Получение трансгенных растений картофеля (Solanum tuberosum L.) и ячменя (Hordeum vulgare L.) с геном Fe-SOD1 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Бакулина, Анна Владимировна

• Бакулина, Анна Владимировна
• кандидат наук
• 2016

Оглавление диссертации кандидат наук Бакулина, Анна Владимировна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Особенности культивирования и регенерации растений in vitro

1.1.1 Культура изолированной ткани картофеля

1.1.2 Культура изолированной ткани ячменя

1.2 Возможности генной инженерии для совершенствования культур

картофеля и ячменя

1.2.1 Генная инженерия антиоксидантов

1.3 Методы генетической инженерии растений

1.3.1 Методы прямого переноса чужеродных генов в растительный геном

1.3.2 Agrobacterium^-опосредованная трансформация

1.4 Подходы к повышению эффективности агробактериальной

трансформации

ГЛАВА II. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объекты исследования

2.2 Условия культивирования растений in vitro

2.3 Индукция морфогенеза в каллусе ячменя

2.4 Гистологическая оценка состояния каллуса

2.5 Агробактериальная трансформация растений

2.6 Молекулярно-генетический анализ растений -трансформантов для подтверждения их трансгенной природы

2.7 Фенотипическая оценка трансгенных растений

2.8 Статистическая обработка данных

ГЛАВА III. ПОЛУЧЕНИЕ И АНАЛИЗ ТРАНСФОРМАНТОВ

КАРТОФЕЛЯ С ГЕТЕРОЛОГИЧНЫМ ГЕНОМ Fe-SOD1

3.1 Получение трансгенных линий картофеля Беллароза с геном Fe-SOD1

3.2 Влияние гетерологичного гена Fe-SOD1 на морфометрические и биохимические показатели трансформантов картофеля

3.3 Оценка растений-трансформантов в условиях стресса

ГЛАВА IV. ПОДБОР МЕТОДИЧЕСКИХ ПРИЕМОВ И СПОСОБОВ ДЛЯ ПОВЫШЕНИЯ РЕГЕНЕРАЦИОННОГО ПОТЕНЦИАЛА ЯЧМЕНЯ

4.1 Изучение особенностей каллусогенеза и морфогенеза (регенерации) у хозяйственно ценных генотипов ячменя

4.2 Разработка новых способов индукции морфогенеза в каллусной ткани ячменя

4.2.1 Изучение влияния перфторорганических соединений и метилотрофных бактерий на каллусную ткань ячменя

4.2.2 Подбор оптимальных условий культивирования каллуса ячменя на

средах с добавлением перфтордекалина

ГЛАВА V. АГРОБАКТЕРИАЛЬНАЯ ТРАНСФОРМАЦИЯ ЯЧМЕНЯ ГЕНОМ Гв-8001

5.1 Подбор оптимальных концентраций антибиотиков, используемых в протоколе агробактериальной трансформации ячменя

5.1.1 Подбор концентрации канамицина для отбора растений -трансформантов

5.1.2 Подбор концентрации цефотаксима для элиминации агробактерии

5.1.3 Подбор концентрации тиментина для элиминации агробактерии

5.2 Сравнительная характеристика эффективности агробактериальной трансформации ячменя в различных реципиентных системах

5.3 Изучение первичных трансформантов (Т0) ячменя с гетерологичным

геном ¥е-$>0и1 и их потомства (Т1)

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение трансгенных растений картофеля (Solanum tuberosum L.) и ячменя (Hordeum vulgare L.) с геном Fe-SOD1»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы, степень ее разработанности. Длительная направленность селекционного процесса на высокую урожайность привела к тому, что многие культурные виды, в результате однонаправленного отбора, утратили устойчивость к стрессовым воздействиям, что существенным образом снижает их продуктивность. Сравнение потенциальных и фактических урожаев нескольких видов культурных растений показало, что их урожаи обычно составляют не более 30% от их максимально возможного уровня (Brown, 2011). Последние достижения биотехнологии и генной инженерии позволили достичь крупных успехов в повышении устойчивости растений к гербицидам, насекомым-вредителям, фитопатогенам (Clive, 2014), в меньшей степени - к повреждающим абиотическим факторам. Это делает актуальным разработку методических основ создания стресс-толерантных сортов растений.

Важным условием формирования у растений адаптивных реакций является эффективное функционирование общих систем устойчивости, и, среди них -антиоксидантных систем, защищающих организм от окислительного стресса, который выдвинут сегодня на роль универсального звена в реакции растительного организма на действие самых разнообразных факторов (Шакирова, 2001; Тарчевский,2002; Mittler, 2002).

К числу ключевых компонентов системы защиты клеток и тканей от окислительной деструкции относится антиоксидантный фермент супероксиддисмутаза (СОД, КФ 1.15.1.1) (Бараненко, 2006). СОД катализирует реакцию дисмутации супероксидных анион-радикалов до молекулярного кислорода и пероксида водорода. Супероксидные анион-радикалы могут вызывать прямые повреждающие эффекты, а также быть источником образования других, в том числе и более токсичных, форм кислорода. Поэтому клетка нуждается в строгом контроле над продукцией и своевременном удалении данных радикалов.

Антиокислительную активность внутри клетки можно значительно повысить, внедрив в геном реципиентного растения гены фермента СОД.

Гетерологическая суперэкспрессия этих генов в растениях табака (Gupta et al., 1993; Badawi et al., 2004; Павлючкова, 2012; Широких и др., 2015), кукурузы (Breusegem et al., 1999), арабидопсиса (Gao et al., 2003), томата (Серенко и др., 2009; Баранова и др., 2015) и др. повышала их устойчивость к воздействию неблагоприятных факторов среды, в сравнении с обычными растениями. В отношении повышения антиоксидантной защиты важнейших для Нечерноземья РФ продовольственных культур - картофеля и ячменя - ранее подобных исследований не проводилось.

Эффективность генетической трансформации растений напрямую зависит от возможности сохранения морфологических и физиологических характеристик культуры и стабильной экспрессии гетерологичных генов. Сегодня существует ряд стратегий и технологий, применяемых для получения трансгенных растений с новыми физиолого-биохимическими признаками (Колодяжная и др., 2009; Vinocur, Altman, 2005). Однако, несмотря на разнообразие подходов, универсального эффективного способа все еще не найдено. В связи с этим разработка эффективных способов и приемов трансформации и регенерации для получения трансгенных растений ячменя, как и получение трансформантов картофеля с искомым стабильным фенотипом, остаются важными задачами и будут содействовать разработке современных технологий повышения стресс -толерантности растений.

Наряду с прикладными аспектами применения нового биотехнологического подхода в селекции, эти исследования могут иметь важное значение для развития фундаментальных вопросов физиологии растений и молекулярной биологии.

Цель работы - получение и анализ трансгенных растений картофеля и ячменя с гетерологичным геном Fe-супероксидисмутазы (Fe-SOD1) для повышения стресс-толерантности растений и изучения механизмов антиоксидантной защиты.

Задачи работы

1. Получить трансгенные по гену Fe-SOD1 растения картофеля (Solanum tuberosum L.) и ячменя (Hordeum vulgare L.) с использованием штамма Agrobacterium tumefaciens AGL0 с бинарным вектором pBI-FeSOD.

2. Провести проверку встраивания, функциональной активности гетерологичного гена Fe-SOD1 в геноме трансформантов и оценку влияния встроенного гена на фенотип трансгенных растений (морфологические и биохимические признаки, продуктивность).

3. Выявить оптимальные условия для проведения агробактериальной трансформации ячменя.

4. Подобрать методические приёмы и способы повышения регенерационной способности ячменя in vitro.

Научная новизна. Впервые на основе картофеля сорта Беллароза и ячменя отечественных сортов Белгородский 100 и Купец получены трансгенные линии, несущие ген Fe-SOD1 из Arabidopsis thaliana. Показано, что встраивание гена Fe-SOD1 в геном картофеля повышает уровень общей активности супероксиддисмутазы в листьях трансформантов по сравнению с исходными (нетрансгенными) растениями, не вызывая нарушений роста и клубнеобразования. Выявлены оптимальные условия для агробактериальной трансформации исследованных сортов ячменя, в частности подобраны реципиентные системы, концентрации антибиотиков для отбора трансформантов и элиминации агробактерии, а также продолжительность инокуляции и сокультивирования (для каллусной ткани). Впервые установлено, что перфторорганические соединения (ПФОС) в чистом виде, а также в сочетании с бактеризацией каллуса M. extorquens, могут способствовать активизации процессов вторичной дифференцировки каллусной ткани ячменя, в том числе - при длительном культивировании.

Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные экспериментальные данные являются методологической основой к проведению работ, связанных с трансформацией однодольных и двудольных

сельскохозяйственных культур для придания им хозяйственно-ценных признаков. Результаты проведенных исследований могут быть использованы для разработки новых способов создания стресс-толерантных сортов растений. Полученные трансформанты по гену ¥е-$>0В1 могут служить экспериментальной моделью для изучения перекисного гомеостаза растений в условиях стресса. Предлагаемые методики регенерации и трансформации представляют интерес для генетической и клеточной инженерии ячменя. Подана заявка на изобретение № 2015136821 от 28.08.2015 «Способ стимуляции морфогенеза в культуре ткани ячменя».

Методология и методы исследований. Методология работы спланирована в соответствии с поставленной целью. Эксперименты проводились согласно стандартным и вновь разработанным методикам. В работе использовали изолированные культуры ткани картофеля и ячменя, а также микробиологические, биохимические и молекулярно-генетические методы. Генетическую модификацию картофеля и ячменя осуществляли методом агробактериальной трансформации.

Достоверность и обоснованность результатов и выводов работы подтверждается использованием статистических методов.

Связь работы с научно-исследовательскими программами и темами. Исследования проведены в 2011-2016 гг. в лаборатории биотехнологии растений и микроорганизмов ФГБНУ «НИИСХ Северо-Востока», являясь частью плановых НИР Россельхозакадемии по научному обеспечению АПК Российской Федерации на 2011-2015 гг. по заданию 04.04.04. «Разработать биотехнологические методы создания и оценки исходных перспективных форм ячменя и овса с улучшенными хозяйственными характеристиками, в т.ч. с адаптациями к локальным климатическим изменениям» и Программы фундаментальных научных исследований государственных академий наук на 2015-2017 гг. по заданию № 0767-2014-0021 «Разработка фундаментальных основ создания новых сортов и линий ячменя и овса с улучшенными хозяйственно-ценными признаками, в т.ч. с использованием постгеномных

биотехнологий».

Положения, выносимые на защиту

1. Встраивание в геном картофеля Беллароза гетерологичного гена Fe-SOD1 из Arabidopsis thaliana сопровождалось увеличением общей активности супероксиддисмутазы в листьях трансформантов, по сравнению с интактными растениями, и не оказало негативного влияния на фенотип растений.

2. Использование перфторорганических соединений с газотранспортной функцией (ПФД, 5об.%) в чистом виде и в сочетании с

о

инокуляцией каллуса Methylobacterium extorquens АМ1 BKM В-2064 (1*10 кл/мл) позволяет активизировать процессы вторичной дифференцировки и регенерации в каллусной культуре ячменя

3. Осуществлению агробактериальной трансформации отечественных сортов ячменя способствуют следующие разработанные методические приемы: отмывание эксплантов различных типов (незрелые и зрелые зародыши, каллус) в жидкой среде с добавлением 150 мг/л тиментина и последующее культивирование на среде с добавлением 500 мг/л тиментина; при использовании в качестве реципиентной системы каллусной ткани ячменя необходимо использовать оптимальное время инокуляции - 20 мин. и сокультивирования с агробактерией - 1 сут.

Апробация работы. Результаты исследований были представлены на Всероссийских научно-практических конференциях с международным участием: «Биологический мониторинг природно-техногенных систем» (Киров, 2011, 2012), «Актуальные проблемы региональной экологии и биодиагностика живых систем» (Киров, 2015); Всероссийских молодежных конференциях: «Адаптационные реакции живых систем на стрессорные воздействия» (Киров, 2012), «Методы и технологии в селекции растений» (Киров, 2014); Первой молодежной научно-практической конференции СМУ СВРНЦ Россельхозакадемии «Молодые ученые - аграрной науке Евро-Северо-Востока» (Киров, 2012); Молодежной научной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии» (Москва, 2012); Форуме Bio-

Киров (Киров, 2013); Междисциплинарном форуме «Moscow Science Week 2014 - Неделя науки в Москве» (Москва, 2014); V Всероссийском симпозиуме «Трансгенные растения: технологии создания, биологические свойства, применение, биобезопасность» (Москва, 2014); Международных научно -практических конференциях: «Аграрная наука: развитие и перспективы» (Николаев, Украина, 2015), «Методы и технологии в селекции растений и растениеводстве» (Киров, 2015, 2016).

Работа по теме диссертационного исследования стала победителем в Областном молодежном научно-инновационном конкурсе по программе "У.М.Н.И.К." (Киров, 2011, 2012) и конкурсе докладов на II Всероссийской молодежной научной конференции «Молодежь и наука на Севере» (Сыктывкар, 2013); была отмечена дипломом I степени за доклад на XVI Международной научно-практической конференции аспирантов и молодых ученых «Знания молодых наука, практика и инновации» (Киров, 2016) и почетной грамотой за доклад на XXIII Всероссийской молодежной научной конференции «Актуальные проблемы биологии и экологии» (Сыктывкар, 2016).

Личный вклад автора. Автор принимал личное участие в планировании и проведении экспериментов, анализе и обобщении результатов, подготовке материалов к публикации.

Публикации. По результатам исследования опубликовано 18 печатных работ, в том числе 3 статьи в журналах, входящих в перечень ВАК РФ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, объектов и методов исследования, 3-х глав результатов, заключения, списка сокращений и условных обозначений, списка литературы и двух приложений. Работа изложена на 191 страницах, содержит 36 таблиц и 40 рисунков. Список литературы включает 343 источников, из них 228 на иностранных языках.

Автор выражает глубокую признательность и благодарность научному руководителю д.б.н. Широких И.Г. за неоценимую помощь в подготовке

диссертации. Искреннюю благодарность автор адресует к.х.н. Лундовских И.А., к.б.н. Огородниковой С.Ю., к.б.н. Барановой Е.Н., к.б.н. Гулевичу А.А., к.б.н. Курениной Л.В., д.б.н. Широких А.А., к.б.н. Шуплецовой О.Н., к.б.н. Щенниковой И.Н. за содействие на разных этапах выполнения работы, а также благодарит сотрудников лаборатории биотехнологии растений и микроорганизмов ФГБНУ «НИИСХ Северо-Востока» за дружескую поддержку.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Особенности культивирования и регенерации растений in vitro

В основе всех биотехнологических методов лежит культивирование клеток и тканей растений in vitro, а практический успех работ связан с решением проблемы регенерации растений в культуре изолированной ткани. Поэтому при получении форм и линий с улучшенными хозяйственными качествами важным аспектом является изучение процессов морфогенеза in vitro и разработка эффективных методов регенерации для основных сельскохозяйственных культур (Богомаз, 2005). Известно, что регенерационная способность зависит от видовых и сортовых особенностей исследуемых объектов, для которых важно учитывать принадлежность к классам Двудольных (Dicotyledones) или Однодольных (Monocotyledones) растений (Шевелуха, 2008). Так представители семейств Пасленовые (Solanaceae) и Злаки (Graminae) сильно различаются по способности к морфогенезу (рис. 1).

Максимальная способность Пасленовые

Капустные

Сельдерейные

Астровые

Бобовые (травы)

Бобовые (зерновые)

Мятликовые (травы)

Минимальная способность -»- (зерновые)

Рисунок 1 - Перечень некоторых семейств высших растений, расположенных по способности к морфогенезу (по Бутенко, 1999)

Это в значительной мере определяет успехи и приоритетные направления развития фитобиотехнологии для культур, относящихся к указанным семействам, в частности, объектов настоящего исследования - картофеля и ячменя.

1.1.1 Культура изолированной ткани картофеля

Картофель - одна из важнейших сельскохозяйственных культур, которая является постоянным объектом биотехнологических исследований (Кравец и др., 1992). В связи с тем, что картофель - вегетативно размножаемая культура, работы связанные с микроклональным размножением и регенерацией in vitro ведутся достаточно успешно (Определение регенерационной..., 1990). В первичном семеноводстве картофеля методы биотехнологии нашли широкое применение в технологиях оздоровления от вирусов и других патогенов (метод культуры апикальной меристемы), микроклонального размножения, получения микроклубневого посадочного материала, а также депонирования сортовых коллекций in vitro (Назарова, 2011).

В селекции картофеля культура клеток и тканей используется для создания исходного материала. Методы получения и отбора сомаклональных вариантов являются источником генетического разнообразия и позволяют отбирать сомаклоны (варианты), отличающиеся ценными признаками (Родькина, Яковлева, 2001), которые далее используются в селекционной работе. С помощью клеточной селекции осуществляют скрининг устойчивых, например, к инфекционному стрессу (Калашникова, 2003), засолению (Ochatt S.J. et al., 1998) и др., и продуктивных линий и сортов картофеля на клеточном уровне (Муминджанов, 2001). А соматическая гибридизация протопластов позволяет преодолеть барьеры половой несовместимости при межвидовых скрещиваниях, благодаря чему в селекционный процесс вовлекаются филогенетически отдаленные формы (Евтушенко и др., 2000).

Важными моментами практического применения методов классической (клеточная селекция, получение сомаклональных вариантов) и современной (генная инженерия (ГИ)) биотехнологии являются особенности процессов каллусогенеза и регенерации растений картофеля in vitro. Индукцию каллусогенеза у данной культуры можно вызвать практически из любого фрагмента или органа растения при создании оптимальных условий для

дедифференциации клеток экспланта (Анварова, 1998). Как индукция каллусообразования, так и регенерация требуют присутствия соответствующих концентраций и комбинаций регуляторов роста в питательной среде (ПС), но также зависят от негормонального состава среды, типа экспланта, условий культивирования и генотипа картофеля (Yasmin et al., 2003). Многими авторами проводились исследования по подбору оптимальных концентраций регуляторов роста для индукции каллусогенеза и регенерации растений из каллуса картофеля (Ahloowalia, 1982; Ehsanpour, Jones, 2000; Вальдеррама А., 2002; Elaleem et al., 2009). Наиболее часто для дедифференцировки клеток экспланта используют 2,4-дихлорфеноксиуксусную кислоту (2,4-Д) в концентрациях от 0,5 до 4 мг/л (Khatun et al., 2003; Shirin et al., 2007; Huda et al., 2013; Sherkar, Chavan, 2014), а индукцию морфогенеза в каллусе осуществляют с помощью 6-бензиламинопурина (6-БАП) (2-3 мг/л) в сочетании с нафтилуксусной кислотой (НУК) (2,5 мг/л) (Khatun et al., 2003; Yasmin et al., 2003;) или тидиазуроном (2 мг/л) (Sherkar, Chavan, 2014). Также с целью стимуляции процессов каллусогенеза и регенерации подбирают оптимальные условия культивирования изолированной ткани картофеля. Установлено, что ускорению процесса каллусобразования, а также увеличению объема каллусной массы способствует снижение интенсивности освещения вплоть до полной темноты (Huda et al., 2013), тогда как для процесса регенерации в каллусе картофеля свет необходим (Казакова, 1993).

Важно отметить, что в культуре изолированной ткани картофеля, возможна и прямая (без индукции каллусогенеза) регенерация растений из эксплантов. Прямая регенерация была осуществлена из фрагментов листьев и стебля, корней, дисков клубней (Yadav, Sticklen, 1995; Сувд и др., 2004; Hussain et al., 2005; Сташевски, Ильинская, 2009). В качестве оптимального гормонального состава ПС для нескольких типов эксплантов картофеля в работе Hussain с соавт. (2005) указывается 2 мг/л 6-БАП и 0,5 мг/л индолилуксусной кислоты (ИУК). Прямой способ регенерации позволяет ускорить процесс получения растений-регенерантов картофеля, а также снизить вероятность

возникновения сомаклональной изменчивости, которая возникает при получении регенерантов через каллус. Это позволяет успешно использовать прямую регенерацию при создании трансгенных линий картофеля (Dobigny et al., 1996; Сташевски, Ильинская, 2009).

Итак, разработанные к настоящему времени схемы регенерации картофеля in vitro могут обеспечить высокую эффективность регенерации и осуществление работ по генетической трансформации данной культуры (Elaleem et al., 2009). Благодаря тому, что существующие методы трансформации позволяют относительно легко вводить в геном картофеля чужеродные гены, пожалуй, именно картофель имеет наибольшие успехи по усовершенствованию хозяйственно-ценных признаков методами современной биотехнологии (Halterman et al., 2015). В мире разрешено для выращивания и промышленного использования уже 44 трансгенные линии картофеля (табл. А.1, приложение А). Трансгены обусловливают устойчивость картофеля к насекомым-вредителям, вирусным инфекциям, а также улучшенное качество клубней, причем имеются такие линии, которые экспрессируют в своем геноме одновременно до пяти чужеродных генов (GM Approval Database, дата обращения сентябрь 2016).

1.1.2 Культура изолированной ткани ячменя

В отличие от картофеля ячмень относится к числу менее освоенных объектов для генетической трансформации и ни одна из полученных трансгенных линий (табл. A.2, приложение А) не допущена к производству. Зерновые культуры являются главной целью биотехнологического улучшения, т.к. играют важнейшую роль в обеспечении человечества продовольствием (Пастернак, 1991), но именно для зерновых злаков отмечается в настоящее время множество методических затруднений, связанных со сложностью их культивирования и регенерации in vitro (Shravat, Lorz, 2006).

Каллусогенез. Изолированная ткань зерновых злаков в современных фитобиотехнологиях, чаще всего, представлена каллусной культурой -

неорганизованной пролиферирующей тканью, состоящей из дедифференцированных клеток (Бутенко, 1964; 1975; Шевелуха, 2008). У ячменя формирование каллусной ткани (индукция каллусогенеза) происходит на 3 -7 день после помещения экспланта на среду для каллусогенеза в результате дедифференцировки клеток на поверхности экспланта. Особенности каллусогенеза обусловлены генотипом растения (Komatsuda et al., 1989; Широких и др., 2010), но также зависят от типа экспланта (Goldstein, Kronstard, 1986; Круглова, Катасонова, 2009; Чернов, Пендиен, 2011), состава питательной среды (ПС) (Luhrs, Lorz, 1987) и, прежде всего, от соотношения в среде фитогормонов (ауксинов и цитокининов) (Skoog, Miller, 1957). Определенное соотношение ауксинов и цитокининов является обязательным условием для дедифференцировки клеток экспланта и формирования каллусной ткани. При этом ауксины способствуют подготовке клетки к делению, вызывая дедифференцировку, а цитокинины вызывают деление (пролиферацию) дедифференцированных клеток (Шевелуха, 2008). Однако, эффект, вызываемый действием одних и тех же гормонов, может быть различным в зависимости от ткани-мишени. Во многом результаты зависят от эндогенного баланса гормонов, содержащегося в тканях экспланта (Бутенко, 1975; Шаяхметов, 1999). Например, в культуре незрелых зародышей пшеницы и ячменя каллусообразование происходит на среде с (2,4-Д) без цитокининов.

При культивировании клеток и тканей ячменя в качестве источника ауксинов чаще всего используют 2,4-Д (Luhrs, Lorz, 1987; Dahleen, 1995; Dahleen, Bregitzer, 2002; Arabi et al., 2005; Широких и др., 2009). В работе Bregitzer с соавт. (1998) сообщается о положительном воздействии 2,4-Д, вносимой на этапе каллусогенеза и пролиферации каллуса в среду Мурасиге и Скуга (МС) (Murashige, Skoog, 1962), на регенерацию трех сортов ячменя. При этом оптимальной концентрацией для индукции каллусогенеза указывается концентрация в 3 мг/л (Bregitzer et al., 1998). Однако, другие авторы (Ziauddin, Kasha, 1990) указывают, что при длительном культивировании каллуса ячменя, 2,4-Д (2 мг/л) в большей мере вызывает хромосомные нарушения в каллусных

клетках, чем нафтилуксусная кислота (НУК). Помимо 2,4-Д в качестве источника ауксинов при работе с культурой ткани ячменя используют также пиклорам (4-амино-3,5,6-трихлорпиридинкарбоновая-2 кислота) или дикамбу (3,6-дихлор-2-метоксибензойная кислота) (Castillo, 1998; Чернов, Пендиен, 2011).

Значительную роль для каллусогенеза и последующей регенерации играет тип экспланта. Со времени первого сообщения о работе с культурой ткани ячменя in vitro (Norstog, 1970), регенерация была достигнута из различных эксплантов: зрелых (Luppoto, 1984; Чернов, Пендиен, 2011) и незрелых зародышей (Lurhs, Lorz, 1987; Dahleen, 1995; Bregitzer, 1992; Шуплецова, 2003; Овчинникова и др, 2006; Сидоров и др., 2009; Чернов, Пендиен, 2011), молодых соцветий (Чернов, Пендиен, 2011), микроспор (Белинская и др., 1993; Arabi et al., 2005), листьев (Mohanty, Ghosh, 1988), апикальной меристемы (Исаева и др., 1983; Weigel, Hughes, 1985), проростков (Becher et al., 1992) и колеоптиля (Toyoda et al., 1990). Однако наибольшая регенерационная способность характерна для каллусов, индуцированных эксплантами, представляющими собой генеративные ткани (пыльники и незрелые зародыши), что обусловлено зависимостью морфогенеза от компетентности клеток экспланта. Под компетентностью клетки понимают степень ее дифференциации, т.е. соответствующее состояние хроматина и распределение в нем транскрипционной активности (Журавлев, Омелько, 2008), необходимое для индукции каллусо- или органогенеза. Наилучшими эксплантами для ячменя признаны незрелые зиготические зародыши (Wan, Lemaux, 1994; Chang et al, 2003) на 3 подстадии дифференциации (Круглова, Катасонова, 2009). Стадия развития зародыша играет важную роль, поскольку способность к образованию морфогенного каллуса и последующей регенерации для зародышей пшеницы сохраняется у незрелых зародышей в период от 12,5 до 17 сут после опыления (Круглова, Катасонова, 2009). Для ячменя установлено, что незрелые зародыши, размером 1-1,5 мм, у которых только начинается накопление крахмала, индуцируют каллус, который впоследствии легко регенерирует, более мелкие прозрачные зародыши (менее 0,9 мм) не способны формировать каллус, а

зародыши размером более 2 мм, как правило, дают начало проростку (Goldstein, Kronstard, 1986; Шуплецова, 2003). В связи с этим, оптимальным эксплантом считается зародыш размером 1-2 мм. Морфогенетический потенциал экспланта зависит также от физиологического состояния растения-донора, например, способность к регенерации у эксплантов, полученных от здоровых растений пшеницы, выращенных в климатических камерах, выше, чем у эксплантов, полученных от растений, выращенных в аналогичных условиях, но подвергнутых стрессу (Chеng et al., 2004).

В зависимости от культуральных признаков каллус разделяют на морфогенный и неморфогенный. У ячменя рыхлый, оводненный каллус, состоящий из крупных вакуолизированных клеток, не способен к морфогенезу, и только плотный, крупинчатый каллус светло-желтого цвета формирует меристематические очаги и дает в последующем регенерацию растений (Luppoto, 1984; Chauhan, Kothari, 2004).

Регенерация растений в культуре in vitro. В условиях in vivo развитие зародыша от зиготы до проростка - это строго определенная смена клеток и тканей с предсказуемым результатом, хотя и не все механизмы индукции морфогенеза ясны; а вот в условиях in vitro превращение эксплантированной клетки трудно предсказать (Лутова, 2010). В зависимости от сочетания внутренних и внешних факторов, определяющих начальные условия, возможны разные морфогенетические сценарии (Журавлев, Омелько, 2008). Морфогенез в каллусной культуре может иметь различную направленность. Регенерация растений может протекать по типу соматического эмбриогенеза (эмбриоидогенез), органогенеза и гистогенеза (Батыгина, 1999 ) (рис. 2).

Наиболее редким событием является соматический эмбриогенез, когда из соматических клеток каллуса формируются зародышеподобные структуры (эмбриоиды), которые далее развиваются, подобно зиготическому зародышу, в растение. Также возможны гемма- и ризогенез, которые представляют собой соответственно формирование побега и корневой системы по отдельности. Геммагенез позволяет регенерировать растения, индуцируя формирование

РАСТЕНИЕ - РЕГЕНЕРАНТ

Рисунок 2 - Морфогенетические пути развития каллусной ткани in vitro

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Бакулина, Анна Владимировна, 2016 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алексеев, Я.И. ПЦР диагностика в современной агробиотехнологии / Я.И. Алексеев // Проблемы агробиотехнологии; под ред. член-корр. РАСХН Харченко П.Н. - М.: Росинформагротех, 2012. - С. 200-226.

2. Анварова, М. Морфо-физиологические особенности регенерации генотипов картофеля in vitro: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.12 / Анварова Мавлюда. - Душанбе, 1998. - 26с.

3. Андреева, Е.А. Устойчивость к солям меди и никеля у ipt-трансгенных растений картофеля / Е.А. Андреева, Л.А. Лутова // Ecological genetics. - 2004. - Т. 2. - №. 3. - С. 25-31.

4. Армитидж, Ф. Агробактериальные трансформирующие векторы растений / Ф. Армитидж, Р. Уолден, Дж. Дрейпер // Генная инженерия растений. - М.: Мир, 1991. - С. 11-86.

5. Бабаева, С.А. Цитогенетика культивируемых in vitro соматических клеток и растении-регенерантов Triticum durum Desf / С.А. Бабаева, Т.Ф. Петрова, А.К. Гапоненко // Цитология и генетика. - 1994. - Т. 28. - С. 23-30.

6. Бабаков, А.В. Стрессоустойчивость растений / А.В. Бабаков, П.Н. Харченко // Проблемы агробиотехнологии; под ред. Харченко П.Н. - М.: Росинформагротех, 2012. - С. 23-48.

7. Бакулин, М.К. Изменение продуктивности микромицетов рода Fusarium под действием перфторуглеродов / М.К. Бакулин, С.В. Дармова, Ю.С. Овсянников, В.М. Бакулин, Е.М. Гордеева // Ветеринарная медицина.- 2010. - № 3-4. - С. 12-16.

8. Бараненко, В.В. Супероксиддисмутаза в клетках растений / В.В. Бараненко // Цитология. - 2006. - Т.48. - №6. - С. 465-474.

9. Баранова, Е.Н. Проблемы и перспективы генно-инженерного подхода в решении вопросов устойчивости растений к засолению / Е.Н. Баранова, А.А. Гулевич // Сельскохозяйственная биология. - 2006. - №1. - С. 3953.

10. Баранова, Е.Н. Генно-инженерный подход к повышению устойчивости растнений к засолению: проблемы и перспективы / Е.Н. Баранова, Е.К. Серенко, А.А. Гулевич, А.Н. Майсурян // Проблемы агробиотехнологии; под ред. Харченко П.Н. - М.: Росинформагротех, 2012. - С. 49-68.

11. Баранова, Е.Н. Индукция окислительного стресса, вызываемого конститутивной экспрессией гена Fe-зависимой супероксиддисмутазы у томата способствует формированию устойчивости к абиотическим и биотическим стрессовым факторам / Е.Н. Баранова, Н.В. Кононенко, Л.В. Куренина, А.А. Гулевич, А.Н. Смирнов, О.О. Белошапкина, Е.А. Смирнова // Фундаментальные и прикладные проблемы современной экспериментальной биологии растений: сборник материалов Всероссийской научной конференции с международным участием и школы для молодых ученых, посвященной 125-летию Института физиологии растений им. К.А. Тимирязева РАН (23-27 ноября 2015 г.). - М.: ИФР РАН, 2015. - С. 76-79.

12. Батыгина, Т.Б. Эмбриогенез и морфогенез половых и соматических зародышей / Т.Б. Батыгина // Физиология растений. - 1999. - Т. 46. - №6. - С. 884898.

13. Белинская, Е.В. Генотипические особенности индукции гаплоидов в культуре пыльников ячменя / Е.В. Белинская, Л.Н. Наумова, В.Т. Манзюк // Цитология и генетика. - 1993. - Т. 27. - №5. - С. 84-88.

14. Биннс, А.Н. Онкогены агробактерий / А.Н. Биннс, П. Константино // Rhizobiaceae молекулярная биология бактерий, взаимодействующих с растениями; под ред. Г. Спайнк, А. Кондороши, П. Хукас. - СПб, 2002. - С. 275288.

15. Богомаз, Д.И. Изучение взаимодействия генотипов растения и штамма Agrobacterim tumefaciens при получении форм картофеля, устойчивых к колорадскому жуку / Д.И. Богомаз // Экологическая генетика. - 2005. - Т. 3. - № 1. - С. 34-41.

16. Бутенко, Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений / Р.Г. Бутенко. - М.: Наука, 1964. - 272 с.

17. Бутенко, Р.Г. Дифференцировка и морфогенез в культуре тканей, клеток и протопластов / Р.Г. Бутенко // Биология развития растений. - М.: Наука, 1975. - С. 48-65.

18. Бутенко, Р.Г. Биология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко. - М.: ФБК-Пресс, 1999. - 160с.

19. Вальдеррама, А. Изучение процессов регенерации и клонирования некоторых перуанских видов картофеля: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.23 / Вальдеррама Ромеро Антонио Саломон. - М., 2002. - 23с.

20. Веселов, А.П. Гормональная и антиоксидантная системы при ответе растения на тепловой шок: автореф. дис. ... док-ра. биол. наук: 03.00.12 /. Веселов Александр Павлович. - Н. Новгород, 2001. - 40с.

21. Внучкова, В.А. Использование методов in vitro в селекции ячменя на устойчивость к токсичности кислых почв / В.А. Внучкова, Э.Д. Неттевич, Т.М. Чеботарева, Л.М. Хитрова, Л.М. Молчанова // Доклады ВАСХНИЛ. - 1989. - №7. - С. 2-5.

22. Волощук, Г.Д. Вплив культуральных фшьтрат1в деяких грибшх патогешв на суспензшнну культуру пшениц / Г.Д. Волощук // Цитология и генетика. - 1995. - Т. 29. - №4. - С. 70-77.

23. Ву, Ю.Е. Эффективная регенерация и стабильная агробактериальная трансформация райграса многолетнего / Ю.Е. Ву, Ц.Ю. Чен, С.Х. Куи, Х.Чен, Ц. Чен, Х.Ч. Ван // Физиология растений. - 2007. - Т. 54. - № 4. - С. 590-596.

24. Гарифзянов, А.Р. Образование и физиологические реакции активных форм кислорода в клетках растений / А.Р. Гарифзянов, Н.Н. Жуков, В.В. Иванищев // Современные проблемы науки и образования. - 2011. - №2. - С. 1-21.

25. Данилова, С.А. Условия, необходимые для эффективной агробактериальной трансформации эмбриогенного каллуса кукурузы / С.А. Данилова, Ю.И. Долгих /Физиология растений. - 2005. - Т. 25. - №. 4. - С. 600608.

26. Данилова, С.А. Методы генетической трансформации зерновых культур / С.А. Данилова // Физиология растений. - 2007. - Т. 54. - №5. -С. 645658.

27. Данилова, С.А. Новый эффективный метод генетической трансформации кукурузы с использованием агробактериального газона / С.А. Данилова, В.В. Кузнецов, Ю.И. Долгих // Физиология растений. -2009. - Т. 56. -№. 2. - С. 285-290.

28. Дессо, И. Опины и опин-подобные молекулы, вовлеченные во взаимодействия растений с бактериями семейства Rhizobiaceae / И. Дессо, А. Пети, С.К. Фарранд, П.Д. Марфи // Rhizobiaceae молекулярная биология бактерий, взаимодействующих с бактериями; под ред. Г. Спайнк, А. Кондороши, П. Хукас. - СПб, 2002. - С. 199-224.

29. Джонсон, Т.М. Организация и регуляция генов вирулетности Agrobacterium / Т.М. Джонсон, A. Дас // Rhizobiaceae молекулярная биология бактерий, взаимодействующих с бактериями; под ред. Г. Спайнк, А. Кондороши, П. Хукас. - СПб, 2002. - С. 291-304.

30. Доронина, Н.В. Стимуляция роста и морфогенеза растений in vitro ассоциативными аэробными бактериями Methylobacterium extorquens D 10, образующими цитокинины, ауксины и витамин В12. / Н.В. Доронина, Д.Н. Федоров, М.В. Шихсаидов, О.Н. Пономарёва // Известия Тульского государственного университета. Естественные науки. - 2010. - Вып.1. - С. 215225.

31. Дрейпер, Д. Генная инженерия растений / Д. Дрейпер, Р. Скотт, Ф. Армитидж, Г. Дьюри; под ред. Дрейпера. - М.: Мир, 1991. - 408с.

32. Евтушенко, Д.П. Реконструкция цитоплазмы картофеля путем переноса хлоропластов из дикого вида Solarium и регенерация цибридных форм растений / Д.П. Евтушенко, А.М. Шаховский, В.А. Сидоров // Биополимеры и клетка. - 2000. -Т. 16. - №. 4. - С. 289-296.

33. Егоров, Н.С. Руководство к практическим занятиям по микробиологии: практическое пособие / Н.С. Егоров; под ред. Н.С. Егорова. 2-е изд. - М.: Изд-во Моск. Ун-та, 1983. - 215с.

34. Журавлев, Ю.Н. Морфогенез у растений in vitro / Ю.Н. Журавлев,

A.М. Омелько // Физиология растений. - 2008. - Т.55. - №5. - С. 643-664.

35. Зауралов, О.А. Последствие пониженных температур на дыхание теплолюбивых растений / О.А. Зауралов, Ф.С. Лукаткин // Физиология растений. - 1997. - Т. 44. - № 5. - С. 736-741.

36. Ибрагимова, С.С. Роль различных метаболитов в формировании стрессоустойчивости растений / С.С. Ибрагимова, В.В. Горелова, А.В. Кочетов,

B.К. Шумный // Вестник НГУ. Серия: Биология, клиническая медицина. - 2010. -Т. 8. - С. 98-103.

37. Иваницкий, Г.Р. Биофизика на пороге нового тысячелетия: перфторуглеродные среды и газотранспортные кровезаменители / Г.Р. Иваницкий // Биофизика. - 2001. - №1. - С. 5-33.

38. Исаева, И.А. Особенности органогенеза в каллусных тканях разных видов и межвидовых гибридов ячменя / И.А. Исаева, Л.А. Першина, В.К. Шумный // Известия Сибирского отделения А.Н. СССР: Сер. Биологические науки. - 1983. - №5. - С. 76-81.

39. Казакова, Е.А. Морфогенез и формирование фотосинтетического аппарата в каллусной культуре картофеля: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.12, 03.00.23 / Казакова Елена Альбертовна. - Спб., 1993. - 19с.

40. Калашникова, Е.А. Морфо-физиологические особенности пробирочных растений, каллусной ткани и суспензионной культуры картофеля, обусловленные действием экзометаболитов гриба Rhizoctonia solani / Е.А. Калашникова // Биотехнология. - 2003. - №. 3. - С. 36-41.

41. Каляева, М.А. Стимуляция роста и морфогенеза растений in vitro ассоциативными метилотрофными бактериями / М.А. Каляева, Н.С. Захарченко, Н.В. Доронина, Е.Б. Рукавцова и др. // Физиология растений. - 2001. - Т. 48. - N 4. - С. 596-599.

42. Катасонова, А.А. Этапы биотехнологии получения растений -регенерантов яровой мягкой пшеницы путем эмбриоидогенеза в каллусной культуре in vitro / А.А. Катасонова, И.Ф. Шаяхметов, Н.Н. Круглова // Известия Челябинского научного центра. - 2006. - Вып. 2. - С. 78-82.

43. Китлаев, Г.Б. Стимуляция слабым электрическим током регенерации растений в культуе тканей кукурузы / Г.Б. Китлаев, С. Диас, Т.Ю. Вера-Рамос, Ю.И. Долгих, Р.Г. Бутенко // Биотехнология. - 2001. - №5. - С. 5863.

44. Козырева, О.Г. Генетика регенерации в культуре in vitro злаков / О.Г. Козырева, С.Е. Дунаева // Генетика. - 1994. - Т.30. - № 10. - С. 1432-1439.

45. Колодяжная, Я.С. Трансгенные растения, толерантные к абиотическим стрессам / Я.С. Колодяжная, Н.К. Куцоконь, Б.А. Левенко, О.С. Сютикова, Д.Б. Рахметов, А.В. Кочетов // Цитология и генетика. - 2009. - №2. -С. 72-93.

46. Колупаев, Ю.Е. Антиоксидантная система растений: участие в клеточной сигнализации и адаптации к действию стрессоров / Ю.Е. Колупаев, Ю.В. Карпец, А.И. Обозный // Вестник Харьковского национального аграрного университета. Серия биология. - 2011. - вып. 1. - С. 6-34.

47. Кравец, О.А. Трансформация различных сортов картофеля и анализ поученных трансгенных растений / О.А. Кравец, Н.Я. Погребняк, Е.Н. Шиша, С.В. Лопато, Ю.Ю. Глеба // Биополимеры и клетка. - 1992. - Т.8. - №6. - С. 44-49.

48. Креславский, В.Д. Сигнальная роль активных форм кислорода при стрессе у растений / В.Д. Креславский, Д.А. Лось, С.И. Аллахвердиев, Вл.В. Кузнецов / Физиология растений. - 2012. - Т. 59. - №2. - С. 163-178.

49. Круглова, Н.Н. Незрелый зародыш пшеницы как морфогенетически компетентный эксплант / Н.Н. Круглова, А.А. Катасонова // Физиология и биохимия культурных растений. - 2009. - Т.41. - № 2. - С. 124-131.

50. Лакин, Г.Ф. Биометрия: учебное пособие для биологических специальностей вузов / Г.Ф. Лакин. - М.: Высшая школа. - 352с.

51. Лешина, Л.Г. Agrobacterm rhizogenes-опосредованная трансформация и регенерация двух видов растений из семейства Apocynaceae / Л.Г. Лешина, О.В. Булко // Физиология и биохимия культурных растений. -2011. - Т. 43. - №6. - С. 533-539.

52. Лукаткин, А.С. Холодовое повреждение теплолюбивых растений и окислительный стресс / А.С. Лукаткин. - Саранск: Изд-во Мордов. ун-та, 2002. -с. 208.

53. Лутова, Л.А. Биотехнология высших растений / Л.А. Лутова. - СПб.: Изд-во СПб-университета, 2010. - 238с.

54. Майсурян, А.Н. Агробактериальная трансформация ячменя / А.Н. Майсурян, В.Н. Овчинникова, Ю.И. Долгих, А.Ю. Степанова, Д.В. Терешонок, Ю.Ц. Мартиросян, П.Н. Харченко // Биотехнология. - 2006. - №3. - С. 56-61.

55. Максимов, И.В. Про-/антиоксидантная система и устойчивость растений к патогенам / И.В. Максимов, Е.А. Черепанова // Успехи современной биологии. - 2006. - Т.126. - №3. - С. 250-261.

56. Матис, Э. Прикрепление Rhizobeaceae к растительным клеткам / Э. Матис, Я. Кайн // Rhizobeaceae. Молекулярная биология бактерий, взаимодействующих с растениями; под ред. И.А. Тихоновича, Н.А. Проворова. -СПб., 2002. - С. 259-274.

57. Медведев, С.С. Физиологические основы полярности / С.С. Медведев. - СПб: Кольна, 1996. - 160с.

58. Муминджанов, Х.А. Селекция и семеноводство картофеля на основе физиологических тестов и методов клеточной биотехнологии: автореф. дисс. ...д-ра с.-х. наук: 06.01. 05 / Муминджанов Хафиз Абдувахобович. - Душанбе, 2000. - 51с.

59. Назарова, В.Ф. Оптимизация элементов технологии семеноводства картофеля на основе микроклонального размножения посадочного материала: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 06.01.05 / Назарова Валентина Федоровна. -М., 2011. - 20с.

60. Нетрусов, А.И. Практикум по микробиологии: учебное пособие для студентов высших учебных заведений / А.И. Нетрусов, М.А. Егорова, Л.М. Захарчук и др.; под ред. А.И. Нетрусова. - М.: Академия. - 2005. - 602с.

61. Овчинникова, В.Н. Индукция каллусообразования и регенерации растений ячменя Hordeum vulgare L. в культуре зародышей / В.Н. Овчинникова, Н.В. Варламова, О.С. Мелик-Саркисов, П.Н. Харченко, А.Н. Майсурян, В.В. Щербачев, Ю.Ц. Мартиросян // Сельскохозяйственная биология. - 2006. - №1. -С. 74-79.

62. Определение регенерационной способности картофеля в каллусной культуре: методические указания / Всесоюзный НИИ растениеводства имени Н.И. Вавилова (ВИР); сост. Л.И. Алексеева, И.М. Суриков; под ред. О.Г. Козыревой. - Ленинград, 1990. - 17с.

63. Оценить на всех этапах селекции 1000 перспективных номеров ячменя (гибриды, регенеранты) и выделить линии, толерантные к повышенной кислотности почв. Передать сорт на ГСИ: отчет о НИР (заключит.): 04.05.04.03 / ГУ науч.-исслед. ин-т сельского хозяйства Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого; рук. Щенникова И.Н.; исполн.: Родина Н.А. [и др.]. - Киров: НИИСХ Северо-Востока, 2009. - С. 41-74. - Рег.№ 15070.6111004668.06.8.005.5.

64. Павлючкова, С.М. Динамика окислительных процессов в трансгенных по Fe-СОД и Mn-СОД растениях табака в условиях низкотемпературного стресса и в постстрессовый период [Электронный ресурс] / С.М. Павлючкова. - 2012. - Режим доступа: http://elib.bsu.by/bitstream/ 123456789/44394/1/Pavluchkova.pdf

65. Пастернак, Н.П. Генетическая трансформация злаков: достижения и перспективы / Н.П. Пастернак // Биополимеры и клетка. - 1991. - Т.7. - №4. - С. 20-26.

66. Пермякова, Н.В. Агробактериальная трансформация растений: перенос фрагментов векторной ДНК в растительный геном / Н.В. Пермякова, В.К. Шумный, Е.В. Дайнеко // Генетика. - 2009. - Т. 45. - № 3. - С. 305-317.

67. Пухальский, В.А. Генетическая трансформация пшеницы (Triticum aestivum L.) с помощью Agrobacterim tumefaciens / В.А. Пухальский, С.П. Смирнов, Т.В. Коростылева, Е.Н. Билинская, А.А. Елисеева // Генетика. - 1996. -Т. 32. - №11. - С. 1596-1600.

68. Ралдугина, Г.Н. Получение трансгенных растений методом агробактериальной трансформации / Г.Н. Ралдугина, С.А. Данилова, Н.О. Юрьева // Молекулярно-генетические и биохимические методы в современной биологии растений; под ред. Вл.В. Кузнецова, В.В. Кузнецова, Г.А. Романова. -М.: БИНОМ, 2011. - С. 5-26.

69. Родина, Н.А. Особенности селекции ярового ячменя на Северо-Востоке Нечерноземной зоны России / Н.А. Родина // Материалы международной научно-практической конференции «Современные аспекты селекции, семеноводства, технологии, переработки ячменя и овса». - Киров, 2004.- С. 85-93.

70. Родина, Н.А. Селекция ячменя на Северо-Востоке Нечерноземья / Н.А. Родина. - Киров: Зональный НИИСХ Северо-Востока, 2006. - 488с.

71. Родькина, И.А. Изменчивость морфологических признаков при вегетативном размножении андроклонов картофеля / И.А. Родькина, Г.А. Яковлева // Биотехнология. - 2001. - №. 2. - С. 31-39.

72. Росси, Л. Функции белков вирулентности агробактерий в растении / Л. Росси, Б. Тинланд, Б. Хон // Rhizobiaceae молекулярная биология бактерий, взаимодействующих с бактериями: под ред. Г. Спайнк, А. Кондороши, П. Хукас. - СПб, 2002. - С. 327-344.

73. Рыбчин, В.Н. Основы генетической инженерии: учебник для биологических специальностей вузов / В.Н. Рыбчин. - 2-е изд., перераб. и доп. -СПб.: Изд-во СПбГТУ, 2002. - 521с.

74. Рябушкина, Н.А. Молчание генов в растениях. Как это явление можно использовать в биоинженерии / Н.А. Рябушкина, Н.Н. Галиакпаров // Биотехнология. Теория и практика. - 2009. - №1. - С. 15-31.

75. Савчин, Д.В. Молекулярно-генетический анализ трансгенных растений картофеля с геном gox Penicillium funiculosum / Д.В. Савчин, А.С. Панюш, Н.А. Картель // Труды БГУ. - 2011. - Т. 6. - Ч. 2. - С. 116-120.

76. Серенко, Е.К. Получение трансгенных растений томата с геном Fe-зависимой супероксиддисмутазы / Е.К. Серенко, В.Н. Овчинникова, Л.В. Куренина, Е.Н. Баранова, А.А. Гулевич, А.Н. Майсурян, П.Н. Харченко // Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2009. - №4. - С. 1214.

77. Сидоров, Е.А. Индуцированный морфогенез и биолистическая трансформация ячменя (Hordeum vulgare L.) отечественных сортов: автореф. дис. .канд. биол. наук: 03.00.23 / Сидоров Евгений Александрович. - М., 2009. -24 с.

78. Сидоров, Е.А. Индуцированный морфогенез и регенерация in vitro растений ячменя отечественных сортов / Е.А. Сидоров, М.А. Чернобровкина, А.Н. Николаева, П.Н. Харченко, С.В. Долгов // Сельскохозяйственная биология. - 2009. - №3. - С. 73 - 78.

79. Скрябин, К.Г. Фундаментальная и прикладная биотехнология - ответ на вызов XXI века / К.Г. Скрябин // Вестник Российской академии наук. - 2009. -Т. 79. - № 3. - С. 242-245.

80. Собчак, Р.О. Анатомия растений: практикум / Р.О. Собчак, О.Н. Папина. - Горно-Алтайск: РИО ГАГУ, 2006. - 200с.

81. Создать и передать на государственное сортоиспытание сорта ячменя, с урожайностью 5-6 т/га, средне- и скороспелые, с повышенной устойчивостью к кислым почвам и болезням, кормового и пивоваренного использования: отчет о НИР (промежут.): 04.05.04.02, 04.05.04.03 / ГНУ Зонал. науч.-исслед. ин-т сельского хозяйства Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого; рук. Щенникова И.Н.; исполн.: Родина Н.А. [и др.]. - Киров: НИИСХ Северо-Востока, 2010. - С. 48-96. - Рег.№ 15070.6111004668.06.8.005.5.

82. Создать новый селекционный материал ярового ячменя методами гибридизации (30 комбинаций), отбора (500 элитных растений) и с/х

биотехнологии (50 регенерантов) высокоурожайный устойчивый к абиотическим и биотическим факторам: отчет о НИР (промежут.): 04.05.02.04 / ГНУ Зонал. науч.-исслед. ин-т сельского хозяйства Северо-Востока им. Н.В. Рудницкого; рук. Щенникова И.Н.; исполн.: Кокина Л.П. [и др.]. - Киров: НИИСХ Северо-Востока, 2011. - С. 152-199. - Рег.№ 15070.7713095583.06. 8003.8.

83. Способ получения растений-регенерантов in vitro : пат. 2027757 Рос. Федерация МПК51 С12Ш5/04 A01H4/00 / В.А. Внучкова, О.А. Аш ; заявитель и патентообладатель Всероссийский научно-исследовательский институт сельскохозяйственной биотехнологии. - №5039812/13; заявл. 24.04.1992; опубл. 27.01.1995.

84. Способ культивирования клеток микроорганизмов : заявка на изобретение 2005139679 Рос. Федерация МПК51 С12Ш/20 / Е.В. Пименов, М.К. Бакулин, А.Ю. Плетнева, А.С. Грудцина; заявители Е.В. Пименов, М.К. Бакулин, А.Ю. Плетнева, А.С. Грудцина. - №2005139679/13; заявл. 19.12.2005; опубл. 27.06.2007.

85. Справочник сортов семян [Электронный ресурс], дата обращения февраль 2016г. - Режим доступа: http://www.agroxxi.ru/spravochnik-sortov-semjan/sort-9252932.html.

86. Сташевски, З. Вирусоустойчивость трансгенных растений картофеля Solanum tuberosum L., несущих PVYntn-CP ген белка оболочки y вируса картофеля / З. Сташевски, О.Н. Ильинская // Ecological genetics. - 2009. - №4 -С.41-50.

87. Степанова, А.Ю. Получение трансгенных растений пшеницы (Triticum aestivum L.) методом агробактериальной трансформации / А.Ю. Степанова, Д.В. Терешонок, Е.С. Осипова, Е.А. Гладких, Ю.И. Долгих // Биотехнология. - 2006. - №2. - С. 20-27.

88. Струнин, Д.Е. Компетентность к агробактериальной трансформации каллусных культур инбредных линий кукурузы (Zea mays L.) / Д.Е. Струнин,

О.Е. Абраимова, Л. Пэрри, Е.Н. Тищенко // Вюник Украшського товариства генетиюв i селекцiонерiв. - 2008. - №1. - С. 150-156.

89. Сувд, Ч. Влияние электростатического поля на прямую регенерацию корневвых и стеблевых эксплантов картофеля in vitro / Ч. Сувд // Известия Тимирязевской сельскохозяйственной академии. - 2004. - №. 2. - С. 69-75.

90. Танасиенко, И.В. Получение трансгенных линий ячменя, продуцирующих лактоферрин человека с использованием мутантного альфа-тубулина в качестве селективного маркерного гена / И.В. Танасиенко, А.И Емец, Я. Пирко, В.И. Корховой, Н. Абумхади, Я.Б. Блюм // Цитология и генетика. -2011. - № 1. - С. 3-10.

91. Тарчевский, И.А. Сигнальные системы клеток растений / И.А. Тарчевский. - М.: Наука, 2002. - 294с.

92. Урбах, В.Ю. Биометрические методы / В.Ю. Урбах. - М.: Наука, 1964. - 415с.

93. Фарранд, С.К. Конъюгативные плазмиды и их перенос / С.К. Фарранд // Rhizobiaceae молекулярная биология бактерий, взаимодействующих с бактериями; под ред. Г. Спайнк, А. Кондороши, П. Хукас. - СПб, 2002. - С. 225257.

94. Федоров, Д.Н. Метаболические аспекты фитосимбиоза аэробных метилотрофных бактерий: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.02.03 / Федоров Дмитрий Николаевич. - Пущино, 2010. - 26с.

95. Фундаментальная фитопатология / Под ред. Ю.Т. Дьякова. - М.: КРАСАНД, 2012. - 512 с.

96. Хавкин, Э.Е. Устойчивость картофеля к фитофторозу глазами молекулярного биотехнолога / Э.Е. Хавкин // Проблемы агробиотехнологии; под ред. член-корр. РАСХН Харченко П.Н. - М.: Росинформагротех, 2012. - С. 69-92.

97. Халилуев, М.Р. Изучение экспрессии генов хитинсвязывающих белков (PR-4) и гевеинподобных антимикробных пептидов в отношении повышения устойчивости растения томата к Phytophthora infestans / М.Р. Халилуев, А.Г. Мамонов, А.Н. Смирнов, П.Н. Харченко, С.В. Долгов и др. //

Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. - 2011. - № 4. - С. 22-27.

98. Харченко П.Н. Приоритетные направления исследований в агробиотехнологии / П.Н. Харченко // Проблемы агробиотехнологии; под ред. Харченко П.Н. - М.: Росинформагротех, 2012. - С. 8-22.

99. Цыдендамбаев, В.Д. ГМО: Фундаментальные основы возможных экологических рисков / В.Д. Цыдендамбаев // Контроль качества продукции. -2008. - №. 2. - С. 14-19.

100. Чернобровкина, М.А.Соматический эмбриогенез и морфогенный потенциал ярового ячменя Hordeum vulgare L. в системе технологического процесса генетической трансформации / М.А. Чернобровкина, Ч.А. Караваев, П.Н. Харченко, О.С. Мелик-Саркисов // Известия РАН. Серия биологическая. -2004.-№4. - С. 404-409.

101. Чернов, В.Е. Сравнительная оценка каллусогенеза и регенерации у различных видов ячменя / В.Е. Чернов, Г.И. Пендиен // Сельскохозяйственная биология. - 2011. - №1. - С. 44-53.

102. Чесноков, Ю.В. Использование антибиотиков в культуре in vitro: методические рекомендации / Ю.В. Чесноков. - СПб.: Р-КОПИ, 2015. - 48с.

103. Чесноков, Ю.В. Перенос чужеродных генов в интактные растения кукурузы посредством процесса опыления-оплодотворения / Ю.В. Чесноков, А.Б. Король // Генетика. - 1993. - Т. 29. - С. 1345-1355.

104. Чумаков, М.И. Технологии агробактериальной трансфрмации растений in planta / М.И. Чумаков, Е.М. Моисеева // Биотехнология. - 2012. - №1. - С. 8-20.

105. Шакирова, Ф.М. Неспецифическая устойчивость растений к стрессовым факторам и ее регуляция / Ф.М. Шакирова. - Уфа: Гилем, 2001. -160с.

106. Шаяхметов И.Ф. Соматический эмбриогенез и селекция злаковых культур / И.Ф. Шаяхметов. - Уфа: Изд-во Башкирск. ун-та, 1999. - 166с.

107. Шевелуха, В.С. Сельскохозяйственная биотехнология: учебник /

B.С. Шевелуха, Е.А. Калашникова, Е.З. Кочиева и др.; под ред. В.С. Шевелухи. -3-е изд. перераб. и доп. - М.: Высш. шк., 2008. - 710с.

108. Шевелуха В.С. Сельскохозяйственная биотехнология [Электронный ресурс] / В.С. Шевелуха // Ресурсы науки. Биология. - 2011. - С. 666-670. - Режим доступа: http://federalbook.ru/files/FS/Soderjanie/FS-21/XI/Sheveluha.pdf.

109. Широких, И.Г. Клеточная селекция ячменя и ее практические результаты / И.Г. Широких, О.Н. Шуплецова / Устойчивость растений к неблагоприятным факторам внешней среды: Материалы Всероссийской научной конференции 16-19 сентября 2007г., Иркутск, Сибирский институт физиологии и биохимии растений СО РАН. - Иркутск: РИО НЦ РВХ ВСНЦ СО РАМН, 2007. -

C. 330-333.

110. Широких, И.Г. Получение in vitro форм ячменя, устойчивых к токсическому действию алюминия в кислых почвах / И.Г. Широких, О.Н. Шуплецова, И.Н. Щенникова // Биотехнология. - 2009. - №3. - С.40-48.

111. Широких, И.Г. Реакция каллусной культуры и регенерантных растений ячменя на бактеризацию Methylobacterium mesophylicum / И.Г. Широких, О.Н. Шуплецова, С.Ю. Огородникова, А.А. Широких // Теоретическая и прикладная экология. - 2010. - № 4. - С. 54-62.

112. Широких, И.Г. Трансформанты табака с геном Бе-СОД1 как модель для формирования алюмоустойчивости / И.Г. Широких, С.Ю. Огородникова, Е.Н. Баранова, Я.И. Назарова, А.А. Гулевич // Агрохимия. - 2015. - № 2. - С. 7985.

113. Шлык, А.А. Определение хлорофиллов и каротиноидов в экстрактах зелёных листьев / А.А. Шлык // Биохимические методы в физиологии растений. -М.: Наука, 1971. - С. 154-171.

114. Шуплецова, О.Н. Совершенствование и применение метода культуры ткани для получения форм ярового ячменя, устойчивых к кислым почвам: дис....канд. биол. наук: 03.00.23, 06.01.05 / Шуплецова Ольга Наумовна. - Киров, 2003. - 119с.

115. Щелкунов, С.Н. Генетическая инженерия: учебное пособие для студентов вузов / С. Н. Щелкунов. - 2-е изд., испр. и доп. - Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2004. - 496 с.

116. Ahloowalia, B.S. Plant regeneration from callus culture in wheat / B.S. Ahloowalia // Crop Science. - 1982. - V. 22. - №. 2. - P. 405-410.

117. Aida, H.-S. Overexspression of 1-pyrroline-5-carboxylate synthetase increases proline production and confers salt tolerance in transgenic potato plants / H.-S. Aida, G.B. Radhia, B. Amira // J. Plant Sci. - 2005. - V. 169. - № 4. - P. 746-752.

118. Allen, R.D. Dissection of oxidative stress tolerance using transgenic plants / R.D. Allen // Plant physiology. - 1995. - V. 107. - №. 4. - P. 1049-1054.

119. Al-Oudat, M. Effect of low dose of gamma irradiation on onion yield / M. Al-Oudat // Ann. Biol. - 1990. - V. 6. - P. 61-67.

120. Al-Safadi, B. Gamma irradiation induced variation in carrots / B. Al-Safadi, P.V. Simon // J. Am. Soc. Hort. Sci. - 1996. - V. 121. - P. 599-603.

121. Al-Safadi, B. The effect of gamma irradiation on potato micro-tuber production in vitro / B. Al-Safadi, Z. Ayyoubi, D. Jawdat // Plant Cell Tiss. Organ Cult. - 2000. - V. 61. - P. 183-187.

122. Arabi, M.I.E. Enchancement of embryogenesis and plant regeneration from barley anther culture by low doses of gamma irradiation / M.I.E. Arabi, B. Al-Safadi, M. Jawar, M. Mir-Ali // In Vitro Cell. Dev. Biol.-Plant. - 2005. - V.41. - P. 762-764.

123. Armstrong, C.L. The first decade of maize transformation: a review and future perspectives / C.L. Armstrong // Maydica. - 1999. - V. 44. - P. 101-109.

124. Armstrong, C.L. A novel Agrobacterium^-mediated plant transformation method / C.L. Armstrong, J.R. Rout // Int. Patent Publ. - 2001. WO01/09302 A2.

125. Arshad, M. Microbial production of plant hormones / M. Arshad, W.T. Frankenberger // Plant and Soil/ - 1991. - V.133. - P.1-8.

126. Ayliff, M.A. Abberant mRNA processing of the maize Rp-1-D rust resistance gene in wheat and barley / M.A. Ayliff, M. Steinau, R.F. Park, L. Rook,

M.G. Pacheco, S.H. Hulbert, H.N. Trick, A.J. Pryor // Mol. Plant Microbe Interact. -2004. - V. 17. - P. 853-864.

127. Badawi, G.H. Enhanced tolerance to salt stress and water deficit by overexpressing superoxide dismutase in tobacco (Nicotiana tabacum) chloroplasts / G.H. Badawi, Y. Yamauchi, E. Shimada, R. Sasaki, N. Kawano, K. Tanaka //Plant Science. - 2004. - V. 166. - №. 4. - P. 919-928.

128. Baranova, E.N. Activity of the photosynthetic apparatus and antioxidant enzymes in leaves of transgenic Solanum lycosperum and Nicotiana tabacum plants, with FeSODl gene / E.N. Baranova E.K. Serenko, T.I. Balachnina, A.A. Kosobruhov, L.V. Kurenina, A.A. Gulevich, A.N. Maisuryan // Russian Agricultural Science. -2010. - V. 36. - P. 242-249.

129. Barcelo, P. Transgenic cereal (Tritordeum) plants obtained at high efficiency by microprojectile bombardment of inflorescense tissue / P. Barcelo, C. Hagel, D. Becker, A. Martin, H. Lorz // Plant J. - 1994. - V. 5. - P. 583-592.

130. Bartels, D. Targeting detoxification pathways: an efficient approach to obtain plants with multiple stress tolerance / D. Bartels // Trends Plant Sci. - 2001. -V.6. - P. 284-286.

131. Basu, U. Transgenic Brassica napus plants overexpressing aluminium - induced mitochondrial manganese superoxide dismutase cDNA are resistant to aluminium / U. Basu, A.G. Good, G.J. Taylor // Plant, Cell & Environment. - 2001. - V. 24. - №. 12. - P. 1278-1269.

132. Beauchamp, C. Superoxide Dismutase: Improved Assays and an Assay Applicable to Acrylamide Gels / Beauchamp C., Fridovich J. // Anal. Biochem. -1971. - v. 44. - P. 276-287.

133. Becher, T. Callus formation and plant regeneration in standard and microexplants from seedling from barley (Hordeum vulgare L.) / T. Becher, G. Haberbland, H.-U. Koop // Plant Cell Rep. - 1992. - V.11. - P. 39-43.

134. Becker, D. Fertile transgenic wheat from microprojectile bombardment of scutellar tissue / D. Becker, R. Brettschneider, H. Lorz // Plant J. - 1994. - V. 5. - P. 299-307.

135. Biddington, N.L. The influence of ethylene plant tissue culture / N.L. Biddington // Plant Growth Regulation/ - 1992. - V. 11. - P. 173-187.

136. Binns, A.N. Cell biology of Agrobacterium infection and transformation of plants / A.N. Binns, M.F. Thomashow // Annu. Rev. Microbiol. - 1988. - V. 42. - P. 575-606.

137. Birnboim, H.C. A rapid alkaline extraction procedure for screening recombinant plasmid DNA / H.C. Birnboim, J. Doly // Nucl. Acids Res. - 1979. - N. 7. - P. 1513-1523.

138. Bregitzer, P. Plant regeneration and callus type in barley: effect of genotype and culture medium / P. Bregitzer // Crop Science. - 1992. - V. 32. - P. 11081112.

139. Bregitzer, P. Enhancement of plant regeneration from embryogenic callus of commercial barley cultivars / P. Bregitzer, L.S. Dahleen, R.D. Campbell // Plant Cell Reports. - 1998. - V. 17. - P. 941-945.

140. Breusegem, Van F. Overproduction of Arabidopsis thaliana FeSOD confers oxidative stress tolerance to transgenic maize / Van F. Breusegem // Plant and cell physiology. - 1999. - V. 40. - №. 5. - P. 515-523.

141. Brinch-Pedersen, H. An evaluation of feed-back insensitive aspartate kinase as a selectable marker for barley (Hordeum vulgare L.) transformation / H. Brinch-Pedersen, O. Olsen, S. Knudsen, P.B. Holm // Hereditas. - 1999. - V. 131. - P. 239-243.

142. Briside, E.A. Cytodifferentiation and transformation of embryogenic callus lines derived from anther culture of wheat / E.A. Briside, A. Gajdosova, A. Olesen, S.B. Andersen // J. Exp. Bot. - 2000. - V. 51. - P. 187-196.

143. Brown, L. The great food crisis of 2011 / L. Brown // Foreign Policy. -2011. - V. 10. - P. 1-5.

144. Carman, J.G. Improved somatic embryogenesis in wheat by partial stimulation of the in-ovulo oxygen, growth-regulator and desiccation environments / J.G. Carman // Planta. - 1988. - V. 175. - P. 417-424.

145. Castillo, A.M. Somatic embryogenesis and plant regeneration from barley cultivars grown in Spain / A.M. Castillo, B. Egana, J.M. Sanz, L. Cistue // Plant Cell Rep. - 1998. - V. 17. - P. 902-906.

146. Cavatorta, J. Engineering virus resistance using a modified potato gene / J. Cavatorta, K.W. Perez, S.M. Gray, J. Van Eck, I. Yeam, M. Jahn // Plant biotechnology journal. - 2011. - V. 9. - №. 9. - P. 1014-1021.

147. Chan, M.T. Agrobacterium -mediated production of transgenic rice plants expressing a chimeric a-amylase promoter/ß-glucorondase gene / M.T. Chan, H.H. Chang, S.L. Ho, W.F. Tong, S.M. Yu // Plant Mol. Biol. - 1993. - V. 22. - P. 491-506.

148. Chan, M.T. Transformation of indica rice (Oryza sativa L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens / M.T. Chan, T.M. Lee, H.H. Chang // Plant Cell Physiol. - 1992. - V. 33. - P.577-583.

149. Chang, Y. High frequency plant regeneration from immature embryos of an elite barley cultivar (Hordeum vulgare L. cv. Morex) / Y. Chang, J. Zitzewitz, P.M. Hayes, T.H.H. Chen // Plant Cell Reports. - 2003. - V. 21. - P. 733-738.

150. Charbaji, T. Effect of low dose gamma irradiation on in vitro growth of grapevine / T. Charbaji, I. Nabulsi // Plant Cell Tiss. Organ. Cult. - 1999. - V. 57. - P. 129-132.

151. Chauhan, M. Optimization of nutrient levels in the medium increases the efficiency of callus induction and plant regeneration in recalcitrant Indian barley (Hordeum vulgare L.) in vitro / M. Chauhan, S.L. Kothari // In Vitro Cell. Dev. Biol. Plant. - 2004. - V. 40. - P. 520-527.

152. Chawla, H.S. In vitro selection of barley and wheat for resistance against / H.S. Chawla, G. Wenzel // Theor. Appl. Genet. - 1987. - V. 74. - P. 841-845.

153. Cheng, M. Genetic transformation of wheat mediated by Agrobacterium tumefaciens / M. Cheng, J.E. Fry, S. Pang, H. Zhou, C. Hironaka, D.R. Duncan, T.W. Conner, Y. Wan // Plant Physiol. - 1997. - V. 115. - P. 971-980.

154. Cheng, M. Desiccation of plant tissues post-Agrobacterium infection enhances T-DNA delivery and increases stable transformation efficiency in wheat / M.

Cheng, T. Hu, J. Layton, C.N. Liu, J.E. Fry // In Vitro Cell. Dev. Biol. Plant. - 2003. -V. 39(6). - P. 595-604.

155. Cheng, M. Invited review: factors influencing agrobacterium-mediated transformation of monocotyledonous species / M. Cheng, B. Lowe, M. Spencer, X. Ye, C. Armstrong // In vitro Cell. Dev. Biol. Plant. - 2004. - V. 40. - P. 31-45.

156. Christou, P. Production of transgenic rice (Oryza sativa L.) plants from agronomically important indica and japonica varieties via electric discharge particle acceleration of exogenous DNA into immature zygotic embryos / P. Christou, T.L. Ford, M. Kofron // Biotechnology. - 1991. - V. 9. - P. 957-962.

157. Chu, C.C. Establishment of an efficient medium for anther culture of rice through comparative experiments on the nitrogen sources / C.C. Chu, C.C. Wang, C.S. Sun, C. Hsu, K.C. Yin, C.Y. Chu, F.Y. Bi // Sci. Sin. - 1975. - V. 18. - P. 659-668.

158. Clive, J. Global Status of Commercialized Biotech/GM Crops: 2014 [Электронный ресурс] / Clive, J. // ISAAA Brief 49-2014. - Режим доступа: http://www.isaaa.org/.

159. Cushman, J.C. Genomic approaches to plant stress tolerance / J.C. Cushman, H.J. Bohnert //Current opinion in plant biology. - 2000. - V. 3. - №. 2. - P. 117-124.

160. Dahleen, L.S. Improved plant regeneration from barley cultures callus by increased copper levels // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 1995. - V. 43. -P. 267-269.

161. Dahleen, L.S. An improved media system for high regeneration rates from barley immature embryo-derived callus cultures of commercial cultivars / L.S. Dahleen, P. Bregitzer // Crop. Sci. - 2002. - V. 42. - P. 934-938.

162. Dahleen, L.S. Recent advances in barley transformation / L.S. Dahleen, M. Manoharan // In Vitro Cell. and Dev. Biol. Plant. - 2007. - V.43. -P.493-506.

163. Dale, P.J. The experimental and commercial release of transgenic crop plants / P.J. Dale, J.A. Irwin, J.A. Scheffler // Plant Breed. - 1993. - V. 111. - P. 1-22.

164. Datta, S.K. Fertile indica rice plants regenerated from protoplasts isolated from microspore derived cell suspensions / S.K. Datta, K. Datta, I. Potrykus // Plant cell reports. - 1990. - V. 9. - №. 5. - P. 253-256.

165. De Block, M. Genotype-independent leaf disc transformation of potato (Solanum tuberosum) using Agrobacterium tumefaciens / M. De Block // Theoretical and applied genetics. - 1988. - V. 76. - №. 5. - P. 767-774.

166. Deblaere, R. Efficient octopine Ti plasmid-derived vectors for Agrobacterium-mediated gene transfer to plant / R. Deblaere, B.Bytebier, H. De Greve, F. Deboeck, J. Schell, M. Van Montagu, J. Leemans // Nucleic Acids R. -1985. - V. 13. - P. 4777-4788.

167. Delhaize, E. Engineering high level aluminium tolerance in barley with the ALMT1 gene / E. Delhaize, P.R. Ryan, D.M. Hebb, Y. Yamamoto, T. Sasaki, H. Matsumoto // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2004. - V. 101. - P. 15249-15254.

168. Dobigny, A. Direct regeneration of transformed plants from stem fragments of potato inoculated with Agrobacterium rhizogenes / A. Dobigny, S. Tizroutine, C. Gaisne, R. Haicour, L. Rossignol, G. Ducreux, D. Sihachakr // Plant cell, tissue and organ culture. - 1996. - V. 45. - №. 2. - P. 115-121.

169. Duan, H. Overexpression of the wild potato eIF4E-1 variant Eva1 elicits Potato virus Y resistance in plants silenced for native eIF4E-1 / H. Duan, C. Richael, C.M. Rommens // Transgenic research. - 2012. - V. 21. - №. 5. - P. 929-938.

170. Ehsanpour A.A. Evaluation of direct shoot regeneration from stem explants of potato (Solanum tuberosum L.) cv. Delaware by thidiazuron (TDZ) / A.A. Ehsanpour, M.G.K. Jones //Journal of Science and Technology of Agriculture and Natural Resources. - 2000. - V. 4. - №. 3. - P. 47-54.

171. Elaleem, K.G.A. Effect of plant growth regulators on callus induction and plant regeneration in tuber segment culture of potato (Solanum tuberosum L.) cultivar Diamant / K.G.A. Elaleem, R.S. Modawi, M.M. Khalafalla //African Journal of Biotechnology. - 2009. - V. 8. - №. 11.

172. Enikeev, A.G. Agrobacterial transformation as complex biotical stressing factor / A.G. Enikeev, T.V. Kopytina, L.A. Semenova, A.V. Natyaganova, L.V.

Gamanetz, O.D. Volkova // J. of Stress Physiol. and Biochemistry. - 2008. - V. 4. - №. 1. - P. 11-19.

173. Escobar, M. A. Agrobacterium tumefaciens as an agent of disease / M.A. Escobar, A.M. Dandekar // Trends Plant. Sci. - 2003. - V. 8. - P. 380-386.

174. Eva, C. Agrobacterium-mediated barley transformation // C. Eva, I. Csoti, L. Tamas / Acta Biologica Szegediensis. - 2008. - V. 52. - P. 49-51.

175. Evans, J.M. Ethylene precursors and antagonists increase embryogenesis of Hordeum vulgare L. anther culture / J.M. Evans, N.P. Batty // Plant Cell Rep. -1994. - V. 13. - P. 676-678.

176. Farago, J. Regeneration of bialaphos resistant plants after biolistic transformation of two commercial cultivars of spring barley (Hordeum vulgare L.) grown in Slovakia / J. Farago, L. Nemcova // Vedecke Prace. - 2001. - V. 30. - P. -169-176.

177. Frame, B.R. Production of fertile transgenic maize plants by silicon carbide whisker-mediated transformation / B.R. Frame, P.R. Drayton, S.V. Bragnall,

C.J. Lewnau, W.P. Bullock, H.M. Wilson, J.M. Dunwell, J.A. Thompson, K. Wang // Plant J. - 1994. - V. 6. - P. 941-948.

178. Frame, B.R. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of maize embryos using a standard binary vector system / B.R. Frame, H. Shou, R.K. Chikwamba, Z. Zhang, C. Xiang, T.M. Fonger, S. E. K. Pegg, B. Li, D.S. Nettleton,

D. Pei, K. Wang // Plant Physiol. - 2002. - V. 129. - P. 13-22.

179. Gamborg, O.L. Nutrient requirements of suspension cultures of soybean root cells / O.L. Gamborg, R.A. Miller, K. Ojima // Experimental cell research/ - 1968. - V. 50. - P. 151-158.

180. Gao, X. Overexpression of SOD2 increases salt tolerance of Arabidopsis / X. Gao, Z. Ren, Y. Zhao, H. Zhang // Plant Physiology. - 2003. - V. 133. - №. 4. - P. 1873-1881.

181. Gelvin, S. B. Agrobacterium and plant genes involved in T-DNA transfer and integration / S.B. Gelvin // Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. - 2000. - V. 51. - P. 223-256.

182. Getzoff, E.D Electrostatic recognition between superoxide and copper, zinc superoxide dismutase / E.D. Getzoff, J.A. Tainer, P.K. Weiner, P.A. Kollman, J.S. Richardson, D.C Richardson // Nature (London). - 1983. V. 306. - P. 287-290.

183. GM Approval Database [Электронный ресурс], дата обращения сентябрь 2016г. - Режим доступа: http://www.isaaa.org/gmapprovaldatabase/ default.asp.

184. Goldstein, C.R. Tissue culture and plant regeneration from immature embryo explants of barley, Hordeum vulgare / C.R. Goldstein, W.E. Kronstard // Theor. And Appl. Genet. - 1986. - V. 71. - P. 631-636.

185. Gomez, J.M. Location and effects of long-term NaCl stress on superoxide dismutase and ascorbate peroxidase isoenzymes of pea (Pisum sativum cv. Puget) chloroplasts / J.M. Gomez, A. Jimenez, E. Olmos, F. Sevilla // Journal of Experimental Botany. - 2004. - V. 55. - №. 394. - P. 119-130.

186. Gordon-Kamm, W. Stimulation of the cell cycle and maize transformation by disruption of the plant retinoblastoma pathway / W. Gordon-Kamm, B.P. Dilkes, K. Loewe, G. Hoerster, X. Sun, M. Ross et al. // Proc. Natl. Acad. USA -2002. - V. 99. - P. 11975-11980.

187. Gould, J. Transformation of Zea mays L. using the Agrobacterium tumefaciens and the shoot apex / J. Gould, M. Devery, O. Hasegava, E.C. Ulian, G. Peterson, R.H. Smith / Plant Physiol. - 1991. - V. 95. - P. 426-434.

188. Grossi, M. Characterization of two barley genes that respond rapidly to dehydration stress / M. Grossi, M. Gulli, A.M. Stanca, L. Cattivelli // Plant Sci. - 1995. - V. 105. - P. 71-80.

189. Gupta, A.S. Increased resistance to oxidative stress in transgenic plants that overexpress chloroplastic Cu/Zn superoxide dismutase / A.S. Gupta, J.L. Heinen, A.S. Holaday, J.J. Burke, R.D. Allen // Proceedings of the National Academy of Sciences. - 1993. - V. 90. - №. 4. - P. 1629-1633.

190. Gusta, L.V. Superoxide dismutase: an all-purpose gene for agri-biotechnology / L.V. Gusta, N.T. Benning, G. Wu, X. Luo, X. Liu, M.L. Gusta, A. McHughen // Mol Breeding. - 2009. - V. 24. - P. 103-115.

191. Halliwell, B. Oxygen free radicals and iron in relation to biology and medicine: some problems and concepts / B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge //Archives of biochemistry and biophysics. - 1986. - V. 246. - №. 2. - P. 501-514.

192. Halterman, D. Biotech Potatoes in the 21st Century: 20 Years Since the First Biotech Potato / D. Halterman, J. Guenthner, S. Collinge, N. Butler, D. Douches // Am. J. Potato Res. - 2015. - V. 93. - P. 1-20.

193. Hamilton, C.M. A binary-BAC system for plant transformation with high-molecular-weight DNA / C.M. Hamilton // Gene. - 1997. - V. 200. - P. 107-116.

194. Hashizume, F. Efficient Agrobacterium^-mediated transformation and the usefulness of a sythetic GFP reporter gene in leading varieties of japonica rice / F. Hashizume, T. Tsuchiya, M. Ugaki, Y. Niwa, N. Tachibana, Y. Kowyama // Plant Biotechnol. - 1999. - V. 16. - P. 397-401.

195. Haunsen, G. Constitutive expression of the virulence genes improves the efficiency of plant transformation by Agrobacterium / G. Hansen, A. Das, M.D. Chilton // Proc. Natl Acad. Sci. USA/ - 1994. - V. 91. - P. 7603-7607.

196. Hayashimoto, A. A polyethylene glycol-mediated transformation system for production of fertile transgenic rice plants / A. Hayashimoto, Z. Li, N. Murai // Plant Physiol. - 1990. - V. 93. - P. 857-863.

197. He, D.G. Transformation of wheat (Triticum aestivum L.) through electroporation of protoplast / D.G. He, A. Mouradov, Y.M. Yang, E. Mouradova, K.J. Scott // Plant Cell Rep. - 1994. - V. 14. - P. 192-196.

198. Hernalsteens, J.P. An Agrobacterium-transformed cells culture from monocot Asparagus officinalis / J.P. Hernalsteens, L. Thia-Toong, J. Schell, M. Van Montagu // EMBO J. - 1984. - V. 3. - P. 3039-3041.

199. Hess, D. transformation experiments by pipetting Agrobacterium into spikelets of wheat (Triticum aestivum L.) / D. Hess, K. Dressler, R. Nimmrichter // Plant Sci. - 1990. - V. 72. - P. 233-244.

200. Hiei, Y. Efficient transformation of rice (Oryza sativa L.) mediated by Agrobacterium and sequence analysis of the boundaries of the T-DNA / Y. Hiei, S. Ohta, T. Komari, T. Kumashiro // Plant J. - 1994. - V. 6. - P. 271-282.

201. Hiei, Y. Transformation of rice mediated by Agrobacterium tumefaciens / Y. Hiei, T. Komari, T. Kubo // Plant Mol. Biol. - 1997. - V. 35. - P. 205-218.

202. Hoekama, A. A binary plant vector strategy based of separation of vir-and T-region of the Agrobacterium tumefaciens Ti-plasmid / A. Hoekama, P.R. Hirsch, P.J.J. Hooykaas, R.A. Schilperoort // Nature/ - 1983. - V. 303. - P. 179-180.

203. Hooykaas, P.J.J. The virulence system of Agrobacterium tumefaciens / P.J.J. Hooykaas, A. Beijersbergen // Annu. Rev. Phytopatol. - 1994. - V. 32. - P. 157179.

204. Hooykaas-Van Slogteren, G.M.S. Expression of Ti plasmid genes in monocotyledonous plants infected with Agrobacterium tumefaciens / G.M.S. Hooykaas-Van Slogteren, P.J.J. Hooykaas, R.A. Schilperoot // Nature/ - 1984. - V. 311. - P. 763-764.

205. Horvath, H. The production of recombinant proteins in transgenic barley grains / H. Horvath, J. Huang, O. Wang, E. Kohl, T. Okita, C.G. Kannangara, D. von Wettstein // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2000. - V. 97. - P. 1914-1919.

206. Horvath, H. Genetically engineered stem rust resistance in barley using the Rpg1 gene / H. Horvath, N. Rostoks, R. Brueggeman, B. Steffenson, D. von Wettstein, A. Kleinhofs // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2003. - V. 100. - P. 364-369.

207. Huda, M.S. Effect of explants on callus formation of potato / M.S. Huda, M. M. Hossain, M.Z.Haq, S.S. Zamal, M.R. Karim // Eco-friendly Agril. J. - 2013. -V. 6(08). - P. 146-149.

208. Hussain, I. Morphogenic potential of three potato (Solanum tuberosum) cultivars from diverse explants, a prerequisite in genetic manipulation / I. Hussain, A. Muhammad, Z. Chaudhry, R. Asghar, S.M. S. Naqvi, H. Rashid // Pak. J. Bot. - 2005. - V. 37. - №. 4. - P. 889-898.

209. Ishida, Y. High efficiency transformation of maize (Zea mays L.) mediated by Agrobacterium tumefaciens / Y. Ishida, H. Saito, S. Ohta, Y. Hiei, T. Komari, T. Kumashiro // Nature Biotechnol. - 1996. - V. 14. - P. 745-750.

210. Jensen, L.G. Transgenic barley expressing a protein-engineered, thermostable (1,3-1,4)-betaglucanase during germination / L.G. Jensen, O. Olsen, O.

Kops, N. Wolf, K.K. Thompsen // Proc. Natl. Acad. Sci. USA/ - 1996. - V. 93. - P.

3487-3491.

211. Jha, A.K. Ethylene influences green plant regeneration from barley callus / A.K. Jha, S.L. Dahleen, J.C. Suttle // Plant Cell Rep. - 2007. - V. 26. - P. 285-290.

212. Jha, S. Expression of Dm-AMP1 in rice confers resistance to Magnaporthe oryzae and Rhizoctonia solani / S. Jha, H.G. Tank, B.D. Prasad, B.B. Chattoo // Transgenic Res. - 2009. - V. 18(1). - P. 59-69.

213. Jha, S. Expression of a plant defensin in rice confers resistance to fungal phytopatogenes / S. Jha, B.B. Chattoo // Transgenic Res. - 2010. V. - 19(3). - P. 373384.

214. Kaeppler, H.F. Silicon-carbide fiber-mediated stable transformationof plant cell / H.F. Kaeppler, D.A. Somers, H.W. Rines, A.F. Cockburn // Theor. Appl. Genet. - 1992. - V. 84. - P. 560-566.

215. Kanazaki, H. Overexspression of the wasabi defensin gene confers enhanced resistance to blast fungus in transgenic rice / H. Kanazaki, S. Nirasava, H. saitoh, M. Ito, M. Nishihara, R. Terauchi // Theoretical and Applied Genetics. - 2002. -V. 105(6).- P. 809-814.

216. Kang, B.C. Ectopic expression of a recessive resistance gene generates dominant potyvirus resistance in plants / B.C. Kang, I. Yeam, H.X. Li, K.W. Perez, M.M. Jahh // Plant Biotechnology Journal. - 2007. - V. 5. - P. 526-536.

217. Ke, J. High-efficiency gene transfer to recalcitrant plants by Agrobacterium tumefaciens / J. Ke, R. Khan, T. Johnson, D.A. Somers, A. Das // Plant Cell Rep. - 2001. - V. 20. - P. 150-156.

218. Ke, X.-Y. Manipulation of discriminatory T-DNA delivery by Agrobacterium into cells of immature embryos of barley and wheat / X.-Y. Ke, A.C. McCormac, A. Harvey, D. Lonsdale, D.-F. Chen, M.C. Elliott // Euphytica. - 2002. -V. 126. - P. 333-343.

219. Khanna, H.K. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of wheat using a superbinary vector and a polyamine-supplemented regeneration medium / H.K. Khanna, G.E. Daggard // Plant Cell Rep. - 2003. - V. 21. - P. 429-436.

220. Khatun, N. Callus induction and regeneration from nodal segment of potato cultivar Diamant / N. Khatun, M.A. Bari, R. Islam, S. Huda, N.A. Siddque, M.A. Rahman, M. U. Mullah //J. Biol. Sci. - 2003. - V. 3. - P. 1101-1106.

221. Kihara, M. Improvement of ß-amylase thermostability in transgenic barley seeds and transgene stability in progeny / M. Kihara, Y. Okada, H. Kuroda, k. Saeki, N. Yoshigi, K. Ito // Mol. Breed. - 2000. - V. 6. - P. 511-517.

222. Kim, Y.B. Thioredoxin h overexpressed in barley seeds enhances selenite resistance and uptake during germination and early seedling development / Y.B. Kim, C. Garbisu, I.J. Pickering, R.C. Prince, G.N. George, M.J. Cho, J.H. Wong, B.B. Buchanan // Planta. - 2003. - V. 218. - P. 186-191.

223. Klee, H. Agrobacterium--mediated plant transformation and its further applications to plant biology / H. Klee, R. Horsch, S. Rogers // Annu. Rev. Plant Physiol. - 1987. - V. 38. - P. 467-486.

224. Komatsuda, T. Genetics of callusproliferation and shoot differentiation in barley / T. Komatsuda, S. Enomoto, K. Nakajima // Journal Heredity. - 1989. - V. 80. -P. 345-350.

225. Komori, T. Current status of binary vectors and superbinary vectors / T. Komori, T. Imayama, N. Kato, Y. Ishida, J. Ueki, T. Komari // Plant Physiology. -2007. - V. 145. - P. 1155-1160.

226. Lange, M. Suppression of C-hordein synthesis in barley by antisense constructs results in a more balanced amino acid composition / M. Lange, E. Vincze, H. Wieser, J.K. Schjoerring, P.B. Holm // Journal of Agricultural and Food Chemistry. - 2007. - V. 55. - N. 4. - P. 6074-6081.

227. Leckband, G. Transformation and expression of a stilbene synthase gene of Vitis vinifera L. in barley and wheat for increased fungal resistance / G. Leckband, H. Lorz // Theor. Appl. Genet. - 1998. - V. 96. - P. 1004-1012.

228. Li, L. An improved rice transformation system using the biolistic method / L. Li, r. Qu, A. de Kochko, C. Fauquet, R.N. Beachy // Plant Cell Rep. - 1993. - V. 12. - P. 250-255.

229. Liang, H. Transgenic wheat with stilbene synthase gene resistant to powdery mildew obtained by biolistic method / H. Liang, J. Zheng, X.Y. Duan, B.Q. Sheng, S.G. Jia, D.W. Wang et. al // Chin. Sci. Bul. - 2000. - V. 45. - P. 634-638.

230. Linsmaier, E.M. Organic growth factor requirements of tobacco tissue cultures / E.M. Linsmaier, F. Skoog // Physiol. Plant. - 1965. - V. 18. - P. 100-127.

231. Luhrs, R. Plant regeneration in vitro from embryogenic cultures of spring-and winter-type barley, Hordeum vulgare L. / R. Luhrs, H. Lorz // Theoretical and Applied Genetics. - 1987. - V. 75. - P. 16-25.

232. Luo, Z.K. Simple method for transformation of rice via the pollen-tube pathways / Z.K. Luo, R. Wu // Plant. Mol. Biol. - 1988. - V. 6. - P. 165-174.

233. Luppoto, E. Callus induction and plant regeneration from barley mature embryos / E. Luppoto // Annals of Botany. - 1984. - V. 54. - P. 523-529.

234. Manoharan, M. Genetic transformation of the commercial barley (Hordeum vulgare) cultivar Conlon by particle bombardment of callus / M. Manoharan, L.S. Dahleen // Plant Cell Rep. - 2002. - V. 21. - P. 76-80.

235. Manoharan, M. Expression of 3-OH trichoticene acetyltransferase in barley (Hordeum vulgare L.) and effects on deoxynivalenol / M. Manoharan, L.S. Dahleen, T.M. Hohn, S.M. Neate, X-N. Yu, N.J. Alexander, S.P. McCormick et al. // Plant Sci. - 2006. - V. 171. - P. 699-706.

236. Matthysse, A.G. Role of Agrobacterium cellulose fibrils in Agrobacterium tumefaciens infection / A.G. Matthysse // J. Bacteriol. - 1983. - V. 154. - P. 906-915.

237. McCord, J.M. Superoxide dismutase: an enzymatic function for erythrocuprien (hemocuprien) / J.M. McCord, I. Fridovich // J. Biol. Chem. - 1969. -V. 244. - P. 6056-6063.

238. McCullen, C.A. Agrobacterium tumefaciens and plant cell interactions and activities required for interkingdom macromolecular transfer / C.A. McCullen, A.N. Binns // Annu. Rev. Cell Dev. Biol. - 2006. - V. 22. - P. 101-127.

239. McGrath, P.F. Coat protein-mediated resistance to isolates of barley yellow dwarf in oats and barley / P.F. McGrath, J.R. Vincent, C-H. Lei, W.P.

Pawlowsky, K.A. Torbert, W. Gu et al. // Eur. J. Plant Path. - 1997. - V. 103. - P. 695710.

240. McKersie, B.D. Water-deficit tolerance and field performance of transgenic alfalfa overexpressing superoxide dismutase / B.D. McKersie, S.R. Bowley, E. Harjanto, O. Leprince // Plant Physiology. - 1996. - V. 111. - №. 4. - P. 1177-1181.

241. McKersie, B.D. Winter survival of transgenic alfalfa overexpressing superoxide dismutase / B.D. McKersie, S.R. Bowley, K.S. Jones // Plant Physiol. -1999. - V. 119. - P. 839-848.

242. McKersie, B.D. Iron-superoxide dismutase expression in transgenic alfalfa increases winter survival without a detectable increase in photosynthetic oxidative stress tolerance / B.D. McKersie, J. Murnaghan, K.S. Jones, S.R. Bowley // Plant Physiol. - 2000. -V. 122. - P. 1427-1437.

243. Miller, J.H. Experiments in molecular genetics / J.H. Miller. - New York, Cold Spring Harbor, 1972. - 437 p.

244. Mittler, R. Oxidative stress, antioxidants and stress tolerance / R. Mittler // Trends Plant Sci. - 2002. - V. 7. - P. 405-410.

245. Mittova, V. Up - regulation of the leaf mitochondrial and peroxisomal antioxidative systems in response to salt - induced oxidative stress in the wild salt - tolerant tomato species Lycopersicon pennellii / V. Mittova, M. Tal, M. Volokita, M. Guy // Plant Cell Envir. - 2003. - V. 26. - №. 6. - P. 845-856.

246. Mohanty, B.D. Somatic embryogenesis and plant regeneration from leaf callus of Hordeum vulgare / B.D. Mohanty, P.D. Ghosh // Ann. Bot. - 1988. - V. 61. -P. 551-555.

247. Mohanty, A. Agrobacterium--meditated high frequency transformation of an elite indica rice variety Pusa Basmati 1 and transmission of the transgenes to R2 progeny / A. Mohanty, N.P. Sarma, A.K. Tyagi // Plant Sci. - 1999. - V. 147. - P. 127137.

248. Moran, J.F. Functional characterization and expression of a cytosolic iron-superoxide dismutase from cowpea root nodules / J.F. Moran, E.K. James, M.C.

Rubio, G. Sarath, R.V. Klucas, M. Becana // Plant Physiology. - 2003. - V. 133. - №. 2. - P. 773-782.

249. Mordhorst, A.P. Embryogenesis and development of isolated barley (Hordeum vulgare L.) microspores are influenced by the amount and composition of nitrogen sources in cultyre media / A.P. Mordhorst, H. Lorz // Journal of Plant Physiology. - 1993. - V. 142. - P. 485-492.

250. Murashige, Y. A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue culture / Y. Murashige, F. Skoog // Physiol Plant. - 1962. - № 3. - P. 473-497.

251. Nehra, N.S. Self-fertile transgenic wheat plants regenerated from isolated scutellar tissie following microprojectile bombardment with two distinct gene constructs / N.S. Nehra, R.N. Chibbar, N. Leung, K.K. Caswell, C.C. Mallrad, L.L. Steinhauer et al. // Plant J. - 1994. - V. 5. - P. 285-297.

252. Nobre, J. Transformation of barley scutellum protoplasts: regeneration of fertile transgenic plants / J. Nobre, M. R. Davey, P.A. Lazzeri, M.E. Cannel // Plant Cell Rep. - 2000. - V. 19. - P. 1000-1005.

253. Norstog, K. Induction of embryo like structures by kinetin in cultured barley embryos / K. Norstog // Dev. Biol. - 1970. - V 23. - P. 665-670.

254. Norstog, K.J. The growth of barley embryos on coconut milk media / K.J. Norstog // Bulletin of the Torrey Botanical Club. - 1956. - V. 83(1). - P. 27-29.

255. Nuutila, A.M. Expression of fungal thermotolerant endo-1,4-B-glucanase in transgenic barley seeds during germination / A.M. Nuutila, A. Ritala, R.W. Skadsen, L. Mannonen, V. Kauppinen // Plant Mol. Biol. - 1999. - V. 41. - P. 777-783.

256. Nuutila, A.M. Optimization of media nitrogen and copper concentrations for regeneration of green plants from polyembryogenic cultures of barley (Hordeum vulgare L.) / A.M. Nuutila, J. Hamalainen, L. Mannonen // Plant Science. - 2000. - V. 151. - P. 85-92.

257. Ochatt, S.J. In vitro recurrent selection of potato: production and characterization of salt tolerant cell lines and plants / S.J. Ochatt, P.L. Marconi, S.

Radice, P.A. Arnozis, O.H. Caso // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. - 1998. - V. 55. - №. 1. - P. 1-8.

258. Ohta, Y. High-efficiency genetic transformation of maize by mixture of pollen and exogenous DNA / Y. Ohta // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1986. - V. 83. -P. 715-720.

259. Owens, L.D. Kanamycin promotes morphogenesis of plant tissues / L.D. Owens // Plant Sci. Lett. - 1979. --V. 16. - №. 2. - P. 225-230.

260. Patel, M. Transgenic barley expressing a fungal xylanase gene in the endosperm of the developming grains / M. Patel, J.S. Johson, R.I.S. Brettell, J. Jacobsen, G.-P. Xue // Mol. Breed. - 2000. - V. 6. - P. 113-123.

261. Pauly, M.N. Selection for bacterial blight phytotoxin resistance in wheat culture // M.N. Pauly, W.W. Shane, B.G. Gegenbach // Crop Sci. - 1987. - V. 27. -№2. - P. 340-344.

262. Pelligrineschi, A. Transgenic wheat plants: a powerful breeding source /

A. Pelligrineschi, S. McLean, M. Salgado, L. Velazquez, R. Hernandes, R.M. Brito et al. // Euphytica. - 2001. - V. 119. - P. 133-136.

263. Pena, A. Transgenic rye plants obtained by injecting DNA into young floral tillers / A. Pena, H. Lorz, J. Schell // Nature. - 1987. - V. 325. - P. 274-276.

264. Perl, A. Enhanced oxidative-stress defense in transgenic potato expressing tomato Cu,Zn superoxide dismutases / A. Perl, R. Perl-Treves, S. Galili, D. Aviv, E. Shalgi, S. Malkin, E. Galun // Theor. and Appl. Genet. - 1993. - V. 85. - P. 568-576.

265. Petolino, J.F. Genetic transformation and hybridization: Whisker-mediated transformation of embryogenic callus of maize / J.F. Petolino, N.L. Hopkins,

B.D. Kosegi, M. Skokut // Plant Cell Rep. - 2000. - V. 19. - P. 781-786.

266. Pieczynski, M. Down - regulation of CBP80 gene expression as a strategy to engineer a drought - tolerant potato / M. Pieczynski, W. Marczewski, J. Hennig, J. Dolata, D. Bielewicz, P. Piontek, M. Krzeslowska // Plant biotechnology journal. - 2013. - V. 11. - №. 4. - P. 459-469.

267. Pitcher, L.H. Overproduction of petunia chloroplastic copper/zinc superoxide dismutase does not confer ozone tolerance in transgenic tobacco / L.H. Pitcher, E. Brennan, A. Hurley, P. Dunsmuir, J.M. Tepperman, B.A Zilinskas // Plant physiology. - 1991. - V. 97. - №. 1. - P. 452-455.

268. Popelka, J.C. Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation of rye (Secale cereale L.) / J.C. Popelka, F. Altpeter // Mol. Breed. -2003. - V. 11. - P. 203-211.

269. Potrykus, I. Callus formation from cell culture protoplasts of corn / I. Potrykus, C.T. Harms, H. Lorz // Theor. Appl. Genet. - 1979. - V. 54. - P. 209-214.

270. Qi, Y.C. Overexpression of glutation-S-transferase gene increases salt tolerance of Arabidopsis / Y.C. Qi, W.Q. Liu, L.Y. Qiu, S.M. Zhang, L. Ma, H. Zhang // Russian Journal of Plant Physiology. - 2010. - V. 57. - №2. - P. 233-240.

271. Quatrano, R.S. Control of cereal embryogenesis and the regulation of the gene expression by abscisic acid (ABA) / Quatrano R.S., Marcotte W.R., Litts J.S. et al. // Biol. Bull. - 1989. - V. 176. - № 1. - P. 65.

272. Raineri, D.M. Agrobacterium--mediated transformation of rice (Oryza sativa L.) / D.M. Raineri, P. Bottino, M.P. Gordon, E.W. Nester // Biotechnology. -1990. - V. 8. - P. 33-38.

273. Ramesh, S.A. Over-expression of an Arabidopsis zinc transporter in Hordeum vulgare increases short-term zinc uptake after zinc deprivation and seed zinc content / S.A. Ramesh, S. Choimes, D.P. Schachtman // Plant Mol. Biol. - 2004. - V. 54. - P. 373-385.

274. Rance, I.M. Partial desiccation of mature embryo-derived calli, a simple treatment that dramatically enhances the regeneration ability of Indica rice / I.M. Rance, W. Tian, H. Mathews, A. Kochko, R.N. Beachy, C. Fauquet // Plant Cell Rep. -1994. - V. 13. - P. 647-651.

275. Rao, K.V. Transient gene expression in electroporated immature embryos of rice (Oryza sativa L.) / K.V. Rao // J. Plant Physiol. - 1995. - V. 147. - P. 71-74.

276. Rashid, H. Transgenic plant production mediated by Agrobacterium in indica rice / H. Rashid, S. Yokoi, K. Toriyama, K. Hinata // Plant Cell Rep. - 1996. -V. 15. - P. 727-730.

277. Razem, F.A. The RNA-binding protein FCA is an abscisic acid receptor / F.A. Razem, A. El-Kereamy, S.R. Abrams, R.D. Hill // Nature. - 2006. - V. 439. - №. 7074. - P. 290-294.

278. Rhodes, C.A. Genetically transformed maize plants from protoplast /

C.A. Rhodes, D.A. Pierce, I.J. Mascarenhas, J.J. Detmer // Science. - 1988. - V. 240/ -P. 204-207.

279. Rout, J.R. Agrobacterium--mediated stable genetic transformation of suspension cells of corn (Zea mays L.) / J.R. Rout, C.M. Hironaka, T.W. Conner, D.L. DeBoer, D.R. Duncan, M.E. Fromm, C.L. Armstrong // 38th Annual Maize Genetics Conf., St. Charles, IL, March 14-17, 1996.

280. Roxas, V.P. Stress tolerance in transgenic tobacco seedlings that overexspress glutation S-transferase/glutation peroxidase / V.P. Roxas, S.A. Lodhi,

D.K. Garret, J. R. Mahan, R.D. Allen // Plant and Cell Physiology. - 2000. - V. 41(11). - P. 1229-1234.

281. Ruffel, S. A natural recessive resistance gene against potato virus Y in pepper corresponds to the eukaryotic initiation factor 4E (eIF4E) / S. Ruffel, M.H. Dussault, A. Palloix, B. Moury, A. Bendahmane, C. Robaglia, C. Caranta // The Plant Journal. - 2002. - V. 32. - №. 6. - P. 1067-1075.

282. Ruffel, S. The recessive potyvirus resistance gene pot-1 is the tomato orthologue of the pepper pvr2-eIF4E gene / S. Ruffel, J.L. Gallois, M.L. Lesage, C. Caranta // Molecular Genetics and Genomics. - 2005. - V. 274. - №. 4. - P. 346-353.

283. Sambrook, J. Molecular Cloning: a laboratory manual / J. Sambrook, D.W. Russel. - Harbour, New York: Cold Spring Harbour Laboratory Press, 2001. - V. 1. - 2344p.

284. Schunmann, P.H.D. Biopharming the SimpliRED™ HIV diagnostic reagent in barley, potato and tobacoo / P.H.D. Schunmann, G. Coia, P.M. Waterhouse // Mol. Breed. - 2002. - V. 9. - P. 113-121.

285. Sharma, K.K. Genetic transformation technology: status and problems / K.K. Sharma, P. Bhatnagar-Mathur, T.A. Thorpe // In Vitro Cell. Dev. Biol. Plant. -2005. - V. 41. - P. 102-112.

286. Sharma, V.K. Transgenic barley overexpressinga 13-lipoxygenase to modify oxylipin signature / V.K. Sharma, T. Monostory, C. Gobel, R. Hansch, F. Bittner, S. Wasternack et al. // Phytochemistry. - 2006. - V. 67. - P. 264-276.

287. Sheerman, S. A rapid transformation method for Solanum tuberosum using binary Agrobacterium tumefaciens vectors / S. Sheerman, M.W. Bevan // Plant Cell Reports. - 1988. - V. 7. - №. 1. - P. 13-16.

288. Shen, W.H. T-DNA transfer to maize cells: hystochemical investigation of ß-glucoronidase activity in maize tissues / W.H. Shen, J. Escudero, M. Schlappi, C. Ramos, B. Hohn, Z. Koukolikova-Nicola // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 1993. - V. 90. - P. 1488-1492.

289. Sherkar, H.D. Effect of 2,4-D; BAP and TDZ on callus induction and shoot regeneration in potato / H.D. Sherkar, A.M. Chavan // Science Res. Rep. - 2014. - V. 4(1). - P. 101-105.

290. Shimamoto, K. Fertile transgenic rice plants regenerated from transformed protoplast / K. Shimamoto, R. Terada, T. Izawa, H. Fujimoto // Nature. -1989. - V. 338. - P. 274-276.

291. Shirin, F. Callus induction and plant regeneration from internodal and leaf explants of four potato (Solanum tuberosum L.) cultivars / F. Shirin, M. Hossain, M.F. Kabir, M. Roy, S.R. Sarker // World J. Agric. Sci. - 2007. - V. 3. - №. 1. - P. 1-6.

292. Shravat, A.K. Agrobacterium--mediated transformation of cereals: a promising approach crossing barriers / A.K. Shravat, H. Lorz // Plant Biotechnology Journal. - 2006. - V. 4. - P. 575-603.

293. Sivamani, E. Improved biomass productivity and water-use efficiency under water-deficit conditions in transgenic wheat constitutively expressing the barley Hval gene / E. Sivamani, A. Bahieldin, J.M. Wraith, T. Alniemi, W.E. Dyer, T.H.D. Ho, R.D. Qu // Plant Sci. - 2000. - V. 155. - P. 1-9.

294. Skoog, F. Chemical Regulation of Growth and Organ Formiration in plant Tissues Cultured in vitro / F. Skoog, C.O. Miller // Sympos. Soc. Exper. - 1957. -V. 11. - P. 118-131.

295. Smirnoff, N. Plant resistance to environmental stress / N. Smirnoff // Current Opinion in Biotechnology, 1998. V. 9. P. 214-219.

296. Somers, D.A. Fertile, transgenic oat plats / D.A. Somers, H.W. Rines, W. Gu, H.F. Kaeppler, W.R. Bushnell // Biotechnology. - 1992. - V. 10. - P. 1589-1594.

297. Songstad, D.D. Transient expression of GUS and anthocyanin constructs in intact maize immature embryos following electroporation / D.D. Songstad, F.G. Halaka, D.L. DeBoer, C.L. Armstrong, M.A.W. Hinchee, C.G. Ford-Santino, S.M. Brown, M.E. Fromm, R.B. Horsch // Plant Cell Tissie Organ Cult. - 1993. - V. 33. - P. 195-201.

298. Sood, P. Problems and possibilities of monocot transformation / P. Sood, A. Bhattacharya, A. Sood // Biologia Plantarum. - 2011. - V. 55(1). - P. 1-15.

299. Spiegel-Roy, P. Radiosensitivity of Shamouty orange (Citrus sinensis) seeds and buds / P. Spiegel-Roy, J. Koghba // Rad. Bot. - 1973. - V. 13. - P. 105-110.

300. Stein, N. The eucariotic translation initiation factor 4E confers multiallelic recessive Bymovirus resistance in Hordeum vulgare (L.) / N. Stein, D. Perovic, J. Kumlehn, B. Pellio, S. Stracke, S. Streng et al. // Plant J. - 2005. - V. 42. -P. 912-922.

301. Suparthana, P. Development of simple and efficient in planta transformation method for rice (Oryza sativa L.) using Agrobacterium tumefaciens / P. Suparthana, T. Shimizu, H. Shioiri, M. Nogawa, M. Nozue, M. Kojima // J. Biosci. Bioengi. - 2005. - V. 100. - №4. - P. 391-397.

302. Suparthana, P. Development of simple and efficient in planta transformation method for wheat (Triticum aestivum L.) using Agrobacterium tumefaciens / P. Suparthana, T. Shimizu, H. Shioiri, M. Nogawa, T. Nakajima, N. Haramoto, M. Nozue, M. Kojima // J. Biosci. Bioengi. - 2006. -V. 102. - № 3. - P. 162-170.

303. Tang, K. Development mediated transformation and genetic analysis -based selection // K. Tang, A. Wu, J. Yao, H. Qi, X. Lu // Acta Biotech. - 2000. - V. 20. P. 175-183.

304. Tang, L. Enhanced tolerance of transgenic potato plants expressing both superoxide dismutase and ascorbate peroxidase in chloroplasts against oxidative stress and high temperature / L. Tang, S.Y. Kwon, S.H. Kim, J.S. Kim, J.S. Choi, K.Y. Cho, H.S. Lee // Plant Cell Rep.- 2006. - V. 25. - №. 12. - P. 1380-1386.

305. Tempe, J. Plasmids of medical, commercial and environmental importance / J. Tempe, P. Guyon, D. Tepfer, A Petit; in: Timms K.N., Puhler A. (eds.)

- Amsterdam: Elsevier/North Holland Biomedical Press, 1979. - P. 353-363.

306. Thompson, J.A. Maize transformation utilizing silicon-carbide whiskers

- a Review / J.A. Thompson, P.R. Drayton, B.R. Frame, K. Wang, J.M. Dunwell // Euphytica. - 1995. - V. 85. - P. 75-80.

307. Tingay, S. Agrobacterium tumefaciens-mediated barley transformation / S. Tingay, D. McElroy, R. Kalla, S. Fieg, M. Wang, S. Thornton, R. Brettell // Plant Journal. - 1997. - V. 11. - P. 1369-1376.

308. Tobias, D.J. Co-bombardment, intergration and expression of rice chitinase and thaumatin-like protein genes in barley (Hordeum vulgare cv. Conlon) / D.J. Tobias, M. Manoharan, C. Pritsch, L.S. Dahleen // Plant Cell Rep. - 2007. - V. 26.

- P. 631-639.

309. Toriyama, K. Transgenic rice plants after direct gene transfer into protoplast / K. Toriyama, Y. Arimoto, H. Uchimiya, K. Hinata // Biotechnology. -1988. - V. 6. - P. 1072-1074.

310. Toyoda, H. Transient expression of ß-glucuronidase gene introduce in the barley coleoptile cells by microinjecton / H. Toyoda, T. Yamaga, Y. Matsuda, S. Ouchi // Plant Cell Rep. - 1990. - V. 9. - P. 299-302.

311. Tsukahara, M. Simple dehydration treatment promotes plantlet regeneration of rice (Oryza sativa L.) callus / M. Tsukahara, T. Hirosawa // Plant Cell Rep. - 1992. - V. 11. - P. 550-553.

312. Tull, D. Enhanced amylolytic activity in germinating barley through synthesis of a bacterial alpha-amylase / D. Tull, B.A. Phillipson, B. Kramhoft, S. Knudsen, O. Olsen, B. Svensson // J. Ceeal Sci. - 2003. - V. 37. - P. 71-80.

313. Tyagi, N. Short term ethylene manipulation influences regeneration in barley / N. Tyagi, L.S. Dahleen // Journal of Plant molecular biology and biotechnology. - 2011. - V. 2. - №1. - P. 65-73.

314. Upadhyaya, N.M. Agrobacterium mediated transformation of Australian rice cultivars Jarrah and Amaroo using modified promoters and selectable markers / N.M. Upadhyaya, B. Surin, K. Ramm, J. Gaudron, P.H.D. Schunmann, W. Taylor, P.M. Waterhouse, M.-B. Wang // Aust. J. Plant Physiol. - 2000. - V. 27. - P. 201-210.

315. Urushibara, S. Efficient transformation of suspension-cultured rice cells mediated by Agrobacterium tumefaciens / S. Urushibara, Y. Tozawa, M. Kawagishi-Kobayashi, K. Wakasa // Breed. Sci. - 2001. - V. 51. - P. 33-38.

316. Van Camp, W. Enhancement of oxidative stress tolerance in transgenic tobacco plants overproducing Fe-superoxide dismutase in chloroplasts / W. Van Camp, K. Capiau, M. Van Montagu, D. Inze, L. Slooten // Plant Physiol. - 1996. - V. 112.- P. 1703-1714.

317. Vinocur, B. Recent advances in engineering plant tolerance to abiotic stress: achievements and limitations / B. Vinocur, A. Altman // Current Opinion in Biotechnology. - 2005. - V. 16. - P. 123-132.

318. Wan, Y. Generation of large numbers of independently transformed fertile barley plants / Y. Wan, P.G. Lemaux // Plant Physiology. - 1994. - V. 104. - P. 37-48.

319. Wang, Y. Promoters from kin1 and cor6.6, two Arabidopsis thaliana low temperature and ABA-indicible genes, direct strong b-glucuronidase expression in guard cells, pollen and young developing seeds / Y. Wang, W. Zhang, J. Cao, D. McElory, R. Wu // Plant Mol. Biol. - 1995. - V. 28. - P. 619-634.

320. Wang, M.-B. Intronmediated improvement of a selectable marker gene for plant transformation using Agrobacterium tumefaciens / M.-B. Wang, N.M.

Upadhyaya, R.I.S. Brettell, P.M. Waterhouse // J. Genet. Breed. - 1997. - V. 51. - P. 325-334.

321. Wang, M.-B. A single copy of a virus-derived transgene encoding hairpin RNA gives immunity to barley yellow dwart virus / M.-B. Wang, D.C. Abbot, P.M. Waterhouse // Mol. Plan Pathol. - 2000a. - V. 1. - P. 347-356.

322. Wang, A.S. A mannose selection system for production of fertile transgenic maize plants from protoplast / A.S. Wang, R.A. Evans, P.R. Altendorf, J.A. Hanten, M.C. Doyle, J.L. Rosichan // Plant Cell Rep. - 2000b. - V. 19. - P. 654-660.

323. Wang, M.-B. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of an elite Australian barley cultivar with virus resistance and reporter genes / M.-B. Wang, D.C. Abbot, N.M. Upadhyaya, J.V. Jacobsen, P.M. Waterhouse // Aust. J. Plant Physiol. - 2001. - V. 28. - P. 149-156.

324. Wang, Y. Transgenic tomato (Lycopersicon esculentum) over-expressing cAPX exhibits enhanced tolerance to UV-B and heat stress / Y. Wang, M. Wisniewski, R. Meilan, M. Cui, L. Fuchigami // J. Appl. Hortic. - 2006. - V.9. - P.1-5.

325. Wang, J. Maize (Zea mays) genetic transformation by co-cultivating germinating seeds with Agrobacterium tumefaciens / J. Wang, Y. Sun, Y. Li // Biotechnol. Appl. Biochem. - 2007. - V. 46. - P. 51-55.

326. Weeks, I.T. Rapid production of multiple independent lines of fertile transgenic wheat (Thriticum aestivum) / I.T. Weeks, O.D. Anderson, A.E. Blechl // Plant Physiol. - 1993. - V. 102. - P. 1077-1084.

327. Weigel, R.S. Long term regeneration by somatic embryogenesis in barley (Hordeum vulgare L.) tissue cultures derived from apical meristem explants / R.S. Weigel, K.W. Hughes // Plant Cell Tiss. Organ Cult. - 1985. - V. 5. - P. 151-162.

328. Wu, H. Agrobacterium-mediated stable transformation of cell suspension cultures of barley (Hordeum vulgare) / H. Wu, A.C. McCormac, M.C. Elliott, D.F. Chen // Plant Cell Tiss. Organ Cult. - 1998. - V. 54. - P. 161-171.

329. Xu, X. Fertile transgenic Indica rice plants obtained by electroporation of the seed embryo cells / X. Xu, B. Li // Plant Cell Rep. - 1994. - V. 13. - P. 237-242.

330. Xue, G.P. Selectable marker-free transgenic barley producing a high level of cellulose (1,4-0-glucanase) in developing grains / G.P. Xue, M. Patel, J.S. Jonson, D.J. Smyth, C.E. Vickers // Plant Cell Rep. - 2003. - V. 21. - P. 1088-1094.

331. Yadav N. R., Sticklen M. B. Direct and efficient plant regeneration from leaf explants of Solanum tuberosum L. cv. Bintje / N.R. Yadav, M.B. Sticklen // Plant Cell Rep. - 1995. - V. 14. - №. 10. - P. 645-647.

332. Yasmin, S. Regeneration and establishment of potato plantlets through callus formation with BAP and NAA / S. Yasmin, K.M. Nasiruddin, R. Begum, S.K. Talukder // Asian J. Plant Sci. - 2003. - V. 2. - №. 12. - P. 936-940.

333. Zale, J.M. Evidence for stable transformation of wheat by floral dip in Agrobacterium tumefaciens / J.M. Zale, S. Agarwal, S. Loar, C.M. Steber // Plant Cell Rep. - 2009. - V. 28. - P. 903-913.

334. Zambryski, P. Ti plasmid vector for the introduction of DNA into plant cells without alteration of their normal regeneration capacity / P. Zambryski, H. Joos, C. Genetello, J. Leemans, M.V. Montagu, J. Schell // the EMBO Journal. - 1983. V. -2(12). - P. 2143-2150.

335. Zambryski, P.C. Basic process underlying Agrobacterium-mediated DNA transfer to plant cells / P.C. Zambryski // Annu. Rev. Genet. - 1988. - V. 22. - P. 1-30.

336. Zeng, J.Z. Genetic expression in progeny of transgenic plants obtained by using pollen-tube pathway (or delivery) method and approach to the transformation mechanism / J.Z. Zeng, Y.Q. Wu, D.J. Wang, J. Zhang, Z.R. Ma, Z.Y. Zhou // Chin. Sci. Bull. - 1998. - V. 43. - P. 798-803.

337. Zhang, H.M. Transgenic rice plants produced by electroporation-mediated plasmid uptake into protoplasts / H.M. Zhang, H. Yang, E.L. Rech, T.J. Golds, A.S. Davis, B.J. Mulligan, E.C. Cocking, M.R. Davey // Plant Cell Rep. - 1988. - V. 7. - P. 379-384.

338. Zhang, Y. Expression of antisense SnRK1 protein kinase sequence causes abnormal pollen development and male sterility in transgenic barley / Y.

Zhang, P.R. Shewry, H. Jones, P. Barcelo, P.A. Lazerri, N.G. Halford // Plant J. -2001. - V. 28. - P. 431-441.

339. Zhang, Y. Expression of the gamma-zein protein of maize in seeds of transgenic barley: effects on grain composition and properties / Y. Zhang, H. Darlington, H.D. Jones, N.G. Halford, J.A. Napier, M.R. Davey, P.A. Lazerri, P.R. Shewry // Theor. Appl. Genet. - 2003. - V. 106. - P. 1139-1146.

340. Zhao, Z.Y. High throughput genetic transformation mediated by Agrobacterium tumefaciens in maize / Z.Y. Zhao, W. Gu, T. Cai, L. Tagliani, D. Hondred, D. Bond, S. Schroeder, M. Rudert, D. Pierce // Mol. Breed. - 2001. -V. 8. -P. 323-333.

341. Ziauddin, A. Long-term callus cultures of diploid barley (Hordeum vulgare L.) II. Effect of auxins on chromosomal status of cultures and regeneration of plants / A. Ziauddin, K.J. Kasha // Euphytica. - 1990. - V. 48. - P. 279-286.

342. Zupan, J.R. Transfer of T-DNA from Agrobacterium to the plant cell / J.R. Zupan, P. Zambryski // Plant Physiol.- 1995. - V. 107. - P. 1041-1047.

343. Zupan, J. The transfer of DNA from Agrobacterium tumefaciens into plants: a feast of fundamental insights / J. Zupan, T.R. Muth, O. Draper, P. Zambryski // Plant J. - 2000. - V. 23. - P. 11-28.