Применение маркера протеина S-100? в диагностике и прогнозировании исходов лечения черепно-мозговой травмы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.18, кандидат наук Сосновский, Евгений Александрович

• Сосновский, Евгений Александрович
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Сосновский, Евгений Александрович

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ_

13

ГЛАВА 1. БИОХИМИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ЧЕРЕПНО- МОЗГОВОЙ

____ТРАВМЫ (обзор литературы)

1.1. Биохимические маркеры повреждения нервной ткани. ^ ^ _____ Требования, предъявляемые к биохимическим маркерам__

1.2. Протеин S-lOOp______________[7_

1.2Л. Физико-химические свойства протеина S-100p 17

1.2.2. Роль и функция протеина S-100fi в клетке 18

1.2.3. S-100/3 - биохимический маркер повреждения нервной ^q ткани __ _ _

1.2.4. S-100J3 - биохимический маркер черепно-мозговой ^ j травмы__________

1.3. Нейрон-специфическая енолаза____24

1.4. Глиальный фибриллярный кислый протеин____26

1.5. Протеин С4аи_27

1.6. Маркеры апоптоза_29

1.7. Продукты распада спектрина_____33_

1.8. Заключение 3 5

37

ГЛАВА 2. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА НАБЛЮДЕНИИ И ____МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ__

2.1. Ретроспективное исследование, посвященное факторам риска и причинам ухудшения состояния у больных с исходной клинической 37

картиной черепно-мозговой травмы легкой степени_

2.1.1. Общая характеристика больных с черепно-мозговой травмой 3 8

2.2. Проспективное исследование, посвященное изучению возможности применения протеина 8-100(3 в сыворотке крови для 42 диагностики черепно-мозговой травмы легкой степени___

2.2.1. Критерии включения больных с черепно-мозговой ^ травмой легкой степени в проспективное исследование _

2.2.2. Критерии исключения больных с черепно-мозговой ^ травмой легкой степени из проспективного исследования _

2.2.3. Общая характеристика больных с черепно-мозговой ^ __травмой легкой степени_______

2.3. Проспективное исследование, посвященное прогнозированию исходов лечения больных с черепно-мозговой травмой тяжелой ^ степени с помощью динамической оценки концентрации протеина

Б-100(3 в сыворотке крови_______

2.3.1. Критерии включения больных с черепно-мозговой ^ травмой тяжелой степени в проспективное исследование _ _

2.3.2. Критерии исключения больных с черепно-мозговой ^ травмой тяжелой ^тепени из проспективного исследования__

2.3.3. Общая характеристика больных с черепно-мозговой_50^

травмой тяжелой степени

2.4. Методы исследования больных____55_

2.4.1. Оценка тяжести состояния м уровня бодрствования 55

2.4.2. Неврологическое исследование пациентов 56

2.4.3. Диагностическая поясничная пункция________ __ 58

2.4.4. Компьютерная томография головного мозга ______ 59

2.4.5. Магнитно-резонансная томография головного мозга 61

2.4.6. Электроэнцефалография________________ 62

2.4.7. Определение концентрации протеина 8-100(1 в ^ _сыворотке крови_

2.5. Статистическая обработка материала_____63

ГЛАВА 3. ПРИЧИНЫ И ФАКТОРЫ РИСКА УХУДШЕНИЯ СОСТОЯНИЯ И РАЗВИТИЯ ТЯЖЕЛОГО ТЕЧЕНИЯ ТРАВМЫ ГОЛОВНОГО МОЗГА У БОЛЬНЫХ С ИСХОДНОЙ КЛИНИЧЕСКОЙ КАРТИНОЙ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ ЛЕГКОЙ СТЕПЕНИ

67

3.1. Общая характеристика пациентов с исходной клинической картиной легкой черепно-мозговой травмы и последующим 68 ухудшением состояния___________

3.1.1. Причины ухудшения состояния у пациентов с исходной клинической картиной черепно-мозговой травмы легкой 71 степени и последующим ухудшением состояния _

3.1.2. Исходы лечения пациентов с исходной клинической картиной черепно-мозговой травмы легкой степени и 76 последующим ухудшением состояния_

3.2. Причины и факторы риска ухудшения состояния у больных с исходной клинической картиной черепно-мозговой травмы легкой 77 степени_

3.2.1. Сравнение основной и контрольной групп пациентов ^ по полу ___

3.2.2. Сравнение основной и контрольной групп пациентов по ^ механизму травмы _

3.2.3. Сравнение основной и контрольной групп пациентов по ^ виду повреждения .............

3.2.4. Сравнение основной и контрольной групп пациентов по объему повреждения мозга, величине поперечной дислокации и 80 наличию аксиальной дислокации_

3.3. Заключение 82

ГЛАВА 4. ЗНАЧЕНИЕ КОНЦЕНТРАЦИИ ПРОТЕИНА 8-100р В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЧЕРЕПНО- 85

_______МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ ЛЕГКОЙ СТЕПЕНИ________________

4.1. Динамическое исследование концентрации протеина Б-!00)3 в 85

сыворотке крови больных с черепно-мозговой травмой легкой степени_____________

4.2. Зависимость концентрации протеина Б-ЮОр в сыворотке крови ^ от изменений на компьютерных томограммах_________

4.2.1.Зависимость концентрации протеина 8-100(1 в ^ сыворотке крови от вида и объема очага повреждения мозга__

4.3. Зависимость концентрации протеина 8-100(3 в сыворотке крови ^ от изменений на магнитно-резонансных томограммах____

4.4. Зависимость концентрации протеина Б-ЮОр в сыворотке крови ^ от изменений на электроэнцефалограмме_

4.5. Оценка точности диагностики ушиба головного мозга легкой степени с помощью концентрации протеина Б-ЮОр в сыворотке 94 крови и КТ головного мозга_

4.6. Заключение 97

99

ГЛАВА 5. ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ИСХОДА ЛЕЧЕНИЯ ЧЕРЕПНО-

МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ ТЯЖЕЛОЙ СТЕПЕНИ С ПОМОЩЬЮ ДИНАМИЧЕСКОЙ ОЦЕНКИ КОНЦЕНТРАЦИИ ПРОТЕИНА 8-100р

__________В^ШОРОТ^^ОВИ _

5.1. Динамическое исследование концентрации протеина 8-100р в сыворотке крови больных с черепно-мозговой травмой тяжелой 99 степени

5.2. Зависимость концентрации протеина S-ЮОр в сыворотке крови ^^ от вида повреждения мозга_

5.3. Зависимость концентрации протеина S-100ß в сыворотке крови ^^ ___ от объема очага повреждения мозга____________

5.4. Зависимость концентрации протеина S-ЮОр в сыворотке крови ^^ от уровня бодрствования________

5.5. Зависимость концентрации протеина S-ЮОр в сыворотке крови ^^ от величины поперечной дислокации___

5.6. Исходы лечения больных с черепно-мозговой травмой тяжелой ^^ степени_

5.6.1. Зависимость исхода лечения от исходной концентрации ^^ протеина S-100ß в сыворотке крови _ __ .................

5.6.2. Зависимость исхода лечения от динамики jq^ __концентрации протеина S-100ß в сыворотке крови_____

5.7. Заключение 117

ЗАКЛЮЧЕНИЕ_____________118

ВЫВОДЫ_^_~_123

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ____125

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ~ 127

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение маркера протеина S-100? в диагностике и прогнозировании исходов лечения черепно-мозговой травмы»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы

Черепно-мозговая травма (ЧМТ) остается одной из ведущих причин инвалидизации и летальности среди трудоспособного населения в индустриально развитых странах. Летальность у пострадавших с тяжелой ЧМТ, с наличием внутричерепных гематом и очагов ушиба мозга, сопровождающихся дислокационным синдромом, возрастает до 41-85%, а при крайне тяжелой ЧМТ достигает 90-100%. Поэтому повышение качества диагностики и лечения пострадавших с ЧМТ является на сегодняшний день одной из важнейших медико-социальных проблем [1,7-9].

ЧМТ легкой степени является ведущей в структуре черепно-мозговых повреждений. На ее долю приходится 75-90% всей травмы головного мозга. Дифференциальную диагностику сотрясения и ушиба мозга легкой степени проводят с помощью компьютерной (КТ) и магнитно-резонансной томографии (МРТ) головного мозга. При КТ при сотрясении мозга патологии вещества мозга не выявляют. Однако признаков повреждения вещества головного мозга при КТ так же не обнаруживают и у ряда больных с ушибом мозга легкой степени, что может быть связано с ограничениями разрешающей способности метода [3,5-7,9].

Высокая частота встречаемости ЧМТ, значительное количество неблагоприятных исходов, большой социально-экономический ущерб, наносимый ЧМТ, обусловливают постоянную актуальность проблемы поиска достоверных диагностических и прогностических критериев повреждения головного мозга.

В настоящее время для оценки степени первичного повреждения мозга при ЧМТ, а также для определения прогноза исходов лечения широко используют: оценочную шкалу уровня бодрствования - Шкалу комы Глазго (ШКГ), данные клинико-неврологического осмотра и методов нейро-мониторинга и нейровизуализации (КТ и МРТ головного мозга) [1,3,5-7,86].

Однако, как показал клинический опыт, применение этих клинических и инструментальных методов для диагностики, оценки эффективности лечения и прогнозирования исходов при ЧМТ недостаточно, так как, все эти методы позволяют только констатировать факт травмы и объем первичного повреждения мозга, тогда как их разрешающая способность не позволяет уточнить данные о биохимических процессах, которые были инициированы и могут прогрессировать в результате ЧМТ, о динамике их развития с течением времени, об эффективности проводимого лечения и т.д. Кроме того, оценка неврологического статуса и уровня бодрствования по ШКГ является невозможным у пациентов в состоянии выраженного алкогольного и наркотического опьянения, в медикаментозной седации и с нарушением слуха и речи. Методы нейровизуализации (КТ и МРТ) являются общепринятым «золотым стандартом» диагностики и прогноза ЧМТ, но их применение в ряде случаев может быть ограничено [1,21,66].

За последние два десятилетия в нейрохирургии возрос интерес к изучению биохимических маркеров повреждения вещества мозга, по концентрации которых возможно было бы не только определять степень первичного повреждения нервной ткани, но и оценивать патофизиологические процессы вторичного повреждения мозга, а также на основании динамического исследования прогнозировать возможный исход лечения [16].

В настоящее время, биохимические маркеры используют как дополнение к клинико-инструментальным методам и способам нейромониторинга и нейровизуализации для более точного определения тяжести первичных и вторичных повреждений мозга, эффективности проводимого лечения и оценки прогноза исходов лечения больных. Наиболее изученным и востребованным в клинической практике биохимическим маркером ЧМТ является протеин S-100р. В ходе многочисленных экспериментальных и клинических исследований установлено, что при структурных повреждениях головного мозга (инсульт, ЧМТ), разрушении глиальных клеток и нарушении целостности

гематоэнцефалического барьера (ГЭБ), уровень S-100(3 в цереброспинальной жидкости (ЦСЖ) и сыворотке периферической крови повышается [28,3738,48,70,75,78-80,88,90,96-97].

Поэтому оценка возможности применения протеина S-100(3 в диагностике легкой ЧМТ и прогнозировании исходов у пострадавших с ЧМТ тяжелой степени представляется актуальной задачей.

Цель исследования

Оценить возможность применения протеина S-100(3 в диагностике и прогнозировании исходов черепно-мозговой травмы.

Задачи исследования

1. Определить частоту, причины и факторы риска ухудшения состояния и развития тяжелого течения травмы головного мозга у больных с исходной клинической картиной легкой ЧМТ.

2. Определить возможность проведения дифференциальной диагностики между сотрясением головного мозга и его ушибом легкой степени с помощью оценки концентрации протеина S-100(3 в сыворотке крови.

3. Определить чувствительность и специфичность методов определения концентрации протеина S-100(3 в сыворотке крови и КТ головного мозга в диагностике ушиба головного мозга легкой степени посредством сравнительного анализа с МРТ головного мозга.

4. Определить изменения концентрации протеина S-100(3 в сыворотке крови у пациентов с тяжелой ЧМТ при разном уровне бодрствования, различных видах и объемах очагов повреждения мозга, величине поперечной дислокации.

5. Оценить значение динамики концентрации протеина S-100(3 в сыворотке крови для определения прогноза исходов лечения пострадавших с ЧМТ тяжелой степени.

Научная новизна

Выявлены частота, факторы риска и причины развития более тяжелых повреждений мозга при ЧМТ легкой степени.

Определена возможность проведения дифференциальной диагностики между сотрясением головного мозга и его ушибом с помощью оценки концентрации протеина 8-100|3 в сыворотке крови.

Проведена сравнительная оценка точности двух методов диагностики ушиба головного мозга легкой степени: путем определения концентрации протеина 8-100Р в сыворотке крови и КТ головного мозга.

Установлена зависимость концентрации протеина 8-100|3 в сыворотке крови от анатомической формы повреждения мозга у пациентов с ЧМТ тяжелой степени.

Выделены два типа динамики концентрации протеина 8-100Р в сыворотке крови у больных с ЧМТ тяжелой степени, позволяющие использовать маркер для прогноза исходов лечения: 1 тип - с постепенным снижением концентрацией протеина Б-ЮОр (благоприятный), 2 тип - с постепенным повышением концентрации протеина Б-ЮОр в сыворотке крови (неблагоприятный).

Практическая значимость

Установлены факторы риска и причины развития более тяжелых повреждений мозга у пациентов с исходной клинической картиной легкой ЧМТ, что позволит снизить частоту диагностических ошибок у этой категории больных.

Определена роль концентрации протеина Б-ЮОр в сыворотке крови в дифференциальной диагностике между сотрясением головного мозга и его ушибом у больных с ЧМТ легкой степени, что может иметь значение для определения тяжести повреждений в практике судебно-медицинской экспертизы.

Оценка концентрации протеина 8-100(3 в сыворотке крови является более чувствительным методом диагностики ушиба мозга легкой степени, чем КТ головного мозга.

Выявлена достоверная взаимосвязь концентрации протеина Б-100(3 в сыворотке крови от вида повреждения мозга у больных с ЧМТ тяжелой степени.

Выделены типы динамики концентрации протеина Б-ЮОр в сыворотке крови, которые целесообразно использовать для прогноза исходов лечения у больных с ЧМТ тяжелой степени.

Основные положения, выносимые на защиту

Частота диагностических ошибок при черепно-мозговой траве легкой степени составляет 2%.

Наиболее значимыми факторами риска ухудшения больных с исходной клинической картиной легкой ЧМТ являются: мужской пол, наличие алкогольного опьянения на момент поступления в стационар, наличие перелома костей черепа по данным рентгенографии, а также такие механизмы получения травмы, как падение с большой высоты и оружейные ранения головы.

Наиболее частыми причинами ухудшения состояния больных являются: эволюция очагов ушиба (63,6%), прогрессирование дислокационного синдрома при острых (27,3%) и подострых субдуральных гематомах большого объема (9,1%).

У пациентов с ЧМТ легкой степени нормальная концентрация протеина 8-100(3 в сыворотке крови свидетельствует о сотрясении головного мозга, повышенный - о его ушибе.

Определение концентрации протеина 8-100(3 в сыворотке крови является более чувствительным методом диагностики ушиба головного мозга легкой степени, чем КТ головного мозга.

У больных с ЧМТ тяжелой степени наиболее высокая концентрация протеина S-100J3 в сыворотке крови наблюдается при очагах ушиба головного мозга и диффузном аксональном повреждении.

Динамика концентрации протеина S-100(3 в сыворотке крови в течение трех суток с момента травмы может быть использована при определении прогноза исходов у больных с ЧМТ тяжелой степени: постепенное снижение концентрации протеина S-100(3 соответствует благоприятному исходу (1 тип динамики), при постепенном увеличении концентрации S-100(3 -неблагоприятному (2 тип динамики).

Внедрение в практику

Результаты исследования внедрены в практику работы отделения нейрохирургии для лечения больных с сосудистыми заболеваниями головного мозга, нейрохирургического отделения, отделения реанимации для нейрохирургических больных НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского.

По материалам диссертации опубликовано 9 работ в виде статей и тезисов в сборниках работ съездов, конференций, симпозиумов, 4 из них — в центральной печати.

Апробация работы

Основные положения работы доложены на:

Международной конференции «ICRAN-2010. Neurotrauma: basic and applied aspects» (г. Санкт-Петербург, 2010 г.),

Всероссийской научно-практической конференции «Поленовские чтения» (г. Санкт-Петербург, 2011 г. и 2012 г.),

I Съезде врачей неотложной медицины (г.Москва, 2012 г.),

-заседаниях проблемно-плановой комиссии №5 НИИ скорой помощи им. Н.В. Склифосовского «Заболевания и повреждения нервной системы» (Москва, 2012 г. и 2013 г.),

-Образовательном цикле «Хирургия и интенсивная терапия черепно-мозговой травмы» (г. Москва, 2013 г.)

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 137 страницах машинописного текста, иллюстрирована 42 рисунками, 9 таблицами. Работа состоит из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, охватывающего 14 работ отечественных и 86 зарубежных авторов (всего 100).

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

БИОХИМИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ЧЕРЕПНО-МОЗГОВОЙ ТРАВМЫ.

Черепно-мозговая травма (ЧМТ) остается одной из ведущих причин инвалидизации и летальности среди трудоспособного населения в индустриально развитых странах. Ежегодные затраты на диагностику, лечение и реабилитацию пострадавших с ЧМТ увеличиваются. Это связано, с одной стороны, с усовершенствованием новых способов нейровизуализации, внедрением в рутинную клиническую практику методов нейромониторинга, улучшением оснащения стационаров специализированным оборудованием и хирургическим инструментарием, а с другой стороны - с постоянным увеличением как общего количества пациентов с ЧМТ, так и числа пострадавших с ЧМТ тяжелой степени, диффузным аксональным повреждением (ДАП) и политравмой, значительно ухудшающей течение и исходы травмы головного мозга. Летальность у пострадавших с тяжелой ЧМТ, наличием внутричерепных гематом и очагов ушиба мозга, сопровождающихся дислокационным синдромом, возрастает до 41-85%, а при крайне тяжелой ЧМТ достигает 90-100%. Поэтому повышение качества диагностики и лечения пострадавших с ЧМТ является на сегодняшний день одной из важнейших медико-социальных проблем [1,7-9].

ЧМТ легкой степени является ведущей в структуре черепно-мозговых повреждений. На ее долю приходится 75-90% всей травмы головного мозга. К ЧМТ легкой степени относят сотрясение и ушиб головного мозга легкой степени. Легкая ЧМТ возникает вследствие воздействия травмирующей силы небольшой интенсивности и характеризуется кратковременной утратой сознания, умеренно выраженной общемозговой симптоматикой и легкими неврологическими расстройствами, которые регрессируют в течение

нескольких дней. Уровень бодрствования пострадавших к моменту поступления в стационар соответствует 13-15 баллам по ШКГ [1,7,9].

Дифференциальную диагностику сотрясения и ушиба мозга проводят с помощью компьютерной (КТ) и магнитно-резонансной томографии (МРТ) головного мозга. Сотрясение мозга - наиболее легкая клиническая форма ЧМТ, при которой отсутствуют структурные повреждения вещества мозга, а все изменения носят функциональный и обратимый характер. На томограммах при сотрясении мозга патологии вещества мозга не выявляют. Ушиб мозга характеризуется наличием морфологических очагов деструкции и структурных повреждений в коре и белом веществе мозга. Примерно у 50% пострадавших с ушибом мозга легкой степени при КТ в веществе мозга выявляют зону пониженной плотности - очаг гемангиопатической посттравматической ишемии - по В.В. Лебедеву и В.В. Крылову (2000) или ушиб I вида - по В.Н. Корниенко и соавт. (1987). У ряда больных с ушибом мозга легкой степени изменений на томограммах не обнаруживают, что может быть связано с ограничениями чувствительности метода, так как при патологоанатомических исследованиях у умерших вследствие других причин выявляют точечные диапедезные кровоизлияния в белом веществе мозга, для визуализации которых разрешающая способность КТ недостаточна [3-6,8,9].

Значительная распространенность ЧМТ, высокий процент неблагоприятных исходов, большой социально-экономический ущерб, наносимый ЧМТ, обусловливают постоянную актуальность проблемы поиска достоверных диагностических и прогностических критериев при повреждениях головного мозга. Прогнозирование течения и исходов тяжелой ЧМТ, на долю которой могут приходиться 10-25% среди всех случаев ЧМТ, может быть необходимым во время проведения медицинской сортировки пострадавших, при установлении очередности, сроков и объема оказания медицинской помощи и реабилитационных мероприятий. Разработка прогностических критериев необходима не только для констатации того или иного исхода ЧМТ,

но и для управления лечебно-диагностическим процессом, своевременного предупреждения осложнений, разработки новых методов лечения пострадавших. До настоящего времени сохраняется необходимость в поиске доступного, надежного и простого метода диагностики, с помощью которого возможно было бы не только определять тяжесть ЧМТ, прогнозировать исход травмы, но и оценивать эффективность проводимого лечения [1,10,96].

В настоящее время для оценки степени первичного повреждения мозга при ЧМТ, а также для определения прогноза исходов лечения широко используют: оценочную шкалу уровня бодрствования - ШКГ, данные клинико-неврологического осмотра и методов нейромониторинга и нейровизуализации (КТ и МРТ головного мозга) [1,4-6,86].

Однако по мере накопления клинического опыта в последние годы стало очевидным, что применение даже такого большого набора клинических и инструментальных методов для диагностики, оценки эффективности лечения и прогнозирования исходов при ЧМТ является недостаточным. И прежде всего потому, что эти методы, позволяют всего лишь констатировать факт травмы и объем первичного повреждения мозга, тогда как их разрешающая способность не позволяет уточнить - какие биохимические процессы были инициированы в результате ЧМТ, какой будет динамика их развития с течением времени, эффективно ли проводимое лечение и т.д. Кроме того, оценка неврологического статуса и применение ШКГ является невозможным у пациентов в состоянии выраженного алкогольного и наркотического опьянения, в медикаментозной седации и с нарушением слуха и речи. Методы нейровизуализации (КТ и МРТ) являются на сегодняшний день общепринятым «золотым стандартом» диагностики ЧМТ, но их применение в ряде случаев может быть ограничено [1, 21,66].

1.1. Биохимические маркеры повреждения нервной ткани.

Требования, предъявляемые к биохимическим маркерам.

За последние два десятилетия в нейрохирургии возрос интерес к изучению биохимических маркеров повреждения вещества мозга, по уровню которых возможно было бы определять степень первичного повреждения нервной ткани, оценивать патофизиологические процессы вторичного повреждения мозга, а также на основании динамического исследования прогнозировать возможный исход лечения.

Согласно определению, биохимические маркеры - это органические химические вещества, доступные для определения в биологических жидкостях и средах организма и отражающие нормальные или патологические процессы в клетках в ответ на повреждение или лекарственное воздействие. Основными требованиями, предъявляемыми к биохимическим маркерам, являются следующие:

- возможность определения в биологических средах больного,

- высокая чувствительность и органоспецифичность,

- отражение ряда патофизиологических биохимических процессов,

- хорошая воспроизводимость в экспериментальных условиях (на культурах клеток, животных моделях),

- экономическая доступность [16].

В нейротравматологии биохимические маркеры используют в дополнение к клинико-инструментальным методам и способам нейромониторинга и нейровизуализации для более точного определения тяжести первичных и вторичных повреждений мозга, эффективности проводимого лечения и оценки прогноза исходов лечения пострадавших. В настоящее время наиболее изученными и чаще всего применяемыми в клинической практике биохимическими маркерами ЧМТ являются: протеин Б-ЮОр, нейрон-специфическая енолаза, глиальный фибриллярный кислый протеин, протеин С-1аи, продукты распада спектрина и ряд маркеров апоптоза.

1.2. Протеин S-100p.

Изучение белков семейства S-100 берет свое начало в 1965 году, когда B.W. Moore впервые выделил из мозга быка специфичный белок, который получил название «S-100» из-за своей способности растворяться в 100% насыщенном растворе сульфата аммония при нейтральном pH (S - solution (англ.) - растворимый) [56,59]. Позднее, с развитием чувствительных иммунологических методов диагностики протеин S-100 был выделен из мозга отдельных видов млекопитающих, птиц, рептилий и человека, и установлена филогенетическая связь белков данной группы у всех позвоночных от рыб до человека [11-12,57-58,75].

Первоначально S-100 рассматривали как индивидуальный белок, но позднее на основании экспериментальных опытов с электрофорезом в присутствии ионов Са2+ в гелях с высокой концентрацией полиакриламида была установлена значительная гетерогенность белков S-100 и обнаружено, что в ткани мозга присутствует обширный спектр этих белков, различающихся хроматографически и реагирующих с антисывороткой к белкам S-100. В настоящее время описан 21 белок из группы S-100, каждый из которых кодируется единым генным кластером на хромосоме lq21 человека [2,23,65].

1.2.1. Физико-химические свойства протеина S-100ß.

Протеины S-100 являются глобулярными белками и принадлежат к семейству Са2+ -связывающих белков, различаясь между собой количеством Ca -связывающих центров (от 2 до 8). Белки S-100 в своем составе содержат большое количество дикарбоновых аминокислот - аспарагиновой и глутаминовой, что обусловливает их кислую природу и способность связываться с ионами металлов. Величина молекулярной массы белков S-100 варьирует от 21 до 26 кДа [11,75,79,93].

В тканях организма белки S-100 существуют в виде димера, состоящего из двух субъединиц: а - с молекулярной массой 10,4 кДа, и ß - с молекулярной

массой 10,5 кДа. Расшифрован полный аминокислотный состав и последовательность аминокислот в каждой субъединице. Установлено, что белок Б-ЮОрр присутствует в высоких концентрациях в глиальных и шванновских клетках (леммоцитах), Б-100 ар - в глиальных клетках, а Б-ЮОаа - в клетках мозгового слоя надпочечников, поджелудочной железы, в миоцитах, хондроцитах и адипоцитах. Белки Б-100, содержащие в своем составе р субъединицу (Б-ЮОрр и Б-100 аР) и наиболее специфичные для нервной ткани, получили в литературе общее название «протеин 8-100р» [11,44,75,79,96,93].

Содержание протеина 8-100р в центральной и периферической нервной системе значительно превышает концентрацию его в других тканях и составляет 2,8 мкг/мг (0,1-0,5 % от общего количества белка). В головном мозге белка 8-100р приблизительно в 104раз больше, чем в любом другом органе. Содержание Б-ЮОр в периферических тканях составляет не более 20 нг/мг. Наибольшее количество белка Б-ЮОр (около 85-90% от их общего содержания в нервной ткани) сосредоточено в астроцитах, 10-15% - расположено в нейронах, минимальное его количество определяется в олигодендроцитах [11,72,75,96,93].

Имеются работы, свидетельствующие о присутствии белка 8-100р в меланоцитах. Некоторые авторы докладывают, что содержание 8-100р в культурах некоторых злокачественных меланом даже в несколько раз выше, чем в культурах глиальных клеток. Чувствительность белка 8-100р при меланомах составляет 41-50%, специфичность - 95%. Также 8-100Р встречается в клетках других опухолей (глиомах и нейробластомах) [19,100]. Эти факты позволяют считать белок 8-100 не только нейроспецифическим, но, по-видимому, и маркером клеток, имеющих эктодермальное происхождение.

1.2.2. Роль и функция протеина Б-100р в клетке.

До настоящего времени роль и функция протеина 8-100р остаются малоизученными и являются объектом активного исследования биохимиков,

биологов и физиологов. Такие особенности белка 8-100(3, как видовая неспецифичность и способность к взаимодействию с ионами Са , свидетельствуют о важной роли данного протеина в регуляции различных внутриклеточных метаболических процессов: фосфорилировании белков, дифференциации клеток, их роста, восприятия и трансдукции сигналов, а также процессов апоптоза. Находясь в тесном структурно-функциональном сотрудничестве с органеллами клетки и входя в состав кальций-связывающих центров, белки 8-100р регулируют уровень внутриклеточного Са , что, в конечном итоге, играет важную роль в регуляции процессов возникновения и передачи нервного импульса. Белки 8-100(3 обладают высоким сродством не только к связыванию ионов Са2+, но также и что способствует связыванию протеина 8-100(3 с некоторыми 2п2+-содержащими белками-мишенями (факторами трансформации, протеинкиназами, белками цитоскелета и др.), изменяя тем самым состояние органелл клетки и влияя на экспрессию её генов [11,75,78-79,80].

Полагают, что 8-100(3 имеет прямое отношение к формированию и фиксации временных связей, приводящих к появлению устойчивых навыков, а также играет важную роль в осуществлении таких функций мозга, как привыкание, обучение, возникновение страха, хранение и воспроизведение информации [50].

Установлено, что протеин 8-100(3 может также высвобождаться в экстрацеллюлярное пространство и вызывать трофический или токсический эффект в зависимости от своей концентрации. Так, белок 8-100р может выступать в роли хемоаттрактанта для лейкоцитов и участвовать в составе иммунного ответа путем активации макрофагов (токсический эффект) [79,96].

Установлено, что добавление малых доз 8-100р в культуру нейронов обеспечивает поддержание их жизнеспособности, возможность образования и роста нейритов, тогда как в контрольных культурах клеток нейроны не

выживают. Это свидетельствует о наличии нейротрофических свойств у протеина S-100 [96].

In vitro и in vivo показано, что в очень малой концентрации экстрацеллюлярный S-100(3 действует на глиальные и нервные клетки как дифференцирующий фактор. В более высокой концентрации он индуцирует быстрое и значительное увеличение (в 2-3 раза) содержания внутриклеточного Са2+, что обусловливает цитостатическое и цитотоксическое действие. Предполагается, что конечный ответ нейронов на содержание S-100(3 в экстрацеллюлярном пространстве является фактором, зависимым от концентрации протеина и от стадии развития нервной клетки [79,96].

Недавно выявлена роль S-100(3 как посредника нейротрофического, регенераторного и фармакологического действия серотониновых рецепторов астроцитов. Установлено, что агонисты серотониновых рецепторов защищают культуру нейронов от эксайтотоксических и апоптических повреждений и усиливают высвобождение S-100(3 [79].

1.2.3. S-100fi - биохимический маркер повреждения нервной ткани.

Протеин S-100p является наиболее часто используемым маркером повреждения нервной ткани (глиальных клеток) при травме нервной системы, острых нарушениях мозгового кровообращения, различных нейродегенеративных, аутоиммунных и онкологических заболеваниях, а также в кардиохирургии при оценке степени повреждения нервной системы во время операций, проведенных в условиях искусственного кровообращения [50,79,89,96].

С помощью оценки уровня протеина S-lOOp в сыворотке крови и ЦСЖ установлено, что нарушение нормальных физиологических процессов в глии и структурное повреждение глиальных клеток имеет место при болезни Паркинсона, синдроме Дауна, болезни Альцгеймера, эпилепсии, гидроцефалии, остром нарушении мозгового кровообращения, нетравматическом

субарахноидальном кровоизлиянии, воспалительных заболеваниях центральной нервной системы, а также при системной красной волчанке и тяжелом атеросклеротическом поражении интимы аорты [50,72,79,89,96].

Показано, что продукты экспрессии S-100 генов оказываются вовлеченными в аутоиммунные заболевания и канцерогенез. Так, высокое содержание белка S-100ß было обнаружено в тканях некоторых опухолей (нейробластом), при нейрофиброматозе I и II типов, а также в сыворотке крови при карциноме почек и опухоли гортани. Обосновано исследование уровня S-100ß в периферической крови как маркера метастазирования меланомы и меланоцитных опухолей [79,96,100].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Сосновский, Евгений Александрович, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Доказательная нейротравматология [Текст] / A.A. Потапов, Л.Б. Лихтерман, В.Л. Зельман [и др.]. -М.: Антидор, 2003. - 517 с.

2. К вопросу о гетерогенности нейроспецифического S-100 белка [Текст] / Е.И. Малецкая, Т.К. Бахтина, М.В. Высоцкий, С.М. Свиридов // Биохимия. - 1976. - Т. 41, № 1. - С. 40-49.

3. Компьютерная томография в неотложной нейрохирургии [Текст] / В.В. Лебедев, В.В. Крылов, Т.П. Тиссен, В.М. Халчевский. - М.: Медицина, 2005.- 360с.

4. Компьютерная томография мозга [Текст] / Н.В. Верещагин, Л.К. Брагина, С.Б. Вавилов, Г.Я. Левина. - М.: Медицина, 1986. - 256 с.

5. Корниенко, В.Н. Диагностическая радиология [Текст] / В.Н. Корниенко, И.Н. Пронин. - М.: Издательство ИП «Андреева Т.М.», 2006. -1327 с.

6. Корниенко, В.Н. Компьютерная томография в диагностике черепно-мозговой травмы [Текст] / В.Н. Корниенко, Н.Я. Васин, В.А. Кузьменко. - М.: Медицина, 1987. - 288 с.

7. Лебедев, В.В. Неотложная нейрохирургия: рук-во для врачей [Текст] / В.В. Лебедев, В.В. Крылов. - М.: Медицина, 2000. - 568 е.: ил.

8. Лекции по черепно-мозговой травме [Текст] / под ред. В.В. Крылова. - М.: Медицина, 2010.- 320 с.

9. Лихтерман, Л.Б. Классификация черепно-мозговой травмы [Текст] / Л.Б. Лихтерман, A.A. Потапов // Клиническое руководство по черепно-мозговой травме. - М.: Антидор, 1998. - Т.1.- С. 47-128.

10. Нейропротекция: модели, механизмы, терапия [Текст] / пер. с англ. под ред. М. Бэра. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2011. - 429 с.

11. Никандров, В.Н. Протеин S-100: структурно-функциональные свойства и роль в нервной ткани [Текст] / В.Н. Никандров, Е.В. Чаплинская // Бюпол1мери i клггина. - 2005. - Т.21, № 1. - С. 12-27.

12. Полетаев, А.Б. О гетерогенности мозгоспецифических белков группы S-100 [Текст] / А.Б. Полетаев, Т.П. Куприяненко // Биохимия. - 1980. -Т. 45, №12. - С. 2153-2157.

13. Прогностическое значение стволового дислокационного синдрома у пострадавших с тяжелой черепно-мозговой травмой [Текст] / А.Э. Талыпов, Ю.В. Пурас, П.В. Волков, В.В. Крылов // Материалы IV съезда нейрохирургов России, г. Москва, 18-22 июня 2006 г.- М., 2006. - С. 374.

14. Реброва, О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ Statistica [Текст] / О.Ю. Реброва. -М.: МедиаСфера, 2003. - 312 с.

15. A sensitive ELISA for glial fibrillary acidic protein: application in CSF of adults [Text] / L.E. Rosengren, C. Wikkelso, L. Hagberg [et al.] // J. Neurosci. Methods. - 1994. - Vol. 51, N.2. - P. 197-204.

16. Biomarkers and surrogate endpoints: preferred definitions and conceptual framework [Text] / Biomarkers Definitions Working Group // Clin. Pharmacol. Ther. - 2001. - Vol. 69, N.3. - C. 89-95.

17. Brain spectrin (240/235A): a novel astrocyte specific spectrin isoform [Text] / S.R. Goodman, L.L. Lopresti, B.M. Riederer [et al.] // Brain. Res. Bull. -1989. - Vol. 23, N.4-5. - P. 311 -316.

18. Caspase-3 activity is present in cerebrospinal fluid from patients with traumatic brain injury [Text] / L. Harter, M. Keel, H. Hentze [et al.] // J. Neuroimmunol. -2001. - Vol. 121, N. 1-2. - P. 76-78.

19. Characterization of microglia/macrophages in gliomas developed in S-ЮОр-v-erbB transgenic rats [Text] / A. Sasaki, H. Yokoo, Y. Tanaka [et al.] // Neuropathology.- 2013.-Vol.33, N.5.-P.505-514.

20. Chowdhury, I. Current concepts in apoptosis: the physiological suicide program revisited [Text] /1. Chowdhury, B. Tharakan, G.K. Bhat // Cell. Mol. Biol. Lett. - 2006. - Vol. 11. - P. 506-525.

21. Clinical predictors and neuropsychological outcome in severe traumatic brain injury patients [Text] / R. Formisano, G.A. Carlesimo, M. Sabbadini [et al.] // Acta Neurochir. (Wien). - 2004. - Vol. 146. - P. 457-462.

22. Clinical significance of alpha II-spectrin breakdown products in cerebrospinal fluid after severe traumatic brain injury [Text] / J.A. Pineda, S.B. Lewis, A.B. Valadka [et al.] // J. Neurotrauma. - 2007. - Vol. 24, N.2. - P. 354-366.

23. Clustered organization of S-100 genes in human and mouse [Text] / K. Ridinger, E.C. Jig, F.K. Niggli [et al.] // Biochim. Biophys Acta. - 1998. - Vol. 1448, N.2. - P. 254-263.

24. Comparison of clinical, radiologic, and serum marker as prognostic factors after severe head injury [Text] / C. Woertgen, R.D. Rothoerl, C. Metz, A. Brawanski // J. Trauma. - 1999. - Vol. 47. - P. 1126-1130.

25. C-tau biomarker of neuronal damage in severe brain injured patients: association with elevated intracranial pressure and clinical [Text] / F.P. Zemlan, E.C. Jauch, J.J. Mulchahey [et al.] // Brain Res. - 2002. - Vol. 947, N.l. - P. 131-139.

26. Cytochrome c, a biomarker of apoptosis, is increased in cerebrospinal fluid from infants with inflicted brain injury from child abuse [Text] / M.A. Satchell, Y. Lay, P.M. Kochanek [et al.] // J. Cereb. Blood. Flow. Metab. - 2005. - Vol. 25, N.7.-P. 919-927.

27. Detectable concentrations of Fas ligand in cerebrospinal fluid after severe head injury [Text] / W. Ertel, M. Keel, R. Stocker [et al.] // J. Neuroimmunol. - 1997. - Vol. 80, N.l-2. - P. 93-96.

28. Detection of traumatic brain injury with magnetic resonance imaging and S-100B protein in children, despite normal computed tomography of the brain [Text] / J.I. Akhtar, R.M. Spear, M.O. Senac [et al.] // Pediatr. Crit. Care Med. - 2003.- Vol.

4, N.3.-P. 322-326.

29. Diagnostic significance of serum neuron-specific enolase and myelin basic protein assay in patients with acute head injury [Text] / Y. Yamazaki, K. Yada,

5. Morii [et al.] // Surg. Neurol. - 1995. - Vol. 43, N.3. - P. 267-270.

30. Discordant temporal patterns of SlOObeta and cleaved tau protein elevation after head injury: a pilot study [Text] / D.A. Chatfield, F.P. Zemlan, D.J. Day [et al.] // Br. J. Neurosurg. - 2002. - Vol. 16, N.5. - P. 471-476.

31. Ealy identification of secondary brain damage in subarachoid hemorrhage: a role for glial fibrillary acidic protein [Text] / A. Petzold, G. Keir, M. Kerr [et al.] // J. Neurotrauma. - 2006. - Vol. 23, N.7. - P. 1179-1184.

32. Elevated serum S-100B protein as a predictor of failure to short-term return to work or activities after mild head injury [Text] / G. Stranjalis, S. Korfias, A. Papadimitriou [et al.] // J. Neurotrauma. - 2004.- Vol. 21, N.8. - P. 1070-1075.

33. Elevation of neuron-specific enolase in serum and cerebrospinal fluid of early stage Creutzfeldt-Jakob disease [Text] /1. Kohira, T. Tsuji, H. Ishizu [et al.] // Acta Neurol. Scand. - 2000. - Vol. 102, N.6- P. 385-387.

34. Eng, L.F. Glial fibrillary acidic protein: GFAP-thirty one years (19692000) [Text] / L.F. Eng, R.S. Ghirnikar, Y.L. Lee // Neurochem. Res. - 2000. - Vol. 25, N.9-10. - P. 1439-1451.

35. Evaluation of apoptosis in cerebrospinal fluid of patients with severe head injury [Text] / M. Uzan, H. Erman, T. Tanriverdi [et al.] // Acta Neurochir. (Wien).-2006.-Vol. 148, N.l 1. - P. 1157-1164.

36. Evaluation of relevance in concussion and damage of health by monitoring of neuron specific enolase and S-100b protein [Text] / D. Vajtr, R. Prusa, J. Kukacka [et al.] // Soud. Lek. - 2007. - Vol. 52. - P. 43-46.

37. Evaluation of S-100B as a specific marker for neuronal damage due to minor head trauma [Text] / P. Biberthaler, T. Mussack, E. Wiedemann [et al.] // World J. Surg. - 2001.- Vol. 25, N.l. - P. 93-97.

38. GFAP versus S100B in serum after traumatic brain injury: relationship to brain damage and outcome [Text] / L.E. Pelinka, A. Kroepfl, M. Leixnering [et al.] //J. Neurotrauma. - 2004.-Vol. 21, N.l 1,-P. 1553-1561.

39. Glial and neuronal proteins in serum predict outcome after severe traumatic brain injury [Text] / P.E. Vos, K.J. Lamers, J.C. Hendriks [et al.] // Neurology. -2004. - Vol. 62, N.8. - P. 1303-1310.

40. Glial fibrillary acidic protein in serum after traumatic brain injury and multiple trauma [Text] / L.E. Pelinka, A. Kroepfl, R. Schmidhammer [et al.] // J. Trauma. - 2004. - Vol. 57, N.5. - P. 1006-1012.

41. Harris, A.S. The calmodulin-binding site in alpha-fodrin is near the calcium-dependent protease-I cleavage site [Text] / A.S. Harris, D.E. Croall, J.S. Morrow// J. Bio Chem. - 1988. - Vol. 263, N.30. - P. 15754-15761.

42. High serum S100B levels for trauma patients without head injuries [Text] / R.E. Anderson, L.O. Hansson, O. Nilsson [et al.] // Neurosurgery. - 2001. -Vol. 48.-P. 1255-1258.

43. Immunohistochemical study of calpain-mediated breakdown products to alpha-spectrin following controlled cortical impact injury in the rat [Text] / J.K. Newcomb, A. Kampfl, R.M. Posmantur [et al.] // J. Neurotrauma. - 1997. - Vol. 14, N.6.-P. 369-383.

44. Increased levels of serum S100B protein in critically ill patients without brain injury [Text] / C. Routsi, E. Stamataki, S. Nanas [et al.] // Shock. - 2006. - Vol. 26, N.l.-P. 20-24.

45. Increased serum creatine kinase BB and neuron specific enolase following head injury indicates brain damage [Text] / I.M. Skogseid, H.K. Nordby, P. Urdal [et al.] // Acta Neurochir. (Wien). - 1992. - Vol. 115. - P. 106-111.

46. Increased serum-GFAP in patients with severe traumatic brain injury is related to outcome [Text] / K. Nylen, M. Ost, L.Z. Csajbok [et al.] // J. Neurol. Sei. -2006.-Vol. 240, N.l-2. - P. 85-91.

47. Increases in Bcl-2 and cleavage of caspase-1 and caspase-3 in human brain after head injury [Text] / R.S. Clark, P.M. Kochanek, M. Chen [et al.] // FASEB J.-1999.-Vol. 13,N.8.-P. 813-821.

48. Ingebrigtsen, T. Biochemical serum markers for brain damage: a short review with emphasis on clinical utility in mild head injury [Text] / T. Ingebrigtsen, B. Romner // Restor. Neurol. Neurosci. - 2003. - Vol. 21. - P. 171-176.

49. Kosik, K.S. The molecular and cellular biology of tau [Text] / K.S. Kosik// Brain Pathol. - 1993. - Vol.3, N.l. - P. 39-43.

50. Marks, A. SI00 protein and Down syndrome [Text] / A. Marks, R. Allore //Bioessays. - 1990. - Vol. 12,N.8. - P. 381-383.

51. McKeating, E.G. Relationship of neuron specific enolase and protein S-100 concentrations in systemic and jugular venous serum to injury severity and outcome after traumatic brain injury [Text] / E.G. McKeating, P.J. Andrews, L. Mascia // Acta Neurochir. Suppl. - 1998. - Vol. 71. - P. 117-119.

52. Measurement of glial fibrillary acidic protein in blood: an analytical method [Text] / W.J. Van Geel, H.P. de Reus, H. Nijzing [et al.] // Clin. Chim. Acta. -2002. - Vol. 326, N.l-2. - P. 151-154.

53. Measurement of glial fibrillary acidic protein in human blood: analytical method and preliminary clinical results [Text] / U. Missler, M. Wiesmann, G. Wittmann [et al.] // Clin. Chem. - 1999. - Vol. 45, N.l. - P. 138-141.

54. Mechanisms of calpain proteolysis following traumatic brain injury: implications for pathology and therapy: a review and update [Text] / A. Kampfl, R.M. Posmantur, X. Zhao [et al.] // J. Neurotrauma. - 1997. - Vol. 14, N.3. - P. 121134.

55. Minocycline inhibits caspase-1 and caspase-3 expression and delays mortality in a transgenic mouse model of Huntington disease [Text] / M. Chen, V.O. Ona, M. Li [et al.] // Nat. Med. - 2000. - Vol. 6, N.7. - P. 797-801.

56. Moore, B.W. A soluble protein characteristic of the nervous system [Text] / B.W. Moore // Biochem. Biophys. Res. Comm. - 1965. - Vol. 19. - P. 739744.

57. Moore, B.W. Brain specific proteins [Text] / B.W. Moore // Proteins of the nervous system / ed. D. J. Schreider.—New York: Raven Press, 1973. - P. 1-12.

58. Moore, B.W. Assay and regional distribution of a soluble protein characteristic of the nervous system [Text] / B.W. Moore, V. Perez, M. Cehring // J. Neurochem. - 1968. - Vol. 15, N.4. - P. 265 -272.

59. Moore, B.W. Chromatographic and electrophoretic fractionation of soluble proteins of brain and liver [Text] / B.W. Moore, D. McGregor // J. Biol. Chem. - 1965. - Vol. 240, N.4. - P. 1647-1653.

60. Neuron-specific enolase as an aid to outcome prediction in head injury [Text] / S.A. Ross, R.T. Cunningham, C.F. Johnston [et al.] // Br. J. Neurosurg. -1996. - Vol. 10, N.5. - P. 471-476.

61. Neuron-specific enolase concentrations in serum and cerebrospinal fluid in patients with no previous history of neurological disorder[Text] / O. Nygaard, B. Langbakk, B. Romner [et al.] // Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1998. - Vol. 58. - P. 183-186.

62. Neuron-specific- enolase is increased in plasma after hemorrhagic shock and after bilateral femur fracture without traumatic brain injury in the rat [Text] / L.E. Pelinka, M. Jafarmadar, H. Redl [et al.] // Shock. - 2004. - Vol. 22. - P. 88-91.

63. Neuron-specific enolase, a marker of acute neuronal injury, is increased in complex partial status epilepticus [Text] / C.M. De Giorgio, P.S. Gott, A.L. Rabinowicz [et al.] // Epilepsia. - 1996. - Vol. 37, N.7. - P. 606-609.

64. Nonspecific increase of systemic neuron-specific enolase after trauma: clinical and experimental findings [Text] / L.E. Pelinka, H. Hertz, W. Mauritz [et al.] // Shock. - 2005. - Vol. 24. - P. 119-123.

65. Physical mapping of a functional cluster of epidermal differentiation genes on chromosome lq21 [Text] / A. Volz, B.P. Korge, J.C. Compton [et al.] // Genomics. - 1993. - Vol. 18, N.l. - P. 92-99.

66. Predictive value of Glasgow Coma Scale after brain trauma: change in trend over the past ten years [Text] / M. Balestreri, M. Czosnyka, D.A. Chatfield [et al.] // J. Neurol. Neurosurg. Psychiatry. - 2004. - Vol. 75. - P. 161-162.

67. Prognostic value of serum neuronspecific enolase levels after head injury [Text] / R. Ergun, U. Bostanci, G. Akdemir [et al.] // Neurol. Res. - 1998. - Vol. 20. -P. 418-420.

68. Prolonged intrathecal release of soluble Fas following severe traumatic brain injury in humans [Text] / P.M. Lenzlinger, A. Marx, O. Trentz [et al.] // J. Neuroimmunol. - 2002. - Vol. 122, N.l-2. - P. 167-174.

69. Rothoerl, R.D. S-100 serum levels and outcome after severe head injury [Text] / R.D. Rothoerl, C. Woertgen, A. Brawanski // Acta Neurochir. Suppl. (Wien). - 2000. - Vol. 76. - P. 97-100.

70. SI00 and cognitive impairment after mild traumatic brain injury [Text] / C.N. De Boussard, A. Lundin, D. Karlstedt [et al.] // J. Rehabil. Med. - 2005.- Vol. 37.-P. 53-57.

71. S-100B and neuron-specific enolase in serum of mild traumatic brain injury patients. A comparison with health controls [Text] / Jr. De Kruijk, P. Leffers, P. Menheere [et al.] // Acta Neurol. Scand. - 2001. - Vol. 103. - P. 175-179.

72. S100B in brain damage and neurodegeneration [Text] / M. Rothermundt, M. Peters, J.H. Prehn [et al.] // Microsc. Res. Tech. - 2003. - Vol. 60, N.6. - P. 614632.

73. S100B serum level predicts computed tomography findings after minor head injury [Text] / K. Muller, W. Townend, N. Biasca [et al.] // J. Trauma. - 2007.-Vol. 62, N.6. - P. 1452-1452.

74. Savola, O. Early predictors of post-concussion symptoms in patients with mild head injury [Text] / O. Savola, M. Hillbom // Eur. J. Neurol. - 2003. - Vol. 10.-P. 175-181.

75. Sedaghat, F. SI00 protein family and its application in clinical practice [Text] / F. Sedaghat, A. Notopoulos // Hippokratia. - 2008. - Vol. 12, N.4. - P. 198204.

76. Serum S-100B and eleaved-tau are poor predictors of long-term outcome after mild traumatic brain injury [Text] / J.J. Bazarian, F.P. Zemlan, S. Mookerjee [et al.] // Brain. Inj. - 2006. - Vol. 20, N.7. - P. 759-765.

77. Serum S-100B protein and neuron-specific enolase after traumatic brain injury [Text] / S. Sawauchi, K. Taya, S. Murakami [et al.] // No Shinkei. Geka. -2005. - Vol. 33. - P. 1073-1080.

78. Serum S-100B protein as a biochemical marker of brain injury: a review of current concepts [Text] / S. Korfias, G. Stranjalis, A. Papadimitriou [et al.] // Curr. Med. Chem. - 2006. - Vol. 13,N.30.-P. 3719-3731.

79. Serum S-100B protein as a molecular marker in severe traumatic brain injury [Text] / A. Raabe, O. Kopetsch, A. Woszczyk [et al.] // Restor. Neurol. Neurosci. - 2003. - Vol. 21, N.3-4. - P. 159-169.

80. Serum S-100B protein monitoring in patients with severe traumatic brain injury [Text] / S. Korfias, G. Stranjalis, E. Boviatsis [et al.] // Int. Care Med. - 2007. -Vol. 33.-P.255-260.

81. Shaw, G.J. Serum cleaved tau protein levels and clinical outcome in adult patients with closed head injury [Text] / G.J. Shaw, E.C. Jauch, F.P. Zemlan // Ann. Emerg. Med. - 2002. - Vol. 39, N.3. - P. 254-257.

82. Spectrin breakdown products in the cerebrospinal fluid in severe head injury: preliminary observations [Text] / O. Farkas, B. Polgar, J. Szekeres-Bartho [et al.] // Acta Neurochir. (Wien). - 2005. - Vol. 147, N.8. - P. 855-861.

83. Stoica, B.A. Cell death mechanisms and modulation in traumatic brain injury [Text] / B.A. Stoica, A.I. Faden // Neurotherapeut. - 2010. - Vol. 7, N.l. - P. 3-12.

84. Studies of the brain specificity of S100B and neuron-specific enolase (NSE) in blood serum of acute care patients [Text] / T.O. Kleine, L. Benes, P. Zofel [et al.] // Brain Res. Bull. - 2003. - Vol. 61, N.3. - P. 265-279.

85. Sumultaneous degradation of alpha II- and beta II-spectrin by caspase 3 (CPP32) in apoptotic cells [Text] / K.K. Wang, R. Posmantur, R. Nath [et al.] // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273, N.35. - P. 22490-22497.

86. Teasdale, G. Assessment of coma and impaired consciousness. A practical scale [Text] / G. Teasdale, B. Jennett // Lancet. - 1974. - Vol. 13, N.2. - P. 81-84.

87. Temporal profile and cell subtype distribution of activated caspase-3 following experimental traumatic brain injury [Text] / R. Beer, G. Franz, A. Srinivasan [et al.] // J. Neurochem. - 2000. - Vol. 75, N.3. - P. 1264-1273.

88. Temporal profile of release of neurobiochemical markers of brain damage after traumatic brain injury is associated with intracranial pathology as demonstrated in cranial computerized tomography [Text] / M. Hermann, S. Jost, S. Kutz [et al.] // J. Neurotrauma. - 2000.- Vol. 17, N.2. - P. 113-122.

89. The appearance of S-100 protein in serum during and immediately after cardiopulmonary bypass surgery: a possible marker for cerebral injury [Text] / S. Blomquist, P. Johnsson, C. Luhrs [et al.] // J. Cardiothorac. Vase. Anesth. - 1997. -Vol. 11,N.6.-P. 699-703.

90. The clinical value of serum S-100 protein measurements in minor head injury: a Scandinavian multicentre study [Text] / T. Ingebrigtsen, B. Romner, S. Marup-Jensen [et al.] //Brain. Inj. - 2000. - Vol. 14, N.12. -P. 1047-1055.

91. The diagnosis of stupor and coma [Text] / J.B. Posner, C.B. Saper, N.D. Schiff, F. Plum.- 4th ed. - Oxford University Press., 2007.

92. The neuronal microtubule-associated protein tau is a substrate for caspase-3 and an effector of apoptosis [Text] / L. Fasulo, G. Ugolini, M. Visintin [et al.] // J. Neurochem. - 2000. - Vol. 75, N.2. - P. 624-633.

93. The SI00 protein family: history, function, and expression [Text] / D.B. Zimmer, E.H. Cornwall, A. Landar [et al.] // Brain Res. Bull. - 1995. - Vol. 37, N.4. -P. 417-429.

94. Tikka, T.M. Minocycline provides neuroprotection against N-methyl-D-aspartate neurotoxicity by inhibiting microglia [Text] / T.M. Tikka, J.E. Koistinaho // J. Immunol. - 2001. - Vol. 166, N. 12. - P. 7527-7533.

95. Traumatic brain damage: serum S-100 protein measurements related to neuroradiological findings [Text] / B. Romner, T. Ingebrigtsen, P. Kongstad, S.E. Borgesen // J. Neurotrauma. - 2000. - Vol. 17, N.8. - P. 641-647.

96. Update on protein biomarkers in traumatic brain injury with emphasis on clinical use in adults and pediatrics [Text] / E. Kovesdi, J. Luckl, P. Bukovics [et al.] //Acta Neurochir.-2010.-Vol. 152.-P. 1-17.

97. Woertgen, C. Comparison of serial S-100 and NSE serum measurements after severe head injury [Text] / C. Woertgen, R.D. Rothoerl, M. Holzschuh // Acta Neurochir. (Wien). - 1997. - Vol. 139. - P. 1161-1164.

98. Woertgen, C. Glial and neuronal serum markers after controlled cortical impact injury in the rat [Text] / C. Woertgen, R.D. Rothoerl, M. Wiesmann // Acta Neurochir. Suppl (Wien). - 2002. - Vol. 81. - P. 205-207.

99. Yakovlev, A.G. Caspase-dependent apoptotic pathways in CNS injury [Text] / A.G. Yakovlev, A.I. Faden // Mol. Neurobiol. - 2001. - Vol. 24, N.l-3. - P. 131-144.

100. Zimmer, D.B. In vivo screening of S100B inhibitors for melanoma therapy [Text] / D.B. Zimmer, R.G. Lapidus, D.J. Weber // Methods Mol. Biol. -2013.-Vol. 963.-P. 303-317.