Разработка аналитических методов фракционного исследования гомоцистеина и других аминотиолов плазмы крови для оценки ишемических повреждений головного мозга тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.03, кандидат наук Иванов Александр Владимирович

• Иванов Александр Владимирович
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Иванов Александр Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ

РАЗДЕЛ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫЕ АМИНОТИОЛЫ ПЛАЗМЫ КРОВИ И ИХ РОЛЬ В ПАТОГЕНЕЗЕ ИШЕМИЧЕСКОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ МОЗГА

1.1 Биохимия гомоцистеина и других аминотиолов

1.1.1 Содержание и фракционный состав гомоцистеина и других аминотиолов

в плазме крови

1.1.2 Биосинтез и пути метаболизма аминотиолов

1.1.3 Химические свойства SH-групп тиолов

1.1.4 Аминотиолы и антиоксидантная защита организма

1.2 Механизмы повреждающего действия гомоцистеина

1.2.1 Внутриклеточные мишени повреждающего действия гомоцистеина

1.2.2 Гомоцистеинилирование белков плазмы крови

1.3 Нейротоксичность гомоцистеина

1.4 Глутатионилирование белков как механизм цитопротекции

при ишемическом повреждении головного мозга

ГЛАВА 2. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ПЛАТФОРМЫ И ТЕХНОЛОГИИ МОНИТОРИНГА УРОВНЯ ГОМОЦИСТЕИНА И ДРУГИХ АМИНОТИОЛОВ В ПЛАЗМЕ КРОВИ

2.1 Общие замечания

2.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография

2.2.1 ВЭЖХ-Фл

2.2.2 ВЭЖХ-УФ

2.2.3 ВЭЖХ-МС

2.2.4 ВЭЖХ с детектором сцинтилляции

2.2.5 Электрохимический детектор

2.3 Капиллярный электрофорез

2.3.1 КЭ-УФ

2.3.2 КЭ-ЛИФ

РАЗДЕЛ II. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 3. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО МАТЕРИАЛА И

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Реактивы

3.2 Материалы и Оборудование

3.2.1 ВЭЖХ

3.2.2 Масс-спектрометрия

3.2.3 Капиллярный электрофорез

3.3 Объекты исследования

3.4 Экспериментальные модели на животных

3.4.1 Моделирование фокальной ишемии головного мозга

3.4.2 Моделирование глобальной ишемии головного мозга

3.4.3 Моделирование гипергомоцистеинемии у крыс

3.4.4 Регистрация мозгового кровотока

3.5 Методы определения аминотиолов

3.5.1 Определение фракций Гцис в плазме крови по его КБМ-производному

с использованием ВЭЖХ-МС

3.5.2 Определение фракций аминотиолов в плазме крови по их ТНБ-производным методом ВЭЖХ-УФ

3.5.3 Определение фракций аминотиолов в плазме крови по их тВгВ-производным методом ВЭЖХ-Фл

3.5.4 Прямое определение общего гомоцистеина в плазме крови

с использованием КЭ-МС

3.5.5 Метод КЭ-УФ для определения связанных аминотилов

по их тиокарбонильным производным

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

4.1 Прямое определение общего гомоцистеина плазмы крови методом капиллярного электрофореза и масс-спектрометрии

4.2 Определение связанных аминотиолов плазмы методом капиллярного электрофореза по их циклическим S,N-тиокарбонильным производным

4.3 Анализ плазменных фракций гомоцистеина по его ^этилсукцинимидному производному с использованием хроматомасс-спектрометрии

4.4 Определение общих и восстановленных аминотиолов плазмы крови человека методом жидкостной хроматографии по их тионитробензойным производным

4.5 Сравнение хроматографических методик определения гомоцистеина, цистеина и глутатиона

4.6 Апробация метода жидкостной хроматографии для определения аминотиолов по их тионитробензойным производным

на экспериментальной модели гипергомоцистеинемии

4.7 Редокс-статус аминотиолов плазмы крови крыс при локальной

и глобальной ишемии головного мозга

ВЫВОДЫ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка аналитических методов фракционного исследования гомоцистеина и других аминотиолов плазмы крови для оценки ишемических повреждений головного мозга»

Актуальность проблемы.

Низкомолекулярные аминотиолы, такие как гомоцистеин (Гцис), глутатион (Глн), цистеин (Цис) и др., участвуют в разнообразных физиологических процессах (защита от активных форм кислорода и азота, ферментативное метилирование, внутриклеточная сигнализация, модуляция функций белков и проч.), которые активно вовлекаются в патогенез широкого спектра заболеваний [Lentz S.R. and Haynes W.G. 2002, Newton L.A.A. et al. 2010, Ueland P.M. et al. 1992, Santilli F. et al. 2015]. Особое внимание уделяется Гцис, обладающему высокой реакционной способностью по отношению к различным биологическим структурам, прежде всего, сосудистому эндотелию, тромбоцитам и др. форменным элементам крови, а также ферментам, рецепторам, структурным белкам и др. Многочисленные исследования выявляют тесную связь гипергомоцистеинемии (ГГц) с проявлениями сосудистой дисфункции при атеросклерозе, ИБС, инфаркте миокарда, инсультах, тромбозах, что выводит Гцис в ранг независимого фактора риска развития сердечно-сосудистых заболеваний [Баранова Е.И. и Большакова О.О. 2004, Жлоба А.А. 2009, , Родионов Р.Н. и Лентц С.Р. 2008, Шмелева В.М. и др. 2008, Han L. et al. 2015, Maron B. and Loscalzo J. 2009, Ansari R. et al. 2014]. У трети пациентов с ранним развитием ССЗ, не имеющих отклонения по прочим факторам риска развития этих заболеваний, наблюдается ГГц [Ueland P.M. et al. 1992, Потемкин В.В. и др. 2007, Подзолкова Н. М. и Скворцова М. Ю. 2014, Львова О.А. и др. 2013, Акопян Г.Р. и др. 2014, Ganguly P. and Alam S.F. 2015]. Было показано, что повышение Гцис на каждые 2,5 мкМ повышают риск развития инфаркта миокарда на 10% и инсульта на 20 %, а сосудистые стенки, пораженные атеросклерозом, содержат Гцис на порядок выше, чем не измененные [Sen U. et al. 2010, Santilli F. et al. 2015, Дунаевская С. С. и др. 2015]. ГГц также наблюдается при почечной недостаточности, диабете, заболеваниях щитовидной железы, болезни Альцгеймера, Паркинсона и др.

Нормальный уровень Гцис в плазме составляет 10-15 мкМ и находится под влиянием многочисленных физиологических и социальных факторов: возраст, пол, раса, качество питания, курение, употребление некоторых продуктов, состояние беременности и климакса и др. [Mudd S.H. et al. 2000, Obersby D. et al. 2013]. Особую роль среди них отводят недостаточности фолата (В9) и кобаламина (В12) как наиболее важным кофакторам, участвующим в превращениях Гцис. Ряд исследований показывают возможность использования гомоцистеина в качестве индикатора фолат- и В12 - недостаточностей [Ueland P.M. et al. 1993, Тапильская Н. И. и Гайдуков С. Н. 2013, Farrell Chr.-J. L. et al. 2013].

Многочисленные комплексные эффекты Гцис, его вовлеченность в патогенез многих заболеваний являются отражением, с одной стороны, сложной системы нормальных

(физиологических) метаболических путей, в которых это соединение играет одну из центральных ролей и, с другой стороны, возникновением или резким возрастанием концентрации нехарактерных для нормального метаболизма продуктов окисления Гцис в условиях протекания патологических состояний. В связи с этим диагностическая значимость Гцис как маркера заболеваний остается предметом дискуссий [Petras M. et al. 2014]. Это во многом обусловлено тем, что, как и другие аминотиолы, Гцис присутствует во многих формах (или фракциях). В плазме крови только небольшая часть Гцис присутствует в восстановленной форме, большая его часть окисляется и образует дисульфидные связи с белками (связанная фракция), цистеином и др. тиолами (растворимая или свободная фракция). Некоторое количество Гцис через образование тиолактона способно присоединяться к аминогруппам белков. Все эти формы имеют различную реакционную способность и кинетику обменных процессов, что обуславливает интерес к определению именно фракционного состава, т.к. оно позволяет получить более подробную информацию, открывая абсолютные или относительные изменения редокс-статуса Гцис и др. аминотиолов или их долю, связанную с определенным белком.

Существует много методов определения Гцис в биологических жидкостях. Наиболее активно используются такие методы как ВЭЖХ-УФ или ВЭЖХ-Фл. Большинство из них позволяет определять только общее содержание Гцис (и ещё нескольких тиолов - Цис, Глн, цистеинглицина (ЦисГли) и др.) и только небольшая их часть дает возможность количественного анализа восстановленных форм. Многие методы ограничены по чувствительности и технологическим процессам (методика дериватизации, время реакции или пробоподготовки и пр.), затрудняющим определение восстановленной формы аминотиолов. Сравнительно недавно появились такие высокочувствительные и специфические методы как КЭ-ЛИФ и ВЭЖХ-МС, позволившие поднять чувствительность и системность анализа на новый уровень, однако стоимость оборудования ограничивает широту их применения.

Таким образом, разработка новых и оптимизация существующих методов определения общего содержания и фракционного состава гомоцистеина (а также других аминотиолов) представляет собой актуальную задачу, как для фундаментальных, так и для клинических исследований, и требует привлечения современных и доступных платформ разделения и детектирования аналитов, таких как ВЭЖХ и КЭ в сочетании с масс-спектрометрическим или УФ-детектированием. Используя их преимущества, можно охватить широкий круг задач - от рутинных скрининговых до высокочувствительных целевых исследований. Однако, перед внедрением новых методов в лабораторную практику, необходима их валидация при состояниях, сопровождающихся нарушением метаболизма гомоцистеина. Одним из таких состояний является экспериментальная ГГц, широко использующаяся для исследований

цитотоксичности и патогенеза Гцис-опосредованных дисфункций. Другим состоянием была выбрана ишемия головного мозга, ввиду тесной взаимосвязи ГГц с развитием инсультов и значимостью этой проблемы для здравоохранения.

Диагностика инсультов имеет важное медико-социальное значение, т.к. его ежегодно переносят около полумиллиона человек в России, а во всем мире - более 5 миллионов, из которых 70-80% становятся инвалидами [Гусев Е. И. и др. 2013]. Смерность как первичных, так повторных инсультов составляет около 20%. Несмотря на достигнутый в последние годы прогресс, заключающийся в снижении смертности и летальности, средний возраст больных инсультом остается ещё ниже, чем в Западной Европе и США [Lenti L. et al. 2013; Скворцова В. И. и др. 2013, 2014]. В структуре инсультов доминирующее положение занимает ишемический инсульт, на долю которого приходится около 80% случаев [Стаховская Л.В. и др. 2013]. Как можно отметить, Гцис оказывает влияние и/или ассоциирован с патогенезом основных факторов риска инсультов - артериальной гипертонии, атеросклерозом и сахарным диабетом. Он, наряду с С-реактивным белком и P-селектином входит в тройку наиболее значимых маркеров инсульта [Hasan N. et al. 2012, Полушин А.Ю. и др. 2013, He Y. et al. 2014]. Однако, как показали исследования, снижение уровня общего Гцис не приводит к снижению заболеваемости ишемическим инсультом [Jakubowski H. 2008, Ansari R. et al. 2014], что требует поиска других связанных с ним диагностических маркеров. Вместе с тем, на сегодняшний день ещё недостаточно изучены системные вазомоторные эффекты инсульта [Jimenez-Altayo F. et al. 2014], а данные о влиянии ишемии головного мозга как на метаболизм самого Гцис, так и на гомеостаз низкомолекулярных аминотиолов в целом отсутствуют. Изучение этого вопроса имеет значение для развития концепций факторов риска развития инсульта как основы интегральной популяционной и целевой стратегии [Верещагин Н.В. и Пирадов М.А. 2002], гетерогенности ишемического инсульта, раскрытия молекулярно-биологических и патофизиологических основ ишемического инсульта, контроля над жизненно важными показателями гомеостаза в острейшем периоде инсультов.

Цель работы. Разработка аналитических методик исследования содержания гомоцистеина и других низкомолекулярных аминотиолов в плазме крови для ранней диагностики, мониторинга и прогноза течения ишемического повреждения головного мозга.

Для достижения данной цели были поставлены следующие задачи: 1. Определение возможностей и преимуществ подходов высокоэффективной жидкостной хроматографии и капиллярного электрофореза в сочетании с абсорбционными и масс-спектрометрическими детекторами для анализа аминотиолов.

2. Разработка методик анализа аминотиолов в плазме крови (выбор реагентов для дериватизации, оптимизация пробоподготовки и анализа, определение чувствительности и сопоставление с существующими методами) на основе вышеперечисленных подходов.

3. Апробация методик на биологических образцах (плазмы крови человека и лабораторных животных). Валидация на моделях экспериментальной гипергомоцистеинемии и ишемии головного мозга.

4. Выявление диагностической роли восстановленных форм гомоцистеина и других аминотиолов при ишемии головного мозга.

Научная новизна результатов.

1. В работе был впервые предложен метод прямого определения общего Гцис с помощью КЭ-МС, а также его фракций с использованием ВЭЖХ-МС и дериватизацией N этилмалеимидом (что является одной из самых чувствительных методик с использованием ВЭЖХ-МС).

2. Разработан новый подход фракционного определения тионитробензойных производных аминотиолов с использованием ВЭЖХ-УФ, увеличивающий стабильность результатов анализа восстановленной фракции.

3. Впервые применен методический прием определения белок-связанных аминотиолов по их циклическим тиокарбонильным производным посредством КЭ-УФ с обращенным полем и электрокинетическим концентрированием.

4. Впервые установлены дифференциальные отличия системы аминотиолов плазмы крови в реакции на глобальную и локальную ишемию головного мозга.

5. Впервые показано, что редокс-статус аминоитиолов плазмы крови, в отличие от их общего содержания, претерпевает значительное снижение системного характера при острой ишемии головного мозга.

6. Впервые доказано, что метиониновая нагрузка способна вызывать не только состояние гипергомоцстеинемии, но и значительно повышать редокс-статус аминотиолов плазмы крови.

Научно-практическая ценность. Результатами работы является разработка аналитических методов, позволяющих определять как общий гомоцистеин плазмы крови, так и фракции гомоцистеина, цистеина, глутатиона и цистеинилглицина, максимально приближенные к условиям лабораторной диагностики, для мониторинга и прогноза течения инсульта, а также исследования эндотелиальной дисфункции.

Положения, выносимые на защиту:

1. Применение №этилмалеимида в качестве дериватизирующего агента для масс-спектрометрического определения фракций гомоцистеина в плазме крови повышает чувствительность метода и стабильность аналитов.

2. Метод определения связанных форм Гцис, Цис и Цис-Гли по их циклическим S,N-тиокарбонильным производным с использованием капиллярного электрофореза упрощает процесс пробоподготовки и не уступает в чувствительности аналогичному подходу ВЭЖХ-УФ.

3. Применение №этилмалеимида в качестве блокатора побочных реакций дисульфидного обмена при определении восстановленных аминотиолов плазмы крови с дериватизацией дитиобиснитробензойной кислотой позволяет повысить стабильность результатов анализа.

4. Экспериментальная гипергомоцистеинемия сопровождается повышением уровня восстановленных аминотиолов в плазме крови.

5. Фокальная ишемия головного мозга вызывает значительное снижение редокс-статуса аминотиолов в плазме крови, тогда как глобальная ишемия индуцирует этот эффект лишь в сочетании с декомпенсированной кровопотерей.

Апробация работы

Материалы диссертации отражены в 7 статьях, опубликованных в ведущих отечественных журналах, 5 из которых входит в Перечень российских рецензируемых научных журналов ВАК.

Результаты работы представлены на двух всероссийских конференциях (VIII Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием "Молекулярная диагностика-2014", Москва и XVII Всероссийская конференция "Человек и его здоровье", Санкт-Петербург, 2014). Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, их результатов и обсуждения, заключения и выводов, списка цитируемой литературы из 320 наименований. Работа изложена на 127 страницах, содержит 30 рисунков и 7 таблиц.

ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ.

РАЗДЕЛ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ГЛАВА 1. НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫЕ АМИНОТИОЛЫ ПЛАЗМЫ КРОВИ И ИХ РОЛЬ В ПАТОГЕНЕЗЕ ИШЕМИЧЕСКОГО ПОВРЕЖДЕНИЯ МОЗГА

1.1 Биохимия гомоцистеина и других аминотиолов

1.1.1 Содержание и фракционный состав гомоцистеина и других аминотиолов в плазме крови

К низкомолеклярным аминотиолам относят множество соединений, из которых наибольшую роль в организме играют гомоцистеин, цистеин и глутатион. Гомоцистеин (Гцис) - непротеогенная аминокислота, обладающая множеством молекулярных мишеней, обусловливающих многообразие патогенетических механизмов клеточного повреждения с его участием. Большое число факторов влияет на его содержание в плазме крови: возраст, пол, беременность, особенности питания, прием антагонистов витаминов группы В и др. [Broxson E.H. et al. 1989 , Ueland P.M. et al. 1993]. Под верхней границей нормального содержания общего Гцис (ТГцис) обычно приводят значения 10-15 мкМ [Amores-Sanchez M. and Medina M.A. 2000, Wiley V.C. et al. 1988; Ueland P.M. et al. 1993], но выделение границ нормы имеет несколько условный характер и служит только для общего ориентирования. Превышение этого порога называется гомоцистеинемией (ГГц). Для женщин характерны более низкие значения общего Гцис (примерно на 2 мкМ), но с возрастом разница пропадает и в среднем уровень ТГцис поднимается от младенчества до старости примерно в два раза [Refsum H. et al.2004]. Так у ~30% пожилых людей наблюдается его уровень > 14 мкМ [Selhub J. et al. 1995]. Потребление витаминов группы В оказывает существенное влияние на уровень Гцис и является основной причиной вариабельности референтных значений в популяциях. Индивидуальные же изменения общего Гцис составляют около 8 % для измерений, проводимых по единым правилам в течение 1 года [Refsum H. et al.2004], однако суточные колебания ТГцис (и, в особенности, его фракций) связаны с приемом пищи и могут быть значительно больше. С его ростом возрастают и его индивидуальные колебания, достигая 25% при ГГц выше 40 мкМ [Refsum H. et al.2004].

ГГц имеет три степени: умеренную, среднюю и тяжелую. Умеренная ГГц (ТГцис 10-30мкМ) наиболее распространена, особенно у пожилых людей. Она может быть ассоциирована с почечной недостаточностью и умеренным дефицитом В12, В9 [Selhub J. et al. 1993], также при ряде мутаций цистатионин-Р-синтазы и MTHFR [Klerk M. et al. 2002]. У большинства людей с В12-дефицитом также повышен ТГцис плазмы [Ueland P.M. et al. 1993], и имеется негативная корреляция между ними в области субнормальных значений кобаламина (130-300 пМ) [Ueland P.M. et al. 1993]. Отсюда анализ ТГцис имеет некоторые преимущества перед B12, т.к.

Гцис отражает не столько дефицит фолата номинальный, сколько функциональный, т.е. дефицит внутриклеточного фолата или нарушение молекулярных фолат-зависимых реакций. Это позволяло бы его использовать в качестве маркера дефицита, однако диагностическая значимость Гцис как маркера дефицита B12 невелика вследствие его неспецифичности и уступает определению метилмалоновой кислоты [Ueland P.M. et al. 1993]. Показано, что чрезмерное употребление кофе, курение и алкоголизм сопровождаются развитием умеренной Ггц и большинство исследований, посвященных определению взаимосвязей уровня Гцис с различными заболеваниями, сталкиваются с данной группой ГГц.

Средняя ГГц (ТГцис 30-100 мкМ) наблюдается также, как правило, у людей с недостаточностью B12 и В9, при почечной недостаточности. В последнем случае ГГц возникает из-за нарушения клиренса Гцис [Friedman A.N. et al. 2001]. В работе [Manssor M.A. et al. 1994] на небольшой выборке людей, имеющих ГГц и дефицит В12, было показано существенное возрастание восстановленного Гцис (~2 мкМ) по сравнению с контрольной группой (0,24 мкМ), притом не только в абсолютных значениях, но и относительно общего Гцис плазмы, поэтому характер зависимости восстановленный-общий Гцис имел не линейный, а экспоненциальный характер.

Наследственные нарушения метаболизма метионина могут приводить к тяжелой форме ГГц, при которой уровень ТГцис превышает 100 мкМ в плазме крови и моче. Среди людей с такими нарушениями (называемых вместе наследственной гомоцистинурией) высок процент ССЗ, инсультов, деформаций скелета, нарушение зрения [Mudd S.H. et al. 1985]. В большинстве случаев у них обнаруживается аутосомно-рецессивная форма дефектов цистатионин-Р-синтазы.

Существуют наследственные заболевания, обозначаемые как гомоцистинурии, сопровождаемые очень высоким уровнем плазменного гомоцистеина. Само соединение было открыто в 30-х годах ХХ века [Butz L.W. and du Vigneaud V. 1932], но только спустя три десятилетия исследования гомоцистинурии привлекли интерес ученых к Гцис и положили начало его лабораторной диагностике [Gerritaen T. et al. 1962, Carson N.A.J. and Neil D.W. 1962].

Гцис-снижающая терапия (применение витаминов B6, B12, бетаина, фолата, ограниченное потребление метионина) во многих случаях оказывает выраженный клинический эффект (но не снижают риск развития инсульта), хотя лишь частично снижает Гцис плазмы [Wilcken DEL. and Wilcken B. 1997, Lentz S.R. and Haynes W.G. 2002].

Свободный Гцис состоит из восстановленного (1% от общего Гцис) и окисленного пула (5-10% Гцис и столько же смешанного дисульфида Гцис-Цис). Остальная часть ТГцис связана с белками дисульфидными связями [Wiley V.C. et al. 1988], другие дисульфидные формы Гцис (Гцис-ЦисГли и Гцис-Глн) присутствуют в незначительных количествах [Mudd S.H. et al. 2000]. Часть Гцис образует амидные связи с боковыми цепями лизина (~3 мкМ [Jakubowski H. 2006]),

и тиолактоновая форма (~30 нМ [Jakubowski H. 2006]) которые при анализе, как правило, не учитываются. Верхний предел нормальной концентрации Гцис принимается за 12-15 мкМ [Wiley V.C. et al. 1988; Ueland P.M. et al. 1993], у пациентов с гомоцистинурией Гцис может достигать 500мкМ, что превышает связывающую емкость плазменных белков (~140мкМ [Wiley V.C. et al. 1988]). У детей Гцис ниже (4-8мкМ) [Refsum H. et al. 1991].

Данные о возможных суточных вариациях плазменного Гцис немногочисленны и неполные. Одни авторы не находят различий [Malinow M.R. et al. 1989], другие отмечают небольшой, но значимый подъем общего Гцис после приема пищи в течение 2-4 ч с возвращением к 8 часу на исходный уровень [Ubbink J.B. et al. 1992]. Для здоровых людей характерен постоянный уровень Гцис в течение многих лет [Ueland P.M. et al. 1993].

Общее содержание других низкомолекулярных аминотиолов в плазме крови и их фракционный состав приведен в таблице 1. Была показана линейная связь между соотношениями восст./общ. Гцис, Цис, Цис-Гли [Mansoor M.A. et al. 1993a, 1994], что является отражением гомеостаза окислительно-восстановительного состояния тиолового пула. Также выявлена обратная корреляция содержания белок-связанных форм этих тиолов [Mansoor M.A. et al. 1994], отражая их конкурентные отношения за места связывания с белками. Изменения равновесия между фракциями аминотиолов в плазме происходят очень короткое время (за минуты) [Mansoor M.A. et al. 1993b].

Таблица 1.1 Фракции аминотиолов плазмы крови [Refsum H. et al. 1985, Andersson A.A. et al. 1992, Andersson A.A. et al. 1999, Kartusiak A.E. et al. 2001, Williams R.H. et al. 2001, Carru C. et al. 2004]

Тиол Концентрация (восст./своб./общ.), мкМ

Гомоцистеин 0,1-0,3 2-3 6,5-14

Цистеин 5-12 70-110 120-320

Глутатион 1,6-3,5 3,4-5,4 5,7-8

Цистеинилглицин 1,5-3,6 5,5-13 25-35

1.1.2 Биосинтез и пути метаболизма аминотиолов В клетках Гцис синтезируется из метионина в ходе реакций, называемой метиониновым циклом (рисунок 2.1), который замыкается регенерацией (реметилированием) метионина за счет использования 5-метилТГФ или бетаина (в печени), являющихся внешними донорами метильной группы. Образование SAM из метионина и АТФ катализируется

метионинаденозинтрансферазой (МАТ). Он как продукт ингибирует эту реакцию, что особенно значимо в эритроцитах. На промежуточной стадии синтеза SAM образуется трифосфат, гидролиз которого до ортофосфата и пирофосфата происходит также в реакционном центре МАТ. Стадия гидролиза трифосфата является скорость-лимитирующим процессом и, кроме того, МАТ может осуществлять его в отсутствии АТФ и метионина [Lu S.C. and Mato J.M. 2012]. NO является физиологическим ингибитором фосфатазной активности МАТ [del Pino M.M. et al. 2000] и тем самым регулирует содержание SAM в печени при её регенерации [Vazquez-Chantada M. et al. 2009]. Передача метильных групп с SAM на многочисленные субстраты катализируется метилтрансферазами (МТ), коих насчитывается у человека более 200 [Petrossian T.C. and Clarke S.G. 2011, Brosnan J.T. 2005]. SAM осуществляет метилирование ДНК, белков, аминокислот, углеводов, жиров, катехоламинов и др. соединений. Реакция передачи метильной группы на субстрат проходит по механизму ¿п2-замещения. В качестве нуклеофила могут выступать атомы углерода (С-метилирование цитозина ДНК), азота (N-метилирование глицина), кислорода (О-метилирование катехоламинов), серы (S-метилирование тиопуринов) [Lu S.C. and Mato J.M. 2012]. Как было отмечено выше, наибольшая активность МТ наблюдается в печени, а наиболее распространенная МТ гепатоцитов - глицин-Ы-метилтрансфераза [Stipanuk M.H. 2004]. Дефицит этого фермента вызывает гепатомегалию [Ansorena E. et al. 2002]. В результате метилтрансферазной реакции образуется SAH. Как ингибитор МТ он играет большую роль, т.к. его К имеет тот же порядок, что и Km SAM [Chiang P.K. et al. 1996]. Поэтому соотношение концентраций SAM/SAH, названное индексом метилирования [Hershfield M.S. et al. 1983], является важной характеристикой, которая во многих случаях отражает интенсивность процессов метилирования.

Утилизация SAH осуществляется SAH-гидролазой (аденозилгомоцистеиназой) EC 3.3.1.1. Реакция гидролиза SAH до аденозина и Гцис обратима и её равновесие сдвинуто в сторону SAH [Finkelstein J.D. 1990]. Поэтому для того, чтобы избегать накопления SAH и гипометилирования, клеткам необходимы пути быстрой утилизации Гцис и аденозина. Гцис может метаболизироваться по путям реметилирования (до метионина) или транссульфурации (в цистатионин), а аденозин под действием дезаминазы превращается в инозин [Mato J.M. et al. 1997, Wagner C. and Koury M.J. 2007]. Недостаточность SAH-гидролазы, обусловленная генетическими дефектами, приводит к накоплению SAH, SAM и метионина [Lu S.C. and Mato J.M. 2012].

Гцис далее может превращаться в метионин под действием метионинсинтазы (5-метилентетрагидрофолат-гомоцистеин метилтрансферазы, - EC 2.1.1.13), использующий производное В9 (5-метилентетрагидрофолат) в качестве субстрата и В12 (в форме

метилкобаламина) в качестве кофактора. Эта реакция является точкой сопряжения метаболизма фолата с реакциями метилирования. Надо отметить, что метилкобаламин у человека используется исключительно в данной реакции и для его восстановления редуктазой метионин синтазы (EC 1.16.1.8) используется NADPH и S-аденозилгомоцистеин. В печени и митохондриях (там импорт метилентетрагидрофолата затруднен) роль метионинсинтазы выполняет бетаин-гомоцистеин метилтрансфераза (EC 2.1.1.5) с использованием бетаина в качестве донора метильной группы.

Другой путь превращения Гцис (в цистеин) проходит по т.н. пути транссульфурации и включает необратимую реакцию образования цистатионина при участии цистатионин-ß-синтазы (EC 4.2.1.22) и B6 (пиридоксаль-5-фосфата) [Finkelstein J.D. 1990]. Цистатионин далее расщепляется y-цистиониназой (EC 4.4.1.1) на цистеин и а-кетобутарат [Frontiera M.S. et al. 1994; Finkelstein J.D. 1990]. Цистеин, в свою очередь расходуется на синтез белка, глутатиона, превращение в таурин, ацетил-CoA и проч. Для этого пути также необходим серин, одним из источников которого является реакция превращения бетаина в диметилглицин, катализируемая как описано выше бетаин-гомоцистеин метилтрансферазой. Диметилглицин затем может превращаться в саркозин (ферм. диметилглициноксидаза), а последний в глицин (ферм. саркозиноксидаза), при этом побочным продуктом является формальдегид. Глицин под действием серингидроксиметилтрансферазы, используя метилентетрагидрофолат, превращается в серин. Таким образом, метиониновый цикл печени способствует метаболизму гомоцистеина по пути транссульфурации, однако следует отметить, что вовлечение в него серина существенно увеличивает число факторов, влияющих на работу этого пути.

Км для цистатионин^-синтазы (U,ßC) и у-цистиониназы более 1 мМ Гцис, а для метионинсинтазы и бетаин-гомоцистеин метилтрансферазы менее 0,1 мМ Гцис [Finkelstein J.D. 1990]. Поэтому при низком содержании внутриклеточного Гцис преобладает синтез из него метионина, а при высоком содержании - образование цистеина. Активность этих ферментов обуславливает экспорт Гцис в зависимости от концентрации внутриклеточного метионина [Christensen B. and Ueland P.M. 1993]. Также SAM вносит вклад в регуляцию этих путей, а также и собственного содержания, ингибируя реметилирование (за счет действия на МТГФ-редуктазу) и активируя транссульфурирование (U,ßC) [Mato J.M. et al. 1997, Prudova A. et al. 2006]. Эта регуляторная роль SAM играет большое значение в развитии ГГц [Selhub J. et al. 1992].

Исследования на изолированных клетках показывают, что секреция Гцис отражает дисбаланс между его продукцией метаболизмом. При этом особенности метаболизма Гцис таковы, что его уровень натощак определяется активностью метионинсинтазы, а после приема пищи ЦßС [Ueland P.M. et al. 1993]. Поэтому дефицит фолата или B12, а не B6 (кофактора ЩС), оказывает

влияние на базовый уровень Гцис, но дает нормальный рост Гцис после метионинового теста, в отличии от генетических аномалий ЦРС [Ueland P.M. et al. 1993]. Также необходимо отметить, что ЦРС активируется SAM, в то время как метионинсинтаза и бетаин-гомоцистеин метилтрансфераза им ингибируются. При диете с высоким содержанием метионина происходит активация пути транссульфурации (за счет увеличения концентрации его ферментов) и снижение активности метионинсинтазы [Finkelstein J.D. 1990].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Иванов Александр Владимирович, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Акопян Г.Р., Назарько И.М., Андреев Е.В. Показатели обмена гомоцистеина как один из критериев сердечно-сосудистого риска у больных ишемической болезнью сердца. // Сердце и сосуды - 2014 - № 3(47) - с. 53-58.

Александрин В.В. Ауторегуляция мозгового кровотока в норме и в период постишемической гипоперфузии. // Патогенез. - 2012 - т.10 №1 - с. 27-30.

Александрин В.В., Лузянин Б.П., Иванов А.В., Кубатиев А.А. Влияние гипергомоцистеинемии на мозговой кровоток, по данным вейвлет-анализа. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2011 - № 2 - С. 13-18.

Александрова Л.А., Жлоба А.А., Блашко Э.Л., Чефу С.Г., Кузьменко Н.В., Цырлин В.А. Метаболизм аминотиолов и антиоксидантный статус крыс в условиях односторонней ишемии почки. // Профилактическая и клиническая Медицина. - 2010 - т.2(35) - с. 103-105.

Алисиевич С.В., Дубичев А.Г., Левина А.А., Назарова Г.А., Золотов Н.Н., Кржечковская В.В., Павлова Н.Н., Романова Е.П., Рудько И.А., Черкасова К.А., Кубатиев А.А. Стресс-индуцированная дисфункция тромбоцитов у крыс с фолат-зависимой гипергомоцистеинемией. // Общая реаниматология. - 2006. - т. 2 № 5-6. - с.61-65.

Баранова Е.И., Большакова О.О. Клиническое значение гомоцистеинемии (обзор литературы) // Артериальная гипертензия. - 2004. - т.10, №1. - с.12-15.

Болдырев А.А. Молекулярные механизмы токсичности гомоцистеина // Биохимия. -2009. - т. 74 № 6. - с. 725-736.

Верещагин Н.В., Пирадов М.А. Инсульт: состояние проблемы. // В сб.: Труды Всероссийского общества неврологов России "Неотложные состояния в неврологии", Орел, 2002, с.5-12.

Гмурман В.Е. Теория вероятностей и математическая статистика. Москва, "Высшая школа", 2001, с. 305-307.

Гусев Е. И., Мартынов М. Ю., Камчатнов П. Р. Ишемический инсульт. Современное состояние проблемы. // Доктор.ру - 2013 - т. 5 № 83 - с. 7-12

Дайнеко А.С., Симаненкова А.В., Просвирнина М.С. Исследование нейропротективных эффектов теанина в различных дозах и на различных сроках введения при фокальной ишемии головного мозга у крыс // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. - 2012. - т.11,№ 1(41). - С. 82-85

Дёрффель К. Статистика в аналитической химии. - М.: "Мир", 1994. - с.168 (а), с. 125 (б).

Дунаевская С. С., Подрезенко Е. С., Антюфриева Д. А., Никифорова А. А. Предикторы прогрессирующего течения облитерирующего атеросклероза сосудов нижних конечностей. // В мире научных открытий - 2015 - № 2 (62) - с. 95-107.

Дутов А.А, Никитин Д.А., Федотова А.А. Определение гомоцистеина и цистеина в плазме/сыворотке крови вэжх методом с уф детекцией и твердофазной экстракцией на полимерном сорбенте //Биомедицинская химия. - 2010. - т.56, №5. - с. 609-615.

Евтушенко С.К., Филимонов Д.А. Роль гомоцистеина в развитии ишемических инсультов у лиц молодого возраста. // Международный неврологический журнал - 2013 - 7 (61). Режим доступа: http://www.mif-ua.com/archive/article/37500

Жлоба А.А. Лабораторная диагностика при гипергомоцистеинемии // Клинико-лабораторный консилиум. - 2009. - №1. - 49-60.

Иванов А.В., Московцев А.А., Мартынова Е.А., Савина Г.Д., Лузянин Б.П., Кубатиев А.А. Общие аминотиолы плазмы крови крыс при внутрибрюшинном и подкожном введении гомоцистеина. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2013 - №.4 - с.41-45.

Кузьменко Н.В., Александрова Л.А., Чефу С.Г., Блашко Э.Л., Жлоба А.А., Цырлин В.А. Исследование общего гомоцистеина и основных аминотиолов в условиях экспериментальной ишемии почки крыс. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины - 2011- т.151№1 -с. 27-29.

Львова О.А., Гусев В.В., Ковтун О.П., Гаврилов И.В., Решетова А.Н., Степанова А.Э., Ворошилина Е.С. Детский ишемический инсульт: вклад полиморфизма генов фолатного цикла и гипергомоцистеинемии. // Сибирский медицинский журнал - 2013 - Т. 28. № 3 - с. 34-40.

Лянг О. В., Кочетов А. Г., Архипкин А. А., Новоженова Ю. В., Шамалов Н. А., Рамазанов Г. Р., Чуйко М.Р., Огурцов П. П., Скворцова В. И. Баланс маркеров регуляции сосудистого тонуса и фибриногена в прогнозе развития геморрагической трансформации и летального исхода в остром периоде ишемического инсульта. // Клиническая медицина - 2012 -т. 90 № 8 - с. 55-60.

Мельников И.О., Назимов И.В., Стукачева Е.А., Глубоков Ю.М. Определение содержания гомоцистеина и других низкомолекулярных аминотиолов в плазме крови // Журн. аналит. химии. - 2006 - т.61, №11 - С.1185-1191.

Мирошниченко И.И., Платова А.И., Сафарова Т.П., Яковлева О.Б. Количественное определение гомоцистеина посредством тандемной хроматомасс-спектрометрии с химической ионизацией // Биомедицинская химия. - 2014. - Т. 60 № 2. - с. 235-245.

Подзолкова Н. М., Скворцова М. Ю. Гипергомоцистеинемия: миф или скрытая угроза? // Доктор.ру - 2014 - № 1(89) - с. 7-14.

Полтавцева О.В., Нестеров Ю.И., Тепляков А.Т. Гомоцистеинемия у пациентов с артериальной гипертензией и цереброваскулярными осложнениями. // Сибирский медицинский журнал. - 2012 - т. 27 № 4 - с. 37-41.

Полушин А.Ю., Одинак М.М., Янишевский С.Н., Голохвастов С.Ю., Цыган Н.В. Гипергомоцистеинемия - предиктор тяжести инсульта на фоне обширности повреждения мозгового вещества // Вестник Российской Военно-Медицинской Академии. - 2013. - № 4 (44).

- с. 89-94.

Потемкин В.В., Кубатиев А. А, Абрамова Е. А, Томилова E.H., Гудукина Г.Н. Роль гомоцистеина в патогенезе сосудистых осложнений при сахарном диабете 2-го типа. // Проблемы эндокринологии . - 2007. - т. 53 №3. - с. 10-13.

Родионов Р.Н., Лентц С.Р. Современные представления о гипергомоцистеинемии как факторе риска сердечно-сосудистых заболеваний // Артериальная гипертензия. - 2008. - 14(1). -с. 110-115.

Роткина А.С., Романова Е.П., Московцев А.А., Кубатиев А.А. Динамика изменений АДФ и тромбин-индуцированной агрегационной активности тромбоцитов в присутствии избытка гомоцистеина in vitro. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 2012. - №4

- с. 80-87.

Скворцова В. И., Алексеева Г. С., Трифонова Н. Ю. Анализ медико-организационных мероприятий по профилактике инсультов и реабилитации постинсультных состояний на современном этапе. // Социальные аспекты здоровья населения - 2013 - т. 29 № 1 - с. 2.

Скворцова В.И., Стаховская Л.В., Бодыхов М.К., Кочетов А.Г., Салимов К.А., Алексеев М.А., Сун Чер И. Некоторые показатели системной гемодинамики в прогнозировании летального исхода у больных с инсультом в остром периоде. // Вестник Росздравнадзора - 2014

- №1 - с. 37-43.

Стаховская Л.В., Клочихина О.А., Богатырева М.Д., Коваленко В.В. Эпидемиология инсульта в России по результатам территориально-популяционного регистра (2009—2010). // Журнал неврологии и психиатрии - 2013 - т.5 - с. 4-10.

Тапильская Н. И., Гайдуков С. Н. Устранение дефицита фолатов - основная стратегия коррекции гомоцистеинзависимой эндотелиальной дисфункции. // Гинекология - 2013 - т. 15. № 3 - с. 70-74.

Торчинский Ю. М. Сульфгидрильные и дисульфндные группы белков. - М.: Наука, 1971. Устьянцева И.М., Агаджанян В.В., Хохлова О.И., Писарева И.А., Визило Т.Л. Метаболические и реологические нарушения в остром периоде ишемического инсульта // Общая реаниматология. - 2007. - Т. 3 № 5-6. - с. 129-133.

Хохлова О.И. Особенности течения ишемических инсультов у лиц молодого возраста в зависимости от уровня гомоцистеина // Политравма. - 2006. - № 2. - с. 19-21.

Чиныбаева Л.А. Гипергомоцистеинемия при острых нарушениях мозгового кровообращения // Клиническая медицина. - 2005. - Т. 83, № 9. - с. 25-26.

Шамалов Н.А., Губский Л.В., Рамазанов Г.Р., Анисимов К.В., Шетова И.М., Гапонова Н.И., Терещенко С.Н., Плавунов Н.Ф., Скворцова В.И. Динамика КТ-перфузионных показателей в острейшем периоде ишемического инсульта. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова - 2012 - т. 112 - с. 3-6.

Шмелева В.М., Папаян Л.П., Салтыкова Н.Б., Каргин В.Д., Капустин С.И., Блинов М.Н., Гуржий А.А., Смирнова О.А., Головина О.Г. Клинико-лабораторная диагностика и лечение тромбофилии, обусловленной гипергомоцистеинемией. Медицинская технология. - СПб.:«СПб МАПО», 2008.

Шмелева В.М., Смирнова О.А., Салтыкова Н.Б., Матвиенко О.Ю., Силина Н.Н., Гуржий А.А., Папаян Л.П. гипергомоцистеинемия - фактор риска сердечно-сосудистых заболеваний или маркер остроты процесса? // Тромбоз, гемостаз и реология. - 2010. - № 4. - c. 67-74.

Шмелева В.М., Капустин С.И., Блинов М.Н., Полякова А.П., Салтыкова Н.Б., Папаян Л.П. Роль гипергомоцистеинемии в развитии тромбоэмболических осложнений. // Медицина экстремальных ситуаций - 2012 - № 1(39) - с. 106-117.

Abbott N. J., Revest P. A. and Romero I. A. Astrocyteendothelial interaction: physiology and pathology. // Neuropathology and Applied Neurobiology - 1992- v.18, no. 5 - p. 424-433.

Algaidi S.A., Christie L.A., Jenkinson A.M., Whalley L., Riedel G. and Platt B. Long-term homocysteine exposure induces alterations in spatial learning, hippocampal signaling and synaptic plasticity. // Exp. Neurol. - 2005 - v.197 - p. 8-12

Amarnath K., Amarnath V., Amarnath K., Valentine H.L., Valentine W.M. A specific HPLC-UV method for the determination of cysteine and related aminothiols in biological samples. // Talanta. - 2003 - Vol. 60, №6 - P. 229-238.

Amores-Sanchez M., Medina M.A. Methods for the determination of plasma total homocysteine: a review. // Clin. Chem. Lab. Med. - 2000 - v.38 - p. 199-204.

Angeli V., Tacito A., Paolicchi A. A kinetic study of gamma-glutamyltransferase (GGT)-mediated S-nitrosoglutathione catabolism. // Archives of Biochemistry and Biophysics - 2009 - v. 481, no. 2 - p. 191-196.

Ansari R., Mahta A., Mallack E., Luo J. J. Hyperhomocysteinemia and Neurologic Disorders: a Review. // J. Clin. Neurol. - 2014 - v.10(4) - p.281-288.

Andersson A., Isaksson A., Brattstrom L., Hultberg B. Homocysteine and other thiols determined in plasma by HPLC and thiol-specific postcolumn derivatization. // Clin. Chem. - 1993 -

Vol. 39, №8 - p.1590-1597.

Andersson A., Lindgren A., Hultberg B. Effect of thiol oxidation and thiol export from erythrocytes on determination of redox status of homocysteine and other thiols in plasma from healthy subjects and patients with cerebral infarction. // Clin. Chem. - 1995 - v.41(3) - p. 361-366.

Ansari R., Mahta A., Mallack E., Luo J.J. Hyperhomocysteinemia and neurologic disorders: a review. // J. Clin. Neurol. - 2014 - v.10 n. 4 - p. 281-288.

Ansorena E., García-Trevijano E.R., Martínez-Chantar M.L., Huang Z.Z., Chen L., Mato J.M., Iraburu M., Lu S.C., Avila M.A. S-adenosylmethionine and methylthioadenosine are antiapoptotic in cultured rat hepatocytes but proapoptotic in human hepatoma cells. // Hepatology - 2002 - v.35(2) -p.274-280.

Apeland T., Kristensen O., Mansoor M.A. The aminothiol redox status in haemodialysis patients does not improve with folate therapy. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 2009 - v.69(2) - p.265-271.

Awata S., Nakayama K., Suzuki I., Sugahara K. Kodama H. Changes in cystathionine gamma-lyase in various regions of rat brain during development. // Biochem. Mol. Biol. Int. - 1995 - v. 35 -p. 1331-1338.

Balligand J.L. Beta3-adrenoreceptors in cardiovasular diseases: new roles for an "old" receptor. // Curr. Drug Deliv. - 2013 - v. 10 - p. 64-66.

Banecka-Majkutewicz Z., Sawula W., Kadziñski L., W^grzyn A. and Banecki B. Homocysteine, heat shock proteins, genistein and vitamins in ischemic stroke - pathogenic and therapeutic implications. // Acta Biochimica polonica - 2012 - v. 59(4) - p.495-499.

Banerjee R. and Zou C.G. Redox regulation and reaction mechanism of human cystathionine-beta-synthase: a PLP-dependent hemesensor protein. // Arch. Biochem. Biophys. - 2005 - v.433 - p. 144-156.

Bannai S. Exchange of cystine and glutamate across plasma membrane of human fibroblasts. // J. Biol. Chem. - 1986 - v.261 - p.2256-2263. (a)

Bannai S., Takada A., Kasuga H., Tateishi N. Induction of cystine transport activity in isolated rat hepatocytes by sulfobromophthalein and other electrophilic agents. // Hepatology - 1986 - v. 6 - p. 1361-1368. (b)

Baradaran A., Nasri H., Rafieian-Kopaei M. Oxidative stress and hypertension: Possibility of hypertension therapy with antioxidants. // J. Res. Med. Sci. - 2014 -v. 19(4) - p.358-367.

Baydas G., Ozer M., Yasar A., Tuzcu M. and Koz S.T. Melatonin improves learning and memory performances impaired by hyperhomocysteinemia in rats. // Brain Res. - 2005 - v.1046 -p.187-194.

Bea F., Hudson F. N., Neff-LaFord H. Homocysteine stimulates antioxidant response elementmediated expression of glutamate-cysteine ligase in mouse macrophages. // Atherosclerosis - 2009 - v. 203, no. 1 - p. 105-111.

Boselli C., Cozzi A., Rozza A., Favalli L., Govoni F., Govoni S. Acute cerebral focal ischaemia alters the adrenergic and NANC responses in the bisected rat vas deferens. // Br. J. Pharmacol. - 2002

- v.135 - p. 1723-1732.

Brattatrom L.E., Hardebo J.E., Hultberg B.L. Moderate homocysteinemia - a possible risk factor for arteriosclerotic cerebrovascular disease. // Stroke -1984 -v.15 - p. 1012-1016.

Brixius K., Bloch W., Pott C., Napp A., Krahwinkel A., Ziskoven C., Koriller M., Mehlhorn U., Hescheler J., Fleischmann B., Schwinger R.H. Mechanisms of beta 3-adrenoceptor-induced eNOS activation in right atrial and left ventricular human myocardium. // Br. J. Pharmacol. - 2004 - v.143 -p.1014-1022.

Brosnan J.T. Homocysteine and cardiovascular disease: interactions between nutrition, genetics and lifestyle. // J. Nutr. - 2005 - v.135(6) - p.1576-1579.

Broxson E.H., Stork L.C., Allen R.H., Stabler S.P., Kolhouse J.F. Changes in plasma methionine and total homo^cteine levels in patients receiving methotrexate infusions. // Cancer Res.

- 1989 - v.49 - p.5879-5883.

Butz L.W., du Vigneaud V. The formation of a homologue of cystine by the decompensation of methionine with sulphuric acid. // J. Biol. Chem. - 1932 - v. 99 - p. 135-142.

Cardillo C., Campia U., Kilcoyne C.M., Bryant M.B., Panza J.A. Improved endothelium-dependent vasodilatation after blockade of endothelin receptors in patients with essential hypertension. // Circulation - 2002 - v.105 - p. 452-456.

Carmel R., Jacobsen D.W. Homocysteine in health and disease. Cambridge University Press, England, 2001.

Carson N.A.J., Neil D.W. Metabolic abnormalities detected in a survey of mentally backward individuals in Northern Ireland. // Arch. Dis. Child - 1962 - v.37 - p. 505-513.

Carru C., Zinellu A., Pes G.M., Marongiu G., Tadolini B., Deiana L. Ultrarapid capillary electrophoresis method for the determination of reduced and oxidized gluthatione in red blood cells. // Electrophoresis - 2002 - v.23(11) - p. 1716-1721.

Carru C., Deiana L., Sotgia S., Pes G. M., Zinellu A. Plasma thiols redox status by laser-induced fluorescence capillary electrophoresis. // Electrophoresis - 2004 - v. 25 - p. 882-889.

Causse E., Siri N., Bellet H. Plasma homocysteine determined by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection. // Clin. Chem. - 1999 - v.45(3) - p.412-414.

Chadwick L.H., McCandless S.E., Silverman G.L., Schwartz S., Westaway D. and Nadeau J.H. Betaine-homocysteine methyltransferase-2: cDNA cloning, gene sequence, physical mapping, and expression of the human and mouse genes. // Genomics - 2000 - v.70 - p.66-73.

Chambers J.C., Ueland P.M., Wright M., Doré C.J., Refsum H., Kooner J.S. Investigation of relationship between reduced, oxidized, and protein-bound homocysteine and vascular endothelial function in healthy human subjects. // Circ. Res. - 2001 - v. 89(2) - p.187-192.

Chang C.-W. and Tseng W.-L. Gold Nanoparticle Extraction Followed by CapillaryElectrophoresis to Determine the Total, Free, and Protein-Bound Aminothiols in Plasma. // Anal. Chem. - 2010 - v.82 - p.2696-2702.

Chassaing C., Gonin J., Wilcox C.S., Wainer I.W. Determination of reduced and oxidized homocysteine and related thiols in plasma by thiol-specific pre-column derivatization and capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection. // J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl. -1999 - v. 735(2) - p. 219-227.

Chen C., Surowiec S.M., Morsy A.H., Ma M. Intraperitoneal infusion of homocysteine increases intimal hyperplasia in balloon-injured rat carotid arteries. // Atherosclerosis - 2002 - v. 160(1) - p. 103-114.

Chen C. A., Wang T. Y., Varadharaj S. S-glutathionylation uncouples eNOS and regulates its cellular and vascular function. // Nature - 2010 - v. 468, no. 7327 - p. 1115-1120.

Chen H., Fitzgerald R., Brown A.T., Quiershi I. Identification of a homocysteine receptor in the peripheral endothelium and its role in proliferation. // J. Vascular Surg. - 2005 - v. 41(5) - p. 853-860.

Chiang P.K., Gordon R.K., Tal J., Zeng G.C., Doctor B.P., Pardhasaradhi K., McCann P.P. S-Adenosylmethionine and methylation. // FASEB J. - 1996 - v. 10(4) - p. 471-480.

Christensen B., Ueland P.M. Methionine synthase inactivation by nitrous oxide during methionune loading of normal human fibroblasts. Homocysteine remethylation as determinant of enzyme inactivation and homocysteine export. // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1993 - v.267(3) - p. 298303.

Chwatko G., Bald E. Determination of different species of homocysteine in human plasma by high-performance liquid chromatography with ultraviolet detection. //J. Chromatogr. A - 2002 - v. 949(1-2) - p. 141-151.

Clavreul N., Adachi T., Pimental D. R., Ido Y., Schoneich C., Cohen R. A.. S-glutathiolation by peroxynitrite of p21ras at cysteine-118 mediates its direct activation and downstream signaling in endothelial cells. // FASEB Journal - 2006 - v. 20, no. 3 - p. 518-520. (a)

Clavreul N., Bachschmid M. M., Hou X. S-glutathiolation of p21ras by peroxynitrite mediates endothelial insulin resistance caused by oxidized low-density lipoprotein. // Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology - 2006 - v. 26, no. 11 - p. 2454-2461. (b)

Coucha M., Li W., Johnson M.H., Fagan S.C., Ergul A. Protein nitration impairs the myogenic tone of rat middle cerebral arteries in both ischemic and nonischemic hemispheres after ischemic stroke. // Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. - 2013 - v. 305 - p. 1726-1735.

Cuenod M., Do K.Q. and Streit P. Homocysteic acid as an endogenous excitatory amino acid. // Trends Pharmacol. Sci - 1990 - v.11 - p. 477-478.

D'Agostino L.A., Karen P.L., Lee R., Britz-McKibbin P. Comprehensive plasma thiol redox status determination for metabolomics. // J. Proteome Res. — 2011. — Vol.10, №2 — P. 592—603.

Damy T., Ratajczak P., Robidel E., Bendall J.K., Oliviero P., Boczkowski J., Ebrahimian T., Marotte F., Samuel J.L., Heymes C. Up-regulation of cardiac nitric oxide synthase 1-derived nitric oxide after myocardial infarction in senescent rats. // FASEB J. - 2003 - v. 17(13) - p. 1934-1936.

Dalle-Donne I., Rossi R., Giustarini D., Colombo R., Milzani A. Actin S-glutathionylation: evidence against a thioldisulphide exchange mechanism," Free Radical Biology and Medicine - 2003 -v. 35, no. 10 - p. 1185-1193.

Dalle-Donne I., Rossi R., Giustarini D., Colombo R., Milzani A. S-glutathionylation in protein redox regulation. // Free Radical Biology and Medicine - 2007 - v. 43, no. 6 - p. 883-898.

Dayal S., Bottiglieri T., Arning E., Maeda N., Malinow M.R., Sigmund C.D., Heistad D.D., Faraci F.M., Lentz S.R. Endothelial dysfunction and elevation of S-adenosylhomocysteine in cystathionine beta-synthase-deficient mice. // Circ. Res. - 2001 - v. 88 - p. 1203-1209.

del Pino M.M., Corrales F.J., Mato J.M. Hysteretic behavior of methionine adenosyltransferase III. Methionine switches between two conformations of the enzyme with different specific activity. // J. Biol. Chem. - 2000 - v.275(31) - p. 23476-23482.

Domagala T.B., Libura M., Gozdecka H., Krzanowski M., Szczeklik A. Familial hyperhomocysteinemia with early development of atherosclerosis. // Pol. Arch. Med. Wewn. - 1996 -v.96(4) - p. 354-358.

Drexler H., Kästner S., Strobel A., Studer R., Brodde O.E., Hasenfuss G. Expression, activity and functional significance of inducible nitric oxide synthase in the failing human heart. // J. Am. Coll. Cardiol. - 1998 - v.32(4) - p. 955-963.

Durand P., Lussier-Cacan S., Blache D. Acute methionine load-induced hyperhomocysteinemia enhances platelet aggregation, thromboxane biosynthesis, and macrophage-derived tissue factor activity in rats. // FASEB J. - 1997 - v. 11(13) - p. 1157-1168.

Eberhardt R.T. Endothelial dysfunction in a murine model of mild hyperhomocyst(e)inemia. // J. Clin. Invest. - 2000 - v. 106 - p. 483-491.

Egwim I.O.C., Gruber H.J. Spectrophotometry measurement of mercaptans with 4,4'-dithiopyridine. // Anal. Biochem. - 2001 - v. 288 - p.188-194.

Emorine L.J., Marullo S., Briend-Sutren M.M., Patey G., Tate K., Delavier-Klutchko C., Strosberg A.D. Molecular characterization of the human beta 3-adrenergic receptor. // Science - 1989 - v. 245 - p. 1118-1121.

Farrell Chr.-J. L., Kirsch S, H., Herrmann M. Red cell or serum folate: what to do in clinical practice? // Clinical Chemistry and Laboratory Medicine - 2013 - v. 51 n. 3 - p. 555-569.

Federici G., Pastore A., Massoud R., Motti C., Lo Russo A., Fucci G., Cortese C. Fully automated assay for total homocysteine, cysteine, cysteinylglycine, glutathione, cysteamine, and 2-mercaptopropionylglycine in plasma and urine. // Clin. Chem. - 1998 - v. 44 - p. 825-832.

Fermo I., Arcelloni C., De Vecchi E., Vigano S., Paroni R. High-performance liquid chromatographic method with fluorescence detection for the determination of total homocyst(e)ine in plasma. // J. Chromatogr. - 1992 - v. 593(1-2) - p. 171-176.

Ferretti G., Bacchetti T., Moroni C., Vignini A., Nanetti L., Curatola G. Effect of homocysteinylation of low density lipoproteins on lipid peroxidation of human endothelial cells. // J. Cell. Biochem. - 2004 - v.92 - p. 351-360.

Feletou M., Vanhoutte P.M. Endothelial dysfunction: a multifaceted disorder (The Wiggers Award Lecture). // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. - 2006 - v.291 - p. H985-H1002. (a)

Feletou M. and Vanhoutte P.M. EDHF: the complete story. Boca Raton, FL: Taylor & Francis CRC - 2006. (b)

Finkelstein J.D. Methionine metabolism in mammals. // J. Nutr. Biochem. - 1990 - v. 1 - p. 228-237.

Fiskeratrand T., Refsum H., Kvalheim G., Ueland P.M. Homocysteine and other thiols in plasma and urine: automated determination and sample stability. // Clin. Chem. - 1993 - v.39 - p. 263271.

Friedman A.N., Bostom A.G., Selhub J., Levey A.S., Rosenberg I.H. The kidney and homocysteine metabolism. // J. Am. Soc. Nephrol. - 2001 - v. 12 - p.2181-2189.

Frontiera M.S., Stabler S.P., Kothouse J.F., Allen R.H. Regulation of methionune metabolism: effect of nitrous oxide and excess dietary methionine. // J. Nutr. Biochem. - 1994 - V. 5 - p. 28-38.

Ganguly P. and Alam S.F. Role of homocysteine in the development of cardiovascular disease. // Nutrition Journal - 2015 - v. 14 n. 6 - p. 1-10. Режим доступа: http://www.nutritionj .com/content/14/1/6

Garcia-Beltran O., Mena N., Perez E.G., Cassels B.K., Nunez M.T. The development of a fluorescent turn-on sensor for cysteine, glutathione and other biothiols. A kinetic study. // Tetrahedron letters - 2011 - v.52 - p. 6606-6609.

Gerritaen T., Vaughn J.G., Weisman H.A. The identification of homocysteine in the urine. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1962 - v. 9 - p.493-496.

Gibson J., Carson N., Neill D. Pathological Findings in Homocystinuria. // J. Clin. Pathol. -1964 - v.17 - p.427-437.

Ghosh D. K., Chrestensen C., McMury J. L. and Salerno J. C. HSP90 Interaction with eNOS and nNOS. // FASEB - 2012 - v.26 - p. 756.25

Glowacki R., Borowczyk K., Bald E., Jakubowski H. On-column derivatization with OPA for fast determination of homocysteine in human urine. // Anal. Bioanal. Chem. - 2010 - v. 396 - p. 23632366.

Glushchenko A.V., Jacobsen D.W. Molecular targeting of proteins by L-homocysteine: mechanistic implications for vascular disease. // Antioxid. Redox Signal.- 2007 - v. 9(11) - p. 18831898.

González J., Valls N., Brito R., Rodrigo R. Essential hypertension and oxidative stress: New insights. World J. Cardiol. - 2014 - v.6(6) - p. 353-366.

Green R. M., Graham M., O'Donovan M. R., Chipman J. K., Hodges N. J. Subcellular compartmentalization of glutathione: correlations with parameters of oxidative stress related to genotoxicity. // Mutagenesis - 2006 - v. 21, no. 6 - p. 383-390.

Griffith T.M., Chaytor A.T., Bakker L.M. and Edwards D.H. 5-Methyltetrahydrofolate and tetrahydrobiopterin can modulate electrotonically mediated endothelium-dependent vascular relaxation. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 2005 - v. 102 - p. 7008-7013.

Griffith O.W. Biologic and pharmacologic regulation of mammalian glutathione synthesis. // Free Radical Biology and Medicine - 1999 - v. 27, no. 9-10 - p. 922-935.

Grogaard B., Schurer L., Gerdin B., Arfors K.E. Delayed hypoperfusion after incomplete forebrain ischemia in the rat. Role of polymorfonuclear leukocytes. // J. Cereb. Blood Flow Metab. -1989 - V. 9. - P. 500-505

Guerra-Shinohar E.M., Paiva A.A., Rondo P.H., Yamasaki K., Terzi C.A., D'Almeida V. Relationship between total homocysteine and folate levels in pregnant women and their newborn babies according to maternal serum levels of vitamin B12. // BJOG - 2002 - v.109 - p.784-791.

Gumustas K., Meta Guzeyli F.M., Atukeren P. The effects of vitamin E on lipid peroxidation, nitric oxide production and surepoxide dismutase expression in hyperglycemic rats with cerebral ischemia-reperfusion injury. // Turk. Neurosurg. - 2007 - v.17(2) - p. 78-82.

Han L., Wu Q., Wang C., Hao Y., Zhao J., Zhang L., Fan R., Liu Y., Li R., Chen Z., Zhang T., Chen S., Ma J., Liu S., Peng X., Duan S. Homocysteine, Ischemic Stroke, and Coronary Heart Disease in Hypertensive Patients: A Population-Based, Prospective Cohort Study.// Stroke - 2015 - v. 46(7) -p. 1777-1786.

Hanker G., Allen J.W., Mutkus L.A., Aschner, M. The uptake of cysteine in cultured primary astrocytes and neurons. // Brain Res. - 2001 - v.902 - p. 156-163

Hanneman S.K. Design, Analysis and Interpretation of Method-Comparison Studies. // AACN Adv. Crit. Care. - 2008 - v.19(2) - p. 223-234.

Hanson N.Q., Eckfeldt J.H., Schwichtenberg K., Aras O., Tsai M.Y. Interlaboratory variation of plasma total homocysteine measurements: results of three successive homocysteine proficiency testing surveys. // Clin. Chem. - 2002 -v. 48(9) - p. 1539-1545.

Hasan N., McColgan P., Bentley P., Edwards R. J., and Sharma P. Towards the identification of blood biomarkers for acute stroke in humans: a comprehensive systematic review. // Br. J. Clin. Pharmacol. - 2012 - v.74(2) - p. 230-240.

He Y., Li Y., Chen Y., Feng L., Nie Z. Homocysteine level and risk of different stroke types: A meta-analysis of prospective observational studies. // Nutr. Metab. Cardiovasc. Dis. - 2014 - p. S0939-4753(14)00190-2.

Heinecke J.W., Rosen H., Suzuki L.A., Chait A. The role of sulfur-containing amino acids in superoxide production and modification of low density lipoprotein by arterial smooth muscle cells. // J. Biol. Chem. - 1987 - v.262(21) - p. 10098-10103.

Herrmann W., Quast S., Ullrich M., Schultze, H., Bodis, M. and Geisel, J. Hyperhomocysteinemia in high-aged subjects: relation of B-vitamins, folic acid, renal function and the methylenetetrahydrofolate reductase mutation. // Atherosclerosis - 1999 - v.144 - p.91-101

Hershfield M.S., Kredich N.M., Koller C.A., Mitchell B.S., Kurtzberg J., Kinney T.R., Falletta J.M. S-adenosylhomocysteine catabolism and basis for acquired resistance during treatment of T-cell acute lymphoblastic leukemia with 2'-deoxycoformycin alone and in combination with 9-beta-D-arabinofuranosyladenine. // Cancer. Res. - 1983 -v. 43(7) - p. 3451-3458.

Ho P.I., Collins S.C., Dhitavat S., Ortiz D., Ashline D., Rogers E. and Shea T.B. Homocysteine potentiates betaamyloid neurotoxicity: role of oxidative stress. // J. Neurochem. - 2001 - v.78 - p.249-253.

Hoque M.E., Arnett S.D., Lunte C.E. On-column preconcentration of glutathione and glutathione disulfide using pH-mediated base stacking for the analysis of microdialysis samples by capillary electrophoresis. // J. Chrom. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. - 2005 - v. 827(1) - p. 5157.

Hortin G.L., Seam N., Hoehn G.T. Bound Homocysteine, Cysteine, and Cysteinylglycine Distribution between Albumin and Globulins. // Clinical Chemistry - 2006 - v. 52(12) - p. 22582264.

Hubner U., Schorr H., Eckert R., Geisel J., Herrmann W. Stability of plasma homocysteine, S-adenosylmethionine, and S-adenosylhomocysteine in EDTA, acidic citrate, and Primavette collection tubes. // Clin Chem. - 2007 - v.53(12) - p. 2217-2228.

Hutchinson D.S., Bengtsson T., Evans B.A., Summers R.J. Mouse beta 3a- and beta 3b-adrenoceptors expressed in Chinese hamster ovary cells display identical pharmacology but utilize distinct signalling pathways. // Br. J. Pharmacol. - 2002 - v.135 - p. 1903-1914.

Irizarry M.C., Gurol M.E., Raju S., az-Arrastia R., Locascio J.J., Tennis M., Hyman B.T., Growdon J.H., Greenberg S.M. and Bottiglieri, T. Association of homocysteine with plasma amyloid beta protein in aging and neurodegenerative disease. // Neurology - 2005 - v.65 - p. 1402-1408

Isobe C., Murata T., Sato C., Terayama, Y. Increase of total homocysteine concentration in cerebrospinal fluid in patients with Alzheimer's disease and Parkinson's disease. // Life Sci. - 2005 -v.77 - p.1836-1843.

Ivanov A.R., Nazimov I.V., Baratova L. Determination of biologically active low-molecular-mass thiols in human blood. I. Fast qualitative and quantitative, gradient and isocratic reversed-phase high-performance liquid chromatography with photometric and fluorescence detection. // J. Chromatogr. A. - 2000 - v.895(1-2) - p.157-166.

Jacobs W.A., Leburg M.W., Madai E.J. Stability of o-phthalaldehyde-derived isoindoles. // Analyt. Biochem. - 1986 - v. 156 - p. 334-340.

Jakubowski H. The pathophysiological hypothesis of homocysteine thiolactone-mediated vascular disease. // J. Physiol. Pharm. - 2008 - v. 59 (9) - p.155-167.

Jakubowski H. The molecular basis of homocysteine thiolactone-mediated vascular disease. // Clin. Chem. Lab. Med. - 2007 - v. 45(12) - p. 1704-1716.

Jakubowski H. Homocysteine thiolactone: metabolic origin and protein homocysteinylation in humans. // J. Nutrition - 2000 - v. 130 - p. 377-381.

Jakubowski H. Protein homocysteinylation: possible mechanism underlying pathological consequences of elevated homocysteine levels. // FASEB J. - 1999 - v. 13 - p. 2277-2283.

Jakubowski H. Pathophysiological Consequences of Homocysteine Excess. // J. Nutrition (suppl.) - 2006 - v.136 - p. 1741-1749S.

Jimenez-Altayo F., Planas A. M., Vila E. Targeting cerebrovascular myogenic dysfunction in Stroke. // Am. J. Phys. Heart Circ. Physiol. - 2014 - v. 306 - p. 1481-1482.

Jiang X., Yang F., Brailoiu E., Jakubowski H., Dun N.J., Schafer A.I., Yang X., Durante W., Wang H. Differential regulation of homocysteine transport in vascular endothelial and smooth muscle cells. // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. - 2007 - v. 27(9) - p. 1976-1983.

Jiang Z., Liang Q., Luo G., Hu P., Li P., Wang Y.. HPLC-electrospray tandem mass spectrometry for simultaneous quantitation of eight plasma aminothiols: Application to studies of diabetic nephropathy. // Talanta - 2009 - Vol. 77. N.4. - P. 1279-1284.

Kanaoka Y., Machida M., Ando K., Sekine T. Fluorescence and structure of proteins as measured by incorporation of fluorophore. IV. Synthesis and fluorescence characteristics of N-(p-(2-benzimidazolyl)phenyl) maleimide. // Biochim. Biophys. Acta. - 1970 - v.207(2) - p. 269-277.

Kang S.H., Wei W., Yeung E.S. On-column derivatization for the analysis of homocysteine and other thiols by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence detection. //J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl. - 2000 - 744(1) - p. 149-156.

Katrusiak A.E., Paterson P.G., Kamencic H. Pre-column derivatization high-performance liquid chromatographic method for determination of cysteine, cysteinyl-glycine, homocysteine and glutathione in plasma and cell extracts. // J. Chromatogr. B Biomed. Sci. Appl. - 2001 - v.758(2) - p. 207-212.

Kirsch S.H., Knapp J.P., Geisel J., Herrmann W., Obeid R. Simultaneous quantification of S-adenosyl methionine and S-adenosyl homocysteine in human plasma by stable-isotope dilution ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. // J. Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. - 2009 - v. 877 (30) - p.3865-3870.

Khan M., Sekhon B., Giri S., Jatana M., Gilg A.G., Ayasolla K., Elango C., Singh A.K., Singh I. Nitrosoglutathione reduces inflammation and protects brain against focal cerebral ischemia in a rat model of experimental stroke. // J. Cereb. Blood Flow Metab. - 2005 - v.25(2) - p. 177-192.

Khan M., Sakakima H., Dhammu T. S., Shunmugave A., Im Y.-B., Gilg A.G., Singh A. K., Singh I. S-Nitrosoglutathione reducesoxidative injury and promotes mechanisms of neurorepair following traumatic brain injury in rats. // Journal of Neuroinflammation - 2011 - v. 8 - p. 78-85.

Khan M., Im Y.-B., Shunmugavel A. Administration of S-nitrosoglutathione after traumatic brain injury protects the neurovascular unit and reduces secondary injury in a rat model of controlled cortical impact. // Journal of Neuroinflammation - 2009 - v. 6 - p. 32-41.

Klerk M., Verhoef P., Clarke R., Blom H.J., Kok F.J., Schouten E.G. MTHFR Studies Collaboration Group. MTHFR 677C^T polymorphism and risk of coronary heart disease: a metaanalysis. // JAMA - 2002 - v. 288 - p. 2023-2031.

Koizumi J. Experimental studies of ischemic brain edema. I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area // Jpn. J. Stroke. - 1986. - Vol. 8. - P. 1-8.

Komuro C., Ono K., Shibamoto Y. Rapid and simple method for quantitative determination of non-protein sulphydryls in mouse liver by reversed-phase high-performance liquid chromatography. // J. Chromatogr. - 1985 - v. 338(1) - p. 209-212.

Korokin M.V., Pokrovskiy M.V., Novikov O.O. A model of hyperhomocysteine-induced endothelial dysfunction in rats. // Bull. Exp. Biol. Med. - 2011 - v. 152(2) - p. 213-215.

Kovacs A., Moricz K., Albert M., Benedek A., Harsing Jr.L.G., Szenasi G. Decreased vasoconstrictor responses in remote cerebral arteries after focal brain ischemia and reperfusion in the rat, in vitro. // European Journal of Pharmacology - 2010 - v. 644 i. 1-3 - p. 154-159.

Kranich O., Dringen R., Sandberg M., Hamprecht, B. Utilization of cysteine and cysteine precursors for the synthesis of glutathione in astroglial cultures: preference for cystine. // Glia - 1998 -v. 22 - p.11-18.

Krum H., Viskoper R.J., Lacourciere Y., Budde M., Charlon V. The effects of endothelin receptor antagonist, bosentan, on blood pressure in patients with essential hypertension. Bosentan Hypertension Investigators. // N. Engl. J. Med. - 1998 - v.338 - p. 784-790.

Kubalczyk P., Bald E. Transient pseudo-isotachophoretic stacking in analysis of plasma for homocysteine by capillary zone electrophoresis. // Anal. Bioanal. Chem. - 2006 - Vol. 384, № 5 - p. 1181-1185.

Kusama N., Kajiguri J., Yamamoto T., Watanabe Y., Suzuki Y., Katsuya H., Itoh T. Reduced hyperpolarization in endothelial cells of rabbit aortic valve following chronic nitroglycerine administration. // Br. J. Pharmacol. - 2005 - v.146 - p. 487-497.

Kusmierek K., Chwatkob G., R. Glowackib, P. Kubalczykb, E. Bald. Ultraviolet derivatization of low-molecular-mass thiols for high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis analysis. // Journal of Chromatography B - 2011 - v. 879 - p. 1290-1307.

Kutlan D., Molnal-Perl I. Characteristics and stability of the OPA/3-mercaptopropionic acid and OPA/N-acetyl-L-cysteine derivatives of aminoacids. // Chromatogr. Suppl. - 2001 - v. 53 - p. 188-198.

Langston J.W., Li W., Harrison L., Aw T. Y. Activation of promoter activity of the catalytic subunit of y- glutamylcysteine ligase (GCL) in brain endothelial cells by insulin requires antioxidant response element 4 and altered glycemic status: implication for GCL expression and GSH Synthesis. // Free Radical Biology and Medicine - 2011- v. 51, no. 9 - p. 1749-1757.

Lassegue B., Griendling K.K. Reactive oxygen species in hypertension. // Am. J. Hypertens. -2004 - v.17 - p. 852-860.

Laursen J.B., Rajagopalan S., Galis Z., Tarpey M., Freeman B.A., Harrison D.G. Role of superoxide in angiotensin II-induced but not catecholamine-induced hypertension. // Circulation - 1997 - v.95 - p. 588-595.

Lee M. and Choy J. C. Positive Feedback Regulation of Human Inducible Nitric-oxide Synthase Expression by Ras Protein S-Nitrosylation. // JBC - 2013 - v. 288 n. 22 - p. 15677-15686.

Lenti L., Bereczki D., Brainin M., Titianova E., Morovic S., Demarin V., Kalvach P., Skoloudik D., Kobayashi A., Czlonkowska A., Muresanu D.F., Shekhovtsova K., Skvortsova V.I., Sternic N., Beslac Bumbasirevic L., Svigelj V., Turcani P., Csiba L. Stroke care in central eastern

europe: current problems and call for action. // International journal of stroke - 2013 - v. 8 n. 5 - p. 365-371

Lentz S.R., Piegors D.J., Fernández J.A., Erger R.A., Arning E., Malinow M.R. Effects of hyperhomocysteinemia on protein C activation and activity. // Blood -2002 - v.100 - p. 2108-2112.

Lentz S.R., Haynes W.G. Homocysteine: is it a clinically important cardiovascular risk factor? // Cleveland Clin. J. of Med. - 2004 - v. 71(9) - p. 729-734.

Li S., Jia J., Liu G. Improved and simplified LC-ESI-MS/MS method for homocysteine determination in human plasma: application to the study of cardiovascular diseases. // J. Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. - 2008 - v.870(1) - p. 63-67.

Li W., Busu C., Circu M.L., Aw T.Y. Glutathione in CerebralMicrovascular Endothelial Biology and Pathobiology: Implications for Brain Homeostasis. // International Journal of Cell Biology - 2012 - v. 2012 - p. 1-14.

Liggett S.B., Freedman N.J., S D.A., Lefkowitz R.J. Structural basis for receptor subtype-specific regulation revealed by a chimeric beta 3/beta 2-adrenergic receptor. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 1993 - v. 90 - p. 3665-3669.

Lin Ch.-H., Kaneta T. On-line sample concentration techniques in capillary electrophoresis: velocity gradient techniques and sample concentration techniques for biomolecules. // Electrophoresis. - 2004 - v. 25, №23-24 - p. 4058-4073.

Lipton S.A., Kim W.K., Choi Y.B., Kumar S., D'Emilia D.M., Rayudu P.V., Arnelle D R. and Stamler, J.S. Neurotoxicity associated with dual actions of homocysteine at the N-methyl-D-aspartate receptor. // Proc. Natl. Acad. Sci USA - 1997 - v. 94 - p. 5923-5928.

Lluis J. M., Morales A., Blasco C. Critical role of mitochondrial glutathione in the survival of hepatocytes during hypoxia. // Journal of Biological Chemistry - 2005 - v. 280, no. 5 - p. 3224-3232.

Lochman P., Adam T., Friedecky D., Hlídková E., Skopková Z. High-throughput capillary electrophoretic method for determination of total aminothiols in plasma and urine. // Electrophoresis -2003 - v.24(7-8) - p. 1200-1207.

Lock J. T., Sinkins W. G., Schilling W. P.. Effect of protein S-glutathionylation on Ca2+ homeostasis in cultured aortic endothelial cells. // American Journal of Physiology - 2011 - v. 300, no. 2 - p. 493-506.

Loscalzo J. Homocysteine-mediated thrombosis and angiostasis in vascular pathobiology. // J. Clin. Invest. - 2009 - v. 119 - p. 3203-3205.

Lu S.C. Regulation of glutathione synthesis. // Molecular Aspects of Medicine - 2009 - v. 30, no. 1-2 - p. 42-59.

Lu S.C. Regulation of hepatic glutathione synthesis: current concepts and controversies. // FASEB J. - 1999 - v. 13(10) - p. 1169-1183.

Lu S.C., Mato J.M. S-adenosylmethionine in liver health, injury, and cancer. // Physiol Rev. -2012 - v. 92(4) - p. 1515-1542.

Lushchak V.I. Glutatione gomeostasis and functions: potencial targets for medical interventions. // Journal of Amino Acids - 2012 - v. 2012 - p. 1-26.

Majors A.K., Sengupta S., Willard B., Kinter M.T., Pyeritz R.E., Jacobsen D.W. Homocysteine Binds to Human Plasma Fibronectin and Inhibits Its InteractionWith Fibrin. // Arterioscler Thromb. Vasc. Biol. - 2002 - v. 22 - p. 1354-1359.

Magnusson M.K., Mosher D.F. Fibronectin: structure, assembly, and cardiovascular implications. // Arterioscler Thromb. Vasc. Biol. - 1998 - v. 18 - p. 1363-1370.

Malinow M R., Kang S.S., Taylor L.M., Wong P.W.K., Inahara T., Mukeijee D. Prevalence of hyperhomocyst(e)inemia in patients with peripheral arterial occlusive disease. // Circ. Res. - 1989 -v.79 - p. 1180-1186.

Mansoor M.A., Guttormsen A.B., Fiskerstrand T., Refsum H., Ueland P.M., Svardal A.M. Redox status and protein binding of plasma aminothiols during the transient hyperhomocysteinemia that follows homocysteine administration. // Clin. Chem. - 1993 - v. 39(6) - p. 980-985. (a)

Mansoor M.A., Ueland P.M., Aarsland A., Svardal A.M. Redox status and protein binding of plasma homocysteine and other aminothiols in patients with homocystinuria. // Metabolism. - 1993 -v.42(11) - p.1481-1485. (b)

Mansoor M.A., Svardal A.M., Schneede J., Ueland P.M. Dynamic relation between reduced, oxidized, and protein-bound homocysteine and other thiol components in plasma during methionine loading in healthy men. // Clin. Chem. - 1992 - v.38(7) - p.1316-21.

Mansoor M.A., Ueland P.M., Svardal A.M. Redox status and protein binding of plasma homocysteine and other aminothiols in patients with hyperhomocysteinemia due to cobalamin deficiency. // Am. J. Clin. Nutr. - 1994 - v. 59 - p. 631-635.

Maron B., Loscalzo J. The treatment of hyperhomocysteinemia. // Annu. Rev. Med. - 2009 - v. 60 - p. 39-54.

Martinez-Revelles S., Jimenez-Altayo F., Caracuel L.,Perez-Asensio F. J., Planas A. M., and Vila E. Endothelial Dysfunction in Rat Mesenteric Resistance Artery after Transient Middle Cerebral Artery Occlusion. // The journal of pharmacology and experimental therapeutics - 2008 - v. 325 - p. 363-369.

Mato J.M., Alvarez L., Ortiz P., Pajares M.A. S-adenosylmethionine synthesis: molecular mechanisms and clinical implications. // Pharmacol Ther. - 1997 - 73(3) - p. 265-280.

McBride M.W., Brosnan M.J., Mathers J., McLellan L.I., Miller W.H., Graham D., Hanlon N., Hamilton C.A., Polke J.M., Lee W.K., Dominiczak A.F. Reduction of Gstm 1 expression in the stroke-

prone spontaneously hypertensive rat contributes to increased oxidative stress. // Hypertension - 2005

- v. 45 - p. 786-792.

McCully K.S. Chemical pathology of homocysteine. IV. Excitotoxicity, oxidative stress, endothelial dysfunction, and inflammation. //Ann. Clin. Lab. Sci. - 2009 - Vol. 39, №3 - p. 219-232.

McCully K.S. Chemical pathology of homocysteine. III. Cellular function and aging. // Ann. Clin. Lab. Sci. - 1994 - v.24(2) - p. 134-152. (a)

McCully K.S. Chemical pathology of homocysteine. II. Carcinogenesis and homocysteine thiolactone metabolism. // Ann. Clin. Lab. Sci. - 1994 - v.24(1) - p. 27-59. (b)

McCully K.S., Wilson R.B. Homocysteine theory of arteriosclerosis. // Atherosclerosis - 1975

- v. 22 - p. 215-227.

McKeever M.P., Weir D.G., Molloy A., Scott J.M. Betaine-homocysteine methyltransferase: organ distribution in man, pig and rat and subcellular distribution in the rat. // Clin. Sci. - 1991 -v.81(4) - p.551-556.

Meister A. and Anderson M. E. Glutathione. // Annual Review of Biochemistry. - 1983 - v. 52

- p. 711-760.

Melnikov I.O., Nazimov I. V., Stukacheva E. A., and Glubokov Yu. M. Determination of Homocysteine and Other Low-Molecular-Weight Amino Thiols in Blood Plasma. // Journal of Analytical Chemistry - 2006 - Vol. 61, No. 11 - p. 1093-1099.

Miller J.W. Homocysteine and Alzheimer's disease. // Nutr. Rev. - 1999 - v. 57(4) - p. 126129.

Moens A.L., Yang R., Watts V.L., Barouch L.A. Beta 3-adrenoreceptor Regulation of Nitric Oxide in the Cardiovascular System. // J. Mol. Cell. Cardiol. - 2010 - v. 48(6) - p.1088-1095.

Moinova H.R. and Mulcahy R.T. Up-regulation of the human y-glutamylcysteine synthetase regulatory subunit gene involves binding of Nrf-2 to an electrophile responsive element. // Biochemical and Biophysical Research Communications - 1999 - v. 261, no. 3 - p. 661-668.

Monsen A.L.B. and P. M. Ueland. Homocysteine and methylmalonic acid in diagnosis and risk assessment from infancy to adolescence. // Am. J. Clin. Nutr. - 2003 - v. 78 - p. 7-21. Mosher D.F. Fibronectin. New York, NY: Academic Press; 1989.

Mudd S.H., Skovby F., Levy H.L. The natural history of homocystinuria due to cystathionine beta-synthase deficiency. // Am. J. Hum. Genet. 1985 v. 37 - p. 1-31.

Mudd S.H., Finkelstein J.D., Refsum H. Homocysteine and its disulphide derivatives. A suggested consensus terminology. // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. - 2000 - v.20 - p. 1704-1706.

Munday R. Toxicity of thiols and disulfides: involvement of free-radical species. // Free Rad. Biol. Med. - 1989 - v.7 - p.659-673.

Munzel T., Daiber A., Ullrich V., Mulsch A. Vascular consequences of endothelial nitric oxide synthase uncoupling for the activity and expression of the soluble guanylyl cyclase and the cGMP-dependent protein kinase. // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. - 2005 - v. 25 - p. 1551-1557.

Nabha L., Garber J.C., Buller C.L., Charpie JR. Vascular oxidative stress precedes high blood pressure in spontaneously hypertensive rats. // Clin. Exp. Hypertens. - 2005 - v.27 - p.71-82.

Nahmias C., Blin N., Elalouf J.M., Mattei M.G., Strosberg A.D., Emorine L.J. Molecular characterization of the mouse beta 3-adrenergic receptor: relationship with the atypical receptor of adipocytes. // EMBO J. - 1991 - v.10 - p. 3721-3727.

Nakashima K., Umekawa C., Nakatsuji S., Akiyama S., Givens R.S. High-performance liquid chromatography/chemiluminescence determination of biological thiols with N-[4-(6-dimethylamino-2-benzofuranyl)phenyl]maleimide. // Biomed. Chromatogr. - 1989 - v. 3(1) - p.39-42.

Nantel F., Bonin H., Emorine L.J., Zilberfarb V., Strosberg A.D., Bouvier M., Marullo S. The human beta 3-adrenergic receptor is resistant to short term agonist-promoted desensitization. // Mol. Pharmacol. - 1993 - v. 43 - p. 548-555.

Nekrassova O., White P.C., Threlfell S., Hignett G., Wain A.J., Lawrence N.S., Davis J., Compton R.G. An electrochemical adaptation of Ellman's test. // Analyst. - 2002 - v. 127(6) - p. 797802.

Newton L.A.A., Sandhu K., Livingstone C., Leslie R., Davis J. Clinical diagnostics for homocysteine: a rogue amino acid? // Expert Review of Molecular Diagnostics - 2010 - Vol. 10, No. 4

- p. 489-500.

Obeid R. and Herrmann W. Mechanisms of homocysteine neurotoxicity in neurodegenerative diseases with special reference to dementia. // FEBS Lett. - 2006 - v. 580(13) - p.2994-3005.

Obersby D., Chappell D.C., Dunnett A., Tsiami A.A. Plasma total homocysteine status of vegetarians compared with omnivores: a systematic review and meta-analysis. // Br. J. Nutr. - 2013 -v.109 n.5 - p. 785-794.

Okouchi M., Okayama N., Alexander J. S., Aw T. Y. NRF2-dependent glutamate-L-cysteine ligase catalytic subunit expression mediates insulin protection against hyperglycemia- induced brain endothelial cell apoptosis. // Current Neurovascular Research - 2006 - v. 3, no. 4 - p. 249-261.

Pan S. and Berk B. C. Glutathiolation regulates tumor necrosis factor-a-induced caspase-3 cleavage and apoptosis: key role for glutaredoxin in the death pathway. // Circulation Research - 2007

- v. 100, no. 2 - p. 213-219.

Park E. M., Choi J. H., Park J. S., Han M. Y., Park Y. M. Measurement of glutathione oxidation and 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine accumulation in the gerbil hippocampus following global ischemia. // Brain Research Protocols - 2000 - v. 6, no. 1-2 - p. 25-32.

Petras M., Tatarkova Z., Kovalska M., Mokra D., Dobrota D., Lehotsky J., Drgova A. Hyperhomocysteinemia as a risk factor for the neuronal system disorders. // J. Physiol. Pharmacol. - 2014 - v.65(1) - p.15-23.

Petrossian T.C., Clarke S.G. Uncovering the human methyltransferasome. // Mol. Cell. Proteomics. - 2011 - v. 10(1) - p. M110.000976

Peng H., Chen W., Cheng Y., Hakuma L., Strongin R., Wang B. Thiol rective probes and chemosensors. // Sensors (Basel) - 2012 - v. 12(11) - p. 15907-46.

Pfeiffer C.M., Huff D.L., Smith S.J., Miller D.T., Gunter E.W. Comparison of plasma total homocysteine measurements in 14 laboratories: an international study. // Clin. Chem. - 1999 - v. 45(8 Pt 1) - p. 1261-1268.

Prudova A., Bauman Z., Braun A., Vitvitsky V., Lu S.C., Banerjee R. S-adenosylmethionine stabilizes cystathionine beta-synthase and modulates redox capacity. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA -2006 - v.103(17) - p. 6489-6494.

Puri R.N., Roskoski R.J. Reaction of low molecular weight aminothiols with o-phthaldialdehyde. // Analyt. Biochem. - 1988 - v. 173 - p. 26-32.

Pushpakumar S., Kundu S., Sen U. Endothelial dysfunction: the link between homocysteine and hydrogen sulfide. // Curr Med Chem. 2014 - v. 21 n. 32 - p. 3662-3672.

Qureshi I., Chen H., Brown A.T., Fitzgerald R., Zhang X., Breckenridge J., Kazi R., Crocker A.J., Stuhlinger M.C., Lin K., Cooke J.P., Eidt J.F., Moursi M.M. Homocysteine-induced vascular dysregulation is mediated by the NMDA receptor. // Vasc. Med. - 2005 - v. 10(3) - p. 215-223.

Ohnesorge J., Neususs C., Watzig H. Quantitation in capillary electrophoresis-mass spectrometry. // Electrophoresis - 2005 - v. 26(21) - p. 3973-3987.

Ragone R. Homocystine solubility and vascular disease. // FASEB J. - 2002 - v. 16(3) - p. 401-404.

Rammouz G., Lacroix M., Garrigues J.C. The use of naphthalene-2,3-dicarboxaldehyde for the analysis of primary amines using HPLC and capillary electrophoresis. // Biomed. Chromatogr. - 2007 - v. 21 - p. 1223-1239.

Rasmussen K., Moller J. Total homocysteine measurement in clinical practice. // Ann. Clin. Biochem. - 2000 - v. 37 ( Pt 5) - p. 627-648.

Ravaglia G., Forti P., Maioli F., Martelli M., Servadei L., Brunetti N., Porcellini E. and Licastro, F. Homocysteine and folate as risk factors for dementia and Alzheimer disease.// Am. J. Clin Nutr. - 2005 - v.82 - p.636-643;

Regland B., Abrahamsson L., Blennow K., Grenfeldt B., Gottfries C.G. CSF-methionine is elevated in psychotic patients. // J. Neural. Transm. - 2004 - v.111 - p. 631-640;

Reis E.A., Zugno A.I., Franzon R., Tagliari B., Matte C., Lammers M.L., Netto C.A. and Wyse, A.T. Pretreatment with vitamins E and C prevent the impairment of memory caused by homocysteine administration in rats. // Metab. Brain Dis. - 2002 - v.17 - p. 211-217

Refsum H., Smith A.D., Ueland P.M., Nexo E., Clarke R., McPartlin J., Johnston C., Engbaek F., Schneede J., McPartlin C., Scott J.M. Facts and recommendations about total homocysteine determinations: an expert opinion. // Clin. Chem. - 2004 - v. 50(1) - p. 3-32.

Refsum H., Wesenberg F., Ueland P.M. Plasma homo^cteine in children with acute lymphoblastic leukemia. Changes during a chemotherapeutic regimen including methotrexate. // Cancer Res. - 1991 - v. 51 - p. 828-835.

Refsum H., Ueland P.M., Svardal A.M. Fully automated fluorescence assay for determining total homocysteine in plasma. // Clin. Chem - 1989 - v. 35(9) - p. 1921-1927.

Refsum H., Helland S., Ueland P.M. Radioenzymic determination of homocysteine in plasma and urine. // Clin. Chem. - 1985 - v. 31(4) - p. 624-628.

Riddles P.W., Blakeley R.L., Zerner B. Ellman's Reagent: 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic Acid) a Reexamination. // Anal. Biochem - 1979 - v. 94 - p. 75-81.

Robin S., Courderot-Masuyer C., Nicod L. Opposite effect of methionine-supplemented diet, a model of hyperhomocysteinemia, on plasma and liver antioxidant status in normotensive and spontaneously hypertensive rats. // J. Nutr. Biochem. - 2004 - v. 15(2) - p. 80-89.

Russell J., Rabenstein D. L. Speciation and quantitation of underivatized and Ellman's derivatized biological thiols and disulfides by capillary electrophoresis. // Anal. Biochem. - 1996 -Vol. 242, № 1 - p. 136-144.

Sai X., Kawamura Y., Kokame K., Yamaguchi H., Shiraishi H., Suzuki R., Suzuki T., Kawaichi M., Miyata T., Kitamura T., De S.B., Yanagisawa K. and Komano H. Endoplasmic reticulum stress-inducible protein, Herp, enhances presenilin-mediated generation of amyloid betaprotein. // J. Biol. Chem. - 2002 - v.277 - p.12915-12920.

Santilli F., Davi G., Patrono C. Homocysteine, methylenetetrahydrofolate reductase, folate status and atherothrombosis: A mechanistic and clinical perspective. // Vascul. Pharmacol. - 2015 - in press. Режим доступа: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1537189115001408

Schiffrin E.L. Vascular endothelin in hypertension. // Vascul. Pharmacol. - 2005 - v.43 - p. 1929.

Seiwert B. and Karst U. Simultaneous LC/MS/MS Determination of Thiols and Disulfides in Urine Samples Based on Differential Labeling with Ferrocene-Based Maleimides. // Anal. Chem. -2007 - v. 79 - p. 7131-7138.

Selhub J., Miller J.W. The pathogenesis of homocysteinemia: interruption of the coordinate regulation by S-adenosylmethionine of the remethylation and transsulfuration of homocysteine. // Am. J. Clin. Nutr. - 1992 - v. 55(1) - p. 131-138.

Selhub J., Jacques P.F., Wilson P.W., Rush D., Rosenberg I.H. Vitamin status and intake as primary determinants of homocysteinemia in an elderly population. // JAMA - 1993 - v. 270 - p. 2693-2698.

Selhub J., Jacques P.F., Bostom A.G., D'Agostino R.B., Wilson P.W., Belanger A. J., O'Leary D.H., Wolf P.A., Schaefer E.J., Rosenberg I.H. Association between plasma homocysteine concentrations and extracranial carotid-artery stenosis. // N. Engl. J. Med. - 1995 - v. 332(5) - p.286-291.

Sen U., Mishra P. K., Tyagi N., Tyagi S.C.. Homocysteine to Hydrogen Sulfide or Hypertension. // Cell Biochem. Biophys. - 2010 - v. 57(2-3) - p. 49-58.

Sengupta S., Chen H., Togawa T., DiBello P. M., Majors A. K., Budy B., Ketterer M. E. and D. W. Jacobsen. Albumin Thiolate Anion Is an Intermediate in the Formation of Albumin-S-S-Homocysteine. // J.B.C. - 2001 - v. 276, No. 32 - p. 30111-30117. (a)

Sengupta S., Wehbe C., Majors A. K., Ketterer M. E., DiBello P. M., and D.W. Jacobsen. Relative Roles of Albumin and Ceruloplasmin in the Formation of Homocystine, Homocysteine-Cysteine-mixed Disulfide, and Cystine in Circulation. // JBC - 2001 - v. 276, No. 50 - p. 4689646904. (b)

Sharp C.D., Hines I., Houghton J., Warren A., Jackson T.H., Jawahar A., Nanda A., Elrod J.W., Long A., Chi A., Minagar A., Alexander J.S. Glutamate causes a loss in human cerebral endothelial barrier integrity through activation of NMDA receptor. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. - 2003 -v.285(6) - p. H2592-2598.

Sharp C.D., Houghton J., Elrod J.W., Warren A., Jackson T.H. 4th, Jawahar A., Nanda A., Minagar A,. Alexander J.S. N-methyl-D-aspartate receptor activation in human cerebral endothelium promotes intracellular oxidant stress. // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. - 2005 - v. 288(4) - p. H1893-1899.

Shen C.-C., Tseng W.-L., Hsie M.-M. Selective enrichment of aminothiols using polysorbate 20-capped gold nanoparticles followed by capillary electrophoresis with laser-induced fluorescence. // Journal of Chromatography A - 2009 - v. 1216 - p. 288-293.

Shi Q., Savage J.E., Hufeisen S.J., Rauser L., Grajkowska E., Ernsberger P., Wroblewski J.T., Nadeau J.H. and Roth B.L. L-homocysteine sulfinic acid and other acidic homocysteine derivatives are potent and selective metabotropic glutamate receptor agonists. // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2003 - v. 305 - p.131-142

Shibuya N., Mikami Y., Kimura Y., Nagahara N., Kimura H. Vascular endothelium expresses 3-mercaptopyruvate sulfurtransferase and produces hydrogen sulfide. // Journal of Biochemistry -2009 - v. 146 - p. 623-626.

Shimokawa H. and Matoba T. Hydrogen peroxide as an endotheliumderived hyperpolarizing factor. // Pharmacol. Res. - 2004 - v. 49 - p. 543-549.

Sibrian-Vazquez M., Escobedo J.O., Lim S., Samoei G.K., Strongin R.M. Homocystamides promote free-radical and oxidative damage to proteins. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA - 2010 -v.107(2) - p.551-554.

Siesjo B.K., Bengtsson F. Calcium fluxes, calcium antagonists, and calcium-related pathology in brain ischemia, hypoglycemia, and spreading depression: a unifying hypothesis. // J. Cereb. Blood Flow Metab. - 1989 - v.9(2) - p.127-140.

Smolin L.A., Sneider J.A. Measurement of total plasma cystsamine using high-performance liquid chromatography with electrochemical detection. // Anal. Biochem. - 1988 - v.168 - p. 374.

Soeder K.J., S S., Cao W., Della Rocca G.J., Daniel K.W., Luttrell L.M., Collins S. The beta3-adrenergic receptor activates mitogen-activated protein kinase in adipocytes through a Gi-dependent mechanism. / JBC - 1999 - v.274 - p. 12017-12022.

Sprince H., Parker C.M., Josephs J.A.Jr. Homocysteine-induced convulsions in the rat: protection by homoserine, serine, betaine, glycine and glucose. // Agents Actions. - 1969 - v.1(1) -p.9-13.

Stabler S.P., Lundenbaum J., Savage D.G., Allen R.H. Elevation of serum cystathionine levels in patients with cobalamun and folate deficiency. // Blood 1993 - v.81 - p. 3403-3413.

Stabler S.P., Marcell P.D., Podell E.R., Allen R.H. Quantitation of total homocysteine, total cysteine, and methionine in normal serum and urine using capillary gas chromatography-mass spectrometry. // Anal. Biochem. - 1987 - v. 162 - p. 185-196.

Stabler S.P. and Allen R.H. Quantification of Serum and Urinary S-Adenosylmethionine and S-Adenosylhomocysteine by Stable-Isotope- Dilution Liquid Chromatography-Mass Spectrometry. Clinical Chemistry 2004, 50:2. 365-372

Stamler J.S., Osborne J.A., Jaraki O., Rabbani L.E., Mullins M., Singel D., Loscalzo J. Adverse vascular effects of homocysteine are modulated by endothelium-derived relaxing factor and related oxides of nitrogen. // J. Clin. Invest. - 1993 - v. 91(1) - p. 308-318.

Stamler J.S., Slivka A. Biological chemistry of thiols in the vasculature and in vascular-related disease. // Nutr. Rev. - 1996 - v. 54(1 Pt 1) - p. 1-30.

Starkebaum G., Harlan J.M. Endothelial cell injury due to copper-catalyzed hydrogen peroxide generation from homocysteine. // J. Clin. Invest. - 1986 - v. 77(4) - p. 1370-1376.

Stipanuk M.H. Sulfur amino acid metabolism: pathways for production and removal of homocysteine and cysteine. // Annu. Rev. Nutr. - 2004 - v. 24 - p. 539-577.

Sun W.M., Huang Z.Z., Lu S.C. Regulation of y- glutamylcysteine synthetase by protein phosphorylation. // Biochemical Journal - 1996 - v. 320, no. 1 - p. 321-328.

Surtees R., Bowron A. and Leonard, J. Cerebrospinal fluid and plasma total homocysteine and related metabolites in children with cystathionine beta-synthase deficiency: the effect of treatment. // Pediatr. Res. - 1997 - v.42 - p. 577-582.

Tang D., Shafer M.M., Vang K., Karner D.A., Armstrong D.E. Determination of dissociation thiols using solid phase extraction and liquid chromatography determination of fluorescently derivatives thiolic compounds. // J. Chrom. A - 2003 - v. 998(1-2) - p. 31-40.

Tchantchou F., Graves M., Ortiz D., Rogers E. and Shea T.B. Dietary supplementation with 3-deaza adenosine, Nacetyl cysteine, and S-adenosyl methionine provide neuroprotection against multiple consequences of vitamin deficiency and oxidative challenge: relevance to age-related neurodegeneration. // Neuromolecular. Med. - 2004 - v.6 - p. 93-103

Ubbink J.B., Vermaak W.J., van der Merwe A., Becker P.J. The effect of blood sample aging and food consumption on plasma total homocysteine levels. // Clin. Chim. Acta. - 1992 - v. 207(1-2) -p. 119-128.

Ueland P.M., Hustad S., Schneede J., Refsum H., Vollset S.E. Biological and clinical implications of the MTHFR C677T polymorphism. // Trends Pharmacol. Sci. - 2001 - v. 22 - p. 195201.

Ueland P.M., Refsum H., Brattstrom L. Plasma homocysteine and cardiovascular disease. In: Francis RB Jr, ed. Atherosclerotic cardiovascular disease, hemostasis, and endothelial function. // New York Marcel Dekker - 1992 - p. 183-236.

Ueland P.M., Refsum H., Stabler S.P., Malinow M.R., Andersson A., Allen R.H. Total homocysteine in plasma or serum. Methods and clinical applications. // Clin. Chem. - 1993 - v. 39 - p. 1764-1779

Undas A., Williams E.B., Butenas S., Orfeo T., Mann K.G. Homocysteine inhibits inactivation of factor Va by activated protein C. // J. Biol. Chem. - 2001 - v. 276 - p. 4389-4397.

Ungvari Z., Pacher P., Rischak K., Szollar L., Koller A. Dysfunction of nitric oxide mediation in isolated rat arterioles with methionine diet-induced hyperhomocysteinemia. // Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. - 1999 - v.19(8) - p. 1899-1904.

Usatyuk P. V., Vepa S., Watkins T., He D., Parinandi N. L., Natarajan V. Redox regulation of reactive oxygen speciesinduced p38 MAP kinase activation and barrier dysfunction in lung microvascular endothelial cells. // Antioxidants and Redox Signaling - 2003 - v. 5, no. 6 - p. 723-730.

Vanhoutte P.M., Feletou M., and Taddei S. Endothelium-dependent contractions in hypertension. // Br. J. Pharmacol. - 2005 - v. 144 - p. 449-458.

Varon J., Marik P.E. The diagnosis and management of hypertensive crises. // Chest - 2000 - v. 118 - p. 214-227.

Varon J. Diagnosis and management of labile blood pressure during acute cerebrovascular accidents and other hypertensive crises. // Am. J. Emerg. Med. - 2007 - v. 25 - p.949-959.

Vazquez-Chantada M., Ariz U., Varela-Rey M., Embade N., Martinez-Lopez N., Fernandez-Ramos D., Gomez-Santos L., Lamas S., Lu S.C., Martinez-Chantar M.L., Mato J.M. Evidence for LKB1/AMP-activated protein kinase/ endothelial nitric oxide synthase cascade regulated by hepatocyte growth factor, S-adenosylmethionine, and nitric oxide in hepatocyte proliferation. // Hepatology - 2009 - v. 49(2) - p. 608-617.

Vecchione G., Margaglione M., Grandone E., Colaizzo D., Cappucci G., Fermo I., D'Angelo A., Di Minno G. Determining sulfur-containing amino acids by capillary electrophoresis: a fast novel method for total homocyst(e)ine human plasma. // Electrophoresis - 1999 - v. 20(3) - p. 569-574.

Yannoutsos A., Levy B.I., Safar M.E., Slama G., Blacher J. Pathophysiology of hypertension: interactions between macro and microvascular alterations through endothelial dysfunction. // J. Hyper-tens. - 2014 - v. 32(2) - p. 216-224

Yang D., Zhang J.N., Vanhoutte P.M., and Feletou M. NO and Inactivation of the endothelium-dependent contracting factor released by acetylcholine in SHR. // J. Cardiovasc. Pharmacol. - 2004 -v. 43 - p. 815-820.

Yang F., Tan H.-M., Wang H. Hyperhomocysteinemia and atherosclerosis. // Acta Physiologica Sinica - 2005 - v. 57 (2) - p. 103-114.

Yang H., Magilnick N., Lee C. Nrf1 and Nrf2 regulate rat glutamate-cysteine ligase catalytic subunit transcription indirectly via NF-kB and AP-1. // Molecular and Cellular Biology - 2005 - v. 25, no. 14 - p. 5933-5946 (a).

Yang H., Magilnick N., Ou X., Lu S.C. Tumour necrosis factor a induces co-ordinated activation of rat GSH synthetic enzymes via nuclear factor KB and activator protein-1. // Biochemical Journal - 2005 - v. 391, no. 2 - p. 399-408 (b).

Wagner C., Koury M.J. S-Adenosylhomocysteine: a better indicator of vascular disease than homocysteine? // Am. J. Clin. Nutr. - 2007 - v.86(6) - p.1581-1588.

Walker J.M. The protein protocol handbook. - Springer - 2009.

Wang H., Jiang X., Yang F., Chapman G.B., Durante W., Sibinga N.E., Schafer A.I. Cyclin A transcriptional suppression is the major mechanism mediating homocysteine-induced endothelial cell growth inhibition. // Blood - 2002 - v. 99 - p. 939-945.

Wang J., Boja E. S., Tan W. Reversible glutathionylation regulates actin polymerization in A431 cells. // Journal of Biological Chemistry - 2001 - v. 276, no. 51 - p. 47763-47766.

Wang Y., Yang J., Yi J. Redox sensing by proteins: oxidative modifications on cysteines and the consequent events. // Antioxidant and Redox Signaling - 2012 - v. 16, no. 7 - p. 649-657.

Wexler B.C. Metabolic Changes in Response to Acute Cerebral Ischemia Following Bilateral Carotid Artery Ligation in Arteriosclerotic Versus Nonarteriosclerotic Rats. //Stroke - 1970 - v. 1 - p. 112-121.

Wilcken D.E.L., Reddy S.G., Gupta V.J. Homocysteinemia, ischemic heart disease, and the carrier state for homocystinuria. // Metabolism - 1983 - v. 32 - p. 363-370.

Wilcken D.E.L., Wilcken B. The pathogenesis of coronary artery disease. A possible role for methionune metabolism. // J. Clin. Invest. - 1976 - v. 57 - p. 1079-1082.

Wilcken D.E.L., Wilcken B. The natural history of vascular disease in homocystinuria and the effects of treatment. // J. Inherit. Metab. Dis. - 1997 - v.

20 - p. 295-300.

Wiley V.C., Dudman N.P.B., Wilcken D.E.L. Interrelations between plasma free and protein-bound homocysteine and cysteine in homocystinuria. // Metabolism - 1988 - v. 37 - p. 191-195.

Williams R.H., Maggiore J.A., Reynolds R.D., Helgason C.M.. Novel approach for the determination of the redox status of homocysteine and other aminothiols in plasma from healthy subjects and patients with ischemic stroke. // Clin. Chem. -2001 - Vol. 47, №6 - p. 1031-1039.

Winther J.R., Thorpe C. Quantification of thiols and disulfides. // Biochim. Biophys. Acta -2014 - v. 1840(2) - p. 838-846.

Woo C.W.H., Siow Y.L., Pierce G.N., Choy P.C., Minuk G.Y., Mymin D., Karmin O. Hyperhomocysteinemia induces hepatic cholesterol biosynthesis and lipid accumulation via activation of transcription factors. // Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. - 2005 - v.288 - p. E1002-E1010.

Wright C.B., Paik M.C., Brown T.R., Stabler S.P., Allen R.H., Sacco R.L. and DeCarli C. Total homocysteine is associated with white matter hyperintensity volume: the Northern Manhattan Study. // Stroke - 2005 - v.36 - p.1207-1211

Wu C.-W., Yarbrough L. R., Wu F. Y. H.. N-(1-Pyrene)maleimide: a fluorescent crosslinking reagent. // Biochemistry - 1976 - v. 15 (13) - p. 2863-2868.

Zhao M., He X., Wier W. G., Zhang H.-L., Zhao M., Yu X.-J., Zang W.-J. Endothelial dysfunction in rat mesenteric artery after regional cardiac ischaemia-reperfusion. // Experimental Physiology - 2012 - v. 97 n.1 - p.70-79.

Zhloba A.A., Blashko E.L. Liquid chromatographic determination of total homocysteine in blood plasma with photometric detection.// J. Chromatogr. B Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. -

2004 - v. 800(1-2) - p. 275-280.

Zieminska E., Stafiej A. and Lazarewicz J.W. Role of group I metabotropic glutamate receptors and NMDA receptors in homocysteine-evoked acute neurodegeneration of cultured cerebellar granule neurones. // Neurochem. Int. - 2003 - v.43 - p.481-492

Zinellu A., Sotgia S., Deiana L., Carru C. Quantification of thiolcontaining amino acids linked by disulfides to LDL. // Clin. Chem. - 2005 - v. 51 - p. 658-660.

Zinellu A., Zinellu E., Sotgia S., Formato M., Cherchi G.M., Deiana L., Carru C. Factors affecting S-homocysteinylation of LDL apoprotein B. // Clin. Chem. - 2006 - v. 52(11) - p. 20542059.

Zinellu A., Sotgia S., Usai M.F., Zinellu E., Posadino A.M., Gaspa L., Chessa R., Pinna A., Carta F., Deiana L., Carru C. Plasma methionine determination by capillary electrophoresis-UV assay: application on pacients affected by retinal occkusive disease. // Anal. Biochem. - 2007 - v. 363 - p. 91-96.

Zinellu A., Sotgia S., Scanu B., Pisanu E., Sanna M., Sati S., Deiana L., Sengupta S., Carru C. Determination of homocysteine thiolactone, reduced homocysteine, homocystine, homocysteine-cysteine mixed disulfide, cysteine and cystine in a reaction mixture by overimposed pressure/voltage capillary electrophoresis. // Talanta - 2010 - v.82 - p. 1281-1285.

Zou C.G. and Banerjee R. Homocysteine and redox signaling. // Antioxid. Redox. Signal. -

2005 - v.7 - p. 547-559.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И ОБОЗНАЧЕНИЙ

ARE - элементы (транскрипции) антиоскидантного ответа

CA - цистамин

CMQT - 2-хлоро-1-метилхинолинтетрафлуороборат

CTAB - гексадецилтриметилбромид аммония

MTHFR - метилентетрагидрофолатредуктаза

NEM - N-этилмалеимид

NMDA - N-метил-Б-аспартат

NOS - синтаза оксида азота (NO-синтаза); e - эндотелиальная,

i - индуцибельная, n - нейрональная

R2 - коэффициент детерминации

SAH - S-аденозилгомоцистеин

SAM - S-аденозилметионин

SDS - додецилсульфонат Na

TCEP - трис-(2-карбоксиэтил)фосфин гидрохлорид

АДМА - ассиметричный диметиларгинин

АДФ - аденозиндифосфат

АТФ - аденозинтрифосфат

АФК - активные формы кислорода

ВЭЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография

ГГц - гипергомоцистеинемия

Гли-асп - глициласпарагин

Глн - глутатион

ГМ - головной мозг

ГМК - гладкомышечные клетки

Гцис - гомоцистеин

Гцис-Тл - тиолактон гомоцистеина

ГЭБ - гематоэнцефалический барьер

ДДТ - дитиотреитол

ДМГ - диметилглицин

ДТНБ - дитиобиснитробензойная кислота

ИБС - ишемическая болезнь сердца

Ил - интерлейкин

ИФА - иммуноферментный анализ

КЭ - капиллярный электрофорез

ЛИФ - лазер-индуцированная флуоресценция

ЛПНП - липопроетины низкой плотности

МАТ - метионинаденозинметилтрансфераза

МС - масс-спектрометрия

МТ - метилтрансферазы

НДА - нафталеновый диальдегид

ОНМК - острое нарушение мозгового кровообращения

ОЦК - объем циркулирующей крови

ОФА - о-фталевый альдегид

ПА - пеницилламин

ПОЛ - продукты (перекисного) окисления липидов

ССЗ - сердечно-сосудистые заболевания

ССК - стволовые клетки крови

ТГцис - общий гомоцистеин

ТКДИ - 1,1'- тиокарбонилдиимидазол

ТНБ - тионитробензоил

ТФУ - трифторуксусная кислота

ТФЭ - твердофазная экстракция

ТХУ - трихлоуксусная кислота

УФ - ультрафиолет

ферм. - фермент

Фл - флуоресценция

ФНОа - фактор некроза опухоли а

ЭХ - электрохимический детектор

ЭИ - электрокинетическая инжекция

ЦРС - цистатион-Р-синтаза

Цис - цистеин

ЦисГли - цистеинилглицин