Разработка методик анализа и изучение стабильности холина альфосцерата и мельдония в растворе для инъекций тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Мудрецова, Юлия Викторовна

• Мудрецова, Юлия Викторовна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Мудрецова, Юлия Викторовна

Оглавление

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА, ПРИМЕНЕНИЕ И СПОСОБЫ АНАЛИЗА МЕЛЬДОНИЯ И ХОЛИНА АЛЬФОСЦЕРАТА

1.1 Применение холина альфосцерата и мельдония в терапии острых и хронических нарушений мозгового кровообращения

1.2 Четвертичные аммониевые основания. Общая характеристика и физико-химические свойства

1.3 Методы анализа четвертичных аммониевых оснований

1.4 Цвиттер-ионы. Общая характеристика и физико-химические свойства

1.5 Методы анализа мельдония и холина альфосцерата

1.5.1 Метод масс-спектрометрии. Общая характеристика и способы ионизации

1.5.2 Метод капиллярного электрофореза

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1

ГЛАВА 2. РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА КОМПЛЕКСНОГО ЛЕКАРСТВЕННОГО ПРЕПАРАТА МЕЛЬДОНИЯ И ХОЛИНА АЛЬФОСЦЕРАТА

2.1 Выбор условий для качественного анализа мельдония и холина альфосцерата методом капиллярного электрофореза при их совместном присутствии в пробе

2.1.1 Выбор ведущего электролита, обеспечивающего оптимальную электрофоретическую подвижность анализируемых веществ

2.2 Выбор условий анализа мельдония и холина альфосцерата методом мицеллярной электрокинетической хроматографии при их совместном присутствии в пробе

2.2.1 Выбор концентрации ПАВ

2.2.2 Выбор концентрации ведущего электролита и величины прикладываемого напряжения

2.3 Электрофоретическое поведение холина альфосцерата и мельдония в условиях косвенного детектирования

2.3.1 Выбор оптимального хромофора

2.3.2 Выбор оптимальной концентрации хромофора

2.4 Методика количественного определения мельдония и холина альфосцерата методом мицеллярной электрокинетической хроматографии с косвенным

детектированием

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2

ГЛАВА 3. ВАЛИДАЦИОННАЯ ОЦЕНКА МЕТОДИКИ АНАЛИЗА МЕЛЬДОНИЯ И ХОЛИНА АЛЬФОСЦЕРАТА МЕТОДОМ КАПИЛЛЯРНОГО ЭЛЕКТРОФОРЕЗА

3.1 Определение специфичности методики

3.2 Определение линейности методики

3.3 Определение прецизионности методики

3.4 Определение правильности методики

3.5 Определение диапазона применения методики

3.6 Определение стабильности показателей правильности и прецизионности методики анализа мельдония и холина альфосцерата с использованием карт

Шухарта

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3

ГЛАВА 4. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОСТОРОННИХ ПРИМЕСЕЙ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕКАРСТВЕННОМ ПРЕПАРАТЕ МЕЛЬДОНИЯ И ХОЛИНА АЛЬФОСЦЕРАТА

4.1 Разработка методики определения мельдония и холина альфосцерата методом хроматографии в тонком слое сорбента

4.2 Методика определения подлинности мельдония и холина альфосцерата методом ТСХ в растворе для инъекций

4.3 Изучение стабильности мельдония и холина альфосцерата

4.3.1 Изучение стабильности мельдония и холина альфосцерата в нейтральных условиях

4.3.2 Изучение устойчивости мельдония и холина альфосцерата к окислению

4.3.3 Изучение стабильности мельдония и холина альфосцерата в условиях кислотного гидролиза

4.4 Методика определения посторонних примесей мельдония и холина альфосцерата в растворе для инъекций методом ТСХ

4.5 Изучение процесса деструкции мельдония

4.6 Изучение процесса деструкции холина альфосцерата

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 4

ГЛАВА 5. СТАНДАРТИЗАЦИЯ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ ХОЛИНА АЛЬФООСЦЕРАТА И МЕЛЬДОНИЯ

5.1 Описание препарата на основе мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.2 Подлинность препарата на основе мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.3 Прозрачность препарата на основе мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.4 Цветность препарата на основе мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.5 Определение рН препарата на основе мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.6 Определение механических включений в препарате на основе мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.7 Определение номинального объема в комплексном препарате мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.8 Испытание на определение посторонних примесей в комплексном препарате мельдония и холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

5.9 Количественное определение мельдония и холина альфосцерата в комплексном препарате на их основе в форме раствора для инъекций

м ' Л1'«-'

5.10 Определение срока годности комплексного препарата на основе мельдония и

холина альфосцерата в форме раствора для инъекций

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 5

ГЛАВА 6. ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА НА ОСНОВЕ МЕЛЬДОНИЯ И ХОЛИНА АЛЬФОСЦЕРАТА

6.1 Изучение ноотропного и нейропротекгорного действия комплексного препарата мельдония и холина альфосцерата

6.2 Изучение влияния комплексного препарата мельдония и холина альфосцерата

на формирование алкогольной зависимости

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 6

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка методик анализа и изучение стабильности холина альфосцерата и мельдония в растворе для инъекций»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы: В последние годы отмечается рост распространенности сосудистых заболеваний, в т.ч. острых нарушений мозгового кровообращения. К их числу в первую очередь можно отнести инсульт, определяющий более 30% всех случаев смерти от сердечно-сосудистых заболеваний и занимающий первое место среди причин стойкой утраты трудоспособности и инвалидизации населения.

Таким образом, борьба с цереброваскулярными заболеваниями, их профилактика, лечение и трудовая реабилитация, является проблемой чрезвычайной медицинской и социальной значимости.

В настоящее время для профилактики и лечения нарушений мозгового кровообращения широко используются ноотропные средства с различным механизмом действия. К таковым относятся препараты холина альфосцерата, являющиеся наиболее эффективными в терапии острого и хронического инсульта.

Кроме того, в медицинской практике для терапии данного заболевания применяют препараты мельдония, которые улучшают метаболические процессы при острых и хронических нарушениях мозгового кровообращения.

В России зарегистрированы лекарственные препараты холина альфосцерата «Холитилин» (производитель ООО «ФерментФирма»), «Церепро» (производитель ОАО «Верофарм») и «Церетон» (производитель ЗАО «Сотекс ФармФирма»). Мельдоний же в отечественной промышленности выпускается в виде препаратов «Мельдоний» производства ОАО «Фармстандарт-Уфимский витаминный завод» и «Милдронат» (производитель ЗАО «Сотекс ФармФирма»),

Оба вещества довольно близки по структуре (относятся к четвертичным аммониевым основаниям и являются цвиттер-ионами), но проявляют различный механизм действия: холина альфосцерат является ноотропным средством, в то время как мельдоний представляет собой средство, улучшающее метаболизм.

В литературе имеются данные о совместном применении препаратов мельдония и холина альфосцерата в терапии острых и хронических нарушений

* * 1

■?<! > '

мозгового кровообращения, поскольку, проявляя различную фармакологическую активность, они способны дополнять и потенцировать действие друг друга [1]. При этом особое значение имеют инъекционные лекарственные формы, поскольку достигается 100% биодоступность, что особенно важно в терапии острых состояний указанных патологий.

Таким образом, разработка фармацевтической композиции мельдония и холина альфосцерата и создание нового комбинированного лекарственного препарата в виде раствора для инъекций на ее основе, является актуальной задачей.

Для производства комплексного препарата на основе холина альфосцерата и мельдония помимо решения технологических вопросов необходима также разработка надежных методов оценки его качества.

В связи с тем, что методики анализа исследуемых веществ разнообразны, необходимо использование универсальных методов, позволяющих вести анализ обоих веществ в одной пробе.

В анализе данных веществ используются различные методы. Например, для количественного определения мельдония, как в субстанции, так и в лекарственных препаратах, применяют метод неводного титрования. Однако анализ комбинированного лекарственного препарата данным методом практически невозможен.

Поскольку мельдоний и холина альфосцерат не имеют в своей структуре хромофорных групп, их детектирование в УФ-области спектра невозможно, а, следовательно, невозможен и их анализ сепарационными методами с применением спектрофотометрических детекторов. Известны методики анализа холина альфосцерата методом ВЭЖХ с использованием рефрактометрического или масс-спектрометрического детекторов. Однако, несмотря на существенные преимущества данных методов, они сложны в исполнении и требуют использования дорогостоящего оборудования.

Альтернативным методу ВЭЖХ в современной практике считается метод капиллярного электрофореза, который позволяет с помощью косвенного

детектирования определять вещества, не поглощающие в УФ-области спектра. Кроме того, данный метод достаточно чувствителен, сравнительно прост в исполнении и экономичен.

Таким образом, для разработки методики анализа холина альфосцерата и мельдония при их совместном присутствии в лекарственных препаратах целесообразным является использование метода капиллярного электрофореза. Учитывая, что помимо идентификации и количественного определения еще одним немаловажным показателем качества лекарственных препаратов является контроль содержания в них посторонних примесей, не менее актуальным является изучение стабильности мельдония и холина альфосцерата в растворе для инъекций и условий, в которых данные вещества подвергаются деструкции.

Степень разработанности: Аналогом предлагаемого препарата является фармацевтическая нейропротекторная, антиоксидантная, антигипоксантная, антиапоптотическая и мембранопротекторная композиция, содержащая 100-250 мг 3-оксипиридина или его фармацевтически приемлемого производного, или фармацевтически приемлемой соли этого производного и 100-400 мг холина альфосцерата, отличающаяся тем, что дополнительно содержит 400-500 мг фармацевтически приемлемого производного магния, 10-50 мг пиридоксина или его фармацевтически приемлемого производного, 10-50 мг никотинамида, 15-30 мг идебенона, 15-30 мг убихинона (коэнзима С) 10) и 5-40 мг фармацевтически приемлемого производного цинка и фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества (патент 1Ш №2385722).

Данная композиция содержит 7 компонентов. Каждый из компонентов имеет свой спектр действия и противопоказания, что необходимо учитывать при назначении препарата в каждом случае. Этот факт ограничивает применение композиции и может быть удобен только для тех пациентов, которым показаны все компоненты в соответствующих дозах.

Наиболее близкой к предлагаемому препарату является композиция (патент Яи №2406506) в форме раствора для инъекций, обладающая ноотропной активностью и холиномиметическим действием, содержащая в качестве

активного ингредиента холина альфосцерат в терапевтически эффективном количестве и в качестве фармацевтически приемлемого носителя - повидон (пласдон или коллидон). Недостатком данной композиции является недостаточно сильный фармакологический эффект.

Цели и задачи исследования:

Целью настоящего исследования является разработка методик анализа холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии, стандартизация и изучение стабильности раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

1. Изучить возможности использования методов капиллярного зонного электрофореза и мицеллярной электрокинетической хроматографии для установления подлинности и количественного определения холина альфосцерата и мельдония.

2. Изучить факторы, влияющие на поведение холина альфосцерата и мельдония в условиях мицеллярной электрокинетической хроматографии, с целью оптимизации условий их электрофоретического разделения.

3. С использованием выбранных условий разработать методику установления подлинности и количественного определения холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии в растворе для инъекций.

4. Осуществить валидационную оценку разработанной методики количественного определения холина альфосцерата и мельдония по показателям: специфичность, линейность, прецизионность, правильность, диапазон применения и робастность.

5. Разработать и провести валидационную оценку методики определения посторонних примесей холина альфосцерата и мельдония при их совместном присутствии в растворе для инъекций.

6. С использованием стресс-тестов изучить процесс деструкции холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии в растворе для инъекций.

7. Провести исследования по стандартизации раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

8. С использованием метода ускоренного старения лекарственных средств изучить стабильность раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

9. В экспериментах на животных провести первичную фармакологическую оценку ноотропного и нейропротекторного действия раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

Научная новизна:

Впервые предложена фармацевтическая композиция в форме раствора для инъекций, обладающая ноотропной и нейропротекторной активностью, содержащая холина альфосцерат и мельдонйй.

На примере холина альфосцерата и мельдония теоретически обоснованы и экспериментально подтверждены подходы для электрофоретического разделения цвиттер-ионных соединений. Показано, что в условиях использования мицеллярной электрокинетической хроматографии в боратном электролите с рН 9,0 возможно разделение как заряженных (холина альфосцерат), так и электронейтральных (мельдоний) цвиттер-ионных соединений. В качестве мицеллообразующей добавки необходимо использование натрия додецилсульфата в концентрации не менее 75 мМ.

Установлено, что повышение чувствительности анализа цвиттер-ионных веществ (в случае отсутствия хромофорных групп) возможно путем применения косвенного детектирования, где в качестве оптимального хромофора выбрана кислота ацетилсалициловая, обеспечивающая наилучшие условия детектирования.

Проведенная валидационная оценка разработанной методики показала ее соответствие обоснованным критериям приемлемости по всем показателям: специфичность, линейность, прецизионность, правильность, диапазон применения и робастность.

Проведено изучение стабильности раствора для инъекций, содержащего

мельдоний и холина альфосцерат. При этом установлены сроки его годности, которые составляют более 2 лет.

Впервые, с использованием различных стресс-тестов, изучена кинетика процесса деструкции холина альфосцерата и мельдония. С помощью метода масс-спектрометрии идентифицированы основные продукты деструкции холина альфосцерата и мельдония, которые представляют собой их деметилированные производные.

В опытах на животных изучена фармакологическая активность предлагаемого комплексного раствора для инъекций, в сравнении с холина альфосцератом и мельдонием, применяемым по отдельности. Полученные данные свидетельствуют о потенцировании ноотропного и нейропротекторного действия веществ в полученной композиции.

Теоретическая и практическая значимость работы:

В Федеральную службу по интеллектуальной собственности, патентам и товарным знакам подана заявка на изобретение фармацевтической композиции в форме раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

Разработанная методика анализа с использованием капиллярного электрофореза может быть использована для качественного и количественного определения холина альфосцерата и мельдония в растворе для инъекций при их совместном присутствии.

При проведении валидации разработанной методики изучена возможность построения контрольных карт Шухарта в оценке ее робастности. При этом выбраны условия, при которых достигается максимальная стабильность результатов в условиях использования мицеллярной электрокинетической хроматографии.

Полученные результаты по использованию мицеллярной электрокинетической хроматографии, а также варианта косвенного детектирования в анализе холина альфосцерата и мельдония могут быть применены для изучения электрофоретического поведения других лекарственных средств, являющихся цвиттер-ионами.

Методология и методы исследования

Для разработки методики количественного определения холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии в растворе для инъекций использовался метод капиллярного электрофореза в различных вариантах.

Изучение процессов деструкции и стабильности холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии в растворе для инъекций проводили с применением методов мицеллярной электрокинетической хроматографии, тонкослойной хроматографии, а также методом ВЭЖХ-МС.

Положения, выносимые на защиту

1. Исследования по разработке и валидации методики количественного определения холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии в растворе для инъекций.

2. Результаты проведения процедуры стандартизации раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

3. Результаты исследования процессов деструкции и стабильности холина альфосцерата и мельдония при совместном присутствии в растворе для инъекций.

4. Данные по первичной фармакологической оценке ноотропного и нейропротекторного действия раствора для инъекций, содержащего холина альфосцерат и мельдоний.

Степень достоверности и апробация результатов

Основные положения диссертационной работы доложены на региональных конференциях по фармации (Пятигорск, 2013 и 2014 гг.), а также на 2-й Всероссийской конференции «Аналитическая хроматография и капиллярный электрофорез» (Краснодар, май 2013 года)."

По теме диссертации опубликовано 6 научных работ, в т.ч. 3 в журналах, рекомендуемых ВАК РФ.

По результатам работы совместно с ООО «ФармИнтеллект» разработан проект ФСП на «Холина альфосцерат + Мельдоний», раствор для инъекций 4 мл. Данный проект был успешно апробирован в ГУП РО «Фармацевтический центр»

(г. Ростов-на Дону).

Также разработано информационное письмо на методику анализа мельдония и холина альфосцерата при их совместном присутствии в растворе для инъекций. Приведенная в письме методика успешно апробирована ФГБУ «Информационно-методический центр по экспертизе, учету и анализу обращения средств медицинского применения» Росздравнадзора (г. Ростов-на-Дону).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Пятигорского медико-фармацевтического института -филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России.

Объем и структура диссертации. Работа изложена на 166 страницах печатного текста, содержит 46 таблиц и 42 рисунка, 19 формул, состоит из «Введения», «Обзора литературы» и 5-ти глав собственных исследований, общих выводов, а также списка литературы, включающего 123 источника, в том числе 76 иностранных.

ГЛАВА 1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА, ПРИМЕНЕНИЕ И СПОСОБЫ АНАЛИЗА МЕЛЬДОНИЯ И ХОЛИНА АЛЬФОСЦЕРАТА

1.1 Применение холина альфосцерата и мельдония в терапии острых и хронических нарушений мозгового кровообращения

В настоящее время около 9 млн. человек в мире страдают цереброваскулярными заболеваниями различного характера. Среди них наибольшее распространение получили инсульты, ежегодно поражающие от 5,6 до 6,6 млн. человек и уносящие более 4,6 млн. жизней [2,3].

Уровень смертности от цереброваскулярных заболеваний уступает лишь смертности от заболеваний сердечно-сосудистой системы и онкозаболеваний и ежегодно растет, достигая на данный момент 12-13% [4,5,6]. В России, как и в мире в целом, наблюдается тенденция роста расстройств мозгового кровообращения. Примерно 2/3 больных, перенесших инсульт, страдают от остаточных явлений различной степени выраженности и характера. И поскольку в последние годы наблюдается повышение частоты случаев мозгового инсульта у лиц трудоспособного возраста, материальные расходы, связанные с лечением и реабилитацией, ложатся на бюджет семей и государства в целом. Из выживших пациентов до 60% больных становятся тяжелыми инвалидами, 30% имеют стойкие остаточные изменения и только 10% возвращаются к полноценной жизни [2,5].

Основными факторами риска развития инсульта и других хронических заболеваний мозгового кровообращения являются:

• Артериальная гипертония с резкими колебаниями артериального давления (АД) и нарушениями нормального суточного ритма АД (отсутствие или недостаточное снижение АД в ночное время, на поздних стадиях, иногда, наоборот, резкое снижение АД ночью).

• Атеросклероз магистральных, артерий головы: общих сонных, внутренних сонных и позвоночных артерий.

• Заболевания сердца с высоким эмбологенным потенциалом -

мерцательная аритмия при ишемической болезни сердца и ревматических пороках сердца, эндокардиты и др.

Также к факторам риска развития хронических заболеваний мозгового кровообращения относятся:

- курение;

- сахарный диабет;

- нарушение липидного обмена;

- гиперагрегация тромбоцитов;

- повышение вязкости крови и гематокрита [7].

Таким образом, острые и хронические нарушения мозгового кровообращения принимают характер одной из наиболее актуальных и ярко-выраженных медико-социальных проблем, являясь наиболее значимой причиной инвалидизации и смертности населения [8,9].

В настоящее время большинство специалистов, занимающихся терапией острых и хронических цереброваскулярных заболеваний, считают, что причиной данных заболеваний являются сосудистые и гематологические нарушения с последующим снижением мозгового кровотока и энергетической недостаточностью нейронов. Отсюда следует, что одним из наиболее эффективных способов профилактики и терапии данных заболеваний является прием препаратов, стимулирующих мозговое кровообращение [10,11,12,13,14].

В последние десятилетия в терапии острых и хронических нарушений мозгового кровообращения широко применяются средства, влияющие на нейромедиаторные системы [15,16,17,18].

Воздействие на широко распространенный в центральной и периферической нервной системе холинергический аппарат всегда представлялось одной из важнейших терапевтических задач, являясь также наиболее сложной, поскольку отсутствие оптимальных форм, проникающих через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ), делает затруднительным применение холинотропных средств.

В последнее время наиболее эффективными средствами терапии острых и хронических цереброваскулярных заболеваний признаны препараты холина

альфосцерата, являющегося центральным холиностимулятором, в структуре которого содержится 40,5% метаболически защищенного холина. Он способен проникать через ГЭБ и служить донором для биосинтеза нейротрансмиттера ацетилхолина в пресинаптических мембранах холинергических нейронов. Это холиномиметик с преимущественным влиянием на холиновые рецепторы в центральной нервной системе. При попадании в организм холина альфосцерат расщепляется под действием ферментов на холин и глицерофосфат. При этом холин участвует в биосинтезе ацетилхолина - одного из основных медиаторов нервного возбуждения, а глицерофосфат является предшественником фосфолипидов (фосфатидилхолина) мембраны нейрона [19,20,21].

Холинергическая система, тесно взаимодействуя с дофаминергической, ГАМК-ергической и глутаматергической медиаторными системами, обеспечивает эмоциональную окраску поведения, когнитивные свойства и волевые акты [22,23,24].

Являясь предшественником фосфолипидов мембран, холина альфосцерат участвует в анаболических процессах, ответственных за мембранный фосфолипидный и глицеролипидный синтез, положительно влияя на функциональное состояние мембранных структур клеток, улучшая тем самым цитоскелет нейронов и увеличивая массу клеточных органелл (рибосом, митохондрий). Таким образом, холина альфосцерат улучшает передачу нервных импульсов в холинергических нейронах, положительно воздействуя на пластичность нейрональных мембран и функцию рецепторов [25,26,27].

Отсутствие токсичности (наиболее распространенный побочный эффект -тошнота как следствие дофаминергической активации) и терапевтическая широта делают холина альфосцерат приоритетным препаратом в терапии острых и хронических нарушений мозгового кровообращения [25,28,29].

Также в терапии и профилактике острых и хронических нарушений мозгового кровообращения широко применяются препараты мельдония, который применяется в клинической практике как средство, улучшающее метаболические процессы.

Мельдоний (3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата дигидрат) - это структурный аналог природного у-бутиробетаина, предшественник карнитина. Механизм его действия заключается в том, что подавляя гамма-бутиробетаингидроксиназу, угнетая синтез карнитина и транспорт длинноцепочечных жирных кислот через оболочки клеток, мельдоний препятствует накоплению в клетках активированных форм неокисленных жирных кислот - производных ацилкарнитина и ацилкоэнзима А [30].

В условиях ишемии мельдоний восстанавливает равновесие процессов доставки кислорода и его потребления в клетках, предупреждает нарушение транспорта АТФ; одновременно с этим активирует гликолиз, который протекает без дополнительного потребления кислорода. В результате снижения концентрации карнитина усиленно синтезируется гамма-бутиробетаин, обладающий вазодилатирующими свойствами. Механизм действия определяет многообразие его фармакологических эффектов: повышение работоспособности, уменьшение симптомов психического и физического перенапряжения, активация тканевого и гуморального иммунитета, кардиопротекторное действие.

В случае острого ишемического повреждения миокарда мельдоний замедляет образование некротической зоны, укорачивает реабилитационный период. При сердечной недостаточности повышает сократимость миокарда, увеличивает толерантность к физической нагрузке, снижает частоту приступов стенокардии [31].

При острых и хронических ишемических нарушениях мозгового кровообращения улучшает циркуляцию крови в очаге ишемии, способствует перераспределению крови в пользу ишемизированного участка. Эффективен при сосудистой и дистрофической патологии глазного дна. Оказывает тонизирующее действие на ЦНС, устраняет функциональные нарушения со стороны нервной системы у больных хроническим алкоголизмом при синдроме абстиненции [32,33].

Н,С - N-СН--СНГ 0-Р-О-СН, 3 / 2 2 II Н3С О

СН2ОН

н3с

о

мельдоний

холина альфосцерат

Рисунок 1 - Структурные формулы мельдония и холина альфосцерата

Вышеуказанные вещества структурно близки, являются цвиттер-ионами и относятся к четвертичным аммониевым основаниям, что видно из рисунка 1, однако обладают несколько различными механизмами действия. Холина альфосцерат является ноотропным средством, в то время как мельдоний является средством, улучшающим метаболические процессы, проявляя также вазодилатирующее действие и таким образом, может дополнять и усиливать эффекты холина альфосцерата.

1.2 Четвертичные аммониевые основания. Общая характеристика и физико-химические свойства

Четвертичные аммониевые основания - это обширная группа химических соединений, которые можно рассматривать как продукты полного алкилирования солей аммония [34].

Известны внутренние четвертичные аммониевые соли, например, бетаин. Также типичными представителями являются бензалкония хлорид, бензалкония пропионат, мецетрония метилсульфат. Это, как правило, кристаллические вещества, которые получают главным образом алкилированием (кватернизацией) третичных аминов алкилгалогенидами:

Скорость реакции убывает в ряду: йодиды >бромиды>хлориды и резко возрастает при использовании биполярных апротонных растворителей, например, диметилсульфоксида (ДМСО) или диметилформамида (ДМФА). Алкилирующими агентами могут быть также диалкилсульфаты, эфиры арилсульфоновых кислот и т.д. [35]

+ Л'Х [ЯзИЯ^Х-

Четвертичные аммониевые соединения не имеют запаха, бесцветны, обладают слабой коррозийной активностью, эффективны в широком диапазоне рН, устойчивы к высоким температурам. Концентраты и растворы на их основе стабильны.

Под действием растворов едких щелочей на четвертичные соли образуются четвертичные аммониевые основания. Это кристаллы, расплывающиеся на воздухе. При 100-150 °С разлагаются, причем по-разному в зависимости от строения радикалов. Так, из [(CH3)4N]+OH" или [(СбН5СН2)4М]+ОН" образуются третичные амины и спирты. При наличии атома водорода в Р-положениии к атому азота распад идет с образованием алкенов, третичных аминов и воды.

В смеси безводного тетрагидрофурана (ТГФ) и ДМСО четвертичные основания расщепляются уже при комнатной температуре [35,36].

Наиболее распространенными солями и замещенными производными четвертичных аммониевых оснований являются:

V холин, его соли и производные [34]. Гидроксид гидроксиэтилтриметиламмония, содержащийся в желчи, в мозге, в яичном желтке и во всех свежих семенах [37]. Соединение, производными которого являются другие биологически активные вещества (например, ацетилхолин, метилхолин).

> лецитины и прочие фосфоаминолипиды. Эти соединения представляют собой сложные эфиры (фосфатиды), полученные взаимодействием олеиновой, пальмитиновой и других жирных кислот с глицерофосфорной кислотой и органическим азотсодержащим основанием, таким как холин. Они обычно представляют собой желтовато-коричневые воскообразные массы, растворимые в этаноле [38]. Лецитины содержатся в яичном желтке (оволецитин), в животных и растительных тканях.

Технический лецитин, который также включается в данную товарную

(1)

позицию, является преимущественно соевым лецитином и состоит из смеси нерастворимых в ацетоне фосфатидов (обычно 60 - 70 мас.%), соевого масла, жирных кислот и углеводов. Цвет технического соевого лецитина может меняться от коричневатого до светло-окрашенного; продукт относительно вязкий; при экстрагировании соевого масла ацетоном имеет вид желтоватых гранул.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мудрецова, Юлия Викторовна, 2014 год

Список используемой литературы:

1. Лазаренко, А. Современные подходы к использованию нейропротекторов / А. Лазаренко // Здоров'я Украши. - 2012. - №4. - С. 40-41.

2. Эпидемиология инсульта в России / Е.И. Гусев [и др.]. // Consilium medicum. - 2003. - № 5. - С. 2-7.

3. Preventing stroke: saving lives around the word / K. Strong [et al.] // Lancet Neurol. - 2007. - Vol. 2, № 6. — P. 182-187.

4. Чуканова Е.И. Хроническая цереброваскулярная недостаточность. Возможности лечения и профилактики инсульта / Е.И. Чуканова // Фарматека. -2007. - Т. 12, № 146. - С. 66-71.

5. Гусев, Е.И. Ишемия головного мозга / Е.И. Гусев, В.И. Скворцова -М., 2001.-327 с.

6. Bonita, R. The worldwide problem of stroke / Bonita R., Beaglehole R., Asplund K. // Current Opinion in Neurology - 1994. - Vol. 7, № 1. - P. 5-10.

7. Кадыков, А.С. Лечение и профилактика хронических сосудистых заболеваний головного мозга / А.С. Кадыков, Н.В. Шахпаронова // Consilium medicum. - 2005. - №2. - С. 147-152.

8. Инсульт: диагностика, лечение, профилактика / под. ред. З.А. Суслиной, М.А.Пирадова. - М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 288 с.

9. Здравоохранение в России: стат. сб. - М.: Росстат, 2007. - 355 с.

10. Быкова, О.В. Современные направления нейропротекции: анализ опыта использования холина альфосцерата в комплексной терапии острых цереброваскулярных заболеваний / О.В. Быкова, А.Н. Бойко // Фарматека. - 2005. - №9. - С. 55-60.

11. Кадыков, А.С. Хронические прогрессирующие сосудистые заболевания головного мозга / А.С. Кадыков, Н.В. Шахпаронова // Consilium Medicum. -2003. - Т. 5, №12. - С.712-715.

12. Когнитивные расстройства у больных с артериальной гипертензией: ранняя диагностика, возможности оптимизации фармакотерапии / М.Н. Дадашева [и др.], // Consilium medicum. - 2011. - Т. 13, № 9. - С.78-82.

13. Baron, J.C. Treatment of acute ischemic stroke. Challtnging the concept of a rigid and universal window / J.C. Baron, von Kummer R., dei Zoppo G.J. // Stroke. -1995. -№26. - P. 2219-2221.

14. Dyker, A.G. Duration of neuroprotective treatment for ischemic stroke / A.G. Dyker, K.R. Lees // Stroke. - 1998. -№ 29. - P. 535-542.

15. Gladstone, D.J. Ebhancing recovery after stroke with noradrenergig pharmacotherapy: a new frontier? / D.J. Gladstone, S.E. Black // Can J. Neurol. Sei. -2000. - № 27. - P. 97-105.

16. Goldstein, L.B. Restorative Neurology: Advances in Pharmacotherapy for Recovery After Stroke / Goldstein L.B. - New York: New York Futura Publishing, 1998.-321 p.

17. Pametti, L. Choline alphoscerate in cognitive decline and in acute cerebrovascular disease: an analysis of published clinical data. / L. Parnetti, F. Amrnta, V. Gallai // Mech Ageing Dev. - 2001. - Vol. 122, № 20. - P. 41-55.

18. Corbett, D. The problem of assessing effective neuroprotection in xperimental cerebral ischemia / D. Corbett, .S. Nurse // Prog Neurobiol. - 1998. -№54.-P. 531-548.

19. Кадыков, A.C. Перспективы иейропротективной терапии в лечении когнитивных нарушений /A.C. Кадыков, Н.В. Шахпаронова. // Consilium Medicum -2007.-№12.-С. 72-75.

20. Alpha-Glycerophosphocholine in the mental recovery of cerebral ischemic attacks / G. Barbagallo [et al.] // Ann NY Acad. Sei. - 1994. - Vol. 30, № 717. -P. 253-269.

21. Effects of citicoline combined with thrombolytic therapy in a rat embolic stroke model /М. Andersen [et al.] // Stroke. - 1999. -№ 30. - P. 1464 - 1471.

22. Опыт применения препарата глиатилин в практике интенсивной терапии острого каротидного ишемического инсульта / А.Г. Гуцалюк [и др.] // Фарматека. - 2005. - № 17. - С.77-80.

23. Даминов, В.Д. Применение глиатилина в комплексном лечении больных, перенесших черепно-мозговую травму / В.Д. Даминов, В.В. Германович

// Фарматека. - 2007. - № 15. - С. 70-73.

24. Аракелян, Г.В. Эффективность холина альфосцерата при цереброваскулярных заболеваниях/ Г.В. Аракелян, Н.В. Стуров // Фундамент, исследования. -2006. -№1. - С. 22.

25. Всрижникова, Е.В. Современные аспекты цитопротекторной коррекции. Взгляд клинического фармаколога / Е.В. Всрижникова, И.С. Петрусенко, И.И. Шоломов // Глиатилин. Сб. клинич. наблюдений. Пособие для врачей. - М., 2003. - С.64-77.

26. Глиатилин в комплексном лечении черепно-мозговой травмы. Травма нервной системы / А.Ю. Савченко [и др.] // Травма нервной системы: материалы ежегодной научно-практической конференции. - Омск, 1999. - С. 79-85.

27. Pomponi, М. Present state and future development of the therapy of the Alzheimer disease / M. Pomponi, E. Giacobini, M. Brufani // Aging. - 1990. - №2. -P. 125-153.

28. Imbimbo, B.P. Eptastigmine: a cholinergic approach to the treatment of Alzheimer disease / Imbimbo B.P. // Proc. of 4th Int. Symp. Advances in Alzheimer therapy. - Nice, 1996. - P. 103-112.

29. Markesbery, W.R. Oxidative stress hypothesis in Alzheimer disease / Markesbery W.R. // Free Rad Biol. Med. - 1997. - № 23. - P. 134-147.

30. Регистр лекарственных средств России (PJIC 2011). - М.: PJIC, 2011. -

973 с.

31. Hanaki, Y. Effect of 3-(2,2,2, — trimelhylhydrazinium) propionate, gamma-butyrobetaine hydroxylase inhibitor, on isoproterenol — induced mitochondrial dysfunction/ Hanaki Y., Sugiyama S., Ozawa T. // Res. Commun. Chem. Phatol. Pharmacol. - 1999. -№ 64. - P. 157-160.

32. Милдронат: механизмы действия, перспектива коррекции патологических состояний/ Ж.В. Шутенко [и др.]. // Хим.-фармац. журн. - 1995. -Т. 29,№5.-С. 13-17.

33. Dambrova, М. Mildronate: cardioprotective action through carnitine-lowering effect/ Dambrova M., Liepinsh E., Kalvinsh I. // Trends Cardiovasc Med. -

Ъ .

2002. - № 12. - P. 275-279.

34. Formation of y-butyrobetaine and trimethylamine from quaternary ammonium compounds structure-related to L-carnitine and choline by Proteus vulgaris / H. Seim [et al.] // FEMS Microbiology Letters. - 1982. - Vol. 13, № 2. - P. 201-205.

35. Яновская, Л.А. Органический синтез в двухфазных системах / Л.А. Яновская, С.С. Юфит. - М., 1982. - 184 с.

36. Соре, А.С. Trans-Cyclooctene / Соре А.С., Bach R.D. // Organic Syntheses Coll. - 1973. - Vol. 5. - P. 315.

37. Pernak, J. Synthesis and anti-microbial activities of choline-like quaternary ammonium chlorides / Pernak J., Chwala P. // European J. of Medicinal Chemistry. -

2003.-Vol. 38, № 11.-P. 1035-1042.

38. Validation of an LC-MS/MS method for the quantification of choline-related compounds and phospholipids in foods and tissues / Y. Xiong [et al.] // J. of Chromatography B. - 2012. - Vol. 911. - P. 170-179.

39. Kaiser, C. Alkenes via hofmann elimination: use of ion-exchange resin for preparation of quaternary ammonium hydroxides: diphenylmethyl vinyl ether / KaiserC„ Weinstock J. // Organic Syntheses Coll. - 1988. - Vol. 6. -P.552.

40. Химическая энциклопедия / И.Л. Кнунянц [и др.]. - М.: Сов. энциклопедия, 1988. - 623 с.

41. Лутцева, Т.Ю. Методы анализа и стандартизации лекарственных четвертичных аммониевых оснований / Т.Ю. Лутцева, Н.П. Садчикова, А.П. Арзамасцев // Вопросы биологич., мед. и фармац. химии. - 2002. - N 3. -С. 17-20.

42. Ivey, J.P. Zwitter ionic eluents for suppressed ion chromatography / Ivey J.P. // J. of Chromatography A. - 1984. - Vol. 287. - P. 128-132.

43. Graham, E.F. Effect of Some Zwitter Ion Buffers on the Freezing and Storage of Spermatozoa I. Bull / Graham E.F., Crabo B.G., Brown K.I. // J. of Dairy Science. - 1972. - Vol. 55, №. 3. - P. 372-378.

44. Цвиттер-ионы [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://goldbook.iupac.org/Z06752.html.

45. Some aspects of zwitter ion polymerization in the processes of formation of interpenetrating polymer networks based on diisocyanates / L.S. Andrianova [et al.] // Polymer Science U.S.S.R. - 1985. - Vol. 27, № 10. - P. 2319-2325.

46. Markevich, M.A. Polymerization kinetics with the participation of zwitterions (ZI) / Markevich M.A., Kochetov Ye.V., Yenikolopyan N.S. // Polymer Science U.S.S.R.-1971.-Vol. 13, №5.-P. 1163-1178.

47. Цвиттер-ионы [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://goldbook.iupac.org/B00637.html.

48. Мельдоний: [фармакоп. ст.] // Государственная фармакопея РФ: вып. 1. - 12-е изд. - М.: Науч. центр экспертизы средств мед. применения, 2008. -С. 585.

49. ФСП 42-9388-08. Мельдоний. - М.: Фармстандарт, 2008. - 6 с.

50. Количественное определение дигидрата 3-(2,2,2-триметилгидразиний) пропионата в сыворотке, плазме крови методом инверсионной вольтамперометрии / Е.А. Ивановская [и др.]. // Хим.-фармац. журн. - 1995. -Т.29, №3. - С.57-58.

51. The United States Pharmacopoeia - 31-ed. (USP) - Rockville, 2007. - P.

3788

52. Application of hydrophilic interaction chromatography for simultaneous separation of six impurities of mildronate substance / J. Hmelnickis [et al.] // J. of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2008. - Vol. 48, №. 3. - P. 649-656.

53. Sahartova, O. HPLC analysis of mildronate and its analogues in plasma / Sahartova O., Shatz V., KalvinS I. // J. of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. -1993.-Vol. 11, №. 10.-P. 1045-1047.

54. Государственная Фармакопея Российской Федерации: Ч. 1. - 12-е изд. - М.: Науч. центр экспертизы средств мед. применения, 2008. - 704с.

55. Determination of mildronate by LC-MS/MS and its application to a pharmacokinetic study in healthy Chinese volunteers / Y. Peng [et al.] // J. of Chromatography B. - 2010. - Vol. 878, № 5. - P. 551-556.

56. Lv, Y-F. Determination of mildronate in human plasma and urine by liquid

chromatography-tandem mass spectrometry / Lv Y-F., Hu X., Bi K-S. // J. of Chromatography B. - 2007. - Vol. 852, № 1. - P. 35-39.

57. Carter, J.F. Mass spectrometry / Carter J.F., Sleeman R. // Overview Encyclopedia of Analytical Science - 2-ed. - New York, 2005. - P. 337-344.

58. Лебедев, A.T. Масс-спектрометрия в органической химии / А.Т. Лебедев. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2003. - 493 е., ил.

59. Smith, R.W. Mass Spectrometry Encyclopedia of Forensic Sciences / R.W. Smith. - Hoboken: Wiley, 2013 - P. 603-608.

60. Галль, Л.Н. Масс-спектрометрия - дело государственное. Размышления о состоянии и путях возрождения отечественного масс-спектрометрического приборостроения / Л.Н. Гааль // Атомная стратегия. - 2004. - №4. - С.5-6.

61. Busetti, F. Liquid Chromatography-Mass Spectrometry / Busetti F., Swann L. // Encyclopedia of Forensic Sciences. - Hoboken: Wiley, 2013 - P. 590-595.

62. Pasiiis, S.P. Modern Atmospheric Pressure Surface Sampling Ionization Techniques in Mass Spectrometry. Reference Module in Chemistry, Molecular Sciences and Chemical Engineering / Pasiiis S.P., Berkel G.J. // Encyclopedia of Spectroscopy and Spectrometry. - 2-ed. - London: Academic Press, 2010. - P. 1544-1555.

63. Bruins, A.P. Mass Spectrometry. Reference Module in Chemistry. Molecular Sciences and Chemical Engineering / A.P. Bruins, W.M.A. Niessen. -Washington: CRC, 2013. - P. 632-651.

64. Analysis of explosives using corona discharge ionization combined with ion mobility spectrometiy-mass spectrometry / J. Lee [et al.] - 2014. - Vol. 120. -P. 64-70.

65. Heeren, R.M.A. MALDI Techniques in Mass Spectrometry Imaging / Heeren, R.M.A. // Encyclopedia of Spectroscopy and Spectrometry. 2-ed. - London: Academic Press, 2010. - P. 1443-1451.

66. Altunta$, E. Comparison of ESI, APCI and MALDI for the (tandem) mass analysis of poly(2-ethyl-2-oxazoline)s with various end-groups / E. Altunta§ [et al.] // European Polymer J. - 2013. - Vol. 49, № 8. - P. 2172-2185.

67. Comparison of SSI with APCI as an interface of HPLC-mass spectrometry for analysis of a drug and its metabolites / T. Arinobu [et al.] // J. of the American Society for Mass Spectrometry. - 2002. - Vol. 13, № 3. - P. 204-208.

68. Development and application of LC-APCI-MS method for biomonitoring of animal and human exposure to imidacloprid / M.P. Kawalakis [et al.] // Chemosphere. - 2013. - Vol. 93, № 10. - P. 2612-2620.

69. Harrison A.G. Chemical Ionization in Mass Spectrometry Reference Module in Chemistry / Harrison A.G. // Molecular Sciences and Chemical Engineering, from Encyclopedia of Spectroscopy and Spectrometry. - 2-ed. - London: Academic Press, 1999.-P. 238-245.

70. Токарев, M. Что такое масс-спектрометрия и зачем она нужна? [Электронный ресурс]. - 2004 / . М. Токарев - Режим доступа: http://www.textronica.com.

71. Electrospray Ionization Mass Spectrometry: Fundamentals, Instrumentation, and Applications / Ed. by Cole R. - New York: Wiley and Sons, 1997. -P. 323-341.

72. Cole, R.B. Some tenets pertaining to electrospray ionization mass spectrometry / Cole R.B. // J. Mass Spectrom. - 2000. -№ 35. - P. 763-772.

73. Gaskell, S.J. Electrospray: principles and practice / Gaskell S.J. // J. Mass Spectrom. - 2000. - № 35. - P. 677-688.

74. Cech, N.B. Practical implications of some recent studies in electrospray ionization fundamentals / Cech N.B., Enke C.G. // Mass Spectrom. Rev. - 2001. -№ 20. - P. 362-387.

75. Busch, K.L. Mass Spectrometry: Techniques and Applications of Tandem / Busch K.L., Glish G.L., McLuckey S.A. - New York: Wiley and Sons, 1989. -P. 356-361.

76. Cotter, R. Time-Of-Flight Mass Spectrometry: Instrumentation and Applications in Biological Research / Cotter R. - Washington: ACS, 1997. -P. 238-241/

77. Molecular beams of macroions / M. Dole [et al.] // J. of Chemical Physics.

-¡ifW'i .

. 1'

'i

- 1968.-Vol. 49.-P. 2240.

78. Karas, M. Laser desorption ionization of proteins with molecular mass exceeding 10,000 Daltons. / Karas M., Hillenkamp F. // Anal. Chem. - 1988. -Vol. 60. - P. 2299.

79. Bruins, A.P. Mechanistic aspects of electrospray ionization / Bruins A.P. // J Chromatogr A - 1998 - Vol. 795. - P. 345-357.

80. Electrospray ionization - principles and practice / J.B. Fenn [et al.] // Mass Spectrometry Reviews. - 1990. - № 9. - P. 37.

81. Manisali, I. Electrospray ionization source geometry for mass spectrometry: past, present, and future / Manisali I., Chen D.Y., Schneider B.B. // TrAC Trends in Analytical Chemistry. - 2006. - Vol. 25, № 3. - P. 243-256.

82. Sipler, R. Use of electrospray ionization (ESI) mass spectrometry to investigate complex dissolved organic matter (DOM) and its potential applications in phytoplankton research / Sipler R., Seitzinger S. // Harmful Algae. - 2008. - Vol. 8, № 1 -P. 182-187

83. Kebarle, P.A. Brief overview of the present status of the mechanisms involved in electrospray mass spectrometry / Kebarle P.A. // J. Mass Spectrom. - 2000. -Vol. 35.-P. 804-817.

84. Sensitivity of positive ion mode electrospray ionization mass spectrometry (ESI MS) in the analysis of purine bases in ESI MS and on-line electrochemistry ESI MS (EC/ESI MS) / N.A. Mautjana [et al.] // Electrochimica Acta. - 2009. - Vol. 55, № l.-P. 52-58.

85. Optimization of a free separation of 30 free amino acids and peptides by capillary zone electrophoresis with indirect absorbance detection: a potential for quantification in physiological fluids / G. Zvunic [et al.] // J. of chromatography B. -2002 - Vol. 772. - P. 19-33.

86. Internal standard method for the measurement of choline and acetylcholine by capillary electrophoresis with electrochemical detection / D.D. Wise [et al.] // J. of Chromatography B. - 2002. - Vol. 775, №. 1. - P. 49-56.

87. Separation and determination of in vitro oxidized phospholipids by

capillary zone electrophoresis / Y-L. Ho [et al.] // Analytical Biochemistry. - 2007. -Vol. 367, №2. - P. 210-218.

88. D^browska, M. Analytical approaches to determination of carnitine in biological materials, foods and dietary supplements / D^browska M., Starek M. // Chemistry. - 2014. - Vol. 142. - P. 220-232.

89. Морзунова, Т.Г. Капиллярный электрофорез в фармацевтическом анализе / Т.Г. Морзунова // Хим-фармац. журн. - 2006. - Т.40, №3. - С. 39-52.

90. Черноглазов, В.М. Развитие капиллярного электрофореза и его аппаратурного оформления / В.М. Черноглазов, П.Н. Нестеренко // Рос. хим. журн. - 1996. - Т.40, №1. - С. 100-110.

91. Комарова, Н.В. Практическое руководство по использованию систем капиллярного электофореза «Капель» / Н.В. Комарова, Я.С. Каменцев. - СПб., 2006. - 107 с.

92. Бёккер, Ю. Хроматография. Инструментальная аналитика: методы хроматографии и капиллярного электрофореза. / Ю. Бёккер. - М.: Техносфера, 2009.-472 с.

93. Vernez, L. Analysis of carnitine and acylcarnitines in urine by capillary electrophoresis / L. Vernez, W. Thormann, S. Krahenbuhl // J. of Chromatography A. -2000. - Vol. 895, № 1. - P. 309-316.

94. Determination of acid-base dissociation constants of very weak zwitterionic heterocyclic bases by capillary zone electrophoresis / E. Sille [et al.] // J. of chromatography A. - 2010. - Vol. 1217. - P. 8048-8053.

95. ФСП 42-0521-5989-04. Церепро. - M.: Верофарм, 2004 - 14 с.

96. ФС 42-0344-7625-06. Кардионат. - М.: Макиз-фарма, 2006 - 7 с.

97. ICH Q2B / Validation of analytical procedure: Methodology // International Conference for the Registration of Pharmaceuticals for Human Use. -Geneva, 1996.-75 p.

98. Валидация фармакопейных методов / А. П. Арзамасцев [и др.] // Ведомости научного центра экспертизы и гос. контроля лек. средств. - 1993. ~ №3.-С. 28-31.

99. Валидация аналитических методов исследования / Л. Р. Давлетбаева [и др.] // Медицинские иммунобиологические препараты в XXI веке: разработка, производство и применение: материалы. Всерос. конф. 4.1. - Уфа, 2005. -С. 34-37.

100. Валидация аналитических методик/ П. Носырев [и др.] // Ремедиум -

2003. -№11. -С. 62-64.

101. Гаврилин, М.В. Валидация аналитических методик: методические указания для аспирантов и студентов / М. В. Гаврилин, С. П. Сенченко. -Пятигорск, 2009.- 35 с.

102. Валидация аналитических методик для производителей лекарств: Типовое руководство предприятия по производству лекарственных средств / под редакцией В.В. Береговых -М.: Литтерра, 2008. - 132 е.: 5 с. Цвет. Вкл.: ил.

103. Guidelines for standard method performance requirements. -[Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.aoac.org/imisl5_prod/AOAC _Docs/StandardsDevelopment/eoma_appendix_f.pdf.

104. ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002. Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Использование значений точности на практике. - М., Госстандарт России, 2002. -4.6. - 55с.

105. Validation of Analytical Procédures: Methodology. - [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.fda.gov/downloads/AnimalVeterinary/ GuidanceComplianceEnforcement/GuidanceforIndustry/UCM052379.pdf

106. Руководство для предприятий фармацевтической промышленности / методические рекомендации. - М.: Спорт и-Культура - 2000,2007. - 192 с.

107. Green, J.M. Practical guides to analytical method validation / Green J.M. // Anal. Chem. News and Features. - 1996. - № 1. - P. 305A-309A.

108. Эпштейн, H. A. Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе (обзор) / Н. А. Эпштейн // Хим. - фармац. журн. -

2004. - Т. 38, № 4. - С. 40-56.

109. ГОСТ Р 50779.42-99 (ИСО 8258-91) Контрольные карты Шухарта.-М.; Госстандарт России, 1999.-38с.

110. ФСП 42-2961-93. Милдронат. - М.: Гриндекс, 1993-4 с.

111.Bajaj S. Testing of Pharmaceutical Products / Bajaj S., Singla D., Sakhuja N. // J. of Applied Pharmaceutical Science. - 2012. - № 2. - P. 129-138.

112. ICH Q1(R2) / Stability testing Guidelines: Stability Testing of New Drug. - [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.ikev.org/haber/stabilite/kitap /29%201.1 %2 0 Stabil ity %20 Workshop%20ICH%20Q 1 AR2%20C. pdf

113. НД 42-13286-04. Глицерилфосфорилхолин гидрат. - М.: Верофарм, 2004- 14 с.

114. ЮН, «Stability Testing: Photostability Testing of New Drug Substances and Products» // Intern. Conf. on Harmonization. - Geneva, 1996. - P. 8.

115. ICH, «Quality of BiotechnolOgical Products: Stability Testing of Biotechnological/ Biological Products» // Intern. Conf. on Harmonization. - Geneva, 1995.-P. 10.

116. CPMP, «Note for Guidance on Stability Testing of Existing Active Substances and Related Finished Products» // The Europ. Agency for the Evaluation of Med. Products. - London, 1998. - P. 9.

117. Peer, L. Verified methods Program / Peer L. // Manual on policies and procedures. - Arlington, 1993. - P. 98.

118. Forced degradation studies to assess the stability of drugs and products / S. Singh [et al.] // TrAC Trends in Analytical Chemistry. - 2013. - Vol. 49. - P. 71-88.

119. Kinetic study for a stress testing of L,L-ethylenedicysteine by ultraperformance liquid chromatography/tandem mass spectrometry analysis / X. Sun [et al.] // Applied Radiation and Isotopes. - 2010. - Vol. 68, № 12. - P. 2153-2156.

120. Henderson, W. Using electrospray ionisation mass spectrometry as a synthesis-targeting technique - An update on the chemistry of the platinum chalcogenide dimers [Pt2(p2-E)2(PPh04] / Henderson W., Andy Hor T.S. // Inorganica Chimica Acta. - 2014. - Vol. 411. - P. 199-211.

121. Plattner, D.A. Electrospray mass spectrometry beyond analytical chemistry: studies of organometallic catalysis in the gas phase / Plattner D.A. // International Journal of Mass Spectrometry. - 2001. - Vol. 207, № 3. - P. 125-144.

/

122. ОСТ 91500.05.001-00. Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения. - Введ.2000. - М.: Изд-во стандартов. 2000. - 36с.

123. И 42-2-82. Инструкция по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре. - М.: Минздрав РФ, 1982. - 13 с.