Противодиабетические свойства гимнемовых кислот тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, доктор биологических наук Воронкова, Мария Павловна

• Воронкова, Мария Павловна
• доктор биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации доктор биологических наук Воронкова, Мария Павловна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ЛЕЧЕНИИ И ПРОФИЛАКТИКЕ САХАРНОГО ДИАБЕТА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1. НОВЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ПОИСКА ПРЕПАРАТОВ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ САХАРНОГО ДИАБЕТА II ТИПА.

1.1.1. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА СОВРЕМЕННОЙ ФАРМАКОТЕРАПИИ САХАРНОГО ДИАБЕТА.'.

1.1.2. НОВЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ В СОЗДАННЫЙ АНТИДИАБЕТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ.

1.1.3. ИНКРЕТИНОМИМЕТИЧЕСКИЕ ПОДХОДЫ К СОЗДАНИЮ АНТИДИАБЕТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ.

1.2. ЭКСТРАКТЫ ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ - КАК ИСТОЧНИК ИНКРЕТИНОМИМЕТИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ.

1.2.1. БИОЛОГИЧЕСКИЕ КОМПОНЕНТЫ ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ.

1.2.2. ОСНОВНЫЕ МЕХАНИЗМЫ ВЛИЯНИЯ ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ ПА ГОМЕОСТАЗ ГЛЮКОЗЫ.

2. ИЗУЧЕНИЕ АНТИДИАБЕТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЭКСТРАКТА ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ.

2.1. ПШОГЛИКЕМИЧЕСКИЕ И АНТИДИАБЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ЭКСТРАКТОВ ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ.44 г

2.1.1. МА ТЕР И АЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1.2. ГИПОГЛИКЕМИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭКСТРАКТОВ ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ.

2.1.3. АНТИДИАБЕТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ ЭКСТРАКТОВ ГИМНЕМЫ ЛЕСНОЙ.50 '

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Противодиабетические свойства гимнемовых кислот»

Актуальность темы. Сахарный диабет (СД) зарегистрирован более чем у 150 млн. человек в мире (И.И. Дедов, 2008; А.С. Аметов, 2008). При этом прогнозируется удвоение числа заболевших СД каждые 12-15 лет. Из этого числа 90-95% - больные инсулиннезависимым СД в возрасте 35-49 лет. Фактическая распространенность СД в 3-4 раза превосходит регистрируемую, что свидетельствует о пандемии СД среди взрослого населения (И.И. Балаболкин, 2008). Достаточно большой объем знаний в области патофизиологии диабета и наличие широкого спектра терапевтических возможностей лечения не привели к улучшению метаболического контроля заболевания от стадии глюкозотолерантности до развернутой клиники СД (И.И. Дедов, Г.А. Мельниченко, 2006). Лечение усложняется, тем, что гипергликемия сочетается с ожирением, артериальной гипертензией, дислипидемией, гиперкоагуляцией и окислительным стрессом. Так как длительно протекающая декомпенсация усугубляет инсулинорезистентность и способствует развитию вторичной резистентности к пероральным сахароснижающим средствам, составляющим основную фармакотерапевтическую группу для лечения СД II типа, потребность в новых эффективных и безопасных сахароснижаю-щих лекарственных средствах очевидна (И.И. Балаболкин, 2005). В связи с этим идет интенсивный поиск как синтетических, так и растительных секре-тогенов, влияющих на физиологические механизмы высвобождения инсулина (М.Б. Анциферов, 2007).

В исследованиях последних лет убедительно доказано, что снижение уровня инсулина в ответ на естественный стимулятор (углеводы) может обусловливаться нарушением выделения некоторых интестинальных гормонов (GIP и GLP-1), оказывающих глюкозостимулирующее влияние на синтез инсулина (J. Hou et al, 2007; T.R. Vahi et al, 2007). Поскольку большая часть этих гормонов инактивируется еще в кишечнике, не достигая системного кровотока, то экзогенное применение инкретинов представляется технически сложным (S.C. Мс Donagh, 2007). Поэтому используются ингибиторы расщепляющих инкретины энзимов, либо вещества, проявляющие прямое или косвенное инкретиномиметическое действие (К.А. Scott, 2007). В то же время гипогликемическую активность растительного экстракта Гимнемы лесной (ветвистой лианы из семейства ластовневых) связывают с увеличением ин-кретиномиметичекого действия, повышением секреторной активности и восстановлением морфологической структуры p-эндокриноцитов, подавлением глюконеогенеза (Т. Fushiki, 1992; Gymnema Lawrence Rev. 1993). Исходя из этого различные экстракты Гимнемы лесной могут являться основой для создания антидиабетических лекарственных и нелекарственных препаратов.

Диссертационная работа выполнена в рамках Федеральной целевой научно-технической программы «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники гражданского назначения». Тема утверждена на заседании Ученого Совета ВолГМУ (протокол № 1 от 10 февраля 2006 г.) и включена в план НИР.

Целью настоящего исследования является экспериментальное обоснование создания на основе экстракта Гимнемы лесной, проявляющего инкретиномиметическое действие, антидиабетических препаратов.

Для достижения указанной цели представляется необходимым решение следующих задач:

1) изучение метаболических (гипогликемических, антиоксидантных, гемореологических) и антидиабетических свойств экстрактов Гимнемы лесной в зависимости от дозы и степени очистки;

2) исследование антиоксидантных и гемореологических свойств оптимизированной экстрактами девясила и гребней винограда Гимнемы-25 -наиболее активной фракции Гимнемы лесной;

3) углубленное доклиническое изучение антидиабетической Композиции на основе Гимнемы лесной с целью обоснования перспективы создания нового лекарственного препарата;

4) исследование панкреотропных механизмов антидиабетического действия Композиции;

5) изучение механизма экстрапанкреатических эффектов препарата;

6) исследование влияния препарата на процессы регенерации и апоп-тоза инсулинпродуцирующих клеток;

7) исследование фармакологических свойств биологически активной добавки к пище на основе Гимнемы лесной;

8) изучение токсикологических свойств Композиции и биологически активной добавки, созданных на основе Гимнемы лесной.

Научная новизна.

Впервые проведено комплексное исследование влияния различных экстрактов Гимнемы лесной на функциональную активность и регенерацию эндокринных клеток поджелудочной железы, а также изучены механизмы секреции инсулина при экспериментальном сахарном диабете различной этиологии.

Впервые изучено влияние Гимнемы-25 на реологические свойства и тромбогенный потенциал крови. Впервые проведен анализ уровня гипогли-кемической активности различных экстрактов Гимнемы лесной в зависимости от их дозы и степени очистки.

Выполнены доклинические исследования фармакодинамических свойств лекарственной Композиции на основе Гимнемы-25, проявившей выраженные антидиабетические свойства. Обоснована возможность создания антидиабетического препарата с инкретиномиметическим и экстрапанкреатическим механизмом действия.

Впервые проведена оценка пролиферативной активности |3-эндокриноцитов при применении лекарственной Композиции и выявлена степень её антиапоптогенной активности.

Впервые изучены гипогликемические свойства биологически активной добавки к пище на основе Гимнемы-25 при моделировании метаболических расстройств (синдрома преддиабет), а также изучены её антиоксидантные свойства и влияние на реологические свойства крови.

Научно-практическая значимость

Результаты изучения уровня гипогликемической активности различных экстрактов Гимнемы лесной на интактных животных и на животных с экспериментальным стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом позволили выявить наиболее активную фракцию Гимнемы лесной - Гимнема - 25, содержащую гимнемовые кислоты.

Результаты доклинических исследований позволили обосновать создание Композиции на основе Гимнемы-25 в виде лекарственного препарата (с добавлением экстрактов гребней винограда и девясила) с антиоксидантными и гемореологическими свойствами для применения в комплексной сахарос-нижающей терапии СД II типа и профилактики его отдаленных последствий.

Результаты доклинических исследований позволили обосновать создание БАД на основе Композиции (с введением микронутриенов необходимых для стабилизации углеводного обмена: ванадия сульфата, цинка сульфата, хрома пиколината, магния сульфата, пиридоксина гидрохлорида), проявляющей антиоксидантные и гемореологические свойства для профилактики развития метаболических расстройств и поздних осложнений СД. На основании результатов клинических исследований БАД можно полагать об её эффективности при использовании в составе комплексной терапии у больных СД II типа.

Изучены показатели острой, хронической и специфических видов токсичности.

Реализация результатов исследования

Система методических подходов к изучению и анализу антидиабетической активности экстрактов растений применяется при проведении исследований в лабораторий экспериментальной фармакологии ВНЦ РАМН и АВО, НИИ фармакологии ВолГМУ и кафедры фармакологии ВолГМУ. Биологиче

10 ски активная добавка к пище «Диабета» выпускается ООО «Экко Плюс» (Россия).

Результаты работы включены в лекционные курсы на кафедрах фармакологии ВолГМУ, фармакогнозии и ботаники ВолГМУ, фармакологии и биофармации ФУВ ВолГМУ, на кафедрах фармакологии Кубанского, Саратовского и Ростовского государственных медицинских университетов.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Экстракты Гимнемы лесной - перспективные вещества для создания противодиабетических препаратов, сочетающих гипогликемическую активность с антиоксидантными и гемореологическими свойствами.

2. Антидиабетическое действие Композиции на основе Гимнемы-25 (с добавлением экстрактов гребней винограда и цветков девясила) связано с её сахароснижающим действием при экспериментальном стрептозотоцин, ал-локсан-индуцированном, иммунозависимой форме СД, при латентной форме СД, инсулинорезистентности.

3. Композиция тормозит развитие апоптоза и способствует регенерации (3-эндокриноцитов при токсическом воздействии цитотоксинов на ткань поджелудочной железы.

4. Композиция на основе Гимнемы-25 нетоксична, оказывает комплексное антидиабетическое, антиоксидантное, гемореологическое действие.

5. БАД на основе Композиции оказывает гипогликемическое действие при экспериментальном метаболическом синдроме (преддиабет) и ожирении за счет глюкозостимулированного влияния на секрецию инсулина и потенцирования его действия, улучшения утилизации глюкозы периферическими тканями, снижения всасывания глюкозы и жирных кислот в кишечнике.

6. БАД в составе комплексной сахароснижающей терапии способствует улучшению состояния углеводного и липидного обменов, снижению ин-сулиновой резистентности и повышению активности антиоксидантной системы у больных СД II типа.

Апробация работы

Материалы диссертации докладывались и обсуждались в материалах: научно-практической конференции «Состояние здоровья населения Волгоградской области и современные медицинские технологии его коррекции», Волгоград, 2005; 4-й Международной конференции «Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам», «Подмосковье», 2006; XI Международного конгресса по реабилитации в медицине и иммуно-реабилитации, Москва, 2006; XII и XIV Российских национальных конгрессов «Человек и лекарство», Москва, 2006, 2007, 2008; I Международного съезда фитотерапевтов «Современные проблемы фитотерапии», Москва, 2006; II Всероссийской конференции с международным участием «Клинико-морфологические аспекты эндокринопатий», Москва, 2006; V международного научно-практического конгресса «Человек в экстремальных условиях: Здоровье, надежность и реабилитации», Москва, 2006; 'The next line of defense' International conference on diabetes. Synergy and strategy, Анталия, Турция, 2007; III Съезде Фармакологов России «Фармакология - практическому здравоохранению», Санкт-Петербург, 2007; II Международной научной конференции "Химия, технология и медицинские аспекты природных соединений", Алматы, Казахстан, 2007; Международной научной конференции «Лекарственные средства и биологически активные соединения», Гродно, Беларусь, 2007; 63-й конференции по фармации, Пятигорская фармацевтическая академия, Пятигорск 2008; IV Всероссийском конгрессе диабетологов, Москва, 2008; симпозиуме «Результаты фундаментальных и прикладных исследований для создания новых лекарственных средств» Москва, 2008; VII международной конференции «Гемореология и микроциркуляция. От функциональных механизмов в клинику», Ярославль, 2009.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 40 печатных работ.

Объем и структура работы

Диссертация изложена на 339 страницах машинописного текста, иллюстрирована 61 таблицей, 97 рисунками, состоит из введения, обзора литературы (глава I), экспериментальной части (главы II-V), обсуждения результатов (глава VI), выводов и приложения. Список литературы включает 117 отечественных и 166 иностранных источников.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Воронкова, Мария Павловна

7. ВЫВОДЫ:

1. Экстракты Гимнемы лесной стимулируют секрецию инсулина, влияют на процессы регенерации и апоптоза (3-эндокриноцитов, повышают утилизацию глюкозы периферическими тканями, задерживают всасывание глюкозы и олеиновой кислоты в кишечнике, и могут служить основой для создания противодиабетических препаратов, биологически активных добавок I к пище.

2. Величина гипогликемической активности экстрактов Гимнемы лесной, исходя из степени очистки фракции, уменьшается в ряду: Гимнема-25 □Гимнема-50>Гимнема-75 в экспериментах на интактных животных и на животных с экспериментальным стрептозотоцин-индуцированным сахарным диабетом.

3. Гимнема-25 оказывая умеренную антиоксидантную активность, предотвращает увеличение ПОЛ преимущественно в эритроцитах, и проявляет умеренное влияние на реологические свойства крови, существенно не влияния на показатели коагуляционного гемостаза.

4. Компоненты биофлавоноидной структуры (экстракты гребней винограда и цветков девясила) усиливают антиоксидантные и гемореологи-ческие свойства Гимнемы-25.

5. Антидиабетическое действие Композиции на основе Гимнемы-25 при экспериментальных состояниях латентной формы сахарного диабета, патогенетических вариантах сахарного диабета обусловлено увеличением секреции инсулина, повышением чувствительности к нему периферических тканей, снижением скорости всасывания глюкозы в кишечнике.

6. Сахароснижающий эффект Композиции обусловлен её панкрео-тропным и экстрапанкреатическим действием, проявляющимся в пролонгации сахароснижающего действия экзогенно введенного инсулина, усилении его эффекта и удлинении времени стабилизации гликемии, улучшении утилизации глюкозы мышечной тканью в присутствии и без инсулина, в снижении коэффициента поглощения углеводов и олеиновой кислоты в кишечнике.

7. Композиция способствует активации репаративных процессов в Р-эндокриноцитах при экспериментальном иммунозависимом сахарном диабете, что подтверждается высоким уровнем экспрессии PCNA и умеренной экспрессией Ki-67, а также препятствует развитию апоптоза в эндокриноци-тах панкреатических островков, что подтверждается снижением экспрессии каспазы 3.

8. Композиция оказывает антиоксидантное действие, эффективно уменьшая образование как начальных (КД в 2,8 раза), так и конечных продуктов липопероксидации (МДА в 1,2 раза) а также увеличивает активность антиоксидантных ферментов (СОД в 2 раза) на модели аскорбат-зависимого перекисного окисления липидов; взаимодействует со стабильным свободным радикалом ДФПГ и с активными формами кислорода.

9. Комплексный препарат на основе Гимнемы лесной обладает ге-мобиологической активностью как in vitro, так и in vivo - у крыс с экспериментальным синдромом повышенной вязкости крови, влияя на основные ге-мореологические параметры — деформабильность и агрегацию форменных элементов крови, снижает АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов.

10. Композиция относится к классу малотоксичных лекарственных средств, так как при исследовании острой, хронической не выявлено патологических изменений со стороны сердечно-сосудистой, выделительной систем и основных гомеостатических констант. При изучении специфических видов токсичности не выявлено аллергизирующего, иммунотоксического, мутагенного действия. Композиция в дозе 280 мг/кг обратимо повышает пред- и постимплантационную эмбриональную гибель, не влияя на органо- и фетоге-нез, постнатальное развитие.

11. Биологически активная добавка к пище на основе Гимнемы лесной эффективна при состояниях преддиабета и инсулинорезистентности, препятствует развитию гипергликемии, активации процессов свободно-радикального окисления, снижает агрегацию тромбоцитов в плазме крови, повышает скорость утилизации глюкозы периферическими тканями, снижает всасывание глюкозы и жирных кислот в кишечнике, уменьшает потребность в высокалорийной пище.

5.7. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

На основании проведенных исследований можно заключить, что препарат относится к классу малотоксичных - токсической дозы для Композиции не установлено, т.к. в дозе 5 г/кг не установлено гибели животных не установлено. Кроме того, шестимесячное применение препарата в терапевтической и субтоксической дозах способствует достоверному снижению массы тела экспериментальных животных и уменьшению площади частичной потери шерстного покрова. Композиция не вызывает патологических изменений в ЦНС, сердечно-сосудистой, детоксицирующей и выделительной системах, не изменяет качественного и количественного состава периферической крови, а также не влияет на биохимические показатели плазмы крови крыс.

По результатам проведенных хронических исследований установлено, что Композиции при шестимесячном применении у собак в дозах 50, 280 и 500 мг/кг не оказывает патологического влияния на их основные гомеостати-ческие константы. Электрокардиографические сдвиги у собак не выходили за рамки физиологической нормы и были обратимыми, что также свидетельствует о взаимосвязи влияния Композиции на сократительную активность сердца. Гематологическими и биохимическими исследованиями выявлено отсутствие влияния Композиции при шестимесячном введении собакам на эритро- и лейкопоэз, а также функциональную активность органов детокси-кации и выведения. При морфологическом обследовании тканей органов собак выявлены обратимые дистрофические изменения в печени и сужение мочевых канальцев в почках в токсической дозе Композиции.

Не выявлено патологического повреждающего действия изучаемого препарата на генеративную функцию крыс на сперматогенез и оплодотворяющую функцию самцов. Снижение индекса сперматогенеза и числа спер-матогоний в канальцах семяродного эпителия, а также некоторые тенденции увеличения числа патологических форм сперматозоидов в семенной жидкости самцов восстанавливаются после отмены Композиции. При этом выявленный у самцов эффект увеличения масс гонад и эпидидимисов, возможно, обусловлен стимулирующим действием испытуемого препарата на отдельные этапы созревания и формирования сперматогенеза в тестикулах.

По результатам испытаний на самках установлено, что Композиция вмешивается в процесс регуляции эстральной цикличности: увеличивает встречаемость стадии эструса и метаэструса, но снижает встречаемость фазы диэструса. Учитывая это можно предположить, что препарат способен оказывать стимулирующее влияние на синтез эстрогенов, снижая уровень геста-генов в крови. Последнее, возможно - негативно и отразилось не на процессах зачатия, а на процессах вынашивания плодов. Также можно предположить, что Композиция в дозах 280 и 2800 мг/кг может оказывать абортивный эффект при условии его введения беременным самкам на стадии имплантации, плацентации, органогенеза. Вместе с тем данные эффекты имели обратимый характер и восстанавливались в исследованиях. Композиция не оказывает повреждающего действия на антенатальное и постнатальное формирование потомства плодов в ранние и отдаленные периоды наблюдений.

Композиция не обладает аллергизирующими свойствами, так как после её введения не отмечено увеличения интенсивности системной реакции анафилаксии, не установлено аллергических реакций замедленного типа при иммунизации препаратом в изучаемых дозах в смеси с полным адъювантом Фрейнда.

Композиция не обладает иммунотоксическим действием, так как при её курсовом применении не выявлено значимого увеличения антителообразова-ния и увеличения показателей клеточного иммунитета.

Потенциальный лекарственный препарат не обладает мутагенным действием, так как не увеличивает спонтанного уровня хромосомных повреждений в клетках костного мозга самцов и самок мышей.

6. ОБСУЖДЕНИЕ

Выбор растительного экстракта Гимнемы лесной в качестве основы для создания нового антидиабетического средства с принципиально новым механизмом действия обусловлен доказанными гипогликемическими свойствами Гимнемы лесной, которые подтверждены литературными данными, а также результатами предварительных исследований, проведенных на кафедре фармакологии ВолГМУ (А.А. Спасов и др., 2003 - 2007 г; Г.Л. Снигур и др., 2008).

Экспериментальные данные, опубликованные за последнее десятилетие, свидетельствуют о том, что гипогликемическая активность ГЛ обусловлена антидиабетической активностью ГК (V-VII) и гимнемосапонинов (F. Gent Janneane, 1999), проявляющейся повышением секреторной активности, восстановлением морфологической структуры Р -эндокриноцитов и подавлением глюконеогенеза, супрессией повышения уровня глюкозы, ингиби-рованием её захвата и поглощения в кишечнике (L.F. Wang, 1998; F. Janneane, 1999; Y. Sugihara, H. Nojima, H. Matsuda, 2000; Y. Ogawa, 2004), влиянием на метаболизм липидов крови и снижением массы тела (R. Asano, М. Shinosaka, M.Okazaki, N. Shigemasu, 2002).

Учитывая многообразие уже описанных и приведенных выше видов антидиабетической активности, а также то, что гипогликемическую активность растительного экстракта ГЛ связывают с увеличением секреции пептида GLP-1 и GIP, следовательно, к ГЛ вполне применимо определение «инкре-тиномиметик», введенное в научный оборот за последние несколько лет.

В последнее время в странах Европы, Японии и США активно работают с экстрактом ГЛ, в плане создания лекарственного препарата нового типа действия. Как правило, эти исследования нацелены на очистку субстанции и выделение различных фракций экстракта ГЛ (United States Patent № 5,116,820 от 26.05.1992; № 5,605,698 от 25.02.1997; № 5,612,039 от 18.03.1997; № 6,413,545 от 2.07.2002).

На данный момент в лечении СД, как правило, применяют комбинированную терапию, что особенно важно для профилактики отдаленных последствий (L.A. Donnelly, 2006; Peter Timmins, 2006). В отдельных случаях создаются комплексные препараты (P.D. Home , C.J Bailey et al., 2007) для лечения и профилактики отдаленных последствий СД, которые, помимо гипогли-кемического действия, обладают антиоксидантными свойствами и стабилизируют гемореологические свойства крови (М. Comaschi , A. Demicheli, 2007; М. Comaschi , A. Corsi, 2007).

Новый антидиабетический препарат создан на основе экстракта Гимнемы-25, полученного новым методом экстракции из сухого сырья ГЛ, с помощью оригинального метода РНИИ здоровья. Уникальность технологии получения Гимнемы-25 состоит в том, что в процессе очистки используется не только этанол, но и другие органические спирты, с сохранением всех сапонинов, включая гимнемогенин, гимнемовые кислоты (ГК) I-XVIII и гим-немосапонины I-V, определяющие, по зарубежным данным антидиабетические свойства ГЛ (М.А. Feanny, 2007; L. Hong, 2001; N. Murakami, 1999).

Поскольку Гимнема-25 является экстрактом, ранее не исследовавшимся, было сочтено необходимым изучить его фармакологические свойства. На первом этапе работы было проведено изучение уровня гипогликемической активности экстрактов ГЛ в трех концентрациях Гимнема-25, Гимнема-50, Гимнема-75, отличающихся друг от друга содержанием ГК и гимнемосапо-нинов на интактных животных и на животных с экспериментальной патологией. Была выявлена зависимость антидиабетической активности экстрактов ГЛ от степени очистки экстракта, которая снижается в ряду:

Гимнема-25>Гимнема-50>Гимнема-75 По результатам исследования можно заключить, что наиболее активный экстракт гимнемы лесной - Гимнема-25 относится к группе малотоксичных веществ который (так же как и Гимнема лесная (К. Shapiro, 2002), оказывает гипогликемическое действие, а также снижает скорость и продолжительность гипергликемии при проведении глюкозотолерантных тестов. Учитывая, что в настоящее время в клинической практике РФ не используются растительные гипогликемические средства препаратом сравнения было выбрано синтетическое соединение - диабенол. При этом необходимо отметить, что гипогликемический эффект Гимнемы-25 уступает ему по величине активности.

Полученные результаты несколько превосходят имеющиеся литературные данные по величине активности экстракта ГЛ, полученного из сырья высушенных листьев ГЛ другими методами (J.J. Mier, 2001; E.R. Shanmuga-sundaram et al., 1990). Вероятно, это связано с тем, что в листьях тропической лианы ГЛ, помимо комплекса пентациклических тритерпенов, содержатся разнообразные органические соединения как — то: аминокислоты, растительные фенолокислоты которые в свою очередь могут существенно влиять на фармакологические эффекты препаратов ГК (G.Y Yen, 2003). Оригинальная технология очистки экстракта ГЛ, вероятно, позволяет сохранить комплекс активно действующих компонентов в составе Гимнемы-25, а их эффективность, возможно, обусловливается потенцирующим синергетическим эффектом компонентов гимнемозидного комплекса Гимнема-25 (П.М. Васильев и др., 2008). При изучении состава Гимнемы-25, помимо ГК, были обнаружены и некоторые органические вещества: сравнительно высокое содержание ультрафиолет-поглощающего соединения, по хроматографической подвижности относящегося к группе так называемых гидроксикоричных кислот и кумаринов; аминокислоты, которые, возможно, сами обладают определенным фармакологическим эффектом (В.А. Храмов и др., 2008). Известен, например, гипогликемический эффект производных хлорогеновой кислоты и антиоксидантное действие растительных фенольных соединений (А.А. Дьяков, 2002).

В ходе изучения механизма антидиабетического действия Гимнемы-25 были проведены эксперименты по изучению секретогенной активности экстракта. Выявленное увеличение количества инсулина в крови подопытных животных, сочетающееся с сахаропонижающим эффектом, вероятно, может явиться прямым доказательством инсулинотропного эффекта Гимнемы-25, возможно, основанного на стимулировании функционально способных Р - клеток островков Лангерганса. Полученные данные согласуются с литературными о том, что механизм действия ГЛ связан с повышением высвобождения инсулина из инсулинпродуцирующих клеток за счет увеличения Р-эндокриноцитов, а не за счет высвобождения инсулина по истощающему ти пу (Y. Ogawa, 2004), увеличением инсулина в плазме крови и достоверным снижением уровня глюкозы и количества гликилированного гемоглобина (N. Shigemasu et al, 2001).

Известно, что баланс клеточной популяции поддерживается благодаря равновесию процессов регенерации и клеточной гибели (Э.С. Северигина, 2002). Особенности эмбрионального развития поджелудочной железы и сохранение клеток-предшественниц являются предпосылками для возможной регенерации Р - эндокриноцитов путем неогенеза ПО из эпителия протоков, ациноинсулярной трансформации или по альтернативному пути - дифферен-цировке клеток-предшественниц, расположенных в ПО (В.Ф. Иванова, А.А. Пузырёв, 2006). Гимнема-25 при приёме в течение одной недели увеличивает количество Р-эндокриноцитов во всех отделах поджелудочной железы и способствует умеренно выраженной гипертрофии ядер Р-клеток островко-вого аппарата поджелудочной железы у интактных животных, что может свидетельствовать о повышении функциональной способности Р-клеток, присущей экстрактам ГЛ полученным различными способами экстракции (R.R. Chattopadhyay, 1996; N. Murakami, 1996). Кроме того Гимнема-25 повышает уровень экспрессии маркера пролиферации PCNA при иммунозави-симом диабете, что также является свидетельством наличия репаративных

280 процессов в ткани поджелудочной железы и который косвенно подтверждается умеренной экспрессией Ki-67. Так при применении Гимнемы-25 у животных с иммунозависимым диабетом отсутствовали морфологические признаки апоптоза, о чем свидетельствует выявленный низкий уровень экспрессии р53 (ключевой фермент каскадного цикла, участвующий в протеолизе белков цитоплазмы и ядра клетки) и каспазы 3 (маркер активации «апоптоза изнутри»). Вероятно, Гимнема-25 способствует регенерации эндокриноцитов поджелудочной железы как и за счет стимуляции клеток гастроэнтеропан-креатической системы, вырабатывающих GLP-1 и GIP (T.R. Vahi, 2007), так и за счёт способности инкретинов не только увеличивать уровень секреции инсулина, но и снижать скорость апоптоза [3-эндокриноцитов, а также стимулировать их пролиферацию (S.L. Aronoff, 2004; М.А. Feanny, 2007; Gymnema Review, 2003).

При исследовании экстрапанкреотических эффектов было выявлено, что при применении в течение 30 дней Гимнемы-25 в дозе 280 мг/кг регистрируется количественное увеличение поглощения глюкозы изолированными диафрагмами крыс. При этом эффективность Гимнемы-25 в среде без инсулина может свидетельствовать о её прямом воздействии на транспортную систему утилизации глюкозы и повышении чувствительности периферических тканей к инсулину у крыс с экспериментальным стрептозотоцин-индуцированным СД. Увеличение коэффициента поглощения глюкозы выявило его зависимость от присутствия инсулина в среде, что, вероятно, связано, на уровне тканей, с потенцирующим действием экстракта ГЛ на действие инсулина. Это дает еще один аргумент в пользу предположения о непосредственном влиянии Гимнемы-25 на углеводный обмен и о наличии экстрапанкреатических эффектов в механизме антидиабетического действия, что в свою очередь подтверждается данными литературы о влиянии ГЛ на повышение чувствительности периферических тканей к глюкозе (К. Baskaran, 2003).

Гимнема-25 достоверно ингибирует всасывание глюкозы и олеиновой кислоты, но с существенным замедлением последнего процесса. Тем не менее, установлено дозозависимое влияние Гимнемы-25 (при непосредственном добавлении в перфузат) на всасывание глюкозы и олеиновой кислоты, при этом по ингибирующей активности Гимнема-25 в концентрации 0,5 мг/л превалировала над таковой в дозе 0,25 мг/л. Полученные результаты полностью соответствуют имеющимся литературным данным по соответствующим эффектам ГЛ (К. Baskaran et al., 1990; А.К. Khare, 1983; L. Wang, 1995) и могут объясняться наличием различных внутриклеточных механизмов утилизации глюкозы и жирных кислот, обусловленных индивидуальными особенностями химического строения гимнемовых кислот, способных независимо друг от друга блокировать транспортеры как олеиновой кислоты, так и глюкозы (I. Fushiki, 2003). Помимо этого в ходе работы показано, что практически полное восстановление процессов поглощения жирной кислоты и глюкозы происходит спустя 6 часов после отмены препарата. В данной временной точке регистрируются значения, тождественные показателям у интактных животных, что свидетельствует об обратимости действия Гимнемы-25.

Известно, что основная роль в развитии сосудистых осложнений диабета принадлежит неферментативному аутоокислительному гликозилирова-нию и окислительному стрессу, которые вызваны нарушением углеводного обмена (М.И. Балаболкин и др., 2005). При исследовании фармакологических свойств ГК, необходимых для профилактики развития отдаленных последствий СД, было выявлено, что Гимнема-25 в дозе 280 мг/кг обладает антиокси-дантной активностью, снижая образование ТБК-реактивных продуктов на 82,53% (р<0,001) у животных с экспериментальным стрептозотоцин-индуцированным СД, превышая при этом эффективность препарата сравнения растительного происхождения танакан (37% в дозе 12 мг/кг). Полученные результаты получили подтверждение и при сравнении активности веществ по величине константы ингибирования ИК50 на модели аскорбатиндуцируемого ПОЛ. Так было выявлено, что Гимнема-25 оказывает 50% -эффект в значительно меньших дозах по сравнению с препаратом сравнения.

Кроме того, было установлено, что развитие стрептозотоцинового диабета сопровождается повышением уровня первичных продуктов ПОЛ - КД по сравнению с интактными животными. Так наибольший темп роста КД (на 39,3%) был отмечен в плазме крови при незначительном росте этого показателя в эритроцитах. Нарастание количества КД в указанных средах может вызвать повреждение и частичное лизирование клеточных мембран эритроцитов и повреждение эндотелия сосудов (М.И. Балаболкин, 2005). Формирование патологии также сопровождалось увеличением уровня конечного продукта ПОЛ - малонового диальдегида. Максимальные изменения выявлены в плазме, где уровень этого продукта был на 20,5% больше, чем в группе интактных животных. Вероятно, что столь существенное усиление указанных процессов может привести к усилению процессов пероксидациии липидов и изменению качественных характеристик липопротеидов с их накоплением в пенистых клетках, являющихся основой атеросклеротического поражения крупных сосудов, и принимают участие в повреждении эндотелиальных клеток, способствуя развитию микроангиопатии (S.F.Wolf, 1993).

Кроме того, течение стрептозотоцинового диабета сопровождается снижением активности супероксиддисмутазы. Наиболее выраженное уменьшение количества фермента отмечается в плазме крови крыс, что, по-видимому, ведет к накоплению продуктов окисления и увеличивает вероятность повреждения тканей (В.А. Барсель и др., 1999). В ходе эксперимента выяснилось, что после курсового введения Гимнемы-25 регистрировалось достоверное снижение количества КД в красных клетках крови, при этом несколько уступая по эффективности препарату сравнения танакану. Установлено, что после применения Гимнемы-25 особенно низкий уровень МДА (на 12,2%, р<0,05, по сравнению с группой контроль-диабет) отмечается в эритроцитах. Таким образом, Гимнема-25 проявляет антиоксидантные свойства, влияя на образование как начальных, так и конечных продуктов пере-кисного окисления и несколько увеличивая активность антиоксидантных ферментов в плазме крови крыс с экспериментальным СД, но при этом уступает по эффективности танакану. Полученные результаты также свидетельствуют о некоторой тенденции к восстановлению дисбаланса между прооксидантами и аитиоксидантной системой и вполне согласуются с результатами ранее проведенных исследований (отчет СКС «Альянс от 12.01.05).

Следующим этапом работы было выяснение влияния Гимнемы-25 на реологические свойства крови, поскольку при СД активация свободно-радикальных процессов обуславливает нарушения гемореологических свойств крови, реализуемые через повреждения циркулирующих эритроцитов и соответственно изменение вязкостных характеристик крови (A.M. Шилов и др., 2008). Так было выявлено, что Гимнема-25 оказывает влияние на реологические свойства крови, о чём свидетельствует статистически значимое снижение показателей вязкости крови по отношению к группе крыс со стрептозотоцин-индуцированным СД во всем диапазоне скоростей сдвига и снижение индекса агрегации эритроцитов в 1,4 раза по отношению к контрольной группе крыс с СД. Так как повышенная вязкость крови явлется независимым фактором риска для СД вследствие нарушения микроциркуляции, то влияние Гимнемы-25 на уменьшение вязкости крови в капиллярной системе имеет особую значимость, поскольку показано, что сопротивление на уровне микроциркуляторного русла составляет до 70% общего сосудистого сопротивления (О.В. Коркушко, В.Ю. Лишневская, 2002).

Основными факторами, создающими феномен вязкости крови кроме объёмной концентрации эритроцитов, свойств и состава плазмы, клеточной агрегации, является деформируемость клеточных элементов (Л.Н. Катюхин, 2005). Будучи важнейшим свойством эритроцитов, деформируемость обусловливает их способность выполнять транспортную функцию (К.М. Аносова и др., 2006). В представленном исследовании с использованием фильтрационного теста было выявлено, что Гимнема-25 при курсовом применении увеличивала скорость фильтрации взвеси эритроцитов на 37,9%, что по литературным данным (В.В. Зинчук, 2001) может свидетельствовать об о влиянии Гимнемы-25 на внутреннюю вязкость, клеточную геометрию и на свойства мембраны обеспечивающие форму и эластичность эритроцита. Подтверждением данного тезиса можно считать зарегистрированное достоверное увеличение индекса доставки кислорода на 21,3%.

Немаловажным фактром в снижении деформируемости эритроцитар-ных мембран является снижение поверхностного заряда мембраны эритроцита (Ю.В. Котовская, 2005). Гимнема-25 повышет интенсивность флуоресценции зонда ДСМ4" в эритроцитарной взвеси в 1,4 раза по сравнению с кон-тролем-диабет, а значит, препятствует агрегации эритроцитов и снижает травматизацию и разрушение клеток в процессе гемоциркуляции. А это, в свою очередь, предотвращает выделение в кровь факторов свертывания, улучшая процессы микроциркуляции (Г.Е. Ройтберг и др., 2007).

Известно, что повышенная агрегация эритроцитов характерная для СД приводит к нарушению транскаппилярного обмена, выбросу биологически активных веществ, и стимулирует адгезию и агрегацию тромбоцитов (О.П. Шевченко и др., 2006). Гимнема-25 при курсовом введении снижала выраженность основных проявлений гиперагрегации тромбоцитов, что подтверждалось уменьшением величины индекса АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов в 2 раза (по сравнению с контролем-диабет), превосходящей по эффективности танакан, при этом и Гимнема-25 и танакан не оказывали существенного влияния на показатели коагуляционНого гемостаза. Полученные результаты свидетельствуют о влиянии Гимнемы-25 на уменьшение функциональной активности тромбоцитов и их способности к внутрисосудистой агрегации, что, в конечном счете, препятствует развитию сосудистых поражений (М.Н. Мамедова и др., 2003).

По результатам проведенных исследований можно констатировать, что Гимнема-25 также эффективно снижает уровень глюкозы в крови и сопоставима по эффекту с препаратом «Рго-b» (США) и другими экстрактами ГЛ, полученными с помощью различных запатентованных методов водно-спиртовой экстракции, описанных в литературе (Gymnema sylvestre, 2003). Кроме того, Гимнема-25 восстанавливает структурную целостность инсули-нопродуцирующих клеток поджелудочной железы, задерживает всасывание углеводов и олеиновой кислоты в кишечнике, при экспериментальных формах сахарного диабета нормализует уровень глюкозы в крови, снижает уровень холестерина и влияет на липиды плазмы крови, улучшает реологические свойств крови и уменьшает выраженность процессов пероксидации.

Проанализировав вышеизложенные данные, на следующем этапе работы мы посчитали возможным оптимизировать Гимнему-25 в ранее не патентованных комбинациях отечественными источниками биофлавоноидов - экстрактами гребней винограда и девясила высокого (патент РФ № 2289419 от 20.12.2004 г.) с целью создания растительной Композиции, позиционируемой как потенциальный антидиабетический лекарственный препарат с антиокси-дантными и гемореологическими свойствами (табл. 6.1).

В настоящее время недостаточно средств, с помощью которых возможно произвести направленную блокаду клеток, принимающих участие в механизмах деструкции Р-клеток, приводящих к развитию сахарного диабета, его профилактике и устранению сопутствующих осложнений. Выбор экстракта девясила высокого был обусловлен тем, что в основе его механизма действия лежит усиление продукции регуляторных цитокинов при аутоиммунном диабете (Т. Kobayashi et al., 2002), снижается уровень у-интерферона и соответственно его повреждающее действие на клетки поджелудочной железы, уменьшается деструкция клеток, нормализуется уровень инсулина в крови. Сухой экстракт девясила в комплексном лечении устраняет нарушения толерантности к глюкозе и оптимизирует ее метаболизм, обладает превентивным действием на деструктивный процесс в поджелудочной железе (Q.H. Song, 2002).

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Воронкова, Мария Павловна, 2009 год

1. Автандилов, Г.Г. Основы количественной патологической анатомии / Г.Г. Автандилов М.: Медицина, 2002. - 240 с.

2. Адо, В.А. Подавление аллергических реакций низкомолекулярными соединениями / В.А. Адо, Л.А. Горячкина Минск, 1971, - 40 с.

3. Аметов, А.С. Факторы риска сахарного диабета. Роль ожирения. // Русский медицинский журнал T.l 1 - № 27 - 2003 - С. 1447-1480.

4. Анализатор вязкости крови / Н.А. Добровольский и др. // Реологические исследования в медицине: сб. науч. тр. М.: НЦХ РАМН, 1998. - с.45-51.

5. Аннотированный отчёт «Изучение гипогликемических свойств биологически активного вещества (гимнемы лесной) / Отчет СКС «Альянс» от 28.05.2003 и 18.10.03 // Под рук. А.А. Спасова и др. // Волгоград, ВолГМУ. -2003.- 12 с.

6. Антигипергликемические и антиоксидантные эффекты «Диа-(3» у больных сахарным диабетом 2 типа / М.И. Балаболкин и др. // Клиническая эндокринология\\ реф. сб. новости науки и техники 2007.- № 4.- С. 6-14.

7. Анциферов, М.Б. Исследование UKPDS и основные принципы перо-ральной терапии сахарного диабета 2 типа / М.Б. Анциферов // Ожирение, метаболический синдром, сахарный диабет 2 типа; под общ. ред. И.И. Дедова М., 2000.- 111с.

8. Анциферов, М.Б. Новые подходы к лечению сахарного диабета типа 2: Глюкагогоподобный пептид-1 и эксенатид (БАЕТА) / М.Б. Анциферов, Л.Г. Дорофеева // Фарматека. 2007. - № 11. - С. 4-23.

9. Артериальная гипертония и ожирение / О.П. Шевченко, Е.А. Праскур-ничий, А.О. Шевченко // М. Реофарм. -2006. 213 с.

10. Арутюнян, А.В. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма / А.В. Артюнян, Е.Е. Дубина, Н.Н. Зыбина СПб., 2000. - 294 с.

11. Бабичев, В.Н. Нейрогуморальная регуляция овариального цикла\ В.Н. Бабичев М.: Медицина, 1984. - 240 с.

12. Балаболкин, М.И. Влияние метформина («Polfa) на показатели пере-кисного окисления липидов у больных сахарным диабетом 2 типа / М. И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская // Клин, фармакология и терапия. -2001.-№4.-с. 89-90.

13. Балаболкин, М.И. Лечение сахарного диабета и его осложнений / М.И. Балаболкин, Е.М. Клебанова, В.М. Креминская. Москва, 2005 - 512 с.

14. Балаболкин, М.И. Роль гликирования белков, окислительного стресса в патогенезе сосудистых осложнений при сахарном диабете / М.И. Балаболкин // Сахарный диабет. 2002, - № 5. - С. 8 - 16.

15. Балаболкин, М.И. Существуют ли возможности улучшения сахарос-нижающей терапии сахарного диабета типа II? / М.И. Балаболкин // Информационный бюллетень РНИИ Здоровья.- М., 2006. №' 1.- С. 1-3.

16. Баранов, В.Г. Экспериментальный сахарный диабет / В.Г. Баранов -Л., 1983.-300 с.

17. Баркаган, З.С. Основы диагностики нарушений гемостаза / З.С. Барка-ган, А.П. Момот М.: «Ныодиамед», 2001. - С. 285.

18. Беленький, М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта / М.Л. Беленький. Л., - 1963. - 152 с.

19. Бобырева, Л.Е. Влияние фенольных антиоксидантов на развитие ал-локсанового диабета у крыс. / Л.Е. Бобырева // Эксп. клин. фарм. 1997. - Т. 60, № 3.- С. 51-53.

20. Болдырев, А.А. Двойственная роль свободнорадикальных форм кислорода в ишемическом мозге / А.А. Болдырев // Нейрохимия 1995. - Т. 12, № 3. - С. 246-257.

21. Бондарь, Т.П. Лабораторно-клиническая диагностика сахарного диабета и его осложнений / Т.П. Бондарь, Г.И. Козинец М.: Медицинское информационное агенство, 2003. - 88 с.

22. Боровая, Т.Г. Влияние экспериментальной гиперпролактинемии на половой цикл и фолликулогенез / Т.Г. Боровая, О.В. Волкова // Бюл. эксперим. биологии и медицины 1994. - № 9 - С. 326-328.

23. Василенко, В.В. Сахарный диабет. Место комбинированных сахарос-нижающих препаратов / В.В. Василенко // Русский медицинский журнал 2007. - №1. - С. 468.

24. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах / Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М., 1972. - 124 с.

25. Влияние «Диа-р» на регенерацию Р-клеток поджелудочной железы. / М.П. Самохина и др. // Информационный бюллетень РНИИ Здоровья.- М., 2006.-№ 1.-С. 6-7.

26. Влияние Гимнемы лесной на регенерацию Р-клеток поджелудочной железы / В.Б. Писарев и др. // Сб. матер. XIV Национального конгресса «Человек и лекарство» 2007. - Р. 863.

27. Влияние зиксорина на фармакокинетику антипирина у интактных и сенсибилизированных морских свинок / Т.Г. Хлопушина и др.. // Бюл. экспер. биол. 1991. - № 7. - с. 67-69.

28. Влияние нафтидрофурила на перекисное окисление липидов сыворотки и мембраны эритроцитов больных инсулинзависимым сахарным диабетом /

29. A.А. Кубатиев и др. // Бюллетень эксперим. биологии и медицины. 1996. - Т. 122, №9.-С. 338-41.

30. Возможности неинвазивного конроля показателей, характеризующих реологические и коагуляционные свойства крови / О.А. Царев и др. //Ангиология и сосудистая хирургия. 2004, - Т. 10. - С. 52-53.

31. Волчегорский, И.А. Тест «принудительное плавание» / И.А. Волче-горский М. - 2000. - 111 с.

32. Галенок, В.А. Гемореология при нарушениях углеводного обмена /

33. B.А. Галенок, Е.В. Гостинская, В.Е. Диккер. Новосибирск: Наука, 1987. -232 с.

34. Гипогликемические свойства экстракта Гимнемы лесной / А.А. Спо-асов и др. // Вестник ВолГМУ. 2007. - №1 (12). - С. 78-72.

35. Гительзон, И.И. Закономерности распределения эритроцитов по стойкости к различным гемолитикам / И.И. Гительзон, И.А. Терсков // Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. 1961. - С. 30-59.

36. Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц; пер. с англ.-М., Практика, 1998. 459 с.

37. Гущин, А.Г. Оценка комплекса гемореологических параметров при эритроцитозе / А.Г. Гущин, А.В.Муравьев, И.К. Шаечкина // Физиология человека. 2000.-№ 2. - С.111-114.

38. Дедов, И.И. Введение в диабетологию: Руководство для врачей / И.И. Дедов, В.В. Фадеев. М.: Берег, 2000. - 300 с.

39. Дедов, И.И. Влияние антиоксидантов на состояние ПОЛ и функцию клеток у больных с впервые выявленным инсулинзависимым сахарным диабетом / И.И. Дедов, В.А. Горелышева, О.Н. Смирнова // Проблемы эндокринологии.- 1995.- Том 41, №5.-С. 16-20.

40. Дедов, И.И. Клинические рекомендации. Эндокринология / И.И. Дедов, Г .А. Мельниченко М.: ГЭОТАР МЕДИА, 2008. - 304 с.

41. Дедов, И.И. Сахарный диабет и артериальная гипертензия / И.И. Дедов, М.В. Шестакова. М.: МИА, 2006. - 344 с.

42. Дедов, И.И. Экономические проблемы сахарного диабета в России / И.И. Дедов, С.В. Сунцов, С.В. Кудряков // «Сахарный диабет»- 2000.- № 3. -1580.

43. Демидова, И.Ю. Фармакотерапия сахарного диабета II типа / И.Ю.Демидова // РМЖ. 1999. - № 7. с. 18.

44. Дефицит витаминов у больных сахарным диабетом пути компенсации / В.Д. Забелина // Consilium provizorum. - 2004. - № 5. - С. 13.

45. Добрецов, Г.Е., Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов / Г.Е. Добрецов. М.: Наука. 1989. - 277с.

46. Древаль, А.В. Взаимосвязь HbAlc и параметров перорального теста толерантности к глюкозе у больных сахарным диабетом 2 типа. / А.В. Древаль, Редькин Ю.А., Богомолов В.В. // Проблемы эндокринологии М. - 2005. - Деп. № 53913.

47. Дудченко, Г.П. Противодиабетическая активность производных бен-зимидазола: дис. д-ра биол. наук: 14.00.25 / Г.П. Дудченко; Волг. мед. ун-т, 2001.-331 с.

48. Зборовский, А.Б. Осложнений Фармакотерапии / А.Б. Зборовский, И.Н. Тюренков М.: Медицина. - 2003 - 333 с.

49. Зинчук, В.В. Деформируемость эритроцитов: физиологические аспекты / В.В. Зинчук // Физиол. чел. 2001. - № 2. - С. 154-160.

50. Зинчук, В.В. Роль кислородосвязывающих свойств крови в поддержании прооксидантно-антиоксидантного равновесия ограпнизма / В.В. Зинчук, М.В. Борисюк // Успехи физиологических наук. 1999. - №3. - С. 38-48.

51. Иванов, К.П. Роль лейкоцитов в динамике микроциркуляции в норме и при патологии / К.П. Иванов, Н.Н. Мельникова // Общ. биол. 2004. - № 1. - С. 3-13.

52. Иванова, В.Ф. Структурно-функциональные изменения в поджелудочной железе белой крысы при введении глюкозы / В.Ф. Иванова, А.А. Пузы-рёв // Морфология. 2006. - Т. 129. - С.67-71.

53. Избыточный вес и ожирение / Д.Г. Бессесен, Р. Кушнер. М., 2006 -240 с, ил.

54. Изменения реологических свойств крови у больных с метаболическим синдромом / A.M. Шилов и др. // РМЖ № 2. - 2008. - С. 18.

55. Йена, С.С. Репродуктивная эндокринология: пер. с англ; под ред. С.С Йена, Р.Б. Джарффе. М., 1998. - Т. 1. - 704 с.

56. Катюхин, JI.H. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования / JI.H. Катюхин // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. 1995. - Т 81. - №6. - С. 122-129.

57. Катюхии, JI.H. Роль реологических детерминант эритроцитов в регуляции структуры кровотока. / JI.H. Катюхин. // Клин. лаб. диагностика. 2001. -№ 12. - С. 22.

58. Катюхин, JI.H. Роль реологических параметров эритроцитов в поддержании структуры кровотока у стрессированных крыс / JI.H. Катюхин // Авиакосмос и экологическая медицина. 2002. - № 1. - С. 64-67.

59. Кеттайл, В.М. Патофизиология эндокринной системы: пер. с англ./

60. B.М. Кеттайл, Р.А. Арки. М.: «БИНОМ», 2007. - 336 е., ил.

61. Климов, А.Н. Обмен липидов и липопротеидов и его нарушения. -С+Пб: «Питер», 1999. 512 с.

62. Кондратьева, JI.B. Бигуаниды в лечении сахарного диабета 2 типа. Современный взгляд на проблему/ JI.B. Кондратьева // Русский медицинский журнал. 2007. - №1, - С. 305.

63. Коррекция тромбоцитарно-сосудистого гемостаза при метаболическом синдроме / И.Н.Медведев и др. // Клиническая медицина. 2006. - № 1.1. C.46.

64. Косолапов, В.А. Окислительный стресс в патогенезе сахарного диабета и его осложнений / В.А. Косолапов, М.П. Самохина, А.А. Спасов // Информационный бюллетень РНИИ Здоровья. 2006. - № 1- С. 8.

65. Крылов В.Н. Типовые изменения электрофоретической подвижности эритроцитов при стрессовых воздействиях / В.Н. Крылов, А.В. Дерюгина // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 2005. - № 4. - С. 364-366.

66. Кубатиев, А.А. Индуцированная АДФ и тромбином мобилизация внутриклеточного Са2+ в тромбоцитах больных сахарным диабетом с сосудистыми осложнениями / А.А. Кубатиев, Т.С. Балашова, Е.Н. Томилова // Бюлл. эксперим. биол. и мед. 1996. - № 1. - С. 112-115.

67. Лаикин, В.З. Изучение аскорбат-зависимого перекисного окисления липидов тканей при помощи теста с 2-тиобарбитуровой кислотой. / В.З. Ланкин,

68. С.М. Гуревич, Е.Б Бурлакова // Труды московского общества испытателей природы. М. - 1975. - Т. 52. - С. 73-78.

69. Лебедева, Е.А. Фармакологическая блокада гликозилирования белков при сахарном диабете производными сульфонилмочевины и бигуанидами / Е.А. Лебедева // Эксп. и клин, фармакология. 1996. - №5. - С.40-42.

70. Лекарственные растения / А.Ф. Лебеда и др.. М.: АСТ-Пресс Книга,2004.-296 с.

71. Люсов, В.А. Метод графической регистрации агрегации тромбоцитов и изменения ее при ишемической болезни сердца / В.А. Люсов, Ю.Б. Белоусов // Кардиология. 1971. - № 8. - С.459-461.

72. Максимов, Г.В. Исследование роли вязкости и проницаемости плазматической мембраны эритроцита в изменениях связывания кислорода гемоглобином при сахарном диабете / Г.В. Максимов // Бюллетень эксп. биологии и мед.2005. Т.140, №11. - С. 519-522.

73. Мамедов, М.Н. Возможны ли диагностика и лечение метаболического синдрома в реальной практике? / М.Н. Мамедов // Лечащий врач. 2006.- № 6. -С.18.

74. Маньковский, Б.Н. Лечение сахарного диабета второго типа фарма-коэкономические соображения. / Б.Н. Маньковский // Медицинская газета «Здоровье Украины». - 2004. - №108. - С. 14-20.

75. Матюшичев, В.Б. Связь электрофоретической подвижности эритроцитов с их концентрацией в крови крыс /В.Б. Матюшичев, В.Г. Шамратова // Бюллетень эксп. биологии и мед. 2005, - Т. 139, № 3. - С. 250-51.

76. Метаболический синдром / Под редакцией Г.Е. Ройтберг. // Москва, «МЕДпресс-информ», 2007. 300 С., ил.

77. Мирсаева, Г.Х. Влияние танакана на свободно-радикальное окисление и систему гемостаза у больных гемореологической лихорадкой с почечным синдромом / Г.Х. Мирсаева, Р.Ф. Фазлыева, Ф.Х. Камилов // Нефрология. -2001. -№4. С49-54.

78. Муравьев, А.В. Реологические свойства крови и транспорт кислорода при долговременной адаптации к мышечным нагрузкам. / А.В. Муравьев, А.Г. Гущин, А.А. Муравьев // Рос. физиол. журн. им. И. М. Сеченова. 2001. - № 7. -С. 895-900.

79. Новый высокочувствительный метод анализа агрегации тромбоцитов / З.А. Габбасов и др. // Лабораторное дело. 1989. - №10. - С. 15-18.

80. О лекарственных средствах: Федеральный закон РФ // Собрание законодательства РФ, 1998. № 26. - Ст. 2.

81. О лекарственных средствах: Федеральный закон РФ // Собрание законодательства РФ, 2000. № 2. - Ст. 2.

82. О лекарственных средствах: Федеральный закон РФ // Собрание законодательства РФ, 2002. № 1, часть I. - Ст. 2.

83. О лекарственных средствах: Федеральный закон РФ // Собрание законодательства РФ, 2003. № 2. - Ст. 167.

84. Положение о Министерстве здравоохранения Российской Федерации // Собрание законодательства РФ, 2002. №18. - Ст. 1771.

85. Потемкин, В.В. Метаболические показатели и структура мембран эритроцитов при ожирении и метаболическом синдроме у женщин / В. В. Потемкин, С.Ю.Троицкая, А.Г. Максина // Российский медицинский журнал. -2006. №1. - С.35.

86. Прилепская, В.Н. Ожирение Клиника, Диагностика, лечение / В.Н. Прилепская, Е.В. Цаллагова. М., «МЕДпресс-информ», 2007 - 98 с.

87. Рациональная фармакотерапия заболеваний эндокринной системы и нарушения обмена веществ. Руководство для практикующих врачей. / под ред. И.И. Дедова, Г.А. Мельниченко. М.: Литтера, 2006. - 1080 с.

88. Результаты клинических исследований нового антидиабетического препарата / М.И. Балаболкин и др. // Бюллетень российского НИИ здоровья — 2007.-№2.-С. 13-18.

89. Ройтман, Е.В. Биореология. Клиническая гемореология. Фундаментальные основы, показатели, приборы / Е.В. Ройтман // Клип. лаб. диагн. 2001,- № 5. С. 25-32.

90. Российская энциклопедия биологически активных добавок / В.И. Петров и др.. М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2007. - 1062с.

91. Руководство по иммуногистохимической диагностике опухолей человека / 3-е изд., доп. и перераб.; под общ. редакцией С.В. Петрова, Н.Т. Райхлина.- Казань, 2004. 456 с.

92. Руководство по проведению клинических исследований новых лекарственных средств / под ред. Р.У. Хабриева, И.А. Денисова, В.Б. Герасимова, В.Г. Кукеса. М., 2005. - 359 с.

93. Саноцкий, И.В. Критерии вредности в гигиене и токсикологии при оценке опасности химических соединений / И.В. Саноцкий, И.П.Уланова. М.: Медицина, 1975. - 328 с.

94. Саноцкий, И.В. Отдаленные последствия влияния химических соединений на организм / И.В. Саноцкий, В.Н. Фоменко М.: Медицина, 1979. - 33 с.

95. Саркисов, Д.С. Микроскопическая техника: руководство / Д.С. Сарки-сов, Ю.Л. Перов. М.: Медицина, 1996. - 544с.: ил.

96. Сахарный диабет у детей и подростков / И.И. Дедов, Т.Л. Кураева, В.А. Петеркова. М., 2007. - 160 с.

97. Сахарный диабет: патогенез, классификация, диагностика и лечение: пособие для врачей / И. И. Дедов и др.. Москва, 2003, - 171с.

98. Севергина, Э.С. Инсулинзависимый сахарный диабет взгяд морфолога / Э.С. Севергина. - М.: Издательский дом Видар - М, 2002. - 152 е., ил.

99. Семешко, С.Г. Общая антиоксидантная активность слезной жидкости. / С.Г. Семешко, P.P. Фархутдинов // Клин. лаб. диаг. 2002. - № 24. - С. 33-34.

100. Синдром диабетической стопы. Атлас для врачей-эндокринологов /

101. М.Б. Анциферов и др.. М., 2002 - С.80.

102. Синдром повышенной вязкости крови / М.Б. Плотников и др. // Бюлл. Экспериментальной биологии и медицины. 1998. - Т. 126, № 8. - С. 18.

103. Смирнов, А.Н. Элементы эндокринной регуляции: научное издание / под ред. акад. РАМН В.А. Ткачука. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 352 е.: ил.

104. Сорокина, А.А. Фитотерапия сахарного диабета у детей / А.А. Сорокина, В.П. Кукес, А.К. Углицких // Медицинский научный и учено методический журнал. - 2001.- № 4. - С. 14.

105. Спасов, А.А. Гимнема лесная / А.А. Спасов, А.П. Ефремов // Информационный бюллетень РНИИ Здоровья. М., 2006. - № 1. - С. 9-10.

106. Спасов, А.А. Магний в медицинской практике / А.А. Спасов. Волгоград, 2000 - С 269.

107. Спасов, А.А. Проблема диабета, методы профилактики и лечения / А.А. Спасов, М.П. Самохина // Российский НИИ здоровья, Информационный бюллетень М., 2006. - № 1. - С.4.

108. Справка о нецелесообразности изучения канцерогенных эффектов мультикомпонентного лекарственного средства на основе экстракта гимнемы лесной (диа-Р) / Отчет СКС «Альянс» от 2.08.2005 // Под рук. А.А. Спасова и др. // Волгоград, ВолГМУ. 2008. - 32 с.

109. Токсикология лекарственных средств. Издание второе дополненное / Т.А. Гуськова М.: МДВ., 2008. - 161 с.

110. Трофимов, А.В. Нейрокринные клетки желудочно-кишечного тракта в моделях преждевременного старения / А.В. Трофимов, И.В. Князькин, И.М. Кветной Спб.: ДЕАН, 2005.- 208 с.

111. Фармакологические свойства Гимнемы лесной / А.А. Спасов и др. // материалы 1-го международного съезда фитотерапевтов «Современные проблемы фитотерапии». М., 2006. - С. 228-235.

112. Фирсов, Н.Н. Классификация тяжести гемореологических расстройств / Н.Н. Фирсов, Т.В. Коротаева, М.А. Вышлова // Тромбоз, гемостаз и реология. 2003.-№ 1. - С. 14-15.

113. Фисенко, В.П. Анализ наиболее перспективных исследований по созданию новых лекарственных средств / В.П. Фисенко, А.П. Дрожжин, М.Т. Абидов. Научный центр экспертизы и государственного контроля лекарственных средств Минздрава России, 2000. - 48 с.

114. Функциональные методы исследования в эндокринологии / З.И. Цюхно и др.. Киев: Здоровье, 1981. - 240с.

115. Чазова, И.Е. Методы диагностики инсулинорезистентности / И.Е. Чазова, В.Б. Мычка // Consilium medicum. 2004. - № 1. - С. 186.

116. Эллиниди, В.Н. Практическая иммуногистоцитохимия: методические рекомендации / В.Н. Эллиниди, Н.В. Аникеева, Н.А. Максимова СПб.: ВЦЭРМ МЧС России, 2002. - 36 с.

117. Эндокринология: национальное руководство / И.И. Дедов. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - С. 1072.

118. Якусевич, В.В. Синдром гипервязкости при артериальной гипертонии и его лечение тренталом / В.В. Якусевич, А.В. Муравьев, Л.Г. Зайцев // Клин, фармакол. и терапия. 1998. - №2. - С. 53-54.

119. Antidiabetic properties of Dia-P: experimental and clinical investigation / A.A. Spasov et al. // International conference on diabetes. 2007. P. 7-12.

120. A genomic perspective on protein tyrosine phosphatases: gene structure, pseudogenes, and ge linkage // JN. Andersen et al. // Vecchio RD,FASEB J. 2004. -№18 -P. 8-30.

121. Abbitt, K.B. Rheological properties of the blood influencing selectin-mediated adhesion of flowing leukocytes / K.B. Abbitt, G.B. Nash // Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2003. - № 1. - P. 229-240

122. Ahmed, M. Molecular modeling of SWR-0342SA, a beta3-selective agonist, with betal- and beta3-adrenoceptor / M. Ahmed, M. Ishiguro, T. Nagatomo // Life Sci. 2006. - №78. - P. 2019-23.

123. Ahren, B. Gut peptides and type 2 diabetes mellitus treatment / B. Ahren // Curr Diab Rep. 2003. - № 3. P. 365-372.

124. American Conference of Governmental Industrial Hygienists. Documentation of Threshold Limit Values for Chemical Substances and Physical Agents and Biological Exposure Indices for 2001. Cincinnati, OH. 2001. - P. 1.

125. American Diabetes Association: Clinical practice recomendations .- Diabetes Care (suppl. l).-2000. P. SI-SI 16.

126. An extract of Gymnema sylvestre leaves and purified gymnemic acid inhibits glucose-stimulated gastric inhibitory peptide secretion in rats / T.Fushiki et al. // J Nutr. 1992. - Vol. 122, № 12. - P. 2367-2440.

127. Antidiabetic effect of a leaf extract from Gymnema sylvestre in non-insulin dependent Diabetes mellitus patients / K. Baskaran et al. // J. Ethnopharma-col. 1990. - № 30. - P. 295 - 305.

128. Antihyperglycemic effects of gymnemic acid IV, a compound derived from Gymnema sylvestre leaves in streptozotocin-diabetic mice / Y. Sugihara et al. // J Asian Nat Prod Res. 2000. - № 2. P. 321-7.

129. Aronoff, SL. Glucose metabolism and regulation beyong insulin and glucagon / SL. Aronoff, K. Berkowitz, B. Shireiner // Diabetes Spectrum. 2004. -№17.-P. 183-90.

130. Baggio, LL. Glucagon-like peptide-1 and glucagon-like peptide-2. Best Pract Res / LL. Baggio, DJ. Drucker // Clin Endocrinol Metab. 2004. - № 18. - P. 531-554.

131. Bailey, C.J. Potential new treatments for type 2 diabetes. / С J. Bailey // Diabetologia. 2000. - Vol.43, №21. - P. 259-265.

132. Baskurt, O.K. Blood rheology and hemodynamics / O.K. Baskurt, H.J. Meiselman // Semin. Thromb. Hemost. 2003. - № 29. - P. - 435-450.

133. Baskurt, O.K. Protection of erythrocytes from sub-hemolytic mechanical damage by nitric oxide mediated inhibition of potassium leakage / O.K. Baskurt, M. Uyuklu, H.J. Meiselman // Biorheology. 2004. - № 41. - P. 79-89.

134. Beer, T Prognosis in malignant mesothelioma related to MIB1 proliferation index and histological subtype. / T. Beer, R. Buchanan, A. Matthews, R. Strad-ling, N. Pullinger, R.Pethybridge // Human Pathol 1998. - № 15. - P. 146.

135. Bertalli, E. Association between endocrine pancreas and ductal system. More than an epiphenomenon of endocrine differentiation and development? / E. Bertalli, M. Bendayan //J. Histocem. & Cytocem. 2005. - P. 1071-1086.

136. Betta-cell response to metformin-glidenclamide combination tablets (Glucovance) in patient with type 2 diabetes / S. Bruce et al. // Int.J Clin. Pract. -2007. № 60(7). - P. 783-9.

137. Bhakuni, D.S. Screening of Indian plants for biological activity: Part III. /D.S. Bhakuni, M.L. Dhar, M.M. Dhar, B.N. Dhawan // Ind. J. Exp. Biol.- 1971.- № 9.-P. 91-102.

138. BIBRA Working Group; ТА: Toxicity Profile. TNO BIBRA Intl 2001.

139. Birks, J. Ginkgo biloba for cognitive impairment and dementia / J. Birks, E.V. Grimley, M. Van Dongen // Cochrane Database Syst Rev. 2002. - №4. - C.312.

140. Bishayee, A. Hypolipidaemic and antiatherosclerotic effect of oral Gym-nema sylvestre R.Br, leaf extract in albino rats fed on a high fat diet / A. Bishayee, M. Chatterjee // Phytotherapy Res. 1994. - Vol. 8, № 2.- P. 118-120.

141. Blood rheology in acute myocardial infarction: effects of high dose i. v. streptokinase compared to placebo / H.R. Arntz et al. // Eur. Heart J. - 1992. -Vol. 13.-№2. - P. 275-280.

142. Bone, K. Phytotherapy Review & Commentary Gymnema: A Key Herb in the Management of Diabetes, FNIMH, FNHAA / K. Bone. // 2002.

143. Born, G. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal. / G. Born // Nature. 1962. - №9. - P. 927-936

144. Bozdouani, О. Effect of the combination of glibenclamide, fn ATF-dependent potassium Channel Blocker, and Metoprolol, a cardioselective p-adrenoreceptor blocker / O. Bozdouani, J. Lepr // DiabeticMedicine. 2006. - №23(2) - P128-133.

145. Bradley, R. Algorithm for complementary and alternative medicine practice and research in type 2 diabetes / R. Bradley // J. Altern Complement Med. 2007. -№13(1).-P. 159-75.

146. Brichard, S.M. The role of vanadium in the management of diabetes. // S.M. Brichard, J.C. Henquin // Trends Pharmacol Sci.- 1995,- Vol. 16.- N8.- P. 265335.

147. Brubaker, PL. Minireview: Glucagon-like peptides regulate cell proliferation and apoptosis in the pancreas, gut, and central nervous system / PL. Brubaker, DJ. Drucker // Endocrinology. 2004. - № 145. P. 2653-2659.

148. Buse, JB, Type 2 diabetes mellitus. / In: Larsen PR, Kronenberg HM, Melmed S, Polonsky KS, eds. // Williams Textbook of Endocrinology. 2003. - № 10. - P. 1427-1483.

149. Butler, A.E. p-cell deficit and increased P-cell apoptosis in humans with type 2 diabetes / A.E. Butler, J. Janson, B. Bonner-Weir // Diabetes. 2003. - P. 102110.

150. Chini, E. N. Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate: a new intracellular second messenger / E. N. Chini, F. G. S. De Toledo // Am J Physiol Cell Physiol. 2002.-№ 282 (6).-C. 1191 - 1198.

151. Clayton, G.D. Patty's Industrial Hygiene and Toxicology / G.D. Clayton, F.E. Clayton // Toxicology. 1994. - Vol. 2A-F. - P. 3566-73567.

152. Clustem expression during regeneration of pancreatic islet P-cell in streptozotocin-induced diabetic rats / B.M. Kim et al. // Diabetologia. 2001. - P. 2192-2202.

153. Combined Inhibitors of Carcinogenesis: Effect on Azoxymethane-induced Intestinal Cancer in Rats / N.D. Nigro et al. // J. Natl. Cancer Inst. 1982. -№69(1).-P. 103-107.

154. Cowan, J.A. Structural and catalytic chemistry of magnesium-dependent enzymes / J.A. Cowan // Biometals. -2002. Vol. 15, № 3. - P. 225-235.

155. C-peptide, Na+, K(+)-ATPase, and diabetes / P. Vague et al. // Exp. Diabesity Res. 2004. - № 15. - P. 37-50.

156. Critical roles of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand in type 1 diabetes / S-E Lamhamedi-Cherradi et al. // Diabetes. 2003. - №52 - P. 2274-2279.

157. Cyano-(S)-pyrrolidine: a potent, selective, and orally bioavailable dipep-tidyl peptidase IV inhibitor with antihyperglycemic properties // J Med Chem. 2003. - № 46. - P. 2774-89.

158. Dako internationals group. Режим доступа: http://www.dako.co.uk/.

159. Decreased red blood cell aggregation subsequent to improved glycaemic control in Type 2 diabetes mellitus / B. Chong-Martinez et al. // Diabet. Med. -2003.-№ 186. P. 301-306.

160. Deport-specific regulation of perelin by rosiglitasone in diabetic animal model / H.J. Kim et al.. // Metabolism. 2007. - №56(6). - P. 676-85.

161. Desfaits, A.C. Normalization of plasma lipid peroxides, monocyte adhesion and tumor necrosis factor-a production in NIDDM patients after gliclazide treatment / A.C. Desfaits, O. Serri, G. Renier // Diabetes care. 1998. - Vol.21, № 4. -P. 21-28.

162. Development of 3DQSARmodels in cyclic ureidobenzenesulfonamides: human beta3-adrenergic receptor agonist / S.K. Kashaw et al. // Bioorg Med Chem3261.tt.-2003.-№ 13.-P. 2481-4.

163. Diet- and diabetes-induced changes of ob gene expression in rat adipose tissue. // D.J. Becker et al. // FEBS Lett. 1995. - Vol. 371. - № 3. - P. 324-332.

164. Dintenfass, L. Modifications of blood rheology during aging and agere-lated pathological conditions / L. Dintenfass // Aging (Milano). 1989. - № 1. - P. 99125.

165. Discovery of dapagliflozin: a potent, selective renal sodium-dependent glucose cotransporter 2 (SGLT2) inhibitor for the treatment of type 2 diabetes / Meng et al. // J Med Chem. 2008. - Vol. 51 (5). P. 1145-9.

166. Drucker, D.J. Biological actions and therapeutic potential of the gluca-gon-like peptides. / DJ. Drucker // Gastroenterology 2002. - № 122. - P. 531-544.

167. Drucker, D.J. Glucagon-like peptide-1 and the islet P-cell: augmentation of cell proliferation and inhibition of apoptosis / D.J. Drucker // Endocrinology. -2003.-P. 5145-5148.

168. Duncombe, W. G. The colorimetric micro-determination of long-chain fatty acids / W. G. Duncombe // J. Biochem. 1963. - № 88. - P. 7.

169. Dunn, C.J Metformin. A review of its pharmacological properties and therapeutic use in non-insulin-dependent diabetes mellitus / Dunn C.J., Peters D.H. // Drugs. 1995. - Vol. 49, № 5.- P. 721-770.

170. Effect of 6-week course of glucacons-like peptide 1 on glucaemic control, insulin sensitivity, and beta-cellfunction in type 2 diabetes: a parallel-group study /М. Zander et al. // Lancet. 2002. - № 359. - P.824-830.

171. Effect of Dianex, a herbal formulation on experimentally induced diabetes mellitus / M. S. Meghaddam et al. // Phytother Res. 2005. - № 19(5). - P. 40915.

172. Effect of Gymnema sylvestre, R.Br, on glucose homeostasis in rats / Y. Okabayashi et al. // Diabetes Res. Clin. Pract. 1990. - Vol. 9, № 2. - P. 143-151.

173. Effect of metformin treatment on insulin action in diabetic rats: in vivo and in vitro correlations. / L. Rossetti et al. // Metabolism. 1990. - Vol. 39, № 4.- P. 425-460.

174. Effect of novel non-tiazolidindinion peroxisome proliferation-activated receptor alfa/gamma agonist jn glucose uptake / X. Hu et al. // Diabetologia. 2007. -№50(5). -P. 1048-57.

175. Effect of plasma cholesterol on red blood cell oxygen transport / H. Buchwald et al. // Clin Exp Pharmacol Physiol. 2000. - № 27(12). - P. 951-5.

176. Effect on regeneration of pancreatic P-cell in neonatal streptozotocin-treated rats / L. Li et al. // Diabetes. 2004. - P. 608-615.

177. Effects of acetyl- and proprionyl-L-carnitine on peripheral nerve function and vascular supply in experimental diabetes. / MA. Cotter et al. // Metabolism. 1995. - Vol. 44. - № 9. - P. 1209-1223.

178. Effects of replacement fluids on plasma viscosity used for therapeutic plasma exchange / O. Arslan et al. // Ther Apher. 2004. - № 8(2). - P. 144-147.

179. Eherli, A.M. Drugs that alter blood viscositi. Their role in therapy / A.M. Eherli//Drugs. 1990. - Vol. 39, № 2. - P. 155-159.

180. Enzyme changes and glucose utilization in diabetic rabbits. The effect of Gymnema sylvestre R.Br. / K.R. Shanmugasundaram et al. // J. Ethnopharmacol.-1983.-№7.-P. 205-234.

181. Extraction and quantification of gymnemic acids through gymnemagenin from callus cultures of Gymnema sylvestre / P.V. Kanetkar et al. // Phytochem Anal. -2006.-№17(6).-P. 409-13.

182. Fecal Steroid Excretion Is Increased in Rats by Oral Administration of

183. Gymnemic Acids Contained in Gymnema sylvestre Leaves // Y. Nakamura et al. //328

184. Division of Food Chemistry, National Institute of Health Sciences. 1998. - № 18. -P.123

185. Fill, M. Ryanodine Receptor Calcium Release Channels / M. Fill, J. A. Copello // Physiol Rev. 2002, - № 82 (4). - P. 893 - 922.

186. Friedewald, W. Estimation of the concentration of low-density lipoprotein cholesterol in plasma without use of the preparative ultracentrifuge / W. Friedewald, R. Levy, D. Fredrickson // Clin Chem. 1972. - Vol. 18. - P. 499-502.

187. Functional food properties of non-digestible oligosaccharides: a consensus report from the ENDO project (DG//-I AIRI-CT94-1095) / J. Van Loo et al. // Br. JNutr. 2007. - №81. - P. 121-132.

188. Furse, KE Three-dimensional models for betaadrenergic receptor complexes with agonists and antagonists / KE. Furse, TP. Lybrand // J. Med Chem -2003. №46. - P. 4450-62.

189. Glevind, G. Antioxidants in animal tissue / G. Glevind // Acta chemica scand. 1963. - Vol.17, № 6. - P.1635-1640.

190. Goldin, B.R. Effect of Lactobacillus acidophilus dietary supplements on 1,2 dimethylhydrazine dihydrochloride-induced intestinal cancer in rats / B.R. Goldin, S.L. Gorbach // Natl. Cancer Inst. 1980. - № 64. - P. 263-265.

191. Gurmarin sensitivity of sweet taste responses is associated with co-expression patterns of Tlr2, Tlr3, and gustducin / N. Shigamura et al. // Biochem Biophys Res Commun. 2008. - № 367(2). - P. 356-63.

192. Gymnema sylvestre stimulates insulin release in vitro by increased membrane permeability / S.J. Persaud et al. // J Endocrinol. 1999. - № 163. - P. 207-212.

193. Gymnema. Lawrence Review of Natural Products // Aug. 1993. - P.201.

194. Hepatic РТР-IB expression regulates the assembly and secretion of apol-ipoprotein B-containing lipoproteins: evidence from protein tyrosine phosphatase-IB overexpression, knockout, and RNAi studies / W. Qiu et al. // Diabetes. 2004. -№53. P. 3057-66.

195. Hong-Min, L. Isolation and Structure elucidation of Gymnemic Acids, antisweet principles Gymnema sylvestre. / L. Hong-Min, K. Fumiyuki, T. Yoshisuke //Chem. Pharm. Bull. 1992. - Vol. 40, № 6. - P. 1366-1375.

196. Human beta3 adrenergic receptor agonists containing cyanoguanidine and nitroethylenediamine moieties / LL. Brockunier et al. // Bioorg Med Chem Lett. -2001.-№ 11.-P. 379-82.

197. IARC Carcinogenicity Ratings for CAS 8002-09-3 // IARC. 2004.

198. Idris, I. Sodium-glucose co-transporter-2 inhibitors: an emerging new class of oral antidiabetic drug / I. Idris, R. Donnelly // Diabetes Obes. Metab.- 2009. Vol. 11(2).-P. 79-88.

199. Immunobiochemical and molecular biologic characterization of the cell proliferation-associated nuclear antigen that is defined by monoclonal antibody Ki-67. / J. Gerdes et al. // Amer J Pathol. 1991. - P 123.

200. Immunological detection of tumor growth fraction (Ki-67 Antigen) in formalin-fixed and routinely processed tissues / J. Gerdes et al. // J Path. 1992. - P. 47.

201. In silico fragmentbased discovery of DPP-IV SI pocket binders. C. Rummeyet al. // Bioorg Med Chem Lett. 2006. - № 16. - P. 1405-9.

202. Inhibit Tumor Promotion in Mouse Skin Two-stage Carcinogenesis Car-thami Flos Extract and Its Component, Stigmasterol / Y. Kasahara et al. // Phytother. Res. 1994.-№ 8(6).-P. 327-331.

203. Inhibitory effect of gymnemic acid on intestinal absorption of oleic acid in rats / L.F. Wang et al. // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1998. - Vol. 76, № 10-11. -P. 1017-1040.

204. Islet-sparing effects of protein tyrosine phosphatase-1 b deficiency delays onset of diabetes in IRS2 knockout mice / J.A. Kushner et al. // Diabetes. 2004. -№53.-P. 61-6.

205. Isoxazole carboxylic acids as protein tyrosine phosphatase IB (PTP1B) inhibitors / H. Zhao et al. // Bioorg Med Chem Lett. 2004. - № 14. - P. 5543-6.

206. Jabbour, SA. Sodium glucose co-transporter 2 inhibitors: blocking renal tubular reabsorption of glucose to improve glycaemic control in patients with diabetes / SA. Jabbour, BJ. Goldstein // Int J Clin Pract. 2008. - Vol. 62(8). - P. 1279-84.

207. Kamerlin, S.C.L. A targeted molecular dynamics study of WPD loop movement in PTB1B / S.C.L. Kamerlin, R. Rucker, S. Boresch // Bichem Biophys Res Comm. 2006. - № 345. - P. 1161-66.

208. Kanetkan, P. Gymnema sylvestre: A Memoir / P. Kanetkan, R. Singhal, M. Kamat // J Clin Biochem Nutr. 2007. - № 41(2). - P. 77-81.

209. Khare, A.K. Hypoglycaemic activity of an indigenous drug (Gymnema sylvestre, «Gurmar») in normal and diabetic persons. / A.K. Khare, R.N. Tandon, J.P. Tewari // Indian J. Physiol. Pharmacol. 1983. - Vol. 27, № 3. - P. 257 -258.

210. Kieffer, Timothy J. The Glucagon-Like Peptides / Timothy J. Kieffer, J.F. Habener // Endocrine Reviews. 2007. - № 20(6). - P 876-913.

211. Kim, D. Exenatide reduzierte HbAlc und gewicht uber 82 wochen bei patienten mit typ-2 diabetes / D. Kim, M.E. Troufman // Diabetes Stoffwechsel. -2007. -№ 14(2). P.161.

212. Kimura, I. Convergent synthesis of a trisaccharide as its 2-(trimethylsilyl)ethyl glycoside related to the flavonoid triglycoside from Gymnema sylvestre /1. Kimura // Carbohydr Res. 2006. - № 341 (10). - P. 1697-701.

213. Knight, A.P. Plants associated with Congenita Defects and reproductive failure (Review) / A.P. Knight, R.G. Walter. Teton NewMedia. - 2004. - 200 c.

214. Knudsen, LB. Glucagon-like peptide-1: the basis of a new class of treatment for type 2 diabetes / LB. Knudsen // J Med Chem. 2004. - № 47. - P. 4128-34.

215. Kumar, P.S. CoMFA study on selective human (3-3-adrenoreceptor agonists / P.S. Kumar, P.V. Bharatam // ARKIVOC. 2005. - P. 67-79.

216. Lach, M.G. Gymnema sylvestre for diabetes mellitus: a systematic review / M.G. Lach // J Altern Complement Med. 2007. - № 13(9). - P.977-83.

217. Legrand, C. Glucose homeostasis in magnesium-deficient rats / C. Legrand // Metabolism. 1987. - Vol. 36. - P. 160-164.

218. Lemon, Ch. H. Differential Gurmarin Suppression of Sweet Taste Responses in Rat Solitary Nucleus Neurons. / Ch. H. Lemon, T. Imoto, D. V. Smith // J Neurophysiol. 2003. - № 90. - P. 911-923.

219. Luo, IT. Inhibitory effect of voglibose and gymnemic acid on maltose absorption in vivo / H. Luo, T. Imoto, Y. Hiji // World J Gastroenterol. 2001.- Vol. 7, № 2. - P. 270 - 274.

220. Madsen, P. N-Dibenzylidenhydrazines: Potent Competitive glucoses-phosphate catalytic enzyme inhibitors / P. Madsen, P. Jakobsen, N. Westergaard // Bi-org Med Chem Lett. 2001. - № 11. - P. 2165-7.

221. Mayer, RM. PDH kinase inhibitors: A novel therapy for type II diabetes? / RM. Mayer, B. Leighton, E. Kilgour // Biochem Soc Trans. 2005. - № 33. - P. 367-70

222. Medicinal Foodstuffs (IX1) The Inhibitors of Glucose Absorption from the leaves of Gymnema sylvestre R.Br. (Asclepiadaceae): Structures of Gymneo-mosides A and B. / Y. Masayuki et al. // Chem. Pharm. Bull. 1997. - Vol. 45. - № 10. - P. 1671-1676.

223. Modeling aided design of potent glycogen phosphoiylase inhibitors \\ Q.

224. Deng et al. // J Mol Graph Model. 2005. - № 23. - P. 457-64.

225. Molecular identification and characterisation of the platelet ADP receptor targeted by thienopyridine antitrombotic drugs / C.J. Foster // J. Clin. Invest. -2001.-V. 107. P.1591-1598.

226. Molecular interaction of the antagonist N-(Piperidin-l-yl)-5-(4-hlorophenyl)-l-(2,4-dichlorophenyl)-4-methyl lH-pyrazole-3-carboxamide with the CB1 cannabinoid receptor / J.Y. Shim et al. // J Med Chem. 2002. - № 45. - P. 1447-59.

227. Monocyclic thiophenes as protein tyrosine phosphatase IB inhibitors: capturing interactions with Asp48 / Z.K. Wan et al. // Bioorg Med Chem Lett. -2006.-№ 16. -P 4941-5.

228. Mooradian, A.D. The antioxidative potential of cerebral microvessels in experimental diabetes mellitus / A.D. Mooradian // Brain Res. 1995. - Vol. 671. -P. 164-169.

229. Mukhopadhyay, B. Decreased bodyweight without rebound and regulated lipoprotein metabolism by gymnemate in genetic multifactor syndrome animal / B. Mukhopadhyay, R.A. Field // Mol Cell Biochem. 2007. - № 299(1-2). - P. 93-8.

230. Nandhini, T.A. Inhibition of lipid peroxidation, protein glycation and elevation of membrane ion pump activity by taurine in RBC exposed to high glucose / T.A. Nandhini, C.V. Anuradha // Clin. Chim. Acta. 2003. - № 27. - P. 129-135.

231. Nathan, D.M. Insulin Treatment of Type 2 Diabetes: The Real Deal. / D.M. Nathan // Endocrinology Rounds. 2002. - № 1(1). - P. 1-8.

232. PDX-1 Expression Is Associated with Islet Proliferation In Vitro and In Vivo / M.A. Feanny et al. // J.Surg. Res. 2007. № 19. - P. 342.

233. Pei, Z. Inhibition of protein tyrosine phosphatase IB as a potential treatment of diabetes and obesity / Z. Pei et al. // Curr Pharm Des. 2004. - № 10. - P. 3481-504.

234. Platelet activation in patients with diabetic retinopathy / S.H. Bae et al. //J. Ophthalmol. 2003. - № 17. - P. 140-144.

235. Possible regeneration of the islets of langerhans in streptozotocin-diabetic rats given Gymnema sylvestre leaf extracts / E.R.B. Shanmugasundaram et al. // J. Ethnopharmacol. 1990. - № 30. - P. 265-279.

236. Prakash, A.O. Effect of feeding Gymnema sylvestre leaves on blood glucose in Beryllium nitrate treated rats / A.O. Prakash, S. Mathur, R. Mathur // J. Eth-nopharmcol. 1986. - № 18. - P.143 - 146.

237. Prathipati, P. Characterization of (3-3-adrenergic receptor: determination of pharmacophore and 3D QSAR model for beta3 adrenergic receptor agonism / P. Prathipati, AK. Saxena // J Comput Aided Mol Des. 2005. - № 19. - P. 93-110.

238. Prognostic significance of a formalin-resistant nuclear proliferation antigen in mammary carcinomas as determined by the monoclonal antibody Ki-67 / H. Kreipe et al. // Amer J Pathol. 1993. - P. 3542-95.

239. Prognostic value of interleukin-6, plasma viscosity, fibrinogen, von Wil-lebrand factor, tissue factor and vascular endothelial growth factor levels in, congestive heart failure / B.S. Chin et al. // Eur. J. Clin Invest. 2003. - № 33. - P. 941-948.

240. Proliferating cell nuclear antigen (PCNA): ringmaster of the genome. T. Paunesku et al. // Int J Radiat Biol. 2001. - № 13. - P. 32.

241. Protein tyrosine phosphatases as drug targets: Inhibitors of PTP1B-1B for treatment of diabetes / N.P.H. Moller et al. // Curr Opin Drug Discov Dev. -2000. -№3.-P. 527-40.

242. Puratchimani, V. Standardisation of Gymnema sylvestre with reference to gymnemagenin by high-performance thin-layer chromatography / V. Puratchimani, S. Jha // Phytochem Anal. 2004. - № 15(3). - P. 164-6.

243. QSAR analysis of thiazole benzenesulfonamide substituted 3pyridylethanolamines as beta3-adrenergic receptor agonist / P. Hanumantharao // Bio334org Med Chem Lett. 2005. - № 15. - P. 3167-73.

244. Reduced insulinotropic effect of Gastric Inhibitory polypeptide in first-degree relatives of patients with type 2 diabetes / J.J. Mier et al. // Diabetes. 2001. -P. 2497-2504.

245. Reitman, L.M. Schadt Pharmacogenetics of metformin response: a step in the path toward personalized medicine / Marc L. Reitman, E. Eric // Clin Invest. -2007.-№ 117(5).-P. 1226-1229.

246. Remogliflozin etabonate, in a novel category of selective low-affinity sodium glucose cotransporter (SGLT2) inhibitors, exhibits antidiabetic efficacy in rodent models / Y Fujimori et al. // J Pharmacol Exp Ther. 2008. - Vol. 327(1). P. 268-76.

247. Role of glial cell-line derived neurotropic factor family receptor {al-pha}2 (GFR{alpha}2) in the actions of the glucagon-like peptides on the murine intestine / S.C. Mc Donagh et al. // Am. J Physiol Gastrointest Liver Physiol. -2007. -№21.-P. 231.

248. Role of resveratrol in prevention and therapy of cancer: preclinical and clinical studies / B.B. Aggarwal et al. // Anticancer Res. 2004. - № 24. - P. 2783840.

249. Rossetti, L. Glucose toxicity / L. Rossetti, A. Giaccari // Diabetes Care. -1990.-Vol. 136.- P. 610-640.

250. Scott, K.A. The GLP-1 agonist exendin-4 reduces food intake in non-human primates through changes in meal size / K.A. Scott, T.I. Morgan // Am.J.Physiol. Regul Integr. 2007. - № 20. - P. 212.

251. Shigematsu, N. Effect of administration with the extract of Gymnema sylvestre leaves on lipid metabolism in rats / N. Shigematsu, R. Asano, M. Okazaki // Biol Pharm Bull. 2001. - № 24. - P. 713-717.

252. Song, Q.H. Effects of Inula Britannica on the production of antibodies and cytokines and on T cell differentiation in C57BL/6 mice immunized by ovalbumin. / Q.H. Song, T. Kobayashi, J.C. Cyong // Am J Chin Med. 2002. - Vol. 30, № 2-3.-P. 297-305.

253. Standard aggregating media to test the «aggregabiliti» of rat red blood cells / H.J. Meiselman et al. // Clin. Hemorheol. Microcirc. 2000. - Vol. 22. - № 2. P. 161-166.

254. Standardisation of Gymnema sylvestre R.Br, by high-performance thin-layer chromatography: an improved method / H. Luo et al. // Phytochem Anal. -2006.-№ 17(3).-P. 192-6.

255. Stremmel, W. Uptake of fatty acids by jejunal mucosal cells is thediated by a fatty acid binding membrane protein / W. Stremmel // J. Clin. Invest. 1988. - № 82. P. 2001-2010.

256. Structure studies of new antisweet constituents from gymnema sylves-tris. / Y. Kuzuko et al. // Tetrahedron lett. 1989. - Vol. 30, № 9. - P. 1106-1130.

257. Studies on the effect of Gymnema sylvestre on diabetes / K.B. Balasu-bramaniam et al. // J. Nat. Sci. Coun. Srilanka. 1992.- Vol. 20, № 1. - P. 81-89.

258. Suppression of glucose absorption by some fractions extracted from Gymnema sylvestre leaves / K. Shimizu et al. // J. Vet. Med. Sci. 1997. - № 4. - P. 245-251.

259. Survival of islet isografts despite cytotoxicity against pancreatic islets measured in vitro / B. Ziegler et al. // Exp Clin Endocrinol. 1990. - Vol. 95, №1. -P. 31-39.

260. Systematic Review of Herbs and Dietary Supplements for Glycemic Control in Diabetes. / Gloria Y. et al. // Diabetes Care. 2003. - Vol. 26, № 4. - P. 1277-1294.

261. Szkudelsk, T. // Physiol. Res. 2001. Vol. 50. N P. 536-546.

262. The effects of cholesterol levels on hemorheological parameters in diabetic patients / M Ercan et al. // Clin. Hemorheol. Microcirc. 2002. - № 26. - P. 257-263.

263. The efficacy and safety of miglitol therapy compared with glibenclamide in patients with NIDDM inadequately controlled by diet alone / P. Segal et al. // Diabetes Care. 1997. - Vol. 20, № 5. - P. 687-778.

264. Tomomatsu, H. Health effects of oligosaccharides / H. Tomomatsu // Food Technology. 1994. - P. 61-5.

265. Tosiello, L. Hypomagnesemia and diabetes mellitus / L. Tosiello // Arch Intern Med. 1996.-№156. - P. 1143-8.

266. Toxicology of protein allergenicity: prediction and characterization I. Kimber et al. //Toxicol. Sci. 1999, - Vol. 48. - P. 157-162.

267. Trucco, M. Reregeneration of the pancreatic P-cell / M. Trucco // J. Clin. Investigation. 2005. - P. 5-12.

268. UK Prospective Diabetes Study Group/ Intensive blood-glucose control with sulfonoreas or insulin compared withconventional treatment and rick of complications in patients with type 2 diabetes (UKRDS 33) // Lancet. 1998. - № 52. - P. 837- 853.

269. Use of Gymnema sylvestre leaf extract in the control of blood glucose in insulin dependent diabetes mellitus / E.R.B. Shanmugasundaran et al. // J. Ethnopharmacol. 1990.- № 30. - P. 281-294.

270. Validation and application of an automated rheoscope for measuring red blood cell deformability distributions in different species / J.G. Dobbe et al. // Bior-heology. 2004. - № 41. - P. 65-77.

271. Wang, C. 3D-QSAR of 4,5,6,7-tetrahydrothienopyridines analogues as glucose-6-phosphatase inhibitors / C. Wang, L. Yang, S.L. Yang // J Mol Struc. -2006. № 782. - P. 49-54.

272. Wolf, F.I. Chemistry and biochemistry of magnesium / F.I. Wolf, A. Cit-tadini // Mol. Aspects Med. 2003. - Vol. 24, № 1-3. - P. 3-9.

273. Yoshioka, S. Inhibitory effects of gymnemic acid and an extract from the leaves of Zizyphus jujuba on glucose absorption in the rat small intestine. / S. Yoshioka, J. Yonago // Med. Assoc. 1986. - № 37. - P. 142-145.

274. Zhen, H. The pharmacognostical identification of peel of Gymnema sylvestre / H. Zhen, S. Xu, X. Pan // Zhong Yao Cai. 2001. - Vol. 24, № 2.- P. 95-102.