Распределение микроорганизмов по профилю почв разных типов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Гейдебрехт, Валентина Викторовна

• Гейдебрехт, Валентина Викторовна
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гейдебрехт, Валентина Викторовна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Изменение численности и биомассы микроорганизмов

в разных почвах в разные сроки наблюдения

1.1. Факторы, влияющие на динамику микробной биомассы в почвах

1.2. Распределение микроорганизмов по профилю почв

ГЛАВА 2. Биомасса микроорганизмов в различных почвах

2.1. Соотношение грибов и бактерий в почвах

ГЛАВА 3. Пространственная характеристика распределения

микроорганизмов в почве

ГЛАВА 4. Методы определения микробной биомассы в почвах

4.1. Методы посева

4.2. Биохимические методы

4.2.1.Фумигационно-инкубационный метод (ФИМ)

4.2.2.Фумигационно-экстракционный метод (ФЭМ)

4.2.3. Субстрат-индуцированное дыхание (СИД)

4.2.4. АТФ -методы

4.3. Кинетические методы

4.4. Прямые микроскопические методы

4.4.1. Жизнеспособность

ГЛАВА 5. Материалы и методы ..'..■

5.1. Описание изученных почв

5.2. Методика подготовки образцов почвы к микробиологическому анализу

5.3. Методика исследования комплекса почвенных микроорганизмов

5.4. Определение потенциальной

интенсивности дыхания по СОг

ГЛАВА 6. Распределение численности и биомассы

микроорганизмов по профилю разных типов почв

ГЛАВА 7. Биомасса грибов в различных типах почв

ГЛАВА 8. Годовая динамика численности и биомассы

микроорганизмов в разных типах почв

ГЛАВА 9. Репрезентативность данных о

структуре микробных сообществ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ЛИТЕРАТУРА

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Распределение микроорганизмов по профилю почв разных типов»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. В почве происходят разнообразные химические превращения, несомненно, главную роль в этих процессах играют микроорганизмы (Виноградский, 1953; Мишустин, 1975; Звягинцев, 1987). Для того чтобы понять функционирование почвы как системы важна как качественная характеристика почвенной микробиоты, т.е. видовой состав и разнообразие, так и собственно количественная характеристика. Необходимо знать запасы живых микроорганизмов в почвах разных типов и в их различных горизонтах (Полянская, 1996).

Проводившиеся ранее исследования ограничивались, в основном, подсчетом биомассы в верхних почвенных горизонтах, при этом оценивалась преимущественно биомасса прокариотных микроорганизмов (Богоев, 1981; Лимарь и др., 1975), а биомасса микромицетов, если и учитывалась (Мирчинк и др., 1985; Паников, 1992), то иными, чем бактерии методами, что не позволяло корректно сопоставлять результаты. Результаты, полученные методами посева, способствовали установлению парадигмы о сосредоточении микробной биомассы преимущественно в верхних почвенных горизонтах.

Между тем, уровень заселенности микроорганизмами нижних и средних горизонтов представляет как теоретический, так и немалый практический интерес. На огромных площадях происходят процессы эрозии и "вчерашние" нижние горизонты оказываются сегодняшним пахотным слоем, а его микробное население влияет на его плодородие, токсичность и патогенность.

Целью данной работы было изучить распределение микробной биомассы по профилю разных почв для оценки сравнительной значимости факторов, влияющих на этот показатель.

Основные задачи:

1. Учет численности и биомассы основных групп микроорганизмов по профилю зональных типов почв и установление различий их динамики в разные годы.

2. Изучение корреляции между биомассой микроорганизмов в различных почвах и горизонтах и показателями в них актуального и потенциального дыхания.

3. Определение степени жизнеспособности грибных спор и мицелия в различных почвенных горизонтах.

4. Определение доли углерода биомассы микроорганизмов в общем содержании углерода органического вещества в почвах.

5. Изучение значимости пространственного и временного факторов и выявление корреляции между различными параметрами, характеризующими состояние микробного комплекса.

6. Оценка периодичности колебаний численности почвенных микроорганизмов.

Научная новизна. Впервые показаны различия в содержании микроорганизмов в различных почвах в разные годы наблюдения. Установлено, что углерод микробной биомассы составляет значительную часть содержащегося в почве органического углерода. Не отмечается прямой корреляции между содержанием органического субстрата, численностью микроорганизмов и дыханием, хотя большая часть

микроорганизмов (даже в минеральных горизонтах) жизнеспособна. Пространственные различия в содержании микроорганизмов в почвах не настолько значимы, чтобы перекрывать происходящие во времени сукцессионные события.

Практическая значимость. Происходящая эрозия вскрывает минеральные горизонты и необходимо знать, в какой мере они способны выполнить функции пахотного слоя, что в значительной степени зависит от состояния содержащихся в них микробных комплексов.

Автор выражает искреннюю благодарность профессору Д.Г.Звягинцеву (за постоянное внимание к работе и поддержку), профессору С. А. Владыченскому (за помощь в идентификации почв), благодарит ст. преп. Т.Н.Початкову, доцента А.Л.Степанова, с.н.с. И.Ю.Чернова за помощь в проведении данной работы.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (код проекта 94-041296).

Глава 1. ИЗМЕНЕНИЕ ЧИСЛЕННОСТИ И БИОМАССЫ МИКРООРГАНИЗМОВ В РАЗНЫХ ПОЧВАХ В РАЗНЫЕ СРОКИ НАБЛЮДЕНИЯ.

В течение длительного периода времени основным методом исследования почвенных микроорганизмов являлся метод посева на плотные питательные среды, что несомненно оказало определяющее влияние на представление о численности и состоянии почвенной микробиоты. Между тем, метод посева, незаменимый при изучении видового состава микроорганизмов, дает весьма противоречивые сведения об общей численности последних в зависимости от способа подготовки субстрата, спектра использованных питательных сред, условий культивирования и множества других факторов, которые трудно учесть. Достаточно сказать, что при обычном посеве от учета и изучения ускользает вся анаэробная микробиота, несомненно, обильно представленная в почвах. Спецификой посева можно объяснить господствовавшее долгое время представление о преобладании в почве бактериальной микрофлоры и о приуроченности основного количества микроорганизмов к верхним гумусовым горизонтам.

Между тем, вопрос о численности и биомассе основных групп почвенных микроорганизмов имел первостепенное значение, так как перед почвенной микробиологией ставилась задача оценить роль почвенных микроорганизмов в круговороте органического вещества и энергии в наземных экосистемах, установить корреляцию между почвами и населяющей их микробиотой (Лимарь и др., 1975). Несоответствие между целями и имеющимися в наличии средствами порождало порой фантастические результаты, например, представление о резких

ежесуточных колебаниях численности почвенных бактерий (Аристовская, 1972).

Одними из первых динамику развития бактерий в почве изучали Т.Реми (1902), Л.Хилтнер и К.Штермер (1903), бравшие пробы во время вегетационного периода или даже в течение всего года. В последующие 4050 лет наиболее обстоятельные исследования по сезонной динамике развития почвенных бактерий провели Д.Фехер, С.А.Самцевич, С.Я.Мехтиев, Я.Сайферт и др. (цит. по Рыыс, 1974) Большая заслуга в систематическом исследовании продуктивности почвенных микроорганизмов принадлежит микробиологам ленинградской школы под руководством Т.В.Аристовской. В последние годы изучению сезонной динамики развития различных групп почвенных микроорганизмов, а также факторов, обуславливающих ее, посвящен еще ряд работ, в основном по исследованию почвенных бактерий и актиномицетов. Значительно меньше их по изучению почвенных грибов и водорослей, еще меньше сведений о представителях почвенных макро- и микрофауны. Работ, в которых динамика развития отмеченных групп исследовалась одновременно, комплексно, вообще мало (Karl, 1986).

Несмотря на многочисленность современных публикаций, имеющиеся в литературе данные по изменению численности и биомассы почвенных микроорганизмов содержат немало противоречий и не позволяют сделать однозначных выводов. Все методы учета почвенной микрофлоры свидетельствуют о динамике численности отдельных компонентов микробного ценоза почвы (Мишустин, 1974). Количество микробной биомассы различно в разных почвах, а его максимум падает на разные сезоны и месяцы. Отмечено, что общая микробная биомасса нарастает от

января к лету (Behera et al., 1991; Мао et al., 1992), с пиками ранней весной (Гильманов и др., 1984; Liao, 1988; Collins et al., 1992; Garcia et al., 1994), весной и осенью (Laudelout et al., 1982), при этом динамика численности бактерий и грибов не совпадает: максимум бактерий приходится на май-июль, а максимум грибов - на осень (Мехтиев и др., 1974; Богоев, 1981;

Ои

Nagel-de Boois, 1971) или и на весну и на осень (Soderstrom, 1979; Baath, Soderstrom, 1982). По данным других авторов (Никитина, Антоненко, 1982) летом максимальна численность грибов, а не бактерий, поздней осенью преобладание грибов над бактериями слабее, весной больше бактерий, чем грибов. В некоторых случаях не обнаружено весеннего максимума развития микроорганизмов в почве (Аристовская, 1980), что объясняется быстрым расходованием и значительным выносом скудных запасов доступных питательных веществ и сильным обеднением почвы уже весной. Отмечается низкая бактериальная численность во время летних месяцев в течение трех лет наблюдений, что впрочем, совпадает с низкими значениями влажности почвы (Lundgren, Soderstrom, 1983).

Наблюдались краткосрочные ежемесячные изменения в численности и биомассе бактерий в течение 15 месяцев, при этом колебания в численности на протяжении 2 недель были найдены такие же большие, как во время всего года (Clarholm, Rosswall, 1980). Однако множественный регрессионный анализ не дал никаких адекватных предсказуемых уравнений для ежемесячных колебаний грибной биомассы (Hunt, Fogel, 1983). Малые ежегодные изменения в биомассе наблюдали и другие авторы (Patra et al., 1990). Интересно, что микробная биомасса и биохимические характеристики хотя и увеличивались в почвах, обогащенных субстратом, но снижались в конце концов, к уровню контрольной почвы (Nannipieri et al., 1983). Микробная биомасса и энзимная активность контрольной почвы

отражали нормальное состояние микробного сообщества, поэтому избыток биомассы и энзимов был уничтожен.

По некоторым данным (Baath, Soderstrom, 1982; Behera et al., 1991) колебания численности больше характерны для верхних органических горизонтов почв и не наблюдаются в минеральных горизонтах. Флуктуации численности бактерий в минеральных горизонтах лесной почвы могут не коррелировать с выпадением дождей и изменениями температуры, так как органический слой имеет водоудерживающую способность (Clarholm, Rosswall, 1980). По другим данным сезонные флуктуации микробной численности также уменьшались с глубиной (Martinez, 1978; Lundgren, Soderstrom, 1983). Содержание грибных гиф менялось в верхних горизонтах в течение года от 140 до 750 м/г, на глубине 50 см - от 118 до 264 м/г, ниже 50 см содержание гиф оставалось практически стабильным -около 80 м/г на глубине 70 см и 38 м/г на глубине 90 см (Hunt, Fogel, 1983). Некоторые авторы наблюдали сезонные колебания количества углерода и фосфора микробной биомассы (Buchanan, 1992), некоторые, наоборот, отмечали, что углерод биомассы не различался значительно между весной и осенью, возможно, из-за того, что пространственная неоднородность почвы перекрывала сезонные колебания (Ross, Tate, 1993). В одних исследованиях обнаружены колебания в пропорции живых гиф -их численность была значительно больше в июле (Frankland, 1975), в других колебания в численности AO-окрашенных и FDA-окрашенных, то есть жизнеспособных, бактерий не коррелировали (Lundgren, Soderstrom, 1983).

Известно, что численность микроорганизмов в почвах изменяется не только в связи с сезонными изменениями экологических условий, но и в

силу внутренних закономерностей развития микробных популяций (Karl, 1986). Исторические абиотические факторы: pH, t°C, влажность, химические превращения в почвах небиотического характера могут быть первоочередными регуляторами встречаемости для многих грибов, но имеются доказательства, что регулирование может быть связано, в первую очередь, с состоянием микробного сообщества и в настоящее время не поддается описанию (Christensen, 1989). Даже Homo sapiens, пишет Кристенсен, с его гербицидами, может вторгаться в растительное сообщество с меньшими последствиями, чем Penicillia в сообщество почвенных микроорганизмов. Есть данные, что изменения численности носят характер пульсаций и происходят в течение очень коротких промежутков времени (Аристовская, 1972; Мирчинк, Паников, 1985). Наиболее непостоянным уровнем численности и биомассы бактерий отличаются почвы Крайнего Севера. Здесь биологические процессы развиваются с такой скоростью, что в течение 1-2 суток содержание бактерий может увеличиться или уменьшиться в 100-1000 раз (Аристовская, 1965). Последнее может быть связано не столько с изменением общей численности, сколько с особенностями метода посева и изменениями в физиологическом состояния микроорганизмов, так как известно, что в связи с выходом популяции из стресса полнота учета может повышаться на несколько порядков.

Можно ожидать различия в сезонных колебаниях численности бактерий и их биомассе, но закономерности в этих колебаниях между различными годами существуют (Lundgren, Soderstrom, 1983). Некоторые авторы, напротив, сходятся во мнении о невозможности описать закономерности сезонных колебаний некоторых факторов. Единственный фактор, который

показывал выраженный сезонный характер во время исследованного периода (Rastin et al., 1990), представлял собой FDA-активность.

1.1. Факторы, влияющие на динамику микробной биомассы в почвах.

Насколько широк и многообразен диапазон временной изменчивости микробной численности и биомассы в почвах, настолько многочисленны предполагаемые причины, вызывающие эту динамику. Факторы, рассматриваемые в литературе, могли бы быть разделены на несколько типов: климатические условия, почвенные условия, антропогенные воздействия и пространственный фактор.

Много данных о влиянии температуры, влажности, токсичности и аэрированности почвы, ее структуры, содержания в ней питательных веществ, растительности, применяемой обработки и др. на состояние микроорганизмов в почве (Nagel-de Boois, 1971; Wardle, Parkinson, 1990; Has sink et al., 1993; Winding, 1994). Эти факторы влияют на различные уровни биотической системы: молекулярный, клеточный, популяционный, уровень сообщества и даже экосистемы (Кипе, 1994). Несомненно, что микробное сообщество является экологическим маркером на стрессы в почвах (Кипе, 1994; Powlson, 1994).

По мнению многих авторов (Kjoller, Struwe, 1982) численность микроорганизмов в почвах регулируется только влажностью, которая является решающим фактором среды. Рахно (1961) установлено, что в холодное время года численность бактерий в почве больше, чем в теплое, и их количество изменяется пропорционально влажности. В тундрах пики численности часто происходят непосредственно после снегопадов в

результате изменений в условиях увлажнения в микрозонах (Kj oller, Struwe, 1982). Резкое падение содержания грибных гиф в подстилке от ноября к декабрю (Hunt, Fogel, 1983), объясняется вспышкой численности в ноябре в связи с обильным поступлением опада. Здесь следует отметить, что по наблюдениям Аристовской (1980) в тех случаях, когда весной и осенью жизнедеятельность микроорганизмов ограничивается высокой влажностью, максимум численности микрофлоры приходится на относительно сухие летние месяцы. Если влажность не является ограничивающим фактором, она имеет только малое влияние на почвенные биологические процессы (Rastin et al., 1990). Малое же количество биомассы летом может быть более активным, чем большая биомасса осенью (Nagel-de Boois, 1971; Jorgensen, 1990). Интересно, что численность бактерий показала более высокую степень корреляции с почвенной влажностью, чем биомасса (Clarholm, Rosswall, 1980). Другие авторы отмечают отсутствие корреляции между влажностью и количеством почвенных микроорганизмов и объясняют это возможным вымыванием бактериальных клеток из подстилки в нижележащие горизонты по аналогии с водорослями (Алексахина, Штина, 1984). Имеются данные, что колебания в содержании грибных гиф в почве (от 4 до 45% содержания) могут быть объяснены влажностью почвы и наличием органического вещества (Baath, Soderstrom, 1982). Влажность почвы, в свою очередь, зависит не только от выпадения осадков, но и от скорости испарения, т.е. от температуры и влажности воздуха. А эти последние факторы также сезонно зависимы.

Из-за испарения содержание воды в почве может быстро уменьшатся. Была найдена корреляционная связь между численностью FDA-окрашенных клеток и выпадением осадков (Lundgren, Soderstrom, 1983). AO-окрашенные клетки, включающие активные и бездействующие

микроорганизмы, не коррелировали с выпадением осадков, но коррелировали с влажностью почвы, что совпадало с результатами других авторов (Clarholm, Rosswall, 1980).

При изучении углеродного и азотного циклов микробной биомассы почв при различных температурах была обнаружена зависимость оборота биомассы от температурного режима: 40-60% помеченных С и N оставались в биомассе при 20-28° С, а при 4-12° С только 0-40% (Nicolardot, 1994). Другими авторами зависимость между числом бактерий и температурными изменениями в ежемесячных измерениях на протяжении трехлетнего наблюдения не найдена (Lundgren, Soderstrom, 1983). Ергенсен с соавторами рассматривали влияние длительных инкубаций при различных температурах на жизнеспособность почвенной биомассы в почве, которая не получала внешнего питательного субстрата (Jorgensen et al., 1990). В результате, биомасса падает вниз очень медленно при 15 и 25° С, и резко при 35°С (0,11%, 0,21% и 1,72% в день, соответственно). Количество органического углерода, минерализованного во время инкубации, было удвоено увеличивающейся температурой от 15 до 25° С в согласии с обычным правилом, но утроено при увеличении температуры до 35° С. Авторы, также отмечают, что инкубация почвы при более высоких температурах неблагоприятна для типа биомассы, найденного в умеренных почвах. Биомасса может упасть до 16% от своего первоначального значения, замечено даже более кардинальное падение - до 5-7% (Bonde, et al., 1988) Немаловажны, поэтому, условия и сроки хранения в лабораториях отобранных почвенных образцов. Хранение и высушивание на воздухе уменьшает длину мицелия и число бактерий (West et al., 1987). Результаты сравнения влияния хранения на показатели микробной биомассы, измеренной двумя методами (Priha, Smolander, 1993) показали,

что хранение ни при +6° С, ни при -18° С не повлияло на результаты фумигадионного определения, но по методу субстрат-индуцированного дыхания после хранения биомасса упала на 14%. Авторы, правда, относят различные результаты к различиям в пуле микробной биомассы, которые измеряют два эти метода. Падение в микробной биомассе при хранении возможно вследствие истощения субстрата (Wardle, 1992).

Остается дискуссионным вопрос о влиянии низких температур на развитие микроорганизмов (Рахно, 1964; Soderstrom, 1979). Несомненно, что некоторые почвенные биологические и биохимические факторы могут достигнуть очень высоких значений во время зимы несмотря на то, что почва заморожена (Rastin et al., 1990). Взгляды ученых на причины увеличения количества микроорганизмов в промерзших почвах расходятся. Одни считают, что увеличение численности является результатом их активного размножения, другие объясняют это десорбцией (Звягинцев, 1972). В литературе отмечается влияние температуры на активность почвенных микроорганизмов (Bath, Soderstrom, 1982; Limdgren, Soderstrom, 1983). Последние авторы заметили увеличение зимой в численности АО-окрашенных бактерий и уменьшение в численности FDA-окрашенных клеток в органических горизонтах почвы, что, по их мнению, вполне логично, поскольку низкие температуры неизменно ведут к уменьшению биологической активности почвы. Не исключено, что сказывается приостановление жизнедеятельности простейших (выедания) в зимний период (Рахно, 1974; Gupta, Germida, 1988).

Роль почвенной фауны в почвенных процессах, особенно во взаимоотношениях с микрофлорой, отмечают многие авторы (Clarholm, 1985; Clarholm, 1989; Couteaux, 1994). Количество грибного мицелия

заметно контролируется артроподами и нематодами (Soderstrom, Baath,

п

1979; Bardgett et al., 1993) вплоть до его поедания (Dash et al., 1986). По Кристенсен, микро- и мезобиота могут быть вообще видосиецифичными или, по крайней мере, видоселективными в своем питании, и что пастбищное питание значительно сильнее влияет на численность хищников и их жертв, чем стратегия случайных встреч (Cristensen, 1989). Багданавичене (1975) тоже считает, что учитывается не вся биомасса -бактерий, а только ее остаточная, непотребленная животными, часть. В экспериментах с микрокосмом была изучена взаимосвязь между бактериями и простейшими и влияние на нее режима увлажнения (Kuikman et al., 1989а; 19896). Результаты показали, что выпасание простейших вызывает активную минерализацию и оборот микробной биомассы с одновременным увеличением на 20% потребления растениями азота. Даже загрязнение тяжелыми металлами не влияло на активность питающихся бактериями нематод (Bardgett et al., 1994). Кроме того, простейшие, двигаясь через почву в поисках пищи, могут просто инокулировать новые субстраты транспортировкой бактерий, удерживающихся на поверхности их клеток (Vargas, 1990), а также влиять на бактериальную популяцию другими механизмами, например, увеличением доступности вещества его размельчением.

Уделяется внимание изучению влияния рН на почвенных обитателей. По некоторым данным, таксономический состав простейших снижается при рН 5,33; бактериальный избыток уменьшается при рН 5,34. Другие таксономические категории не были восприимчивы к увеличению кислотности (Niederlehner, Cairns, 1990).. Микроорганизмы живут в микрозонах, определяемых миллиметрами или меньше. Как результат, окружение, воздействующее на индивидуальную клетку, может быть

отличным от химической ситуации в окружающей почве (Karl, 1986). Следовательно, измерение pH, восстановительного потенциала, растворенного О2 или концентрации питательных веществ не дает непосредственной информации о ситуациях в различных микрозонах.

Имеются данные о зависимости динамики численности микроорганизмов от расположения экосистем на разных элементах рельефа (Никитина, Антоненко, 1982; Rastin et al., 1990; Gallardo, Schlesinger, 1992), что по мнению авторов, может служить одной из причин разногласий в интерпретации многочисленных данных по динамике численности микроорганизмов в разных почвах. В результате привноса аллохтонной органики динамика численности может носить пульсационный характер и меньше зависеть от других факторов. Отмечаются большие ежемесячные колебания биомассы на нижнем склоне, чем на верхнем, при этом на нижнем склоне максимальные пики биомассы грибного мицелия происходили на месяц раньше, чем на верхнем (Rastin et al., 1990).

Вообще, именно свойства почв объясняли 90-99% различий в доступных микроорганизмам субстратов (Srivastava, 1992). Попытки связать почвенную микробную биомассу с текстурой почвы и органическим веществом делают многие авторы. Большая агрегация почвы коррелирует с большим уровнем содержания органического вещества (Beare et al., 1994). По данным Кайзера с соавторами, значения биомассы и активности почвенной микрофлоры значительно коррелировали с содержанием глины и почвенной органики (Kaiser et al., 1992). Морфология и объем клеток in vitro изменяются в зависимости от увеличения пищевого статуса среды (West et al., 1987), при голодании клетки принимали коккальную морфологию с высоким объемом и низким соотношением области

поверхности к объему. На этой основе даже предложено характеризовать пищевой статус почвы и активность бактерий по соотношению числа палочковидных форм к коккальным (Clarholm, Rosswall, 1980). Аналогично, Никитина и др. (1982) предполагали, что совокупная общая поверхность бактерий почвы обратно коррелирует с количеством водорастворимого органического вещества почвы. Присутствие гиф на глубине 90-100 см по мнению авторов (Hunt, Fogel, 1983) показывает, что снабжение питанием здесь достаточное для роста грибных гиф. Эти авторы пришли к выводу, что влажность и почвенное органическое вещество высоко коррелируют, таким образом, их раздельное влияние невозможно определить.

Ергенсен с соавторами сомневаются во влиянии содержания органического субстрата на динамику микробной биомассы, предполагая, что почва достаточно обеспечена запасами субстрата, но существует факторы, препятствующие биомассе потреблять субстрат с большой скоростью и эти факторы температурочувствительны (Jorgensen et al., 1990). Что-то мешает микроорганизмам размножаться быстро и использовать все субстраты, которые в данное время они способны метаболизировать. Может быть важен недостаток биодоступных катионов, особенно в кислых почвах, ограничивающий микробную активность так, что мертвая биомасса и нативное органическое вещество не могут быть использованы с максимальной скоростью (Dumontet, Mathur, 1989). Поскольку микробные клетки обычно составляют меньше 1% объема почвы (Nannipieri, 1983), предположено, что лимитирующий фактор микробного распространения в почве представляет собой скорее благоприятное пространство, чем общее или физическое пространство. Мало микрозон в почве обеспечивает необходимое сочетание экологических условий для роста и

жизнедеятельности различных видов микроорганизмов. Поэтому в управляемых экспериментальных условиях (константа температуры и влажности), почва может быть рассмотрена в качестве системы с характерным "биологическим" пространством, которая определяет общий уровень биомассы. Большее содержание микробной биомассы, считают авторы, возможно при большей доступности субстрата. Важность температуры и влияния субстрата на активность микробов подчеркивают и другие авторы (Priha, Smolander, 1993), которые нашли, что общее дыхание почвенных микроорганизмов составило лишь 11-15% от субстрат-индуцированного.

Физико-химические свойства почвы могут повлиять на скорость микробного дыхания и ферментативную активность (Якутии, 1994; Gispert, Arcara, 1988). В других экспериментах (Kilbertus, 1980) размер вносимых в почвы бактерий изменялся согласно типу почвы, но был всегда меньше 1 мкм, соотношение диаметра бактерий к диаметру пор был всегда постоянен (d/D=l/3).

Изучалась также связь периодичности роста микроорганизмов с периодичностью первичного продукционного процесса растений (Евдокимова, 1976; Горбенко, 1986). Предполагается, что в буковых лесах до 10-20 % фотосинтатов может циклировать прямо к грибной микоризе (Harley, 1971). Более того, 14-15% чистой первичной продукции обнаруживается в спорах и оболочках эктомикоризных грибов. (Vogt et al., 1986). Запас питания, влажность почвы и физические условия имеют сильную взаимозависимость и поэтому влияют на биологические и биохимические процессы в почве сложным образом. Отсутствует прямое

объяснение того, как эти факторы влияют на численность и состав, их активность и биохимические процессы в почве.

Наконец, многочисленны работы по влиянию на состояние почвенной микробной биомассы различных видов загрязнения (тяжелые металлы, гербициды, пестициды), типов сельскохозяйственной обработки и т.д., но в рамках одной работы невозможно рассмотреть все средоообразующие факторы для почвенных микроорганизмов.

1.2. Распределение микроорганизмов по профилю поче.

Различные ландшафты характеризуются различным вертикальным распределением микроорганизмов в почвах.

Арктическая тундра - наиболее крайний случай с очень малым содержанием грибных пропагул и с выраженным уменьшением его по направлению к вечной мерзлоте (на 18-20 см под поверхностью). Субарктическая тундра имеет очень высокую продуктивность, которая превосходит продуктивность степи. В бедных пустынных почвах грибной рост ингибирован высушиванием в нескольких верхних см и количество колониеобразующих единиц достигает максимума на глубине 10-20 см. Работы по Биологической Программе (К]о11ег, 81ти\уе, 1982) подчеркивают тенденцию падения содержания грибов по профилю в степях и лесах. Тундровые почвы часто следуют этой же тенденции, но существенно различаются между собой и для некоторых из них характерен рост содержания микроорганизмов с глубиной. В двух степных почвах содержание грибов было относительно малым и уменьшение вниз по профилю было незначительным. По некоторым данным, однако, имелось

небольшое увеличение в содержание грибных гиф от поверхности к нижним горизонтам (Kjoller, Struwe, 1982). Возможно, это результат благоприятных условий, обусловленных глубоким проникновением корневой системы растений прериевых степей. В подзолистых почвах установлено большое содержание микроорганизмов в нижних горизонтах (Zvyagintsev, 1994). Относительно равномерное распределение численности бактерий по профилю почвы отмечалось Богоевым (1981), Головченко (1993). Значительное содержание микроорганизмов в минеральных горизонтах, естественно, не предполагает их высокого метаболизма. К аналогичному выводу пришли и другие авторы (Babuik, Paul, 1970). Отмечены различия по годам в распределении численности бактерий, причем наибольшее количество их зарегистрировано на глубине 20-30 см во втором гумусовом горизонте (Никитина, Антоненко, 1982). Распределение грибных гиф в горизонтах почвенного профиля также изменяется по сезонам (Hunt, Fogel, 1983; Van Gestel et a!., 1992), что указывает на важность сезонного отбора образцов в профиле для точного описания распределения: во время интенсивного выпадения осадков около 73% биомассы (г/м2) находятся в верхних 40 см почвы, в то время как летом лишь 54%.

Заселенность микроорганизмами нижних почвенных горизонтов по разным причинам изучена слабо. Исследователи чаще обращаются к пахотным горизонтам, либо к подстилке и верхним горизонтам целинных почв, что при господстве чашечного метода учета способствовало устойчивому представлению о преимущественной заселенности именно этих местообитаний. В нижних почвенных горизонтах гораздо меньше микроорганизмов, способных расти на стандартных средах, чем в верхних

(Лимарь, 1975; Богоев, 1981), что также способствовало мнению о слабой заселенности нижних горизонтов.

Показана значительная отрицательная логарифмическая корреляция численности грибных гиф с глубиной (Hunt, Fogel, 1983). Численность бактерий уменьшается при рассмотрении нижележащих горизонтов (Kanazawa, 1987; Okano, 1989; Мао, 1992), но по данным микроскопии снижение регистрируемого показателя происходит менее резко по сравнению с данными посева. Показатель обилия в нижних горизонтах по прямому методу составляет 80-200 миллионов клеток на г почвы (Лимарь, 1975; Кожевин, 1989), что в десятки тысяч раз больше, чем по данным посева.

Слабая заселенность микроорганизмами иллювиального горизонта объяснялась, во-первых, его непроницаемостью для бактерий и, во-вторых, содержанием периодина (Худяков, 1960). По данным Рыбалкиной (1957), напротив, в некоторых случаях для подзолов и подзолистых почв основная масса микроорганизмов, развивающихся на МПА, сосредоточена не в поверхностных, а в иллювиальных горизонтах. Аристовской (1965) показано то же: в профиле некоторых подзолов имеются два максимума численности микроорганизмов - в аккумулятивном и иллювиальном горизонтах. Вполне возможно, это проявление большей плотности почвы в этих слоях (Hunt, Fogel, 1983).

Интересно, что сопоставление данных численности микроорганизмов, учтенных на различных средах, показало, что кривые количественной динамики не совпадают (Голодяев, 1974), что свидетельствует о малой информативности метода посева.

Глава 2. БИОМАССА МИКРООРГАНИЗМОВ В РАЗЛИЧНЫХ ПОЧВАХ.

Литературные данные по содержанию микробной биомассы в почвах фрагментарны. Характеризуя биологическую активность почв, исследователи ограничивались фиксированием численности по посеву, в то время как содержание биомассы более объективно отражает биологическую активность почв (Аристовская, 1974). Бактериальные клетки и грибные пропагулы различных видов сильно отличаются друг от друга по размерам и весу, поэтому содержание микробной биомассы может существенно различаться при одной и той же численности микроорганизмов (Аристовская, 1980; Мирчинк, 1988). Затруднения при сопоставлении значений микробной биомассы почв, полученных различными авторами, вызывает, в первую очередь, различие единиц, использованных в публикациях.

В работе Хунт и Фогель сделана оценка продуктивности грибной биомассы, составившей 6666 кг на гектар, большинство которой поступит в круговорот в течение года (Hunt, Fogel, 1979). Известно, что гифы содержат огромное количество микроэлементов и, таким образом, осуществляя быструю циклизацию пула питательных веществ, поддерживают стабильность экосистемы иммобилизацией питательных веществ и сокращают выщелачивание из корневой зоны.

2.1. Соотношение грибов и бактерий в почвах.

В ранних работах по учету численности и биомассы микроорганизмов методом посева преобладало мнение о преимущественном содержании бактерий над грибами. Например, в работе Мишустина и Пушкинской (I960) приведено соотношение 90 к 3%. Отмечалось, что соотношение грибной и бактериальной биомасс меняется по сезонам (Никитина, Антоненко, 1982; Anderson, 1981). Границы годовых колебаний этого показателя составляли от 1.7 до 7.1 раз. Положительная корреляция была найдена между бактериальной биомассой и объемом почвенных пор с диаметром 0.2-1.2 мкм (Hassink et al., 1993). Зависимость соотношения содержания грибной и бактериальной биомасс от типа почвы обнаружил Kaczmarek (1984). В работе Ингмен с соавт. (Ingham, 1989) бактерии и бактериепитающиеся нематоды доминировали на лугу и в степи, а грибы и микроартроподы - в лесных экосистемах. По данным Ромелла и Чейза (цит. по Аристовской, 1965) в органогенных горизонтах почв хвойных лесов преобладала грибная биомасса, а в тех же горизонтах почв лиственных лесов - бактериальная, то есть, чем грубее гумус, тем большую роль в почвенной микрофлоре играют грибы. Неустойчивые цифры получены для подзолов, где соотношения между бактериями и грибами носят крайне непостоянный характер, что связано, вероятно с особенностями водного режима: в периоды временного избыточного увлажнения развитие грибов может быть до некоторой степени подавлено, и в микрофлоре доминируют бактерии - до 70% (Аристовская, 1965). Отмечено возрастание процентного содержания актиномицетов летом на фоне обычно наблюдаемого подавления биогенности почв (Мехтиев и др., 1974). В окультуренных почвах и в почвах с хорошо развитым дерновым горизонтом относительное количество грибов всегда незначительно по Аристовской (1980) и

основную массу микроорганизмов составляют бактерии. Несомненно, существует зависимость соотношения двух групп микроорганизмов от стадии сукцессии: подчеркивалось доминирование грибов на ранних этапах разложения растительных остатков (Beare et al., 1990), наблюдались изменения в соотношении грибной к бактериальной биомассах от 4:1 до 6:1 и обратно к 4:1 (в зависимости от использования добавленного субстрата) (Nannipieri et al., 1983).

Делались попытки соотнести размеры микробной биомассы с показателями почвенного дыхания. В некоторых работах установлена положительная корреляция между выделением С02 и микробной биомассой (Oades, Jenkinson, 1979; Ross et al., 1980; Sparling, 1981; Hasebe, 1985), но в других работах - нет (Frankenberger, Dick, 1983). Поэтому, вопрос о корреляции микробной биомассы с почвенным дыханием остается дискуссионным. И Обнаружена положительная связь между содержанием грибной биомассы и выделением С02 (Baruah et al., 1983) и сделан вывод о преобладающей роли грибной компоненты в почвенном дыхании.

Соотношение выделения С02 к содержанию микробной биомассы названо метаболическим коэффициентом ( qC02 ) (Anderson,Domsch, 1986). Этот коэффициент изменяется согласно видовому составу и физиологическому состоянию микрофлоры, наличию разлагаемого субстрата и различию климатических условий. Грибная компонента высоко эффективна в использовании субстрата и ассимилирует 30-40% С в новый мицелий (Alexander, 1977; Yanagida, 1984; цит. по Sakamoto, 1994). Наоборот, бактериальная микрофлора использует С неэффективно и ассимилирует только 5-10% субстратного С в новые клетки. Поэтому соотношение грибной и бактериальной биомасс может быть важным фактором,

влияющим на значение qC02, поскольку грибами освобождается меньше С02-С для каждой единицы метаболизированного субстрата, чем бактериями (Sakamoto, 1994). В этой работе отсутствие корреляции между общей микробной биомассой и qC02 авторы объясняют широким диапазоном значений для соотношения грибной и бактериальной биомассы. Широкий диапазон этого значения может быть ответственным за разброс значений qC02. Поэтому, авторы предполагают, что соотношение грибной биомассы к бактериальной - важный фактор, регулирующий взаимоотношение между выделением С02 и содержанием микробной биомассы.

Причиной раннего недоучета биомассы грибов является несовершенство используемых методов: отчасти то, что для такой огромной и гетерогенной группы микроорганизмов не может быть одной универсальной среды, да и не все грибы растут на питательных средах (Мирчинк, 1988), отчасти то, что во влажных почвах грибы находятся в состоянии стерильного мицелия, и результаты их количественного учета чашечными методами могут быть сильно занижены. Большинство работ с использованием прямой микроскопии, а также физиологического метода (Anderson, Domsch, 1978) показывают, что биомасса грибов в почвах больше, чем бактерий (без учета ризосферы), при этом результаты многих лабораторий совпадают (Anderson, Domsch, 1980; West et al, 1987; Okano et al., 1989; Behera et al., 1991; Henrot, Robertson, 1994;). По Никитиной и Антоненко (1982) грибная биомасса больше бактериальной в 40-60 раз в слое 0-30 см, глубже это соотношение выравнивается, и распределение более равномерное. Снижение грибной биомассы в ризосфере может быть следствием конкуренции бактерий и грибов (Okano, 1992). Изучение грибной компоненты почвенного микробоценоза долгое время сдерживалось

отсутствием прямых и надежных методов прямого учета грибных спор и мицелия непосредственно в почве, в последнее время положение изменилось (Князева и др., 1985; Полянская, 1988). Также серьезным изъяном в работах по определению биомасс отдельных компонентов микробного комплекса является игнорирование сукцессионных процессов (Звягинцев и др., 1994; Polyanskaya, Zvyagintsev, 1995).

В литературе отмечается адаптивное преимущество грибов, что, возможно и объясняет их обилие в почвах. Во-первых, высокая конкурентоспособность этой группы объясняется особенностями ее физиологии. По сравнению с бактериями грибы отличаются более экономным обменом веществ (Waksman, 1924, цит. По Аристовской, 1980). Во-вторых, распространению грибов способствует большое разнообразие их биохимических функций и умение перерабатывать труднодоступные органические вещества (Аристовская, 1980). В-третьих, способность продуцировать органические кислоты и добывать минеральные вещества является мощным оружием в борьбе за существование. Кроме всего, грибы являются более активными амонификаторами, и, наконец, преимущество им дает способность к мицелиальному росту. По данным Худякова (1960) проникновение грибов в плотно сцементированную гелем почву способствует распространению в ней бактерий. Вполне допустимо такое огромное преобладание грибного компонента над бактериальным и использование последними мертвой грибной биомассы как энергетического субстрата (Полянская, 1978, 1996; Parkinson, 1977; West et al.,1987).

Глава 3. ПРОСТРАНСТВЕННАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАСПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ В ПОЧВЕ.

Имеется значительная информация относительно физиологии почвенных микроорганизмов, но мало известно об их пространственном распределении в почве, особенно в микроразмерной шкале, соответствующей размерам микробных клеток (Звягинцев, 1987). Это частично является результатом недостаточной эффективности прямых методов для характеристики микробного сообщества без нарушений структурной целостности почвы (White et а!., 1994).

Эти авторы пытались оценить потенциал частичной хлороформной фумигации в качестве технологии, характеризующей пространственное расположение бактерий, введенных в почву. Большая живучесть инокулята наблюдалась, когда клетки первоначально были размещены в меньшие поры, слабое воздействие хлороформа ассоциируется с меньшим доступом к малым порам. В дополнении к размеру пор, важна также адсорбция клеток в качестве возможного механизма защиты клеток от обработки фумигацией. Клетки могут адсорбироваться к поверхностям через произведенный внеклеточный материал, разрушение которого требует больших инкубационных периодов. Различия в живучести клеток между использоваными почвами могут являться хорошим показателем различий в природе поровых структур, распределении размера пор по типам почв и в отношении водо- к воздухо-наполненному пространству пор. Почва, ассоциированная с наиболее низким процентом живучести клеток после фумигации, будет иметь значительно больший процент воздухо-наполненных пор. Пространственное распределение клеток в пределах почвенных агрегатов играет важную роль в определении микробных

трофических взаимодействий. Обычно считалось, что защищенность бактерий структурой пор почвы, обусловлена только размерами пор, в которые большие простейшие неспособны попасть. Поскольку размещение бактериальных клеток зависит от влажностных характеристик почвы, взаимодействие интродуцированных бактерий с простейшими будет зависеть от этого показателя. Миграция почвенных простейших в значительной степени ограничена непрерывными пленками воды, окружающей почвенные агрегаты.

Статистическую природу свойств почв исследователи поняли уже давно, по крайней мере, уже в 1901 году на страницах журнала "Почвоведение" шла дискуссия о целесообразности использования смешанных образцов (Дмитриев, 1995). Применение почвоведами разных стран и лабораторий методов статистических анализов показывает, что вероятностная природа почвенных явлений - давно не новость в научном мире, что без четкого понимания ее вряд ли возможно достаточно естественное понимание и описание сложных почвенных процессов и явлений. Почва - одно из самых сложных природных образований, результат одновременной деятельности многочисленных и разнородных факторов, определяющих протекание различных по природе, но взаимосвязанных процессов. При изучении таких систем учесть все факторы и процессы практически невозможно, тем более что ряд факторов, пусть даже временно, но может оставаться исследователю просто неизвестным (Дмитриев, 1995).

Несмотря на всем известную пространственную гетерогенность свойств почв, как физико-химических (Дмитриев, 1970; Леонтьев, 1974; Карпачевский, 1977; Brasewell, 1979; Harrison, 1979 (цит. поГолимбет, 1980); White et al., 1994), так и биологических (Аристовская, Худякова,

1977; Звягинцев, 1978), немногие авторы учитывают это явление в своих исследованиях. Вероятно, сказывается недостаточность навыков исследователей в использовании статистических методов, неумение, порой и нежелание мыслить статистически (Дмитриев, 1995).

Особенно важно учитывать пространственную неоднородность почв при изучении динамики почвенных свойств. В последнее время, как видно, исследованию динамики почвенных биологических процессов уделяется достаточно много внимания. Понять законы функционирования почвы как единого целого, а в частности, оценить масштабы деятельности почвенных микроорганизмов, невозможно без учета динамики их численности и биомассы, трудность изучения которой также обусловлена такими свойствами почв, как гетерогенность, многофазность и пространственная неоднородность. Показатели биологической активности почв изучены достаточно широко, но работы по почвенной биодинамике будут недостаточно полными без твердой уверенности, что получаемые во времени различия есть следствие динамических процессов, а не пространственной неоднородности почвы. Споры о роли тех или иных экологических и других факторов в динамике показателей биологической активности почв, возможно, потеряют всякий смысл, если одновременно не учитывать взаимоотношения временного и пространственного факторов.

Какова реальная величина вклада пространственного фактора в исследованиях по динамике численности и биомассы микроорганизмов почв - до сих пор спорно. Правомерно ли говорить о его влиянии на сезонную, годовую и прочие динамики показателей почвенных микроорганизмов или эти временные изменения - лишь следствие неоднородности состава и свойств почв?

В литературе предложены способы устранения влияния пространственного фактора, начиная с взятия смешанных образцов, которые просто усредняют искомые значения, но никак не устраняют влияния пространственного фактора. Кроме того, микробы редко представлены в концентрациях, идеально подходящих для анализа. Большинство образцов должно быть сконцентрировано (мембранное фильтрование, центрифугирование) или в некоторых случаях разбавлено, что уже искажает достоверную картину пространственного распределения микроорганизмов.

Отмечается важность количества отобранных образцов. Kirchman с соавторами (цит. по Karl, 1986) определили, что расхождение вариабельности в общей бактериальной численности вносилось индивидуальными единичными отборами. При инкубировании почвенных образцов большое значение имеют размеры временных интервалов между замерами. В некоторых случаях даже интервал 1-3 часа может быть чрезмерно большим (Karl, 1986).

Делались попытки использовать биометры, предложенные Рахно, что так и не "прижилось" на практике; и использование показателя кратности пространственного разброса (Голимбет, 1980), позволяющего, по мнению автора, вычленять влияние пространственного фактора из получаемых результатов нахождением отношения максимальной и минимальной величин биологической активности почвы в данный момент времени. Такое устранение колебаний, обусловленных пространственным разбросом, позволяет сопоставлять получаемые кривые.

Вклад пространственного фактора в измерении численности микроорганизмов оценивается разными авторами по-разному (Ефремова, 1978, цит. по Голимбет, 1980; Паринкина, 1979). Доля пространственного фактора зависит от сезона: летом и осенью он значительнее. Очевидно, поздней осенью и зимой степень гетерогенности почвенных участков уменьшается вследствие прекращения вегетации растений и не такого явного варьирования совокупности внешних факторов среды (Голимбет, 1980).

Отмечается больший разброс во времени и пространстве содержания грибных гиф, чем численности бактерий: для грибов на долю недостоверных флуктуации, то есть имеющих амплитуду, не выходящую за пределы ошибки опыта, приходится 50%, что в 1,5 раза меньше, чем для бактерий (Голимбет, 1980). Автор приходит к выводу, что необходимым условием для изучения временной динамики численности является разграничение флуктуаций биологической активности, обусловленных временным и пространственным факторами.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Гейдебрехт, Валентина Викторовна

выводы

1.Впервые прямым методом люминесцентной микроскопии изучено распределение численности и биомассы основных групп микроорганизмов по профилю зональных типов почв. Показано, что основной компонентой всех изученных микробных систем являются грибы, что микробная биомасса распределена по профилю большинства почв относительно равномерно и что основные запасы микробной биомассы, как правило, сосредоточены в более мощных минеральных горизонтах.

2.Установлено, что общие запасы микробной биомассы во всех изученных почвах весьма значительны и в зависимости от типа почвы и мощности профиля составляют от нескольких тонн до несколько десятков тонн в пересчете на гектар, причем на долю грибов в разных почвах приходится от 88 до 99% всей микробной биомассы, в то время как доля прокариот составляет от 1 до 12%.

3.Изучено влияние различных факторов на численность основных групп микроорганизмов в почве. Показано, что их численность, и биомасса флуктуируют в зависимости от года наблюдения., т.е. наиболее значимыми факторами является время и влажность.

4.Показана значимость реальных диаметров спор и мицелия грибов в различных почвах и их разных горизонтах для расчетов запасов грибной биомассы в этих местообитаниях. Результаты расчетов, основанных на реальных значениях диаметров, существенно расходятся с результатами традиционных расчетов.

5.Показано, что нет прямой корреляции между наличием органического субстрата в различных типах почв и различных горизонтах, содержанием в них микроорганизмов, в первую очередь грибов, и интенсивностью дыхания. При этом большая часть грибной биомассы в этих местообитаниях представлена живыми спорами и мицелием.

6.Установлено, что доля углерода микробной биомассы в запасах углерода содержащегося в почве органического материала (на глубине до 1 м) весьма велика и составляет от 3 до 42% в зависимости от срока взятия образцов и типа почв.

7.Показано, что в условиях эксперимента пространственная неоднородность почвы по таким показателям как численность основных групп микроорганизмов была невелика и не препятствовала наблюдению динамики численности микроорганизмов в почве. Наблюдалась невысокая, но достоверная корреляция между численностями основных групп микроорганизмов в ходе сукцессии в почве. Отмечена тенденция к периодичности колебания численности некоторых групп микроорганизмов с периодом в 7 суток.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гейдебрехт, Валентина Викторовна, 1999 год

ЛИТЕРАТУРА

1. Афремова В .Д., Горбенко А.Ю., Паншеов Н.С. Ежедневная и

внутрисуточная динамика интенсивности дыхания почвы i i Тез. докл. VII съезда Всес. общ. почвоведов. Ташкент. 1985. С. 163.

2. Алексахина Т.Н., III тина Э.А. Почвенные водоросли лесных биогеоценозов i i М.: Наука. 1984. 149 с.

3. Аристовская Т.В. Микробиология подзолистых почв /7 M.-JL,

Наука. 1965. 186 с. %i

4. Аристовская Т.В. Микробиология процессов п очв о о бр а з ов а ния Н

Л., Наука. 1980. 187 с.

5. Аристовская Т.В. Теоретические аспекты проблемы численности, биомассы и продуктивности почвенных микроорганизмов // Вопросы численности биомассы и продуктивности почвенных микроорганизмов. Л.: Наука. 1972. с. 7-20.

6. Аристовская Т.В., Багданавичене З.П., Ефремова Т.Н. Динамика изменений размеров бактериальной биомассы в почвах разных географических зон if Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин. 1974. с. 23-30.

7. Аристовская Т.В., Худякова Ю.А. Методы изучения микрофлоры почв и ее жизнедеятельности // Методы стационарного изучения почв. М. 1977. с. 241-286.

8. Багданавичене З.П. Динамика изменений численности и биомассы бактерий в дерново-подзолистой супесчаной почве Литовской ССР // В кн.: Закономерности развития почвенных микроорганизмов. Л., 1975. 287 с.

9. Богоев В.М. Количественная оценка численности, биомассы и биологической активности почвенных микроорганизмов в экосистемах некоторых природных зон /7 Автореф. дис... канд. биол. наук. - М.: МГУ. 1981. 25 с.

10.Богоев В.М., Гильманов Т. Г. Численность и биомасса микроорганизмов в почвах некоторых зональных экосистем // Биологические науки. 1982. № 7, С. 80-83.

11 .Випоградсшш С.Н. Микробиология почвы // Москва. 1953, 792 с.

12.Голимбет В.Е. Временные и пространственные изменения, некоторых показателей биологической активности дерново-подзолистой почвы /7 Дисс. канд. биол. наук. М: МГУ. 1980. 172 с.

13.1'оловченко A.B. Особенности пространственного распределения и структуры микробных комплексов болотно-лесных экосистем /7 Дисс. канд. биол. наук. М: МГУ. 1993. 165 с.

14.Головченко A.B., Полянская Л.М. Сезонная динамика численности и биомассы микроорганизмов но профилю почвы // Почвоведение. 1996. № 10. С. 1277-1233.

15.Головченко А., Полянская Л.М., Особенности годовых сукцессия микроорг анизмов в почвах Южной тайги //Почвоведение, 1999 (в печати).

!5.Головченкс A.B., Полянская Л.М., Добровольская Т.Г., Васильева Л.В., Чернов И.Ю., Звягинцев Д.Г. Особенности пространственного распределения и структуры микробных комплексов болотно-лесных экосистем // Почвоведение. 1993. № 10. С. 78-89,

17.Голодяев Г.И. Численность и биомасса микроорганизмов лугово-бурых оподзоленных почв Приморья // Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин. 1974. с. 88-91.

18.Горбенко А.ГО. Материальный баланс и динамика роста почвенных микроорганизмов в агр о биогеоценозе // Дисс. канд. биол. наук. М: МГУ. 1986. 145 с.

19.Демкина Т.С., Мирчинк Т.Г. Распределение биомассы грибов в некоторых почвенных типах // Вестн. МГУ, сер. почвоведение, 1983.

4. С, 36-42.

20.Дмитриев Б.А. Об использовании дисперсионного анализа при изучении пространственной вариабельности свойств почв /7 Закономерности пространственного варьирования свойств почв и информационно-статистические методы их изучения. 1970. М. Наука, с. 81-95.

21.Дмитриев Е.А. О почвенных границах и элементах организации почвы //Почвоведение, 1994,14 5, С.667-678.

22.Евдокимова Г.А. Динамика биологической продуктивности бактериальных сообществ в ризосфере злаков // Почвоведение. 1976.

12 Р. 97-102.

23.Ефремова Т.Н. Динамика кратковременных колебаний численности

в некоторых почвах полупустыни // В сб.»Закономерности развития почвенных микроорганизмов», Ленинград. Почв.музей им. В. В .Докучаева, 1975, С .77-86.

24.Ефремова Т.Н. Динамика кратковременных колебаний численности бактерий в некоторых почвах полупустыни /7 Закономерности развития почвенных микроорганизмов. Л. почв, музей им. В.ВДокучаева. 1975.

25.Звягинцев Д.Г. Взаимодействие микроорганизмов с твердыми поверхностями // М: МГУ. 1973. 175 с.

26.Звягинцев Д.Г. Методы учета численности микроорганизмов в почвах // Сб.: Вопросы численности биомассы и продуктивности почвенных микроорганизмов. Л.: Наука. 1972. с. 37-48.

27.Звягинцев Д.Г. Подготовка почв с помощью ультразвука к количественному учету микроорганизмов Я Вестн. МГУ, сер. биол. почв. 1968. №3.6. 127-129.

28.Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы // М., МГУ. 1987. 256 с.

¿9.Звягинцев Д.1Дмитриев &.А., Кожевин li.A. О люминесцентномикроекогшчееком изучении почвенных микроорганизмов // Микробиология. 1978. Т. 47. С. 1091-1096.

30.Звягинцев Д.Г., Добровольская Т.Г., Полянская Л.М.,Чернов И.Ю. Теоретические основы экологической оценки микробных ресурсов почв//Почвоведение. 1994. № 4 с. 65-73.

31 .Карпачевский Л.О. Пестрота почвенного покрова в лесном биогеоценозе // М. МГУ. 1977.

32.Князева И.Н., Полянская Л.М., Кожевин П.А., Звягинцев Д.Г. Учет почвенных микроорганизмов с помощью микроскопии при низкой численности объектов // Вести. МГУ, сер,, почвоведение. 1985. т. 2 с. 62-70.

33.Кожевин П.А., Полянская Л.М., Звягинцев Д.Г. Динамика развития

различных микроорганизмов в почве // Микробиология. 1979. Т. 48. № 4. С. 490-494.

34.Кожевин П.А. Микробные популяции в природе // М.: МГУ. 1989. 175 с.

35.Леонтьев А.К. Определение пестроты почвенного плодородия опытной делянки и участка и ее использование в агрохимических исследованиях // Почвоведение. 1974. № 2 с. 45-51.

36.Лимарь Т.Е., Кожевин H.A., Звягинцев Д.Г. Сравнение количества микроорганизмов в почвах разных типов, выявленного с помощью чашечного метода и люминесцентной микроскопии // Научн. докл. высш. школы, сер. биол. науки. 1975. № 9 с, 134-138.

37.Методы почвенной микробиологии и биохимии // М.: МГУ. 1991. 303 с.

38.Мехтиев С.Я., Чернобровина P.M., Пресман Л.М. Сезонные изменения численности микроорганизмов в почвах Молдавии // В сб. Динамика микробиологических процессов и обусловливающие ее факторы. Таллин. АН ЭССР. 1974. с. 92-97.

39.Мирчинк Т.Г. Почвенная микология // М., МГУ. 1988. 224 с.

40.Мирчинк Т.Г., Паншсов Н.С. Современные подходы к оценке биомассы и продуктивности грибов и бактерий в почве // Успехи микробиологии. 1985. т. 20 с. 198-227.

41. Мишустин E.H. Ассоциации почвенных микроорганизмов // Наука. М. 1975

42.Мишустии E.H. Численность и динамика микробного населения почвы // Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин. 1974. с. 6-8.

43.Мишустин E.H., Пушкинская O.E. Эколого - географические закономерности в распространении почвенных микроскопических грибов. Факторы, определяющие размножение микроскопических грибов в почве // Изв. АН СССР, сер. биол. i960. № 5.

44. Никитина 3.11, Антоненко А.М. Бактериальная и миделиальная

биомасса в почвах таежных экосистем Прииртышья // Виол, науки. 1982. № 7.

45.Орлов Д.С., Бирюкова O.I I. Запасы углерода органических соединений в почвах Российской федерации // Почвоведение. 1995. №1 с. 21-32.

46.Павлова O.G., Полянская Л.М., Кочкина Г.А., Иванушкина Н.Е., Звягинцев Д.Г. Особенности микробной сукцессии в почвах Окского заповедника //Почвоведение, 1999 (в печати).

47.Паииков Н.С. Кинетика роста микроорганизмов// М.: Паука. 1992. 310 с.

48.Паников П.С., Палеева М.В., Дедыш С.П., Дорофеев А.Г. Кинетические методы определения биомассы и активности различных групп почвенных микроорганизмов // Почвоведение. 1991. № 8 с," 109-120.

49.Паринкина О.М. Динамика развития бактериальных сообществ в почвах южных тундр Таймыра // Биодинамика и плодородие почвы. 1979. Таллин. АН ЭССР. с. 100-103.

50.Полянская Л.М. Микробная сукцессия в почве: Автор еф. дисс.... докт. биол. наук. М: МГУ. 1996. 96 с.

51.Полянская Л.М. Популяция Streptomyces olivocinereus в почвах разных типов /7 Дисс.... канд. биол. наук. М.: МГУ. 1978. 136 с.

52.Полянская Л.М. Прямой микроскопический подсчет спор и мицелия грибов в почве // Тез. конф. "Изучение грибов в биогеоценозах". Свердловск. 1988. 30 с.

53.Полянская Л.М., Гейдебрехт В.В., Звягинцев Д.Г. Биомасса грибов в различных типах почв //Почвоведение. 1995а. № 5 С. 566-572.

54.Полянская Л.М., Гейдебрехт В.В., Степанов А.Л., Звягинцев Д.Г. Распределение численности и биомассы микроорганизмов по профилям зональных типов почв //' Почвоведение. 1995b. № 3 С. 322-328.

55.Полянская Л.М., Головченко A.B., Звягинцев Д.Г. Микробная биомасса в почвах И Доклады АН РАН. 1995с. Т. 344. № 6. С. 846848.

56.Полянская Л.М., Головченко A.B., Звягинцев Д.Г. Определение жизнеспособности грибных пропагул в почве // Микробиология. 1998, т.67, N 6, С.832-836.

57.Полянский М.Р. Воспроизводственные циклы в почве в свете традиционной концепции циклического времени //Социокультурная динамика в период становления постиндустриального общества: закономерности, противоречия, приоритеты. Материалы к III Международной Кондратьевской конференции, Москва. 1998.

С.447-450.

58.Рахно П.Х. О сезонности развития бактерий в почвах Эстонской ССР // Изв. АН СССР, сер. биол. 1961. тЛО Jsfe 3.

59.Рахно П.Х. Развитие исследований количественной динамики микроорганизмов в Эстонской ССР // Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин. 1974. с. 61-68.

60.Рахно Г1.Х. Сезонная количественная динамика почвенных бактерий. Таллин. 1964. 235 с.

61.Рыбалкина А.В. Микрофлора тундровых, подзолистых и черноземных почв // В кн.: Микрофлора почв Европейской части СССР. Изд. АН СССР. М. 1957. 258 с.

62.Рыыс О. Состояние исследований по биодинамике почвы.// Динамика микробиологических процессов в почве. Таллин. 1974. с. 8-15.

63.Худяков Я.П. Биологические основы окультуривания подпочвенных горизонтов подзолистых почв // Тр. Инст. микробиол. АН СССР. I960, т. 7.

64.Якутин М.В. Биомасса и активность микроорганизмов пойменных

почв Средней Оби // Почвоведение. 1994. К® 12 с. 70-76.

65. Alef К. Estimation of microbial biomass in soil: A critical view // Zeitschrift Fuer Pflanzenernaehrung Unci Boetenkuiide. 1993. V. 156 P. 109-114.

66.Alexander M. // Introduction to soil microbiology. 1977. 2nd edn. Wiley & Sons. New York.

67.Anderson J.P.E. Methods to evaluate pesticide damage to the biomass of the soil microflora // Soil Biol. Biochem. 1981. V. 13 P. 149-153.

68.Anderson J.P.E., Bignell P.E. Bacteria in the food, gut contents and faeces of the litter-feeding millipede Glomeris marginata (Yillers) // Soil Biol. Biochem. 1980. V. 12 P. 252-254.

69. Anderson J.P.E., Domsch K.N. A physiological method for the quantitative measurement of microbial biomass in soils // Soil Biol. Biochem. 1978. V. 10 P. 215-221.

70.Anderson J.P.E., Domsch K.N. Quantities of plant nutrients in the microbial biomass of selected soils // Soil Sci. 1980. V. 130 P. 211-216.

71 .Anderson J.P.E., Westmoreland D. Direct counts of soil organisms using a fluorescent brightener and a europium chelate // Soil Biol. Biochem. 1971. V. 3 P. 85-87.

72.Anderson Т.Н., Domsch K.H. Carbon assimilation and microbial activity in soil H Z. Pflanzenernaehr. Bodenkd. 1986. V. 149 P. 457-468.

73.Baath, E. and Soderstrom, B. Seasonal and spatial variation in fungal biomass in a forest soil is Soii Biol. Biochem. 1982. V. 14 P. 353-358.

74.Babuik L.A., Paul E.A. The use a fluorescein isothioeyanate in the determination of the bacterial biomass of grassland soil 11 Can. J. Microbiol. 1970. V. 16 P. 57-62,

75.Bard.gett, R.D., Whittaker, J.B., and Frankland, J.C. The diet and food preferences of Onychiurus procampatus (Collembola) from upland grassland soils // Biology and Fertility of Soils. 1993(a). V.16 P. 296-298.

76.Bardgett, R.D., Whittaker, J.B., and Frankland, J.C. The effect of collembolan grazing on fungal activity indifferently managed upland pastures: A microcosm studv // Biol. Fertil. Soils. 1993(b). V. 16 P. 253262.

77.Bardgett, R.D., Speir, T.W., Ross, D.J., Yeat.es, G.W., and Kettles, H.A. Impact of Pasture Contamination by. Copper, Chromium, and Arsenic Timber Preservative on Soil Microbial Properties and Nematodes

// Biol. Fertil. Soils. 1994. Y. 18 P, 71-79.

78.Baruah, M. and Mishra, R.R. Carbon-dioxide evolution and microbial population in flooded and upland rice (Oryza sativa L.) field soils of north-east India // J. Soil Biol. Ecol. 1983. Y. 3 P. 69-76.

79.Beare, M.H., Cabrera, M.L., Hendrix, P.F., and Coleman, D.C. Aggregate-Protected and Unprotected Organic Matter Pools in Conventional-Tillage and No-Tillage Soils// Soil Sci. Soc. Amer. J. 1994. V. 58 P. 787-795.

80.Bea.re, M.H., Neely, C.L., Coleman, D.C., and Hargrove, W.L. A substrate-induced respiration (SIR) method for measurement of fungal and bacterial biomass on plant residues // Soil Biol. Bio eh em. 1990. V. 22 P. 585-594.

Sl.Behara B., Wagner G.H. Microbial growth rate in glucose amended soil // Soil Sci. Soc. of Amer. Proc. 1974. V. 38 P. 591-597.

82.Behera, N., Pati, D.P., and Basu, S. Ecological studies of soil inicromngi in a tropical forest soil of Orissa, India // Tropical Ecology. 1991. V. 32 P.. 136.

83.Bonde T.A., Lindberg T. Nitrogen mineralization kinetics in soil during

long-term aerobic laboratory incubations: A case study // J. Environ. Qual. 1988. V. 17 P. 414-417.

84.Brasewell J.M., Robertson C.W., Logan J. Variability of organic matter and exchangeable cations within the A2 horizon of an iron podsol // J. Soil Sci., 1979, N 2. p.327-332.

85.Buchanan M., King L.D. Seasonal fluctuations in soil microbial biomass carbon, phosphorus, and activity in no-till and reduced-chemical-input maize agroecosistems // Biol. Fertil. Soils. 1992. Y. 13 P. 211-217.

86.Burauel P, Burmhard B. // Mitteilgn.Dtsch. Bodenkundl. Ges. 1991. 66\1, P. 467-470.

87.Casida L.E. Continuously variable amplitude contrast microscopy for

the detection and study of microorganisms in soil //Appl. Environ. Microbiol. 1976. V. 31 P. 605-608." SS.Casida L.E. Infrared color photograph: Selective demonstration of bacteria//Science. 1968. VA59 P. 199-200.

89.Casida L.E. Microorganisms in unamended soil as observed by various forms of microscopy and staining // Appl. Microbiol, 197!. V. 21 P. 10401045.

90. Christensen M. A view of fungal ecology ¡1 Mycologia. 1989. V. 81 Ks ] P. 1-19.

91.Ciardi C., Nannroieri P. A comparison of methods for measuring ATP in soil // Soil Biol. Biochem. 1990. V. 22. P. 725-727.

92.Clarholm M. Effects of plant-bacterial-amoebal interactions on plant uptake of nitrogen under field conditions // Biol. FertiL Soils. 1989. V. 8

P. 373-378.

93.Clarholm M. interactions of bacteria, protozoa and plants leading to mineralization of soil nitrogen// Soil Biol. Biochcm. 1985. V. 17 P. 181187.

94.Clarholm, M. and Ross wall, T. Biomass and turnover of bacteria in a

forest soil and a peat // Soil Biol. Biochem. 1980. V. 12 P. 49-57.

95.Collins, H.P., Rasmussen, P.E., and Douglas, C.L. Crop rotation and residue and management effects on soil carbon and microbial dynamics // Soil Sci. Soc. Amer. J. 1992. V. 56 P. 783-788.

96.Couteaux M.M., Bottner P. Biological interactions between fauna and the microbial community in soils. / Beyond the biomass. Compositional and Functional Analysis of Soil Microbial Communities, Edited by K.Ritz, Y.Dighton, K.E.Giller. 1994. P. 159473.

97.Couteaux M.M., Henkinet R., Bottner P. Anomalies in microbial biomass measurements in asid organic soils using extractable carbon following fumigation // Soil Biol. Biochem. 1990. V. 22 P. 955-957.

98.Coutea.ux M.M., Henkinet R., Pitta P., Bottner P., Billes G., Palka L. and Vanier G. Native carbon mineralization of an acid organic soil after use of the chloroform-fumigation method to estimate microbial biomass // Biol. FertiL Soils. 1989, V", 8 P. 172-177,

99.Dash, H.K., Beura, B.N., and Dash, M.C. Gut load, transit time, gut microflora and turnover of soil, plant and fungal material by some tropical earthworms// Pedobiologia. 1986. V. 29 P. 13-20. "

100.Dumontet, S. and Mathur, S.P. Evaluation of respiration-based methods for measuring microbial biomass in metal-contaminated acidic mineral and organic soils fi Soil Biol. Biochem. 1989. V. 21 P. 431-436.

101.Fairbanks B.C., Woods L.E., Bryant R.J., Elliot E.T., Cole C.V., Coleman D.C. Limitation of ATP estimates of microbial biomass /7 Soil Biol. Biochem. 1984. V. 16 P. 549-558.

102.Fogel R. Hunt G.A. Fungal and arboreal biomass in a Western Oregon Douglas-fir ecosystem: distribution patterns and turnover // Canadian Journal of Forest Research. 1979. V, 9. P. 245-256.

103.Frankeriberger W.T., Dick W.A. Relationships between enzyme activities and microbial growth and activity indices in soil // Soil Sci. Soc. Am. J. 1983, V. 49. P. 945-95 L

104.Frank!and J.C. Estimation of live fungal biomass If Soil Biol. Biochem. 1975. V, 7 P. 339-340.

105.Frankland J.C. Importance of phase-contrast microscopy for estimation of total fungal biomass by the agar-fllm technique // Soil Biol. Biochem. 1974. V. 6 P. 409-410.

106.Gallardo A., Schlesinger W.H. Carbon and nitrogen limitations of soil microbial biomass in desert ecosystems // Biogeochemistry. 1992. V. 18 P. 1-17.

107.Garcia F.O., Rice C.W. Microbial Biomass Dynamics in Tallgrass Prairie // Soil Sci. Soc. Amer. J. 1994. V. 58 P. 816-823.

lOS.Gispert M.A., Arcara P.G. A study of the biological activity of different soils of the Mediterranean region: the relationship between enzyme activities, rates of respiration and bacterial biomass If Agrochimica. 1988. V. 32 P. 491-499.

i09.Goodav G.W. An autoradiographic study of hyphal growth of some fungi. //J. Gen. Microbiol. 1971. V. 67 P. 125-133"

I lO.Gregorich E.G., Wen G., Voroney R.P., Kachanoski R.G. Calibration of a direct chloroform extraction method for measuring soil microbial biomass C // Soil Biol. Biochem. 1990. V. 22 P. 1009-1011.

111 .Gupta V.V.S.R., Germida, J J. Distribution of microbial biomass and its activity in different soil aggregate size classes as affected by cultivation // Soil Biol. Biochem. 1988(a). ¥. 20 P. 777-786.

112.Gupta V.V.S.R., Germida, J J. Populations of predatory protozoa in field soils after 5 years of elemental S fertiliser application if Soil Biol. Biochem. 1988(b). V. 20 P. 787-791.

113-Hanssen J.F., Thingstad T.F., Gosoyr J. Evaluation of hyphal lengths and fungal biomass in soil by a membrane filter technique // Oikos. 1974. V. 25. P. 102-107.

114.Harley J.L. Fungi in ecosystems if J. Ecol. 1971. V. 59 P. 653-668.

115.Harrison A.F. Variation of four phosphorus properties in woodland soils // Soil Biol. Biochem. 1979. V. 11 P. 393-403.

116.Hasebe, A., Kanazawa, S., and Takai, Y. Microbial biomass in paddy soil, I. Microbial biomass calculated from direct count using fluorescence microscope II Soil Science and Plant Nutrition, 1985. V. 30'P. 175-187.

117.Hassink, J., Bouwman, L.a., Zwari, K.B., and Brussaard, L. Relationships between habitable pore space, soil biota and mineralization rates in grassland soils // Soil Biol. Biochem. 1993. V. 25 P. 47-55.

llB.Henrot, J. and Robertson, G.P. Vegetation removal in two soils of the humid tropics: Effect on microbial biomass // Soil Biol. Biochem. 1994. V. 26 P. 111-116.

119.Hintze Th., Gehlen P., Schroder D. Mitteilgn.Dtsch. RodenkimdL Ges.

1991, 66/1 P. 503-506.

!20.Hoppe H.G. Analysis of actively metabolising bacterial populations with the autoradiograiic method // Microbial Ecology of a Brackish Water Environment, / Rheinbeimer G., ed, / Springer - Yerlag. Heidelberg. 1977. P. 179-197. 121.Hunt G.A., Fogel R, Fu.ifc.ii Ip ph:l 1. _ -, hi m Oregon

Douglas-iir stand if Soil Biol liiourivm. r 5 5 P 641 -M9. 122Ingham, E.R., Coleman, D.C., and Moore, J.C. An analysis of food-web structure and function in a shorigr&si prairie, a mountain meadow, and a lodgepole pine forest // Biol. Fertil. Soils. 1989, V. 8 P. 29-37. 123.Ingham, E.R., Griffiths, R.P., Cromack, K., Entry, J.A. Comparison of direct vs fumigation incubation microbial biomass estimates from ectomycorrhizal mat and non-mat soils // Soil BioL Biochem. 1991. V, 23 P. 465-471.

124.1ngham, E.R., Horton, K.A. Bacterial, fungal and protozoan responses

to chloroform fumigation in stored soil//Soil Biol. Biochem. 1987. V. 19 P. 545-550.

!25.Joergensen R. G., Brookes P. C., Jenkinson D. S. Survival of the soil microbial biomass at elevated temperatures // Soil Biol, Biochem. 1990. V, 22 №8 P. ! 129-1136,

126.Kaczmarek. W. A comparisons of bacterial and fungal biomass in several cultivated soils // Acta Microbiologica Polonica. 1984, V.33 P. 239-247.

127.Kaiser, E.A., Mueller, T., Joergensen, R.G., Insam, H., Heinemeyer, O. F'/i'mi' m of methods to estimate the soil microbial biomass and the relationship vvith soil texture and organic matter // Soil BioL Biochem.

1992. V. 24 P. 675-683.

UP p;rr-zar./a, s, Amino sugar content., fungal biomass, and beta-aceiyigkicosammidase activity in forest soils // Soil Science and Plant Nutrition. 1987. V. 33 P. 387-398. '

129.Karl D.M. Cellular nucleotide measurements and application in microbial ecology // Microbiol. Rev. 1980. ¥. 44. P. 739-796.

130,Karl D.M. Determination of in situ microbial biomass, viability, metabolism, and growth, / Bacteria in Nature. V. 2. Methods and Special applications in Bacterial Ecology. / Y.S.Peinelexter and E.K.Leadbetter, eds. / Plenum Press. New York and London. 1986. P, 55-89,

13' ► iibrrtu m i Hi io «ut n i »i lie« mlationsmp with

uc i <■ iu l t z ^ I * } t t v. mt// Revue

I p ,s n t n-r r (J> 1 '-111 I / I si ~57'

V. , * a )ceuixerice and

133.Kuikman, P.J. and Veen, J, A. The impact of protozoa on the

availability of bacteria! nitrogen to plants // Biol Fertil. Soils. 1989. V. 8 P. 13-48. "

134.Kuikman, PJ., Vuuren. M.M.I., Veen, J.A., Van-Vuuren, M.M.I., and Van-Veen, J.A. Effect of soil moisture regime on predation by protozoa of bacterial biomass and the release of bacterial nitrogen /7 Agriculture, Ecosystems and Environment. 1989. V. 27 P. 271-279.

135.Kunc F. Methods for the analysis of soil microbial communities./ Beyond the biomass. Compositional and Functional Analysis of Soil Microbial Communities. Edited bv K.Ritz, Y.Dighton, K.E.Giller. 1994. P. 23-29.

136Xarsson K.. Weibull C., Cronberg G. Comparison of light and electron microscopic determinations of the number of bacteria and algae in lake water H Appl. Environ. Microbiol. 1978. V. 35 P. 397-404. 137.Laudelout. IL and Lambert, R. Seasonal variation m the soil microbial population. 2, Effect on nitrogen mineralisation in soil // Revue d'Ecologie et de Biologie du Sol. 1982. V. 19 P. 1-15. 138Xiao. Y.N. Methods of measuring the biomass of soil microorganisms in grassland // Research on Grassland Ecosystem. 1988. V. 9 № 2 P. 233-238.

139.Lundgren B. Fluorescein diacetate as a stain of metaboiicallv active bacteria in soil // Dikes. 1981. V. 36 P. 17-22.

140.Lund.gren B., Soderstrom B. Bacterial numbers in a pine forest soil in relation to environmental factors // Soil Biol. Biochem, 1983. V. 15

P. 625-630.

141 .Mao. D.M,. Min, Y.W., Yu, L.L., Martens, R., Insam, H. Effect of afforestation on microbial biomass and activity in soils of tropical

China // Soil Biol. Biochem. 1992. V. 24 P. 865-872.

142.Martens R. Limitations in the 'm^-eetion of the fumigation technique [or biomass estimations in amende J. ^ vis // Soil Biol. Biochem. 1985, V. 17 P. 57-63.

143.Martens R., Bunte D., Borkott H. Carbon-ATF ratios of active soil animals and their possible influence on total biomass-C-ATF ratios of soils // Soil BioL Biochem. 1988. V. 20 P. 965-967.

144.Martikainen PJ., Paiojarvi A. Evaluation of the fumigation-extraction method for the determination of microbial C and Nina range of forest soils // Soil BioL Biochem. 1990. V. 22 P. 797-802.

145.Martin J.K., Foster R.C. A mode! System for studying the biochemistry and biology of the ¿oil - root interface // Soil Biol. Biochem. 1985. V". 17 P, 271-274.

146.Martinez A.T., Ramirez C, Microfungai biomass and number of propaguies in an andoso! // Soil BioL Biochem. 1978. V. 10 P. 529-531.

147.Mayndd C.I. A iliiore: . _ 0 : * * . microscopically counting viable microorganisms in soil // Can. 3. Microbiol. 1977. V. 33 P. 75-83.

148.Mayfiek! C.I. A simple fluorescence staining technique for in situ soil organisms // Can. J. Microbioi. 1975. V. 21 pr7:27-729. 1977

149.Nagei-de Boois H.M.. Jansen E. The growth of fungal mycelium in forest soil layers//Rev, Ecol. Biol. Soi.~1971. V. 8 P. 509-520.

150.Nannipieri, P., Muccini, L.. Ciardi C. Microbial biomass and enzyme activities: production and persistence /7 Soil Biol. Biochem. 1983. V. 15 P, 679-685.

151.Newell S.Y., Fallon R.D. Bacterial productivity in the water column and sediments of the Georgia (USA) coastal zone: Estimates via direct counting and parallel measurement of thymidine incorporation // MicrobrEcoi. 1982. ¥. 8 P. 33-46.

152.Nicolardot, B. and Molina, I.A.E. C and N fluxes between pools of soil organic matter: Model calibration with long-term field experimental data/Soil BioL Biochem, 1994(a). V, 25 P, 245-251.

153.Nicolardot B., Fauvet G.,7 Cheneby D. Carbon and nitrogen cycling through soil microbial biomass at various temperatures // Soil Bioi. Biochem, 1994(b). V, 26. P. 253-261.

154.Nieder'iehner B.R., Cairns J.,Jr., Effects of increasing acidity on aquatic protozoan communities // Water, Air. and Soil Pollution 1990. ¥, 52 P,

:S3-196.

155.0ades J.M., Jenkinson D.S. Adenosine triphosphate content of the soil microbial biomass // Soil BioL Biochem. 1979. V. li P. 201-204.

156.Oka.no S. Can grass roots decrease soil microbial biomass to utilize its nitrogen9. Recent advan:es in grassland production and management // edited by Gaborcik, 1992, V, f'l P. 194-201.

I57.0kano S., Kondo H,. Sawada Y, Soil microbial biomass in a sasa-type (Pleioblastus) grassland /7 Journal of Japanese Societv of Grassland Science. 1989. V, 34 P. 280-285.

i pirkr-soi r> n-rii- -r t? o ^c5 T Nrgc1 3 - roois H.M.

» „ , " J hods of study in \ -f-? energi flow. IBP

cu ) v v ^ t f . 34-50.

DD r ' - ^ r s T 'n r D.S. Seasonal

ri^c o i i i u ) ii n ^ , i" n-*** " id " grassland soil which a i + s//Soil Biol.

HiQplviri 1 OC)n \f 22'"' 7 '1A'J

<>o_ i) i ^ n „ 1 adenosine 5-

ti'mj

>

1 ^ * ;rowth in soil //

is rvr)« i-»n\riyr\'/* inyp.r% J U 71 \/ 5 A. is ■ / A -i..

i 6 LPolyanskaya L.M., Zoyagmisev ly.C. Microbial succession in soil // Soviet Scientist Reviews. Harwood xAcademic- Publishers GmbH. 1995,

r 1 1

* . I . A. . t -<j

_ .. J.. ~ — ij. ^ i^. _4.0J.J-J;.

- < 1 . i - • .t. ». -J ?. 943-948

^ _ ¿Tying and counting

: ■■ ... f, * t- i -1-, " ! - -r _ -:

«.. .jUi - j. ... i^» ji.1,/,1 uc'VOilG cliiti OtiCK.

,-r» „----.. ..)- . ----.... <f~>----,---- !■>; . . - j - . .? n----... - t * .. . t---;„ ,f

iiiv > 1 „ «/ ¿-VUiliV &i£> Ui OK)U

Liw,./... „ t . j ^ ''V JV aVt< J L- " 1. iv.JI,. Gilier, 1994.

P. :-2i.

164.Priha. O.. Smolander A. Fumigation-extraction ana substraie-induced respiration derived microbial biomass C, and respiration rate in limed soil o: Scots Dine sapling stands /7 Biol. Pert!!. Soils, 1994, V.I7 P. 301308.

K-i „ , Ai.utiCiiiitU.Ui ¿A,. 4--' A CiA S. i A JLV . U^UJUliUi

^ , 1 .11.« 1 -

_ Viv:. i. r> .¿VO-i. 1 /. ¿O JL.L.:-. s-. x .-1 ^ ---- V.ii VlliiViti J. -i X ilViVi. V A C*^/ UVl

u - s. iv, i SV , - ^ 8.

j , ^ -r- f r ^ i 5 > 1

( ti 1 M) 1 < "" n « ' ^ „ ' 11 - -> 1 ''

1

f t r— 9 • * « r •• y— » ^-r » —

. l e _ - „

^^ r ^ "

C t- V 1 V » » ill iA.-tvl iili -Li- ^ W JL J. y.J L ,.L ,.! W VSvil Si 1 -w- L \ J. .1 i. «'=.. i^j.*.: ' i j 3

..... . .. . > ........ . .• » . // ...''» "f> 4 ^ .....* « . ... 1 1 . * ^ >

1 f:H i? rif'.j T Tni-., Tf O rv, A T>,rn ^ ~ l\;nCr00

, 1 .i I i

.■..1 V. ■' ' 1 . '- ■ -. .. .... ... .. / v .i:.. ^ ... i : I i.t . . \ . .. . ... . . > , ; . . ...:

«> ieO'i"^1- L.W jj '1 ii« A

* ¿p -C - 1_______ - Tr , T r - J. . J? JC*„. .. . .1 I. . . .i . .«. 1 . - - !-•

" -1 re o - t 1 , ^ u

rj,;,-.; r\-.i ..... if;!!/ "

* J. 1. 1 • • t . . ' w , . : y - . > . 1 i 3 , X • -i •

f - c ^ . 1 ■ 1. -3- -B- "-k V' . ' - < Ci « ....... . V-?- T T . . 4 . » __________. "a ' . . 1.

/ V . w.. - i.v ; - V. .. .. . ". . .' . V. . ¿..¡i l.i.Lllcl'.j.V/i.i ./. ; i ill.ivi U L'i^ti

:n~i '^Tih-cic .'vi .. • r vit r-s^ ■^•^■■Tt-- ^t' srO" .'/ 0 >T! i .¡-it/T-1

v is. 'i..^.-.^

-J i'. ^ ------t> T1 c- -. - - - j »-'j.,. . A.; , . , .. l* .. ... At.— ->.-,-„, . .....1. '_______ ... !..

' (> i. t t *> tz 1 " s ) t- - e » 1.

T»i___t- i ir ' i i> 1 m i ■.)

liivvii^, *J> is \<Af. » . i 1 A .

~ ^ > j >' >1 / , i j, * . »

. J ^ A o

i73.Soderstrom B.E. Yitai staining oi itinai in onre euiture and hi soil wooi.

J . - , , / A . j. .

^ -t/ i1 Jo ^ "

X

175.Sparling Gab., Feltbam Cbm, lupoids lb, "Vest A.W., Singleton P. Esbmaticn of soil microbial C by a fiiirdg?.*: -extraction method: Use on sous of mad .maamc ¡.maon: romam. ana s reassessment of the kec-mefrr // Soil Biol, Bbnbcm. '"'rb ¥ 22 ?. 301-307. 1'76,Sparling G.P., West A.W. A direct extraction me-nod to estimate soil microbial C: Calibration in situ using microbial respiration ana I4C labelled cells // Soil Bio!, Bio-hem. 1.988. v, 20 P. 337-343. 177.Sparling G.P.. West A.W., Whale K.N. Interference from roots in the estimation of soil miarobbd ATT, C, M aim ? // Soil Blob Biosbem. i«85, '¥ 17 P. 275-278. iVo.Snvasiava 3,C, Influeaee of sou properties on microbial carbon, phosphorus and ?b¥ogen in dry tropical ecosystems // Biol. Fertil. Soils, 1992. ¥.13 P. i /6- ¡ 80.. bm.3img.mr 2. Fbmsmmnce mi.n escape examination of bactena in soil /7

Can. A Res. Sect, J948. ¥ 26 P. ¥¥!93. iSO.Taie K,R., Ross D.J., Feltham C.W, m dire in extraction meibod to estimate soil microbial C: effects of experimental variables and some different calibration procedures // Soil Biol. Bioehem. ? v. 20 p. 32¥ 335,

" " ' * "" m , , o

A

CA^Oi f- iT-^ Or*. T» ^Ti- /- rr *7 I'P-i'T imp f^C O V AT

"•• ; // V;v: blm,-. Wl- 1 DO d V' *M "D

... /. , J . Ui . . .. t.. A,. l.l iu^i. . . ._/*.' j i . . / , / A . I « I V 1 •>.... . . , i > w . , ... V . „ .

J < > 1 < i

,UJ- 1 J i .

, , < , * ^ » 1 »* _ ^ " <'< '<"1 t J

■ " . _ _ ^ -f T>.

< CJs

¿Oil IM<

'5 *dr\ m l¥ '

¡mnori'jin^ia irj nitrriOVSl rp m < i "Td i

Ills' T -n; TJ_ i

' * . V 1 * ! ' : _ " I j ; ■'. '■,

jL. X „ . - i V 11 1 I. 1

V C 1

^ ^ „ ..'.on, turnover, and nuirien

-- „ i?* • jls of "world forests //

• V

"I * * - * ieiahoHeally-aetive

• ' -> - r, . -ioi. Biochem, 1971, V. 3 P.

" -,-i i .

'90,Wardie D,.A, . " -n ^ which influence

microbial bioma^s yy n 1 t i ' v „.n r i >n „oil /7 Biol. Rev, 1992, v o7 rk 3, P. 32

* L* * *«>'«->-J^r-j »i "S A Onv^^rnf"] 3 I if £ r\-*r* r^ A i A-^t PO ! "f -t "T ■» .0>C

Of . j t, i ^ , v > C

J'« ii ^ \ 0 ; -.1 O 4 "i / 'A '-V 1''. V ^ r*.T «Hi'i^ A ! A!i1 J>0 i T -'.T' ^ - ? ?

... . . ~ . a . lit

193.Wardie O, A., Parkinson 33. K.esr>oi?.se of the yon nncroo^ni oonooss to

..- - • • • • 1 . > • --

>-■" - ~ ? '■.....- ...... _... ..^ — ~ ~ - -—1 - - - - -- ^ -.......- —. - ~ -1 - ■ - - - -......- ■ •

WljM ! U«Ji l/> H' -t I W y .« Q j- ".

i!/ ■* H " * ^ 1 j

.. , .. ... -v------....... , . _. ----------- ... „ , . ......................... . ..................--- , - — - - ^ - •

i,-. t / 'i. J . \ .;■ .^i-; «-¡-^ , , t v ; > j o . . ■ /?»■!■' ^ r^ J « «-> rr

^/ii^iw^i ¿.Vl-i.^. JL-i'i^-i ± - .x J- * JL « ^ J-4 i_/ «.y «

-f - * ^ * * ^ s i + I - i ? * * t * -3 T t * * O i j n

« i i ( * > V f-1 1 ^^ ^ t ^ J

» » • r-v, .-"-r 1 * t—» o-«-r 1 — ¿•aoo'ri "—1 - : -v- "i ^ 1 * --rr ' - ^-»f--. f»-r o ~

C/iii ¿iCtl Oii OCz^J-i-ll Cb // OOj.J BlUb OiUUiiv iii. :: > O ^ : .. iO = 3 "* ^ C ^

^ ^ 1 1 } ^

^.i. <, 'W'X i !, i v.,^ iti-.i v 4. i.l U x./ i W -.

ana

f K * ^

i i 1 * i I

1 * • « ' i <.* i m • * ¿oi -v

.. ^ ^ t... : , Is i. « i ^ i i > ^ »

Ui

i, - v J

no C "" O" " ^ " ^^ •

<i "K (i

Oi.Zryagintsev D.G., Panicov W.S.. -Vou-E.-Naga S,A, // in: Proc, of 3rd Intern., s>Tnp. or-microbial ecol. Mich. 1983. ?. 11.

-j