Разработка методик анализа лофанта анисового листьев экстракта, обладающего антимикобактериальным действием тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Юртаева Екатерина Алексеевна

• Юртаева Екатерина Алексеевна
• кандидат наук
• 2021

Оглавление диссертации кандидат наук Юртаева Екатерина Алексеевна

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Современные лекарственные препараты, применяемые для лечения микобактериальных инфекций........................................................ ^

1.2. Лекарственные растения и лекарственные растительные препараты, проявляющие антимикобактериальную активность............................... ^

1.3 Методы экстрагирования БАВ растительного происхождения, оценка

их эффективности

1.4 Лофант анисовый: ботаническая характеристика, химический состав,

фармакологическая активность...................................................... ^

1.5. Стандартизация растений семейства Ьатгасвав и лекарственных

препаратов на их основе............................................................... ^

Заключение по обзору литературы

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1 Дизайн исследования

2.2 Объекты исследования

2.3 Методы исследования

Глава 3. Получение лофанта анисового экстракта методом сверхкритической флюидной экстракции с применением СО2 и его

фитохимические исследования.......................................................... ^

3.1. Идентификация и количественное определение основных групп БАВ в сырье лофанта анисового................................................................. ^

3.1.1. Идентификация флавоноидов в извлечении лофанта анисового

листьев...................................................................................... ег

56

3.1.2. Количественное определение суммы флавоноидов в извлечении из лофанта анисового листьев.............................................................. ^

3.1.3. Исследование тритерпеновых соединений в извлечении из лофанта

анисового листьев

3.1.4. Исследование аминокислот в извлечении из лофанта анисового

листьев....................................................................................................................................................................,,

61

3.2 Разработка оптимальных условий получения лофанта анисового листьев экстракта методом сверхкритической флюидной экстракции с

применением СО2..............................................................................................................................................^

Заключение по главе

Глава 4. Идентификация основных биологически активных веществ в

лофанта анисового листьев экстракте................................................................................................^ ^

4.1. Изучение фенольных соединений

4.1.1 Идентификация фенольных соединений в экстракте методом ВЭЖХ-

МС

4.2. Качественный анализ экстракта методом ГХ

4.3. Обнаружение и количественное определение фенольных соединений................................................................................................................................................................^

4.4. Определение суммы дубильных веществ в экстракте

4.5. Обнаружение и количественное определение аминокислот в

экстракте

84

4.6. Исследование содержания тритерпеновых соединений в

экстракте............................................................................................................................................................................^

4.7 Макро-и микроэлементный состав экстракта

Заключение по главе

Глава 5. Разработка методик анализа лофанта анисового листьев экстракта

5.1. Потеря в массе при высушивании

5.2. Степень сыпучести порошков

5.3. Тяжелые металлы

5.4. Растворимость

5.5. Подлинность

5.6. Валидация методик количественного определения основных

БАВ

5.6.1. Спектрофотометрическое определение суммы флавоноидов в

лофанта анисового листьев экстракте............................................... ^

5.6.2. Определение суммы флавоноидов методом ВЭЖХ в лофанта

анисового листьев экстракте............................................................. по

98

5.6.3. Спектрофотометрическое определение тритерпеновых соединений в лофанта анисового листьев экстракте................................................ ^

5.7. Изучение стабильности и определение сроков годности лофанта

анисового листьев экстракта.......................................................... ^^

Заключение по главе

Глава 6. Исследование антимикобактериальной активности лофанта

анисового листьев экстракта....................................................................................................................1ЛО

108

6.1 Исследование противолепрозной активности

6.2 Исследование противотуберкулёзной активности экстракта

6.3 Исследование активности экстракта в отношении некоторых представителей ЫТВС, способных вызывать микобактериозы................................^^

6.4 Исследование хронической токсичности лофанта анисового листьев

экстракт сухой в отношении периферической крови

Заключение по главе

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Перспективы дальнейшей разработки темы

Список литературы

Приложения

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ:

БАВ - биологически активные вещества

ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ВЭЖХ-МС - высокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с масс-спектрометрией

ГХ - газовая хроматография

ГХ/МС - газовая хроматография в сочетании с масс-спектрометрией

КУМ - кислотоустойчивые микобактерии

КЛТ- комплексная лекарственная терапия

ЛРС - лекарственное растительное сырье

ЛРП - лекарственные растительные препараты

МЛУ- ТБ- множественная лекарственная устойчивость

МЭД - максимальная эффективная доза

ПАС- парааминосалицилат

РСО- раствор стандартного образца

СО-стандартный образец

ТБ - туберкулёз

ТСХ - тонкослойная хроматография

УФ-СФМ - спектрофотометрия в ультрафиолетовой области

ШЛУ-ТБ - туберкулёз с широкой лекарственной устойчивостью

БС-С02 - сверхкритическая флюидная экстракция с применением СО2

БРИГС -(англ. БШС&) организация, основателями которой являются крупные страны Бразилия, Россия, Индия, Китай, ЮАР. Члены этой организации характеризуются наиболее быстрым ростом экономики ШОС - Шанхайская организация сотрудничества

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методик анализа лофанта анисового листьев экстракта, обладающего антимикобактериальным действием»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность исследований

Данные ВОЗ и Международной ассоциации лепрологов свидетельствуют, что каждый год в мире регистрируется до 300 тыс. новых случаев заболевания лепрой, этот показатель не имеет тенденции к снижению. Широкое распространение лепры наблюдается в Бразилии, Индии, Непале, Танзании, Мадагаскаре, Мозамбике. В 2000 году ВОЗ в целом зарегистрировала территориальные очаги лепры в 91 стране.

В странах Европы в настоящее время насчитывается около 50 тыс. больных, представленных в основном рабочими и эмигрантами из эндемичных по лепре стран [1].

На территории Российской Федерации эндемичными очагами по лепре являются Нижнее Поволжье и Северный Кавказ [2,3]. На эти регионы приходится более 90% всех зарегистрированных больных. Преимущественными по территориям распространения заболевания в России являются Астраханская область, Ставропольский край, республики Северного Кавказа, Краснодарский край, Ростовская область.

В России заболеваемость в настоящее время носит спорадический характер, однако усиление миграционных потоков из стран Азии, тесное сотрудничество со странами БРИГС и ШОС, не исключающие усложнения эпидемиологических условий, не снижает актуальности решения проблем по оптимизации терапии лепры и для нашей страны.

Несмотря на достигнутые успехи в терапии лепры, болезнь продолжает оставаться проблемой мирового здравоохранения и в настоящее время. В 2016 году Всемирная организация здравоохранения объявила новую глобальную стратегию под названием «Глобальная стратегия по лепре: ускорение действий в интересах ликвидации лепры в мире».

На протяжении почти восьмидесяти лет основным препаратом для терапии лепры является производное сульфона - дапсон (4,4'-сульфонилбис[бензоламин]).

Имея высокую фармакологическую активность, препарат обладает рядом негативных эффектов, обусловленных формированием в ходе метаболизма гидроксиламин-производных.

К 2007 г. по некоторым данным вторичная резистентность к дапсону отмечалась у более 7% больных [4,5].

Существенные побочные эффекты и развитие лекарственной устойчивости снижают эффективность проводимой терапии и диктуют необходимость принятия мер по поиску и разработке новых отечественных эффективных препаратов.

Туберкулез - инфекционная болезнь, одна из ведущих причин заболеваемости, которая входит в десятку наиболее распространенных причин смертности в мире и чаще других инфекционных возбудителей (включая ВИЧ/СПИД) становится причиной смерти людей [6].

Согласно оценкам ВОЗ, в 2018 г. во всем мире туберкулезом заболело 10 миллионов человек, и этот параметр в последнее время остается на сравнительно стабильном уровне.

ВОЗ отмечает 30 стран с высоким уровнем заболевания туберкулезом, в которых было зарегистрировано 87% всех случаев заболевания в мире.

Серьезной угрозой здоровью населения по-прежнему является лекарственно-устойчивый туберкулез. В 2018 г. данной инфекцией, вызванной штаммами устойчивыми к рифампицину, заболело около полумиллиона человек, из которых 78% имели туберкулез с множественной лекарственной резистентностью. Наибольшая доля лекарственно-устойчивого туберкулеза пришлась на три страны: Индию (27%), Китай (14%) и Российскую Федерацию (9%). Доля случаев заболевания туберкулезом с множественной лекарственной устойчивостью среди ранее пролеченных случаев была наиболее высока (свыше 50%) в странах бывшего Советского Союза [7].

На сегодняшний день туберкулез продолжает оставаться опасным социально значимым заболеванием, для борьбы с которым используют длительную поликомпонентную противотуберкулёзную химиотерапию [8, 9, 10,

11,12]. Препараты первого ряда из классификации Международного противотуберкулезного Союза - изониазид и рифампицин обладают выраженными недостатками: снижением эффективности в связи с устойчивой резистентностью и выраженной токсичностью [8, 13]. В связи с этим поиск новых высокоэффективных и малотоксичных лекарственных средств является приоритетной задачей современного здравоохранения.

Одним из путей решения данной проблемы является разработка новых комплексных схем терапии лепры и туберкулеза, одними из компонентов которой могут быть растительные лекарственные препараты, содержащие близкие вещества по структуре к основным биологически активным веществам организма человека, что обуславливает их хороший профиль лекарственной безопасности.

Перспективным растением, обладающим антимикобактериальным действием, является лофант анисовый. Народная медицина Монголии и Тибета использует для общеукрепляющего и антибактериального действия настои и отвары лофанта анисового, водные экстракты из листьев - для устранения воспалительных процессов в желудочно-кишечном тракте, болезнях печени и мочевыводящих путей, гель из листьев лофанта - как антифунгальное средство.

Основными БАВ, содержащимися в траве лофанта анисового, являются флавоноиды, тритерпеновые соединения, аминокислоты, эфирные масла.

Таким образом, разработка способов контроля качества оригинального экстракта из листьев лофанта анисового, обладающего антимикобактериальным действием, является актуальной и перспективной задачей.

Степень разработанности темы

Терапия инфекций, вызываемых микобактериями, в настоящее время не теряет актуальности. Препараты, применяемые при лечении лепры и туберкулеза, обладают высокой токсичностью и при их длительном применении демонстрируют тяжелые побочные эффекты [14]. Кроме этого, все чаще при лечении данных заболеваний выявляется резистентность к препаратам первого

ряда [15,16,17,18]. В этой связи возникает необходимость поиска средств, с низкой токсичностью, обладающих антимикобактериальной активностью, для актуализации комбинированных терапевтических схем, применяемых при микобактериальных инфекциях.

Имеются данные о клиническом применении масла дерева чаульмугра для лечения [19] в «досульфоновую эру» при малобациллярных типах лепры, но не эффективного при лепроматозе.

Применение лекарственных растительных средств, обладающих антимикобактериальным действием, представлено в основном в виде отдельных экспериментальных данных [20,21].

Имеются исследования, устанавливающие связь между регулярным употреблением флавоноидов и снижением риска развития туберкулеза [22,23]. Известно бактерицидное действие экстракта бессмертника песчаного на клинические штаммы Mycobacterium tuberculosis [24].

За рамками отдельных работ российских и зарубежных ученых остались незавершенными исследования, посвященные поиску и применению лекарственных растительных субстанций, обладающих антимикобактериальной активностью [25,26].

Незначительный уровень разработанности данного направления обусловливает необходимость разработки способов получения и контроля качества нового отечественного лекарственного растительного экстракта, обладающего антимикобактериальным действием.

Цель исследования - разработка методик контроля качества экстракта из листьев лофанта анисового, полученного методом сверхкритической флюидной экстракции, обладающего антимикобактериальным действием.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи: 1. Изучить литературные данные по поиску лекарственных растений источников БАВ перспективных в отношении резистентных штаммов возбудителей лепры и туберкулеза.

2. Определить содержание основных БАВ в листьях лофанта анисового.

3. Обосновать выбор оптимальных условий получения экстракта из листьев лофанта анисового методом сверхкритической флюидной экстракции с применением СО2.

4. Изучить химический состав экстракта из листьев лофанта анисового.

5. Разработать методики контроля качества и определить сроки годности экстракта из листьев лофанта анисового.

6. Исследовать антимикобактериальную активность и хроническую токсичность экстракта из листьев лофанта анисового (в эксперименте).

Научная новизна

Экспериментально обоснован выбор режимов получения лофанта анисового листьев экстракта сверхкритической флюидной экстракцией с применением СО2 в зависимости от уровня выхода БАВ (Патент Яи 2650399 С1).

Изучен химический состав экстракта из листьев лофанта анисового сверхкритической флюидной экстракцией с применением СО2.

Разработаны методики идентификации и количественного определения основных БАВ в экстракте из листьев лофанта анисового. Проведена валидация предложенных методик.

В условиях естественного хранения изучена стабильность полученного экстракта и определены сроки его годности.

Доказано, что экстракт лофанта анисового обладает антимикобактериальной активностью (в эксперименте).

Установлено, что полученный экстракт в исследованных дозах не проявляет токсического действия (в эксперименте).

Теоретическая и практическая значимость

Впервые, предложен отечественный оригинальный лекарственный растительный экстракт, полученный из лофанта анисового листьев, обладающий антимикобактериальным действием.

Теоретически обоснован и практически реализован способ получения экстракта из листьев лофанта анисового.

Проведен анализ основных действующих веществ, содержащихся в экстракте. Предложены методики идентификации и количественного определения основных БАВ.

Предложен проект НД «Лофанта анисового листьев экстракт», который апробирован на ООО НПП «Вулкан» (г. Астрахань).

Методология и методы исследования Методология диссертационной работы планировалась согласно цели исследования и поставленным задачам. На основе формально-логических методов исследования был проведен анализ научной литературы. При выполнении исследований использовали современные физико-химические и химические методы исследования: ТСХ, УФ-СФМ, ВЭЖХ, ВЭЖХ-МС, ГХ-МС.

Результаты статистически обработаны, методики количественного определения основных БАВ лофанта анисового листьев экстракта валидированы в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи XIV издания.

Положения, выносимые на защиту

1. Листья лофанта анисового содержат большее количество БАВ, чем другие части данного растения и являются перспективным сырьем для получения экстракта.

2. Экстракт содержит комплекс БАВ, большую часть представленных флавоноидами и тритерпеновыми соединениями.

3. Подлинность сухого экстракта актуально подтверждать по наличию флавоноидов и тритерпеновых соединений методами ТСХ и СФМ.

4. Количественное содержание флавоноидов и тритерпеновых соединений предлагается проводить методами СФМ и ВЭЖХ.

5. Лофанта анисового листьев экстракт сухой обладает выраженным бактериостатическим действием в отношении M.leprae и M.tuberculosis.

Личный вклад автора

Диссертант самостоятельно провел информационный поиск, анализ источников литературы, определил цели и задачи исследования, получил и обобщил результаты.

Автор непосредственно участвовал во всех этапах решения задач: определении содержания основных БАВ в лофанта анисового листьях; разработке оптимального способа получения экстракта из листьев лофанта анисового методом сверхкритической флюидной экстракции с применением СО2; изучении химического состава полученного экстракта; разработке способов стандартизации и определении сроков годности экстракта сухого из листьев лофанта анисового; статистической обработке результатов. Исследования по специфической активности соединений были проведены на базе ФГБУ «Научно-исследовательского института по изучению лепры» Минздрава России под руководством к.б.н. С.А. Лужновой.

Степень достоверности и апробация результатов

Достоверность полученных результатов базируется на применении современных методик анализа и статистической обработки материала в соответствии с требованиями Государственной Фармакопеи РФ XIV издания; в использовании достаточного количества экспериментального материала, обеспечивающего репрезентативность выборок, и статистическая обработка посредством программы «BioStat-2009» (Analist Soft Ins., США).

Результаты исследований представлены на конференции: научно-практической конференции с международным участием: Фармацевтические науки: от теории к практике (Астрахань, 2016), на международной конференции «RENEWABLE PLANT RESOURCES: CHEMISTRY, TECHNOLOGY, MEDICINE» (Санкт-Петербург, 2017), V Всероссийской научно-практической конференции (Пятигорск, 2017), Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции (Пятигорск, 2018), на II Всероссийской конференции с международным участием, посвященной 110-летию Саратовского

национального исследовательского государственного университета имени Н.Г. Чернышевского, 90-летию Института Химии (Саратов, 2019), Международной научной конференции: Актуальные вопросы органической химии и биотехнологии (Екатеринбург, 2020), Х Всероссийской научно-практической конференции с международным участием: Актуальные проблемы науки, производства и химического образования (Астрахань, 2020), XI Международной научно-практической конференции: Актуальные проблемы науки, производства и химического образования (Астрахань, 2021).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 11 работ, из них 2 статьи - в рецензируемых научных изданиях, изданиях, включенных в Перечень российских рецензируемых научных журналов, в которых должны быть опубликованы научные результаты диссертации на соискание ученой степени кандидата наук, 1 патент на изобретение (Патент RU 2650399 О).

Соответствие диссертации паспорту научной специальности

Диссертационное исследование соответствует паспорту научной специальности 3.4.2 - Фармацевтическая химия, фармакогнозия, а именно: пунктам 3 и 6.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 157 страницах печатного текста, проиллюстрирована 39 таблицами, 32 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (глава 1), экспериментальной части (главы 2 - 6), заключения, библиографического списка и приложений.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные лекарственные препараты, применяемые для лечения

микобактериальных инфекций

Туберкулез - инфекционная болезнь, которая входит в десятку наиболее распространенных причин смертности в мире. Согласно оценкам ВОЗ, в 2018 г. во всем мире туберкулезом заболело 10 миллионов человек, и этот показатель в настоящее время остается на сравнительно стабильном уровне. ВОЗ отмечает 30 стран с высоким уровнем туберкулеза, в которых было зарегистрировано 87% всех случаев заболевания в мире.

Препараты первого ряда из классификации Международного противотуберкулезного Союза - изониазид и рифампицин обладают выраженными недостатками: снижением эффективности в связи с устойчивой резистентностью и выраженной токсичностью. Серьезной угрозой здоровью населения по-прежнему является лекарственно-устойчивый туберкулез. В связи с этим поиск новых высокоэффективных и малотоксичных лекарственных средств является приоритетной задачей современного здравоохранения.

Первые сведения о развитии лекарственной резистентности у возбудителя туберкулеза появились в пятидесятые годы двадцатого века, а к 2017 г., по оценкам ВОЗ, туберкулезом, устойчивым к рифампицину (РУ-ТБ), одному из наиболее эффективных препаратов первого ряда, в разных странах мира заболело 558 000 человек, при этом в 82% случаев выявлялся туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ-ТБ). Половина случаев МЛУ/РУ-ТБ выявляется в трех странах - Индии (24%), Китае (13%) и Российской Федерации (10%).

Лекарственно-устойчивый туберкулез (ЛУ-ТБ) вызывается штаммами микобактерий туберкулеза, демонстрирующих резистентность к одному или более препаратам первого ряда. Туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ-ТБ) определяется, как туберкулез, который устойчив к

лечению, как минимум двумя противотуберкулезными препаратами - изониазиду и рифампицину. Лечение продолжается длительное время, при этом препараты проявляют тяжелые побочные эффекты [34,13,36].

Лепра является одним из древнейших заболеваний, известных человечеству [27]. Оно может стать причиной инвалидизации, приводящей к существенным ограничениям и ухудшению качества жизни человека. На сегодняшний день, лепра считается проблемой общественного здравоохранения во всем мире [28].

Несмотря на успехи фармакотерапии, статистика заболеваемости лепрой продолжает оставаться проблемой для мирового здравоохранения, а новые случаи заболевания выявляются в настоящее время не только за рубежом, но и в России [29]. В 2016 году Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) приняла новую глобальную стратегию под названием «Глобальная стратегия по проказе 20162020: ускорение к миру, свободному от проказы».

Принято считать, что единственным источником инфекции является больной человек, однако существует теория об альтернативном источнике инфицирования возбудителем лепры - почве [3]. В ряде работ зарубежных авторов выявлена связь распространенности лепрозной инфекции у человека и животных с наличием нефтегазовых месторождений и другого ископаемого топлива в эндемичных регионах Азии, Африки, Южной Америки [30,31].

Кроме этого, из-за сложности в диагностике и редких случаев заболевания, лечение пациентов может происходить под другим диагнозам в то время, как больной является открытым источником инфекции. Это приводит к снижению бдительности в отношении лепры. В связи с этим, проблема заболеваемости лепрой остается актуальной, в особенности в высоко эндемичных странах, на долю которых приходиться большая часть случаев в мире. Ранняя диагностика заболевания снижает вероятность инфицирования окружающих, сокращает сроки стационарного лечения, способствует более успешной медицинской и социальной реабилитации больных [32].

Внедрение мультимедикаментозной терапии (МОТ) позволило достичь ощутимых результатов в лечении лепры. Данная схема рекомендована ВОЗ и включает в себя комбинацию из трех препаратов дапсона, рифампицина, клофазимина [17, 33]. Такая терапия позволяет сократить срок лечения, уменьшает количество рецидивов. Однако, уже к 2007 г. у более, чем 6% больных отмечалось развитии резистентности к названным препаратам [4,33]. Резистентность к препаратам для лечения лепры (дапсону) возникала на фоне длительной монотерапии.

В 1981 году исследовательская группа ВОЗ рекомендовала КЛТ для лечения лепры. Она состоит из 2 или 3 препаратов: дапсон и рифампицин назначают всем пациентам, а клофазимин добавляют в случае мультибактериальной инфекции. Данное предписание является рекомендуемым режимом для лечения лепры. Так же, могут применяться солюсульфон (сульфетрон), диуцифон, лампрен, кралитромицин, моноциклин, офлоксацин и др., например, в случаях резистентности к препаратам из КЛТ [37]. С 1995 года ВОЗ бесплатно предоставляет препараты КЛТ пациентов в ряд стран. Однако, несмотря на принятые меры, из разных регионов мира сообщается о штаммах микобактерий устойчивых к дапсону, рифампицину и офлоксацину [7, 34, 35, 38, 39].

1.2. Лекарственные растения и лекарственные растительные препараты, проявляющие антимикобактериальную активность

Интерес к препаратам из лекарственного растительного сырья обусловлен неблагоприятным действием на организм пациентов синтетических противолепрозных и противотуберкулезных средств, которые, как правило, применяются длительными курсами. Согласно исследованию, проведенному в Индии, побочные реакции на химиотерапевтические средства во время лечения МЛУ-ТБ наблюдаются у 57% - 94% больных. Наиболее распространенным побочным эффектом является гепатотоксичность (71,7%) [35,36,40,41].

Эффективность применения лекарственных фитопрепаратов при многих заболеваниях обусловлена тем, что БАВ растений имеют естественное происхождение, они более физиологичны, в связи с этим усваиваются организмом лучше, чем синтетические, наблюдается меньше побочных эффектов [42, 43].

Поиск БАВ растений с противотуберкулезной активностью перспективен для выявления потенциальных веществ для создания новых антимикобактериальных препаратов для разработки новых схем вспомогательной терапии.

Применение лекарственных растений в комплексной терапии микобактериальных инфекций дает большие возможности для создания новых схем противолепрозного и противотуберкулезного лечения [44-47]. Фитотерапия при данных инфекциях может быть применима при различных проявлениях побочных эффектов от химиопрепаратов, недостаточной эффективности традиционной химиотерапии, при нарушении иммунитета. Лекарственные растительные препараты способствуют удалению токсичных продуктов обмена веществ и усилению антиоксидантой защиты [43,48-51].

При терапии микобактериальных инфекций находят применение сборы лекарственного растительного сырья (сбор №48, ТМ «Мариславна», сбор №57 «Травы Кавказа», сбор трав монастырский при туберкулезе легких, сбор 3 «туберкулез легких» и др.), содержащие лекарственные растения с антибактериальной, противовоспалительной, иммунокоррегирующей,

детоксикационной активностью [50,52,53,54].

Данные литературы свидетельствуют, что антимикробная активность в отношении микобактерий туберкулеза выявлена у алкалоидов, терпеноидов, полиацетиленов, флавоноидов, кумаринов, простых фенолов, хинонов и др. [47,55,56,57].

Исследования подтверждают тесную связь между флавоноидами в рационе больных и снижением рисков смертности при острых респираторных, некоторых хронических заболеваниях, воспалительных процессах и окислительном стрессе.

Выявлена связь между регулярным употреблением флавоноидов и снижением риска развития туберкулеза [22,23,57,58].

Антимикробные препараты растительного происхождения (Allium cepa L., Allium sativum L., Aloe vera (L.) Burm.f., Humulus lupulus L., Prunella vulgaris L., Aristolochia brevipes Benth., Hypericum sp. Piper nigrum L.) обладают свойствами, позволяющими рассматривать их в качестве альтернативных средства для борьбы с МЛУ- и ШЛУ-ТБ [23,59,60,61,62] или использовать их для усиления активности химиотерапии для улучшения ее переносимости [63,64,65,66,67].

Доказана противотуберкулезная активность эфирных масел растений семейства астровые (полыни австрийской, полыни сантониковой, тысячелистника широколопастного, полыни однолетней, полыни Филатова, полыни Сиверса) сопоставимая с эффективностью официнальных противотуберкулёзных препаратов (рифампицин, протионамид) [68,69,70].

Фенольные соединения и флавоноиды рассматриваются как перспективные источники противотуберкулезных препаратов. Так, выявлена противотуберкулезная активность петролейно-эфирной фракции и этилацетатной фракции растений Thymus sibthorpii Benth., Ballota acetabulosa (L.) Benth. Экстракты проявляли высокую, как бактериостатическую, так и бактерицидную активность в отношении штаммов микобактерий, обусловленную, по мнению авторов, их фенольным составом [47,71].

Сухой экстракт Gratiola officinalis L., содержащий флавоноиды, в концентрации 14 мг/мл, согласно исследованиям [24] проявлял бактерицидный эффект в отношении музейного штамма МБТ в концентрации 26,6 мг/мл в отношении чувствительного клинического штамма МБТ и при концентрации 53,1 мг/мл: наблюдали отсутствие роста штамма микобактерий туберкулеза с МЛУ.

Представители флавоноидов: кверцетин, рутин и лютеолин были исследованы на антимикобактериальную активность [72,73,74]. Результаты свидетельствуют, что кверцетин обладает лучшей ингибирующей активностью, чем рутин [72].

Установлено, что метанольный экстракт плодов Schinus terebinthifolius проявляет антиоксидантную и антимикобактериальную активность [75]. Воздействие смесью кверцетина, флаван-3-олов зеленого чая, антоцианами черники приводило к выраженному снижению вирулентности микобактерий туберкулеза [76].

Установлено бактерицидное действие экстракта бессмертника песчаного, содержащего нарингенин, апигенин, кемпферол, а также рутин, кверцетин, лютеолин на штаммы Mycobacterium tuberculosis [77].

В качестве возможного механизма действия, обуславливающего активность флавоноидов в отношении микобактерий, рассматривают ингибирование эффлюкс систем. Показано, что флаванон пиноцембрин (дигидрохризин), фенольные соединения биоханин А, лютеолин и ресвератрол проявляют ингибирующую активность в отношении эффлюкса бромистого этидия, сопоставимую с активностью карбонил-цианид m -хлорфенилгидразоном, одним из эталонных ингибиторов эффлюксных систем у M. smegmatis [78].

Показано, что флавоноиды (байкалеин, пектолинарин, кверцетин, хиспидулин, мирицетин, изоликвиритигенин, икариин, кемпферол, куркумин и байкалин) могут служить потенциальными ингибиторами протеасом [74].

В исследовании [74] показана способность флавоноида апигенина ингибировать активность NO-продукции макрофагами, а также проявлять антимикобактериальную активность в отношении Mycobacterium bovis в дозе 14,53±1,25 мкг/мл.

Некоторые лигнаны (дигидрокубебин, хинокинин, этоксикубебин), по данным исследователей способны влиять на метаболизм миколовой кислоты, разрушая клеточную стенку микобактерий, что делает их перспективными для использования их в качестве антимикобактериальных лекарственных средств. Исследование выявило, что этоксикубебин вызывал значительное снижение содержания всех миколовых кислот (после суточной экспозиции) на Mtb H37Rv.

В дополнение к этому, ультраструктурный анализ бактерий, обработанных этоксикубебином, показал аберрацию морфологии бактерий [79].

Доказана активность в отношении микобактерий туберкулеза различных тритерпеновых соединений растений и экстрактов [80, 81, 82, 83]. Так, урсоловая кислота и кукурбитацин Е 2-й-Р-В-глюкопиранозид, содержащиеся в растении Citrullus colocynthis (L.) Schrad., оказывают противотуберкулезное действие [81]. Установлена активность в отношении микобактерий туберкулеза у тритерпеновых соединений (урсоловой кислоты, лупеола, бетулиновой кислоты и бета-ситостерина), выделенных из Curtisia dentata (Burm.f.) C.A.Sm. Наиболее активной являлась метанольная фракция и ацетоновые экстракты [83]. Олеаноловая и урсоловая кислоты, полученные из листьев Chamaedorea tepejilote Liebm., обладали бактерицидной активностью в отношении M. tuberculosis в концентрации 100 мкг/мл [80]. Установлена антимикобактериальная активность гексанового экстракта надземной части крапивы двудомной, которую связывают с наличием терпеноидов [82]. Доказана активность тритерпенов (включая урсоловую кислоту), выделенных из растений - Calceolaria pinifolia Cav. и Chamaedorea tepejilote Liebm., [84,85,86]. Выявлено, что водное извлечение корня солодки голой при пероральном введении зараженным M. leprae мышам в дозе 0,2 мл/кг проявляет бактериостатическое действие [25].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Юртаева Екатерина Алексеевна, 2021 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Update on leprosy/ S.N. Marlowe, D.N. Lockwood // Hosp Med.- 2001.- Vol.62, №8.- P. 471-476.

2. Изучение антительного ответа на антигены Mycobacterium leprae у жителей эндемического и неэндемического по лепре регионов Российской Федерации/ М. Ю. Юшин, В. В. Анохина //Астраханский медицинский журнал. - 2014.- Т.9, №2. -С. 92-97.

3. Сравнительное изучение содержания иммуноглобулинов класса g в сыворотках крови доноров астраханской области и больных лепрой к специфическому полусинтетическому антигену Mycobacterium leprae - dis-bsa и антигену из Mycobacterium lufu/ М. Ю. Юшин [и др.] // Астраханский медицинский журнал. - 2013. - Т.8, №2. - С. 93-96.

4. Sulfone resistance in leprosy. A review of 100 proven clinical cases/ J. Pearson, R. Rees, M. Waters // Lancet. -1975. Vol. 2.-P. 69-72.

5. Геномные основы подверженности к инфекционным заболеваниям / И.А. Гончарова [и др.] // Вестник ВОГиС. - 2006. - Т.10, №3. - С. 540-552.

6. Tabuti JR, Kukunda CB, Waako PJ. Medicinal plants used by traditional medicine practitioners in the treatment of tuberculosis and related ailments in Uganda. JEthnopharmacol 2010; 127:130-6.

7. World Health Organization (WHO). Global tuberculosiseport2015; 20thedition.http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/191102/1/9789241565059_eng.pdf [accessed 6 September 2017].

8. Баласанянц, Г. С. Побочные действия противотуберкулезных препаратов и методы их устранения: учеб. Пособие / Г.С. Баласанянц, Д. С. Суханов, Д. Л. Айзиков. - СПб., 2011. -С. 59 -60.

9. Суханов Д.С. Лекарственные поражения печени у больных туберкулёзом лёгких и гепатопротекторная терапия: Автореф. дис.... канд.мед.наук. - СПб., 2008. - 25 с.

10. Хорошилова, Н.Е. Эпидемиологическая ситуация по туберкулёзу с множественной лекарственной устойчивостью возбудителя в России / Н.Е. Хорошилова, О.А. Юматова, А.В. Лушникова // Научно-медицинский вестник Центрального Черноземья. - 2017.- № 70. - С. 66-70.

11. Adaramoye OA, Kehinde AO, Adefisan A, Adeyemi O, Oyinlola I, Akanni OO. Ameliorative Effects of Kolaviron, a Biflavonoid Fraction from Garcinia Kola Seed, on Hepato-renal Toxicity of Anti-tuberculosis Drugs in Wistar Rats. // Tokai J. Exp. Clin. Med. - 2016. N41, vol.1. - P. 14-21

12. World Health Organization. Tuberculosis report 2013. Available from: URL: http: //www.who. int/tb/en/

13. Зеллвегер, Ж.П. Современные возможности лечения туберкулеза со множественной лекарственной устойчивостью микобактерий / Ж. П. Зеллвегер // Bulletin of the International Scientific Surgical Association. - 2017. - Т. 6, № 4. -С. 512.

14. Dapsone and sulfones in dermatology: Overview and update/ Y. I. Zhu, M. Y. Stiller // Journal of the American Academy of Dermatology. - Vol. 45, №3.- P.420-34.

15. Возрастающая угроза развития антимикробной резистентности. Возможные меры [Эектронный ресурс]: Всемирная организация здравоохранения. - Женева, 2013. - 130 с. - Режим доступа: http: //www.who. int/patientsafety/implementation/amr/publication/ru/

16. Antimicrobial resistance in leprosy: results of the first prospective open survey conducted by a WHO surveillance network for the period 2009-15/ E. Cambau [et al.]. // Clin Microbiol Infect. - 2018. -Vol.- 24, №12.- P. 1305-1310.

17. Rifampin-resistant leprosy/ R.R. Jacobson, R.C. Hastings // Lancet. - 1976. Vol. 2.- P. 1304-1305.

18. Streptomycin resistance in pulmonary tuberculosis/ J. Crofton, J, D. A. Mitchison // Br Med J. -1948. Vol. 2. -P. 1009-1015.

19. Hist Cienc Saude Manguinhos. 2008 Jan-Mar;15(1):29-47 «Chaulmoogra oil as scientific knowledge: the construction of a treatment for leprosy» dos Santos FS1, de Souza LP, Siani AC.

20. Rachmawaty, F.J. Antimycobacterial Activity of Ethanolic Extract and Essential oil of Red Betel Leaves (Piper crocatum) against Mycobacterium tuberculosis in Vitro and in Vivo. Ph.D. Thesis, Faculty of Medicine of Gadjah Mada University, Yogyakarta, Indonesia, 2014.

21. Lakshmanan, D.; Werngren, J.; Jose, L.; Suja, K.P.; Nair, M.S.; Varma, R.L.; Mundayoor, S.; Hoffner, S.;Kumar, R.A. Ethyl-p-methoxycinnamate isolated from a traditional anti-tuberculosis medicinal herb inhibits drug resistant strains of Mycobacterium tuberculosis in vitro. Fitoterapia 2011, 82, 757-761.

22. Soh, A.Z.; Pan, A.; Chee, C.B.E.; Wang, Y.T.; Yuan, J.M.; Koh, W.P. Tea drinking and its association with active tuberculosis incidence among middle-aged and elderly adults: The Singapore Chinese Health Study. Nutrients 2017, 9, 544.

23. Chen, M.; Deng, J.; Li,W.; Lin, D.; Su, C.;Wang, M.; Li, X.; Abuaku, B.K.; Tan, H.;Wen, S.W. Impact of tea drinking upon tuberculosis: A neglected issue. BMC Public Health 2015, 15, 515.

24. Полуконова Н.В., Наволокин Н.А., Маслякова Г.Н., Бучарская А.Б., Панкратова Л.Э., Манаенкова Е.В., Курчатова М.Н., Скворцова В.В., Дурнова Н.А. Сборник научных трудов НИИ фундаментальной и клинической уронефрологии Саратовского ГМУ им. В.И. Разумовского "Актуальные проблемы фундаментальной и клинической уронефрологии - 2017".

25. Назарова Г.Н., Маслов А.К., Сухенко Л.Т., Лужнова С.А. Предпосылки использования экстракта из корня солодки голой (Glycyrrhiza glabra) в терапии лепры // Вестник новых медицинских технологий - 2008 - Т. XV, №2 - С. 219.

26. Генатуллина Г.Н., Лужнова С.А Противомикобактериальная активность сборного растительного экстракта и влияние его биологически активных веществ НА структурные изменения клеток M. lufu // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований 2015 - № 12. - С. 1439-1441.

27. Ramesh MB, Chaitra P. Leprosy: An overview of pathophysiology, interdisciplinary perspectives on infectious diseases. Hindawi Publishing Corporation. -2012.- P. 1-6

28. Всемирная Организация Здравоохранения; Обновление проказы, 2018.Женева: Всемирная Организация Здравоохранения, 2018. Доступно по адресу: http: //www.who .int/mediacentre/factsheets/fs 101 /en/

29. Global leprosy situation, 2012 // Weekly epidemiological record. - 2012. - Vol. 87. - P. 317-328

30. Katoch, V. M. Recent advances in molecular biology of leprosy / V. M. Katoch, M. Lavania, D. S. Chauhan [et al.]//Ind. J. Lepr. -2007. - Vol.79. - P. 151-166

31. Katoch, V. M. The contemporary revelance of the mouse foot pad model for cultivation M.leprae / V. M. Katoch // Lepr. Rev. - 2009. - Vol. 80.- P. 120-123.]

32. Экспериментальная лепра: прошлое, настоящее и будущее/ Ю.В. Первухин. В.В. Дуйко//Естественные науки. -2010. - Т.2 № 31. - С. 144-149.

33. Gelber R. N. The chemotherapy of leprosy: An interpretive history / R. N. Gelber, J. Grosset // Lepr. Rev. - 2012. - Vol. 83. - P. 221-240.

34. ВОЗ. Доклад о глобальной борьбе с туберкулезом 2018 год https://www.who.int/tb/areas-of-work/drug-resistant-tb/ru/

35. ЛРС. Регистр лекарственных средств России. https: //www.rlsnet.ru/mnn_index_id_873. htm

36. Akshata, J., Chakrabarthy, A., Swapna, R., Buggi, S. and Somashekar, M. Adverse Drug Reactions in Management of Multi Drug Resistant Tuberculosis, in Tertiary Chest Institute // Journal of Tuberculosis Research, 20153, 27-33.

37. Treatment of leprosy/ H.K. Kar, R. Gupta // Clin Dermatol. -2015. - Vol.- 33, №1. - P. 55-65.

38. Multidrug-resistance to dapsone, rifampicin, and ofloxacin in Mycobacterium leprae/ E. Cambau [et al.]. Lancet. - 1997. Vol.- 349. -P. 103-104

39. Multidrug resistant Mycobacterium leprae from patients with leprosy/ S. Maeda [et al.]. //Antimicrob Agents Chemother. - 2001. Vol. 45.-P. 3635-3639

40. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению туберкулеза органов дыхания. 2014. Москва, 56 с.

41. Ramesh Pandit, Pawan Kumar Singh, Vipin Kumar Natural Remedies against Multi-Drug Resistant Mycobacterium tuberculosis // Journal of Tuberculosis Research. - 2015.- 3, 171-183.

42. Корзунова А. Очищение и восстановление организма народными средствами после туберкулеза. - М., 2013. 160 с.

43. Макеев О.Г., Короткое А.В., Бураев М.Э., Гисматов Р.Х., Костюкова С.В. Применение комплекса факторов растительного происхождения для лечения больных туберкулезом легких // Вестник уральской медицинской академической науки. - 2010. - №2. - С. 95-97.

44. Brennan, J.P.; Young, D.B.; Robertson, B.D. Handbook of Antituberculosis Agents; Elsevier: New York, NY, USA, 2008; pp. 85-170.

45. Mowbray SL, Kathiravan MK, Pandey AA, Odell LR. Inhibition of Glutamine Synthetase: A Potential Drug Target in Mycobacterium tuberculosis. Molecules 2014;19:13161-76. doi:10.3390/molecules190913161.

46. Казаринова Н.В. Лекарственные растения в лечении разных форм туберкулеза (обзор русскоязычной литературы) / Н.В. Казаринова, К.Г. Ткаченко // Растительные ресурсы. - 2000. - № 1. - С. 92-106

47. Федько И.В., Хващевская А.А., Камбалина М.Г. Перспектива использования растений семейства Lamiaceae при фитотерапии туберкулеза легких, Фундаментальные исследования №6, 2013 С. 665-667

48. Мархаев А.Г., Убеева И.П., Бадлеева М.В. Возможности фитотерапии в коррекции гепатотоксических эффектов при химиотерапии туберкулеза // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. - 2010. - №2 (72). - С. 67-70.

49. Гельберг И.С., Вольф С.Б., Алексо Е.Н., Авласенко В.С., Шевчук Д.В., Кроткова Е.Н., Мойсеенок А.Г., Наумов А.В. Нарушения резистентности, метаболизма при туберкулезе и методы патогенетического воздействия в его комплексном лечении // Журнал ГрГМУ. 2009. № 1. С. 123-128.

50. Ким М.Е., Мурзагулова К.Б., Евсеева С.Б. Возможности использования природного сырья в составе вспомогательной терапии туберкулеза: опыт народной медицины, современное состояние исследований // Фармация и фармакология. - 2017. - Т. 5 № 5. - С. 404-421.

51. Барнаулов О.Д., Барнаулов А.О., Поспелова М.Л. Сбор для лечения туберкулеза легких // Патент 2411954. Россия, A61K 36/00/. №2009112475/15; 3аявл.03.04.2009; Опубл. 20.02.2011; Бюл. № 5.

52. Фитолаборатория Мариславна. URL: http://marislavna.ru/o-nas/.

53. Травы Кавказа. URL: http://www.greenph.ru/

54. Фитоаптека «Алтаймикс». URL: http://altaymix.ru/catalog/fi tochai.html.

55. Balentine, D.A.; Dwyer, J.T.; Erdman, J.W., Jr.; Ferruzzi, M.G.; Gaine, P.C.; Harnly, J.M.; Kwik-Uribe, C.L. Recommendations on reporting requirements for flavonoids in research. Am. J. Clin. Nutr. 2015, 101, 1113-1125.

56. Williamson, G.; Kay, C.D.; Crozier, A. The bioavailability, transport, and bioactivity of dietary flavonoids: A review from a historical perspective. Comp. Rev. Food Sci. Food Saf. 2018, 17, 1054-1112.

57. Cassidy, A.; Rogers, G.; Peterson, J.J.; Dwyer, J.T.; Lin, H.; Jacques, P.F. Higher dietary anthocyanin and flavonol intakes are associated with anti-inflammatory effects in a population of US adults. Am. J. Clin. Nutr. 2015, 102, 172-181.

58. Somerville, V.S.; Braakhuis, A.J.; Hopkins,W.G. Effect of flavonoids on upper respiratory tract infections and immune function: A systematic review and metaanalysis // Adv. Nutr. 2016, 7, 488-497.

59. Smolarz HD, Swatko-Ossor M, Ginalska G, Medynska E Antimycobacterial effect of extract and its components from Rheum rhaponticum. // J AOAC Int. 2013; 96(1): 155-60.

60. Rostinawati, T. Antibacterial Activity of Ethanolic Extract and Water Extract of Roselle Petals (Hibiscus sabdariffa L.) against Mycobacterium tuberculosis Labkes-026 (MDR) Strain and Mycobacterium tuberculosis H37Rv Strain in Vitro. Master's Thesis, Faculty of Pharmacy Padjadjaran University, Bandung, Indonesia, 1 March 2008

61. Suksamrarn A, Chotipong A, Suavansri T, Boongird S, Timsuksai P, Vimuttipong S, Chuaynugul A. Antimycobacterial activity and cytotoxicity of flavonoids from the flowers of Chromolaena odorata. // Arch Pharm Res. 2004 May;27(5):507-11.

62. Филиппова Г.В., Павлов Н.Г., Шашурин М.М., Кершенгольц Б.М. Влияние экстрактов слоевищ северных лишайников, экстрагированных различными способами, на биологические свойства микобактерий туберкулеза // Сибирский медицинский журнал. 2008. №3. С. 99-103.

63. Ramesh Subramani, Mathivanan Narayanasamy, Klaus-D. Feussner Plant-derived antimicrobials to fight against multi-drug-resistant human pathogens // Biotech. 2017; 7:172.

64. Коновалов Д.А. Природные полиацетиленовые соединения // Фармация и фармакология. 2014. №4 (5). С. 23-47.

65. Ramachandran Sarojini Santhosh, Balasubramanian Suriyanarayanan. Plants: a source for new antimycobacterial drugs // Planta Med. 2014. 80(01). P. 9-21. DOI: 10.1055/s-0033-1350978.

66. Насухова А.М., Оробинская В.Н., Коновалов Д.А., Кузьмина У.А., Шханукова З.Х. Природные полиацетиленовые соединения с противотуберкулёзной активностью // Медицинский вестник Северного Кавказа. 2016. Т. 11. №4. С. 595-599.

67. Gentry EJ, Jampani HB, Keshavarz-Shokri A, Morton MD, Velde DV, Telikepalli H, Mitscher LA, Shawar R, Humble D, Baker W. Antitubercular natural products: berberine from the roots of commercial Hydrastis canadensis powder. Isolation of inactive 8-oxotetrahydrothalifendine, canadine, beta-hydrastine, and two new quinic acid esters, hycandinic acid esters-1 and -2. J Nat Prod 1998; 61(10): 11871193.

68. Коновалов Д.А., Хамилонов А.А. Биологически активные соединения полыни однолетней. Эфирное масло // Фармация и фармакология. 2016. №4(4). С. 4-33. DOI: 10.19163/2307-9266-2016-4-4-4-33.

69. Коновалов Ю.Б., Коновалов Д.А. Противотуберкулезная активность эфирного масла полыни австрийской // Научное обозрение. 2005. №3. С. 13-15.

70. Новикова Н.М. Противотуберкулезная активность эфирных масел, выделенных из полыней флоры Казахстана //Медицина и экология. 2012. №2. С. 104-105.

71. Tülin Askun, Emmanuel Mouafo Tekwu, Fatih Satil, Seyma Modanlioglu and Hatice Aydeniz Preliminary antimycobacterial study on selected Turkish plants Lamiaceae) against Mycobacterium tuberculosis and search for some phenolic constituents // BMC Complementary and Alternative Medicine 2013, 13:365

72. Sasikumar, K.; Ghosh, A.R.; Dusthackeer, A. Antimycobacterial potentials of quercetin and rutin against Mycobacterium tuberculosis H37Rv3. // Biotech 2018, 8, 427.

73. Lechner, D.; Gibbons, S.; Bucar, F. Plant phenolic compounds as ethidium bromide e_ux inhibitors in Mycobacterium smegmatis // J. Antimicrob. Chemother. 2008, 62, 345-348.

74. Zheng, Y.; Jiang, X.; Gao, F.; Song, J.; Sun, J.;Wang, L.; Sun, X.; Lu, Z.; Zhang, H. Identification of plant-derived natural products as potential inhibitors of the Mycobacterium tuberculosis proteasome // BMC Complement. Altern. Med. 2014, 14, 400.

75. Bernardes, N.R.; Heggdorne-Araujo, M.; Borges, I.F.J.C.; Almeida, F.M.; Amaral, E.P.; Lasunskaia, E.B.; Muzitano, M.F.; Oliveira, D.B. Nitric oxide production, inhibitory, antioxidant and antimycobacterial activities of the fruits extract and flavonoid content of Schinus terebinthifolius. Rev. Bras. Farmacogn. 2014, 24, 644650.

76. Ruoqiong Cao, Garrett Teskey, Hicret Islamoglu, Myra Gutierrez, Oscar Salaiz, Shalok Munjal, Marcel P. Fraix, Airani Sathananthan, David C. Nieman, Vishwanath Venketaraman Flavonoid Mixture Inhibits Mycobacterium tuberculosis Survival and Infectivity // Molecules 2019, 24, 851; doi:10.3390/molecules24050851

77. В. В. Скворцова, Н.А. Наволокин, Н.В. Полуконова, Е.В. Манаенкова, Л.Э. Панкратова, М.А. Курчатова, Г.Н. Маслякова, Н.А. Дурнова, Противотуберкулезная активность бессмертника песчаного (HELICHRYSUM ARENARIUM) in vitro, Экспериментальная и клиническая фармакология, Т 78, №2, 2015, С. 30-33

78. Muhamad Harith Mazlun, Siti Fatimah Sabran, Maryati Mohamed, Mohd Fadzelly Abu Bakar, Zunoliza Abdullah Phenolic Compounds as Promising Drug Candidates in Tuberculosis Therapy // Molecules 2019, 24, 2449; doi: 10.3390/molecules24132449

79. Baquero, E.; Quinones,W.; Ribon,W.; Caldas, M.L.; Sarmiento, L.; Echeverri, F. E_ect of an Oxadiaxoline and a Lignan on Mycolic Acid Biosynthesis and Ultrastructural Changes of Mycobacterium tuberculosis. Tuberculosis Res. Treat. 2011, 2011, 1-6.

80. Jessica A. Jesus, Joao Henrique G. Lago, Marcia D. Laurenti, Eduardo S. Yamamoto, Luiz Felipe D. Passero Antimicrobial Activity of Oleanolic and Ursolic Acids: An Update Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine Volume 2015, Article ID 620472, 14 pages http://dx.doi.org/10.1155/2015/620472

81. Mehta A, Srivastva G, Kachhwaha S, Sharma M, Kothari SL. Antimycobacterial activity of Citrullus colocynthis (L.) Schrad. against drug sensitive and drug resistant Mycobacterium tuberculosis and MOTT clinical isolates. J Ethnopharmacol. 2013. 26;149(1):195-200. doi: 10.1016/j.jep.2013.06.022. Epub 2013 Jun 29.

82. Singh R., Hussain S., Verma R., Sharma P. Anti-mycobacterial screening of five Indian medicinal plants and partial purification of active extracts of Cassia sophera and Urtica dioica // Asian Pac J Trop Med. 2013. No. 5. P. 366-371. DOI: 10.1016/S1995-7645(13)60040-1.

83. Fadipe VO, Mongalo NI, Opoku AR, Dikhoba PM,Makhafola TJ. Isolation of anti-mycobacterial compounds from Curtisia dentata (Burm.f.) C.A.Sm (Curtisiaceae) // BMC Complementary and Alternative Medicine. 2017. 17:306 DOI 10.1186/s12906-017-1818-9

84. Jiménez-Arellanes, A.; Luna-Herrera, J.; Cornejo-Garrido, J.; López-Garcia, S.; Castro-Mussot, M.E.; Meckes-Fisher, M.; Mata-Espinosa, D.; Marquina, B.; Torres, J.; Hernández-Pando, R. Ursolic and oleanolic acids as antimicrobial and immunomodulatory compounds for tuberculosis treatment // BMC Complement. Altern. Med. 2013, 13, 258-269.

85. Jiménez, A.; Meckes, M.; Alvarez, V.; Torres, J.; Parra, R. Secondary metabolites from Chamaedora tepejilote (Palmae) are active against Mycobacterium tuberculosis // Phytother. Res. 2005, 19, 320-322.

86. Woldemichael, G.M.; Franzblau, S.G.; Zhang, F.; Wang, Y.; Timmermann, B.N. Inhibitory effect of sterols from Ruprechtia triflora and diterpenes from Calceolaria pinnifolia on the growth of Mycobacterium tuberculosis // Planta Med. 2003, 69, 628631.

87. Мезенцева М.В., Стаханов В.А., Захарова М.В., Зотова И.Ф., Шаповал И.М., Трегубова М.И., Руссу Л.И. Перспективы иммунотерапии в комплексном лечении инфильтративного туберкулеза легких // Биопрепараты: профилактика, диагностика, лечение. 2011. №2(42). С. 20-25.

88. Маслов А.К., Назарова Г.Н., Сухенко Л.Т. Влияние экстракта из корня солодки на функциональную активность перитонеальных макрофагов мышей, зараженных внутрибрюшинно микобактериями туберкулеза //Вестник новых медицинских технологий. 2008. Т. XV. №4. С. 212-213.

89. López-García Sonia, Jorge Ismael Castañeda-Sanchez, Adelina Jiménez-Arellanes, Lilia Domínguez-López, Maria Eugenia Castro-Mussot, Javier Hernández-Sanchéz and Julieta Luna-Herrera. Macrophage Activation by Ursolic and Oleanolic Acids during Mycobacterial Infection // Molecules. 2015, 20, 14348-14364; doi: 10.3390/molecules200814348

90. Anand, P.K.; Kaul, D.; Sharma, M. Green tea polyphenol inhibits Mycobacterium tuberculosis survival within human macrophages // Int. J. Biochem. Cell Biol. 2006, 38, 600-609.

91. Guzman, J.D.; Evangelopoulos, D.; Gupta, A.; Birchall, K.; Mwaigwisya, S.; Saxty, B.; McHugh, T.D.; Gibbons, S.; Malkinson, J.; Bhakta, S. Antitubercular specific activity of ibuprofen and the other 2-arylpropanoic acids using the HT-SPOTi whole-cell phenotypic assay // BMJ Open 2013, 3, e002672-e002685.

92. Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация / под ред. В.Л. Багировой, В.А. Северцева. СПб.: СпецЛит, 2001. 223с.

93. Маслов А.К., Слепова С.Б. Возможность лечения экспериментальной лепры корнем хрена, содержащим пероксидазу в комплексе с галоидами // Вестник дерматологии и венерологии. - 2007. - №6. - С. 42-44.

94. Маслов А.К., Генатуллина Г.Н. Возможности применения препаратов из растений в комплексном лечении лепры // Естественные науки. 2013. - № 3 (44). -С. 096-100.

95. Патент №2362577. Экстракт солодки голой, обладающий противотуберкулезной активностью / Сухенко Л.Т., Урляпова Н.Г., Назарова Г.Н - № 2007118573/15, заявл. 18.05.2007, опубл. 27.07.2009 Бюл. № 21.

96. Пат. 2657423 Средство, обладающее противотуберкулезным действием Наволокин Н. А. и др. - № 2017113645, 19.04.2017, опубл. 13.06.2018 Бюл. № 17

97. Connell ND, Nikaido H: In Tuberculosis: Pathogenesis, Protection and Control. Edited by Bloom BR. Washington, D.C: ASM Press; 1994:333-352.

98. Jimenez-Arellanes A, Meckes M, Ramirez R, Torres J, Luna-Herrera J. Activity against multidrug-resistant Mycobacterium tuberculosis in Mexican plants used to treat respiratory diseases // Phytother Res. 2003 Sep;17(8):903-8.

99. Jiménez-Arellanes A, Meckes M, Torres J, Luna-Herrera J. Antimycobacterial triterpenoids from Lantana hispida (Verbenaceae). J Ethnopharmacol. 2007. 4;111(2):202-5.

100. Зилфикаров И.Н., Челомбитько В.А., Алиев А.М. Обработка лекарственного растительного сырья сжиженными газами и сверхкритическими флюидами. Пятигорск, 2007. 244 с.

101. Силинская С.М., Тазин А.А. Возможности развития бизнеса в области производства и применения СО2-экстрактов // Экономико-правовые аспекты реализации стратегии модернизации России: поиск модели эффективного социохозяйственного развития: сборник статей международной научно-практической конференции. - Сочи, 30 сентября-04 октября 2015 г. - С. 195-199.

102. Евсеева С.Б., Сысуев Б.Б. Экстракты растительного сырья как компоненты косметических и наружных лекарственных средств: ассортимент продукции, особенности получения (обзор) // Фармация и фармакология. - 2016. - С.4-36.

103. Касьянов Г.И., Мишкевич Э.Ю. Особенности экстракции ценных компонентов из эфиромасличного сырья сжиженным и сжатым диоксидом углерода // Научные труды КубГТУ, 2019. - №1. - С. 366-377.

104. Жунусова М.А., Кударинова А.К., Ахметова С.Б., Абдуллабекова Р.М., Кабиева С.К., Ибраев М.К. Антимикробная и противогрибковая активность CO2-экстрактов растений семейства Dipsacaceae // Фармация Казахстана - 2017. - №3.

- С. 23-25.

105. Цыдендамбаев П. Б., Балданова И. Р., Ерентуева А. Ю., Абидуева Л. Р., Дашинамжилов Ж. Б. Антибактериальные свойства экстрактов лекарственных растений Прибайкалья // Вестник бурятского государственного университета. Медицина и фармация. - 2018. - №3-4. - С. 99-102.

106. Антимикробные свойства СО2-экстракта боярышника // Электронный научно-образовательный вестник "Здоровье и образование в XXI веке" 2007. - Т. 9, №3. - С.91.

107. Демина Л.Н., Паршикова В.Н., Степень Р.А. Состав, свойства и биоцидная активность углекислотного экстракта из листьев Betula pendula Roth // Химия и химическая технология. - 2006. - Т. 49, вып. 1. -С. 75-78;

108. Никонович С.Н., Тимофеенко Т.И., Котельников Д.А., Лобода А.В. Антимикробные свойства СО2-экстрактов // Известия вузов. Пищевая технология.

- 2006. - № 6. - С. 27-29.

109. Сизова Н.В., Попова И.Ю. Содержание антиоксидантов в экстрактах растительного сырья, полученных методом сверхкритической экстракции // Химико-фармац. журн. - 2006. - Т.40, №4. - С. 29-33.

110. Лобанов В.Г., Щубко А.С. Жирнокислотный состав СО2-экстрактов лекарственных растений // Известия вузов. Пищевая технология. - 2007. - №3. - С. 23-24.

111. Сизова Н.В. Сравнение антиоксидантной активности пихтового масла и СО2-экстракта пихты, подсолнечного масла и СО2-экстракта семян подсолнечника // Химия растительного сырья. - 2004. - №3. - С. 99-102.

112. Зилфикаров И.Н., Агларова А.М. Сравнительный анализ эфирного масла и СО2-экстрактов полыни эстрагон // Фармация. - 2006. - С. 12-14;

113. Пелипенко Т.В. и др. Биологические активные вещества из СО2 экстрактов из растительного сырья // Известия вузов. Пищевая технология. - 1999. - №4. - С. 12-14.

114. Башкирова И.Б., Ларионов Л.П., Емельянова Л.А., Гайсина Е.Ф. Оценка содержания суммы флавоноидов и токоферолов в лекарственном сырье и продуктах на основе СО2-экстрактов розы коричной // Электронный научно-образовательный вестник "Здоровье и образование в XXI веке". 2006. - Т. 8, №2. -С. 75.

115. Алимова У.С., Дильбарханов Р.Д., Устенова Г.О., Кожанова К.К., Юдина Ю.В. Химический состав СО2-экстракта Plantago major L., полученного в докритических условиях // Фармация Казахстана. - 2016. - №9. - С. 38-40.

116. Куркин В.А. и др. Родиола розовая: комплексная переработка сырья // Фармация. - 2006. - №1. - С. 40-42.

117. Исследование экстракции масла из семян амаранта и измерение растворимости сквалена в сверхкритическом диоксиде углерода / Р.Н. Максудов, Е. Н. Тремасов, А. Е. Новиков, и др. // Вестник Казанского технол. ун-та. 2004. № 1-2. С. 172-176.

118. Алиев А.М., Зилфикаров И.Н., Степанов Г.В., Гусейнова З.А. Анализ экстрактов шалфея, полученных сверхкритической углекислотной экстракцией // Химия растительного сырья. - 2009. - №1. - С. 97-101.

119. Шишкина А.А. Разработка технологии получения сверхкритического СО2-экстракта бархатцев с высоким содержанием лютеина // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. 2012. №1. С. 164-165.

120. Тигунцева Н.П. Состав сверхкритического СО2-экстракта из надземной части одуванчика лекарственного // Известия вузов. Прикладная химия и биотехнология. - 2013. С.50-54.

121. Морозов Ю.А. Количественное определение суммы лигнанов в лимоннике китайского семян СО2-экстракте, полученном с применением ресурсосберегающей технологии Молодые учёные и фармация XXI века: сборник трудов шестой научной конференции студентов, аспирантов и молодых учёных: Москва, 14 декабря 2018 г.- М., 2018. - С. 188-192.

122. Группа компаний «Горо». Официальный сайт. URL: http://www.extract.ru/index.php?id=285

123. Сайт ООО «Биоцевтика». Экстракты. URL: http://www.biozevtika.ru/о-компании/

124. Сайт ООО «Грумант». Сверхкритические СО2 экстракты URL: http://www.grumextract.ru/hippocastanum.shtml

125. Земскова Ю.К., Лялина Е.В., Суминова Н.Б. Элементы технологии выращивания чабера огородного и лофанта анисового в Нижнем // Овощи России - 2012. - № 1 (14) - С. 41-43.

126. Ионова Л. П., Паршин С. А. Влияние агротехнических приемов на рост, развитие и продуктивность лофанта анисового в условиях Астраханской области // Аграрный вестник Урала. - 2012. - № 9 (101). - С. 49-51;

127. Докукин Ю.В., Савин А.П. Лофант анисовый - ценная медоносная культура для Рязанской области // Новое в науке и практике пчеловодства: сб.научных тр. -2009. - с. 116-119.

128. Чумакова В.В., Попова О.И., Чумакова В.В. Лофант анисовый -перспективная культура многопланового использования // Достижения науки и техники АПК. - 2013 - №10 - с. 36-38.

129. Duda Marcel M., Matei Cristina Firu|a, Varban Dan I., Muntean Sorin and Moldovan Cristina. The Results of Cultivating the Species Agastache foeniculum (Pursh) Kuntze at Jucu, CJ // Bulletin UASMV serie Agriculture 2013; 70(1): 214-217.

130. Ivanov Ivan G., Vrancheva Radka Z., Petkova Nadezhda T., Tumbarski Yulian, Dincheva Ivayla N., Badjakov Ilian K. Phytochemical compounds of anise hyssop (Agastache foeniculum) and antibacterial, antioxidant, and acetylcholinesterase inhibitory properties of its essential oil Journal of Applied Pharmaceutical Science. 2019; 9(02):072-078.

131. Marcel DM, Varban DI, Muntean S, Moldovan C, Olar M. Use of species Agastache foeniculum (Pursh) Kuntze. // Hop Med Plant, 2013; 2:41-2.

132. Charles DJ, Simon JE, Widrlechner MP. Characterization of essential oil of Agastache species. // J Agric Food Chem. -1991.- 39(11).-P.1946-1949.

133. Svoboda KP, Gough J, Hampson J. Analysis of the essential oils of some Agastache species grown in Scotland from various seed sources. // Flavour Fragr J 1995; 10:139-145.

134. Omidbaigi R, Mahmoodi M. Effect of irrigation regimes on the essential oil content and composition of Agastache foeniculum // J Essent Oil Bear Pl. 2010; 13(1):59-65.

135. Великородов А.В., Абделаал Х.А.А., Тырков А.Г., Фурсов В.Н. Выделение эфирного масла из лофанта анисового и изучение его химического состава // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. - 2009. - № 10 (60). - С. 66-71.

136. Mallavarapu GR, Kulkarni RN, Baskaran K, Ramesh S. The essential oil composition of anise hyssop grown in India // Flavour Fragr J. 2004; 19:351-3.

137. Omidbaigi R, Sefidkon F. Essential oil composition of Agastache foeniculum cultivated in Iran // J Essent Oil Res 2003; 15(1):52-53;

138. Zhekova G, Dzhurmanski A, Dobreva A. Gas-chromatography and organoleptic analysis of the essential oil of Agastache foeniculum (Pursh.) Kuntze // Agric Sci Technol. 2010; 2(2):102-4.

139. Воронкова О.С., Писарев Д.И., Новиков О.О., Тохтарь В.К., Казакова В.С., Яковлева Е.Г. Изучение флавоноидного состава травы лофанта анисового // Научные ведомости БелГУ. Серия Медицина. Фармация. - 2011. - № 4 (99), Вып. 13/2. - С.186-189;

140. Еремеева Е.Н., Маланкина Е.Л. Особенности накопления флавоноидов в сырье лекарственных растений из семейства яснотковые // Биологические особенности лекарственных и ароматических растений и их роль в медицине, М. 2016. - С. 379-381;

141. Писарев Д.И., Новиков О.О., Воронкова О.С., Писарева Н.А. Способ выделения и идентификации тилианина // Научные ведомости БелГУ. Серия Медицина. Фармация. - 2011. -№ 22 (117). Вып. 16/2. -С. 176-181)

142. Charles D. J., Simon James Edward, Widrlechner Mark P. Major essential oil constituents of Agastache spp. // Вю^. 1992 D0I:10.17660/actahortic.1992.306.42

143. Hashemi M, Ehsani A, Hassani A, Afshari A, Aminzare M, Sahranavard T, Azimzadeh Z. Phytochemical, antibacterial, antifungal and antioxidant properties of Agastache foeniculum essential oil // JCHR. 2017; 7(2):95-104.

144. Коновалова Е.Ю., Гуртовенко И.А., Шураева Т.К, Меньшова В.А., Омельковец Т. С. Качественный состав летучих соединений Agastache foeniculum в онтогенезе // Рецепт. - 2017.- Т. 20, № 6. - С. 544-550.

145. Suchorska-Tropilo K, Pioro-Jabrucka E. Morphological, developmental and chemical analysis of the chosen Agastache species // Ann Warsaw Univ Life Sci SGGW Horticult Landsc Architect 2004; 25:2531.

146. Janicsak G, Mathe I, Mikklosy-Vari V et al Comparative studies of the rosmarinic and caffeic acid contents of Lamiaceae species // Biochem Syst Ecol 1999; 27:733-738.

147. Ganeva Y, Tsankova E, Parvanova K et al. Triterpenoids from Agastache foeniculum. // Chimie. 1994; 47:49-51

148. Chae SC, Lee SW, Kim JK et al. Variation of carotenoid content in Agastache rugosa and Agastache foeniculum // Asian J Chem 2013; 25(8):4364-4366

149. Ownagh A, Hasani A, Mardani K et al Antifungal fects of Thyme, Agastache and Satureja essential oils on Aspergillus fumigates, Aspergillus flavus, and Fusarium solani // Vet Res Forum 2010;1(2):99-105

150. Sylwia Zielinska, Adam Matkowski Phytochemistry and bioactivity of aromatic and medicinal plants from the genus Agastache (Lamiaceae) Phytochem Rev.2014; 13:391-416 DOI 10.1007/s11101-014-9349-1

151. Чумакова В.В., Мезенцева Т.Д., Попова О.И. Определение галловой кислоты в траве лофанта анисового // Химия растительного сырья. 2011. № 4. С. 269 - 271.

152. Чумакова В.В., Попова О.И., А.Б. Дмитриев, Т.Д. Мезенова Тритерпеновые кислоты в траве лофанта анисового // Фармация - 2013. - №4. - С. 19-20.

153. Ganeva Y, Tsankova E, Parvanova K et al. Triterpenoids from Agastache foeniculum. // Chimie. 1994; 47:49-51

154. Ownagh A, Hasani A, Mardani K et al Antifungal fects of Thyme, Agastache and Satureja essential oils on Aspergillus fumigates, Aspergillus flavus, and Fusarium solani // Vet Res Forum 2010;1(2):99-105

155. Великородов А.В., Ковалев В.Б., Тырков А.Г., Дегтярев О.В. Изучение химического состава и противогрибковой активности эфирного масла Lophantus anisatum Benth. // Химия растительного сырья. - 2010.- №2. - С. 143-146.

156. Махомед Ахмед Абдельрахим, Ковалев В. Б., Носачев С.Б., Сухенко Л. Т. Сравнительная оценка антимикробной активности эфирных масел, выделенных из некоторых растений Астраханской области и синтетических соединений гетероциклического и ароматического ряда // Естественные науки. - 2012. - №3. -С. 175-185.

157. Хлебцова Е.Б., Иглина Э., Сорокина А.А., Гражданцева Н.Н. Флавоноиды лофанта анисового: психотропная и иммуномодулирующая активность// Фармация. - 2014. - №1, - С. 39-41.

158. Хлебцова Е.Б., Сорокина А.А. Иммуномодулирующее действие лофанта анисового // Фармация. - 2014. - №4. - С. 45-48.

159. Иглина Э.М., Самотруева М.А., Тырков А.Г., Хлебцова Е.Б., Магомедов М.М. // Журнал научных статей «Здоровье и образование в XXI веке» - 2012 - Т. 14 №4, -С. 418.

160. Патент 2491949 Способ получения иммунотропного средства как основы для препарата "иммунофлан" / Тырков А. Г., Самотруева М. А., Прилучный С. В., Иглина Э. М., Хлебцова Е. Б. - 2011144608/15, заявл. 02.11.2011, опубл. 10.09.2013 Бюл. № 25

161. Хлебцова Е.Б., Сорокина А.А., Сережникова Т.К., Турченков С.С. Лофант анисовый в комплексной терапии заболеваний легких // Фармация. - 2017. - Т. 66, №8.- с. 45-48.

162. Чумакова, В.В. Фармакогностическое изучение лофанта анисового (Agastache foeniculum (Pursh.) O. Kuntze) сем. Яснотковые (Lamiaceae): дис. ... канд.фармац.наук: 14.04.02/Чумакова Вероника Валерьевна - Пятигорск, 2013 -152 с.

163. Государственная фармакопея РФ XIV издания. Минздрав РФ [Офиц.сайт]. URL: http: //www. http://femb .ru/femb/pharmacopea.php. Москва, 2018.

164. Беликов, В.В. Реакции комплексообразования в анализе флавоноидов / В.В. Беликов, Т.В. Точкова // Фенольные соединения и их физиологические свойства.-Алма-Ата, 1973.-С.168-172.

165. Н.А. Буркина, Г.И. Калинкина, Л.В. Фоминых, Л.В. Курдюкова, Исследование аминокислотного состава сфагнума бурого. Химия растительного сырья. 2000. №1. С. 81-83.

166. Позднякова, Т.А. Изучение тритерпеновых сапонинов астрагала белостебельного (Astragalus albicaulis Д.С.)/ Т.А. Позднякова, Р.А. Бубенчиков // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии.-2016.-т.19.-№12.-С.24-27.

167. Навашин С.М., Фомин И.П. Справочник по антибиотикам. - М.:Медицина, 1974, С. 54.

168. Всемирная организация здравоохранения, Vandepitte, J, Engbaek, Kraesten, Piot, Peter&Heuck, Claus C. Основные методы лабораторных исследований в клинической бактериологии (1994).

169. Иртуганова, О.А. Использование M.lufu для первичного отбора противолепрозных препаратов / О.А. Иртуганова, Н.Г. Урляпова // В кн.: Актуальные вопросы лепрологии. - Астрахань, 1984. - С.147-150.

170. Shepard C. C. The experimental disease that follows the injection of human leprosy bacilli into footpads of mice / C. C. Shepard // J. Exp. Med. - 1960. - Vol. 112. - p. 445-454.

171. ГОСТ 33044-2014 Принципы надлежащей лабораторной практики, ГОСТ от 20 ноября 2014 года №33044-2014.

172. Directive/2004/9/EC of the European parliament and of the council of 11 February 2004 on the inspection and verification of good laboratory practice (GLP) // Official J. of the Europ.Union - 2004. - № EU 2004/9/EC. - P. 29-43.

173. Levi L. Activity оf derivatives and analogs of dapsone against Micobacterium leprae. Antimicrobial Agent Chemother. 1978,14:791 -793

174. Кузнецова, М. А., Лекарственное растительное сырье и препараты 2-е изд., перераб. и доп. М.: Высш. шк., 1987.

175. Гринкевич Н.И., Сафронич Л.Н., Химический анализ лекарственных растений. М., 1987. С. 190

176. Куркина А.В., Калабухова Е.А., Власова Г.И., Демидова Г.А., Авдеева Е.В. Возможности применения метода вэжх для стандартизации цветков пижмы обыкновенной (tanacetum vulgare l.) // Современные проблемы науки и образования. - 2013. - № 5.

177. В. Могилюк, А. Добровольный, Технологии: сверхкритическая флюидная экстракция, «Фармацевтическая отрасль» февраль №1(48) 2015, С. 62-68

178. Коничев А.С., Баурин П.В. Традиционные и современные методы экстракции биологически активных веществ из растительного сырья: перспективы, достоинства, недостатки. 30-06-2011 Вестник МГОУ. Естественные науки Журнал, Москва

179. Т.П. Жузе, Роль сжатых газов как растворителей. Москва: Недра, 1981, С.161

180. А.А. Пичугин, В.В. Тарасов, Суперкритическая экстракция и перспективы создания новых бессточных процессов. Успехи химии. 1991, Т. 60, 11, С. 2412 -2421

181. Попова И.Ю., Водяник А.Р. «О растворяющей способности сверхкритического углекислого газа.» Рынок БАД. 2003, Т. 11, 3, С. 30-33

182. York P., Kompella U., Shekunov B.Y., [ed]. Supercritical-fluid technology for drug product development. New York, Basel: Marcel Dekker, Inc., 2004. Pp.44-53, 504.

183. Чумакова В.В. и др. Изучение фенольных соединений травы лофанта анисового/Чумакова В.В. и др. // Фармация. 2011. №3. С. 20-22.

184. https://www.dissercat.com/content/standartizatsiya-lekarstvennogo-rastitelnogo-syrya-i-rastitelnykh-sborov-metodami-iono-ekskl/read

185. Садек П. Растворители для ВЭЖХ [текст] / П. Садек; пер с анг. А.А. Горбатенко и Е.И. Ревина, науч. ред. И.С. Беленькая. - Бином. Лаборатория знаний, 2017. - 704 с.

186. Шульга И.М., Безроднова С.М. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у детей, подростков с недостаточностью питания и больных туберкулёзом. Наука и мир, 1 (5), 2014, 355-358, "Издательство "Научное обозрение"

187. Кучерявый Ю.А. Гепатопротекторы: рациональные аспекты применения: учеб. пособие для врачей / Ю.А. Кучерявый, С.В. Морозов.-М.: Форте Принт, 2012. - 36 с.

188. Грин Н. Биология: В 3-х Т. / Н. Грин, У. Стаут, Д. Тейлор: Пер. с англ. Е.Р. Наумовой, М.С. Морозовой, О.В. Протасовой. - М.: Мир, 1996. - Т. 1. - 368 с.

189. Нефедов Л.И. Результаты и перспективы применения аминокислот и их производных в качестве универсальных природных регуляторов обмена веществ и новых лекарственных препаратов // Медицинские новости. - 2000.-№7.- С.9-13.

190. Ивашев М.Н., Чуклин Р.Е. Влияние оксикоричных кислот на систему мозгового кровообращения. Фармация и фармакология. 2013. №1 С. 44-48.

191. В.А. Чхенкели, Н.А. Шкиль, Противотуберкулезная активность базидиомицета coriolus pubescens (shum.:fr.) Quel. и препарата, получаемого на его основе, Сибирский медицинский журнал, Т. 50, №1, 2005, С. 67-70

192. Барнаулов О.Д. Фитотерапия больных бронхолегочными заболеваниями. -СПб.: Изд-во Н-Л, 2008. - 304 с.

193. Свечкарь В.П., Буданова Н.А, Григорьева И.В., Пирогова И.М. Использование валидации в фармацевтической практике на примере определения примесей в спирте этиловом // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2015. - № 7-2. - С. 263-267; URL: https://applied-research.ru/ru/article/view?id=7006 (дата обращения: 25.08.2020).

194. Guidelines for standard method performance requirements. URL: http://www.eoma.aoac.org/app_f. pdf (дата обращения 28.08.2020).

195. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств / под ред. А. Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012.- 944 с.

ПРИЛОЖЕНИЯ

Таблица 1 - Результаты определения соответствия лофанта анисового экстракта листьев сухого требованиям проекта НД в условиях естественного хранения № 001 Упаковка: флаконы темного стекла с пластиковыми пробками с навинчивающимися крышками. Температура: 25оС. Дата начала анализа: 28.08.2016 г. (серия 1)

Показатели Нормы Результаты анализа

кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый 28.11.2016 28.02.2017 28.05.2017 28.08.2017 28.02.2018 28.08.2018

Описание кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый

Потеря в массе при высушивании Не более 5,0 % 2,06% 2,06% 2,06% 2,06% 2,06% 2,06%

Степень сыпучести порошков 6,84 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с

Тяжелые металлы не более 0,01% 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732

Растворимость Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в спирте Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало

96%, очень мало 96%, очень мало растворим в растворим в этиловом 70%, и 40% 96%, очень мало растворим в

растворим в растворим в спирте этиловом спирте этиловом растворим в спирте этиловом

спирте этиловом спирте этиловом 70%, и 40% 70%, и 40% спирте этиловом 70%, и 40%

70%, и 40% 70%, и 40% 70%, и 40%

Подлинность

На На На хроматограмме На хроматограмме На хроматограмме На На

Флавоноиды хроматограмме хроматограмме испытуемого испытуемого испытуемого хроматограмме хроматограмме

испытуемого испытуемого раствора раствора раствора испытуемого испытуемого

раствора должны раствора обнаруживаются обнаруживаются обнаруживаются раствора раствора

ТСХ обнаруживаться обнаруживаются зоны адсорбции зоны адсорбции зоны адсорбции на обнаруживаются обнаруживаются

зоны адсорбции зоны адсорбции на уровне зон на уровне зон уровне зон зоны адсорбции зоны адсорбции

на уровне зон на уровне зон адсорбции СО адсорбции СО адсорбции СО на уровне зон на уровне зон

адсорбции СО адсорбции СО лютеолина, лютеолина, лютеолина, адсорбции СО адсорбции СО

лютеолина, лютеолина, кверцетина, кверцетина, кверцетина, рутина, лютеолина, лютеолина,

кверцетина, кверцетина, рутина, кофейной рутина, кофейной кофейной кислоты, кверцетина, кверцетина,

рутина, рутина, кислоты, кислоты, обнаружены другие рутина, рутина, кофейной

кофейной кофейной обнаружены обнаружены зоны адсорбции. кофейной кислоты,

кислоты, кислоты, другие зоны другие зоны кислоты, обнаружены

допускается обнаружены адсорбции. адсорбции. обнаружены другие зоны

обнаружение другие зоны другие зоны адсорбции.

других зон адсорбции. адсорбции.

СФМ адсорбции.

Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают

максимум максимум максимум максимум максимум максимум Наблюдают

светопоглощения светопоглощени светопоглощения светопоглощения светопоглощения светопоглощени максимум

комплекса я комплекса комплекса комплекса комплекса я комплекса светопоглощения

полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных комплекса

соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с полифенольных

раствором раствором раствором раствором раствором алюминия раствором соединений с

алюминия алюминия алюминия алюминия хлорида 5% в алюминия раствором

хлорида 5% в хлорида 5% в хлорида 5% в хлорида 5% в области 388 ± 2нм хлорида 5% в алюминия

области 390 ± 2нм области 388 ± 2нм области 388 ± 2нм области 388 ± 2нм области 388 ± 2нм хлорида 5% в области 388 ± 2нм

Тритерпеновые На На На хроматограмме На хроматограмме На хроматограмме На На

соединения хроматограмме хроматограмме обнаруживаются обнаруживаются обнаруживаются хроматограмме хроматограмме

должна обнаруживается зоны адсорбции зоны адсорбции зоны адсорбции обнаруживаются обнаруживаются

ТСХ обнаруживаться зона адсорбции светло-розового светло-розового светло-розового зоны адсорбции зоны адсорбции

зона адсорбции светло-розового цвета после цвета после цвета после светло-розового светло-розового

светло-розового цвета после обработки обработки обработки цвета после цвета после

цвета после обработки фосфорновольфра фосфорновольфра фосфорновольфрамо обработки обработки

обработки фосфорновольфр мовой кислотой со мовой кислотой со вой кислотой со фосфорновольфр фосфорновольфра

фосфорновольфр амовой кислотой значением значением значением Rf=0,58, амовой кислотой мовой кислотой

амовой кислотой со значением Rf=0,58, что Rf=0,58, что что соответствует со значением со значением

со значением &=0,58, что соответствует соответствует урсоловой кислоте. Rf=0,58, что Rf=0,58, что

&=0,58, что соответствует урсоловой урсоловой Обнаружена другая соответствует соответствует

соответствует урсоловой кислоте. кислоте. зона адсорбции. урсоловой урсоловой

урсоловой кислоте. Обнаружена Обнаружена кислоте. кислоте.

кислоте. Обнаружена другая зона другая зона Обнаружена Обнаружена

Допускается другая зона адсорбции. адсорбции. другая зона другая зона

обнаружение адсорбции. адсорбции. адсорбции.

другой зоны

адсорбции.

СФМ

Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают

максимум максимум максимум максимум максимум максимум максимум

светопоглощения светопоглощени светопоглощения светопоглощения светопоглощения светопоглощени светопоглощения

комплекса я комплекса комплекса комплекса комплекса я комплекса комплекса

тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых

соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с

концентрированн концентрирован концентрированно концентрированно концентрированной концентрирован концентрированн

ой кислотой ной кислотой й кислотой серной й кислотой серной кислотой серной в ной кислотой ой кислотой

серной в области серной в области в области 309 ± в области 309 ± области 309 ± 2нм серной в области серной в области

310±2нм 309 ± 2нм 2нм 2нм 309 ± 2нм 309 ± 2нм

Количественное определение

Флавоноиды не менее 58,0% 58,98% 58,98% 58,98% 58,98% 58,98% 52,20%

СФМ

ВЭЖХ не менее 47,0% 47,27% 47,27% 47,27% 47,27% 47,27% 40,19%

Тритерпеновые соединения СФМ не менее 4,0% 4,76% 4,76% 4,76% 4,76% 4,76% 2,51%

Таблица 2 - Результаты определения соответствия лофанта анисового экстракта листьев сухого требованиям проекта НД в условиях естественного хранения№002 Упаковка: флаконы темного стекла с пластиковыми пробками с

навинчивающимися крышками. _Температура: 25°С. Дата начала анализа: 28.08.2016 г. (серия 2)_

Показатели Нормы Результаты анализа

Описание кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый 28.11.2016 28.02.2017 28.05.2017 28.08.2017 28.02.2018 28.08.2018

кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый

Потеря в массе при высушивании Не более 5,0 % 2,06% 2,06% 2,06% 2,06% 2,06% 2,06%

Степень сыпучести порошков 6,84 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с

Тяжелые металлы не более 0,01% 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732

Растворимость Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в спирте этиловом Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в спирте этиловом Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в спирте этиловом 70%, и 40% Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в спирте этиловом

спирте этиловом спирте этиловом 70%, и 40% 70%, и 40% спирте этиловом 70%, и 40%

70%, и 40% 70%, и 40% 70%, и 40%

Подлинность

Флавоноиды На На На хроматограмме На хроматограмме На хроматограмме На На

хроматограмме хроматограмме испытуемого испытуемого испытуемого хроматограмме хроматограмме

испытуемого испытуемого раствора раствора раствора испытуемого испытуемого

раствора должны раствора обнаруживаются обнаруживаются обнаруживаются раствора раствора

ТСХ обнаруживаться обнаруживаются зоны адсорбции зоны адсорбции зоны адсорбции на обнаруживаются обнаруживаются

зоны адсорбции зоны адсорбции на уровне зон на уровне зон уровне зон зоны адсорбции зоны адсорбции

на уровне зон на уровне зон адсорбции СО адсорбции СО адсорбции СО на уровне зон на уровне зон

адсорбции СО адсорбции СО лютеолина, лютеолина, лютеолина, адсорбции СО адсорбции СО

лютеолина, лютеолина, кверцетина, кверцетина, кверцетина, рутина, лютеолина, лютеолина,

кверцетина, кверцетина, рутина, кофейной рутина, кофейной кофейной кислоты, кверцетина, кверцетина,

рутина, рутина, кислоты, кислоты, обнаружены другие рутина, рутина, кофейной

кофейной кофейной обнаружены обнаружены зоны адсорбции. кофейной кислоты,

кислоты, кислоты, другие зоны другие зоны кислоты, обнаружены

допускается обнаружены адсорбции. адсорбции. обнаружены другие зоны

обнаружение другие зоны другие зоны адсорбции.

других зон адсорбции. адсорбции.

адсорбции.

СФМ Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают

максимум максимум максимум максимум максимум максимум Наблюдают

светопоглощения светопоглощени светопоглощения светопоглощения светопоглощения светопоглощени максимум

комплекса я комплекса комплекса комплекса комплекса я комплекса светопоглощения

полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных комплекса

соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с полифенольных

раствором раствором раствором раствором раствором алюминия раствором соединений с

алюминия алюминия алюминия алюминия хлорида 5% в алюминия раствором

хлорида 5% в хлорида 5% в хлорида 5% в хлорида 5% в области 388 ± 2нм хлорида 5% в алюминия

области 390 ± области 388 ± области 388 ± 2нм области 388 ± 2нм области 388 ± хлорида 5% в

2нм 2нм 2нм области 388 ± 2нм

Тритерпеновые На На На хроматограмме На хроматограмме На хроматограмме На На

соединения хроматограмме хроматограмме обнаруживается обнаруживается обнаруживается зона хроматограмме хроматограмме

должна обнаруживается зона адсорбции зона адсорбции адсорбции светло- обнаруживается обнаруживается

ТСХ обнаруживаться зона адсорбции светло-розового светло-розового розового цвета после зона адсорбции зона адсорбции

зона адсорбции светло-розового цвета после цвета после обработки светло-розового светло-розового

светло-розового цвета после обработки обработки фосфорновольфрамо цвета после цвета после

цвета после обработки фосфорновольфра фосфорновольфра вой кислотой со обработки обработки

обработки фосфорновольфр мовой кислотой со мовой кислотой со значением Rf=0,58, фосфорновольфр фосфорновольфра

фосфорновольфр амовой кислотой значением значением что соответствует амовой кислотой мовой кислотой

амовой кислотой со значением Rf=0,58, что Rf=0,58, что урсоловой кислоте. со значением со значением

со значением &=0,58, что соответствует соответствует Обнаружена другая Rf=0,58, что Rf=0,58, что

&=0,58, что соответствует урсоловой урсоловой зона адсорбции. соответствует соответствует

соответствует урсоловой кислоте. кислоте. урсоловой урсоловой

урсоловой кислоте. Обнаружена Обнаружена кислоте. кислоте.

кислоте. Обнаружена другая зона другая зона Обнаружена Обнаружена

Допускается другая зона адсорбции. адсорбции. другая зона другая зона

обнаружение адсорбции. адсорбции. адсорбции.

другой зоны

адсорбции.

СФМ

Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают

максимум максимум максимум максимум максимум Наблюдают Наблюдают

светопоглощения светопоглощени светопоглощения светопоглощения светопоглощения максимум максимум

комплекса я комплекса комплекса комплекса комплекса светопоглощени светопоглощения

тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых тритерпеновых я комплекса комплекса

соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с тритерпеновых тритерпеновых

концентрированн концентрирован концентрированно концентрированно концентрированной соединений с соединений с

ой кислотой ной кислотой й кислотой серной й кислотой серной кислотой серной в концентрирован концентрированн

серной в области серной в области в области 309 ± в области 309 ± области 309 ± 2нм ной кислотой ой кислотой

310±2нм 309 ± 2нм 2нм 2нм серной в области серной в области

309 ± 2нм 309 ± 2нм

Количественное определение

Флавоноиды

СФМ не менее 58,0% 58,98% 58,98% 58,98% 58,98% 58,98% 50,11%

ВЭЖХ не менее 47,0% 47,27% 47,27% 47,27% 47,27% 47,27% 41,72%

Тритерпеновые

соединения не менее 4,0% 4,76% 4,76% 4,76% 4,76% 4,76% 2,97 %

СФМ

Таблица 3 - Результаты определения соответствия лофанта анисового экстракта листьев сухого требованиям проекта НД в условиях естественного хранения№003 Упаковка: флаконы темного стекла с пластиковыми пробками с

навинчивающимися крышками. Температура: 25°С. Дата начала анализа: 28.08.2016 г. (серия 3)

Показатели Нормы Результаты анализа

Описание кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый 28.11.2016 28.02.2017 28.05.2017 28.08.2017 28.02.2018 28.08.2018

кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый кристаллический порошок темно-коричневого цвета, запах специфический вкус кисловатый

Потеря в массе при высушивании Не более 5,0 % 2,06% 2,06% 2,06% 2,06% 2,06% 2,06%

Степень сыпучести порошков 6,84 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с 6,76 г/с

Тяжелые металлы не более 0,01% 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732 0,00732

Растворимость Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в спирте этиловом 70%, и 40% Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало Легко растворим в эфире, практически не растворим в воде, мало растворим в спирте этиловом 96%, очень мало растворим в

растворим в растворим в спирте этиловом спирте этиловом растворим в спирте этиловом

спирте этиловом спирте этиловом 70%, и 40% 70%, и 40% спирте этиловом 70%, и 40%

70%, и 40% 70%, и 40% 70%, и 40%

Подлинность

Флавоноиды На На На хроматограмме На хроматограмме На хроматограмме На На

хроматограмме хроматограмме испытуемого испытуемого испытуемого хроматограмме хроматограмме

испытуемого испытуемого раствора раствора раствора испытуемого испытуемого

раствора должны раствора обнаруживаются обнаруживаются обнаруживаются раствора раствора

ТСХ обнаруживаться обнаруживаются зоны адсорбции зоны адсорбции зоны адсорбции на обнаруживаются обнаруживаются

зоны адсорбции зоны адсорбции на уровне зон на уровне зон уровне зон зоны адсорбции зоны адсорбции

на уровне зон на уровне зон адсорбции СО адсорбции СО адсорбции СО на уровне зон на уровне зон

адсорбции СО адсорбции СО лютеолина, лютеолина, лютеолина, адсорбции СО адсорбции СО

лютеолина, лютеолина, кверцетина, кверцетина, кверцетина, рутина, лютеолина, лютеолина,

кверцетина, кверцетина, рутина, кофейной рутина, кофейной кофейной кислоты, кверцетина, кверцетина,

рутина, рутина, кислоты, кислоты, обнаружены другие рутина, рутина, кофейной

кофейной кофейной обнаружены обнаружены зоны адсорбции. кофейной кислоты,

кислоты, кислоты, другие зоны другие зоны кислоты, обнаружены

допускается обнаружены адсорбции. адсорбции. обнаружены другие зоны

обнаружение другие зоны другие зоны адсорбции.

других зон адсорбции. адсорбции.

адсорбции.

СФМ Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают Наблюдают

максимум максимум максимум максимум максимум максимум Наблюдают

светопоглощения светопоглощени светопоглощения светопоглощения светопоглощения светопоглощени максимум

комплекса я комплекса комплекса комплекса комплекса я комплекса светопоглощения

полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных полифенольных комплекса

соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с соединений с полифенольных

раствором раствором раствором раствором раствором алюминия раствором соединений с

алюминия алюминия алюминия алюминия хлорида 5% в алюминия раствором

хлорида 5% в хлорида 5% в хлорида 5% в хлорида 5% в области 388 ± 2нм хлорида 5% в алюминия

области 390 ± области 388 ± области 388 ± 2нм области 388 ± 2нм области 388 ± хлорида 5% в

2нм 2нм 2нм области 388 ± 2нм

Тритерпеновые На На На хроматограмме На хроматограмме На хроматограмме На На

соединения хроматограмме хроматограмме обнаруживается обнаруживается обнаруживается зона хроматограмме хроматограмме

должна обнаруживается зона адсорбции зона адсорбции адсорбции светло- обнаруживается обнаруживается

ТСХ обнаруживаться зона адсорбции светло-розового светло-розового розового цвета после зона адсорбции зона адсорбции

зона адсорбции светло-розового цвета после цвета после обработки светло-розового светло-розового

светло-розового цвета после обработки обработки фосфорновольфрамо цвета после цвета после