Потенциометрия в исследовании антиоксидантной активности объектов растительного происхождения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Шарафутдинова, Елена Николаевна

• Шарафутдинова, Елена Николаевна
• кандидат химических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат химических наук Шарафутдинова, Елена Николаевна

Глава 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР.

1.1. Механизмы образования свободных радикалов.

1.1.1. Активация кислорода в ферментативных реакциях.

1.1.2. Радикальные окислительные процессы.

1.2. Основные механизмы защиты организма от активных форм кислорода.

1.2.1. Взаимодействие низкомолекулярных тиольных антиоксидантов с активными формами кислорода.

1.2.2. Взаимодействие низкомолекулярных фенольных антиоксидантов с активными формами кислорода.

1.3. Методы исследования составляющих антиоксидантной защиты.

1.4. Методы исследования общей антиоксидантной активности.

1.4.1. Спектрофотометрические и люминесцентные методы исследования.

1.4.2. Электрохимические методы определения антиоксидантов.

1.4.3. Другие методы определения антиоксидантной активности.

Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Аппаратура.

2.2. Реактивы.

2.3. Объекты исследования.

2.4. Методы исследования.

2.4.2. Фотохемилюминесцентный метод.

2.4.3. Исследование противорадикальной активности с использованием стабильного радикала 2,2-дифенил-1 -пикрилгидразила.

2.4.4. Метод хемилюминесцентного определения сверхслабого свечения продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), накапливающихся в мембранах липосом.

2.4.5. Метод Фолина-Чокальтеу.

2.4.6. Метод циклической вольтамперометрии.

Глава 3. ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ПРИРОДНЫХ И СИНТЕТИЧЕСКИХ АНТИОКСИДАНТОВ.

3.1. Исследование электрохимических процессов окисления-восстановления природных и синтетических антиоксидантов методом циклической вольтамперометрии.

3.2. Исследование АОА потенциометрическим методом с использованием медиаторной системы.

3.2.1. Обоснование выбора медиаторной системы.

3.2.2.0птимизация условий определения АОА.

3.2.3. Исследование взаимодействия медиаторной системы с природными водорастворимыми антиоксидантами.

3.2.4. Исследование взаимодействия медиаторной системы с водорастворимыми синтетическими антиоксидантами.

3.2.5. Исследование взаимодействия медиаторной системы с жирорастворимыми антиоксидантами.

Глава 4. КОРРЕЛЯЦИОННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

4.1. Определение корреляции АОА и общего содержания фенольных соединений в вине.

4.2. Определение АОА потенциометрическим методом и методом перекисного окисления липидов.

4.3. Хемилюминесцентные и потенциометрические исследования АОА лекарственных настоев и бальзамов.

4.4. Противорадикальная и антиоксидантная активность водных и водно-этанольных экстрактов лекарственных трав.

Глава 5. ИССЛЕДОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ОБЪЕКТОВ СО СЛОЖНОЙ МАТРИЦЕЙ.

5.1. Метод «введено-найдено».

5.2. Исследование антиоксидантной активности некоторых продуктов питания.

5.2.1. Антиоксидантная активность соков фруктов и овощей.

5.2.2. Исследование антиоксидантной активности чая.

5.2.3. Антиоксидантная активность алкогольсодержащих напитков.

5.3. Определение метрологических характеристик потенциометрического измерения антиоксидантной активности продуктов питания.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Потенциометрия в исследовании антиоксидантной активности объектов растительного происхождения»

Актуальность темы: Общее ухудшение экологической обстановки увеличило риск развития окислительного стресса у людей. Окислительный стресс сопровождается накоплением в организме человека свободных радикалов (CP), что приводит к усугублению заболеваний сердечно-сосудистой, нервной систем, легких, глаз, крови и ускоряет старение организма. Вещества, способные снижать уровень свободных радикалов в организме и защищать макромолекулы живой клетки, получили название антиоксидантов (АО). Актуальность перечисленных выше причин привела к росту потребности оценки содержания такого рода веществ в природных или созданных на их основе объектах (продуктах питания, биологически активных добавках, лекарственных препаратах), которые могут служить источниками АО.

Исследование антиоксидантов в таких объектах в настоящее время проводится в двух направлениях: определение состава веществ, способных выполнять функции антиоксидантов, и определение общих антиоксидантных свойств объектов. Группа веществ, предотвращающая образование сильных окислителей in vivo, довольно разнообразна. К ним относится SH-содержащая аминокислота цистеин, некоторые пептиды и белки (глютатион, альбумин), убихинон, аскорбиновая кислота, мочевая кислота, токоферолы, каротиноиды, флаваноиды и др. Определение состава антиоксидантов позволяет судить о возможной физиологической ценности продуктов, в которых они содержатся. Однако исследование композиции веществ требует применения тех или иных процедур разделения, которые могут быть проведены только в условиях хорошо оснащенной исследовательской лаборатории. Кроме того, информации о составе антиоксидантов, как правило, недостаточно, чтобы судить об антиоксидантных свойствах в целом, так как в этом случае не учитываются процессы взаимного восстановления антиоксидантов и влияние матрицы исследуемого объекта.

Оценить общую антиоксидантную активность (АОА) того или иного объекта можно с помощью интегральных методов. В основе методов оценки общей антиоксидантной активности, как правило, лежат реакции взаимодействия с долгоживущими свободными радикалами, которые служат прототипом свободных радикалов, образующихся в живой клетке. Обеспечивая получение информации об АОА того или иного образца, такие методы имеют ряд особенностей, которые ограничивают возможности их применения. А именно, анализ проходит в несколько стадий и занимает довольно продолжительное время, аналитический сигнал необходимо регистрировать с помощью дорогостоящего спектрофотометрического или флуорометрического оборудования, а также требуется использование дорогостоящих реактивов.

Взаимодействие антиоксидантов с CP и активными кислородными соединениями (02'~, НО', Н202, О!, и др.) в водных средах сопровождается передачей электрона и, следовательно, имеет электрохимическую природу. В связи с этим представляется целесообразным изучать взаимодействие АО и активных кислородных соединений с использованием электрохимических методов. Электрохимические методы характеризуются высокой чувствительностью, быстротой процедуры анализа, относительно невысокой стоимостью необходимого оборудования и реактивов, а значит, и анализа в целом. В этой ситуации наиболее доступным источником информации может служить измерение электрохимических параметров системы реагент/антиоксидант, например, окислительно-восстановительного потенциала.

Целю работы являлись исследование взаимодействия медиаторной системы с АО и разработка нового потенциометрического метода с использованием медиаторной системы для определения антиоксидантной активности чистых химических веществ и оценки антиоксидантных свойств объектов со сложной матрицей: продуктов питания, БАД и экстрактов лекарственных растений. Для достижения указанной цели необходимо решить следующие задачи: обосновать применение нового потенциометрического метода с использованием медиаторной системы для определения антиоксидантной активности различных объектов: чистых химических веществ, продуктов питания и экстрактов лекарственных растений;

- сформулировать критерии выбора и подобрать медиаторную систему для потенциометрического определения антиоксидантной активности;

- исследовать реакции взаимодействия антиоксидантов с медиаторной системой;

- исследовать антиоксидантную активность индивидуальных веществ полифенольной природы (природных и синтетических) методом потенциометрии; провести корреляционные исследования результатов определения антиоксидантных свойств различных объектов, полученных разными методами;

- исследовать антиоксидантную активность объектов со сложной переменной матрицей: свежеприготовленных соков, соков и нектаров промышленного производства, алкогольсодержащих напитков, чая, овощей, ягод, некоторых фруктов, препаратов лекарственных растений; определить основные метрологические характеристики потенциометрического метода с применением медиаторной системы для измерения антиоксидантной активности некоторых продуктов питания. Научная новизна. Предложен новый потенциометрический метод исследования антиоксидантной активности. Дано термодинамическое обоснование выбора медиаторной системы для данного метода. Предложенным потенциометрическим методом изучена стехиометрия реакции некоторых полифенольных антиоксидантов растительного происхождения, аскорбиновой кислоты, ряда синтетических антиоксидантов с выбранной медиаторной системой гексацианоферрат (II/III) калия. Показано, что стехиометрические коэффициенты взаимодействия полифенольных антиоксидантов с K3[Fe(CN)6] соответствуют количеству ОН-групп при бензольном кольце, флавоновом ядре или ненасыщенном гетероцикле (аскорбиновая кислота). На примере производных пирогаллола, пирокатехина и гидрохинона показано, что антиоксидантная активность этих соединений возрастает при введении в структуру молекулы карбонильной группы в соседнем с бензольным кольцом положении, а также при введение оксимной и тиосульфонатной групп. Снижение АОА наблюдается, когда метальная группа находится в соседнем положении с карбонильной и оксимной группами, а также когда один или два морфолинометильных остатка находятся в соседнем положении с бензольным кольцом. Можно полагать, что подобные явления окажутся достаточно общими.

Показана высокая степень корреляции результатов определения антиоксидантной активности и противорадикальной активности методами потенциометрии, фотохемилюминесценции, фотоколориметрии с использованием стабильного радикала 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила и методом определения сверхслабого свечения продуктов перекисного окисления в липосомах, а также антиоксидантной активности и содержания фенольных соединений в вине. Коэффициенты корреляции составляют 80 - 90%. Практическая значимость. Разработан способ интегральной оценки антиоксидантной активности ряда природных объектов со сложной матрицей с использованием метода потенциометрии.

Предложена экспрессная и простая в исполнении методика определения АОА чистых химических веществ, оценки АОА продуктов питания и лекарственных препаратов растительного происхождения. Установлены пределы определения АОА в водном растворе и мицеллярном растворе а-токоферол/вода.

Определена АОА ряда продуктов питания. Установлены количественные метрологические характеристики измерения АОА продуктов питания. Обсуждается возможность использования этого параметра как одного из показателей качества продуктов питания. На защиту выносятся:

1. Обоснование применения нового потенциометрического метода исследования АОА веществ с использованием медиаторной системы.

2. Результаты исследования взаимодействия природных и синтетических АО с медиаторной системой K3[Fe(CN)6]/ K4[Fe(CN)6].

3. Результаты корреляционных исследований антиоксидантных свойств предложенным методом и методами фотохемилюминесценции, фотоколориметрии с использованием стабильного радикала 2,2-дифенил-1-пикрилгидразила и методом определения сверхслабого свечения продуктов перекисного окисления липосом, а также корреляции АОА и общего содержания фенолов в вине.

4. Результаты исследования АОА объектов со сложной переменной матрицей: продуктов питания растительного происхождения, препаратов лекарственного сырья.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на VI Всероссийской конференции по электрохимическим методам анализа с международным участием «ЭМА-2004», г. Уфа, 2004; на научно-практическом семинаре «Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения», Институт биохимической физики им. Н.М. Эммануэля РАН, г. Москва, 2004; на Всероссийской научно-технической конференции-выставке

Высокоэффективные пищевые технологии, методы и средства для их реализации», г. Москва, 2004; на II Международной конференции «Современное приборное обеспечение и методы анализа почв, кормов, растений и сельскохозяйственного сырья», г. Москва, 2004; на Всероссийской научной конференции с международным участием «Электроаналитика-2005», г. Екатеринбург, 2005; на 8-м Международном семинаре-презентации инновационных научно-технических проектов «Биотехнология-2005», г. Пущино, 2005.

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Шарафутдинова, Елена Николаевна

выводы

1. Методом ЦВА показано наличие окислительно-восстановительных свойств ряда антиоксидантов природного и синтетического происхождения. Определены потенциалы пиков окисления исследованных соединений.

2. Дано термодинамическое обоснование применения потенциометрического метода с использованием медиаторной системы для определения антиоксидантных свойств различных объектов, сформулированы критерии выбора и подобрана соответствующая им медиаторная система.

3. Потенциометрическим методом исследована антиоксидантная активность ряда природных и синтетических антиоксидантов, определены числа эквивалентности и стехиометрические коэффициенты реакции взаимодействия AOred и Кз[Ре(СЫ)б].

4. Показана взаимосвязь антиоксидантной активности и строения молекулы синтетических антиоксидантов.

5. Показана высокая чувствительность нового потенциометрического метода: предел определения АОА в водном растворе и эмульсии масло/вода составили 3,5" 10"6и 4i0"6 моль экв. /дм3 (п=6, р=0,95).

6. Достоверность результатов, получаемых предлагаемым методом, доказана: а) хорошей корреляцией с данными, полученными известными методами. Коэффициенты корреляции составили: с методом Фолина-Чокальтеу - 0,99; с методом ПОЛ - 0,94; с методом фотохемилюминесценции - 0,87; с методом фотометрии с использованием ДФПГ - 0,99. б) Близкими к 100% результатами определения АОА, полученными методом «введено-найдено» на модельных растворах и объектах со сложной матрицей.

7. Исследована АОА объектов со сложной матрицей: продуктов питания, БАД, препаратов лекарственных трав. Обсуждается возможность использования параметра АОА как одной из характеристик качества продуктов растительного происхождения.

8. Определены метрологические характеристики методики потенциометрического определения антиоксидантной активности.

9. Разработан новый потенциометрический метод определения антиоксидантной активности, который отличается экспрессностью процедуры анализа, и позволяет проводить точную количественную оценку антиоксидантной активности объектов с сложной матрицей без использования токсичных и дорогостоящих вспомогательных материалов.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Неблагоприятное воздействие факторов внешней среды, таких как избыточная инсоляция, ионизирующее излучение, воздействие ксенобиотиков, попадающих в организм с воздухом, водой, пищей, могут приводить к избыточному образованию свободных радикалов и возникновению окислительного стресса. Окислительный стресс, в свою очередь, вносит существенный вклад в развитие ряда заболеваний и старение организма человека. В настоящее время существует большое количество дифференциальных и интегральных способов оценки антиоксидантных свойств как организма в целом, отдельных составляющих антиоксидантной защиты, так и АОА химических веществ, продуктов питания и биодобавок. Большинство существующих методов объединяет ряд особенностей, ограничивающих возможность их использования рамками исследовательских лабораторий. В связи с этим поиск простого в исполнении и информативного метода определения интегральной антиоксидантной активности природных и синтетических объектов по-прежнему представляет большой интерес.

Электрохимические методы исследования АОС выгодно отличает быстрота процедуры анализа, относительно невысокая стоимость необходимого оборудования. Тем не менее, разработанные к настоящему моменту методы предполагают применение либо дорогостоящих биохимических реактивов, либо использование достаточно токсичных вспомогательных веществ (Hg). В настоящей работе для интегральной оценки антиоксидантной активности предложен новый потенциометрический метод с использованием медиаторной системы, которая отвечает ряду требований: термодинамическая возможность химической реакции реагента с основными антиоксид антами, обратимость электродной реакции медиаторной системы, быстрое установление равновесного потенциала, Нернстовская зависимость потенциала от изменения концентрации компонентов системы, достаточно большая скорость реакции с основными АО. Поиск медиаторной системы, соответствующей этим требованиям, привел к выбору системы K4[Fe(CN)6]/

K3[Fe(CN)6], стандартный потенциал которой относительно Н.В.Э. составляет 0,36 В. Исследованы реакции взаимодействия ряда природных и синтетических антиоксидантов с данной медиаторной системой. Определены стехиометрические коэффициенты этих реакций. Показано, что стехиометрические коэффициенты взаимодействия исследованных природных антиоксидантов с медиаторной системой соответствуют количеству ОН-групп при бензольном кольце, флавоновом ядре и ненасыщенном гетероцикле. Для синтетических АО показана взаимосвязь АОА со структурой молекулы вещества. Новый потенциометрический метод позволяет определять антиоксидантную активность с высокой чувствительностью: предел определения АОА в водном растворе - 3,5'10"6 моль экв./дм3, в мицеллярном

А Ч растворе - 4' 10' моль экв./дм . Подтверждена достоверность результатов определения АОА, полученных потенциометрическим методом: результаты определения АОА методом «введено-найдено» на модельных растворах и в образцах со сложной матрицей составили величины, близкие к 100%. Получены высокие коэффициенты корреляции результатов определения АОА потенциометрическим методом и широко используемыми методами фотоколориметрии с использованием ДФПГ, Фолина-Чокальтеу, фотохемилюминесценции и люминесценции ПОЛ. Реализована возможность определения АОА объектов со сложной матрицей: продуктов питания, Б АД, препаратов лекарственного сырья. Показана значимость антиоксидантной активности как одного из показателей качества продуктов питания. Оценены метрологические характеристики методики потенциометрического определения антиоксидантной активности продуктов питания, БАД, витаминов. Готовится ее метрологическая аттестация (Приложение 1). Разработанные методики внедрены в текущий учебный процесс и используются в НИРС (Приложение 2).

Представляется перспективным дальнейшее развитие метода для определения АОА биологических жидкостей.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Шарафутдинова, Елена Николаевна, 2007 год

1. Зенков Н.К. Окислительный стресс Текст. / Н.К. Зенков, В.З. Панкин, Е.Б. Меньшикова // М.: МАИК «НАУКА/ИНТЕРПЕРИОДИКА», 2001. - 343с.

2. Метелица Д.Н. Активация кислорода ферментными системами Текст. / Д.Н. Метелица // М.: Наука, 1982. 255с.

3. Эккерт Р. Физиология животных Текст. / Р. Эккерт, Д. Рэнделл, Д. Огастин // М.: Мир, 1992. Т 2.- 343с.

4. Cheung К. Luminol-dependent chemiluminescence produced by neutrophils stimulated by immune complexes Text. / K. Cheung, A. Archibald, F. Robinson // Austr. J. Exp. Biol. And Med. Sci. 1984. V. 62. -P. 403-419.

5. Kolb H. Nitric oxide: A pathogenic factor in autoimmunity Text. / H. Kolb, V. Kolb-Bchoten // Immunol. Today. 1992. V 13. - P. 157-160.

6. Shi X. Flavoenzymes reduce vanadium (V) and molecular oxygen and generate hydroxyl radical Text. / X. Shi, N.S. Dalai // Arh. Biochem. and Biophys. 1991. -V. 289.-P. 355-361.

7. Вольский Н.Н. Влияние супероксидного радикала на пролиферацию лимфоцитов, стимулированную митогеном Текст. / Н.Н. Вольский, Р.И. Кашлаков, В.А Козлов. // Цитология. 1988. Т. 30, №7. - С.898-902.

8. Wendel A. Enzymes acting against reactive oxygen Text. / A. Wendel // Enzymes Tools and Targets. - Basel: Karger, 1988. - P. 161-167.

9. Фридович И. Радикалы кислорода, пероксид водорода и токсичность кислорода Текст. / И. Фридович // В кн.: Свободные радикалы в биологии. Под. ред. У. Прайора. М.: Мир. - 1979. - т.1. - с.270-314.

10. Halliwell В. The antioxidants of human exracellular fluids Text. / B. Halliwell, M. Vasil, M. Grootveld // Arch. Biochem. and Biophys. 1990. V. 280. -P. 1-8.

11. Yagi K. Female hormones act as natural antioxidants a survey of our research Text. / K. Yagi // Acta Biochimica Polonica.1997. - V.44. - P.701-709.

12. Reiter R.J. Reactive oxygen intermediates, molecular damage, and aging. Relation to melatonin Text. / R.J. Reiter, J.M. Guerrero, J.J. Garcia, D. Acuna-Castroviejo // Ann. N.Y.Sci. 1998. V. 854. - P. 410-424.

13. Меньшикова Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов Текст. / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Успехи соврем, биологии. 1993. - Т. 113, № 4. - С. 442-455.

14. Finch J.W. Mass spectrometric identification of modifications to human serum albumin treated with hydrogen peroxide Text. / J.W. Finch, R.K. Crouch, D.R. Knapp, K.L. Schey // Arch. Biochem. And Biophys. 1993. V. 305. - P. 595-599.

15. Radi R. Peroxynitrite oxidation of sulfhydryls. The cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide Text. / R. Radi, J.S. Beckman, K.M. Bush, B.A. Freeman//J. Biol. Chem. 1991.-V. 166. P. 4244-4250.

16. Рогинский B.A. Фенольные антиоксиданты. Реакционная способность Текст. / B.A. Рогинский // М.: Наука, 1988. 247 с.

17. Hicks М. Identification of products from oxidation of uric acid induced by hydroxyl radicals Text. / M. Hicks, L.S. Wong, R.O. Day // Free Radical Res. Commun. 1993.-V. 18.-P. 337-351.

18. Арутюнян A.B. Методы оценки свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы организма Текст. / А.В. Арутюнян, Е.Е. Дубинина, Н.Н. Зыбина // СПб.: МФК «Фолиант», 2000. 104 с.

19. Fried R. Enzimatic and non- enzymatic assay of superoxide dismutase Text. / R. Fried // Biocemie. 1975. V.57, № 5. - P. 657-660.

20. L'Able M.R. Automated assay of superoxide dismutase in blood Text. / M.R. L'Able, P.W. F. Fisher // Method Enzimology. 1990. V.186. - P. 232-237.

21. Костюк В. А. Простой и чувствительный метод определения супероксиддисмутазы, основанный на реакции окисления кверцетина Текст. / В.А. Костюк, А.И. Потапович, Ж.В. Ковалева // Вопросы медицинской химии. 1990.-Т. 36,№2.-С. 88-91.

22. Каган В.Е. Проблема анализа эндогенных продуктов перекисного окисления липидов Текст. / В.Е. Каган, О.Н. Орлов, JI.A Прилипко // Биофизика. Т. 18. (Итоги науки и техники ВИНИТИ АН СССР). М., 1986. -136 с.

23. Fletcher B.L. Measurement of fluorescent lipid peroxidation products in biological system and tissues Text. / B.L. Fletcher, C.J. Dillard, A.Y. Tappel // Analitical Biocemistry. 1973.-V.52.-P. 1-9.

24. Mueller S. Sensitive and nonenzimatic measurement of hydrogen peroxide in biological systems Text. / S. Mueller // Free Radical Biology & Medicine. 2000. -V.29, № 5. P. 410-415.

25. Преснова Г.В. Биосенсоры на основе иммобилизованной пероксидазы для определения пероксида водорода Текст. / Автореф. дис. канд. хим. наук:02.00.15- Защищена 19.06.2001; Москва, 2001.-23 с.

26. Rice-Evance С. Total antioxidant status in plasma and body fluids Text. / C. Rice-Evance, N.J. Miller // Methods of Enzymology. 1994. V. 234. - P.279-293.

27. Strain J.J. Measurement of antioxidant (reducing) power and/or antioxidant concentration Text. / J.J. Strain, I. Benzie // U.S. Patent US6177260, МПК7 GO IN 33/48.-2001.-7 p.

28. Da Cruz G. Use of bathocuproine for the evaluation of the antioxidant power in liquids and solutions Text. / G. Da Cruz // Patent PCT IT99/00289, WO 00 16093, МПК7 G01N 31/00. 2000. - 9 p.

29. Prior R.L. In vivo total antioxidant capacity comparison of different analytical methods // Free Radical Biology & Medicine. 1999. - v.27. - P. 1173-1181.

30. Gizelli A. Fluorescence-based method for measuring total plasma antioxidant capability Text. / A. Gizelli, M. Serafini, G. Maiani, E. Azzini, A. A Ferro-Luzzi // Free Radical Biology & Medicine. 1995. V.18, № 1. - P. 29-36.

31. Ghiselli A. Total antioxidant capacity as a tool to assess redox status: critical view and experimental data Text. / A. Ghiselli, M. Serafini, F. Natella, C. Scaccini // Free Radical Biology& Medicine. 2000.-V. 29, № 11.-P. 1106-1114.

32. Формазюк В.Е. Способ определения антиокисительной активности веществ Текст. / В.Е. Формазюк, Т.Н. Горшкова, В.И. Сергиенко // Патент РФ RU2163021, МПК7 G01N 33/483. 10.02.2001. - 7 с.

33. Cheng Z. Determination of antioxidant activity of phenolic antioxidants in Fenton-type reaction system by chemiluminescence assay Text. / Z. Cheng, G. Yan, Y. Li, W. Chang // Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2000. - V.28, № 6. -P. 860-870.

34. Chevion Sh. The use of cyclic voltammetry for the evaluation of antioxidant capacity Text. / Sh. Chevion, M.A. Roberts, M. Chevion // Free Radical Biology & Medicine. 2000. V.28, № 6. - P. 860-870.

35. Kohen R. Quantification of the overall reactive oxygen species scavenging capacity of biological fluids and tissues Text. / R. Kohen, E. Vellaichamy, J. Hrbac, I. Gaty, O. Tirosh // Free Radical Biology & Medicine. 2000. V.28, № 6. -P. 871-879.

36. Chen J. Electrochemical studies on antioxidants in bovine milk Text. / J. Chen, L. Gorton, B. Akersson // Analitica Chimica Acta, 2002, № 474. P. 137-146.

37. Chen J. Antioxidant capacity of bovine milk as assayedby spectrofotometric methods Text. / J. Chen, H Lindmarc-Mansson, L. Gorton, B. Akersson // Internationale Diary Journal, 2003, V.13. P.927-935.

38. Campanella L. Determination of antioxidant properties of aromatic herbs, Olives and fresh fruit using an enzymatic sensor Text. / L. Campanella, A. Bonnani, G. Favero, M. Tomassetti // Analiticaland Bioanalitical Chemistry. 2003. V.375. -P. 1011-1016.

39. Ignatov S. Amperometric biosensor based on a functionalized gold electrode for the detection of antioxidants Text. / S. Ignatov, D. Shishniashvili, B. Ge, F.W. Scheller, F. Lisdat // Biosensor & Bioelectronics. 2002. V. 17. - P. 191-199.

40. Короткова Е.И. Новый вольтамперометрический способ определения активности антиоксидантов Текст. / Е.И. Короткова, Ю.А. Карбаинов, О.А. Аврамчик // VI Международная конференция «Биоантиоксидант», Москва, 1619 апреля 2002. Тез. докл. С. 298-299.

41. Korotkova E.I. Study of antioxidant properties by voltammetry. Short Communication Text. / E.I. Korotkova, Y.A. Karbainov, A.V. Shevchuk // J. of Electroanalytical Chemistry. 2002. V.518. - P. 56-60.

42. Абдуллин И.Ф. Кулонометрическая оценка антиоксидантной способности экстрактов чая электрогенерированным бромом Текст. / И.Ф. Абдуллин, Е.Н. Турова, Г.К. Будников // Журнал аналитической химии. 2001. Т.56, № 6. -С. 627-629.

43. Абдуллин И.Ф. Определение ионола методами вольтамперометрии и кулонометрического титрования. Текст. / И.Ф. Абдуллин, Е.Н. Турова, Ю.В. Паршакова, Г.К. Будников, Э.Л. Гоголашвили // Журнал аналитической химии. 2002. Т.57, № 3. - С. 296-300.

44. Абдуллин И.Ф. Применение электрогенерированного брома для оценки интегральной антиоксидантной способности лекарственного растительного сырья и препаратов на его основе Текст. / И.Ф. Абдуллин, Е.Н. Турова, Г.Х.

45. Гайсина, Г.К. Будников // Журнал аналитической химии. 2002. Т.57, № 6. -С. 666-670.

46. Турова Е.Н. Применение электрохимических методов для оценки интегральной антиоксидантной способности лекарственного растительного сырья и пищевых продуктов Текст. / Автореф. дис. канд. хим. наук: 02.00.15 -Защищена 15.11.2001; Казань, 2001.-23 с.

47. Зиятдинова Г.К. Определение сывороточного альбумина в крови методом гальваностатической кулонометрии Текст. / Г.К. Зиятдинова, Г.К. Будников,

48. B.И. Погорельцев // Журнал аналитической химии. 2004. Т.59, № 7.1. C. 742-744.

49. Lindqvist А-М. Method for detection of potential co-antioxidants Текст. / AM. Lindqvist, K. Petersson, R. Stocker, C. Westerlund, P. Witting // U.S. Patent US6031008, МПК7 AO IN 31/08. 2000. - 14 p.

50. Zhang M.H. Determination of total antioxidant capacity in green tea by near-infrared spectroscopy and multivariate calibration Text. / M.H. Zhang, J. Luypaert, J.A. Fernandes Pierna, Q.S. Xu, D.L. Massart // Talanta. 2004. V.62. - P. 25-35.

51. Morelle J. Method for measuring the antioxidant activity of food products and for producing extracts with quantified antioxidant activity Text. / J. Morelle // Patent PCT/FR98/01164, W098/57168, MnK6G01N 30/02, A61K 35/78. -1998. 7 p.

52. Porter W.L. Method for visually detecting antioxidants in an organic mixture Text. / W.L. Porter, R.E. Kramer // U.S. Patent US4257776, МПК3 G01N 31/06, G01N 31/08.- 1981.-4 p.

53. Qian Y. Antioxidant activity profile assay Text. / Y. Qian, R.E.A. Leitz, D.W. Krempin // U.S. Patent US6429021, MnK7G01N 30/90, GO IN 30/94. 2002. - 5 p.

54. Лозовская E.JI. Сравнительная эффективность некоторых медицинских препаратов как акцепторов супероксид-радикала Текст. / E.JI. Лозовская, И.И. Сапежинский//Биофизика. 1993. Т.38. - С. 31-36.

55. ГОСТ 19885-74 Чай. Методы определения содержания танина и кофеина Текст. // М.: Издательство стандартов, 1990. 7 с.

56. Сернов Л.Н. Элементы экспериментальной фармакологии Текст. / Л.Н. Сернов, В.В. Гацура // М.: 2000. 352 с.

57. Вино и алкогольные напитки. Директивы и регламенты Европейского союза Текст. // М.: «ИПК Издательство стандартов», 2000. 606 с.

58. Рекомендации и номенклатурные правила ИЮПАК по химии Текст. / Сост. Б.Ф. Мясоедов, Ю.А. Золотов, В.М. Иванов, Е.К. Корчемная // М.: «Наука», 2004. 158 с.

59. ГОСТ Р ИСО 5725-2002 Текст. / в 6 частях // М.: ИПК Издательство стандартов, 2002. 208 с.

60. Дёрфель К.Статистика в аналитической химии Текст. / К. Дёрфель // М.: «Мир», 1994.-268 с.

61. Janeiro P. Catechin electrochemical oxidation mechanisms Text. / P. Janeiro, Brett A.M.O. // Analytica Chimica Acta. 2004. V. 518. - P. 109-115.

62. Marcovic J.M.D. Antioxidative capabilities of some organic acids and their co-pigments with malvine. Part I Text. / J.M.D. Marcovic, L.M. Ignatovic, D.A. Marcovic, J.M. Baranac // Journal of Electroanalitical Chemistry. 2003. V.553. -P. 169-175.

63. Dias T.G. Voltammetric behavior and determination of tocopherols with partial least square calibration: analysis in vegetable oil samples Text. / T.G. Dias, I.D. Meras, A.G. Cabanillas, M.F.A. Franco // Analitica Chimica Acta. 2004. V.511. -P. 231-238.

64. Standard potentials in aqueous solution Text. / edited by AJ. Bard, R. Parsons, J. Jordan // New York.: Marcel Dekker INC, 1985. 834 p.

65. Слесарев В.И. Химия: Основы химии живого Текст. / В.И. Слесарев // Санкт-Петербург: Химиздат, 2001. 784 с.

66. Будников Г.К. Основы современного электрохимического анализа Текст. / Г.К. Будников, В.Н. Майстренко, М.Р. Вяселев // М.: Мир, 2003. 592с.

67. Тарасевич М.Р. Электрохимия углеродных материалов. Текст. / М.Р. Тарасевич // М.: Наука, 1984. С. 18-94.

68. Меньшикова Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окислительных процессов Текст. / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Успехи соврем, биологии. 1993. Т. 113. - Вып. 4. - С. 442-455.

69. Барабой В. А. Биологическое действие растительных фенольных соединений Текст. / В.А. Барабой // Киев, 1976. 260 с.

70. Павлов Б.А. Курс органической химии Текст. / Б.А.Павлов, А.П.Терентьев // М-Л.: «Химия», 1965. 686 с.

71. Robards К. Phenolic compounds and their role in oxidative processes in fruits Text. / K. Robards, P.D. Prenzler, G. Tucer, P. Swatsitang, W. Glover // Food Chemistry. 1999. -V. 66. P. 401-436.

72. Ruperes F.J. Determination of a-tocopheryl acetate in diets of experimental animals. Study of stability in diets Text. / F.J. Ruperes, C. Barbaras, M. Castro, E. Herrera // Journal of Chromatography A. 1999. V. 839. - P. 93-99.

73. Плесков В.А. Электродные потенциалы в ацетонитриле Текст. / В.А. Плесков // Ж. физической химии. 1948. -т. XXII. -№ 3. С. 352-361.

74. Колотыркин Я.М. Электрохимия металлов в неводных растворах Текст. / Я.М. Колотыркин // М.: «Мир», 1974. 440 с.

75. Соломатин В.Т. Ферроцен в анализе сталей и сплавов Текст. / В.Т. Соломатин // М.: «Металлургия», 1980. 160 с.

76. Шляпинтох В.Я. Хемилюминесцентные методы исследования медленных химических процессов Текст. / В.Я. Шляпинтох, О.Н. Карпухин, JI.M. Постников, И.В. Захаров, А.А. Витучинский // Москва.: «Наука», 1966. 300 с.

77. Malterud К.Е. C-metilated digidrohalkone from Myrica gale L: effect as antioxidant and as scavengers of l,l-diphenil-2-picrilhydrasil Text. / K.E. Malterud, O.H. Diep, R.B. Sund // Pharmacol. Toxicol. 1996. -V. 78, №2. -P. 111-116.

78. Blois H.S. Antioxidant determination by use of stable free radical Text. / H.S. Blois // Nature. 1958.-Nol81.-P. 119-120.

79. Glaving J. Antioxidants in animal tissue Text. / J. Glaving // Acta Chem. Scand. 1963.-V. 17, № 13.-P. 1635-1640.

80. Litescu S. Antioxidative power evaluation of some phenolic antioxidants -electoanalitical approach Text. / S. Litescu, G-L. Radu, M. Diaconu // Electroanalysis. 2001. -V. 13, № 8-9. P. 804-806.

81. Dufor C. Gallic esters of sucrose as efficient radical scavengers in lipid peroxidation Текст. / С. Dufor, E. Da Silva, P. Potier, Y. Queneau , O. Dangler // J. Agric. Food Chem. 2002. V.50. - P. 3425-3430.

82. Булатов М.И. Практическое руководство по фотоколориметрическим методам анализа Текст. / М.И. Булатов, И.П. Калинкин //М.: «Химия», 1968. -384 с.

83. Физико-химические методы анализа Текст. / под. ред. В.Б. Алесковского // Л.: «Химия», 1988. 374 с.

84. Tiwari А.К. Imbalance in antioxidant defense and human diseases: Multiple approach of natural antioxidant therapy Text. / A.K. Tiwari // Current science. 2001. V.81, № 9. - P. 1179-1187.

85. Garcia-Alonso M. Evaluation of the antioxidant properties of fruits Text. / M. Garcia-Alonso, S. de Pascual-Teresa, C. Santos-Buelga, J.C. Rivas-Gonzalo // Food Chemistry. 2004 V.84, №1. - P. 13-18.

86. Dekker M. Analysing the Antioxidant Activity of Food Products: Processing and Matrix Effects Text. / M. Dekker, R. Verkerk, A.A. Van Der Sluis, S. Khokhar, W.M.F. Jongen // Toxicology in vitro. 1999. V. 13. - P. 797-799.

87. Higdon J.V. Tea Catehins and Polyphenols: Health Effects, Metabolism, and Antioxidant Functions Text. / J.V. Higdon, B. Frey // Critical Reviews in Food Science and Nutrition. 2003. V.43, №1. - P. 89-143.

88. Robards K. Analitical Chemistry of Fruit Bioflavaniods Text. / K. Robards, V. Antolovich // Analist. 1997. V. 122. - P. 11R-34R.

89. Справочник по товароведению продовольственных товаров Текст. / под ред. Родиной Т.Г.// М.: «КолосС», 2001. 608 с.

90. Minussi R.C. Phenolic compounds and total antioxidant potential of commercial wines Text. / R.C. Minussi, M. Rossi, L. Bologna, L. Cordi, D. Rotilio, G. M. Pastore, N. Duran // Food Chemistry. 2003. V. 82, No 3. - P. 409-416.

91. Sobiech R.M. Automated Voltammetric Determination of Reducing Compounds in Beer Text. / R.M. Sobiech, R. Neuman, D. Wabuer // Electoanalysis. 1998. -V.10, Nol4.-P. 969-975.

92. РМГ 61-2003 Рекомендации по межгосударственной стандартизации. ГСИ. Показатели точности, правильности, прецизионности методик количественного химического анализа. Методы оценки Текст. // М.: ИПК Издательство стандартов, 2004. 42 с.