Профилактика рекуррентных респираторных инфекций у детей на основе персонифицированной коррекции микробиома ротоглотки и кишечника тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Курдюкова Татьяна Ивановна

• Курдюкова Татьяна Ивановна
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Курдюкова Татьяна Ивановна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Концепция микробиома человека и его функции. Факторы, определяющие формирование микробиома

1.2. Состав и формирование микробиома верхних дыхательных путей в

норме и у детей с РРИ

1.3. Формирование микробиома кишечника. Концепция «ось мозг

9?

кишечник». Кишечно-легочная ось

1.4. Сравнительная оценка методов исследования микробиома. Молекулярная генетика микроорганизмов

1.5. Влияние пищевых компонентов на конфигурацию кишечного микробиома. Средства коррекции состава микробиома

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объем исследования

2.2. Клинические и лабораторные методы исследования

2.3. Генетическое секвенирование образцов биоматериала

2.4. Применяемые методы профилактики

2.5. Используемые методы статистического анализа для оценки

53

полученных результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1. Анализ анамнестических данных с определением факторов риска возникновения РРИ

3.2. Оценка параметров физического развития участников исследования

3.3. Клиническая оценка течения эпизодов ОРВИ участников исследования

3.4. Анализ лабораторных данных обследования групп участников

3.5. Сравнительный анализ состава микробиома ротоглотки участников

71

исследования

3.6. Сравнительный анализ состава микробиома кишечника участников

исследования

3.7. Анализ показателей заболеваемости ОРВИ участников исследования

3.8. Анализ корреляционных связей между микроорганизмами в составе микробиома и параметрами заболеваемости ОРВИ

3.9. Алгоритм персонифицированного принятия решения выбора фармакомикробиомической компенсации для снижения частоты ОРВИ

у детей с РРИ

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Профилактика рекуррентных респираторных инфекций у детей на основе персонифицированной коррекции микробиома ротоглотки и кишечника»

Актуальность темы исследования

Несмотря на современные возможности терапии и профилактики, острые респираторные инфекции (ОРИ) остаются одной из самых распространённых патологий в структуре детской заболеваемости, показывая тенденцию к неуклонному росту [23,39], а их частые рецидивы ставят серьезные задачи перед лечащими врачами [9,34].

Возрастные особенности иммунитета (незавершенный фагоцитоз, недостаточная выработка интерлейкинов и интерферонов, практически отсутствующая цитотоксическая активность лимфоцитов и другие элементы незрелости звеньев иммунной системы) определяют высокую восприимчивость детей раннего возраста к инфекциям [16]. В 4-х из 5-и случаев вирусы являются причиной ОРИ [22], и их огромное биоразнообразие в сочетании с высокой вирулентностью постоянно расширяют «иммунологический опыт» ребенка, вызывая частые и длительно текущие случаи осложненного ОРВИ (острый средний отит, риносинусит, фаринготонзиллит и проч.), формируя целую группу детей с рекуррентными респираторными инфекциями (РРИ) [9,34].

Разнообразные микробные сообщества, находящиеся в симбиозе с макроорганизмом ребенка, в условиях различных внешних и внутренних факторов способны превратиться в реактивный биотоп и стать триггером метаболических, иммунных и инфекционных заболеваний [24,25,77]. Особое место в развитии респираторного иммунитета у ребенка занимают микроорганизмы [37,83], которые формируют биоценоз слизистых оболочек дыхательных путей, защищают экосистему от патогенов, тем самым обеспечивая колонизационную резистентность [38,63]. Представители естественного (нормального) микробиома обладают

способностью к стимуляции фагоцитарной активности макрофагов, выработки интерферона, синтеза иммуноглобулинов и регуляции функциональной активности лимфоцитов [8,63], а нарушение «гомеостаза микробиома» [89] приводит к ослаблению противовирусных и антибактериальных эффектов слизистой [ 11,12].

В настоящее время в педиатрии существует актуальная и малоизученная проблема дисбиоза у детей с РРИ [40] как предиктора высокой частоты заболеваемости в периоде раннего и дошкольного возраста, что на основе молекулярно-генетического анализа разнообразия микробиома ротоглотки и кишечника позволит оптимизировать патогенетически обоснованные профилактические мероприятия.

Степень разработанности проблемы исследования

В современных условиях, учитывая неуклонный рост заболеваемости ОРВИ в детской популяции, все больший научный интерес проявляется к поиску патогенетических факторов возникновения рекуррентных респираторных инфекций (РРИ) у детей, в частности, к изучению микробиома ротоглотки и кишечника. В зарубежной и отечественной литературе имеется немало работ, касающихся определения состава микробиома ротоглотки и кишечника с использованием стандартных микробиологических методов [2]. Активно изучается состав микробиома с использованием новых методов генетического секвенирования [94,100]. В некоторых работах приводится анализ таксономического состава микробиома при определенных нозологиях [26,85,87], в том числе рассматриваются вопросы его коррекции с целью достижения клинического эффекта, направленного на уменьшение частоты ОРВИ [16,63,93]. Однако патогенетические процессы повторных эпизодов РРИ у детей изучены недостаточно, отсутствуют эффективные, работающие меры профилактики у детей раннего и дошкольного периодов, направленные на снижение частоты их возникновения.

Таким образом, на сегодняшний день существует проблема коррекции состава микробиома с целью снижения частоты и длительности эпизодов РРИ у детей раннего и дошкольного периодов.

Цель исследования

Повысить эффективность профилактики рекуррентных респираторных инфекций у детей раннего и дошкольного возраста на основе персонифицированной коррекции нарушений микробиома ротоглотки и кишечника, установленных методом генетического секвенирования.

Задачи исследования

1. Изучить состав микробиома ротоглотки и кишечника у здоровых и детей с РРИ раннего и дошкольного возраста методом генетического секвенирования фрагмента У3-У4 гена 16S-р-РНК.

2. Выявить взаимосвязь состава микробиома ротоглотки и кишечника с факторами риска, частотой, длительностью и курсовым приемом антибактериальных средств при РРИ у детей раннего и дошкольного возраста.

3. Разработать алгоритм профилактики рекуррентных респираторных инфекций у детей на основе персонифицированной коррекции выявленных у них нарушений микробиома ротоглотки и кишечника.

4. Провести катамнестический анализ эффективности персонифицированного алгоритма профилактики РРИ у детей на основе коррекции состава микробиома ротоглотки и кишечника с использованием диетических рекомендаций и курсового приема пробиотиков.

Научная новизна

В качестве факторов, способствующих формированию частой заболеваемости РРИ у детей, установлена роль особенностей течения беременности и родов, недостаток у ребенка полноценного сна не менее 10 часов, наличие в анамнезе предшествующих эпизодов ОРВИ сочетанных нозологических форм.

У здоровых и детей с РРИ раннего и дошкольного возраста выявлены различия состава ротоглоточного и кишечного микробиома на основании результатов генетического секвенирования фрагмента У3 -У4 гена 16S-р-РНК.

Определена однотипность изменений в изучаемых таксономических группах (тип, род микроорганизмов) микробиома ротоглотки и кишечника у детей с РРИ раннего и дошкольного возраста.

Установлено влияние микробиома ротоглотки и кишечника на частоту, длительность эпизодов ОРВИ и курсовой прием антибактериальных средств.

Доказан эффект применения персонифицированного алгоритма профилактики состава микробиома ротоглотки и кишечника у детей, направленный на снижение частоты РРИ.

Разработан эффективный способ профилактики повторных эпизодов ОРВИ с использованием коррекции питания и курсового приема препаратов пробиотиков.

Практическая значимость

Получены данные о составе микробиома на основе метода генетического секвенирования фрагмента У3-У4 гена 16S-р-РНК у здоровых и детей с РРИ раннего и дошкольного возраста, что вносит существенный вклад в понимание патогенеза заболевания и позволяет расширить представление о выборе рациональной и результативной профилактической терапии.

Изучены результаты применения метода генетического секвенирования, что вносит вклад в систему диагностики выявления причин возникновения частых эпизодов ОРВИ и дает возможность внедрить данный способ в практическое здравоохранение для последующей персонифицированной профилактики РРИ у детей.

Разработаны и обоснованы способ прогнозирования частоты ОРВИ у детей в возрастной группе 1-6 лет (патент RU 2817268 С1 от 12.04.2024), способ снижения частоты ОРВИ у детей с рекуррентными респираторными инфекциями в возрастной группе 3-6 лет (патент RU 2819502 С1 от 21.05.2024). Зарегистрирована база данных «Микробиота оро-фарингеальной зоны и кишечника у детей в возрастной группе от 1 года до 6 лет» (свидетельство о государственной регистрации № 2023621675 от 24.05.2023 г.).

Созданы и научно обоснованы персонифицированный алгоритм для выбора способа профилактики возникновения и снижения частоты РРИ у детей, программа профилактики на основе коррекции состава микробиома ротоглотки и кишечника с использованием диетических рекомендаций и курсового приема препаратов пробиотиков, доказавшие свою высокую эффективность по данным катамнеза.

Методология и методы исследования

Методология диссертационной работы спланирована согласно поставленной цели и задачам, использованы клинические, лабораторные, инструментальные и статистические методы исследования. Выполнено открытое сравнительное проспективное исследование. Полученные автором результаты проанализированы, систематизированы, изложены в главах диссертационной работы. По результатам исследования разработан персонифицированный алгоритм для выбора способа профилактики возникновения и снижения частоты РРИ у детей, программа

профилактики на основе коррекции состава микробиома ротоглотки и кишечника с использованием диетических рекомендаций и курсового приема препаратов пробиотиков, сформулированы выводы и практические рекомендации, обозначены перспективы дальнейшей разработки темы.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Таксономический состав микробиома ротоглотки и кишечника у здоровых и детей с РРИ раннего и дошкольного возраста имеет значимые различия и коррелирует с частотой и длительностью эпизодов ОРВИ.

2. Для микробиома детей с РРИ установлены следующие однотипные изменения: повышение относительного количества бактерий типа Proteobacteria на фоне снижения содержания типов Firmicutes, Actinobacteriota в ротоглотке и кишечнике, снижение содержания бактерий рода Lactobacillis, Ruminococcus, Faecalibacterium в ротоглотке и кишечнике, Bifidobacterium в кишечнике на фоне повышения содержания Haemophilus, Neisseria в ротоглотке, Bacteroides в кишечнике.

3. Разработанный метод профилактики рекуррентных респираторных инфекций у детей, основанный на коррекции состава микробиома ротоглотки и кишечника с использованием диетических рекомендаций и курсового приема пробиотиков, эффективно снижает частоту и длительность эпизодов ОРВИ.

Степень достоверности и апробация результатов исследования

Достоверность результатов исследования основывается на использовании принципов доказательной медицины с применением научных методов, отвечающих поставленной цели исследования. Объём и способ формирования выборки соответствует поставленным задачам, использованы современные методики

статистической обработки исходной информации, что минимизирует случайные и систематические ошибки. В диссертационной работе теория построена на основе анализа применения современных высокотехнологичных методик оценки микробиома. В работе проведено сравнение результатов авторских данных и данных по рассматриваемой тематике, представленных в независимых источниках. Установленные закономерности подтверждены практическими результатами. Выводы и практические рекомендации диссертационной работы логично вытекают из полученных результатов и соответствуют цели и задачам исследования.

Диссертационная работа апробирована в 2024 году на расширенном заседании кафедры факультетской и паллиативной педиатрии ФГБОУ ВО ВГМУ имени Н.Н. Бурденко Минздрава России (протокол № 3 от 25 октября 2024 года), одобрена Этическим комитетом ФГБОУ ВО ВГМУ имени Н.Н. Бурденко Минздрава России 19 октября 2022 года (протокол №6). Основные положения работы доложены и обсуждены на XIX Всероссийском конгрессе с международным участием «Педиатрия и детская хирургия в Приволжском федеральном округе» (Казань, 2022), Научно-практической конференции студентов и молодых учёных «Студеникинские чтения» (Москва, 2022).

Внедрение результатов работы в практику

Результаты исследования опубликованы в учебно -методическом пособии для педиатров, врачей общей практики «Микробиом ротоглотки и кишечника у здоровых и часто болеющих детей» (Воронеж, 2024) и применяются в работе БУЗ ВО «Воронежская городская клиническая поликлиника №10» (детская поликлиника №3), БУЗ ВО «Воронежская городская клиническая поликлиника №1» (детская поликлиника корпус №2), ООО «Центр современной педиатрии». Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах

факультетской и паллиативной педиатрии, кафедре пропедевтики детских болезней и поликлинической терапии ФГБОУ ВО ВГМУ им. Н. Н. Бурденко Минздрава России. На основании результатов исследования создана база данных «Микробиота оро-фарингеальной зоны и кишечника у детей в возрастной группе от 1 года до 6 лет» (свидетельство о государственной регистрации № 2023621675 от 24.05.2023 г.)

Публикации

По материалам выполненных исследований опубликовано 13 работ, в том числе 3 научные статьи в журналах, рекомендуемых ВАК Министерства науки и высшего образования РФ для публикации основных результатов диссертационных исследований на соискание ученых степеней доктора и кандидата наук; 1 свидетельство о государственной регистрации базы данных № 2023621675 «Микробиота оро-фарингеальной зоны и кишечника у детей в возрастной группе от 1 года до 6 лет» от 24.05.2023, 2 патента на изобретение № 2817268 С1 «Способ прогнозирования частоты ОРВИ у детей в возрастной группе 1 -6 лет» от 12.04.2024 и № 2819502 С1 «Способ снижения частоты ОРВИ у детей с рекуррентными респираторными инфекциями в возрастной группе 3 -6 лет» от 21.05.2024.

Личный вклад автора

Личное участие автора осуществлялось на всех этапах планирования и проведения исследования. Осуществлен научно-информационный поиск, определена цель и задачи работы. Проведен набор участников исследования, клиническое обследование, заполнена первичная документация. Определены факты и закономерности, подтверждены практическими результатами. Сформулированы выводы и практические рекомендации.

Соответствие диссертации Паспорту научной специальности

Диссертационное исследование соответствует паспорту научной специальности: 3.1.21. Педиатрия, в частности пунктам: п.1 - изучение физиологических закономерностей и патологических отклонений, роста, физического, полового, нервно-психического и когнитивного развития, состояния функциональных систем детей в различные периоды жизни: внутриутробного периода, периода новорожденности, раннего, дошкольного и школьного возраста; п.2 - совершенствование технологий вскармливания / питания, нутритивной, микронутриентной поддержки (в том числе с учетом микробиома), здоровых, детей с особыми потребностями; п.3 - оптимизация научно-исследовательских подходов и практических принципов ведения — диагностики, профилактики, лечения, реабилитации, а также сопровождения детей с хроническими рецидивирующими болезнями, острой патологией, подвергшихся воздействию внешних факторов, в том числе экологических и социальных.

Структура и объем работы

Диссертация состоит из введения и четырех глав. Завершается выводами, практическими рекомендациями, перспективами дальнейшей разработки темы и списком литературы. Работа изложена на 165 страницах компьютерного текста, иллюстрирована 22 рисунками, содержит 59 таблиц. Библиографический указатель состоит из 109 источников, из которых 46 отечественных и 63 зарубежных.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Концепция микробиома человека и его функции.

Факторы, определяющие формирование микробиома

Молекулярный генетик и биохимик, нобелевский лауреат Джошуа Ледерберг (Joshua Lederberg, 1925—2008) впервые сформулировал концепцию микробиома и определил термин «микробиом» для обозначения экологического сообщества комменсальных, симбиотических и патогенных микроорганизмов, заселяющих пространство человеческого тела.

Согласно современным представлениям, взаимодействие микробиома и организма хозяина является мутуалистическим симбиозом, при котором тело человека предоставляет экологическую нишу для существования и питания микробов, а микробиом выполняет свои функции. Этот процесс сопровождается морфологическими, биохимическими и генетическими изменениями взаимодействующих сторон [6].

В любом микробиоме различают характерные виды. Представители облигатной флоры постоянно присутствуют в организме человека и играют важную роль в метаболизме и защите организма от поступающих извне патогенов, обеспечивая иммунную защиту. Вторая составляющая нормального микробиома — транзиторные микроорганизмы. Представители этой части микробиома часто встречаются у здоровых людей. Качественный состав транзиторной флоры непостоянен и невелик, в основном представлен условно-патогенными микроорганизмами [15].

Главным условием для существования симбиотического взаимодействия с организмом человека является выполнение микробиомом ряда крайне важных функций [96], таблица 1.

Биоразнообразие является самым важным показателем стабильности микробиома.

Воздействие вредных факторов внешней среды, инфекционных агентов, может нарушить структуру микробиома, привести к утрате ключевых родов и видов микроорганизмов. Чем выше биоразнообразие - тем выше потенциал к восстановлению микробиома и сохранению его ключевых функций в результате активации механизмов регуляции и компенсации, способности других видов заместить и взять на себя функции утраченных бактерий [11,12].

Установлено множество причин снижения микробного разнообразия микробиома:

- недостаточное, скудное или однообразное питание, диета с избытком животных жиров, простых сахаров, консервантов, с низким содержанием в рационе растительной клетчатки;

- воздействие медикаментозных препаратов, в частности местных и системных антибактериальных препаратов;

- низкая физическая активность, малоподвижный образ жизни. Физические нагрузки способствуют активному синтезу бутирата (масляной кислоты) - крайне важного метаболита нормального микробиома;

- длительный латентный стресс [4]. В результате активации оси Гипоталамус-Гипофиз- Надпочечники растет уровень глюкокортикоидов, что нарушает барьерную функцию кишечника;

- бактерицидное и бактериостатическое воздействие токсических веществ окружающей среды: бисфенол-А, пестициды, хлор, гербициды [20,41].

Таблица 1 - Функции микробиома организма человека

Функция Описание

Пищеварительная Бактерии типа Firmicutes участвуют в расщеплении белков, жиров, полисахаридов, растительной клетчатки, участвуют в метаболизме глютена и лактозы. Синтез витаминов и КЖК (короткоцепочечные жирные кислоты), ферментов. Трансформация желчных кислот для переваривания и усвоения жиров в кишечнике.

Метаболическая Синтез аминокислот (аргинин, глутамин), нейропептидов, гормонов, витаминов (виЖ, витамины группы В), оксида азота. Утилизация белков, пептидов, гликопротеинов. Бутират- основной источник энергии для колоноцитов.

Защитная (барьерная) Колонизационная резистентность- конкуренция с патогенами, иммунорегуляция - синтез бактериоцинов, интерферонов, интерлейкинов, стимуляция развития лимфоидного аппарата кишки. Синтез IgA, лизоцима - мукозальный иммунитет.

Иммуномодулирующая Иммуномодулирующее действие КЖК (бутирата). Колонизация бактериями эпителия кишечника при взаимодействии на поверхности М-клеток пейеровых бляшек приводит к стимуляции лимфоидной ткани, усилению врожденных иммунных реакций клеточного и гуморального иммунитета, активации продукции цитокинов.

Регуляторная Созревание и функционирование иммунной системы, регуляция эндокринной системы кишечника, центральной нервной системы (ЦНС), работы оси «кишечник-мозг».

Антистрессорная Изменение экспрессии рецепторов нейромедиторов: гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), дофамина, серотонина, норадреналина, окситоцина, гистамина, холина.

Антиканцерогенная Бутират модулирует экспрессию генов, регулирующих клеточный цикл и активирующих апоптоз в раковых клетках толстой кишки, подавляя канцерогенез; сохраняет целостность эпителиального барьера кишечника, повышая синтез цитозольных и мембранных белков плотных межклеточных контактов, предотвращает повышенную кишечную проницаемость. Снижение системного воспаления путем подавления активности провоспалительных цитокинов и повышения синтеза противовоспалительных цитокинов; создание иммунологической толерантности (взаимодействие с Т reg).

Нормальный микробиом способен конкурировать с патогенами за источники питания [52]. Факторами, определяющими формирование нормального микробиома, являются:

- микробиом родовых путей матери;

- микробиом внешней среды;

- функциональная активность неспецифических защитных механизмов (бактерицидность и резистентность кожных покровов, активность макрофагов, секреция ферментов);

- степень активности пассивного иммунитета, получаемого плодом от матери;

- особенностей главной системы гистосовместимости, так как она определяет особенности формирования экосистем микроорганизмов, обеспечивающих колонизационную резистентность слизистых оболочек [28].

Микробиом внешней среды неизбежно оказывают влияние на состояние микробиома человека. Некоторые из микробиомов в пределах конкретных мест обитания являются открытыми и стабильными, как например, микробиомы жилых районов, и подвержены влиянию сезонных, географических и биологических факторов. Другие являются ограниченными, как например, микробиомы медицинских организаций, где фактором воздействия на их таксономический состав являются антибактериальные препараты, что приводит к обеднению состава микробиома, ограниченности содержания видов, их изменчивости и появлению микроорганизмов с множественной лекарственной устойчивостью, являющихся высокопатогенными для человека [75].

Дыхательная и пищеварительная системы подвержены наибольшей нагрузке экзогенными антигенами [1]. В этих отделах находится наибольшее количество бактериальной флоры, таким образом, делая их наиболее важными при формировании иммунного гомеостаза.

1.2. Состав и формирование микробиома верхних дыхательных путей в норме

и у детей с РРИ

Микробиом ВДП характеризуется небольшой биомассой, но чрезвычайной гетерогенностью микробных видов. Жизнедеятельность бактериального компонента слизистой оболочки ВДП ребенка с раннего возраста стимулирует развитие иммунной толерантности [32, 42, 69].

Методом генетического секвенирования установлено, что слизистые оболочки этой зоны заселены широким спектром бактерий, принадлежащих к типам Firmicutes (44%), Actinobacteria (3%), Bacteroidetes (11%), Proteobacteria (41%) и Fusobacteria (1%), с преобладающими родами Moraxella, Haemophilus, Streptococcus, Flavobacteria, Corynebacteriumи Neisseriaа, рисунок 1.

Fusobacteria % Proteobacteria %

Bacteroidetes % Actinobacteria % Firmicutes %

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50

Рисунок 1 - Микробиом верхних дыхательных путей

На основании имеющихся литературных данных по микробиому ВДП у детей, можно выделить следующие таксономические группы, представленные в таблице 2 [75].

Таблица 2 - Таксономические группы микробиома верхних дыхательных путей у

детей

Тип Класс Порядок Семейство, род

Bacteroidetes Bacteroidia Bacteroidales

Firmicutes Bacilli Bacillales Lactobacillales Семейство Staphylococcaceae

Clostridia Clostridiales Семейство: Peptococcaceae Род: Desulfotomaculum Семейство: Clostridiaceae Род: Clostridium

Mollicutes Mycoplasmatales Семейство: Mycoplasmataceae Род: Mycoplasma

Proteobacteria Gammaproteobacteria Род: Legionella Coxiella Moraxella Pseudomonas Acinetobacter Vibrio Escherichia Proteus Salmonella

Actinobacteria Actinobacteria Род: Mycobacterium Streptomyces Frankia Bifidobacterium

Fusobacteria Fusobacteria Fusobacteriales Семейство: Fusobacteriaceae Род: Fusobacterium

Сразу после рождения микробиом ВДП новорожденного ребенка имеет смешанный характер, влияние на который оказывает микробиом матери и окружающей среды [53].

Однако в течение первой недели жизни младенца происходит быстрая дифференциация носоглоточного биотопа. Изначально у большинства новорожденных с высокой частотой и обилием колонизации преобладает Staphylococcus aureus, затем его количество быстро снижается и сменяется преобладанием Corynebacterium pseudodiphteriticum, Dolosigranulum pigrum, Moraxella catarrhalis, Streptococcus pneumoniae или Haemophilus influenzae. Этот процесс происходит в течение первых 6 месяцев жизни младенца [104]. Поскольку почти все дети были колонизированы S. aureus в раннем возрасте, прежде чем перейти на профиль, характеризующийся Corynebacterium, Dolosigranulum и/или Moraxella, некоторые исследователи высказывают предположение, что S. aureus представляет собой так называемый ключевой вид в раннем возрасте, функционирующий как основа для формирования нормального микробиома ВДП, создавая среду, более восприимчивую к колонизации другими комменсальными бактериями, которые, в свою очередь, обеспечивают стабильность экосистемы и иммуномодулирующее действие [56].

Становлению нормального респираторного микробиома способствует грудное вскармливание. По данным некоторых исследователей, грудное вскармливание способствует увеличению численности Dolosigranulum и Corynebacterium на слизистых ВДП. Dolosigranulum относятся к семейству Carnobacteriaceae, которые являются грамположительными молочнокислыми бактериями, и, как молочнокислые бактерии вносят свой вклад в нормальную микробиоту [104].

У младенцев, рожденных путем кесарева сечения, наблюдаются задержка в общем развитии профилей микробиома ВДП и также отмечается уменьшение колонизации «здоровыми» комменсалами Corynebacteriumи Dolosigranulum [53]. В возрасте ребенка около 1,5 месяцев нормальный микробиом представлен 5 группами: Streptococcus, Moraxella, Staphylococcus, Corynebacterium или Corynebacterium/Dolosigranulum, которые являются доминирующими

бактериальными компонентами в 89% случаев. В 7,5% случаев превалируют Firmicutes, причем у детей до 3 лет частота встречаемости выше. Actmobacteriaопределяется от 7,9% до 12,5% микробиома, а представленность Bacteroidetes в микробиоме в 2,6 раза выше у детей раннего возраста по сравнению с дошкольниками (р<0,001) [15].

Ученые из Великобритании предполагают, что развитие микробиома ВДП происходит преимущественно в первый год жизни, что является critical window -«критическим окном» для формирования иммунитета [83].

Преобладающие бактериальные компоненты детей до 1 года значительно отличаются от более старших возрастных групп (1-3 и 4-7 лет). Разнообразие микробиома у здоровых детей увеличивается в первые 3 года жизни и зависит от воздействия множества факторов. Бактериальные агенты поступают из внешней атмосферы через вдыхаемый воздух, что подтверждается данными о низком разнообразии микробиома, но высокой концентрации Corynebacterium и Staphylococcus [100]. Кроме того, на формирование микробиома оказывает не меньшее воздействие интеграция вирусных геномов, которые могут поддерживать воспалительный процесс и создавать неблагоприятные условия для стабильности экосистемы. В расшифрованном вирусном контенте преобладают Paramyxoviridae (38%), Picornaviridae (31%) и Orthomyxoviridae (21%). В семействе Paramyxoviridae в 80% случаев выделяют человеческие респираторно-синцитиальные вирусы, в семействе Picornaviridae доминируют риновирусы А (65%) и риновирусы С (35%).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Курдюкова Татьяна Ивановна, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Абрамова Н. А. Роль социальных и экологических факторов в формировании группы часто болеющих детей в социально благополучных семьях города Москвы / Н. А. Абрамова, М. С. Савенкова. - Текст : электронный // Детские инфекции. - 2013. - № 12 (4). - С. 52-57. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/rol-sotsialnyh-i-ekologicheskih-faktorov-v-formirovanii-gruppy-chasto-boleyuschih-detey-v-sotsialno-blagopoluchnyh-semyah-g-moskvy (дата обращения: 08.10.2024).

2. Богданова Н. М. Состояние кишечной микробиоты и местного иммунного ответа желудочно-кишечного тракта у часто болеющих детей, находящихся в трудной жизненной ситуации / Н. М. Богданова, А. И. Хавкин, Д. Г. Пеньков. -Текст : электронный // Вопросы практической педиатрии. - 2021. - № 6 (4). - С. 125-134. - URL: https://doi.org/10.20953/1817-7646-2021-4-125-134(дата обращения: 08.10.2024).

3. Бонч-Осмоловская Е. А. Анализ полных геномов - очередной этап в развитии микробиологии / Е. А. Бонч-Осмоловская, Н. В. Равин. - Текст : электронный // Вестник Российской академии наук. - 2010 - Том 80, № 11. - С. 977-984. - URL: https://doi.org/10.1134/S1019331610060043 (дата обращения: 08.10.2024).

4. Булгакова С. В. Иммунный гомеостаз: новая роль микро- и макроэлементов, здоровой микробиоты / С. В. Булгакова, Н. П. Романчук. - Текст : электронный // Бюллетень науки и практики. - 2020. - № 6 (10). - С. 206-233. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/immunnyy-gomeostaz-novaya-rol-mikro-i-makroelementov-zdorovoy-mikrobioty (дата обращения: 08.10.2024).

5. Вахитов Т. Я. Концепция суперорганизма в биологии и медицине / Т. Я. Вахитов, С. И. Ситкин. - Текст : электронный // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2014. - № 7 (107). - С. 72-85. - URL:

https://cyberleninka.ru/article/n/kontseptsiya-superorganizma-v-biologii-i-meditsine (дата обращения: 08.10.2024).

6. Великорецкая М. Д. Реккурентные респираторные инфекции у детей / М. Д. Великорецкая. - Текст : электронный // Медицинский совет. - 2017. - № 9. - С. 124-130. - URL: https://www.med-sovet.pro/jour/article/view/1967/1949 (дата обращения: 08.10.2024).

7. Власов В. В. Российский опыт трансплантации фекальной микробиоты / В. В. Морозов, В. В. Власов. - Текст : электронный // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2023. - № 4. - С. 113-120. - URL: https://doi.org/10.31146/1682-8658-ecg-212-4-113-120 (дата обращения: 08.10.2024).

8. Влияние микробиоты кишечника и обеспеченности витаминами А и D на здоровье ребенка / И. Н. Захарова, О. В. Дедикова, А. Е. Кучина, А. И. Сгибнева.

- Текст : электронный // Педиатрия. Приложение к журналу Consilium Medicum.

- 2021. - № 1. - С. 25-29. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/vliyanie-mikrobioty-kishechnika-i-obespechennosti-vitaminami-a-i-d-na-zdorovie-rebenka (дата обращения: 08.10.2024).

9. Грицинская В. Л. Рекуррентные респираторные инфекции у детей / В. Л. Грицинская. - Текст : электронный // Childrens medicine of the North-west. - 2024.

- Том 12, № 1. - С. 19-29. - URL: https://doi.org/10.56871/CmN-W.2024.36.12.002 (дата обращения: 08.10.2024).

10. Зайцева О. В. Реккурентные респираторные инфекции: можно ли предупредить? / О. В. Зайцева. - Текст : электронный // Педиатрия. - 2015. - № 2. - С. 185-192.

- URL: https://cyberleninka.ru/article/n7rekurrentnye-respiratornye-infektsii-mozhno-li-predupredit (дата обращения: 08.10.2024).

11. Кайбышева В. О. Микробиом человека: возрастные изменения и функции / В. О. Кайбышева, М. Е. Жарова, К. Ю. Филимендикова. - Текст : электронный //

Доказательная гастроэнтерология. - 2020. - № 9 (2). - С. 42-55. - URL: https://doi.org/10.17116/dokgastro2020902142 (дата обращения: 08.10.2024).

12. Капелович М. Б. Микробиом человека, респираторные вирусные инфекции и пробиотики: польза для практической работы / М. Б. Капелович. - Текст : электронный // Педиатрия. Приложение к журналу ConsiliumMedicum. - 2021. -№ 3. - С. 249-254. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/mikrobiom-cheloveka-respiratornye-virusnye-infektsii-i-probiotiki-polza-dlya-prakticheskoy-raboty (дата обращения: 08.10.2024)

13. Кишечная микробиота: современные представления о видовом составе, функциях и методах исследования / А. А. Кожевников, К. В. Раскина, Е. Ю. Мартынова [и др.]. - Текст : электронный // Русский Медицинский Журнал. -2017. - № 17. - С. 1244-1247. - URL: https://www.rmi.ru/articles/gastroenterologiya/Kishechnaya_mikrobiota_sovremenny e predstavleniya o vidovom sostave funkciyah i metodah issledovaniya/?ysclid=l p9x6goewy321884056 (дата обращения: 08.10.2024).

14. Клименко Е. С. Возможность таксономической идентификации бифидобактерий на основании различных вариабельных районов гена 16S рРНК / Е. С. Клименко, А. В. Погодина, Л. В. Рычкова. - Текст : электронный // Генетика. -2020. - Том 56, № 8. - С. 904-914. - URL: https://doi.org/10.31857/S001667582008007X (дата обращения: 08.10.2024).

15. Коренюк Е. С. Нарушения микробиоты дыхательных путей у детей с респираторными заболеваниями (обзор литературы) / Е. С. Коренюк. - Текст : электронный // Здоровье ребенка. - 2018. - № 5. - С. 506-515. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/narusheniya-mikrobioty-dyhatelnyh-putey-u-detey-s-respiratornymi-zabolevaniyami-obzor-literatury (дата обращения: 08.10.2024).

16. Косенко И. М. Рекуррентные респираторные инфекции у детей: современные подходы к рациональной фармакотерапии / И. М. Косенко. - Текст :

электронный // Педиатрия. Приложение к журналу Consilium Medicum. - 2018. -№ 1. - С. 51-56. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/rekurrentnye-respiratornye-infektsii-u-detey-sovremennye-podhody-k-ratsionalnoy-farmakoterapii (дата

обращения: 08.10.2024).

17. Красноруцкая О. Н. Перспективы диагностики микробиоты у частоболеющих детей с острыми респираторными заболеваниями / О. Н. Красноруцкая, Т. И. Курдюкова. - Текст : электронный // Вопросы устойчивого развития общества. -2021. - № 8. - С. 306-310. - URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=46537872&ysclid=lp9xdwsdty389962858 (дата обращения: 08.10.2024).

18. Красноруцкая О. Н. Состояние микробиоты кишечника и оро-фарингеальной зоны у часто болеющих детей / О. Н. Красноруцкая, Т. И. Курдюкова. - Текст : электронный // Российский педиатрический журнал. - 2021. - № 24 (4). - С. 262.

- URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=46542677&ysclid=lp9xhufxek610401696 (дата обращения: 08.10.2024).

19. Кривущев Б. И. Профилактика бактериальных осложнений при респираторных заболеваниях у часто и длительно болеющих детей / Б. И. Кривущев, С. Я. Ярошенко. - Текст : электронный // Здоровье Ребенка. - 2011. - № 7. - С. 95-98.

- URL: https ://cyberleninka. ru/article/n/profilaktika-bakterialnyh-oslozhneniy-pri-respiratornyh-zabolevaniyah-u-chasto-i-dlitelno-boleyuschih-detey (дата обращения:

https: //elibrary. ru/item. asp?id обращения: 08.10.2024).

m20pa1rdyt664334935 (дата

21. Лазарева Т. С. Желудочно-кишечный тракт, микробиом и иммунитет / Т. С. Лазарева, Ф. Ф. Жвания. - Текст : электронный // Педиатрическая Фармакология. - 2009. - № 6 (1). - С. 46-50. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/zheludochno-kishechnyy-trakt-mikrof[ora-i-immunitet (дата обращения: 08.10.2024).

22. Мазанкова Л. Н. Инфекции и соматические заболевания / Л. Н. Мазанкова, А. А. Чебуркин. - Текст : электронный // Практика педиатра. - 2023. - № 1. - С. 23-31.

- URL: https://medi.ru/pp/2023/01/27790/ (дата обращения: 08.10.2024).

23. Малинина Н. В. ОРВИ у детей. Всем ли необходима интерферонотерапия? / Н. В. Малинина, Т. Н. Малюгина, В. В. Печенкин. - Текст : электронный // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2022. - Том 67, № 4. - С. 240.

- URL: https://www.elibrary.ru/item.asp?id=49438560&ysclid=m209h931ps904155377 (дата обращения: 08.10.2024).

24. Микробиота и здоровье ребенка: задачи медицинской практики / Л. А. Харитонова, К. И. Григорьев, О. В. Папышева [и др.]. - Текст : электронный // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2022. - Том 67, № 1. - С. 513. - URL: https://doi.org/10.21508/1027-4065-2022-67-1-5-13 (дата обращения: 08.10.2024).

25. Микробиота кишечника как отдельная система организма / Ю. В. Юдина, А. А. Корсунский, А. И. Аминова [и др.]. - Текст : электронный // Доказательная гастроэнтерология. - 2019. - № 8 (4). - С. 36-43. - URL: https://doi.org/10.17116/dokgastro2019804-05136 (дата обращения: 08.10.2024).

26. Микробиота кишечника, нутриенты и пробиотики с позиции взаимодействия оси «кишка-легкие» / О. Ю. Зольникова, К. В. Ивашкин, Е. Л. Буеверова, В. Т. Ивашкин. - Текст : электронный // Вопросы питания. - 2019. - № 3. - С. 13-22. -

URL: https://cyberleninka.ru/article/n/mikrobiota-kishechnika-nutrienty-i-probiotiki-s-pozitsii-vzaimodeystviya-osi-kishka-legkie (дата обращения: 08.10.2024).

27. Микрофлора, колонизационная резистентность слизистых и мукозальный иммунитет / А. В. Караулов, С. С. Афанасьев, В. А. Алешкин [и др.]. - Текст : электронный // Иммунология. - 2015. - № 36 (5). - С. 290-295. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n7mikroflora-kolonizatsionnaya-rezistentnost-slizistyh-i-mukozalnyy-immunitet/viewer (дата обращения: 08.10.2024).

28. Нарушения микробиоценозов у детей: многоцентровое исследование. Сообщение III. Микробиоценоз и дисбактериоз кишечника / В. А. Алешкин, Х. М. Галимзянов, С. С. Афанасьев [и др.]. - Текст : электронный // Астраханский медицинский журнал. - 2011. - № 2 (3). - С. 124-128. - URL: https://cyberleninka.ru/article/n/narusheniya-mikrobiotsenozov-u-detey-mnogotsentrovoe-issledovanie-soobschenie-iii-mikrobiotsenoz-i-disbakterioz-kishechnika (дата обращения: 08.10.2024).

29. Николаева И. В. Формирование кишечной микробиоты ребенка и факторы, влияющие на этот процесс / И. В. Николаева, А. Д. Царегородцев, Г. С. Шайхиева. - Текст : электронный // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2018. - № 63 (3). - С. 13-18. - URL: https://doi.org/10.21508/1027-4065-2018-63-3-13-18 (дата обращения: 08.10.2024).

30. Олескин А. В. Пробиотики, психобиотики и метабиотики: проблемы и перспективы / А. В. Олескин, Б. А. Шендеров. - Текст : электронный // Физическая и реабилитационная медицина, медицинская реабилитация. - 2020. - № 3. - С. 233-243. - URL: https://doi.org/10.36425/rehab25811 (дата обращения: 08.10.2024).

31. Орипова Н. А. Современные данные морфункционального строение иммунной системы желудочно-кишечного тракта / Н. А. Орипова. - Текст : электронный // Scientific progress. - 2022. - № 2. - С. 773-781. - URL:

https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennye-dannye-morfunktsionalnogo-stroenie-immunnoy-sistemy-zheludochno-kishechnogo-trakta (дата обращения: 08.10.2024).

32. Особенности иммунного статуса и системы интерферона у детей раннего возраста / М. В. Кушнарева, Т. В. Виноградова, Е. С. Кешишян [и др.]. - Текст : электронный // Российский вестник перинатологии и педиатрии. - 2016. - № 61 (3). - С. 12-21. - URL: https://doi.org/10.21508/1027-4065-2016-61-3-12-21 (дата обращения: 08.10.2024).

33. Острая респираторная вирусная инфекция (ОРВИ) / Союз педиатров России. -Текст : электронный // Рубрикатор клинических рекомендаций : [подсистема]. -

2022. - URL: https://cr.minzdrav. gov.ru/recomend/25_2?ysclid=m20htogd6m520225154(дата обращения: 08.10.2024).

34. Острые, рекуррентные и рецидивирующие инфекции респираторного тракта у детей: вопросы иммунопрофилактики и иммунотерапии. / А. Л. Заплатников, А. А. Гирина, Е. И. Бурцева [и др.]. - Текст : электронный // РМЖ. Мать и дитя. -

2023. - Том 6, № 1. - С. 50-59. - URL: https://doi.org/10.32364/2618-8430-2023-6-1-50-59 (дата обращения: 08.10.2024).

35. Пробиотики // Микробиота : монография / под редакцией Е. Л. Никонова, Е. Н. Поповой. - Текст : электронный. - Москва : Компания Полиграфмастер, 2019. -С. 31-37. - ISBN 978-5-89084-058-5. - URL: http ://gastro-rsmu. ru/wp-content/uploads/2017/06/mikrobiota.pdf?ysclid=lp79ctmfsa490460960 (дата

URL: https://cyberleninka.ru/article/n/probiotiki-pri-respiratornyh-zabolevaniyah-e li-puti-vzaimodeystviya-i-perspektivy-primeneniya (дата обращения: 08.10.2024).

37. Романчук П. И. Здоровая микробиота и натуральное функциональное питание: гуморальный и клеточный иммунитет / П. И. Романчук. - Текст : электронный // Бюллетень науки и практики. - 2020. - № 6 (9). - С. 127-166. - URL: https://doi.org/10.33619/2414-2948/58/14 (дата обращения: 08.10.2024).

38. Стома И. Микробиом-ассоциированная медицина: как связаны мир микробов и мир людей? / И. Стома, Е. Малаева. - Текст : электронный // Наука и инновации. - 2022. - № 8 (234). - С. 18-22. - URL: https://doi.org/10.29235/1818-9857-2022-8-18-22 (дата обращения: 08.10.2024).

39. Суханова А. О. Применение противовирусной терапии у детей с ОРВИ в условиях детской поликлиники / А. О. Суханова, В. В. Коломацкая. - Текст : электронный // Российский Педиатрический Журнал. - 2023. - Том 23, № 1. - С. 47-48. - URL: https : //elibrary. ru/item. asp?id=50367488 (дата обращения: 08.10.2024).

40. Феклисова Л. В. Перспективы применения сорбированного монокомпонентного пробиотика у детей с рекуррентными респираторными заболеваниями / Л. В. Феклисова. - Текст : электронный // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. - 2021. - Том 10, № 2 (37). - С. 60-68. - URL: https://doi.org/10.33029/2305-3496-2021-10-2-60-68 (дата обращения: 08.10.2024).

41. Хайтович А. Б. Микробиом и его влияние на здоровье человека / А. Б. Хайтович, А. Ю. Воеводкина. - Текст : электронный // Крымский журнал экспериментальной и клинической медицины. - 2019. - № 1. - С. 61-70. - URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=38221665&ysclid=m20pwtyvx9427018383 (дата обращения: 08.10.2024).

42. Чеботарева Т. А. Рекуррентные инфекции органов дыхания у детей и программы иммунореабилитации / Т. А. Чеботарева, Л. Н. Мазанкова, А. П. Хоперскова. -Текст : электронный // Детские инфекции. - 2014. - № 3. - С. 61-64. - URL:

https://cyberleninka.ru/article/n/rekurrentnye-infektsii-organov-dyhaniya-u-detey-i-programmy-immunoreabilitatsii (дата обращения: 08.10.2024).

43. Шендеров Б. А. Метабиотики: вчера, сегодня, завтра / Б. А. Шендеров, А. В. Синица, М. М. Захарченко. - Санкт-Петербург : Крафт, 2017. - 79 с. - URL: https://kraftgroup.ru/METABIOTICS-challenge-rus-

final.pdf?ysclid=lp9yxtvh4i984010867 (дата обращения: 08.10.2024). - Текст : электронный.

44. Шестаков С. В. Метагеномика микробиома человека / С. В. Шестаков. - Текст : электронный // Успехи современной биологии. - 2010. -№ 6 (30). - С. 531-543. -URL: https://elibrary.ru/item.asp?id=17679028&ysclid=m20q06ifdv287010205 (дата обращения: 08.10.2024).

45. Эффективность агрегирования препарата Деринат в комплексном лечении ОРВИ у дошкольников в практике участкового педиатра / А. А. Зуйкова, О. Н. Красноруцкая, Ю. А. Котова, Д. Ю. Бугримов. - Текст : электронный // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2021. - Том 20, № 3. - С. 128-133. - URL: https://doi.org/10.36622/VSTU.2021.20.3.017 (дата обращения: 08.10.2024).

46. Юлиш Е. И. Рациональный выбор антибактериальной терапии внебольничных бактериальных инфекций ЛОР-органов и органов дыхания у детей / Е. И. Юлиш // Здоровье ребенка. - 2008. - № 1 (10). - С. 39-41.

47. A correction of a gut microflora composition for the allergic bronchial asthma complex therapy / V. Ivashkin, O. Zolnikova, N. Potskherashvili [et al.]. - Text : electronic // Italian Journal of Medicine. - 2018. - № 12. - P. 260-264. - URL: https://doi.org/10.4081/itjm.2018.1040 (дата обращения: 08.10.2024).

48. Akkermansia muciniphila: key player in metabolic and gastrointestinal disorders / I. G. Macchione, L. R. Lopetuso, G. Ianiro [et al.]. - Text : electronic // European Review for Medical and Pharmacological Sciences. - 2019. - № 23 (18). - P. 8075-

8083. - URL: https://doi.org/10.26355/eurrev_201909_19024 (дата обращения: 08.10.2024).

49. Analysis of the upper respiratory tract microbiotas as the source of the lung and gastric microbiotas in healthy individuals / C. M. Вassis, J. R. Erb-Downward, R. P. Dickson [et al.]. - Text : electronic // American Society for Microbiology. - 2015. -№ 6 (2). - Р. e00037. - URL: https://doi.org/10.1128/mBio.00037-15 (дата обращения: 08.10.2024).

50. Antibiotics, birth mode, and diet shape microbiome maturation during early life / N.

A. Bokulich, J. Chung, T. Battaglia [et al.]. - Text : electronic // Science translational medicine. - 2016. - № 8 (343). - Р. 343ra82. - URL: https: //doi. org/10.1126/scitranslmed. aad7121 (дата обращения: 08.10.2024).

51. Cesarean delivery may affect the early biodiversity of intestinal bacteria / G. Biasucci,

B. Benenati, M. Lorenzo [et al.]. - Text : electronic // Journal of Nutrition. - 2008. -№ 138. - P. 1796-1800. - URL: https://doi.org/10.1093/in/138.9.1796S (дата обращения: 08.10.2024).

52. Cornick S. Roles and regulation of the mucus barrier in the gut / S. Cornick, A. Tawiah, K. Chadee. - Text : electronic // Tissue barriers. - 2015. - № 3 (1-2). - Р. e982426. - URL: https://doi.org/10.4161/21688370.2014.982426 (дата обращения: 08.10.2024).

53. Delivery mode shapes the acquisition and structure of the initial microbiota across multiple body habitats in newborns / M. G. Dominguez-Bello, E. K. Costello, M. Contreras [et al.]. - Text : electronic // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 2010. - Volume 107, № 26. - 11971-11975 - URL: https://doi.org/10.1073/pnas.1002601107 (дата обращения: 08.10.2024).

54. Desired Turbulence? Gut-Lung Axis, Immunity, and Lung Cancer / R. Bingula, M. Filaire, N. Radosevic-Robin [et al.]. - Text : electronic // Journal of Clinical

Oncology. - 2017. - № 2017. - URL: https://doi.org/10.1155/2017/5035371 (дата обращения: 08.10.2024).

55. Determinants of the human infant intestinal microbiota after the introduction of first complementary foods in infant samples from five European centres / M. Fallani, S. Amarri, A. Uusijarvi [et al.]. - Text : electronic // Microbiology. - 2011. - № 157. - P. 1385-1392. - URL: https://doi.org/10.1099/mic.0.042143-0 (дата обращения: 08.10.2024).

56. Development of Upper Respiratory Tract Microbiota in Infancy is Affected by Mode of Delivery / A. A. T. M. Bosch, E. Levin, M. A. van Houten [et al.]. - Text : electronic // EBioMedicine. - 2016. - № 9. - P. 336-345. - URL: https: //doi .org/10.1016/i.ebiom.2016.05.031 (дата обращения: 08.10.2024).

57. Dietary gut microbial metabolites, short-chain fatty acids, and host metabolic regulation / M. Kasubuchi, S. Hasegawa, T. Hiramatsu [et al.]. - Text : electronic // Nutrients. - 2015. - № 7 (4). - P. 2839-2849. - URL: https://doi.org/10.3390/nu7042839 (дата обращения: 08.10.2024).

58. Dinan T. G. The Microbiome-Gut-Brain Axis in Health and Disease / T. G. Dinan, J. F. Cryan. - Text : electronic // Gastroenterology clinics of North America. -2017. - № 46 (1). - P. 77-89. - URL: https://doi.org/10.1016/i.gtc.2016.09.007 (дата обращения: 08.10.2024).

59. Dynamics of gut microbiota according to the delivery mode in healthy Korean infants / E. Lee, Y Kim, Mi. Kang [et al.]. - Text : electronic // Allergy, Asthma & Immunology Research. - 2016. - № 8 (5). - P. 471-478. - URL: https://doi.org/10.4168/aair.2016.8.5.471 (дата обращения: 08.10.2024).

60. Effect of Lactobacillus gasseri PA 16/8, Bifidobacterium longum SP 07/3, B. bifidum MF 20/5 on common cold episodes: a double blind, randomized, controlled trial / M. de Vrese, P. Winkler, P. Rautenberg [et al.]. - Text : electronic // Clinical nutrition

(Edinburgh, Scotland). - 2005. - № 24 (4). - P. 481-491 - URL: https://doi.org/ 10.1016/j.clnu.2005.02.006 (дата обращения: 08.10.2024).

61. Effect of long term con6 sumption of probiotic milk on infections in children attending day care centers: double blind, randomized trial / K. Hatakka, E. Savilahti, A. Pönkä [et al.]. - Text : electronic // BMJ. - 2001. - № 322. - P. 1351-1367. - URL: https://doi.org/10.1136/bmj.322.7298.1327 (дата обращения: 08.10.2024).

62. Endotoxemia is associated with an increased risk of incident diabetes / P.J. Pussinen, A.S. Havulinna, M. Lehto [et al.]. - Text : electronic // Diabetes Care. - 2011. - № 34 (2). - P. 392-397. - URL: https://doi.org/10.2337/dc10-1676 (дата обращения: 08.10.2024).

63. Enterotypes in the landscape of gut microbial community composition / P. I. Costea, F. Hildebrand, M. Arumugam [et al.]. - Text : electronic // Nature microbiology. -2018. - Volume 3, № 1. - P. 8-16. - URL: https://doi.org/10.1038/s41564-017-0072-8 (дата обращения: 08.10.2024).

64. Enterotypes of the human gut microbiome / M. Arumugam, J. Raes, E. Pelletier [et al.]. - Text : electronic // Nature. - 2011. - № 473. - P. 174-180. - URL: https://doi.org/10.1038/nature09944 (дата обращения: 08.10.2024).

65. Establishment and development of intestinal microbiota in preterm neonates / S. Arboleya, A. Binetti, N. Salazar [et al.]. - Text : electronic // FEMS Microbiology Ecology. - 2012. - № 79. - P. 763-772. - URL: https://doi.org/10.1111/j.1574-6941.2011.01261.x (дата обращения: 08.10.2024).

66. Examination of faecal Bifidobacterium populations in breast- and formula-fed infants during the first 18 months of life / L. C. Roger, A. Costabile, D. T. Holland [et al.]. -Text : electronic // Microbiology. - 2010. - № 156. - P. 3329-3341. - URL: https://doi.org/10.1099/mic.0.043224-0 (дата обращения: 08.10.2024).

67. Expert consensus document. The International Scientific Association for Probiotics and Prebiotics consensus statement on the scope and appropriate use of the term

probiotic / C. Hill, F. Guarner, G. Reid [et al.]. - Text : electronic // Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology. - 2014. - № 11 (8). - P. 506-514. - URL: https://doi.org/10.1038/nrgastro.2014.66 (дата обращения: 08.10.2024).

68. Factors influencing the composition of the intestinal microbiota in early infancy / J. Penders, C. Thijs, C. Vink [et al.]. - Text : electronic // Pediatrics. - 2006. - № 118. -P. 511-521. - URL: https://doi.org/10.1542/peds.2005-2824 (дата обращения: 08.10.2024).

69. Gollwitzer E. S. Impact of Early-Life Exposures on Immune Maturation and Susceptibility to Disease / E. S. Gollwitzer, B. J. Marsland. - Text : electronic // Trends in immunology. - 2015. - № 36 (11). - P. 684-696 - URL: https://doi.org/10.1016/ut.2015.09.009 (дата обращения: 08.10.2024).

70. Gut microbiome and antibiotics / T. Iizumi, T. Battaglia, V. Ruiz, G. I. Perez. - Text : electronic // Archives of Medical Research. - 2017. - № 48. - P. 727-734. - URL: https://doi.org/10.1016/j.arcmed.2017.11.004 (дата обращения: 08.10.2024).

71. Gut microbiota metabolism of dietary fiber influences allergic airway disease and hematopoiesis / A. Trompette, E. S. Gollwitzer, K. Yadava [et al.]. - Text : electronic // Nature medicine. - 2014. - № 20 (2). - P. 159-166. - URL: https://doi.org/10.1038/nm.3444 (дата обращения: 08.10.2024).

72. Gut microbiota of healthy Canadian infants: Profiles by mode of delivery and infant diet at 4 months / M. B. Azad, T. Konya, H. Maughan [et al.]. - Text : electronic // Canadian Medical Association. - 2013. - № 185. - P. 385-394. - URL: https://doi.org/10.1503/cmaj.121189 (дата обращения: 08.10.2024).

73. Hicks L. A. U.S. Outpatient antibiotic prescribing, 2010 / L. A. Hicks, T. H. Taylor, R. J. Hunkler. - Text : electronic // The New England journal of medicine. - 2013. - № 368 (15). - P. 1461-1462. - URL: https://doi.org/10.1056/NEJMc1212055 (дата обращения: 08.10.2024).

74. Human milk oligosaccharides in premature infants: Absorption, excretion, and influence on the intestinal microbiota / M. A. Underwood, S. Gaerlan, M. L. De Leoz [et al.]. - Text : electronic // Pediatric Research. - 2015. - № 78. - P. 670-677. -URL: https://doi.org/10.1038/pr.2015.162 (дата обращения: 08.10.2024).

75. Human pharyngeal microbiome may play a protective role in respiratory tract infections / Z. Gao, Y. Kang, J. Yu, L. Ren. - Text : electronic // Genomics Proteomics Bioinformatics. - 2014. - № 12 (3). - P. 144-150. - URL: https://doi.org/10.1016/j.gpb.2014.06.001 (дата обращения: 08.10.2024).

76. Immunomodulatory effect of fibres, probiotics and synbiotics in different life-stages / J. Romeo, E. Nova, S. Gómez-Martínez [et al.]. - Text : electronic // Nutricion Hospitalaria. - 2010. - № 25 (3). - P. 341-349. - URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/20593114/ (дата обращения: 08.10.2024).

77. Impact of delivery mode-associated gut microbiota dynamics on health in the first year of life / M. Reyman, M. A. van Houten, D. van Baarle [et al.]. - Text : electronic // Nature Communications. - 2019. - № 10 (1). - Р. 4997. - URL: https://doi.org/10.1038/s41467-019-13014-7 (дата обращения: 08.10.2024).

78. Influence of antibiotic exposure in the early postnatal period on the development of intestinal microbiota / S. Tanaka, T. Kobayashi, P. Songjinda [et al.]. - Text : electronic // FEMS Immunology and Medical Microbiology. - 2009. - № 56 (1). - P. 80-87. - URL: https://doi.org/10.1111/j.1574-695x.2009.00553.x (дата обращения: 08.10.2024).

79. Interpreting infective microbiota: the importance of an ecological perspective / G. B. Rogers, L. R. Hoffman, M. P. Carroll, K. D. Bruce. - Text : electronic // Trends in Microbiology. - 2013. - № 21 (6). - P. 271-276. - URL: https://doi.org/10.1016/_j.tim.2013.03.004 (дата обращения: 08.10.2024).

80. Intestinal colonisation patterns in breastfed and formula-fed infants during the first 12 weeks of life reveal sequential microbiota signatures / H. M. Timmerman, N. B.

Rutten, J. Boekhorst [et al.]. - Text : electronic // Scientific reports. - 2017. - № 7 (1). - Р. 8327. - URL: https://doi.org/10.1038/s41598-017-08268-4 (дата обращения: 08.10.2024).

81. Italian Society of Neonatology. Probiotics for prevention of atopic diseases in infants: systematic review and meta-analysis / G. Zuccotti, F. Meneghin, A. Aceti [et al.]. -Text : electronic // Allergy. - 2015. - № 11. - P. 1356-1371. - URL: https://doi.org/10.1111/all.12700 (дата обращения: 08.10.2024).

82. Kelsall B. Recent progress in understanding the phenotype and function of intestinal dendritic cells and macrophages / B. Kelsall. - Text : electronic // Mucosal Immunology. - 2008. - № 1 (6). - P. 460-469. - URL: https: //doi .org/10.103 8/mi.2008.61 (дата обращения: 08.10.2024).

83. Lloyd C. M. Lung Homeostasis: Influence of Age, Microbes, and the Immune System / C. M. Lloyd, B. J. Marsland. - Text : electronic // Immunity. - 2017. - № 46 (4). - P. 549-561. - URL: https://doi.org/10.1016/Ummuni.2017.04.005 (дата обращения: 08.10.2024).

84. Looft T. Collateral effects of antibiotics on mammalian gut microbiomes / T. Looft, H. K. Allen. - Text : electronic // Gut Microbes. - 2012. - № 3. - P. 463-467. - URL: https://doi.org/10.4161/gmic.21288 (дата обращения: 08.10.2024).

85. Lynch S. V Gut Microbiota and Allergic Disease. New Insights / S. V. Lynch. - Text : electronic // Annals of the American Thoracic Society. - 2016. - Volume 13, Supplement 1. - P. 51-54. - URL: https://doi.org/10.1513/AnnalsATS.201507-451MG (дата обращения: 08.10.2024).

86. Meconium microbiome analysis identifies bacteria correlated with premature birth / A. N. Ardissone, D. M. de la Cruz, A. G. Davis-Richardson [et al.]. - Text : electronic // PLoS One. - 2014. - № 9 (3). - Р. e90784. - URL: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0090784 (дата обращения: 08.10.2024).

87. Microbiome disturbance and resilience dynamics of the upper respiratory tract during influenza A virus infection / D. Kaul, R. Rathnasinghe, M. Ferres [et al.]. - Text : electronic // Nature Communications. - 2020. - № 11 (1). - Р. 2537. - URL: https://doi.org/10.1038/s41467-020-16429-9 (дата обращения: 08.10.2024).

88. Microbiota Composition in Upper Respiratory Tracts of Healthy Children in Shenzhen, China, Differed with Respiratory Sites and Ages / H. Wang, W. Dai, X. Feng [et al.]. - Text : electronic // BioMed Research Internationa. - 2018. - № 2018.

- Р. 6515670 - URL: https://doi.org/10.1155/2018/6515670/ (дата обращения: 08.10.2024).

89. Piters S. W. A. The role of the local microbial ecosystem in respiratory health and disease / W. A. S. Piters, E. A. Sanders, D. Bogaert. - Text : electronic // Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. - 2015. - Volume 370, Issue 1675. - Р. 20140294 - URL: https://doi.org/10.1098/rstb.2014.0294 (дата обращения: 08.10.2024).

90. Pneumonia-induced sepsis and gut injury: effects of a poly-(ADP-ribose) polymerase inhibitor / S. M. Lobo, S. R. Orrico, M. Queiroz [et al.]. - Text : electronic // Journal of Surgery and Research. - 2005. - № 129 (2). - P. 292-297. - URL: https://doi.org/10.1016/j.jss.2005.05.018 (дата обращения: 08.10.2024).

91. Rajilic-Stojanovic M. The first 1000 cultured species of the human gastrointestinal microbiota / M. Rajilic-Stojanovic, W. M. de Vos. - Text : electronic // FEMS Microbiology Reviews. - 2014. - № 38 (5). - P. 996-1047. - URL: https://doi.org/10.1111/1574-6976.12075 (дата обращения: 08.10.2024).

92. Regulation of inflammation by short chain fatty acids / M. A. Vinolo, H. G. Rodrigues, R. T. Nachbar, R. Curi. - Text : electronic // Nutrients. - 2011. - № 3 (10).

- P. 858-876. - URL: https://doi.org/10.3390/nu3100858 (дата обращения: 08.10.2024).

93. Respiratory tract infections and gut microbiome modifications: A systematic review / C. A. Woodall, L. J. McGeoch, A. D. Hay [et al.]. - Text : electronic // PLoS ONE. -2022 . - № 17 (1). - Р. e0262057. - URL: https://doi.org/ 10.1371/journal.pone.0262057 (дата обращения: 08.10.2024).

94. RNA sequencing: new technologies and applications in cancer research / M. Hong, S. Tao, L. Zhang [et al.]. - Text : electronic // Journal of Hematology & Oncology. -2020. - № 13 (1). - P. 166. - URL: https://doi.org/10.1186/s13045-020-01005-x (дата обращения: 08.10.2024).

95. Role of Dietary Nutrients in the Modulation of Gut Microbiota: A Narrative Review / Q. Yang, Q. Liang, B. Balakrishnan [et al.]. - Text : electronic // Nutrients. - 2020. -№ 12 (2). - Р. 381. - URL: https://doi.org/10.3390/nu12020381 (дата обращения: 08.10.2024).

96. Rosenbaum M. The gut microbiota in human energy homeostasis and obesity / M. Rosenbaum, R. Knight, R. L. Leibel. - Text : electronic // Trends in Endocrinology and Metabolism. - 2015. - № 26 (9). - P. 493-501. - URL: https://doi.org/10.1016/j.tem.2015.07.002 (дата обращения: 08.10.2024).

97. Salminen S. J. Probiotics that modify disease risk / S. J. Salminen, M. Gueimonde, E. Isolauri. - Text : electronic // Journal of Nutrition. - 2005. - № 135. - P. 1294-1298. -URL: https://doi.org/10.1093/jn/135.5.1294 (дата обращения: 08.10.2024).

98. Samuelson D. R. Regulation of lung immunity and host defense by the intestinal microbiota / D. R. Samuelson, D. A. Welsh, J. E. Shellito. - Text : electronic // Frontiers in microbiology. - 2015. - № 6. - Р. 1085. - URL: https://doi.org/10.3389/fimicb.2015.01085 (дата обращения: 08.10.2024).

99. Smith P. A. The tantalizing links between gut microbes and the brain / P. A. Smith. -Text : electronic // Nature. - 2015. - № 526 (7573). - P. 312-314. - URL: https://doi.org/10.1038/526312a (дата обращения: 08.10.2024).

100. Structure, function and diversity of the healthy human microbiome / Human Microbiome Project Consortium. - Text : electronic // Nature. - 2012. - № 486 (7402). - P. 207-214. - URL: https://doi.org/10.1038/nature11234 (дата обращения: 08.10.2024).

101. Tanaka M. Development of the gut microbiota in infancy and its impact on health in later life / M. Tanaka, J. Nakayama. - Text : electronic // Allergology International. -2017. - № 66. - P. 515-522. - URL: https://doi.org/10.1016/_i.alit.2017.07.010 (дата обращения: 08.10.2024).

102. The dogma of the sterile uterus revisited: does microbial seeding occur during fetal life in humans and animals? / P. Banchi, B. Colitti, G. Opsomer [et al.]. - Text : electronic // Reproduction (Cambridge, England). - 2023. - Volume 167, Issue 1. - Р. e230078. - URL: https://doi.org/10.1530/REP-23-0078 (дата обращения: 08.10.2024).

103. The gut microbiome of healthy Japanese and its microbial and functional uniqueness / S. Nishijima, W. Suda, K. Oshima [et al.]. - Text : electronic // DNA Research. - 2016 - № 23 (2). - P. 125-133. - URL: https://doi.org/10.1093/dnares/dsw002 (дата обращения: 08.10.2024).

104. The impact of breastfeeding on nasopharyngeal microbial communities in infants / G. Biesbroek, A. A. T. M. Bosch, X. Wang [et al.]. - Text : electronic // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. - 2014. - № 190. - P. 298-308. - URL: https://doi.org/10.1164/rccm.201401-00730C (дата обращения: 08.10.2024).

105. The infant microbiome development: Mom matters / N. T. Mueller, E. Bakacs, J. Combellick [et al.]. - Text : electronic // Trends in Molecular Medicine. - 2015. - № 21. - P. 109-117. - URL: https://doi.org/10.1016/i.molmed.2014.12.002 (дата обращения: 08.10.2024).

106. The placenta harbors a unique microbiome / K. Aagaard, J. Ma, K. M. Antony [et al.]. - Text : electronic // Science Translational Medicine. - 2014. - № 6 (237). - P. 65. -URL: https://doi.org/10.1126/scitranslmed.3008599 (дата обращения: 08.10.2024).

107. Treating Clostridium difficile infection with fecal microbiota transplantation / J. Bakken, T. Borody, L. J. Brandt [et al.]. - Text : electronic // Clinical Gastroenterology and Hepatology. - 2011. - Volume 9, № 12. - Р. 1044-1049. - URL: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/21871249/ (дата обращения: 08.10.2024).

108. Virgin H. W. The virome in mammalian physiology and disease / H. W. Virgin. - Text : electronic // Cell. - 2014. - № 157. - P. 142-150. - URL: https://doi. org/ 10.1016/j. cell.2014.02.032 (дата обращения: 08.10.2024).

109. Wang H. X. Gut Microbiota-brain Axis / H. X. Wang, Y. P. Wang. - Text : electronic // Chinese Medical Journal. - 2016. - № 129 (19). - P. 2373-2380. - URL: https://doi.org/10.4103/0366-6999.190667 (дата обращения: 08.10.2024).

Приложение №1

Информация, предоставленная Вами в анкете, составляет врачебную тайну, является конфиденциальной, не подлежит разглашению, будет использована исключительно для статистической обработки и не будет доступна для посторонних лиц.

Анкета-опросник для родителей

ФИО родителя_

ФИО, дата рождения ребенка

№ п/п Вопрос Да Нет

1 Были ли у Вас какие-либо особенности течения данной беременности и родов? - токсикоз первой половины беременности - угроза прерывания - повышение артериального давления, отеки - анемия -гестоз - фето-плацентарная недостаточность - гипоксия плода - преждевременные роды - стремительные роды - затяжные роды - кесарево сечение - низкий вес ребенка при рождении - родовые травмы - кровотечения

2 Были ли у Вашего ребенка какие-либо осложнения в периоде новорожденное™? - пневмония - сепсис - омфалит - коньюнктивит - энтеролит - инфекционные заболевания кожных покровов

3 Принимали ли Вы во время данной беременности какие-либо лекарственные препараты?

4 На каком виде вскармливания находился Ваш ребенок на первом году жизни? - грудное - смешанное - искусственное

5 Курите ли Вы либо ближайшие родственники, с которыми ребенок проживает совместно? Если да, то каков стаж курения?

6 Были ли у Вашего ребенка ранее или имеются в настоящее время перечисленные ниже заболевания? - железодефицитная анемия - врожденные пороки сердца - сахарный диабет - бронхиальная астма - заболевания печени - заболевания почек - гиперплазия лимфоидных органов

7 Отмечались ли когда-либо у Вашего ребенка проявления аллергии? - лекарственная

- контактная - респираторные проявления - пищевая

8 Отмечались ли когда-либо у Вашего ребенка проявления непереносимости лактозы, если да, то как давно и как долго?

9 Отмечали ли Вы когда-либо у Вашего ребенка избыток сахара, хлебобулочных изделий в питании?

10 Употребляет ли Ваш ребенок в пищу мясо? Если нет, то как давно?

11 Наблюдался ли когда-либо Ваш ребенок у невролога?

12 Наблюдался ли когда-либо Ваш ребенок у гастроэнтеролога?

13 Перенес ли Ваш ребенок когда-либо следующие заболевания - пневмония - плеврит

14 Были ли когда-либо у Вашего ребенка операции?

15 Вакцинирован ли Ваш ребенок пневмококковой вакциной (Превенар13, Пневмо23, Пневмовакс)? Если да, то какова схема вакцинации?

16 Как часто Ваш ребенок болеет вирусными инфекциями: - до 4 раз в год - 4-6 раз в год - больше 6 раз в год

17 Как часто во время болезни Вашего ребенка приходится принимать системные антибактериальные препараты? - не чаще 1 раза в год - до 3 раз в год - чаще 3 раз в год

18 Как давно Ваш ребенок получал курс системного антибиотика? - 1-3 мес назад - 3-6 мес назад - больше 6 мес назад

19 Как часто во время болезни Вашего ребенка приходится местно использовать 0,01% р-р Мирамистина или другие антисептики для орошения зева/носа? - не чаще 1 раза в год - до 3 раз в год - 3-6 раз в год - чаще 6 раз в год

20 Как часто во время болезни Вашего ребенка приходится местно использовать препараты бактериальных лизатов (Имудон, Исмиген, Бронхомунал, ИРС19) - не чаще 1 раза в год - до 3 раз в год - 3-6 раз в год - чаще 6 раз в год

21 Как часто во время болезни Вашего ребенка приходится местно использовать таблетированные антисептики (Лизобакт, Ларипронт) - не чаще 1 раза в год - до 3 раз в год - 3-6 раз в год - чаще 6 раз в год

22 Как часто у Вашего ребенка отмечается насморк? - 1-2 раза в год - 2-4 раза в год - 4-6 раз в год - чаще 6 раз год

23 Как часто у Вашего ребенка отмечается боль в горле? - 1-2 раза в год - 2-4 раза в год

- 4-6 раз в год - чаще 6 раз год

24 Как часто у Вашего ребенка отмечается кашель? - 1-2 раза в год - 2-4 раза в год - 4-6 раз в год - чаще 6 раз год

25 Как часто у Вашего ребенка отмечаются проявления кишечной инфекции? (повышение температуры, рвота, жидкий стул) - 1-2 раза в год - 2-4 раза в год - чаще 4 раз в год

26 За предшествующий год принимал ли Ваш ребенок препараты витаминов? - витамин С - витамин Д - другие витамины

27 За предшествующий год принимал ли Ваш ребенок препараты пре- или пробиотиков?

28 Как давно Ваш ребенок проходил обследование на носительство гельминтов? (кал на я/г, соскоб на э/б, кровь на антитела к гельминтам) - менее 3 мес назад - менее 6 мес назад - более 6 мес назад

29 Как давно Ваш ребенок получал противогельминтные препараты? (пирантел, альбендазол, мебендазол) - менее 3 мес назад - менее 6 мес назад - более 6 мес назад

30 Отмечались ли у Вашего ребенка в течение предшествующих 30 дней признаки ОРВИ?

31 Отмечалась ли у Вашего ребенка в течение предшествующих 30 дней температура выше 37 градусов?

32 Отмечались ли у Вашего ребенка в течение предшествующих 30 дней боли в животе до/после приема пищи, изжога, тошнота, рвота?

33 Отмечались ли у Вашего ребенка в течение предшествующих 30 дней изменения характера стула? - появление примесей слизи, крови - запоры - неустойчивый стул

34 Принимал ли Ваш ребенок за предшествующие 30 дней какие-либо лекарственные препараты, включая местные антисептики для полости рта/носа?

35 Принимает ли Ваш ребенок в настоящий момент какие-либо лекарственные препараты?

36 Какова степень физической активности Вашего ребенка: - 180 и более минут в день, из которых не менее 60 минут умеренная и высокая активность - менее180 минут в день, из которых не менее 60 минут умеренная и высокая активность

37 Сколько времени в течение дня Ваш ребенок проводит перед экраном телевизора/гаджетов: - не более 60 минут в день - более 60 минут в день

38 Какое количество часов составляет сон Вашего ребенка ежедневно: - не менее 10 часов ежедневно - менее 10 часов ежедневно

Дата заполнения

ФИО, подпись