Разработка методики цитогенетического анализа ооцитов для генотоксикологической оценки лекарственных средств тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат наук Плигина Кира Львовна

• Плигина Кира Львовна
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Плигина Кира Львовна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Индуцированный мутагенез и его медицинские последствия

1.2. Источники генотоксических воздействий

1.2.1. Эндогенные

1.2.2. Средовые

1.2.3. Пищевые

1.2.4. Лекарственные

1.3. Методология оценки генотоксических повреждений

1.3.1. Регистрация первичных повреждений ДНК

1.3.2. Регистрация генных мутаций

1.3.3. Регистрация хромосомных мутаций

1.3.4. Регистрация геномных мутаций

1.4. Оценка генотоксичности в системе доклинических исследований безопасности лекарственных средств

1.5. Методологические проблемы оценки генотоксических эффектов в половых клетках

1.5.1. Методы и подходы к оценке генотоксических эффектов в половых клетках

1.5.2. Особенности мужского и женского гаметогенеза как фактор различной чувствительности к генотоксическим воздействиям

1.5.3. Методические проблемы детекции цитогенетических нарушений в ооцитах

2.МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы

2.1.1. Экспериментальные животные

2.1.2. Реактивы

2.1.3. Расходные материалы

2.1.4. Использованные соединения

2.2. Методы

2.2.1. Метод цитогенетического анализа ооцитов мышей

2.2.2. Метод гель-электрофореза изолированных клеток (метод «ДНК-комет»)

3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Разработка метода цитогенетического анализа ооцитов

3.1.1. Подбор доз для гормональной суперовуляции

3.1.2. Подбор условий гипотонической обработки и спиртовой фиксации

3.1.3. Подбор условий гипотонической обработки и фиксации ооцитов параформальдегидом

3.1.4. Подбор условий удаления зоны пеллюцида

3.1.5. Подбор условий высушивания

3.1.6. Подбор условий окрашивания

3.2. Цитогенетические эффекты модельных генотоксикантов в ооцитах

3.2.1. Колхицин

3.2.2. Паклитаксел

3.2.3. Этопозид

3.2.4. Доксорубицин

3.2.5. Мелфалан

3.2.6. Циклофосфамид

3.2.7. Цисплатин

3.2.8. Метотрексат

3.2.9. Диоксидин

3.3. Цитогенетические эффекты кофеина, акриламида и бисфенола А

3.3.1. Кофеин

3.3.2. Акриламид

3.3.3. Бисфенол А

3.4. Оценка мутаген-модифицирующей активности в ооцитах

3.4.1. Ацетилцистеин

3.4.2. Афобазол

3.4.3. Полиоксидоний

3.4.4. Бетаин

3.5. Оценка уровня повреждений ДНК фолликулярных клеток и ооцитов методом гель-электрофореза отдельных клеток (метод «ДНК-комет»)

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

5. ВЫВОДЫ

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

7. СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

8. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

9. БЛАГОДАРНОСТИ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методики цитогенетического анализа ооцитов для генотоксикологической оценки лекарственных средств»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. В общепринятой системе скрининговой оценки генотоксичности вновь синтезированных и уже используемых, но ранее не исследованных или недостаточно исследованных ксенобиотиков, особое место занимают лекарства [39].

Оценка генотоксичности является обязательной частью доклинического изучения безопасности новых оригинальных лекарственных средств. С этой целью применяются батареи верифицированных тестов in vitro и in vivo, позволяющие регистрировать различные типы генотоксических событий: генные, хромосомные, геномные мутации и повреждения ДНК [21].

По мере накопления практического опыта в тестировании на генотоксичность и развития технологической базы медико-биологических исследований, периодически возникают предпосылки к пересмотру, унификации и международной гармонизации методов и программ генотоксикологических исследований фармакологических веществ и/или лекарств. Актуальной проблемой, которая более чем за полувековую историю развития генотоксикологии не решена, является разработка методологии оценки генотоксичности лекарств в половых клетках [19].

Сформировалось два подхода к решению этой проблемы. Первый предполагает обязательность тестирования генотоксичности лекарств в половых клетках на основе уже существующих методов (метод доминантных летальных мутаций, ДЛМ) с учетом возможных ограничений, вытекающих из их несовершенства [53]. Второй, принятый гармонизированным трехсторонним руководством (ICH, 2011), на основе представлений о единстве механизмов возникновения генотоксических событий в различных типах клеток, ограничивает тестирование только соматическими клетками [154].

С точки зрения доклинической оценки безопасности лекарств (оценки польза/риск), базирующихся на фармакологических принципах, т.е. зависимости эффектов от дозы, пути введения, режима применения и др., в отношении

лекарств важна оценка не только качественных, но и количественных эффектов. Есть основания полагать, что и те и другие неизбежно будут различаться в половых и соматических клетках. В пользу этого свидетельствуют экспериментальные данные о наличии, по крайней мере, у 7 химических соединений мутагенных эффектов, специфических для половых клеток [19].

На VI международном семинаре по генотоксическим испытаниям (IWGT, 2014) важность решения проблемы оценки генотоксичности в половых клетках была отмечена в числе первостепенных [265]. Это особо значимо в области доклинической оценки безопасности лекарств для оценки соотношения «польза/риск» и принятия регуляторных решений.

Существующие методы оценки генотоксических событий в половых клетках акцентированы на использовании в качестве тест-систем самцов. Это ограничивает перспективы оценки соотношения «пользы/риск» применения лекарств у женщин. Отсюда разработка методов и подходов к оценке генотоксичности в ооцитах является актуальной задачей современной лекарственной генотоксикологии.

Степень разработанности.

Наиболее адекватным решением на сегодняшний день представляется применение «золотого стандарта» генотоксикологии - метода цитогенетического анализа. В 1966 году А.Тарковским был разработан суховоздушный метод получения цитогенетических препаратов ооцитов грызунов, который по сегодняшний день находит применение в фундаментальных исследованиях в области эмбриологии и оогенеза. В виду существенных недостатков, таких как трудоемкость, низкая пропускная способность и неудовлетворительное качество цитогенетических препаратов, метод неоднократно подвергался модификациям, которые не решили главную проблему, ограничивающую его применение в качестве экспертного генотоксикологического теста высокую вариабельность и низкую воспроизводимость результатов. По данным разных лабораторий

спонтанный уровень анеуплоидии в ооцитах мышей может варьировать от 2.9 до 29.5%, в ооцитах человека - от 4 до 50% что, как многократно отмечалось в литературе, является следствием несовершенства методики получения и анализа цитогенетических препаратов [4; 265].

В настоящей работе определены критические точки при получении и анализе цитогенетических препаратов ооцитов мышей, подобраны оптимальные условия выполнения методики и проведена ее верификация в экспериментах по оценке спонтанного и индуцированного анеугенеза и кластогенеза с использованием лекарственных генотоксикантов с различными механизмами действия.

Цель исследования. Разработка и верификация методики цитогенетического анализа в ооцитах мышей in vivo для совершенствования доклинической генотоксикологической оценки лекарств.

Задачи исследования.

1. Разработать методику получения и анализа цитогенетических препаратов ооцитов мышей in vivo.

2. Апробировать и верифицировать методику в экспериментах с использованием лекарственных генотоксикантов с различными механизмами действия.

3. Охарактеризовать дозовые эффекты кофеина, акриламида и бисфенола А -соединений, сведения о цитогенетической активности в ооцитах мышей которых неоднозначны.

4. Изучить мутаген-модифицирующие свойства лекарственных антимутагенов в ооцитах мышей.

5. Определить применимость метода ДНК-комет для оценки поврежденности ДНК в ооцитах и кумулюсных клетках.

Научная новизна

Доказана высокая генетическая стабильность половых клеток самок мышей. При исследовании более двух тысяч овулировавших ооцитов интактных мышей не выявлено числовых хромосомных нарушений, что опровергает имеющиеся данные о высоком уровне спонтанной анеуплоидии (до 29.5%) в ооцитах.

Впервые установлены различия в проявлении анеугенных эффектов у генотоксикантов с различными механизмами генотоксического действия; ингибиторы веретена деления колхицин и паклитаксел индуцируют в ооцитах в равной степени гипо- и гипергаплоидию, ингибитор топоизомеразы этопозид и алкилирующие и сшивающие ДНК препараты цисплатин и мелфалан -преимущественно гипогаплоидию. Не выявлено индукции исключительно гипергаплоидии.

Установлено, что кофеин в дозах 50 и 100 мг/кг и акриламид в дозе 125 мг/кг при пероральном введении индуцируют числовые и структурные хромосомные нарушения в ооцитах мышей.

Впервые показано что ацетилцистеин (АЦЦ) в дозе 200 мг/кг обладает выраженной, зависимой от возраста экспериментальных животных, антимутагенной активностью по отношению к индуцированным в ооцитах цитогенетическим эффектам этопозида. Установлено снижение индуцируемого этопозидом преждевременного расхождения сестринских хроматид под влиянием афобазола (10 мг/кг) и полиоксидония (50 мг/кг).

Теоретическая и практическая значимость

Полученные доказательства практического отсутствия спонтанного геномного мутагенеза в ооцитах изменяют представления о значимости спонтанного анеугенеза в формировании генетически-обусловленных репродуктивных потерь, чем представлялось из данных ранее проведенных работ.

Разработана и верифицирована с использованием известных лекарственных анеугенов (колхицин, паклитаксел, этопозид, цисплатин) новая методика цитогенетического анализа в ооцитах мышей. Установленная возможность с высокой степенью надежности регистрировать дозовые зависимости цитогенетических эффектов позволяет использовать ее для оценки индуцированного анеугенеза в ооцитах и рекомендовать для включения в программу доклинического изучения безопасности лекарственных средств

При цитогенетическом анализе лекарств, реализующих генотоксическое действие за счет влияния на топоизомеразы (этопозид, доксорубицин) в ооцитах были выявлены кластогенные эффекты, которые не наблюдались при применении в широком диапазоне доз лекарств-генотоксикантов с иными механизмами действия: прооксидантным (диоксидин), алкилирующим и сшивающим ДНК (мелфалан, циклофосфамид, цисплатин), ингибированием синтеза ДНК (метотрексат). Полученные данные указывают на возможное ограничение в трактовке результатов скрининга кластогенных эффектов отдельных лекарств в ооцитах и подтверждают необходимость анализа результатов всей совокупности комплексных исследований in vitro и in vivo для заключения о генотоксичности и определения генетического риска. [21].

Выявление мутагенной активности кофеина и акриламида в ооцитах определяет необходимость расширенной оценки их генотоксического потенциала для половых клеток с целью определения генетических рисков для человека.

Полученные данные о антимутагенной активности АЦЦ по отношению к индуцированным в ооцитах цитогенетическим эффектам этопозида определяют перспективы изучения эффективности и безопасности включения АЦЦ в комплексную противоопухолевую терапию больных с репродуктивным потенциалом.

Методология и методы исследования

Метод регистрации цитогенетических эффектов в ооцитах мышей разработан на основе классического метода цитогенетического анализа и его различных модификаций. Помимо этого в работе использован современный метод оценки первичных ДНК-повреждений - метод ДНК-комет в щелочной версии согласно ранее описанному [30].

Исследование соответствует пункту № 5 паспорта специальности «фармакология, клиническая фармакология», шифр 14.03.06.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработана оригинальная методика цитогенетического анализа ооцитов мышей для целей доклинической оценки безопасности лекарств, отличающаяся высоким качеством цитогенетических микропрепаратов, воспроизводимостью экспериментальных данных и незначительной трудоемкостью.

2. Методика верифицирована на основе исследования дозовых зависимостей эффектов широкого набора лекарственных генотоксикантов с различными механизмами действия.

3. Исследование более чем двух тысяч овулировавших ооцитов интактных мышей не выявило клеток с числовыми и/или структурными нарушениями хромосом.

4. Кофеин в дозах 50 и 100 мг/кг и акриламид в дозе 125 мг/кг при пероральном введении индуцируют структурные и числовые хромосомные повреждения в ооцитах мышей. Бисфенол А не обладает цитогенетической активностью.

5. АЦЦ при трехкратном пероральном введении в дозе 200 мг/кг проявляет антимутагенную активность, снижая или предупреждая анеугенные и кластогенные эффекты этопозида в ооцитах мышей. Установлено слабо выраженное, но значимое снижение индуцируемого этопозидом

преждевременного расхождения сестринских хроматид под действием афобазола (10 мг/кг) и полиоксидония (50 мг/кг).

6. Метод ДНК-комет в принятой модификации малопригоден для оценки поврежденности ДНК в кумулюсных клетках и ооцитах.

Степень достоверности. Исследование выполнено на достаточном экспериментальном материале с использованием адекватных методов оценки и статистической обработки полученных данных.

Личный вклад соискателя. Автором самостоятельно подготовлен обзор литературы, выполнена экспериментальная часть диссертации, статистическая обработка данных, проведен анализ полученных результатов, сформулированы положения и выводы. При непосредственном участии автора подготовлены публикации по результатам исследований.

Апробация работы. Результаты диссертационной работы были доложены на IV съезде фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» (Казань, 18 - 21 сентября 2012 года), IV съезде токсикологов России (Москва, 68 ноября 2013 года), VII съезде Российского общества медицинских генетиков (Санкт-Петербург, 19-23 мая 2015 года), 6-ой Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам» (Москва, 9 - 13 ноября 2015 года), V съезде фармакологов России «Научные основы поиска и создания новых лекарственных средств» (Ярославль, 14 - 18 мая 2018 года), а также представлены на расширенном заседании отдела фармакогенетики ФГБУ «НИИ фармакологии им. В.В.Закусова» (Москва, 2018).

Публикации. Результаты исследований опубликованы в 8 печатных работах, из них 3 статьи в ведущих рецензируемых научных журналах,

определенных ВАК Минобрнауки РФ, и 5 тезисов в материалах российских и международных конференций.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 184 страницах компьютерного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов экспериментов, их обсуждения, выводов, списка сокращений и литературы. Диссертационная работа иллюстрирована 50 таблицами и 26 рисунками. Библиографический указатель включает 267 источников, из них 59 отечественных и 208 зарубежных.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Индуцированный мутагенез и его медицинские последствия

Мутагенез - фундаментальный биологический процесс, лежащий в основе наследственной изменчивости и эволюционно обеспечивший индивидуальное разнообразие за счет генетического полиморфизма [19; 38]. Возникновение мутаций происходит за счет воздействия на генетические структуры разнообразных экзогенных и эндогенных факторов. Научно-технический прогресс и индустриализация привели к резкому изменению экологической обстановки в масштабах всей планеты, что к настоящему времени фактически создало новую экологическую систему с высокой представленностью антропогенных факторов физической, химической и биологической природы, оказывающих интенсивное мутационное воздействие на человека.

Спектр потенциальных генотоксических событий включает повреждения ДНК, генные, хромосомные и геномные мутации, основным негативным последствием которых является накопление «генетического груза» наследственных болезней (таблица 1).

Таблица 1 - Структура генетического груза (А.Д. Дурнев с соавторами, 2013)

Генотоксическое событие Патология Примеры

Генные мутации Генные болезни (>4 тыс.) Распространенность 0.1/100-1/100 Фенилкетонурия, Мусковисцидоз, Ахондроплазия, Гемофилия, Синдром Марфана и др. Нейрофиброматоз, до 50% мутаций de novo

Хромосомные и геномные мутации Хромосомные болезни (около 100) Распространенность 0.5/100 Синдром Клайнфелтера XXY, Синдром Шерешевского-Тернера XO, Синдром «крика кошки» и др. Синдром Дауна 1/400-1/800

Геномные мутации (в 100% случаев -de novo) Снижение фертильности Из 1 млн. планируемых беременностей 580 тыс. завершаются летальным исходом (в 90% случаев -по причине геномных мутаций)

Повреждения ДНК, мутационная и комбинаторная изменчивость, эпигенетические события Мультифакторные заболевания (заболевания с генетической предрасположенностью) Атеросклероз, Бронхиальная астма, Диабет, Нейрогенеративные болезни и др., по существу, все известные нозологии

По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) ежегодно с врожденными дефектами, имеющими генетическую природу, рождается, около 45 миллионов детей, из которых ~276 тысяч умирают от пороков развития в течение первых 4 недель жизни. К наиболее тяжелым порокам развития относятся пороки сердца, дефекты нервной трубки и синдром Дауна [12]. По различным оценкам у 5-10% населения выявляются наследственные нарушения [76].

На сегодняшний день этиологическая и патогенетическая роль индуцированного мутагенеза для организма человека не вызывает сомнений [18]. Биологические и медицинские последствия для отдельного индивидуума могут иметь генотоксические поражения половых и соматических клеток (таблица 2). Хромосомные и геномные нарушения, возникающие в клетках развивающегося эмбриона и/ или половых клетках родителей, могут приводить к бесплодию, наследственным болезням, врожденным порокам развития. Так, с генетическими нарушениями связано до 60% случаев невынашивания беременности и до 25% случаев возникновения врожденных пороков развития [18; 128; 171].

Большинство хромосомных нарушений в ооцитах возникают вследствие неправильного расхождения хромосом в анафазе I деления мейоза, а анеуплоидия является самым распространенным типом хромосомных аномалий у человека [15; 249].

Таблица 2 - Возможные биологические и медицинские последствия генотоксических поражений [А.Д. Дурнев с соавторами, 2013]

Причина Последствия

Индукция повреждений ДНК Мутагенез, Тератогенез, Канцерогенез Снижение фертильности, Цитотоксичность (нейродегенерация и эндотелиальные поражения, старение)

Индукция мутаций В половых клетках Наследственные болезни, бесплодие, злокачественные новообразования, преждевременное старение, нарушения иммунитета, врожденные пороки развития, спонтанные аборты

Индукция мутаций В соматических клетках Злокачественные новообразования, старение

Индукция мутаций В эмбриональных клетках Врожденные пороки развития, спонтанные аборты, заболевания, обусловленные соматическим мозаицизмом

Индукция мутаций В митохондриях Митохондриальные мио-, энцефало- и нейропатии, атеросклероз, сахарный диабет , старение

Следствием нарушения целостности ДНК сперматозоидов является бесплодие и аномальное прерывание развития плода [234; 239].

Исследования гаметогенеза у человека показали, что оогенез более подвержен ошибкам в мейозе, чем сперматогенез [19; 193]. На долю младенческой и детской смертности вследствие хромосомных аномалий приходится 5-7% случаев [128]. При этом следует подчеркнуть, что дифференцировать эффекты, возникающие в результате мутаций в родительских половых клетках и в соматических эмбриональных клетках, не всегда представляется возможным.

Мутации, возникающие в соматических клетках, могут стать причиной индукции и прогрессии злокачественных новообразований, преждевременного старения, нарушений иммунитета [110, 257]. По данным ВОЗ в 2015 году от онкологических заболеваний, занимающих второе место по причине смертности в мире, умерло 8,8 миллионов человек [13]. По мнению специалистов, злокачественные новообразования относят к генетическим заболеваниям, возникающим преимущественно вследствие индукции и накопления мутаций в соматических клетках, приводящих к их бесконтрольному росту [67; 140]. Способность противоопухолевых препаратов вызывать мутагенные эффекты в тканях, не являющихся мишенями, может приводить к возникновению вторичных опухолей [77]. Очевидна взаимосвязь дефектов репарации ДНК с возникновением злокачественных новообразований. Следствием мутационных процессов также является активация протоонкогенов и инактивация генов-онкосупрессоров [18]. В итоге взаимосопряженность между мутагенезом и канцерогенезом не вызывает сомнений.

К настоящему моменту имеется большое количество сведений, указывающих на повышенный уровень поврежденности ДНК при таких распространенных заболеваниях как атеросклероз, бронхиальная астма и диабет (таблица 1). Также на современном этапе генотоксические поражения

соматических клеток рассматривают как одну из причин преждевременного старения организма [18].

Обращено внимание на медицинские последствия повреждений митохондриального генома. Считается, что следствием превышения определенного уровня митохондриальных мутаций, являются такие патологии, как атеросклероз, сахарный диабет, мио-, энцефало- и нейропатии [18; 95].

Таким образом, воздействие генотоксикантов имеет разнообразные негативные последствия как на здоровье отдельных индивидуумов, так и популяций в целом. Невозможность полного исключения всех генотоксических факторов из среды обитания человека актуализирует необходимость разработки и проведения мер для предотвращения негативных эффектов вызванных индуцированным мутагенезом.

1.2. Источники генотоксических воздействий

Мутационное воздействие на организм человека оказывает совокупность факторов различной интенсивности химической, физической и биологической природы.

1.2.1. Эндогенные

Главным источником эндогенного мутирования являются процессы свободно-радикального окисления [22; 139]. Стационарные уровни продуктов повреждения ДНК активными формами кислорода (АФК) на несколько порядков превышают аналогичный показатель для других ДНК-аддуктов [91]. Наиболее реакционно-активная АФК - гидроксильный радикал, приводит к образованию более 20 видов окисленных оснований ДНК и образованию разрывов нитей ДНК вследствие повреждения дезоксирибозы. ДНК-повреждающей активностью обладают образующиеся в организме продукты перекисного окисления липидов -липидные радикалы и альдегиды (малоновый диальдегид, акролеин, 4,5-диоксивалериановая кислота и др.) [169]. Аналогичные свойства показаны и для

образующегося эндогенно NO', окисление которого молекулярным кислородом приводит к образованию ряда продуктов, таких как N2O3, HNO2- и ONOO- , способных нитрозировать и/или дезаминировать основания ДНК с образованием различных аддуктов и модифицированных оснований [195].

Опосредованной генотоксической активностью обладают эндогенные эстрогены, метаболиты которых эстрадиол-2,3-хиноны, эстрадиол-3,4-хиноны и 16-альфа-гидроксиэстроны, образуют аддукты с основаниями ДНК, преимущественно с гуанином и аденином [93]. Способность образовывать аддукты с ДНК, установлена для эндогенных альдегидов, образующихся в процессе карбонильного стресса при аутоокислении глюкозы, в том числе глиоксаля, метилглиоксаля и 3- дезоксиглюкозы [59].

Опосредованное гиперпродукцией АФК и нарушением антиоксидантой защиты генотоксическое воздействие оказывают различные возбудители паразитарных и инфекционных заболеваний [210]. Имеются сведения о повышении уровней мутирования при инфицировании Helicobacter pylori [236], заражении гельминтами [49], различными вирусами [207], в частности вирусом папилломы человека [103], гриппа [255], гепатита В [208] и полиомиелита [161]. Опосредованное мутагенное действие проявляют не только инфекционные формы вирусов, но также живые вакцины, в частности, вакцины от полиомиелита и кори [14]. Увеличение уровня хромосомных аберраций выявлено при нарушении гормонального гомеостаза и при стрессовых воздействиях [108].

Таким образом, продукты нормального метаболизма могут являться источником генотоксического воздействия на организм человека, обуславливающих в совокупности процессы эндогенного мутагенеза. Для их детоксикации эволюционно сложилась эшелонированная система защиты, нарушение которой при различных патологиях и патологических состояниях способно вызывать превышение физиологически обусловленного спонтанного уровня мутирования.

1.2.2. Средовые

Основными физическими факторами генотоксического воздействия являются ионизирующая радиация и ультрафиолетовое излучение [1]. Земная радиация представлена естественными радионуклидами, содержащимися в земной коре, распад которых сопровождается образованием большого количества радиоизотопов. Искусственный радиационный фон земли обусловлен выбросами радионуклидов в результате аварий на АЭС, в результате испытаний ядерного оружия или захоронений радиоактивных отходов, а также использовании искусственных ионизирующих излучений в медицине, народном хозяйстве [242].

Воздействие радиации на человека может приводить к двум категориям различных мутационных событий. В постнатальный период развития организма ионизирующее излучение приводит к возникновению злокачественных новообразований, иммунодефицитных состояний, лучевой болезни [38]. В период внутриутробного развития может приводить к возникновению наследуемых мутаций, увеличению вероятности спонтанного аборта или рождения ребенка с наследственной болезнью, с пороками развития, часто влекущими раннюю смертность [1].

Среди антропогенных факторов долговременного воздействия следует отметить истощение озонового слоя, приводящего к усилению воздействия ультрафиолетового излучения на человека. Мутагенные эффекты ультрафиолетовых лучей связывают с возникновением злокачественных новообразований кожи [99].

Основными по распространенности средовыми источниками генотоксического воздействия являются химические соединения, образующиеся в производственных процессах различных видов промышленности [117]. При этом надо отметить, что промышленные генотоксиканты представляют опасность не только для лиц, непосредственно принимающих участие в производственном процессе, но и для большого количества людей, проживающих в районах окружающих источники этих вредностей. Выявлены генотоксические свойства

следующих химических соединений — полициклических ароматических углеводородов, алкилирующих агентов, оксидов углерода, азота и серы, стирола, бензола, акриламида, винилхлора, а также тяжелых металлов: никеля, кадмия, свинца, ртути [22; 73; 159; 246]. Например, было установлено, что бензол и его метаболит 1-4-бензохинон являются известными источниками загрязнения окружающей среды и были определены как факторы риска возникновения гемопоэтических опухолей, таких как миелодиспластический синдром (МДС) и острый миелолейкоз (ОМЛ) [221; 228] (таблица 3).

До 7 тысяч ежегодно синтезируемых химических соединений оказываются мутагенами и примерно такое же количество канцерогенами [50]. Активные разработки в области нанотехнологий привело к появлению в среде обитания соединений/веществ с уникальными физико-химическими свойствами [26; 172]. Так, наночастицы серебра и диоксида титана индуцируют окислительный стресс и вызывают хромосомные аберрации в условиях in vivo [132; 250]. Генотоксические эффекты проявляли наночастицы оксида алюминия [75]. Следует отметить, что отсутствие адекватной верифицированной методологической базы в области генотоксикологии наноматериалов не позволяет на сегодняшний день дать оценку возможных мутагенных эффектов наночастиц [26; 111; 237].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Плигина Кира Львовна, 2019 год

8. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абилев, С.К. Мутагенез с основами генотоксикологии: учебное пособие [Текст] / С.К. Абилев, В.М. Глазер. - М.; СПб.: Нестор - История, 2015. - 304 с.

2. Абилев, С.К. Генетическая токсикология: итоги и проблемы [Текст] / С.К. Абилев, В.М. Глазер // Генетика. - 2013. - Т. 49 (1). - С. 81 - 93.

3. Аршинова, С.С. Иммуномодулятор полиоксидоний в комплексной терапии больных туберкулезом легких [Текст] / С.С. Аршинова, Б.В. Пинегин, В.А. Стаханов и др. // Иммунология. - 2001. - № 3. - C. 35 - 40.

4. Баранов, В.С. Цитогенетика эмбрионального развития человека: Научно-практические аспекты [Текст] / В.С. Баранов, Т.В. Кузнецова. - СПб: изд. Н-Л, 2007. - 640 с.

5. Безуглый, Н.Д. Осмотическая реакция яйцеклеток и эмбрионов млекопитающих в растворах криопротекторов. I. Общее описание изменений клеточного объема [Текст] / Н.Д. Безуглый, Н.А. Гордиенко // Проблемы криобиологии. - 1995. - № 3. - С. 40 - 46.

6. Богданов, В.П. Исследование методом соматической рекомбинации дрозофил, подвергшихся воздействию продольных электромагнитных волн [Текст] / В.П. Богданов, В.В. Воронов, Р.А. Сидоров и др. // Вестник новых медицинских технологий. - 1995. - Т. 2 (3-4). - С.6-9.

7. Вагина, И.Н. Оптимизация системы для проведения генетико-эмбриологических исследований на инбредных линиях мышей 3. Условия гормональной стимуляции самок и культивирования in vitro зародышей на доимплантационной стадии развития у мышей инбредных линий ICR, CBA/Lac и C51Bl/6j [Текст] / И.Н. Вагина, Т.Г. Титок, Н.А. Сарапина и др. // Биополимеры и клетка. - 1997. - Т.13 (3). - С. 232 - 238.

8. ВОЗ. Биомониторинг человека: факты и цифры. - Копенгаген: Европейское региональное бюро ВОЗ. -2015.

9. ВОЗ. Выпуск новостей. 7 миллонов смертей ежегодно связаны с загрязнением воздуха. Женева. - 25 марта 2014 года.

10. ВОЗ. Информационный бюллетень. Безопасность продуктов питания. -31 октября 2017 года.

11. ВОЗ. Информационный бюллетень. Остатки пестицидов в продуктах питания. -19 февраля 1018 года.

12. ВОЗ. Пороки развития Информационный бюллетень № 370. - Апрель 2015 года.

13. ВОЗ. Рак. Информационный бюллетень. - Февраль 2017 года.

14. Волгарева, Г.М. Генотоксичность вакцин: эколого-генетическая проблема с незавершенным решением [Текст] / Г.М. Волгарева // Генетика. - 1995. - № 4. - C. 437 - 457.

15. Ворсанова, С. Г. Медицинская цитогенетика: учебное пособие [Текст] / С. Г. Ворсанова, Ю. Б. Юров, В. Н. Чернышев. - М: ИД Медпрактика - М, 2006. - 300 с.

16. Горбатова, Д.М. Повреждения ДНК в клетках плацент и эмбрионов крыс, подвергнутых воздействию торфяного дыма; антигенотоксический эффект афобазола [Текст] / Д.М. Горбатова, А.К. Жанатаев, Е.П. Немова, А.Д. Дурнев // Экологическая генетика. - 2016. - Т. 14 (2). - C. 50 - 56.

17. Даугель-Дауге, Н.О. Оценка генотоксичности парацетамола и его комбинации с верапамилом in vivo [Текст] / Н.О. Даугель-Дауге, А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2017. - № 4. - С. 23 - 27.

18. Дурнев, А.Д. Генотоксические поражения и болезни [Текст] / А.Д. Дурнев, А.К. Жанатаев, О.В. Шредер, В.С. Середенина // Молекулярная медицина. -2013. - № 3. - С. 3 - 19.

19. Дурнев, А.Д. Анализ и значение мутаций в зародышевых клетках [Текст] / А.Д. Дурнев // Медицинская генетика. - 2011. - № 2. С. 3 - 11.

20. Дурнев, А.Д. Генотоксикология соединений растительного происхождения / А.Д. Дурнев, А.С. Лапицкая [Текст] // Экологическая генетика. -2012. - Т. 10 (3). - С. 41 - 52.

21. Дурнев, А.Д. Генетическая токсикология [Текст] / А.Д. Дурнев // Вестник российской АМН. - 2011. - №9. - С. 35 - 43.

22. Дурнев, А.Д. Мутагены (скрининг и фармакологическая профилактика воздействий) [Текст] / А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин. - М.: Медицина, 1998. -328 с.

23. Дурнев, А.Д. Оценка генотоксических свойств методом ДНК-комет in vitro [Текст] / А.Д. Дурнев, А.К. Жанатаев, Н.П. Сирота и др. // Методические рекомендации. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010. - 15 с.

24. Дурнев, А.Д. Оценка цитогенетической и мутаген-модифицирующей активности кофеина в клетках костного мозга мышей [Текст] / А.Д. Дурнев, А.В. Кулакова, А.К. Жанатаев, Л.А. Оганесянц // Гигиена и санитария. - 2015.

- №3. - C. 106 - 110.

25. Дурнев, А.Д. Перспективы определения 8-гидрокси-2-дезоксигуанозина в качестве биомаркера окислительного стресса в эксперименте и клинике [Текст] / А.Д.Дурнев, А.К. Жанатаев, С.Б. Середенин // Вестник Российской академии медицинских наук. - 2002. - № 2. - С. 45-49.

26. Дурнев, А.Д. Профилактическая токсикология и гигиеническое нормирование. Оценка генотоксичности наночастиц при использовании в медицине [Текст] /

A.Д. Дурнев // Гигиена и санитария. - 2014. - № 2. - C. 76 -83.

27. Дурнев, А.Д. Фармакологическая защита генома [Текст] / А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин. - М.: ВИНИТИ, 1992. - 161 с.

28. Дыбан, А. П. Раннее развитие млекопитающих [Текст] / А.П. Дыбан. -Ленинград : Наука, 1988. - 228 с.

29. Дыбан, А.П. Цитогенетика развития млекопитающих [Текст] / А.П. Дыбан,

B.С. Баранов. - M: Наука, 1976. - 216 с.

30. Жанатаев, А.К. Метод ДНК-комет в генотоксикологических исследованиях [Текст] / А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин. // Гигиена и санитария.

- 2011. - №5. - C. 86 - 90.

31. Жанатаев, А.К. Сравнительное изучение антимутагенной активности афобазола при различных режимах введения [Текст] / А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2000. - Т. 130 (11). - С. 539 - 542.

32. Журков, В.С. Цитогенетическое действие кофеина в культуре лимфоцитов человека [Текст] / В.С. Журков, Т.И. Сурайкина // Генетика. - 1971. - Т. 7. -№7. - С. 161-163.

33. Засухина, Г.Д. Мутагенез, антимутагенез, репарация ДНК [Текст] / Г.Д. Засухина, Т.А. Синельщикова // Вестник РАМН. - 1993. - №1. - С. 9 - 14.

34. Кобелев, К.В. / Способ антимутагенного воздействия на организм. Патент на изобретение РФ № 2261704 [Текст] // К.В. Кобелев, А.В. Орещенко, А.Д. Дурнев, А.К. Жанатаев.

35. Манк, М. Биология развития млекопитающих. Методы [Текст] / М. Манк (под ред. В.С. Баранова). - М: Мир, 1990. - 406 с.

36. Межевикина, Л.М. Экспериментальные основы создания низкотемпературного банка эмбрионов лабораторных мышей: автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата биологических наук 03.00.11 [Текст] / Межевикина Людмила Михайловна. -1990. - 16 с.

37. Морозова, Т. Ацетилцистеин в клинической практике [Текст] / Т. Морозова, Т. Андрущишина // Врач. - 2007. - № 12. - С. 37 - 38.

38. Наследственные болезни. Национальное руководство по медицинской генетике [Текст] / под ред. Н.П. Бочкова, Е.К. Гинтера, В.П. Пузырева. - М.: ГЕОТАР-Медиа, 2013. - 936 с.

39. Оценка токсичности и опасности химических веществ и их смесей для здоровья человека: Руководство. Москва, «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора», 2014, - 639 с.

40. Пенджиев, А.М. Физико-химический состав кофейного напитка [Текст] / А.М. Пенджиев // Рациональное питание, пищевые добавки и биостимуляторы. -2016. - № 1. - С. 100 - 111.

41. Плигина, К.Л. Разработка методики цитогенетического анализа в ооцитах мышей [Текст] / К.Л. Плигина, З.В. Чайка, А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев, С.Б. Середенин // Материалы IV съезда фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» 18-21 сентября 2012 года, республика Татарстан, г. Казань. - М.: Фолиум, 2012. - С.

42. Плигина, К.Л. Цитогенетический анализ в ооцитах мышей [Текст] / К.Л. Плигина, З.В. Чайка, А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев // Материалы IV съезда токсикологов России , 6-8 ноября 2013 г., Москва. - С. 369.

43. Плигина, К.Л. Методика цитогенетического анализа ооцитов мышей [Текст] / К.Л. Плигина, А.К. Жанатаев, З.В. Чайка, А.Д. Дурнев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2013. Т. 156 (7). С. 128-132.

44. Плигина, К.Л. Цитогенетические эффекты модельных мутагенов в ооцитах мышей [Текст] / К.Л. Плигина, З.В. Чайка, А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев // Материалы VII съезда Российского общества медицинских генетиков, г. Санкт-Петербург, 19-23 мая 2015 г./ Медицинская генетика, 2015, №3, - С. 64.

45. Плигина, К.Л. Антимутагенные эффекты ацетилцистеина в ооцитах мышей [Текст] / К.Л. Плигина, А.К. Жанатаев, А.В. Кулакова, З.В. Чайка, А.Д. Дурнев // Материалы 6-ой международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам», Москва, 9-13 ноября 2015 г. Экспериментальная и клиническая фармакология, Прил., - С. 50.

46. Плигина, К.Л. Влияние ацетилцистеина на цитогенетические эффекты этопозида в ооцитах мышей [Текст] / К.Л. Плигина, А.К. Жанатаев, А.В. Кулакова, З.В. Чайка, А.Д. Дурнев // Генетика. 2016. Т.52 (2). С. 215-220

47. Плигина, К.Л. Индуцированные анеугенные эффекты в ооцитах мышей in vivo [Текст] / К.Л. Плигина, А.К. Жанатаев, А.В. Кулакова, Н.О. Даугель-Дауге, А.Д. Дурнев // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2017. Т. 163, № 4. С. 419 425.

48. Плигина К.Л. Валидизация метода цитогенетического анализа в ооцитах мышей [Текст] / К.Л. Плигина, А.В. Кулакова, А.К. Жанатаев, А.Д. Дурнев // материалы V съезда фармакологов России, 14-18 мая 2018 года, г. Ярославль, -С.191.

49. Побяржин, В.В. Влияние антигенов из тканей гельминтов на хромосомные наборы лимфоцитов крови человека in vitro [Текст] / В.В. Побяржин, В.Я. Бекиш // Вестник Витебского Государственного Медицинского Университета. - 2003. - Т. 2 (2). - C. 73 - 80.

50. Рахманин, Ю.А. Полиорганный микроядерный тест в эколого-гигиенических исследованиях [Текст] / под ред. Академика РАМН, д.м.н. проф. Рахманина Ю.А., д.б.н. Сычевой Л.П. - М.: Гениус, 2007. - 312 с.

51. Ревазова, Ю.А. Системная оценка мутагенной активности лекарственных средств: автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук 03.00.02; 03.00.15 [Текст] / Ревазова Юлия Анатольевна. -1983. - 49 с.

52. Рубцов, Н.Б. Методы работы с хромосомами млекопитающих: учебное пособие [Текст] / Н.Б. Рубцов. - Новосибирск. Новосибирский государственный университет, 2006. - 152 с.

53. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть 1. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

54. Сайфитдинова, А. Ф. Двумерная флуоресцентная микроскопия для анализа биологических образцов: учебно-методическое пособие [Текст] / А. Ф. Сайфитдинова. - Санкт-Петербург, 2011. -110 с.

55. Стокгольмская конвенция о СОЗ. Die Stockholm Konvention (POPs Konvention) Eine international verbindliche Regelung zur weltweiten Beseitigung von extrem gefährlichen Dauergiften. - PAN Germany. Carina Weber, Hamburg, 2002. [электронный ресурс] http://www.pan-germany.org/download/russ-pops.pdf

56. Тимошевский, В.А. Биологическая индикация мутагенных воздействий и генетической нестабильности у человека путем учета числовых хромосомных нарушений [Текст] / В.А. Тимошевский, С.А. Назаренко // Вестник ВОГиС. - 2006. -Т. 10 (3). - С.530 -539.

57. Узбеков, Р.Э. Центросома - загадка «клеточного процессора» [Текст] / Р.Э. Узбеков, И.Б. Алиева // Цитология. - 2008. - Т.50(2). - C. 91 - 112.

58. Шредер, Е.Д. Влияние афобазола на генотоксические и нейротоксические эффекты в модели пренатальной алкоголизации крыс [Текст] / Е.Д. Шредер, О.В. Шредер, В.В. Забродина и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2014. - № 4. - С.492 - 495.

59. Шумаев, К.Б. Механизм образования супероксидного радикала при взаимодействии L-лизина с дикарбонильными соединениями [Текст] / К.Б. Шумаев, С.А. Губкина, Е.М. Кумскова и др. // Биохимия. - 2009. - T. 74 (4). -C. 568 - 574.

60. Abnet, C. C. Carcinogenic Food Contaminants [Text] / C. C. Abnet // Cancer Invest. - 2007. - V. 25 (3) - P. 189 - 196.

61. Adler, I.D. Clastogenic effects of acrylamide in mouse bone marrow cells [Text] / I.D. Adler, I. Ingwersen, U. Kliesch, A. el Tarras // Mutation Research. - 1988.

- V. 206 (3). - P. 379 - 385.

62. Adler, I.D. Screening for possible human carcinogens and mutagens: a symposium report [Text] / I.D. Adler, J. Ashby, F.E. Würgler // Mutation Research. -1989. -V. 213 (1). - P. 27 - 39.

63. Adler, I.D. The present lack of evidence for unique rodent germ-cell mutagens [Text] / I.D. Adler, J. Ashby // Mutation Research. -1989. -V. 212 (1). - P. 55 -66.

64. Agarwal, A. Role of sperm chromatin abnormalities and DNA damage in male infertility [Text] / A. Agarwal, T.M. Said // Human Reproduction Update. - 2003.

- V. 9 (4). - P. 331 - 345.

65. Aitken, R.J. Analysis of the relationships between oxidative stress, DNA damage and sperm vitality in a patient population: development of diagnostic criteria [Text] / Aitken R.J., De Iuliis G., Finnie J.M. et al. // Human Reproduction. -2010. - V. 25 (10). - P. 2415 - 2426.

66. Almonacid, M. Actin-based spindle positioning: new insights from female gametes [Text] / M. Almonacid, M. Terret, M. Verlhac // Journal of Cell Science. -2014. -V. 127 (3). - P. 477 - 483.

67. Altieri, F. DNA damage and repair: from molecular mechanisms to health implications [Text] / F. Altieri, C. Grillo, M. Maceroni et al. // Antioxidants & Redox Signaling. - 2008. - V. 10 (5). - P. 891 - 937.

68. Ames, B.N. An Improved Bacterial Test System for the Detection and Classification of Mutagens and Carcinogens [Text] / B.N. Ames, F.D. Lee, W.E. Durston // Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. -1973. -V. (3). - P. 782 - 786.

69. Andreu, J.M. Tubulin-colchicine interactions and polymerization of the complex [Text] / J.M. Andreu, S.N. Timasheff // Annals of the New York Academy of Sciences. - 1986. - V. 466. - P. 676 - 689.

70. Aras, D. In Vivo acrylamide exposure may cause severe toxicity to mouse oocytes through its metabolite glycidamide [Text] / D. Aras, Z. Cakar, S. Ozkavukcu et al. // PLoS ONE. - 2017. -V.12 (2). -e0172026.

71. Attia, S.M. Dominant lethal mutations of topoisomerase II inhibitors etoposide and merbarone in male mice: a mechanistic study [Text] / S.M. Attia // Archives of Toxicology. -2012. - V. 86 (5). - P. 725 - 731.

72. Baarends, W.M. DNA repair mechanisms and gametogenesis [Text] / W.M. Baarends, R.van der Laan, J.A. Grootegoed // Reproduction. - 2001. - V. 121 (1). - P.31 - 39.

73. Bagchi, D. Cadmium- and chromium-induced oxidative stress, DNA damage, and apoptotic cell death in cultured human chronic myelogenous leukemic K562 cells, promyelocytic leukemic HL-60 cells, and normal human peripheral blood mononuclear cells [Text] / D. Bagchi, S.S. Joshi, M. Bagchi et al. // Journal of Biochemical and Molecular Toxicology. - 2000. - V. 14 (1). - P. 33 - 41.

74. BaKou, K. Spontaneous and spindle poison-induced micronuclei and chromosome non-disjunction in cytokinesis - blocked lymphocytes from two age group of women [Text] / K. BaKou, G. Stephanou, C. Andrianopoulos, N.A. Demopoulos // Mutagenesis. - 2002. - 17(3). - P. 233 - 239.

75. Balasubramanyam, A. In vivo genotoxicity assessment of aluminium oxide nanomaterials in rat peripheral blood cells using the comet assay and micronucleus test [Text] / A. Balasubramanyam, N. Sailaja, M. Mahboob et al. // Mutagenesis. -2009. - V. 24 (3). - P. 245 - 251.

76. Becker, F. Genetic testing and common disorders in a public health framework: how to assess relevance and possibilities [Text] / F. Becker, C. G. van El, D. Ibarreta et al. // European Journal of Human Genetics. -2011. - V. 19. -P. 6 - 44.

77. Benjamini, O. Second cancers in patients with chronic lymphocytic leukemia who received frontline fudarabine, cyclophosphamide and rituximab therapy: distribution and clinical outcomes [Text] / O. Benjamini, P. Jain, L. Trinh et al. // Leukemia & Lymphoma. - 2015. - V. 56 (6). - P.1643 - 1650.

78. Bennabi, I. Meiotic spindle assembly and chromosome segregation in oocytes [Text] / I. Bennabi, M.E. Terret, M.H. Verlhac // The Journal of Cell Biology. -2016. - V. 215. - P. 611 - 619.

79. Bergman, K. The genotoxicity and carcinogenicity of paracetamol: a regulatory (re) view [Text] / K. Bergman, L. Müller, S.W. Teigen // Mutation Research. -1996. -V. 349. - P.263 - 288.

80. Berthelot-Ricou, A. Comet assay on mouse oocytes: an improved technique to evaluate genotoxic risk on female germ cells [Text] / A. Berthelot-Ricou, J. Perrin, C. Di Giorgio et al. // Fertility and Sterility. - 2011. - V. 95 (4). - P. 1452 -1457.

81. Brambilla, G. Genotoxicity and carcinogenicity studies of antihistamines [Text] / G. Brambilla, F. Mattioli, L. Robbiano, A. Martelli //Archives of Toxicology. -2011. -V. 85 (10). - P.1173 - 1187.

82. Brambilla, G. Genotoxicity and carcinogenicity studies of bronchodilators and antiasthma drugs [Text] / G. Brambilla, F. Mattioli, L. Robbiano, A. Martelli // Basic & Clinical Pharmacology & Toxicology. -2013. - V. 112(5). - P. 302 -313.

83. Brambilla, G. Genotoxic and carcinogenic effects of antipsychotics and antidepressants [Text] / G. Brambilla, F. Mattioli, A. Martelli // Toxicology. -2009. - V. 261 (3). - P. 77 - 88.

84. Brambilla, G. Genotoxic and carcinogenic effects of gastrointestinal drugs [Text] / G. Brambilla, F. Mattioli, A. Martelli // Mutagenesis. - 2010. - V. 25 (4). - P. 315 - 326.

85. Brambilla, G. Genotoxicity and carcinogenicity studies of antihypertensive agents [Text] / G. Brambilla, A. Martelli // Mutation Research. - 2006. - V. 612 (2). - P. 115 - 149.

86. Brambilla, G. Genotoxicity and carcinogenicity studies of benzodiazepines [Text] / G. Brambilla, R. Carrozzino, A. Martelli // Pharmacological Research. - 2007. - V. 56 (6). - P. 443 - 458.

87. Brambilla, G. Genotoxicity and carcinogenicity studies of analgesics, anti-inflammatory drugs and antipyretics [Text] / G. Brambilla, A. Martelli // Pharmacological Research. - 2009. - V. 60 (1). - P. 1 - 17.

88. Brambilla, G. Studies on genotoxicity and carcinogenicity of antibacterial, antiviral, antimalarial and antifungal drugs [Text] / G. Brambilla, F. Mattioli , L. Robbiano, A. Martelli // Mutagenesis. -2012. - V. 27 (4). - P. 387 - 413.

89. Bromberg, K. D. A Two-drug model for etoposide action against human Topoisomerase II [Text] / K.D. Bromberg, A.B. Burgin, N. Osheroff et al. // The Journal of Biological Chemistry. - 2003. - V. 278 (9). - P. 7406 - 7412.

90. Brown, K. Methods for the detection of DNA adducts [Text] / K. Brown // Methods in Molecular Biology. - 2012. - V. 817. - P.207 - 230.

91. Cadet, J. DNA base damage by reactive oxygen species, oxidizing agents, and UV radiation [Text] / J. Cadet, J. R. Wagner // Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. - 2013. - V.5. - P. 1- 18.

92. Carroll, J. The DNA damage response in mammalian oocytes [Text] / J. Carroll, P. Marangos // Frontiers in genetics. - 2013. - V.4. - P. 1 - 9.

93. Cavalieri, E. Estrogens as endogenous genotoxic agents—DNA adducts and mutations [Text] / E. Cavalieri, K. Frenkel, J.G. Liehr et al. // Journal of the National Cancer Institute. Monographs. - 2000. -V. 27. - P. 75 - 93.

94. Cheng, S.C. DNA adducts from carcinogenic and noncarcinogenic enantiomers of benzo[a]pyrene dihydrodiol epoxide [Text] / S.C. Cheng, B.D. Hilton, J.M. Roman, A. Dipple // Chemical Research in Toxicology. - 1989. - V. 2 (5). - P. 334 - 340.

95. Cline, S.D. Mitochondrial DNA damage and its consequences for mitochondrial gene expression [Text] / S.D. Cline // Biochimica et Biophysica Acta. - 2012. - V. 1819 (9-10). - P. 979 - 991.

96. Corbett, H.E. Uptake of betaine into mouse cumulus-oocyte complexes via the SLC7A6 isoform of y+L transporter [Text] / H.E. Corbett, C.D. Dubé, S. Slow et al // Biology of Reproduction. - 2014. -V. 90 (4) - P. 1 - 9.

97. Cordelli, E. Evaluation of DNA damage in different stages of mouse spermatogenesis after testicular X irradiation [Text] / E. Cordelli, A.M. Fresegna, G. Leter et al // Radiation Research. - 2003. - V. 160(4). - P. 443 - 451.

98. Craig, S.A. Betaine in human nutrition [Text] / S.A. Craig // The American journal of clinical nutrition. - 2004. - V. 80 (3). - P. 539 - 549.

99. D'Orazio, J. UV Radiation and the skin [Text] / J. D'Orazio, S. Jarrett, A. Amaro-Ortiz, T. Scott // International Journal of Molecular Sciences. -2013. - V. 14 (6). -P. 12222 - 12248.

100. De Flora, S. Antigenotoxic and cancer preventive mechanisms of N-Acetyl-L-Cysteine [Text] / S. De Flora, A. Izzotti, A. Albini et al. In: Cancer Chemoprevention: Promising Cancer Chemoprevention Agents. Humana Press Inc, 2004. - P. 37 - 67.

101. De Flora, S. Chemopreventive properties and mechanisms of N-Acetylcysteine. The experimental background [Text] / S. De Flora, C.F. Cesarone, R.M. Balansky et al. // Journal of Cellular Biochemistry. Supplement. - 1995. - V. 22. - P. 33 -41.

102. De Iuliis, G.N. DNA damage in human spermatozoa is highly correlated with the efficiency of chromatin remodeling and the formation of 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine, a marker of oxidative stress [Text] / G.N. De Iuliis, L.K. Thomson, L.A. Mitchell et al. // Biology of Reproduction. - 2009. - V. 81 (3). - P. 517 - 524.

103. De Marco, F. Oxidative stress and HPV carcinogenesis [Text] / F. De Marco // Viruses. - 2013. -V. 5 (2). - P. 708 - 731.

104. Deans, A.J. DNA interstrand crosslink repair and cancer [Text] / A.J. Deans, S.C. West // Nature Reviews. Cancer. - 2011. - V.11. - P. 467 - 480.

105. Delhanty, J.D. Mechanisms of aneuploidy induction in human oogenesis and early embryogenesis [Text] / J.D. Delhanty // Cytogenetic and Genome Research. -2005. - V. 111 (3 - 4). - P. 237 - 244.

106. Demarini, D.M. Genotoxicity of tobacco smoke and tobacco smoke condensate: a review [Text] / D.M. Demarini // Mutation Research. -2004. - V. 567 (2-3). - P. 447 - 474.

107. Demarini, D.M. Declaring the existence of human germ-cell mutagens [Text] / D.M. Demarini // Environmental and Molecular Mutagenesis. - 2012. -V. 53 (3). -P.166 - 172.

108. Dimitroglou, E. DNA damage in a human population affected by chronic psychogenic stress [Text] / E. Dimitroglou, M. Zafiropoulou, N. Messini-Nikolaki et al. // International Journal of Hygiene and Environmental Health. - 2003. - V. 206 (1). - P. 39 - 44.

109. Donmez-Altuntas, H. Evaluation of genotoxicity, cytotoxicity and cytostasis in human lymphocytes exposed to patulin by using the cytokinesis-block micronucleus cytome (CBMN cyt) assay [Text] / H. Donmez-Altuntas, P. Gokalp-Yildiz, N. Bitgen, Z. Hamurcu // Mycotoxin Research. - 2013. - V. 29 (2). -P. 63 -70.

110. Duesberg, P. Aneuploidy, the somatic mutation that makes cancer a species of its own [Text] / P. Duesberg, D. Rasnick // Cell Motility and the cytoskeleton. -2000. - V. 47 (2). - P. 81 - 107.

111. Durnev, A.D. In vivo study of genotoxicity and teratogenicity of silica nanocrystals [Text] / A.D. Durnev, A.S. Solomina, N.O. Daugel-Dauge, A.K. Zhanataev et al. // International Journal of Biomedical Nanoscience and Nanotechnology. - 2010. -V.1 (1). - P. 70 - 86.

112. Dyban, A.P. An improved method for chromosome preparations from preimplantation mammalian embryos, oocytes or isolated blastomeres [Text] / A.P. Dyban // Stain Technology. -1983. - V. 58 (2). - P. 69 - 72.

113. Edwards, R.E. Timing of the stages of the maturation divisions, ovulation, fertilization and the first cleavage of eggs of adult mice treated with gonadotrophins [Text] / R.E. Edwards, A.H. Gates // The Journal of Endocrinology. -1959. - V. 18. - P. 292 - 304.

114. Efthimiou, M. Aneugenic potential of the nitrogen mustard analogues melphalan, chlorambucil and p-N,N-bis(2-chloroethyl)aminophenylacetic acid in cell cultures

in vitro [Text] / M. Efthimiou, C. Andrianopoulo., G. Stephanou et al. // Mutation Research. - 2007. - V. 617 (1-2). - P. 125 - 137.

115. Eichenlaub-Ritter, U. Bisphenol A Effects on Mammalian Oogenesis and Epigenetic Integrity of Oocytes: A Case Study Exploring Risks of Endocrine Disrupting Chemicals [Text] / U. Eichenlaub-Ritter, F. Pacchierotti. // BioMed Research International. - 2015. - V. 2015. - P. 1 - 11.

116. Eltoum, I. Introduction to the theory and practice of fixation of tissues [Text] / I. Eltoum, J. Fredenburgh, R.B. Myers, W.E. Grizzle // Journal of Histotechnology. -

2001. - V. 24. - P. 173 - 190.

117. Engström, W. The potential for chemical mixtures from the environment to enable the cancer hallmark of sustained proliferative signaling [Text] / W. Engström, P. Darbre, S. Eriksson et al. // Carcinogenesis. - 2015. - V. 36 (1). - P. 38 -60.

118. Epstein, S.S. Use of the dominant-lethal test to detect genetic activity of environmental chemicals [Text] / S.S. Epstein // Environmental Health Perspectives. - 1973. - V. 6. - P. 23 - 26.

119. Ertizeid, G. Adverse effects of gonadotropin treatment on pre- and postimplantation development in mice [Text] / G. Ertizeid, R. Storeng // Journal of Reproduction and Fertility. - 1992. - V. 96 (4). - P. 649 - 655.

120. Evenson, D.P. Sperm chromatin structure assay: its clinical use for detecting sperm DNA fragmentation in male infertility and comparisons with other techniques [Text] / D.P. Evenson, K.L. Larson, L.K. Jost // Journal of Andrology. -

2002. - V. 23 (1). - P. 25 - 43.

121. Evenson, D.P. Characteristics of human sperm chromatin structure following an episode of influenza and high fever: a case study [Text] / D.P. Evenson, L.K. Jost, M. Corzett, R. Balhorn // Journal of Andrology. - 2000. - V. 21 (5). -P. 739 - 746.

122. Evenson, D.P. Clinical aspects of sperm DNA fragmentation detection and male infertility [Text] / D.P. Evenson, R. Wixon // Theriogenology. - 2006. - V. 65 (5). - P. 979 - 991.

123. Fenech, M. In vitro micronucleus technique to predict chemosensitivity [Text] / M. Fenech // Methods in Molecular Medicine. - 2005. - V. 111. - P. 3 - 32.

124. Fernández, J.L. Simultaneous labeling of single- and double-strand DNA breaks by DNA breakage detection-FISH (DBD-FISH) [Text] / J.L. Fernández, D. Cajigal, J. Gosálvez // Methods in Molecular Biology. - 2011. - V. 682. - P. 133 - 147.

125. Fernandez, J.L. The Sperm Chromatin Dispersion Test: a simple method for the determination of sperm DNA fragmentation [Text] / J.L. Fernandez, L. Muriel, M.T. Rivero et al. // Journal of Andrology. - 2003. - V. 24 (1). - P. 59 - 66.

126. Fulka, JJr. Damaged chromatin does not prevent the exit from metaphase I in fused mouse oocytes [Text] / J.Jr. Fulka, P. Kalab, N.L. First, R.M. Moor // Human Reproduction. - 1997. - V.12 (11). - P. 2473 - 2476.

127. Garcia-Sagredo, J.M. Fifty years of cytogenetics: Aparallel viev of the evolution of cytogenetics and genotoxicology [Text] / J.M. Garcia-Sagredo // Biochimica et Biophysica Acta. - 2008. - V. 1779. - P. 363 - 375.

128. Gardner, R.J.M. Chromosome abnormalities and genetic counseling /4th edition/ R.J.M. Gardner, G.R. Sutherland, L.G. Shaffer. - Oxford monographs on medical genetics. New York. Oxford University Press. - 2012. - 648 p.

129. Gates, A.H. Oocyte aneuploidy screening using superovulating prepubertal mice: effect of methotrexate [Text] / A.H. Gates, C.H. Donaldson, M.D. Levy // Teratology. - 1981. - V. 24 (3). - P. 321 - 327.

130. Generoso, W.M. Heritable translocation test in mice [Text] / W.M. Generoso, J.P. Bishop, D.G. Gosslee et al. // Mutation Research. - 1980. - V. 76 (2). - P. 191 -215.

131. Genetic Toxicology: Principles and Methods. Edited by James M. Parry, Elizabeth M. Parry, c/o Springer Science+Business Media, LLC, New York, Humana Press, 2012, - 433 p.

132. Ghosh, M. In vitro and in vivo genotoxicity of silver nanoparticles [Text] / M. Ghosh, J. Manivannan, S. Sinha et al. // Mutation Research. - 2012. - V. 749 (12). - P. 60 - 69.

133. Gill, P. Development of guidelines to designate alleles using an STR multiplex system [Text] / P. Gill, R. Sparkes, C. Kimpton // Forensic Science International. -1997. - V. 89 (3). - P. 185 - 197.

134. Giri, A.K. The genetic toxicology of paracetamol and aspirin: a review [Text] / A.K. Giri //Mutation Research. - 1993. - V. 296 (3). - P. 199 - 210.

135. Goldman, R. Food Mutagens [Text] / R. Goldman, P.G. Shields // The Journal of nutrition. - 2003. - V. 133. - P. 965S - 973S.

136. Gómez, R. Cohesin removal precedes topoisomerase Ila-dependent decatenation at centromeres in male mammalian meiosis II [Text] / R. Gómez, A. Viera, I. Berenguer et al. // Chromosoma. - 2014. - V. 123 (1 - 2). - P. 129 -146.

137. Graf, U. Somatic mutation and recombination test in Drosophila melanogaster [Text] / U. Graf, F.E. Würgler, A.J. Katz et al. // Environmental Mutagenesis. -1984. - V. 6 (2). - P. 153 - 188.

138. Greco, F. A new approach for the oocyte genotoxicity assay: adaptation of comet assay on mouse cumulus-oocyte complexes [Text] / F. Greco, J. Perrin, M. Auffan et al. // Laboratory Animals. - 2014. - V. 49 (3). - P. 251 - 254.

139. Gruber, J. The mitochondrial free radical theory of ageing -where do we stand? [Text] / J. Gruber, S. Schaffer, B. Halliwell // Frontiers in Bioscience. - 2008. - V. 13. - P. 6554 - 6579.

140. Hanahan, D. The hallmarks of cancer: the next generation [Text] / D. Hanahan, R.A. Weinberg // Cell. - 2011. - V. 144 (5). - P. 646 - 674.

141. Hansmann, I. Chromosome aberrations in metaphase II-oocytes. Stage sensitivity in the mouse oogenesis to amethopterin and cyclophosphamide [Text] / I. Hansmann // Mutation Research. - 1974. - V. 22 (2). - P. 175 - 191.

142. Hansmann, I. The genetic basis of non-disjunction: increased incidence of hyperploidy in oocytes from F1 hybrid mice [Text] / I. Hansmann, J. Jenderny // Human Genetics. - 1983. - V.65 (1). - P. 56 - 60.

143. Haveland-Smith, R.B. Screening of food dyes for genotoxic activity [Text] / R.B. Haveland-Smith, R.D. Combes // Food and Cosmetics Toxicology. - 1980. - V. 18. - P. 215 - 221.

144. Heddle, J. A. A rapid in vivo test for chromosomal damage [Text] / J.A. Heddle // Mutation Research. - 1973. - V. 18 (2). - P. 187 - 190.

145. Henkel, R. TUNEL assay and SCSA determine different aspects of sperm DNA damage [Text] / R. Henkel, C.F. Hoogendijk, P.J. Bouic, T.F. Kruger // Andrologia. - 2010. - V. 42 (5). - P. 305 - 313.

146. Higdon, R.E. The effects of cisplatin on murine metaphase II oocytes [Text] / R.E. Higdon, F. Marchetti, J.B. Mailhes et al. // Gynecologic Oncology. - 1992. -V. 47 (3). - P. 348 - 352.

147. Holders, C.A. Simultaneous analysis of chromosomes and chromosome-associated proteins in mammalian oocytes and embryos [Text] / C.A. Holders, P.A. Hunt // Chromosoma. - 2002. - V.111 (3). - P. 165 - 169.

148. Hughes, C.M. Reproducibility of human sperm DNA measurements using the alkaline single cell gel electrophoresis assay [Text] / C.M. Hughes, S.E. Lewis, V.J. McKelvey-Martin, W. Thompson // Mutation Research. -1997. -V. 374 (2). - P. 261-268.

149. Hummler, E. Pattern and frequency of nondisjunction in oocytes from the Djungarian hamster are determined by the stage of first meiotic spindle inhibition [Text] / E. Hummler, I. Hansmann // Chromosoma. - 1988. - V. 97 (3). - P. 224 -230.

150. Hunt, P.A. Bisphenol a exposure causes meiotic aneuploidy in the female mouse [Text] / P.A. Hunt, K.E. Koehler, M. Susiarjo et al // Current Biology. - 2003. - V. 13 (7). - P. 546 - 553.

151. Husgafvel-Pursiainen, K. Genotoxicity of environmental tobacco smoke: a review [Text] / K. Husgafvel-Pursiainen // Mutation Research. - 2004. - V. 567 (2-3). - P. 427 - 445.

152. Hwang, K. The use of fluorescent in situ hybridization in male infertility [Text] / K. Hwang, J.W. Weedin, D.J. Lamb // Therapeutic Advanced in Urology. - 2010. -V. 2(4). - P. 157 - 169.

153. IARC Monographs on the Evaluation of Carcinogenic Risks to Humans. Tobacco Smoke and Involuntary Smoking. - 2004. - V.83. - 1478 p.

154. ICH Harmonized Tripartite Guideline: Guidance on genotoxicity testing and data interpretation for pharmaceuticals intended for human use S2 (R1). International Conference on Harmonisation of Technical Requirements for Registration of

Pharmaceuticals for Human Use. Current Step 4 version 2011. [электронный ресурс] http : // www. ich. Org / fileadmin / Public_Web_Site / ICH_Products / Guidelines / Safet y / S2_R1 / Step4 / S2R1_Step4.pdf.

155. Jordan, M. A. Microtubules as a target for anticancer drugs [Text] / M. A. Jordan, L. Wilson // Nature Reviews. Cancer. - 2004. - V.4 (4). - P. 253 - 265.

156. Jurisicova, A. Molecular requirements for doxorubicin-mediated death in murine oocytes [Text] / A. Jurisicova, H.J. Lee, S.G. D'Estaing et al. // Cell Death and Differentiation. - 2006. - V. 13 (9). - P. 1466 - 1474.

157. Kamiguchi, Y. A new technique for chromosome study of murine oocytes [Text] / Y. Kamiguchi, K. Funaki, K. Mikamo // Proceedings of the Japan Academy. -1976. - V 52. - P. 316 - 319.

158. Katsuki, Y. Caffeine yields aneuploidy through asymmetrical cell division caused by misalignment of chromosomes [Text] / Y. Katsuki, S. Nakada, T. Yokoyama et al // Cancer Science. - 2008. - V. 99 (8). - P. 1539 - 1545.

159. Koedrith, P. Toxicogenomic approaches for understanding molecular mechanisms of heavy metal mutagenicity and carcinogenicity [Text] / P. Koedrith, H. Kim, J.I. Weon, Y.R. Seo // International Journal of Hygiene and Environmental Health. -2013. - V. 216 (5). -Р.587 - 598.

160. Konca, K. A cross-platform public domain PC image-analysis program for the comet assay [Text] / K. Konca, A. Lankoff, A. Banasik // Mutation Research. -2003. - V. 534. - P. 15 - 20.

161. Kuper, H. Infections as a major preventable cause of human cancer [Text] / H. Kuper, H. O. Adami, D. Ttichopoulos // Journal of Internal Medicine. - 2000. - V. 248 (3). - P. 171 - 183.

162. Latt, A. Sister-chromatid exchanges: a report of the GENE-TOX program [Text] / S.A. Latt, J. Allen, S.E. Bloom et al // Mutation Research. - 1981. - V. 87 (1). - P. 127 - 134.

163. Leach, N.T. The application of spectral karyotyping (SKY) and fluorescent in situ hybridization (FISH) technology to determine the chromosomal content(s) of micronuclei [Text] / N.T. Leach, C. Jackson-Cook // Mutation Research. - 2001. -V. 495 (1-2). - P. 11 - 19.

164. Lewis, S.E. Clinical implications of sperm DNA damage [Text] / S.E. Lewis, L. Simon // Human Fertility. - 2010. - V. 13 (4). - P. 201 - 207.

165. Lewis, S.E. Using the alkaline comet assay in prognostic tests for male infertility and assisted reproductive technology outcomes [Text] / S.E. Lewis, I.M. Agbaje // Mutagenesis. -2008. - V. 23 (3). - P. 163 - 170.

166. Li, X.M. DNA topoisomerase II is dispensable for oocyte meiotic resumption but is essential for meiotic chromosome condensation and separation in mice [Text] / X.M. Li, C. Yu, Z.W. Wang et al // Biology of reproduction. - 2013. - V. 89 (5). -P. 1 - 11.

167. Lima, P.H. Levels of DNA damage in blood leukocyte samples from-non-diabetic and diabetic female rats and their fetuses exposed to air or cigarette smoke [Text] / P.H. Lima, D.C. Damasceno, Y.K. Sinzato et al // Mutation Research. - 2008. -V. 653 (1-2). - P. 44 - 49.

168. Liu, L. Checkpoint for DNA integrity at the first mitosis after oocyte activation [Text] / L. Liu, J.R. Trimarchi, P.J.Smith, D.L. Keefe // Molecular reproduction and development . - 2002. - V. 62. - P. 277 - 288.

169. Luczaj, W. DNA damage caused by lipid peroxidation products [Text] / W. Luczaj, E. Skrzydlewska // Cellular and Molecular Biology Letters. - 2003. - V. 8. - P. 391 - 413.

170. Machemer, L. Experiences with the dominant lethal test in female mice: effects of alkylating agents and artificial sweeteners on pre-ovulatory oocytes stages [Text] / L. Machemer, D. Lorke // Mutation Research. - 1975. - V. 29 (2). - P. 209 - 214.

171. Macklon, N.S. Conception to ongoing pregnancy: the 'black box' of early pregnancy loss [Text] / N.S. Macklon, J.P.M. Geraedts, B.C.J.M. Fauser // Human Reproduction. Update. - 2002. - 8 (4). - P. 333 - 343.

172. Magdolenova, Z. Mechanisms of genotoxicity. A review of in vitro and in vivo studies with engineered nanoparticles [Text] / Z. Magdolenova, A. Collins, A. Kumar et al. // Nanotoxicology. - 2014. - V. 8 (3). - P. 233 -278.

173. Mailhes, J. B. Numerical and structural chromosome aberrations induced by etoposide (VP16) during oocyte maturation of mice: transmission to one-cell

zygotes and damage to dictyate oocytes [Text] / J.B. Mailhes, F. Marchetti, D. Young et al. // Mutagenesis. - 1996. - V. 11 (4). -P. 357 - 361.

174. Mailhes, J.B. Chemically-induced aneuploidy in mammalian oocytes [Text] / J.B. Mailhes, F. Marchetti // Mutation Research. - 1994. - V. 320 (1-2). - P. 87 -111.

175. Mailhes, J.B. Cytogenetic analysis of mouse oocytes and one-cell zygotes as a potential assay for heritable germ cell aneuploidy [Text] / J.B. Mailhes, Z.P. Yuan, M.J. Aardema et al. // Mutation Research. - 1990. - V.242. - P. 89 - 100.

176. Mailhes, J.B. Cytogenetic effects of caffeine during in vivo mouse oocyte maturation [Text] / J.B. Mailhes, D. Young, S.N. London // Mutagenesis. - 1996. -V. 11 (4). - P. 395 - 399.

177. Mailhes, J.B. Cytogenetic technique for mouse metaphase II oocytes [Text] / J.B. Mailhes, Z.P. Yuan // Gamete Research. -1987. - 18 (1). - P. 77 - 83.

178. Mailhes, J.B. Differential sensitivity of mouse oocytes to colchicine-induced aneuploidy [Text] / J.B. Mailhes, Z.P. Yuan // Environmental and Molecular Mutagenesis. - 1987. - V. 10 (2). - P. 183 - 188.

179. Mailhes, J.B. Important biological variables that can influence the degree of chemical-induced aneuploidy in mammalian oocyte and zygotes [Text] / J.B. Mailhes // Mutation Research. - 1995. - V. 339 (3). - P. 155 - 176.

180. Mailhes, J.B. Preferential pericentric lesions and aneuploidy induced in mouse oocytes by the Topoisomerase II inhibitor etoposide [Text] / J.B. Mailhes, F. Marchetti, L.P. George et al. // Teratogenesis, Carcinogenesis, and Mutagenesis. -1994. - V. 14 (1). - P. 39 - 51.

181. Mailhes, J.B. Taxol-induced meiotic maturation delay, spindle defects, and aneuploidy in mouse oocytes and zygotes [Text] / J.B. Mailhes, M.J. Carabatsos, D. Young et al. // Mutation Research. - 1999. - V. 423 (1-2). - P. 79 - 90.

182. Mailhes, J.B. Synergism between gonadotrophins and vinblastine relative to the frequencies of metaphase I, diploid and aneuploid mouse oocytes [Text] / J.B. Mailhes, F. Marchetti, D. Young // Mutagenesis. - 1995. - V. 10 (3). - P.185 -188.

183. Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual, 3rd Edition [Text] / Edited by A. Nagy, M. Gertsenstein, K. Vintersten, R.Begringer // Cold Spring Harbor Laboratory Press. - 2003. - P. 148 - 149.

184. Marchetti, F. Variation of mouse oocyte sensitivity to griseofulvin-induced aneuploidy and meiotic delay during the first meiotic division [Text] / F. Marchetti, J.B. Mailhes // Environmental and molecular Mutagenesis. - 1994. - V. 23 (3). - P. 179 - 185.

185. McKenna, D.J. Potential use of the comet assay in the clinical management of cancer [Text] / D.J. McKenna, S.R. McKeown, V.J. McKelvey-Martin // Mutagenesis. - 2008. - V. 23 (3). - P. 183 - 190.

186. Merk, O. Analysis of chromate-induced DNA-protein crosslinks with the comet assay [Text] / O. Merk, K. Reiser, G. Speit // Mutation Research. -2000. -V. 471 (1-2). - P.71 - 80.

187. Miao, Y.L. Effects of caffeine on in vivo and in vitro oocyte maturation in mice [Text] / Y.L. Miao, L.H. Shi, Z.L. Lei et al. // Theriogenology. - 2007. -V. 68 (4).

- P. 640 - 645.

188. Moore, M.M. Differential mutant quantitation at the mouse lymphoma tk and CHO hgprt loci [Text] / M.M. Moore, K. Harrington-Brock, C.L. Doerr, K.L. Dearfield // Mutagenesis. - 1989. - V. 4 (5). - P. 394 - 403.

189. Moralli, D. An improved technique for chromosomal analysis of human ES and iPS cell [Text] / D. Moralli, M. Yusuf, M.A. Mandegar et al. // Stem Cell Reviews.

- 2011. - V. 7 (2). - P. 471 - 477.

190. Morris, I.D. The spectrum of DNA damage in human sperm assessed by single cell gel electrophoresis (Comet assay) and its relationship to fertilization and embryo development [Text] / I.D. Morris, S. Ilott, L. Dixon, D.R. Brison // Human Reproduction. - 2002. - V. 17 (4). - P. 990 - 998.

191. Muratori, M. Critical aspects of detection of sperm DNA fragmentation by TUNEL/flow cytometry [Text] / M. Muratori, L. Tamburrino, S. Marchiani et al. // Systems Biology in Reproductive Medicine. -2010. -V. 56 (4). -P. 277 -285.

192. Muriel, L. Increased aneuploidy rate in sperm with fragmented DNA as determined by the sperm chromatin dispersion (SCD) test and FISH analysis [Text] / L. Muriel, V. Goyanes, E. Segrelles et al. // Journal of Andrology. - 2007. -V. 28 (1). - P. 38 -49.

193. Nagaoka, S.I. Human aneuploidy: mechanisms and new insights into an age-old problem [Text] / S.I. Nagaoka, T.J. Hassold, P.A. Hunt // Nature Reviews Genetics.

- 2012. - V.13 (7). - P.493 - 504.

194. Nehlig, A. Potential genotoxic, mutagenic and antimutagenic effects of coffee: a review [Text] /A. Nehlig, G. Debry // Mutation Research. - 1994. - V. 317 (2). -P.145 - 162.

195. Nnate, D. A. Nitrate Metabolism: A curse or blessing to humanity? [Text] / D. A. Nnate, N. K. Achi. // Journal of Scientific Research & Reports. - 2016. -V. 11 (4).

- P. 1 - 19.

196. Norppa, H. What do human micronuclei contain [Text] / H. Norppa, G.C. Falck // Mutagenesis. - 2003. - V.18 (3). - P. 221 - 233.

197. OECD. Section 4. Test № 478: Rodent dominant lethal test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - OECD Publishing. - 2015.

198. OECD. Section 4. Test № 471: Bacterial reverse mutation test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - OECD Publishing. - 1997.

199. OECD. Section 4. Test № 473: In vitro Mammalian Chromosome Aberration Test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - OECD Publishing. - 2016.

200. OECD. Section 4. Test № 476: In vitro mammalian cell gene mutation test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - OECD Publishing. -1997.

201. OECD. Section 4. Test № 483: Mammalian spermatogonial chromosome aberration test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. OECD Publishing.

- 2015.

202. OECD. Section 4. Test № 485: Genetic toxicology: mouse heritable translocation assay. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. OECD Publishing. - 1986.

203. OECD. Section 4. Test № 486: Unscheduled DNA Synthesis (UDS) Test with Mammalian Liver Cells In Vivo. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. OECD Publishing. - 1997.

204. OECD. Section 4. Test № 488: Transgenic rodent somatic and germ cell gene mutation assays. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. -OECD Publishing. - 2013.

205. OECD. Section 4. Test № 475: Mammalian Bone Marrow Chromosomal Aberration Test. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. - OECD Publishing. - 2016.

206. OECD. Section 4. Test № 477: Genetic Toxicology: Sex-linked Recessive Lethal Test in Drosophila melanogaster. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals. -OECD Publishing. - 1984.

207. Ohshima, H. Chronic infections and inflammatory processes as cancer risk factors: possible role of nitric oxide in carcinogenesis [Text] / H. Ohshima, H. Bartsch // Mutation Research. - 1994. - V. 305 (2). - P. 253 - 264.

208. Ozkal, P. The genotoxic effects of hepatitis B virus to host DNA [Text] / P. Ozkal , H. Ilgin-Ruhi , M. Akdogan et al. // Mutagenesis. - 2005. - V. 20 (2). - P. 147 -150.

209. Pacchierotti, F. Acrylamide-induced chromosomal damage in male mouse germ cells detected by cytogenetic analysis of one-cell zygotes [Text] / F. Pacchierotti, C. Tiveron, M. D'Archivio et al. // Mutation Research. - 1994. - V. 309 (2). - P. 273 - 284.

210. Parkin, D.M. The global health burden of infection-associated cancers in the year 2002 [Text] / D.M. Parkin // International Journal of Cancer. - 2006. - V. 118 (12). - P. 3030 - 3044.

211. Pacchierotti, F. Cytogenetic observations, in mouse secondary spermatocytes, on numerical and structural chromosome aberrations induced by cyclophosphamide in various stages of spermatogenesis [Text] / F. Pacchierotti, D. Bellincampi, D. Civitareale // Mutation Research. 1983. V. 119 (2). P. 177-183.

212. Pastorelli, R. Benzo(a)pyrene diolepoxide adducts to albumin in workers exposed to polycyclic aromatic hydrocarbons: association with specific CYP1A1, GSTM1, GSTP1 and EHPX genotypes [Text] / R. Pastorelli, A. Cerri, M. Rozio et al. // Biomarkers. - 2001. - V. 6 (5). - P. 357 - 374.

213. Perry, P. Cytological detection of mutagen-carcinogen exposure by sister chromatid exchange [Text] / P. Perry, H.J. Evans // Nature. - 1975. - V. 258 (5531). - P.121 - 125.

214. Pfohl-Leszkowicz, A. An update on direct genotoxicity as a molecular mechanism of ochratoxin a carcinogenicity [Text] / A. Pfohl-Leszkowicz, R.A. Manderville // Chemical Research in Toxicology. - 2012. - V. 25 (2). -P. 252 - 262.

215. Phillips, B. J. Is ethanol genotoxic? A review of the published data [Text] / B. J. Phillips, P. Jenkinson // Mutagenesis. - 2001. - V.16 (2). - P. 91 - 101.

216. Porta, M. Coffee drinking: the rationale for treating it as a potential effect modifier of carcinogenic exposures [Text] / M. Porta, J. Vioque, D. Ayude et al. // European Journal of Epidemiology. - 2003. - V. 18 (4). - P. 289 - 298.

217. Purohit, V. Mechanisms of alcohol-associated cancers: introduction and summary of the symposium [Text] / V. Purohit, J. Khalsa, J. Serrano // Alcohol. -2005. - V. 35 (3). - P. 155 - 160.

218. Ramasamy, R. Fluorescent in situ hybridization of human sperm: diagnostics, indications, and therapeutic implications [Text] / R. Ramasamy, S. Besada, D.J. Lamb // Fertility and Sterility. - 2014. - V. 102 (6). - Р.1534 - 1539.

219. Raposa, T. Fluorescence banding pattern of human and mouse chromosomes with a benzimidazol derivative (Hoechst 33258) [Text] / T. Raposa, A.T. Natarajan // Humangenetik. - 1974. - V. 21. - P. 221 - 226.

220. Register medical drugs. Available at: [электронный ресурс] (http: // www. rlsnet.ru /) (in Russian).

221. Rinsky, R.A. Benzene and leukemia. An epidemiologic risk assessment [Text] / R.A. Rinsky, A.B. Smith, R. Hornung et al. // The New England Journal of Medicine. - 1987. - V. 316 (17). - P. 1044 - 1050.

222. Russell, L. B. Spontaneous mutations recovered as mosaics in the mouse specific-locus test [Text] / L. B. Russell, W. L. Russell // Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. -1996. - V. 93 (23). - P. 13072 - 13077.

223. Russell, L.B. A report of the U.S. Environmental Protection Agency Gene-Tox Program. Evaluation of mutagenicity assays for purposes of genetic risk assessment [Text] / L.B. Russell, C.S. Aaron, F. de Serres et al. // Mutation Research. - 1984. - V.134 (2-3). - P.143 - 157.

224. Russell, L.B. The mouse specific-locus test with agents other than radiations: interpretation of data and recommendations for future work [Text] / L.B. Russell,

P.B. Selby, E. von Halle et al // Mutation Research. -1981. - V. 86 (3). - P. 329 -354.

225. Russo, A. In vivo cytogenetics: mammalian germ cells [Text] / A. Russo // Mutation Research. - 2000. - V. 455 (1-2). - P. 167 - 189.

226. Sarkaria, J.N. Inhibition of ATM and ATR kinase activities by the radiosensitizing agent, caffeine [Text] / J.N. Sarkaria, E.C. Busby, R.S. Tibbetts et al. // Cancer Research. - 1999. - V. 59 (1). - P. 4375 - 4382.

227. Schmid, W. The micronucleus test [Text] / W. Schmid // Mutation Research. -1975. - V. 31 (1). - P. 9 - 15.

228. Schnatter, A.R. Myelodysplastic syndrome and benzene exposure among petroleum workers: an international pooled analysis [Text] / A.R. Schnatter, D.C. Glass, G. Tang et al. // Journal of the National Cancer Institute. - 2012. - V. 104 (22). - V. 1724 - 1737.

229. Schulte, R.T. Sperm DNA damage in male infertility: etiologies, assays, and outcomes [Text] / R.T. Schulte, D.A. Ohl, M. Sigman, G.D. Smith // Journal of Assisted Reproduction and Genetics. - 2010. - V. 27(1). - P. 3-12.

230. Severson, A.F. Oocyte meiotic spindle assembly and function [Text] / A.F. Severson, G. von Dassow, B. Bowerman // Current Topics in Developmental Biology. - 2016. - V. 116. - P. 65 - 98.

231. Sgura, A. Chromosome aberrations and telomere length modulation in bone marrow and spleen cells of melphalan-treated p53+/- mice [Text] / A. Sgura, A. De Amicis, L. Stronati et al. // Environmental and Molecular Mutagenesis. - 2008. -V. 49 (6). - P. 467 - 475.

232. Shafik, A. Molecular andrology as related to sperm DNA fragmentation/sperm chromatin biotechnology [Text] / A. Shafik, A. A. Shafik, I. Shafik, O. E. Sibai // Archives of Andrology. - 2006. - V. 52 (4). - P. 299 - 310.

233. Shamsi, M.B. Comet assay: a prognostic tool for DNA integrity assessment in infertile men opting for assisted reproduction [Text] / M.B. Shamsi, S. Venkatesh, M. Tanwar et al. // The Indian Journal of Medical Research. - 2010. - V. 131. - P. 675 - 681.

234. Shamsi, M.B. Evaluation of nuclear DNA damage in human spermatozoa in men opting for assisted reproduction [Text] / M.B. Shamsi, R. Kumar, R. Dada //The Indian Journal of Medical Research. - 2008. - V. 127 (2). - P. 115 - 123.

235. Shamsi, M.B. Sperm DNA integrity assays: diagnostic and prognostic challenges and implications in management of infertility [Text] / M.B. Shamsi, S.N. Imam, R. Dada // Journal of Assisted Reproduction and Genetics. - 2011. - V. 28 (11) - P. 1073 - 1085.

236. Sheh, A. Mutagenic potency of Helicobacter pylori in the gastric mucosa of mice is determined by sex and duration of infection [Text] / A. Sheh, C.W. Lee, K. Masumura et al. // Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. -2010. - V. 107 (34). - P. 15217 - 15222.

237. Sierra, L.M. Genotoxicity and DNA Repair: A Practical Approach. Methods in Pharmacology and Toxicology [Text] / L.M. Sierra, I. Gaivao. - Springer Science + Business Media New York. - 2014. - 483 p.

238. Silver, L.M. Mouse Genetics: Concepts and Applications [Text] / L.M. Silver. -Oxford University Press. - 1995. - 376 p.

239. Simon, L. Clinical significance of sperm DNA damage in assisted reproduction outcome [Text] / L. Simon, G. Brunborg, M. Stevenson et al // Human Reproduction. - 2010. - V. 25 (7). - P. 1594 - 1608.

240. Singer, T.M. Germ cell mutagens: risk assessment challenges in the 21st century [Text] / T.M. Singer, C.L. Yauk // Environmental and Molecular Mutagenesis. -2010. -V.51. - P. 919 - 928.

241. Singh, N.P. Microgels for estimation of DNA strand breaks, DNA protein crosslinks and apoptosis [Text] / N.P. Singh // Mutation Research. - 2000. -V. 455 (1-2). - P.111 - 127.

242. Smith-Bindman, R. Radiation dose associated with common computed tomography examinations and the associated lifetime attributable risk of cancer [Text] / R. Smith-Bindman, J. Lipson, R. Marcus et al. // Archives of Internal Medicine. -2009. - V.169 (22). - P. 2078 - 2086.

243. Storer, R.D. Revalidation of the in vitro alkaline elution/rat hepatocyte assay for DNA damage: improved criteria for assessment of cytotoxicity and genotoxicity

and results for 81 compounds [Text]/ R.D. Storer, T.W. McKelvey, A.R. Kraynak et al. // Mutation Research. - 1996. - V. 368 (2). - P. 59 - 101.

244. Sun, F. Aneuploidy in mouse metaphase II oocytes exposed in vivo and in vitro in preantral follicle culture to nocodazole [Text] / F. Sun, I. Betzendahl, F. Pacchierotti et al. // Mutagenesis. - 2005. - V. 20. - P. 65 - 75.

245. Sykora, I. Trichlormethine hydrochloride and correlation of its mutagenic and toxic effects on male germ cells in mice [Text] / I. Sykora, D. Gandalovicova // Mutation research. - 1992. - V. 266 (2). - P. 291 - 297.

246. Tamir, S. DNA Damage by Nitric Oxide [Text] / S. Tamir, S. Burney, S. R. Tannenbaum // Chemical Research in Toxicology. 1996 V. 9 (5) P. 821-827.

247. Tarkovski, A.K. An air-drying method for chromosome preparation from mouse eggs [Text] / A.K. Tarkovski // Cytogenetics. - 1966. - V. 5. - P. 394 - 400.

248. Tease, C. Oocytes from young and old female mice respond differently to colchicines [Text] / Tease C., Fisher G. // Mutation Research. - 1986. - V. 173. -P. 31 - 34.

249. The ESHRE Capri Workshop Group. Genetic aspects of female reproduction. -Human Reproduction. Update. - 2008. - V. 14 (4). - P. 293 - 307.

250. Trouiller, B. Titanium dioxide nanoparticles induce DNA damage and genetic instability in vivo in mice [Text]/ B. Trouiller, R. Reliene, A. Westbrook et al. // Cancer Research. - 2009. - V. 69 (22). - P. 8784 - 8789.

251. Tsutsui, T. Mammalian cell transformation and aneuploidy induced by five bisphenols [Text] / T. Tsutsui, Y. Tamura, A. Suzuki et al. // International Journal of Cancer. - 2000. - V. 86 (2). - P. 151 - 154.

252. Tyl, R.W. Relationship between acrylamide reproductive and neurotoxicity in male rats [Text] / R.W. Tyl, M.C. Marr, C.B. Myers et al. // Reproductive Toxicology. -2000. - V. 14 (2). - P. 147 - 157.

253. Utulu, S. DNA damage induced in the germ and bone marrow cells of mice by caffeine [Text] / S. Utulu, A.A. Bakare // Research Journal of Biological Sciences. - 2010. -V.5 (8). - P.536 - 541.

254. Verlhac, M.H. Oocyte Maturation and Development [Text] / M.H. Verlhac, M.E. Terret // F1000 Research. - 2016. - V. 5. - P. 1 - 8.

255. Vijaya Lakshmi, A.N. Detection of influenza virus induced DNA damage by comet assay [Text] / A.N. Vijaya Lakshmi, M.V. Ramana, B. Vijayashree et al. // Mutation Research. - 1999. - V. 442 (1). - P.53 - 58.

256. Wang, Y. Effect of gonadotrophin stimulation on mouse oocyte quality and subsequent embryonic development in vitro [Text] / Y. Wang, S.A. Ock, R.C. Chian // Reproductive Biomedicine Online. - 2006. - V. 12 (3). - P. 304 - 314.

257. Williams, B.R. Aneuploidy - Cancer's Fatal Flaw? [Text] / B.R. Williams, A. Amon // Cancer Research. - 2009. - V. 69 (13). - P. 5289 - 5291.

258. Witt, K.L. Mutagenicity of anticancer drugs in mammalian germ cells[Text] / K.L. Witt, J.B. Bishop // Mutation Research. - 1996. - V. 355 (1-2). - P.209 -234.

259. Wood, S.G. Measurement of 8-oxo-deoxyguanosine in lymphocytes, cultured cells and tissue samples by HPLC with electrochemical detection [Text] / S.G. Wood, C.M. Gedik, N.J. Vaughan, A.R. Collins // Methods in Molecular medicine. -2000. - V. 38. - P.171 - 178.

260. Wykes, S.M. The Structural Organization of Sperm Chromatin [Text] / S.M. Wykes, S.A. Krawetz // The Journal of Biological Chemistry. - 2003. - V. 278 (32). - P. 29471 - 29477.

261. Wyrobek, A.J. An evaluation of the mouse sperm morphology tests and other sperm tests in nonhuman mammals. A report of the U.S. Environmental Protection Agency Gene-Tox Program [Text] / A.J. Wyrobek, L.A. Gordon, J.G. Burkhart et al. // Mutation Research. - 1983. - V.115 (1). - P. 1 - 72.

262. Wyrobek, A.J. Chemical induction of sperm abnormalities in mice [Text] / A.J. Wyrobek, W.R. Bruce // Proceedings of the National Academy of Sciences of the USA. - 1975. - V. 72 (11). - P. 4425 - 4429.

263. Yaduvanshi, S.K. Evaluation of micronuclei induction capacity and mutagenicity of organochlorine and organophosphate pesticides [Text] / S.K. Yaduvanshi, N. Srivastava, F. Marotta et al. // Drug Metabolism Letters. - 2012. - V.6 (3). - P.187 - 197.

264. Yamatoya, K. One-step collagenase method for zona pellucida removal in unfertilized eggs: easy and gentle method for large-scale preparation [Text] / K.

Yamatoya, C. Ito, M. Araki et al. // Reproductive Medicine and Biology. -2011. -V. 10 (2). - P. 97 - 103.

265. Yauk, C.L. Approaches for identifying germ cell mutagens: Report of the 2013 IWGT workshop on germ cell assays [Text] / C.L. Yauk, M.J. Aardema, J.V. Benthem et al. // Mutation Research. - 2015. - V. 783. - P. 36 - 54.

266. Zhang, L.H. Measurement of sperm DNA fragmentation using bright-field microscopy: comparison between sperm chromatin dispersion test and terminal uridine nick-end labeling assay [Text] / L.H. Zhang, Y. Qiu, K.H. Wang et al. // Fertility and Sterility. - 2010. - V. 94 (3). - P. 1027 - 1032.

267. Zuccotti, M. Collagenase as an agent for dissolving the zona pellucida of hamster and mouse oocytes [Text] / M. Zuccotti, U.A. Urch, R. Yanagimachi // Journal of Reproduction and Fertility. - 1991. - V. 93 (2). - P. 515 - 520.

9. БЛАГОДАРНОСТИ Автор выражает глубокую благодарность:

научному руководителю - кандидату биологических наук Алию Курмановичу Жанатаеву обучавшему, руководившему и оказавшему огромную помощь автору на всех этапах планирования, выполнения и подготовки диссертации к защите;

научному консультанту - член-корреспонденту РАМН, профессору Андрею Дмитриевичу Дурневу за огромную помощь и поддержку на всех этапах выполнения диссертационной работы;

научному сотруднику лаборатории фармакологии мутагенеза Злате Чайка за помощь в проведении экспериментов методом ДНК-комет и постоянную поддержку и участие.

Особую признательность выражаю коллегам Елене Анисиной, Наталье Даугель-Дауге, Алле Кулаковой, Елене Абрамовой, а также друзьям и коллегам, поддержка и дружеское расположение которых способствовали выполнению экспериментальной части диссертации.

А также огромную признательность выражаю друзьям и коллегам Ирине Родиной, Татьяне Шевченко, Елене Белянкиной, Екатерине Бекчановой дружеское расположение, поддержка и участие которых оказали автору неоценимую помощь.

Руководству ФГБНУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова», оказавшему поддержку в выполнении этой работы!