Пространственная оценка превалентности и анализ рисков распространения Toxoplasma gondii в популяциях дефинитивных и промежуточных хозяев тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Шамаев Николай Дмитриевич

• Шамаев Николай Дмитриевич
• кандидат наук
• 2023

Оглавление диссертации кандидат наук Шамаев Николай Дмитриевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биология и жизненный цикл паразита T. gondii

1.2 Экологические закономерности возникновения и распространения T. gondii в популяциях дефинитивных хозяев

1.3 Экологические закономерности возникновения и распространения T. gondii в популяциях промежуточных хозяев

1.4 Экология патогенного микроорганизма Т. gondii в градиенте урбанизации объектов окружающей среды

1.5 Методы индикации и идентификации патогенного микроорганизма T. gondii

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Отбор проб и пробоподготовка биообразцов

2.2 Методика постановки реакции латекс-агглютинации (РЛА) для индикации T. gondii в популяциях коз и кошек

2.3 Иммуноферментный анализ (ИФА) для индикации T. gondii в популяциях пушных зверей и человека

2.4 Методика выделения ДНК, оптимизация постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР), электрофоретическая детекция и секвенирование для геноиндикации и идентификации T. gondii

2.5 Специфичность вложенной ПЦР и усовершенствование метода для амплификации однокопийных генов посредством ДНК-зондирования и селективной полногеномной амплификации при геноиндикации и идентификации T. gondii

2.6 Флотация образцов проб фекалий кошек

2.7 Картографический анализ

2.8 Статистическая обработка полученных данных

3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Оценка уровня превалентности паразита T. gondii и факторов риска распространения в популяции человека

3.2 Оценка уровня превалентности протисты T. gondii в популяции домашней кошки (Felis catus) и уровня загрязнения окружающей среды ооцитами паразита в городе Казани

3.3 Сравнительная характеристика и анализ рисков распространения T. gondii в популяциях мышевидных грызунов и землероек в условиях сельской и городской природной среды

3.4 Оценка уровня серопревалентности паразита T. gondii в популяциях домашней козы (Capra hircus) некоторых регионов России

3.5 Характеристика паразитизма T. gondii в популяции пушных зверей в условиях отдельного агроценоза: оценка уровня превалентности и генетического разнообразия паразита

3.6 Оптимизация метода ПЦР-идентификации биомаркеров генома T. gondii

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Сокращения

ДИ - доверительный интервал

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ИФА - иммуноферментный анализ

КРС - крупный рогатый скот

МГЕ - мобильные генетические элементы

МРС - мелкий рогатый скот

НК - нуклеиновые кислоты

ОП - оптическая плотность

ПЦР- полимеразная цепная реакция

ПГА -полногеномная амплификация

РИА - радиоиммунный анализ

РЛА - реакция латекс-агглютинации

РТ - Республика Татарстан

СПГА -селективная полногеномная амплификация СПИД - синдромом приобретенного иммунодефицита AIC - информационный критерий Акаике

AIC - скорректированный информационный критерий Акаике VIF - коэффициент инфляции дисперсии T. gondii - Toxoplasma gondii GRA - granule protein HP - hypothetical protein

NCBI - National Center for Biotechnology Information

ROP - rhoptry protein

SAG - surface antigen

UTM - Universal Transverse Mercator

UPRT - uracil phosphoribosyltransferase

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Пространственная оценка превалентности и анализ рисков распространения Toxoplasma gondii в популяциях дефинитивных и промежуточных хозяев»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности.

Протозойный микроорганизм Toxoplasma gondii, этиологический фактор токсоплазмоза, распространен во многих странах, что связано с эволюционно сложившимися особенностями взаимоотношений «паразит-хозяин» (Васильев, 1998; Бейер, 1999; Новак, 2000; Никонова, 2010; Грижак, 2017).

Постоянное изменение биоразнообразия в экосистемах на популяционном уровне, перестройка отношений, сложившихся в экосистемах в процессе эволюции, изменения в окружающей среде в свою очередь оказывают влияние и на жизненные циклы отдельных патогенных микроорганизмов, а также взаимоотношения «паразит-хозяин». Несмотря на то, что дефинитивным хозяином T. gondii являются представители семейства кошачьих (Felidae), данный биопатоген часто встречается и у сельскохозяйственных животных (Королева и Новак, 2001; Муллоджанова, 2005; Катков, 2017), а продукты животноводства, содержащие тканевые цисты T. gondii, могут привести к передаче паразита потребителям (Сергеева, 1991). В связи с этим, изучение экологических особенностей паразитарных систем (в том числе с участием T. gondii) отдельных территорий имеет как теоретическое, так и прикладное значение, и является одним из важнейших направлений современной экологии.

Микроорганизм может влиять на репродуктивные функции представителей семейства кошачьих, что особенно актуально для редких или исчезающих видов, таких как амурский тигр, реинтродукция которого в дикую природу может стать малоэффективной, если на данной территории среди других видов животных (в т.ч. олени, кабан, медведь, а также мелкие грызуны) циркулирует вирулентный патогенный штамм T. gondii. В связи с этим, актуальным также остается вопрос разработки и внедрения эффективных мер биологического контроля (методами биоиндикации, биотестирования, биомониторинга) окружающей среды, а именно способов

выявления циркуляции вирулентных патогенных штаммов T. gondii на отдельных территориях, где предполагается увеличение численности отдельной популяции какого-либо вида семейства кошачьих.

Для решения обозначенных проблем актуальными остаются вопросы оценки влияния паразитов на различные виды, прогноз возможных изменений в популяциях хозяев, разработка мероприятий по предотвращению риска распространения патогенного микроорганизма T. gondii.

Цель данной работы - определить локальные особенности взаимодействия основных компонентов паразитарной системы протозоа T. gondii на популяционно-видовом уровне биологической организации в Республике Татарстан.

Задачи исследования:

1. Изучить особенности паразитизма T. gondii в популяциях человека, мелких млекопитающих (мышевидные грызуны и землеройки) (промежуточные хозяева), сельскохозяйственных животных (коз), пушных зверей (норка, лиса), кошек (дефинитивные хозяева) с оценкой факторов риска распространения биопатогена.

2. Оптимизировать методы ИФА и ПЦР для индикации и идентификации T. gondii путем выявления биомаркеров паразита в биопробах при оценке уровня паразитизма отдельных территорий.

3. Охарактеризовать генетическое разнообразие циркулирующих штаммов паразита T. gondii в условиях отдельного агроценоза.

Научная новизна. Для индикации, идентификации и пространственной оценки превалентности патогенного микроорганизма T. gondii в объектах окружающей среды были впервые оптимизированы серологические (непрямой ИФА) и молекулярно-биологические методы (вложенная ПЦР с электрофоретической детекцией). Это позволило обнаружить T. gondii в популяциях дефинитивных и промежуточных хозяев среди пушных зверей, коз, мышевидных грызунов и кошек. Проведена работа по оптимизации

метода индикации и идентификации патогенных микроорганизмов T. gondii у животных с выделением и амплификацией нуклеиновых кислот, а также впервые использован филогенетический анализ выявленных генетических последовательностей мультикопийного гена В1 генома T. gondii в популяции пушных зверей.

Впервые изучены факторы риска распространения T. gondii на локальных территориях Республики Татарстан и оценены зависимости между местом обитания популяций промежуточных хозяев и уровнем паразитизма патогенного микроорганизма.

Теоретическая и научно-практическая значимость работы. Полученные данные расширяют знания об экологических особенностях паразитарных систем и взаимоотношениях «паразит-хозяин» на отдельных территориях между T. gondii и популяциями промежуточных и дефинитивных хозяев. Также, полученные данные вносят вклад в использование методов индикации и идентификации патогенных микроорганизмов и углубляют знания о распространенности паразитических простейших T. gondii в популяциях промежуточных и дефинитивных хозяев (мышевидные грызуны, землеройки, норки).

Результаты выявдения и определения патогенных микроорганизмов T. gondii в объектах окружающей среды в совокупности с приведенной методической и аналитической работой с генетическими данными могут быть использованы для описания биоразнообразия T. gondii в совокупности живых организмов в природной среде и объектах окружающей среды, для дифференциации штаммов, и других геномных исследований.

Разработанные и оптимизированные подходы в индикации и идентификации патогенных микроорганизмов отображены в опубликованном учебно-методическом пособии (Шамаев, Н. Д. Обработка изображений электрофоретических гелей и блотов в программном обеспечении «Image Lab» при экологических исследованиях: учебно-

методическое пособие / Н. Д. Шамаев, Э. А. Шуралев, М. Н. Мукминов. -

Казань: Казан. ун-т, 2021. - 82 с.

https://repository.kpfu.ru/?p_id=257785).

Результаты научных исследований (Глава 3. Результаты собственных исследований. Разделы 3.1, 3.2, 3.3, 3.4) успешно внедрены в производство средств индикации и идентификации биопатогенов в организме животных и объектах окружающей среды (акт о внедрении результатов в Приложении № В).

Положения, выносимые на защиту:

1. В популяциях мышевидных грызунов и землероек (суммарно на отдельных исследованных территориях Республики Татарстан) уровень превалентности T. gondii более высокий в сельской местности, чем в городской.

2. Особенностью распространения T. gondii в популяции человека города Казани является положительная корреляция инфицированности с содержанием кошек (как основным фактором риска), что отличается от факторов риска, выявленных локальными исследованиями в отдельных странах Европы, Азии, Америки.

3. В локальных популяциях норки, содержащихся в неволе на территории Республики Татарстан, циркулирует слабопатогенный штамм паразита T. gondii, генотип которого характеризуется двумя основными генетическими материнскими линиями типов II и III и их дочерними вариантами (анцесторами).

Апробация работы. Материалы работы были доложены и обсуждены на Всероссийской научной конференции «Химическое и биологическое загрязнение почв» (Пущино, 2018); Международной научной конференции «Биоразнообразие паразитов», посвященной 75-летию Центра паразитологии ИПЭЭ РАН и 140-летию со дня рождения академика К.И. Скрябина (Москва, 2018); V Международной конференции «Постгеном 2018: в поисках моделей персонализированной медицины» (Казань, 2018); VII Международной

8

научно-практической конференции «Новые концепции механизмов воспаления, аутоиммунного ответа и развития опухоли» (Казань, 2019); XXI международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы экологии и природопользования: партнерство в целях устойчивого развития и экологической безопасности» (Москва, 2020); Международной научно-практической конференции «Современная ветеринарная наука: теория и практика», посвященная 20-летию факультета ветеринарной медицины Ижевской ГСХА (Ижевск, 2020); 5th International Symposium of Association of Japan and Indonesia Veterinary Education (AJIVE) (Богор, Индонезия, 2021); 90th Annual Meeting of the Japanese Society of Parasitology and the 32nd Annual Meeting of the Japanese Society of Clinical Parasites (Нара, Япония, 2021).

Выполнение диссертационного исследования осуществлялось в рамках поддержанного гранта РФФИ № 19-34-90024 «Аспиранты» (Конкурс на лучшие проекты фундаментальных научных исследований, выполняемые молодыми учеными, обучающимися в аспирантуре) на тему: «Магнитный захват ДНК в ПЦР для оценки уровня превалентности T. gondii в популяциях промежуточных хозяев».

Соответствие паспорту научной специальности. Результаты проведенного исследования соответствуют паспорту специальности 1.5.15. Экология.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 15 печатных работ, в том числе 4 статьи в международных библиографических и реферативных базах данных Scopus и Web-Of-Science, 1 статья в журнале, рекомендованном ВАК при Министерстве науки и высшего образования РФ, 2 публикации в иных научных изданиях, 7 тезисов и материалов в сборниках конференций, 1 учебно-методическое пособие, отражающих её основное содержание.

Место выполнения и личный вклад соискателя. Основные экспериментальные работы выполнены на кафедре прикладной экологии Казанского (Приволжского) федерального университета и Учебно-научной лаборатории «Центр агро- и экобиотехнологий». Часть экспериментальных

9

исследований по геноиндикации T. gondii и пространственной оценке превалентности среди мелких млекопитающих были лично проведены автором в пределах Университета Гифу в рамках договора о сотрудничестве между Институтом экологии и природопользования КФУ и Факультетом прикладных биологических наук Университета Гифу, Япония (Договор от 29.11.2018). Автор принимал участие в планировании и осуществлении экспериментальной части работы. Автором был проведен анализ, статистическая обработка полученных данных и интерпретация полученных результатов. Соавтором публикаций являются научный руководитель, к.в.н., доцент кафедры прикладной экологии Шуралев Э.А., участвовавший в обсуждении результатов.

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 122 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 26 рисунками и 14 таблицами. Дополнительно предусмотрены приложения. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, выводов, практических предложений, списка литературы, включающего 68 отечественных и 103 иностранных источников.

ГЛАВА l ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Биология и жизненный цикл паразита T. gondii

T. gondii является внутриклеточным облигатным паразитом, который относится к группе кокцидий, а также возбудитель токсоплазмоза (Галузо, Коновалова, 1974; Beazley, Egerman, 1998). Биопатоген принадлежит типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Coccidiida, подсемейству Isosporinae, роду Toxoplasma (Васильев, 1998).

Существуют три инфекционные стадии T. gondii: тахизоиты, брадизоиты (тканевые цисты) и спорозоиты (находятся в ооцистах). Эти этапы связывает сложный жизненный цикл (рисунок 1). Термин «тахизоит» (tachos -«скорость» с греческого) был введен J. K. Frenkel (1973), чтобы описать стадию, которая с большой скоростью размножается в любой клетке промежуточного хозяина и в некишечных эпителиальных клетках конечного хозяина. Скопления большого числа тахизоитов называются клонами, терминальными колониями или группами. Тахизоиты попадают в клетки хозяина, активно проникая через плазмалемму клетки хозяина или фагоцитозом (Nichols, Connor, 1981; Nichols, 1983; Werk, 1985; Bonhomme et al., 1992; Dubremetz, Swartzman, 1993; Joiner, 1993; Morisaki et al., 1995; Speer et al., 1997). Тахизоиты многократно размножаются в клетке хозяина повторным эндодиогенезом, специализированной формой размножения, в которой два потомства образуются внутри родительского паразита, поглощая его (Sheffield and Melton, 19б8). Скорость инвазии и роста варьируются в зависимости от штамма T. gondii и типа клеток хозяина (Kaufman, Maloney, 1962; Appleford, Smith, 1997).

Термин «брадизоит» (brady - «медленный» с греческого) также был

введен J.K. Frenkel (1973), чтобы описать организм, медленно

размножающийся в тканевой цисте. Цисты тканей различаются по размеру;

молодые тканевые цисты могут иметь диаметр до 5 мм и содержать только

два брадизоита, а более старые могут содержать сотни организмов. Тканевые

11

цисты способны к развитию в висцеральных (легкие, печень, почки) и органах зрения, а также нервных (спинной и головной мозг), мышечных тканях (скелетная и сердечная мускулатура) (Werner et al., 1981; Dubey, 1988). Интактные тканевые цисты, в большем числе случаев не наносят никакого вреда и не вызывают воспалительную реакцию у хозяина, однако могут сохраняться в течение жизни хозяина.

Рисунок 1 - Жизненный цикл T. gondii

Фекалии кошек могут содержать ооцисты биопатогена в случае

проглатывания любой стадии развития T. gondii. Период обнаружения ооцист

в фекалиях и количество ооцист варьируются (Dubey, Frenkel, 1976; Freyre et

al., 1989; Dubey, 1996). После того, как кошкой были проглочены тканевые

цисты, препатентный период длится от 3 до 10 дней. Если кошкой были

проглочены тахизоиты и ооцисты, период будет длиться от 13 до 18 дней

12

(Dubey, 1996). Ооцисты в фекалиях зараженных кошек в случае проглатывания тканевых цист достигает 100 %, тогда как при заражении ооцистами и тахизоитами ооцисты в фекалиях кошек зарегистрированы в 30 % случаев (Dubey, Frenkel, 1976; Dubey, 1996).

Протеолитические ферменты, содержащиеся в желудке и тонком кишечнике способствуют растворению стенок тканевой цисты и высвобождению брадизоитов, которые попадают внутрь клеток кишечного эпителия и способствуют образованию новых колоний паразита. Выделяют пять различных морфотипов T. gondii, которые развиваются в клетках кишечного эпителия. Эти этапы в кокцидийном цикле размножения обозначаются типами A-E вместо поколений, поскольку в каждом типе T. gondii существует несколько поколений (Dubey, Frenkel, 1976). Эти формы размножаются специализированной формой шизогонии (рисунок 2).

Поглощение тканевых Время цист/брадизоитов обнаружения после

/ W поглощения

i

Ооцисты

3-15 дней

Рисунок 2 - Кокцидийный цикл T. gondii

Приспособление и проникновение T. gondii в клетки хозяев похоже с описанием других кокцидийных паразитов. Особенности механизма прикрепления и проникновения зоитов включают в себя: скольжение зоита; зондирование клетки хозяина зоитом с коноидальным концом; отделение плазмолеммы клетки хозяина; переходное движение зоита кзади, когда он проникает в клетку хозяина; частичный экзоцитоз микронем, роптрий и плотных гранул. Зоиты T. gondii могут проникать в различные типы клеток широкого спектра хозяев, учитывая то, что биохимические рецепторы, вовлеченные в прикрепление и проникновение, вероятно, являются общими для большинства животных клеток (Silva et al., 1982; Sibley, 1995). Рецепторы клеток хозяина, состоящие из ламинина, лектина и SAG1, участвуют в прикреплении и проникновении тахизоита T. gondii (Grover, 1990). Однако, зоиты T. gondii могут проникать в клетки с помощью других средств, кроме опосредованного рецепторами проникновения. C.A. Speer et al. (1996) обнаружили, что после полного прохождения через клетки некоторые спорозоиты T. gondii несут оболочку мембран и цитоплазму клеток-хозяев, но все еще способны проникать в другие клетки. Также зоиты T. gondii могут проникать в клетки посредством эндоцитоза (Speer et al., 1997).

Во время проникновения тахизоитов в клетку хозяина, они окружают себя мембраной из плазмалеммы клетки хозяина. С этой мембраной связан ряд белков паразита (ROP2 - ROP5, ROP7 и др.), что указывает на то, что они играют роль в биохимической связи клетки хозяина и паразита (Beckers et al., 1994).

1.2 Экологические закономерности возникновения и распространения T. gondii в популяциях дефинитивных хозяев

Токсоплазма была впервые обнаружена французскими учеными C. Nicolle и M.H. Manceaux в 1908 у африканских мышевидных грызунов гонди. В СССР токсоплазма впервые была обнаружена у сусликов Д. Н. Засухиным и Н. А. Гайским в 1930. Токсоплазма была впервые выделена в

1910 году от больных собак. Первый случай токсоплазмоза у кошки был описан в 1942 году. У животных наблюдались анорексия и лихорадка. После того, как кошка умерла, вскрытие показало опухолевидный рост брыжеечных лимфатических узлов, язвенный колит и единственный узелок в легких. Токсоплазма была обнаружена в лимфатических узлах и легких (Dubey, 2002).

Определенным хозяином паразитов является семейство кошачьих (Felidae), которое классифицируется на 30 видов: домашние кошки, африканские и европейские дикие кошки, тигры, львы, ягуары, гепарды, леопарды и т. д. (Галузо, Коновалова, 1973). Токсоплазмоз у домашних кошек проявляется при употреблении в пищу мышевидных грызунов, птиц, сырого мяса и мясных отходов (Бутабаева, Абиджанов, 1980; Новикова и др., 2005). До 46 % кошек в Европе, Южной Америке и США дают положительный результат на токсоплазмоз (Quintero-Nunez et al., 1995), и до 9 % в Азии (Shen et al., 1990).

Известно, что кошки, съевшие мышь, содержащую тканевые цисты T. gondii, одновременно выделяли и секретировали до 20 миллионов ооцист патогенных микроорганизмов. При нормальных условиях менее 10 % кошек выделяют ооцисты T. gondii. До 96 % кошек являются серопозитивными в отношении наличия антител к T. gondii, что связано с циркуляцией в природе типичных и атипичных штаммов возбудителя (Dubey and Frenkel, 1976). Во Франции 60 % положительных животных были обнаружены с помощью иммуноиндикации, в Китае - 69,4 %, в Бельгии - 70,2 %, в Иране - 63 %, в Чехии - 61,3 %, в Бразилии - 87,3 %, в Таиланде - 7,3 % (Шамаев и др., 2018). Распределение токсоплазмоза в городских условиях среди домашних плотоядных животных (Воробьева, 2007) ранее изучалось отечественными учеными. В Казани серологическим скринингом обнаружено 15,8 % серопозитивных хищников (кошек и собак). Р.Х. Равилов с соавт. (2008) обнаружил высокий уровень серопозитивности у кошек до 35 % (Равилов и др., 2008). По данным Т.В. Новиковой (2005), самки кошек (50 %) и собак (30,4 %) более инфицированы, чем самцы (24,1 %) (Новикова и др., 2005).

15

Клинические и серологические исследования кошек на локальной территории Москвы выявили 33,8 % и 23,4 % животных, положительно реагировавших на токсоплазмоз. Копрологический анализ подтвердил выделение ооцист T. gondii у 7,3 % кошек (Олейников, 2006).

Как уже было сказано, семейство кошачьих выделяет ооцисты T. gondii с фекалиями, однако в то же время этот биопатоген может передаваться между промежуточными хозяевами при хищном поедании (Shwab et al., 2018). Ооцисты могут попадать в почву и концентрироваться в городских и сельских районах (Afonso et al., 2007; Gilot-Fromont et al., 2012; Gotteland et al., 2014). Урбанизированная городская территория включает в себя город с высокой плотностью населения, а урбанизированная сельская территория включает деревни с низкой плотностью населения и большим количеством неосвоенных земель. Распространенность инфицированных T. gondii домашних кошек и сельскохозяйственных животных позволяет определить масштаб распространения паразитов.

Анализ литературы по эпидемиологии токсоплазмоза позволяет сделать вывод, что заболевание встречается повсеместно. Это обеспечивается тем, что токсоплазма адаптируется к широкому кругу промежуточных хозяев, и стадия тканевой цисты патогена в организме продолжается неопределенно долго. Это связано с неограниченным количеством кошек в жилых районах, животноводческих помещениях и помещениях, огромной фертильностью возбудителя на стадии ооцист, выделяемых из организма кошки, и его высокой устойчивостью к факторам окружающей среды, а также биологией токсоплазмоза на каждой стадии генетического цикла, обусловленной способностью передаваться животным различными путями (Заводских, Шаповалов, 2008).

1.3 Экологические закономерности возникновения и распространения T. gondii в популяциях промежуточных хозяев Пушные звери. В популяциях диких плотоядных большинство инфекций T. gondii протекает бессимптомно. В данной группе выделяются норки, у которых при общем бессимптомном проявлении заболевания (Dietz et al., 1993) могут происходить самопроизвольные аборты новорожденных щенят (Frank, 2001), что экономически невыгодно для процесса звероводства. Распространенность T. gondii у норок была зарегистрирована во многих регионах мира, включая Северную Америку (Barros et al., 2018), Южную Америку (Sepúlveda et al., 2011), Азию (Shwab et al., 2014) и некоторые европейские страны, включая Данию (Henriksen et al., 1994), Польшу (Smielewska-Los, Turniak, 2004) и Великобританию (Burrells et al., 2013). Однако ситуация во многих регионах России остается неясной.

Хотя СССР был мировым лидером в звероводстве, производство пушнины снизилось после распада из-за сокращения финансовой поддержки со стороны государства. Было высказано предположение, что такая ситуация повлияла на санитарные условия на зверофермах (Balakirev, 2001). Сообщается, что до 16 % исследованных в 2008 г. норок в центральной части России были инфицированы простейшими паразитами Eimeria spp. или Isospora spp. (Safiullin, 2008). Однако текущая распространенность инфекции T. gondii среди норок в России остается неизвестной. В Республике Татарстан, где меховое производство является процветающей отраслью, широко распространено разведение локальной породы норки, содержащейся в неволе. И хотя T. gondii не входит в список особо опасных болезней плотоядных, экономический ущерб фермам от потери молодняка может быть объяснен и предупрежден при установлении распространенности биопатогена в популяциях (Melnikov et al., 1980).

Грызуны. Исследование в Панама-Сити (Панама) в совокупности продемонстрировало самую высокую распространенность T. gondii среди

диких мышевидных грызунов (крыс), чем среди птиц у человека из того же

17

района города (Quintero-Nunez et al., 1995). Вероятнее всего инфекция T. gondii больше всего поражает мышевидных грызунов. Мыши являются жертвами кошек больше, чем других промежуточных хозяев (птиц, рептилий) в городских и сельских районах, находящихся под антропогенным эффектом (Quintero-Nunez et al., 1995; Mitter et al., 2015). Следовательно, уровень превалентности микроорганизма в популяциях мышевидных грызунов может влиять на его распространение в местной урбанизированной среде, поскольку только окончательный хозяин (кошка) может поймать инфицированных мышевидных грызунов, а затем распространить огромное количество ооцист в окружающей среде.

Полевые наблюдения за уровнем распространения T. gondii в популяциях диких мышевидных грызунов в сельской местности (Франция) показали, что расстояние от точки отлова до ближайшей фермы отрицательно коррелирует с его превалентностью (Gotteland et al., 2014). Также сообщалось, что уровень превалентости ооцист биопатогена в почве также отрицательно коррелирует с расстоянием до ближайшего хозяйства или фермы (места обитания кошки) (Krauze-Gryz et al., 2017). Эти отчеты показывают, что небольшое расстояние от среды обитания кошек является фактором риска распространения T. gondii. Однако в том же исследовании также сообщалось о существовании точек на карте, расположенных более чем на 2,5 км от места обитания кошек, свидетельствующих о наличии большого количества ооцист в почве (Krauze-Gryz et al., 2017). Thomasson D. с соавт. (2011) также сообщали, что уровень превалентности T. gondii среди диких мышевидных грызунов в городских районах с высокой плотностью кошачьих популяций и в сельской местности с низкой плотностью кошек была одинакова (Thomasson et al., 2011). Эта общая информация, полученная в результате исследований в Европе, указывает на то, что уровень превалентности T. gondii уменьшается по мере удаления от точки загрязнения ооцистами, но сохраняется в больших количествах в местных сельских районах. Могут существовать и другие специфические факторы

18

риска, а не расстояние до места обитания кошек в городских и сельских районах.

Обобщенные исследования показывают, что районы с ярко выраженным антропогенным эффектом могут иметь различные пространственные факторы окружающей среды, которые способствуют сохранению T. gondii в популяциях мышевидных грызунов. При изучении зоонозных патогенов с широким спектром путей распространения важно сразу получить доступ к вариативным факторам, таким как расстояние, вид, среда. Для этого можно использовать многомерный анализ для определения рисков распространения в популяциях промежуточных хозяев.

Изучение мышевидных грызунов на локальных природных территориях Татарстана (Россия) важно для установления масштаба распространения T. gondii среди разных видов. Во-первых, мышевидные грызуны в естественной природной среде обитания, когда они становятся жертвами кошек, могут стать причиной широкого распространения биопатогена в окружающей среде с помощью ооцист зараженных кошек. В последующем они могут стать причиной риска для здоровья человека (Frenkel, 1973; Remington et al., 1980; Kociecka et al., 1990; Cook et al., 2000; Webster, 2001). Во-вторых, это важно с точки зрения сохранения биоразнообразия, поскольку в Татарстане много редких и исчезающих видов мышевидных грызунов (Назиров и др., 2016).

Сельскохозяйственные животные. Токсоплазмоз характеризуется очень широким географическим распространением, и патоген может поражать многие виды диких, домашних и сельскохозяйственных видов млекопитающих. Токсоплазмоз у животных исследуется локально (Кузнецова, 2001; Олейников, 2006; Воробьева, 2007; Заводских, 2008; Никонова, 2013), однако значительное количество работ, опосредованно связанных с токсоплазмозом млекопитающих, посвящено глобальному изучению токсоплазмоза у человека (Маккаев, 1971; Сергеева, 1991;

Васильева, 2002; Васильев, 2003; Флоренсов, 2004; Аббазова, 2014; Марданлы, 2016; Степанова, 2019).

Риск передачи токсоплазмы через мясо и мясные продукты считается значительным у порядка 30-60 % населения при использовании мяса, которое не было достаточно термически обработано (АТоибо й а1., 2010). Так, в Польше распространенность токсоплазмоза у свиней составила 36 %. Сырое рубленое мясо, необработанное мясо и недожаренное мясо представляют риски повышения уровня превалентности биопатогена в популяциях человека. Источниками передачи инфекции человеку являются: тканевые цисты в мясе и ооцисты у владельцев кошек (Галузо, Коновалова, 1973). Передача патогенов с пищей в ряде исследований считается преобладающей и происходит через мясо убитых больных животных, а также через молочные продукты (Бейер, 1999). Немногие люди контактируют с токсоплазмой во время манипуляций с лабораторными материалами, при контакте с инвазивными материалами и при трансплантации органов или тканей (Васильев и др., 2009).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Шамаев Николай Дмитриевич, 2023 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Аббазова, Е. В. Токсоплазмоз при ВИЧ-инфекции: эпидемиология, диагностика и профилактика : специальность 14.02.02 «Эпидемиология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук: / Аббазова Евгения Витальевна ; НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи. - Москва, 2014. -132 с. - Текст : непосредственный.

2. Архипов, И. А. Распространение паразитозов собак и кошек в России / И.А. Архипов, Б.И. Борзунов, В.И. Шайкин. - Текст : непосредственный // Актуальные вопросы ветеринарной медицины : материалы межрегиональной научно-практической конференции. -Новосибирск, 2002. - С. 81-89.

3. Бейер, Т. В. Биология возбудителя токсоплазмоза / Т. В. Бейер. -Текст : непосредственный // Практик. - 1999. - № 4. - С. 1-5.

4. Березина, И. С. Распространение токсоплазмоза в популяциях домашних и сельскохозяйственных животных и человека / И. С. Березина, Д. В. Лобкис, О. Ю. Старостина. - Текст : непосредственный // Ветеринария. -2011. - № 3. - С. 107-112.

5. Бобров, В. В. Чужеродные виды млекопитающих в экосистемах России / В. В. Бобров, А. А. Варшавский, Л. А. Хляп. - Текст : непосредственный // Товарищество научных изданий КМК, Москва. - 2008. -232 с.

6. Флоренсов, В. В. Патогенетические механизмы задержки внутриутробного развития плода (профилактика, диагностика и акушерская тактика) : специальность 14.00.01 «Акушерство и гинекология» : диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук: / Флоренсов Владимир Вадимович : Иркутский государственный медицинский университет. - Иркутск, 2004. -263 с. - Текст : непосредственный.

7. Бутабаева, М. Спонтанная токсоплазмозная инфекция у котят в Узбекистане / М. Бутабаева, А. Абиджанов. - Текст : непосредственный // Абстракты 9-й конференции паразитологов Украины. - Киев, 1980. - С. 185186.

8. Васильев, В. В. Токсоплазмоз: современные научно-практические подходы / В. В. Васильев. - Текст : непосредственный // Сборник научных трудов. Серия «Вопросы инфекционной патологии». -Санкт-Петербург, 1998. - С. 121-126.

9. Васильев, В. В. Приобретенный токсоплазмоз у лиц молодого возраста (патогенез, диагностика, лечение и военно-врачебная экспертиза) : специальность 14.00.10 «Инфекционные болезни» : диссертация на соискание ученой степени доктора медицинских наук / Васильев Валерий Викторович ; Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия. - Санкт-Петербург, 2003. - 319 с. - Текст : непосредственный.

10. Васильев, В. В. Токсоплазмоз: современные научно-практические подходы / В. В. Васильев. - Текст : непосредственный // Современная медицина. -2002. С. 235.

11. Васильев, В. В. Клинико-лабораторная характеристика первичного заражения Toxoplasma gondii (острый приобретенный токсоплазмоз) / В. В. Васильев, Г. М. Ушкова, Г. А. Жанарстанова. - Текст : непосредственный // Журнал инфектологии. - 2009. - № 2-3. - С. 36-42.

12. Васильева И. С. Врожденный токсоплазмоз (риск развития, профилактика) : специальность 14.00.10 «Инфекционные болезни» : диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Васильева Ирина Сергеевна ; Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия. - Санкт-Петербург, 2002. - 162 с. -Текст : непосредственный.

13. Воробьева, М. Н. Совершенствование ретроспективной диагностики токсоплазмоза кошек и собак : специальность 16.00.03 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Воробьева Марина Николаевна ; Казанская академия ветеринарной медицины им. Н.Э.Баумана. - Казань, 2007.

- 135 с. - Текст : непосредственный.

14. Волгина, И. С. Проблема токсоплазмоза в Воронеже / И. С. Волгина. - Текст : непосредственный // Вестник Мордовского университета.

- 2009. - №1. - С. 79-80.

15. Галацевич, Н. Ф. Динамика таксоценоза блох длиннохвостого суслика в Юго-Западной Туве и ее влияние на эпизоотическую активность Каргинского мезоочага чумы : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Галацевич Нина Феликсовна ; Иркутский государственный университет. - Иркутск, 2018. -151 с. - Текст : непосредственный.

16. Галузо, И. Г. Паразиты, как фактор, определяющий условия существования природного очага токсоплазмоза / И. Г. Галузо, С. И. Коновалова. - Текст : непосредственный // Вопросы природной очаговости болезней. - 1973. С. 83-100.

17. Галузо, И. Г. Жизненный цикл токсоплазм / И. Г. Галузо, С. И. Коновалова. - Текст : непосредственный // Алма-Ата: Наука. - 1974. С. 3-35.

18. Гончаров, Д. Б. Токсоплазмоз: роль в инфекционной патологии человека и методы диагностики / Д. Б. Гончаров. - Текст : непосредственный // Мед. Паразитология. - 2005. - №4. - С.52-58.

19. Гончаров, Д. Б. Инфицированность токсоплазмами домашних

животных в Приокско-Террасном заповеднике [Собаки и кошки] / Д. Б.

98

Гончаров. - Текст : непосредственный // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. - 2007. - № 1. - С.32-33.

20. Гордейко, Н. С. Клещи семейства 1хоё1ёае юга приморья: типы населения, паразито-хозяинные связи, инфицированность патогенами : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Гордейко Наталья Станиславовна ; Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока. -Иркутск, 2019. -166 с. - Текст : непосредственный.

21. Градковская, Н. В. Использование иммуноферментного анализа в диагностике токсоплазмоза / Н. В. Градковская, Л. И. Грачева, Н. А. Захарова. - Текст : непосредственный // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1985. - №4. - С. 69-72.

22. Современные методы серологической диагностики токсоплазмоза / Л. И. Грачева, Б. В. Мороз, Н. В. Градковская [и др.]. -Текст : непосредственный // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. - 1997. - №5. - С. 58-61.

23. Грижак, И. И. Змши iмунологiчного статусу у В1Л-шфшованих оЫб iз хрошчною токсоплазмозною iнвазieю та токсоплазмозним енцефалггом / И. И. Грижак. - Текст : непосредственный // Актуальная инфектология. - 2017. - №5. - С. 18-23.

24. Денисов, А. В. Пространственная структура населения млекопитающих - носителей возбудителя чумы в Горно-Алтайском высокогорном природном очаге : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Денисов Алексей Васильевич ; Иркутский государственный университет. - Иркутск, 2018. -181 с. - Текст : непосредственный.

25. Долгих, Т. И. Токсоплазмоз: современная стратегия лабораторной диагностики / Т. И. Долгих. - Текст : непосредственный // Инфекция и иммунитет. - 2011. - № 1. - С. 43-50.

26. Ерофеева, В. В. Гельминтофауна грызунов в урбанизированных экосистемах Кировской области : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Ерофеева Виктория Вячеславовна ; Российский университет дружбы народов. - Москва, 2016. -156 с. - Текст : непосредственный.

27. Заводских, А. В. Эпизоотическая ситуация по заразным болезням собак и кошек в Московской области / А. В. Заводских, А.С. Шаповалов. -Текст : непосредственный // Российский ветеринарный журнал. Мелкие домашние и дикие животные. - 2008. - №3. - С. 14-15.

28. Индикация Toxoplasma gondii в популяции европейской норки (Mustela lutreola) / Н. Д. Шамаев, А. Ю. Федотова, Н. М. Александрова [и др.]. - Текст : непосредственный // Сборник научных трудов. Серия «Биоразнообразие паразитов». - Москва, 2018. - Вып. 50. - С. 278-280.

29. Катков, С. С. Токсоплазмоз домашних плотоядных в условиях Воронежской области : специальность 03.02.11 «Паразитология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Катков Сергей Сергеевич ; Ставропольский государственный аграрный университет. - Ставрополь, 2017. -126 с. - Текст : непосредственный.

30. Киселев, С. В. Динамика численности и изменчивость эколого-физиологических показателей у бурозубок (род Sorex) Верхней Колымы : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Киселев Сергей Викторович ; «Федеральный научный центр биоразнообразия наземной биоты Восточной Азии» Дальневосточного отделения Российской академии наук. - Владивосток, 2016. -167 с. - Текст : непосредственный.

31. Клинические протеомные исследования пациентов с токсоплазмозом / Н. Д. Шамаев, А. Р. Валеева, Э. Г. Гайфуллина [и др.]. -Текст : непосредственный // В поисках моделей персонализированной медицины: сборник научных трудов V международной конференции "Постгеном-2018", (29 октября-2 ноября 2018 г.). - Казань, 2018. - С. 50.

32. Королева, С. Н. Эпизоотологический и эпидемиологический мониторинг при токсоплазмозе в Центральном районе Российской Федерации / С. Н. Королева, А. И. Новак. - Текст : непосредственный // Тр. Костромской гос. с.- х. академии. - Кострома, 2001. - № 59. - С.24-29.

33. Крылов, М. В. Определитель паразитических простейших (человека, домашних животных и сельскохозяйственных растений) / М. В. Крылов ; Российская академия наук, Зоологический институт. - Санкт-Петербург : Изд-во Наука, 1996. - 604 с. - Текст : непосредственный.

34. Красная книга Республики Татарстан: животные, растения, грибы. Издание третье. / A. А. Назиров, Ю. А. Горшков, Д. В. Иванов, Т. В. Рогова. -Казань : Идеал-пресс, 2016. - 760 с. ISBN 978-5-85247-884-9. - Текст : непосредственный.

35. Кузьмина, Н. В. Воздействие антропогенных факторов на основные виды цестод рыб среднего течения реки Лена : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Кузьмина Наталья Васильевна ; Северо-Восточный федеральный университет имени М.К. Аммосова. - Якутск, 2017. -127 с. - Текст : непосредственный.

36. Кузнецова, Э. А. Диагностика протозойных заболеваний животных с помощью полимеразной цепной реакции : специальность 03.00.19 «Паразитология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Кузнецова Эльвира Алексеевна ; НИИЭиМ им. Н.Ф. Гамалеи. - Москва, 2001. - 178 с. - Текст : непосредственный.

37. Лобзин, Ю. В. Руководство по инфекционным болезням / Ю.В. Лобзин, К. В. Жданов. - 4-е изд., доп. и перераб. Санкт-Петербург : Изд-во Фолиант, 2011. - 744 с. - ISBN 978-5-93929-219-1. - Текст : непосредственный.

38. Маккаев, М. X. О зональных и сезонных различиях зараженности токсоплазмозом рогатого скота в Дагестане / М. X. Маккаев ; Институт эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи. - Москва : Изд-во ИЭиМ им. Н. Ф. Гамалеи, 1971. - 175 с. - Текст : непосредственный.

39. Марданлы, С. Г. Эпидемиологический надзор за инфекциями TORCH - группы на основе современных технологий лабораторной диагностики : специальность 14.02.02 «Эпидемиология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Марданлы Сейфаддин Гашим оглы ; МГМУ им. И. М. Сеченова. - Москва, 2016. - 234 с. - Текст : непосредственный.

40. Мельникова О. В. Динамика паразитарной системы клещевого энцефалита в Прибайкалье и ее влияние на заболеваемость населения : специальность 03.02.08 «Экология» : диссертация на соискание ученой степени доктора биологических наук / Мельникова Ольга Витальевна ; Иркутский ордена Трудового Красного Знамени научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока. - Иркутск, 2017. -283 с. - Текст : непосредственный.

41. Муллоджанова, М. М. Эпидемиологические и иммунологические аспекты токсоплазмоза в Республике Таджикистан : специальность 14.00.30 «Эпидемиология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Муллоджанова Манижа Масудовна ; Таджикский государственный медицинский университет. - Душамбе, 2005. - 128 с. -Текст : непосредственный.

42. Николаев, В. Ю. Иммуногематологические характеристики амфибий и рептилий Верхнего и Среднего Поволжья в аутэкологическом

аспекте : специальность 03.02.08 «Экология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Николаев Вадим Юрьевич ; Национальный исследовательский Нижегородский государственный университет им. Н.И. Лобачевского. - Нижний Новгород, 2016. -148 с. -Текст : непосредственный.

43. Никонова, Н. А. Токсоплазмоз / Н. А. Никонова, Н. А. Татарникова. - Текст : непосредственный // Аграрный вестник Урала. - 2010. - № 11-2 (77). - С. 38.

44. Никонова, Н. А. Патоморфологическая характеристика плацентарного барьера и клинический статус коров при токсоплазмозе : специальность 06.02.01 «Диагностика болезней и терапия животных, патология, онкология и морфология животных» : диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Никонова Наталья Александровна ; Пермская Государственная Сельскохозяйственная Академия им. акад. Д. Н. Прянишникова. - Пермь, 2013. - 120 с. - Текст : непосредственный.

45. Новак, А. И. Саркоцистоз и токсоплазмоз сельскохозяйственных животных в центральном районе Нечерноземной зоны Российской Федерации : специальность 03.00.09 «Энтомология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Новак Александра Ивановна ; Костромская государственная сельскохозяйственная академия. -Кострома, 2000. - 125 с. - Текст : непосредственный.

46. Нурмагонбетова, С. С. Полевая мышь (Apodemus agrarius, Pall) и ее место в населении мелких млекопитающих в Среднем Прииртышье Нурмагонбетова : специальность 03.02.08 «Экология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Сауле Сенсембаевна ; Иркутский государственный университет. - Иркутск, 2017. -125 с. - Текст : непосредственный.

47. Олейников, С. Н. Токсоплазмоз кошек в условиях мегаполиса: эпизоотология, диагностика, терапия и профилактика : специальность

103

16.00.03 «Ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук / Олейников Сергей Николаевич ; Аграрно-технологический институт РУДН, 2006. - 136 с. -Текст : непосредственный.

48. Петухов, В. А. Сообщества и популяции мелких млекопитающих и их эктопаразиты садово-дачных участков Среднего Приобья : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Петухов Владимир Александрович ; Сургутский государственный университет. -Сургут, 2020. -149 с. - Текст : непосредственный.

49. Плеханова, В. В. Эколого-эпизоотологическая характеристика трематод моллюсков и карповых рыб в водоемах с различной степенью антропогенного воздействия : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Плеханова Валентина Владимировна ; Институт биологии Коми научного центра Уральского отделения Российской академии наук. - Тюмень, 2016. -152 с. - Текст : непосредственный.

50. Попов, И. О. Климатически обусловленные изменения аутэкологических ареалов иксодовых клещей Ixodes ricinus и ixodes persulcatus на территории России и стран ближнего зарубежья : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Попов Игорь Олегович ; Российский государственный аграрный университет - МСХА имени К.А. Тимирязева. - Москва, 2016. -112 с. - Текст : непосредственный.

51. Потапов, С. А. Вирусные сообщества в оз. Байкал : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Потапов Сергей Анатольевич ; Иркутский государственный университет. - Иркутск, 2021. -156 с. - Текст : непосредственный.

52. Равилов, Р. Х. Токсоплазмоз домашних плотоядных / Р. Х. Равилов, В. В. Герасимов, М. Н. Воробьева ; Казанская государственная академия им. Н. Э. Баумана. - Казань : Изд-во КГАВМ им. Н. Э. Баумана, 2008. - 98 с. - Текст : непосредственный.

53. Результаты выявления антител к Toxoplasma gondii у домашних животных в г. Вологда / Т.В. Новикова, В. И. Околелов, С. А. Тепляшина, Н. П. Покиданов. - Текст : непосредственный // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. - 2005. -- № 3. - С. 26-28.

54. Савченко, П. А. Особенности распространения вирусов гриппа А на территории юга Центральной Сибири : специальность 03.02.08 «Экология (биология) (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Савченко Петр Александрович ; Сибирский федеральный университет. - Красноярск, 2017. -214 с. - Текст : непосредственный.

55. Сергеева, Н. А. Уровень инфицированности токсоплазмами работников зверосовхоза / Н. А. Сергеева. - Текст : непосредственный // Казанский медицинский журнал. - 1991. - № 2 (71). - С. 154-155.

56. Серологическая активность компонентов тахизоитового антигена Toxoplasma gondii / С. В. Петров, Н. Д. Шамаев, Э. А. Шуралев, Я. Такасима. - Текст : непосредственный // Новые концепции механизмов воспаления, аутоиммунитета и развития опухоли: материалы VI международной научно-практической конференции, (6-8 июня 2019 г.). - Казань, 2019. - С. 123-125.

57. Степанова, Е. В. Модуляция поведения человека под воздействием Toxoplasma gondii : специальность 03.02.11 «Паразитология» : диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Степанова Екатерина Викторовна ; Первый Московский государственный медицинский университет имени И. М. Сеченова, 2019. - 112 с. - Текст : непосредственный.

58. Тимофеев, Б. А. Факторы патогенности паразитических простейших / Б. А. Тимофеев, Р. Х. Эпельдимова. - Текст : непосредственный // Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. - 2005. - № 6. - С. 348-349.

59. Хайсарова, А. Н. Экологические особенности и генетическая структура популяций и сообществ мелких млекопитающих в условиях лесостепного Поволжья (на примере Ульяновской области) : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Хайсарова Анна Николаевна ; Пензенский государственный университет. - Пенза, 2020. -115 с. - Текст : непосредственный.

60. Чумаченко, П. А. Эколого-эпидемиологическая характеристика очагов дифиллоботриозов на территории Иркутской области : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Чумаченко Павел Андреевич ; Иркутский государственный университет. - Иркутск, 2016. -126 с. - Текст : непосредственный.

61. Шамаев, Н. Д. Обработка изображений электрофоретических гелей и блотов в программном обеспечении «Image Lab» при экологических исследованиях: учебно-методическое пособие / Н. Д. Шамаев, Э. А. Шуралев, М. Н. Мукминов. - Казань: Казан. ун-т, 2021. - 82 с. - Текст : электронный // Каталог научно-образовательных ресурсов КФУ. - URL: https://repository.kpfu.ru/?p_id=257785 (дата обращения: 10.08.2021). - Режим доступа: свободный.

62. Шамаев, Н. Д. Годовая превалентность Toxoplasma gondii среди грызунов лесопаровых зон города Казани / Н. Д. Шамаев. - Текст : непосредственный // Современная ветеринарная наука: теория и практика: материалы международной научно-практической конференции, посвященной

20-летию факультета ветеринарной медицины Ижевской ГСХА, (28-30 октября 2020 г.). - Ижевск, 2020. - С. 225-228.

63. Шамаев, Н. Д. Сравнение серологических методов оценки серопревалентности T. gondii в популяциях европейской норки / Н. Д. Шамаев. - Текст : непосредственный // Актуальные вопросы ветеринарной биологии. - 2020. - № 4 (48). - С. 3-6.

64. Шамаев, Н. Д. Сравнительная оценка флотационных методов выявления ооцист Toxoplasma gondii в почвенных образцах / Н. Д. Шамаев. -Текст : непосредственный // Вестник КрасГАУ. - 2020. - № 12. - С. 249-254.

65. Шамаев, Н.Д. Сравнительный анализ методов выделения ооцист T. gondii из образцов почвы / Н. Д. Шамаев. - Текст : непосредственный // Химическое и биологическое загрязнение почв : материалы всероссийской научной конференции, (18-21 июня 2018 г.). - Пущино, 2018. - С. 262-265.

66. Шамаев, Н. Д. Межпопуляционные исследования генетического полиморфизма Toxoplasma gondii в отдельном биоценозе / Н. Д. Шамаев. -Текст : непосредственный // Актуальные проблемы экологии и природопользования: сборник научных трудов XXI международной научно-практической конференции, (23-25 апреля 2020 г.). - Москва, 2020. - Т. 1. - С. 216-218.

67. Шамаев, Н. Д. Превалентность паразита Toxoplasma gondii в популяциях мелких млекопитающих лесопарковых зон города Казани / Н. Д. Шамаев. - Текст : непосредственный // Естественные и технические науки. -2021. - № 4 (155). - С. 130-133.

68. Ямборко, А. В. Популяционная экология лесных полевок (род Clethrionomys) Северо-Восточной Азии : специальность 03.02.08 «Экология (биологические науки)» : диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук / Ямборко Алексей Владимирович ;

Федеральный научный центр биоразнообразия наземной биоты Восточной Азии» Дальневосточного отделения Российской академии наук. -Владивосток, 2015. -202 с. - Текст : непосредственный.

69. Afonso, E. Local meteorological conditions, dynamics of seroconversion to Toxoplasma gondii in cats (Felis catus) and oocyst burden in a rural environment / Е. Afonso, P. Thulliez, E. Gilot-Fromont. - Текст : непосредственный // Epidemiology and Infection. - 2010. № 138: С. 1105-1113.

70. Afonso, E. Toxoplasmosis in prey zpecies and consequences for prevalence in feral cats: not all prey species are equal / E. Afonso, P. Thulliez, D. Pontier, E. Gilot-Fromont. - Текст : непосредственный // Parasitology. - 2007. № 134. С. 1963-1971.

71. Andreychev, A. V. Homing in the Forest Dormouse (Dryomys nitedula, Rodentia, Gliridae) / A. V. Andreychev, O. S. Kiyaykina. - Текст : непосредственный // Biology Bulletin. - 2020. № 99. С. 698-705. DOI: 10.31857/s0044513420060033.

72. Aramini, J. J. Potential contamination of drinking water with Toxoplasma gondii oocysts / C. Stephen, J. P. Dubey. - Текст : непосредственный // Epidemiology and Infection. - 1999. № 122 (2). С. 305-315. DOI: 10.1017/s0950268899002113.

73. Appleford, P. J. Toxoplasma gondii: the growth characteristics of three virulent strains / P. J. Appleford, J. E. Smith. - Текст : непосредственный // // Acta Tropica. - 1997. № 65. С. 97-104.

74. Bahia-Oliveira, L. M. Highly endemic, waterborne toxoplasmosis in north Rio de Janeiro state, Brazil / L. M. Bahia-Oliveira, J. L. Jones, J. Azevedo-Silva, C. C. Alves. - Текст : непосредственный // Emerging Infectious Diseases. - 2003. № 9 (1). С. 55-62. DOI: 10.3201/eid0901.020160.

75. Baker, P. J. Factors affecting the distribution of small mammals in an urban area / P. J. Baker, R. J. Ansell, P. A. A. Dodds, C. E. Webber. - Текст : непосредственный // Mammal Review. - 2003. № 33. С. 95-100.

76. Baker, P.J. Impact of predation by domestic cats Felis catus in an urban area / P. J. Baker, A. J. Bentley, R. J. Ansell, S. Harris. - Текст : непосредственный // Mammal Review. - 2005. № 35: С. 302-312.

77. Balakirev, N. A. Osnovyi Norkovodstva / N. A. Balakirev. - Moskva : Vyisshaya shkola, 2001. - 286 с. ISBN 5-06-004180-8. Текст : непосредственный.

78. Barratt, D. G. Predation by house cats, Felis catus (L.), in Canberra, Australia. II. Factors affecting the amount of prey caught and estimates of the impact on wildlife / D. G. Barratt. - Текст : непосредственный // Wildlife Research. - 1998. № 25. С. 475-487.

79. Barros, M. Toxoplasma gondii infection in wild mustelids and cats across an urban-rural gradient / M. Barros, O. Cabezón, J. P. Dubey, S. Almería. -Текст : непосредственный // PLoS One. - 2018. № 13. e0199085. DOI: 10.1371/journal.pone.0199085

80. Beazley, D. M. Toxoplasmosis / D. M. Beazley, R. S. Egerman. -Текст : непосредственный // Seminars in Perinatology. - 1998. DOI: 10.1016/S0146-0005(98)80022-0 1.

81. Beckers, C. J. M. The Toxoplasma gondii rhoptry protein ROP 2 is inserted into the parasitophorous vacuole membrane, surrounding the intracellular parasite, and isexposed to the host cell cytoplasm / C. J. M. Beckers, J. F. Dubremetz, O. Mercereau-Paijalon, K. A. Joiner. - Текст : непосредственный // Journal of Cell Biology. - 1994. № 127. С. 947-961.

82. Bonhomme, A. Review: Toxoplasma gondii cellular invasion / A. Bonhomme, L. Pingret, J. M. Pinon. - Текст : непосредственный // Parassitologia. - 1992. № 54. С. 31-43.

83. Bou, G. Value of PCR for detection of Toxoplasma gondii in aqueous humor and blood samples from immunocompetent patients with ocular toxoplasmosis / G. Bou, M. S. Figeueroa, P. Marti-Belda. - Текст : непосредственный // Journal of Clinical Microbiology. - 1999. № 37. С. 34653468.

84. Bowie, W. R. Outbreak of toxoplasmosis associated with municipal drinking water / W. R. Bowie, A. S. King, D. H. Werker, J. L. Isaac-Renton. -Текст : непосредственный // Lancet. - 1997. DOI: 10.1016/S0140-6736(96)11105-3 1.

85. Burg, J. L. Direct and sensitive detection of a pathogenic protozoan, Toxoplasma gondii, by polymerase chain reaction / J. L. Burg, C. M. Grover, P. Pouletty, J. C. Boothroyd. - Текст : непосредственный // Journal of Clinical Microbiology. - 1989. № 27. С. 1787-1792.

86. Burrells, A. Evidence of the three main clonal Toxoplasma gondii lineages from wild mammalian carnivores in the UK / A. Burrells, P. M. Bartley, I. A. Zimmer, S. Roy. - Текст : непосредственный // Parasitology. - 2013. № 140. С. 1768-1776. DOI: 10.1017/S0031182013001169.

87. Calhoon, R. E. Urban Cat Populations Compared by Season, Subhabitat and Supplemental Feeding / R. E. Calhoon, C. Haspel. - Текст : непосредственный // The Journal of Animal Ecology. - 1989. № 58. С. 321-328.

88. Cat ownership is neither a strong predictor of Toxoplasma gondii infection nor a risk factor for brain cancer / M. Vittecoq, K. D. Lafferty, E. Elguero, J. Brodeur, M. Gauthier-Clerc, D. Misse, B. Roche, F. Thomas. - Текст : непосредственный // Biology Letters. - 2012. DOI: 10.1098/rsbl.2012.0625.

89. Chiang, S. H. Epidemiological survey of Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections in dairy goats in central-southern Taiwan / S. H. Chiang, H. H. Huang, C. C. Chou, C. S. Chu. - Текст : непосредственный // Journal of Veterinary Medical Science. - 2020. DOI: 10.1292/jvms.20-0116.

90. Cook, A. J. Sources of toxoplasma infection in pregnant women: European multicentre case-control study / A. J. Cook, R. E. Gilbert, W. Buffolano, J. Zufferey. - Текст : непосредственный // British Medical Journal. - 2000. № 321. С. 142-147.

91. Dickman, C. R., The Ecology of Small Mammals in Urban Habitats. I. Populations in a Patchy Environment / C. R. Dickman, C. P. Doncaster. - Текст : непосредственный // The Journal of Animal Ecology. - 1987. № 56. С. 629-640.

92. Dietz, H. H. Experimental infection with Toxoplasma gondii in farmed mink (Mustela vison S.) / H. H. Dietz, P. Henriksen, M. Lebech, S. A. Henriksen. - Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. - 1993. № 47. С. 1-7. DOI: 10.1016/0304-4017(93)90170-R.

93. Dubey, J. P. The Toxoplasma gondii oocyst from cat feces / J. P. Dubey, N. L. Miller, J. K. Frenkel. - Текст : непосредственный // Journal of Experimental Medicine. - 1970. № 132(4). С. 636-662. DOI: 10.1084/jem.132.4.636.

94. Dubey, J. P. Feline toxoplasmosis from acutely infected mice and the development of Toxoplasma cysts / J. P. Dubey, J. K. Frenkel. - Текст : непосредственный // The Journal of Protozoology. - 1976. № 23. С. 537-546.

95. Dubey, J. P. Long term persistence of Toxoplasma gondii in tissues of pigs inoculated with T. gondii oocysts and effect of freezing on viability of tissue cysts in pork / J. P. Dubey. - Текст : непосредственный // American journal of veterinary research. - 1988. № 49. С. 910-913.

96. Dubey, J. P. Infectivity and pathogenicity of Toxoplasma gondii oocysts for cats / J. P. Dubey. - Текст : непосредственный // The Journal of Protozoology. - 1996. № 82. С. 957-960.

97. Dubey, J.P. Prevalence of Toxoplasma gondii antibodies in domestic cats From rural Ohio / J. P. Dubey, W. J. A. Saville, J. Stanek, S. M. Reed. -Текст : непосредственный // The Journal of Protozoology. - 2002. № 88. С. 802803.

98. Dubremetz, J. F. Subcellular organelles of Toxoplasma gondii and host cell invasion / J. F. Dubremetz, J. D. Swartzman. - Текст : непосредственный // Research in Immunology. - 1993. № 144. С. 31-33.

99. Dwuznik, D. Comparison of helminth community of Apodemus agrarius and Apodemus flavicollis between urban and suburban populations of mice / D. Dwuznik, T. Gortat, J. M. Behnke, A. Gryczynska. - Текст : непосредственный // Parasitology Research. - 2017. № 116. С. 2995-3006. DOI: 10.1007/s00436-017-5609-5.

100. Frank, R. K. An outbreak of toxoplasmosis in farmed mink (Mustela vison S.) / R.K. Frank. - Текст : непосредственный // Journal of veterinary diagnostic investigation: official publication of the American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians, Inc. - 2001. № 13. С. 245-249. DOI: 10.1177/104063870101300310.

101. Frenkel, J. K. Toxoplasma in and around us / J. K. Frenkel. - Текст : непосредственный // BioScience. - 1973. № 23. С. 343-352.

102. Frenkel, J. K. Soil survival of Toxoplasma oocysts in Kansas and Costa Rica / J. K. Frenkel, A. Ruiz, M. Chinchilla. - Текст : непосредственный // American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. - 1975. № 24 (3). С. 439443. DOI: 10.4269/ajtmh.1975.24.439.

103. Freyre, A. Oocyst-induced Toxoplasma gondii infections in cats / A. Freyre, J. P. Dubey, D. D. Smith, J. K. Frenkel. - Текст : непосредственный // Journal of Parasitology. - 1989. № 75. С. 750-755.

104. Fromont, E. Epidemiology of feline leukemia virus (FeLV) and structure of domestic cat populations / E. Fromont, M. Artois, D. Pontier. - Текст : непосредственный // The Journal of Wildlife Management. - 1998. № 62. С. 978988.

105. Galeh, T. M. Global Status of Toxoplasma gondii seroprevalence in rodents: A systematic review and meta-analysis / T. M. Galeh, S. Sarvi, M. Montazeri, M. Moosazadeh. - Текст : непосредственный // Frontiers in Veterinary Science. - 2020. DOI: 10.3389/fvets.2020.00461.

106. Gazzonis, A. L. Toxoplasma gondii infection and biosecurity levels in fattening pigs and sows: serological and molecular epidemiology in the intensive pig industry (Lombardy, Northern Italy) / A. L. Gazzonis, M. Marangi, L. Villa, M. E. Ragona. - Текст : непосредственный // Parasitology Research. - 2018. DOI: 10.1007/s00436-017-5736-z.

107. Gilot-Fromont, E. The life cycle of Toxoplasma gondii in the natural environment / E. Gilot-Fromont, M. Lélu, M.-L. Dardé, C. Richomme. - Текст : непосредственный // In: Toxoplasmosis - Recent Advances. - 2012. DOI: 10.5772/48233.

108. Gotteland, C. Species or local environment, what determines the infection of rodents by Toxoplasma gondii? / C. Gotteland, Y. Chaval, I. Villena, M. Galan. - Текст : непосредственный // Parasitology. - 2013. № 141 (2). С. 259-268.

109. Gotteland, C. Spatial Distribution of Soil Contamination by Toxoplasma gondii in a rural area: influence of cats and land use / C. Gotteland, E.

Gilot-Fromont, D. Aubert, M. L. Poulle. - Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. - 2014. DOI: 10.1016/j.vetpar.2014.08.003.

110. Grover, C. M. Rapid prenatal diagnosis of congenital Toxoplasma infection by using polymerase chain reaction and amniotic fluid / C. M. Grover, P. Thulleiz, J. Remington. - Текст : непосредственный // Journal of Clinical Microbiology. - 1990. № 28. С. 2297-2301.

111. Hekeler, M. ^xoplasmosis / M. Hekeler. - Текст : непосредственный // Medicine. - 2002. С. 1-26.

112. Henriksen, P. Seroprevalence of Toxoplasma gondii in Danish farmed mink (Mustela vison S. ) / P. Henriksen, H. H. Dietz, A. Uttenthal, M. Hansen. -Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. - 1994. № 53. С. 1-5. DOI: 10.1016/0304-4017(94)90010-8.

113. Homan, W. L. Identification of a 200- to 300-fold repetitive 529 bp DNA fragment in Toxoplasma gondii, and its use for diagnostic and quantitative PCR / W. L. Homan, M. Vercammen, J. De Braekeleer, H. Verschuern. - Текст : непосредственный // International Journal for Parasitology. - 2000. № 30. С. 6975.

114. Howe, K. D. Determination of genotypes of Toxoplasma gondii strains isolated from patients with toxoplasmosis / K. D. Howe, S. Honore, F. Derouin, L. D. Sibley. - Текст : непосредственный // Journal of Clinical Microbiology. - 1997. № 35. С. 1411-1414.

115. Inferring the ecological niche of Toxoplasma gondii and Bartonella spp. in wild felids / L. E. Escobar, S. Carver, D. Romero-Alvarez, S. VandeWoude, R. K. Crooks, M. R. Lappin, M. E. Craft. - Текст : непосредственный // Frontiers in Veterinary Science. - 2017. № 4. DOI: 10.3389/fvets.2017.00172.

116. Isaac-Renton, J. Detection of Toxoplasma gondii oocysts in drinking water / J. Isaac-Renton, W. R. Bowie, A. King, G. S. Irwin. - Текст :

непосредственный // Applied and Environmental Microbiology. - 1998. DOI: 10.1128/aem.64.6.2278-2280.1998.

117. James, G. Comparison of cell culture, mouse inoculation and PCR for detection of T. gondii: effects of storage conditions on sensitivity / G. S. James, V. G. Sintchenko, D. J. Dickeson, G. L Gilbert. - Текст : непосредственный // Journal of Clinical Microbiology. - 1996. № 34. С. 1572-1575.

118. Webster, J. P. Rats, cats, people and parasites: the impact of latent toxoplasmosis on behavior / J. P. Webster. - Текст : непосредственный // Microbes and Infection. - 2001. № 3. С. 1037-1045. DOI: S1286457901014599/REV.

119. Joiner, K. Cell entry by Toxoplasma gondii: all paths do not lead to success / K. Joiner. - Текст : непосредственный // Research in Immunology. -1993. № 144. С. 34-48.

120. Kociecka, W. Clinical criteria and evaluation of the pathology and progress of lympho-nodular toxoplasmosis / W. Kociecka, B. Mrozewicz, E. Simon, M. Pakula. - Текст : непосредственный // Wiadomosci parazytologiczne. - 1990. № 36. С. 99-119.

121. Kasper, L. H. Attachment and invasion of host cells by Toxoplasma gondii / L. H. Kasper, J. R. Mineo. - Текст : непосредственный // Parasitology Today. - 1994. № 10. С. 184-188.

122. Kaufman, H. E. Multiplication of three strains of Toxoplasma gondii in tissue culture / H. E. Kaufman, E. D. Maloney. - Текст : непосредственный // The Journal of Parasitology. - 1962. № 48. С. 358-361.

123. Krauze-Gryz, D. Annual variation in prey composition of domestic cats in rural and urban environment / D. Krauze-Gryz, M. Zmihorski, J. Gryz. -Текст : непосредственный // Urban Ecosystems. - 2017. № 20. С. 945-952. DOI: 10.1007/s11252-016-0634-1.

124. Liberg, O. Spacing pattern in a population of rural free-roaming domestic cats / O. Liberg. - Текст : непосредственный // Oikos. - 1980. № 35. С. 336-349.

125. Liberg, O. Predation and social behaviour in a population of domestic cats. An evolutionary perspective : Ph. D. Thesis / Liberg Olof ; University of Lund. - Sweden, 1981. - 135 с. - Текст : непосредственный.

126. Liberg, O. Food habits and prey impact by feral and house-based domestic cats in a rural area in southern Sweden / O. Liberg. - Текст : непосредственный // Journal of Mammalogy. - 1984. № 65. С. 424-432.

127. Lindsay, D. S. Removal of Toxoplasma gondii oocysts from sea water by eastern oysters (Crassostrea virginica) / D. S. Lindsay, K. K. Phelps, S. A. Smith, G. Fuck. - Текст : непосредственный // Journal of Eukaryotic Microbiology. - 2001. DOI: 10.1111/j.1550-7408.2001.tb00517.x.

128. Meisel, R. Identification of two allelles in the GRA4 locus of Toxoplasma gondii determining a differential epitope which allows discrimination of type I versus type II and III strains / R. Meisel, S. Stachelhaus, M. N. Mevelec, G. Reichman. - Текст : непосредственный // Molecular and Biochemical Parasitology. - 1996. № 81. С. 259-263.

129. Melnikov, V. D. Data of toxoplasmosis in fur-animals / V. D. Melnikov, A. P. Rodykov, A. A. Berestov. - Текст : непосредственный // Adapattsionnye Reaktsii Pushnykh Zverei. - 1980. С. 124-128.

130. Miró, G. Prevalence of antibodies to Toxoplasma gondii and intestinal parasites in stray, farm and household cats in Spain / G. Miró, A. Montoya, S. Jimenez, C. Frisuelos. - Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. -2004. № 126. С. 249-255.

131. Mitter, G. Niche-partitioning of three Apodemus species (Mammalia: Murinae) in an urban environment / G. Mitter, P. Sumasgutner, A. Gamauf. -

Текст : непосредственный // Annalen Des Naturhistorischen Museums in Wien. -2015. № 117. С. 37-46.

132. Morisaki, J. H. Invasion of Toxoplasma gondii occurs by active penetration of the host cell / J. H. Morisaki, J. E. Heuser, L. D. Sibley. - Текст : непосредственный // Journal of Cell Science. - 1995. № 108. С. 2457-2464.

133. Musser, G. G. Systematic studies of oryzomyine rodents (Muridae: Sigmodontinae): definition and distribution of Oligoryzomys vegetus (Bangs, 1902) / G. G. Musser, M. D. Carleton. - Текст : непосредственный // Biological Society of Washington. - 1995. № 108 (2). С. 338-369.

134. Nichols, B. A. Penetration of mouse peritoneal macrophages by the protozoon Toxoplasma gondii / B. A. Nichols, G. R. O'Connor. - Текст : непосредственный // Laboratory Investigation. - 1981. №44. С. 324-335.

135. Nichols, B. A. Secretion from the rhoptries of Toxoplasma gondii during host-cell invasion / B. A. Nichols, M. L. - Текст : непосредственный // Chiappino Journal of Ultrasructure Research. - 1983. № 83. С. 85-98.

136. Ossorio, P. N. Mitochondrial-like DNA sequences flanked by direct and invert repeats in the nuclear genome of Toxoplasma gondii / P. N. Ossorio, L. D. Sibley, J. C. Boothroyd. - Текст : непосредственный // Journal of Molecular Biology. - 1991. № 222. С. 525-536.

137. Page R. J. C. Home ranges of feral cats at Avonmouth Docks (United Kingdom) / R. J. C. Page, J. Ross, D. H. Bennett. - Текст : непосредственный // Revue scientifique et technique (International Office of Epizootics). - 1993. № 12. С. 23-26.

138. Pelloux, H. A new set of primers for the detection of Toxoplasma gondii in amniotic fluid using polymerase chain reaction / H. Pelloux, J. Weiss, J. Simon, F. Muet. - Текст : непосредственный // FEMS Microbiology Letters. -1996. № 138. С. 11-15. DOI: 10.1111/j.1574-6968.1996.tb08127.x.

139. Pelloux, H. A second European collaborative study on polymerase chain reaction for Toxoplasma gondii involving 15 teams / H. Pelloux, E. Guy, M. C. Angelici. - Текст : непосредственный // FEMS Microbiology Letters. - 1998. № 165. С. 231-237.

140. Pontier, D. Evidence of selection on the orange allele in the domestic cat Felis catus: the role of social structure / D. Pontier, N. Rioux, A. Heizmann. -Текст : непосредственный // Oikos. - 1995. № 73. С. 299-308.

141. Prevalence and risk factors of Toxoplasma-like and intestinal parasites in cats from urbanized area of Tatarstan, Russia / N. D. Shamaev, A. Yu. Fedotova, A. V. Galiullina [и др.]. - Текст : непосредственный // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2018. - № 9. - С. 465-471.

142. Prevalence of Toxoplasma gondii among wild murid rodents in Tatarstan, Russia / Shamaev N. D., Shuralev E. A., Nikitin O. V., Mukminov M. N., Davidyuk Y. N., Belyaev A. N., Savitskaya T. A., Isaeva G. S., Ziatdinov V. B., Khaertynov K. S., Kitoh K., Takashima Y. - Текст : непосредственный // Proceeding of the 5th International Symposium of Association of Japan and Indonesia Veterinary Education, (13 февраля 2021 г.). - Bogor, 2021. - С. 87.

143. Quintero-Nunez, R. Transmission of Toxoplasma gondii in Panama City, Panama: A Five-Year Prospective Cohort Study of Children, Cats, Rodents, Birds, and Soil / R. Quintero-Nunez, R. S. Hassanein, P. Thulliez, J. K. Frenkel. -Текст : непосредственный // The American Journal of Tropical Medicine and Hygiene. - 1995. №53 (5). С. 458-468. DOI: 10.4269/ajtmh.1995.53.458.

144. Reischl, U. Comparision of two DNA targets for the diagnosis of toxoplasmosis by real time PCR using fluorescence resonance energy transfer hybridization probes / U. Reischl, S. Bretagne, D. Kruger, P. Ernaut. - Текст : непосредственный // BMC Infectious Diseases. - 2003. № 3. С. 7.

145. Remington, J. S. Toxoplasmosis / J. S. Remington, G. Desmonts. -Remington J. S., Klein J. O. Infectious diseases of the infant. Philadephia : Saunders, 1980. - 1310 с. - Текст : непосредственный.

146. Rinder, H. Specific DNA polymorphism discriminate between virulence and non-virulence to mice in nine Toxoplasma gondii strains / H. Rinder, A. Thomschke, M. L. Darde, T. Loscher. - Текст : непосредственный // Molecular and Biochemicaly Parasitology. - 1995. № 69. С. 123-126.

147. Safiullin, R. T. Eimeriosis and isosporosis of fur animals and its therapy / R. T. Safiullin. - Текст : непосредственный // Russian Journal of Parasitology. - 2008. № 2. С. 84-99.

148. Say, L. Spatiotemporal variation in cat population density in a sub-Antarctic environment / L. Say, J. M. Gaillard, D. Pontier. - Текст : непосредственный // Polar Biology. - 2002. № 25. С. 90-95.

149. Say, L. The mating system of feral cats (Felis catus L.) in a sub-Antarctic environment / L. Say, S. Devillard, E. Natoli, D. Pontier. - Текст : непосредственный // Polar Biology. - 2002. № 25. С. 838-842.

150. Sepûlveda, M. A. Toxoplasma gondii in feral American minks at the Maullin river, Chile / M. A. Sepûlveda, C. Munoz-Zanzi, C. Rosenfeld, R. Jara. -Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. - 2011. № 175. С. 60-65. DOI: 10.1016/j.vetpar.2010.09.020.

151. Seroprevalence and B1 gene genotyping of Toxoplasma gondii in farmed European mink in the Republic of Tatarstan, Russia / N. D. Shamaev, E. A. Shuralev, S. V. Petrov [и др.]. - Текст : непосредственный // Parasitology International. - 2020. - № 76. - С. 1-5. DOI: 10.1016/j.parint.2020.102067.

152. Sibley, L. D. Invasion of vertebrate cells by Toxoplasma gondii / L. D. Sibley. - Текст : непосредственный // Trends in Cell Biology. - 1995. № 5. С. 129-132.

153. Silva, S. R. L. Mechanism of entry of Toxoplasma gondii into vertebrate cells / S. R. L. Silva, S. S. L. Meirelles, W. De. Souza. - Текст : непосредственный // Journal of Submicroscopic Cytology. - 1982. № 14. С. 471482.

154. Sheffield, H. G. The fine structure and reproduction of Toxoplasma gondii / H. G. Sheffield, M. L. Melton. - Текст : непосредственный // The Journal of parasitology. - 1968. № 54. С. 209-226.

155. Shen, L. Prevalence of Toxoplasma gondii infection in man and animals in Guangdong, People's Republic of China / L. Shen, L. Zhichung, Z. Biaucheng, Y. Huayuan. - Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. - 1990. DOI: 10.1016/0304-4017(90)90082-M.

156. Shwab, E. K. Geographical patterns of Toxoplasma gondii genetic diversity revealed by multilocus PCR-RFLP genotyping / E. K. Shwab, X. Q. Zhu, D. Majumdar, H. F. J. Pena. - Текст : непосредственный // Parasitology. - 2014. № 141. С. 453-461. DOI: 10.1017/S0031182013001844.

157. Shwab, E. K. Human impact on the diversity and virulence of the ubiquitous zoonotic parasite Toxoplasma gondii / K. E. Shwab, P. Saraf, X. Q. Zhu, D. H. Zhou. - Текст : непосредственный // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2018. DOI: 10.1073/pnas. 1722202115.

158. Smielewska-Los, E. Toxoplasma gondii infection in polish farmed mink / E. Smielewska-Los, W. Turniak. - Текст : непосредственный // Veterinary Parasitology. - 2004. № 122. С. 201-206. DOI: 10.1016/j .vetpar.2004.02.003.

159. Speer, C. A. Time lapse video microscopy and ultrastructure of penetrating sporozoites, types 1 and 2 parasitophorous vacuoles, and the transformation of sporozites to tachyzoites of the VEG strain of Toxoplasma

gondii / C. A. Speer, J. P. Dubey, J. A. Blixt, K. Prokop. - Текст : непосредственный // The Journal of parasitology. - 1997. № 83. С. 565-574.

160. Stagno, S. An outbreak of toxoplasmosis linked to cats / S. Stagno, A. C. Dykes, C. S. Amos, R. A. Head. - Текст : непосредственный // Pediatrics. -1980. № 65 (4). С. 706-712.

161. Terry, R. S. MGE-PCR: A novel approach to the analysis of Toxoplasma gondii strain differentiation using mobile genetic elements / R. S. Terry, J. E. Smith, P. Duncanson, G. Hidea. - Текст : непосредственный // International Journal for Parasitology. - 2001. № 31. С. 155-161. DOI: 10.1016/S0020-7519(00)00158-2.

162. Teutsch, S. M. Epidemic Toxoplasmosis Associated with Infected Cats / S. M. Teutsch, D. D. Juranek, A. Sulzer, J. P. Dubey. - Текст : непосредственный // New England Journal of Medicine. - 1979. DOI: 10.1056/nejm197903293001302.

163. Thomasson, D. Prevalence and co-infection of Toxoplasma gondii and Neospora caninum in Apodemus sylvaticus in an area relatively free of cats / D. Thomasson, E. A. Wright, J. M. Hughes, N. S. Dodd. - Текст : непосредственный // Parasitology. - 2011. DOI: 10.1017/S0031182011000904.

164. Toxoplasma gondii seroprevalence in goats, cats and humans in Russia / E. A. Shuralev, N. D. Shamaev, M. N. Mukminov [и др.]. - Текст : непосредственный // Parasitology International. - 2018. - № 67. - С. 112-114. DOI: 10.1016/j.parint.2017.10.014.

165. Turner, D. C. The Domestic Cat: The Biology of Its Behaviour / D. C. Turner, P. B. Bateson. - Текст : непосредственный // Cambridge University Press. - 2013. DOI: 10.1017/CBO9781139177177.

166. Vukicevic-Radic, O. Spatial organization and home range of Apodemus flavicollis and A. agrarius on Mt. Avala, Serbia / O. Vukicevic-Radic,

R. Matic, D. Kataranovski, S. Stamenkovic. - Текст : непосредственный // Acta Zoologica Academiae Scientiarum Hungaricae. - 2006. № 52. С. 81-96.

167. Werk, R. How does Toxoplasma gondii enter host cells / R. Werk. -Текст : непосредственный // Reviews of Infectious Diseases. - 1985. № 7. С. 449-457. DOI: 10.1093/clinids/7.4.449.

168. Werner, H. Latent Toxoplasma gondii infection as a possible risk factor for CNS disorders / H. Werner, K. N. Masihi, U. Senk. - Текст : непосредственный // Zentralblatt Fur Bakteriologie Mikrobiologie Und Hygiene. - 1981. № 250. С. 368-375. DOI: 10.1016/s0174-3031(81)80129-1.

169. Woods, M. Predation of Wildlife by Domestic Cats Felis Catus in Great Britain / M. Woods, R. A. McDonald, S. Harris. - Текст : непосредственный // Mammal Review. - 2003. № 33. С. 174-188. DOI: 10.1046/j.1365-2907.2003.00017.x.

170. Wu, S. M. Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in household and stray cats in Lanzhou, Northwest China / S. M. Wu, X. Q. Zhu, D. H. Zhou, B. Q. Fu. - Текст : непосредственный // Parasites & Vectors. - 2011. № 4. С. 214-218.

171. Zhang, H. Seroprevalence of Toxoplasma gondii infection in stray and household cats in Guangzhou, China / H. Zhang, D. H. Zhou, P. Zhou, Z. R. Lun. -Текст : непосредственный // Zoonoses public health. - 2009. № 56. С. 502-505.

ПРИЛОЖЕНИЯ

ПРИЛОЖЕНИЕ А. Протокол выделения ДНК T. gondii из образцов проб головного мозга грызунов и норок с применением комплекта реагентов для экстракции ДНК из биологического материала «ДНК-СОРБ-С-М».................2

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. Учебно-методическое пособие «Анализ и документирование гелей и мембран в программном обеспечении «Image lab» при электрофорезе и блоттинге».........................................................................6

ПРИЛОЖЕНИЕ В. Акт о внедрении результатов научных исследований.......7

ПРИЛОЖЕНИЕ Г. Сводные данные по полученным показателям загрязнения патогенным микроорганизмом T. gondii в популяциях промежуточных и дефинитивных хозяев.................................................................................................................8

ПРИЛОЖЕНИЕ Д. Последовательность частичного фрагмента гена B1 T. gondii в базе данных GeneBank выделенного в популяции норок .................................................................................................................................................................10

ПРИЛОЖЕНИЕ А. Протокол выделения ДНК T. gondii из образцов проб головного мозга грызунов и норок с применением комплекта реагентов для экстракции ДНК из биологического материала «ДНК-СОРБ-С-М»

При исследовании биологического материала от животных работа проводилась согласно правилам МСХиП РФ 27.01.1997 г. № 13-7-2/840 «Правила проведения работ в диагностических лабораториях, использующих метод полимеразной цепной реакции. Основные положения», утвержденным Департаментов ветеринарии.

Принцип метода: Исследуемый образец обрабатывается лизирующим раствором с протеиназой К, в результате чего происходит деструкция клеточных мембран, высвобождение НК и клеточных компонентов. Растворенные НК связываются с частицами сорбента, в то время как другие компоненты лизированного исследуемого материала остаются в растворе и удаляются при осаждении сорбента центрифугированием и последующей отмывкой сорбента. При добавлении буфера для элюции к сорбенту происходит переход НК с поверхности силики в раствор, который отделяется от частиц сорбента центрифугированием. В результате указанной процедуры получается высокоочищенный препарат НК, свободный от ингибиторов реакции амплификации, что обеспечивает высокую аналитическую чувствительность ПЦР-исследования.

Состав комплекта реагентов для экстракции ДНК из биологического материала «ДНК-сорб-С-М» вариант 50 (комплект реагентов вариант 50 рассчитан на экстракцию ДНК из 50 проб)

Вариант 50

Реагент Описание Объем

Количество

, мл

Буфер для лизирующего раствора Прозрачная бесцветная жидкость 20 1 флакон

Лизирующий реагент Прозрачная бесцветная жидкость 0,85 1 пробирка

Раствор для отмывки 1 Прозрачная бесцветная жидкость 15 1 флакон

Раствор для отмывки 2 Прозрачная бесцветная жидкость 50 1 флакон

Сорбент универсальный Суспензия белого цвета 1,25 1 пробирка

Буфер для элюции В Прозрачная бесцветная жидкость 5,0 1 пробирка

Экстракция ДНК из биологического материала от животных:

1. Прогреть буфер для лизирующего реагента и раствор для отмывки 1, если они хранились при температуре от 2 до 8 °С, при температуре 64 °С до полного растворения кристаллов.

2. Отобрать необходимое количество одноразовых полипропиленовых пробирок объемом 1,5 мл с завинчивающимися или плотно закрывающимися крышками.

3. Внести в каждую пробирку по 400 мкл буфера для лизирующего реагента.

4. Внести в каждую пробирку по по 17 мкл лизирующего реагента.

5. Внести в приготовленные пробирки по 100 мкл исследуемых образцов (допускается исследование образцов объемом от 10 до 100 мкл или весом от 10 до 100 мг), используя для каждого образца отдельный наконечник с фильтром.

6. В пробирку отрицательного контроля (ОК) экстракции внести 100 мкл ОКО, в пробирку положительного контроля (ПК) экстракции внести 90 мкл ОКО и 10 мкл ПКО.

7. Плотно закрыть крышки, тщательно перемешать и осадить капли в вортексе. Поместить пробирки в термостат с температурой 64 С° на 1 ч, периодически перемешивая на вортексе (5 раз через каждые 10-12 мин). Допускается инкубация в течении 12 ч при температуре 60 С°.

8. Осадить нерастворенные частицы образцов центрифугированием в течение 5 мин при 12 тыс об/мин.

9. Отобрать надосадочную жидкость в объеме 200-350 мкл очень аккуратно (избегая попадания взвешенных частиц и капель жира) отдельными наконечниками с фильтрами и перенести в новые пробирки. Осадить капли в вортексе.

10. Ресуспендировать сорбент универсальный, интенсивно перемешивая на вортексе. Добавить в каждую пробирку отдельным наконечником по 25 мкл ресуспендированного сорбента универсального, плотно закрыть крышки. Перемешать в вортексе, оставить в штативе на 10 мин, перемешивая через каждые 2 мин.

11. Центрифугировать пробирки на микроцентрифуге в течение 1 мин при 5 тыс об/мин.

12. Не захватывая сорбент, удалить надосадочную жидкость из каждой пробирки отдельным наконечником без фильтра на 200 мкл, используя вакуумный отсасыватель.

13. Добавить в пробирки по 300 мкл раствора для отмывки 1, плотно закрыть крышки, перемешать в вортексе до полного ресуспендирования сорбента универсального.

14. Центрифугировать пробирки на микроцентрифуге в течение 1 мин при 5 тыс об/мин.

15. Не захватывая сорбент, удалить надосадочную жидкость из каждой пробирки отдельным наконечником без фильтра на 200 мкл, используя вакуумный отсасыватель.

16. Добавить в пробирки по 500 мкл раствора для отмывки 2, плотно закрыть крышки, перемешать на вортексе до полного ресуспендирования сорбента универсального.

17. Центрифугировать пробирки на микроцентрифуге в течение 1 мин при 10 тыс об/мин

18. Не захватывая сорбент, удалить надосадочную жидкость из каждой пробирки отдельным наконечником без фильтра на 200 мкл, используя вакуумный отсасыватель.

19. Повторить процедуру отмывки, следуя пп. 16-17, удалить надосадочную жидкость полностью.

20. Поместить пробирки с открытыми крышками в термостат с температурой 64 С° на 5-10 мин, периодически (1 раз в мин) перемешивая на вортексе.

21. Центрифугировать пробирки на микроцентрифуге в течение 1 мин при 10 тыс об/мин. Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к постановке ПЦР.

ПРИЛОЖЕНИЕ Б. Учебно-методическое пособие

УДК 574:577Л:312Л8:(10Ш22 ЕЕК 2 H.II8: 2H.U7:2Sc: 14S? :32Я72

Принято на заседании учебно-методической комиссии Института шшлщ и

природопользования П/ютокол № 4 от 0? июня 202 i ¿ода

iVui'и икш;

доктор биологически* наук, профессор кафедры цшшаднай зпиюпн КФУ ll.K>L Галнцкяп; кандидат биологическиv наук, доцент кафедры биохимии, бщггяшмппи н фармакологии КФУ O.A. Кряициел

Шамаен ILA.

()ij р лГн? I к л лшбрашслмн злектрофоретн ческик геле! и блптои в мршрАмшнш пПесиешмиш ulniagt Laim при эколог ihicckiiv исследованиях: ) чебип-метпдическис ммспйис Н.Д. Шамасд, Э_А. Шуралев, MR Мукмшюа. - Катань: Каган, у и-т., 2021. - с.

В iijtBimikv современник зииигнчккнк нахкдиыкнН hl J- бельшс внедряются межацСцнсиискарные ие']вды. шкме как uiejripihtjl)fH.4 и cl'Lirj'L'leui'. «июенно kin да речь iL.L^i й^ншниичсцснхишфсш (reuiuiMh^i члешклшгнх, кровь и сыворолл криден рыи, раштельный сои). '>гч.ь связано с рашсшринисм шчнысстн одшит) лч

нрфшкимй кЗЙАЛйГНН — 1ЬЖ)]иУЙ|Ш НЫиуЩй! HU

Учебно-ыроднческов посовне шадшо ди студенток Гйкилаврлапл ei магистратуры, обучающихся но щприпенни кЭшпйпи л фнрйдопшзоешно), а raiotfi ..lim ü.-l":jlj]ij in i№. йбуЩЩМЖя но нанравлел hhj (0.ß2.0fi — ЭНЩК^НЯ (бъюыигичнгкле jjjy'KHj, с целью лияышеьшя ll\ уменлл jj навыкши leu обработке ншбршйииЛ злелрйфарргнуесш itJKfl л блотоа ири энилоснчесшл нссн^Дршннш.

if..- II LlMiU'ü НД^ Ill у рал е ъ ЭА, My кмшшь MJI» 2(121 © Казанский университет, 202 L

ПРИЛОЖЕНИЕ В. Акт о внедрении результатов научных исследований

Общество с ограниченной ответственностью «Научно-исследовательский лабораторный комплекс Л ИОНЕКС»

ИНН 1660359736 / КПП 166001001 420073, г. Казань, ул. Гвардейская, дом 16,пом 1101, офис 7 Расчетный счет40702810323000082362 / БИК 042202847 Поволжский филиал АО «Райффайзенбанк» Кор/счет 30101810300000000847 Телефон: [phone]

В ООО «Научно-исследовательский лабораторный комплекс ЛИОНЕКС» были пр иняты р езультаты научных исследований, которые будут применимы для разработки средств индикации и идентификации биопатогенов в организме животных и объектах окружающей среды. Результаты научных исследований были получены аспирантом Института экологии и природопользования Казанского (Приволжского) федерального университета Шамаевым Николаем Дмитриевичем в рамках выполнения диссертационной работы под руководством кандидата ветеринарных наук, доцента Шуралева Эдуарда Аркадьевича.

АКТ

о внедрении результатов научных исследований

г. Казань

28 мая 2021г.

Генер альный дир ект

молински

ПРИЛОЖЕНИЕ Г. Сводные данные по полученным показателям превалентности патогенного микроорганизма T. gondii в популяциях промежуточных и дефинитивных хозяев

Сводные данные по полученным показателям превалентности патогенного микроорганизма T. gondii среди популяций дефинитивных

хозяев

№ наименование пробы кол-во всего, ед. исследовано

методом кол-во всего, ед. из них

положит. , ед. отриц., ед.

12. Сыворотка крови кошек 99 РЛА 99 39 60

13. Анальные соскобы от кошек 59 ПЦР 59 9 50

14. Фекалии кошек 94 Флотация и микроскопия 94 3 91

Примечание: РЛА - реакция латекс-агглютинации; ПЦР - полимеразная цепная реакция.

Сводные данные по полученным показателям превалентности патогенного микроорганизма T. gondii среди популяций промежуточных

хозяев

№ наименование пробы кол-во всего, ед. исследовано

методом кол-во всего, ед. из них

положит. , ед. отриц., ед.

1. ДНК головного мозга грызунов 474 ПЦР 474 40 434

2. Сыворотка крови коз 216 РЛА 216 95 121

3. Сыворотка крови норок 280 ИФА 280 94 186

4. ДНК головного мозга норок 50 ПЦР 50 7 43

5. Сыворотка крови лисиц 76 ИФА 76 21 55

6. Сыворотка крови человека 181 РЛА 181 56 125

Примечания: ПЦР - полимеразная цепная реакция; РЛА - реакция латекс-агглютинации; ИФА - иммуноферментный анализ.

ПРИЛОЖЕНИЕ Д. Последовательность частичного фрагмента гена B1 T. gondii в базе данных GeneBank выделенного в популяции норок

LULUb lNiriun

ACCCSSIfihl VLKiLUM ■iLYWURDb SOURCE LftiiftTJiiM

KEf-fcfi&NLt АШНОКЬ

TI _h IDURKAl

шммьы

HNb£jJBb& BJb bp UNA linear 1NV W-JUL-Htf^B

UIWtRIKLtU: Toxoplasna gondii isolate ,B10L

glycerol-i-phosphatE dEhydrogenasE-like gene, partial SEquence.

rtWfiaees

MMhbdtibU.l UNtftRIfltU . lc>iopLasTa gondii I oiocI-asTa Ecdii

Eukaryota: Sarj AIwdMb; Apicorrplesa; Conoidasida; Lcccidia; EucDccidiorida; iirrEriorinaj Sarcocystidae; rDMoplasma. L {bases 1 to Bdb}

ShaiiaeVjN.D., ihuralEV>£JA., h'etrovjS.V., Kazaryanjli^G. t flle-kssndrDva^.Fl, > ValEeva,fl.R. > KhaErtynov, K.2;. t HukninDV^H.N., ftitDhj.K. and 1 akashiTia^V.. Direct Submission

Subni-Zted (lfl-atl-aeisO tfepartner- of Parasitology, &ifu University, 1-1 VanagidD, bifu bBl-liyd, Japan GenBank staff is unable to verify sequence and/or annotation provided by thE subnitter,

iriAss впЫу -Uat a -i-T Д К Г Ш

bequencing T ec hnolo.gy :: banger dideoxy sequencing if iAss епЫу -Uat a -tHLWfl 1-ti.l JKtb Location/Qualifiers

source 1..aJb

/organisii="ToKcpLasTia gondii" /mol_type="genomic UNA" /i scl ate= " ТйНВ1!01 /, B1S1" /host="MU£tela lutrEala" /db_Kref="taкоп:bail" /t iss ue_ty pe="brain"

/country=nRussia: Republic of Tatarstan" /note="similar to glycerol-!-phosphate dehydrogenase"

OlilGir.

l atcgcaacgg ag^tcttccc agacgrggat ttccgrtggt tccg^ctcct tcgt^cgtcg

bl taatatcagg ccttctgttc tg^tcgctgt ctgtc^aggg cacccTtact gcaagagaag

121 tatttgaggt catatcgtcc catgaagtcg accacctgtt tcctctcttc acTgtcacgt

1И1 acgacatcgc attcaaggga agagatccag cagatctcgt tcgtg^attc gagacaagag

241 aggtccgccc cc ас-зада eg gctgaagaat gcaa-:attct tgrgctgcct cctctcatgg

JB1 caaatgccag aagaagggta cg^gtTgcat сатаасаада gcTgtatttc ccgctggcaa

¿61 atacaggrga aatgtacctc cagaaaagcc acctagtatc gtgcggcaat gtgccac:tc

■ill gcctcttggg agaaaaagag gaagagaege tgccgctgtt ttgcaaatga aaaggattca

■IB1 ttttcgcagt acaccaggag ttggaTtttg tagagegtet ctcttcaagc agegtattgt

Ь41 cgagtagatc agaaaggaac tgcatccgtt ca-gagtata agaaaaaaat gtgggaatga

bBl aagagacgct aatgtatttg cataggttgc agrcactgac gagctceect ctgctggiga

bbl aaagtgaaat t:atgagtat ctgtgcaact ttggtgtatt cgcagattgg tcgcc~g:aa

721 tcgatagrtg accacgaacg ctttaaagaa caggagaaga agateggaaa agaatacgag

/И1 aa^aggtaca cagagat^ga ag^cgctgcg gagacagcga agactgcgga tgactt