного и механического способов дезагрегации тканевых фрагментов меланомы кожи и рака почки было установлено, что количество жизнеспособных клеток при диссоциации трипсином составило 30,4+8,8% и 29,8±6,3%, коллагеназой - 68,1 ±10,2% и 72,9±8,6%, механическим способом - 84,3±12,1% и 63,4±3,9% соответственно, то есть для успешного выделения одиночных клеток меланомы кожи и рака почки из тканевых образцов можно применять автоматическую механическую дезагрегацию.

2. Оптимальными условиями для культивирования большинства культур меланомы кожи и рака почки являются: среда DMEM/F12, содержащая 20% СЭКРС, 20% кондиционированной среды фибробластов легких эмбриона человека. Целесообразно при медленном росте культуры клеток рака почки добавлять к питательной среде трансферрин, инсулин, селен.

3. В результате использования механического способа дезагрегации и эффективных условий культивирования из опухолевых образцов 106 больных меланомой кожи и 49 больных раком почки были получены первичные культуры в количестве 79 (74,5%) и 34 (69,4%) соответственно.

4. Максимальная эффективность трансфекции с помощью элекгропорации составила 2%, при использовании липосом - 30%. Таким образом, липо-фекция достаточно эффективна для клеток меланомы кожи и рака почки. Условия трансфекции необходимо подбирать индивидуально для каждого пациента.

5. Иммунотерапия больных диссеминированными солидными опухолями вакциной на основе опухолевых клеток, модифицированных геном tag7, нетоксична, сопровождается развитием реакции гиперчувствительности замедленного типа у 47,6% больных, иммунологическим ответом у 95% и объективным регрессом метастазов в легких (минимальный регресс менее 50%) у 1 из 18 пациентов с диссеминированным опухолевым процессом.

6. Перспективным представляется проведение иммунотерапии генетически модифицированной вакциной у больных после радикального лечения или циторедукгивных операций с минимальным объемом опухолевой массы.

7. Вакцинотерапия на основе опухолевых клеток в сочетании с ИЛ-1 р нетоксична, сопровождается иммунологическим ответом у 90% больных, стабилизацией опухолевого процесса у 10 пациентов из 20 (50%), получавших вакцину с лечебной целью (средняя продолжительность эффекта - 6 мес.) и отсутствием прогрессирования опухоли у 20 пациентов из 34 (61,8%), получавших вакцину с адъювантной целью (среднее значение времени до прогрессирования -16,4 мес.).

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Данилов, Алексей Олегович, 2004 год

1. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимиков. Москва: "Мир", 1983. -263 с.

2. Барышников А.Ю. Противоопухолевые вакцины // Российский Биотер.Журнал. 2002. - Т. 1. - №2. - С. 12-14.

3. Богданенко Е.В., Свиридов Ю.В.,Московцев А.А., Жданов Р.И. Невирусный перенос генов в генной терапии // Вопр.мед.химии. 2000. - Т.46. - №3. -С.226-246.

4. Боровиков В. Statistical искусство анализа данных на компьютере. Для профессионалов. СПб.: Питер, - 2001. - 656 с.

5. Гольштейн В.И. Регуляция пролиферации нормальных и опухолевых клеток в культуре // Явления индукции и дифференцировки при опухолевом росте / под ред. Н.Г.Хрущева. М.: Наука, 1981. - С.119-170.

6. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и гено-терапию наследственных заболеваний. СПб.: "Специальная Литература", 1997.-287 с.

7. Жданов Р.И., Подобед О.В., Куценко Н.Г. и соавт. Новые катионные липосомы для трансфекции эукариотических клеток//Докл. РАН. 1998. -Т.362. - № 4. -С.557 - 560

8. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология: руководство для врачей. СПб: Питер, 2001. - 576 с.

9. Кадагидзе З.Г., Городилова В.В., Куницына Т.А. Учебно-методическое пособие по клинической иммунологии. Часть II. Саратов: Изд-во Саратовского Ун-та, 1989.-76 с.

10. Кетлинский С.А., Симбирцев А.С., Ищенко A.M. и соавт. Иммуномодулирую-щий препарат «Беталейкин» // Описание изобретения: Авт.свидетельство №98107188/13 от 23.04.98.

11. Киселев О.И., Слита А.В., Смирнова А.В. и соавт. Трансформация эукариотических клеток плазмидной ДНК в комплексе с полимерными катионами // Докл.Акад.наук. 1999. - Т.366. - №5. - С.699-701.

12. Киселев О.И., Бендзко П.Г., Школьникова Л.Л., Хансон К.П., Киселев В.И. Вирусные и опухолевые антигены, их использование в конструировании противораковых вакцин // Мед.Акад.Журнал. 2002. - Т.2. - №1. - С. 19-32.

13. Киселев С.Л., Ларин С.С., Гнучев Н.В., Георгиев Г.П. Ген tag 7 и генотерапия рака // Генетика. 2000. - Т.36. - № 11. - С. 1431 -1435.

14. Культура животных клеток. Методы. Пер. с англ./ под ред. Р.Фрешни. М.: "Мир", 1989.-333 с.

15. Кустикова О.С., Киселев С.Л., Бородулина О.Р., Сенин В.М. и др. Клонирование гена , экспрессирующегося в метастазирующих опухолях // Генетика. -1996. -Т.32.-С.621 -628.

16. Лимфоциты: Методы. Пер. с англ./ под ред. Дж.Клауса. М.: "Мир", 1990. - 395 с.

17. Меньшиков В.В., Делекторская Л.Н., Золотницкая Р.П. и др. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник / Под.ред.В.В.Меньшикова. М.: Медицина, 1987, -368 с.

18. Методы культивирования клеток: Сборник науч. трудов. Л.: "Наука", 1988. -313 с.

19. Михайлов А.Т., Симирский В.Н. Методы иммунохимического анализа в биологии развития (практическое руководство). М.: "Наука", 1991. -288с.

20. Моисеенко В.М. Биотерапия солидных опухолей // Вопр.онкол. 1998. - Т.44. -№1. - С. 120-125.

21. Моисеенко В.М. Вакцины и моноклональные антитела для лечения солидных опухолей // Вопр.онкол. 2000. - Т.46. - №2. - С.246.

22. Моисеенко В.М. Возможности вакцинотерапии меланомы кожи // Практическая онкология. 2001. - ТА. - №8. - С.58-64.

23. Моисеенко В.М., Балдуева И.А., Хансон К.П. Вакцинотерапия злокачественных опухолей // Вопр.онкол. 1999. - Т.45. - №3. - С.327-332.

24. Последние достижения в клинической иммунологии. Пер. с англ. / Под ред. Р.А.Томпсона. М.: Медицина, 1983. - 496 с.

25. Прасолов B.C., Иванов Д.С. Ретровирусные векторы в генной терапии // Вопр.мед.хим. 2000. - Т.46. - №3. - С.207-226.

26. Рузов А.С., Георгиев Г.П., Прохорчук Е.Б. Функциональная характеристика промоторной области гена tag 7/PGRPb клетках линий КСМЛ0, КСМЛ100 и BMP-печень аденокарцином молочной железы мыши // Генетика. -2000. Т.36. - № 5. - С.636-643.

27. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / Под. ред. С.В.Петрова, Н.Т.Райхлина. Казань, 2000. - 287 с.

28. Симбирцев А.С., Пигарева Н.В., Кетлинский С.Ф. и соавт. Изучение биологической активности рекомбинантного интерлейкина-1 р человека: анализ лимфо-цитактивирующих свойств // Иммунология. 1990. - №6. - С.39-42.

29. Симбирцев А.С., Пигарева Н.В., Конусова В.Г. и соавт. Изучение биологической активности рекомбинантного ИЛ-1 р человека при введении in vivo // Вестник РАМН. 1993. - №2. - С. 18-22.

30. Тимофевский А.Д. Эксплантация опухолей человека. М.: Изд-во АМН СССР, 1947.-160 с.

31. Тотолян А.А. Современные подходы к диагностике иммунопатологических состояний // Мед.иммунология. 1999. - Т.1. - №1. - С.75-108.

32. Фридлянская И.И. Постоянные клеточные линии, дифференцирующиеся in vitro // Биология клетки в культуре / под ред. А.С.Трошина. Л.: Наука, 1984.1. С.50-100.

33. Хансон К.П., Афанасьев Б.В., Берштейн Л.М., Блинов Н.Н. и соавт. Современные тенденции в развитии биологической терапии злокачественных опухолей // Вопр.онкол. 1996. - Т.42. - №5. -С.7-12.

34. Химиотерапия опухолевых заболеваний: Краткое руководство / Под. ред. Н.И.Перевозчиковой. М., 2000. - 342 с.

35. Юнкеров В.И., Григорьев С.Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. СПб.: Изд-во Военно-Мед.Акад., 2002. -266 с.

36. Abdel-Wahab Z., Weltz С., Hester D. et al. A phase I clinical trial of immunotherapy with interferon-gamma gene-modified autologous melanoma cells: Monitoring the humoral immune response. Cancer. - 1997. - Vol.80. - P.401-412.

37. Ahn S., Irie R., Weisenburger T. et al. Humoral response to intralymphatic immunotherapy for disseminated melanoma: Correlation with clinical response // Surgery. -1982. Vol.92. - P.362-367.

38. Akporiaye E.T., Hersh E.M. Immune adjuvants // Biologic therapy of cancer / Eds.: DeVita J.V.T., Hellman S., Rosenberg S.A. Philadelphia, USA: Loppincott-Raven Publishers, 1995. - P.635-647.

39. Ali-Osman F., Maurer H.R. Stimulation of clonal tumor cell growth in vitro by inamine oxidase activity // J.Cancer Res.Clin.Oncol. 1983. - Vol.106. - P. 17-20.

40. Alving C.R. Design and selection of vaccine adjuvants: animal models and human trials//Vaccine. -2002. Vol. 20.(Suppl.3). - P.S56-S64.

41. Anderson W.F. Human gene therapy // Science. 1992. - Vol.256. - P.808-813.

42. Anglard P., Trahan E., Liu S. et al. Molecular and cellular characterization of human renal cell carcinoma cell lines // Cancer Res. 1992. - Vol.52. - N2. - P.348-356.

43. Antonia S.J., Seigne J.D. B7-1 gene-modified autologous tumor-cell vaccines for renal-cell carcinoma//World J.Urol. 2000. - Vol.18. - N2. - P. 157-163.

44. Arienti F., Sule-Suso J., Belli F. et al. Limited antitumor T cell response in melanoma patients vaccinated with interleukin-2 gene-transduced allogeneic melanoma cells // Hum.Gene Ther. 1996. - Vol.7. - P. 1955-1963.

45. Atkins M.B., Robertson M.J., Gordon M. et al. Phase I evaluation of intravenous recombinant human interleukin 12 in patients with advanced malignancies //

46. Clin.Cancer Res. 1997. - Vol.3. - P.409-417.

47. Aubert C., Rouge F., Reillaudou M., Metge P. Establichment and characterization of human ocular melanoma cell lines // Int.J.Cancer. 1993. - Vol.54. - P.784-792.

48. Aubert C., Voulot C., Rouge F., Pirisi V. et al. New variants of B16 mouse melanoma: differentiation and metastatic properties // Pigment Cell Res. 1989. - Vol.2. -P. 17-25.

49. Baars A., Claessen A.M., van den Eertwegh A.J. et al. Skin tests predict survival after autologous tumor cell vaccination in metastatic melanoma: experience in 81 patients // Ann.Oncol. 2000. - Vol.11. - N8. - P.965-970.

50. Beasley R.P., Hwang L.Y., Lin C.C., Chien C.S. Hepatocellular carcinoma and hepatitis В virus. A prospective study of 22707 men in Taiwan // Lancet. 1981. -Vol.2. -P.1129-1133.

51. Beaudenon S., Kremsdorf D., Croissant O., Jablonska S. et al. A novel type of human papillomavirus associated with genital neoplasias // Nature. 1986. - Vol.321. -P.246-249.

52. Belli F., Arienti F., Sule-Suso J. et al. Active immunization of metastatic melanoma patients with interleukin-2 transduced allogeneic melanoma cells: Evaluation of efficacy and tolerability II Cancer Immunol.Immunother. 1997. - Vol.44. - P.197-203.

53. Berd D. Cancer vaccines: reborn or just recycled? // Semin.Oncol. 1998. - Vol.25. -P.605-610.

54. Berd D., Maguire H.C., McCue P., Mastrangelo M.J. Treatment of metastatic melanoma with an autologous tumor-cell vaccine: clinical and immunologic results in 64 patients // J.Clin.Oncol. 1990. - Vol.8. - P. 1858-1867.

55. Berinstein N. Overview of therapeutic vaccination approaches for cancer // Semin.Oncol. -2003 . Vol.3 (Suppl.8). - P.1-8.

56. Billiau A., Heremans H., Vermeire K., Matthys P. Immunomodulatory properties of interferon-gamma. An update //Ann.N.Y.acad.Sci. 1998. - Vol.856. - P.22-32.

57. Boon Т., Cerottini J.C., Van den Eynde B. et al. Tumor antigens recognized by T lymphocytes//Annu Rev.Immunol. 1994. - Vol.12. - P.337-365

58. Boon Т., Old L.J. Cancer tumor antigens // Curr.Opin.Immunol. 1997. - Vol.9. -P.681-683.

59. Boraschi D., Nencioni L., Villa L. In vivo stimulation and restoration of immune response by the noninflammatory fragment 163-171 of human interleukinip //

60. J.Exp.Med. 1988. - Vol.168. -675-686.

61. Boraschi D., Tagliabue A. lnterleukin-1 and interleukin-1 fragments as vaccine adjuvants//Methods. 1999. -Vol.19. -N1.- P. 108-113.

62. Bowman L.C., Grossmann M., Rill D. et al. Interleukin-2 gene-modified allogeneic tumor cells for treatment of relapsed neuroblastoma // Hum.Gene Ther. 1998. -Vol.9. -N.9. -P.1303-1311.

63. Brewer J.M., Alexander J. Cytokines and the mechanisms of action of vaccine adjuvants // Cytokines Cell Mol.Ther. 1997. - Vol.3. - P.233-246.

64. Brocker E.B., Suter L., Czametzki B.M. et al. BCG immunotherapy in stage I melanoma patients. Does it influence prognosis determined by HLA-DR expression in high-risk primary tumors? // Cancer Immunol.Immunother. 1986. - Vol.23. - P. 155157.

65. Buszello H., Ackermann R. Establichment and characterization of two human renal cancer cell lines (DNT-11 and DNT-63) derived from metastases // Anticancer Res. -1994. Vol.14. -N1 A. - P. 173-176.

66. Cascinelli N., Foa R., Parmani G. et al. Active immunization of metastatic melanoma patients with interleukin-4 transduced, allogeneic melanoma cells // Hum.Gene Ther. 1994. - Vol.5. - P. 1059-1064.

67. Catanella P.J., Prausniz M.R. Prediction and optimization of gene transfection and drug delivery by electroporation // Gene Ther. 2001. - Vol.8(19). - p.1464-1469.

68. Cemazar M., Sersa G., Wilson J. et al. Effective gene transfer to solid tumors using different nonviral gene delivery techniques: electroporation, liposomes, and integrin-targetes vector // Cancer Gene Ther. 2002. - Vol.9. - N4. - P.399-406.

69. Chang A.E., Li Q., Bishop D.K. et al. Immunogenetic therapy of human melanoma utilizing autologous tumor cells transduced to secrete granulocyte-macrophage colony-stimulating factor // Hum.Gene Ther. 2000. - Vol.11. - N6. - P.839-850.

70. Chang A.E., Li Q., Jiang G. et al. Phase II trial autologous tumor vaccination, anti-CD3-activated vaccine-primed lymphocytes, and interleukin-2 in stage IV renal cell cancer // J.CIin.Oncol. 2003. - Vol.21. - N5. - P.884-890.

71. Chang K.W., Lin S.C., Chao S.Y. et al. Establichment and characterization of an oral melanoma cell line (ME) // Oral.Oncol. 2001. -Vol.37. - N3. - P.301-307.

72. Chen L., Ashe S., Brady W.A. et al. Costimulation of antitumor immunity by the B7 counterreceptor for the T lymphocyte molecules CD28 and CTLA-4 // Cell. 1992. -Vol.71. - P. 1093-1102.

73. Cheson B.D., Phillips P.H., Sznol M. et al. Clinical trial referral resource: trials using tumor vaccines // Oncology. 1997. - Vol. 11. - P.81 -90.

74. Cole R.J., Paul J. The effects of erythropoietin on haem synthesis in mouse yolk sac and cultured foetal liver cells // J.EmbryoI.Exp.Morphol. 1966. - Vol.15. -P.245-260.

75. Colombo M.P., Forni G. Cytokine gene transfer in tumor inhibition and tumor therapy: were are we now? // Immunol.Today. 1994. - Vol. 15. - P.48-51.

76. Cornil I., Theodorescu D., Man S., Herlyn M. et al. Fibroblast cell interactions with human melanoma cells affect tumor cell growth as a function of tumor progression // PNAS. 1991. - Vol.88. - P.6028-6032.

77. Coulie P.G., Ikeda H., Baurain JF. Antitumor immunity at work in a melanoma patients //Adv. Cancer Res. 1999. - Vol.76. - P.213-242.

78. Courdi A., Gioanni J., Lalanne C.M. et al. Establichment, characterization, and response to cytotoxic and radiation treatment of three human melanoma cell lines // In Vitro. 1983. - Vol. 19. - N6. - P.453-461.

79. Courtenay V.D., Mills J. An in vitro colony assay for human tumors grown in immune-suppressed mice and tested in vivo with cytotoxic agents // Br. J.Cancer. -1978. Vol.37.-P.261-268.

80. Culver K.W. Gene Therapy: A handbook for physicians. N.-Y.: May Ann Liebert Inc.Publ., 1994. - 117 p.

81. Czarnetzki B.M., Macher E., Suciu S. et al. Long-term adjuvant immunotherapy in stage I high risk malignant melanoma, comparing two BCG preparation versus non-treatment in a randomized multicentre study (EORTC Protocol 18781) //

82. Eur.J.Cancer. 1993. - Vol.29A. - P. 1237-1242.

83. Dairkee S.H., Paulo S.C., Traquina P. et al. Partial enzymatic degradation of stroma allows enrichment and expansion of primary breast tumor cells // Cancer Res. -1997. Vol.57. - P. 1590-1596.

84. Detrisac C.J., Sens M.A., Garvin A.J. et al. Tissue culture of human kidney epithelial cells of proximal tubule origin // Kidney Int. 1984. - Vol.25. - P.383-390.

85. De Vita V.T., Hellman S., Rosenberg S.A. (Eds). Biologic Therapy of Cancer // Philadelphia: J.B.Lippincot Сотр. 1995.

86. De Waard-Siebinga I., Blom D.-J.R., Griffioen M., Schrier P.I. et al. Establishment and characterization of an uveal-melanoma cell line 11 Int. J.Cancer. 1995. - Vol.62. - P.155-161.

87. Diefenbach A., Raulet D.H. The innate immune response to tumors and its role in the induction ofT-cell immunity// Immunol.Rev. -2002. Vol.188. - P.9-21.

88. Dillman R.O., Beutel L.D., Cornforth A.N., Nayak S.K. Short-term tumor cell lines from renal cell carcinoma for use as autologous tumor cell vaccines in thr treatment of kidney cancer // Cancer Biother.Radiopharm. 2000. - Vol.15. - N2. - P. 161-168.

89. Dillman R.O., De Leon C., Beutel L.D. et al. Short-term autologous tumor cell lines for the active specific immunotherapy of patients with metastatic melanoma //

90. Crit.Rev.Oncol.Hematol. -2001. Vol.39. - N1-2. - P. 115-123.

91. Dillman R.O., Nayak S.K., Barth N.M. et al. Clinical experience with autologous tumor cell lines for patient-specific vaccine therapy in metastatic melanoma // Cancer Biother.Radiopharm. 1998. - Vol.13. - N3. - P. 165-176.

92. Dinarello C.A. lnterkeukin-1 and interleukin-1 antagonism // Blood. 1991. - Vol.77. -P. 1627-1652.

93. Donaldson J.Т., Tucker J.A., Keane Т.Е. et al. Characterization of a new model of human prostatic cancer: the multicellular tumor spheroid // Int. J.Cancer. 1990. -Vol.46. - P.238-244.

94. Dranoff G., Molligan R.C. Gene transfer as cancer therapy //Adv. Immunol. 1995. -Vol.58. -P.417-454.

95. Dranoff G., Soiffer R., Lynch T. et al. A phase I study of vaccination with autologous, irradiated melanoma cells engineered to secrete human granulocyte-macrophage colony stimulating factor // Hum.Gene Ther. 1997. - Vol.8. - P.111-123.

96. Dubensky T.W., Liu M.A., Ulmer J.B. Delivery systems for gene-based vaccines // Mol.Med. 2000. - Vol.6. - N9. - P.723-732.

97. Dzau J.V., Mann M.J, Morishita R., Kaneda Y. Fusigenic viral liposome for gene therapy in cardiovascular diseases // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1996. - Vol.93. -P.11421-11425.

98. Ebert Т., Bander N.H., Finstad C.L., Ramsawak R.D. et al. Establishment and characterization of human renal cancer and normal kidney cell lines // Cancer Res.1990. Vol.50. - N1. - P.5531 -5536.

99. Elder E.M., Lotze M.T., Whiteside T.L. Successful culture and selection of cytokine gene-modified human dermal fibroblasts for the biologic therapy of patients with cancer// Hum.Gene Ther. 1996. - Vol.1; 7. - N4. - P.479-487.

100. Fearon E.R., Itaya Т., Hunt В. et al. Induction in a murine tumor of immunogenic tumor variants by transfection with a foreign gene // Cancer Res. 1988. - Vol.48. -P.2975-2980.

101. Forni G., Fujiwara H., Martino F. et al. Helper strategy in tumor immunology: expansion of helper lymphocytes and utilization of helper lymphokines for experimental and clinical immunotherapy // Cancer Metast.Rev. 1988. - Vol.7. - P.289-309.

102. Foss F.M. Immunologic mechanisms of antitumor activity // Semin.Oncol. 2002. -Vol.29 (3 suppl.7).-P.5-11.

103. Frasca D., Boraschi D., Baschieri S. et al., In vivo restoration of T cell function by human 1L-1 p or its 163-171 nonapeptide in immunodepressed mice // J.Immunol. -1988. Vol. 141. - P. 2651 -2655.

104. Freshney R.I. Tumour cells disaggregated in collagenase // Lancet. 1972. - Vol.2. - P.488-489.

105. Freshney R.I. Culture of animal cells: A manual of basic technique. N.-Y.Chichester: Wiley&Sons, publ. - 2000. - 577p.

106. Gainer A.L., Young A.T.L., Parney I.F. et al. Gene gan transfection of human glioma and melanoma cell lines with genes encoding human IL-12 and GM-CSF // J.Neurooncol. 2000. - Vol.47. - N1. - P.23-30.

107. Galligioni E., Quaia M., Merlo A. et al. Adjuvant immunotherapy treatment of renal carcinoma patients with autologous tumor cells and bacillus Calmette-guerin // Cancer. 1996. - Vol.77. - P.2560-2566.

108. HO.Gansbacher В., Motzer R., Houghton A. et al. A pilot study of immunization with in-terleukin-2 secreting allogeneic HLA-A2 matched renal cell carcinoma cells in patients with advanced renal cell carcinoma // Hum.Gene Ther. 1992. - Vol.3. -P.691-703.

109. Gerharz C.D., Moll R., Storkel S. Establishment and characterization of two divergent cell lines derived from a human chromophobe renal cell carcinoma // Am.J.Pathol. 1995. - Vol.146. - N4. - P.953-962.

110. Gerharz C.D., Hildebrandt В., Moll R. et al. Chromophilic renal cell carcinoma: cy-tomorphological and cytogenetic characterization of four permanent cell lines // Br.J.Cancer. 1996. - Vol.74. - N10. - P. 1605-1614.

111. Giard D.J., Aaronson S.A., Todaro G.J., Amstein P. et al. In vitro cultivation of human tumors: establishment of cell lines derived from a series of solid tumors // J.Natl.Cancer.lnst. 1973. - Vol.51. - N 5. - P. 1417-1421.

112. Giovanella B.C., Stehlin J.S., Santamaria C. et al. Human neoplastic and normal cells in tissue culture. I. Cell lines derived from malignant melanomas and normal melanocytes // J.Natl.Cancer Inst. 1976. - Vol.56. - N6. - P. 1131-1142.

113. Grabarczyk P., Gryska K., Wysocki P.J. et al. Improving the retroviral vector (RV) systems for immunotherapy of cancer // Adv Exp Med Biol. 2001. - Vol.495.1. P.389-392.

114. Greten T.F., Jaffee E.M. Cancer vaccines//J.Clin.Oncol. 1999. - Vol.17. - N3. -P. 1047-1060.

115. Grohmann U., Fioretti M.C., Bianchi R. et al. Dendritic cells, interleukin 12, and CD4+ lymphocytes in the initiation of class l-restricted reactivity to a tumor/self peptide // Crit.rev.Immunol. 1998. - Vol.18. - P.87-98.

116. Gupta R.K., Siber G.R. Adjuvants for human vaccines current status, problems and future prospects //Vaccine. - 1995. - Vol.13. - P. 1263-1276

117. Hahne M., Rimoldi D., Schroter M., Romero P. et al. Melanoma cell expression of Fas(Apo-1/CD95) ligand: implications for tumor immune escape // Science. 1996. -Vol.274. - P. 1363-1366.

118. Hanna M.G., Hoover H.C., Vermorken J.B. et al. Adjuvant active specific immunotherapy of stage II and stage III colon cancer with an autologous tumor cell vaccine: first randomized phase III trials show promise //Vaccine. -2001. Vol.19. - P.2576-2582.

119. Hauschka S.D., Konigsberg I.R. The influence of collagen on the development of muscle clones // Proc.Natl.Acad.Sci. 1966. - Vol.55. - P. 119-126.

120. Helling F., Zhang S., Shang A. et al. GM2-KLH conjugate vaccine: increased immu-nogenicity in melanoma patients after administration with immunological adjuvant QS-21 // Cancer Res. 1995. - Vol.55. - P.2783-2788.

121. Ho S.N., Abraham R.T., Nilson A. et al. Interleukin 1-mediated activation of interleukin 4 (IL-4)-producing T lymphocytes. Proliferation by IL-4-dependent and IL-4-in dependent mechanisms // J.Immunol. 1987. - Vol.139. - N5. - P. 1532-1540.

122. Hoal-Van Helden E.G., Wilson E.L., Dowdle E.B. Characterization of seven melanoma cell lines: melanogenesis and secretion of plasminogen activators.

123. Br.J.Cancer. 1986. - Vol.54. - P.287-295.

124. Hogge G.S., Burkholder J.K., Culp J. et al. Development of human granulocyte-macrophage colony-stimulating factor-transfected tumor cell vaccines for the treatment of spontaneous canine cancer // Hum.Gene Ther. 1998. - Vol.9. - N13. -P.1851-1861.

125. Hoover H.C., Brandhorst J.S.,Peters I.C. et al. Adjuvant active specific immunotherapy for human colorectal cancer: 6,5-year median follow-up of a phase III prospectively randomized trial //J.Clin. Oncol. 1993. - Vol.11. - P.390-399.

126. Houghton A.N., Gold J.S., Blachere N.E. Immunity against cancer: lessons learned from melanoma// Curr.Opin.lmmunol. -2001. Vol.13. - P.134-140.

127. Houghton A.N., Real F.X., Davis L.J. et al. Phenotypic heterogeneity of melanoma. Relation to the differentiation program of melanoma cells // J.Exp.Med. 1987. -Vol.165.-P.812-829.

128. Hsieh C.L., Chen D.S., Hwang L.H. Tumor-induced immunosuppression: a barrier to immunotherapy of large tumors by cytokine-secreting tumor vaccine // Hum.Gene Ther. 2000. - Vol.11. - N5. - P.681 -692.

129. Hsu M.-Y., Herlyn M. Cultivation of normal human epidermal melanocytes / Methods in molecular medicine: human cell culture protocols // Ed.: Jones G.J. London, UK: Humana Press, 1996. - P.9-19.

130. Hui K., Grosveld F., Festenstein H. Rejection of transplantable AKR leukemia cells following MHC DNA-mediated cell transformation // Nature. 1984. - Vol.311.1. P.750-752.

131. Ikonopisov R., Lewis M., Hunter-Craig I. Et al. Autoimmunization with irradiated tumor cells in human malignant melanoma // Brit. Med. J. 1970. - Vol.2. - P.752-754.

132. Irvine A.R., Mannagh J., Arya D.V. et al. Change in cell type of human choroidal malignant melanoma in tissue culture // Amer. J.Ophthalmol. 1975. - Vol.80. -P.418-424.

133. Ishihara Т., Moore G.E., Sandberg A.A. The in vitro chromosome constitution of cells from human tumors // Cancer Res. 1962. - Vol.22. - P.375-379.

134. Ishii A., Matsui M., Terano Y. et al. Establishment and characterization of a novel human malignant melanoma cell line AKI // Cell.Mol.Biol. 1988. - Vol.34. - N3. -P.255-264.

135. Itaya Т., Yamagiwa S., Okawa T. et al. Xenogenization of a mouse lung carcinoma (3LL) by transfection with an allogeneic class I major histocompatibility complex gene (H-2Ld) // Cancer Res. 1987. - Vol.47. - P.3136-3140.

136. Jaffee E.M. Immunotherapy of cancer//Ann.N.Y.Acad.Sci. 1999. - Vol.886. -P.67-72.

137. Jaffee E.M., Schutte M., Gossett J. et al. Development and characterization of a cy-tokine-secreting pancreatic adenocarcinoma vaccine from primary tumors for use in clinical trials // Cancer J.Sci.Am. 1998. - Vol.4. - N3. - P. 194-203.

138. Jager E., Jager D., Knuth A. Antigen-specific immunotherapy and cancer vaccines // Int.J.Cancer. -2003. Vol.106. - N6. - P.817-820.

139. Jones Т., Stern A., Lin R. Potential role of granulocyte-macrophage colony-stimulating factor as vaccine adjuvant// Eur.J.Clin.Microbiol.Infect.Dis. 1994. -Vol.13Suppl.2., - p.S47-S53.

140. Kairiyama C., Slavutsky I., Larripa I. et al. Biologic, immunocytochemical, and cytogenetic characterization of two new human melanoma cell lines: IIB-MEL-LES and IIB-MEL-IAN // Pigment Cell Res. 1995. - Vol.8. - N3. - P.121-131.

141. Kaneda Y. Development of a novel fusogenic viral liposome system (HVJ-liposomes) and its application to the treatment of acquired diseases // Mol. Membr. Biol. 1999. - Vol.16. - P.119- 122

142. Kawai K. Cell therapy for renal cell carcinoma // Gan To Kagaku Ryoho. 2002. -Vol.29. - N 10. - P.1745-1751.

143. Kawai K., Aihara K., Nakai S. lnterleukin-1 in cancer therapy// Gan.To.Kagaku. Ryoho. 1994. - Vol.21. - N4. - P.573-580.

144. Keilholz U., Weber J., Finke J.H. et al. Immunologic monitoring of cancer vaccine therapy: results of a workshop sponsored by the Society for Biological Therapy // J.lmmunother. 2002. - Vol.25. - N2. - P.97-138.

145. Kido N., Nakashima I., Kato N. Correlation between strong adjuvancity of Klebsiella 03 lipopolysaccharide and its ability to induce interleukin-1 secretion // Cell.Immunol. 1984. - Vol.85. - N2. - P.477-486.

146. Kiguchi К., Ishiwata I., Ishiwata C. et al. Establishment and characterization of melanoma cell line derived from malignant melanoma of human uterine cervix // Hum.Cell. 1998. - Vol. 11. - N2. - P.93-100.

147. Kiselev S.L., Kustikova O.S., Korobko E.V. et al. Molecular Cloning and characterization of the mouse tag 7 gene encoding a novel cytokine // J.Biol.Chem. 1998. -Vol.273.-P. 18633-18639.

148. Koch I., Depenbrock H., Danhauser-Riedl S. et al. Interleukin 1 modulates growth of human renal carcinoma cells in vitro // Br. J.Cancer. 1995. - Vol.71. - N4. - P.794-800.

149. Koppenhagen F.J., Kupcu Z., Wallner G. et al. Sustained cytokine delivery for anticancer accination: liposomes as alternative for the gene-transfected tumor cells // Clin.Cancer.Res. 1998. - Vol.4(8). - P.1881-1886.

150. Krause S.W., Neumann C., Soruri A. et al. The treatment of patients with disseminated malignant melanoma by vaccination with autologous cell hybrids of tumor cells and dendritic cells // J/lmmunother. 2002. - Vol.25. - N5. - P.421-428.

151. Kremetz E., Samuel M., Wallace J. Clinical experience in the immunotherapy of cancer// Surg.Gynecol.Obstet. 1971. - Vol.133. - P.209-217.

152. Kugler A., Stuhler G., Walden P. et al. Regression of human metastatic renal cell carcinoma after vaccination with tumor cell-dendritic cell hybrids // Nat.Med. 2000.- Vol.3. P.332-336.

153. Kusumoto M., Umeda S., Ikubo A. et al. Phase I clinical trial of irradiated autologous melanoma cells adenovirally transduced with human GM-CSF gene // Cancer Immunol.Immunother. -2001. -Vol.50. N7. - P.373-381.

154. Kwak L.W., Londo D.L. Modern vaccine adjuvants // Cancer chemotherapy and bio-therapy / Eds. Chabner B.A., Londo D.L. Philadelphia, USA: Lippincott-Raven Publishers, 1996. -P.749-763

155. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. -1970. Vol.227. - P.680-685.

156. Larin S., kustikova O., Palkina T. Et al. Preclinical trial of genetically modified autologous antitumor vaccine // Scand.J. Immunol. 2001. - Vol.54. - P. 131.

157. Laucius J., Bodurtha A., Mastrnagelo M. et al. A phase II study of autologous irradiated tumor cells plus BCG in patients with metastatic malignant melanoma // Cancer.- 1977. Vol.40. - P.2091-2093.

158. Levin D.B., Wilson К., Valadares de Amorim G. et al. Detection of p53 mutation in benign and dysplastic nevi // Cancer Res. 1995. - Vol.55. - P.4278-4282.

159. Liao S.K., Dent P.В., McCulloch P.B. Characterization of human malignant melanoma cell lines. I. Morphology and growth characteristics in culture // J.Natl. Cancer. Inst. 1975. - Vol.54. - P.1037-1044.

160. Lindblom A., Lijegren A. Tumour markers in malignancies // Brith.Med.J. 2000. -Vol.320. - P.424-427.

161. Lindenmann J., Klein P.A. Viral oncolysis: increased immunogenicity of host cell antigen associated with influenza virus // J.Exp.Med. 1967. - Vol.126. - P.93-108.

162. Liu C., Gelius E., Liu G. et al. Mammalian peptidoglycan recognition protein binds peptidoglycan with high affinity, is expressed in neutrophils, and inhibits bacterial growth // J.Biol.Chem. 2000. - Vol.275. - P.24490-24499.

163. Livingston P.O., Albino A.P., Chung T.J. et al. Serological response of melanoma patients to vaccines prepared from VSV lysates of autologous and allogeneic cultured melanoma cells // Cancer. 1985. - Vol.55. - P.713-720.

164. Lotze M.T., Zitvogel L., Campbell R. et al. Cytokine gene therapy of cancer using in-terleukin-12: Murine and clinical trials //Ann.N.Y.Acad.Sci. 1996. - Vol.795.1. P.440-454.

165. Lovelock J.E., Bishop M.W.H. Prevention of freezing damage to living cells by di-metyl sulfoxide // Nature. 1959. - Vol.183. - P. 1394 - 1395.

166. Lowell Т.Н., Kenichiro H. Zeroing in on the cancer cell. Cancer vaccines. Philadelphia, USA: "Hasumi Intern.Res.Foundation", 2002.-371 p.

167. Luyten G.P., Naus N.C., Mooy C.M. et al. Establishment and characterization of primary and metastatic uveal melanoma cell lines // Int. J.Cancer. 1996. - Vol.66. -N3. - P.380-387.

168. Mach N., Dranoff G. Cytokine-secreting tumor cell vaccines // Curr.Opin.Immunol. -2000. Vol.12. - N5. - P.571-575.

169. Mandruzzato S., Brasseur F., Andry G. et al. P.A.CASP-8 mutation recognized by cytolytic T-lymphocytes on a human head and neck carsinoma // J.Exp.Med. 1997. -Vol.186. -P.785-793.

170. March C.J., Mosley В., Larsen A. et al. Cloning, sequence and expression of two distinct human interleukin-1 complementary DNAs // Nature. 1985.

171. Vol.315(6021). P.641 -647.

172. Marshall E.S., Matthews J.H., Shaw J.H. et al. Radiosensitivity of new and established human melanoma cell lines: comparison of 3H.thymidine incorporation and soft agar clonogenic assays // Eur. J. Cancer. 1994. - Vol.30A. - N9. - P. 13701376.

173. Mather J.P. Making informed choices: medium, serum, and serum-free medium; how to choose the appropriate medium and culture system for the model you wish to create // Meth.Cell.Biol. 1998. - Vol.57. - P. 19-30.

174. Matejuk A., Dwyer J., Zamora A. et al. Evaluation of the effects of 17beta-estradiol (17beta-e2) on gene expression in experimental autoimmune encephalomyelitis using DNA microarray// Endocrinology. -2002. Vol.143. - P.313-319.

175. Matzinger P. Tolerance, danger, and the extended family //Annu Rev. Immunol. -1994. Vol.12. -P.991 -1045.

176. McCaffrey M., Yao T.-J., Williams L. et al. Immunization of melanoma patients with BEC2 antiidiotypic monoclonal antibody that mimics GD3 ganglioside: enchancedimmunogenicity when combined with adjuvant // Clin.Cancer Res. 1996. - Vol.2. -P.679-686.

177. McCune G.S., Marquis D.M. Interleukin 1 as an adjuvant for active specific immunotherapy in a murine tumor model // Cancer Res. 1990. - Vol.50. - P. 1212-1215.

178. McCune C.S., Schapira D.V., Henshaw E.C. et al. Specific immunotherapy of advanced renal carcinoma: evidence for the polyclonality of metastases // Cancer. -1981. Vol.47. - P. 1984-1987.

179. Methods in molecular medicine: human cells culture protocols / ed. G.E.Jones. -Totowa, N.J.: Humana Press Inc, 2001. 545 p.

180. Meliff C.J.M., Toes R.E.M., Medema J.P. et al. Strategies for immunotherapy of cancer // Advances in Immunology. 2000. - Vol.75. - P.235-282.

181. Michel Т., Reichart J.M., Hoffmann J.A. et al. Drosofhila Toll is activated by Gram-positive bacteria through a circulating peptidoglycan recognition protein // Nature. -2001. Vol.414. - P.756-759.

182. Minev В., Hipp J., Schmidt J.D. et al. Cytotoxic T-cell immunity against telomerase reverse transcriptase in humans // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 2000. - Vol.97.1. P.4796-4801.

183. Moingeon P. Cancer vaccines//Vaccine. -2001. Vol.19. - N11-12. - P. 13051326.

184. Mordoh J., Kairyama C., Bover L. et al. Allogeneic cells vaccine increase disease-free survival in stage III melanoma patients. A non-randomized phase II study // Medicinia (B Aires). 1997. - Vol.57. - P.421-427.

185. Moretta A., Moretta L. HLA class I specific inhibitory receptors // Curr.Opin.Immunol. 1997. - Vol.9. - N5. - P.694-701.

186. Nabel G.J., Nabel E.G., Yang Z.Y. et al. A direct gene transfer with DNA-liposome complexes in melanoma: Expression, biologic activity, and lack of toxicity in human // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1993.-Vol.90. - P.11307-11311.

187. Naeyaert J.M., Eller M., Gordon P.R. et al. Pigment content of cultured human melanocytes does not correlate with tyrosinase message level // Br.J.Dermatol. -1991. Vol.125. - P.297-303.

188. Naito S., von Eschenbach A.C., Giavazzi R., Fidler I.J. Growth and metastasis of tumor cells isolated from a human renal cell carcinoma implanted into different organs of nude mice // Cancer Res. 1986. - Vol.86. - P.4109-4115.

189. Nawrocki S., Mackiewicz A. Genetically modified tumor vaccines where we are today // Cancer Treat. Rev. - 1999. - Vol.25. - N 1. - P.29-46.

190. Nestle F.O., Dummer R. New perspectives on immunobiology and immunotherapy of melanoma // Immunol.Today. 1998. - Vol.20. - N1. - P.5-7.

191. Ostrand-Rosenberg S., Roby C., Clements V.K. et al. Tumor-specific immunity can be enhanced by transfection of tumor cells with syngeneic MHC-class-ll genes or allogeneic MHC-class-l genes // Int. J.Cancer Suppl. 1991. - Vol.6. - P.61 -68.

192. Ostrand-Rosenberg S., Pulaski B.A., Clements V.K. et al. Cell-based vaccines for the stimulation of immunity to metastatic cancers // Immunol.Rev. 1999. - Vol.170.- P.101-114.

193. Palmer K., Moore J., Everard J.D. et al. Gene therapy with autologous, interleukin2-secreting tumor cells in patients with malignant melanoma // Hum.Gene Ther.1999. Vol. 10. - N8. - P. 1261 -1268.

194. Pantel K., Dickmanns A., Zippelius A. et al. Establishment of micrometastatic carcinoma cell lines: a novel source of tumor cell vaccines // J.Nat.Cancer Inst. 1995. -Vol.87.-N5.-P.1162-1168.

195. Pardoll D. Paracrine cytokine adjuvants in cancer immunotherapy // Ann.Rev.lmmunol. 1995. - Vol.13. - P.399-415.

196. Pardoll D.M. Cancer vaccine // Nature Med. Vaccine suppl. 1998. - Vol.4. -P.525-531.

197. Pardoll D.M., Jaffee E.M. Cancer vaccines:clinical application. Genetically modified tumor vaccines / Principles and practice of the biologic therapy of cancer // Eds.: Rosenberg S.A. Philadelphia, USA: Lippincott Williams&Wilkins, 2000. - P.647-662.

198. Parmiani G., Pilla L., Castelli C., Rivoltini L. Vaccination of patients with solid tumours//Ann. Oncol. -2003. -Vol.13. P.817-824.

199. Phillips J.H., Gumperz J.E., Parham P., Lanier L.L. Superantigen-dependent, cell-mediated cytotoxicity inhibited by MHC class I receptors on T lymphocytes // Science. 1995. - Vol.268(5209). - P.403-405.

200. Plautz G.E., Yang Z.Y., Wu B.Y. et al. Immunotherapy of malignancy by in vivo gene transfer info tumors // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1993. - Vol.90. - P.4645-4649.

201. Portielje J.E., Gratama J.W., van Ojik H.H. et al. IL-12: a promising adjuvant for cancer vaccination // Cancer Immunol.Immunother. 2003. - Vol.52. - N3. - P. 133144.

202. Ramoner R., Rieser C., Herold M. et al. Activation of human dendritic cells by bacillus Calmette-Guerin // J.Urol. 1998. - Vol.159. - P. 1488-1492.

203. Rauschmeier H.A. Immunotherapy of metastatic renal cancer // Semin.Surg.Oncol. 1988. - Vol.4. - P.169-173.

204. Raychauduri S., Tonks M., Carbone F. et al. Induction of antigen-specific class I-restricted cytotoxic T cells by soluble proteins in vivo // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. -1992. Vol.89. - P.8308-8312.

205. Razzaque A., Dye E., Puri R.K. Characterization of tumor vaccines during product development // Vaccine. 2000. - Vol. 19. - N6. - P.644-647.

206. Repmann R., Wagner S., Richter A. Adjuvant therapy of renal cell carcinoma with active-specific-immunotherapy using autologous tumor vaccine // Anticancer Res. -1997. Vol.17: - P.2879-2882.

207. Restifo N.P. Cancer vaccines: basic principles. General concepts and preclinical studies / Principles and practice of the biologic therapy of cancer // Eds.: Rosenberg S.A. Philadelphia, USA: Lippincott Williams&Wilkins, 2000. - P.571-583.

208. Restifo N.P., Rosenberg S.A. Developing recombinant and synthetic vaccine for the treatment of melanoma // Curr.Opin.Oncol. 1999. - Vol. -11.- P.50-57.

209. Restifo N.P., Sznol M. Cancer vaccines // Cancer: Principles & Practice of Oncology, 5th ed. / Eds. V.DeVita, S.Hellman, S.Rosenberg. Philadelphia: Lippincott-Raven Publishers, 1997. - P.3023-3043.

210. Ribas A., Butterfield L.H., Glaspy J.A., Economou J.S. Current developments in cancer vaccines and cellular immunotherapy // J.CIin.Oncol. 2003. - Vol.21. - N12. -P.2415-2432.

211. Ristic-Fara A., Nicolic D., Petrovic I. et al. The late effects of proton irradiation on cell growth, cell cycle attest and apoptosis in a human melanoma cell line //

212. J.Exp.Clin.Cancer Res. -2001. Vol.20. - N1. - P.135-143.

213. Rosenberg S.A. Principles of cancer management: biologic therapy // Ibid. 1995. - P.349-373.

214. Rosenberg S.A. Cancer vaccines based on the identification of genes encoding cancer regression antigens // Immunol.Today. 1997. - Vol.18. - P.175-182.

215. Rosenberg S.A. Principles of cancer management: biologic therapy // Cancer: principles and practice of oncology / Eds. De Vita J.V.T., Hellman S., Rosenberg S.A. -Philadelphia, USA: Lippincott-Raven Publishers, 1997. P.349-373.

216. Rosenberg S.A. Progress in human tumor immunology and immunotherapy // Nature. 2001. - Vol.411. - P.380-384.

217. Rosenberg S.A., Anderson W.F., Blarse M., Hwu P. et al. The development of gene therapy for the treatment of cancer // Ann.Surg. 1993. - Vol.218. - N4. - P.455-464.

218. Rosenberg S.A., Packard B.S., Aebersold P.M., et al. Use of tumor-infiltrating lymphocytes and interleukin-2 in the immunotherapy of patients with metastatic melanoma. A preliminary report// N.Engl.J.Med. 1988. - Vol.319.1. P. 1676-1680.

219. Salgaller M.L. Immune adjuvants / Principles and practice of the biologic therapy of cancer//Eds.: Rosenberg S.A. Philadelphia, USA: Lippincott Williams&Wilkins, 2000. -P.584-601.

220. Salgaller M.L., Lodge P.A. Use of cellular and cytokine adjuvants in the immunotherapy of cancer // J.Surg.Oncol. 1998. - Vol.68. - P. 122-138.

221. Sanes J.R., Rubenstein J.F., Nicolas J.F. Use of a recombinant retrovirus to study post-implantation cell lineage in mouse embryos // EMBO J. 1986. - Vol.5. -P.3133-3142.

222. Schadendorf D., Fichtner I., Makki A. et al. Metastatic potential of human melanoma cells in nude mice characterization of phenotype, cytokine secretion and tumour-assosiated antigens// Br. J.Cancer. - 1996. - Vol.74. - n2. - P. 194-199.

223. Schattka S., Decken K., Schmitz-Drager B. et al. Establishment and characterization of human renal cancer cell lines and autologous normal kidney short term cultures // Investig Urol. 1994. - Vol.5. - P.35-41.

224. Schreiber S., Kampgen E., Wagner E. et al. Immunotherapy of metastatic malignant melanoma by a vaccine consisting of autologous interleukin 2-transfected cancer cells: outcome of a phase I study// Hum.Gene Ther. 1999. - Vol.10. - N6. - P.983-993.

225. Seigler H.F., Darrow T.L., Abdel-Wahab Z. et al. A phase I trial of human gamma interferon transduced autologous tumor cells in patients with disseminated malignant melanoma // Hum.Gene Ther. 1994. - Vol.5. - P.761 -777.

226. Sedlacek H.H. Vaccination for treatment of tumors: a critical comment // Crit. Rev. Oncogenesis. 1994. - Vol.5. - N 6. - P.555-587.

227. Shin K.H., Ku J.L., Kim W.H. et al. Establishment and characterization of seven human renal cell carcinoma cell lines// B.J.U.Int. 2000. - Vol.85. - N1. - P.130-138.

228. Shrayer D.P., Bogaars H., Hearing V.J., Wanebo H.J. Immunization of mice with irradiated melanoma tumor cells transfected to secrete lymphokines and coupled with IL-2 or GM-CSF therapy // J.Exp.Ther.Oncol. 1996. - Vol.1. - N2. - P.126-133.

229. Simons J.W., Jaffe E.M., Weber C.E., et al. Bioactivity of autologous irradiated renal cell carcinoma vaccines generated by ex vivo granulocyte-macrophage colony-stimulating factor gene transfer// Cancer Res. -1997. Vol.57. - P. 1537-1546.

230. Sinkovics J.G., Horvath J.C. Vaccination against human cancers // Int. J.Oncol. -2000. Vol.16. - N1. - P.81-96.

231. Speizer D.E., Miranda R., Zakarian A.et al. Self antigens expressed by solid tumors do not efficiently stimulate naive or activated T cells: Implication for immunotherapy // J.Exp.Med. 1997. - Vol.186. - P.645-653.

232. Stampfer M., Halcones R.G., Hackett A.J. Growth of normal human mammary cells in culture // In vitro. 1980. - Vol.16. - P.415-425.

233. Staruch M.J., Wood D.D. The adjuvanticity of interleukin 1 in vivo // J.Immunol. -1983.-Vol.130.-P.2191 -2194.

234. Staveley-0'Carroll K., Sotomayor E., Montgomery J. et al. Induction of antigen-specific T cell anergy: An early event in the course of tumor progression // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1998. - Vol.95. - P.1178-1183.

235. Strauss m.,Barranger j.a. Concepts in Gene Therapy. Berlin, Germany: De-Gruyter, 1997. -553 p.

236. Sugaya M; Takenoyama M; Osaki T. et al. Establishment of 15 cancer cell lines from patients with lung cancer and the potential tools for immunotherapy // Chest. -2002. Vol.122. - N1. - P.282-288.

237. Suminami Y., Elder E.M., Lotze M.T., Whiteside T.L. In situ interleukin-4 gene expression in cancer patients treated with genetically modified tumor vaccine // J.lmmunother.Emphasis Tumor Immunol. 1995. - Vol.17. - N4. - P.238-248.

238. Sun Y., Jurgovsky K., Moller P. et al. Vaccination with IL-12 gene-modified autologous melanoma cells: preclinical results and first clinical phase I study // Gene Ther.- 1998. Vol.5. - N4. - P.481-490.

239. Surovoy A., Flechsler I., Gaunitz F. et al. Simple and fast microscale procedure for transfection and quantification of reporter gene expression in eukaryotic cells // Adv.Exp.Med.Biol. 1998. - Vol.451. - P.457-460.

240. Tagliabue A., Ghiara P., Boraschi D. Noninflammatory peptide fragments of 1L-1 as safe new generation adjuvants // Res.Immunol. 1992. - Vol.143. - P.563 - 568, discussion 581-582.

241. Takahashi K, Okada T.S. Analisis of the effect of "conditioned medium" upon the cell culture at low density // Dev.Growth Diff. 1970. - Vol.12. - P.65-77.

242. Taylor J.L., Grossberg S.E. The effects of interferon-a on the production and action of other cytokines // Semin.Oncol. 1998. - Vol.25. - P.23-29.

243. Tepper R.I., Mule J.J. Experimental and clinical studies of cytokine gene-modified tumor cells // Hum.Gene Ther. 1994. - Vol.5. - P. 153-164.

244. Torre-Amione G., Beauchamp R.D., Koeppen H., Park B.H. et al. A highly immuno-genetic tumor transfected with a murine transforming growth factor type beta 1 cDNA escapes immune surveillance // Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 1990. - Vol.87. - P.1486-1490.

245. Townsend S.E., Allison J.P. Tumor rejection after direct costimulation of CD8+ T cells by B7-transfected melanoma cells // Science. 1993. - Vol.259. - P.368-370.

246. Trefzer U., Weingart G., Chen Y. Et al. Hybrid cell vaccination for cancer immune therapy: first clinical trial with metastatic melanoma // Int. J.Cancer. 2000. - Vol.85.- N5. P.618-626.

247. Trojaneck В., Niemitz S., Micka B. et al. Establishment and characterization of colon carcinoma and renal cell carcinoma primary cultures // Cancer Bio-ther.Radiopharm. -2000. Vol.15. - N2. - P. 169-174.

248. Tsoncheva V.L., Kirov K.S., Valkova C.A., Milchev G.I. Evaluation of delayed apop-totic response in lethally irradiated human melanoma cell lines // Z.Naturforsch. -2001. Vol.56. - N7-8. - P.660-665.

249. Thurnher M., Ramoner R., Gastl G. et al. Bacillus Calmette-Guerin mycobacteria stimulate human blood dendritic cells // Int.J.Cancer. 1997. - Vol.70. - P.128-134.

250. Tveit K.M., Fodstad O., Pihl A. The usefulness of human tumor cell lines in the study of chemosensitivity. A study of malignant melanomas // Int. J.Cancer. 1981. -Vol.28. - P.403-408.

251. Van den Eynde B.J., Van der Bruggen P. T-cell defined tumor antigens // Curr.Opin.Immunol. 1997. - Vol.9. - P.684-694.

252. Van der Eertwegh A.J.M.,. Boersma W.J.A, Claassen E. Immunological functions and in vivo cell-cell interactions of T-lymphocytes in the spleen // Crit. Rev. Immunol. 1992. - Vol. 11.- P.337-380.

253. Van Muijen G.N.P., Jansen K.F.J., Cornelissen I.M., Smeets D.F. etal. Establishment and characterization of a human melanoma cell line (MV3) which is highly metastatic in nude mice// Int.J.Cancer. 1991. - Vol.48. - P.85-91.

254. Veelken H., Mackensen A., Lahn M. et al. A phase-l clinical study of autologous tumor cells plus interleukin-2-gene-transfected allogeneic fibroblasts as a vaccine in patients with cancer // Int.J.Cancer. 1997. - Vol.70. - P.269-277.

255. Vermorken J.В., Claessen A.M., van Tinteren H. et al. Actove specific immunotherapy for stage II and III human colon cancer: a randomized trial // Lancet. 1999. -Vol.353. - P.345-350.

256. Vile R., Souberbielle В., Dalgleish A.G. Tumor vaccines // Immunotherapy in Cancer/Eds. Gore M., Riches P. London, 1996. - P. 157-191.

257. Vogel F.R. Adjuvants in perspective // Dev.Biol.Stand. 1998. - Vol.92. - P.241-248.

258. Volk J., Sel S., Ganser A., Schoffski P. Tumor cell-based vaccination in renal cell carcinoma: rational, approaches, and recent clinical development //

259. Curr.Drug.Targets. 2002. - Vol.3. - N5. - P.401-408.

260. Wang R.F. Tumor antigens discovery: perspectives for cancer therapy // Mol.Med. -1997. Vol.3. - N11. - P.716-731.

261. Wang R.F., Johnston S.L., Southwood S. et al. Recognotion of an antigenic peptide derived from tyrosinase-related protein 2 by CTL in the context of HLA-A31 and A33 // J.Immunol. -1998. Vol.160. - P.890-897.

262. Watanabe N., Kahayashi I. Selective release of a processed from of interleukin 1 alpha // Cytokine. 1994. - Vol.6. - N6. - P.597-601.

263. Weber K.L., Pathak S., Multani A.S. et al. Characterization of a renal cell carcinoma cell line derived from a human bone metastasis and establishment of an experimental nude mouse model // J.Urol. 2002. - Vol.168. - N2. - P.774-779.

264. Weitzmann M.N., Savage N. Nuclear internalization and DNA binding activities of interleukin-1, interleukin-1 receptor and interleukin-1/ receptor complexes // Bio-chem.Biophys.Res.Commun. 1992. - Vol.187. - N2. - P.1166-1171.

265. Wick M., Dubey P., Koeppen H. et al. Antigenic cancer cells grow progressively in immune hosts without evidence for T cell exhaustion or systemic anergy //

266. J.Exp.Med. 1997. - Vol.186. - P.229-238.

267. Williams R.D., Elliott A.Y., Stein N., Fraiey E.E. In vitro cultivation of human renal cell cancer. I. Establishment of cells in culture // In Vitro. 1976. - Vol.12. - N9. -P623-627.

268. Witting В., Marten A., Dorbic T. et al. Therapeutic vaccination against metastatic carcinoma by expression-modulated and immunomodified autologous tumor cells: a first clinical phase l/ll trial // Hum.Gene Ther. -2001. Vol.12. - N3. - P.267-278.

269. Wolchok J.D., Livingston P.O., Houghton A.N. Vaccine and other adjuvant therapies for melanoma// Hematol.Oncol.Clin.North.Am. 1998. - Vol.12. - P.835-848.

270. Woodlock T.J., Sahasrabudhe D.M., Marquis D.M. et al. Active specific immunotherapy for metastatic colorectal carcinoma: phase I study of an allogeneic cell vaccine plus low-dose interleukin-1 alpha // J.lmmunother. 1999. - Vol.22. - N3. -P.251-259.

271. Wortzel R.D., Philipps C., Schreiber H. Multiple tumor-specific antigens expressed on a single tumour cell // Nature. 1983. - Vol.304. - P.165-167.

272. Xu M., Qui G., Jiang Z., Humphreys R.E. Genetic modulation of tumor antigen presentation//Trends Biotechnol. 2000. - Vol.18. - N4. - P. 167-172

273. Yang N.S., Burkholder J., Roberts В., Martinell B. et al. In vivo and in vitro gene transfer to mammalian somatic cells by particle bombardment (transfection / transduction / gold) // Proc.Natl.Acad.Sci. 1990. - Vol.87. - P.9569-9572.

274. Yu W., Shimoyama A., Uneda T. et al. Gene transfer mediated by IKS-220 cationic particles: convenient and efficient gene delivery reagent // J. Biochem. 1999. -Vol.125. - P. 1034-1038.