Разработка методик анализа новых фенольных серосодержащих антиоксидантов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Шинко Татьяна Геннадьевна

• Шинко Татьяна Геннадьевна
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Шинко Татьяна Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Антиоксиданты в медицине

1.2 Новые полифункциональные фенольные серосодержащие антиоксиданты

1.3 Методы анализа серосодержащих антиоксидантов

1.3.1 Лекарственные препараты - серосодержащие антиоксиданты

1.3.2 Методы установления подлинности

1.3.3 Методы определения примесей

1.3.4 Методы количественного определения серосодержащих антиоксидантов в субстанции и лекарственных формах

1.3.5 Методы количественного определения серосодержащих антиоксидантов в биологических образцах

1.4 Выводы по Главе

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Приборы и оборудование

2.3 Реактивы

2.4 Статистическая обработка результатов эксперимента

2.5 Дизайн фармакокинетического исследования

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДИК УСТАНОВЛЕНИЯ ПОДЛИННОСТИ ОБЪЕКТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Физико-химические свойства

бис- [(3,5 - ди-трет-бутил-4 -гидроксифенил)пропил] сульфида и

додецил(3,5 - диметил-4-гидроксибензил)сульфида

3.2 Спектральные характеристики

бис- [3(3,5 - ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида

3.2.1 Спектрометрия в инфракрасной области

3.2.2 Спектрофотометрия в ультрафиолетовой области

3.3 Качественные реакции

3.4 Выводы по Главе

ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИК ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИМЕСЕЙ В ОБЪЕКТАХ ИССЛЕДОВАНИЯ

4.1 Определение примесей в объектах исследования методом ТСХ

4.1.1 Разработка и валидация методики определения примесей

бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида методом ТСХ

4.1.2 Разработка и валидация методики определения примесей

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида методом ТСХ

4.2 Определение примесей в объектах исследования методом ВЭЖХ

4.2.1 Валидация методики определения примесей

бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропил]сульфида методом ВЭЖХ с УФ-детектированием

4.2.2 Валидация методики определения примесей додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида методом ВЭЖХ с

УФ-детектированием

4.3 Выводы по Главе

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИК КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОБЪЕКТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

5.1 Разработка и валидация титриметрических методик количественного определения объектов исследования

5.2 Разработка и валидация методик количественного определения объектов исследования методом УФ-спектрофотометрии

5.3 Выводы по Главе

ГЛАВА 6. РАЗРАБОТКА И ВАЛИДАЦИЯ МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДОДЕЦИЛ(3,5-ДИМЕТИЛ-4-ГИДРОКСИБЕНЗИЛ)СУЛЬФИДА В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

6.1 Подбор параметров вольтамперометрического определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида

6.2 Разработка и валидация вольтамперометрической методики количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в сыворотке крови

6.3 Определение фармакокинетических показателей

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида на крысах

6.4 Выводы по Главе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ А. Проект Нормативной документации на субстанцию

бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. Проект Нормативной документации на субстанциию

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида

ПРИЛОЖЕНИЕ В. Акты о внедрении результатов исследования

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методик анализа новых фенольных серосодержащих антиоксидантов»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы исследования

Активация свободнорадикального механизма и процессов перекисного окисления липидов в организме являются пусковым фактором развития многих заболеваний, таких как атеросклероз и его осложнения в виде инфаркта и инсульта, онкологические заболевания, гепатит и др [1; 2]. Лекарственные препараты-антиоксиданты способствуют нормализации нарушенного прооксидантного/антиоксидантного баланса, что открывает большие возможности для их применения в медицине [3; 4; 5; 6; 7].

На базе НИИ химии антиоксидантов (Новосибирский государственный педагогический университет) разработаны новые биологически активные соединения - фенольные серосодержащие антиоксиданты

бис- [3(3,5 - ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфид и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфид, которые не имеют структурных аналогов среди зарегистрированных лекарственных препаратов. Биологическая активность и безопасность указанных соединений проверены и подтверждены в нескольких исследованиях [8; 9; 10; 11; 12], что позволяет рассматривать их в качестве перспективных лекарственных препаратов. Однако для полной и достоверной оценки действия и оказываемых эффектов бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида необходимо проведение доклинических и клинических исследований, в том числе установление их фармакокинетического профиля. Разработка методики количественного определения исследуемых соединений в биологическом материале позволит частично решить эти задачи.

Для регистрации новых разработанных соединений в качестве лекарственных препаратов для медицинского применения требуется разработка нормативной документации (НД) - перечня показателей качества лекарственного средства с описанием валидированных методик испытаний. Дальнейшее

производство зарегистрированных лекарственных препаратов, в свою очередь, должно отвечать требованиям Правил надлежащей производственной практики к организации контроля качества (Приказ министерства промышленности и торговли Российской Федерации № 916 от 14.06.13 г.), и гарантировать, что продукция контролируется по стандартам качества, соответствующим её предназначению, а также в соответствии с требованиями спецификации. В этой связи разработка параметров стандартизации

бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида, а также разработка методики количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в биологических жидкостях являются актуальными задачами научной и практической фармации.

Степень разработанности темы исследования

В ходе исследовательских работ в области синтеза новых фенольных серосодержащих антиоксидатов в НИИ химии антиоксидантов на базе Новосибирского государственного педагогического университета получены и охарактеризованы новые химические соединения -

бис- [3(3,5 - ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфид и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфид, установлена их биологическая активность.

На момент начала работ по теме диссертации разработка методик анализа и составление нормативной документации для целей контроля качества исследуемых субстанций не проводились. Параметры фармакокинетики додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида не установлены ввиду отсутствия методики его количественного определения в биологических образцах.

Цель и задачи исследования

Цель исследования - разработка методик анализа новых фенольных серосодержащих антиоксидантов

бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида для целей стандартизации и фармакокинетических исследований.

Задачи исследования:

1. Исследовать физические и физико-химические свойства субстанций бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида.

2. Разработать методики установления подлинности субстанций бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида.

3. Разработать методики обнаружения и количественного определения примесей с установлением допустимых пределов их содержания в субстанциях бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида.

4. Разработать методики количественного определения бис- [3(3,5 - ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в фармацевтических субстанциях.

5. Разработать Проекты нормативной документации для субстанций бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида.

6. Разработать методику количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в биологическом материале.

Научная новизна

В процессе исследования изучены УФ- и ИК-спектральные характеристики бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида, а также выбраны условия проведения УФ-спектрофотометрического количественного определения. Подобраны условия хроматографического разделения родственных примесей исследуемых субстанций. Впервые представлены условия количественного определения субстанций бис- [3(3,5 - ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида

и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида методом меркуриметрии. Изучено электрохимическое поведение

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида, подобраны оптимальные параметры электролиза для количественного определения исследуемого вещества. Представлены условия изолирования

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида из сыворотки крови для проведения вольтамперометрического количественного определения. Впервые частично установлены параметры фармакокинетики

додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида на лабораторных животных.

Теоретическая и практическая значимость работы

В ходе работы разработаны и валидированы методики установления подлинности бис- [3(3,5 - ди-трет- бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида, ВЭЖХ- и ТСХ-методики определения примесей в исследуемых субстанциях, а также УФ-спектрофотометрическая и меркуриметрическая методики количественного определения. Составлены Проекты нормативной докуметации на субстанцию-порошок бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида.

Впервые разработана и валидирована биоаналитическая методика количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в сыворотке крови. Применение данной методики позволяет установить фармакокинетический профиль додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида у лабораторных животных (крысы).

Методология и методы исследования

Теоретическую основу исследования составляли фармакопейные статьи (ФС) и общие фармакопейные статьи (ОФС), представленные в фармакопеях различных стран и сообществ, а также работы отечественных и зарубежных учёных в области аналитической и фармацевтической химии.

В работе использовали методы химического (качественные реакции, титриметрия), физического (установление физико-химических свойств

исследуемых субстанций), физико -химического (УФ-спектрофотометрия, ИК-спектрометрия, ВЭЖХ, ТСХ, вольтамперометрия) анализа.

Полученные в ходе исследования результаты были статистически обработаны в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи Российской Федерации XIV издания (ГФ XIV) с использованием программного обеспечения Microsoft Office Excel.

Основные положения, выносимые на защиту:

- результаты исследований по установлению подлинности и физико -химических свойств бис- [3(3,5 - ди-трет- бутил-4 -гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида;

- результаты разработки и валидации методик определения примесей в субстанциях бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида методами ВЭЖХ и ТСХ;

- результаты разработки методик количественного определения бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в субстанциях;

- результаты разработки и валидации биоаналитической методики количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида в сыворотке крови лабораторных животных (крысы).

Степень достоверности результатов исследования

Диссертационная работа выполнена с использованием современного аналитического оборудования, фармакопейных методов, соответствующих поставленным целям и задачам. Разработаные методики прошли процедуру валидации, а полученные результаты были подвергнуты статистической обработке в соответствии с ОФС «Статистическая обработка результатов химического эксперимента» ГФ XIV. Первичная документация соответствует представленным в диссертации материалам.

Апробация работы

Основные результаты, полученные в ходе исследования были представлены на X, XI, XII Российских (итоговых) научно-практических конференциях с

международным участием студентов и молодых учёных «Авиценна-2019-2021» (г. Новосибирск, апрель 2019-2021 гг.), VI Междисциплинарной конференции «Молекулярные и биологические аспекты химии, фармацевтики и фармакологии «МОБИ-Химфарма 2020» (г. Нижний Новгород, сентябрь 2020 г.), Международной научно-практической конференции «Разработка лекарственных средств - традиции и перспективы» (г. Томск, сентябрь 2021 г.).

Апробация работы состоялась на заседании Проблемной комиссии «Фармакология и фармация» ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации 23.06.2022 г.

Личный вклад автора Автору принадлежит ведущая роль в выборе темы исследования, постановке цели и задач работы, планировании и непосредственном выполнении эксперимента, разработке и валидации методик, проведении статистической обработки результатов экспериментов, формулировке выводов, а также написании статей и представлении результатов в виде докладов. Внедрение результатов исследования

Разработанные методики и проекты нормативной документации на субстанции бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида внедрены в научную и практическую деятельность кафедры химии Новосибирского государственного педагогического университета (г. Новосибирск) и используются для контроля процесса синтеза указанных веществ. Биоаналитическая методика количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида внедрена и апробирована в учебной (практические занятия) и научной работе кафедры фармацевтической химии ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности Научные положения диссертации соответствуют паспорту специальности 3.4.2. Фармацевтическая химия, фармакогнозия. Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности п.3 и п.4.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с утвержденным направлением научно-исследовательской работы ФГБОУ ВО "Новосибирский государственный медицинский университет" Минздрава России по теме "Поиск, изучение и внедрение новых лекарственных средств на основе природных и синтетических биологически активных соединений и совершенствование лекарственного обеспечения населения", номер государственной регистрации 121062200036-5.

Публикации

По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работ, в том числе:

- научных статей, отражающих основные результаты диссертации - 4 статьи (из них 2 - в журналах, индексируемых в международных базах данных Scopus, Chemical Abstracts, 2 - в изданиях из перечня ВАК при Минобрнауки России);

- обзорных статей - 1;

- в иных изданиях - 1.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа изложена на 131 странице машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы по применению методов фармацевтического анализа для стандартизации серосодержащих антиоксидантов; описания материалов и методов исследования, 4 глав собственных исследований, общих выводов, списка сокращений и условных обозначений, списка литературы и приложений. Список литературы состоит из 114 источников, в том числе 65 - на иностранном языке. Работа иллюстрирована 43 рисунками и включает 31 таблицу.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Антиоксиданты в медицине

Роль перекисного окисления липидов и свободнорадикального механизма для организма человека начали широко изучать научные коллективы разных стран мира в 1950-1960-х гг. Именно тогда было показано повреждающее влияние активных форм кислорода на клеточные мембраны, этиологию и патогенез онкологических заболеваний. Предложенная теория оксидативного стресса позволила обнаружить влияние свободных радикалов на развитие и течение заболеваний многих систем и органов человека [13; 14; 15; 16; 17]. В настоящее время установлено, что перекисное окисление липидов является одним из факторов патогенеза атеросклероза [18; 19; 20], артериальной гипертензии, диабета [16], рассеянного склероза, болезней Паркинсона, Альцгеймера [1; 21], аутоиммунных заболеваний [22], воспалительных заболеваний печени [23]. Согласно статистическим данным Всемирной организации здравоохранения, многие из указанных заболеваний являются лидерами по преждевременной смертности населения [24]. Применение лекарственных препаратов с антиоксидантной активностью позволяет восстановить нарушенный прооксидантный/антиоксидантый баланс в организме и предотвратить нежелательное повреждение тканей [2; 4; 6; 7; 19; 25].

Выделяют лекарственные препараты-антиоксиданты природного (токоферол, каротиноиды, флавоноиды, убихинон и др.) и синтетического происхождения (мексидол, эмоксипин, пробукол и др.). Согласно некоторым исследованиям, антиоксидантная активность, а в отдельных случаях и биодоступность синтетических препаратов превосходит аналогичные показатели препаратов природного происхождения, поэтому их применение в комплексной терапии серьёзных нарушений является предпочтительным [2]. Среди синтетических антиоксидантов перспективным в плане синтеза новых активных соединений является класс серосодержащих структур [26], поскольку они имеют

двойственный механизм действия: выступают одновременно и как донаторы протона, и как хелаторы катионов тяжёлых металлов [2; 19].

1.2 Новые полифункциональные фенольные серосодержащие

антиоксиданты

На базе кафедры химии Новосибирского государственного педагогического университета были синтезированы структурно новые полифункциональные фенольные серосодержащие антиоксиданты -бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфид (Рисунок 1) и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфид (Рисунок 2).

но^к

Ж^-он

Рисунок 1- Химическая структура бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида

ОН

?

С12Н25

Рисунок 2 - Химическая структура додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида

Синтез бис-[3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида

осуществляют взаимодействием 4-( у -оксипропил)-2,6-ди-трет-бутилфенола с

хлорирующим агентом в органическом растворителе при нагревании с последующей отгонкой растворителя и обработкой промежуточного 4-^-хлорпропил)-2,6-ди-трет-бутилфенола сульфидом натрия в изопропиловом спирте при кипячении [8].

Схема синтеза додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида заключается в кипячении смеси 2,6-диметилфенола, додекантиола-1 и формалина в этаноле, обработки смеси горячей водой, отделении органического слоя, высушивании и перекристаллизации образующегося продукта реакции [27].

Антиоксидантная активность данных соединений установлена по способности угнетать перекисное окисление липидов на различных моделях, в том числе в бактериальных тестах по способности защищать клетки микроорганизмов при воздействии Н2О2 [8; 10; 27]. Также было установлено, что додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфид и

бис- [3(3,5 - ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфид не оказывают токсического действия, не проявляют мутагенного и генотоксического свойств [27; 28; 29; 30]. Исследования на модели тетрахлорметан-индуцированного гепатита у мышей и крыс показали гепатопротекторную и противовоспалительную активность додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида, основанную на стабилизации мембран гепатоцитов, снижении активности

аланинаминотрансферразы и уменьшении развития жировой дистрофии [9; 27]. Исследуемые вещества положительно влияют на показатели крови [31], обладают гемореологическим, антиагрегационным и антитромбоцитарным эффектами, а также выраженным протекторным эффектом при ишемии головного мозга [11; 32; 33]. Кроме того, установлено, что описываемые соединения обладают цитопротективным действием и способны усиливать противоопухолевый эффект лекарственных препаратов при полихимиотерапии [34; 35; 36; 37].

Таким образом, данные, полученные в ходе исследований безопасности и биологической активности додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида и бис- [3 (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида, позволяют

расматривать иследуемые соединения в качестве преспективных фармацевтических субстанций.

1.3 Методы анализа серосодежащих антиоксидантов

1.3.1 Лекарственные препараты - серосодержащие антиоксиданты

Тиоктовая (а-липоевая) кислота (Рисунок 3) - является коферментом окислительного декарбоксилирования пировиноградной кислоты и а-кетокислот в цикле Кребса. Применение тиоктовой кислоты способствует улучшению углеводного, энергетического и липидного обмена. Препарат обладает гепатопротекторным, дезинтоксикационным, гипохолестеринемическим и гиполипидемическим действием, поэтому его назначают при различных заболеваниях печени (гепатит, цирроз, жировая дистрофия), гиперлипидемии [38; 39]. Ещё один вероятный механизм действия препарата - образование хелатных комплексов с катионами тяжёлых металлов - лежит в основе назначения данного лекарственного препарата при интоксикациях, диабетической и алкогольной полинейропатии [40].

Буцилламин (Рисунок 4) - синтетический антиоксидантный препарат, применяемый для снижения повреждения тканей при инфаркте миокарда, операциях на сердце, трансплантации органов. Буцилламин содержит в структуре две тиольные группы, за счёт которых он способен восполнять тиольные группы глутатиона, тем самым восстанавливая собственную антиоксидантную систему организма [41]. Однако это не единственный механизм антиоксидантного

О

3-8

Рисунок 3 - Тиоктовая (а-липоевая) кислота

действия препарата: исследования показали, что буцилламин активирует транскрипцию фактора N12, за счёт чего увеличивается синтез эндогенного глутатиона [42].

Рисунок 4 - Буцилламин

Пробукол (Рисунок 5) - синтетический антиоксидант, обладающий широким спектром активности. Основной эффект пробукола связан с предотвращением перекисного окисления липопротеинов низкой плотности в плазме. Это эффект обусловливает применение пробукола при атеросклерозе и гиперлипидемии [43; 44; 45; 46]. Также установлено, что данный препарат способен регулировать экспрессию антиоксидантных ферментов и, таким образом, восстанавливать повреждённые кардиомиоциты [47], улучшать состояние почек на фоне диабетической нефропатии [48].

Рисунок 5 - Пробукол

Дисульфирам (Рисунок 6) - производное дитиокарбаминовой кислоты, широко известен как препарат, применяющийся для лечения алкогольной зависимости. Также в исследованиях была показана способность дисульфирама препятствовать повреждающему действию активных форм кислорода [49 ; 50], благодаря чему дисульфирам успешно применяется в лечении катаракты [51], одобрен FDA для проведения клинических испытаний в качестве

противоопухолевой и ВИЧ-терапии [52]. Также имеются сведения о противомикробной активности дисульфирама [53].

В Государственной фармакопее РФ XIV издания (ГФ РФ) [54] фармакопейные статьи (ФС) на представленные в данной статье лекарственные вещества отсутствуют. В качестве возможных для использования могут быть рассмотрены методики, предложенные в общих фармакопейных статьях (ОФС). Монографии на описанные выше фармацевтические субстанции серосодержащих антиоксидантов представлены в ведущих мировых фармакопеях: Европейской фармакопее (Еш\Рк)[55], Фармакопее США (USP) [56], Британской фармакопее (BP) [57], Японской фармакопее ^Р) [58] (Таблица 1).

Подлинность всех предложенных лекарственных средств может быть установлена с использованием ИК-спектроскопии по совпадению спектра испытуемого вещества со спектром стандартного вещества, либо со стандартным спектром (ДР)[58]. Также для установления подлинности дисульфирама, пробукола, буцилламина предлагается определять температуру плавления субстанции. Обнаружение дисульфирама и пробукола согласно методикам JP можно проводить с использованием УФ-спектрофотометрии по совпадению спектров испытуемых образцов со стандартными спектрами. Кроме того, при анализе буцилламина JP предлагает проводить качественную реакцию с сульфатом меди на тиольные группы. ГФ РФ 14 [54] содержит в ОФС «Общие реакции на подлинность» методику проведения качественной реакции на

Э

СН3

Рисунок 6 - Дисульфирам

1.3.2 Методы установления подлинности

сульфаты с раствором бария хлорида. Для препаратов, содержащих ковалентно-связанную серу данная методика не может быть применена напрямую, однако, после проведения окислительной минерализации, указанным способом можно установить подлинность серосодержащих органических лекарственных средств.

1.3.3 Методы определения примесей

Обнаружение родственных примесей серосодержащих антиоксидантов согласно методикам Eur.Ph, USP, BP, JP (Таблица 1) проводят с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с УФ-детектором. Также для идентификации некоторых примесей в субстанциях дисульфирама и тиоктовой кислоты Eur.Ph [55]. предлагает проводить тонкослойную хроматографию (ТСХ), что обусловлено отсутствием светопоглощающей способности у данных примесей.

Таблица 1 - Методы фармакопейного определения примесей в субстанциях серосодержащих антиоксидантов

Фармакопея Метод анализа

Тиоктовая кислота

Eur.Ph. [55] Примесь B: ТСХ на пластинах с силикагелем; подвижная фаза - 25 % раствор состава раствор аммиака : вода : этилацетат : пропанол 5 : 10 : 40 : 40, детектирование в йодной камере в течение 30 минут. Родственные примеси: ВЭЖХ, колонка с октадецилсиликагелем 5 ^м, l =0,25 м d = 4,6 мм, 35 °С, подвижная фаза - смесь 8 объёмов ацетонитрила, 41 объёма дигидрофосфата калия, предварительно доведенного до значения рН = 3,0 фосфорной кислотой и 51 объёма метанола; скорость потока 1,2 мл/мин; спектрофотометрическое детектирование при 215 нм.

Пробукол

USP [56] Родственные примеси - ВЭЖХ, колонка с наполнителем L3, ! = 0,25 м d = 4,6 мм, подвижная фаза - смесь н-гексана и безводного спирта этилового 4000 : 1; скорость потока 1 мл/мин; спектрофотометрическое детектирование серией детекторов при 254 нм и 420 нм. Примесь А детектируется при 420 нм, остальные примеси - при 254 нм.

JP [58] Родственные примеси - ВЭЖХ, колонка с октадецилсиликагелем 5 ^м, ! = 0,25 м d = 4,6 мм, термостатирование при 40 °С подвижная фаза - смесь ацетонитрил : вода 97 : 3; скорость потока соответствующая времени удерживания пробукола около 13 мин; спектрофотометрическое детектирование серией детекторов при 242 нм.

Дисульфирам

Ешг.РЬ. Родственные примеси: ТСХ на пластинах с силикагелем с флуоресцентным индикатором (254 нм); подвижная фаза - бутилацетат : гексан 30 : 70, детектирование в УФ-свете при 254 нм.

1Р Родственные примеси - ВЭЖХ, колонка с октадецилсиликагелем 5 ^м, 1 = 0,15 м ё = 5 мм, подвижная фаза - смесь метанол : вода 7 : 3; термостатирование при 25 °С, скорость потока соответствующая времени удерживания дисульфирама около 8 мин; УФ-спектрофотометрическое детектирование при 210 нм.

Буцилламин

1Р Родственные примеси - ВЭЖХ, колонка с октадецилсиликагелем 5 ^м, 1=0,15 м ё=6 мм, подвижная фаза - смесь 0,01 М лимонная кислота : метанол 1 : 1; термостатирование при 40 °С, скорость потока соответствующая времени удерживания буцилламина около 5 мин; УФ-спектрофотометрическое детектирование при 254 нм.

1.3.4 Методы количественного определения серосодержащих антиоксидантов в субстанции и лекарственных формах

Количественное содержание действующего вещества в субстанциях тиоктовой кислоты (Ешг.Р^ ВР) и пробукола (ЦЗР, JP) определяют методом ВЭЖХ с использованием УФ-детектора. Для количественного определения буцилламина (ДР) и дисульфирама ^Р, Ешг.Р^ ВР) применяют титриметрические методы аргентометрии и йодиметрии. ГФ РФ для количественного определения серосодержащих органических лекарственных средств предлагает метод сжигания в колбе с кислородом (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом») с последующим бариметрическим титрованием образующихся сульфат-ионов.

Рядом исследователей предложены альтернативные методы количественного определения серосодержащих антиоксидантов в лекарственных формах и субстанциях (Таблица 2). Определить содержание тиоктовой кислоты в фармацевтических препаратах и пищевых добавках можно альтернативными хроматографическими методами - газовой хроматографией [59], ВЭЖХ с электрохимическим детектированием [60]. Электрохимический метод детектирования основан на способности серы к окислению, а потому может

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шинко Татьяна Геннадьевна, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Bhatt, S. Role of reactive oxygen species in the progression of Alzheimer's disease / S. Bhatt, L. Puli, C. R. Patil // Drug Discovery Today. - 2021. -Vol. 26, Issue 3. - P. 794-803.

2. Трегубова, И. А. Антиоксиданты: современное состояние и перспективы / И. А. Трегубова, В. А. Косолапов, А. А. Спасов // Успехи физиологических наук. - 2012. - Т. 43, № 1. - С. 75-94.

3. Эффективность применения антиоксидантов группы пространственно затрудненных фенолов при фотодегенерации сетчатки / А. А. Жданкина, Г. А. Кон, М. Б. Плотников [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - 2010. -Т. 9, № 5. - С. 32-38.

4. Medicinal prospects of antioxidants: A review / K. Neha, M. Haider, A. Pathak, M. S. Yar // European Journal of Medicinal Chemistry. - 2019. - Vol. 178. -P. 687-704.

5. Synthetic phenolic antioxidants: Metabolism, hazards and mechanism of action / X. Xu, A. Liu, S. Hu [et al.]. - Text : electronic // Food Chemistry. - 2021. -Vol. 353. - P. 129488. - URL : https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S03088146210049457via%3Dihu b (date of access : 23.02.2021).

6. Natural and synthetic antioxidants targeting cardiac oxidative stress and redox signaling in cardiometabolic diseases / M. Bartekova, A. Adameova, A. Gorbe [et al.] // Free Radical Biology and Medicine. - 2021. - Vol. 169. - P. 446-477.

7. Antioxidants with two faces toward cancer / N. Dastmalchi, B. Baradaran, S. Latifi-Navid [et al.]. - Text : electronic // Life Sciences. - 2020. - Vol. 258. -P. 118186. - URL : https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S00243205203093837via%3Dihub (date of access 23.02.2021).

8. Просенко, А. Е. Синтез и исследование антиокислительных свойств бис-[ю-(3,5-диалкил-4-гидроксифенил)алкил]сульфидов / А. Е. Просенко,

Е. И. Терах, Е. А. Горох // Журнал прикладной химии. - 2003. -Т. 76, № 2. -С.256-260.

9. Антиоксидантные эффекты тиофана при экспериментальном поражении печени тетрахлорметаном / В. И. Смольякова, М. Б. Плотников, Г.А. Чернышева [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - 2010. - № 5. - С. 98-101.

10. Бахтина, И. А. Влияние антиоксиданта «тиофан» на параметры антиокислительного стресса при ишемической болезни сердца / И. А. Бахтина, Е. В. Антипьева, А. Е. Просенко // Бюллетень СО РАМН. - 2000. - № 3. - С. 24-29.

11. Меньщикова Е. Б. Фенольные антиоксиданты в биологии и медицине / Е. Б. Меньшикова, В. З. Ланкин, Н. В. Кандалинцева. - Saarbrucken : LAP LAMBERT Academic Publishing, 2012. - 488 с.

12. Исследование нейроретинопротекторной активности тиофана при инволюционной хориоретинальной дегенерации крыс линии OXYS / А. А. Жданкина, М. Б. Плотников, Г. А. Кон [и др.] // Бюллетень сибирской медицины. - 2013. - Т. 12, № 3. - С. 24-31.

13. Окислительный стресс: Патологические состояния и заболевания / Е. Б. Меньщикова, Н. К. Зенков, В. З. Ланкин [и др. ]. - Новосибирск : АРТА, 2008. - 284 с.

14. Лысенко, В. И. Оксидативный стресс как неспецифический фактор патогенеза органных повреждений (обзор литературы и собственных исследований) / В. И. Лысенко // Emergency Medicine. - 2020. -Т. 16, № 1. - С. 24-35.

15. Sciacovelli, M. Oncometabolites: Unconventional triggers of oncogenic signalling cascades / M. Sciacovelli, C. Frezza // Free Radical Biology and Medicine. -2016. - Vol. 100. - P. 175-181.

16. Oxidative stress in cardiac hypertrophy: From molecular mechanisms to novel therapeutic targets / C. J. A. Ramachandra, S. Cong, X. Chang [et al.] // Free Radical Biology and Medicine. - 2021. -Vol. 166. - P. 297-312.

17. Шинко, Т. Г. Обзор методов фармацевтического анализа серосодержащих антиоксидантов / Т. Г. Шинко, С. В. Терентьева,

Е. А. Ивановская // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2021. - Т. 24, № 5. - С. 15-21.

18. Bolduc, J. A. Reactive oxygen species, aging and articular cartilage homeostasis / J. A. Bolduc, J. A. Collins, R. F. Loeser // Free Radical Biology and Medicine. - 2019. - Vol. 132. - P. 73-82.

19. Daiber, A. Revisiting pharmacology of oxidative stress and endothelial dysfunction in cardiovascular disease: Evidence for redox-based therapies / A. Daiber, S. Chlopicki // Free Radical Biology and Medicine. - 2020. - Vol. 157. - P. 15-37.

20. Role of reactive oxygen species in atherosclerosis: Lessons from murine genetic models /A. Negre-Salvayre, P. Guerby, S. Gayral [et al.] // Free Radical Biology and Medicine. - 2020. - Vol. 149. - P. 8-22.

21. Oxidative stress and its significant roles in neurodegenerative diseases and cancer / R. Thanan, S. Oikawa, Yu. Hiraku [et al.] // International Journal of Molecular Sciences. - 2014. - Vol. 16, № 1. - P. 193-217.

22. Oxidative stress in autoimmune rheumatic diseases / M. J. Smallwood, A. Nissim, A. Knight [et al.] // Free Radical Biology and Medicine. - 2018. - Vol. 125. -P. 3-14.

23. Role of oxidative stress in the pathogenesis of nonalcoholic fatty liver disease / Z. Chen, R. Tian, Zh. She [et al.] // Free Radical Biology and Medicine. -

2020. - Vol. 152. - P. 116-141.

24. Мировая статистика здравоохранения, 2020г: мониторинг показателей здоровья в отношении ЦУР, целей в области устойчивого развития [World health statistics 2020: monitoring health for the SDGs, sustainable development goals]. -Текст : электронный // Всемирная органиация здравоохранения : официальный сайт. -

2021. - URL: https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/332070/9789240011977-rus.pdf?sequence=32&isAllowed=y (дата обращения: 15.11.2021).

25. Данилова, Л. Г. Липидный обмен и антиоксиданты / Л. Г. Данилова // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2013. -№ 10. - С. 92.

26. Thiol-Based Drugs in Pulmonary Medicine: Much More than Mucolytics / M. Cazzola, L. Calzetta, C. Page [et al.] // Trends in Pharmacological Sciences. - 2019. -Vol. 40, № 7. - P. 452-463.

27. Синтез и антиокислительная активность 3,5-диметил-4-гидроксибензилтиододекана / М. Б. Плотников, А. Е. Просенко, В. И. Смольякова [и др.] // Химико-фармацевтический журнал. - 2010. - Т. 44, № 3. - С. 65-67.

28. Новые перспективные антиоксиданты на основе 2,6-диметилфенола / Е. А. Кемелева, Е. А. Васюнина, А. Е. Просенко [и др.] // Биоорганическая химия. - 2008. - Т. 34, № 4. - С. 558-569.

20. Антиокислительная активность тиофана

[бис(3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил)сульфида] / Л. П. Овчинникова, У. Н. Роцкая, Е. А. Васюнина [и др.] // Биоорганическая химия. - 2009. - Т. 35, № 3. - С. 417-423.

30. Оценка специфической активности антиоксидантов «тиофан» и «а-токоферол» при моделировании окислительного стресса / С. Н. Луканина, А. В. Сахаров, А. Е. Просенко [и др.] // Медицина и образование в Сибири. -2013. - № 6. - С. 76.

31. Влияние антиоксидантов на функциональную активность мононуклеарных клеток периферической крови больных вирусным гепатитом С / И. Ф. Фридлянд, А. Е. Просенко, С. Ю. Клепикова [и др.] // Медицинская иммунология. - 2001. - Т. 3, № 2. - С. 243.

32. Патент № 2368376 Российская Федерация, МПК А61К 31/095 (2006.01), А61Р 7/02 (2006.01), А61Р 7/06 (2006.01). Средство, обладающее антиагрегантной, уменьшающей повышенную вязкость крови и антитромбогенной активностью : № 2008108613 : заявл. 04.03.2008 : опубл. 27.09.2009 / Плотников М. Б., Смольякова В. И., Иванов И. С., Чернышева Г. А., Просенко А. Е., Гросс М. А., Бойко М. А. ; патенотообладатели Государственое учреждение Научно-исследовательский институт фармакологии Томского

научного центра Сибирского отделения Российской академии медицинских наук ГУУ НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН, Некоммерческое партнерство "Новосибирский институт антиоксидантов", Плотников М. Б., Просенко А. Е. - 10 с.

33. Патент № 2242221 Российская Федерация, МПК А61К31/10, А61Р7/02. Гемореологическое и антитромбоцитарное средство : №200318915/15 : заявл. 23.06.2003 : опубл. 20.12.2004 / Плотников М. Б., Маслов М. Ю., Чернышова Г. А., Смольякова В. И., Алиев О. И., Васильев А. С., Просенко А. Е, Терах Е. И. ; патентообладатели Государственное учреждение Научно-исследовательский институт фармакологии Томского научного центра СО РАМН, Фонд пикладных исследований по разработке и внедрению отечественных биоантиоксидантов, Плотников М. Б., Просенко А. Е. - 6 с.

34. Исследование синергетических эффектов у антиоксиданта СО-3 и его структурных аналогов в сравнении с композициями триалкилфенолов и диалкилсудьфида / Е. И. Терах, А. Е. Просенко, В. В. Никулина [и др.] // Журнал прикладной химии. - 2003. - Т. 76, № 2. - С. 261-265.

35. Фармакологическая коррекция цитогенетических эффектов цисплатина / О. Л. Воронова, Щ. В. Неупокоева, Е. П. Федорова [и др.] // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2010. - Т. 73, № 10. - С. 37-39.

36. Патент № 2447888 Российская Федерация, МПК А61К 31/095 (2006.01), А61Р 35/00 (2006.01), А61Р 39/00 (2006.01). Средство для коррекции цитостатических эффектов паранеопластических процессов и химиотерапии, обладающее противоопухолевой активностью : № 201114190/15 : заявл. 11.04.2011 : опубл. 20.04.2011 / Просенко А. Е., Гросс М. А., Кандалинцева Н. В., Толстикова Т. Г., Сорокина И. В. ; патентообладатели Некоммерческое партнерство Новосибирский институт антиоксидантов, Толстикова Т. Г., Сорокина И. В. - 19 с.

37. Патент № 2367420 Российская Федерация, МПК А61К 31/10 (2006.01), А61Р 15/00 (2006.01). Средство для корекции нарушений жеской репродуктивной функции, вызванных цитостатическим воздействием : №2008104276/15 : заявл.

04.02.2008 : опубл. 20.09.2009 / Боровская Т. Г., Гольдберг Е. Д., Щемерова Ю. А., Пахомова А. В., Перова А. В., Просенко А. Е., Дюбченко О. И. ; патенотообладатели Государственное учреждение Научно-исследовательский институт фармакологии Томского научного центра Сибирского отделения Российской академии наук, Некоммерческое партнерство Новосибирский институт антиоксидантов. - 10 с.

38. Navari-Izzo, F. Lipoic acid: A unique antioxidant in the detoxification of activated oxygen species / F. Navari-Izzo, M. F. Quartacci, C. Sgherri // Plant Physiology and Biochemistry. - 2002. - Vol. 40, № 6-8. - P. 463-470.

39. Packer, L. a-Lipoic Acid: A Metabolic Antioxidant and Potential Redox Modulator of Transcription / L. Packer, S. Roy, C. K. Sen // Adv. Pharmacol. - 1996. -Vol. 38, Issue C. - P. 79-101.

40. Ou, P. Thioctic (lipoic) acid: a therapeutic metal-chelating antioxidant? / P. Ou, H. J. Tritschler, S. P. Wolff // Biochem. Pharmacol. - 1995. - Vol. 50, Issue 1. -P. 123-126.

41. Free-radical degradation of high-molecular-weight hyaluronan induced by ascorbate plus cupric ions. Testing of bucillamine and its SA981-metabolite as antioxidants / K. Valachova, E. Hrabarova, E. Priesolova [et al.] // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2011. - Vol. 56, Issue 3. - P. 664-670.

42. Bucillamine induces glutathione biosynthesis via activation of the transcription factor Nrf2 / A. M. Wielandt, V. Volrath, M. Fariath [et al.] // Biochemical Pharmacology. - 2006. - Vol. 72, Issue 4. - P. 455-462.

43. Zimetbaum, P. Probucol: Pharmacology and clinical application / P. Zimetbaum, H. Eder, W. Frishman // Journal of Clinical Pharmacology. - 1990. -Vol. 30, № 1. - P. 3-9.

44. Закирова, А. Н. Влияние пробукола и ципрофибрата на перекисное окисление липидов, реологические свойства крови и течение стенокардии / А. Н. Закирова, А. В. Перевалов, Н. Э. Перевалов // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2005. - Т. 4, № 1. - С. 66-71.

45. Mao, S. J. T. Antioxidant activity and serum levels of probucol and probucal metabolites / S. J. T. Mao, M. T. Yates, R. L. Jackson // Methods in Enzymology. - 1994. - Vol. 234, Issue C. - P. 505-513.

46. Probucol reverses homocysteine induced inflammatory monocytes differentiation and oxidative stress / M. Zhang, Yu. Hou, Y. Shen [et al.] // European Journal of Pharmacology. - 2018. - Vol. 818. - P. 67-73.

47. Zhang, W. Probucol recovers pathological damage in viral Myocarditis through improvement of myocardium-related proteins / W. Zhang, K. Ma, N. Han. -Text : electronic // Microbial Pathogenesis. - 2020. - Vol. 147. - P. 104257. - URL : https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S08824010203062397via%3Dihub (date of access : 21.02.2021).

48. Probucol ameliorates renal injury in diabetic nephropathy by inhibiting the expression of the redox enzyme p66Shc / S. Yang, L. Zhao, Ya. Han [et al.] // Redox Biology. - 2017. - Vol. 13. - P. 482-497.

49. Kyle, M. E. The inhibition of lipid peroxidation by disulfiram prevents the killing of cultured hepatocytes by allyl alcohol, tert-butyl hydroperoxide, hydrogen peroxide and diethyl maleate / M. E. Kyle, A. Serroni, J. L. Farber // Chemical Biology. - 1989. - Vol. 72, № 3. - P. 269-275.

50. Nash, N.G. Disulfiram / N.G. Nash, R. D. Daley // Analytical Profiles of Drug Substances and Excipients. - 1975. - Vol. 4, Issue C. - P. 168-191.

51. Disulfiram thermosensitive in-situ gel based on solid dispersion for cataract / C. Zhang, T. Xu, D. Zhang [et al.] // Asian Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2018.

- Vol. 13, Issue 6. - P. 527-535.

52. The revival of dithiocarbamates - from pesticides to innovative medical treatments / L. Kaul. R. Suss, A. Zannettino [et al.]. - DOI 10.1016/j.isci.2021.102092.

- Text: electronic // iScience. - 2021. - P. 102092. - URL : https://www.cell.com/iscience/pdf/S2589-0042(21)00060-2.pdf (date of access : 21.02.2021).

53. Identification of disulfiram as a potential antifungal drug by screening

small molecular libraries / W. Hao, D. Qiao, Y, Han [et al.] // Journal of Infection and Chemotherapy. - 2020. - Vol. 27, Issue 5. - P. 696-701.

54. Государственная Фармакопея Российской Федерации XIV издания : в 4 т. Т.1. - Текст : электронный // Федеральная электронная медицинская библиотека : сайт. - 2018. - URL : https://docs.rucml.ru/feml/pharma/v14/vol1/ (дата обращения : 11.11.2021).

55. European Pharmacopoeia 8.0 : 2 vol. Vol.2. / European Directorate for the Quality of Medicines and Health Care. - Strasbourg : Council of Europe, 2014. - 2133 p.

56. The United States Pharmacopoeia 41 - The National Formulary 36 : 4 vol. Vol.1. / The United States Pharmacopeial Convention. - Rockville : The United States Pharmacopeial Convention, 2018. - 2413 p.

57. British Pharmacopoeia 2016 : 4 vol. Vol. 1. / Medicines and Healthcare products Regulatory Agency. - London : The Stationery Office, 2016. - 2321 p.

58. The Japanese Pharmacopoeia Seventeenth Edition. English version . - Тext : electronic // Pharmaceuticals and Medical Devices Agency : official site. - 2016. -URL: https://www.mhlw.go.jp/file/06-Seisakujouhou-11120000-Iyakushokuhinkyoku/JP17_REV_1.pdf (date of access : 11.11.2021).

59. Kataoka, H. Chromatographic analysis of lipoic acid and related compounds / H. Kataoka // Journal of Chromatography B: Biomedical Applications. -1998. - Vol. 717, Issue 1-2. - P. 247-262.

60. Siangproh, W. Reverse-phase liquid chromatographic determination of a-lipoic acid in dietary supplements using a boron-doped diamond electrode / W. Siangproh, P. Rattanarat, O. Chailapakul // Journal of Chromatography A. - 2010. -Vol. 1217, Issue 49. - P. 7699-7705.

61. Low-cost and disposable sensors for the simultaneous determination of coenzyme Q10 and a-lipoic acid using manganese (IV) oxide-modified screen-printed graphene electrodes / K. Charoenkitamorn, S. Chaiyo, O. Chailapacul [et al.] // Analytica Chimica Acta. - 2018. - Vol. 1004. - P. 22-31.

62. Патент № 2426097 Российская Федерация, МПК G01N 21/78

(2006.01). Способ количественного определения лекарственных веществ в фармакопейных препаратах : № 2010106669 : заявл. 24.02.2010 : опубл. 10.08.2011 / Калашников В. П., Сливкин А. И., Яковлев Л. Ю. ; патентообладатель Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Воронежский государственный университет. - 9 с.

63. Bunaciu, A. A. Quantitative analysis of bucillamine and its pharmaceutical formulation using FT-IR spectroscopy / A. A. Bunacio, H. Y. Aboul-Enein, S. Fleschin // Farmaco. - 2005. - Vol. 60, Issue 8. - P. 685-688.

64. Prue, D. G. Pulse polarographic determination of disulfiram / D. G. Prue,

C. R. Warner, B. T. Kho // Journal of Pharmaceutical Sciences. - 1972. - Vol. 61, № 2. -P. 249-251.

65. Charoenkitamorn, K. Development of gold nanoparticles modified screen-printed carbon electrode for the analysis of thiram, disulfiram and their derivative in food using ultra-high performance liquid chromatography / K. Charoenkitamorn, O. Chailapakul, W. Siangproh // Talanta. - 2015. - Vol. 132. - P. 416-423.

66. Tomcik, P. Determination of pharmaceutical dosage forms via diffusion layer titration at an interdigitated microelectrode array / P. Tomcik, M. Krajcikova,

D. Bustin // Talanta. - 2001. - Vol. 55, Issue 6. - P. 1065-1070.

67. Золотарева, М. С. Валидация методики количественного определения дисульфирама в субстанции на основе комплекса включения гидроксипропил-0-циклодекстрина с дисульфирамом / М. С. Золотарева, В. С. Тюкова // Современная наука: исследования, технологии, проекты : сборник материалов V международной научно-практической конференции (8 ноября 2015 г). - Москва : Перо, 2015. - С. 251-258 с.

68. Фадеев, Д. А. Пробоподготовка и исследование дисульфирама методом ВЭЖХ / Д. А. Фадеев, П. Р. Шмидт, Т. А. Силкина // Актуальные вопросы судебной медицины и права. - 2020. - № 11. - С. 222-226.

69. Voltammetric analysis of disulfiram in pharmaceuticals with a cyclic renewable silver amalgam film electrode / S. Smarzewska, N. Festinger, M. Skowron

[et al.] // Turkish Journal of Chemistry. - 2017. - Vol. 41, № 1. - P. 116-124.

70. Determination of disulfiram and two of its metabolites in urine by reversed-phase liquid chromatography and spectrophotometric detection after post-column complexation / H. Irth, G. J. De Jong, U. A. Th. Brinkman, R. W. Frei // Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. - 1988. - Vol. 424, Issue C. - P. 95-102.

71. Measurement of plasma probucol levels by high-performance liquid chromatography / J. Nourooz-Zadeh, N. K. Gopaul, L. A. Forster [et al.] // Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications. - 1994. - Vol. 654, Issue 1. -P. 55-60.

72. Development and validation of a reversed-phase fluorescence HPLC method for determination of bucillamine in human plasma using pre-column derivatization with monobromobimane / K. C. Lee, Y. G. Chun, I. Kim [et al.] // Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. - 2009. - Vol. 877, Issue 22. - P. 2130-2134.

73. Determination of lipoic acid and dihydrolipoic acid in human plasma and urine by high-performance liquid chromatography with fluorimetric detection / A. I. Haj-Yehia, P. Assaf, T. Nassar, J. Katzhendler // Journal of Chromatography A. -2000. - Vol. 870, Issue 1-2. - P. 381-388.

74. Determination of lipoic acid in human plasma by HPLC-ECD using liquidliquid and solid-phase extraction: Method development, validation and optimization of experimental parameters / A. Khan, M. Khan, Z. Iqbal [et al.] // Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. -2010. - Vol. 878, Issue 28. - P. 2782-2788.

75. Satonin, D.K. Comparison of gas chromatography and high-performance liquid chromatography for the analysis of probucol in plasma / D. K. Satonin, J. E. Coutant // Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences Applications. -1986. - Vol. 380, Issue C. - P. 401-406.

76. A novel UPLC-ESI-MS/MS method for the quantitation of disulfiram, its

role in stabilized plasma and its application / L. Zhang, Y. Jiang, G. Jing [et al.] // Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. - 2013. - Vol. 937. - P. 54-59.

77. Quantification of lipoic acid in plasma by high-performance liquid chromatography-electrospray ionization mass spectrometry/ J. Chen, W. Jiang, J. Cai [et al.] // Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. - 2005. - Vol. 824, Issue 1-2. - P. 249-257.

78. Electrochemical determination of a-lipoic acid in human serum at platinum electrode / M. Marin, C. Lete, B. N. Manolescu, S. Lupu // Journal of Electroanalytical Chemistry. - 2014. - Vol. 729. - P. 128-134.

79. Kinetic spectrophotometric determination of some sulfur containing compounds in pharmaceutical preparations and human serum / I. Walash, M. E. S. Metwally, A. M. El-Brashy, A. A. Abdelal// Farmaco. - 2003. - Vol. 58, № 12. - P. 1325-1332.

80. Elinder, L. S. Simultaneous measurement of serum probucol and lipid-soluble antioxidants / L. S. Elinder, G. Walldius // Journal of Lipid Reserach. - 1992. -Vol. 33, № 1. - P. 131-137.

81. Gorog, S. Identification in drug quality control and drug research / S. Gorog // Trends in Analytical Chemistry. - 2015. - Vol. 69. - P. 114-122.

82. Шинко, Т. Г. УФ-спектрофотометрическое определение бис-[3'(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфида и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида / T. Г. Шинко, С. В. Терентьева, Е. А. Ивановская // Journal of Siberian Medical Sciences. - 2020. - № 1. - С. 4-16.

83. Определение примесей в перспективных антиоксидантах бис-[3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфиде и додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфиде / Т. Г. Шинко, С. В. Терентьева, С. Е. Ягунов [др.] // Разработка и регистрация лекарственных средств. - 2022. -Т. 11, № 1. - С. 106-112.

84. Беликов В. Г. Фармацевтическая химия / В. Г. Беликов. - Москва :

МЕДпресс-информ, 2008. - 614 с.

85. Методы идентификации лекарственных средств / Н. П. Максютина, Ф. Е. Каган, Ф. А. Митченко [и др.]. - Киев : Здоровье, 1978. - 240 с.

86. Gorog, S. The paradigm shifting role of chromatographic methods in pharmaceutical analysis / S. Gorog // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2012. - Vol. 69. - P. 2-8.

87. Kaale, E. TLC for pharmaceutical analysis in resource limited countries / E. Kaale, P. Risha, T. Layloff // Journal of Chromatography A. - 2011. - Vol. 1218, Isue 19. - P. 2732-2736.

88. Kalasz, H. Basis and pharmaceutical applications of thin-layer chromatography / H. Kalasz, M. Bathori, K. L. Valko // Handbook of Analytical Separations. - 2020. - Vol. 8. - P. 523-585.

89. Ferenczi-Fodor, K. Impurity profiling of pharmaceuticals by thin-layer chromatography / K. Ferenczi-Fodor, Z. Vegh, B. Renger // Journal of Chromatography A. -2011. - Vol. 1218, Issue 19. - P. 2722-2731.

90. Кибардин С. А. Тонкослойная хроматография в органической химии / С. А. Кибардин, К. А. Макаров. - Москва : Химия, 1978. - 128 с.

91. Эпштейн, Н. А. Валидация хроматографических методик: определение предела количественного определения на практике / Н. А. Эпштейн // Химико-фармацевтический журнал. - 2021. - Т. 55, № 1. - С. 56-61.

92. Эпштейн, Н. А. Валидация методик «родственные примеси» для неидентифицированных примесей (обзор) / Н. А. Эпштейн, В. Л. Севастьянова, А. И. Королева // Химико-фармацевтический журнал. - 2020. - Т. 54, № 9. -С. 48-56.

93. An overview of experimental designs in HPLC method development and validation / P. K. Sahu, N. R. Ramisetti, T. Cecchi [et al.] // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2018. - Vol. 147. - P. 590-611.

94. Vial, J. Experimental comparison of the different approaches to estimate LOD and LOQ of an HPLC method / J. Vial, A. Jardy // Anaytical Chemistry. - 1999. -

Vol. 71, № 14. - P. 2672-2677.

95. Эпштейн, Н. А. Требования пригодности системы для методик жидкостной хроматографии: контролируемые параметры и их рекомендуемые значения (обзор) / Н. А. Эпштейн // Химико-фармацевтический журнал. - 2020. -Т. 54, № 5. - С. 47-54.

96. Беленький И. Л. Химия органических соединений серы: общие вопросы / И. Л. Беленький, М. Н. Бжезовский, Н. Н. Власова. - Москва : Химия, 1988. - 318 с.

97. Желиговская Н. Н. Химия комплексных соединений / Н. Н. Желиговская, И. И. Черняев. - Москва : Высшая школа, 1966. - 388 с.

98. Берка А. Новые редокс-методы в аналитической химии / А. Берка, Я. Вутерин, Я. Зыка ; Пер. [с чеш.], ред. и доп. проф. А. И. Бусева. - Москва : Химия, 1968. - 318с.

99. Разработка методик количественного определения нового антиоксиданта додецил(3,5-диметил-4- гидроксибензил)сульфида / Т. Г. Шинко, С. В. Терентьева, С. Е. Ягунов [и др.] // Медицина. - 2021. - Т. 9, № 3. - С. 99-110.

100. Шинко, Т. Г. Разработка методики количественного определения додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида методом меркуриметрии / Т. Г. Шинко // Сборник трудов молодых ученых, магистрантов, студентов, преподавателей и профессоров Международной научно-практической конференции «Современная фармация: новые подходы в образовании и актуальные исследования», Нур-Султан, 10 февраля 2021 г. - Нур-Султан: НАО «Медицинский университет Астана», 2021. - С. 186.

101. Okamoto, M. Assay validation and technology transfer: Problems and solutions / M. Okamoto // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2014. -Vol. 87. - P. 308-312.

102. Epshtein, N. A. Validation of Analytical Procedures: Graphic and Calculated Criteria for Assessment of Methods Linearity in Practice / N. A. Epshtein // Drug Development and Registration. - 2019. - Vol. 8, № 2. - P. 122-130.

103. Epifano, F. Recent developments in pharmaceutical analysis / F. Epifano, S. Genovese - Text : electronic // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. -2020. - Vol. 189. - P. 113454. - URL : https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0731708520313406 (date of access : 28.04.2021).

104. Митькина, Л. И. Подходы к оценке пригодности аналитических методик при проведении экспертизы качества лекарственных средств / Л. И. Митькина, Е. Л. Ковалева // Ведомости научного центра экспертизы средств медицинского применения. - 2012. - № 2. - С. 6-9.

105. Хенце Г. Полярография и вольтамперометрия. Теоретические основы и аналитическая практика / Г. Хенце; Учебное пособие, пер. с нем. А. В. Гармаша и А. И. Каменева. - Москва: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2008. - 284 с.

106. Лейтес, Е. А. Определение органических сульфидов методом инверсионной вольтамперометрии / Е. А. Лейтес, Л. С. Анисимова, В. Е. Катюхин // Известия Алтайского государственного университета. - 1998. - № 1. - С. 82-84.

107. Гладышев, В. П. Определение сульфид-ионов методов вольтамперометрии / В. П. Гладышев, С. В. Ковалева, Н. М. Черемухина // Журнал аналитической химии. - 2004. - Т. 59, № 8. - С. 839-842.

108. Mirceski V. Square-Wave Voltammetry. Theory and application / V. Mirceski, S. Komorsky-Lovric, M. Lovric. - Leipzig : Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 2007. - 201 с.

109. Моров, П. В. Разработка методик изолирования лекарственных веществ из крови в рамках реализации Приказа МЗ РФ №933н / П. В. Моров, О. Ю. Стрелова, В. Н. Куклин // Journal of Siberian Medical Sciences. - 2020. - № 2. -С. 30-41.

110. Разработка биоаналитической методики определения нового антиоксиданта вольтамперометрическим методом / Т. Г. Шинко, С. В. Терентьева, О. И Просенко, Е. А . Ивановская // Фармация. - 2021. - Т. 70, № 8. - С. 12-18.

111. Правила проведения исследований биоэквивалентности

лекарственных препаратов в рамках Евразийского экономическоо союза : утверждены Решением Совета Евразийской Экономической Комисии №85 от 03.11.2016. - Текст : электронный // Евразийская экономическая комиссия : официальный сайт. - 2016. - URL : https://docs.eaeunion.org/docs/ru-ru/01411924/cncd_21112016_79 (дата обращения 27.04.2021).

112. Bioanalytical Method Validation. Guidance for Industry. - Text : electronic // Department of Health and Human Services FDA. - 2018. - URL : https://www.fda.gov/files/drugs/published/Bioanalytical-Method-Validation-Guidance-for-Industry.pdf (date of access : 27.04.2021).

113. Guideline on bioanalytical method validation. - Text : electronic // European Medicines Agency. - 2011. - URL : https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/guideline-bioanalytical-method-validation_en.pdf (date of access : 27.04.2021).

114. Яичков, И. И. Основные ошибки в аналитической части исследований биоэквивалентности и фармакокинетики / И. И. Яичков, Ю. А. Джурков, Л. Н. Шитов // Медицинская этика. - 2018. - Т. 6, № 1. - С. 33-38.

ПРИЛОЖЕНИЕ А . Проект Нормативной документации на субстанцию бис- [3(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил] сульфида

Номер реестровой записи №_

Дата внесения в государственный реестр лекарственных средств

20 г.

(наименование юридического лица, на имя которого выдано решение о внесении фармацевтической субстанции в государственный реестр лекарственных средств, адрес)

НОРМАТИВНАЯ ДОКУМЕНТАЦИЯ (ПРОЕКТ)

(номер}

(тестовое канмедованне лекарственного препарата)

бнс-[3(3.5-дн-трет-бутил-4-1 идроксифени-1 )н рои ил] сульфид

(химическое наименование}

_субстанция-порошок_

(лекарственная форма)

ПРОИЗВОДИТЕЛЬ

ФАСОВЩИК (ПЕРВИЧНАЯ УПАКОВКА)

УПАКОВЩИК (ВТОРИЧНАЯ (ПОТРЕБИТЕЛЬСКАЯ) УПАКОВКА) ВЫПУСКАЮЩИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

СПЕЦИФИКАЦИЯ Бис- |3{3,5-д и-трет-бутил-4-гидроксифенил ) пропил | сул ьфид

субстанция-порошок

Показатели Методы Нормы

1 2 3

Описание Визуальный Белый аморфный порошок

Подлинность ИК-спектрометрия Спектр субстанции, снятой в диске в КВг должен совпадать со стандартным спектром бис- [3 ( 3,5 - ди -трет- оути л -4г и дро кси фен и л')п ро п и л] сул ьф и да

УФ Спектр поглощения 0,1 % раствора субстанции

спектроф ото метрия в этаноле должен иметь максимум при (277 = 2) нм и минимум при (245 ± 2) нм.

Качественные реакции При добавлении раствора натрия нитропруссида должно появиться фиолетовое окрашивание

При воздействии концентрированной серной

кислоты на субстанциео должно появиться

желто-оранжевое окрашивание

Растворимость ГФ XIV ОФС, 1,2,1,0005,15 Практически не растворим в воде, растворим в этаноле, легко растворим в хлороформе

Температура ГФ XIV От 71 до 73 С

плавления ОФС. 1,2,1,0011,18 (Метод 3)

Потеря в массе при высушивании ГФ XIV ОФС. 1,2,1,0010,15 (Способ 3) Не более 0,5 %

Сульфатная зола ГФ XIV Не более 0,1%

ОФС, 1,2.2.2,0014,15

Тяжелые металлы ГФ XIV ОФС. 1,2.2,0012,15 Не более 0,001 %

Родственные примеси вэжх П ри мес ь би с- [3- (3,5-ди -трет-бут ил-4-гидроксифенил)пропил]дисульфида — не более 2,5% Единичная не идентифицированная примесь — не более 0,1 %; сумма примесей - не более 0,5 %

Микробиологическая чистота ГФ XIV ОФС. 1,2,4,0002,18 Категория 2,2

Количественное Титрование От 95,0 до [05,0 % Cj4HigS]0: в пересчете на

определение сухое вещество

Упаковка ГФ XIV

Маркировка ГФ XIV

Хранение ГФ XIV В сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25 СС

Срок годности ГФ XIV

Химическое название но ШРАС:

бис-[3-(3,5-ди-трет^бутил-4-гидроксифенил)пропил]сульфид Структурная формула:

Эмпирическая формула: С34Н;К5|02

Молекулярная масса: 530,89 г/моль

Содержит не менее 95,0 и не более 105,0 % С^Нз^О: в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый аморфный порошок

Растворимость, Практически не растворим в воде, растворим в этаноле, легко растворим хлороформе.

Подл инн ост ь.

]) ИК-спектрометрия. ИК-спектр субстанции, снятый в диске с КВг в области от 4000 до 500 см по положению полос поглощения должен соответствовать стандартному спектру

б ис- [3 - (3,5 -д и-трет - б у ти л -4- 1и д ро кс и ф е н ил )п ро 11 ил ] с у л ьфи д а.

2) УФ-спектрофотометрия. Ультрафиолетовый спектр поглощения ОД % раствора субстанции в этаноле в области длин волн 240-310 нм должен имегь максимум поглощения при 277 нм и минимум поглощения при 245 нм,

3) Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 5 мл 0,1 М раствора натрия гид роке и да, нагревают до кипения и прибавляют 10 капель раствора натрия нитропруссида 5 %. Образуется быстро исчезающее фиолетовое окрашивание.

4) Качественная реакция. К 0.1 г субстанции прибавляют 5 капель кислоты серной концентрированной. Образуется желго-оранжевое окрашивание.

Температура плавления. От 71 до 73 =С.

Потер» б массе при высушивании. Не более 0.5 (ОФС. 1.2.1.0010.15 «Потеря в массе при высушивании», Способ 3). Для определения используют около 2.0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 %. (ОФС. 1.2.2.2.0014.15 «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0.001 %. {ОФС.1.2.2.0012.15 «Тяжелые металлы», Способ I). Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г субстанции должен выдерживать испытание на тяжелые металлы.

Родственные примеси.

Определение проводят методом ВЭЖХ, Подвижная фаза - Ацетонитрил;

Испытуемый раствор - около 0.500 г (точная навеска)

бис- [3 -(3,5-ди-трет^б утил-4-гидро ксифенил)пропил] сульфида растворя ют в 5 мл ацето нитрила и доводят объем тем же растворителем до 25,0 мл, К 400.0 мкл полученного раствора прибавляют 600.0 мкл ацегонигрила; Раствор сравнения. А — 1,0 мл испытуемого раствора доводят ацетоннтрилом до 10.0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят тем же растворителем до 100,0 мл;

Раствор сравнения В — около 50 мг (точная навеска) первичного стандартного образца бнс-[3-{3,5-ди-трет-бутил-4-

гидроксифенил)пропил]дисульфцда растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём тем же растворителем до 25,0 мл. К 100.0 мкл полученного раствора прибавляют 900.0 мкл ацето нитрила.

Уеловия хроматографирования: Режим элюирования — изокрагический;

Колонка - ZORBAX SB-Cl8? 5 мкм, 150 х 4,6 мм;

Температура колонки - 40 йС;

Скорость потока - 2 мл/мин;

Детектор - снектрофотометрический, 278 нм;

Объем пробы - 5 мкл

Хроматографируют испытуемый раствор, раствор сравнения и раствор для проверки 1 ip иго д ости хроматограф и ческой системы.

Пригодность хроматографической системы. На хрома го грамме испытуемого раствора разрешение (R) между двумя любыми пиками не менее 2.0.

Относительные времена удерживания.

Бис-[3-(3,5-ди-трет-бутнл-4-гидроксифеяил)проиил]сульфид — около 2.8 мин; бис-[3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)про и ил] дисульфида - около 3.3 мин.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

площадь пика любой единичной неиденгифицпрованной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

площадь пика примеси

бис-[3-(3,5-ди-трет^бутил-4-гидроксифенил)пропил]дисульфида не должна превышать площади пика на хроматограмме раствора сравнения В;

суммарная площадь пиков всех примесей не должна более, чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают площади пиков, составляющих менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0.05 %).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС. 1.2.4.0002.. 18 «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом титриметрии.

Около 0.3 г (точная навеска) субстанции растворяют в смеси 5 мл ацетона и 5 мл этанола, добавляют 5 капель азотной кислоты разведенной. 2-3 капли индикатора дифенилкарбазона и титруют0,05 М раствором рггути (И) нитрата до появления устойчивого фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора ртути (II) ни грага соответствует 26,5 мг С^Н^чО^

Упаковка.

Маркировка.

Хранение, В сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25 °С.

Срок годности.

Назначение. Для производства нестерильных лекарственных форм.

Руководитель организации-разработчика__Ф И О

(1ЮДПЖЗ,)

М.П. Дата

Руководитель органа,

проводившего экспертизу НД _ФИО

(подпись)

М П. Дата

ПРИЛОЖЕНИЕ Б . Проект Нормативной документации на субстанцию д одеци л (3,5-д и м ет н л -4 - г и д ро ксибензн л )сул ьфи д а

Номер реестровой записи №_

Дата внесения в государственный реестр лекарственных средств

20 г.

(наименование юридического лица, на имя которого выдано решение о внесении фармацевтической субстанции в государственный реестр лекарственных средств, адрес)

НОРМАТИВНАЯ ДОКУМЕНТАЦИЯ (ПРОЕКТ)

(номер)

("торговое наименование лекарственного препарата)

_додецил-(3.5-диметил-4-1 идроксибензил)сульфид__

(мимическое наименование)

субстанция-порошок_

(лекарственная форма)

ПРОИЗВОДИТЕЛЬ

ФАСОВЩИК (ПЕРВИЧНАЯ УПАКОВКА)

УПАКОВЩИК (ВТОРИЧНАЯ (ПОТРЕБИТЕЛЬСКАЯ) УПАКОВКА) ВЫПУСКАЮЩИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

СПЕЦИФИКАЦИЯ Додецил-{3,5-днметнл-4-гидроь:сибенз]1Л)£:ульф]|Д

субстанция-порошок

Показатели Методы Нормы

1 2 3

Описание Визуальный Белый аморфный порошок

Подлинность И К-с пе ктро м етрия ИК-спектр субстанции, снятый в диске с КВг, должен совпадать со стандартным спектром д од епн л- (3.5 - д и мет и л -4-ги дро кси бензи л )с уль ф и да

УФ- УФ-спектр поглощения 0,1 % раствора субстанции

спектрофотометрия в этаноле должен иметь максимум при (280 = 2) нм и минимум при (260 = 2) нм. УФ-спектр поглощения 0,02 % раствора субстанции в смеси растворителей этанол:гидроксид натрия 0,1М 6:4 должен иметь максимум при (258 = 2) нм.

Качественные При добавлении раствора натрия нитропруссида к

реакции раствору субстанции после кипячения должно появиться фиолетовое окрашивание

При воздействии концентрированной серной

кислоты на субстанцию должно появиться красно-

оранжевое окрашивание

Растворимость ГФ XIV ОФС-l.Z 1.0005.15 Практически не растворим в воде, легко растворим в этаноле, хлороформе

Температура ГФ XIV От 54 до 56 °С

плавления CKMU.Zl.OOl 1.18 (Метод 3)

Потеря в массе при ГФ XIV Не более 0,5 %

высушивании ОФС-l.Z 1.0010.15

(Способ 3)

Сульфатная зола ГФ XIV Не более 0,1 %

ОФС. 1.2.2.2,0014.15

Тяжелые металлы ГФ XIV ОФС.1.2.2.0012.15 Не более 0,001 %

Родственные примеси ВЭЖХ Единичная неидентифицированная примесь - не более 0, [ %: сумма примесей — не более 0,5 %

Микробиологическая чистота ГФ XIV ОФС.1.2.4.0002.1 R Категория 2.2

Количественное Титрование От 95,0 до 105,0 % C;iHj6SlOl в пересчете на сухое

определение вещество

Упаковка ГФ XIV

Маркировка ГФ XIV

Хранение ГФ XIV В сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25 "С

Срок годности ГФ XIV

Химическое название но П.РАС:

додецил-(3,5-диметил-4-гидрокс иб ензил )сульфид Структурная формула:

&

Эмпирическая формула: С2]НзбЙ|О]

Молекулярная масса: 336.27

Содержит не менее 95,0 и не более 105,0 % С2]Н365:01 в пересчете на сухое вещество.

Описание. Белый аморфный порошок

Растворимость. Практически не растворим в воде, легко растворим в этаноле, хлороформе.

Подлинность.

1. ИК-спектрометрия. ИК-спектр субстанции, снятый в диске с КВг в области ог 4000 до 500 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать стандартному спектру д од ецил-(3,5-д и м ешл-4-гид роксиб ензил )сул ьфида.

2. УФ-спектрофотометрия. Ультрафиолетовый спектр поглощения 0.1 % раствора субстанции в этаноле в области длин волн 240-310 нм должен иметь максимум поглощения при 280 нм и минимум поглощения при 260 нм. Спектр поглощения 0,02 % раствора субстанции в смеси растворителей этанол : 0,1 М раствор натрия гидроксида 6 : 4 должен иметь максимум поглощения при 258 нм.

3. Качественная реакция. К 0.1 г субстанции прибавляют 5 мл 0.1 М раствора натрия гцдроксида, нагревают до кипения и прибавляют 10 капель раствора натрия нитропруссида 5 %. Образуется быстро исчезающее фиолетовое окрашивание,

4. Качественная реакция. К 0.1 г субстанции прибавляют 5 капель кислоты серной концентрированной. Образуется красно-оранжевое окраш ивание.

Температура плавления. От 54 до 56 °С.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,1 %. (ОФС. 1.2.1.0010.15 «Потеря в массе при высушивании», Способ 3). Для определения используют около 2,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 %. (ОФС, 1,2,2,2.0014.15 «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжелые металлы. Не более 0,001 %. (ОФС. 1.2,2.0012.15 «Тяжелые металлы», Способ 1). Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г субстанции должен выдерживать испытание на тяжелые металлы.

Родственные примеси.

Определение проводят методом ВЭЖХ.

Подвижная фаза - Ацетонитрил : вода для хроматографии 95 : 5;

Испытуемый раствор - 0,500 г додецил{3,5-диметил-4-

гидроксибензил)сульфнда растворяют в 100 мл этанола;

Раствор сравнения - 1,0мл испытуемого раствора доводят этанолом до 100.0

мл. 5,0мл полученного раствора доводят этанолом до 50,0 мл.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы - 0,050 г

гидрохинона помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют

1 мл испытуемого раствора и 100 мл этанола, доводят объем раствора тем же

растворителем до метки.

Уеловия хро. \turnограф ирова ния : Режим элюирования - изократический; Колонка - ZORBAX SB-C18. 5 мкм, 150 х 4,6 мм; Температура колонки - 40 йС; Скорость потока - 2 мл мин; Детектор - спектрофотометрический, 278 нм; Объем пробы - 10 мкл

Хроматографируют испытуемый раствор, pac í вор сравнения и раствор для проверки пригодости хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы :

- разрешение (/Í} между пиками додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида и гидрохинона не менее

- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику доде ц ил ( 3,5-ди метил-4-г и дроке и бен зил) сульфида не менее 5000 теоретических тарелок;

- относительное стандартное отклонение площади пика додецил(3,5-димегил-4-гидроксибензил)судьфида не более 5%;

- фактор симметрии пика додецил{3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида не менее 0.9 и не более 1,5.

Относительные времена удерживания.

Додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфид - около 4.12 мин; гидрохинон - около 0,76 мин.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой единичной неиденгифипированной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0.1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более, чем в 5 раз превышать площадь основного лика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают площади пиков, составляющих менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0.05 %).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС.1.2А0002Л8 «Микробиологи ческая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом титрнметрин.

Около 0,2 г (точная навеска) субстанции растворяют в смеси 5 мл ацетона и 5 мл этанола, добавляют 5 капель азотной кислоты разведенной. 2—3 капли индикатора дифенилкарбазона и титруют 0,05 N4 раствором ртути (И) нитрата до появления устойчивого фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора ртути (И) нитрата соответствует 16,81 мг С2 НЗЙ5|0[

Упаковка.

Маркировка.

Хранение, В сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше

25

Срок годности.

Назначение. Для производства нестерильных лекарственных форм.

Руководитель организации-разработчика__ФИО

(подпись)

М П. Дата

Руководитель органа,

проводившего экспертизу НД _ФИО

(подпись)

М П. Дата

ПРИЛОЖЕНИЕ В. Акты о внедрении результатов исследования

о внедрении результатов диссертации Шинко Татьяны Геннадьевны в научную и учебную деятельность кафедры химии ИЕСЭН ФГБОУ ВО «Новосибирский государственный педагогический университет»

Мы, нижеподписавшиеся, подтверждаем, что основные научные положения, выводы и рекомендации кандидатской диссертации Шинко Татьяны Геннадьевны на тему «Разработка методик анализа новых фенольных серосодержащих антиоксидантов» внедрены в научную и учебную деятельность кафедры химии ИЕСЭН ФГБОУ ВО «НГПУ» и используются для анализа образцов додецил(3,5-диметил-4-гидроксибензил)сульфида и бис-[3(3,5-диметил-4-

гидроксифенил)пропил]сульфида, полученных в процессе опытного синтеза.

АКТ

Заместитель директора ИЕСЭН по учебной работе

Заведующий кафедрой химии

Доцент кафедры химии

Н.В. Кандалинцева

Г.А. Корощенко

А.С. Олейник

УТВЕРЖДАЮ

Проректор по учебной работе ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России

Евстропов А.Н.

АКТ

о внедрении результатов диссертации Шинко Татьяны Геннадьевны в учебный процесс кафедры фармацевтической химии ФГБОУ ВО "Новосибирский государственный медицинский университет" Минздрава России.

Мы, нижеподписавшиеся, к.фарм.н., заведующий учебной частью кафедры фармацевтической химии Лигостаев Александр Валерьевич и д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической химии Ивановская Елена Алексеевна подтверждаем, что основные научные положения, выводы и рекомендации кандидатской диссертации Шинко Татьяны Геннадьевны на тему «Разработка методик анализа новых фенольных серосодержащих антиоксидантов» внедрены в учебный процесс кафедры фармацевтической химии ФГБОУ ВО НГМУ МЗ РФ при чтении лекций, проведении практических занятий и выполнении выпускных квалификационных работ со студентами 3, 4, 5 курсов по направлению подготовки (специальности) 33.05.01 Фармация.

Заведующий кафедрой фармацевтической химии,

д.фарм.н., профессор

Ивановская Е.А.

(подпись)

Зав. учебной частью кафедры фармацевтической химии, к.фарм.н.

Лигостаев А.В.

(подпись)