Поведение низкометилированных пектинов в растворе и изучение их гелеобразующих свойств с ионами поливалентных металлов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.04, кандидат технических наук Тешаев, Хуршед Икромович

• Тешаев, Хуршед Икромович
• кандидат технических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат технических наук Тешаев, Хуршед Икромович

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Полиэлектролитические свойства НМ-пектина.

1.2. Свойства НМ-пектинов в концентрированном растворе.

1.2.1. Применение НМ-пектинов как желирующих агентов.

1.2.2. Пектины в производстве молочных изделий.

1.2.3. Применение НМ-пектинов в фармацевтической промышленности.

ГЛАВА 2. МЕТОДИКА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ

ИССЛЕДОВАНИЙ.

2.1. Сбор и подготовка исходного сырья

2.2. Характеристика реагентов и рабочих растворов.

2.3. Гидролиз-экстракция протопектина.

2.4. Очистка пектиновых веществ.

2.5. Деэтерификация ПВ.

2.6. Определение растворимости.

2.7. Определение содержания золы.

2.8. Количественные методы анализа функциональных групп

2.8.1. Модифицированный титрометрический метод.

2.8.2. Фотометрическое определение метоксильных групп.

2.8.3. Карбазольный метод определения.

2.9. Хроматографический анализ.

2.10. Спектроскопические исследования.

2.11. Методы исследования гидродинамических свойств.

2.12. Количественное определение содержания кальция в пектине.

2.13. Определение студнеобразующей способности НМ-пектина . 38 * 2.14. Определение прочности пектинового студня по

Риджелиметру.

2.15. Определение белка в растворах по поглощению в ультрафиолетовой области.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Деэтерификация пектинов.

3.2. Получение НМ-пектина из корзинок подсолнечника.

3.3. Полиэлектролитические свойства НМ-пектинов.

3.3.1. Свойства НМ-пектинов в разбавленном растворе.

3.4. Гелеобразование НМ-пектинов в присутствии поливалентных металлов.

3.5. Практические аспекты желеобразование НМ-пектинов с ионами кальция

3.5.1. Желеобразование НМ-пектина в системе сахар-вода.

3.5.2. Определение факторов, влияющих на реологические свойства желе.

3.6. Некоторые технологические рекомендации по использование НМ-пектинов в производстве молочных изделий.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Поведение низкометилированных пектинов в растворе и изучение их гелеобразующих свойств с ионами поливалентных металлов»

Актуальность темы. Благодаря уникальному набору физико-химических свойств, пектиновые вещества (ПВ) нашли широкое применение в различных отраслях народного хозяйства - пищевой промышленности, медицине, биотехнологии. В пищевой промышленности ПВ, полученные из выжимки цитрусовых или яблок, используют как гелеобразующие добавки в производстве джема и желе. Джемы и желе традиционно готовятся на основе высокометилированного пектина (ВМ-пектин), сахара (более 60%) и кислоты, в то время как низкометилированный пектин (НМ-пектин) образует гель в присутствии ионов кальция, независимо от содержания сахара и кислотности среды. В производстве НМ-пектины получают путем деэтерификации ВМ-пектина кислотой, щелочью и ферментами.

В то же время имеются многочисленные сырьевые базы для получения низкометилированных ПВ, среди которых можно отметить свекловичный жом, корзинки подсолнечника. Наличие перечисленной сырьевой базы ставит на повестку дня вопрос о возможности упрощения технологии получения НМ-пектинов и поиск путей их применения, в первую очередь, в пищевой промышленности и медицине.

НМ-пектины, благодаря наличию свободных карбоксильных групп, способны к организации межмолекулярных связей с низко- и высокомолекулярными компонентами. Проявление указанных особенностей ПВ, прежде всего, определяется поведением макромолекул пектинов в растворе, которое в свою очередь, зависит от конформационного состояния полимерной цепи, химической структуры, состава и соотношения кислых и нейтральных моносахаридных остатков. При этом свойства НМ-пектинов образовывать макромолекулярные комплексы, стабилизировать дисперсные системы, в присутствии ионов поливалентных металлов можно использовать при создании носителей лекарственных препаратов и в производстве желейных продуктов. Поэтому НМ-пектины становятся незаменимыми гелеобразователями при изготовлении диетических продуктов на основе желе с минимальным содержанием сахара и кислот. В связи с этим изучение взаимосвязи поведения макромолекул НМ-пектинов в растворе и их гелеобразующей способности при варьировании компонентного состава раствора и параметров системы является актуальной задачей.

Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - исследование поведения НМ-пектинов в растворе и изучение их гелеобразующих свойств с ионами поливалентных металлов.

Для выполнения поставленной цели были решены следующие задачи:

- изучение механизма реакции гидролиза этерифицированных групп ВМ-пектина;

- исследование полиэлектролитических свойств НМ-пектина;

- изучение свойств НМ-пектина в разбавленном растворе и его гелеобразующие свойства в присутствии поливалентных металлов.

Научная новизна работы:

• Впервые методом ИК-спектроскопии изучена кинетика деэтерификации цитрусового пектина со степенью этерификации 73%. Установлено, что на скорость реакции влияют степень ионизации карбоксильных групп и плотность заряда полииона. Увеличение рО раствора несколько ускоряет скорость реакции.

• Выявлен механизм взаимодействия НМ-пектина яблок с ионами меди, кальция и алюминия. Показано, что ионы кальция в большей степени способствуют образованию различных видов межмолекулярных агрегатов, в том числе трехмерных сеток. Гелеобразующая способность пектиновых веществ усиливается с увеличением числа карбоксильных групп и возрастанием их степени диссоциации.

• Впервые изучен процесс желеобразования НМ-пектина корзинок подсолнечника в присутствии ионов кальция и влияние параметров реакции гелеобразования на прочностные и деформационные характеристики студней НМ-пектинов. Полученные результаты дали возможность оптимизировать процесс получения высокопрочных гелей в широком диапазоне рН.

Практическая ценность работы. Полученные закономерности структурирования НМ-пектинов на основе доступных промышленных отходов - выжимки яблок и корзинок подсолнечника - способствуют созданию гелеобразующих материалов, природных носителей лекарственных средств и сорбентов, которые могут найти применение в пищевой и фармацевтической отраслях промышленности. Разработан высокоэффективный способ концентрирования белков молочной сыворотки с использованием БМ-пектина и получения пектин-белкового комплекса, который может быть использован в качестве препарата с иммуностимулирующей активностью.

Работа проведена в соответствии с планами НИР Института химии АН Республики Таджикистан «Разработка и опытно-промышленное испытание полимерных систем на основе производных этинилпиперидола и пектиновых веществ» (Номер госрегистрации 000000356 от 15.03.1996 г.) и «Композиционные материалы на основе ионогенных полимеров, вторичных ресурсов хлопководства, пектиновых веществ, растительных белков и использование их в народном хозяйстве» (Номер госрегистрации 000000876 от 23.03.2001 г.).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 4 статьи и 2 тезиса докладов.

Апробация работы. Основные результаты работы изложены в докладах на Республиканской конференции «Достижения в области химии и химической технологии» (Душанбе, 2001 г.); на 5-м Международном симпозиуме по химии природных соединений (Ташкент, 2003 г.); на научно-практических конференциях профессорско-преподавательского состава Технологического университета Таджикистана (Душанбе, 2003-2004гг.).

Заключение диссертации по теме «Физическая химия», Тешаев, Хуршед Икромович

ВЫВОДЫ

1. Изучены кинетика реакции деэтерификации сложноэфирной группы и механизм реакции гидролиза этерифицированных групп цитрусового пектина методом ИК-спектроскопии. Обнаружено, что при реакции омыления происходит резкое снижение степени этерификации карбоксильных групп пектина, связанное с влиянием соседних групп на ход реакции и структурными изменениями пектиновых макромолекул, в результате конформационного перехода цепи из формы жесткого цилиндра в клубок.

2. Исследованы полиэлектролитические свойства НМ-пектина в разбавленных растворах. На основании данных потенциометрического титрования рассчитаны рК и электролитическая составляющая свободной энергии. При ионизации макромолекул НМ-пектина происходят значительные конформационные изменения, обусловленные не только воздействием одноименных зарядов, но и разрушением или перераспределением водородных связей, что дает основание описать ионизацию НМ-пектинов с помощью закономерностей, присущих полимерным электролитам.

3. Методом вискозиметрии определены гидродинамические свойства НМ-пектинов. Установлена относительно высокая жесткость макромолекулы НМ-пектина, по сравнению с аналогичными полисахаридами. Показано, что конформационные изменения пектиновых макромолекул существенно зависят от степени этерификации карбоксильных групп: с уменьшением СЭ происходит переход спиральной структуры в клубок, и на ход процесса существенно влияет распределение свободных и этерифицированных групп.

4. Изучена гелеобразующая способность НМ-пектина и показано, что в присутствии поливалентных металлов, кроме кальция, происходят внутримолекулярные конформационные изменения, приводящие к компактизации полимерного клубка. В присутствии ионов кальция, в зависимости от его концентрации и концентрации полимера, происходят конформационные изменения, с образованием полимерных агрегатов вплоть до фазового разделения высоко набухшего геля.

5. Изучена желеобразующая способность НМ-пектинов в присутствии ионов кальция. Показано, что на свойства желе существенное влияние оказывают температура садки, концентрация пектина, продолжительность варки, рН среды и содержание ионов кальция. При исследовании воздействия перечисленных параметров оптимизирован процесс получения высокопрочных гелей для пищевой промышленности.

6. Разработан способ переработки сыворотки молока с использованием НМ-пектинов. Показано, что при соотношении сыворотки и НМ-пектина (3:1) выделяется до 15 г белка на 1 г пектина. Дальнейшее увеличение соотношения СБ : пектин приводит к нарушению равновесия, т.е. происходит кооперативное самоосаждение белка.

86

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Тешаев, Хуршед Икромович, 2004 год

1. Advance in Pectin and Pectinase Research/ Ed. by Voragen, F., Schols, H. and Visser R. Kluwer, Academic Publisher, 2003. - 514 p.

2. Ridley, B.L., O'Neill, M.A, Mohnen, D.A., Pectins: Structure, Biosynthesis, and Oligogalacturonide-related signaling, Phytochemistry, Vol.57, pp. 929967, 2001.

3. Voragen, AGJ., Pilnik, W., Thibault, J.F., Axelos, MAY., Renard, CMG., Pectins in: Food Polysaccharides and their applications/ Ed. by Stephen A.M., Marcel Dekker Inc., New York-Basel-Hong Kong, pp. 287-339, 1995.

4. Carpita, N.C., Gibeaut, D.M., The primary cell wall of flowering plants// Plant J.,No.3, pp. 1-30, 1993.

5. Walter et al. The Chemistry and Technology of Pectin// Academic Press Inc., Harcourt Brace Jovanovich Publishers, 1991.

6. Thakur, B.R., Singh, R.K., Handa, A.K., Chemsitry and use of pectin review// Crit. Rev. Food Sci. Nutr., Vol.37, pp. 47-73. 1997.

7. Liua, L.S., Fishman, M.L, Kostb, J., Hicksa, K.B., Pectin-based systems for colon-specifc drug delivery via oral route// Biomaterials, Vol.24, pp. 33333343, 2003.

8. The Specialists for Pectin. Herbstreith & Fox Corporate Group, (http://www.herbstreith-fox.de), 2003.

9. Мухиддинов З.К. Физико-химические аспекты получения и применения пектиновых полисахаридов: Дис. докт. хим. наук.- Душанбе, 2003. 238 с. - (АН РТ Ин-т химии).

10. Round, A.N., Rigby, N.M., MacDougall, A J., Ring, S.G., Morris, V.J., Investigating the nature of branching in pectin by atomic force microscopy and carbohydrate analysis// Carbohydrate Research, Vol.331, pp. 337-342, 2001.

11. Faraday Discussion, No. 101 (Выпуск посвящен полиэлектролитным гелям), 1995.

12. Program Booklet 36th Microsymposium, High-Swelling Gels// Prague, 1995.

13. Bastide, J., Principal Properties of Gels/ Ed. by Cotton Fad, J.P., New York: Wiley, 1995.

14. Loefgren, C., Pectins structure and gel forming properties, a literature study / PhD work at the Department of Food Science, Chalmers University of Technology, Sweden, 2000.

15. Kaplan, O.M., Wiley, В .J., Mayer, J.M., Arcidiacono, S., Keith, J., Lombardi, S.J., Ball, D., Alle, A.J., Biomedical Polymers/ Ed. by Shalaby, S.W., New York: Hanger Publ., p. 189,1994.

16. Holliday, L., In ionic polymers/ Ed. by L.Holliday, Applied Scince Publishers, London, p. 1, 1975.

17. Bettelheim, F.A., In biological macromolecules series// Biological Polyelectrolytes/ Ed. by Veis A. Dekker, New York, Vol.3, p. 131,1970.

18. Rees, D.A., In MTP International Review of Scince, Organic Chemstry Series, Carbohydrates8/ Ed. by Aspinall, G.O., Butterworth, London, Vol.l, p.251, 1973.

19. Gottschalk, A., Glycoproteins, Elsevier, Amsterdam, 1972.

20. Wells, J.D., Salt activity and osmotic pressure in connectiv tissue. I. A study of solution of dextran sulphate as a model system// Proc. Roy. Soc. В., London, Vol. 183, p.399, 1973.

21. Reid, D.S., Ion in macromolecular and biological system/ Ed. by Erercot, D.M., Vincent, В., Scientechnica, Bristol, pp. 82-93, 1978.

22. Kjoniksen, A.L., Hiorth, M., Roots, J. and Nystrom B. Shear, Induced assosiation and gelation of aqueous solution of pectin// J. Phis. Chem., Vol. 107, pp. 6324-6328,2003.

23. Rees, D.A., Polysaccharide gels, A molecular view// Chem. and Industry, No 16, pp. 630-636, 1972.

24. Smidsrod, O., Haug, A., Light scattering satudy of alginate// Acta Chem. Scand., Vol.22(3), pp. 797-810, 1968.

25. Morris, E.R., Rees, D.A., Thom, D., Boyd, J. Chiroptical and stoichiometric evidence of a specific, primary dimerisation process in alginate gelation/ Carbohydr. Res., Vol. 66, pp. 145-154, 1978.

26. Oakenfull, D.G. The chemistry of high-methoxyl pectins in the chemistry and technology of pectins/ Ed. by Walter, R.H., Academic press, New York, pp.87-106, 1991.

27. Clark, A.H. and Ross-Murphy, S.B., Structiral and mechanical properties of biopolymer gels// Adv. Polym. Sei., Vol.83 (In Doudlier et al., 1992), pp. 55192.

28. Doublier, J.L, Launay, B. and Cuvelier, G., Viscoelastic properties of food gels. In Viscoelastic properties of foods/ Ed. by Rao, M.A. and Steffe J.F., Elsevier Applied Science, New York, pp. 371 -434,1992.

29. Rao, M.A. and Cooley, H.J., Dynamic rheological measurement of structure development in high-methoxyl pectin/fructose gels// J. Food Sei., Vol. 58(4), pp. 876-879, 1993.

30. Williams, M.A.K., Keenan, R.D., Halstead, T.K., A 'H -NMR lineshape study of -CH3 group dynamics in pectin gels// Food Hydrocolloids, Vol.12, pp. 8994, 1998.

31. Thorn, D., Dea, I.C.M., Morris, E.R., Powell, D.A., Interchain association of alginate and pectins// Progr. Food and Nutr. Sci., No. 6, pp. 97-108, 1982.

32. Morris, E.R., Powell, D.A., Conformations and interactions of pectins. I. Polymorphism between gel and solid states of calcium polygalacturonate// J. Mol. Biol., Vol. 155 (4), pp. 507-516, 1982.

33. Powell, D.A., Morris, E.R., Gidley, M.T., Rees, D.A. Conformations and interactions of pectins. II. Influence of residue sequence on chain association in calcium pectate gels// J. Mol. Biol, Vol. 155 (4), pp. 517-531,1982.

34. Rees, D.A., Polysaccharide shapes and their interactions some recent advances// Pure and Appl. Chem., Vol 53 (1), pp. 1-14, 1981.

35. Kohn, R., Hirsch, J., Binding of calcium, lead and copper (II) cations to galacturonic and 2,5-furandicarboxylic acid and to D-galacturonic acid and its derivatives// Collect. Czechosl. Chem. Communs, Vol.51 (5), pp. 150-159, 1986.

36. Smidsrod, O., Haug, A., Properties of poly (1,4-hexuronates) in the gel state. II. Comparsion of gels of different chemical composition// Acta Chem. Scand., Vol.26 (1), pp. 79-88, 1972.

37. Kohn, R., Binding of lead cations to oligogalacturonic acids// Collect. Czech. Chem. Commun., Vol.47 (12), pp. 3424-3431,1982.

38. Kohn, R., Heinrichova, K., Malovikova, A., Binding of cadmium and copper (II) ions to oligogalacturonic acids// Collect. Czech. Chem. Commun., Vol. 48 (7), pp. 1922-1936, 1983.

39. Rees, D.A., Polysaccharide Conformation in Solution and Gels Recent Rsults on Pectins// Carbohydr. Polym, Vol. 2, pp.254-263,1982.

40. Kohn, R., Larsen, B., Preparation of water soluble polyuronic acids and their calcium sals, and the determination of calcium ion activity in relation to the degree of polymerization// Acta Chem. Scand., Vol. 26(6), pp. 2455-2462, 1972.

41. Kohn, R., Sticzay, T., Circular dichroism and the cation binding to polyuronates// Collect. Czech. Chem. Communs., Vol. 42(8), pp. 2372-2378, 1977.

42. Thom, D., Grant, G.T., Morris, E.R., Rees, D.A., Characterization of cation binding and gelation of polyuronates by circular dichroism// Carbohydr. Res., Vol. 100, pp. 29-41,1982.

43. Morris, E.R., Rees, D.A., Thom, D., Welsh, E.J., Conformation and intermolecular interactions of carbohydrate chains// J. Supermol. Struct., Vol. 6 (2), pp.259-274,1977.

44. Smidsrod, O., Some physical properties of alginats in solution and in gel state// Rept. Norw. Inst. Seaweed Res., Vol.34, var.pag. il 1,1973.

45. Kohn, R., Binding of toxic cations to pectin, its oligomeric fragments and plant tissues// Carbohydr. Polym., Vol.(2), pp. 273-275, 1982.

46. Kohn, R., Luknar, O., Calcium and stroncium ion activity in solutions of corresponding pectinates and dependence on their degree of esterification// Collect. Czech. Chem, Vol. 40(4), pp. 959-970,1975.

47. Rinaudo, M., Ravanat, G, Vincedon, M, NMR investigation of oligo- and poly (galacturonic acid) S: gel formation in the presence of Ca2+ counterions//Macromol. Chem, Vol. 181, pp. 1059-1070,1980.

48. Chemical Marketing Reporter/ Pectin market business old niche market areas., Febrary (4), pp. 16-17, 1991.

49. Pectin's functionality finds uses in fat-replacer market// IFT Press Comference Report, Food Technol., Vol. 45(12), pp. 116-117, 1991.

50. Мухиддинов 3.K., Халиков Д.Х., Авлоев X.X. Пектиновые препараты и их назначение // Информационный листок. -№ 9-98. Душанбе: Тадж.НИИНТИ,1998.

51. JFT Committee on Pectin Standartisation// Food Technol., Vol. 13, p. 496, 1959.

52. Маттес Ф., Мельхоф У. « Хербстрайт & Фокс»- специалисты по пектинам// Пищевая промышленность. 2000. - № 8. - С. 33-34.

53. Эндерс Х.У., Крац Р., Колеснов А.Ю. Желейные изделия: органолептические свойства и их оценка // Пищевая промышленность.- 1994.-№ 3,-С. 9-12.

54. Кристинсен С. X. (Копенгаген пектин АО). Пектиновые желе-тестуризаторы для кондитерских изделий// Пищевая промышленность.- 1994.-№3.-С. 13-15.5 9. ГОСТ 29186-91. Пектин, технические условия.

55. Benichou, A., Aserin, A. and Garti N. Protein, Polysaccharide Interactions for Stabilization of Food Emulsions// J. Dispersion Science and Technology, Vol. 23(1-3), pp.93-123, 2002.

56. Tolstoguzov, V.B., Protein-polysaccharide interactions/ Ed. by Damodaran S. and Paraf A., Food proteins and their applications in foods, New York: Marcel Dekker, pp. 171-198, 1997.

57. Tolstoguzov, V., Thermodynamic considerations on polysaccharide functions// Polysaccharides came first, Carbohydrate Polymers, 10 pp. in press, 2003.

58. Tamine, A.Y. and Robinson, R.K., Yogurt: Science and Technology// ч Pergamon Press, Oxford, UK, 1985.

59. Ramaswamy, H.S. and Basak, S., Pectin and Raspberry Concentrate Effects > on the Rheology of Stirred Commerical Yogurt// J. Food Sci., Vol. 57(2), pp.357.360, 1992.

60. Vandamme, T.F., Lenourry, A., Charrueau, C., Chaumeil, J.C., The use of polysaccharides to target drugs to the colon// Carbohydr Polym., Vol. 48, 219-231,2002.

61. Pillay, V., Fassihi, R., Danckwerts, M.P. and Muhiddinov, Z.K., The superior crosslinking effect of zinc electrolyte system on Alginate// Pectinate microshphers: Postulating a mechanism through design of experiments (submited for publication).

62. Fassihi, R. and Kim, J.H., Matrix for conroled delivery of highly soluble pharmaceutical agents// US patent # 6337091 Bl, issued Jan. 8, 2002.

63. Kim, H., and Fassihi, R., Application of binary polymer system in drug release rate modulation. (I, II)// J. Pharm. Sci., Vol. 86(3), pp. 316-328, 1997.

64. Acikgoz, M., Kas, H.S., Hascelik, Z., Milli, U., Hincal, A.A., Chitosanmicrosphers of diclofenac sodium. II: in vitro and in vivo evaluation// Pharmazie, Vol. 50, pp. 275-277, 1995.

65. Ping Lui and Krishnan, T.R.J., Alginate- Pectin Poly-L- lysine Particulate as a Potential Controled Release Formulation// Pharm.Pharmacol., Vol. 51, pp. 141-149, 1999.

66. Cleland, J.L., Jones, A.J.S., Stable formulation of recombinant human growth and interferon for microencapsulation in biodegradable microsphers// Pharm. Res., Vol. 13, pp. 1464-1475,1996.

67. Smart, J.D., Kellaway, I.W., Worthington, H.E.C., An in vitro investigation of mucosa-adhesive materials for use in controlled drug delivery// J. Pharm. Pharmocol., Vol. 36, pp. 295-299,1984.

68. Muhiddinov, Z.K., Khalikov, D.Kh., Speaker, T., Fassihi, R., Development and characterization of different low methoxy pectin microcapsules by anemulsion interface reaction technique// Journal of Microencapsulation 2004, in press.

69. Мухиддинов 3.K., Халиков Д.Х., Авлоев X.X., Камардинов Х.К., Мамадазизов Ш.М., Касымова С.Д. Пектин с антибиотиками при лечение острых кишечных инфекций// Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2003. - № 2.- С.40-46

70. Халиков Д.X.,Мухиддинов З.К.,Асоев М.Г.,Дегтярев В.А. Некоторые кинетические особенности гидролиза протопектина// Химия природных соединений. 1994. - № 6. - С. 787-793.

71. Авлоев Х.Х. Кислотный гидролиз протопектина корзинок подсолнечника и некоторые характеристики продуктов его распада: Дис. . канд. хим. Наук.-Душанбе , 1998. 104 с.

72. Афанасьев С.П., Панова Э.П., Кацева Г.Н., Чирова В.Я. Модификация титриметрического метода анализа пектиновых веществ // Химия природных соединений. 1984. - № 4. - С. 428-431

73. Филипов М.И, Кузминов В.И. Фотометрическое определение метоксилных групп в пектиновых веществах //Аналитическая химия. -1971. Т.26. - Вып. 1. - С. 143-146.

74. McComb, Е.А., McCready, R.M., Colorimetric determination of pectic substances// Anal. Chem., Vol. 24(10), pp. 1630-1632, 1952.

75. McComb, E.A., McCready, R.M., Determination of acetyl in pectin of accetilated carbohydrate polymers// Anal. Chem., Vol. 29, pp. 819-821, 1957.

76. Столяров Б.В., Савинов И.М., Витенберг А.Г. Руководство к практическим работам по газовой хроматографии. JL: Химия, 1988. - 366 с.

77. Халиков Д.Х., Штанчаев А.Ш., Мухиддинов З.К. Влияние молекулярной массы на желирующие свойства пектина // Аналитическое ультрацентрифугирование в химии и биологии / Под ред. В.П.Панова. -Душанбе : Дониш, 1987. С. 140-145.

78. Цветков В.Н, Эскин В.Е, Франкель С.Я. Структура макромолекул в растворах. М.: Наука. 1964. -719 с.

79. Боуэн Т. Введение в ультрацентрифугирование. М.: Мир, 1973.

80. Berth, G, Anger, Н, Linow, F, Light scattering and viscosimetric studies for molecular weight determination on pectins in aqueous solution// Nahrung, Vol. 21(10), pp.939-950,1977.

81. Berth, G, Studies on the Heterogenity of Citrus Pectin by gel permeation chromatography on sepharose 2B/4B// Carbohydr. Res, Vol. 8, pp.105-117, 1988.

82. Anger, H, Berth, G, Gel permeation chromatography of sunflowers pectin// Carbohydr. Polym, Vol. 5(5), pp.241-250, 1985.

83. Thibault, J.F, Rinaudo, M, Gelation of pectic acids in the presence of calcium counterions//British polym. J, Vol. 17(2), pp. 181-184, 1985.

84. Донченко J1.B, Нелина B.B, Карпович Н.С, Киореску Е.Н, Гааг О.С. Методические указания по определению пектиновых веществ в производстве. М.: АгроНИИТЭИПП, 1987.

85. Феденко B.C. Определение белка в растворах по поглощению в ультрафиолетовой области // Химия природных соединений. 1989. -No 7.- С. 693-795.

86. Kirtchev, N, Panchev, I. and Kratchanov С, Kinetics of acid-catalysed de-esterification of pectin in heterogenouse medium// Inter. J. Food Sci. and Technology, Vol .27. pp. 479-486,1989.

87. Dobiash, J, Baranchikova, J, Vostradovska, G, Деэтерификация яблочногопектина в амиачной среде (перевод с чешского). Vysoka Skola Chemico- Technologicka V Praze// Sbornik, Vol. 60, pp. 51-59,1986.

88. Kim, W.G, Rao, V.N.M, Smit, S.J.B, De-esterefication of pectin by acid and ammonia// Journal of Food Sci, Vol. 43. pp. 74-78, 1978.

89. Lyutskova, N., Pishtiisky, I., Koleva, L., Tsiporkov, N., Travaux Scietifiques, Institute technologique superior des industries alimentaries// Vol. 28. No. 2. pp. 263-270, 1981.

90. Моравец Г. Макромолекулы в растворе. М: Изд-во «Мир», 1967. — 345 с.

91. Sosulski, F.M., Lin, V.J.Y. and Humbert, E.S., Gelation characteristics of acid- precipitated pectin from sunflower heads// Can. Inst. Food. Sci. Technol. J., Vol. 11, pp. 113-116, 1978.

92. Chang, K.C. and Miyamoto, A., Geling characteristics of pectin from sunflower head residues// J. Food Sci., Vol. 57, pp. 1435-1438,1992.

93. Shi, X.Q., Chang, K.C., Schwarz, J.G. and Wiesenborn, Acid removal from Sunflower Ethanol Washing// J. Food Sci., Vol. 61(1), pp. 192-194, 1996.

94. Халиков Д.Х.,., Авлоев X.X., Горшкова P.M., Тешаев X.X., Мухиддинов З.К. Влияние фонового электролита на гидролиз протопектина подсолнечника // Химия природных соединений. 2002. - № 2. -С. 118-120.

95. Асоев М.Г., Мухиддинов З.К., Халиков Д.Х. Сорбция кислоты в клеточной стенке яблочной выжимки// Докл.АН РТ. -Душанбе, 1994.- № 6. С. 787-793.

96. Nola, A.D.I., Fabrizi, G., Lamba, D. and Segre, A.L. Solution of pectin acide fragment by lH NMR and Molecular dynamics //Biopolimers, Vol. 36, pp.457-462,1994.

97. Тешаев Х.И., Мухиддинов 3.K., Халиков Д.Х., Авлоев Х.Х. Гелеобразования низкометилированного пектина в присутствии ионов поливалентных металлов// Докл.АН РТ. -Душанбе, 2002. Т. XLV.- № 1-2. С. 72-78.

98. Lifson, S., Katchalsky, A.T., The electrostatic free energy of polyelectrolyte solution. II. Fully starched macromolecules// Polym. Sci., Vol. 13, pp. 43-55, 1954.

99. Thibault, J.F. and Rinaudo, M., Interaction of mono and divalent counterions with alkaline and enzim-deesterified Pectins in salt free solution// Biopolymers, Vol. 24, pp. 2131-2143, 1985.

100. Manning, G.S., Charged and Reactive Polymers/ Ed. by Selengny, E, Reidel Dordrecht, The Netherlands, Vol. 1, pp. 9-37, 1974.

101. Rinaudo, M., Ravanat, G., Vincedon, M., NMR investigfation on oligo-and polygalacturonic acid gel formation in the presence of Ca2+ counterions// Macromol.Chem., Vol. 181 (5), pp. 1059-1070, 1980.

102. Philip, G., Grandal and Louise Wicker. Pectin Internal Gel Strength: Theory, Measurment, and Methodology.- in Fishman M.L. 7 Jen J.J. Chemistry and Function of Pectin// ACS Syp. Series 310, pp. 88-102, 1986.

103. Owens, H.S., McReady, R.M., Maclay, W.D., Gelation properties of pectin// Fd. Technol. Champaign, No.3, p. 77,1949.

104. Молочников B.B., Орлова T.A., Анисимов C.B. Безотходная технология переработки обезжиренного молока на основе безмембранного осмоса. -М.: АгроНИИТЭИММП, 1986.-35 с.

105. Weiss, Н.О., Pectin in Yogurts and Desserts. Lebensmitteltechnik// Food and Nutr. Sci., Vol. 13, No.7-8, pp. 345-349, 1981.