Разработка и изучение биологической активности фармацевтической композиции на основе соли цинка (II) и глицина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат биологических наук Балышев, Александр Владимирович

• Балышев, Александр Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Балышев, Александр Владимирович

Введение.

ГЛАВА I. Обзор литературы.

1.1. Этиология туберкулеза.

1.1.1. Характеристика микобактерий туберкулеза.

1.1.2. Механизмы иммунной защиты от Mycobacteria tuberculesis.

1.1.3. Основные проблемы неэффективности иммунитета при туберкулезе.

1.1.4. Профилактика туберкулеза.

1.1.5. Лечение туберкулеза.

1.2. Роль цинка как эссенциального элемента.

1.2.1. Биологическая функция цинка.

1.2.2. Физиологическая роль цинка.

1.2.3. Биохимическая роль цинка.

1.2.4. Роль цинка в иммунном ответе.

1.2.5. Препараты, содержащие цинк.

ГЛАВА II. Материалы и методы исследования

2.1. Материалы исследования.

2.1.1. Объекты исследования.

2.1.2. Лабораторные животные.

2.1.3. Культура клеток.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Исследования биологической активности с использованием клеточного биосенсора.

2.2.2. Элементный анализ.

2.3. Определение размерных спектров супранадмолекулярных комплексов растворов лекарственных средств.

2.4. Детекция М. tuberculosis.

2.5. Определение активности естественных киллеров (ЕК).

2.6. Статистическая обработка результатов измерений.

ГЛАВА III. Результаты исследования

3.1. Изучение биологической активности фармацевтической композиции (ФК).

3.1.1. Обоснование выбора соли Zn (II) и хелатирующего агента (глицин) в качестве основных компонентов фармацевтической композиции.

3.1.2. Неаддитивные эффекты при комбинированном действии сульфата цинка и глицина на клеточный биосенсор.

3.1.3. Влияние исследуемой ФК на активность естественных киллеров.

3.2. Изучение лечебно-профилактического действия ФК при инфицировании Mycobacterium tuberculosis в модельных экспериментах с лабораторными животными.

3.3. Изменения содержания микроэлементов в органах и тканях инфицированных животных.

3.4. Разработка нового экспресс-метода стандартизации жидких лекарственных средств на примере разрабатываемой ФК.

ГЛАВА IV. Обсуждение результатов исследования

4.1.1. Микроэлементный подход в характеристике заболеваний.

4.1.2. Основные подходы к лечению заболеваний микроэлементами.

4.2. Роль комплексообразователей.

4.3. Модель развития экспериментального туберкулеза.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка и изучение биологической активности фармацевтической композиции на основе соли цинка (II) и глицина»

Актуальность темы.

В последние годы в развитых странах мира, в том числе и в России активно развивается медицинская микроэлементология [32, 39, 46]. Коррекция микроэлементного статуса позволяет существенно улучшать состояние больных при разнообразных заболеваниях с трудом поддающихся химиотерапии, что связано с особенностью метаболизма микроэлементов, а именно постоянством микроэлементных профилей здорового организма [2, 42, 139].

Одним из наиболее значимых микроэлементов, используемых для коррекции микроэлементного статуса является цинк. С одной стороны, сульфат цинка практически не токсичен, с другой стороны, хорошо известно применение солей цинка в качестве антагонистов к меди, хрому, кадмию. Важность коррекции микроэлементного статуса с участием цинка обусловлена распространением цинк-дефицитных состояний, а также его влиянием на предотвращение иммунодефицитов и стимуляцию синтеза антител при инфекционных болезнях [1, 28, 95, 139].

Оценка нарушения микроэлементного гомеостаза при различных заболеваниях и его коррекция микроэлементами - позволяет говорить о новом подходе к лечению, и это особенно важно там, где аллопатическая медицина, использующая препараты органической природы, недостаточно эффективна. Одним из таких заболеваний является туберкулез, от которого ежегодно в мире умирает около 3 млн. человек, несмотря на колоссальные средства направляемые на профилактику и лечение данного заболевания [138]. Это в первую очередь связано с возникновением мультирезистентных штаммов микобактерий, а также с возможностью формирования полицеллюлярных, ультрамелких и L-форм Mycobacteria tuberculosis, обладающих повышенной устойчивостью к антибактериальной терапии и действию факторов клеточного иммунитета.

Нашей группой было показано, что внесение в среду культивирования М. tuberculosis ионов цинка влияет на процессы их формообразования - отмечается увеличение количества одиночных форм возбудителя за счет снижения полицеллюлярных и практически полного исчезновение ультрамелких форм [30, 49]. Так же обнаружено, что среди координационных соединений металлов (кобальта, никеля, меди и цинка), обладающих бактериостатической активностью в отношении М. tuberculosis, наиболее эффективными являются препараты, содержащие цинк [26]. На существенное усиление стандартной антимикобактериальной терапии при добавлении хелатов цинка указывают и работы Карьяди [102-104]. Биологическая активность комбинированных препаратов часто проявляется неаддитивно, что свидетельствует об особой важности тщательного подхода к выбору хелатирующего агента. С учетом возможности коррекции микроэлементного метаболизма при использовании соединений цинка, эффективного влияния на процессы формообразования микобактерий туберкулеза с целью увеличения их доступности для воздействия факторов клеточного иммунитета (с их одновременной стимуляцией) и антибактериальной терапии нам представлялось весьма актуальным разработать и изучить действие цинк-содержащей фармацевтической композиции.

Цель работы.

Создание новой высокоэффективной, нетоксичной 2п2+-содержащей фармацевтической композиции, предотвращающей образование нефагоцитируемых колониальных и ультрамелких форм микобактерий туберкулеза и стимулирующей активность факторов клеточного иммунитета.

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Разработать состав фармацевтической композиции (ФК) на основе водных растворов Zn2+ и хелатирующего агента.

2. Изучить биологическую активность ФК и ее компонентов с помощью клеточного биосенсора по данным аррениусовских параметров кинетики гибели.

3. Определить действие ФК на некоторые факторы клеточного иммунитета в опытах на лабораторных животных.

4. Исследовать наличие лечебно-профилактической активности разрабатываемой ФК при инфицировании лабораторных животных микобактериями туберкулеза.

5. Разработать методику пробоподготовки органов и тканей животных для последующего микроэлементного анализа методом атомно-абсорбционной спектрометрии с зеемановской коррекцией фона.

6. Определить микроэлементные профили органов и тканей у здоровых, инфицированных М. tuberculosis животных и животных, прошедших курс лечения разработанной ФК.

7. Разработать на примере изучаемой ФК лазерный экспресс-метод стандартизации и контроля качества жидких лекарственных средств (ЛС).

Научная новизна.

Теоретически обосновано конструирование фармацевтической композиции, включающей сульфат цинка и глицин, а также воду с измененным изотопным составом. Экспериментально подтверждено ее лечебно-профилактическое действие при инфицировании лабораторных животных микобактериями туберкулеза.

Изучена биологическая активность разработанной фармацевтической композиции с помощью клеточного биосенсора по данным аррениусовских параметров кинетики гибели. Выявлено, что применение ФК вызывает триггерное усиление неспецифической резистентности клеточного биосенсора, тогда как индивидуальное действие компонентов подчиняется стандартной аррениусовской зависимости.

Показана трехкратная активация естественных киллеров при применении данной

ФК.

Разработана новая методика пробоподготовки органов и тканей животных с применением жидкого азота для последующего микроэлементного анализа с использованием зеемановской атомно-адсорбционной спектрометрии.

Впервые проанализирована взаимосвязь полученных данных по изменению микроэлементного состава (Al, Cr, Mn, Ni, Си, Zn, Cd, Pb, Se, Fe) органов и тканей животных с наличием возбудителя туберкулеза.

Получены микроэлементные профили, характеризующие ткани и органы животных в здоровом и инфицированном состоянии.

Подана патентная заявка на разработанную ФК, как средство для профилактики и дополнительной химиотерапии туберкулеза (патентная заявка № 2004135345/15(038452) от 03.12 2004. Положительное решение ФИПС от 26.01.05.).

Практическая значимость работы:

Полученные в ходе проведенной исследовательской работы результаты могут быть использованы при разработке новых схем профилактики и лечения туберкулеза, поскольку разработанная композиция влияет на процессы межпопуляционных переходов и формообразования микобактерий туберкулеза, способствуя увеличению их доступности к действию иммунной системы (с одновременной ее стимуляцией) и стандартной химиотерапии.

Установленные изменения микроэлементных профилей органов и тканей инфицированных животных (печень, кровь, легкие), в комплексе с другими показателями могут быть использованы при диагностических исследованиях на туберкулез.

Разработан экспресс-метод стандартизации и контроля качества растворов ЛС по определению размерных спектров супранадмолекулярных (СНМ) комплексов воды на основе лазерной дифракции.

Методика стандартизации растворов ЛС внедрена в учебный процесс (специальность фармацевтическая химия) кафедры фармацевтической и токсикологической химии медицинского факультета РУДЫ.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработанная фармацевтическая композиция на основе сульфата цинка, глицина и воды с измененным изотопным составом демонстрирует выраженный триггерный эффект на клеточном биосенсоре, свидетельствующий о неспецифической активации защитных свойств эукариотической клетки, за счет синергитического действия компонентов.

2. Микроэлементные профили в органах и тканях лабораторных мышей инфицированных микобактериями туберкулеза могут служить маркером заболевания животных.

3. Разработанная фармацевтическая композиция стимулирует активность естественных киллеров, являющихся одним из факторов клеточного иммунитета и снижает вероятность инфицирования лабораторных животных микобактериями туберкулеза.

4. Разработанный лазерный экспресс-метод анализа растворов путем определения размерных спектров СНМ комплексов воды может быть использован для стандартизации и контроля качества растворов лекарственных средств.

Апробация работы:

Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждены на конференциях: Итоговая конференция СНО медицинского факультета РУДН «Клинические и теоретические аспекты современной медицины» (Москва, 2003), XI Российский национальный конгресс «Человек и лекарство» (Москва, 2004), I Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Биоэлементы» (Оренбург, 2004), V международная научно-практическая конференция «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва, 2004), 1-ый съезд РОСМЭМ «Актуальные вопросы медицинской элементологии» (Москва, 2004), XI Международная конференция «Новые медицинские технологии и квантовая медицина» (Москва, 2005).

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Балышев, Александр Владимирович

выводы

1. Теоретически обоснована и экспериментально подтверждена лечебно-профилактическая активность фармацевтической композиции на основе соли цинка (II) и глицина при инфицировании М. tuberculosis.

2. Пероральный прием разработанной фармацевтической композиции снижает вероятность развития микобактерий туберкулеза в организме животных при экспериментальном заражении: в группе мышей принимавших фармацевтическую композицию не было выявлено случаев инфицирования, тогда как в контрольной группе выявлено заражение 60% животных.

3. Инфицирование микобактериями туберкулеза приводит к выраженному изменению микроэлементных профилей (Al, Cr, Mn, Ni, Си, Zn, Cd, Pb, Se, Fe), причем у инфицированных мышей в крови и легких концентрация Мп падает ниже предела обнаружения (>0,05 мкг).

4. Пероральный прием разработанной фармацевтической композиции предотвращает изменение микроэлементных профилей легких, крови и печени при экспериментальном заражении мышей микобактериями туберкулеза.

5. Применение фармацевтической композиции вызывает триггерное усиление неспецифической резистентности клеточного биосенсора Spirostomum ambigua к лиганд-индуцируемой гибели.

6. Разработанная фармацевтическая композиция усиливает активность естественных киллеров, являющихся одним из решающих клеточных компонентов в защитных реакциях против М. tuberculosis на ранних этапах инфицирования, в три раза.

7. Разработана методика пробоподготовки органов и тканей животных с диспергированием замороженного материала в жидком азоте для последующего микроэлементного анализа.

8. Разработанный способ анализа на основе лазерной дифракции растворов лекарственных средств путем определения размерных спектров супранадмолекулярных комплексов может служить экспресс - методом их стандартизации и контроля качества.

Заключение

При изучении развития микобактерий туберкулеза установлено, что при росте культуры образуются как полицеллюлярные, так и ультрамелкие формы [30], обладающие повышенной устойчивостью к иммунному ответу и химиотерапии. Была установлена возможность влияния на процессы формообразования культуры путем внесение в среду культивирования некоторых микроэлементов, в частности цинка (И), что приводило к перераспределению биомассы микобактерий в сторону одиночных форм. При исследовании комбинированной биологической активности сульфата цинка с глицином было подобрано соотношение их концентраций, вызывающее триггерное усиление неспецифической резистентности клеточного биосенсора, и показано ее альтерирование при использовании воды с измененным изотопным составом. Также было выявлено, что данная композиция дополнительно усиливает резистентность и адаптационные свойства одной из разновидности лимфоцитов - естественных киллеров, отвечающих за защитные реакции против М. tuberculosis на ранних этапах туберкулезной инфекции.

Выраженное влияние на формообразование при развитии культуры микобактерий туберкулеза, а именно предотвращение образований ультрамелких и колониальных форм и иммуностимулирующие действие позволили предположить, что прием данной ФК будет препятствовать инфицированию микобактериями туберкулеза человека (животных). Лечебно-профилактическое действие ФК при инфицировании М. tuberculosis было подтверждено на моделях с лабораторными животными.

При исследовании микроэлементного составом (Al, Cr, Mn, Ni, Си, Zn, Cd, Pb, Se, Fe) в органах и тканях мышей было показано, что у инфицированных животных после заражения происходят существенные изменения микроэлементных профилей, что может быть использовано в комплексе с другими показателями при диагностических исследованиях на туберкулез.

Разработанный в процессе выполнения исследований способ анализа растворов JIC (на примере изучаемой ФК) с определением размерных спектров СНМ комплексов может служить экспресс - методом их стандартизации и контроля качества.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Балышев, Александр Владимирович, 2005 год

1. Авцын А.П., Жаворонков А.А., Риш М.А., Строчкова Л.С. Микроэлементозы человека (этиология, классификация, органопатология). М.: Медицина, 1991. -496с.

2. Агаджанян Н.А., Велданова М.В., Скальный А.В. Экологический портрет человека и роль микроэлементов. — М., 2001. 236с.

3. Агаджанян Н.А., Скальный А.В. Химические элементы в среде обитания и экологический портрет человека. М.: КМК, 2001. -83с.

4. Альберт А. Избирательная токсичность. В 2 т. Т. 2. М.: Медицина. -1989. - 429с.

5. Бабенко Г. А. Микроэлементы в медицине. В 2 т.- 2001. Т. 1 С. 2-5.

6. Балышев А.В., Плетенева Т.В., Гребенникова Т.В., Каприльянц А.С., Сыроешкин А.В. К вопросу о разработке нового противотуберкулезного Zn2+-coдержащего препарата (2004) Вестник ОГУ. («Приложение «Биоэлементология») №4 (29). С. 13-14

7. Беспамятное Г.П., Кротов Ю.А. Предельно допустимые концентрации химических веществ в окружающей среде. Справочник. JL: Химия. - 1985. - 528с.

8. Бжозовски Р., Таталай М., Марциновска Суховерска Э., Интеревич А. Клиническое значение нарушений в обмене цинка // Новости фармации и медицины. - 1995. - №3. - С. 40-44.

9. Болдырев А.А. Биологические мембраны и транспорт ионов. М.: МГУ, 1985.

10. Бурлакова Е.А. Эффект сверхмалых доз // Вестн. РАН. 1994. - Т.64. - №5. -С.425-431.

11. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М.: Медицина, 1999. - 366 с.

12. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика: практический курс. М.: Фаир-пресс, 1999.-720с.

13. Вернадский В.И. Химическое строение биосферы Земли и ее окружения. М.: Наука,- 1987.-340с.

14. Гмошинский И.В., Мазо В.К., Тутельян В.А., Хотимченко С.А. Микроэлемент селен: роль в процессах жизнедеятельности// Экология моря. 2000. - №54. - С.5-19.

15. Готовский Ю.В., Перов Ю.Ф. Особенности биологического действия физических факторов малых и сверхмалых интенсивностей и доз. М.: Имедис, 2000.-192с.

16. Гуревич К.Г. Нарушения обмена микроэлементов и их коррекция //Фарматека. —2001. -№3,- С. 45-53.

17. Епифанова О.И., Терских В.В., Полуновский В.А. Покоящиеся клетки. 1983. М.: Наука. - 215 с.

18. Ершов Ю.А., Плетенева Т.В. Механизмы токсичности неорганических соединений. М.: Медицина, 1989. - 250с.

19. Земская З.С., Дорожкова И.Р. Скрыто протекающая туберкулезная инфекция. — М.: Медицина, 1984. -83с.

20. Кабата-Пендиас А., Пендиас X. Микроэлементы в почвах и растениях. М.: Мир, 1989.-439с.

21. Калетина Н.И., Афанасьев Ю.И., Лазурина Л.П. Роль микроэлементов в нарушении и коррекции металло-лигандного гомеостаза //Медицина. Вестник РАМН. 1995.-№ 10. - С.44-48.

22. Калетина Н.И., Арзамасцев Е.В., Афанасьева Е.Ю. Биокомплексы микроэлементов регуляторы метало-лигандного гомеостаза // Микроэлементы в медицине.2002.- №3(1).- С.-8-14.

23. Келер Г. Гомеопатия. М.: Медицина, 1989. - 592 с.

24. Кудрин А.В., Скальный А.В., Жаворонкова А.А., Скальная М.Г., Громова О.А. Иммунофармакология микроэлементов. М: изд-во КМК, 2000. 537 с.

25. Лурье Ю.Ю. Справочник по аналитической химии. М.: Химия. -1979.-480с.

26. Михайлов И. В. Комплексная гомеопатия рациональная терапия. Практическое руководство. - М.: «Стар'КО». - 1997. - 226с.

27. Оберлис Д. Новый подход к проблеме дефицита микроэлементов // Микроэлементы в медицине. -2002.- №3(1).- С.-2-7.

28. Плетенева Т.В. Прогнозирование экологической опасности неорганических соединений по их физико-химическим свойствам: Автореф. дис. . д-ра хим. наук.- М., 1993. 84 с.

29. Плетенева Т.В., Тарнавская Н.А., Есменская Н.Б., Ершов Ю.А. Комбинированное действие растворов серебра и меди на инфузорий Paramecium caudatumll «Серебро в медицине, биологии и технике». СО РАМН Новосибирск. 1995. - №4. - С. 124130.

30. Плетенева Т.В., Суздалева О.С., Сыроешкин А.В. Гомеопатические лекарственные средства неорганической природы: за и против //Фармация 2002. - №6. - С.35-39.

31. Подколозин А.А., Донцов В.И. Иммунитет и микроэлементы. М.: Медицина. 1994.- 146 с.

32. Романовский Ю.М. Молекулярная динамика ферментов. М.: изд-во МГУ, 2000. -169с.

33. Сергеев П.В., Шимановский H.JL, Гуревич К.Г. Цинксодержащие препараты как модуляторы иммунной системы // Международный медицинский журнал. 2000.- №4. С. 99-102.

34. Скальный А.В., Рудаков И.А. Биоэлементы в медицине.- М.: Издательский дом «ОНИКС 21 век»: Мир,- 2004. 272с.

35. Скальный А.В. Цинк и здоровье человека. Оренбург: РИК ГОУ ОГУ.- 2003. -80с.

36. Скальный А.В. Микроэлементозы человека (диагностика и лечение). М.: Школа биотической медицины.- 1999. - 96 с.

37. Скальный А.В. Микроэлементы для вашего здоровья. М.: Издательский дом "Оникс 21 век". - 2003. -238с.

38. Скальный А.В. Референтные значения концентраций химических элементов в волосах, полученных методом ИСП-АЭС (АНО Центр Биотической Медицины) // Микроэлементы в медицине. 2003. - Т.4. Вып.1. - С 65.

39. Смирнов А.Н., Лапшин В.Б., Балышев А.В., Лебедев И.М., Сыроешкин А.В. "Супранадмолекулярные комплексы воды" Электронный журнал "Исследовано в России", 38, стр. 413-421, 2004 г. http://zhurnal.ape.relarn.ru/articles/2004/038.pdf

40. Сусликов В.П. Геохимическая экология болезней: В 4 т. Т.2. Атомовиты. М.: Гелиос АРВ, 2000. - 672с.

41. Сусликов В.П. Геохимическая экология болезней: В 4 т. Т.З. Атомовитозы. М.: Гелиос АРВ, 2002. - 546с.

42. Сыроешкин А.В., Синюк Т.Ф., Лебедев И.М., и др. Изучение антагонизма в токсическом действии ионов меди и цинка в водных растворах // Метеорология и гидрология. 2000. - № 10. - С. 55-61.

43. Сыроешкин А.В. Попов П.И., Балышев А.В., Карпов О.В., Лесников Е.В., Смирнов А.Н., Лебедев И.М., Плетенева Т.В. Определение подлинности и контроль качества ЛВ гетерогенной природы с помощью лазерного МИД (2004) Хим. фарм. журнал. Т. 38. № 11. С. 43-48.

44. Туберкулез. Патогенез, защита, контроль: Пер. с англ./ Под ред. Барри Р. Блума.-М.: Медицина, 2002,- 697с.: ил.

45. Туберкулез /под ред А.Г. Хоменко. М.: Медицина, 1992. - 312 с.

46. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман И. Основы биохимии. В 3 т. М.: Мир, - 1981,- 1878 с.

47. Уильяме Д. Металлы жизни. М.: Мир, 1975. 224с.

48. Уэбб Л. Ингибиторы ферментов и метаболизма. -М.: Мир. 1966. - 862 с.

49. Шлеева М.О., Мукамолова Г.В., Телков М.В., Березинская Т.Л., Сыроешкин А.В., Бикетов С.Ф., Каприльянц А.С. Образование некультивируемых клеток Mycobacterium tuberculosis и их оживление// Микробиология. 2003. - 72. - №1. -С. 1-8.

50. Adachi S, Takemoto К, Ohshima S, Shimizu Y, Takahama M. Metal concentrations in lung tissue of subjects suffering from lung cancer //Int. Arch. Occup. Environ. Health. -1991. №63(3).-P.193-197.

51. Akita T, Hina Y, Nishi T. Effect of zinc deficiency on betacyanin production in a cell suspension culture of table beet (Beta vulgaris L.) //Biosci. Biotechnol. Biochem. -2001. №65(4).-P.962-655.m

52. Andrasi E, Suhajda M, Saray I, Bezur L, Ernyei L, Reffy A. Concentration of elements in human brain: glioblastoma multiforme //Sci. Total Environ. 1993. - №139- P.399-402.

53. Baintot D. The discovery of lysosomes // J. Cell. Biol. 1981.- №91. - P.66-76.

54. Bal W, Kasprzak KS. Induction of oxidative DNA damage by carcinogenic metals //Toxicol. Lett. 2002. - №28. - P.55-62.

55. Baltaci AK, Bediz CS, Mogulkoc R, Kurtoglu E. Effect of zinc and melatonin supplementation on cellular immunity in rats with toxoplasmosis // Biol. Trace Elem. -2003.-№96(1-3). -P.237-245.

56. Bancroft G., Schreiber R., Unanue E. Natural immunity: a T-cell-independent pathway of macrophage activation defined in the scid mouse // Immunol. Rev. 1991,- №124. -P.5-24.

57. Barksdale L., Kim K.S. Mycobacterium // Bacter. Rev. 1977,- №41.- P.217-232.

58. Berzin N. I., Bauman V.K. Vitamin A-dependent zinc-binding protein and instinal absorbtion of zinc in chics // Brit. J. Nutrition. -1987.-№2(57). P.255-268.

59. Binkhuysen F., Das P.K. Ultrastructural characteristics of Mycobacterium Bovis and Mycobacterium leprae // Int. J. Lepr. 1982,- №50. - P.76-82.

60. Chackerian A, Alt J, Perera V, Behar SM. Activation of NKT cells protects mice from tuberculosis// Infect. Immun. 2002. - №70(11). - P. 6302-6309.

61. Chan J., Brennan P., Bloom R. Lipoarabinomannan, a possible virulence factor involved in persistence of Mycobacterium tuberculosis within macrophages // Infect. Immun. -1991.- №59. P.1755-1761.

62. Chan J., Bloom B. Killing of virulent Mycobacterium tuberculosis by reactive nitrogen intermediates produced by activated murine macrophages // J. Exp. Med. 1992.-№175. - P.l 111-1122.

63. Cohn Z. The fate of bacteria within phagocytic cells // J. Exp. Med. 1963. - №117.-P.27-42.

64. Colice G.L. Decision analysis, public health policy, and isoniasid chemoprophylaxis for young adult tuberculin skin reactors // Arch. Intern. Med. 1990. - №150. - P.2517-2522.

65. Comstock G., Edwards P. The competing risks of tuberculosis and hepatitis for adult tuberculin reactors // Am. Rev. Respir. Dis. 1975. -№111. — P.573-577.

66. D'Arcy Hart., Young M., Jordan W., Percins W., Geisow M. Chemical inhibitors of phagosome-lysosome fusion in cultured macrophages also inhibit salutatory lysosomal movements // J. Exp. Med. 1983. - №158.- P.477-492.

67. Denis M. Killing of Mycobacterium tuberculosis within human monocytes: activation by cytokines and calcitriol // Clin. Exp. Immunol. 1991.- №84,- P.200-206.

68. Drapper P. The anatomy of mycobacteria // The Biology of micobacteria.- 1982.-vol.1.-P.9-52.

69. Durlach J, Вага M, Guiet-Bara A, Collery P. Relationship between magnesium, cancer and carcinogenic or anticancer metals //Anticancer Res. 1986. - №6(6). - P.1353-1361.

70. Emanuel N.M. Kinetics and free-radical mechanisms of ageing and carcinogenesis// IARC Sci. Publ. -1985. V. 58. - P.127-150.

71. Falkow S., Portnoy D. // The interaction of bacteria with mammalian cells // Rew. Cell Biol. 1992.-№8. - P.333-363.

72. Fine P., Rodrigues L. Modern vaccines: mycobacterial diseases // Lancet. 1990. -№335. - P.1016-1020.

73. Flesch I., Kaufmann H. Mycobacterial growth inhibition by interferon-activated bone marrow macrophages and differential susceptibility among strains of Mycobacterium tuberculosis // J. Immunol. 1987.-№138.- P.4408-4413.

74. Flesch I., Kaufmann H. Activation of tuberculostatic macrophage functions by gamma interferon, interleukin-4, and tumor necrosis factor // Infect. Immun. 1990.- №58. -P.2675-2677.

75. Flynn JL. Mutual attraction: does it benefit the host or the bug// Nat. Immunol. 2004. -№5(8).-P. 828-835.

76. Flynn J., Goldstein K., Treibold В., Koller В., Bloom B. Major histocompatibility complex class I-restricted T-cells are required for resistance to Mycobacterium tuberculosis infection// Proc. Natl. Acad. Sci. 1992.- №89.-P. 1213-1217.

77. Forrest С., Forehand R., Ahtell R., Roberts R., Johnston R. Clinical features and current management of chronic granulomatosis disease // Hematol. Oncol. Clin. N. Am. 1988. - №2. - P.253-265.

78. Gansert JL, Kiessler V, Engele M, Wittke F, Rollinghoff M, Krensky AM, Porcelli SA, Modlin RL, Stenger S. Human NKT cells express granulysin and exhibit antimycobacterial activity // J. Immunol. 2003. - №170(6). — P.4-61.

79. Gavioli R., Tranielo S. Protein kinase С mediates human neutrophil cytotoxicity // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1987. - №148.-P.1290-1294.

80. Gaur S, Trayner E, Aish L, Weinstein R. Bronchus-associated lymphoid tissue lymphoma arising in a patient with bronchiectasis and chronic Mycobacterium avium infection// Am. J. Hematol. 2004. - №77(1). - P. 22-25.

81. Goren M., Valter A., Fiscus J. Polyanionic agents as inhibitors of phagosome-lysosome fusion in cultured macrophage // J. Leukocyte Biol. 1987.- №41. - P.l 11-121.

82. Jimenez I., Speisky H. Effect of copper ions on the free radical-scavenging properties of reduced gluthathion// Trase Elements Med. Biol. 2000. - Vol.14. - P. 161-167.

83. Johnston C.C., Slemenda C.W. Pathogenesis of osteoporosis // Bone. 1995,- №17-P. 1922.

84. Hadden J.W. The treatement of zinc deficiency is an immunotherapy // Int. J. Immunopharmac.-1995 .-№ 17-P.697-701.

85. Hart B.A., Gong Q., Eneman J.D., Durieux-Lu C.C. In vivo expression of metallothionein in rat alveolar macrophages and type II epithelial cells followingrepeated cadmium aerosol exposures// Toxicol. Appl. Pharmacol. 1995. - V. 133. -№. 1,-P. 82-90.

86. Hengge-Aronis R. Survival of hunger and stress: the role of rpoS in early stationary phase gene regulation in E. coli // Cell. 1993. - №72. - P.165-168.

87. Heugten E., Spears J.W., Kegley E.B., Qureshi M.A. Effects of organic forms of zinc on growth perfomance, tissue zinc distributios, and immune response of weanling pigs // J. Anim. Sci. 2003.- №81(8).- P.263-271.

88. Hirschfield G.R., Brenan P.G. Peptidoglycan-associated polypeptides of Mycobacterium tuberculosis // J. Bacteriol. 1990,- №172.-P. 1005-1013.

89. Hunter S., Brennan P. Evidence for the presence of a phosphatidylinositol anchor on the lipoarabinomannan and lipomannan of Mycobacterium tuberculosis // J. Biol. Chem. -1991. -№265.-P.9272-9279.

90. Kam KM, Yip CW. Surveillance of Mycobacterium tuberculosis susceptibility to second-line drugs in Hong Kong, 1995-2002, after the implementation of DOTS-plus// Int. J. Tuberc. Lung. Dis. 2004. - №8(6).- P.760-766.

91. Karyadi E, Schultink W, Nelwan RH, Gross R, Amin Z, Dolmans WM, van der Meer JW, Hautvast JG, West CE. Poor micronutrient status of active pulmonary tuberculosis patients in Indonesia// J. Nutr. 2000. - №130(12). - P.2953-2958.

92. Karyadi E, West CE, Nelwan RH, Dolmans WM, Schultink JW, van der Meer JW. Social aspects of patients with pulmonary tuberculosis in Indonesia// Asian J. Trop. Med. Public Health. -2002.- №33(2). P.338-345.

93. Kaufmann S., Blum C., Yamamoto S. Crosstalk between a/8 T cells and 7/6 T cells in vivo // Proc. Natl. Acad. Sci. 1993. - №90. - P.9620-9624.

94. Kidler V., Vassalli P. The inducing role of tumor necrosis factor in the development of bactericidal granulomas during BCG infection // Cell. 1989. - №56. - P.731-740.

95. Koeffler H., Norman A. Gamma interferon stimulates production of 1,25-dihydroxyvitamin D by normal human macrophages // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1985. - №127. - P.596-603.

96. Kornfeld S. Trafficking of lysosomal enzymes // FASEB J. 1987. -№1. - P.462-468.

97. Krasnow I., Wayne G. Comparision of methods for tuberculosis bacteriology //Appl. Microbiol. 1969.-№18. - P.915-917.

98. Kopanoff D., Snider D., Caras G. Isoniasid-related hepatitis // Am. Rev. Respir. Dis. -1978. -№117.-P.991-1001.

99. Kozlovskii A.G., Zhelifonova V.P., Vinokurova N.G., Ozerskaia S.M. Effect on microelements on biosynthes of secondary metabolites in the fungus Penicillium citrinum Thorn VKM F-1079 // Mikrobiologiia. 2000. - № 69(5). - P.642-646.

100. Kubica G., Wayne G. The Mycobacteria a Source Book. -1984- Marcel Dekker, Inc. New York.

101. Lambert JC, Zhou Z, Wang L, Song Z, McClain CJ, Kang YJ. Preservation of intestinal structural integrity by zinc is independent of metallothionein in alcohol-intoxicated mice // Am. J. Pathol. 2004. -№ 164(6). - P. 1959-1966.

102. Leemans JC, Thepen T, Weijer S, Florquin S, van Rooijen N, van de Winkel JG, vander Poll T. Macrophages play a dual role during pulmonary tuberculosis in mice // J. Infect. Dis. 2005. - № 191(1).-P.65-74.

103. Li Y., Severn M., Liew F. Catalase inhibits nitric oxide synthesis and the killing of intracellular Leishmania major in murine macrophages // Eur. J. Immunol. 1992. -№22.- P.441-446.

104. Lotte A., Henderson R. Second IUATLK study on complications induced by intradermal BCG-vaccination // Bull. Int. Union Tuberc. 1984. - №63. - P.47-83.

105. Mackaness G.B., Lagrange P.H. Immuno-potentiation with DCG: immune response to different strains and preparations // J. Natl. Cancer Inst. 1973.-№51. - P.1655-1667.

106. Mackaness G. The influence of immunologically committed lymphoid cells on macrophage activation in vivo // J. Exp. Med. 1969. - №129. - P.965-973.

107. Makonnen B, Venter A, Joubert G. A randomized controlled study of the impact of dietary zinc supplementation in the management of children with protein-energy malnutrition in Lesotho // J. Trop. Pediatr. 2003. -№49(6). - P.353-360.

108. Manca C, Reed MB, Freeman S, Mathema B, Kreiswirth B, Barry CE 3rd, Kaplan G. Differential monocyte activation underlies strain-specific Mycobacterium tuberculosis pathogenesis// Infect. Immun. 2004. - №72(9).- P.5511-5514.

109. Marinov В., Tsachev K., Nikolov A., Kumanov F., Atanasova B. Multiple pregnancy and microelements: zinc (preliminary report) //Akush. Ginekol. (Sofiia). 1998. -№37(2). - P.7-8.

110. Matin A., Auger P., Schultz J. Genetic basis of survival in nondifferentiating bacteria // Annu. Rev. Microbiol. 1989. - №43. - P.293-316.

111. McDonough K-, Bloom B. Pathogenesis of tuberculosis: interaction of Mycobacterium tuberculosis with macrophages // Infect. Immunol. 1993.- №61. - P.2763-2773.

112. McNeil M., Daffe M., Brennan P. Evidence for the nature of the link between the arabinogalactan and peptidoglycan of mycobacterial cell walls // J. Biol. Chem.-1990. -№265. P.200-218.

113. Mollenkopf HJ, Kursar M, Kaufmann SH. Immune response to postprimary tuberculosis in mice: Mycobacterium tuberculosis and Miycobacterium bovis bacille Calmette-Gurrin induce equal protection// J. Infect. Dis. 2004. - №190(3). - P. 588-597.

114. Moulding T.S., Redeker A.G, Kanel G.C. Twenty isoniazid-assotiated deaths in one state // Am. Rev. Respir. Dis. 1989. - №140. - P.700-705.

115. Moyanahan E.J. Zn deficiency and cellular immune deficiency in acrodermatitis enteropathica in man // Lancet. №2.- 1975.- P. 710.

116. Muroaka S., Nomoto K. In vitro studies on the mechanism of acquired resistance to tuberculosis infection // Jpn. J. Microbiol. 1976. - №20. - P. 115-122.

117. Nathan C. Nitric oxide as a secretors product of mammalian cells // FASEB J. 1992. -№6. -P.3051-3064.

118. Newhook R., Hirtle H., Byrne K., Meek M.E. Releases from copper smelters and refineries and zinc plants in Canada: human health exposure and risk characterization //Sci. Total Environ. 2003. - №301(1-3). - P.23-41.

119. Nicaido H., Rosenberg E. Physical organization of lipids in the cell wall of Mycobacterium Chelonae // Mol. Microbiol. 1993,- №8.- P. 1025-1030.

120. Nig VH, Cox JS, Sousa AO, MacMicking JD, McKinney JD. Role of KatG catalase-peroxidase in mycobacterial pathogenesis: countering the phagocyte oxidative burst// Mol. Microbiol. 2004. - №52(5). - P. 1291-1302.

121. Nikandrov V.V. Inorganic semiconductors as photosensitizers in biochemical redox reactions// Membr. Cell. Biol. 1998. - V. 12. - No. 5. - P. 755-769.

122. Ohkuma S., Takano T. Identification and characterization of a proton pump on lysosomes by fluorescein isothiocyanate-dextran fluorescence // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1982. - №79. - P.2758-2762.

123. Osborn T. Change in BCG strains // Tubercle. 1983. - №64. - P. 1-132.

124. Prasad A.S. Clinical. Biochemical and pharmacological role of zinc // Annu. Int. Med. — 1984,- V. 100. P. 367-371.

125. Rastogy N., David H. Growth and cell division of Mycobacterium avium // J. Gen. Microbiol. 1981,- №126.- P.77-84.

126. Roberts G.D., Kim Y.K. Mycobacterium // Manual of Clinical Microbiology. 1991,-№5. - P.304-339.

127. Rodilla V., Miles A.N., Jenner W., Hawksworth G.M. Exposure of cultured human proximal tubular cells to cadmium, mercury, zinc, and bismuth: toxicity and metallothionein induction// Chem. Biol. Interact. 1998. - V. 115. - P. 71-83.

128. Rodrigues L., Smith P. Tuberculosis in developing countries and methods for its control // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. -1990. №84. - P.739-744.

129. Rook G. The role of activated macrophages in protection and immunopathology in tuberculosis // Res. Microbiol. 1990. - №141. - P.253-256.

130. Roth HP. Development of alimentary zinc deficiency in growing rats is retarded at low dietary protein levels // J. Nutr. -2003. -№133(7). P.2294-2301.

131. Saunders BM, Briscoe H, Britton WJ. T cell-derived tumour necrosis factor is essential, but not sufficient, for protection against Mycobacterium tuberculosis infection// Clin Exp. Immunol. 2004. - №137(2). - P. 279-287.

132. Schlesinger L. Macrophage phagocytosis of virulent Mycobacterium tuberculosis is mediated by mannose receptors in addition to complement receptors // J. Immunol. -1993. №150. - P.2920-2930.

133. Smith P.G. Epidemiological methods to evaluate vaccine efficacy // Br. Med. Bull. -1988. -№44,- P.679-690.

134. Snider D.E., Caras G.J., Koplan J.P. Preventive therapy with izoniazid // JAMA. 1986. - №255. - P.1579-1583.

135. Styblo K., Meijer J. Epidemiology of tuberculosis // Selected Papers R. Netherland Tuberc. Assoc. 1976. - №24. - P. 1-136.

136. Sugawara I, Yamada H, Mizuno S, Li CY, Nakayama T, Taniguchi M. Mycobacterial infection in natural killer T cell knockout mice// Tuberculosis. 2002. - №82(2-3). - P. 97-104.

137. Surjawidjaja JE, Hidayat A, Lesmana M. Growth inhibition of enteric pathogens by zinc sulfate: an in vitro study // Med. Princ. Pract. 2004. - №13(5). - P.286-289.

138. Suter E. The multiplication of tubercule bacilli within normal phagocytes in tissue cultures // J. Exp. Med. 1952. - №96. - P. 137.

139. Suterland I. On the risk of infection // Bull. Int. Union Tuberc. 1991. - №66. - P.91-189.

140. Swierenga S.H., Gilman J.P., McLean J.R. Cancer risk from inorganics //Cancer Metastasis Rev. 1987. - №6(2). - P.l 13-154.

141. Talamas-Rohana P., Wright S., Lennarts M., Russel D. Lypophosphoglycan from Leishmania mexicana promastigotes binds to members of the CR3, pi50,95 and LFA-1 family of leukocyte integrins // J. Immunol. 1990. -№144. - P.4817-4824.

142. Tran CD, Miller LV, Krebs NF, Lei S, Hambidge KM. Zinc absorption as a function of the dose of zinc sulfate in aqueous solution // American J. Clin. Nutr.- 2004. №80(6). -P.1570-1573.

143. Trias J., Benz R. Porins in the cell wall of mycobacteria // Science. 1992.- №258.-P.1470-1481.

144. Underwood E.G. Trace Elements in Human and Animal Nutrition // Acad. Press. 1977. -P. 402.

145. Vanhoe H., Versieci J., Moens L. Role of inductively coupled mass spectrometry in the assessment of reference values for ultra-trace elements in human serum// Trace Elem. Electrol.- 1995,-Vol.12.-P. 81-88.

146. Walker L., Lowrie D. Killing of mycobacterium microti by immunologically activated macrophages // Nature. 1981. - №293.- P.69-70.

147. Wayne L.G. Synchronized replication of Mycobacterium tuberculosis // Infect. Immun. -1977.- №17. P.528-530.

148. Wayne L.G., Kubica P.G. Mycobacteria // Bergey's Manual of systematic Bacteriology. 1986.-vol.2.-P.1436-1457.

149. Weltman A., Rose D. The safety of Bacille Calmette Guerin vaccination in HIV infection and AIDS // AIDS. 1993. - №7. - P.149-157.

150. Williams R. An introduction to the biochemistry of zinc //C.F. Mills, (ed.). U.K. 1978. -P. 15-31.

151. Wen CG, Pang GY, Huang SQ. Significance of the serum level of Cu, Zn, Mn, Cr and Ni in acute leukemia //Zhonghua Nei Ke Za Zhi. 1989. - №28(12). - P.734-736, 768769.

152. Weston WL. Zinc correction of defective chemotaxis in acrodermatitis enteropathica // Arch. Dermatol. 1977.- № 113. -P.422-425.