Рассеянный склероз и адгезивная активность лейкоцитов и сыворотки крови (клинико-иммунологическое исследование) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.13, кандидат медицинских наук Ларина, Ираида Васильевна

• Ларина, Ираида Васильевна
• кандидат медицинских наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Ларина, Ираида Васильевна

Страница

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ (актуальность проблемы)

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Клиническая картина и патогенез рассеянного склероза

1.2. Иммунологические и биохимические изменения при РС.

1.3. Роль адгезивных свойств лейкоцитов крови и адгезивных молекул при РС

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Общая характеристика клинических наблюдений

2.2. Методы исследования

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Исследование адгезивной активности лейкоцитов крови и эффекта усиления адгезии под действием аутосыворотки

3.2. Исследование клеточной реактивности к антигенам основному белку миелина (ОБМ), туберкулопротеину (ТП), ганглиозидам мозга (ГМ) с помощью метода реакции подавления прилипания лейкоцитов (РППЛ)

3.3. Определение субпопуляций лимфоцитов крови (фенотипы СБЗ+, СЭ4+, СЭ8+, СБ 16+, СЭ20+) и активированных клеток (СБ25+, СБ95+, НЬА-ОЯ+) при РС

3.4. Определение содержания иммуноглобулинов (

§0,1§А,

§М), иммунных комплексов, их фракционного состава (крупно-, средне-, и мелкомолекулярной фракций) в сыворотке крови при РС

3.5. Сопоставления адгезивных свойств крови и показателей клеточного и гуморального иммунитета и клиническая гетерогенность РС

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Рассеянный склероз и адгезивная активность лейкоцитов и сыворотки крови (клинико-иммунологическое исследование)»

Актуальность. Проблема рассеянного склероза (РС) одна из актуальных в современной неврологии. РС - наиболее часто встречающееся хроническое аутоиммунное демиелинизирующее заболевание центральной нервной системы (ЦНС). По распространённости среди неврологических заболеваний ЦНС РС занимает четвертое место после инсультов, эпилепсии и паркинсонизма, в молодом возрасте — второе место после эпилепсии. В настоящее время в мире насчитывается более 2 млн больных РС, в том числе в России свыше 150 тысяч человек. Распространённость его растет во многих странах мира, что связано не только с удлинением жизни больных, но и с истинным увеличением заболеваемости [9]. Хроническое прогрессирующее течение РС, поражение преимущественно лиц молодого и среднего возраста, ранняя инвалидизация, недостаточная эффективность проводимой терапии подтверждают медицинскую и социальную значимость проблемы. [8,10,17,18].

Исследование последних лет показали сложность и многогранность патогенеза рассеянного склероза (РС). РС является заболеванием с выраженной клинической вариабельностью, непредсказуемостью прогноза.

Несмотря на активное изучение, этиология и патогенез РС остаются не вполне ясными. Актуальной проблемой является изучение механизмов развития неврологической симптоматики и вариантов течения заболевания. Очаги демиелинизации в ЦНС, выявляемые с помощью магнитно-резонансной томографии (МРТ), не всегда и не в полной мере соответствуют клиническим данным. В последние годы большое внимание уделяется не только изучению иммунологических и биохимических нарушений, приводящих к обострению болезни и формированию ремиссий, но и также сопоставлению патогенетических особенностей различных вариантов течения РС.[4,10,25,30].

В последние годы установлено, что ключевую роль в миграции специфичных к антигенам нервной ткани (ОБМ и др.) аутореактивных Т-лимфоцитов через ГЭБ в ЦНС, играют молекулы адгезии, экспрессирующиеся как на поверхности Т лимфоцитов, так и на эндотелиальных клетках [2,10, 14, 20,30,37,80]. На современном этапе, изучение адгезивных молекул является актуальным как в понимании патогенеза различных типов течения PC, так и разработки перспективных направлений патогенетической терапии PC. В последние годы проводятся исследования возможности использования моноклональных антител против некоторых форм МА с терапевтической целью. Одним из таких препаратов является натализумат, ингибирующий а-4-интегрин [16].

В осуществлении целого ряда физиологических и патологических процессов важнейшую роль играют адгезивные свойства лейкоцитов крови. Способность лейкоцитов крови к адгезии (прилипанию) была известна давно. Однако значимость этого свойства долгое время недооценивалась. В настоящее время адгезионным взаимодействиям различного типа клеток между собой, а также их взаимодействию с межклеточным матриксом отводится ведущая роль во многих процессах, развивающихся, как в физиологических условиях, так и в условиях патологии. К их числу относятся такие, как активация и дифференцировка иммунокомпетентных клеток, преодоление клетками гистогематических барьеров, развитие воспалительных реакций, передача всевозможных сигналов и другие [24, 65, 98, 105, 112].

Молекулы адгезии (МА) являются субстратом, опосредующим взаимную адгезию клеток и межклеточного матрикса, причём прилипание (или распластывание клеток на субстрате) служит одним из проявлений их функциональной активации. В целостном организме адгезия клеток развивается по отношению к другим клеткам, эндотелию сосудов, межклеточному матриксу, а в условиях in vitro она воспроизводится к неспецифическим субстратам, в частности, стеклу, пластиковой поверхности; при этом предполагается, что данное явление отражает способность клеток к прилипанию к эндотелию. Идентифицировано более 5 групп МА, в их числе интегрины, селектины, суперсемейство иммуноглобулинов и другие. Известно существование двух различных форм МА: растворимой (рМА) и связанной с поверхностью клеточных мембран (мМА) [10].

Методы определения уровня молекул адгезии (МА) в клинических условиях, хотя принципиально и разработаны, однако остаются малодоступными в связи с большой трудоёмкостью и высокой стоимостью тест - систем для определения рМА, что объясняет ограниченное число исследований роли МА при РС.

Все вышеизложенное послужило основанием для определения и изучения клинического значения адгезивных свойств лейкоцитов и сыворотки крови при РС.

Цель настоящего исследования:

Провести клинико-иммунологическое исследование с оценкой различных параметров адгезивной активности клеток и сыворотки крови больных РС.

Задачи исследования

1. Изучить адгезивную активность лейкоцитов и сыворотки крови у больных рассеянным склерозом (РС) с помощью оригинального нового способа, разработанного на основе реакции подавления прилипания лейкоцитов (РППЛ).

2. Провести сопоставление индекса спонтанной адгезии (ИСА) и эффекта усиления адгезии под действием аутосыворотки (ЭУс-а) со степенью активности патологического процесса, длительностью, тяжестью и клиническими проявлениями заболевания.

3. Исследовать сенсибилизацию лейкоцитов крови к основному белку миелина, смеси ганглиозидов из мозга быка (ГМ) и туберкулопротеину (ТП) с помощью РППЛ у больных РС.

4. Уточнить состояние количественных показателей клеточного иммунитета с помощью определения основных субпопуляций лимфоцитов крови (фенотипы СБЗ+, С04+, СБ8+, СБ 16+, СВ20+) и активированных клеток (С025+, СБ95+, НЬА-ОЯ+) у больных РС.

5. Исследовать гуморальный иммунитет с определением содержания иммуноглобулинов в, А, М и иммунных комплексов (ИК) в сыворотке крови больных РС.

6. Изучить взаимосвязь показателей адгезии с другими показателями иммунного статуса больных РС, и оценить диагностическую и прогностическую значимость адгезивной активности лейкоцитов и сыворотки крови у больных РС.

Научная новизна

Впервые применён оригинальный метод определения суммарной адгезивной активности лейкоцитов и сыворотки крови. Получен патент на изобретение №2246728 "Способ определения адгезивных свойств лейкоцитов крови", приоритет изобретения от 03 апреля 2003; зарегистрировано в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 20.02.2005г.

Проведённое исследование позволило получить новые данные, характеризующие адгезивную активность лейкоцитов и сыворотки крови, взаимосвязи показателей адгезии с клиническими проявлениями у больных РС, а также с особенностями клеточного, гуморального иммунитета при различных типах течения, длительности и тяжести заболевания.

Сравнительный анализ показателей адгезии и иммунного статуса в зависимости от типа течения, длительности и тяжести заболевания показал значительные отличия в изменении изучаемых параметров, что отражает этапы демиелинизирующего процесса.

Теоретическая и практическая значимость работы

Установлены параметры показателей адгезии (значение индексов спонтанной адгезии и эффекта усиления адгезии под действием аутосыворотки), которые могут быть использованы в качестве дополнительных лабораторных критериев прогнозирования характера течения РС. Предложенный способ определения показателей азгезии и вычисления величин ИСА и ЭУс-а позволил выявить повышение адгезивной активности лейкоцитов и сыворотки при РС и использовать их для скринингового определения суммарного содержания мембранных и растворимых форм адгезивных молекул как при РС, так и при других заболеваниях. Проведённое комплексное клинико-иммунологическое исследование расширяет представление о механизмах формирования иммунного ответа при РС, и влияние факторов адгезии на гетерогенность клинических проявлений.

Основные положения, выносимые на защиту

1. У больных РС обнаружено повышение адгезивных свойств лейкоцитов и сыворотки крови. Установлена взаимосвязь показателей адгезии с характером течения РС, активностью патологического процесса, а также с клиническими проявлениями заболевания.

2. Показатели адгезии (индекс спонтанной адгезии, эффект усиления адгезии под действием сыворотки) могут использоваться как критерий подтверждения развития обострения заболевания и выхода в ремиссию, а также прогнозирования типа течения РС.

3. Различный характер и особенности взаимосвязей иммунных параметров с показателями адгезии при разных клинических проявлениях РС подтверждают их существенный вклад в клиническую гетерогенность заболевания.

Заключение диссертации по теме «Нервные болезни», Ларина, Ираида Васильевна

ВЫВОДЫ

1. У больных PC обнаружено повышение адгезивных свойств лейкоцитов и сыворотки крови, что подтверждено частым выявлением высоких значений индекса спонтанной адгезии (ИСА) и эффекта усиления адгезии под действием аутосыворотки (ЭУс-а) по сравнению с группой нормального контроля.

2. Прослеживается взаимосвязь показателей адгезии с характером течения PC, а также активностью патологического процесса и, в меньшей степени, с длительностью заболевания и тяжестью неврологического дефицита. Повышение показателей адгезии отмечается уже в ранние сроки заболевания. Наиболее высокие показатели адгезии выявлены при первично-прогредиентном течении PC, что отличает этот тип течения от вторично-прогредиентного. При ремиттирующем течении PC более высокие показатели адгезии соответствуют стадии обострения заболевания.

3. Отмечены значимые взаимосвязи высоких показателей ИСА с содержанием B-лимфоцитов, NK клеток, количеством активированных лимфоцитов, маркёрами которых являются HLA-DR+ и CD95+; а также с реактивностью к основному белку миелина и туберкулопротеину и уровнем IgM, что отражают активность иммунологического процесса и важную роль показателей адгезии в интегрированном участии всех перечисленных компонентов в патогенезе PC.

4. Различный характер и особенности взаимосвязей показателей адгезии с другими иммунными параметрами при разных типах течения PC, а также расширение клинико-иммунологических корреляционных связей у больных с высокими показателями адгезии отражают этапы патологического процесса и подтверждают патогенетическую роль, как мембранных, так и растворимых форм адгезивных молекул в клинической гетерогенности рассеянного склероза.

5. Структура соотношения индекса спонтанной адгезии (ИСА) и эффекта усиления адгезии под действием аутосыворотки (ЭУс-а) при длительности РС более 10 лет и тяжести неврологического дефицита более 6,5 баллов была сходна с группой больных другими неврологическими заболеваниями (ДНЗ), для которых характерны высокие показатели ИСА в сочетании с незначительным повышением растворимых форм адгезивных молекул.

6. Определение показателей адгезии может использоваться как дополнительный лабораторный критерий для подтверждения обострения заболевания и выхода в ремиссию, а также при прогнозировании типа течения РС.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Ларина, Ираида Васильевна, 2009 год

1. Александров А. В., Джексон А. М., Румянцев А. Г Анализ механизма модуляции межклеточных молекул адгезии ICAM (обзор). //Иммунология. 1997.-№17-С:4-13.

2. Барановский П.В., Данилишина B.C. Определение циркулирующих иммунных комплексов в сыворотке крови.//Лабораторное дело.- 1983.-№5.-С:62-63.

3. Беляева И.А. Клинико-иммунологическая характеристика ремиттирующего и вторично-прогредиентного рассеянного склероза: Автореферат дис. ...д-ра мед. наук.- Москва, 2000.- 45с.

4. Виничук. М. Рассеянный склероз: спорные и нерешенные вопросы этиологии и патогенеза. - «Здоров'е Украши», 2003. - 65с.

5. Ганнушкина И.В., Горбунов В.И., Лихтерман Л.Б. Иммунопатология травматической болезни головного мозга. - Ульяновск, 1976г.

6. Говалло В. И., Скуинь Л. М., Космиади Г.А., Ефимцева Н. Н. Некоторые аспекты клинического применения реакции подавления прилипания лейкоцитов. //Иммунология. -1983.- №2. -С. 81-34.

7. Гусев Е.И., Бойко А.Н. Рассеянный склероз: достижения десятилетия //Журнал неврологии и психиатрии им. С.Корсакова. Специальный выпуск. Рассеянный склероз (приложение к журналу), 4. - 2007.- С 4-13.

8. Гусев Е.И., Демина Т.Л., Бойко А.Н. Рассеянный склероз. - Москва, 1997.- 463с.

9. Гусев Е.И., Завалишин И.А., Бойко А.Н. Рассеянный склероз и другие демиелинизирующие заболевания.- М: Миклош, 2004.-540с.

10. Дранник Г.Н. Клиническая иммунология и аллергология—М.ЮОО "Медицинское информационное агентство", 2003.- 604с.

11. Жирнова И.Г. Иммунопатологические реакции //В кн.: Рассеянный склероз.- Москва, 2000. - 11-59.

12. Жирнова И.Г., Ларина И.В., Ганнушкина И.В., Завалишин И.А., Царёва М.И. Новый метод оценки адгезивной активности лейкоцитов крови и влияния сыворотки на адгезию клеток. //Нейроиммунология.- 2003.-№ 12: 53-54.

13. Завалишин И.А., Головкин В.И. Рассеянный склероз. Избранные вопросы теории и практики.- М., 2000.- 637с.

14. Завалишин И.А., Переседова А.В. Рассеянный склероз: современная концепция патогенеза и патогенетического лечения. //Журнал Анналы клинической и экспериментальной неврологии. Том 1. №1.-2007.- С 32-40.

15. Завалишин И.А., Захарова М.Н. Рассеянный склероз: современные аспекты этиологии и патогенеза. //Журн. Неврол. и психиатр, им. С.Корсакова. -2003. №103:2.- 10-17.

16. Завалишин И.А., Захарова М.Н. Современные аспекты этиологии и патогенеза рассеянного склероза. //Материалы I Национальная конференция с международным участием «Нейроинфекции» 28-29 мая 2007г. Москва. С: 41-44.

17. Захарова М. Н. Боковой амиотрофический склероз и окислительный стресс. Докт. дисс... М, 2001, 257 с.

18. Земсков В. И., Субботин М. Молекулярные механизмы влияния адгезии на активацию и дифференцировку иммунокомпетентных клеток. Иммунология. 2:9 — 12. 1990.

19. Кульберг А.Я. Рецепторы клеточных мембран. М., 1988.

20. Миллер А., Эниня Г., Метра М., Платкайс А., Кукайне Р. Адгезивные молекулы как иммунные маркеры активности рассеянного склероза. Журн. неврол. и психиатрии им. С.Корсакова. 2003; 1: 35-38.

21. Опольский М.Б. Патогенетические механизмы нарушения гематоэнцефалического барьера при рассеянном склерозе. //Автореферат на соискание учёной степени кандидата медицинских наук. Москва, 2005г.

22. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакетов прикладных программ STATISTICA. М., МедиаСфера. 2002. 312с.

23. Столяров И.Д., Осетрова Б.А. Рассеянный склероз. СПб, ЭЛБИ-СПб., 2002.-176.

24. Судомоина М.А., Бойко А.Н., Турецкая Р.Л., и соавт. Генетический полиморфизм генома человека, содержащего гены фактора некроза опухоли: новые маркёры восприимчивости к рассеянному склерозу. // Доклады Акад. Наук.-1995.-Т.343.-№1.-С119-123.

25. Судомоина М.А., Бойко А.Н., Гусев Е.И. и соавт. Связь рассеянного склероза в русской популяции с аллелями гена DRB1 главного комплекса гистосовместимости. //Молекулярная биология.- 1998, 32:291-296.

26. Тринитатский Ю.В. Клинико-иммунологические и МРТ основы диагностики и лечения рассеянного склероза. Автореф. дис. д-ра мед. наук. М. 2003.

27. Фарни Л. Флуоресцирующие антитела и их применение при анализе антигенов и лимфоидных клеток //В кн: Методы исследований в иммунологии, под редакцией И.Лефковитса, Б. Перниса. перевод с англ. Издательство «Мир» М, 1981, глава 9; с. 164-180. (485с).

28. Фролов В.М., Рыков В.Е., Бала М.А. «Исследование иммунных комплексов при роже: диагностические и прогностическое значение». //Журнал «Лабораторное дело» - 1986г.- №3. - с. -159-161.

29. Хайдаров Б.Т., Завалишин И.А., Бартова Л.М., Кульберг А.Я. Прогнозирование течения рассеянного склероза с помощью теста на R-белки. Иммунология.-1991.-1.-С. 71-72.

30. Харкевич Д. Д., Полевая Е. Б., Деревнина Н. А., Сабликова Ю. А., Савинов А. Ю. Изучение механизмов кинетики и специфичности теста ингибиции адгезии лейкоцитов при раке молочной железы. Эксперим. онкология. 7 (6): 6 9 - 7 3 . 1985.

31. Хондкариан О.А., Завалишин И.А., Невская О.М., Рассеянный склероз, М Издательство «Медицина».- 1987; 256.

32. Ширалиева Р.К. «Диагностика и патогенетические механизмы рассеянного склероза». Автореферат на соискание учёной степени доктора медицинских наук. Москва, 1995.

33. Шмидт Т.Е., Яхно Н.Н. Рассеянный склероз. М. Медицина. 2003.

34. Archelos J., Hartung H. Pathogenetic role of autoantibodies in neurological diseases. // Trends Neurosci. - 2000. - V. 23. - p. 317-327.

35. Arpinati M., Green C , Heimfeld S. Granulocyte-colony stimulating factor mobilizes T helper 2-inducing dendritic cells. // Blood. - 2000. - V. 95. - p. 2484-2490.

36. Baxevanis CN, Reclos GJ, Servis C, Anastasopoulos E, Arsenis P, Katsiyianmis A, Matikas N, Lambris JD. Papamichail M. Peptides of myelin basic protein stimulate T lymphocytes from patients with multiple sclerosis. J Neuroimmunol 1989, 22: 23-30.

37. Bellamy AS, Calder VL, Feldman M, Davison AN. The distribution of interleukin -2 receptor bearing lymphocytes in multiple sclerosis: evidence for a key role of activated lymphocytes, Clin Exp Immunol 1985, 61: 248-256.

38. Birnbaum G. Heat shock proteins and multiple sclerosis. In: Frontiers in Multiple sclerosis. Clinical research and therapy. Eds O. Abramsky, H. Ovadia. Martin Dunitz Ltd. 175-181. 1997.

39. Birnbaum G. Heat shock proteins and multiple sclerosis. In: Frontiers in Multiple Sclerosis. Abramsky O, Ovadia H (eds.). Martin Dunitz 1997: 175-182.

40. Bjartmar C , Wujek J.R., Trapp B.D. Axonal loss in the pathology of MS: consequences for understating the progressive phase of the disease. Neurol. Science 2003, 206: 165-171.

41. Bo L, Mork S, Kong PA, Nyland H, Pardo CA, Trapp BD. Detection of MHC class II- antigen on macrophages and microglia, but not on astrocytes and endotelia in active multiple sclerosis lesions, J Neuroimmunol 1994, 51: 135-146.

42. Boiko A.N., Kesselring J., Paty D.W. et al. Multiple sclerosis end public health. Educational and menagement implications. Word Health Organization, Department of Mentale Health, Neuroscience and Neurological Desorders, 1999, (2), 1-11.

43. Boyle EA, Mc Geer PL. Cellular immune response in multiple sclerosis plaques. Amer J Pathology 1990, 137: 575-84.

44. Caiman Т., Lublin F., The genetics of multiple sclerosis. A rewier. Biomed. Pharrnacother. 2000; 53:58-370.

45. Carmella B, Raine CS. The adhesion molecule and cytokine profile of MS lesions, Ann Neurol 1995, 37: 424-435.

46. Chofflon M, Juillard C, Juillard P, Gauthier G, Grau G.E. Tumor necrosis factor alpha production as a possible predictor of relapse in patients with multiple sclerosis. EurCytokNetw 1992, 3: 523-531.

47. Chung IY, Norris JG, Benveniste EN. Differential tumor necrosis factor a expression by astrocytes from experimental allergic encephalomyelitis -susceptible and resistant rat strains. J Exp Med 1991, 173: 801-812.

48. Coles A., Wing M., Molyneux P. et al. Monoclonal antibody treatment exposes three mechanisms underlying the clinical course of multiple sclerosis. // Ann. Neurol. - 1999. - V. 46. - p. 296-304.

49. Colombo E., Dono M., Gazzola P. et al. Accumulation of clonally related В lymphocytes in the cerebrospinal fluid of multiple sclerosis patients. // J. Immunol. - 2000. - V. 164. - p. 2782-2789.

50. Diemel L. Macrophages in CNS remyelination: on friends or foe? // Neurochem. Res. - 1998. - V. 23. - p. 341-347.

52. Dore Duffy P., Newman W., Balabanov R. Circulating, soluble adhesion proteins in cerebrospinal fluid and serum of patients with multiple sclerosis: correlation with clinical activiti. Ann. Neurol. 37: 55-62. 1995.

53. Drakesmith H., Chain В., Beverley p. How can dendritic cells cause autoimmune disease? // Immunol. Today. - 2000. - V. 21. - p. 214-217.

54. Ferguson В., Matyszak M., Esiri M. et al. Axonal damage in acute multiple sclerosis lesion. // Brain. - 1997. - V. 120. - p. 393-399.

55. Freedman MS, Ruijs TC, Selin LK, Antel JP. Peripheral blood gamma- delta T cells lyse fresh human brain- derived oligodendrocytes. Ann Neurol 1991, 30: 794-800.

56. Halliday WJ, Miller S. Leukocyte adherence inhibition: a simple test for cell- mediated tumor immunity and serum blocking factors. Int J Cancer, 1972, 9: 477-483.

57. Hartung H. P., Archelos J J . Circulating adhesion molecules and tumor necrosis factor receptor in MS: correlation with MRI. Ann. Neurol. 38: 186-193. 1995.

58. Hartung HP. Pathogenesis of Multiple sclerosis. In: Frontiers in Multiple Sclerosis. Abramsky O, Ovadia H (eds.). Martin Dunitz 1997: 45-59.

59. Hauser SL, Bhan AK, Gilles F. et al. Immunohistochemical staining of human brain with monoclonal antibodies that identify lymphocytes, monocytes and la-antigen. J Neuroimmunol 1983, 5: 197-205.

60. Head M.W., Corbin E., Goldman J.E. Coordinate and independent regulation of a B- crystalline and HSP27 expression in response to physiological stress. J Cell Phesiol 1994, 159: 41-50.

61. Hemachudha ., Griffin DE, Giffels JI, Johnson RT, Moser AB, Phanuphak P. Myelin basic protein as an encephalitogen in encephalomyelitis and polineuritis following rabies vaccination. New Engl J Med 1987, 316: 369-374.

62. Hohlfeld R. Biotechnological agents for the immunotherapy of multiple sclerosis. Principles, problems, and perspectives. // Brain. — 1997. — V. 120 — p.865-916.

63. Hohlfeld R. Pro-inflammatory cytokines and the immunogenetic associations of multiple sclerosis. In: Frontiers in Multiple Sclerosis. Abramsky O, Ovadia H (eds.). Martin Dunitz 1997: 149-153.

64. Hohlfeld R., Wekerle H. Immunological update on multiple sclerosis. // Cur. Opin. Neurol. - 2001. - V. 14. - p. 299-304.

65. Huang Y., Stoyanova N., Jin Y. et al. Altered phenotype and function of dendritic cells in multiple sclerosis is modified by IL-10 and IFN-P: A novel mechanism of immunomodulation applicable to therapy? // Clin. Exp. Immunol. -2001.

66. Ingolia T.D. b Graig E.A. Four small heat shock proteins are related to each other and to mammalian a-crystallin. Proc Natl Acad Sci USA 1982,79: 2360-2364.

67. Johnson D, Hafler DA, Fallis RJ, Lees MB, Brady RO, Quarles RH, Weiner HL. Cell- mediated immunity to myelin-associated glicoprotein, proteolipid protein and myelin basic protein in multiple sclerosis. J Neuroimmunol 1986, 13: 99-108.

68. Kerschensteiner M. Activated human T cells, В cells and monocytes produce brain-derived neurotrophic factor in vitro and in inflammatory brain lesion: a neuroprotective role of inflammation? J Exp Med 1999; 189: 865-870.

69. Kornek В. Multiple sclerosis and chronic autoimmune encephalomyelitis: a comparative quantitative study of axonal injury in active, inactive and remyelinated lesions. // Am. J. Pathol. - V. 157. - p. 267-276.

70. Kornek В., Lassmann H. Axonal pathology in multiple sclerosis: a historical note. // Brain Pathol. - 1999. - V. 9. - p. 651-656.

71. Kurtzke J.F. Rating neurologic impairment in multiple sclerosis: an expeanded disability status skale (EDSS). Neurology 1983; 33: 1444-1452.

72. Lassmann H. Adhesion molecules and the blood-brain barrier. In: Frontiers in Multiple sclerosis. Abramsky O, Ovadia H (eds.). Martin Dunitz 1997: 161-174.

73. Lassmann H., Raine C , Antel J. et al. Immunopathology of multiple sclerosis: report on an international meeting held at the Institute of Neurology of the University of Vienna. // J. Neuroimmunol. - 1998. - V. 86. - p. 213-217.

74. Liblau R., Fontaine В., Evercooren A., et al. Demyelinating diseases: from pathogenesis to repair strategies. TINS 2001; 24: 134-135.

75. Lucchinetti C, Bruck W., Parisi J. et al. A quantitative analysis of oligodendrocytes in multiple sclerosis lesions: a study of 113 cases. // Brain. -1999. - V. 122. - p. 2279-2295.

76. Mancini G., Nasb D.K., Herevans J.S. Furtherstudies on singlet radial immunodiffusion. Ill Quantitve analis of related and unrelated antigens //J.Immunochemistry.-1970.-V7.- p. 261-264.

77. Matsuo Y, Onodera H, Shiga Y et al. Role of adhesion molecules in brain injury after transiet middle cerebral artery occlusion in the rat, Brain Res. 1994, 656: 344 - 352.

78. McDonald W.I., Comston A., Edan G. et al. Recommended diagnostic criteria for multiple sclerosis: guidelines from the International Panel on the diagnosis of multiple sclerosis. Ann Neurol. 2001; 50: 121-127.

79. McCuirk P., Mills K.H. Pathogen-specific regulatory T cells provoke a shift in the Thl /Th2 paradigm in immunity to infectious disease. Trend Immunol 2002; 23:450-455.

80. Moalem G. et al. Autoimmune T-cells protect neurons from secondary degeneration after central nervous system axotomy. // Nat. Med. - 1999. - V. 5. - p . 49-55.

81. Muraro P., Pette M., Bielekova B. et al. Human autoreactive CD4+ T cells from naive CD45RA+ and memory CD45RO+ subsets differ with respect to epitope specificity and functional antigen avidity. // J. Immunol. - 2000. - V. 164. — p. 5474-5481.

82. O'Connor K., Bar-Or A., Hafler D.A. The Neuroimmunology of Multiple Sclerosis: Possible Role of T and В Lymphocytes in immunogenesis. J. Clin Immunol. 2001; 21:81-92.

83. Obermayer-Straub P., Manns M. Hepatitis С and D, retroviruses and autoimmune manifestations. // J. Autoimmunity. - 2001. - V. 16. - p. 275-285.

84. Pender MP, Nguyen KB, Mc Combe PA. et al. Apoptosis in the nervous system in experimental allergic encephalomyelitis, J Neurol Sci 1991, 104: 81 - 87.

85. Penkowa M., Hidalgo J. Metallothionein Treatment Reduces Proinflammatory Cytokines IL-6 and TNF-a and Apoptotic Cell Death during Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE). // Exp. Neurol. - 2001. - V. 170. - p. 1-14.

86. Poser СМ., Paty D.W., Scheinberg L.C. et al. New diagnostic criteria for multiple sclerosis: guidelines for research protocols. Ann. Neurol. 1983; 13: 227-231.

87. Renganathan M., Cummins Т., Hormuzdiar W. et al. Nitric oxide is an autocrine regulator of Na+ currents in axotomized C-type DRG neurons. // J. Neurophysiol. - 2000. - V. 83. - 2431-2443.

88. Rodriguez M., Scheithauer B. Ultrastructure of multiple sclerosis. // Ultrastructural Pathol. - 1994. -V. 18. - p . 3-13.

89. Selmaj K, Battistini L, Gao YL, Brosnan CF. and Raine CS. Heat shock proteins and )S T lymphocytes in multiple sclerosis. In: Frontiers in Multiple Sclerosis. Abramsky O, Ovadia H (eds.) Martin Dunitz 1997: 183-191.

90. Sharief MK, Noori MA, Ciardi M. et al. Increased levels of circulating ICAM-1 in serum and cerebrospinal fluid of patients with active multiple sclerosis. Correlation of TNF and blood-brain barrier damage. J Neuroimmunol 1993, 43: 15-22.

91. Shields D., Banik N. Upregulation of calpain activity and expression in experimental allergic encephalomyelitis: a putative role for calpain in demyelination. // Brain Res. - 1998. - V. 794. - p. 68-74.

92. Smith-Jensen Т., Burgoon M., Anthony J. et al. Comparison of IgG heavy chain sequences in MS and SSPE brain reveal an antigen-driven response. // Neurology. - 2000. - V. 54. - p. 1227-1232.

93. Sobel RA, Mitchell ME, Fondren G. Intercellular adhesion molecule -1 (ICAM- 1) in cellular immune reactions in the human central nervous system. Am J Pathol 1990, 136: 1309-1316.

94. Steinman L. Immunotherapy of multiple sclerosis: the end of the beginning. // Current Opinion in Immunology. - 2001. - V. 13. - p. 597-600.

95. Steinmann L. Multiple sclerosis : two-stade disease. Nat. Immunology 2001, 2: 762-764.

96. Trapp В., Peterson J., Ransohoff R. Axonal transection in the lesions of multiple sclerosis. // The New England J. of Medicine. - 1998. - V. 338. - p. 278-285.

97. Trapp В., Ransohoff R., Fisher E. et al. Neurodegeneration in Multiple sclerosis: relation of neurological disability. //Neuroscientist. - 1999. - V. 5 - p. 48-57.

98. Traugott U, Scheinberg LC, Raine CS. On the presence of la - positive endothelial cells and astrocytes in multiple sclerosis lesions and its relevance to antigen presentation. J Neuroimmunol 1985, 8: 1 -14.

99. Tsukada N, Matsuda M, Miyagi K. Yanagisawa N. Soluble CD4 and CD8 in the peripheral blood of patients with multiple sclerosis and HTLV -1 - associated myelopathy. J Neuroimmunol 1991, 35: 285-293.

100. Tsukada N., Miyagik L., Matsuda M., Yanagisawa N. Increased levels of circulating intercellular adhesion molecules in multiple sclerosis and human T-lymphotrophic virus tupe 1-associated myelopathy. Ann. Neurol. 33.: 646-649. 1993.

101. Van Noort J.M., van Sechel A., Boon J., et al. Minor myelin proteins can be major targets for peripheral blood T cells from both multiple sclerosis pacients and healthy subjects. J. Neuroimmunol 1993, 46: 67-72. &

102. Wucherpfennig KW, Newcombe J, Li H, Keddy C, Cuzner ML. Hafler DA. Gamma delta T-cell receptor repertoire in acute multiple sclerosis lesions. Proc Nat Acad Sci USA 1992, 89:4588-4592.

103. Zaffaroni M, Rossini S, Ghezzi A, Parma R, Cazzullo CL. Decrease of CD4+CD45+ T-cells in chronic -progressive multiple sclerosis. J Neurol 1990, 237: 1-4.

104. Zeine R., Pon R., Ladiwala U. et al. Mechanism of gammadelta T cell-induced human oligodendrocyte cytotoxicity: relevance to multiple sclerosis. // J. Neuroimmunol. - 1998.- V. 87. - p. 49-61.

105. Zhu В., Moore G.5 Zwimpfer T. Axonal cytoskeleton changes in experimental optic neuritis. // Brain Res. - 1999. - V. 824. - p. 204-217. /