«Разработка и стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата» тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат наук Коробко Валентина Михайловна
Коробко Валентина Михайловна
кандидат наук
2016
- Специальность ВАК РФ14.04.02
- Количество страниц 149
Оглавление диссертации кандидат наук Коробко Валентина Михайловна
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1. Свойства монооксида азота и его фармакологические действия в живых системах
1.1.1. Физико-химические свойства монооксида азота
1.1.2. Механизмы образования NO in vivo. Роль NO-синтаз
1.1.3. Пути метаболизма NO в организме
1.1.4. Монооксид азота как потенциальное лекарственное средство
1.2. NO-донирующие биологически активные соединения. Нитрозильные комплексы как доноры монооксида азота в организме
1.2.1. Медицинские технологии с использованием NO
1.2.2. Нитрозильные комплексы, генерирующие NO, и их возможное применение в медицине
1.2.3. Механизм генерации NO из нитросодержащих препаратов
1.3. NO-НПВС как NO-донирующие биологически активные вещества
1.4. Роль нитроксидных радикалов - производных ТЕМПО в биологических процессах. Лекарственные формы с нитроксильными радикалами как потенциальные антиоксидантные препараты
1.4.1. ТЕМПО и его производные как миметики СОД и их антиоксидантная активность
1.4.2. Нитроксильные радикалы как компоненты потенциальных антиоксидантных препаратов
1.5. Методы анализа монооксида азота и его метаболитов
1.5.1. Метод ЭПР-спектроскопии при идентификации нитроксильных радикалов
1.5.2. Хемилюминесцентный метод определения NO
1.5.3. Электрохимический метод определения NO
1.5.4. Определение содержания метаболитов монооксида азота в биологических образцах. Спектрофотометрический метод определения
нитрит-аниона
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты, материалы и приборы исследования
2.2. Методика получения монослоев Ленгмюра
2.2.1.Формирование монослоев и получение изотерм сжатия
2.3. Методика исследования биомиметического взаимодействия бис-нитроксидного метанофуллерена и ТЕМПО с цитохромом с
2.4. Аналитические методики определения 5-нитрофурала, цитохрома с, натрия аскорбата и цинка оксида
2.4.1. Идентификация и количественное определение 5-нитрофурала и натрия аскорбата методом ВЭЖХ
2.4.2. Количественное определение цитохрома с атомно-абсорбционной спектроскопией в порошке
2.4.3. Количественное определение цинка оксида в порошке
2.5. Исследования влияния бис-нитроксидного метанофуллерена на антиоксидантные свойства дигидрокверцетина
2.6. Исследования эффективности действия мазей с ксимедоном и бис-нитроксидным метанофуллереном на процессы заживления ожоговых ран у крыс и антиоксидантные свойства
2.7. Методика приготовления ранозаживляющих препаратов
2.8. Исследование эффективности действия ранозаживляющего препарата на процессы заживления ожоговых ран у крыс
ГЛАВА 3. БИОМИМЕТИЧЕСКОЕ ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОССТАНОВИТЕЛЬНОЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ НИТРОКСИДНЫХ СОЕДИНЕНИЙ С
ЛЕКАРСТВЕННЫМИ ВЕЩЕСТВАМИ. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Изучение взаимодействия газообразного монооксида азота и нитрита натрия с цитохромом с
3.2. Исследование биомиметического взаимодействия бис-нитроксидного метанофуллерена и ТЕМПО с цитохромом с
3.3. Влияние (КО)2-МФ на восстановление окисленных форм антиоксидантов и на их антиоксидантную активность
3.3.1. Изучение взаимодействия бис-нитроксидного малонатного метанофуллерена с дигидрокверцетином и аскорбиновой кислотой
3.3.2. Влияние бис-нитроксидного малонатного метанофуллерена на антиоксидантные свойства БАД с ДКВ
3.3.3. Биомиметическое взаимодействие бис-нитроксидного малонатного метанофуллерена с ксимедоном
3.3.4. Влияние бис-нитроксидного малонатного метанофуллерена на антиоксидантные свойства ксимедона
ГЛАВА 4. РАЗРАБОТКА И СТАНДАРТИЗАЦИЯ НОВОГО РАНОЗАЖИВЛЯЮЩЕГО ПРЕПАРАТА
4.1. Обоснование состава ранозаживляющих препаратов
4.2. Разработка методик установления подлинности и количественного определения активных компонентов в ЛФ «Фуроцит»
4.2.1. Разработка пробоподготовки для проведения анализа активных компонентов противоожогового порошка «Фуроцит»
4.2.2. Разработка норм качества и валидационная оценка методики определения 5-нитрофурала и натрия аскорбата в порошке «Фуроцит»
4.2.3. Разработка норм качества и валидационных характеристик методики определения цитохрома с в порошке «Фуроцит»
4.2.4. Разработка норм качества и валидационная оценка методики определения цинка оксида в порошке «Фуроцит»
4.2.5. Спецификация на новый противоожоговый порошок «Фуроцит»
4.3. Вазодилатирующий эффект ранозаживляющего препарата на основе нитросодержащего компонента и цитохрома с
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
113
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение 1. Проект фармакопейной статьи на ранозаживляющий порошок
для наружного применения «Фуроцит»
Приложения 2. Акты внедрения
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ТЕМПО ДКВ
(т)2-МФ
ЕБКР
СОД
СРО
ПОЛ
НАД
НАДФ
ФМН
ДК
ТК
ОШ
АОА
УФ-спектроскопия
ААС
ВЭЖХ
СТС
АФК
НПВС
2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил дигидрокверцетин
61 -бис-(О-2,2,6,6-тетраметил-4-оксипиперидинил-
оксил)-61 -метано [60]фуллерен
эндотелиальный релаксирующий фактор
супероксиддисмутаза
свободно-радикальное окисление
перекисное окисление липидов
никотинамиддинуклеотид
никотинамиддинуклеотид-фосфат
флавинмононуклеотид
диеновые конъюгаты
триеновые конъюгаты
основания Шиффа
антиоксидантная общая активность
ультрафиолетовая спектроскопия
атомно-абсорбционная спектроскопия высокоэффективная жидкостная хроматография триплетная сверхтонкая структура активная форма кислорода нестероидное противовоспалительное средство
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», 14.04.02 шифр ВАК
Молекулярное моделирование биохимических реакций нитроксильных радикалов и динитрозильных комплексов железа2022 год, кандидат наук Крапивин Владимир Борисович
Особенности распада нитрозильных комплексов железа структурного "μ-S" и "μ-N-C-S" типа в различных растворителях. Их взаимодействие с глутатионом и гемопротеидами2017 год, кандидат наук Покидова, Олеся Викторовна
Метаболиты оксида азота в процессах свободнорадикального окисления в модельных системах и ткани миокарда2008 год, кандидат физико-математических наук Гудков, Леонид Леонидович
Влияние метаболитов оксида азота на окислительную модификацию белков и липидов2024 год, кандидат наук Пугаченко Игорь Сергеевич
Метаболические эффекты динитрозильных комплексов железа в отношении системы крови2017 год, кандидат наук Давыдюк, Алексей Викторович
Введение диссертации (часть автореферата) на тему ««Разработка и стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата»»
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы. Монооксид азота - важнейший регулятор эндотели-альной релаксации сосудов, передачи нервных сигналов, обеспечивает антибактериальное, кардиологическое, иммуностимулирующее, цитотоксическое, противовоспалительное и антиоксидантное действия.
Особый интерес вызывают лекарственные средства (ЛС), содержащие в своем составе NO-донирующий фрагмент (нитриты, нитраты и др.), способный высвобождать NO под действием ферментов. К ним относится группа NO-НПВС, превосходящая свойства исходного НПВС, и обладающая противоопухолевым, обезболивающим, антитромбоцитным действиями без негативного влияния на слизистую желудка (A.M. Qandil, 2012). Предложено лечение онкологических, сердечно-сосудистых заболеваний и раневых процессов, использующее NO либо в газообразном состоянии, либо получаемого из сложных нитроксидных комплексов азот- и серосодержащих соединений в присутствии ионов железа (С.М. Ал-дошин 2011, А.Ф. Ванин, 2008). Однако эти ЛС несовершенны, поскольку выделяемый NO трудно дозировать вследствие быстрого окисления на воздухе, имеют низкую биодоступность и возникают сложности при их стандартизации.
Близкими к NO свойствами обладают нитроксидные соединения, содержащие в своем составе стабильные радикалы, такие как ТЕМПО (2,2,6,6 - тетраме-тилпиперидин-1-оксил радикал), например, ТЕМПО - НПВС.
Производные ТЕМПО являются эффективными антиоксидантами и могут быть использованы в качестве имитации супероксиддисмутазы (СОД) и NO. Достоинством производных ТЕМПО, в отличие от NO-высвобождающих ЛС, является возможность изучения физико-химических закономерностей при создании новых ЛС, содержащих нитроксидные соединения, используя ТЕМПО как спиновую метку, на биомиметической модели red-ox процессов с участием NO частиц и ионов железа.
3~ь 2~ь
Изучение свойств нитрозильных комплексов цитохрома с (cyt c /cyt c ), полученных под действием доступных нитро- и нитроксидсодержащих ЛВ в раз-
личных условиях позволяет сформулировать требования для получения новых NO-высвобождающих ЛС.
Степень разработанности темы. Ранее показана возможность образования Fe-содержащих нитрозильных комплексов и последующей генерации NO из серосодержащих ЛВ, диэтилдитиокарбаматов, тиолатов (С.М. Алдошин, Н.А. Санина, 2008), 5-нитрофуранов и K4[Fe(CN)6] (Н.Б. Григорьев, В.Г. Граник, 1999). Быстрое окисление NO и превращение его в токсичные пероксинитритные частицы не позволяют создать стабильные NO-генерирующие ЛС в этих системах.
Продемонстрированы противоопухолевые свойства бис-нитроксидного ма-лонатного метанофуллерена ((NO^-МФ) (И.А. Нуретдинов, 2007). Антиокси-дантная активность, стабильность и способность (NO^-МФ образовывать ленгмюровские и адслои делают это соединение удобной биомиметической моделью изучения red-ox свойств NO-содержащих соединений по отношению к ЛВ, а также компонентом NO-ЛС.
Следует отметить, что, несмотря на перспективность NO-высвобождающих ЛС как для системного, так и для наружного использования, серьезные исследования по разработке новых NO-ЛС из доступных NO-содержащих ЛВ не проводились и на фармацевтическом рынке такие ЛС отсутствуют.
Целью настоящей работы является исследование физико-химических свойств нитроксидных и нитроксид-высвобождающих соединений, и разработка ранозаживляющего препарата, содержащих эти соединения. Для достижения поставленной цели необходимо решить следующие задачи:
1. Изучение восстановления NO-фрагментом цитохрома с - cyt c3+ на биомиметической модели NO-радикальной активности с использованием бис-нитроксидного малонатного метанофуллерена ((NO^-МФ).
2. Исследование влияния (NO^-МФ как соединения со стабильным NO-радикалом на антиоксидантные свойства ксимедона.
3. Экспериментальное обоснование состава ранозаживляющего препарата с натрия нитритом, генерирующим монооксид азота и нитроксидные комплексы в растворах, и условий регулируемого высвобождения NO.
4. Выбор NO-высвобождающих компонентов из класса антибактериальных нитропрепаратов и обоснование состава ранозаживляющего порошка наружного применения.
5. Изучение ранозаживляющих и вазодилатирующих свойств разрабатываемого ранозаживляющего препарата, содержащего нитропрепараты, в эксперименте на животных на модели ожоговой раны.
6. Разработка методов идентификации и количественного определения всех компонентов противоожогового порошка.
7. Проведение валидационной оценки методов количественного определения всех компонентов противоожогового порошка.
Научная новизна.
• Впервые установлена роль цитохрома с как маркера окислительно-восстановительных процессов с участием нитроксидного фрагмента - аналога монооксида азота, на примере нитроксидного метанофуллерена ((NO)2-M^. Выявлено влияние (NO^-МФ на увеличение антиоксидантной активности каталазы и SOD под действием ксимедона в эксперименте на крысах.
• Впервые разработаны составы новых противоожоговых препаратов, содержащие NO-высвобождающий компонент, эффективность которых доказана в эксперименте на крысах.
• Впервые разработаны методики идентификации и количественного определения 5-нитрофурала и натрия аскорбата с использованием УФ-спектроскопии и ОФ ВЭЖ хроматографии, а также количественного определения железа в cyt с и цинка в цинка оксиде в порошке. Все методики удовлетворяют требованиям по правильности, воспроизводимости, линейности и сходимости.
Научно-практическая значимость и внедрение результатов исследования. Обоснованы составы новых противоожоговых препаратов, содержащих NO-высвобождающий компонент. Изучены ранозаживляющие и вазодилатирующие свойства разрабатываемого ранозаживляющего препарата. Проведена валидаци-онная оценка методов количественного определения всех компонентов противоожогового порошка. Результаты диссертационных исследований используются в
учебном процессе и научно-исследовательской работе на кафедре фармацевтической химии и фармакогнозии ГБОУ ВПО НижГМА Минздрава России, а также в учебный процесс государственного бюджетного образовательного учреждения среднего профессионального образования Нижегородской области «Нижегородский медицинский базовый колледж». Полученные данные используются в системе мониторинга качества лекарственных средств в государственном автономном учреждении здравоохранения Нижегородской области «Нижегородский областной центр по контролю качества и сертификации лекарственных средств».
Методология и методы исследования. Методология диссертационного исследования построена на изучении и обобщении литературных данных по изучению физико-химических, фармакологических свойств монооксида азота, N0-высвобождающих препаратов, и препаратов на их основе. В соответствии с поставленной целью и вытекающими из нее задачами разработан план выполнения диссертационной работы, определены объекты научного исследования и подобран перечень современных методов изучения.
Работа была выполнена с использованием современных физико-химических методов анализа (иУ-у1Б спектроскопия, тензиометрические измерения, ЭПР-спектроскопия, высокоэффективная жидкостная хроматография, атомно-абсорбционный спектрофотометр, биохемилюминесцентный анализ). Полученные результаты систематизированы и статически обработаны, на основании этого сделаны выводы и даны практические рекомендации.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтической науки. Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ ГБОУ ВПО НижГМА Минздрава России (номер государственной регистрации 01201063248) по научной проблеме «Разработка и исследование новых лекарственных средств на основе природных и синтетических веществ».
Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Диссертационная работа соответствует паспорту специальности 14.04.02 Фармацевтическая химия, фармакогнозия по нескольким областям исследований.
Положения, выносимые на защиту:
1. Результаты физико-химических исследований (электронная спектроскопия, спектроскопия ЭПР, тензиометрический метод изучения п-А изотерм монослоев, потенциометрия, методики определения концентрации монооксида азота и нит-роксидных частиц) окислительно-восстановительного взаимодействия нитрок-сидных соединений с биологически активными веществами.
2. Доказательства (эксперимент на крысах) усиления антиоксидантной и репа-рантной активности препаратов с ксимедоном под действием NO-радикального фрагмента бис-нитроксидного метанофуллерена.
3. Экспериментальное обоснование оптимального состава нитроксид-генерирующего противоожогового порошка с 5-нитрофуралом.
4. Результаты по изучению вазодилатирующих и репарантных свойств препарата, содержащего 5-нитрофурал, цитохром с, натрия аскорбат, цинка оксид и крахмал.
5. Методика идентификации и количественного определения УФ-спектрального и ОФ ВЭЖ-хроматографического анализов 5-нитрофурала и натрия аскорбата в сложной лекарственной форме - порошке.
6. Методика идентификации и количественного определения УФ-спектрального и атомно-абсорбционного спектрального анализов цитохрома с в порошке.
7. Результаты валидационной характеристики методик количественного определения по показателям линейности, воспроизводимости, сходимости, правильности всех компонентов порошка.
Степень достоверности научных положений и выводов базируется на достаточных по своему объему данных и количеству материала, современных методах исследования и статистической обработке данных.
Апробация работы. Результаты диссертационной работы были представлены на XI научной сессии молодых ученых и студентов «Современные решения актуальных научных проблем в медицине» (Нижний Новгород, 2012); IX Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Озон, активные формы кислорода, оксид азота и высокоинтенсивные физические факторы в биологии и медицине» (Нижний Новгород, 2013); I Всероссийской XII
ежегодной научной сессии молодых ученых и студентов с международным участием «Современные решения актуальных научных проблем в медицине» (Нижний Новгород, 2013); II Международной научно-практической конференции «Теоретические и прикладные аспекты современной науки» (Белгород, 2014); II Всероссийской с международным участием XIII научной сессии молодых ученых и студентов «Современные решения актуальных научных проблем в медицине» (Нижний Новгород, 2015 г.); III Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы медицины в современных условиях» (Санкт-Петербург, 2016 г.); VIII Международной научно-практической конференции «Приоритетные направления развития науки и образования». (г. Чебоксары, 2016); XXIV Международная научно-практическая конференция «Фундаментальные и прикладные исследования проблемы и результаты» (г. Новосибирск, 2016).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 работ, из них 5 в журналах, включенных ВАК Минобрнауки РФ в перечень рецензируемых научных изданий.
Личный вклад автора. Результаты, приведённые в диссертации, получены при непосредственном участии автора в проведении физико-химических и биологических исследований препаратов, содержащих нитроксидные или нитроксидге-нерирующие соединения. Автор является основным исполнителем написания публикаций по теме диссертации и разработке методик контроля качества компонентов препарата и нормативной документации на предложенный состав порошка.
Объём и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной методам и объектам исследования, двух глав собственных исследований, выводов, списка литературы, включающего 160 наименований отечественных и зарубежных авторов и приложений. Работа изложена на 149 страницах машинописного текста, содержит 16 таблиц, 29 рисунков, 19 схем.
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
В настоящее время ведется активный поиск новых доноров N0 с целью создания лекарственных препаратов нового поколения для лечения различных заболеваний, оказывающих антибактериальное, цитотоксическое, противовоспалительное и антиоксидантное действия с улучшенным спектром действия и меньшими побочными эффектами по сравнению с уже известными лекарственными препаратами. Решение проблемы предполагает как синтез новых N0 генерирующих лекарственных веществ (ЛВ), так и прогнозирование ситуации, при которой в сложной лекарственной форме (ЛФ) в определенных условиях образуется активная N0 частица. Принципиально важным при этом является выбор маркера реакции взаимодействия нитроксидсодержащих частиц с компонентами среды, поскольку в силу чрезвычайно высокой реакционной способности монооксида азота трудно оценить как его первоначальную истинную концентрацию, так и первичные продукты реакции. Возможно, вследствие вышеизложенного, в настоящее время однозначно не определенна область применения, за исключением вазодила-тирующего действия, нитроксидсодержащих соединений.
1.1. Свойства монооксида азота и его фармакологические действия в живых
системах
Монооксид азота (N0) признан одним из важнейших регуляторов многих процессов [9, 106, 139], таких как, регуляции иммунной системы, нейротрансмис-сии [109] агрегации тромбоцитов и цитотоксического действия макрофагов и играет положительную роль в течение многих заболеваний [29, 106]. За последние тридцать лет было доказано, что биологический регулируемый синтез монооксида азота при катализе N0-синтазами, в том числе и их изоформами, связан с функционированием сердечно-сосудистой и иммунной систем и оказывает опосредо-
ванное благоприятное действие на раневой и воспалительный процесс, усиливая секрецию цитокинов, индуцируя фагоцитоз бактерий и некротического детрита нейтрофилами и макрофагами [2, 5, 6, 21]. Многие эффекты воздействия N0 в организме удалось изучить благодаря созданию и исследованию соединений, способных генерировать оксид азота - экзогенных доноров N0.
1.1.1. Физико-химические свойства монооксида азота
Монооксид азота представляет собой термически устойчивую молекулу с нечетным числом электронов на внешней разрыхляющей п-орбитали [12], его свойства как радикала обуславливают способность реагировать с различными соединениями и свободными радикалами.
N0 - бесцветный мономерный парамагнитный газ, температуры плавления и кипения которого представлены в таблице 1.1. Он термодинамически неустой-
о
чив и разлагается на элементы при высоких температурах (1100-1200 С), что препятствует прямому синтезу из N и 02.
Таблица 1.1.
Физические свойства монооксида азота
Параметры Величины
Температура кипения, °С -151,8
Температура плавления, °С -163,6
Расстояние N-0, нм 0,115
ДН°обр (298 К), кДж-моль-1 90,2
ДG°обр (298 к), кДж-моль-1 86,6
Энергия ионизации, эВ 9,23
Энергия ионизации, кДж-моль-1 890,6
и, Д 0,15
Монооксид азота быстро диспропорционирует при высоких давлениях и умеренных температурах:
3№0—»-N20 + N02 (1.1)
В лабораторных условиях монооксид азота синтезируют диспропорциони-рованием солей азотистой кислоты в присутствии разбавленной серной кислоты (1.2) или с использованием иодида (1.3) или ферроцианида (1.4) из водных растворов подкисленных нитритов [12]:
6ШШ2 + 3 H2SO4 — 4 Ш + 2 HNOз + 2 H2O + 3 Na2SO4 (1.2) KNO2 + Ш + H2SO4-► NO + K2SO4 + H2O + 1/2 I2 (1.3)
KNO2 + K4[Fe(CN)6] + 2 MeCO2H-► NO + ^^^6] + H2O + 2MeCO2K (1.4)
N0 характеризуется хорошей растворимостью в воде (4,6 мл/л) [27], являясь липофильным соединением не имеющим заряда, он легко диффундирует в биологических средах от места образования на расстояние не более 200 мкм [68]. Монооксид азота представляет собой короткоживущую молекулу, среднее время жизни которой в биологических тканях составляет 3-6 с. Эти обстоятельства и определяют основные свойства N0: его действие проявляется в непосредственной близости от места синтеза, большое значение приобретают процессы, протекающие с участием внутриклеточных комплексов.
Физико-химические свойства N0 во многом определяются способностью атомов азота окисляться и восстанавливаться в составе разных соединений [27].
1.1.2. Механизмы образования NO in vivo. Роль NO-синтаз
Авторами работы [29] были выделены следующие пути синтеза NO in vivo: неферментативный и ферментативный.
Неферментативный путь включает в себя прямое восстановление нитритов, например, под действием железа, или диспропорционирование нитрита или азотистой кислоты в кислой среде (при pH<6,0) [159]. Цвайер описал диспропропор-ционирование нитрита следующими реакциями:
NO2- + H < » HNO2 (1.5) NO2- + HNO2^—► N2O3 + OH- (1.6) NA^—► NO2 + NO (1.7)
Учеными работы [160] было показано, что данный механизм наблюдается при состояниях, которые сопровождаются снижением pH, например, при воспалении или ишемии, при этом в присутствии гемопротеинов восстановление нитрита осуществляется при pH 7.
Ферментативный синтез NO в клетках осуществляется семейством цито-хром Р450-подобных гемопротеинов - NO-синтаз, молекулы которых содержат домены с оксигеназной и редуктазной активностью [44, 62, 86, 135]. NO-синтазы осуществляют окисление L-аргинина с образованием L-цитруллина и NO (Схема 1.1). Oкисление протекает стереоспецифично и только L-аргинин способен генерировать NO под действием NO-синтаз (NOS) [8, 24].
r—c
nh
/У L-аргинин
nh
r—C,
n—oh
^Н^-гидрокси -L-аргинин
/
r-ch
n=o
nh2 у now
/
o—oh-
r-ch
^nh2 ^h2o
/O
^_¡¿s L-цитруллин
^nh9
Схема 1.1. Образование NO из L-аргинина [9].
NO-синтазы классифицируют на два класса в зависимости от типа индукции и характера действия:
1) кальций- и кальмодулин-зависимая, конститутивно экспрессируемая NO-синтаза, разделяемая на эндотелиальную (тип III) и нейрональную (I тип) изоформы;
2) кальций-независимая, индуцибельно экспрессируемая N0-синтаза (тип II) [8, 106, 124].
В качестве кофакторов ферменты используют НАДФН, ФАД, ФМН и тетра-гидробиоптерин [86]. Спектр катализируемых реакций во многом схож, но альтернативными субстратами могут выступать ^производные аргинина и ряд других соединений [10]. Основным местом внутриклеточной локализации N0-синтаз являются микросомы [80]. Краткая характеристика изоформ N0-синтазы представлена в таблице 1.2.
Таблица 1.2.
Типы синтаз монооксида азота (NOS) (по В.Г. Гранику, Н.Б. Григорьеву [9])
Тип NOS (Мг мономера» Название Биомишень Тип активации
NOS-I (155 kDa) Нейрональная NOS (nNOS), мозговая NOS Нейроны ЦНС и ПНС, матки, мышц Конститутивная форма, кальций/кальмодулин-зависимая
NOS-II (125 kDa) Индуцибельная NOS (iNOS) Макрофаги, печень, гладкая мускулатура, эндотелий, сердце Индуцируется липополи-сахаридами, цитокинами и глюкокортикостероида-ми, каль-ций/кальмодулин-независимая
NOS-III (133 kDa) Эндотелиальная NOS ^NOS) Эндотелий, сердце, мозг Конститутивная форма, кальций/кальмодулин-зависимая
Так, внутриклеточная концентрация ионов Са2+ и кальмодулина влияет на активность конститутивно экспессируемых N0-^^^ эндотелиального и нейро-нального типов. Активность индуцибельной N0-синтазы повышается за счет стимуляции синтеза мРНК, который контролируется фактором транскрипции [97].
1.1.3. Пути метаболизма N0 в организме
Наличие неспаренного электрона делает молекулу N0 достаточно реакци-онноспособной в отношении других радикалов и молекул, таких как кислород, свободные радикалы, тиолы и металлы переменной валентности. Так, константа скорости взаимодействия N0 с молекулярным кислородом составляет 6106 М-1 •с-1 [89], а с радикалом 02" - ещё выше 1,61010 М-1 с-1 [94]; при этом N0 легко окисляется или восстанавливается с образованием нитрозоний-катиона (N0+) и нитрок-сил-аниона (N0") [64, 99, 101]. В водных растворах в присутствии кислорода N0 почти полностью превращается в нитрит-анион в процессе протекания следующих реакций:
2Ш + 02 -► 2 N02 (1.8)
N02 + N0^1^ N203 (1.9)
^03 + Н20-^2Ш2" + 2Н+ (1.10)
^04 + Н20-► Ш2" + N03 + 2Н+ (1.11)
Образование высокоактивного соединения пероксинитрита происходит в результате реакции N0 с супероксидным анион-радикалом [11].
N0 + 02"—► 0^0" (1.12)
Скорость данной реакции высока и ограничена только быстротой диффузии частиц друг к другу (6,7-109-М-1 с-1) [59]. В ряде работ [76, 117, 122] было доказано, что антибактериальное действие пероксинитрит-аниона обусловлено ингиби-рованием цепи электронного переноса в митохондриях, связанного с процессами клеточного дыхания микроорганизмов. Пероксинитрит-анион играет ключевую роль в нарушении их энергетического метаболизма.
Достаточно эффективно N0 реагирует и с свободными радикалами, так, при взаимодействии с гидроксильным радикалом образуется нитрит-анион:
N0 + " 0Н ► Н^2 N02 + Н+ (1.13)
Монооксид азота может взаимодействовать во внутриклеточной жидкости с различными веществами - тиолами, ионами металлов, сахарами, гемами протеинов, образуя различные типы нитрозильных комплексов.
В работе Осипова [29] высказано предположение, что динитрозильные же-лезосерные комплексы (ДНКЖ) являются стабильной формой существования N0 в клетках. Эти комплексы образуются в макрофагах и эндотелиальных клетках при участии тиоловых групп белков или низкомолекулярных тиолов и негемового железа [145]. Кроме этого, в работе показано, что ДНКЖ имеют сходную физиологическую активность и стабильность с эндотелиальным релаксирующим фактором (БОКБ), что свидетельствует об участии ДНКЖ в реализации биологического действия N0 [108, 140].
Б-нитрозотиолы (^^N0, GSN0, HbSN0) - продукты реакции Б-нитрозилирования N0 с тиоловыми группами аминокислот (сывороточный альбумин, глутатион), обладающие также как и ДНКЖ, EDRF-подобной активностью, но с более коротким временем жизни [140]. Кроме того, Б-нитрозотиолы являются одной из форм депонирования N0 в клетках, концентрация которых в плазме крови превышает в 3-4 раза концентрацию свободного N0. Распад нит-розопротеинов катализируется ионами металлов переменной валентности, например, ионами железа [56, 144, 150].
Кроме этого, N0 способен нитрозилировать гемоглобин, взаимодействуя с его цистеиновым остатком, и образуя стабильный комплекс S-нитрозогемоглобин (HbSN0) [81, 82, 130]. За счет образования S-нитрозотиолов, N0 может транспортироваться в организме [130], действуя как паракринный и эндокринный регулятор, то есть как «гормон» [131].
Нитрозильные комплексы цитохрома с
Взаимодействие N0 с геминовыми белками, включая взаимодействие с ци-тохромом с (су с) [3, 29, 30, 60, 65, 99], имеет особый интерес, поскольку образуются нитрозильные комплексы как в окисленном (1.15), так и в восстановленном
2~ь 3~ь
(1.14) состояниях (су! с и су с ):
су с2+ + N0 ^ су! с2+-Ы0 (1.14)
су! с3+ + N0 ^ су! с3+-Ш (1.15)
Константы равновесия для нитрозильных комплексов су! с представлены в таблице 1.3.
Таблица 1.3.
Константы скорости реакции N0 и су! с
Форма су! с К с1 -^дисс? ^ Касс, М-1с-1 Источник
и. 2+ су! с 2,9-10-5 8,3 [87, 121]
и. 3 + су! с 4,4-10-2 7,2-102 [87, 121]
,+ 3+ су! с 8,7-10-2 13-102 [133]
Гемовое железо в нативном су! с имеет шести-координационное состояние, а сам белок кроме четырех основных лигандов, содержит два аксиальных лиганда - гистидин в проксимальном положении и метионин - в дистальном. Под действием отрицательно заряженных липидов в су! с происходит переход железа из низкоспинового шести-координационного состояния в высокоспиновую пяти-координированную форму [29].
Авторы работы [29] показали, что при взаимодействии N0 с гемом наблюдается разрыв связи между метионином и железом с последующим замещением аминокислоты на N0 в качестве шестого лиганда. Следовательно, энергозатраты, связанные с замещением шестого лиганда, обуславливают низкие скорости реакций и константы равновесия. Таким образом, су! с, в котором метионин алкили-
7 1
рован, имеет на два порядка более высокое сродство к N0 (2-10 М-), чем натив-ный белок [57].
2+
Нитрозильный комплекс cyt с имеет ЭПР сигнал с g ~ 2,0. Шести координированное состояние железа в комплексе су! с -N0 было подтверждено низкотемпературным спектром ЭПР [29].
Помимо образования нитрозильных комплексов су! с вступает в окислительно-восстановительные реакции с N0. Было доказано, что су! с может восстановиться под действием N0 по предложенной ниже схеме реакций [113]:
су! с3+ + N0 ^ су! ^+-N0 (1.16) су! ^+-N0 ^ су! с2+-Ы0+ (1.17) су! ^+-N0+ + 20Н" ^ су! с2+ + N02- + Н20 (1.18) Авторами ряда работ было показано, что реакция су с и N0 в растворе является одной из основных реакций, катализируемых цитохромом с в митохондриях [115].
М.А. БИагре, С.Е. Соорег в своих работах оценивали аэробные реакции N0 с митохондриальным цитохромом с. Исследования этих ученых доказали, что N0 реагирует с ферроцитохромом с со скоростью 200 М
-V1 с образованием ферри-цитохрома с (видимая спектроскопия) и нитроксильного аниона, который вступает в реакцию с кислородом с образованием пероксинитрита [133]. Связывание N0 с феррицитохромом с приводит к образованию комплекса феррицитохрома с-Ы0. Константа диссоциации (К) комплекса равна 22±7 цМ. Реакции N0 с цитохромом с играют роль в митохондриальном метаболизме N0, поскольку феррицито-хром с может выступать в качестве обратимой ловушки для избыточного содержания N0 в митохондриях. Восстановление N0 до N0- под действием ферроци-тохрома с приводит к необратимому ингибированию митохондриального потребления кислорода за счет образования пероксинитрита. Кроме того, авторы продемонстрировали реакцию восстановления N0 до нитроксил-аниона (N0^, которая имеет константу скорости 200 М-1 •с-1 [133]:
су! с2+ + N0 ^ cyt с3+ + N0" (1.19) В литературе имеются данные, что нитрозильные комплексы могут изменять пероксидазную активность цитохрома с и управлять апоптозом [149]. Однако эти результаты противоречат данным работы [132], в которой показано, что эндогенное нитролизирование цитохрома с во время апоптоза является невозможным, поскольку цитохром с находится в шести-координационном состоянии, имеющий меньшее сродство к N0, чем пяти-координационный гем гуанилатциклазы и ци-тохромоксидазы. Одно из возможных объяснений этого результата является то, что су! с претерпевает конформационные изменения во время апоптоза, что повышает активность гемового железа с N0. Такие изменения в су! с происходят
Похожие диссертационные работы по специальности «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», 14.04.02 шифр ВАК
Активированная хемилюминесценция как метод изучения свободнорадикальных реакций в клетках и тканях2012 год, кандидат биологических наук Матвеева, Наталья Сергеевна
Роль динитрозильных комплексов железа в защите биомолекул и клеточных структур от окислительного, нитрозативного и карбонильного стрессов2010 год, доктор биологических наук Шумаев, Константин Борисович
БИЯДЕРНЫЕ ЖЕЛЕЗОНИТРОЗИЛЬНЫЕ КОМПЛЕКСЫ С МОСТИКОВЫМИ ТИОЛАТНЫМИ ЛИГАНДАМИ2016 год, кандидат наук ДАВИДОВИЧ ПАВЕЛ БОРИСОВИЧ
Катионные динитрозильные комплексы железа с тиомочевиной и ее производными - новые доноры оксида азота2017 год, кандидат наук Шматко, Наталья Юрьевна
Разработка и исследование комплексов фитиновой кислоты с биологически активными аминами как компонентов гидрофильных гелей2015 год, кандидат наук Сидорова, Марта Валерьевна
Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Коробко Валентина Михайловна, 2016 год
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Адамсон, А. Физическая химия поверхностей [Текст] / А.Адамсон -М.: Мир, 1979. - 586 с.
2. Берченко, Г.Н. Экспериментально-морфологическое обоснование использования экзогенного монооксида азота при лечении огнестрельных ран [Текст] / Г.Н. Берченко, А.Н. Шальнев, А.В. Рыкунов, В.И. Татаренков / Вестник травматологии и ортопедии им. Н.Н. Приорова. - 2009. - №4. С. 49-55.
3. Брусничкин, А.В., Термолинзовое определение цитохрома с и его комплекса с NO [Текст] / А.В.Брусничкин, А.В. Марикуца, М.А. Проскурнин, Е.В. Проскурнина А.Н. Осипов, Ю.А. Владимиров // Вестн. Моск. Ун-та. Сер.2. Хим. -2008. - Т.49. №6. - С. 409-414.
4. Ванин, А.Ф. Оксид азота и его обнаружение в биосистемах методом электронного парамагнитного резонанса [Текст] / А.Ф. Ванин // УФН. - 2000. -170(4). - С. 455-458.
5. Выренков, Ю.Е. Методы лимфатической терапии и роль монооксида азота в лечении болезни [Текст] / Ю.Е. Выренков, А.В. Есипов, В.К. Шишло, А.Б. Лазарев, Р.И. Ярема // Хирургия. - 2011. - №5. - С. 32-38.
6. Гостищев, В.К. Использование NO-содержащего газового потока в лечении гнойных ран: NO-терапия, теоретические аспекты, клинический опыт и проблемы применения экзогенного оксида азота в медицине [Текст] / В.К. Гостищев, К.В.Липатов, А.Б.Шехтер, А.Ю.Емельянов // Русский врач. - 2001. - С. 79-82.
7. Государственная Фармакопея Российской Федерации XII. М.: Издательство «Научный центр экспертизы средств медицинского применения». 2010. Ч. 2.
8. Граник, В.Г. Метаболизм экзогенных соединений. Лекарственные средства и другие ксенобиотики [Текст]: монография / В.Г. Граник. - М.: Вузовская книга, 2006. - 528 с.
9. Граник, В.Г. Оксид азота (NO). Новый путь к поиску лекарств [Текст] / В.Г. Граник, Н.Б. Григорьев. - М.: Вузовская книга, 2004. - 360 c.
10. Граник, В.Г. Экзогенные доноры оксида азота и ингибиторы NO-синтаз (химический аспект) [Текст] / В.Г. Граник, Н.Б. Григорьев // Вестник РФФИ. - 2002. - №4. - С. 74.
11. Григорьев, Н.Б. Генерация оксида азота при восстановлении антибактериальных препаратов нитрофуранового ряда [Текст] / Н.Б. Григорьев, Г.В.Чечекин, А.П.Арзамазцев, В.И. Левина, В.Г.Граник // Химия гетероцикл. со-ед. - 1999. - №7. - С. 902-906.
12. Гринвуд, Н.А. Химия элементов: в 2 томах [Текст] / Н. Гринвуд, А. Эрнио, пер. с англ., - М.: БИНОМ Лаборатория знаний, 2008. - 325 c.
13. Диксон, М. Ферменты [Текст]. В 3-х т. Т. 2 / М. Диксон, Э. Уэбб; пер. с англ. Л.М. Гинодмана, М.И. Левянт; под ред. В.К. Антонова, А.Е. Браунштейна. - М.: Мир, 1982. - 692 с.
14. Жукова, О.С. Цитотоксический эффект нитрозильных комплексов железа на опухолевые клетки человека in vivo [Текст] / О.С. Жукова., Н.А.Санина, Л.В.Фетисова, Г.К.Герасимова // Росс. биотерапевт. журнал. - 2006. - Т.5. №1. - С. 14.
15. Земцова, Г.Н. Сравнительная оценка методов определения суммы флавоноидов в P-витаминном комплексе [Текст] / Г.Н.Земцова, А.Б. Дмитриев // Химико-фарм. журнал. - 1985. - № 6. - С. 754-757.
16. Измайлов, С.Г. Ксимедон в клинической практике [Текст] / С.Г.Измайлов, Г.А.Измайлов, М.Ю. Аверьянов., В.С.Резник. - Н. Новгород: НГМА, 2001. - 192 с.
17. Кондакова, И. В. Влияние NO-генерирующих соединений на опухоле-токсическое действие доксорубицина [Текст] / И.В.Кондакова, Г.В.Загребельная, Е.Ц. Чойизонов // Бюл. эксперим. биологии и медицины. - 2004. - Т. 137. №6. - С. 664-666.
18. Кочнев, О.С. Применение ксимедона для стимуляции заживления и профилактики нагноений послеоперационных ран [Текст] / О.С.Кочнев, С.Г. Измайлов // Хирургия. - 1991. - №5. - С. 27-30.
19. Ланкин, В.З. Ферментативное перекисное окисление липидов [Текст] / В.З. Ланкин // Укр. биохим. журн. - 1984. - 56 (№3). - С. 317-331.
20. Лапитан, Д.Г. Медико-физические аспекты стимуляции микроциркуляции крови оксидом азота при лечении заболеваний ЛОР-органов [Текст] / Д.Г.Лапитан, Д.А.Рогаткин, В.М.Свистушкин, Е.А.Шевчик, А.В.Ратова, Г.А.Голубовский // Медицинская физика. - 2012. - № 1. - C. 61-68.
21. Липатов, К.В. Использование газового потока, содержащего оксид азота (NO-терапия), в комплексном лечении гнойных ран [Текст] / К.В.Липатов, М.А.Сопромадзе, А.Б.Шехтер, А.Ю. Емельянов и др. // Хирургия. - 2002. - №2. -С. 41-43.
22. Лурье, Ю.Ю. Справочник по аналитической химии [Текст] / Ю.Ю.Лурье. - М: Химия, 1989. - 253 с.
23. Мартусевич, А.К. Экспериментальная оценка влияния лекарственных композиций на состояние микроциркуляции в раннем послеожоговом периоде [Текст] / А.К.Мартусевич, К.Д.Ларионова, С.П.Перетягин, П.В.Перетягин, А.В.Давыдюк // Фундаментальные исследования. - 2013. - №3. Ч. 2. - С. 332-336.
24. Мартусевич, А.К. Молекулярная стереотипия в реализации эффекта некоторых лечебных физико-химических факторов: роль NO [Текст] / А.К.Мартусевич, С.П. Перетягин // Физико-химическая биология. - 2012. - №2 (3). - С. 205-210.
25. Мартусевич, А.К. Особенности функционально-метаболической адаптации организма в условиях травматического стресса [Текст] / А.К.Мартусевич, А.Г.Соловьева, А.А.Мартусевич, П.В.Перетягин // Медицинский альманах. -2012. - №5. - С. 175-178.
26. Машковский, М.Д. Лекарственные средства [Текст] / Пособие для врачей. 15-е издание. Справочник. М.: Новая Волна, 2009. - 1164 с.
27. Меньшикова, Е.Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиокси-данты [Текст] / Е.Б. Меньшикова, В.З. Ланкин, Н.К. Зенков, И.А. Бондарь, Н.Ф. Круговых, В. А. Труфакин. - М.: Фирма «Слово», 2006. - 556 с.
28. Метельская, В.А.. Скрининг-метод определения уровня метаболитов оксида азота в сыворотке [Текст] / В.А. Метельская, Н.Г. Гуманова // Клиническая лаборатория. - 2005. - №6. - С. 15-18.
29. Осипов, А.Н. Биологическая роль нитрозильных комплексов гемопро-теинов [Текст] / А.Н.Осипов, Г.Г.Борисенко, Ю.А.Владимиров // Успехи биологической химии. - 2007. - Т.47. - С. 259-292.
30. Осипов, А.Н. Регуляция пероксидазной активности цитохрома с с помощью оксида азота и лазерного изучения [Текст] / А.Н.Осипов, Г.О.Степанов, Ю.А.Владимиров, А.В.Козлов, В.Е. Каган // Биохимия. - 2006. - Т.71. - №10. - С. 1392-1398.
31. Островский, Н.В. Комплексное лечение ожоговых ран терагерцовыми волнами молекулярного спектра оксида азота [Текст] / Н.В. Островский, С.М. Ни-китюк, В.Ф. Киричук, О.В. Бецкий // Бюллетень медицинских Интернет-конференций. - 2012. - Т.2. - №6. - С.426-430.
32. Пат. 2174398 Российская Федерация, МПК А61К33/08, А61Р17/00. Способ лечения и/или профилактики поражений мягких тканей организма/ Каби-сов Р.К., Козлов Н.П., Пекшев А.В., Перов Ю.Л., Шехтер А.Б.; заявитель и патентообладатель Кабисов Р.К., Пекшев А. В., Шехтер А.Б. - № 98106256/14; заявл. 02.04.1998; опубл. 10.10.2001. URL: http://www.fips.ru/.
33. Пат. 2183474 Российская Федерация, МПК А61М11/00. Способ и устройство для формирования NO-содержащего газового потока для воздействия на биологический объект / Вагапов А.Б., Грачев С.В., Козлов Н.П., Пекшев А.В., Шехтер А.Б.; заявитель и патентообладатель Пекшев Александр Валерьевич. - № 2001103924/14; заявл. 09.02.2001; опубл. 20.06.2002. URL: http://www.fips.ru/.
34. Пат. 2217109 Российская Федерация, МПК А6№9/06, А42B1/06, А42B3/22, A61H33/00, A61H33/04. Способ лечения гифемы/ Чеснокова Н.Б., Ква-ша О.И.; заявитель и патентообладатель Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца - № 2002124876/14; заявл. 19.09.2002; опубл. 27.11.2003. URL: http://www.fips.ru/.
35. Пат. 2223072 Российская Федерация, МПК А6№9/00. Способ лечения тромбозов вен сетчатки с помощью доноров и ингибиторов оксида азота // Нероев В.В., Архипова М.М., Ванин А.Ф.; заявитель и патентообладатель Московский
научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца, - № 2002101166/14; заявл. 21.01.2002; опубл. 10.02.2004. URL: http://www.fips.ru/.
36. Пат. 2286184 Российская Федерация, МПК А6Ш5/02. Способ лечения ожоговых ран/ Киричук В.Ф., Островский Н.В., Никитюк С.М., Шуб Г.М., Тупи-кин В.Д., Креницкий А.П., Майбородин А.В., Бецкий О.В.; заявитель и патентообладатель Открытое акционерное общество «Центральный научно-исследовательский институт измерительной аппаратуры» (ЦНИИИА) - № 2005103560/14; заявл. 14.02.2005; опубл. 27.10.2006. URL: http://www.fips.ru/.
37. Пат. 2326678 Российская Федерация, МПК А61К33/08, А61К35/28, А61К9/06, А61Р17/02. Способ лечения гнойно-воспалительных заболеваний мягких тканей/ Халилов М.А., Снимщикова И. А., Лялюхина Е.И., заявитель и патентообладатель Халилов М.А., Снимщикова И. А., Лялюхина Е.И.- № 2006141806/14; заявл. 28.11.2006; опубл. 20.06.2008. URL: http://www.fips.ru/.
38. Пат. 2437667 Российская Федерация, МПК А61К33/26, А61К33/04, А61Р9/08, A61P9/10. Применение биядерного сера-нитрозильного комплекса железа анионного типа в качестве вазодилататорного лекарственного средства / Санина Н.А., Серебрякова Л.И., Шульженко В.С., Писаренко О.И., Руднева Т.Н., Алдошин С.М.; заявитель и патентообладатель Учреждение Российской академии наук Институт проблем химической физики РАН (ИПХФ РАН), Федеральное государственное учреждение «Российский кардиологический научно-производственный комплекс Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» (ФГУ РКНПК)- № 2010112814/15; заявл. 05.04.2010; опубл. 27.12.2011. URL: http://www.fips.ru/.
39. Пат. 2429242 Российская Федерация, МПК А61К31/295, А61К31/095, А61Р35/00, C07F15/02. Применение тетранитрозильного комплекса Fe с тиофено-лом в качестве противоопухолевого лекарственного средства // Санина Н.А., Жукова О.С., Алдошин С.М., Емельянова Н.С., Герасимова Г.К.; заявитель и патентообладатель Учреждение Российской академии наук Институт проблем химической физики РАН (ИПХФ РАН), - № 2009140097/15;заявл. 30.05.2007; опубл. 20.09.2011. URL: http://www.fips.ru/.
40. Пат. 2441873 Российская Федерация, МПК А61К31/295, А61К31/095, А61Р35/00, C07F15/02. Водорастворимые биядерные катионные нитрозильные комплексы железа с природными алифатическими тиолилами, обладающие цито-токсической, апоптотической и NO-донорной активностью // Санина Н.А., Лысенко К.А., Жукова О.С., Руднева Т.Н., Алдошин С.М., Емельянова Н.С.; заявитель и патентообладатель Учреждение Российской академии наук Институт проблем химической физики РАН (ИПХФ РАН), - № 2009140388/04;заявл. 02.06.2008; опубл. 10.02.2012. URL: http://www.fips.ru/.
41. Пат. 2460531 Российская Федерация, МПК А61К33/26, А61К33/04, А61Р9/08, A61P9/10. Применение биядерного сера-нитрозильного комплекса железа катионного типа в качестве вазодилататорного лекарственного средства/ Санина Н.А., Серебрякова Л.И., Шульженко В.С., Писаренко О.И., Руднева Т.Н., Алдошин С.М.; заявитель и патентообладатель Учреждение Российской академии наукИнститут проблем химической физики РАН (ИПХФ РАН), Федеральное государственное учреждение «Российский кардиологический научно-производственный комплекс Федерального агентства по высокотехнологичной медицинской помощи» (ФГУ РКНПК)- № 2010112813/15; заявл. 05.04.2010; опубл. 10.09.2012. URL: http://www.fips.ru/.
42. Пат. 2494104 Российская Федерация, МПК C07F15/02, A61K31/295, A61P35/00). Моноядерные динитрозильные комплексы железа, способ получения моноядерных динитрозильных комплексов железа, доноров монооксида азота, применение моноядерногодинитрозильного комплекса железа в качестве противоопухолевого лекарственного средства// Санина Н.А., Козуб Г.И., Кондратьева Т.А., Алдошин С.М.; заявитель и патентообладатель Учреждение Российской академии наук Институт проблем химической физики РАН (ИПХФ РАН), - № 2011142254/04;заявл. 20.10.2011; опубл. 27.03.2013. URL: http://www.fips.ru/.
43. Пиотровский Л.Б., Киселев О.И. Фуллерены в биологии [Текст]// Сев.-Зап. отд-ние Рос. Акад. Мед. Наук. - СПб.: ООО «Издательство Росток». 2006. С.49.
44. Проскуряков С.Я., Конопляников А.Г., Скворцов В.Г. и др. Структура и активность ингибиторов NO-синтаз, специфичных к L-аргининсвязывающему центру (обзор) [Текст]// Биохимия. 2005. Т.70. вып.1. С. 14-32.
45. Санина Н.А., Жукова О. С., Смирнова З.С., Борисова Л.М., Киселева М.П., Алдошин С.М. Противоопухолевая активность нитрозильных комплексов железа - нового класса доноров монооксида азота [Текст] // Росс. биотерапевт. журнал. 2008. №1. С. 52.
46. Стандартизация и контроль качества лекарственных средств [Текст]: Учебное пособие / Н.А. Тюкавкина, А.С. Берлянд, Т.Е. Елизарова и др., Под ред. Н.А. Н.А. Тюкавкина. - М.: ООО «Медицинское информационное агентсво». 2008. С. 18.
47. Суздальцев И.В., Полапин И.А. Клинико-лабораторная оценка применения воздушно-плазменного потока монооксида азота в лечении язвенно-некротических осложнений синдрома диабетической стопы [Текст] // Фундаментальные исследования. 2013. № 5. С. 409-412.
48. Теселкин Ю.О., Жамбалова Б.А., Бабенкова И.В., Клебанов Г.И., Тюкавкина Н.А. Антиоксидантные свойства дигидрокверцетина [Текст]. // Биофизика. 1996. Т. 41. Вып. 3. С. 620-623.
49. Фармацевтическая разработка: концепция и практические рекомендации: научно-практическое руководство для фармацевтической отрасли [Текст]; [под ред. С.Н. Быковского]. - М. Изд-во Перо, 2015. С. 79.
50. Эйхгорн Г. Неорганическая биохимия [Текст]. В 2-х т. Т. 2 / пер. с англ. М. Е. Вольпина, К. Б. Яцимирского. - М.: Мир, 1978. С. 352.
51. Abdellatif, K.R. Dinitroglyceryl and diazen-1-ium-1,2-diolated nitric oxide donor ester prodrugs of aspirin, indomethacin and ibuprofen: synthesis, biological evaluation and nitric oxide release studies [Text] / K.R. Abdellatif, M.A. Chowdhury, Y. Dong., D. Das et al. // Bioorg. Med. Chem. Lett. - 2009. - 19(11). - P. 3014-3018.
52. Abu-jaish, A. Prodrugs Overview in "Prodrugs Design - A New Era" [Text] / A. Abu-jaish, S. Jumaa, R. Karaman, Nova Publisher, USA, 2014. - P. 77-102.
53. Aldoshin, S.M. New class of neutral paramagnetic binuclear sulfur-containing iron nitrosyl complexes [Text] / S. M. Aldoshin, N. A. Sanina, O.A. Rakova [et al.] // Russ. Chem. Bull., Int. Ed. - 2003. - Vol. 52, Issue 8. - P. 1702-1708.
54. Aoki, T. Continuous flow determination of nitrite with membrane separation chemiluminescence detection [Text] / T. Aoki // Biomed. Chromatogr. - 1990. -Vol. 4, Issue 3. - P. 128-130.
55. Archer, S. Measurement of nitric oxide in biological models [Text] /S. Archer // FASEB J. - 1993. - Vol. 7. - P. 349 - 360.
56. Arnelle, D.R. NO+, NO and NO donation by S-nitrosotiols: implications for regulation of physiological functions by S-nitrosylation and acceleration of disulfide formation [Text] / D.R. Arnelle, J.S. Stamler // Arch. Biochem. Biophys. - 1995. - Vol. 318, Issue 2. - P. 279-285.
57. Ascenzi, P. Nitric oxide binding to ferrous native horse heart cytochrome c and to its carboxymethylated derivative: a spectroscopic and thermodynamic study [Text] / P. Ascenzi, M. Coletta, R. Santucci [et al.] // J. Inorg. Biochem. - 1994. - Vol. 53, Issue 4. - P. 273-280.
58. Bajrovic, F. The contribution of lumbal sympathetic neurones activity to rats skin blood flow oscillation [Text] / F. Bajrovic // Eur. J. Physiol. - 2000. - Vol. 439. Suppl. p. R158-R159.
59. Beckman, J.S. Apparent hydroxyl radical production by peroxynitrite: implications for endothelial injury from nitric oxide and superoxide [Text] / J.S. Beckman, T.W. Beckman, J. Chen [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1990. - Vol. 87, Issue 4. - P. 1620-1624.
60. Bellota-Anton, C. Spectoscopic analysis of protein Fe-NO complexes [Text] / C. Bellota-Anton, J. Munnoch, K. Robb [et al.] // Biochem. Soc. Trans. - 2011. - Oct., Vol. 39(5). - P. 1293-1298. doi: 10.1042/BST0391293.
61. Borisenko, G.G. Nitroxides scavenge myeloperoxidase-catalyzed thiyl radicals in model systems and in cells [Text] / G.G. Borisenko, I. Martin, Q. Zhao [et al.] // J. Am. Chem. Soc. - 2004. - Vol. 126, Issue 30. - P. 9221-9232.
62. Bredt, D.S. Cloned and expressed nitric oxide synthase structurally resembles cytochrome P-450 reductase [Text] / D.S. Bredt, P.M. Hwang., C. Lowenstein // Nature. - 1991. - Vol. 351, Issue 6329. - P. 714-718.
63. Brien, J. Quantitation of nitric oxide formation from nitrovasodilator drugs by chemiluminescence analysis of headspace gas [Text] / J. Brien, B. McLaughlin, K. Nakatsu [et al.] // J. Pharmacol. Meth. - 1991. - Vol. 25, Issue 1. - P. 19-27.
64. Brown, C.G. Nitric oxide and mitochondria [Text] / C.G. Brown // Front. Biosci. - 2007. - Vol. 12. - P. 1024-1033.
65. Brunori, M. Control of cytochrome c oxidase activity by nitric oxide [Text] / M. Brunori, A. Giuffre, E. Forte [et al.] // Biochim. et Biophys. Acta. - 2004. - Vol. 1655, Issue 1. - P. 365-371.
66. Bryan, N.S. Methods to detect niric oxide and its metabolites in biological samples [Text] / N.S. Bryan, M.B. Grisham // Free Radic Biol. Med. - 2007. - Vol. 43, Issue 5. - P. 645-657.
67. Bryan, N.S. Analytical techniques for assaying nitric oxide bioactivity [Text] / N.S. Bryan // J. Vis Exp. - 2012. - Vol. 64. :E3722. doi: 10.3791/3722.
68. Butler, A.R. Diffusion of nitric oxide and scavenging by blood in the vasculature [Text] / A.R. Butler, I.L. Megson, P.G. Wright // Biochim. Biophys. Acta. -1998. - Vol. 1425, Issue 1. - P. 168-176.
69. Cantilena, I.R. Nitric oxide hemoglobin in patient receiving nitroglycerin as detected by electron paramagnetic resonance spectroscopy [Text] / I.R. Cantilena, R.P. Smith, S. Frasur // Lab. Clin. Med. - 1992. - Vol. 120. - P. 902-907.
70. Cena, C. Antiinflammatory, gastrosparing, and antiplatelet properties of new no-donor esters of aspirin [Text] / C.Cena, M.L.Lolli, L.Lazzarato [et al.] // J. Med. Chem. - 2003. - Vol. 46, Issue 5. - P. 747-754.
71. Chattopadhyay, M. Comparison between 3-nitrooxyphenyl acetylsalicylate (NO-ASA) and O2-(acetylsalicyloxymethyl)-1 -(pyrrolidin-1 -yl)diazen-1 -ium-1,2-diolate (NONO-ASA) as safe anti-Inflammatory, analgesic, antipyretic, antioxidant prodrugs [Text] / M.Chattopadhyay, C.A.Velazquez, A.Pruski [et al.] // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2010. - Vol. 335, Issue 2. - P. 443-450.
72. Cytochrome c as drug / K. Hanson [et al.] // Induction of apoptosis by elec-trotransfer of positively charged proteins as cytochrome c and histone Hlinto cells [Text] / by edit. I. Tsoneva. Biochem. Biophys. Acta. - 2005. P. - 55-64.
73. Cytochrome c as drug / K. Hanson [et al.] // Structure and function of cytochromes [Text] / by edit. M. D. Kamen. - Tokyo: Univ. Tokyo Press, 1967. - P. 287
74. Dahmus, J.D. Oral clopidogrel improves cutaneuos microvascular function through EDHF-dependent mechanisms in middle-aged humans [Text] / J.D. Dahmus, R.S. Bruning, W.L.Kenney [et al.] // Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. -2013. - Vol. 305, Issue 4. - P. R452-458.
75. De Carvalho, P.S. Synthesis and pharmacological characterization of a novel nitric oxide-releasing diclofenac derivative containing a benzofuroxan moiety [Text] / P.S.De Carvalho, M. Maróstica, A. Gambero [et al.] // Eur. J. Med. Chem. -2010. - Vol. 45, Issue 6. - P. 2489-2493.
76. Denicola, A. Peroxy-nitrite-mediated cytotoxicity to Trypanosoma cruzi [Text] / A.Denicola, H.Rubbo, D.Robriguez [et al.] // Arch. Biochem. Biophys. - 1993. - Vol. 304. - P. 279.
77. Fedeli, D. Nitroxide radicals protect against DNA damage in rat epithelial cells induced by nitric oxide, nitroxyl anion and peroxynitrite [Text] / D. Fedeli, E. Damiani, Greci [et al.] // Mutat. Res. - 2003. - Vol. 535, Issue 2. - P. 117-125.
78. Flores-Santana, W. Nitroxide derivatives of non-steroidal anti-inflammatory drugs exert anti-inflammatory and superoxide dismutase scavenging properties in A459 cells [Text] / W. Flores-Santana, T. Moody, W. Chen [et al.] // Br. J. Pharmacol. - 2012. - Vol. 165(4b). - P. 1058-1067.
79. Gilmer, J.F. Synthesis, hydrolysis kinetics and anti-platelet effects of isosorbide mononitrate derivatives of aspirin [Text] / J.F. Gilmer, L.M. Moriarty., D.F. McCafferty [et al.] // Eur. J. Pharm. Sci. - 2001. - № 14. - P. 221-227.
80. Giulivi, C. Production of nitric oxide by mitochondria [Text] / C. Giulivi, J.J. Poderoso, A.Boveris // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273. - P. 11038-11043.
81. Gladwin, M.T. The biochemistry of nitric oxide, nitrite, and hemoglobin: role in blood flow regulation [Text] / M.T. Gladwin, J.H. Grawford, R.P. Patel // Free Radical Biology Medicine. - 2004. - Vol. 36, Issue 6. - P. 707-717.
82. Gladwin, M.T. Nitric oxide's reactions with hemoglobin: a view through the SNO-storm [Text] / M.T. Gladwin, J.R. Lancaster, Jr. B.A. Freeman [et al.] // Nat. Med. - 2003. - Vol. 5. - P 496-500.
83. Glebska, J. Structure-activity relationship studied of protective function of nitroxides in Fenton system [Text] / J.Glebska, L.Pulaski, K.Gwozdzinski [et al.] // Bi-ometals. - 2001. - Vol. 14. - P. 159-170.
84. Greenberg, S.S. Endothelium-derived relaxing factor released from canine femoral artery by acetylcholine cannot be identified as free nitric oxide by electron paramagnetic resonance spectroscopy [Text] / S.S.Greenberg, D.F.Wilcox, G.M. Rubanyi // Circ. Res. - 1990. - Vol. 67. - P. 1446-1452.
85. Gubskaya, V.P. Synthesis, structure and biological activity of nitroxide ma-lonate methanofullerens [Text] / V.P.Gubskaya, L.Sh. Berezhnaya, A.T.Gubaidullin, [et al.] // Org. Biomol. Chem. - 2007. Vol. 5, Issue 6. - P. 976-981.
86. Hevel, J.M. Macrophage nitric oxide synthase: Relationship between enzyme-bound tetrahydrobiopterin and synthase activity [Text] / J.M.Hevel, M.A.Marletta // Biochemistry. - 1992. - Vol. 31, Issue 31. - P. 7160-7165.
87. Hoshino, M. Photochemistry of nitric-oxide adducts of water-soluble iron porphyrin and ferrihemoproteins studied by nanosecond laser photolysis [Text] / M. Hoshino, K. Ozawa, H. Seki [et al.] // J. Am. Chem. Soc. - 1993. Vol. 115. - P. 95689575.
88. Huang, Z. Ethanesulfohydroxamic acid ester prodrugs of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (nsaids): Synthesis, nitric oxide and nitroxyl release, cyclooxygen-ase inhibition, anti-inflammatory, and ulcerogenicity index studies [Text] / Z. Huang, C. Velazquez, K. Abdellatif [et al.] // J. Med. Chem. - 2011. - Vol. 54, Issue 5. - P. 13561364.
89. Inoue, M. Mitochondrial generation of reactive oxygen species and its role in aerobic life [Text] / M. Inoue, E. Sato, M. Niskikawa // Cuit. Med. Chem. - 2003. -Vol. 10. - P. 1241-1253.
90. Jain, S. Nitric oxide release is not required to decrease the ulcerogenic profile of nonsteroidal anti-inflammatory drugs [Text] / S. Jain, S. Tran, M.A.M. El Gendy. [et al.] // J. Med. Chem. - 2011. - Vol. 55, Issue 2. - P. 688-696.
91. Jian-An, Jiang. Practical Cu(OAc)2/TEMPO-catalyzed selective aerobic alcohol oxidation under ambient conditions in aqueous acetonitrile [Text] / Jian-An Jiang, Jia-Lei Du, Zhan- Guo Wang // Tetrahedron Letters. - 2014. - Vol. 55. - P. 1677-1681.
92. Kambayashi, Y. pH Profile of cytochrome c-catalyzed tyrosine nitration [Text] / Y. Kambayashi, Y.Hitomi, N. Kodama [et al.] // Acta Biochimica Polonica. -2006. - Vol. 53, Issue 3. - P. 577-784.
93. Katayama, Y. A new strategy for the design of molecular probes for investigating endogenous nitric oxide using an EPR or fluorescent technique [Text] / Y. Katayama, N. Soh, M. Maeda // Chem. Phys. Chem. - 2001. - №2. - P. 655-661.
94. Kissner, R. Peroxynitrous acid - where is the hydroxyl radical [Text] / R. Kissner, T. Nauser, C. Kurz [et al.] // IUBMB Life. - 2003. - Vol. 55, Issue 10. - P. 567
- 572.
95. Krishna, M.C. Do nitroxides antioxidants act as scavenges of superoxide or as SOD mimics [Text] / M.C. Krishna, A.Russo, J.B. Mitchell // J. Biol.Chem. - 1996.
- Vol. 271. - P. 26026-26031.
96. Krusic, P.J. Radical reactions of C60 [Text] / P.J. Krusic, P.N. Wasserman, P.N. Keizer [et al.] // Science. - 1991. - Vol. 254. - P. 1183-1185.
97. Kumar, A. Nuclear factor - Kb its role in health and disease [Text] / A. Kumar, Y.Takada, A.M. Boriek [et al.] // J. Mol. Med. - 2004. - Vol. 82. - P. 434-448.
98. Lai, C. Nanocomposite films based on TEMPO-mediated oxidized bacterial cellulose and chitosan [Text] / C. Lai, S. Zhang, X. Chen [et al.] // Cellulose. - 2014. DOI 10.1007/s10570-014-0330-30.
99. Loccoz, P.M. Spectroscopic characterization of heme iron-nitrosyl species and their role in NO reductase mechanisms in diiron proteins [Text] / P.M. Loccoz // Nat. Prod. Rep. - 2007. - Vol. 24, Issue 3. - P. 610-620.
100. Lucarini, M. Supramolecular radical chemistry [Text] // Encyclopedia of Radicals in Chemistry, Biology and Materials. - 2012. DOI: 10.1002/9780470971253.rad073.
101. Martusevich, A.K. The effect of free and bound nitric oxide on blood energy metabolism [Text] / A.K. Martusevich, A.G. Solovyova, S.P. Peretygin // Biomedical investigations. - 2013. - Vol. 5, Issue 4. - P.33-37.
102. McMurtry, M.S. Measurement of nitric oxide, nitrite and nitrate using a chemiluminescence assay: an update for the year [Text] / M.S. McMurtry, D.H. Kim., T. Dinh-Xuan // Analisis. - 2000. - №28. - P. 455-465.
103. Melnikova, N.B. Structure of surface films of malonate mono- and di-nitroxyl methanofullerenes [Text] / N.B. Melnikova, I.V. Gulyaev, M.V. Gulenova [et al.] // Russ. Chem. Bull, Ser. chem. - 2008. - №9. - P. 1920-1931.
104. Melnikova, N.B. Tert-Butylthiacalix[4]arene monolayers as a biomimetic model for the oxidation of antioxidants with cytochrome c [Text] / N.B. Melnikova, E.N. Kochetkov, S.E. Solov'eva // Russian Chemical Bulletin. - 2011. - Vol. 9. - P. 1948-1955.
105. Mitchell, L.B. Nitroxides as radiation protectors [Text] / L.B. Mitchell, M.C. Krishna // Mil. Med. - 2002. - Vol. 167. - P. 49-50.
106. Moncada, S. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, pharmacology [Text] / S. Moncada, R.M.J.Palmer, E.A. Higgs // Pharmacol. Rev. - 1991. - Vol. 43. -P. 109-142.
107. Morton, J.R. Addition of free radicals to C60 [Text] / J.R. Morton, F. Negri., K.F. Preston // Acc. Chem. Res. - 1998. - Vol. 31. - P. 63-69.
108. Mulsch, A. The potent vasodilating and guanylylcyclase activating dinitro-zyl-iron (11) complex is stored in a protein-bound form in vascular tissue and is released by thiols [Text] / A. Mulsch, P.I. Mordvintcev, A.F.Vanin, // FEBS Lett. - 1991. - Vol. 294, Issue 3. - P. 252-256.
109. Murad, F. The role of nitric oxide in modulating guanylyl cyclase [Text] / F. Murad // Neurotransmissions. -1994. - N10. - P. 1-4.
110. Nishikimi, M. The occurrence of superoxide anion in the reaction of reduced phenasine methasulphate and molecular oxygen [Text] / M. Nishikimi, N.A. Rao, K.Yagi // Biochem. and Biophys. Res. Communs. -1972. -46 (2) -P. 849-857.
111. Offer, T. The pro-oxidative activity of SOD and nitroxide SOD mimics [Text] / T.Offer, A.Russo, A.Samuni // FASEB J. - 2000. - Vol. 14. - P. 1215-1223.
112. Opländer, C. Dermal application of nitric oxide in vivo: kinetics, biological responses, and therapeutic potential in humans [Text] / C. Opländer, A.Römer, A.Paunel-Görgülü [et al.] // Clin. Pharmacol. Ther. - 2012. - Vol. 91, Issue 6. - P. 1074-1082.
113. Orii, Y. Reaction of cytochrome cwith nitrite and nitric oxide. A model of dissimilatory nitrite reductase [Text] / Y. Orii, H. Shimada // J. Biochem. - 1978. - Vol. 84. - P. 1542-1552.
114. Pathan, A. Oral bioavailability, efficacy and gastrictolerability of P2026, a novel nitric oxide-releasing diclofenac in rat [Text] / A. Pathan, M. Karwa, V. Pamidi-boina [et al.] // Inflammopharmacology. - 2010. - Vol. 18, Issue 4. - P. 157-168.
115. Poderoso, J.J. The regulation of mitochondrial oxygen uptake by redox reactions involving nitric oxide and ubiquinol [Text] / J.J.Poderoso, C.Lisdero, F.Schopfer // J. Biol. Chem. - 1999. - Vol. 274. - P. 37709-37716.
116. Qandil Amjad, M. Prodrugs of nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs), more than meets the eye: a critical review [Text] / M. Qandil Amjad // Int. J. Mol. Sci. - 2012. - Vol. 13. - P. 17244-17274.
117. Radi, R. Inhibition of mitochondrial electron transport by peroxynitrite. [Text] / R. Radi, M. Robriguez, L. Castro [et al.] // Arch. Biochem. Biophys. - 1994. -Vol. 308. - P. 89.
118. Rakova, O. A. Novel "Roussin esters" [Fe2(^2-SR)2(NO)4] as NO donors: synthesis, structural and spectroscopic characterization [Text] / O. A. Rakova, N. A.Sanina, Yu. M. Shulga // J. Inorg. Biochem. - 2001. - Vol. 85. - P. 390.
119. Ranatunge, R.R. Synthesis and anti-inflammatory activity of a series of N-substituted naproxen glycolamides: Nitric oxide-donor naproxen prodrugs [Text] / R.R. Ranatunge, M.E. Augustyniak, V. Dhawan [et al.] // Bioorg. Med. Chem. - 2006. -14(8). - P. 2589-2599.
120. Rautio, J., Kumpulainen H., Heimbach T. Prodrugs: design and clinical applications [Text] / J. Rautio, H. Kumpulainen, T.Heimbach // Nat. Rev. Drug Discov. -2008. - Vol. 7, Issue 3. - P. 255-270.
121. Rose, E.J. Nitric oxide ferrohemes: kinetics of formation and photodissociation quantum yields [Text] / E.J. Rose, B.M. Hoffman // J. Am. Chem. Soc. - 1983. Vol.105. - P. 2866-2873.
122. Rubbo, H. Peroxynitrite inactivates thiol-containing enzymes of Trypanosoma cruzi energetic metabolism and inhibits cell respiration [Text] / H. Rubbo, A. Denicola, R. Radi // Arch. Biochem. Biophys. - 1994. - Vol. 308. - P. 96.
123. Rudneva, T.N. Synthesis and structure of water-soluble nitrosyl iron complex with cysteamine ligand [Fe2(S(CH)2NHs)2(NO)4]SO4^2.5 H2O [Text] / T.N. Rudneva, N.A. Sanina, K.A. Lysenko [et al.] // Mend. Comm. - 2009. - Vol. 19. - P. 253255.
124. Salter, M. Widespread tissue distribution, species distribution and changes
94- 9+
in activity of Ca -dependent and Ca -independent nitric oxide synthases [Text] / M. Salter, R.G. Knowler, S. Moncada // FEBS Lett. - 1991. - Vol. 291. - P. 145-149.
125. Salvemini, D. The metabolism of glyceryltrinitrate to nitric oxide in the macrophage cell line J774 and its induction by Escherichia coli lipopolysaccharide [Text] / D. Salvemini, A. Pistelli, V. Mollage // J. Biochem. Pharmacol. - 1992. - Vol. 44, Issue 1. - P. 17-24.
126. Samuni, A. Kinetics and mechanism of hydroxyl radical and OH-adduct radical reactions with nitroxides and with their hydroxylamines [Text] / A. Samuni, S. Goldstein, A. Russo [et al.] // J. Am. Chem. Soc. - 2002. - Vol. 124. - P. 8719-8724.
127. Samuni, A.M. Site-activity relationship of nitroxide radicals antioxidative effect [Text] / A.M. Samuni, Y. Barenholz // Free Radic. Biol. Med. - 2003. - Vol.34. -P. 177-185
128. Samuni, A.M. Nitroxides as antioxidants: Tempol protects against E09 cytotoxicity [Text] / A.M. Samuni, W. DeGraff, M.C. Krishna [et al.] //Mol. Cell. Bio-chem. -2002. - Vol.23, Issue 4. - P. 327-333.
129. Samuni, Y. Factors influencing nitroxide reduction and cytotoxicity in vitro [Text] / Y. Samuni, A. Samuni [et al.] // Antioxidant Redox. Signal. - 2004. - Vol. 6. -P. 587-595.
130. Sanina, N.A. Reaction of sulfur-nitrosyl iron complexes of «g=2,03» family with hemoglobin (Hb):Kinetics of Hb-NO formation in aqueous solutions [Text] / N.A. Sanina, L.A. Syrtsova, N.I. Shkondina // Nitric Oxide:Biology and Chemistry. -2007. - Vol. 16, Issue 2. - P. 181-188.
131. Schechter, A.N. Hemoglobin and the paracrine and endocrine functions of nitric oxide [Text] / A.N. Schechter, M.T. Gladwin // New. Engl. J. Med. - 2003. - Vol. 348. - P. 1483-1485.
132. Schonhoff, C.M. Nitrosylation of cytochrome c during apoptosis [Text] / C.M. Schonhoff, B. Gaston, J.B. Mannick // J. Biol. Chem. - 2003. - Vol. 278. - P. 18265-18270.
133. Sharpe, M.A. Reactions of nitric oxide with mitochondrial cytochrome c: a novel mechanism for the formation of nitroxyl anion and peroxynitrite [Text] / M.A. Sharpe, C.E. Cooper // J. Biochem. - 1998. - Vol. 332. - P. 9-19.
134. Shekhter, A.B. Beneficial effect of gaseous nitric oxide on the healing of skin wounds [Text] / A.B. Shekhter, V.A. Serezhenkov, T.G. Rudenko // Nitric oxide: biology and chemistry. - 2005. - Vol. 12, Issue 4. - P. 209-210.
135. Stuehr, D.J. Spectral characterization of brain and macrophage nitric oxide synthases. Cytochrome P-450-like hemeproteins that contain a flavin semiquinone radical [Text] / D.J. Stuehr, S.M. Ikeda // J. Biol. Chem. - 1992. - Vol. 267, Issue 29. - P. 20547-20550.
136. Sun, Jie. Measurement of nitric oxide production in biological systems by using Griess reaction assay [Text] / Jie Sun, Xueji Zhang, M.Broderick // Sensors. -2003. - №3. - P. 276-284.
137. Tarpey, M.M. Methods of detection of vascular reactive species: Nitric oxide, superoxide, hydrogen peroxide, and peroxynitrite [Text] / M.M. Tarpey, I. Fri-dovich // Citr. Res. - 2001. - Vol. 89. - P. 224-236.
138. van der Vliet, A. Formation of reactive nitrogen species during peroxidase-catalyzed oxidation of nitrite. A potential additional mechanism of nitric oxide-dependent toxicity [Text] / A. van der Vliet, J.P. Eiserich, B. Halliwell // J. Biol. Chem.
- 1997. - Vol. 272. - P. 7617-7625.
139. Vanin, A.F. Dinitrosyl iron complexes with thiolate ligands: psysico-chemistry, biochemistry and physiology [Text] / A.F. Vanin // Nitric Oxide Biol. Chem.
- 2009. - №21. - P. 1-13.
140. Vanin, A.F. Endothelium-derived relaxing factor is a nitrosyl iron complex with thiol ligands [Text] // FEBS Lett. - 1991. - Vol. 289, Issue 1. - P. 1-3.
141. Vanin, A.F. Prospects of desingning medicines with diverse therapeutic activity on the basis of dinitrosyl iron complexes with thiol-containing ligands [Text] / A.F.Vanin, E.I. Chazov // Biophysics. - 2011. - Vol. 56, Issue 2. - P. 268-275.
142. Vanin, A.F. Antioxidant capacity of mononitrosyl-iron-dithiocarbamate complexes: Implications for NO trapping [Text] / A.F.Vanin, A. Huisman, E.S.G. Stroes [et al.] // Free Rad. Biol. Med. - 2001. - Vol.30, Issue 8. - P. 813-824.
143. Vanin, A.F. Iron dithiocarbamate as spin trap of nitric oxide detec-tion:pitfalls and successes [Text] / A.F. Vanin, A. Huisman, E.E. van Faassen // Meth. Enzymol. - 2002. - Vol. 359. - P. 27-42.
144. Vanin, A.F. Iron Catalyzes both Decomposition and Synthesis of S-Nitrosothiols: Optical and Electron Paramagnetic Resonance Studies [Text] / A.F. Vanin, I.V. Malenkova, V.A. Serezhenkov [et al.] // Nitric oxide: Biology and Chemistry. -1997. - Vol. 1, Issue 3. - P. 191-203.
145. Vanin, A.F. The relationship between L-arginin-dependent nitric oxide synthesis, nitrite release and dinitrosyl-iron complex formation by activated macrophages [Text] / A.F. Vanin, P.I. Mordvintcev, S. Hauschildt [et al.] // Biochim. Biophys. Acta.
- 1993. - Vol. 1177, Issue 1. - P. 37-42.
146. Vanin, A.F. Dinitrosyl-iron complexes with thiol-containing ligands: statial and electronic structures [Text] / A.F. Vanin, V.A. Sanina, V.A.Serezhenkov // Nitric oxide: biology and chemistry. - 2007.- №16. - P. 82-93.
147. Velazquez, C. Second-Generation aspirin and indomethacin prodrugs possessing an 02-(acetoxymethyl)-1-(2-carboxypyrrolidin-1-yl)diazenium-1,2-diolate nitric oxide donor moiety: Design, synthesis, biological evaluation, and nitric oxide release studies [Text] / C. Velazquez, Q.-H. Chen, M.L. Citro // J. Med. Chem. - 2008. Vol. 51, Issue 6. - P. 1954-1961.
148. Velazquez, C. Novel nonsteroidal antiinflammatory drugs possessing a nitric oxide donor diazen-1-ium-1,2-diolate moiety: Design, synthesis, biological evaluation, and nitric oxide release studies [Text] / C.Velazquez, P.N.P. Rao, E.E. Knaus [et al.] // J. Med. Chem. - 2005. Vol. 48, Issue 12. - P. 4061-4067.
149. Vlasova, I.I. Nitric oxide inhibits peroxidase activity of cytochrome c car-diolipin complex and blocks cardiolipin oxidation [Text] / I.I. Vlasova, V.A.Tyurin, A.A. Karpalov [et. al] // J. Biol. Chem. - 2006. - Vol. 281. - P. 14554-14562.
150. Walker, F.A. Nitric oxide interaction with insect nitrophorins and thoughts on the electron configuration of the FeNO complex [Text] / F.A. Walker // J. Inorg. Bi-ochem. - 2005. - Vol. 99, Issue 1. - P. 216-236.
151. Wang, P. Order and disorder in fullerene (C60) Langmuir-Blodgett films:direct imaging by scanning tunneling microscopy and high-resolution transmission electron microscopy [Text] / P. Wang, M. Shamsuzzoha, X.L. Wu [et al.] // J. Phys. Chem. - 1992. - Vol. 96. - P. 9025-9028.
152. Xavier, S. Differential protection by nitroxides and hydroxylamines to radiation-induced and metal ion-catalyzed oxidative damage [Text] / S. Xavier, K. Yama-da, A.M. Samuni [et al.] // Biochim. Biophys. Acta. - 2002. - Vol. 1573. - P. 109-120.
153. Xiao-Yan, Yin. Effects of endogenous nitric oxide induced by 5-fluorouracil and L-Arg on liver carcinoma in nude mice [Text] / Xiao-Yan, Yin, Jun-Mei Jiang, Ji-Young Liu, // World Journal of Gastroenterology. - 2007. Vol. 13, Issue 46. - P. 6249-6253.
154. Yokomizo, T. Co-expression of two LTB4 receptors in human mononuclear cells [Text] / T.Yokomizo, T. Izumi, T. Shimizu // Life Sci. - 2001. - Vol. 68. - P. 2207-2212.
155. Yonetani, T. Electron paramagnetic resonance and oxygen binding studies of a-nitrosyl hemoglobin [Text] / T. Yonetani, A. Tsuneshige, Y. Zhou // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273, Issue 32. - P. 20323-20333.
156. Yoshitomi, T. Nitroxyl radical-containing nanoparticles for novel nano-medicine against oxidative stress injury [Text] / T. Yoshitomi, Y. Nagasaki // Nanomed-icine. - 2011. - Vol. 6, Issue 3. - P. 509-518.
157. Young, S., Fabio K., Huang M.-T. Investigation of anticholinergic and non-steroidal anti-inflammatory prodrugs which reduce chemically induced skin inflammation [Text] / S. Young, K. Fabio, M.-T. Huang // J. Appl. Toxicol. - 2012. - Vol. 32, Issue 2. - P. 135-141.
158. Zafiriou, O.C. Determination of trace levels of nitricoxide in aqueous solution [Text] / O.C. Zafiriou, M. McFarland // Analyt. Chem. - 1980. - №52. - P.1662-1667.
159. Zweier, J. L. Enzymatic/non-enzymatic formation of nitric oxide [Text] / J. L. Zweier, P. Wang, A. Samouilov // Nat. Med. - 1995. - Vol. 1, Issue 11. - P. 11031104.
160. Zweier, J.L. Non-enzymatic nitric oxide synthesis in biological systems [Text] / J.L. Zweier, A. Samouilov, P. Kuppusamy //Biochim. Biophys. Acta. - 1999. -Vol. 1411, Issue 2. - P. 250-262.
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение 1. Проект фармакопейной статьи на ранозаживляющий порошок для наружного применения «Фуроцит».
Нормы качества порошка для наружного применения Фуроцит
Показатели Методы Нормы
Описание Визуальный Порошок желтого цвета, допускается наличие частиц в виде уплотнённой порошкообразной массы
1. Качественная реакция на нитрофураны (ГФ.Х, стр.319) 2. Качественная химическая реакция на цинк. 1. Препарат должен давать качественную реакцию на с 30% раствором натрия гидроксида (оранжево-красное окрашивание). 2. Препарат должен давать качественную реакцию на цинк.
Подлинность 3. Спектрофотометрия (5-нитрофурал) 3. Электронный спектр поглощения раствора, приготовленного для количественного определения 5-нитрофурала, в области от 350 до 600 нм должен соответствовать электронному спектру поглощения СО 5- нитрофурала, измеренных в этих же условиях и имеет максимумы поглощения при 260 нм ±2 нм и 375 нм ±2 нм и минимум поглощения при 306 ±2 нм.
4. Спектрофотометрия (цитохром с) 4. Электронный спектр поглощения раствора, приготовленного для качественного определения цитохрома с, в области 350-600 нм должен соответствовать электронному спектру поглощения градуировочных растворов цитохрома с, измеренных в этих же условиях.
и имеет максимумы поглощения при 415±2 нм, 520±2 нм, 550±2
нм и минимум поглощения при 402 нм.
5. ВЭЖХ (натрия аскорбат) 5. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, приготовленного для количественного определения, должно соответствовать времени удерживания пика на хроматограмме градуи-ровочных растворов натрия ас-корбата.
Масса содержимого НД От 9,5 до 10,5 г
Количественное
определение:
5-нитрофурал Натрия аскорбат Цитохром с Цинка оксид ВЭЖХ ВЭЖХ ААС ААС от 0,475 до 0,525 г (на 100 г порошка) от 0,095 до 0,105 г (на 100 г порошка) от 0,0475 до 0,0525 г (на 100 г порошка) от 0,095 до 0,105 г (на 100 г порошка)
Микробиологическая чистота ГФ XII, изд. №1, с. 160 Категория 2
Упаковка НД По 10 г в полиэтиленовые банки с дозатором.
Маркировка НД В соответствии с ФС
Транспортировка В соответствии с РД 9301-006-05749470-93
Хранение НД В сухом, защищенном от света месте, при температуре от 18 до 220 С (не выше 250 С)
Срок годности 2 года
Состав (масс. %)
5-нитрофурал (БР/РЬБиг)
- 0,50 г
Цитохром с
(Ы БТББ7839У, «БЬка» (ШЛ) «81вша-ЛМпсЬ»)
- 0,05 г
Натрия аскорбат (БР/РЬБиг)
- 0,10 г
Цинка оксид
- 0,10 г
(БР/РЬБиг)
Вспомогательных веществ:
Крахмал - до 100,00 г
(ГОСТ Р 53876-2010)
* - Ссылки даются на действующие издания.
Описание. Порошок желтого цвета, допускается наличие частиц в виде уплотнённой порошкообразной массы.
Подлинность. а). 0,01 г порошка растворяют в 5 мл воды и 5 мл раствора натрия гидроксида, появляется оранжево-красное окрашивание. Раствор фильтруют через фильтр «синяя лента», удаляя нерастворенный осадок. Электронный спектр данного раствора, снятый в кювете с толщиной слоя 10 мм, имеет максимум поглощения при Х=450 нм±2 нм.
б). 0,05 г порошка растворяют в 2 мл разведенной соляной кислоты и добавляют 8 мл воды дистиллированной, и 0,2 мл 5% раствора калия ферроцианида, через 10 минут появляется белый осадок или муть.
в). Электронный спектр поглощения раствора, приготовленного для количественного определения 5-нитрофурала, в области от 350 до 600 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм должен соответствовать электронному спектру поглощения СО 5-нитрофурала, измеренных в этих же условиях и имеет максимумы поглощения при 260 нм±2 нм и 375 нм±2 нм и минимум поглощения при 306 нм±2 нм.
г). Электронный спектр поглощения раствора, приготовленного для качественного определения цитохрома с, в области 350-600 нм должен соответствовать электронному спектру поглощения градуировочных растворов цитохрома с, измеренных в этих же условиях и имеет максимумы поглощения при 415±2 нм, 520±2 нм, 550±2 нм и минимум поглощения при 402 ±2 нм.
д). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора натрия аскорбата, приготовленного для количественного определения, должно соответствовать времени удерживания пика на хроматограмме градуиро-вочных растворов натрия аскорбата.
Масса содержимого.
Средняя масса содержимого должна быть от 9,5 до 10,5 г.
Определение проводят на трех упаковках. Взвешивают полиэтиленовую банку с содержимым, затем вскрывают банку, извлекают содержимого, промывают банку водой, высушивают и вновь взвешивают. По разности находят массу содержимого упаковки.
Количественное определение.
5-нитрофурал
От 0,45 до 0,55 г (на 100 г порошка)
Стандартные субстанции: 5-нитрофурал в соответствии со спе-
цификацией фирмы.
Растворителъ: Ацетонитрил;
Вода дистиллированная.
Приготовление модельных смесей 5-нитрофурала.
Модельная смесь 1: 0,25 г; (точная навеска) 5-нитрофурала помещают в ступку, перетирают, добавляют 0,05 г цито-хрома с, 0,1 г натрия аскорбата, 0,1 г цинка оксида до 100 г крахмала. Смесь перетирают пестиком до однородной желтоватой массы. 0,5 г (точная навеска) полученного порошка переносят в стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер рН 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы (соответствует 50% ожидаемой концентрации испытуемого раствора).
Модельная смесь 2: 0,5 г (точная навеска) 5-нитрофурала помещают в ступку, перетирают, добавляют 0,05 г цито-хрома с, 0,1 г натрия аскорбата, 0,1 г цинка оксида до 100 г крахмала. Смесь перетирают пестиком до однородной желтоватой массы. 0,5 г (точная навеска) полученного порошка переносят в стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер рН 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы (соответствует 100% ожидаемой концентрации испытуемого раствора).
Модельная смесь 3: 0,75 г (точная навеска) 5-нитрофурала помещают в ступку, перетирают, добавляют 0,05 г цито-хрома с, 0,1 г натрия аскорбата, 0,1 г цинка оксида
до 100 г крахмала. Смесь перетирают пестиком до однородной желтоватой массы. 0,5 г (точная навеска) полученного порошка переносят в стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер pH 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы (соответствует 150% ожидаемой концентрации испытуемого раствора).
Испытуемыйраствор: 0,5 г (точная навеска) порошка переносят в
стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер pH 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы.
Вводят растворы модельной смеси и испытуемый раствор три раза каждый.
Условия хроматографирования:
Колонка - Discovery C18 (5цш)
Детектор - спектрофотометрический с рабочей длиной волны 310 нм Подвижная фаза (ПФ) - смесь ацетонитрил: вода (21:79); Скорость потока ПФ - 1 мл/мин Объем вводимой пробы - 20 мкл Температура колонки - 35 °С.
Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования
теста «Проверка пригодности хроматографической системы».
1. Проверка пригодности хроматографи-ческой системы.
- относительные стандартные отклонения площадей пиков а- и у-токоферолов на хрома-тограммах растворов стандартных образцов а- и у-токофероловдолжны быть не более 3%;
- коэффициенты корреляции градуировоч-ныхграфиков для а- и у-токоферолов должны быть не менее 0,95;
- факторы асимметрии пиков а- и у-токоферолов должны быть не более 2,0;
- эффективность хроматографической-колонки, рассчитанная по пикама- и у-токоферолов должна быть не менее 10000 теоретических тарелок.
Расчёты.
Вычисления основаны на измерении площадей пиков.
Расчёт основан на линейной калибровочной функции производной от трёх растворов модельных смесей, для которой нет необходимости включать начало координат (трёх-точечная калибровка), и которая не включает взвешивания.
Содержание 5-нитрофурала в мг рассчитывают с учетом калибровочного графика.
Цитохром с
От 0,045 г до 0,055 г (на 100 г порошка) Стандартные субстанции: Цитохром с в соответствии со спецификацией фирмы.
Растворитель: Концентрированная азотная кисло-
та;
Вода дистиллированная.
Приготовление стандартных растворов железа
Стандартные растворы 1,2,3 (2; 6; 10 мкг/л) готовили из ГСО 7872-2000 Бе
Л
(10 мг/см3,фон - 1Н ИШ3). 1 мл раствора ГСО переносят пипеткой в колбу на 100мл, доводят до метки дистиллированной водой (раствор А). 2 мл раствора А переносят пипеткой в колбу на 100 мл, доводят до метки дистиллированной водой (раствор В).
Стандартный раствор 1:2 мл раствора В помещают мерную колбу на 100 мл,
доводят до метки дистиллированной водой (10 мкг/л). Стандартный раствор 2:6 мл раствора В помещают в мерную колбу на 100 мл,
доводят до метки дистиллированной водой (6 мкг/л). Стандартный раствор 3:10 мл раствора В помещают в мерную колбу на 100 мл,
доводят до метки дистиллированной водой (10 мкг/л). Испытуемый раствор: Около 1г (точная навеска) порошка помещают в мерный
стакан вместимостью 50 мл, прибавляют 50 мл разведенной азотной кислоты, после растворения порошка, фильтруют через складчатый бумажный фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 100 мл, трехкратно промывая фильтр 10 мл разведенной азотной кислотой. Объем доводят до метки. 10 мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 50 мл и доводят до метки разведенной азотной кислотой. Вводят стандартные растворы и испытуемый раствор три раза каждый. Условия анализа:
Лампа полого катода - X = 248,33 нм
Газовая среда - аргон
Объем вводимой пробы - 20 цЬ.
Данные стандартных растворов используют для построения калибровочного графика зависимости значения абсолютной абсорбции от содержания в р-рах Бе, после чего анализируется проба исследуемого раствора.
Содержание цитохрома с в мкг рассчитывают с учетом калибровочного графика.
Натрия аскорбат
От 0,05 до 0,15 г (на 100 г порошка)
Стандартные субстанции: Натрия аскорбат в соответствии со
спецификацией фирмы.
Растворитель: Ацетонитрил;
Вода дистиллированная.
Приготовление модельных смесей натрия аскорбата.
Модельная смесь 1: 0,05 г; (точная навеска) натрия аскорбата помещают в ступку, перетирают, добавляют 0,05 г ци-тохрома с, 0,5 г 5-нитрофурала, 0,1 г цинка оксида до 100 г крахмала. Смесь перетирают пестиком до однородной желтоватой массы. 0,5 г (точная навеска) полученного порошка переносят в стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер рН 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы (соответствует 50% ожидаемой концентрации испытуемого раствора).
Модельная смесь 2: 0,1 г (точная навеска) натрия аскорбата помещают в ступку, перетирают, добавляют 0,05 г цито-
хрома с, 0,5 г 5-нитрофурала, 0,1 г цинка оксида до 100 г крахмала. Смесь перетирают пестиком до однородной желтоватой массы. 0,5 г (точная навеска) полученного порошка переносят в стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер рН 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы (соответствует 100% ожидаемой концентрации испытуемого раствора).
Моделъная смесъ 3: 0,15 г (точная навеска) натрия аскорбата помещают в ступку, перетирают, добавляют 0,05 г ци-тохрома с, 0,5 г 5-нитрофурала, 0,1 г цинка оксида до 100 г крахмала. Смесь перетирают пестиком до однородной желтоватой массы. 0,5 г (точная навеска) полученного порошка переносят в стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер рН 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25 мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы (соответствует 150% ожидаемой концентрации испытуемого раствора).
Испытуемый раствор: 0,5 г (точная навеска) порошка переносят в
стакан на 50 мл, добавляют 15 мл подвижной фазы ацетонитрил-фосфатный буфер рН 6 в соотношении 27:73 (и/и), растворяют, фильтруют через фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 25
мл. Раствор в мерной колбе доводят до метки раствором подвижной фазы.
Вводят растворы модельной смеси и испытуемый раствор три раза каждый.
Условия хроматографирования:
Колонка - Discovery C18 (5цш)
Детектор - спектрофотометрический с рабочей длиной волны 254 нм Подвижная фаза (ПФ) - смесь ацетонитрил:вода (21:79); Скорость потока ПФ - 1 мл/мин Объем вводимой пробы - 20 мкл Температура колонки - 35 °С. Оценка пригодности хроматографической системы системы: Хроматографическая система считается пригодной, если:
- относительное стандартное отклонение площадей пиков натрия аскорбата, полученное для трёх вводов раствора модельной смеси 2, составляет не более 2%. Расчёты.
Вычисления основаны на измерении площадей пиков.
Расчёт основан на линейной калибровочной функции производной от трёх растворов модельных смесей, для которой нет необходимости включать начало координат (трёх-точечная калибровка), и которая не включает взвешивания.
Содержание натрия аскорбата в мг рассчитывают с учетом калибровочного графика.
Цинка оксид
От 0,05 до 0,15 г (на 100 г порошка)
Стандартные субстанции: Цинка оксид в соответствии со
спецификацией фирмы.
Растворитель: Концентрированная азотная кисло-
та;
Вода дистиллированная.
Приготовление стандартных растворов цинка
Стандартные растворы: 0,1; 0,2; 0,4 мг/л, которые готовили из ГСО 7837Л
2000 (10 мг/см3, фон - 1Н НШ3). 1 мл раствора ГСО переносят пипеткой в колбу на 100 мл, доводят до метки дистиллированной водой (раствор А). Стандартный раствор 1: 1 мл раствора В помещают мерную колбу на 100 мл,
доводят до метки дистиллированной водой (0,1 мг/л). Стандартный раствор 2: 1 мл раствора В помещают в мерную колбу на 50 мл,
доводят до метки дистиллированной водой (0,2 мг/л). Стандартный раствор 3: 1 мл раствора В помещают в мерную колбу на 25 мл,
доводят до метки дистиллированной водой (0,4 мг/л). Испытуемый раствор: Около 0,5 г (точная навеска) порошка помещают в мерный стакан вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл разведенной азотной кислоты, после растворения порошка, фильтруют через складчатый бумажный фильтр «Синяя лента» в мерную колбу вместимостью 50 мл, объем доводят до метки разведенной азотной кислотой. 1 мл полученного раствора переносят в мерную колбу на 25 мл и доводят до метки разведенной азотной кислотой.
Вводят стандартные растворы и испытуемый раствор три раза каждый. Условия анализа:
Лампа полого катода - X = 213,9 нм Газовая среда - воздух - ацетилен, 2,2 л-мин- 1 Объем вводимой пробы - 20 цЬ.
Данные стандартных растворов используют для построения калибровочного графика зависимости значения абсолютной абсорбции от содержания в р-рах 7п, после чего анализируется проба исследуемого раствора.
Содержание цинка оксида в мг рассчитывают с учетом калибровочного графика.
Микробиологическая чистота.
Испытания проводят в соответствии с требованиями ОФС 42-0067-07 (категория 2).
Упаковка. По 10 г в полиэтиленовые банки с дозатором. Каждую тубу вместе с инструкцией по применению помещают в пачку.
Вторичная и транспортная тара в соответствии с РД 9301-006-05749470-93.
Маркировка.
На тубе указывают:
• название препарата;
• состав (количество активных компонентов и консерванта) и лекарственную форму;
• способ применения;
• срок годности;
• название фирмы-производителя;
• номер серии;
• срок годности;
• условия отпуска из аптек;
• условия хранения;
• предупредительные надписи. На пачке указывают:
• торговое название препарата;
• МНН;
• состав (количество активных компонентов и консерванта) и лекарственную форму;
• массу препарата;
• способ применения;
• регистрационный номер;
• название фирмы-производителя, её адрес и логотип фирмы;
• номер серии и дату производства;
• срок годности;
• условия отпуска из аптек;
• условия хранения;
• предупредительные надписи;
• штрих-код.
Транспортирование. В соответствии с РД 9301-006-05749470-93 Хранение. В сухом, защищенном от света месте, при температуре от 18 до 220 С (не выше 250 С).
Срок годности. 2 года.
Приложения 2. Акты внедрения
603005, г. Нижний Новгород, ул. Минина 10/1
«Утверждаю» научной работе ГБОУ ЭДО «НижГМА» здрава России •Г. Терентьев
декабря 2015 г.
АКТ ВНЕДРЕНИЯ
«р2оГи™Га1СК°Й диссертации Коробко Валентины Михайловны на тему:
» на
соискание учёной степени кандидата фармацевтических наук по специальности 14 04 02 фармацевтическая химия, фармакогнозия в научно-исследовательскую работу кафедрьГ фармацевтической химии и фармакогнозии государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального
образования
«Нижегородская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации.
Комиссия в составе д.х.н., профессора, заведующего кафедрой фармацевтической химии и фармакогнозии Мельниковой Н.Б., к.х.н., доцента кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Жильцовой О.Е., к.х.н., доцента кафедры общей химии Красильниковой Е.В. подтверждает использование результатов, полученных Коробко Валентиной Михайловной в ходе работы над кандидатской диссертацией «Разработка и стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата», в научно-исследовательской работе на кафедре фармацевтической химии и фармакогнозии.
д.х.н., профессор, заведующий кафедрой фармацевтической химии и фармакогнозии
к.х.н., доцент кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии
к.х.н., доцент кафедры общей химии
603005, г. Нижний Новгород, ул. Минина 10/1
Н.Б. Мельникова
О.Е. Жильцова Е.В. Красильникова
«Утверждаю» тебной работе J0 «НижГМА» рдрана России , »рофёсс^р..^.сов
2015 г.
АКТ ВНЕДРЕНИЯ
результатов кандидатской диссертации Коробко Валентины Михайловны на тему «Разработка и стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата» на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук по специальности 14 04 02 -фармацевтическая химия, фармакогнозия в учебную работу кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Нижегородская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации.
Комиссия в составе д.х.н., профессора, заведующего кафедрой
фармацевтической химии и фармакогнозии Мельниковой Н.Б., к.х.н.,
доцента кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии Жильцовой
O.E., к.х.н., доцента кафедры общей химии Красильниковой Е.В.
подтверждает использование результатов, полученных Коробко Валентиной
Михайловной в ходе работы над кандидатской диссертацией «Разработка и
стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата»,в
курсе обучения студентов III-V курсов фармацевтического факультета на
кафедре фармацевтической химии и фармакогнозии.
д.х.н., профессор, заведующий кафедрой фармацевтической
химии и фармакогнозии
к.х.н., доцент кафедры фармацевтической химии и фармакогнозии
к.х.н., доцент кафедры общей химии
603005, г. Нижний Новгород, ул. Минина 10/1
'■Шгем
4
Н.Б. Мельникова
O.E. Жильцова
Е.В. Красильникова
АКТ ВНЕДРЕНИЯ
ъ,„,оцккслс,
Декабря 2015 г.
результатов кандидатской диссертации Коробко Валентины Михайловны на тему: «Разработка и стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата» на соискание учёной степени кандидата фармацевтических наук по специальности 14.04.02 -фармацевтическая химия, фармакогнозия в систему контроля качества препаратов государственного автономного учреждения здравоохранения Нижегородской области «Нижегородский областной центр по контролю качества и сертификации лекарственных средств».
Комиссия в составе директора, к.фарм.и., И.В. Спицкой; начальника испытательной лаборатории Е.В. Митрофановой подтверждает использование результатов, полученных Коробко Валентиной Михайловнойв ходе работы над кандидатской диссертацией «Разработка и стандартизация нитроксидсодержащего ранозаживляющего препарата»в государственном автономном учреждении здравоохранения Нижегородской области «Нижегородский областной центр по контролю качества и сертификации лекарственных средств» (603141, г. Нижний Новгород, ул. Геологов, д. 6, тел. (831)466-70-55, e-mail: nockksls@sandy.ru) в виде:
1. Методики качественного и количественного анализа 5-нитрофурала, натрия аскорбата, цитохрома с и цинка оксида методами УФ-спектроскопии, ОФ-ВЭЖХ, атомно-абсорбционной спектрофотометрии используются в системе мониторинга качества лекарственных средств;
2. Данные проекта ФСП на ранозаживляющий препарат «Фуроцит» используются в полном объеме.
Ответственные за внедрение: Директор, к.фарм.н. И.В. Спицкая
Начальник испытательной лаборатории /Ж. . . Е.В.Митрофанова
603141, г. Нижний Новгород, ул. Геологов, д. 6
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.