Разработка липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.01, кандидат фармацевтических наук Михайлова, Татьяна Витальевна

• Михайлова, Татьяна Витальевна
• кандидат фармацевтических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Михайлова, Татьяна Витальевна

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Биотерапия опухолей.

1.2. Меланома - клиническая и иммунологическая характеристика.

1.3 .Характеристика белков теплового шока НБр-70.

1.4. Липосомальные вакцины.

1.5.Технологические этапы получения липосомальных препаратов.

1.5.1. Методы получения многослойных липосом.

1 .б.Сушка липосомальной дисперсии.

1.7.Методы стерилизации липосомальных вакцин.

1.8.Контроль качества липосомальных препаратов.

1.8.1. Определение размеров липосом.

1.8.2.Количественное определение включенного вещества в липосомы.

1.8.3. Определение степени окисления липидных компонентов.

1.9. Исследование иммунного ответа методом ЕЫБро!.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины»

Актуальность темы

Еще 30-40 лет назад меланома кожи была сравнительно редким заболеванием в большинстве стран мира. Однако за истекшее время частота возникновения этой болезни значительно увеличилась и продолжает неуклонно возрастать. Среднегодовой темп прироста заболеваемости этой опухолью в мире составляет около 5 % (в США - 4 %, в России - 3,9 %) и может считаться одним из самых высоких среди всех злокачественных опухолей, кроме рака легкого [19].

Меланома считается «антигенной опухолью», экспрессирующей так называемые опухолеассоциированные антигены. Эти антигены используются при вакцинотерапии, которая является одним из иммунологических подходов в лечении онкологических заболеваний [3].

В настоящее время активная иммунотерапия с использованием специфических вакцин является признанным методом профилактики и лечения некоторых видов злокачественных новообразований. Основной задачей противоопухолевой вакцинации является индукция и поддержание иммунного ответа, направленного на распознавание и элиминацию иммунорезистентных опухолевых клеток [11; 12].

В процессе поиска опухолеспецифических антигенов было установлено, что белки теплового шока (Ъбр) обладают высокой иммуногенной активностью [48].

Наиболее широко распространены и лучше изучены Ьэр с молекулярным весом 70 кДа. Представители этого семейства участвуют во многих внутриклеточных процессах. Действуя как молекулярные шапероны, они способствуют образованию мульти-белковых комплексов, принимающих участие в транслокации полипептидов через клеточную мембрану в ядро, а также обеспечивают правильное сворачивание полипептидной цепи. Недавно было установлено, что, локализованные экстрацеллюлярно, Ьэр 70 играют ключевую роль в индуцировании клеточного иммунного ответа [48; 66].

Современные исследования в области создания противоопухолевых вакцин включают два основных направления: совершенствование существующих технологических этапов и разработку нового поколения вакцин на основе достижений молекулярной биологии и иммунологии.

Липосомальная терапия - одно из наиболее активно развивающихся направлений в фармакологии и медицине. Способность липосом включать в себя различные вещества практически без каких-либо ограничений в отношении их химической природы, свойств и размера молекул дает поистине уникальные возможности для решения многих медицинских проблем[13].

В 1971 году впервые была произведена попытка включить в липосомы вещество белковой природы. Протеолипосомы - белково-липидные структуры, получаемые путем встраивания белков в липосомы. Включенные в готовые липосомы путем простой инкубации альбумин, инсулин, иммуноглобулины оставались связанными с ними даже после гель-фильтрации, что свидетельствует о прочной ковалентной связи между ними[157].

Липосомальная форма вакцины позволяет обеспечить сохранность антигенов, улучшает доставку антигенов к клеткам иммунной системы и способствует повышению иммуногенности [143].

В настоящее время возможно спроектировать липосомы различной ламеллярности, размера и объема загрузки антигена [89].

Для преодоления химической и физической неустойчивости и достижения долгосрочной стабильности, используется лиофильная сушка липосом [35]. В процессе лиофилизации происходит удаление воды из системы, что предотвращает гидролиз фосфолипидов, кроме того на выходе получают твердый продукт с низкой молекулярной подвижностью, что также ведет к подавлению как химической, так и физической нестабильности.

Сублимационная сушка является основным процессом, используемым для 9 получения стабильных белков и полипептидов, которые физически и / или химически неустойчивы в водном растворе [16].

Цель исследования - разработка и изучение биофармацевтических свойств липосомальной лекарственной формы вакцины, содержащей лизат клеточных линий меланомы человека.

Задачи исследования:

1. На основе химико-фармацевтических исследований разработать состав липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины;

2. Разработать способ получения устойчивой при хранении липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины;

3. Обосновать параметры и критерии качества готового препарата и разработать методики для установления стандартности липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины;

4. Оценить противоопухолевую активность липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины;

5. Изучить стабильность липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины в процессе хранения.

Научная новизна работы

Впервые разработана новая липосомальная лекарственная форма противомеланомной вакцины, содержащей лизат клеточных линий меланомы человека Mel Mtp, Mel Is, Mel Z, Mel P, Mel Kor . Обоснованы требования к стандартизации липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины. Установлены критерии и параметры качества липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины.

Отработаны методы очистки липосомальной лекарственной формы от невключившегося лизата и определена эффективность нагрузки лизата в липосомы. Определены режимы лиофильного высушивания и стерилизации

10 липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины. Получены данные об интенсивности иммунного ответа на липосомальную лекарственную форму противомеланомной вакцины методом ELISpot.

Научно-практическая значимость

Для углубленного доклинического изучения получена липосомальная лекарственная форма противомеланомной вакцины. Получена лиофилизированная форма липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины и установлен режим стерилизации, при котором сохраняются физико-химические показатели липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, в том числе 3 статьи в рекомендованных ВАКом журналах, 1 заявка на изобретение и 5 тезисов на Всероссийских и международных конференциях и съездах.

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 115 страницах машинописного текста, включая библиографию и иллюстрации. Состоит из введения, литературного обзора, общей характеристики материалов и методов исследования, трех глав описания собственных исследований, главы обсуждения результатов и выводов. Список литературы включает 188 источников, в том числе 155 публикаций зарубежных авторов. Диссертация иллюстрирована 22 рисунками и сопровождается 15 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Технология получения лекарств», Михайлова, Татьяна Витальевна

Общие выводы

1. Разработаны стандартные липосомальные лекарственные формы противомеланомной вакцины, содержащей лизат клеточных линий меланомы человека Mel Р, Mel Mtp, Mel Is, Mel Z, Mel Kor.

2. Определены параметры и критерии стандартности липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины. Разработаны хроматографические методики для качественного и спектрофотометрические для количественного определения препаратов в новой липосомальной лекарственной форме.

3. На основании разработанного режима сублимационной сушки липосомальной формы потивомеланомной вакцины выбран состав липосом с криопротектором сахарозой. Установлен режим гамма-облучения липосомальной лекарственной формы противомеланомной вакцины для обеспечения стерильности, при которой сохраняются основные физико-химические показатели липосомального препарата. Методом иммуноблот показано, что стабильность hsp-70 в липосомальной лекарственной форме противомеланомной вакцины сохраняется.

4. Разработан проект ФСП на «Липосомальная противомеланомная вакцина, лиофилизат для приготовления раствора для инъекций 2,5 мг и проведен контроль качества шести наработанных серий препарата при хранении при температуре +4° С в течение одного года.

5. Показано, что число IFNy-продуцирующих лимфоцитов статистически значимо увеличивается в ответ на стимуляцию ДК, нагруженными лизатом (по сравнению с негативным контролем). Отмечена тенденция к увеличению количества IFNy-продуцирующих лимфоцитов при стимуляции ДК липосомальным лизатом по сравнению с ДК, нагруженными лизатом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Михайлова, Татьяна Витальевна, 2012 год

1. Арзамасцев А.П., Дорофеев Д.Л. Современные требования к стандартизации и контролю качества лекарственных средств.// Материалы конференции "Человек и лекарство". 2008. - - р.

2. Барышников, А.Ю. Вакцинотерапия рака: от эксперимента к клинике / А.Ю. Барышников, Л.В. Демидов, И.Н. Михайлова, H.H. Петенко // Вестник Российской академии медицинских наук. 2007. - № 10. - С. 46-48.

3. Бережной А.Е., Закеева И.Р., Барышников А.Ю. и др. Анализ экспрессии молекул HLA-E в клетках меланомы человека // Российский Биотерапевтический Журнал. 2006. - №3. - С. 66-71.

4. Бистрин Ж.-К., Оратц Р., Шапиро Р. Вакцины из частично очищенных опухолевых антигенов. Биологические методы лечения онкологических заболеваний: принципы и практическое применение. Под ред. Винсента Т. Де Вита мл., С. Хеллмана, С.А.Розенберга.- 2009.

5. Государственная фармакопея СССР. XI издание. М., вып. 2. - 1990. - С. 140.

6. Государственная фармакопея РФ. XII издание. М., Часть 1 - 2007. - С. 105.

7. Грегориадис Г., Зади Б., Джайасекера П.Н. Способ получения липосом. Патент РФ, № 2216316. -1999.

8. Гужова И.В. Механизмы работы шаперона Hsp70 в нормальных клетках и при клеточной патологии: Автореф. дис. .д-ра биол.наук. СПб,2004. — 40 с.

9. Демидов, JI.B. Профилактическая иммунотерапия метастатической меланомы (N1-2 МО) препаратом POLY-A/POLY-U после радикального хирургического лечения / JI.B. Демидов, И.Г. Богуш // Вестник РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН. 1994. - Т. 5, № s. - С. 80-82.

10. Дудниченко A.C. Новые возможности в лечении рака.// Провизор. 2000. -№ 6. - С. 18-19.

11. Дудниченко A.C., Краснопольский Ю.М., Швец В.И. Липосомальные лекарственные препараты в эксперименте и в клинике. Харьков: «РА-Каравелла». 2001 - С. 13-18.

12. Каплун А.П., Шон Л.Б., Краснопольский Ю.М., В.И., Ш. Липосомы и другие наночастицы как средство доставки лекарственных веществ.// Вопросы медицинской химии. 1999. - № 1(45). - С. 3-12.

13. Кельнер Р. Аналитическая химия. Проблемы и подходы. М: Мир. ООО «Издательство ACT» - Т.1. 2004 - С.99.

14. Лыков A.B. Сублимационная сушка. Теория сушки. М., Энергия., 1968 .

15. Мансурова Н.Л., Чупринина Р. П., Егорова Н.Б. и др. Антигенспецифическая активность поликомпонентной вакцины при оральном и подкожном введениях.//Журн. Микробиол. 1995. - №1. -с.37-39.

16. Михайлова, И.Н. Первая фаза клинических испытаний противоопухолевой геномодифицированной вакцины, оценка иммунного статуса / И.Н. Михайлова, К.А. Барышников, О.С. Бурова, М.И. Лукашина, А.Л.

17. Смирнова, H.H. Петенко, H.A. Утяшев, JI.В. Демидов, А.Ю. Барышников // Российский биотерапевтический журнал. 2006. - Т. 5, № 3. - С. 51-54.

18. Михайлова, И.Н. Вакцинотерапия меланомы дендритными клетками / И.Н. Михайлова, H.H. Петенко, JI.B. Демидов // Российский биотерапевтический журнал. 2007. - Т. 6, № 3. - С. 8-18.

19. Парсункова К.А. Цитокиновый профиль у больных с диссеминированной меланомой в ходе вакцинотерапии. Автореферат дисс. канд. мед. наук. М., 2010-143 с.

20. Семенов Г.В. Вакуумная сублимационная сушка. Основные понятия и определения.// Материалы научно-технической конференции. Москва. -2005. - - С. 92.

21. Торчилин В.П., Смирнов В.Н., Чазов Е.И. Проблемы и перспективы использования липосом для направленного транспорта лекарств (обзор).// Вопросы медицинской химии. 1982. - № 1(28). - С. 3-12.

22. Фаллер Д.М., Шилдс Д. Молекулярная биология клетки. Руководство для врачей. Пер.с англ. — М.: Бином-Пресс, 2004. С. 69.

23. Финдлея Дж., Эванза У. Биологические мембраны. Методы. Мир, Москва. 1990-С.

24. Харкевич, Г.Ю. Интерфероны альфа в адъювантной терапии меланомы кожи неблагоприятного прогноза: проблемы и перспективы высокодозных режимов / Г.Ю. Харкевич, Л.В. Демидов // Фарматека. 2008. - № 18. - С. 34-41.

25. Шевелев К.Ю. Сублимационная сушка. Описание технологии.// Материалы научно-технической конференции-Москва. 2005. - С. 114.

26. Шубина, И.Ж. Адоптивная иммунотерапия злокачественных новообразований / И.Ж. Шубина, А.Г. Блюменберг, С.М. Волков, JI.B. Демидов, М.В. Киселевский // Вестник Российской академии медицинских наук. 2007. - № 11.-С. 9-15.

27. Aderem A., and Ulevitch, R.L. // Nature 2000. - Vol. 406. - P. 782-787

28. Afzal R. Mohammed Vincent W. Bramwell, Allan G.A. Coombes and Yvonne Perrie Lyophilisation and sterilisation of liposomal vaccines to produce stable and sterile products// Methods Vol. 40, Issue 1, September 2006, Pages 30-38

29. Akasaki Y. Antitumor effect of immunizations with fusions of dendritic and glioma cells in a mouse brain tumor model. / Akasaki Y., Kikuchi Т., Homma S., Abe Т., Kofe D. and Ohno T. // J. Immunother. — 2001 — 24, 106-113

30. Akiyama Y. Clinical response in Japanese metastatic melanoma patients treated with peptide cocktail-pulsed dendritic cells /Akiyama Y, Tanosaki R, Inoue N et al. // J Transl Med — 2005 3:4

31. Albertini G. and Rustichelli F. Effect of gamma irradiation on the liposomal structure.// Liposome Technology. 1993. - Vol.l. - P. 399-428.

32. Asea A, Kraeft SK, Kurt-Jones EA, Stevenson M.A., Chen L.B., Finberg RW. Hsp 70 stimulates cytokine production through a CD 14-dependent pathway, demonstrating its dual role as a chaperone and cytokine. // Nat.Med. 2000. -Vol.6. -P.435-442.

33. Avigan D. Fusion cell vaccination of patients with metastatic breast and renal cancer induces immunological and clinical responses / Avigan D, Vasir B, Gong J et al. // Clin. Cancer Res. 2004; 10: 4699-708.

34. Balch CM. Prognostic factors analysis of 17,600 melanoma patients: validation of the American Joint Committee on Cancer melanoma staging system. / Balch CM, et al // J Clin Oncol — 2001 —19: 36223634

35. Baldo M. Spontaneous regression of subcutaneous metastasis of cutaneous melanoma / Baldo M., Schiavon M. // Plast. Reconstr. Surg. 1992. - 90. - P. 1073-6

36. Banchereau J. Immune and clinical responses in patients with metastatic melanoma to CD34(+) progenitor-derived dendritic cell vaccine. / Banchereau J, Palucka AK, Dhodapkar M et al. // Cancer Res — 2001 — 61:6451-6458

37. Banchereau J. Dendritic cells and the control of immunity / Banchereau J, Steinman RM // Nature 1998, 392:245-252.

38. Bangham A.D., Standish M.M., Watkins J.C. Diffusion of Univalent Ions across the lamellae of Swollen Phospholipids.// J. Mol. Biol. 1965. - No 13. - P. 238-252.

39. Barbuto J. Dendritic cell-tumor cell hybrid vaccination for metastatic cancer / Barbuto JA, Ensina LF, Neves AR et al. // Cancer Immunol. Immunother. 2004; 53: 1111-18.

40. Bastiaannet E. Level of fluorodeoxyglucose uptake predicts risk for recurrence in melanoma patients presenting with lymph node metastases / Bastiaannet E, Hoekstra OS, Oyen WJ, Jager PL, Wobbes T, Hoekstra HJ. // Ann Surg Oncol. 2006;13:919-26

41. Basu S., Binder R.J., Ramalingam T., Srivastava P.K. Heat shock proteins as novel mediators of cytokine secretion by macrophages // Cell Stress Chaperones. 1998.-Vol.3.-P. 11.

42. Blachere N., Li Z., Chandawarcar R. et al. Heat shock protein-peptide complexes, reconstituted in vitro, elicit peptide-specific cytotoxic T lymphocyte response and tumor immunity // J.Exp. Med. 1997. - Vol. 186. - P. 1315-22.

43. Boczkowski D. Dendritic cells pulsed with RNA are potent antigen-presenting cells in vitro and in vivo / Boczkowski D, Nair SK, Snyder D, Gilboa E. // J Exp Med 1996; 184:465-72.

44. Bodurtha A. Spontaneous regression of malig nant melanoma / Bodurtha A. // In: Clarke WH, Goldman M, Mastrangelo JM (eds) Human malignant melanoma. Grune & Stratton, New York, 1979. 227

45. Boon T. Human T cell responses against melanoma / Boon T, Coulie PG, Van den Eynde BJ, et al. // Annu Rev Immunol 24:175-208, 2006

46. Boon T. Human T-Cell Responses Against Melanoma / Boon T., Pierre C., Benoiit J. et al. // Annu. Rev. Immunol. 2006. - 24. - 6.1-6.3

47. Brüggen P. Tumor-specific shared antigenic peptides recognized by human T cells / Brüggen P., Zhang Y., Chaux P. et al. // Immunol. Rev. 2002. - 188. - P. 51-64;

48. Carracosa C., Espejo L., Torrado S. et al. Effect of gamma-sterilization process on PLGA microspheres loaded with insulin-like growth factor-1 (IGF-1) // J. Biomater. Appl. 2003. - Oct. 18(2): 95-108.

49. Celluzzi C. Peptide-pulsed dendritic cells induce antigen-specific; CTL-mediated protective tumor immunity. / Celluzzi CM, Mayordomo JI, Storkus WJ, et al. // J Exp Med 1996;183:283-7

50. Cerundolo V. Dendritic cells: a journey from laboratory to clinic. / Cerundolo V, Hermans IF, Salio M. // Nat Immunol 2004;5:7-10

51. Chang AE. A phase I trial of tumor lysate-pulsed dendritic cells in the treatment of advanced cancer / Chang AE, Redman BG, Whitfield JR et al. // Clin. Cancer Res. 2002; 8: 1021-32.

52. Chengjun Chen, Dandan Han, Cuifang Cai, Xing Tang. An overview of liposome lyophilization and its future potential// J. of Controlled Release -2010. Vol.142. -P.299-311.

53. Copier J. Improving the efficacy of cancer immunotherapy. / Copier J, Dalgleish AG, Britten CM, et al. // Eur J Cancer. 2009;45(8): 1424-1431.

54. Corveleyn S., And Remon J.P. Formulation of a lyophilized dry emultion tablet for delivery of poorly soluble drugs.// Int.J.Pharm. 1998. - No 1(166). - P. 65-70.

55. Costantino H.R., Curley J.G., Wu S., Hsu C.C. Water sorbtion behavior of lyophilized protein/sugar systems and implications for solid-state interactions.// Int.J.Pharm. 1998. - No 2(166). - p. 211-217.

56. Craig E.A., Gross C.A. Is HSP70 the cellular thermometer? // Trends Biochem.Science. 1991.- Vol. 16.-P. 135-40.

57. Crowe L.M., Womersley C., Crowe, J. H. Preservation of Freeze-Dried Liposomes by Trehalose.// Arch. Biochem. Biophys. 1985. - No 242. - p. 240-247.

58. Cullis P., Hope M., Bally M. et al. Liposomes as pharmaceuticals // In: Ostro M. (Ed.). Liposomes from biophysics to therapeutics. New York, Marcel Dekker, -1987.

59. Czerkinsky C. A solid-phase enzyme-linked immunospot (ELISPOT) assay for enumeration of specific antibody-secreting cells. / Czerkinsky C, Nilsson L, Nygren H, Ouchterlony O, Tarkowski A. // J Immunol Methods — 1983 — 65 (1-2): 109-21

60. Douglas S. Watson, Aaron N. Endsley, Leaf Huang . Design considerations for liposomal vaccines: Influence of formulation parameters on antibody and cell-mediated immune responses to liposome associated antigens // Vaccine. 2012 Mar 16;30(13):2256-72.

61. Dutoit V. Degeneracy of antigen recognition as the molecular basis for the high frequency of naive A2/Melan-A peptide multimer+ CD8+ T cells in humans / DutoitV., Rubio-Godoy V., PittetM. etal. //J. Exp. Med. 2002. - 196.-P. 207-16

62. Eggermont MM. Randomized trials in melanoma: An update. / Eggermont MM // Surg Oncol Clin N Am 15:439-451, 2006

63. Eigentier TK. Palliative treatment of disseminated malignant melanoma: A systemic review of 41 randomised clinical trials / Eigentler TK, Caroli UM, Radny P, et al // Lancet Oncol 4:748-759, 2003

64. Erdogan S., Ozer A., et al. Gamma Irradiation of Liposomal Phospholipids //J.Pharm. Science, 31, 2006 - P. 182-190.

65. Escobar A. Dendritic cell immunizations alone or combined with low doses of interleukin-2 induce speciWc immune responses in melanoma patients / Escobar A, Lopez M, Serrano A et al. // Clin Exp Immunol — 2005 — 142:555-568

66. Eynde B.J. T cell defined tumor antigens / Eynde B J., Bruggen P. // Curr. Opin. Immunol. 1997. - 9(5). - 684-93;

67. Ferrini U., Falcioni R., Delpino A. et al. Heat-shock proteins produced by two human melanoma cell lines: Absence of correlation with thermosensitivity // Int. J. of Cancer. 2006. - Vol. 34. - P. 651-5.

68. Finke LH. Lessons from randomized phase III studies with active cancer immunotherapies—outcomes from the 2006 meeting of the Cancer Vaccine Consortium (CVC) / Finke LH, Wentworth K, Blumenstein B, et al. // Vaccine. 2007;25(suppl 2):B97-B109.

69. Francis Puisieux, Patrick Couvreur, Jacques Delattre, Jean-Pjilippe Devissaguet. Liposome, new systems and new trends in their application. Editions de Sante. 1995 -P.797.

70. Franks F. Freeze-dryind of bioproducts. Putting principles into practice.// Eur.J.Pharm.Biopharm. 1998. - No 3(45). - P. 231-237.

71. Gitlitz BJ. A pilot trial of tumor lysate-loaded dendritic cells for the treatment of metastatic renal cell carcinoma / Gitlitz BJ, Belldegrun AS, Zisman A et al. // J. Immunother. 2003; 26: 412-19.

72. Gogas H. Prognostic significance of autoimmunity during treatment of melanoma with interferon / Gogas, H., Ioannovich, J., Dafni, U., et al. // N Engl J Med 2006;354:709-18

73. Gong J. Induction of antigen-specific antitumor immunity with adenovirus transduced dendritic cells / Gong J, Chen L, Chen D, et al. // Gene Ther 1997;4:1023-8

74. Gong J. Reversal of tolerance to human MUC1 antigen in MUC1 transgenic mice immunized with fusions of dendritic and carcinoma cells / Gong J., Chen D., Kashiwaba M., et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1998; 95:6279-83

75. Gong J. Fusions of human ovarian carcinoma cells with autologous or allogeneic dendritic cells induce antitumor immunity / Gong J., Nikrui N., Chen D., et al. // J. Immunol., 2000; 165:1705-11

76. Gregoriadis G. Engineering liposomes for drug delivery progress and problems//Tibtech Dec.1995. - Vol. 13. - P.527-537.

77. Gregoriadis G. Liposome technology. Volume I. Liposome preparation and related techniques. 3rd edition Informa Healthcare USA. 2006 - P.324.

78. Gregoriadis G. Liposome technology. Volume II. Entrapment of Drugs and Other Materials into Liposomes. 3rd edition. Informa Healthcare USA. 2006 - 397 p.

79. Guidance for industry. Liposome Drug Products» FDA. 2002.

80. Guo G. Antitumor activity of a fusion of esophageal carcinoma cells with dendritic cells derived from cord blood / Guo G., Chen S., Zhang J., Luo L., Yu J., Dong H., Xu H., Su Z. Wu L. // Vaccine — 2005 — 23, 5225-5230

81. Guo HB. Clinical significance of serum S100 in metastatic malignant melanoma / Guo HB, Stoffel-Wagner B, Bierwirth T, Mezger J, Klingmuller D. // Eur J Cancer. 1995;31A:924-8

82. Hanagiri T. Analysis of one of the rare melanoma patients with a spontaneous CTL response to a MAGE-A3 peptide presented by HLA-A1 / Hanagiri T., Bar en N., Neyns B. et al. // Cancer Immunol Immunother. 2006. - 55(2). - P. 178-8

83. Harris M. Monoclonal antibodies as therapeutic agents for cancer. / Harris M. // Lancet Oncol 2004; 5:292-302

84. Hauschild A. Predictive value of serum S100B for monitoring patients with metastatic melanoma during chemotherapy and/or immunotherapy / Hauschild A, etal.//Br J Dermatol — 1999 — 140: 1065-1071

85. Hauser H., Strauss G. Stabilization of small unilamellar phospholipid vesicles during spray-drying.// Biochim. Biophys. Acta. 1987. - No 897. - p. 331-334.

86. He L., Guan K., Ye H Heat shock protein 70 expression in relation to apoptosis in primary bladder transitional cell carcinoma // Cninese Med. J. — 2005. Vol. 118(24). - P. 2093-6.

87. Hersey P. Phase I/II study of treatment with dendritic cell vaccines in patients with disseminated melanoma / Hersey P, Menzies SW, Halliday GM et al. // Cancer Immunol Immunother — 2004 — 53:125-134

88. Hirschowitz EA. Immunization of NSCLC patients with antigen-pulsed immature autologous dendritic cells. / Hirschowitz EA, Foody T, Hidalgo GE, Yannelli JR. // Lung Cancer. 2007 Sep;57(3):365-72.

89. Hobeika AC. Enumerating antigen-specific T-cell responses in peripheral blood: a comparison of peptide MHC Tetramer, ELISpot, and intracellular cytokine analysis. / Hobeika AC, Morse MA, Osada T, et al. // J Immunother. 2005;28(l):63-72.

90. Holtl L. Allogeneic dendritic cell vaccination against metastatic renal cell carcinoma with or without cyclophosphamide / Holtl L, Ramoner R, Zelle-Rieser C et al. // Cancer Immunol. Immunother. 2005; 54: 663-70.

91. Holtl L. Immunotherapy of metastatic renal cell carcinoma with tumor lysate-pulsed autologous dendritic cell / Holtl L, Zelle-Rieser C, Gander H et al. // Clin. Cancer Res. 2002; 8: 3369-76.

92. Hoos A. A clinical development paradigm for cancer vaccines and related biologies. / Hoos A, Parmiani G, Hege K et al. // J Immunother — 2007 — 30:1-15

93. Hoos A. Improved Endpoints for Cancer Immunotherapy Trials. / Hoos, A., Eggermont, A., Janetzki, S., Wolchok, J. et al. // J Natl Cancer Inst. 2010 Sep 22; 102(18): 1388-1397.

94. Houghton N. Immunity against cancer: lessons learned from melanoma / Houghton N., Gold J., Blachere N. et al. //Curr. Opin. Immunol. 2001. - 13(2). -P. 134-40

95. Hsu FJ. Vaccination of patients with B-cell lymphoma using autologous antigen-pulsed dendritic cells / Hsu FJ, Benike C, Fagnoni F, et al. // Nat Med 1996;2:52-8

96. Iinuma T. Prevention of gastrointestinal tumors based on adenomatous polyposis coli gene mutation by dendritic cell vaccine. / Iinuma T., Homma S., Noda T., Kufe D., Ohno T. and Toda G. // J. Clin. Invest. — 2004 — 113, 1307-1317

97. Jackel A. S-100 beta protein in serum, a tumor marker in malignant melanoma — current state of knowledge and clinical experience. / Jackel A, Deichmann M, Waldmann V, Bock M, Naher H. // Hautarzt. 1999;50:250-6

98. Janetzki S. MIATA—minimal information about T cell assays. / Janetzki S, Britten CM, Kalos M, et al. // Immunity. 2009;31(4):527-528.

99. Jiang S., Nail S.L. Effect of process conditions on recovery of protein activity after freezing and freeze-drying.// Eur.J.Pharm.Biopharm. 1998. - No 3(45). - P. 249-256.

100. John N.Abelson, Melvin I. Simon. Methods in Enzymology -2003.- Vol. 373.

101. Kagawa Y., Racker E. Partial resolution of the enzymes catalyzing oxidative phosphorylation.// J Biol Chem. - No 246. - P. 5477-5487.

102. Keilholz U. Immunologic monitoring of cancer vaccine therapy: results of a workshop sponsored by the Society for Biological Therapy. / Keilholz U, Weber J, Finke LH, et al. // J Immunother. 2002;25(2):97-138.

103. Kikuchi T. Results of a phase I clinical trial of vaccination of glioma patients with fusions of dendritic and glioma cells. / Kikuchi T, Akasaki Y, Irie M, Homma S, Abe T, Ohno T. // Cancer Immunol Immunother. 2001 Sep;50(7):337-44

104. Kirby, Gregoriadis. Dehydration-Rehydration Vesicles: A Simple Method for High Yield Drug Entrapment in Liposomes.// Biotechnology. 1984. - No 2. - P. 979-984.

105. Koido S. Induction of antitumor immunity by vaccination of dendritic cells transfected with MUC1RNA. / Koido S, Kashiwaba M, Chen D, et al. // J Immunol 2000;165:5713-9

106. Koido S. Induction of antigen-specific CD4 and CD8 mediated T cell responses by fusion of autologous dendritic cells and metastatic colorectal cancer cells. / Koido S., Hara E., Torii A., Homma S., Toyama Y., Kawahara H., Ogawa

107. M., Watanabe M., Yanaga K., Fujise K., Gong J., Toda G. // Int. J. Cancer, 2005; 117,587-595.

108. Koido S. Dendritic cells fused with human cancer cells: morphology, antigen expression and T cell stimulation. / Koido S., Ohana M., Liu C., Nikrui N., Durfee J., Lerner A., Gong J. // Clin. Immunol., 2004; 113, 261-269

109. Koido S. The kinetics of in vivo priming of CD4 and CD8 T cells by dendritic/tumor fusion cells in MUC1-transgenic mice. / Koido S., Tanaka Y., Chen D., Kufe D., Gong J. // J. Immunol. 2002; 168:2111-7

110. Kruijff S. S-100B concentrations predict disease-free survival in stage III melanoma patients. / Kruijff S, Bastiaannet E, Kobold AC, van Ginkel RJ, Suurmeijer AJ, Hoekstra HJ.// Ann Surg Oncol. 2009 Dec;16(12):3455-62

111. Kyte J. T cell responses in melanoma patients after vaccination with tumor-mRNA transfected dendritic cells. / Kyte JA, Kvalheim G, Lislerud K. //Cancer Immunol Immunother 56:659-675, 2007

112. Linette GP. Immunization using autologous dendritic cells pulsed with the melanoma-associated antigen gplOO-derived G280-9V peptide elicits CD8+ immunity. / Linette GP, Zhang D, Hodi FS et al // Clin Cancer Res — 2005 — 11:7692-7699

113. Liu Y. Hierarchy of alpha fetoprotein (AFP)-specific T cell responses in subjects with AFP-positive hepatocellular cancer. / Liu Y, Daley S, Evdokimova VN, Zdobinski DD, Potter DM, Butterfield LH. // J Immunol 2006;177: 712-721

114. Lonchay C. Correlation between tumor regression and T cell responses in melanoma patients vaccinated with a MAGE antigen / Lonchay C., Bruggen P.,

115. Connerotte T. et al. // Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 2004. - 101 (Suppl.2).-P. 14631-8

116. Lotze MT. Clinical effects and toxicity of interleukin-2 in patients with cancer. / Lotze MT, Matoiy YL, Rayner AA et al. // Cancer 1986; 58:2764-72.

117. Lutsiak C., Glen S. Kwon, and John Samuel Analysis of Peptide and Lipopeptide Content in Liposomes// J Pharm Pharmaceut Sei 2002,-Vol.5-P.279-284.

118. Maecker HT. The role of immune monitoring in evaluating cancer immunotherapy. / Maecker HT. // In: Disis ML, eds. Cancer Drug Discovery and Development: Immunotherapy of Cancer.Totowa, NJ: Humana Press; 2005:59-72.

119. Mohammad Riaz Liposome es preparation methods// Pakistan Journal of Pharm.Sciences 1996. - Vol.l9(l). - P.65-77.

120. Mohammad Riaz Stability and uses of liposomes //Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences-1995.-Vol. 8(2), pp.69-79.

121. Moore A. Clinical significance of serum SI00 in metastatic malignant melanoma. / Moore et al. // Eur J Cancer — 1995 — 31A: 1898-1902

122. Morton D. Vaccine Therapy for Malignant Melanoma / Morton D., Barth A. // CA Cancer J. Clin. 1996. - 46(4). - P. 225

123. Nestle FO. Vaccination of melanoma patients with peptide-or tumor lysate-pulsed dendritic cells. / Nestle FO, Alijagic S, Gilliet M et al. // Nat. Med. 1998; 4: 328-32.

124. O'Neill D. Manipulating dendritic cell biology for the active immunotherapy of cancer. / O'Neill DW, Adams S, Bhardwaj N. // Blood 2004;104:2235-2246.

125. O'Rourke MG. Durable complete clinical responses in a phase I/II trial using an autologous melanoma cell/dendritic cell vaccine. / O'Rourke MG, Johnson M, Lanagan C, et al.// Cancer Immunol Immunother 52:387-395, 2003

126. Osanto S. Vaccine Trials for the Clinician: Prospects for Tumor Antigens/ Osanto S. // The Oncologist. 1997. - 2. - P. 284-99

127. Paglia P. Murine dendritic cells loaded in vitro with soluble protein prime cytotoxic T lymphocytes against tumor antigen in vivo. / Paglia P, Chiodoni C, Rodolfo, M, et al. // J Exp Med 183:317-322, 1996

128. Rapoport AP. Restoration of immunity in lymphopenic individuals with cancer by vaccination and adoptive T-cell transfer. / Rapoport AP, Stadtmauer EA, Aqui N et al. // Nat Med — 2005—11:1230-1237

129. Ribas A. Update on immunotherapy for melanoma. / Ribas A. // J Natl Compr Cane. Netw 2006, 4:687-694.

130. Rickwood D., Hames B.D. Liposomes : a practical approach. Practical Approach Series. Oil Press at Oxford University Press. 1990 - P. 231 .

131. Ridolfi R. Improved overall survival in dendritic cell vaccination-induced immunoreactive subgroup of advanced melanoma patients. / Ridolfi R, Petrini M, Fiammenghi L et al. // J Transl Med — 2006 — 4:36

132. Romero P. Monitoring tumor antigen specific T-cell responses in cancer patients and phase I clinical trials of peptide-based vaccination. / Romero P, Cerottini JC, Speiser DE. // Cancer Immunol Immunother. 2004 Mar;53(3):249-55.

133. Roncarolo MG. Differentiation of T regulatory cells by immature dendritic cell. / Roncarolo MG, Levings MK, Traversari C. // J. Exp. Med. 2001; 193: F5-9.

134. Rosenberg SA. Cancer immunotherapy: moving beyond current vaccines. / Rosenberg SA, Yang JC, Restifo NP // Nat Med. 2004;10(9):909-915.

135. Salcedo M. Vaccination of melanoma patients using dendritic cells loaded with an allogeneic tumor cell lysate. / Salcedo M, Bercovici N, Taylor R, et al. // Cancer Immunol Immunother 55:819-829, 2006

136. Sambrook J., Fritsch E., Maniatis T. Molecular cloning: A Laboratory Manualj2 edn). Cold Spring Harbor Laboratory Press: Cold Spring Harbor, 1989. -P. 1847.

137. Seliger B., Ritz U., Ferron S. Molecular mechanisms of HLA class I antigen abnormalities following viral infection and transformation // Int. J. Cancer. -2006.-Vol. 118.-P. 129-38.

138. Su Z. Immunological and clinical responses in metastatic renal cancer patients vaccinated with tumor RNA-transfected dendritic cells. / Su Z, Dannull J, Heiser A et al. // Cancer Res. 2003; 63: 2127-33.

139. Subhash C. Basu, Manju Basu Methods in Molecular Biology.Liposome Methods and Protocols.-2010.-Vol. 199.

140. Suzue K., Zhou X., Eisen H.N., Young R.A. Heat shock fusion proteins as vehicles for antigen delivery into magor histocompatibility complex class I presentation pathway // Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997. - Vol. 94. - P. 13146-51.

141. Szoka F., Papahadjopoulos Jr. D. Procedure for preparation of liposomes with large internal aqueous space and high capture by reverse-phase evaporation.// Proc Natl Acad Sci USA.- 1978. No 75(9). - p. 4194-4198.

142. Takahashi T. Dendritic cell vaccination for patients with chronic myelogenous leukemia. / Takahashi T, Tanaka Y, Nieda M et al. // Leuk. Res. 2003; 27: 795-802.

143. Takeuchi H., Kojima H., Yamamoto H., Kawashima Y. Evaluation of circulation profiles of liposomes coated with hydrophilic polymers having different molecular weights in rats.// J. Control. Release. 2001. - No 75. - p. 83.-91.

144. Tanaka Y. Vaccination with allogeneic dendritic cells fused to carcinoma cells induces antitumor immunity in MUC1 transgenic mice. / Tanaka Y., Koido S.,

145. Chen D., Gendler S. J., Kufe D. and Gong J. // Clin. Immunol. — 2001 — 101, 192-200.

146. Toma K., Vetter O. Pharmaceutical quality of liposomes, requirements for applicability // In: Puisieux F., Couvreur P., Delattre J., Devissaguet J.P. (Eds.). Liposomes, New systems fnd new trends in their applications. Editions de Sante. , - 1995.

147. Trefzer U. Tumour-dendritic hybrid cell vaccination for the treatment of patients with malignant melanoma: Immunological effects and clinical results. / Trefzer U, Herberth G, Wohlan K, et al // Vaccine 23:2367-2373, 2005

148. Vemuri S., Yu C.D., de Groottt J.S. et al. Effect of sugars on freeze Thaw and lyophilization of liposomes // Drug Dev.Ind.Pharm. 1991. - No 3(17). - P. 327-348.

149. Volkman Weissig Liposomes Methods and Protocols. Biological membrane models.-2010.-Vol.2.

150. Walker EB. Monitoring immune responses in cancer patients receiving tumor vaccines. / Walker EB, Disis ML. // Int Rev Immunol. 2003;22(3^):283-319.

151. Wang J. Eliciting T cell immunity against poorly immunogenic tumors by immunization with dendritic cell-tumor fusion vaccines. / Wang J., Saffold S., Cao X. T., Krauss J. and Chen W. // J. Immunol. — 1998 — 161, 5516-5524

152. Wheeler CJ. Vaccination elicits correlated immune and clinical responses in glioblastoma multiforme patients. / Wheeler CJ, Black KL, Liu G, et al. // Cancer Res 2008;68(14):5955-64.

153. Wierecky J. Immunologic and clinical responses after vaccinations with peptide-pulsed dendritic cells in metastatic renal cancer patients. / Wierecky J, Muller MR, Wirths S. // Cancer Res. 2006; 66: 5910-18.

154. Willemer H. Troubleshooting Lyophilisation.// Pharm. Techn. Europe. 1999. -No 5(11).-P. 15-22.

155. Yin Hwa Lai & Chong Wang. Delivery strategies of melanoma vaccines: an overview//Expert Opin. Drug Deliv. -2008.- 5(9):979-1001.

156. Zhengua Zhong, Xin Wei, Baowen Q. et al. A novel liposomal vaccine improves humoral immunity and prevents tumor pulmonary metastasis in mice // Int.J.Pharm. 2010. - Oct. - P. 156-162.

157. Zorn E. A MAGE-6-encoded peptide is recognized by expanded lymphocytes infiltrating a spontaneously regressing human primary melanoma lesion. / Zorn E, Hercend T. // Eur. J.Immunol. 1999. - 29. - P. 602-7.

158. Zuidam NJ, Lee SSL, Crommelin DJA. Gamma irradiation of non-frozen, frozen and freeze-dried liposomes. //Pharm Res.- 1995.-12 P.1761-1768.