Применение маннаноолигосахаридной пребиотической добавки "Кливеролак" для коррекции микробиоценоза кишечника и стимуляции неспецифической резистентности цыплят тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат биологических наук Чупахина, Наталия Александровна

• Чупахина, Наталия Александровна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Чупахина, Наталия Александровна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Кишечная микрофлора и ее функции

1.2. Микрофлора кишечника птицы

1.3. Меры коррекции микробиоценоза кишечника

1.4 Пребиотики

1.4.1. Характеристика пребиотиков, их функции

1.4.2. Виды пребиотиков и механизм их действия

1.4.3. Ферментативный синтез олигосахаридов

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.2. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИИ

2.2.1.Определение массовой доли маннаноолигосахаридов в биомассе дрожжей К1иууеготусея \actis

2.2.2. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на микробиоценоз кишечника цыплят с лекарственным дисбактериозом

2.2.2.1. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» в количестве 0,1% к основному рациону на микробиоценоз кишечника цыплят с лекарственным дисбактериозом

2.2.2.2. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» в количестве 0,5% к основному рациону на микробиоценоз кишечника цыплят с лекарственным дисбактериозом

2.2.2.3. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» в количестве 1,0% к основному рациону на микробиоценоз кишечника цыплят с лекарственным дисбактериозом

2.2.3. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на факторы неспецифической резистентности цыплят-бройлеров кросса «Смена-2»

2.2.3.1. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на лизо-цимную активность сыворотки крови цыплят-бройлеров

2.2.3.2. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на бактерицидную активность сыворотки крови цыплят-бройлеров

2.2.3.3. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на фагоцитарную активность крови цыплят-бройлеров

2.2.4. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на содержание общего белка в крови цыплят-бройлеров

2.2.5. Определение антиадгезивных свойств маннаноолигосахаридов

2.2.6. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на прирост живой массы цыплят-бройлеров кросса «Смена-2» промышленного стада

2.2.7. Влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на сохранность цыплят-бройлеров

2.2.8.Стандартизация показателей качества пребиотической добавки «Кливеролак», полученной из клеточных стенок дрожжей Kluyveromyces ¡actis

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

4. ВЫВОДЫ

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение маннаноолигосахаридной пребиотической добавки "Кливеролак" для коррекции микробиоценоза кишечника и стимуляции неспецифической резистентности цыплят»

Актуальность темы. За последние два десятилетия в промышленном птицеводстве приобрели актуальность проблемы, связанные со снижением колонизационной резистентности слизистой оболочки кишечника и факторов естественной резистентности, ответственных за поддержание физиологического статуса организма птицы. Широкое применение антибиотиков, несбалансированное кормление и технологический стресс обуславливают нарушение сложившегося микробного равновесия и провоцируют развитие дисбак-териозной диареи [18, 32]. Низкая естественная резистентность высокопродуктивных кроссов птицы способствует дессиминации представителей условно-патогенной микрофлоры желудочно-кишечного тракта в органы и ткани птицы, провоцирует вспышки секундарных инфекций, что в конечном итоге наносит экономический ущерб отрасли и снижает безопасность продукции птицеводства для здоровья человека [80].

Одним из перспективных и новых направлений в решении проблемы лечения и профилактики дисбактериозной диареи, коррекции микробиоценоза желудочно-кишечного тракта и повышения сохранности молодняка сельскохозяйственных животных и птицы является создание пребиотиков — кормовых добавок, использование которых повышает уровень колонизационной резистентности слизистой оболочки кишечника за счет стимуляции роста молочнокислых бактерий и бифидобактерий [76,95, 99].

Понятие «пребиотики» употребляется для обозначения кормовых веществ или диетических добавок, не абсорбируемых в кишечнике, но благотворно влияющих на организм хозяина путем селективной стимуляции роста или активизации метаболизма у полезных представителей кишечной микрофлоры [107].

В настоящее время выделяют несколько классов неперевариваемых оли-госахаридов, относящихся к пребиотикам: коротко- и среднецепочечные оли-гомеры из остатков фруктозы - фруктоолигосахариды, фруктаны, в том числе инулин; из остатков глюкозы - глюкоолигосахариды, изомальтоолигоса-хариды, глюканы и декстраны; галактозы - галактоолигосахариды; лактозы -трансгалактоолигосахариды, лактосахароза, лактулоза; ксилозы - ксилооли-госахароза; маннозы — маннаноолигосахариды, а также олигосахариды, происходящие из растительных клеточных стенок, бактериальных клеточных стенок, бобов сои, молочной сыворотки [101, 124].

Наиболее изученными на сегодняшний день пребиотиками являются растворимые фруктоолигосахариды. Применение фруктоолигосахаридов началось в Японии в 80-х гг. в качестве сахарозаменителей, но в дальнейшем, благодаря функциональным свойствам, они приобрели более существенное значение [84, 119,126].

Интерес к использованию пребиотиков в качестве компонентов корма особенно проявляется в странах с развитым промышленным птицеводством, таких как США, Япония, Нидерланды [118,127, 135].

Интенсивно изучаются разные аспекты неперевариваемых олигосахари-дов: структурно-химический анализ; метаболизация интестинальной микрофлорой; воздействие на метаболизм липидов; воздействие на растущих животных; различия между неперевариваемыми олигосахаридами, пищевыми волокнами и пробиотиками как таковыми, а также перспективы пребиотиков.

Из всех известных групп пребиотических добавок до настоящего времени остаются мало изученными свойства таких пребиотиков, как маннаноолигосахариды, которые являются компонентом клеточной стенки дрожжей Saccharomyces cerevisiae, Kluyveromyces lactis и некоторых других.

Американской фирмой «Оллтех» разработан пребиотический маннано-олигосодержащий препарат «Био-МОС» [92, 154]. Источником маннанооли-госахаридов в этом препарате служит клеточная стенка дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Добавление препарата в диету цыплятам-бройлерам повышало сохранность птицы, способствовало увеличению привесов, предотвращало колонизацию кишечника сальмонеллами [131, 146,147].

Известно, что основными компонентами дрожжевой клеточной стенки являются маннан (30%), глюкан (30%) и протеин (12,5%). Маннаноолигоса-харидные цепи клеточных стенок дрожжей устойчивы к воздействию пищеварительных ферментов, что позволяет им не перевариваться в тонком отделе кишечника и сохранять биологическую активность в толстом кишечнике [35, 38, 43, 109]. Считается, что маннаноолигосахариды обладают способностью связывать маннозочувствительные рецепторы условно-патогенных бактерий и этим предупреждать колонизацию ими желудочно-кишечного тракта [120]. Помимо этого клеточная стенка дрожжей обладает способностью к антигенной стимуляции [103]. Таким образом, маннаноолигосахариды препятствуют колонизации патогенных микроорганизмов в кишечнике, стимулируют иммунный ответ, обеспечивают полезную микрофлору хозяина питательными веществами, недоступными для патогенных микроорганизмов [44, 125].

Несмотря на то, что имеются данные о позитивном влиянии пребиотиче-ских добавок на сохранность птицы, привесы живой массы, кишечный микробиоценоз, отмечается недостаток опубликованных результатов испытаний, показывающих эффективность применения пребиотиков для профилактики или лечения желудочно-кишечных болезней животных, связанных с нарушениями микроэкологии желудочно-кишечного тракта [93, 143]. Недостаточно изучена эффективность использования маннаноолигосахаридов в птицеводстве для повышения резистентности организма цыплят. Не изучены механизмы действия маннаноолигосахаридов, обеспечивающие защиту слизистой оболочки кишечника от избыточной колонизации условно-патогенной микрофлорой. В настоящее время в нашей стране на ветеринарном рынке нет отечественных препаратов-пребиотиков на основе маннаноолигосахаридов. Необходимость изучения этих вопросов является очевидной, так как они не только дополнят имеющиеся сведения о механизме действия пребиотиков, но и будут способствовать более обоснованному их применению в промышленном птицеводстве.

Цель работы. Целью настоящих исследований явилась разработка нового маннаноолигосахаридного пребиотика на основе клеточных стенок дрожжей К1иучеготусеБ \actis для профилактики дисбактериозов кишечника, стимуляции естественной резистентности и повышения сохранности цыплят-бройлеров.

Основные задачи исследований

У Определить подлинность маннаноолигосахаридов в пребиотиче-ской добавке «Кливеролак»; в опытах на экспериментальной модели антибиотикоассоцииро-ванного дисбактериоза изучить влияние различных доз пребиотической добавки на динамику формирования нормального кишечного биоценоза цыплят-бройлеров промышленного стада; оценить влияние пребиотической добавки на факторы естественной резистентности организма цыплят-бройлеров промышленного стада; установить влияние пребиотической добавки на адгезивную активность изолятов эшерихий, выделенных из кишечника птицы; изучить влияние пребиотической добавки «Кливеролак» на прирост живой массы и сохранность цыплят-бройлеров; провести анализ полученных данных и разработать рекомендации по применению пребиотической добавки «Кливеролак» для профилактики дисбактериозов и повышения сохранности цыплят-бройлеров ; разработать и утвердить нормативную документацию на «Кормовую пребиотическую добавку «Кливеролак».

Научная новизна

Впервые представлены экспериментальные данные об эффективности использования маннаноолигосахаридной пребиотической добавки из клеточной стенки дрожжей КЫууеготусеБ 1асШ для коррекции микробиоценоза кишечника цыплят. Установлено влияние пребиотической добавки на факторы естественной резистентности цыплят-бройлеров. Выявлено действие пре-биотической добавки на адгезивные свойства эшерихий. Экспериментально обоснована доза и схема применения кормовой пребиотической добавки «Кливеролак», изучена эффективность ее использования для повышения сохранности и привесов птицы.

Практическая значимость работы

Разработана и утверждена нормативная документация на «Кормовую пре-биотическую добавку «Кливеролак»: технические условия 9337-005-59088697002 на опытную партию (согласованы Департаментом ветеринарии Минсельхо-за РФ 05.02.2003); временное наставление по применению кормовой пребиотической добавки «Кливеролак» в ветеринарии (Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 05.02.2003).

На базе ООО «НПК ЦМВЭИ» (г. Москва) организовано производство опытных партий препарата.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту: результаты изучения влияния маннаноолигосахаридной пребиотической добавки «Кливеролак» на динамику восстановления кишечного микробиоценоза цыплят-бройлеров; оценка влияния маннаноолигосахаридной пребиотической добавки «Кливеролак» на факторы^их естественной резистентности у цыплят (фа- С^ гоцитарная, лизоцимная и бактерицидная активность); влияние добавки «Кливеролак» на прирост живой массы и сохранность птицы; изучение антиадгезивных свойств маннаноолигосахаридов; физико-биохимическая характеристика маннаноолигосахаридной пребиотической добавки «Кливеролак» и разработка методов ее контроля.

Связь исследований с научной программой. Диссертационная работа выполнена в соответствии с заданием «Усовершенствовать методы контроля и стандартизации пробиотических препаратов, повысить эффективность средств профилактики неонатальной диареи у молодняка домашних и сельскохозяйственных животных» (№ Госрегистрации 01.960.006535).

Апробация результатов

Основные результаты диссертационной работы изложены в отчетах НИР, доложены и одобрены на заседаниях Ученого совета института и методической комиссии по контролю и стандартизации биопрепаратов, применяемых при бактерийных и грибковых заболеваниях животных Всероссийского государственного центра качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ФГУ «ВГНКИ»); 1-ом Международном конгрессе «Биотехнология - состояние и перспективы развития» (Москва , 2002 г.); Международной научно-практической конференции памяти Г.И. Гончаровой (Москва, 2002 г.); 2-м Международном симпозиуме «Современные проблемы ветеринарной диетологии и нутрициологии» (С.-Петербург, 2003 г.), 2-ом Международном конгрессе «Биотехнология - состояние и перспективы развития» (Москва, 2003 г.).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 5 работ:

1. Малик Н.И., Чупахина H.A., Сканчев А.И. Изучение влияния пребио-тической добавки на микробиоценоз кишечника цыплят//Ж. Био, 2002, №2, с. 18-23

2. Панин А.Н., Малик Н.И., Чупахина H.A. Влияние пребиотической добавки на микробиоценоз кишечника цыплят//Материалы международной научно-практической конференции памяти Г.И. Гончаровой. — М., 2002, с.62.

3. Малик Н.И., Панин А.Н., Чупахина H.A. Использование лактозоути-лизирующих дрожжей Kluyveromyces lactis для получения маннаноолигоса-харидной добавки.//Материалы первого международного конгресса «Биотехнология - состояние и перспективы развития». — М., 2002, с. 166.

4. Малик Н.И., Чупахина H.A. Изменение показателей неспецифической резистентности цыплят-бройлеров при длительном скармливании пребиоти-ка, полученного из клеточной стенки дрожжей Kluyveromyces lactis //Материалы второго международного конгресса «Биотехнология - состояние и перспективы развития». - М., 2003, с.254-255.

5. Малик Н.И., Панин А.Н., Чупахина H.A. Влияние пребиотической добавки на факторы естественной резистентности цыплят-бройлеров//Сборник научных трудов ВГНКИ, 2003, т.64, с.252-258.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Чупахина, Наталия Александровна

выводы

1. Использование лактозоутилизирующих дрожжей КЫучеготусея 1асШ в качестве источника маннаноолигосахаридов позволяет получать продукт, содержащий 64,6% маннаноолигосахаридов, сохраняющих стабильность при хранении в течение 12 месяцев.

2. Введение в рацион цыплят маннаноолигосахаридной пребиотической добавки «Кливеролак» способствует восстановлению структуры микробиоценоза кишечника за счет усиленной колонизации слизистой лактобациллами, бифидобактериями, стрептококками и снижает интенсивность колонизации кишечника цыплят эшерихиями, стафилококками, дрожжеподобными грибами.

3. Выраженная стимуляция роста бифидо- и лактофлоры до 9,83±0,07 ^КОЕ/г и 8,52±0,07 ^КОЕ/г соответственно проявляется при введении пребиотической добавки «Кливеролак» из расчета 1,0% к основному рациону.

4. Механизм действия маннаноолигосахаридной пребиотической добавки «Кливеролак» проявляется блокадой рецепторов адгезии у условно-патогенных бактерий, в том числе эшерихий. Это приводит к снижению уровня колонизации кишечной стенки условно-патогенной микрофлорой.

5. Скармливание цыплятам маннаноолигосахаридной добавки «Кливеролак» в течение 10-15 дней способствует повышению резистентности организма, что проявляется увеличением фагоцитарной активности нейтрофилов крови на 17,12%, лизоцимной активности сыворотки крови на 24,56%, бактерицидной активности сыворотки крови на 27,81%; а также приводит увеличению общего белка в сыворотке крови цыплят.

6. Применение маннаноолигосахаридной пребиотической добавки «Кливеролак» в птицеводстве в течение 35 дней способствует повышению среднесуточного прироста массы тела цыплят в среднем на 8,40% и повышению их сохранности в среднем на 2,70%.

7. Оптимальная ежедневная доза пребиотической добавки «Кливеролак», оказывающая достоверное положительное влияние на кинетику формирования бифидо- и лактофлоры кишечника у цыплят, снижающая уровень контаминации кишечника условно-патогенной микрофлорой, а также положительно влияющая на естественную резистентность, прирост живой массы цыплят и сохранность, составляет 0,5-1,0% из расчета к основному рациону.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Разработана и утверждена нормативно-техническая документация на кормовую пребиотическую добавку «Кливеролак»:

- технические условия 9337-005-59088697-002 на опытную партию (согласованы Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 05.02.2003);

- временное наставление по применению кормовой пребиотической добавки «Кливеролак» в ветеринарии (Утверждено Департаментом ветеринарии Минсельхоза РФ 05.02.2003).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Чупахина, Наталия Александровна, 2004 год

1. Антипов В.А. Биологические препараты симбионтиых микроорганизмов и их применение в ветеринарии.// Сельское хозяйство за рубежом. 1981,№2.-с.43^7.

2. Антипов В.А. Симбионтные микроорганизмы пищеварительного тракта, их роль и состав. // Сельское хозяйство за рубежом. 1980, №12. -с.40-45.

3. Апатенко В.М. Иммунодефицит у животных//Ветеринария, 1992, №5, с. 29-30

4. Ашмарин И.П., Воробьев А.П. Статистические методы в микробиологических исследованиях.- Л., 1962.

5. Беюл Е.А., Куваева И.Б. Дисбактериозы кишечника и их клиническое значение// Клин. мед. -1986. -№11.-С.37-44.

6. Бовкун Г.Ф., Нигманов А. Н., Семенихина В.Ф., Рожкова И.В. профилактическое действие бифинорма при желудочно-кишечных болезнях цыплят// Ветеринария, 1998, №12, с. 44-47

7. Болотников А.И., Образцова A.M. Бактерицидная и ß-литическая активность сыворотки крови птиц. // Методы иммунологии птицы. Петрозаводск, 1976.

8. Бондаренко A.B., Бондаренко Вл.М., Бондаренко В.М. Пути совершенствования этиопатогенетической терапии дисбактериозов. // Ж. микробиол., эпидемиологии и иммунобиологии, 1998, №5, с.96-101.

9. Бондаренко В.М. Новые лекарственные препараты. 1995, №8, с.3-7.

10. Бондаренко В.М. Общий анализ представлений о патогенных и условно-патогенных бактериях. // ЖМЭИ, 1997, №4, -с.20-25.

11. Бондаренко В.М., Горская Е.И. Новые подходы к моделированию, диагностике и лечению дисбактериозов кишечника.// В сб.: Медицинские аспекты микробной экологии. М., 1992, вып.6, с.21-25

12. Бондаренко В.М., Жалко-Титаренко В.П. Динамика формирования инфекционного очага в кишечнике.// ЖМЭИ, 1991, №8, с.23-25.

13. Бондаренко В.М., Юдицкая Н.М., Курбатова H.A. Некоторые стороны конкурентных отношений между шигеллами и Е. coli. //Ж. Микробиология, 1978, №4, с.24-27

14. Брилис В.И., Брилене Т.А., Левков Л.А., Ленцнер Х.П. Методические возможности изучения роли адгезии в колонизирующей способности микроорганизмов.//В кн.: Теоретические и практические проблемы гнотобиологии, М., 1986, с.206-211.

15. Васильев Д.А., Волгушова Н.Г., Молофеева Н.И., Пульчеровская Л.П. Изучение микрофлоры кишечника сельскохозяйственных животных при желудочно-кишечных болезнях.// В сб. Актуальн. пробл. вет.-сан. контроля сельхоз. продукции.Тез. докл.М., 1997, с. 166.

16. Вольская О.Г., Заболотная Д.Д. Изучение антагонистического действия некоторых пробиотиков// Мат. конгр. «Биотехнология: сост и перспект. развития», 2003, с.87

17. Воромей Э.И., Жолнерович М.Л. Современные взгляды на антибиотикотерапию больных животных.// Ветеринария, 1999, №1, с.43-46

18. Выдрин А.Н., Шевцов И.А., Маслак A.A., Мащенко A.C. Заболеваемость скота в зависимости от условий содержания и кормления//Ветеринария, 1998, №1, с.42-45.

19. ГОСТ 28085-89 "Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности".

20. ГОСТ 13496.4-93 «Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения влаги»

21. Гриневич Ю.А., Алферов А.И. Определение иммунных комплексов в крови онкологических больных. // Лаб.дело. 1987, №8. с.493-495.

22. Грошева Г.А., Есакова Н.Р. Новые методы оценки естественной резистентности и реактивности организма птиц. // Ветеринария, 1996. №9.

23. Грязнева Т.Н., Ставцева Л.Я. Антагонистическая активность бифидо- и лактобактерий в отношении энтеробактерий.// Ветеринария, 1991, №6, с.21-22

24. Данилов; М.Б. Получение пребиотической пищевой добавки из молочной: сыворотки.// Хранение и переработка сельхоз сырья, 2001, №9, с.30-31

25. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом. // Лабораторное дело, 1963, №1.

26. Дрожжи в рационах животных и птиц. // Комбикорма, 1999, №6. -с.38-40.

27. Душкин В.А. Взаимодействие представителей нормальной микрофлоры в организме гнотобиологических животных//В кн.: теоретические и практические проблемы гнотобиологии.- М., 1986

28. Евдокимов H.A., Храмцов А.Г., Рябцева С.А., Папин В.Г. Использование лактозосодержащего сырья для производства бифидогенных заменителей молока.// Современные достижения биотехнологии, Ставрополь, 1995, с.51-52

29. Земсков М.В., Журавлева Н.В., Земсков В.М. Современные представления о природе и механизмах, неспецифической резистентности организма.// ЖМЭИ, 1972, -№3, -с. 112-117.

30. Зон Г.А. Аутохтонная микрофлора птицы. // Птицеводство,, 1992, №6, с. 20- 22

31. Зон Г.А. Влияние факторов внешней среды Hai организм птицы.// Птицеводство, 1992, №10, с.21-22

32. Зон Г.А. Динамика нормоценоза кишечника цыплят породы леггорн//Науч.-техн. Бюл. Ин-т птицеводства УААН-1992, №33, с.47-50

33. Интизаров М.М. Возможности гнотобиологического эксперимента при изучении механизмов бактериального антагонизма и симбиоза.//В кн.: Теоретические и практические проблемы гнотобиологии, 1986, с.22-29

34. Квасников Е.И. Дрожжи. Биология. Пути использования.//Институт микробиологии и вирусологии им. Д.К.Заболотного

35. Квасников Е.И., Нестеренко O.A. Молочнокислые бактерии и пути их использования.//М., Наука, 1975, 388 с.

36. Квасников Е.И., Шпилевская Т.Н., Коваленко Н.К. Антагонистическая активность молочнокислых бактерий по отношению к возбудителям кишечных заболеваний домашних птиц.//Микроби<ж Журщ-1983, Т.45, №5, с27-32

37. Коновалов С.А. Биохимия дрожжей.//М., Пищепромиздат, 1962, 269с.

38. Коршунов В.М., Ефимов Б.А., Пикина А.П. Характеристика биологических препаратов и пищевых добавок для функционального питания и коррекции микрофлоры кишечниеа.//ЖМЭИ, 2000 , -№3, -с.86-91.

39. Коршунов В.М., Пинегин В.В. Новые подходы к проблеме регуляции микрофлоры кишечника.// Вестник АМН СССР, -1985, №10, с.66-73

40. Коршунов В.М., Синицына Н. А., Гинодлан Г.А., Пинегин Б.В. Коррекция микрофлоры кишечника при химиотерапевтических дисбактериозах с помощью аутоштаммов бифидобактерий и лактобактерий.// ЖМЭИ, 1985, -№9, -с.20-25.

41. Коршунов В.М., Синицына H.A., Гинодлан Г.А., Пинегин Б.В. Коррекция микрофлоры кишечника при химиотерапевтических дисбактериозах с помощью аутоштаммов бифидобактерий и лактобактерий. // ЖМЭИ, 1985, №9.-с.20-25.

42. Котельникова A.B., Звягильская P.A. Биохимия; дрожжевых митохондрий.//М., Наука, 1973,239 с.

43. Котомина Е.И., Писарницкий А.Ф Пектинрасщепляющие ферменты некоторых видов 8ассЬагошусеБ//Прикладн. Биохим. и микробиол., 1974, т.Х, вып.4, с. 623-626.

44. Крюков В., Бевзюк В. Дрожжи в кормлении птиц. // Птицеводство, 1999, №6. -с.22-24.

45. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофлора.// М.: Медицина, 1976, 126 с.

46. Ленцер A.A. Лактофлора животного организма и ее защитная функция. // Теоретические и практические основы гнотобиологии. М.: Агропромиздат, 1986, -с. 195-200.

47. Ленцнер A.A. Лактофлора и колонизационная резистентность//Ж. Антибиотики и химиотерапия, 1987, №3, с.

48. Лопатина Т.К., Бляхер М.С., Николаенко В.Н. и др. Иммуномодулирующее действие препаратов-эубиотиков.//Вестн. Росс. АМН, 1997, №3, с.30-34

49. Максимов В.И., Миловзорова Т.А., Молодова Г.А. О специфичности микробных лизоцимов.// Успехи биол. химии. 1988, т.29, с.30-32.

50. Максимов В.И., Родоман В.Е., Бондаренко В.М. Лактулоза и микроэкология толстой кишки. // Ж. микробиол., эпидемиологии и иммунобиологии, 1998, №5, с.101-106.

51. Мальцева H.H. Стимуляция местного иммунитета с помощью микробов — представителей нормальной микрофлоры и их компонентов.//Автореф дис.канд. биол. наук. — М.,1988,23с.

52. Мальцева H.H., Шкарупета М.М., Пинегин Б.В., Коршунов В.М. Иммуномодулирующие свойства некоторых микробов представителей нормальной микрофлоры кишечника//Антиб. и химиотерапия.-1992, №12, с.66

53. Микельсаар М.Э. Антибиотики иколонизационная резистентность// М., 1990, вып. XIX, с.26-35.

54. Митюшников В.М. Естественная резистентность сельскохозяйственной птицы. М.: Россельхозиздат, 1985.

55. Мишурнова Н.В., Киржаев Ф.С. Антагонистические свойства препарата СТФ-1/56 отногсительно сальмонелл и кишечной палочки//Ветеринария, 1988, №Ю, с.34-36.

56. Мишурнова Н.В., Киржаев Ф.С. Современные представления о роли нормальной микрофлоры пищеварительного тракта.// Ветеринария, 1993, №6, с.30-33

57. Мурашова АО., Лисицин О.Б., Абрамов H.A. Бифидогенные факторы как лекарственные препараты//Ж. микробиол., эпидемиологии и иммунобиологии.- 1999, -№5, -с.56-61.

58. Никольский В.В. О сущности явлений иммунологической реактивности и естественной резистентности животного организма к заболеваниям. // Научные труды УСХА. Диагностика, терапия и профилактика болезней сельскохозяйственных животных. Киев, 1973.-c.3-7.

59. Никольский В.В. Основы иммунитета сельскохозяйственных животных.// М.: Колос, 1968,224с.

60. Палладина O.K. Биология возбудителей молочнокислого брожения.// М., Пищепромиздат, 1968, 212 с.

61. Панин А.Н., Малик Н.И., Малик Е.В. Иммунобиология и кишечная микрофлора. М.: Аграрная наука,1998, 14-18.

62. Панин А.Н., Малик Н.И., Степаненко И.П. Формирование кишечного микробиоценоза у цыплят.//Ветеринаря. 2000, -№7, -с.23-25.

63. Пивняк И, Гаппоева В. Каротинбактерин кормовая добавка для цыплят-бройлеров.//Передовой науч.-произв. опыт в птицеводстве: Экспресс-информ., 1993, №3, с. 18-22

64. Пинегин Б.В., мальцев В.Н., Коршунов В.М. Дисбактериозы кишечника//М.: Наука, 1984, с. 114-118.

65. Применение бифидогенных факторов при производстве пищевых и кормовых добавок.// Изв. Вузов. Пищевая технология, 1998, №4. -с. 56-57.

66. Свеженцов А.И. Использование автолизата дрожжей в кормлении свиней и кур. // Зоотехния, 1998, №5, с. 16-17.

67. Семенихина В.Ф., Рожкова И.В., Сундукова Кисломолочные продукты нового поколения.// Молочн. пром. 1999, №7, с.29-30

68. Сидоров М.А., Субботин В.В. Основы профилактики желудочно-кишечных заболеваний новорожденных животных// Ветеринария, 1998, №1, с.3-7

69. Сидорова Л.В., Манвелова М.А., Сидоров B.C. Микроэкологические подходы борьбы с заболеваниями и гибелью цыплят-бройлеров.// В сб.: Медицинские аспекты микробной экологии. М., 1992, вып.6, с.48-51

70. Сорокин В.В., Тимошко М.А., Николаева A.B. Нормальная микрофлора кишечника животных. Кишенев, 1973

71. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования, М., 1982

72. Тараканов Б.В. Использование микробных препаратов и продуктов микробиологического синтеза в животноводстве//М.:ВНИИТЭИагропром, 1987,48с.

73. Тараканов Б.В., Николичева Т. А. Новые биопрепараты для ветеринарии.//Ветеринария, 2000, №7, с.45-50

74. Тимошко М.А., Вилыпанская Ф.Л., Поспелова В.В., Рахимова Н.Г. Взаимодействие между Bifidobacterium bifidum, Proteus vulgaris и Klebsiella pneumoniae в пищеварительном тракте цыплят-гнотобионтов.//Ж.Микробиология, 1981, №3

75. Ткачев Е.З., Гвызин О.Л. Пищеварительные и обменные функции ЖКТ поросят при введении в их рацион пробиотиков// Докл. Рос.Акад.сельскохоз. наук, 1995, №2, с.29-31

76. Уголев А.М. Физиология и патология пристеночного пшцеварения.-Л.: Наука, 1967, -230 с.

77. Фисинин В.И. Биологический прогресс в питании птицы и некоторые практические аспекты//Сельхоз. биолог. , Серия Биол. животн., 1997, №2, с.112-121

78. Храмцов А.Г., Евдокимов И.А., Рябцева С.А., Семенов Е.А. Концепция создания кормов с лактулозой.// Современные достижения биотехнологии, Ставрополь, 1995, с.55-58

79. Шварцман Я.С., Хазенсон Л.Б. Местный иммунитет// Л.: Медицина, 1978

80. Шевелева С.А. Антибиотики в продуктах питания.//Вопросы питания. 1994, -№4, -с.23-26.

81. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса// Вопросы питания, 1999, Т.68, №2. -с.34-38.

82. Шендеров Б.А. Значение колонизационной резистентности в патогенезе иныекционных заболеваний// В кн.: Иммунология инфекционного процесса. Под ред. В.И.Покровского, М.: Медицина, 1994, 246с.

83. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Т.1 М.: Грант, 1998. - с. 35.

84. Шендеров Б.А. Механизм действия пробиотиков на микрофлору пищеварительного тракта и организм животных.// Ветеринария, 2000, № 1, с.47-54

85. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и некоторые вопросы микроэкологической токсикологии.// Антибиотики и медицинская биотехнология, 1987, Т.32, №3, с.38-41

86. Шендеров Б.А. Современное состояние и перспективы развития концепции «Функциональное питание»// Пищевая промышленность, 2003, №5, с.4-7

87. Abrams G.D. Microbial effects of mucosal structure and function//Amer. J. Clin. Nutr., 1977, Vol.30, p.l 143

88. Adams M.R., Hall C.J. Growth inhibition of food-borne pathogens by lactic and their mixtures// J. Food Sci. Technol., 1988, Vol.23, pp.287-292

89. Alltech Inc. Bio-Mos reference manual. Alltech Inc., Nicholasville, USA, 15pp.

90. Bailey J.S., Blankenship L.C., Cox N.A. Effect of fructooligosaccharide on Salmonella colonization of the chicken intestine. // Poultry sci. 1991, №70. -p.2433-2438.

91. Barnes E.M., Impey C. S., Stevens B.J. Factors affecting the incidence and antisalmonella activity of the anaerobic caecal flora of the young chic.//J. of hygiene, 1979, №82, p.263-283

92. Bengmark S. Colonic food: pre- and probiotics//Am. J. Gastroenterol.-2000.-№95. -Suppl.l.-p.S5-S7

93. Bouhnic Y., Flourie B., D'agay-Abensour L., Pochart P. Administration of transgalacto-oligosaccharides increases fecal bifidobacteria and modifies colonic fermentation metabolism in healthy humans.// J. of Nutr., 1997, №127, p.444-448

94. Choi K.H., Namkung H., Paik I.K. Effects of dietary fructooligosaccharides on the suppression of intestinal colonization of Salmonella typhimurium in broiler chockens.// Korean J. of animal Sci., 1996, №36, p.271-284

95. Collins M.D. Probiotics, prebiotics and synbiotics: approaches for modulating the microbial ecology of the gut// Am. J. Clin. Nutr.-1999.-№69 (siqpl.).-p.S1052-S1057

96. Coon C.N., Leske K.L., Akavanichan O., Cheng T.C. Effect of oligosaccharide free soybean meal on true metabolizable energy and fiber digestion in adult roosters and broilers.//Zootecnia International, 1990, September, -p.44-50.

97. Critenden R.G., Playne M. J. Production, properties and applications of food-grade oligosaccharides// Trends in food Sci. and Technol.,-1996, №7, -p.353-361

98. Cummings I.H., MacFarlane G.T. Role of intestinal bacteria in nutrient metabolism//Clin.J.Nutr., 1997, Vol.16, №1, p.3-11

99. Dawson K.A. Designing the yeast culture of tomorrow -mode of action of yeast culture for ruminants and non-ruminants. // Biotechnology in the feed industry. Nottingham, University press, 1995, -p.70-72.

100. Ferket P.R. Effect of diet on gut microflora of poultry.// Zootech. Int., 1991, №7-8, p. 44-49

101. Fooks L.J., Fuller R., Gibson G.R. Prebiotics, probiotics and human gut microbiology. // International Dairy Journal. 1999, №9. — p.53-61.

102. Fuller R. Probiotcs in man and animals. // J. Appl. Bacterid, 1989, V.66,-p365-378.

103. Fuller R., Gibson G.R Modification of the intestinal microflora using probiotics and prebiotics.// Gastroenterology, 1997, №32, Suppl. 222, -p.28-31

104. Fuller R., Gibson G.R. Probiotics and Prebiotics: microflora management for improved gut health//Clin. Microbiol. Infect., 1998, №4, p.477-480

105. Gadd J. MOS a gut feeling on dredging out the nasties. // Pig farming. 1994, Vol. 42, №ll.-p.22-23.

106. Gibson G.R. Dietary modulation of the human gut microflora using the prebiotics oligofructose and inulin//J. Nutr.- 1999.-№129 (7) Suppl.:1438S-1441S

107. Gibson G.R., Beatty E.B., Wang X., Cummings J.H. Selective stimulation of bifidobacteria in the human colon by oligofructose and inulin//Gastroenter. 1995.-№108.-p.975-982

108. Gibson G.R., Fuller R. Aspects of in vitro and in vivo research approaches directed toward identifying probiotics and prebiotics for human use// J. Nutr.-2000.-№130 (2) Suppl.:391S-395S

109. Gibson G.R., Roberfroid M.B. Dietary modulation of the human colonic microbiota: introducing the concept of prebiotics// J. Nutr.- 1995.-№125p.l401-1412

110. Gibson G.R.,Willems A., Reading S., Collins M.D. Fermentation of non-digestible oligosaccharides by human colonic bacteria//Proceedings of the nutrition Society, 1996, №55, p.899-912

111. Gibson G.R. Dietary modulation of the human gut microflora using prebiotics. // British Journal of Nutrition. 1998, №80, Suppl.2. p.S209-212.

112. Gibson G.R., Wang X. Bifidogenic properties of different types of fructose-containing oligosaccharides. // Food microbiology. 1994, №11.- p.491-498.

113. Gibson G.R., Wang X. Inhibitory effects of bifidobacteria on other colonic bacteria. // J. Appl. Bacteriol. -1994, Vol.77, -p.412-420.

114. Iji P.A., Tivey D.R. Natural and synthetic oligosaccharides in the broiler chicken diets. // World's poultry science journal. 1998, №54. p.129-143.

115. Kawase K. Effects of nutrients on the intestinal microflora of infants// Jpn. J. Dairy Food Sci.-1982.-v. 31.-p.A241-A243

116. Kessler G., Nickerson Glucomannan-protein complexes from cell walls of yeasts.// Journal of Biological Chemistry. 1959

117. Kitamoto H.K., Nakahara T. Selection of killer yeasts (Kluyveromyces lactis) to prevent aerobic deterioration in silage making. //J. Dairy Sci., 1993, Vol. 76, №3. p.803-804.

118. Kitamoto H.K., Ohmomo S., Nakahara T. Selection of killer yeasta (Kluyveromyces lactis) to prevent aerobicdeterioration in silage making//J. Dairy Sci 1993. Vol.76 №3, p.803-804

119. Kleesen B., Sykura B., Zunft H-J., Blaut M. Effects of inulin and lactose on fecal microflora, microbial activity and bowel habit in elderly constipated persons//Am. J. Clin. Nutr.-1997.- №65.-p.l397-1402

120. Loo J.V., Cummings J., Delzenne N. et al. Functional food properties of non-digestible oligosaccharides: a consensus report from the ENDO project (DGXII AIRII-CT94-1095) // British J. of Nutr. 1999, №81. p.121-132.

121. Lyons T.P. Biotechnology in the feed industry: Immunity. Optimizing immun response with mannanooligosaccharides.// Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.17-19.

122. Lyons T.P. Strategy for the future: the role of biotechnology in the feed indastry.//Biotechnology in the feed industry, 1992, -p. 1-20.

123. Macdonald F. Use of immunostimulants in agricultural applications.// Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.97-103.

124. Macfarlane G.,Gibson G.R. Bacterial infections and diarrhoea//In: Human Colonic Bacteria:Role in Nutrition, Physiology and Pathology, -3K> 201-226

125. Martin R.G. Using yeast culture and lactic acid bacteria in broiler breeder diets// Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.371-379.

126. McFarland L.V., Elmer G.W. Bioterapeutic agents: past, present and future.//Microecology Ther. -1995.-№23.-p.46-73

127. Mehrle H., Hutton B. Effect of mannanoligosaccharide (Bio-MOS) on health and performance of commercial broilers. // Alltech, inc. Research and technical bulletin, 1993.

128. Modler H.W., McKellar R.C., Yaguchi M. Bifidobacteria and bifidogenic factors -review.//Can. Inst. Food Sci. Technol. J. -1990, Vol.23, -p.29-41.

129. Modler H.W., McKellar R.C., Yaguchi M. Bifidobacteria and bifidogenics factors// Can Inst. Food Sci. Technol.-1990.-№23.-p.29-41.

130. Newman K. The immune system: nature's defense mechanism manipulating it through nutrition.//Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.77-85.

131. Olsen R. Mannanooligosaccharides: experience in commercial turkey production.// Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.389-392.

132. Oyarzabal O.A., Conner D.E. In vitro fructooligosaccharide utilization and inhibition of Salmonella spp. by selected bacteria.//Poult. Sci., 1995, №74, p.1418-1425

133. Pusztai A.J. Perry F.G., Morgan A.J., Mul A. The use of mannan-rich materials in feedstuff. PCT Int. Patent Application. WO 95-17103 Al, 28pp.

134. Rasic J.L. The role dairy foods containing bifido- and acidophilus bacteria in nutritional and health. // N. Eur. Dairy J. -1983, Vol.4, -p.80-88.

135. Roberfroid M.B. Functional effects of food components and the gastrointestinal systemxhicory fructooligosaccharides// Nutr. Reviews, 1996, №54, -p.S38-S42/

136. Roberfroid M.B. Prebiotics and probiotics: are they functional foods?// Am. J. Clin. Nutr.-2000.- №71 (6) Suppl.:-p. 1682-1687

137. Rowland I.R., Tanaka R. The effects of transgalactosylated oligosaccharides on gut flora metabolism in rats associated with a human faecal microflora//!. Appl. Bacteriol.-1993.-№74.-p.667-674

138. Salyers A.A., Palmer J.K., Wilkins T.D. Degratation of polysaccharides by intestinal bacterial enzymes.// Amer. J. of Clinical nutrition, 1978, №31,pJS128-S130

139. Savage T.F., Zakrzevska E.I The effects of feeding mannan oligosaccharide supplemented diets to poults on performance and the morphology of the small intestine. // Southern Conference on avian diseases. 1997

140. Sharon N., Lis H. Carbohydrates in cell recognition//Sci. Amer.J., 1993.

141. Sisac F. Stimulation of phagocytosis as assessed by luminol-enhanced chemiluminescence and response to salmonella cyallenge of poultry fed diets containing mannanoligosaccharides. // Alltech, inc. Research and technical bulletin, 1994.

142. Spring P. Competitive exclusion of salmonella using bacterial cultures and oligosaccharides.// Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.383-388.

143. Stewart G.G. Non-traditional uses of yeast and its products: the past fifteen years.// Biotechnology in the feed industry, 1995, -p.105-115.

144. Tivey D.R Natural and syntetic oligosaccharides.// World's Poult. Sci. J., Vol.54,1998

145. Treada A., Hara H., Sakamoto J., Sato N. Effects of dietary supplimentation with lactosucrose (4G-beta-D-galaktosylsucrose) on cecal flora, cecal metabolism, and performance in broiler chickens.// Poult. Sci., 1994, №73, p. 1663-1672

146. Waldroup A.L., Skinner J.T., Hierholzer R.E., Waldroup P. W. An evaluation of fructooligosaccharide in diets for broiler chickens and effects on salmonellae contamination of carcasses.//Poult. Sci., 1993, №72, p.643-650

147. Wells C.L. Relationship between intestinal microecology and the translocation of intestinal bacteria//Poult. Sci., 1990, №58, p.87-93

148. Wolter R. Dietetic feeds and nutritional supplements// Biotechnology in the feed industry, 1995,-p.143-151.

149. Zennoh T.Effect of oral administration of, or direct sensitization by Bio-MOS on stimulation of spleen-derived monocytes from mice. // Alltech, inc. Research and technical bulletin, 1995.

150. Ziemer C.J., Gibson G.R. An overview of probiotics, prebiotics and sinbiotics in the functional food concept: perspectives and future strategies. // International Dairy Journal. 1998, №8. -p.473-479.