Прогностическое значение ZAP-70, интерлейкина-8 и состояние иммунологической реактивности у больных хроническим лимфолейкозом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат медицинских наук Шерстнева, Елена Сергеевна

• Шерстнева, Елена Сергеевна
• кандидат медицинских наук
• 2008

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шерстнева, Елена Сергеевна

Введение

ОГЛАВЛЕНИЕ

Глава 1. Прогностическое значение факторов ZAP-70, интерлейкина-8 и состояние иммунологической реактивности у больных хроническим лимфолейкозом (обзор литературы)

1.1 Роль хронического лимфолейкоза в структуре лимфопролиферативных заболеваний

1.2 Факторы прогноза хронического лимфолейкоза

1.3 Значение оценки суррогатного маркера мутационного статуса — ZAP-70 при хроническом лимфолейкозе

1.4 Прогностическое значение уровня цитокинов при хроническом лимфолейкозе

1.5 Механизмы противоопухолевого иммунитета при хроническом лимфолейкозе

1.6 Особенности иммунного статуса при хроническом лимфолейкозе

Глава 2. Клиническая характеристика обследованных больных и методы исследований

2.1 Клиническая характеристика больных

2.2 Методы исследования

Глава 3. Особенности содержания интерлейкина-8 и ZAP-70 у больных хроническим лимфолейкозом

3.1 Анализ содержания растворимого интерлейкина-8 у больных хроническим лимфолейкозом

3.2 Оценка спонтанной и стимулированной экспрессии внутриклеточного интерлейкина

3.3 Анализ экспрессии ZAP-70 у больных хроническим лимфолейкозом

Глава 4. Особенности иммунного статуса у больных хроническим лимфолейкозом

4.1. Сравнительная оценка иммунного статуса у больных хроническим лимфолейкозом с различными вариантами течения заболевания

4.2. Характеристика показателей иммунного статуса у больных хроническим лимфолейкозом с положительной и отрицательной экспрессией ZAP

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Прогностическое значение ZAP-70, интерлейкина-8 и состояние иммунологической реактивности у больных хроническим лимфолейкозом»

Хронический лимфолейкоз является наиболее распространенным видом лейкоза среди всех гемобластозов [12,29,62]. Заболевание крайне гетерогенно по своему течению, характеризуется различными темпами прогрессирования, а также различной выживаемостью больных. У ряда пациентов болезнь неуклонно прогрессирует, и, несмотря на лечение, продолжительность жизни составляет всего 2-3 года. В то же время примерно у 15-20% больных клинические и гематологические признаки заболевания на протяжении многих лет остаются стабильными и минимально выраженными [52]. Для определения прогноза течения заболевания в настоящее время предложены различные критерии, но ни один из них не является абсолютным. Такие традиционные факторы прогноза как стадия заболевания на момент установления диагноза, время удвоения количества лимфоцитов, характер поражения костного мозга, уровень бета-2-микроглобулина, иммунофенотипические особенности опухолевых клеток не отражают биологические особенности опухоли. В настоящее время имеется возможность проведения эффективной терапии в оптимальные сроки, поэтому актуальным является разработка информативных стратификационных параметров для прогнозирования течения ХЛЛ. Изучая клиническое течение ХЛЛ, авторы отмечают, что на смену традиционной тактике приходит адаптированная к риску терапия, при этом в дебюте болезни должны определяться факторы прогноза ХЛЛ [29]. На практике адаптированную к риску терапию ХЛЛ можно применять, используя генетические или статичные факторы прогноза. Классические или динамичные маркеры прогноза, такие как тип инфильтрации костного мозга, уровень лейкоцитов, уровень растворимого С023 и другие, коррелируют с массой опухоли и меняются со временем. Напротив, независимые факторы прогноза, такие как мутационный статус генов вариабельного региона иммуноглобулинов, не меняются со временем и уже в дебюте позволяют предсказать неблагоприятное течение ХЛЛ [28].

Особенно важно то, что мутационный статус позволяет выделять подгруппы больных с разным прогнозом в пределах ранних стадий [38,62,77]. Вместе с тем, исследование мутационного статуса генов вариабельного региона иммуноглобулинов является технологически сложным, долговременным, дорогостоящим и недоступным практическому здравоохранению. В настоящее время выделен белок ZAP-70, который коррелирует с мутациями гена IgVH и, следовательно, может явиться удачной лабораторной заменой определения мутационного статуса.

Рядом работ последних лет показано, что многообразные клинические проявления XJIJI связаны с нарушениями цитокинового статуса [7]. Выявлено, что при любом опухолевом росте имеются нарушения в системе интерлейкинов, которые проявляются дисбалансом продукции этих биологически активных веществ, а также изменением экспрессии соответствующих рецепторов [14].

Известно, что цитокины продуцируются различными клетками организма и являются факторами взаимодействия между клетками всех его органов и систем [18,34]. Во многих случаях они проявляют себя как факторы аутокринной регуляции.

В результате проведенных исследований показано, что повышенная секреция цитокинов при XJIJI приводит к их системному воздействию на организм, в результате чего формируются значимые субпопуляционные изменения со стороны клеток иммунной системы [27]. JI.A. Грачева (1996) обнаружила, что в процессе возникновения и развития опухоли происходит, прежде всего, нарушение баланса между секрецией проопухолевых, противоопухолевых и регуляторных цитокинов [14]. Секреция определенных цитокинов может обеспечивать преимущества роста для клеток опухоли аутокринным и паракринным путем. Показана связь увеличения уровня цитокинов с повышенной пролиферативной активностью клеток и ускорением процессов метастазирования, проведена оценка влияния цитокинов на основные свойства злокачественных опухолей, благодаря чему они могут использоваться в качестве маркеров опухолевой прогрессии и для определения прогноза заболевания [15,100].

Опухолевые клетки ХЛЛ постоянно экспрессируют интерлейкин-8 (ИЛ-8), а также рецепторы к нему. ИЛ-8 функционирует как аутокринный ростовый фактор и фактор устойчивости к апоптозу, увеличивая выживаемость лейкозных клеток посредством усиления экспрессии bcl-2. Полагают, что внутриклеточная и растворимая формы интерлейкина-8 составляют единую биологическую систему, в которой функциональная активность данного цитокина зависит от относительной концентрации и скорости клиренса ее компонентов, и в первую очередь от дисбаланса между синтезом ИЛ-8 и рецепторов к нему[159]. Исходя из того, что при ХЛЛ одним из механизмов патогенеза является блокада апоптоза, представляет интерес изучение ИЛ-8 как фактора устойчивости к апоптозу.

Необходимо отметить, что само возникновение опухоли в организме связано с нарушением противоопухолевого иммунитета, к тому же, В-клетки являются одними из участников иммунных реакций и в то же время субстратом опухоли [18].

Из сказанного вытекает, что необходим всесторонний анализ экспрессии ZAP-70, цитокинового статуса и перестройки иммунной системы у пациентов в зависимости от динамики опухолевого процесса.

Целью настоящего исследования явилась оценка содержания ZAP-70 и интерлейкина-8, а также иммунного статуса у больных хроническим лимфолейкозом.

Для достижения данной цели в этой работе были поставлены следующие задачи.

1. Определить экспрессию ZAP-70 опухолевыми клетками у больных с различными вариантами течения хронического лимфолейкоза.

2. Оценить прогностическую значимость экспрессии 2АР-70 в течении хронического лимфолейкоза.

3. Установить взаимосвязь уровня интерлейкина-8 (растворимого и внутриклеточного) с вариантом течения и стадией заболевания.

4. Изучить состояние клеточного, гуморального иммунитета и факторов неспецифической резистентности у больных ХЛЛ в зависимости от варианта течения заболевания и уровня экспрессии 2АР-70.

Научная новизна заключается в том, что на основе всестороннего анализа полученных результатов исследований выделен индивидуальный прогностический фактор течения заболевания — суррогатный маркер мутационного статуса 2АР-70, позволяющий прогнозировать вариант течения заболевания. Впервые, у этих пациентов проведен анализ уровня ИЛ-8 у больных в зависимости от стадии и варианта течения заболевания. Определена информативность нового прогностического фактора 2АР-70. Установлена значимость 2АР-70 и ИЛ-8 в качестве прогностических маркеров клинического течения ХЛЛ. Выявлены закономерности дисбаланса иммунной системы и цитокинового статуса в динамике лейкозного процесса.

Теоретическая и практическая значимость работы

Предложены новые прогностические критерии для определения характера клинического течения ХЛЛ. Для каждого варианта течения заболевания определен индивидуальный статический прогностический фактор - 2АР-70. Установлена зависимость уровня ИЛ-8 от динамики лейкозного процесса. Полученные результаты послужат основой для назначения дифференцированной терапии ХЛЛ.

Показана глубина дисфункции основных звеньев иммунитета и их зависимость от варианта течения заболевания. Это имеет немаловажное значение в плане определения терапевтической тактики у больных ХЛЛ на ранних стадиях заболевания.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Скорость прогрессирования ХЛЛ зависит от экспрессии 2АР-70. Больные с положительной экспрессией данного маркера отличаются прогрессирующим течением заболевания, тогда как в группе с отрицательной экспрессией 2АР-70 заболевание имеет благоприятное течение.

2. Уровень ИЛ-8 повышен у больных со стадиями В и С и с прогрессирующим вариантом течения, чем у пациентов со стадией А и доброкачественным вариантом течения.

3. У больных ХЛЛ с положительной экспрессией 2АР-70 и прогрессирующим вариантом течения заболевания выявлены значительные нарушения в системе иммунитета, выражающиеся в сочетанном угнетении клеточного иммунитета, гуморальных факторов, а также дисбалансом регуляторных цитокинов (ИФН-у, ФНО-а, ИЛ-2, ИЛ-4, ИЛ-6).

4. Экспрессия 2АР-70 и высокое содержание растворимого и внутриклеточного ИЛ-8 у больных ХЛЛ в дебюте заболевания может рассматриваться в качестве дополнительного критерия неблагоприятного прогноза: при положительной экспрессии 2АР-70 и высоких уровнях ИЛ-8 прогноз течения заболевания неблагоприятный.

Апробация и внедрение результатов исследований

Основные положения и результаты исследований доложены и обсуждены на заседаниях областного научного общества гематологов и трансфузиологов (2005), научно-практической конференции ФГУ «КНИИГиПК Росмедтехнологий» «Вопросы трансфузиологии и клинической медицины» (2007). По теме диссертации опубликовано 7 научных работ.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики обследованных пациентов и методов исследования, 2 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка цитируемой литературы. Диссертация изложена на 119 страницах, содержит 26 таблиц, 5 рисунков. Список литературы включает 186 источников, из них 52 отечественных и 134 зарубежных.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Шерстнева, Елена Сергеевна

ВЫВОДЫ

1. Экспрессия ZAP-70 является ранним прогностическим критерием течения хронического лимфолейкоза: при положительной экспрессии данного маркера в 89% случаев развивается прогрессирующее течение заболевания, при отрицательной - прогрессия отсутствует. Определение 2АР-70 в дебюте заболевания может использоваться в качестве раннего критерия прогноза течения ХЛЛ.

2. Прогрессирующее течение хронического лимфолейкоза и стадии В и С характеризуются повышенным уровнем растворимого и внутриклеточного интерлейкина-8 в сравнении с доброкачественным вариантом и стадией А. У пациентов со стадией В и С и с прогрессирующим вариантом течения заболевания концентрация растворимого ИЛ-8 в 4 раза превышает показатели больных со стадией А и доброкачественным течением (р<0,05). Уровень внутриклеточного ИЛ-8 в 11 раз выше у больных со стадией В и С, чем со стадией А, и в 8 раз выше у больных с прогрессирующим вариантом течения заболевания, чем у пациентов с доброкачественным вариантом течения хронического лимфолейкоза (р<0,05).

3. Высокий уровень растворимого и экспрессия внутриклеточного ИЛ-8 клетками опухолевого клона в дебюте хронического лимфолейкоза характеризуют активацию популяции лейкемических клеток.

4. У больных ХЛЛ с положительной экспрессией 2АР-70 и прогрессирующим вариантом течения заболевания выявлены нарушения в системе иммунитета, выражающиеся сочетанном угнетением клеточного звена, гуморальных факторов, а также дисбалансом регуляторных цитокинов (ИФН-у, ФНО-а, ИЛ-4, ИЛ-6).

Практические рекомендации

1. У больных ХЛЛ целесообразно в дебюте заболевания исследовать экспрессию 2АР-70, что позволит предсказать доброкачественный или прогрессирующий вариант течения, а также позволит дифференцированно подходить ко времени начала химиоиммунотерапии.

2. У больных ХЛЛ целесообразно определять уровень растворимого и внутриклеточного ИЛ-8 для прогнозирования благоприятного и неблагоприятного течения заболевания.

3. Анализ иммунной системы у больных ХЛЛ, включающий комплексное тестирование клеточного и гуморального иммунитета, неспецифической защиты и регуляторного нейроиммунного аппарата (по содержанию и соотношению цитокинов), позволяет получить представление об иммунореактивности пациентов с различными темпами прогрессирования заболевания и экспрессией 2АР-70.

100

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шерстнева, Елена Сергеевна, 2008 год

1. Абдулкадыров K.M., Рукавицын O.A., Шилова Е.Р., Удальева В.Ю. Гематологичесике синдромы в общей клинической практике: Справочник. -Спб.: Спец Лит., ЭЛБИ, 1999. - 27с.

2. Аль-Шукри С.Х., Бобков Ю.А., Галкин О.В. Диагностическая роль определения ИЛ-8 при хроническом простатите // Урология. 2001. - №6. -С. 6-9.

3. Антонов В.Г., Козлов В.К. Патогенез онкологических заболеваний: иммунные и биохимические феномены и механизмы. Внеклеточные и клеточные механизмы общей иммунодепрессии и иммунной резистентности // Цитокины и воспаление. — 2004. — Т. 3. №1. — С. 12-15.

4. Антонов В.Г., Козлов В.К. Патогенез онкологических заболеваний. Цитоплазматические и молекулярно-генетические механизмы иммунной резистентности малигнизированных клеток // Цитокины и воспаление. -2004. Т. 3. - №. 2. - С. 23 - 33.

5. Баранчук Н.В. Сравнительная оценка показателей иммунитета и иммунофенотипа лимфоидных клеток у больных лимфопролиферативными заболеваниями: Автореф. дисс.канд. мед. наук. Пермь, 2003. - 17с.

6. Бережная Н.М. Система интерлейкинов и рак. Киев, 2000. - 224с.

7. Бережная Н.М., Городецкий Б.А. Интерлейкин-2 и злокачественные новообразования. — Киев, 1992. — 185с.

8. Брагина Э.Г. К вопросу об иммунологической реактивности больных хроническим лимфолейкозом: Дис. . канд. мед. наук. Москва, 1970.

9. Ю.Виксман И.Е., Маянский А.Н. Способ оценки функциональной активности нейтрофилов человека по реакции восстановления нитросинего тетразолия. Методические рекомендации. Казань, 1979. - 14с.

10. П.Волкова М.А. Клиническая онкогематология. М.: Медицина; 2001.

11. Воробьев А.И. Руководство по гематологии. М.: Ньюдиамед, 2003, Т.2.

12. Вуд М.Э., Банн П.А. Секреты гематологии и онкологии: Пер. с англ./ Под ред. Ю.Н. Токаревой, А.Е. Бухны. М.: Бином, 1997. - 560с.

13. Грачева JI.A. Цитокины в онкогематологии. М.: Алтус, 1996

14. Демьянова A.B., Котов А.Ю., Симбирцев A.C. Диагностическая ценность исследования уровней цитокинов в клинической практике // Цитокины и воспаление. 2003. - Т. 2. - №3. - С. 13 - 16.

15. Заботина Т.Н. Маркеры апоптоза в дифференцировке гемопоэтических клеток человека // Медицинская иммунология. 2004. - Т. 6. - №3. - С.5 - 9.

16. Зайцева Г.А. Иммунологические маркеры крови и состояние противоинфекционного иммунитета: Автореф. дис. доктор мед. наук. JL, 1989.-37с.18.3емсков В.М., Земсков A.M., Караулов С.П. Клиническая иммунология. -М.: Марис, 2000.-397с.

17. Зуева Е.Е., Афанасьев Б.Ф., Тотолян A.A. Иммунофенотипическая диагностика лейкозов методом проточной цитофлуориметрии // Мед. иммунол. 2004. - Т.6. - С. 9 -25.

18. Ивашкин В.Т., Шульпекова Ю.О., Лукина Е.А. Классические провоспалительные цитокины и их биологические эффекты при заболеваниях печени // Молекулярная медицина. 2003. - №3. - С.34 - 38.

19. Исаева Н.В. Статус активных доноров крови и ее компонентов по иммунологическим критериям: Автореф. дис. канд. биол. наук. -М., 2000. -24с.

20. Кадалидзе З.Г., Славина Е.Г. Иммунологические подходы к использованию цитокинов в комплексном лечении злокачественных новообразований // Вопросы онкологии. 1995. - Т. 41. - №2. - С. 45 - 46.

21. Лебедев К.А., Понякина И.Д. Иммуннологическая недостаточность (выявление и лечение). М.: Медицинская книга; Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2003.-443с.

22. Ляликова Г.В., Виноградова Ю.Е. Содержание отдельных классов иммуноглобулинов в сыворотке и слюне больных с различными стадиями хронического лимфолейкоза // Тер. Арх. 1986. - №9. - С. 77 - 80.

23. Москалева Е.Ю., Северин С.Е. Возможные механизмы адаптации клетки к повреждениям, индуцирующим программированную клеточную гибель. Связь с патологией. // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. 2006. - №2. - С. 2 - 14.

24. Назарова Е.Л. Особенности иммунных нарушений, их коррекция и прогнозирование клинического течения при ХЛЛ: Дис. . канд. мед. наук. — Киров, 1997.- 138с.

25. Никитин Е.А„ Баранова A.B., Асеева Е.А., Домрачева Е.В. Молекулярно-цитогенетические нарушения при хроническом лимфолейкозе // Гематология и трансфузиология. — 2000. Т. 45. - №3. - С. 61 — 63.

26. Никитин Е.А., Грецов Е.М. Минимальная остаточная болезнь при В-клеточном хроническом лимфолейкозе // Онкогематология. 2006. — Т. 8. — №1. — С. 19-24.

27. Никитин Е.А., Ленива Е.А., Судариков А.Б. Роль молекулярных методов в диагностике и мониторинге лимфатических опухолей // Гематология и трансфузиология. 2001. - №3. - С. 57 - 59.

28. Никитин Е.А., Малахо С.Г., Бидерман Б.В. и др. Молекулярно-биологические факторы прогноза при B-клеточном хроническом лимфолейкозе // Онкогематология. — 2006. Т. 8. - №1. - С. 9 —13.

29. Никитин Е.А., Пивник A.B., Судариков А.Б., Валова Г.М., Габеева Н.Г., Самойлова P.C., Иванов Д.В., Меликян А.Л„ Ковалева Л.Г. Сравнение форм хронического лимфолейкоза в зависимости от мутационного статуса геноввариабельного региона иммуноглобулинов //

30. Тер. Арх. 2000. - №7. - С. 52 - 56.

31. Поддубная И.В. Неходжкинские лимфомы. Современный взгляд на классификацию и новые стандарты терапии // Лекции для врачей. 2005. — №1. - С. 24-29.

32. Потапов М.П. B-лимфоциты. Цитокинобразующая функция // Иммунология. 1994. - №4. - С. 4 - 8.

33. Потапов С.Г., Хрустиков B.C., Демидова И.В., Козинец Г.И. Изучение поглотительной способности нейтрофилов в крови с использованием инертных частиц латекса // Проблемы гематологии и переливания крови. -1977.-№9.-С. 58-59.

34. Пунанов Ю.А. Факторы прогноза у детей со злокачественными лимфомами // Российский онкологический журнал. 2005. - №2. - С.22 - 26.

35. Ройт А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. Пер. с англ. М: Мир,2000. -240с.

36. Рукавицын O.A., Поп В.П. Хронические лейкозы. М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2004. - 240 с.

37. Савинов В.А. Местный иммунитет. -М: Б.И., 1994. 54с.

38. Самойлова P.C., Булычева Т.И. Иммунофенотипическая диагностика хронических лимфопролиферативных заболеваний: опыт практической работы // Гематология и трансфузиология. 1990. - №.8 — С. 34 - 38.

39. Сергеев B.C., Никитин В.Ю., Шинкарева О.Г. Иммунофенотипические маркеры в оценке прогноза В-ХЛЛ и НХЛ в фазе лейкемизации. // Медицинская иммунология.- 2004. Т.6. - №3. - С.5 - 9.

40. Серебряная Н.Б, Новик A.A., Волошин C.B., Новицкий A.B. Клиническоезначение некоторых цитокинов при злокачественных неходжкинских лимфомах // Цитокины и воспаление. 2002. - №3. - 52 - 55.

41. Симбирцев А.С. Цитокины: классификация и биологические функции // Цитокины и воспаление. — 2004. Т.З. - №2. — С. 3 — 6.

42. Симбирцев А.С. Цитокины — новая система регуляции защитных реакций организма // Цитокины и воспаление. 2003. - №1. - С. 16-19.

43. Симбирцев А.С. Интерлейкин-8 и другие хемокины // Иммунология. — 1999. -№4.-С. 9-14.

44. Солнцева О.С. Роль цитокинов в осуществлении апоптотических процессов клеток иммунной системы у лиц, подвергшихся воздействию ионизирующей радиации в малых дозах // Иммунология. 2000. - №3. - С. 22 - 24.

45. Стадник Е.А., Зуева Е.Е., Салогуб Г.Н. Связь иммунологических и генетических маркеров с ответом на терапию больных B-XJIJI // Медицинская иммунология. Т.6. — №3. - С.21 — 25.

46. Тотолян А.А., Фрейдин И.С. Клетки иммунной системы. Спб., 2000. -118с.

47. Шардаков В.И., Загоскина Т.П. Роль иммунной системы и ее оценка у онкологических больных. // Пособие для врачей. Киров, 2000. - 21с.

48. Ярилин А.А. Основы иммунологии // Учебник. М.: Медицина, 1999. -608с.

49. Яхнина Е.И. и соавт. Доброкачественная форма хронического лимфолейкоза. // Тер. Арх. 1997. - Т.69. - №.7. - С. 11-17.

50. Abbott В. L. Chronic lymphocytic leukemia: recent advances in diagnosis and treatment // The Oncologist. 2006. - Vol. 11. - P. 21 - 30.

51. Aguilar-Santelises M., Gigliotti D., Osorio L.M., Santiago A.D., Mellstedt H., Jondal M. Cytokine expression in B-CLL in relation to disease progression and in vitro activation // Med. Oncol. 1999. - Vol. 16. - P. 289 - 295.

52. Bennett J.M., Catovsky D., Daniel M.T., et al. The French-American-British (FAB) Cooperative Group: proposals for the classification of chronic (mature) B and T lymphoid leukemias // J. Clin. Pathol. 1989. - Vol. 42. - P. 567 - 584.

53. Binet J.L., Auquier A., Dighiero G., et al. A new prognostic classification of chronic lymphocytic leukemia derived from a multivariate survival analysis // Cancer. 1981. - Vol. 48. - P. 198 - 206.

54. Binet J.L., Leporrier M., Dighiero G., et al. A clinical staging system for chronic lymphocytic leukemia // Cancer. 1977. - Vol. 40. - P. 855 - 864.

55. Burger J.A., Burger M., Kipps T.J. Chronic lymphocytic leukemia B cells express functional CXCR4 chemokine receptors that mediate spontaneous migration beneath bone marrow stromal cells // Blood. 1999. - Vol. 94. - P. 3658 - 3667.

56. Caligaris-Cappio F. Role of the microenvironment in chronic lymphocytic leukaemia // Br. J. Haematol. 2003. - Vol. 123. - P. 380-388.

57. Caligaris-Cappio F., Hamblin T.J. B-cell chronic lymphocytic leukemia: a bird of a different feather // J. Clin. Oncol. 1999. - Vol. 17. - P. 399 - 408.

58. Calin G. A., Ferracin M., Cimmino A., et al. A MicroRNA signature associated with prognosis and progression in chronic lymphocytic leukemia // N. Eng. J. Med. -2005. Vol. 353. - P. 1793 - 1801.

59. Capello D., Fais F., Vivenza D., et al. Identification of three subgroups of B cell ' chronic lymphocytic leukemia based upon mutations of BCL-6 and IgV genes // Leukemia. 2000. - Vol. 14. - P. 811 - 815.

60. Chan A.C., Iwashima M., Turck C.W., Weiss A. ZAP-70: a 70 kd protein-tyrosine kinase that associates with the TCR zeta chain // Cell. 1992. - Vol. 71. - P. 649 -662.

61. Catalgo F., Marino V., Ventura A., et al. Prevalence and clinical features of selective IgA deficiency //Gut. 1998. - Vol. 42. - P. 362 - 365.

62. Chen L., Widhopf G., Huynh L., et al. Expression of ZAP-70 is associated with increased B-cell receptor signaling in chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2002. Vol. 100. - P. 4609 - 4614.

63. Chilosi M., Pizzolo G., Caligaris-Cappio F., et al. Immunohistochemical demonstration of follicular dendritic cells in bone marrow involvement of B-cell chronic lymphocytic leukemia // Cancer. 1985. - Vol. 56. - P. 328 - 332.

64. Chiorazzi N., Ferrarini M. B cell chronic lymphocytic leukemia: lessons learned from studies of the B cell antigen receptor // Annu. Rev. Immunol. 2003. - Vol. 21.-P. 841 -894.

65. Chen L., Widhopf G., Huynh L., et al. Expression of ZAP-70 is associated with increased B-cell receptor signaling in chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2002. Vol. 100. - P. 4609 - 4614.

66. Cordone I., Masi S., Mauro F.R., et al. p53 expression in B-cell chronic lymphocytic leukemia: a marker of disease progression and poor prognosis // Blood. 1998. - Vol. 91. - P. 4342 - 4349.

67. Cook G.P., Tomlinson I.M. The human immunoglobulin VH repertoire // Immunol. Today. 1995.-Vol. 16.-P. 237-242.

68. Crespo M., Bosch F., Villamor N., et al. ZAP-70 expression as a surrogate for immunoglobulin-variable-region mutations in chronic lymphocytic leukemia // N. Engl. J. Med. 2003. - Vol. 348. - P. 1764 - 1775.

69. Cohlen M.C., Cohlen S. Cytokine function. A study in biologic diversity // Am. J. Clin. Pathol. 2003. - V. 105. - P. 589 - 598.

70. Crespo M., Villamor N., Gine E., et al. ZAP-70 expression in normal pro/pre B cells, mature B cells, and in B-cell acute lymphoblastic leukemia // Clin. Cancer Res. 2006. - Vol. 12. - P. 726 - 734.

71. Criel A., Verhoef G., Vlietinck R., et al. Further characterization of morphologically defined typical and atypical CLL: a clinical, immunophenotipic, cytogenetic and prognostic study on 390 cases // Br. J. Haematol. 1997. - Vol. 97.-P. 383 -391.

72. Chen L., Apgar J., Huynh L., et al. ZAP-70 directly enhances IgM signaling in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2005. - Vol. 105. - P. 2036 - 2041.

73. Chen L., Widhopf G., Huynh L., et al. Expression of ZAP-70 is associated with increased B-cell receptor signaling in chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2002. Vol. 100. - P. 4609 - 4614.

74. Chiorazzi N., Rai K. R., Ferrarini M. Chronic Lymphocytic Leukemia // N. Eng. J. Med.-2005.-Vol. 352.-P. 804-815.

75. Damle R.N., Wasil T., Fais F., et al. Ig V gene mutation status and CD38 expression as novel prognostic indicators in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 1999. - Vol. 94. - P. 1840 - 1847.

76. Da Maeyer E., Da Maeyer-Guignard J. Interferons and other regulatory cytokines. -New York: Wiley, 1988. 61 lp.

77. Deane M., Norton J.D. Immunoglobulin heavy chain variable region family usage is independent of tumor cell phenotype in human B lineage leukemias // Eur. J. Immunol. 1990.-Vol. 20.-P. 2209-2217.

78. De Garcia J., Rodrigo M.J., Morell F. IgG subclass deficiencies assosiencies associated with bronchoectasis // Am. J. Respir. Crit. Care Med. — 1996. — Vol.153.-P. 650-655.

79. Deglesne P.A., Chevallier N., Letestu R., et al. Survival response to B-cell receptor ligation is restricted to progressive chronic lymphocytic leukemia cells irrespective of zap70 expression // Cancer Res. 2006. — Vol. 66. — P. 7158 -7166.

80. De Larco J., Beverly R., Wuertz K., Furcht L. The potential role of neutrophils in promoting the metastatic phenotype of tumors releasing interleukin-8 // Clin. Cancer Res. 2004. - Vol. 10. - P. 4895 - 4900.

81. Del Poeta G., Maurillo L., Venditti A., et al. Clinical significance of CD38 expression in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2001. - Vol. 98. - P. 2633 -2639.

82. Del Principe M. I., Del Poeta G., Buccisano F., et al. Clinical significance of ZAP-70 protein expression in B-cell chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2006. Vol. 108. - P. 853 - 861.

83. De Franco A.L. Structure and function of B-cell antigen receptor // Annu. Rev. Cell. Biol. 2002. - Vol.9. - P. 377 - 410.

84. Di Celle P.F., Mariani S., Riera L., et al. Interleukin-8 induces the accumulation of B-cell chronic lymphocytic leukemia cells by prolonging survival in an autocrine fashion // Blood. 1996. - Vol. 87. - P. 4382 - 4389.

85. Dohner H., Stilgenbauer S., Benner A., et al. Genomic aberrations and survival in chronic lymphocytic leukemia // N. Engl. J. Med. 2000. - Vol. 343. - P. 1910 -1916.

86. Durig J., Naschar m., Schmucker U., et al. CD38 expression is an important prognostic marker in chronic lymphocytic leukemia // Leukemia. — 2002. Vol. 16. — P. 30 — 35.

87. Elder M.E., Lin D., Clever J., et al. Human severe combined immunodeficiency due to a defect in ZAP-70, a T cell tyrosine kinase // Science. 1994. - Vol. 264. -P. 1596- 1599.

88. Fais F., Ghiotto F., Hashimoto S., et al. Chronic lymphocytic leukemia B cells express restricted sets of mutated and unmutated antigen receptors // J. Clin Invest.- 1998.-Vol. 102. P. 1515 - 1525.

89. Foa R., Catovsky D., Brozovic M., et al. Clinical staging and immunological findings in chronic lymphocytic leukemia. // Cancer. — 1979. Vol. 44. - P. 483 -487.

90. Gaidano G., Ballerini P., Gong J.Z., et al. p53 mutations in human lymphoid malignancies: association with Burkitt lymphoma and chronic lymphocytic leukemia// Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 1991. - Vol. 88. - P. 5413 - 5417.

91. Ghia P., Caligaris-Cappio F. The indispensable role of microenvironment in the natural history of low-grade B-cell neoplasms // Adv. Cancer Res. 2000. -Vol. 79.-P. 157- 173.

92. Ghia P., Granziero L., Chilosi M., Caligaris-Cappio F. Chronic B cell malignancies and bone marrow micro-environment // Semin. Cancer Biol. — 2002. -Vol. 12.-P. 149- 155.

93. Ghia P., Guida G., Stella S., et al. The pattern of CD38 expression defines a distinct subset of chronic lymphocytic leukemia patients at risk of disease progression // Blood. 2003. - Vol. 101. - P. 1262 - 1269.

94. Granziero L., Ghia P., Circosta P., et al. Survivin is expressed on CD40 stimulation and interfaces proliferation and apoptosis in B-cell chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2001. - Vol. 97. - P. 2777 - 2783.

95. Gurrieri C., McGuire P., Zan H., et al. Chronic lymphocytic leukemia B cells can undergo somatic hypermutation and intraclonal immunoglobulin V(H)DJ(H) gene diversification // J. Exp. Med. 2002. - Vol. 196. - 629 - 639.

96. Hamblin T. J. Predicting Progression ZAP-70 in CLL // N. Eng. J. Med. -2004.-Vol. 351.-P. 856-857.

97. Hamblin T.J., Davis Z., Gardiner A., et al. Unmutated Ig V(H) genes are associated with a more aggressive form of chronic lymphocytic leukemia // Blood. 1999. - Vol. 94. - P. 1848 - 1854.

98. Hamblin T.J., Orchard J.A., Gardiner A., Oscier D.G., Davis Z., Stevenson F.K. Immunoglobulin V genes and CD38 expression in CLL // Blood. 2000. -Vol. 95.-P. 2455-2457.

99. Hus I., Podhorecka M., Bojarska-Junak A., et al. The clinical significance of ZAP-70 and CD38 expression in B-cell chronic lymphocytic leukaemia // Ann. Oncol. 2006. - Vol. 17. - P. 683 - 690.

100. Ibrahim S., Keating M., Do K.A., et al. CD38 expression as an important prognostic factor in B-cell chronic lymphocytic leukemia // Blood. — 2001. Vol. 98.-P. 181 - 186.

101. Johnson T.A., Rassenti L.Z., Kipps T.J. Ig VH1 genes expressed in B cell chronic lymphocytic leukemia exhibit distinctive molecular features // J. Immunol. 1997. - Vol. 158. - P. 235 - 246.

102. Juliusson G, Oscier DG, Fitchett M, et al. Prognostic subgroups in B-cell chronic lymphocytic leukemia defined by specific chromosomal abnormalities // N. Engl. J. Med. 1990. - Vol. 323. - P. 720 - 724.

103. Kabelitl D. Role of T-cells in the immune response against tumor cells // Cancer J. 1995. - Vol. 8 - №4. - P. 190 - 194.

104. Keating M.J., Chiorazzi N., Messmer B., et al. Biology and treatment of chronic lymphocytic leukemia // Hematology. 2003. - Vol. 27. - P. 153 - 175.

105. Khan I. H., Mendoza S., Rhyne P., et al. Multiplex analysis of intracellular signaling pathways in lymphoid cells by microbead suspension arrays // Mol. Cell. Proteomics. 2006. - Vol. 5. - P. 758 - 768.

106. Kitada S., Zapata J.M., Andreeff M., Reed J.C. Bryostatin and CD40-ligand enhance apoptosis resistance and induce expression of cell survival genes in B-cell chronic lymphocytic leukaemia // Br. J. Haematol. 1999. - Vol. 106. - P. 995 -1004.

107. Klaii S., Choudhury A., Mozaffari F., et al. Signaling molecules and cytokine production in T-cells of patients with B-cell chronic lymphocytic leukemia:comparison of indolent and progressive disease // Med. Oncol. 2005. - Vol. 22. -P. 291-302.

108. Klein U., Tu Y., Stolovitzky G.A., et al. Gene expression profiling of B cell chronic lymphocytic leukemia reveals a homogeneous phenotype related to memory B cells//J. Exp. Med. 2001. - Vol. 194.-P. 1625- 1638.

109. Klein U., Tu Y., Stolovitzky G.A., et al. Gene expression dynamics during germinal center transit in B cells // Ann. N. Y. Acad. Sci. 2003. - Vol. 987. - P. 166-172.

110. Kremeny L., Szolnoky G., Kenderessy A.S., et al. Identification of a soluble interleukin-8 inhibitor in the supernatant of polymorphonuclear leukocytes // Immunol. Lett. 1998. - Vol. 64. - P. 23 - 29.

111. Krober A., Seiler T., Benner A., et al. V(H) mutation status, CD38 expression level, genomic aberrations, and survival in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2002. - Vol. 100. - P. 1410 - 1416.

112. Kagi D., Ledermann B., Burki K., et al. Cytotoxicity mediated by T-cells and natural killer cells is greatly impaired in perforin-deficient mice // Nature. 1999. -Vol. 369.-P. 31-37.

113. Lagneaux L., Delforge A., Bron D., De Bruyn C., Stryckmans P. Chronic lymphocytic leukemic B cells but not normal B cells are rescued from apoptosis by contact with normal bone marrow stromal cells // Blood. 1998. - Vol. 91. — P. 2387-2396.

114. Lam K.P., Kuhn R., Rajewsky K. In vivo ablation of surface immunoglobulin on mature B cells by inducible gene targeting results in rapid cell death // Cell. -1997.-Vol. 90.-P. 1073 1083.

115. Lanham S., Hamblin T., Oscier D., Ibbotson R., Stevenson F., Packham G. Differential signaling via surface IgM is associated with VH gene mutational status and CD38 expression in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2003. -Vol. 101.-P. 1087- 1093.

116. Latour S., Veillette A. Proximal protein tyrosine kinases in immunoreceptor signaling// Curr. Opin. Immunol. 2001. - Vol.13. - P. 299 - 306.

117. Lin K., Sherrington P.D., Dennis M., Matrai Z., Cawley J.C., Pettitt A.R. Relationship between p53 dysfunction, CD38 expression, and IgV(H) mutation in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2002. - Vol. 100. - P. 1404 - 1409.

118. Liu Y.J., Joshua D.E., Williams G.T., Smith C.A., Gordon J., MacLennan I.C. Mechanism of antigen-driven selection in germinal centres // Nature. — 1989. — Vol. 342. P. 929 - 931

119. Mackus W.J., Frakking F.N., Grummels A., et al. Expansion of CMV-specific CD8+CD45RA+CD27-T cells in B-cell chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2003.-Vol. 102.-P. 1057- 1063.

120. Maloum K., Davi F., Merle-Beral H., et al. Expression of unmutated VH genes is a detrimental prognostic factor in chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2000. Vol. 96. - P. 377 - 379.

121. Manchini G., Carbonara A., Heremans J. Immunochemical quantitation of antigens by single radial immunodiffusion // Immunochemistry. 1965. - Vol. 2. -№3. - P. 235-254.

122. Mayr C., Speicher M.R., Kofler D.M., et al. Chromosomal translocations are associated with poor prognosis in chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2006. -Vol. 107.-P. 742-751.

123. McCarthy H., Wierda W.G., Barron L.L., et al. High expression of activation-induced cytidine deaminase (AID) and splice variants is a distinctive feature of poor-prognosis chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2003. - Vol. 101. — P. 4903 -4908.

124. Messmer В. Т., Messmer D., Allen S. L., et al. In vivo measurements document the dynamic cellular kinetics of chronic lymphocytic leukemia В cells // J. Clin. Invest.-2005.-Vol. 115.-P. 755-764.

125. Milla F., Barbera A., Oriol A.,et al. Normal and chronic lymphocytic leukemia lymphocytes can be distinguished in flow-cytometry-based automated differential cell counts by their positional parameters // Blood. 2004. - Vol.46. - P. 4104 -4107.

126. Molica S., Mauro F., Callea V., et al. A gender-based score system predicts the clinical outcome of patients with early B-cell chronic lymphocytic leukemia // Leuk. Lym. 2005. - Vol. 46. - P. 553 - 560.

127. Montserrat E. Assessing prognosis in patients with chronic lymphocytic leukemia a quarter of a century after Rai and Binet staging systems // Ann. Oncol. -2004.-Vol. 15.-P. 1450- 1451.

128. Montserrat E. Classical and new prognostic factors in chronic lymphocytic leukemia: where to now? // Hematol. J. — 2002. Vol. 3. - P. 7 - 9.

129. Montserrat E. Fighting CLL cells: deciphering the enemy // Blood — 2005. -Vol. 106.-P. 2226-2226.

130. Muramatsu M., Kinoshita K., Fagarasan S., et al. Class switch recombination and hypermutation require activation-induced cytidine deaminase , a potential RNA editing enzyme // Cell. 2000. - Vol. 102. - P. 553 - 563.

131. Murashige N., Kami M., Takaue Y., et al. ZAP-70 in Chronic Lymphocytic Leukemia //N. Eng. J. Med. 2003. - Vol. 349. - P. 506 - 507.

132. Nabhan C., Bitran J. D. Chronic Lymphocytic Leukemia: To transplant or not to transplant. That is the question? // J. Clin. Oncol. 2005. - Vol. 23. - P. 8126 -8127.

133. Nenova I., Mateva N., Ananoshtev N., Grudeva-Popova J. The prognostic value of clinical and laboratory parameters in patients with chronic lymphocytic leukemia // Hematology. 2005. - Vol. 10. - P. 47 - 51.

134. Orchard J.A., Ibbotson R.E., Davis Z., et al. ZAP-70 expression and prognosis in chronic lymphocytic leukaemia // Lancet. 2004. - Vol. 363. - P. 105 - 111.

135. Oscier D.G., Thompsett A., Zhu D., Stevenson F.K. Differential rates of somatic hypermutation in V(H) genes among subsets of chronic lymphocytic leukemia defined by chromosomal abnormalities // Blood. 1997. - Vol. 89. - P. 4153-4160.

136. Oppezzo P., Vuillier F., Vasconcelos Y., et al. Chronic lymphocytic leukemia B cells expressing AID display dissociation between class switch recombination and somatic hypermutation // Blood. 2003. - Vol. 101. - P. 4029 - 4032.

137. Panayiotidis P., Jones D., Ganeshaguru K., Foroni L., Hoffbrand A.V. Human bone marrow stromal cells prevent apoptosis and support the survival of chronic lymphocytic leukaemia cells in vitro // Br. J. Haematol. 1996. — Vol. 92. - P. 97 - 103.

138. Parent B.A., Wang X., Song W. Stability of the B cell antigen receptor modulates its signaling and antigen-targeting functions // Eur. J. Immunol. — 2002. -Vol. 32.-P. 1839- 1846.

139. Pasqualucci L., Neri A., Baldini L., Dalla-Favera R., Migliazza A. BCL-6 mutations are associated with immunoglobulin variable heavy chain mutations in

140. B-cell chronic lymphocytic leukemia // Cancer Res. 2000. - Vol. 60. - P. 5644 -5648.

141. Payelle-Brogard B., Magnac C., Alcover A., Roux P., Dighiero G. Defective assembly of the B-cell receptor chains accounts for its low expression in B-chronic lymphocytic leukaemia // Br. J. Haematol. 2002. - Vol. 118. - P. 976 -985.

142. Pierce S.K. Lipid rafts and B-cell activation // Nat Rev. Immunol. -2002. -Vol. 2.-P. 96- 105.

143. Pizzolo G., Chilosi M., Ambrosetti A., Semenzato G., Fiore-Donati L., Perona G. Immunohistologic study of bone marrow involvement in B-chronic lymphocytic leukemia // Blood. 1983. - Vol. 62. - P. 1289 - 1296.

144. Racevskis J. Molecular diagnosis of cancer: methods and protocols // Med. Oncol. 2005. - Vol. 22. - P. 325 - 326.

145. Rai K.R., Savitsky A., Cronkite E.P., Chanana A.D., Levy R.N., Pasternack B.S. Clinical staging of chronic lymphocytic leukemia // Blood. — 1975. Vol. 46. -P. 219-234.

146. Rai K. R., Chiorazzi N. Determining the clinical course and outcome in chronic lymphocytic leukemia. // N. Eng. J. Med. 2003. - Vol. 348. - P. 1797 -1799.

147. Rassenti L. Z,, Huynh L., Toy T. L., et al. ZAP-70 Compared with immunoglobulin heavy-chain gene mutation status as a predictor of disease progression in chronic lymphocytic leukemia // N. Engl. J. Med. 2004. - Vol. 351.-P. 893-901.

148. Richardson S.J., Matthews C., Catherwood M.A., et al. ZAP-70 expression is associated with enhanced ability to respond to migratory and survival signals in B-cell chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2006. - Vol. 107. - P. 3584 - 3592.

149. Rosenwald A., Alizadeh A. A., Widhopf G., et al. Relation of gene expression phenotype to immunoglobulin mutation genotype in B cell chronic lymphocytic leukemia//J. Exp. Med.-2001.-Vol. 194.-P. 1639- 1647.

150. Rozman C., Montserrat E. Chronic lymphocytic leukemia // N. Engl. J. Med. — 1995. Vol. 333. - P. 1052 - 1057.

151. Schroeder H.W., Dighiero G. The pathogenesis of chronic lymphocytic leukemia: analysis of the antibody repertoire // Immunol. Today. 1994. - Vol. 15.-P. 288-294.

152. Shanafelt T.D., Geyer S.M., Kay N.E. Prognosis at diagnosis: integrating molecular biologic insights into clinical practice for patients with CLL // Blood. -2004.-Vol. 103.-P. 1202-1210.

153. Shanafelt T.D., Jelinek D., Tschumper R., et al. Cytogenetic abnormalities can change during the course of the disease process in chronic lymphocytic leukemia // J. Clin. Oncol. 2006. - Vol. 24. - P. 3218 - 3219.

154. Shanafelt T.D., Witzig T.E., Fink S.R., et al. Prospective evaluation of clonal evolution during long-term follow-up of patients with untreated early-stagechronic lymphocytic leukemia // J. Clin. Oncol. 2006. - Vol. 24. - P. 4634 -4641.

155. Sharma V., Zhang L. Interleukin-8 in AIDS-assosiated lymphoma B-cell lines // Biochem. Biophys. Res. Commun. 2001. - Vol. 282. - P. 369 - 375.

156. Silverman G.J. B-cell superantigens // Immunol. Today. 1997. - Vol. 18. - P. 379-386.

157. Smyth M.J., Zachariae C.O., Nirihisa Y., et al. IL-8 gene expression and production in human peripheral blood lymphocyte subsets // J. Immun. 1991. -Vol. 146.-P. 3815-3823.

158. Stevenson F.K., Caligaris-Cappio F. Chronic lymphocytic leukemia: revelations from the B-cell receptor // Blood. 2004. - Vol. 103. - P. 4389 -4395.

159. Stevenson F.K., Sahota S.S., Ottensmeier C.H. et al. The occurrence and significance of V gene mutations in B cell-derived human malignancy // Adv. Cancer Res. 2001. - Vol. 83. - P. 81 -116.

160. Stilgenbauer S., Bullinger L., Lichter P., Dohner H. Genetics of chronic lymphocytic leukemia: genomic aberrations and V(H) gene mutation status in pathogenesis and clinical course // Leukemia. 2002. - Vol. 16. — P. 993 - 1007.

161. Tangye S.G., Aveiy D.T., Deenick E.K., Hodgkin P.D. Intrinsic differences in the proliferation of naive and memory human B cells as a mechanism for enhanced secondary immune responses // J. Immunol. 2003. - Vol. 170. — P. 686-694.

162. Tchirkov A., Chaleteix C., Magnac C., et al. hTERT expression and prognosis in B-chronic lymphocytic leukemia // Ann.Oncol. 2004. - Vol.15. - P. 1476 -1480.

163. Till K.J., Zuel M., Cawley J.C. The role of hyaluronan and interleukin-8 in the migration of chronic lymphocytic leukemia cells within lymphoreticular tissues // Cancer Res. 1999. - Vol. 59. - P. 4419 - 4426.

164. Tinhofer I., Rubenzer G., Holler C., et al. Expression levels of CD38 in T cells predict course of disease in male patients with B-chronic lymphocytic leukemia // Blood. 2006. - Vol. 108. - P. 2950 - 2956.

165. Tobin G., Thunberg U., Johnson A., et al. Somatically mutated IgV(H)3-21 genes characterize a new subset of chronic lymphocytic leukemia // Blood. -2002. Vol. 99. - P. 2262 - 2264.

166. Tobler A., Moser B., Dewald B., et al. Constitutive expression of interleukin-8 and its receptor in human myeloid and lymphoid leukemia // Blood. — 1993. Vol. 82.-P. 2517-2525.

167. Vallespi T., Montserrat E., Sanz M.A. Chronic lymphocytic leukaemia: prognostic value of lymphocyte morphological subtypes: a multivariate survival analysis in 146 patients // Br. J. Haematol. 1991. - Vol. 77. - P. 478 - 485.

168. Wierda W.G., Johnson M.M., Do K.A., et al. Plasma interleukin-8 level predicts for survival in chronic lymphocytic leukemia. // Br. J. Oncol. 2003. -Vol. 120.-P. 452-456.