Разработка экспресс-методов диагностики ботулизма тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.02, кандидат наук Мустафин, Тимур Рустемович

• Мустафин, Тимур Рустемович
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Мустафин, Тимур Рустемович

ОГЛАВЛЕНИЕ

стр.

ВВЕДЕНИЕ

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биология возбудителя ботулизма

1.2 Химический состав и антигенная структура возбудителя ботулизма

и его токсина

1.3 Лабораторная диагностика и идентификация возбудителя ботулизма

и его токсина

2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1 Материалы и методы исследований

2.2 Изучение культурально-морфологических и биохимических свойств

Cl. botulinum

2.2.1 Получение антигенов из Cl.botulinum типов А, В, С, D

2.2.2 Получение анатоксинов из Cl.botulinum типов А, В, С, D

2.2.3 Изыскание оптимального состава антигенной композиции Cl. botulinum типов А, В, С, D

2.2.4 Изыскание оптимального варианта гипериммунизации кроликов с целью получения высокоактивной ботулинической поливалентной сыворотки

2.3 Разработка полиспецифического антигенного эритроцитарного диагностикума для экспресс-диагностики ботулизма в РНГА

2.4 Разработка полиспецифического антительного эритроцитарного

диагностикума для экспресс-диагностики ботулизма в РНГА

2.5 Разработка полиспецифического люминесцирующего ботулинического глобулина для метода флуоресцирующих антител (МФА)

2.6 Разработка полиспецифического иммуноферментного конъюгата

для иммуноферментного анализа (ИФА)

2.7 Обнаружение возбудителя Cl.botulinum и его токсина в объектах ветеринарного надзора с помощью поливалентного флуоресцирующего глобулина и поливалентного иммуноферментного

конъюгата

2.8 Способы хранения культур Cl. botulinum и диагностических биопрепаратов

3 ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕННЫХ ТЕРМИНОВ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИЛЛЮСТРИРОВАННОГО МАТЕРИАЛА

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка экспресс-методов диагностики ботулизма»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Ботулизм - тяжелая интоксикация, возникающая в результате употребления в пищу продуктов, содержащих токсины Clostridium botulinum и характерезующаяся преимущественным поражением центральной и вегетативной нервной системы.

В настоящее время известно 8 типов возбудителя ботулизма (А, В, Са, Ср, D, Е, F, G), которые отличаются между собой по антигенным свойствам вырабатываемых ими токсинов и некоторыми другими признаками.

Возбудитель ботулизма относится к политропным представителям микробов, которые в ходе инфекционного процесса занимают ряд последовательных локализаций в организме, тем самым обнаруживая свою адаптированность к ряду различных органов и тканей, однако это есть единая форма болезни, в которой разные локализации возбудителя соответствуют разным стадиям болезни (кишечник, печень, легкие, нервная система).

Токсин ботулизма представляет собой протеин, состоящий как бы из двух фрагментов, связанных дисульфидными мостиками и попадая в кишечник животного всасывается в кровь и разносится по всему организму. Вследствии разрушения нервных центров продолговатого мозга развиваются параличи глотки, жевательных мышц и языка. Токсин подавляет выделение ацетилхолина, что ведет к расслаблению скелетных мышц, нарушению движения, параличам дыхательных и сердечных мышц, асфиксии и смерти животных. Люди наиболее восприимчивы к ботулиническим ядам типов А и С; лошади - типу В; крупный рогатый скот - типам D и С; овцы - типам А и С; птицы и норки - к типу С.

Впервые возбудитель ботулизма Clostridium botulinum (синоним Bacillus botulinus) был описан Е. Van Ermengem (1896).

Анализируя литературные данные по вопросу обнаружения антигенов и антител вообще, токсинов микробного происхождения в частности, можно заключить, что в этих целях наиболее перспективными являются иммуноферментный анализ (Бочарова Н.Г. Новая тест система обнаружения специфических антител // Сб.

науч. трудов. 1979. Вып.4. С.157-161), реакция непрямой гемагглютинации (Никитин В.М. Справочник серологических реакций. Кишинев, 1977. 205с.), хотя самым расрастраненным в настоящее время методом индикации ботулинического токсина является биопроба с реакцией нейтрализации токсина на белых мышах (Матвеев К.И. Ботулизм. М., 1959. 408с.; Лабинская A.C. Микробиология с техникой микробиологических исследований. М.: Медицина, 1978. 391с.; Пяткин К.Д., Кривошеин Ю.С. Микробиология. М.: Медицина, 1981. 511с.; Каздобина И.С. Специфическая индикация биологических средств и лабораторная диагностика инфекционного заболевания // ВПБЗН. 1985. Вып. 32. С.5-13; Никифоров В.Н., Никифоров В.В. Ботулизм. М.: Медицина, 1985. 198с.; Dezfulian М., Bartlett H.G. Kinetics of growth and toxigenicity of Clostridium botulinum in experimental wound botulism // Infec. and Im-mun. 1985. V.49. №2. P.452-454).

РНГА для индикации ботулинических токсинов во внешней среде применяли (Булатова Т.И., Матвеев К.И. К вопросу о применении РНГА для обнаружения ботулинических токсинов // ВПБЗН. 1966. Вып. 10. С. 167; Шамсутдинова А. X., Папуниди К. X., Кирилюк Д. А. и [др.]. Методическое указание по индикации ботулинических токсинов в объектах ветеринарного надзора реакцией непрямой гемагглютинации // ГУВ при ГК СМ СССР. 1989).

Иммуноферментный анализ находит широкое применение для определения и количественной дифференциации типов ботулинических токсинов (Notermans S.N. The Enzyme — linked immunoabsorbent assay (ELISA) for the detection and determination of Clostridium botulinum toxins А, В and E // Methods Enzymol. 1984. P.223-239; Kozahi S., Dufrenne I., Hagehaars A.M. Enzymelinked immynosorbent assay (ELISA) for detection of Clostridium botulinum type В toxin // Ja-pan.J.med.Sci.Biol. 1979. V.32. P.199-205; Dezfulian M., Bartel I. Detection of Clostridium botulinum type A toxin by enzyme-linked immunosorbent Assay with antibodies produced in immunologically tolerant animals // J. of clinical Microbiology. 1984. V.19. P.645-648; Kamata R., Yamamoto Т., Matsumoto K. [et.al.]. A serratial protease causes vascular permeability reaction by activation of the Hageman factor-dependent pathway in guinea pigs // Infect. Immun. 48. 1985. P.747-753; Никифоров B.H. Боту-

лизм. 198с.; Shone С., Appllton N., Wilton-Smith P., [et al.]. In vitro assays for botulinum toxin an antitoxins // Reduct.Anim.Usage new and Conf.Biol.Prod.Proc.Symp. London. 1986. P.141-145; Папуниди K.X., Адагамова Г.А. Иммуноферментный анализ для серологической диагностики ботулизма // Вопр.вет. вирусологии,микробиологии и эпизотологии. 1992. ч.2. С.273-274).

Люминесцентный анализ с применением флуоресцирующих антител (Бусыгин К.Ф. Люминесцентная диагностика инфекционных болезней животных. М.: Колос, 1975.160с.; Булатова Т.И., Кабанова Е.А., Кульберг А.Я. Применение люми-несцирующих антител для выявления возбудителей ботулизма // Люминесци-рующие антитела в микробиологии. М. 1962. С.98-116).

На сегодняшний день нет средств и методов экспресс - индикации возбудителя ботулизма, обнаружения ботулинического токсина ускоренными методами. Всё вышеописанное и обуславливает актуальность настоящей работы и необходимость создания экспресс анализа для обнаружения возбудителя ботулизма и его токсинов.

Все вышесказанное определило направление наших исследований.

Степень разработанности темы.

Диагностика ботулизма имеет целый ряд проблем. Это, во-первых, связано со сложностью культивирования клостридий как анаэробов и отсутствием селективных питательных сред для них. Кроме того, единственным методом, позволяющим с высокой чувствительностью идентифицировать ботулинические нейроток-сины, является биопроба на мышах в сочетании с реакцией нейтрализации специфическими анатоксинами. Данный метод требует большого количества лабораторных животных, использование которых в настоящее время принято считать неэтичным. Помимо этого, биопроба также не всегда обеспечивает получение необходимой информации. По статистическим данным, 65% клинических случаев ботулизма не имеют лабораторного подтверждения.

Цель и задачи исследований - разработка методов экспресс-индикации возбудителя ботулизма и его токсина в объектах ветеринарного надзора. Для достижения намеченной цели были поставлены следующие задачи:

- разработка полиспецифической композиционной смеси ботулинических антигенов;

- получение высокоактивной поливалентной антиботулинической сыворотки;

- создание полиспецифического антигенного эритроцитарного диагностикума для экспресс-диагностики ботулизма в РИГА;

- получение полиспецифического антительного эритроцитарного диагностикума для экспресс-диагностики ботулизма в РНГА;

- разработка полиспецифического люминесцирующего ботулинического глобулина для МФА;

- получение полиспецифического пероксидазного иммуноферментного коньюгата для экспресс-диагностики ботулизма в ИФА.

Научная новизна работы. Впервые составлена 8 компонентная композиция антигенов, включающая в себя корпускулярные антигены возбудителя С1.ЬоШНпит типов А, В, С, Б и их анатоксинов, которая в свою очередь послужила основой для получения высокочувствительного полиспецифического антигенного эритроцитарного диагностикума и препарата для гипериммунизации кроликов с целью получения высокоактивных поливалентных сывороток, на основе которых разработаны: высокочувствительный полиспецифический антительный эритроцитарный диагностикум; люминесцирующий глобулин; а также иммуно-ферментный коньюгат для экспресс-диагностики возбудителей С1.ЬоШНпиш и их токсинов в объектах внешней среды и патологическом материале в РНГА, МФА и ИФА. Разработанные диагностикумы дают возможность получать результаты в течение 4-5 часов, в то время как общепринятые методы индикации - биопроба и реакция нейтрализации позволяют получать результат в течение 10 суток.

Теоретическая и практическая значимость работы. Всестороннее и детальное изучение возбудителей ботулизма и их токсинов позволило разработать метод получения полиспецифической композиционной смеси ботулинических антиге-

нов с последующим получением на ее основе высокоактивной поливалентной ан-тиботулинической сыворотки, необходимой для изготовления высокоспецифичных диагностикумов для экстренной индикации данного возбудителя и его токсина в объектах ветеринарного надзора и патологическом материале в короткие сроки 4-5 часов.

Разработаны методические рекомендации по изготовлению композиционной смеси ботулинических антигенов.

Методология и методы исследований.

В исследованиях применяли клинические, бактериологические, культурально-морфологические, биохимические, микроскопические, серологические, радиобиологические и химические методы.

Работа выполнена в 2010-2014 г.г. в лаборатории музей штаммов особо опасных болезней ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» в соответствии с гос. заданием по НИР.

Отдельные фрагменты работы были выполнены с участием к.в.н. Мустафиной Э.Н.; д.в.н., профессора Садыкова Н.С.

Методы исследований

1) клинические - заражение возбудителем Cl. botulinum и наблюдение за подопытными животными (белые мыши, морские свинки, кролики). Взятие крови, гипериммунизация;

2) бактериологические - посевы Cl. botulinum на МПА с 2% глюкозой, среду Китта-Тароцци, бульон Хоттингера с 1% глюкозой, выделение чистых культур, получение и наработка бактериальной массы и продуцируемого ими токсина;

3) культурально-морфологические и биохимические - исследования штаммов Cl. botulinum на сахаролитические ( путем посева на «малый пестрый ряд») и про-теолитические свойства;

4) микроскопические - световая и люминесцентная микроскопия;

5) серологические - постановка РН; РНГА; ИФА;

6) радиобиологические - для инактивации возбудителя Cl. botulinum использовали гамма - установку «Исследователь» с источником излучения 60Со;

7) химические -инактивация возбудителя Cl. botulinum и перевод их токсинов в анатоксины с использованием 40%-ного раствора формалина.

Основные положения, выносимые на защиту:

- разработка полиспецифической композиционной смеси ботулинических антигенов;

- получение поливалентной гипериммунной антиботулинической сыворотки;

- создание полиспецифического антигенного эритроцитарного диагностикума для экспресс-диагностики ботулизма в РНГА;

- разработка полиспецифического антительного эритроцитарного диагностикума для экспресс-диагностики ботулизма в РНГА;

- получение полиспецифического люминесцирующего ботулинического глобулина для МФА;

- разработка полиспецифического пероксидазного иммуноферментного коньюга-та.

Степень достоверности и апробация работы.

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на производственных совещаниях лаборатории, на ежегодных заседаниях Ученого совета ФГБУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» при обсуждении отчетов о НИР за 2010-2014 г. и на Всероссийской заочной научно-практической конференции с международным участием «Микробиология в современной медицине» (2013 г.).

Статистическую обработку полученного в ходе экспериментов цифрового материала осуществляли на компьютере с использованием прикладных программ Microsoft Excel, Word 2010.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Биология возбудителя ботулизма

Первые упоминания о ботулизме относятся к 1793 году, когда в Германии после употребления в пищу копченой кровяной колбасы заболело 13 человек, 6 из которых скончались. Аналогичные пищевые отравления колбасой с гибелью большого числа людей наблюдались в Германии во время войны с Наполеоном в 1795-1813 годах. Тогда считалось, что эта смертность связана с отсутствием гигиены питания в деревнях в связи с войной.

Первым ученым, который занялся сбором статистики по случаям подобных отравлений и их симптомов, был профессор медицины Heinrich Ferdinand Autenreith из Тюбингенского университета. Опубликованный им в газете в 1817 году список симптомов включал желудочно-кишечные нарушения, двоение в глазах и расширение зрачка. Также Autenreith обнаружил связь между силой действия яда и степенью прожарки колбасы.

Одним из медиков, представивших профессору описания случаев отравления, был санитарный врач Justinus Kerner. В дальнейшем J. Kerner значительную часть своей жизни посвятил изучению ботулинического токсина, и считается крестным отцом его исследований. Проводя испытания на животных и на самом себе, он пытался выделить из колбасы неизвестный токсин, который сам называл «колбасный яд», «жирный яд» или «жировая кислота». Результаты этих исследований были опубликованы им в 1822 году в монографии, описывавшей 155 случаев отравления у человека и эксперименты на животных, в соответствии с которыми делался вывод о том, что действие токсина заключается в нарушении передачи импульса в волокнах периферической и автономной нервных систем. J. Kerner также предположил биологическое происхождение данного яда на основании сходства действия токсина с действием атропина и змеиного яда.

Впервые эти бактерии выявил в 1895 году бельгийский микробиолог Эмиль Пьер ван Эрменгем (Emile Pierre van Ermengem), ученик Роберта Коха. Используя методы микробиологических исследований, он выделил из кишечника людей,

скончавшихся после дегустации различных сортов колбас и ветчины, подозрительные бактерии, которые не встречались в кишечной флоре здоровых людей. Он назвал их Bacillus botulinus, что в переводе с латыни означает Бацилла колбасная. Так вошло в современную медицину страшное заболевание - ботулизм.

Ботулизм - остро протекающая кормовая токсикоинфекция, вызываемая токсином анаэробного спорообразующего микроба Bacillus botulinus. Эпидемиология ботулизма исключительно специфична и не укладывается в классические представления об эпидемиологии инфекционных болезней. По данным Громашевского J1. В., источником заболевания может служить только больной человек или больное животное ( Громашевский JI.В. Механизм передачи инфекции. Киев: Госмед-издат, 1958. 332с.). С другой стороны широкое распространение возбудителя ботулизма в природе послужило причиной мнения, что возбудитель убиквитарен и может размножаться и образовывать токсин в почве.

В настоящее время известно 7 типов возбудителя ботулизма (А, В, С, D, Е, F, G), вырабатывающих соответственно 7 токсинов, в свою очередь палочка типа С вырабатывает два различных токсина (Месробяну Л., Пэунеску Э. Физиология бактерий. Бухарест: Меридиане, 1963г. 808с.; Булатова Т.И. Ботулизм и его профилактика // Метод, указания. М.:Медгиз. 1966. 37с.), что позволяет говорить о существовании не 7, а 8 ботулинических токсинов. Все они отличаются между собой по антигенным свойствам вырабатываемых ими токсинов и некоторыми другими признаками. Каждый серовар характеризуется специфической иммуно-генностью. Имеется О-антиген, который является общим для всех сероваров.

По морфологии возбудители ботулизма - небольшие палочки длиной 4-9 мкм и шириной 0,6-0,9 мкм с закругленными концами. Палочки образуют субтерминальные или терминальные споры и имеют вид теннисной ракетки. Эти микробы легко окрашиваются различными анилиновыми красками. Молодые клетки окрашиваются по Граму положительно. Через 4-5 суток роста палочки окрашиваются грамотрицательно. Микробы подвижны, имеют от 4 до 35 жгутиков, капсулы не образуют.

Оптимальной температурой роста для бактерий типов А, В, С, D является 34-35°С, для типов Е и F - 26 -30°С, для типа G - 35°С.

В посевах в высокий столбик агара микробы образуют колонии, имеющие форму чечевицы и комочков ваты. При посеве на поверхность кровяного, печеночного или сахарного агара вырастают прозрачные колонии величиной в несколько миллиметров с ровными или изрезанными краями и блестящей поверхностью. На кровяном агаре колонии окружены зоной гемолиза.

Вегетативные формы возбудителя ботулизма погибают при 80°С за 30 минут. Споры выдерживают кипячение от 1,5 до 6 часов, при температуре 115°С они погибают через 30 - 40 минут, при 120°С - через 3- 20 минут. В больших кусках мяса и банках большей емкости они могут оставаться живыми и после их автокла-вирования при 120°С в течение 15 минут. В 5% растворе фенола споры сохраняются сутки. Ботулинический экзотоксин при кипячении разрушается в течение 10 минут, устойчив к действию солнечного света (Тимаков В. Д. Микробиология. М.: 1973. 432с.).

Споры Clostridium botulinum имеют широкое распространение. По В. М. Бер-ману: «Источником ботулизма является вся природа», что подчеркивает широкую обсемененность объектов окружающей среды спорами возбудителя. Ботулизм, как и столбняк, относится к группе сапрозоонозов, т.е. к числу болезней, общих для человека и животных, причем как человек, так и животные заражаются из окружающей среды, особенно из почвы (Берман В.М., Левитов А.М. Курс частной эпидемиологии. Изд. 3-е исправл. М.: Наркомздрав СССР. Медгиз, 1944. 440с.).

При описании патогенеза ботулизма во многих руководствах по инфекционным болезням, микробиологии и в других работах в развитии заболевания считается причиной только токсин, который может образоваться в консервированном продукте при попадании в него палочки ботулизма. В патогенезе заболевания совершенно необоснованно отрицается инфекционная роль палочки ботулизма. Это неправильная точка зрения, взятая из зарубежных руководств по ботулизму, полностью игнорирует работу отечественных авторов по патогенезу ботулизма. Работами советских клицинистов и бактериологов (С.И.Миневрин, С.Я.Штейнберг,

А.М.Корицкий, Н.В.Миртовский, К.И Матвеев и др.) впервые доказана токсико-инфекционная основа патогенеза ботулизма. Как показали исследования приведенных авторов, в развитии заболевания играет роль не только токсин, но и микроб, который вместе с токсином проникает в организм и, размножаясь там, вызывает дополнительную интоксикацию. Таким образом, в патогенезе ботулизма играет роль интоксикация и инфекция организма палочкой ботулизма (Матвеев К.И. Ботулизм. С. 162).

Возбудитель ботулизма широко распространен в окружающей среде, он обнаруживается в почве, воде, на свежих фруктах, овощах, фураже, силосе, иле, продуктах домашнего консервирования, кишечнике человека и животных и т.д. Споры чаще всего встречаются на бобовых (до 34%), на разлагающихся растениях и фруктах (до 20%), на перебродивших зеленых кормах (до 20%), в вяленой рыбе домашнего приготовления (до 55%), в маринованных грибах домашнего приготовления (до 45%>). Основную роль в обсеменении спорами растений, воды, фуража и пищевых продуктов играет почва, содержащая споры ботулинуса (Матвеев К.И. Ботулизм. 407с.; Минервин С.М., Жак С.П., Червякова К.И. Наблюдения над механизмом «сенсибилизирующего» действия ботулинового токсина // ЖМЭИ. 1955. Вып. 5. С.48-53).

Признание ботулизма типичной инфекционной болезнью (типа пищевой токси-коинфекции) упирается в вопрос о возможности размножения и токсикообразова-ния в желудочно-кишечном тракте или в тканях живого организма.

Ch.Thom и соавторы, проведя ряд экспериментов с введением лабораторным животным спор Cl. botulinum, освобожденных от токсина, пришли к выводу, что ни проростания спор, ни образования токсина в живом организме не происходит (Thom Ch., Edmondson R.B., Gilther L.T. Botulism from canned asparagus // Journ. Amer.Med.Ass. 1919.73. P.907-919).

Orr P.E., Coleman G.E. и Meyer K.F. провели серию сходных опытов, однако получили прямо противоположные результаты - животные, которым споры вводились per os или подкожно, заболевали и в некоторых случаях умирали от ботулизма. При вскрытии, производившемся непосредственно после смерти животно-

го или в атональном периоде (для исключения посмертного обсеменения), в органах и тканях животных обнаруживались вегетативные формы Cl. botulinum (Orr P.E. The pathogenicity of В. botulinus // Journ.Inf. Dis. 1922, 30, P. 118; Coleman G. E., Meyer K. F. Some observation on the pathogenecity of B. botulinus // Journ. Inf. Dis., 1922,31,622).

Оригинальная серия опытов была проведена G.E. Coleman. Отмытые от токсина и прогретые в течение 1 часа при 80°С споры помещали в полупроницаемые мешочки, которые затем вшивали в брюшную полость морским свинкам и кроликам. Споры в мешочках прорастали, и шло активное токсинообразование (при этом животные оставались здоровыми, так как токсин через полупроницаемую мембрану наружу не проникал). Так как полупроницаемая мембрана исключает взаимодействие возбудителя с иммунокомпетентными и фагоцитирующими клетками микроорганизма. Из этого автор сделал вывод о возможности роста и образования токсина Cl. botulinum в тканях живого организма (Coleman G. E. Germination of spores of В. botulinus in collodion sacs in abdomen of guinea-pigs and rabbits // Journ. Inf. Dis. 1923, 33, P.384-390).

К выяснению возможности роста и образования токсина Cl. botulinum в живом микроорганизме изучал J. Keppie. Его методика детоксикации споровой суспензии (многократное промывание дистиллированной водой, прогревание в течение часа при 80°С и нейтрализация остаточной токсичности соответствующей антитоксической сывороткой) полностью исключала отравление животных токсином, содержавшимся в культуральной среде. В опытах были использованы высокотоксичные штаммы возбудителя № 4587 и Hall, при этом было показано, что LD50 при внутримышечном введении равна 7,3-21,2 и 53,1 млн. спор соответственно, причем летальный исход обусловлен токсином, высвобождающимся из спор при их разрушении в процессе фагоцитоза, в то время как прорастания спор при жизни подопытного животного не наблюдалось. Аналогичные результаты получены при внутрибрюшинном введении спор, тем самым отверг возможность возникновения заболевания ботулизмом при употреблении в пищу продуктов питания, со-

держащих споры, но не токсин возбудителя (Keppie J. The pathogenicity of the spores of CI. botulinum // Journ. Hyg. 1951, 49, P.36).

В отечественной литературе этот тезис находит наиболее яркое подтверждение в работе M. М. Колесникова, посвященный изучению наличия возбудителей ботулизма в содержимом кишечника различных животных (Колесников M. М. Роль животных как источников инфекции при ботулизме^// Автореферат дис.. Киевский мед. ин-т им. А. А. Богомольца. Киев.: [б. и.]. 1968. 23с)[:

Таким образом, анализ имеющегося экспериментального материала позволяет сделать вывод, что в обычных условиях ни желудочно-кишечный тракт, ни ткани живых организмов не являются естественной средой обитания и токсинообразо-вания Cl. botulinum.

M. R. Poraff, J. C. Legardinier et al. зарегистрировали 3 очага ботулизма типа D у крупного рогатого скота, в которых пало 37 телок в возрасте до одного года. Установлено, что контаминация произошла на пастбище, загрязненном испражнениями перепелов. Эти птицы резистентны к ботулизму типа D и диссимилируют споры Clostridium botulinum D (Poraff M.R., Legardinier J.C., Mehent Ferron P. Analyse epidemiologigue du botulisme bonn dans le department de la Manche // Rev. med. Vet. 1986. 137. №12. P.857-865).

Наибольшее внимание заслуживает силос. Заражение силоса спорами возбудителя может быть причиной ботулизма у большого количества домашних животных. I. L. Smant, Т. О. Jones, F. G. Clegg также отмечают отравление крупного рогатого скота силосом, контаминированным токсином ботулизма. Токсин типа С обнаружен в сыворотке крови молодых заболевших животных и в экстрактах мышц тушек бройлеров, а также в помете птиц, разбросанном по территории пастбища. Случаи отравления токсином Clostridium botulinum В в стаде крупного рогатого скота и группе мулов описывают Т. J. Divere, R. С. Barttholomew, I. В. Messich. Токсин Clostridium botulinum обнаружен в силосе, которым вскармливали животных, возбудителя удалось изолировать из проб почвы поля, на котором проводили сбор трав на силос, а также из фекалий заболевших животных (Smant I.L., Jones Т.О., Clegg F.G. Roultry waste associated type С botulismin Cattle Epide-

miol // Infect. 1983. V.98. №1. P.73-79; Divere T.J., Bartholomew R.C., Messich I.B., [ et al.]. Clostridium botulinum type В toxicosis in a burg of cattle and a group of mules // J. Amer. Vet. Med. Assoc. 1986. V.188. №4. P.382-386).

A. Schwarzmaier, B. Schmidt, T. Volkerl описывают вспышку ботулизма 30 молочных коров на ферме в ФРГ. М. G. Bossi, P. М. Toppino, G. Sfandrini отмечают, что наименьший уровень выделения спор с фекалиями наблюдается при исключении из рациона силоса. О заболевании крупного рогатого скота ботулизмом указывает в своих работах ряд авторов (Schwarzmaier A., Schmidt В., Volkerl Т. Botulismus bein Rind ein Fallbericht // 1987. V.42. №7. P.567-568; Bossi M.G., Toppino P.M., Sfandrini G. Multiplication et Sporulation de Clostridium dans Cetube digestit des bovins: Effects de Lacomposition du regime alimentaire // J. Microbiol. Aliments Nutrit. 1987. V.5. №2. P. 141-145; Ургуев K.P. Клостридиозы животных. M.: 1987. 183c.).

V. Kokubo, M. Maruyama et al., отмечают вспышки ботулизма типа С среди водоплавающих птиц в Токио. Токсин типа С установлен в крови 23 домашних уток, а также в тине прудов: возбудитель выделен из содержимого желудков и слепых отростков. Имеются сообщения о вспышках ботулизма среди перелетных птиц, цыплят - бройлеров, индеек, в ряде стран, в том числе и в нашей стране -Северном Прикаспие Гурьевской области (Kokubo V., Maruyama М., Kaneko S. An outbreak of type С botulism among waterfowlsin a pond en Tokyo // J. Japan Veter. Med. Assn.1987. V.40. №2. P.l 13-117; Doms J.E. The imunisation of broiler chickens against type С botulisn // Avian Dis. 1982. 26. № 2. P.340 - 345; Muller W., Ursachen Sumptome und Bekampfimd des Botulismus bei NERS // Dt. Pelztierzuchter. 1983. 57. № 5. P.74 -75; Булатова Т.И, Ильичев В.Д., Анисимов Б.Д. Ботулизм у перелетных птиц в Северном Прикаспии // ВПБЗН. 1985. Вып. 32. С.423 - 430).

S. N. Notermans и А. Н. Havalaar изучили с 1970 г. распространение Clostridium botulinum в природе. Из 1538 проб пахотной земли, пастбищ, водоемов, фекалий водных птиц и сырья для изготовления пищевых продуктов в 574 случаях обнаружены Clostridium botulinum с преобладанием в почве типов Е и С, а в фекалиях

водоплавающих птиц - типа В, иногда обнаруживали тип D (Notermans S. N., На-valaar А.Н. Tijdschr. diergeneesh // 1986. V. 111. №13. Р.634-638).

Теплокровные животные играют большую роль в рассеивании микроба ботулизма по земной поверхности и обсеменении ими почвы. Дикие птицы, делающие перелеты на большие расстояния, грызуны, а также домашние животные способствуют распространению возбудителя ботулизма в природе.

В литературе описаны случаи массовой гибели норок от ботулизма (Матвеев К.И., Булатова Т.И., Сергеева Т.И. Вспышка ботулизма у норок // Ветеринария. 1957. № 10. 53с.; Weis Н.Е. Botulismus als Ursache eines Massensferbens bei Wasservogeln // Tierarztl. Unisch. 1982. 37.№ 12. P.842-846).

По данным A. Neimanis, D. Gavier-Wide et al., с 2000 г. по 2004 г., более чем 10 000 морских птиц, прежде всего чайки (Larus argentatus), умерли от неопределенной причины в юго-восточной Швеции. Сыворотки крови птиц (31%) проверенных от вспышек в 2000 - 2003 гг. выявили Clostridium botulinum тип С. В 2004 г. из 16 проб сыворотки крови в 11 пробах (69%) обнаружен Clostridium botulinum тип С (Neimanis А., Gavier-Wide D., Leighton F. [ et al.]. An outbreak of type С Botulism in Herring gulls (Larus Argentatus) in Southeastern Sweden // Journal of Wildlife Diseases (Wildlife Disease Association 2007). 2007. 43(3). P.327-336).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мустафин, Тимур Рустемович, 2014 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авакян, А. О. Материалы 6 Всесоюзной конференции по вопросам санитарной микробиологии / А.О. Авакян // М. -1966. - С. 78.

2. Акимов, Г. А. К диагностике и патогенезу ботулизма / Г. А. Акимов, B.C. Лобзин, Е. М. Гаремин // Журн.невропатол. и психиатр. - 1971. - вып.7. - С. 1033 - 1038.

3. Бакулин, И. Н. Метод получения эритроцитарных диагностикумов для обнаружения энтеротоксина Clostridium botulinum типа А / И. Н. Бакулин, Г. Б. Кошкина, Т. И. Сергеева // ЖМЭИ. - 1982. - № 11. - С. 79 - 82.

4. Баяр, Г. И. Реакция непрямой гемагглютинации как метод экспресс -индикации в объектах внешней среды / Г. И. Баяр, Р. Е. Конникова // ВПБЗН. -1966.-Вып. 10.-С. 175 - 180.

5. Березин, И.В. Иммуноферментный анализ как новый метод массового обследования населения и его возможный социальный эффект / И. В. Березин // Биология и медицина. - 1985. - С. 53 - 57.

6. Бондарев, Л.С. Ботулизм / Л. С. Бондарев, Ю. С. Варенко // Киев: Здоровье. -1990. - 72 с.

7. Бочарова, Н. Г. Новая тест система обнаружения специфических антител / Н. Г. Бочарова// Сб. науч. трудов. - 1979. - Вып. 4. - С. 157-161.

8. Бусыгин, К. Ф. Люминесцентная диагностика инфекционных болезней животных / К. Ф. Бусыгин. - М.: Колос, 1975.-160 с.

9. Булатова, Т. И. Журн. микробиологии / Т. Н. Булатова, У. А. Кабанова // — 1960.-№3.-С. 18.

Ю.Булатова, Т. И. Применение люминесцирующих антител для выявления возбудителей ботулизма / Т. И. Булатова, Е. А. Кабанова, А. Я. Кульберг // Лю-минесцирующие антитела в микробиологии. М. - 1962. — С. 98 - 116.

11. Булатова, Т. И. Журн. микробиологии / Т. И. Булатова // 1964. - № 1. — С. 96; 1964.-№7.-С. 79.

12. Булатова, Т. И. Ботулизм и его профилактика./ Т. Н. Булатова // Ме-тод.указания. — М.:Медгиз. - 1966. — 37 с.

13. Булатова, Т. И. К вопросу о применении РНГА для обнаружения ботулини-ческих токсинов / Т. И. Булатова, К. И. Матвеев // ВПБЗН. - 1966. - Вып. 10. -С. 167.

14. Булатова, Т. И. Инструкция о порядке расследования, учета и проведения лабораторных исследований в учреждениях санитарно — эпидемиологической службы при пищевых отравлениях / Т. И. Булатова, И. С. Каздобина // М.: Медицина. - 1975. - С. 98 - 110.

15. Булатова, Т. И. Ботулизм у перелетных птиц в Северном Прикаспии / Т. И. Булатова, В. Д. Ильичев, Б. Д. Анисимов // ВПБЗН. - 1985. - Вып. 32. - С. 423 -430.

16.Бургасов, П. Н. Эволюция клостридиозов / П. Н. Бургасов, С. Н. Румянцев // М.: Медицина. - 1974. - С. 12.

17.Берман, В. М. Курс частной эпидемиологии / В. М. Берман, A.M. Левитов. -Изд. 3-е исправл. М.: Наркомздрав СССР. Медгиз, 1944 .-440 с.

18.Вертиев, Ю. В. / Ю. В. Вертиев // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1999. - № 5. - С. 40 - 47.

19. Виноградова, И. Д. Методы очистки и характеристика ботулинического ней-ротоксина типа А и получения моноспецифических антисывороток к нему/ И. Д. Виноградова, И. С. Каздобина, К. И. Иванов // - В кн.: Вопросы прикладной иммунологии. Совершенствование анатоксинов и антирабических препаратов. Уфа. -1980.-61 с.

20. Воробьёв, А. А. Медицинская и санитарная микробиология: Учеб. пособие для студ. высш. мед. учеб. заведений / А. А. Воробьев, Ю. С. Кривошей, В. П. Широбоков // М.: Издательский центр «Академия», 2003.-464 с.

21. Гаффаров, X. 3. Новое в диагностике инфекционной агалактии овец и коз / X. 3. Гаффаров, Р. Г. Гизатуллин, Л. А. Жандарова // Тез. Докладов Респ. науч. произ. конф. Казань. - 1990. — С. 210.

22. Гаффаров, X. 3., Спиридонов Г. Н., Ефимова М. А. Полиспецифическая гипериммунная сыворотка против рота-, корона-, герпес вирусов и E.coli

(К99,А20) для локальной защиты и иммунотерапии смешанных форм диареи новорожденных телят/ // Патент на изобретение РФ №2145504. 2000.

23.Гизатуллин, Р. Г. Получение моноклональных антител, специфических для штамма «фарз» / Р. Г. Гизатуллин, X. 3. Гаффаров, Л. И. Матвеева // Тез. докл. Респ.науч-произв. конф. Казань. - 1990. — С. 208.

24. Громашевский, Л. В. Механизм передачи инфекции / Л. В. Громашевский. -Киев: Госмедиздат, 1958.-332 с.

25. Далин, М. В. Белковые токсины микробов / М. В. Далин, Н. Г. Фиш. -М.: Медицина, 1980.-224 с.

26. Дербин, М. И. Ботулизм / М. И. Дербин // ВПБЗН - 1983.- Вып. 31. - С. 245 -252.

27. Должкевич, Н. Я. Ботулизм, вызванный тушеной свининой домашнего приготовления / Н. Я. Должкевич, И. М. Любарец, В. П. Таченко // ЖМЭИ. М.: Медицина. - 1980. -№ 6. - С. 93.

28. Дзантиев, Б. Б. Современное состояние и перспективы развития иммунофер-ментного анализа / Б. Б. Дзантиев, А. М. Егоров // Журн.Всес.хим. об-ва им. Д.И. Менделеева. - 1982. -Т.27. - № 4. - С. 442 - 449.

29. Донец, Ю. И. Тезисы докладов научной сессии Одесского мед. ин-та им. Пи-рогова / Ю. И. Донец // 1956. - С. 27.

30. Егоров, А. М. Успехи биоорганического катализа / А. М. Егоров, Б. Б. Дзантиев, Е. М. Гаврилова // МГУ. М. - 1979. - С. 239.

31. Зубко, Л. А. Труды Одесского медецинского Института / Л. А. Зубко // Одесса. - 1959. - Вып. 9.-С. 68.

32. Зуева, Л. П. Эпидемиология / Л. П.Зуева, Р. X. Яфаев. - Санкт - Петербург: Фолиант, 2006. -752 с.

33.Иванов, А. В. Радиовакцины: проблемы и перспективы / А. В. Иванов, Р.Н. Низамов, Г.В. Конюхов. - Изд.: КГУ, 2008.- 498 с.

34. Иванова, М. А. Ботулизм : учеб.-метод, пособие / М. А. Иванова. - Минск: БГМУ, 2009.-24 с.

35. Иванов, Н. Р. Вопросы патогенеза ботулизма / Н. Р. Иванов, Н. Р. Чеснокова, А. В. Архангельский. — Саратов, 1979. - 58 с.

36. Казанцев, А. Г. Справочник по инфекционным болезням / А. Г. Казанцев, В. С. Матковский. - М.: Медицина, 1986.-218с.

37.Каздобина, И. С. Определение ботулинических токсинов в реакции пассивной гемагглютинации / И. С. Каздобина, А. JI. Винник, К. JI. Шахалина // ВПБЗН. - 1976. - Вып. 26. - С. 102 - 110.

38. Каздобина, И. С. Специфическая индикация биологических средств и лабораторная диагностика инфекционного заболевания / И. С. Каздобина //ВПБЗН. - 1985.-Вып. 32.-С. 5 - 13.

39. Капитана, Г. А. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины / Г. А. Калитина. - М., 1960. - Т. 49. - № 3. - 81 с.

40. Канцур, М. Я. Значение метода кольцепреципитации для диагностики токсинов В. botulinum / М. Я. Канцур, Ф. А. Черткова // Вопросы питания. - 1940. -Вып. 4. - С. 64 - 68.

41. Киселева, Н. И. Биолюминесцентный метод иммуноферментного анализа инсулина. Получение и применение иммобилизованных ферментов в научно-исследовательской промышленности и медицины / Н. И. Киселева // Тезисы доклада 3 Всес. науч.симпозиума. - 1980. - С. 96.

42. Коваленко, Я. Р. Анаэробные инфекции сельскохозяйственных животных / Я. Р. Коваленко - М.: Сельхозгиз, 1954.

43. Ковтунович, J1. Г. Изучение нового метода обнаружения ботулинического токсина / J1. Г. Ковтунович // Тез. докл. межинститутской науч. конф. по проблеме анаэробов. — 1956.

44. Колесников, М. М. Роль животных как источников инфекции при ботулизме: автореф. дис. на соискание ученой степени канд. мед. наук : 14.00.33 / Колесников М. М. - Киевский мед. ин-т им. А. А. Богомольца. - Киев : [б. и.], 1968. -23с.

45.Коляков, Я. Е. Ветеринарная иммунология / Я. Е. Коляков. — М.: Агро-промиздат, 1986. — С. 11.

46. Кост, Е. А. Справочник по клиническим и лабораторным методам[|исследова-ния / Е. А. Кост. - М., 1975.

47.Костенко, Т. С. Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии / Т. С. Костенко, Е. И. Скаршевская, С. С. Гительсон. — М.: ВО Аг-ропромиздат, 1989. - С. 215 - 217.

48. Кравченко, А. Т. Распространение возбудителей ботулизма и столбняка на территории СССР / А. Т. Кравченко, Л. М. Шишулина // М. - 1970. - С. 5 -14.

49. Курстак, Э. Применение иммуноферментных и некоторых других иммунологических методов в диагностике вирусных инфекций / Э. Курстак, К. Курстак, П. Тийссен // Бюллетень ВОЗ. - 1986. - 64 - №3. - С. 110 - 124.

50. Лабинская, А. С. Микробиология с техникой микробиологических исследований / А. С. Лабинская. -М.: Медицина, 1978.-С. 391.

51. Лазарев, Б. Н. Ботулизм: этиология, эпидемиология, клиника, диагностика, лечение и профилактика / Б. Н. Лазарев, Г. Д. Родин., А.Ф. Юрин. -Волгоград, 1980.

52.Магазов, Р. Ш. Новый способ получения ботулинического анатоксина типа А /Р. Ш. Магазов//ВПБЗН. - 1983.-Вып. 31.-С. 108-111.

53.Матвеев, К. И. Вспышка ботулизма у норок / К. И. Матвеев, Т. И. Булатова, Т. И.Сергеева // Ветеринария. - 1957. - № 10. - С. 53.

54. Матвеев, К. И. Ботулизм / К. И. Матвеев. - М., 1959.-408 с.

55.Махмутов, А. Ф. Разработка и изучение эффективности полиспецифической гипериммунной сыворотки против рота-, коронавирусного гастроэнтерита и эшерихиозной диареи новорожденных поросят: дис. канд.биол.наук: 06.02.02 / Махмутов Айдар Фаритович. -Казань, 2012. - 171 с.

56.Месробяну, Л. Физиология бактерий / Л. Месробяну, Э. Пэунеску. - Бухарест: Меридиане, 1963.-808 с.

57. Методическое указание по индикации ботулинических токсинов в объектах ветеринарного надзора реакцией непрямой гемагглютинации // А. X. Шам-сутдинова, Д. А. Кирилюк, К. X. Папуниди, П. К. Сметов. - ГУВ при ГК СМ СССР, 1989.

58. Методические рекомендации: Асептическое производство медицинской продукции; Ч.З Лиофилизация. - Москва: Изд. «Стандартинформ», 2012.- 16 с.

59.Минервин, С. М. Наблюдения над механизмом « сенсибилизирующего» действия ботулинового токсина / С. М. Минервин, С. П. Жак, К. И. Червякова // ЖМЭИ. - 1955. - Вып. 5. - С. 48 - 53.

60. Михайлов, В. В. Ботулизм / В. В. Михайлов. - Л.: Медицина, 1980.-200 с.

61. Моргунов, И. Н. Санитарно-эпидемиологические особенности ботулизма в ландшафтных зонах Украины / И. Н. Моргунов, М. Н. Колесников, Б. Л. Влазнева // X Украинский съезд гигиенистов. — К.: Здоровья. - 1981. - 120 с.

62. Муромцев, С. Н. Ботулизм сельскохозяйственных животных / С. Н. Муромцев; В кн.: Частная эпизоотология. Под ред. акад. С. Н. Вышелесского. - Огиз - Сельхозгиз, 1948.-С. 63 -73.

63.Наследышева, С. И. Обнаружение токсина В. botulinum в пищевых продуктах посредством реакции кольцепреципитации / С. И. Наследышева, П. С. Бра-славская // Сообщ. т. Анналы Мечниковского института. - Харьков. - 1935. — Т. 1. - Вып. 1.-С. 123 - 132.

64. Никитин, В. М. Справочник серологических реакций / В. М. Никитин. -Кишинев, 1977.-205 с.

65.Никитин, Е. Е. Замораживание и высушивание биологических препаратов / Е. Е. Никитин, И. В. Звягин. - Москва: «Колос», 1971.-342 с.

66.Никифоров, В. Н. Ботулизм / В. Н. Никифоров, В. В. Никифоров. - М.: Медицина, 1985.-198 с.

67. Никифоров, В. В. Ботулизм : учебно -методическое пособие для врачей / В. В. Никифоров, Н. А. Малышев, Б. И. Санин. - М., 2003. - 32 с.

68,Отараева, Б. И. Ботулизм в республике Северная Осетия-Алания: монография / Б.И. Отараева, Т. М. Бутаев, Н. И. Отараева. - Владикавказ: ГОУ ВПО СОГМА Росздрава, 2010.-110 с.

69.Папуниди, К. X. Иммуноферментный метод для серологической диагностики ботулизма / К. X. Папуниди, Г. А. Адагамова // Материалы научной конференции ВНИВИВВиЛ. - Покров, 1992. - 4.2. - С. 273 - 274.

70. Пилат, В. В. Диагностика ботулизма в Ульяновской области / В. В Пилат, О. М. Разживина, А. А. Нафеев, Ю. А. Зинченко, А. 3 Якупова, Н. В. Точицкая // Журн. микробиол. - 2004.- №1. С. 97 - 98.

71. Покровский, В. И. Иммуноферментный анализ: современное состояние и тенденции развития / В. И. Покровский, Е. П. Голубинский, Н. А. Семина и др. // Обз.инф. ВНИИ мед.-техн. - 1986. - №3. - С. 74.

72. Полевая, О. Ю. Хим.фармацевтический журнал / О. Ю. Полевая, И. Е. Ковалев, Т. Н. Робокидзе // 1980. -Т. 14. - №11. - С. 31.

73.Пяткин, К. Д. Микробиология / К. Д. Пяткин, Ю. С. Кривошеин. - М.: Медицина, 1981.-511 с.

74.Рыцай, Г. Бюллетень Польской АН / Г. Рыцай // 1956. - отд.2 - Т.4. -С. 335. Руководство по иммунологии - М.: Медицина, 1964.-450 с.

75.Синицин, В. А. Материалы по индикации ботулинических токсинов А и В с помощью непрямой реакции гемагглютинации в пищевых продуктах и объектах внешней среды / В. А. Синицин // Дисс. канд. — Чита, 1960.

76.Синицин, В. А. Военно-медицинский журнал / В. А. Синицин // 1961. - №10. -С. 65.

77. Сокол, А. С. Вопросы клиники, эпидемиологии и лечения ботулизма / А. С. Сокол, М. М. Колесников, М. П. Ромазан // Врачеб. дело. — 1982. - №4. -С. 107- 109.

78.Тимаков, В. Д. Микробиология / В. Д. Тимаков. - М., 1973.-432 с.

79. Ургуев, К. Р. Клостридиозы животных / К. Р. Ургуев. — М., 1987.-183 с.

80.Феклисова, Л. В. Вспышка ботулизма в Московской области / Л. В. Феклисо-ва // ВПБЗН. - 1978. - Вып. 28. - С. 20 - 23.

81. Франке, 3. Химия отравляющих веществ: монография / Франке 3., Франц П., ВарнкеВ. - Издательство "Химия", т. 1 - 1973.-435 с.

82. Шагиева, А. X. Иммуноферментный анализ сывороток крови животных с термическими ожогами кожи / А. X. Шагиева, Г. П. Новошинов, В. А. Медет-ханов // Тезисы докл. Респуб. научно — производств, конф. — Казань. — 1990.-С. 101.

83.Шамардин, В. А. Общие принципы стандартизации поливалентных эритро-цитарных диагностикумов / В. А. Шамардин, Б. В. Каральник; В кн.: Стандарты, эталоны и методы контроля бактериальных и вирусных препаратов .«Труды ГКИ», т.1. 1971.- С. 33.

84. Шапиро, С. Е. Семейное заболевание ботулизмом, обусловленное мясом нерпы / С. Е. Шапиро, Е. Г. Таценко // ЖМЭИ. - М.: Медицина. - 1977. - № 8. -С. 142- 143.

85.Шувалова, Е. П. Ботулизм / Е. П. Шувалова // Инф. болезни. - М.: Медицина, 1976.-С. 101 - 107.

86.Avrameas, S. Immunoenzymatic Technigues / S. Avrameas, P. Druet, R. Masseyeff, G. Feldmann // Elsevier Science Publisher. Amsterdam. - 1983. -V.18.- P. 410.

87.Berson, S. A. Isotopic tracens in, the study of diabetes / S. A. Berson, R. S. Valow // In: Advances in biology and medical physics. Academic Press. New York, -1958. - V.6. - P. 349.

88.Boroff, P. A. Toxin of Clostridium botulinum / P. A. Boroff // In: Toxin Anim. and Plant Origin. New York. - 1972. - V.2. - P. 631 - 640.

89. Bossi, M. G. Multiplication et Sporulation de Clostridium dans Cetube digestit des bovins: Effects de Lacomposition du regime alimentaire / M. G. Bossi, P. M. Top-pino, G. Sfandrini // J. Microbiol. Aliments Nutrit. - 1987. - V.5. - №2. - P. 141145.

90.Boyden, S.V. The absortion of proteins on erythrocytes treated with tannic acid and subsequent hemagglutination by antiprotein sera/ S.V. Boyden // J.exp. Med. -1951.- v.93. - 107 p.

91.Blecka, Z. J. Inhibitor enzyme immunoassays for guantiation of various haptens / Z. J.Blecka, M. Shaffar, R. Pworschack // In: Immunoenzymatic technigues. S. Arameas C.a., Amsterdam. - 1983. - P. 207 - 214.

92.Bronfenbrenner, J. J. Cause of immediate death by large doses of botulinus toxin / J. J. Bronfenbrenner, M. J. Schlesinger, P.F. Orr // Journ.Exp.Med. - 1924. - P. 81 -89.

93. Brown, J. T. Container for immunochemical and enzymatical determinations or procedures / J. T. Brown, H. T. Zin Wayne, J. W.Woods // Pat. USA №4210418. -01.07.80.-1980.

94. Buehler, H. I. The elemental and amino acid composition of crystalline Clostridium botulinum type A toxin / H. I. Buehler, E. I. Schantz , C. Lamanna // Journ. Biol., Chem. - 1947. - P. 295 - 302.

95.Ciccarelli, A. S. Cultural and physiological characteristics of Clostridium botulinum type G and susceptibility of certain animals to toxin / A. S. Ciccarelli, D. N. Whaley, L. M. McCroskey // Apple. Envikonm. Microbiol. - 1977. - V.34. -№6. - P. 343 - 848.

96. Coleman, G. E. Some observation on the pathogenecity of B. botulinus / G. E. Coleman, K. F. Meyer // Journ. Inf. Dis. -1922. - P. 622.

97. Coleman, G. E. Germination of spores ofB. botulinus in collodion sacs in abdomen of guinea-pigs and rabbits/ G. E. Coleman // Journ. Inf. Dis. - 1923. - P. 384 -390.

98. Coons, A. H. Fluorescent antibody methods / A. H. Coons // Gen Cytochem Methods. - 1958.-P.399-422.

99. Coons, A. H. The diagnostic application of fluorescent antibodies / A. H. Coons // Schweiz Z. Pathol Bakteriol. - 1959. - P. 700 - 723.

100. Csizmas, L. Preparation of formalinised erythrocytes / L. Csizmas // Proc. soc. exp. Biol. - I960.-v. 103.-P. 157.

101. Dack, G. M. Studies on botulinum toxin in the alimentary tract of hogs, rabbits, guinea-pigs and mice / G. M. Dack, J. Gibbard // Journ. Inf. Dis. - 1926. - P. 173180.

102. Dezfulian, M. Enzyme linked Immunosorbent assay for detection of Clostridium botulinum type A and type B toxic in stodsamples of infants with botulism / M. Dezfulian, M. Halheroaych // J. of clinical Microbiology. - 1984. - V.20 (3). - P. 379-383.

103. Dezfulian, M. Detection of Clostridium botulinum type A toxin by enzyme-linked immunosorbent Assay with antibodies produced in immunologically tolerant animals / M. Dezfulian, I. Bartel // J. of clinical Microbiology. - 1984. - V. 19. - P. 645 -648.

104. Dezfulian, M. Kinetics of growth and toxigenicity of Clostridium botulinum in experimental wound botulism / M. Dezfulian, H. G. Bartlett // Infec. and Im-mun. -1985. - V.49. - №2. - P. 452 - 454.

105. Dezfulian, M. Rapid diagnosis of a case of intant botulism by ensime immunoassay / M. Dezfulian, R. Volken, J. Bartlett // Pediatrie Infectious Disease. — 1985. V.4. - P. 399-401.

106. Divere, T. J. Clostridium botulinum type B toxicosis in a burg of cattle and a group of mules / T. J. Divere, R. C. Bartholomew, I. B. Messich, R. H. Whitlock, R.W. Sureney // J. Amer. Vet. Med. Assoc. - 1986. -V. 188. - №4. - P. 382 - 386.

107. Dobbins Place, J. Immunol. Meth. / J. Dobbins Place, H. R.Schraeder // 1982. -V.48. -P.251 -255.

108. Dolman, C. E. Clostridium botulinum type F with recent observations on other types / C. E. Dolman, L. Murakami // J Infect Dis. - 1961. - P. 28.

109. Dolman, C. E. Botulism as a World Health Problem / C. E. Dolman; In: Botulism. Proc. sumpos. Cincinnati: Ohio, 1964 -P.5 - 30.

110. Doms J. E. The imunisation of broiler chickens against type C botulisn / J. E. Doms // Avian Dis. - 1982. -26. - 2. - P. 340 - 345.

111. Dona, V. Purification of hapten-enzyme conjugates for enzymoimmunoassay / V. Dona, G. Deleide, U. Barbiery, B. Malvano // Clin.Chim. acta. - 1980. - V.108. -№2.-P. 301 -307.

112. Dovell, V. R. Laboratory methods in anaerobic bacteriology / V. R. Dovell, J. Haukins // CDC laboratory manual. Centers for Disease Control no. 77-9272. U.S. Government Printing Office, Washington D.C. - 1977. 126 p.

113. Eckert, H.G. Radioimmunoassay / H.G. Eckert. - Chem.Int.Ed.Engl., 1976.-525 P-

114. Engvall, E. Enzyme linked immunosorbentassay (ELISA), Quantitative assay of immunoglobulin G / E. Engvall, P. Perlmann // Immunochem. - 1971. — V.7. -P. 871 - 874.

115. Finley, P. R. Evalution of a new homogeneous enzyme inhibitorimmunoassay of serum toxine with use of a bichromatic analyser / P. R. Finley, R. J.Williams, D. A. Lichti // Clin.Chem. - 1980.- V.26. - P. 1723 -1726.

116. Gerwing, J. Purification and molecular weight determination of Clostridium botulinum type E toxin / J. Gerwing, C. E. Dolman, M. E. Reichmann // J. Bacte-riol.- 1964.-P. 216-219.

117. Gull — Candy, S. Effects of botulinum toxin on neuromuscular transmission in the rat / S. Gull Candy, H. Lundh, S. Thesleff// J. Physiol (Lond.). - 1976. -V. 260. - P.177 - 203.

118. Gunnison, J. B. Studies on the serologic classification of B. botulinus. The precipitin reaction / J. B. Gunnison, P. Schoenhoiz // Journ.Immunol. - 1927. - P. 237 -241.

119. Gunnison, J. B. Susceptibility of Monkeys goats and small animals to oral administration of botulinum toxin types B, C, D / J. B. Gunnison, K.F. Meyer // Journ. Inf. Dis. - 1930. - P. 335.

120. Haagsma, J. Antonie van Zeawerhock / J. Haagsma // 1980. - V.46. - №5. - P. 510.

121. Harvey, S. M. Botulism due to Clostridium baratii type F toxin / S.M. Harvey, J. Sturgeon, D.E. Dassey // J Clin Microbiol. - 2002. - 40:2260.2.

122. Hatheway, C.Z. Laboratory procedures for cases of suspected infant botulism / C. Z. Hatheway // Rev. Infect. Dis. - 1979. -1. - P. 647 - 651.

123. Ishikawa, E. Amproved preparation of antibody caated polystyrene bead for sondwish enzyme immunocorbent assay / E. Ishikawa, V. Hamaguski, M. Lma-gawa // J.Immunoassay. - 1980 -V.l. - P. 385 - 388.

124. Jacquet, J. Le botulisme experimental du cheval provoque par le toxine D, evolution et essai de serotherapie / J. Jacquet, A.R. Prevot // Bull.Acad.Vet.Fr. - 1952. -P. 247 - 253.

125. Jonson, H.M. Bacteriologi /H.M. Jonson, K. Brenner, R. Angebotti. - J.Bact., 1966.-367 p.

126. Kadis, S. Microbial Toxins. Bacterial protein toxins / S. Kadis, T.C. Montie, S.J. Ajl. - NY:Acad. Pess., V.2. - 1971. - 413 p.

127. Kamata, R. A serratial protease causes vascular permeability reaction by activation of the Hageman factor-dependent pathway in guinea pigs / R. Kamata, T.Yamamoto, K. Matsumoto, H. Maeda // Infect. Immun. - 1985. - P. 747-753.

128. Kenny, G. E. Microbiol / G. E. Kenny, C.L. Dunsmoor. - J. Clin., 1983. - V.17. -P.655 - 665.

129. Keppie, J. The pathogenicity of the spores of CI. botulinum / J. Keppie // Journ. Hyg. - 1951. - P. 36-49.

130. Kokubo, V. An outbreak of type C botulism among waterfowlsin a pond en Tokyo / V. Kokubo, M. Maruyama, S. Kaneko // J. Japan Veter. Med. Assn. - 1987. -V.40. - №2. - P. 113 - 117.

131. Kozahi, S Enzymelinked immynosorbent assay (ELISA) for detection of Clostridium botulinum type B toxin / S. Kazahi, I. Dufrenne, A. M. Hagehaars, S. Noter-mans // Japan.J.med.Sci.Biol. - 1979.-V.32.- P. 199 - 205.

132. Kozahi, S. Evalution of ELISA technigues for titration of monoclonal antibodies against botulinum toxin / S. Kozaki, J. Kamata, T. Nagai, I. Ogasawarn, E. Sa-koguchig // Jap. J. Vet. Sei. - 1986. - V.48 - №5. - P. 409 - 914.

133. Lamanna, C. The purification and crystallization of Clostridium botulinum type A toxin / C. Lamanna, O.E. McElroy, H.W. Eklund // Science 103. - 1946. - P. 613 -614.

134. Legroux, R. Le botulisme experimental du cheval et la quetion du botulisme naturel / R. Legroux, J.C. Levaditi, R. Lamy // Ann.Inst.Pasteur. - 1946. - 72. - P. 545.

135. Legroux, R. Le botulisme experimental du chien et la guestion du botulisme naturel / R. Legroux, J. C. Levaditi // Ann. Inst. Pasteur. - 1947. - V.73. - №2. - P. 105.

136. Lindstrom, M. Multiplex PCR Assay for Detection and Identification of Clostridium botulinum Types A, B, E and F in food and fecal material / M. Lindstrom, R. Keto, A. Markkula, S. Hielm, H. Korkeala // Applied and Environmental Microbiology. - Dec 2001. - P. 5694 - 5699.

137. Malvano, R. Immunoenzymatic Assay Technigues / R. Malvano // Martinus Ny-hoff Rublisher. - 1980.- P. 72.

138. Meyer, K. F. The status of botulism as a world health / K. F. Meyer // Bull. Wld Hlth Org. - 1956 - V. 15. - P. 281.

139. Michali, K.M. ELISA for the detection and differentiation of Clostridium botulinum toxins type A and B / K. M. Michali, J. Grzybowski // J. Immunological methods. - 1986. - V.93. - №2. - P. 225 - 230.

140. Mierzejewski, J. Clostridium botulinum-like bacilli / J. Mierzejewski // Polish. -1979.-33(4).-P. 495 - 500.

141. Moller, V. Preliminary report on the isolation of an apparently new type of Clostridium Botulinum / V. Moller, J. Scheibel // Acta Path. Microbiol. Scand. -1960, -v. 48. - 80 p.

142. Muller, W. Ursachen Sumptome und Bekampfimd des Botulismus bei NERS / W. Muller // Dt. Pelztierzuchter. - 1983. - 57. - 5. - P. 74 -75.

143. Neimanis, A. An outbreak of type C Botulism in Herring gulls (Laras Argentatus) in Southeastern Sweden / A. Neimanis, D. Gavier-Wide, F. Leighton, T. Bollinger, T. Rocke, and T. Morner // Journal of Wildlife Diseases (Wildlife Disease Association 2007). - 2007.- 43(3). - P. 327 - 336.

144. Notermans, S.N. Enzyme — linked immunoabsorbent assay for detection of Clostridium botulinum type E toxin / S. N. Notermans // Appl. Environ. Microbiol. — 1979.-V.37.-P. 1173 - 1175.

145. Notermans, S.N. The Enzyme — linked immunoabsorbent assay (ELISA) for the detection and determination of Clostridium botulinum toxins A, B and E / S. N. Notermans // Methods Enzymol. - 1984. - P. 223 - 239.

146. Notermans, S. N. Tijdschr. diergeneesh / S. N. Notermans, A. H. Havalaar // 1986. - V. 1.11, №13. - P. 634 - 638.

147. Orr, P.E. The pathogenicity of B. botulinus / P.E. Orr // Journ.Inf. Dis. - 1922. -v.30. - P. 118.

148. Poraff, M.R. Analyse epidemiologigue du botulisme bonn dans le department de la Manche / M. R. Poraff, J. C. Legardinier, P. Mehent Ferron, G. Lexune // Rev. med. Vet - 1986. -137. - №12. - P. 857 - 865.

149. Prevot, A. Action de la cortisone sur limmunisation du lapin par anatoxine botuligue / A. Prevot, E. Brygoo, R. Silloc // Inst. Pasteur. 1953. - V.85. - №2. - P. 255 - 257.

150. Prevot, A. Nouvelles recherches sur le botulisme et ses cinq types toxiniques / A. Prevot, E. R. Brygoo // Ann. Inst. Pasteur. - 1953. - 85. - P. 544—575.

151. Reiss, J. Immunologe / J. Reiss, B. Wotityla // 1981-1983. - V.l. - P. 97 - 108.

152. Rosin, H. Bornholmer Krankheit Botulismus / H. Rosin // Pharmahother Kinde-sater. München. - 1988. - P. 159 - 161.

153. Rubenstein, K. E. "Homoheneous" enzyme immunoassay, New Immunochemical technique / K. E. Rubenstein, R. S. Schneider, E. F. Ullman // Bio-chem. Biophys. Res.Commun. - 1975.- V.47. - p. 846 - 851.

154. Schantz, E. J. Toxic proteins produced by Clostridium botulinum / E. J. Schantz, K. L. Sugiyama // J. of Agricol. Food Chem. - 1974. - V.22. - P. 26 - 30.

155. Schwarzmaier, A. Botulismus bein Rind ein Fallbericht / A. Schwarzmaier, B. Schmidt, T. Volkerl // 1987. - V.42. -№7. — P. 567 - 568.

156. Shone, C. In vitro assays for botulinum toxin an antitoxins / C. Shone, N. Appllton, P. Wilton-Smith, P. Hambleton, N. Modi, S. Gatley, J. Meiling // Re-

duct.Anim.Usage new and Conf.Biol.Prod.Proc.Symp. London. - 1986. — P. 141145.

157. Skurrie, I. J. /1. J. Skurrie, G. L. Gilbert // J. Clin. Microb. - 1983. - V. 17. - P. 738-741.

158. Smant, I. L. Roultry waste associated type C botulismin Cattle Epidemiol / I. L. Smant, T. O. Jones, F. G. Clegg, M. J. Meneuntry // Infect. - 1983. - V.98. -№1. — P. 73 - 79.

159. Sonnabend, O. Isolation of Clostridium botulinum type G and identification of type G botulinal toxin in humans: report of five sudden unexpected deaths / O. Sonnabend, W. Sonnabend, R. Heinzle [et.al.] // Journ. Infect, dis. - 1981. - P. 22 -27.

160. Thom, Ch. Botulism from canned asparagus / Ch. Thom, R.B. Edmondson, L.T. Gilther // Journ. Amer.Med.Ass. - 1919. - 73. - P. 907 - 919.

161. Van Weemen, B.K. Immunoassay using antigenenzyme conjugate / B. K. Van Weemen, A. H. Schuwrs // FEBS Letters. -1971. - V.15. - P. 232 - 236.

162. Voller, A. Immunoassay / A. Voller, A. Bartlett, P. Bidwett // Trans.Roy.Soc.Trop.Med and Hug. - 1976. - V.70. - P. 98.

163. Voller, A. Immunoassay for the 80-s Lancaster / A. Voller // MTR. - 1981.

164. Wagman, J. Botulinum A toxin: properties of a toxic dissociation product / J. Wagman, J. Bateman // Arch. Biochem. - 1953. - 45. 2. - P. 375 - 383.

165. Weinberg, M. De anatoxine botulinique / M. Weinberg, P. Goy // Compt.Rend.Soc.Biol. - 1924. - P. 269.

166. Weis, H. E. Botulismus als Ursache eines Massensferbens bei Wasservogeln / H. E. Weis // Tierarztl. Unisch. - 1982. - 37. - 12. - P. 842 - 846.

167. Wentzel, L. High toxicity of pure Botulinum type D toxin / L. Wentzel, M. Sterne, A. Poison // Nature. - 1950. - P. 739 - 740.

168. Wilson, B.M. Recent development in the periodate method of conjugating horseradish peroxidase (HRPO) to antibodies / B.M. Wilson, P.K. Nakane; In: Immunofluorescence and related staining techniques, 1978.-216 p.

169. Wood, W. C. Immunoassay technology / W. C.Wood. - Berlin, 1985. - V.l.

СПИСОК ИЛЛЮСТРИРОВАННОГО МАТЕРИАЛА

Таблицы:

1. Культурально-биохимические свойства штаммов Cl. botulinum лиофилизи-рованных в 1989 году.

2. Токсигенные свойства штаммов Cl. botulinum лиофилизированных в 1989 году.

3. Культурально-биохимические свойства пассажированых штаммов С1. botulinum.

4. Токсигенные свойства пассажированных штаммов Cl. botulinum.

5. Подтверждение токсигенности надосадочной жидкости на белых мышах.

6. Схема гипериммунизации и титры антител в сыворотках крови кроликов.

7. Иммуногематологические и биохимический показатели изменений сыворотки крови после гипериммунизации.

8. Активность и специфичность антигенного эритроцитарного ботулиническо-го диагностикума.

9. Активность и специфичность антительного эритроцитарного ботулиниче-ского диагностикума.

10. Результаты исследования полиспецифического ботулинического иммуно-ферментного коньюгата.

11. Обнаружение возбудителя Cl.botulinum и его токсина в объектах ветеринарного надзора.

12. Сравнительная оценка культурально-биохимических свойств лиофилизированных штаммов Cl. botulinum и их паспортных данных

13. Сравнительная оценка культурально-биохимических свойств нативных штаммов Cl. botulinum и их паспортных данных.

14. Результаты проверки диагностических препаратов.