Разработка и оценка эффективности кинетических моделей тестирования биоантиоксидантов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.04, кандидат химических наук Журавлева, Людмила Анатольевна

• Журавлева, Людмила Анатольевна
• кандидат химических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат химических наук Журавлева, Людмила Анатольевна

Введение.

Глава 1. Теория свободнорадикального окисления.

1.1. Общая теория цепных разветвленных процессов окисления органических соединений.

1.2. Теоретические представления о механизме ингибирования.

1.3. Мицеллообразование. Основы и особенности межфазного и мицеллярного катализа.

1.4. Окисление углеводородов в присутствии мицелл и в двухфазных водно-органических системах.

1.5. Фракционный, жирно-кислотный состав и биологическая активность липидов.

1.6. Особенности кинетики и механизма окисления липидов и их жирно-кислотных компонентов.

1.7. Методы тестирования эффективности антиоксидантов.

Глава 2. Материалы и методы исследования.

2.1. Получение и очистка эфиров ненасыщенных жирных кислот.

2.2. Очистка инициатора.

2.3. Очистка растворителей.

2.4. Очистка ингибиторов.

2.5. Схема и принцип работы манометрической установки.

2.6. Методики окисления.

2.7. Методики определения критической концентрации мицеллообразования.

Глава 3. Результаты исследования эффективности кинетических моделей тестирования биоантиоксидантов в гомогенной среде.

3.1. Обсуждение результатов.

Глава 4. Результаты исследования эффективности водно-липидной кинетической модели тестирования биоантиоксидантов.

4.1. Исследование мицеллообразования водно-липидных систем.

4.2. Подбор катализатора.

4.3. Подходы для расчета кинетических параметров и оценки эффективности ионола при каталитическом окислении этилолеата.

4.4. Исследование эффективности и механизма действия а-токоферола при окислении метиллинолеата в условиях водно-липидной модели.

4.5. Исследование эффективности фенола и его производных при каталитическом окислении этилолеата.

4.5.1. Исследование эффективности и механизма действия осалмида при каталитическом окислении этилолеата.

4.5.2. Исследование эффективности и механизма действия эмоксипина при каталитическом окислении этилолеата.

4.5.3. Исследование эффективности и механизма действия парацетамола при каталитическом окислении этилолеата.

4.6. Исследование эффективности и механизма действия пирокатехина при каталитическом окислении этилолеата.

4.6.1. Исследование эффективности и механизма действия адреналина при каталитическом окислении этилолеата.

4.6.2. Исследование эффективности и механизма действия метилдофы при каталитическом окислении этилолеата.

4.7. Исследование эффективности и механизма действия капотена при каталитическом окислении метиллинолеата.

4.8. Обсуждение результатов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и оценка эффективности кинетических моделей тестирования биоантиоксидантов»

Настоящая работа посвящена исследованию эффективности липидной и водно-липидной кинетических моделей и подбору критериев тестирования во-донерастворимых и водорастворимых биоантиоксидантов.

Актуальность темы. За 90 лет после патентования гидрохинона в качестве стабилизатора окислительной деструкции акролеина области применения антиоксидантов значительно расширились. Антиоксиданты применяют в химической технологии, для стабилизации автомобильных, авиационных видов топлива и смазочных масел, в пищевой и фармацевтической промышленности. За этот период установлен радикально-цепной механизм окисления углеводородов и их производных и механизм действия многих ингибиторов в этих условиях.

С развитием радиобиологии в 50-х годах XX века появились представления о радикально-цепном механизме не только радиационного поражения, но и развития других патологий. К настоящему времени сформировалась теория свободнорадикального механизма развития большинства патологий путем нарушения проницаемости биомембран при изменении интенсивности окисления липидов. Эти научные достижения стимулировали широкое применение антиоксидантов в медицине. Но прогресс в антиоксидантотерапии, применении антиоксидантов в пищевой, фармацевтической технологиях требует разработки сопоставимых и достоверных методов тестирования биоантиоксидантов.

К биоантиоксидантам предъявляются требования их нетоксичности и эффективности в биологических средах.

Все существующие методы тестирования антиоксидантов делятся на кинетические и некинетические. Для некинетических методов известно использование суспензии митохондрий в фосфатном буфере и оценка результатов тестирования хемилюминесцентным методом [9]. Предполагается, что хемилюми-несценция связана с окислительно-восстановительными реакциями. Однако суть этого явления однозначно не установлена, так как свечение могут давать соединения разной химической природы [13; 30; 48; 62].

Показана возможность тестирования биоантиоксидантов путем аскорбат-зависимого окисления олеиновой кислоты в присутствии солей железа (II), аскорбиновой кислоты и растворов испытуемых веществ. В качестве субстратов используют также микросомы, суспензию желточных протеинов в фосфатном буфере, модельные системы липосом, сформированные из раствора яичного лецитина в глициновом буфере. Эффективность биоантиоксидантов в этих моделях оценивают по величине отношения периодов образования определенных концентраций пероксидов и гидроксидов в контрольной пробе и проб с биоанти-оксидантом [89].

Недостатком всех перечисленных методов является низкая точность из-за использования в качестве показателя окисляемости концентрации таких неустойчивых продуктов, как пероксиды. При этом в пробах со слабыми ингибиторами, способными участвовать в распаде гидропероксидов, могут быть зафиксированы высокие значения отношений периодов индукции. Применение аскорбиновой кислоты также может вносить неточности в результаты тестирования, так как известно, что она служит восстанавливающим агентом катионов Fe3+ и способна к синергизму с рядом фенолов и ароматических аминов.

Недостатком этих методов также является трудность стандартизации субстратов, и поэтому невозможность повторить результаты экспериментов.

С целью увеличения точности и информативности методов тестирования биоантиоксидантов широко используют в качестве кинетических моделей растворы углеводородов, таких как кумол, этилбензол, стирол. Кинетические параметры процессов окисления этих соединений хорошо изучены, что позволяет оценить эффективность антиоксидантов и биоантиоксидантов по величине константы скорости обрыва цепей [17; 26; 57]. В этилбензоле и стироле определены значения константы скорости обрыва цепей для токоферолов и убихинонов [24; 25; 27; 51; 96]. Однако использование углеводородов для тестирования антиоксидантов для биологических и пищевых субстратов ограничено большой разницей в структуре и механизмах окисления углеводородов и липидов.

В качестве модельных субстратов для оценки эффективности антиокси-дантов для пищевых продуктов, масляных основ фармацевтических препаратов известно использование процессов инициированного окисления безводных растворов олеатов, линолеатов [100]. Кинетика и механизм окисления эфиров высших ненасыщенных жирных кислот достаточно хорошо изучены, что позволяет использовать эти субстраты в качестве модельных для тестирования липидрастворимых биоантиоксидантов [10; 74-76; 78; 115].

Модель для тестирования биоантиоксидантов должна удовлетворять следующим условиям; а) реакция окисления должна протекать с высокой скоростью, что обеспечивается температурой проведения эксперимента (при 60,0±0,2°С); б) реакция должна протекать в кинетической области (не зависеть от скорости перемешивания окисляемого субстрата); в) необходимо исключить соокисляемость компонентов системы.

В целом актуальность настоящей работы обусловлена необходимостью разработки кинетических методов тестирования водорастворимых и водонерас-творимых биоантиоксидантов.

Особенно актуальным представляется разработка и оценка эффективности модели для тестирования водорастворимых биоантиоксидантов. Именно водорастворимые нетоксичные соединения могут применяться для антиоксидан-тотерапии, торможения процессов окисления водных биологических и пищевых субстратов. Представляются актуальными сравнение эффективности разных кинетических моделей тестирования биоантиоксидантов и разработка практических рекомендаций по их применению.

Цели и задачи исследования. Целью работы является разработка и оценка эффективности кинетических моделей тестирования растворимых и нерастворимых в воде биоантиоксидантов.

В процессе достижения цели в работе решались следующие задачи:

1) разработка кинетической модели тестирования липидрастворимых биоантиоксидантов;

2) разработка метода внешнего стандарта для оценки эффективности и механизма действия липидрастворимых биоантиоксидантов;

3) исследование критериев оценки эффективности и механизма действия липидрастворимых биоантиоксидантов методом математического моделирования;

4) разработка кинетической модели тестирования водорастворимых биоантиоксидантов по результатам исследования процессов мицеллообразования и кинетики каталитического окисления водно-липидных субстратов;

5) исследование критериев тестирования эффективности и механизма действия водорастворимых биоантиоксидантов;

6) тестирование водорастворимых соединений классов фенолов, аминов, тиолов в условиях водно-липидной модели, оценка их эффективности и механизма действия с помощью разработанных критериев;

7) сравнение водно-липидной и безводной кинетических моделей по информативности и области применения.

Научная новизна:

1. Разработаны две кинетические модели, которые позволяют производить поиск эффективных биоантиоксидантов не только среди традиционно исследуемых водонерастворимых соединений, но и среди природных и синтетических водорастворимых соединений, а также оценивать интегральную антиок-сидантную активность всей совокупности компонентов биологического материала и биологических сред.

2. Разработана совокупность критериев оценки эффективности и механизма действия биоантиоксидантов с помощью метода внешнего стандарта, а также по величинам параметров аппроксимирующих функций и их производных. Это позволяет оценить периоды полного торможения и выхода на стационарный режим, участие ингибитора в обрыве, продолжении, разветвлении цепей, величины начальной и максимальной скоростей, минимальную критическую концентрацию, при которой биоантиоксидант не влияет на кинетику процесса, и максимальную критическую концентрацию, при которой биоантиоксидант проявляет высокую антиоксидантную активность.

3. Впервые показаны особенности механизма действия некоторых фенолов при каталитическом окислении водно-липидных субстратов, высокая анти-оксидантная активность водорастворимых лекарственных препаратов различного фармакологического действия, способных расширить ассортимент средств антиоксидантотерапии.

Практическая значимость работы заключается в том, что предложены две кинетические модели, позволяющие тестировать антиоксидантную активность всей совокупности водо- и липидрастворимых компонентов биологического сырья и тем самым расширить ассортимент нетоксичных биологических добавок и средств антиоксидантотерапии.

В работе экспериментально доказана антиоксидантная активность ряда гипотензивных, адреномиметических, желчегонных препаратов, что дает основание исследовать возможность расширения их фармакологического действия и терапевтического применения.

Водно-липидная кинетическая модель, разработанная соискателем, практически применима для тестирования синтетических и природных водорастворимых соединений, а кинетические и математические критерии позволяют всесторонне оценить эффективность и механизм действия антиоксидантов.

Разработан оригинальный способ тестирования антиоксидантов и расчета кинетических параметров. Доказана антиоксидантная активность ряда гипотензивных, адреномиметических лекарственных препаратов и возможность их применения в антиоксидантотерапии.

Апробация работы. Основные результаты доложены на Всероссийских Менделеевских чтениях «Д.И. Менделеев и Сибирь: История и современность» (Тобольск, 1999), Всероссийской научно-практической конференции «Медико-биологические и экологические проблемы здоровья человека на Севере» (Сургут, 2000), межвузовской конференции «Научная молодежь-XXI веку» (Сургут,

2001), в сборнике научных трудов (Сургут, 2001), на III окружной конференции «Наука и инновации Ханты-Мансийского автономного округа» (Сургут, 2002), IV окружной научно-практической конференции «Наука и инновации XXI века» (Сургут, 2003), Всероссийской научной конференции «Экологические проблемы и здоровье населения Севера» (Сургут, 2004), Международной научной конференции «Медико-биологические и экологические проблемы здоровья человека на Севере» (Сургут, 2004), V окружной конференции «Наука и инновации XXI века» (Сургут, 2004), VI окружной конференции «Наука и инновации XXI века» (Сургут, 2005). По результатам исследования опубликованы статьи в журналах «Вестник ТюмГУ» (Тюмень, 2006), «Вопросы современной науки и практики. Университет им. В.И. Вернадского» (Тамбов, 2006).

Публикации. По результатам экспериментов опубликовано 13 печатных работ, в том числе приняты в печать статьи в журнал «Кинетика и катализ» и «Химико-фармацевтический журнал», подана заявка на изобретение (дата поступления 24.05.2005, входящий № 017934, регистрационный № 2005115666).

Заключение диссертации по теме «Физическая химия», Журавлева, Людмила Анатольевна

ВЫВОДЫ

1. Предложена кинетическая модель тестирования водонерастворимых биоантиоксидантов путем исследования кинетики инициированного окисления растворов эфиров ненасыщенных жирных кислот в хлорбензоле при 60,0±0,2°С в зависимости от концентрации и природы биоантиоксиданта. Пробу эфира (этилолеата, метиллинолеата) в хлорбензоле в соотношении 1 : 1 (по объему) и добавкой инициатора 2, 2'-азобисизобутиронитрила 1-4 мг/мл насыщают кислородом. Окисление проводят в термостатированной ячейке манометрической установки. Волюмометрически при непрерывном перемешивании определяют поглощение кислорода во времени в контрольной пробе и пробах с добавками биоантиоксиданта.

2. Предложены критерии оценки эффективности и механизма действия биоантиоксидантов методом внешнего стандарта и с помощью математической модели. В качестве внешнего стандарта предложен ионол, в качестве критериев -минимальная и максимальная критические концентрации биоантиоксиданта, начальная и максимальная скорости процесса, периоды полного торможения и окончания ускорения, ускорение процесса.

3. По результатам исследования мицеллообразования двух- и трехкомпо-нентных систем и каталитической активности солей ряда ^-элементов IV периода

О -i- О Л О -4- О Л- -2

Си ; Ni ; Со ; Fe ; Fe ) разработана кинетическая водно-липидная модель тестирования водорастворимых биоантиоксидантов. Пробу эфира (этилолеата или метиллинолеата) и воды в соотношении 1 : 3 (по объему) добавками хлорида меди и цетилтриметиламмония бромида с конечными концентрациями л

1-5)-10 моль/л насыщают кислородом. Окисление проводят в термостатированной ячейке манометрической установки при 60,0±0,2°С. Волюмометрически при непрерывном перемешивании определяют поглощение кислорода во времени в контрольной пробе и пробах с добавками биоантиоксиданта.

4. По результатам сравнения двух кинетических моделей выявлены различия эффективности ингибиторов в водно-липидной и безводных средах. Показано, что наиболее важный биоантиоксидант - а-токоферол эффективен в безводной среде и низко эффективен в водно-липидной.

5. Выявлены особенности механизма действия фенолов и аминов при каталитическом окислении водно-липидных субстратов. Показано, что фенолы с меньшей антирадикальной активностью, чем у ионола, быстро окисляются под действием катализатора.

6. С использованием водно-липидной кинетической модели впервые протестированы антиоксидантные свойства восьми водорастворимых лекарственных препаратов в зависимости от строения.

7. Показана высокая антиоксидантная активность капотена, осалмида и адреналина в водно-липидной среде, что может служить основанием для расширения области их фармакологической активности.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Журавлева, Людмила Анатольевна, 2006 год

1. Абрамзон А.А. Поверхностно-активные вещества. Синтез, анализ, применение / А.А. Абрамзон, Л.П. Зайченко, С.И. Файнгольд. Л.: Химия, 1988. - 200 с.

2. Абрамзон А.А. Поверхностные явления и поверхностно-активные вещества: Справочник / А.А. Абрамзон, Л.Е. Боброва, Л.П. Зайченко и др.; Под ред.

3. A.А. Абрамзона и Е.Д. Щукина. 2-е изд., испр. и доп. - Л.: Химия, 1984. - 392 с.

4. Аристархова С.А. Изучение ингибирующей активности токоферолов / С.А. Аристархова, Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Известия АН СССР. Сер. хим. 1972. - № 12. - С. 2714-2718.

5. Бабаекин П.М. Определение липидных спектров сыворотки и цельной крови методом прямой денситометрии тонкослойных хроматограмм // Лечебное дело. 1977. - № 7. - С. 406-407.

6. Байрамов В.М. Основы химической кинетики и катализа / Под ред.

7. B.В. Лукина. -М.: Академия, 2003. 256 с.

8. Белых П.Д. Связь солюбилизации органических веществ с их мольным объемом / П.Д. Белых, А.А. Абрамзон // Коллоидн. журн. 1976. - Т. 48, № 5.1. C. 856-861.

9. Березин И.В. Физико-химические основы мицеллярного катализа / И.В. Березин, К.И. Мартинек, А.К. Яцимирский // Успехи химии. 1973. - Т. 42, № 1. -С. 1729-1756.

10. Большаков Г.Ф. Образование гетерогенной системы при окислении углеводородных топлив. Новосибирск: Наука, 1990. - 248 с.

11. Бурлакова Е.Б. Изучение суммарной активности природных антиоксидантов липидов хемилюминесцентным методом / Е.Б. Бурлакова, Н.М. Сторожок, Н.Г. Храпова // Биофизика. 1988. - Т. 33, вып. 4. - С. 584-588.

12. Бурлакова Е.Б. Кинетические особенности токоферолов как антиоксидантов: Препринт / Е.Б. Бурлакова, С.А. Крашаков, Н.Г. Храпова. Черноголовка, 1992. - 56 с.

13. П.Бурлакова Е.Б. О влиянии боковой фитильной цепи токоферолов на окислительные реакции, протекающие в липидах / Е.Б. Бурлакова, Е.Н. Кухти-на, И.К. Сарычева // Биохимия. 1982. - Т. 47, вып. 6. - С. 987-992.

14. П.Бурлакова Е.Б. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты / Е.Б. Бурлакова, Н.Г. Храпова // Успехи химии. 1985. - Т. 54, вып. 9.-С. 1540-1558.

15. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.: Наука, 1972. - 249 с.

16. Власов В.М. Межфазный катализ в реакциях ароматического нуклео-фильного замещения // Журн. орган, химии. 1998. - Т. 34, вып. 9. - С. 1367-1377.

17. Воробьев Е.В. Исследование влияния меди и ее соединений на эффективность аминного антиоксиданта // Известия Гомельского гос. ун-та. 2003. -№5.-С. 132-135.

18. Гаевский В.Ф. Исследование кинетики окисления толуола на кобальт-бромидном катализаторе / В.Ф. Гаевский, Н.П. Евлиненко, К.И. Матковский // Нефтехимия. 1974. - Т. 14, № 2. - С. 256-262.

19. Гладышев Г.П. Тестирование химических соединений как стабилизаторов полимерных материалов / Г.П. Гладышев, В.Ф. Цепалов // Успехи химии. -1975. Т. 44, вып. 10. - С. 1830-1850.

20. Государственная фармакопея СССР / Под ред. М.Д. Машковского. -М.: Медицина, 1987. 333 с.

21. Грибанов Г.А. Микротонкослойная хроматография фосфолипидов сыворотки крови и их количественное определение с помощью малахитового зеленого / Г.А. Грибанов, С.А. Сергеев, А.С. Алексеенко // Лечебное дело. 1976. -№ 12. - С. 724-727.

22. Грибанов Г.А. Экспресс-микроанализ общих липидов сыворотки крови и их фракций / Г.А. Грибанов, С.А. Сергеев // Вопр. мед. химии. 1975. -Т. 21, №6.-С. 652-655.

23. Данилов A.M. Проблемы окислительной стабильности вторичных дие-тиллятных топлив // Нефтехимия. 1992. - Т. 4. - С. 374.

24. Демлов Э. Межфазный катализ / Э. Демлов, 3. Демлов. М.: Мир, 1987.-485 с.

25. Денисов Е.Т. Ингибирование цепных реакций / Е.Т. Денисов, Н.М. Эмануэль, В.В. Азатян. Черноголовка: ИХФ РАН, 1997. - 370 с.

26. Денисов Е.Т. Кинетика гомогенных химических реакций. М.: Высш. школа, 1988.-391 с.

27. Денисов Е.Т. Константы скорости гемолитических жидкофазных реакций. М.: Наука, 1971.-711 с.

28. Денисов Е.Т. Механизмы гемолитического распада молекул в жидкой фазе // Итоги науки и техники. Сер. «Кинетика и катализ». 1981. - Т. 9. - С. 1.

29. Денисов Е.Т. Химическая кинетика: Учебник для вузов / Е.Т. Денисов, О.М. Саркисов, Г.И. Лихтенштейн. -М.: Химия, 2000. 568 с.

30. Дунаева А.Н. Определение жирно-кислотного состава спектра фракций липидов крови // Лаб. дело. 1983. - № 10. - С. 57-59.

31. Едимечева И.П. Взаимодействие пространственно-экранированных фенолов и хинонов с органическими радикалами / И.П. Едимечева, Н.И. Островская, Г.И. Полозов, О.И. Шадыро // Журн. общ. химии. 2005. - Т. 75, № 4. -С. 632-635.

32. Журавлев А.И. Спонтанная биохемилюминесценция животных тканей // Биохемилюминесценция. Т. 58. -М.: Наука, 1983. С. 2-29.

33. Захаров И.В. Механизм каталитического аутоокисления этилбензола и тетралина в присутствии солей кобальта и брома // Кинетика и катализ. 1974. -Т. 15, №6.-С. 1457.

34. Касаикина О.Т. Ингибирующая активность природных фенольных ан-тиоксидантов в процессах окисления липидных субстратов / О.Т. Касаикина,

35. B.Д. Кортенска, Э.М. Маринова, И.Ф. Русина, Н.В. Янишлиева // Известия РАН. Сер. хим. 1997. -№ 6. - С. 1119-1122.

36. Кеда Б.И. Определение содержания высших жирных кислот в сыворотке крови людей методом газовой хроматографии / Б.И. Кеда, А.Е. Хомяков // Лаб. дело. 1975. - № 2. - С. 87-90.

37. Кимура Т. Мицеллярный катализ и его применение в органической химии // Хёмен. 1976. - Т. 14, № 89. - С. 449-463.

38. Костова Н.З. Влияние растворения углеводородов на мицеллообразование в водных растворах мыл при различных температурах / Н.З. Костова, З.Н. Маркина, П.А. Ребиндер, А.Е. Кузьмина // Коллоид, журн. 1971. - Т. 33, № 1. - С. 75-85.

39. Крепе Е.М. Липиды клеточных мембран. Л.: Наука, 1981. - 339 с.

40. Критчфилд Ф. Анализ основных функциональных групп в органических соединениях. М: Химия, 1965. - 207 с.

41. Кудрин А.Н. Свободнорадикальное перикисное окисление липидов -триггерный молекулярный механизм инфаркта миокарда и ингибирование его селеном, а-токоферолом и их комбинацией / А.Н. Кудрин, А.Х. Коган,

42. C.М. Николаев // Человек и лекарство: 3-й Рос. нац. конгр. Москва, 16-20 апр. 1996 г.-М., 1996.-С. 30.

43. Мартинек К. Кинетическая теория и механизмы мицеллярных эффектов в химических реакциях / К. Мартинек, А.К. Яцимирский, А.В. Левашов, И.В. Березин // Мицеллообразование, солюбилизация и микроэмульсии. М.: Мир, 1980. - С. 224-246.

44. Миргородская А.Б. Влияние мицеллярных растворов ПАВ на реакционную способность длинноцепочных аминов / А.Б. Миргородская, Л.А. Кудрявцева, Ю.Ф. Зуев, Н.Н. Вылегжанина // Журн. физ. химии. 2002. - Т. 76, № 11. - С. 2002.

45. Мукерджи ПЛ. Широкий мир мицелл / ПЛ. Мукерджи, КЛ. Миттел // Мицеллообразование, солюбилизация и микроэмульсии. -М.: Мир, 1980. С. 131.

46. Некипелова Т.Д. Влияние природы ПАВ на положение молекул 6-R-2, 2, 4-триметил-1, 2 дигидрохинонов в мицеллах // Известия РАН. Сер. хим. -1994,-№5.-С. 948-951.

47. Опейда И.А. Окисление алкиларенов в присутствии н-бутилпиридиний бромида / И.А. Опейда, Н.М. Залевская // Нефтехимия. -1989. Т. 19, № 2. - С. 244.

48. Паничева Л.П. Кинетические аспекты окисления алкилароматических углеводородов в эмульсиях / Л.П. Паничева, С.А. Паничев, Е.А. Турнаева, В.А. Тур-наев, А.Я. Юффа // Кинетика и катализ. 1996. - Т. 37, № 3. - С. 402-407.

49. Реутов О.А. Органическая химия: Учеб. пособие для вузов: В 2 ч. / О.А. Реутов, А.Л. Курц, К.П. Бутин. М.: Изд-во МГУ, 1999. - Ч. 1. - 560 с.

50. Рогинский В.А. Исследование ингибиторов перекисного окисления липидов акцепторов алкильных радикалов // Исследование синтетических и природных антиоксидантов in vitro и in vivo. - М., 1992. - С. 48-53.

51. Рогинский В.А. Кинетика аутоокисления эфиров полиненасыщенных жирных кислот / В.А. Рогинский, И.В. Уткин // Кинетика и катализ. 1991. -Т. 32, вып. 4.-С. 814-819.

52. Рогинский В.А. Фенольные антиоксиданты. М.: Наука, 1988. - 247 с.

53. Русанов А.И. Мицеллообразование в растворах поверхностно-активных веществ. Л.: Химия, 1992. - 280 с.

54. Русанов А.И. Термодинамика мицеллярных растворов // Успехи коллоид. химии и физ.-хим. механики. 1992. - С. 54-60.

55. Рыхленко А.А. Электронномикроскопическое исследование мицелляр-ных растворов ПАВ в воде и октане / А.А. Рыхленко, Т.С. Трушкина, А.А. Аб-рамзон, А.К. Сироткин // Коллоид, журн. 1987. - Т. 49, № 1. - С. 192-196.

56. Сводный прайс-лист: Лекарственные средства // Фарминдекс. 2002. -№35.-С. 74-203.

57. Семенов Н.Н. Цепные реакции. М.: Наука, 1986. - 535 с.

58. Сирота Т.В. Влияние поверхностно-активных веществ на окисление парафиновых углеводородов / Т.В. Сирота, О.Т. Касаикина // Нефтехимия. -1994.-Т. 34, №5.-С. 467-472.

59. Скурихин И.М. Химический состав пищевых продуктов / Под ред. И.М Скурихина, В.А. Шатерникава. М.: Легкая и пищ. пром., 1984. - 327 с.

60. Современные направления исследований цепных жидкофазных реакций окисления // Проблемы кинетики элементарных химических реакций: Сб. ст. / Сост. Н.М. Эмануэль. М.: Наука, 1973. - С. 1-58.

61. Старке Ч.М. Межфазный катализ. Химия, катализаторы и применение. -М.: Мир, 1991.- 158 с.

62. Сторожок Н.М. Взаимосвязь между ингибирующими свойствами и активностью феноксильных радикалов антиоксидантов различного химического строения / Н.М. Сторожок, Н.В. Гуреева, А.П. Крысин, В.Е. Борисенко,

63. И.Ф. Русина, Н.Г. Храпова, Е.Б. Бурлакова // Кинетика и катализ. 2004. -Т. 45, №4.-С. 519-527.

64. Уайт А. Основы биохимии: В 3 т. / А. Уайт, Ф. Хендлер, Э. Смит, Р. Хилл. -М.: Мир, 1981.-Т. 3.- 1878 с.

65. Ушкалова В.Н. Кинетика окисления липидов. Аутоокисление // Кинетика и катализ. 1984. - Т. 25, № 2. - С. 283-286.

66. Ушкалова В.Н. Кинетика окисления липидов. Инициированное окисление // Кинетика и катализ. 1983. - Т. 24, № 6. - С. 1311-1315.

67. Ушкалова В.Н. Кинетика реакций, перспективных для тестирования гомолитических свойств липидов // Бюлл. эксперим. биолог, и мед. 1984. -Т. 48, №9.-С. 384.

68. Ушкалова В.Н. Контроль перекисного окисления липидов / В.Н. Ушкалова, Н.В. Ионидис, Г.Д. Кадочникова, З.М. Деева. Новосибирск: Изд-во НГУ, 1993. - 181 с.

69. Ушкалова В.Н. Методы тестирования окислительной стабильности, антиоксидантной активности липидов // Вопр. питания. 1986. -№ 1. - С. 9-15.

70. Ушкалова В.Н. Окислительная деструкция жирно-кислотных компонентов в пищевых липидах // Вопр. питания. 1986. - № 4. - С. 7-13.

71. Ушкалова В.Н. Окислительная стабильность липидов муксуна / В.Н. Ушкалова, Н.В. Ионидис // Вопр. питания. 1985. - № 1. - С. 57-61.

72. Ушкалова В.Н. Содержание, антиоксидантная активность и стабильность токоферолов в пищевых липидах // Вопр. питания. 1986. - № 3. - С. 10-17.

73. Ушкалова В.Н. Стабильность липидов пищевых продуктов. М.: Агро-промиздат, 1988. - 153 с.

74. Фендлер Е. Мицеллярный катализ в органических реакциях: кинетика и механизм / Е. Фендлер, Дж. Фендлер // Методы и достижения в физико-органической химии. М.: Мир, 1973. - С. 222-361.

75. Харитонова А.А. Кинетический анализ свойств антиоксидантов в сложных композициях с помощью модельной цепной реакции / А.А. Харитонова, З.К. Козлова, Б.Ф. Цепалов, Г.П. Гладышев // Кинетика и катализ. 1979. — Т. 20, №3,-С. 593-599.

76. Хомяков А.Е. Содержание высших жирных кислот и общих липидов в сыворотке крови больных острым панкреатитом / А.Е. Хомяков, Б.И. Кеда // Клинич. медицина. 1974. - Т. 52, № 11. - С. 70-78.

77. Цепалов Г.П. Тестирование химических соединений как стабилизаторов полимерных материалов / Г.П. Цепалов, В.Ф. Гладышев // Успехи химии. -1975. Т. 44, № 10. - С. 1830-1850.

78. Чернова З.К. Мицеллярная экстракция как способ управления аналитическими реакциями / З.К. Чернова, С.Ю. Доронин, JI.M. Козлова, А.Н. Панкратов, О.И. Железко // Журн. аналитич. химии. 2003. - Т. 58, № 7. - С. 714-715.

79. Шибаева JI.B. Кинетика жидкофазного окисления кумола, катализируемого ацетатом кобальта в обращенных мицеллах / JI.B. Шибаева, Н.Г. Арико, Н.И. Мицкевич // Известия АН БССР. Сер. хим. 1984. - № 4. - С. 22-26.

80. Шибаева JI.B. Окисление кумола, катализируемое ацетатом кобальта в мицеллярных системах / JI.B. Шибаева, Н.Г. Арико, Н.И. Мицкевич // Известия АН БССР. Сер. хим. 1985. - № 3. - С. 18-20.

81. Штыков С.Н. Поверхностно-активные вещества в анализе. Основные достижения и тенденции развития // Журн. аналитич. химии. 2000. - Т. 55, № 7. - С. 679-686.

82. Эмануэль Н.М. Кинетика и механизм реакций жидкофазного окисления углеводородов // Известия АН СССР. Сер. хим. 1974. - № 5. - С. 1056-1072.

83. Эмануэль Н.М. Курс химической кинетики / Н.М. Эмануэль, Д.Г. Кнорре. М.: Высш. школа, 1984. - 400 с.

84. Эмануэль Н.М. Механизм каталитического действия комплексов меди о-фенантролином в реакциях аутоокисления / Н.М. Эмануэль, A.M. Сахаров, И.П. Скибида // Известия АН СССР. Сер. хим. 1975. - № 12. - С. 2692-2699.

85. Эмануэль Н.М. Химическая и биологическая кинетика // Успехи химии. -1981. Т. 50, №10. - С 1721-1809.

86. Янишлиева Н. О скорости и механизме зарождения цепей при окислении метиловых эфиров олеиновой, линолевой и линоленовой кислот / Н. Янишлиева, И. Скибида, 3. Майзус // Известия АН Болгарии. Сер. «Химия». 1971. -Т. 4.-С. 1-4.

87. Angelo A.J. Identification of lipoxygenase-linoleate decomposition products by direct gas chromatography-mass-spectrometry / A.J. Angelo, N.G. Legendre, H.P. Dupuy // Lipids. 1980. - V. 15, № 1. - p. 45-49.

88. Bading H.T. Aroma compounds from butter with Gold-Storage oxidation deters and from autooxidized fatty acids // Neth. Nilk. Dairj. J. 1970. - V. 24. - P. 61-63.

89. Barthel G. Peroxide value determination-comparison of some methods / G. Barthel, W. Grosch//J. Amer. Oil. Chem. Soc. 1974. - V. 51, № 12. - P. 540-544.

90. Bondet V. Behavior of phenolic antioxidants in a partitioned medium: Focus on linoleic acid peroxidation induced by iron/ascorbic acid system JAOCS // J. Amer. Oil Chem. Soc. 2000. - V. 77, № 8. - P. 813-818.

91. Bukharkina T.V. Kinetic model of ethyl benzene oxidation catalysed by manganese salts / T.V. Bukharkina, O.S. Grechishkina, N.G. Digurov, N.V. Krukov-skaya / Org. Proce. Res. and Dev. 2003. - V. 7, № 2. - C. 148-154.

92. Bimton С. A. Micellar Catalysis and Ingibition. Sources of Rate Enhace-ments in Functional and Nonfunctional Micelles // Pure and Appl. Chem. 1977. -V. 13, №5. -P. 519-540.

93. Burton G.W. Autoxidation of biological molecules. I. The Antioxidant activity of vitamin E and related chainbreaning phenolic antioxidantsin vitro / G.W. Burton, K.U. Ungold // J. Amer. Chem. Soc. 1987. - V. 103, № 21. - P. 6472-6477.

94. Cook B.N. Chemical Approaches to the Investigation of Cellular Systems / B.N. Cook, C.R. Bertozzi // Bioorganic and Medicinal Chemistry. 2002. - № 10. -P. 829-840.

95. Cui Jian Huaxue xuebao / Jian Cui, Zhao-Long Li, Xiao-Yin Hong // Acta chim. sin. 2004. - V. 62, № 12. - P. 1095-1100.

96. Decker E.A. Transition metal and hydroperoxide interactions INFORM // Int. News Fats, Oils and Relat. Mater. 2001. - V 12, № 3. - P. 251-256.

97. Faas F.H. Red blood cell and plasma fatty acid composition in diabetes mellitus / F.H. Faas, F.Q. Dang, K. Kemp et al. // Metabolism. 1988. - V. 37, № 8. -P. 711-713.

98. Fatemi S.H. Analysis of Oleate, Linoleate and Linolenate hydroperoxides on Oxidized Ester Mixtures / S.H. Fatemi, E.G. Hammond // Lipids. 1980. - V. 15. №5.-P. 379-385.

99. Fujio K. Size of Micelles of 1-Dodecylhyridinium Cloride in Agueous NaCl Solutions / K. Fujio, S. Ikerda // Bull. Chem. Soc. Jap. 1992. - V. 65, № 5. -P. 1406-1410.

100. Gorelik S. Oxymyoglobin oxidation and membrane lipid peroxidation imitated by iron redox cycle: prevention of oxidation by enzymic and nonenzymic antioxidants / S. Gorelik, J. Kanner // J. Arg. and Food Chem. 2001. - V. 49, № 12. - P 5945-5950.

101. Greene B.E. Relationship between ТВ A nubbers and inexperianced panelists assessments of oxidizen flavorin cooked beef / B.E. Greene, T.N. Cumuze // J. Food Sci. 1982. - V. 47, № 1. - P. 52-54.

102. Henderson S.K. The Autoxidation of linoleates at elevated temperatures / S.K. Henderson, A. Witchwoot, W.W. Nawar // J. Amer. Oil. Chem. Soc. 1980. -V. 57, № 12.-P. 409-413.

103. Hyde S. On The Variation of Microstructure within Surfactant Solutions // Progr. Colloids and Polym. Sci. 1990. -№ 82. - P. 236-242.

104. Kaibara K. Dispersion behavior of oleic acid in agueousmedia: Frommi-celles to emulsions // Colloid and Polum. Sci. 1997. - № 8. - P. 777-783.

105. Keceli T. Ferric ions reduce the antioxidant activity of the phenolic fraction of virdgin olive oil / T. Keceli, M.H. Gordon // J. Food Sci. 2002. - V. 67, № 3. - P. 943-947.

106. Komajda M. Cardiac insufficiency: what treatment, what dose, for which patients, converting enzyme inhibitors and diuretics // Arch Mai Coeur Vaiss. 2000. -№2.-P. 6-13.

107. Li C.T. Evaluation of lipid oxidation in aminal fat / C.T. Li, M. Wick, N.G. Marriott // Spec. Circ. Ohio State Univ. // Ohio Agr. Res. and Dev. Cent. 1999.-№ 172.-P. 38-43.

108. Lomanno S.S. Effect of heating temperature and time on volatile oxidative decomposition of linolenate / S.S. Lomanno, W.W. Nawar // J. Food Sci. 1982. -V. 47, №3,-P. 744-746.

109. Muller N. Temperature Dependence of Critical Mcelle Concentrations and Heat Capacities of Micellization for Ionic Snrffactants // Langmuir. 1993. - V. 9, №7.-P. 96-100.

110. Neff W.E. Quantitative analyses of hidroxystearate isomers from hydroperoxides by high pressure liguid Chromatography of autoxidized and photosensitized oxidized fatty esters / W.E. Neff, E.N. Frankel // Lipids. -1980. V. 15, № 8. - P. 587-590.

111. Pileni M.P. Reverse Miceiie as Microreactors // J. Phys. Chem. 1993. -V. 97, №27.-P. 6961-6973.

112. Sanjeev K., Effekt of Solubilized Amines on the Structural Trnsition of Cetyl-trim ethylammonium Bromide / K. Sanjeev, K. Kirti // J. Amer. Oil Chem. Soc. -1994. V. 71, № 7. - P. 763-766.

113. Trevino S.F. Structure of triglyceride microemulsion: a smallangle neutron scattering study / S.F. Trevino, R. Joubran, N. Parris, N.F. Berk // J. Phys. Chem.1998. V. 102, № 6. - P. 953-960.

114. Umbreit W. Manometric Techniges / W. Umbreit, R. Burris, G. Staufter. -Burges Publ. Co. Minneapolis Minn., 1964. P. 24-36.

115. Wheatley R. Some recent trends in the analytical chemistry of lipid peroxidation. Trac. // Trends Anal. Chem. Ref. Ed. 2000. - № 19. p. 617-628.

116. Williams C.L. Mass transfer of a solubilizate in a micellar solution and across an interface / C.L. Williams, A.R. Bhakta, P. Neorgi // J. Phys. Chem. B.1999. V. 103, № 16. - P. 3242-3249.

117. Yanishlieva N. Natural antioxidants in lipid oxidation / N. Yanishlieva, E. Marinova // Bulg. Chem. Commun. 2003. - V. 35, № 2. - P. 79-91.

118. Yoshikiyo M.R. Size Distribution of Anionic Surfactant Micelles // Phys. Chem. 1985. - V. 89, № 13. - P. 2923-2928.

119. Zachariasse К.A. Intramolecular Excimier Formation with Diarylalkane-sasa Microfluidity Prode for Sodium Dodecyl Sulphate Micelles // Chem. Phys. Letters. 1978. - V. 57, № 3. - P. 429-432.

120. Zhao J. NMR Study of the Transformation of Sodium Dodecyl Sulphate Micelles / J. Zhao, B.M. Fung // Langmuir. 1993. - V. 9, № 5. - P. 1228-1231.

121. Содержание липидов в различных фракциях гомогената печени крыс,%

122. Локализация Содержание, --- Ядро Митохондрии Микросомы Супернатантобщих липидов к сухой массе клеток 15-20 30-40 25-35 20-30к общему содержанию в клетке 9 50 35 6в том числе нейтральных липидов: 3 1 0 68- фосфолипидов 93 93 94 28- холестерина 5 6 6 4

123. Фосфолипидный состав мембран клеток печени крыс, %

124. Тип мембран ФХ ФЭА кл ФИ ФС СМ Другие

125. Ядерная 57,0 26,0 0 3,9 5,5 6,3 1,3

126. Митохондриальные: 41,0 35,0 8,0 7,0 0 2,4 6,6- внутренние 38,0 38,0 10,0 2,0 0 0,8 11,2- внешние 45,0 30,0 0 8,0 0 4,4 12,6

127. Ретикулярные: 59,0 24,0 0 9,0 0 4,2 3,8- гладкого ЭР 55,0 22,0 0 7,0 0 12,3 3,7- шероховатого ЭР 60,0 23,0 0 9,0 0 3,9 4Д

128. Плазматическая 43,0 20,0 0 7,0 4,0 23,0 3,0

129. Лизосомальные 42,0 21,0 0 6,0 0 16,0 15,0

130. Аппарата Гольджи 45,0 17,0 0 9,0 4,2 12,0 12,8

131. Содержание фосфолипидов в субклеточных фракциях мозга белых крыс,от суммы фосфолипидов

132. Фракции фосфолипидов Гомогенат Ядра Митохондрии Микросомы Миелин1. ФИ 2,0 3,6 2,4 2,2 1,81. СМ 4,2 9,7 3,9 7,2 7,9

133. ФХ 37,4 35,8 36,9 40,4 30,4

134. ФС 14,0 13,8 11,0 14,4 14,1

135. ФЭА 39,9 35,7 37,3 35,5 36,6кл 1,5 0 7,8 0 1,51. ФК 1,0 1,4 0,7 0,3 1,1

136. Физиологические значения содержания фракций липидов в сыворотке, плазме и цельной крови человека, мг/дм3

137. Жирно-кислотный состав липидов фракций крови доноров

138. Кислота Соде ржание кислоты, %

139. Сыворотка крови Плазма крови Эритроциты1. До Си 0,2-3,0 0,1 1,31. Cl4:0 0,7-1,7 и 4Д1. Cl4:l 0,2-0,6 0,1 0,31. Cl4:2 0,4 0 01. Cl5-.0 0,3-0,8 0,5 1,21. Cl5:l 0,2-0,5 0,2 0,91. Cl5:2 0,5 0 ^ 0

140. С 16:0 21,0-27,0 21,2-21,3 19,9-32,41. Cl6:l 2,8-6,0 1,0-2,7 2,51. Cl6:2 1,1-1,2 0 01. Cl7:0 0,3-1,1 0,9 1,01. С 17:1 0,5-1,1 0,5 0,91. Cl7:2 0,3-0,6 0 0

141. Cl8:0 6,4-9,9 8,5-19,4 15,6-16,9

142. Cl8:l 20,3-25,8 17,0-25,4 17,5-18,6

143. Cl8:2 21,0-34,3 27,9-31,5 11,9-12,21. Cl8:3 1,2-1,5 0,9 0,81. C20:0 0,7-1,0 0 01. Сг0:1 0,9-1,0 0 01. Сг0:2 0,7-0,8 0 0

144. C20:3 0,7-1,0 1,8-2,1 1,2-1,8

145. Жирно-кислотный состав липидов печени человека, %

146. Состав жирных кислот Фракции липидов

147. Фосфолипиды Триглицериды Эфиры холестерина

148. До С14 3,3±0,3 1,3±0,2 1,8±0,3

149. Cl4;0 5,2±0,8 3,0±0,9 4,3±0,9

150. Cl5:0 3,2±0,8 1,6±0,5 4,5±0,8

151. Cl5:l 0,5±0,1 0,5±0Д 0,9±0Д

152. Cl6:0 21,4±3,6 30Д±1,7 25,2±2,6

153. Cl6:l 4,3±1,2 5Д±0,8 5,3±0,7

154. Cl7:0 0,8±0Д 1,0±0Д 3,4±0,6

155. Cl7:l 2,4±1,0 1,0±0Д 2,4±1,0

156. Clg:0 18,5±4,8 14,0±1Д 10,8±2,2

157. Ci8;l 20,7±2,2 33,4±3,6 24,4±4,8

158. Cl8:2 13,5±2,8 8,5±1,2 14Д±3,0

159. Cl8:3 6,2±0,5 0,5±0,2 2,9±0,31. Итого: насыщенные 47,0±1,0 51,0±0,4 50,0±0,6мононенасыщенные 27,9±0,7 40,0±0,9 33,0±1,3полиненасыщенные 19,7±1,4 9,0±0,6 17,0±1,3

160. Состав основных жирно-кислотных компонентов фосфатидилхолинов и фосфатидилэтаноламинов субклеточных фракций печени крыс, %

161. Субклеточная фракция Состав жирных кислот, %16:0 18:0 18:1 18:2 20:4 22:6 Другие1. Фосфатидилхолины

162. Митохондрии 27,0 21,6 13,0 12,4 17,7 2,9 5,6

163. Микросомы 24,5 21,0 12,3 17,7 15,8 0,7 5,3

164. Аппарат Гольджи 34,7 22,5 8,7 18,1 14,5 0 0,9

165. Плазматическая мембрана 36,9 31,2 6,4 12,9 ПД 0 0,91. Фосфатидилэтаноламины

166. Митохондрии 26,6 27,3 12,0 5,4 22,0 3,2 3,5

167. Микросомы 22,6 23,4 9,8 10,3 23,1 7,2 2,3

168. Аппарат Гольджи 33,5 31,8 5,1 10,0 18,3 0 1,1

169. Плазматическая мембрана 25,5 33,2 10,4 8,7 17,4 0 2 Л

170. Состав основных жирно-кислотных компонентов сфингомиелинов субклеточных фракций печени крыс, %

171. Субклеточная фракция Состав жирных кислот, %16:0 18:0 18:1 18:2 22:0 24:0 24:1митохондрии 26,0 7,2 12,5 13,9 0 29,3 0аппарат Гольджи 24,8 10,0 1Д следы 13,6 35,5 0плазматическая мембрана 24,3 11,6 следы следы 7,3 37,9 0

172. Графический способ расчета

173. Схема расчета периода индукции

174. Формула Название Внешний вид, р, г/мл М, г/моль Г С t" С Растворимость

175. C17H33COOC2H5 этилолеат (ЭО), 9- этилоктадеценоат маслянистая жидкость. 0,867 310,6 184-185 бензол, хлороформ, этанол, эфир

176. С17Н31СООСН3 метиллинолеат (MJI), 9, 12 -метилокгадекадиеноат желтая маслянистая жидкость 0,889 294,2 211-212 бензол, хлороформ, этанол, эфир

177. О" фенол, карболовая кислота, гидроксибензол бесцветные тонкие длинные игольчатые кристаллы со своеобразным запахом, розовеет на воздухе, 1,054 (45°С) 94 42,3 181 растворимость в воде (1 : 20), легко растворим в спирте, эфире, жирных маслах

178. СНз ОН СНз 1 Т 1 3 сн3|| Л СНз СН3 ионол, 2, 6- дитрет. бутил-4-метилфенол белый или со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок 220,19 65-68,5 легко растворим в спирте, бензоле, хлороформе, эфире, не растворим в воде

179. ОН'? оьц 1 1 3 NC—с—N=N— С—CN 1 1 СН3 СНз 2, 2'-азобисизобутиро-нитрил (АИБН) белое кристаллическое вещество 164,2 103-104 растворим в этиловом спирте, ацетоне, практически не растворим в воде1. U)

180. Ос<" N Н сн сн2 СНз SH капотен, 1-(28)-3-метил-пропионил.-Ь- пролин кристаллические иглы 205 ^ разя 220-222 растворим в воде, ограниченно растворим в спирте и бензоле, не растворим в эфире

181. Тестирование антиоксидантной активности водо- и липидрастворимых компонентов биоматериала1. Методика анализа

182. Для анализа используют гомогенаты растительных или животных биоматериалов с целью изучения антиоксидантной активности суммы водорастворимых и водонерастворимых компонентов.

183. В аналогичных условиях определяют поглощение кислорода в контрольной пробе (без добавок гептанового экстракта).1. Методика анализа

184. В аналогичных условиях определяют поглощение кислорода во времени в контрольной пробе (без добавок водорастворимого экстракта.

185. Рис. М.1. Расчет кинетических параметров: 1 контроль, 2 - исследуемый липидрастворимый (водорастворимый) компонент биоматериала