Предоперационная дифференциальная диагностика узловых образований щитовидной железы на основе анализа содержания теломеразы в ткани тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.17, кандидат медицинских наук Жуликов, Дмитрий Владимирович

• Жуликов, Дмитрий Владимирович
• кандидат медицинских наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Жуликов, Дмитрий Владимирович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Обзор литературы.

1.1. Общие сведения о современных подходах к диагностике и лечению узловых образований щитовидной железы.

1.2. Морфологическое исследование в диагностике узловых образований щитовидной железы.

1.3. Теломераза как онкомаркер в диагностике узловых образований щитовидной железы.

ГЛАВА 2. Характеристика группы наблюдения, материалы и методы исследования.

2.1. Характеристика группы наблюдения.

2.2. Методы исследования.

2.3. Оценка, подсчет и статистическая обработка данных.

ГЛАВА 3. Пункционная гистобиопсия щитовидной железы.

3.1. Проведение и переносимость манипуляции.

3.2. Точность методики.

ГЛАВА 4. Активность теломеразы в ткани узловых образований щитовидной железы.

4.1. Получение тканевого материала для проведения исследования.

4.2. Проведение анализа теломеразной активности и контроль качества образцов ткани.

4.3. Уровень теломеразной активности в образцах ткани, полученных интраоперационно.

4.4. Уровень теломеразной активности в образцах ткани, полученных при пункционной гистобиопсии.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Предоперационная дифференциальная диагностика узловых образований щитовидной железы на основе анализа содержания теломеразы в ткани»

Актуальность темы.

В настоящее время различные аспекты вопроса предоперационной диагностики при различных формах узловых новообразований щитовидной железы далеки от окончательного решения. Широкое применение высокоэффективных диагностических технологий (УЗИ, КТ, МРТ), в том числе и в качестве скрининговых методов, позволило чаще выявлять объемные образования щитовидной железы (Шулутко A.M. и соавт., 2007; Мельниченко Г.А., 2002) и в итоге привело к увеличению количества первичных операций на данном органе, в том числе и по поводу рака и подозрительных на злокачественность узловых образований щитовидной железы. При этом особую актуальность приобретает вопрос диагностики злокачественного поражения на дооперационном этапе, с целью определения объема планируемого оперативного вмешательства (Ветшев П.С. и соавт., 1998; Ванушко В.Э., Кузнецов Н.С., 2002).

Единственным инструментом, позволяющим установить окончательный диагноз, остается морфологическая верификация (Mackenzie E.J. et al., 2004; Nguyen G-K et al., 2005). На дооперационном этапе ведущим методом диагностики при узловых поражениях щитовидной железы сегодня является тонкоигольная аспирационная биопсия (ТАБ) (Ветшев П.С. и соавт., 2005; Семиков В.И., 2004; Шулутко A.M. и соавт., 2007). Технология ее проведения хорошо разработана, а вероятность возникновения осложнений процедуры — минимальна (Ванушко В.Э., Кузнецов Н.С., 2002; Nguyen G-K et al., 2005). В то же время при использовании ТАБ может быть довольно высокой (до 30%) доля малоинформативных образцов, обусловленная получением недостаточного количества материала (Гринева Е.Н., 2002; Screaton N.J. et al., 2003). Цитологическое исследование также не позволяет четко дифференцировать возможное присутствие злокачественного роста

Ветшев П.С. и соавт., 2005; Nguyen G-K et al., 2005; Screaton N.J. et al., 2003).

Метод пункционной гистобиопсии щитовидной железы позволяет получить больше материала более высокого качества. Он был предложен С. Kaufman в 1897 г., однако практически не применялся долгое время из-за высокой частоты осложнений (гематомы, инфицирование). В 90-е годы XX века интерес к данной методике возрос в связи с разработкой новых автоматических одноразовых биопсийных игл и проведением ультразвукового контроля во время процедуры, позволивших снизить частоту осложнений практически до уровня ТАБ, сохранив преимущества методики. Тем не менее, в настоящее время гистобиопсия щитовидной железы остается малоизученной - в мировой практике имеется всего около 20 исследований (по данным архива Национальной библиотеки Конгресса США), хотя в ряде работ показана ее высокая диагностическая ценность и безопасность (Renshaw А.А. et al, 2007), (Screaton N.J. et al., 2003). В России пункционная гистобиопсия щитовидной железы практически не применяется, хотя и описана в литературе (Пинский С.Б. и соавт. 1999).

Следует отметить, что дифференциальный диагноз ряда новообразований щитовидной железы невозможен даже при проведении гистобиопсии. Это относится, в частности, к фолликулярным опухолям (фолликулярная аденома, фолликулярный рак), когда диагноз злокачественного поражения подтверждается при выявлении прорастания капсулы узла, что требует планового гистологического исследования всей массы опухоли, и даже при срочном гистологическом исследовании макропрепарата щитовидной железы имеется вероятность ложноотрицательного ответа (Ветшев П.С. и соавт., 2005; Гринева Е.Н., 2002; LiVolsi et al., 2004).

К одному из методов, позволяющих с высокой точностью определить характер опухолевого процесса на предоперационном этапе, дополняющих результаты морфологических, лучевых методов 7 обследования относится исследование ткани опухоли на содержание в ней специфических компонентов опухолевой клетки - онкомаркеров, в частности - теломеразы. Ключевая роль данного фермента в поддержании процесса неограниченного деления клетки обусловливает универсальность и высокую чувствительность методов его определения в ткани в диагностике злокачественного поражения (Глухов А.И. и соавт., 2003; Saldanha S.N. et al., 2003).

В научной литературе опубликованы результаты исследований различных авторов по определению содержания теломеразы в ткани различных новообразований щитовидной железы (Karayan-Tapon L. et al., 2004). При анализе образцов, полученных при выполнении оперативного вмешательства, показана значительная положительная корреляция между теломеразной активностью и/или экспрессией гена ее каталитической субъединицы (hTERT) в ткани новообразования щитовидной железы и наличием злокачественного процесса (Kammori М., 2000).

В небольшом количестве работ на наличие теломеразной активности и/или экспрессии гена hTERT исследовались образцы, полученные при ТАБ щитовидной железы (Trulsson L.M. et al., 2003). Однако результаты исследований в этом направлении показали довольно низкую чувствительность используемых методов (от 40 до 80%), возможно, из-за изначально низкого качества образцов — малого содержания собственно тиреоидных клеток и значительной примеси крови (практически неизбежной при данном виде биопсии).

Метод пункционной гистобиопсии щитовидной железы, хотя и является безопасным и позволяет получить достаточное количество материала удовлетворительного качества, не изучался в комбинации с молекулярно-генетическим исследованием, которое потенциально может повысить диагностическую ценность метода.

Цель исследования.

Улучшить результаты лечения больных объемными образованиями щитовидной железы за счет внедрения новых методов комплексной дифференциальной диагностики рака и доброкачественных образований щитовидной железы на дооперационном этапе. Задачи исследования.

1. Разработать технологию и определить клиническую ценность пункционной гистобиопсии объемных образований щитовидной железы под ультразвуковым контролем, а также оценить возможность использования тканевого материала, получаемого при пункционной гистобиопсии щитовидной железы, для проведения молекулярно-генетического анализа

2. Определить качественные и количественные показатели теломеразной активности, а также достоверность их различий, для различных гистологических типов ткани узловых образований щитовидной железы

3. Апробировать технологию определения активности теломеразы в образцах ткани, полученных при пункционной гистобиопсии узловых образований щитовидной железы

4. Определить клиническую ценность исследования теломеразной активности в образцах, полученных при пункционной гистобиопсии, для предоперационной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных образований щитовидной железы.

Научная новизна.

1. Разработана методика пункционной гистобиопсии щитовидной железы под ультразвуковым контролем, адаптированная к получению образцов ткани оптимального качества для последующего проведения молекулярно-генетического исследования; показаны достаточная точность метода при взятии образца и высокое качество получаемого материала, а также более высокие чувствительность и специфичность метода, в сравнении с ТАБ щитовидной железы

2. Впервые в мировой практике изучена теломеразная активность в образцах, полученных при пункционной гистобиопсии узловых образований щитовидной железы; при этом также впервые показана возможность максимально точной оценки наличия и уровня теломеразной активности в ткани узловых образований щитовидной железы уже на дооперационном этапе

3. Определены клиническая ценность и показания к выполнению пункционной гистобиопсии щитовидной железы в комбинации с исследованием наличия и уровня теломеразной активности при дифференциальной диагностике злокачественного поражения щитовидной железы на дооперационном этапе

Практическая значимость.

1. Разработанный метод пункционной гистобиопсии узловых образований щитовидной железы обладает высокой эффективностью и позволяет получить материал адекватного качества и количества для применения наиболее современных диагностических методик, в том числе молекулярно-генетического анализа

2. Исследование теломеразной активности в образцах, полученных при пункционной гистобиопсии узловых образований щитовидной железы обладает высокой клинической ценностью и может применяться в качестве дополнительного диагностического инструмента в предоперационной диагностике узловых образований щитовидной железы

3. Использование комбинации методов пункционной гистобиопсии и исследования теломеразной активности позволяет выделить группу пациентов с высоким риском наличия злокачественного поражения и получить дополнительные диагностические данные для определения

10 показаний к оперативному вмешательству на щитовидной железе и его предполагаемого объема.

Положения, выносимые на защиту

1. Разработанная технология пункционной гистобиопсии щитовидной железы является безопасным и эффективным методом предоперационной диагностики узловых образований щитовидной железы. Показатели точности этого метода превышают таковые для традиционных методов предоперационной морфологической диагностики (ТАБ), а получаемый тканевой материал по своим количественным и качественным показателям оптимален для проведения молекулярно-генетического анализа, в том числе для анализа теломеразной активности неизотопным методом TRAP

2. Уровень и частота выявления теломеразной активности в ткани узловых образований щитовидной железы достоверно выше (р<0,005) при наличии очагов злокачественного роста либо участков лимфоидной инфильтрации в ткани (с образованием лимфоидных фолликулов)

3. Высокий уровень теломеразной активности не характерен для ткани доброкачественных узловых образований щитовидной железы, однако качественные и количественные показатели теломеразной активности возрастают при переходе от группы коллоидного зоба к истинным доброкачественным опухолям, что позволяет предположительно рассматривать теломеразу как маркер, характеризующий пролиферативную активность в ткани узлового образования щитовидной железы

4. Принципиально возможно точное определение теломеразной активности в ткани узловых образований щитовидной железы уже на дооперационном этапе. Использование для этой цели образцов, полученных при пункционной гистобиопсии щитовидной железы,

11 позволяет производить оценку данного показателя с не меньшей достоверностью, чем при анализе образцов, полученных интраоперационно, и позволяет в целом повысить точность предоперационной дифференциальной диагностики узловых образований щитовидной железы.

Заключение диссертации по теме «Хирургия», Жуликов, Дмитрий Владимирович

Выводы.

1. Разработанная технология пункционной гистобиопсии щитовидной железы является безопасным и эффективным методом предоперационной диагностики узловых образований щитовидной железы. Показатели ее чувствительности, специфичности, положительной и отрицательной предиктивной оценки (соответственно, 75%, 100%, 100%, 96%) превышают таковые для традиционных методов (тонкоигольная аспирационная биопсия) предоперационной морфологической диагностики данной группы заболеваний (соответственно, 50%, 96%, 66%, 92%)

2. Тканевой материал, получаемый при пункционной гистобиопсии щитовидной железы, по своим количественным и качественным показателям оптимален для проведения молекулярно-генетического анализа, в том числе для анализа теломеразной активности

3. Уровень и частота выявления теломеразной активности в ткани узловых образований щитовидной железы достоверно выше (р<0,005) при наличии очагов злокачественного роста, что в том числе позволяет дифференцировать доброкачественные и злокачественные фолликулярные опухоли

4. Уровень и частота выявления теломеразной активности также достоверно повышаются (р<0,005) при наличии лимфоидной инфильтрация ткани щитовидной железы (в т.ч. и при аутоиммунном тиреоидите), и уровень активности в этом случае неотличим от такового при злокачественном процессе, что требует применения дополнительных методов исследования при дифференциальной диагностике данных заболеваний

5. Высокий уровень теломеразной активности не характерен для ткани доброкачественных узловых образований щитовидной железы, однако качественные и количественные показатели теломеразной активности возрастают при переходе от группы коллоидного зоба к истинным доброкачественным опухолям, что позволяет предположительно рассматривать теломеразу как маркер степени пролиферативной активности в ткани узлового образования щитовидной железы.

6. Использование образцов, полученных при пункционной гистобиопсии щитовидной железы, позволяет производить оценку теломеразной активности в ткани узлового образования уже на дооперационном этапе, и с не меньшей точностью, чем при использовании образцов, полученных интраоперационно.

7. Использование пункционной гистобиопсии как метода предоперационного морфологического исследования в сочетании с определением активности теломеразы в полученном образце позволяет повысить точность предоперационной дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных образований щитовидной железы.

Практические рекомендации.

1. Пункционная гистобиопсия щитовидной железы не является методом скринингового или рутинного предоперационного обследования, заменяющим ТАБ щитовидной железы. Ее применение следует считать необходимым в случаях невозможности получения при ТАБ необходимого количества материала для исследования, а также в тех ситуациях, когда результаты ТАБ сомнительны или имеются подозрения на опухолевый процесс. В этих случаях пункционная гистобиопсия, как метод с более высокой диагностической ценностью, способна дать дополнительные сведения о характере поражения щитовидной железы.

2. Параллельно с морфологическим исследованием полученного при пункционной гистобиопсии тканевого материала, рекомендуется проводить также и анализ теломеразной активности в указанном образце ткани. При этом возможно получение дополнительной диагностической информации в данном заведомо сомнительном клиническом случае.

3. Обнаружение высокой теломеразной активности в образце ткани является показателем высокой пролиферативной активности в узле щитовидной железы, что свидетельствует о высоком риске наличия злокачественного процесса либо вероятности агрессивного роста узла. Однако, одновременное получение при морфологическом исследовании данных о наличии лимфоидных элементов (или бластных клеток) либо очагов лимфоидной инфильтрации, в т.ч. морфологических и клинико-лабораторных данных за аутоиммунный тиреоидит, делает определение уровня теломеразной активности неинформативным диагностическим методом, за счет высокой вероятности ложноположительного результата, и требует использования других критериев при выборе дальнейшей тактики ведения пациента. Отсутствие теломеразной активности в биоптате свидетельствует о минимальном риске наличия злокачественного процесса в узле щитовидной железы. В этом случае (при отсутствии дополнительных данных за наличие злокачественного процесса) вполне оправдан выбор менее «агрессивной» хирургической тактики либо рассмотрения возможности. динамического наблюдения пациента.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Жуликов, Дмитрий Владимирович, 2010 год

1. Агапитов Ю.Н. Ультразвуковой мониторинг тиреоидной патологии в эндемическом регионе (Верхнее Поволжье) // Дисс. канд. мед. наук. — Обнинск. —1996.

2. Александров Ю.К. Пункционные методы в диагностике и лечении заболеваний щитовидной эюелезы // Ярославль. — МП Диабет. — 1996.

3. Александров Ю.К., Могутов М.С., Патрунов Ю.Н., Сенча А.Н. Малоинвазивная хирургия щитовидной железы // Медицина — Москва 2005.

4. Баженова Е.А., Баженов А.А. К вопросу диагностики малообъемных раков щитовидной железы. Современные аспекты хирургической эндокринологии // Материалы X (XII) Российского симпозиума по хирургической эндокринологии. — Смоленск. — 2002. — С.37-38.

5. Балаболкин М.И. Эндокринология // Москва. 1998.

6. Блэкберн Е.Х. Теломера и теломераза: нуклеопротеидные комплексы, участвующие в гомеостатической системе поддержания постоянной длины теломер //Биохимия — 1997. Vol.62 —№.11 — С. 1400-1406.

7. Бубнов А.Н., Кузьмичев А.С., Гринева Е.Н., Трунин Е.М. Узловой зоб. Диагностика и методы лечения // СПб. -1997.

8. Ванушко В.Э. Оптимальный диагностический комплекс в выборе объема хирургического вмешательства при узловых эутиреоидныхобразованиях щитовидной железы // Авт. дисс. канд. мед. наук. — Москва. —1997.

9. Ванушко В.Э., Кузнецов Н.С. Медицинские и экономические аспекты хирургии узлового зоба // Материалы 2-го Всероссийского тиреоидологического конгресса «Актуальные проблемы заболеваний щитовидной железы». — Москва. — 2002. — С. 77-81.

10. Ветшев П.С., Мельниченко Г.А., Кузнецов Н.С., и др. Заболевания щитовидной железы // Медицинская газета — 1996. — С. 158.

11. Ветшев П. С., Чилингариди К.Е., Габаидзе Д.И., Салиба М.Б. Аденомы щитовидной железы //Хирургия. — 2005. №7. — С.4-8.

12. Ветшев П.С., Чилингариди К.Е., Лощеное В.Б. и др. Сравнительная оценка методов исследования при аденомах щитовидной железы // Хирургия. -2001. -№10. С.4-10.

13. Ветшев П.С., Чилингариди К.Е., Черепенин М.Ю. Мини-инвазивные технологии в лечении доброкачественных образований щитовидной железы //Хирургия. 2002. - №7. - С.61-64.

14. Ветшев П.С., Шкроб О.С., Кузнецов Н.С. и др. Возможности предоперационной морфологической верификации при узловых эутиреоидных образованиях щитовидной железы // Хирургия — 1998. -№2. С.4-8.

15. Ветшев П.С., Шкроб О.С., Чшингариди К.Е., Опаленова В. А. Тонкоигольная аспирационная биопсия солитарных образований щитовидной железы //Хирургия — 1995. — №3. — С. 34-37.

16. Глухое А.И., Зимник О.В., Хаитов P.M., Северин С.Е. Теломераза -потенциальный опухолевый маркер // Российский онкологический журнал -2003. №2. - С. 53-57.

17. Гринева Е.Н. Дифференциальная диагностика узлового зоба // Материалы 2-го Всероссийского тиреоидологического конгресса «Актуальные проблемы заболеваний щитовидной железы». — Москва. 2002. - С.99-104.

18. Гринева Е.Н., Горюшкина Е.В., Малахова Т.В. и др. Фолликулярные и Хертль-клеточные опухоли щитовидной железы // Вопросы онкологии. -2004. Vol.50. -Ml. - С.41-45.

19. Дедов И.И. Болезни органов эндокринной системы // Москва. — Медицина. 2000.

20. Дедов И.И., Трошина Е.А., Мазурина Н.В. и др. Молекулярно-генетические аспекты новообразований щитовидной железы // Проблемы эндокринологии. — 2000. —№ 2, — С.22.

21. Дедов И.И., Трошина Е.А., Юшков П.В., Александрова Г.Ф. Диагностика и лечение узлового зоба. Методические рекомендации // Москва. -2001.

22. Диагностика и лечение дифференцированного рака щитовидной железы. Клинические рекомендации согласительной комиссии // Журнал Тиронет. — Москва. — 2007. №3.

23. Докудовская С.С., Петров А.В., Донцова О.А., Богданов А.А. Теломераза необычный РНК - содержащий фермент // Биохимия -1997. - Vol.62.-№.11. - С.1411-1422.

24. Дункан Э.Л., Реддел P.P. Генетические изменения, связанные с иммортализацией //Биохимия 1997. — Vol.62 -№. 11. — С.1477-1490.

25. Калинин А.П., Майстренко Н.А., Ветшев П.С. Хирургическая эндокринология. Руководство // СПб. — Питер. — 2004.

26. Куренова Е.В., Мейсон Д.М. О функциях теломер //Биохимия — 1997. — Vol.62. -№. 11. С. 1453-1466.

27. Лукомский Г.И., Шулутко A.M., Семиков В.И. Клинико-морфологическая характеристика и особенности течения дифференцированных форм рака щитовидной железы // Хирургия. — 1999. -№7. С.4-8.

28. Лушников Е.Ф., Втюрин Б.М., Цыб А.Ф. Микрокарцинома щитовидной железы // Москва. — Медицина. — 2003. — 262 С.

29. Мельниченко Г.А. Проблемы классификации и клинической диагностики узлового зоба // Материалы 2-го Всероссийского тиреоидологического конгресса «Актуальные проблемы заболеваний щитовидной железы». Москва. — 2002. — С.43-49.

30. Микер А.К., Коффи Д.С. Теломераза: многообещающий маркер биологического бессмертия половых, стволовых и раковых клеток // Биохимия 1997. - Vol.62.-№.11. - С.1547-1557.

31. Осивац Х.Д., Хамман А. Реорганизация ДНК и биологическое старение //Биохимия 1997. - Vol .62. -№. И. - С. 1491-1502.

32. Остерман JI.A. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Электрофорез и ультрацентрифугирование (практическое пособие) // Москва. — Наука. — 1981.

33. Паршин B.C., Терентьев P.O., Цыб А.Ф. Роль эхографии в диагностике малого рака щитовидной железы (Т1) на дооперационном этапе // Российский онкологический журнал. — 1998. -№>4. С.35-38.

34. Пачес А.И., Пропп P.M. Рак щитовидной железы // Москва. — Медицина. -1995.

35. Пинский С.Б., Калинин А.П., Белобородое В.А. и др. Редкие опухоли и заболевания щитовидной железы. // Иркутск, 1999.

36. Прайс КМ. Синтез теломерной С цепи //Биохимия — 1997. - Vol.62. -№.11.- С.1423-1431.

37. Семиков В.И. Лечебно-диагностическая стратегия при узловых образованиях щитовидной железы // Авт. дисс. д-ра. мед. наук. -Москва. 2004.

38. Семиков В.И. Современные принципы лечения больных с узловым зобом //Врач. 2002. - №7. - С. 7-12.

39. Трошина Е.А. Узловой зоб // Тиронет. — 2000. №1.

40. Фадеев В.В. Узловые образования щитовидной железы: международные алгоритмы и отечественная клиническая практика. //Врач. 2002. - №7.-С. 25-29.

41. Фадеев В.В. Эутиреоидный зоб: патогенез, диагностика, лечение // Клиническая тиреоидология. — 2003. — Vol.1. — №1. — С.3-13.

42. Фадеев В.В. Эутиреоидный зоб: патогенез, диагностика, лечение // Клиническая тиреоидология. —2003. Vol.1. -№1. - С.3-13.

43. Хейфлик Л. Смертность и бессмертие на клеточном уровне // Биохимия 1997. Vol.62 -№11 - С. 1380-1393.

44. Цуканов Ю.Т., Корниенко И.Ф., Толох Ю.Я., Постникова Г.А., Артемьева А.А. Узловой зоб и рак щитовидной железы. // Материалы VI (VIII) Российского симпозиума по хирургической эндокринологии. Саранск. -1997. С. 290-291.

45. Чех Т.Р., Накамура Т.М., Лингнер И. Теломераза как истинная обратная транскриптаза // Биохимия — 1997. — Vol.62. — №.11. — С. 1407-1410.

46. Шулутко A.M., Семиков В.И., Иванова Н.А. и др. Ультразвуковые методы исследования и пункционная биопсия в диагностике узловых образований щитовидной железы //Хирургия. 2002. — №5. — С. 7-12.

47. Шулутко A.M., Семиков В.И. Лечебно-диагностическая тактика при узловых образованиях и раке щитовидной железы // Материалы 4-го Всероссийского конгресса эндокринологов. СПб. - 2001. — С.418.

48. Шулутко A.M., Семиков В.И. Узловой зоб в онкологическом аспекте // Мед. помощь. 1999.-№5. - С.15-18.

49. Шулутко A.M., Семиков В.И., Грязное С.Е., Чакветадзе Н.Г., Попов С.В. Клиническое значение, диагностика и лечение дифференцированной микрокарциномы щитовидной железы // Хирургия. 2007. -№12. - С.4-10.

50. Aguilar-Diosdado М., Contreras A., Gavilanl, et al. Thyroid nodules. Role offine needle aspiration and intraoperative frozen section examination//Acta Cytol. 1997. -No.41.-P.677- 82.

51. Alonso N., Lucas A., Salinas I. et al. Frozen section in a cytological diagnosis of thyroidfollicular neoplasm // Laryngoscope. — 2003. No. 113. Vol.3. - P.563-566.

52. American association of clinical endocrinologists medical guidelines for clinical practice for the diagnosis and management of thyroid nodules. // AACE/AME Task Force on Thyroid Nodules Endocr. Pract. - 2006. -Vol. 12. - P. 63-102.

53. Aogi K., Kitahara K., Buley I. et al. Telomerase activity in lesions of the thyroid: application to diagnosis of clinical samples including fineneedle aspirates//Clin Cancer Res. 1998. -No.4. - P. 1965-1970.

54. Arnholdt H. Intraoperative frozen section examination of thyroid tumors // Exp. Clin. Endocrinol. 1993. - Vol. 101, Suppl. 3. -P.7-10.

55. Autelitano F., SpagnoliL.G., Santeusanio G., et al. Critical reflections on differentiated carcinoma of the thyroid: difficulties, doubts and differential-diagnosis problems // Ann Ital Chir. 1989. — No. 60. — P.267-281.

56. Barden C.B., Shister K.W. et al. Classification offollicular thyroid tumors by molecular signature: results of gene profiling // Clinical cancer research 2003. - No.9. - P.1792-1800.

57. Bojunga J., Zeuzem S. Molecular detection of thyroid cancer: an update // Clinical endocrinology 2004. - No. 61. - P.523-530.

58. Brauer V.F., Paschke R. Molecular aetiology of nodular goiter — consequences for therapy If Zbl. Chir 2004. - Vol.129. - No. 5. - P.356-362.

59. Brooks A.D., Shada A.R., DuMornay W. et al. Role of fine-needle aspiration biopsy and frozen-section analysis in the surgical managementof thyroid tumors // Annals of Surgical Oncology — 2001. Vol.8. - No. 2. -P.92-100.

60. Brousset P., Chaouche N., Leprat F., et al. Telomerase activity in human thyroid carcinomas originating from the follicular cells //J Clin Endocrinol Metab. -1997. -No.82. P.4214-4216.

61. Burn C., Marcand S., Gilson E. Proteins that bind to double-stranded regions of telomeric DNA // Trends in Cell Biology — 1997. Vol. 7. — P.317-324.

62. Carey L.A., Hedican C.A., Henderson G.S. et al. Careful histological confirmation and microdissection reveal telomerase activity in otherwise telomerase-negative breast cancers // Clin Cancer Res. 1998. — No.4. -P.435-440.

63. Chan J.K. Strict criteria should be applied in the diagnosis of encapsulated follicular variant of papillary thyroid carcinoma // Am J Clin Pathol. — 2002. No. 117. — P. 16-18.

64. Chang H.Y., Lin J.D., Chen J.F. et al. Correlation of fine-needle aspiration cytology and frozen section biopsies in the diagnosis of thyroid nodules // J. Clin. Pathol. 1997. -No.50. -P. 1005-1009.

65. Ciatti S., Bartolozzi C. et al. The role of ultrasonography and ultrasound guided biopsy in the management of cold nodules of the thyroid // Ultrasound Med Biol. 1983. -No.2. (suppl) - P.387-391.

66. Danese D, Centanni M, Farsetti A, Andreoli M: Diagnosis of thyroid carcinoma. J Exp Clin Cancer Res 1997, 16:337-347.

67. DeMay R.M. Frozen section of thyroid? Just say no // Am J Clin Pathol. — 1998. Vol.110. — P.423-424.

68. Demers L., Spencer C. Laboratory medicine practice guidelines: thyroid fine needle aspiration (FNA) and cytology // Thyroid. -2003. No. 13. — P. 80-86.

69. Dhaene K., VanMarck E., Parwaresch R. Telomeres, telomerase and cancer: an up-date // Virchows Arch. 2000. - No.437. - P.1-16.

70. Dome J.S., Chung S., Bergemann Т., et al. High telomerase reverse transcriptase (hTERT) messenger RNA level correlates with tumor recurrence in patients with favorable histology Wilms' tumor // Cancer Res. -1999. No.59. - P.4301-4307.

71. Elentioba-Johnson K.S.J. Complex regulation of telomerase activity // American Journal of Pathology 2001. - Vol.159. - No.2. - P.405-410.

72. Emerick G.T., Duh Q.Y., Siperstein A.E., et al. Diagnosis, treatment, and outcome of follicular thyroid carcinoma // Cancer. 1993. - No. 72. —1. P.3287-3295.

73. Fajkus J, Simickova M., Malaska J. Tiptoeing to chromosome tips: facts, promises and perils of today's human telomere biology // Royal society — 2001. -No. 12. -P. 545-562.

74. Finley D.J., Zhu В., Barden C.B., Fahey T.J. III. Discrimination of benign and malignant thyroid nodules by molecular profiling // Ann Surg. — 2004. — No.240. — P.425-436.

75. Gharib H., Goellner J.R., Zinsmeister A.R., et al. Fine-needle aspiration biopsy of the thyroid: the problem of suspicious cytologic findings // Ann Intern Med. -1984. No. 101. - Vol.1. -P.25-28.

76. Glukhov A.I., Zimnik O.V., Gordeev S.A., Severin S.E. Inhibition of telomerase activity of Melanoma cells in vitro by antisense oligonucleotides // Biochem. Biophys. Res. Communs. — 1998. — No. 248. -P. 368-371.

77. Glukhov A.I., Zimnik О. V, Severin S.E. Inhibition of tumor cell telomerase activity by biological active compounds // XXIX ISOBM MEETING. International Society for oncodevelopmental Biology and Medicine. Barcelona 2001 - Abstract Book. - P. 200.

78. Goldstein N.S, Czako P., Neill J.S. Metastatic minimally invasive (encapsulated) follicular and Hurthle cell thyroid carcinoma: a study of 34 patients // Mod Pathol. 2000. -No. 13. -P. 123-130.

79. Golub T.R., Slonim D.K., Tamayo P. et al. Molecular classification of cancer: Class discovery and class prediction by gene expression monitoring//Science. -1999. -No.286.-P.531-537.

80. Hanbidge H.E., Arenson A.M. et al. Needle size and sample adequacy in ultrasound-guided biopsy of thyroid nodules // Can Assoc Radiol J. — 1995. -No.46. -P. 199-201.

81. Haugen B.R., Nawaz S. Telomerase activity in benign and malignant thyroid tumors//Thyroid- 1997. Vol.7.-No.3. -P.337-342.

82. Hiyama K., Hirai Y, Kyoizumi S. et al. Activation of telomerase in human lymphocytes and hematopoietic progenitor cells // J Immunol. — 1995. — No. 155. — P.3711-3715.

83. Hopper K.D., Abendroth C.S. et al. CT percutaneous biopsy guns: comparison of end-cut and side-notch devices in cadaveric specimens // American Journal of Radiology 1995. - No. 164. - P.195-199.

84. Huber G.H., Dziegielewski P., Matthews T. W. et al. Intraoperative frozen-section analysis for thyroid nodules. A step towards clarity or confusion? // Arch. Otolaryngol. Head Neck Surg. 2007. - Vol.133. - No.9. - P.874-881.

85. Ito Y., Yoshida H. et al. Telomerase activity in thyroid neoplasms evaluated by the expression of human telomerase reverse transcriptase (hTERT) // Anticancer res. 2005. - Vol. 25 - No.IB. - P.509-514.

86. Jones C.J., Soley A., Skinner J. W., et al. Dissociation of telomere dynamics from telomerase activity in human thyroid cancer cells // Exp Cell Res. — 1998. No.240. -P.333-339.

87. Kammori M., Takubo К. et al. Telomerase activity and telomere length in benign and malignant human thyroid tissues // Cancer letters — 2000. — Vol. 159. -P. 175-181.

88. Karayan-Tapon L., Menet E. et al. Topoisomerase II a and telomerase expression in papillary thyroid carcinomas // The journal of cancer surgery- 2004. Vol. 30. - P. 73-79.

89. Kinder B.K. Well differentiated thyroid cancer // Curr Opin Oncol. — 2003.1. No. 15. — P. 71—77.

90. Kim N. W., Piatyszek M. A., Prowse K. R. et al. Specific association of human telomerase activity with immortal cells and cancer // Science -1994. Vol. 266. -P. 2011-2015.

91. Klapper W., Parwaresch R., Krupp G. Telomere biology in human ageing and ageing syndromes // Mechanisms of Ageing and Development — 2001. -No. 122. -P.695-712.

92. Krishnamurthy S., Bedi D. G., Caraway N.P. Ultrasound-guidedfineneedle aspiration biopsy of the thyroid bed // Cancer. 2001. — No. 93. -P.199-205.

93. Leboulleux S., Baudin E. et al. Medullary thyroid carcinoma // Clinical endocrinology 2004. No.61. - P.299-310.

94. Lin H.S., Komisar A., Opher E., Blaugrund S.M. Follicular variant of papillary carcinoma: the diagnostic limitations ofpreoperative fineneedleaspiration and intraoperative frozen section evaluation // Laryngoscope. — 2000. -No.llO. -P.1431-1436.

95. Liou M.J., Chan E.C. et al. Human telomerase reverse transcriptase gene expression in FNA samples from thyroid neoplasms // Cancer letters -2003. -No. 191. -P.223-227.

96. Liu K., Schoonmaker M.M., Levine B.L., et al. Constitutive and regulated expression of telomerase reverse transcriptase (hTERT) in human lymphocytes//Proc Natl Acad Sci USA.-1999. No.96. -P.5147-5152.

97. Liu Q., Castelli M., Printz R.A. Simultaneous fine-needle aspiration and core-needle biopsy of thyroid nodules // Am Surg. — 1995. No.61. -P.628-633.

98. LiVolsi V.A., Baloch Z. W. Follicular neoplasms of the thyroid //Adv. Anat. Pathol. 2004. - Vol. 11 -P.279-287.

99. Lo C.Y, LamK.Y., Chan K.T., LukJ.M. Telomerase activity in thyroid malignancy//Thyroid. 1999. -No.9. -P.1215-1220.

100. Lo C.Y., Lam K.Y. et al. Telomerase activity in thyroid malignancy // Thyroid- 1999. Vol.9.-No.12. - P. 1215-1220.

101. Mackenzie E.J., Mortimer R.H. Thyroid nodules and thyroid cancer // MJA 2004. - Vol. 180 - P.242-247.

102. Mazzaferri E.L. Papillary and follicular thyroid cancer: selective therapy // Compr Ther. 1981. -No.7. -P.6-14.

103. Mazzaferri E.L., Jhiang S.M. Long-term impact of initial surgical and medical therapy on papillary and follicular thyroid cancer // Am J Med. — 1994. — No.97. P.418-428.

104. Mazzanti C., Zeiger M.A., Costourous N., et al. Using gene expression profiling to differentiate benign versus malignant thyroid tumor // Cancer Res. -2004. -No. 64. P.2898-2903.

105. Meng W. Medical treatment of nodular goiter // MMW Fortschr. Med — 2004. Vol.146. -No.39. -P.42-44, 46-47.

106. Merchant S.H., Izquierdo R., Khurana K.K. Is repeatedfine-needle aspiration cytology useful in the management of patients with benign thyroid disease? // Thyroid. 2000. - No. 10.-P.489-492.

107. Mesonero C.E., JugleJ.E., Wilbur D.C., Nayar R. Fine needle aspiration of macrofollicular and microfollicular subtypes of follicular variant papillary carcinoma of the thyroid // Cancer. 1998. - No.84. - P.235-244.

108. Meyerson M. Telomerase enzyme activation and human cell immortalization // Toxicology Letters 1998. - Vol.102 - No. 103. -P.41-45.

109. Mittendorf E.A., Tamarkin S.W., McHenry C.R. The results of ultrasound-guided fine-needle aspiration biopsy for evaluation of nodular thyroid diseases //Surgery. 2002. -No. 132.-P.648-653.

110. Mora J., Lerma E. et al. Telomerase activity in thyroid fine needle aspirates//Acta cytol. -2004. Vol.48. - No.6. -P.818-824.

111. Nguyen G-K., Lee M.W. et al. Fine-needle aspiration of the thyroid: an overview // Cyto-Journal 2005 - 2:12 - P. 1-13.

112. Nikiforova M.N., Lynch R.A., Biddinger P. W. et al. RASpoint mutations and PAX8-PPAR gamma rearrangement in thyroid tumors: Evidence for distinct molecular pathways in thyroidfollicular carcinoma //J Clin Endocrinol Metab. 2003. -No.88. - P.2318-2326.

113. Ohyashiki K., Ohyashiki J.H., Nishimaki J., et al. Cytological detection of telomerase activity using an in situ telomeric repeat amplification protocol assay // Cancer Res. 1997. -No.57. -P.2100 -2103.

114. Okayasu I., Osakabe Т., Fujiwara M., et al. Significant correlation of telomerase activity in thyroid papillary carcinomas with cell differentiation, proliferation and extrathyroidal extension // Jpn J Cancer Res. -1997.-No.88.-P.965-970.

115. Orlando C., Gelmini S. Telomerase in endocrine and endocrine-dependent tumors // Journal of steroid biochemistry and molecular biology — 2001. — No. 78. P.201-214.

116. Paphavasit A., Thompson G.B., Hay I.D. et al. Follicular and Hurthle cell thyroid neoplasms: is frozen-section evaluation worthwhile? //Arch Surg. 1997. -No. 132. - Vol.6. -P.674-678.

117. Perrier N.D., Ituarte P.H., Treseler P. et al. Classification and treatment of follicular thyroid neoplasms are discordant between and within medical specialties //Surgery. 1999. -No.126. - P.1063-1069.

118. Quinn S.F., Nelson H.A., Demlow T.A. Thyroid biopsies: fine-needle aspiration biopsy versus spring-activated core biopsy needle in 102 patients //JVIR 1994. - No. 5. - P.282-289.

119. Reddel R.E. A reassessment of the telomere hypothesis of senescence // BioEssays 1998. -No. 20. -P.977-984.

120. Renshaw A.A., Pinnar N. Comparison of thyroidfine-needle aspiration and core-needle biopsy//Am. J. Clin. Pathol. 2007.-No.128.-P.370-374.

121. Ringel M.D. Molecular diagnostic tests in the diagnosis and management of thyroid carcinoma // Reviews in endocrine and metabolic disorders — 2000. -No.l. -P. 173-181.

122. Rowley P.T. Telomerase: putting an end to DNA // Cancer Investigation — 1998. Vol.16. -No.3. -P. 170-174.

123. Saggiorato E., Cappia S., De Giuli P., et al. Galectin-3 as a presurgical immunocytodiagnostic marker of minimally invasive follicular thyroid carcinoma // J. Clin. Endocrinol. Metab. -2001. No. 86. - P. 5152-5158.

124. Saji M., Westra W. et al. Telomerase activity in the differential diagnosis of papillary carcinoma of the thyroid // Surgery 1997. - No. 122. - P. 11371140.

125. Saldanha S.N, Andrews L.G. et al. Analysis of telomerase activity and detection of its catalytic subunit, hTERT // Analytical Biochemistry — 2003. -No. 315. -P. 1-21.

126. Screaton N.J., Berman L.H., Grant J. W. US-guided core-needle biopsy of the thyroid gland. //Radiology 2003 - March - P.827-832.

127. Sebesta J., Brown T. et al. Does telomerase activity add to the value of fine needle aspirations in evaluating thyroid nodules // The American journal of surgery-2001. -No.181.-P.420-422.

128. Segev D.L., Clark D P., Zeiger M. A., Umbricht C.B. Beyond the suspicious thyroidfine needle aspirate //Acta Cytol. 2003. - No.47. - P. 709-22.

129. Segev D.L., Umbricht С., Zeiger M.A. Molecular pathogenesis of thyroid cancer//Surg Oncol.-2003. -No. 12. -P.69-90.

130. Shay J. W., Wright W. E. //Curr. Opin. Oncol. 1996. - Vol. 8. -P.66-71.

131. Shay J.W., Zou Y., Hiyama E., Wrigh W.E. Telomerase and cancer // Human Molecular Genetics 2001. - Vol. 10. - No. 7. -P.677-685.

132. Siddiqui M.T., Greene K.L. et al. Human Telomerase Reverse Transcriptase expression in Diff-Quik stained FNA samples // Diagnostic Molecular Pathology 2001 -No.10- Vol.2 - P. 123-129.

133. Suzuki S., Fukushima T. et al. New attempt of preoperative differential diagnosis of thyroid neoplasms by telomerase activity measurement // Oncol. Rep.-2002. Vol.9. -No.3. -P.539-544.

134. Taki S., Kakuda К., Kakuma K. et al. Thyroid nodules: evaluation with US-guided core biopsy with an automated biopsy gun // Radiology 1997. — No.202. -P.874-877.

135. Titton R.L., Gervais D.A., Boland G. W. et al. Sonography and sonographically guided fine-needle aspiration biopsy of the thyroid gland: indications and techniques, pearls and pitfalls // AJR — 2003. — No. 181. — P.267-271.

136. Trulsson L.M., Velin A.M. et al. Telomerase activity in surgical specimens and fine-needle aspiration biopsies from hyperplastic and neoplastic human thyroid tissues. // The American Journal of Surgery — 2003 No. 186-P.83-88.

137. Udelsman R., Westra W.H., Donovan P.I., et al. Randomized prospective evaluation of frozen-section analysis for follicular neoplasms of the thyroid //Ann Surg. 2001. - No.233. - P. 716-722.

138. Umbricht C.B., Conrad G.T. et al. Human telomerase reverse transcriptase gene expression and the surgical management of suspicious thyroid tumors // Clinical cancer research 2004. - No. 10. - P.5762-5768.

139. Umbricht C.B., Saji M. et al. Telomerase activity: a marker to distinguish follicular thyroid adenoma from carcinoma // Cancer res. — 1997. — Vol.57. — No.ll. — P.2144-2147.

140. Vickery A.L. Jr. Thyroid papillary carcinoma. Pathological and philosophical controversies //Am J Surg Pathol. 1983. - No. 7. - P. 797807.

141. Welker M.J., Orlov V. Thyroid nodules // American Family Physician -2003. Vol. 67. -No. 3.-P.559-566.

142. Wong C.K., Wheeler M.H. Thyroid nodules: rational management//World J Surg. 2000. - No.24. - P.934-941.

143. Wright W.E., Shay J.W. Cellular senescence as a tumor protection mechanism: the essential role of counting // Current Opinion in Genetics and Development-2001.-№> 11.-P.98-103.

144. Wright W.E., Shay J.W., Piatyszek M.A. Modifications of a telomeric repeat amplification protocol (TRAP) result in increased reliability, linearity and sensitivity//Nucl. Acid. Res. 1995. - Vol. 23. -P.3794-3795.

145. Yang G.C., LiebeskindD., Messina A. V. Should cytopatholegists stop reporting follicular neoplasms on fine-needle aspiration of the thyroid? // Cancer (Phila). 2003. - No.99. - P.69-74.

146. Yashima K., Vuitch F., Gazdar A.F, Fahey T.J. III. Telomerase activity in benign and malignant thyroid diseases // Surgery. —1997. — No. 122. —1. P.1141-1145.

147. Zeiger M.A., Dackiw A.P.B. Follicular thyroid lesions, elements that affects both diagnosis and prognosis // Journal of surgical oncology 2005. — No. 89. - P.108-113.