Получение рекомбинантных белков P17, P54 и CD2v вируса африканской чумы свиней в клетках млекопитающих тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.06, кандидат наук Мима, Ксения Александровна
- Специальность ВАК РФ03.01.06
- Количество страниц 134
Оглавление диссертации кандидат наук Мима, Ксения Александровна
Оглавление
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Общие сведения о вирусе АЧС
1.2 Строение и структура вириона вируса АЧС
1.3 Структурные белки вируса АЧС
1.4 Генетическая вариабельность
1.5 Механизмы репродукции вируса АЧС
1.5.1 Репликация в клетке
1.5.2 Механизм распространения вируса АЧС у свиней
1.5.3 Репликация вируса АЧС у клещей
1.6 Механизмы формирования иммунного ответа
1.7 Лабораторные методы диагностики АЧС
1.8 Методы и системы получения рекомбинантных белков
1.9 Заключение по обзору литературы
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и оборудование
2.1.1 Вирусы
2.1.2 Клеточные линии
2.1.3 Сыворотки и иммуноглобулины
2.1.4 Питательные среды и растворы для культивирования
2.1.5 Плазмиды и бактериальные штаммы
2.1.6 Коммерческие наборы
2.1.7 Белки и ферменты
2.1.8 Кислоты и основания
2.1.9 Хромогены и красители
2.1.10 Соли
2.1.11 Реактивы
2.1.12 Буферы
2.1.13 Растворители
2.1.14 Хроматографические сорбенты и гелеобразующие среды
2.1.15 Лабораторное оборудование
2.2 Методы исследований
2.2.1 Выделение ДНК
2.2.2 Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
2.2.3 Электрофорез нуклеиновых кислот и анализ ДНК-продуктов
2.2.4 Выделение и очистка нуклеиновых кислот из агарозного геля
2.2.5 Лигирование
2.2.6 Электропарация, трансформация и трансфекция клеток
2.2.7 Трансфекция клеточных линий
2.2.8 Выделение плазмиды и рестрикционный анализ
2.2.9 Нуклеотидное секвенирование
2.2.10 Приготовление компетентных бактериальных клеток
2.2.11 Поддержание перевиваемых клеточных линий
2.2.12 Фиксация клеток и окрашивание ядер эукариотических клеток
2.2.13 Получение специфического и контрольного антигена
2.2.14 Электрофорез белков и иммуноблотинг
2.2.15 Иммуноферментный анализ (ИФА)
2.2.16 Реакция непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ)
2.2.17 Иммунопероксидазный тест (ИПТ)
2.2.18 Индукция продуцентов рекомбинантных белков
2.2.19 Бактериологические методы
2.2.20 Программное обеспечение
2.2.21 Статистическая обработка результатов исследований
3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1 Биоинформатический анализ белков вируса АЧС
3.1.1 Анализ вариабельности белков вируса АЧС
3.1.2 Анализ гликозилирования белков вируса АЧС
3.1.3 Анализ гидрофильности белков вируса АЧС
3.2 Создание библиотеки генов вируса АЧС
3.2.1 Подбор праймеров
3.2.2 Оптимизация условий амплификации
3.2.3 Клонирование полноразмерных копий генов в клонировочный
вектор
3.3 Клонирование полноразмерных копий генов в экспрессирующие вектора pGFP-N1 и pCMV-HA-С и экспрессия в эукариотических клетках
3.4 Оценка уровня экспрессии и локализации рекомбинантных белков
р17GFP, р54GFP
3.5 Сравнение диагностической эффективности серологических тестов для диагностики АЧС
3.6 Получение культурального антигена
3.7 Использование рекомбинантных белков в иммунологических
реакциях
3.7.1 Иммуноблотинг
3.7.2 Иммуноферментный анализ
3.7.3 Иммунопероксидазный тест для выявления рекомбинантных белков в трансфецированных эукариотических клетках
3.8 Получение рекомбинантного эпитопа белка р17С вируса АЧС в Escherichia coli
3.8.1 Подбор специфических праймеров и условий амплификации фрагмента гена содержащего эпитоп р17С
3.8.2 Клонирование эпитопа белка р17С вируса АЧС в вектор рЕТ-32а(+)
3.8.3 Экспрессия эпитопа белка р17 вируса АЧС в бактериальных клетках Escherichia coli Rosetta 2 (DE3) pLysSpET32a/ASFV/p17ep/2
3.8.4 Очистка рекомбинантного эпитопа белка р17С вируса АЧС
4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ
5 ЗАКЛЮЧЕНИЕ
5.1 Выводы
6 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
8 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
9 ПРИЛОЖЕНИЯ
Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», 03.01.06 шифр ВАК
Функциональная характеристика гликопротеина СD2v вируса африканской чумы свиней, слитого с Fс фрагментом иммуноглобулина G свиньи2020 год, кандидат наук Каторкина Елена Ивановна
Характеристика рекомбинантного вируса африканской чумы свиней с делецией регулятора транскрипции A238L2020 год, кандидат наук Нефедьева Мария Владимировна
Получение стабильной клеточной линии, экспрессирующей рекомбинантный белок I329L вируса АЧС -антагонист TLR-32018 год, кандидат наук Каторкин Сергей Александрович
Анализ влияния рекомбинантных белков вируса африканской чумы свиней на его репродукцию in vitro2019 год, кандидат наук Мазлум Али
Получение и изучение свойств ДНК-конструкций, кодирующих гены потенциально протективных белков вируса африканской чумы свиней2019 год, кандидат наук Иматдинов Алмаз Рамисович
Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение рекомбинантных белков P17, P54 и CD2v вируса африканской чумы свиней в клетках млекопитающих»
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы
Вирус африканской чумы свиней (А ЧС) - крупный (200 нм) икосаэдрический ДНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Asfarviridae, роду Asfivirus [135].
Вирус АЧС является возбудителем одной из самых опасных болезней для представителей семейства Suidae. Африканская чума свиней характеризуется сильной лихорадкой, слабостью, кровоизлияниями внутренних органов, кожи ушных раковин, подгрудка, живота, пятачка и конечностей. Высоковирулентные штаммы вируса вызывают смертность, близкую к 100 % [5, 4, 2].
Средства специфической профилактики при АЧС не разработаны. Во многом это объясняется биологическими свойствами вируса. Полевые штаммы вируса АЧС обычно являются гетерогенными популяциями, различающимися по вирулентности, гемадсорбирующим, антигенным свойствам, что свидетельствует о его многотиповой вариабельности [48, 109]. Всё это обусловливает трудность борьбы с АЧС и необходимость совершенствования противоэпизоотических мероприятий на основе новейших научных достижений [2].
Степень разработанности проблемы
Значительный прогресс в области изучения антигенной вариабельности вируса АЧС был достигнут с использованием методов генной инженерии и молекулярной биологии [49, 123, 150, 171, 184, 192, 199, 224]. Применение делеционных вариантов вируса с дефектными копиями отдельных генов позволило охарактеризовать их функции. На основе технологий рекомбинантных ДНК разработаны различные системы экспрессии вирусных генов в клетках Е. соИ, бакуловирусах, растениях и дрожжах [12, 13, 87, 264].
Получение рекомбинантных белков вируса АЧС исключает использование живого вируса и работу с инфицированными животными, что позволяет получить высокоочищенные вирусные белки в препаративных количествах.
В настоящее время известно о существовании более 150 белков вируса АЧС, многие из которых играют важную роль в формировании иммунного ответа. Однако роль многих вирусных белков в патогенезе АЧС остается до конца не выясненной. Лимитирующим фактором в работе с рекомбинантными белками вируса АЧС, полученных в гетерологичных системах экспрессии (бактерии, растения, дрожжи и др.), является несоответствие пострансляционных изменений вирусных белков клетках хозяина и, как следствие, различия в функциональном взаимодействии белков. Получение и изучение биологических свойств аутентичных рекомбинантных вирусных белков позволит лучше раскрыть механизмы иммунного ответа и взаимодействия вируса с клеткой хозяина, а также разработать высокоспецифичные диагностические средства нового поколения, что определяет актуальность настоящей работы.
Цель и задачи исследования
Целью исследований являлось конструирование эукариотической системы экспрессии рекомбинантных белков вируса африканской чумы свиней на основе клеток млекопитающих и характеристика свойств полученных рекомбинантных белков.
Для выполнения поставленной цели нам необходимо было выполнить следующие задачи:
Провести биоинформатический анализ основных структурных белков р17, р54 и СD2v вируса АЧС.
Получить библиотеку полноразмерных генов Б117Ь (р17), Е183Ь (р54) и ЕР402Я (СD2v) вируса африканской чумы свиней в клонировочном векторе pGEM-Т-еаБу.
Получить рекомбинантные конструкции, экспрессирующие белки р17, р54 и СЭ2у вируса АЧС в составе векторов под контролем цитомегаловирусного промотера.Оценить клеточную локализацию и уровень экспрессии рекомбинантных белков р17, р54 и CD2v вируса АЧС в трансфецированных линиях
клеток COS-1 и HEK-293T/17.
Оценить возможность использования полученных рекомбинантных белков в иммунологических реакциях.
Получить растворимый рекомбинантный эпитоп белка р17 вируса АЧС в клетках E. coli.
Научная новизна работы
Впервые в Российской Федерации подобраны праймеры для амплификации и клонирования полноразмерных генов, кодирующих иммунодоминантные белки р17, р54, CD2v отечественного штамма вируса АЧС.
Впервые получена библиотека генов вируса АЧС штамма «Волгоград-14с» (генотип II, сероиммунотип 8), представляющая собой рекомбинантные плазмиды, несущие нуклеотидные последовательности, кодирующие иммунодоминантные белки р17, р54, CD2v.
Впервые в Российской Федерации получены рекомбинантные плазмиды экспрессирующие рекомбинантные белки р17, р54 и CD2v вируса АЧС в клетках COS-1 и НЕК-293Т/17.
Получен прокариотический продуцент рекомбинантного эпитопа протеина р17 вируса АЧС.
Показана возможность использования рекомбинантных белков р17, р54 и СD2v вируса АЧС в иммунологических реакциях.
Научная новизна подтверждена патентами № 2571855 от 20.12.2016 г. и № 2571858 от 20.12.2015 г.
Теоретическая и практическая значимость исследования
1. В составе плазмид pUC 19 Vector (NEB, США) и pGEM-T-easy (Promega, USA) получена библиотека генов D117L (р17), E183L (р54) и EP402R ^D2v) вируса АЧС штамм «Волгоград-14с».
2. В составе эукариотических экспрессирующих векторов pEGFP-N1 (Clontech, США) и pCMV-HA-C (Clontech, США) получены полноразмерные копии генов
D117L (р17), E183L (р54) и EP402R (CD2v).
3. Получен прокариотический продуцент рекомбинантного эпитопа белка р17 вируса АЧС.
На заседании ученого совета 29.11.2016 года утвержден протокол комиссионных испытаний соответствия паспортным данным клона- продуцента рекомбинантного эпитопа белка р17 (E. coli Rosetta 2 (DE3) pLysS pET32a/ASFV/p17ep/2), который депонирован в музее бактериальных штаммов и микоплазм III-IV групп патогенности ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии под инвентарным номером 740.
Методология и методы исследования
Методология проведенных исследований включает стандартные процедуры с использованием различных материалов. В работе использовали биоинформатические методы (анализ вариабельности, определение уровня гликозилирования, анализ гидрофильности (растворимости), анализ наличия трансмембранных доменов); молекулярно- биологические (ПЦР, секвенирование, клонирование, экспрессия); вирусологические (поддержание клеточных линий, вирусвыделение, культивирование вируса), физико-химические (составление растворов заданной молярности и оценка концентрации различных веществ), серологические (ИФА, РПИФ, ИПТ, ИБ МЭБ), а также световую и флуоресцентную микроскопии.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту
1. Библиотека генов D117L (р17), E183L (р54) и EP402R (CD2v) вируса АЧС штамм «Волгоград-14с» может использоваться в качестве источников нуклеотидных последовательностей генов вируса АЧС для генно-инженерных манипуляций, разработки диагностикумов и изучения свойств белков вируса АЧС.
2. Рекомбинантные белки р17, р54 и CD2v вируса АЧС экспрессируются в перевиваемых линиях клеток млекопитающих COS-1 и НЕК-293Т/17.
3. Продуцент E. coli Rosetta 2 (DE3) pLysS pET32a/ASFV/p17ep/2,
экспрессирующий рекомбинантный эпитоп белка р17 вируса АЧС, подходит для наработки антигена с целью использования в иммунологических реакциях.
Личный вклад соискателя
Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно в лаборатории Молекулярной вирусологии ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии.
Автор выражает искреннюю благодарность сотрудникам лабораторий: Молекулярной вирусологии (к.б.н. И.А. Титов, к.б.н. Бурмакина Г.С.). Автор выражает признательность сотруднику ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» И.Р. Иматдинову и сотруднику ОАО МБЦ «Генериум» С.А. Каторкину.
Работа выполнена при поддержке:
Фонда губернатора Владимирской области в рамках проекта «Конструирование эукариотической системы экспрессии генов вируса африканской чумы свиней»; Фонда Содействия Предприятиям в научно-технической сфере СТАРТ-2013 (Н5-Биотехнология) в рамках проекта 12075/22832 «Биоинформатический анализ генома вируса африканской чумы свиней (АЧС) и разработка рекомбинантных векторов для экспрессии вирусных белков» 2013-2014 гг; Совета по грантам Президента Российской Федерации для государственной поддержки молодых российских ученых и по государственной поддержки ведущих научных школ Российской Федерации в рамках проектов (МК-1843.2013) «Определение генетических маркеров серологического плюралитета вируса африканской чумы свиней» 2013-2014 гг. и (МК-60875.2015). «Генетические маркеры видовой специфичности вируса африканской чумы свиней» 2015-2017 гг.
Степень достоверности и апробации результатов
Достоверность всех экспериментальных показателей подтверждена статистическими критериями и комиссионными испытаниями. Результаты исследований по теме диссертации доложены и обсуждены на заседаниях Ученого совета ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии (2012-2016 гг.), Молодежной научной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и
ветеринарии» (г. Москва 2014, 2016 гг.); IV Международной научно-практическая конференция «Молодежь и наука XXI века» (г. Ульяновск, 2014), X Международном конгрессе «Epizone» (г. Монпелье, Франция, 2015 г.).
Соответствие диссертации паспорту научной специальности
В соответствии с формулой специальности 03.01.06 - биотехнология (в том числе бионанотехнологии), охватывающей генетические, селекционные и иммунологические исследования в прикладной вирусологии, микробиологии и цитологии, изучение и разработку технологических режимов выращивания микроорганизмов-продуцентов, культур тканей и клеток растений и животных для получения биомассы, продуктов метаболизма, направленного биосинтеза биологически активных соединений и других продуктов, изучение их состава и методов анализа, технологии рекомбинантных ДНК, биотехнологию животных клеток. В диссертационной работе Мима К.А. отражены результаты исследований, касающиеся конструирования рекомбинантных плазмид под контролем цитомегаловирусного промотора, кодирующих гены вируса АЧС и экспрессирующих рекомбинантные белки в перевиваемых линиях клеток млекопитающих и клетках Е.свИ; определения динамики экспрессии рекомбинантных белков вируса АЧС в различных линиях клеток; анализа локализации рекомбинантных белков и кинетики их накопления; получения бактериальных продуцентов белков, хроматографической очистке и возможности использования рекомбинантных белков в иммунологических реакциях.
Тема и результаты научных исследований соответствуют пунктам 1, 3, 9 и 11 паспорта специальности, подтверждаются результатами апробации работы, ее научной новизной и практической значимостью.
Полнота изложения материалов диссертации в работах, опубликованных соискателем.
В 12 опубликованных научных работах изложены основные результаты исследований: приведены данные по биоинформатическому анализу изолятов
вируса АЧС, получению библиотеки генов отечественного штамма вируса АЧС, конструированию рекомбинантных плазмид со встройками, кодирующими полноразмерные гены вируса АЧС, экспрессии рекомбинантных белков вируса АЧС, оценке использования рекомбинантных белков в иммунологических реакциях, сравнению серологических методов диагностики АЧС.
Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 134 страницах и включает: введение, обзор литературы, материалы, методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список сокращений, список использованной литературы, включающий 267, из которых 242- иностранные. Диссертация иллюстрирована 22 рисунками и 6 таблицами. В приложении представлены документы, подтверждающие достоверность результатов работы, ее научную и практическую значимость.
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1 Общие сведения о вирусе АЧС
Африканская чума свиней является контагиозной, в большинстве случаев, смертельной болезнью домашних и диких свиней, вызванной вирусом африканской чумы свиней (ВАЧС). Данный вирус является единственным членом семейства Asfarviridae [135].
К АЧС восприимчивы представители члены семейства Suidae [215]. Также вирус АЧС является единственным известным ДНК-содержащим арбовирусом, который может размножаться в клетках млекопитающих и членистоногих [81, 165, 215].
К вирусу АЧС восприимчивы домашние и дикие свиньи всех пород и возрастов. В Африке существуют три представителя дикой фауны семейства Suidae восприимчивых к АЧС, это бородавочники (Phacochoerus SPP), кустарниковые свиньи (Potamochoerus porcus) и гигантские лесные свиньи (Hylochoerus mienertzhageni) [53].
Африканский бородавочник является одним из видов диких свиней, контактирующих с клещами рода Ornithodoros, которые также являются вектором переноса вируса АЧС и одним из резервуаров вируса [162, 127].
Обычно бородавочники обитают в редколесной саванне и для опороса и выращивания молодняка они используют норы, которые были раскопаны муравьедами (Orycteropus afer). Так, как опорос у них происходит в конце весны и до начала лета, за это время, резко увеличивается возможность заражения молодых бородавочников вирусом АЧС от клещей, занимающих их норы и питающимися ими [90, 197, 215]. A. Pini с соавт. (1975) доказали циркуляцию вируса АЧС между дикими, домашними свиньями (Sus strofa domestica) и клещами рода Ornithodoros [197].
Кустарниковые свиньи, хотя более широко распространены, но играют менее важную роль в эпидемиологии АЧС, чем бородавочники [160, 215]. У зараженных
кустарниковых свиней обычно не проявляются клинические признаки заболевания, но они способны передавать вирус АЧС при непосредственном контакте с домашними свиньями [43, 72]. Тогда как для бородавочников характерна передача вируса АЧС только через укусы клещей [162].
Гигантские кустарниковые свиньи обитают в районах с густыми лесами, где домашние свиньи обычно не встречаются и поэтому они не играют важной роли в передаче или распространении заболевания [72, 162].
Европейские дикие кабаны и дикие свиньи восприимчивы к вирусу АЧС и демонстрируют аналогичные домашним свиньям клинические признаки болезни [90, 186, 210].
Jori и Bastos соавт. (2009) предполагают, что несмотря на высокую чувствительность диких кабанов к вирусу АЧС, возбудитель не может циркулировать в их популяции в течение длительного периода времени при отсутствии других факторов, таких как инфицированные домашние свиньи [162]. Это было подтверждено в исследовании, проведенном в Испании при мониторинге АЧС в популяции кабанов [180].
Вирус АЧС был выделен из мягких клещей рода О. moubata в Африке и О. erraticus на Пиренейском полуострове и считается, что большинство клещей рода Ornithodoros могут выступать в качестве природного резервуара вируса [128]. Вирус АЧС может сохраняться и размножаться в клещах О. moubata, а так же иногда может вызвать их гибель [127, 166].
Первые вспышки АЧС были зарегистрированы 2007 г. в 58 районах Грузии из 61 [56, 209]. В августе 2007 года АЧС была подтверждена в Армении, в ноябре 2007 года- в Нагорно-Карабахском районе, граничащем с ней.
В ноябре 2007 г. было подтверждено наличие инфекции у кабана в Чеченской Республике. В январе и декабре 2008 года АЧС была подтверждена в Азербайджане и на Востоке Грузии, а в январе 2009 г. АЧС была диагностирована у кабанов на Северо-Западе Ирана [126].
В январе и декабре 2008 года АЧС была подтверждена в Азербайджане и на Востоке Грузии, а в январе 2009 АЧС был диагностирована у кабанов на Северо-Западе Ирана [126].
В 2008 г. в южной части России (Краснодарский край, Ставропольский край, Чеченская республика) было зарегистрировано более 60 вспышек АЧС. Так же в 2008 г. АЧС впервые была выявлена в Оренбургской области. Далее в 2009 г. вирус АЧС был занесен на территорию Ленинградской области, откуда распространился по всей центральной части России. В настоящее время африканская чума свиней широко распространена в различных регионах России [15, 37].
Генетическая характеристика изолятов вируса АЧС, выделенных от инфицированных животных на Северном Кавказе Российской Федерации является одинаковой и поэтому предполагают, что все они произошли в результате однократного заноса с территории Грузии. Вирус АЧС циркулирующий на территории Российской Федерации по результатам филогенетического анализа отнесен ко генотипу II, что объединяет его с изолятами, встречающимися в Мозамбике и на Мадагаскаре [56, 221].
Первые случаи обнаружения АЧС в Европе были выявлены в 2014 году в Странах Балтии и Польше. В январе 2014 г. вирус был обнаружен в Литве, в феврале в Польше, в июле в Латвии. В Эстонии о первом случае заболевания официально сообщили в сентябре того же года. Быстрое распространение заболевания на территориях указанных выше стран, объясняется высокой плотностью поголовья диких кабанов, что осложняет контроль и искоренение АЧС.
В настоящее время эпизоотическая ситуация остается напряженной, с разрушительными последствиями для отрасли свиноводства в Российской Федерации. Существует значительный риск распространения болезни в других европейских странах.
1.2 Строение и структура вириона вируса АЧС
Вирус африканской чумы свиней является крупным оболочечным вирусом
икосаэдрической форм размером около 200 нм. Структура вириона образована различными концентрическими слоями: ядро, ядерная оболочка, внутренняя мембрана капсида и, внеклеточные вирионы имеют внешняю оболочку [99, 137].
Вирионы имеют сложную многоуровневую структуру, состоящую из нуклеоида или ядра размером 30 нм (образует нуклеопротеидную систему, состоящую из вирусного генома и различных ферментов, необходимых для репликации), ядерной оболочки размером 80 нм, первого липидного слоя (внутренняя оболочка) размером 170-190 нм, который составляет икосаэдрический капсид. Внеклеточные вирионы получают наружную мембрану в процессе почкования через мембрану клеточной плазмы [55].
Геном вируса АЧС представлен двух цепочечной молекулой ДНК и варьирует по длине от 170 до 190 т.п.о., и содержит концевые тандемные повторы. Различия в длине генома между изолятами вируса, объясняются вставками или делециями последовательностей в левом и правом концах генома [62].
Вирус АЧС содержит от 160 до 175 открытых рамок считывания (ОРС), в зависимости от изолята. Из них 110 рамок считывания представлены одной копией у всех изолятов вируса. Другие ОРС принадлежат шести различным мультигенным семействам (MGF100, MGF110, MGF300, MGF360, MGF530 и Р22), расположенных в правом и левом концах генома [39].
Организация этих мультигенных семейств предполагает, что они эволюционировали путем процесса дупликации и расхождения последовательности. Существование нескольких копий генов MGF, может давать селективное преимущество вирусу, и представляет собой механизм уклонения вируса от иммунного ответа хозяина.
Из всех консервативных ОРС кодируемых геномом АЧС, известны функции 39 белков. Мотивы, гомологичные с другими белками содержат 42 вирусных белка, и 28 белков имеют неизвестные функции. До сих пор, 17 ОРС были идентифицированы как кодирующие структурные белки вируса АЧС.
Так как, вирус АЧС реплицируется в цитоплазме, гены ферментов и факторов, необходимых для транскрипции и репликации ДНК также включены в геном вируса. Установлен целый ряд вирусных белков, которые не являются необходимым для репликации вируса и участвуют в взаимодействиях с хозяином, и представляют важные факторы вирулентности и эвазии [31, 39, 49, 60, 218].
Внутреннее ядро вируса АЧС формируется нуклеоидом, и содержит вирусный геном и некоторые нуклеопротеиды: такие как ДНК-связывающий белок р10 [210, 231]. Также в этот слой интегрированы элементы, необходимые для начала синтеза матричной РНК (мРНК): белки, участвующие в транскрипции, поли (А)-полимеразы и ферменты упаковки [218].
Белковая ядерная оболочка представляет собой толстый слой, который окружает ядро и в основном состоит из полипротеинов РР220 и РР62. Оба полипротеина последовательно расщепляются вирусной протеазой (кодируется геном S273R) на белки р150, р37, р14, р34 и р35, р15 соответственно, которые вместе образуют 32 % от общей массы вириона (16, 60, 84, 215].
Внутренняя оболочка примыкает к ядерной оболочке и под электронной микроскопией выглядит как единый липидный слой [218]. Эта мембрана является производным от эндоплазматического ретикулума (ЭР) и вирусных белков р54, р17 и р12, которые являются составляющими структуры капсида [61, 66, 218].
Капсид является внешним слоем внутриклеточных вирионов, и состоит примерно из 2000 капсомеров гексагональной формы. Белок р72 является основным белком капсомеров и составляет одну треть от общей массы вириона [137, 153].
Внешняя мембрана или внешняя оболочка внеклеточных вирусных частиц аналогична клеточной плазматической мембране. Она приобретается в процессе выхода вируса АЧС из клетки [99, 137].
Дополнительно, оболочка вируса содержит вирусный белок р12, который был идентифицирован как необходимый для прикрепления вируса к клетке [41].
Другой белок внешней мембраны является вирусным гомологом клеточного белка CD2 (CD2v), который опосредует гемоадсорбцию инфицированных вирусом АЧС клеток [45, 67].
1.3 Структурные белки вируса АЧС
Структурные белки вириона АЧС кодирует семнадцать генов. Эти белки располагаются в многослойной вирусной частице [239]. Для некоторых из этих белков, путем индуцирования генов удалость выяснить их роль в морфогенезе вируса.
Под действием протеазы (S273R), полипротеин рр220 (CP2475L) расщепляется с образованием зрелых вирусных белков р150, р37, р14, р34, а полипротеин РР60 (CP530R) расщепляется с образованием белков р35 и р15 [84, 207, 227]. Эти белки образуют основу оболочки ядра вириона.
Мажорный белок капсида вириона р72, кодируется геном B646L и составляет до 32 % от общей массы вириона [140]. Экспрессия этого белка происходит на поздних стадиях инфекции. Он также участвует в прикреплении вируса к клетке и является основным иммуногенным белком [28, 63].
В 1993 году Zsak с соавторами определили, что белок р72 содержит высоко консервативный нейтрализующий эпитоп и является конформационным [262]. Правильная сборка белка р72 в вирионы требует вирусного шаперона B602L. Белок B602L предотвращает димеризацию белка р72 пока он не будет доставлен к месту сбора капсида. После сбора капсида белок B602L диссоциирует [39, 108].
Экспрессия гена B438L, кодирующего белок р49 требуется для формирования вершины икосаэдрической капсида. Некоторые из структурных белков вириона содержат трансмембранные домены и локализованы либо на внутренней, либо на внешней мембране вириона. Расположенные во внутренней мембране включают в себя оболочечные белки р17 (D117L), р54 или j13L (E183L), ]18Ь (Б199Ь), (Н108Я) [47, 61, 104, 105, 171, 183].
Белок CD2v (EP402R), необходим для связывания эритроцитов с
инфицированными клетками и обеспечивает распространение вируса по организму с эритроцитами в кровяном русле. У внеклеточных вирионов он располагается на внешнем слое мембраны [117].
Считается, что белки р22 (KP177R) и p12 (pO61R) также локализованы на внешнем слое мембраны [73, 101]. Вирус АЧС кодирует компоненты окислительно-восстановительного пути, в том числе белки pB119L (или 9GL), pE248R и pA151R, из них белок pE248R является структурным [59, 101, 238].
Также у вируса АЧС присутствует три белка со свойствами связывания ДНК р10 (K78R), p11,6 (A104R) и p14,5 (E120R). Белок E120R присутствует на поверхности внутриклеточных вирионов и необходим для переноса вируса с вирусных фабрик к плазматической мембране [31, 68, 106, 231].
1.4 Генетическая вариабельность
Генетическая вариабельность изолятов вируса АЧС первоначально характеризуются разницей в размерах его генома и различными профилями рестрикционного анализа [260]. Высокий уровень изменчивости в основном отмечен в концевых участках генома- на 3' и на 5' конце [139, 265]. Эти два концевых региона содержат мультигенные семейства (MGF), которые у разных изолятов различаются по количеству копий [47].
Для того, чтобы провести дифференциацию изолятов вируса АЧС было проведено секвенирование и филогенетический анализ гена B646L, кодирующего основной вирусный белок vp72 [140]. На основании этих исследований все изоляты вируса АЧС были разделены на XXII генотипа. Позднее в Западной Африке был идентифицирован XXIII генотип вируса АЧС [149].
Установлено, что высокая степень гомологии была выявле между изолятами из Западной Африки, Европы и Южной Америки и поэтому все эти изоляты относены к I генотипу.
Было отмечено, что восточно- и южно-африканские изоляты вируса АЧС более разнообразны и представляют все 22 генотипа [138, 140, 179]. Чрезвычайное
высокое разнообразие изолятов в Восточной Африке может быть объяснено тем, что они в основном циркулируют в сельватическом цикле, в отличие от вирусов I генотипа, которые распространяются у домашних свиней. Это подтверждает предположение о том, что большое разнообразие вируса АЧС может быть связано с сельватическим циклом распространения вируса [123].
Дополнительные генетические маркеры были успешно использованы для дифференциации изолятов АЧС. Например, ген B602L, расположенный в центральной вариабельной области генома (CVR, кодирующей J9L белок), ген CP204L (кодирующий фосфопротеин р32), и ген E183L (гликопротеин р54) были использованы для увеличения разрешающей способности методов генотипирования близкородственных изолятов [81,180, 212].
1.5 Механизмы репродукции вируса АЧС 1.5.1 Репликация в клетке
Репликация вируса АЧС преимущественно проходит в цитоплазме инфицированной клетки, в вирусных фабриках и требует вирусных ферментов, продуцируемых сразу после внедрения вируса в клетку. В связи с этим, и из-за сходства генома, вирус АЧС был включен в крупные цитоплазматические ДНК-вирусы [63]. Тем не менее, начальная фаза репликации вируса в ядре клетки также была описана в первые часы после инфицирования [214]. В результате заражения вирусом АЧС, на первой стадии репликации разрушается организация ядра клетки, путем дезорганизации ядерной оболочки и ядрышек [122]. Нуклеопорин р62-маркер ядерной оболочки и В-23- маркер ядрышка, находятся в цитоплазме инфицированных вирусом АЧС клеток, на поздних стадиях инфекции и, как предполагается, выполняют важную роль в нарушении ядерных функций.
Похожие диссертационные работы по специальности «Биотехнология (в том числе бионанотехнологии)», 03.01.06 шифр ВАК
Группоспецифические вируснейтрализующие рекомбинантные антитела против иммунодоминантного белка р35 ортопоксвирусов: получение и характеризация2019 год, кандидат наук Хлусевич Яна Александровна
Конструирование продуцентов рекомбинантных белков Р72, Р30 и Р54 вируса африканской чумы свиней2013 год, кандидат биологических наук Казакова, Анна Сергеевна
ДНК-вакцинные конструкций, кодирующие искусственные антигены вируса гриппа2021 год, кандидат наук Старостина Екатерина Владимировна
Протективное химерное антитело против вируса клещевого энцефалита: получение и характеризация2019 год, кандидат наук Матвеев Андрей Леонидович
Анализ структуры генов изолятов вируса африканской чумы свиней, выделенных на территории Российской Федерации2014 год, кандидат наук Варенцова, Алиса Алексеевна
Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мима, Ксения Александровна, 2017 год
8 СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Африканская чума свиней в Европе [электронный рессурс] / АгроХХ1 -Российский агропромышленный портал // животноводство. - Режим доступа: https://www.agroxxi.ru/zhivotnovodstvo/novosti/afrikanskaja-chuma-svinei-v-evrope.html
2. Бакулов, И.А. Проблемы современной эволюции африканской чумы свиней / И.А. Бакулов, В.В. Макаров// Вестн. с.-х. науки. - 1990.- № 3. - С.46-55.
3. Бейли, Н. Статистические методы в биологии / Н. Бейли. - М. : Изд-во иностр. лит-ры, 1962.
4. Болоцкий, И.А. Африканская чума свиней / И.А. Болоцкий, А.П. Васильев,
B.И. Семенцов. - Свиноферма. - 2008.- № 9. - С. 43-46.
5. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин и др. - М.: ВНИТИБП, 1998. -
C.770-777.
6. Выявление вируса АЧС в продуктах, приготовленных из свинины / Д.В. Колбасов, С.Ж. Цыбанов, А.С. Малоголовкин и др. - Ветеринария. - 2011. - № 10. - С. 54-55.
7. ГОСТ 28573-90. Свиньи. Методы лабораторной диагностики африканской чумы. - Москва: Изд-во стандартов, 1991. - 10 с.
8. Гуморальные и клеточно- опосредованные механизмы иммунитета при африканской чуме свиней (обзор) / А.Д. Середа, А.С. Казакова, А.Р. Иматдинов, Д.В. Колбасов // Сельскохозяйственная биология. - 2013. - Т. 50, №6. С. 709-718.
9. Дуева, Е.В. Разработка низкомолекулярных ингибиторов репродукции переносимых клещами флавовирусов: дис. ... канд. хим. наук / Дуева Евгения Владимировна; ФГБНУ ИПВЭ им. М.П. Чумакова. - Москва, 2016. - 130с.
10. Иммунобиологические свойства аттенуированных вариантов вируса африканской чумы свиней, выделенного в Российской Федерации / В.И. Балышева, Е.Ю. Прудникова, Т.В. Гальнбек, В.М. Балышев // Российская сельскохозяйственная наука. - 2015. - №1-2. - С. 65-69.
11. Использование рекомбинантного белка р30 вируса африканской чумы свиней в непрямом варианте иммуноферментного анализа / М.Р. Якупов, А.С. Яковлева, А.В. Каньшина и др. // Ветеринария. - 2015. - №8. - С. 58 - 62.
12. Казакова, А.С. Конструирование продуцентов рекомбинантных белков Р72, Р30, и Р54 вируса африканской чумы свиней: дис. ... канд. биол. наук / Казакова Анна Сергеевна; ГНУ ВНИИВВиМ Россельхозакадемии. - Покров, 2013. - 135с.
13. Копытов, В.О. Клонирование и экспрессия генов структурных белков Р30 и Р72 вируса африканской чумы свиней: дис. ... канд. биол. Наук / В.О. Копытов; ГНУ ВНИИВВиМ Росслельхозакадемии. - Покров, 2004. - 137с.
14. Маниатис, Т. (1984). Методы генной инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э.Фрич, Дж. Сэмбрук // Москва: Мир, 1984.
15. О резком обострении эпизоотической ситуации по АЧС в странах Балтии и Польши [электронный рессурс] / Россельхознадзор // эпизоотическая ситуация АЧС. - Режим доступа: http://www.fsvps.ru/fsvps/asf/news/18098.html
16. Середа, А.Д. Белки вируса африканской чумы свиней [Электронный ресурс] / А.Д. Середа, Д.В. Колбасов // Научный журнал КубГАУ. - 2012. - Т. 3, №77. -Режим доступа: http://ej.kubagro.ru/2012/03/pdf/35.pdf
17. Середа, А.Д. Моделирование IN VITRO защитных иммунных механизмов при африканской чуме / А.Д. Середа // Сельскохозяйственная биология. - 2013. -№4. С. 59-64.
18. Середа, А.Д. Серологические и физико-химические свойства ГП 110-140 вируса африканской чумы свиней / А.Д. Середа, Е.Г. Анохина, Л.Г. Фугина // Ветеринария. - 1993. - № 1. - С. 26-28.
19. Середа, А.Д. Функциональная роль гликозилирования вирусных компонентов / А.Д. Середа, А.А. Пиря. - Вопросы вмрусологии - 1992. - Т. 37, №56. - С. 267-270.
20. Серологическая диагностика методом иммуноблоттинга при хронической и бессимптомной формах африканской чумы свиней / О.А. Дубровская, А.С.
Казакова, А.П. Васильев и др. // Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. - 2015. - №2. - С. 78 - 79.
21. Тест-система для экспресс-диагностики африканской чумы свиней методом иммуноблоттинга с использованием рекомбинантного белка р30 / А.С. Казакова, А.Д. Середа, О.М. Стрижакова и др. // Ветеринария. - 2014. - №9. - С. 52 - 56.
22. Транзиентная экспрессия [электронный рессурс] // База знаний по биологии человека. Режим доступа: http://humbio.ru/humbio/tarantul_sl/00001590.htm
23. Эпизоотологический мониторинг африканской чумы свинсй в Республике Абхазия / В.И. Герасимов, С.А. Кукушкин, Э.А. Аншба и др. // Ветеринарный врач. - ФЦТРБ ВПИВ И.- Казань, 2008. - №5,- С.21-25.
24. Эффективность дезинфицирующих преператов против вируса африканской чумы свиней в почве и воде / В.М. Балышев, В.И. Балышева, А.Д. Середа и др. // Ветеринария. - 2015. - №12. - С. 35-38.
25. Якупов, М.Р. Использование рекомбинантных белков р30, рK205R и рB602L в серодиагностике африканской чумы свиней / М.Р. Якупов, А.С. Яковлева, А.В. Щербаков // Ветеринария сегодня. - 2015. - Т. 3, №14. - С. 37 - 42.
26. A novel TLR3 inhibitor encoded by African swine fever virus (ASFV) / V.L. de Oliveira, S.C. Almeida, H.R. Soares et al. // Arch. Virol. - 2011. - Vol. 156, №4. - Р. 597609.
27. A pathological study of the perisinusoidal unit of the liver in acute African swine fever / J.C. Gomez-Villamandos, J. Hervas, A. Mendez et al. // Res. Vet. Sci. - 1995a. -Vol. 59, №2. - Р. 146-151.
28. A reliable enzyme linked immunosorbent assay for African swine fever using the major structural protein as antigenic reagent / E. Tabares, M. Fernandez, E. Salvador-Temprano et al. // Arch. Virol. - 1981. - Vol. 70, №3. - P. 297-300.
29. A simple plasmid-based transient gene expression method using High Five cells / X. Shen, A.K. Pitol, V. Bachmann et al. // J. Biotechnol. - 2015. - Vol. 216. - Р. 67-75.
30. A solid-phase enzyme linked immunosorbent assay using monoclonal antibodies,
for the detection of African swine fever virus antigens and antibodies / M.I. Vidal, M. Stiene, J. Henkel et al. // J. Virol. Methods. - 1997. - Vol. 66, №2. - P. 211-218.
31. A structural DNA binding protein of African swine fever virus with similarity to bacterial histone-like proteins / M.V. Borca, P.M. Irusta, G.F. Kutish et al. // Arch. Virol.
- 1996. - Vol. 141, №2. - Р. 301-313
32. A ubiquitin conjugating enzyme encoded by African swine fever virus / P.M. Hingamp, J.E. Arnold, R.J. Mayer, L.K. Dixon // The EMBO journal. - 1992. - Vol. 11, №1. - Р. 361-366.
33. A viral mechanism for inhibition of the cellular phosphatase calcineurin / J.E. Miskin, C.C. Abrams, L.C. Goatley, L.K. Dixon // Science. - 1998. - Vol. 281, №5376. -Р. 562-565.
34. Actin-binding protein-1 interacts with WASp-interacting protein to regulate growth factor-induced dorsal ruffle formation / C.L. Cortesio, B.J. Perrin, D.A. Bennin, A.Huttenlocher // Mol. Biol. Cell. - 2010. - Vol. 21, №1. - P. 186-197.
35. Adipose tissue gene expression of factors related to lipid processing in obesity / M. Clemente-Postigo, M.I. Queipo-Ortuno, D. Fernandez-Garcia et al. // PLoS ONE. - 2011.
- Vol. 6, №9. - р. 24783.
36. African Swine Fever [Электронный ресурс] // AHP Disease Manual / G. Garner, P. Saville, & A. Fediavsky (Eds.); Food & Agriculture Organisation of the United Nations. Режим доступа: http: //lrd. spc. int/ext/Disease_Manual_Final/a 120_african_swine_fever.html.
37. African swine fever in the North Caucasus region and the Russian Federation in years 2007-2012 / A. Gogin , V. Gerasimov, A. Malogolovkin, D. Kolbasov // Virus Res.
- 2013. - Vol. 173, №1. - Р. 198-203.
38. African swine fever in the Russian Federation: spatio-temporal analysis and epidemiological overview / A.S. Oganesyan, O.N. Petrova, F.I. Korennoy et al. // Virus. Res. - 2003. - Vol. 173, №1. - Р. 204-211.
39. African Swine Fever Virus / L.K. Dixon, C.C. Abrams, G. Bowick et al. // T.M.
Sobrino (editor), Animal Viruses: Molecular Biology/ T.M. Sobrino (editor).- London: Caister Academic Press, 2008.- P.457-521.
40. African Swine Fever virus / R.C. Wardley, C. de M. Andrade, D.N. Black et al. // Arch. Virol. - 1983. - Vol. 76, №2. - P. 73-90.
41. African swine fever virus attachment protein / A.L. Carrascosa, I. Sastre, E. Vinuela // J. Virol. - 1991. - Vol. 65, №5. - P. 2283-2289.
42. African swine fever virus causes microtubule-dependent dispersal of the trans-golgi network and slows delivery of membrane protein to the plasma membrane / C.L. Netherton, M.C. McCrossan, M. Denyer et al. // J. Virol. - 2006. - Vol. 80, №221. - P. 11385-11392.
43. African swine fever virus controls the host transcription and cellular machinery of protein synthesis / E.G. Sanchez, A. Quintas, M. Nogal et al. // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 58-75.
44. African swine fever virus dUTPase is a highly specific enzyme required for efficient replication in swine macrophages / M. Oliveros, R. Garcia-Escudero, A. Alejo et al. // J. Virol. - 1999. - Vol. 73, №11. - P. 8934-8943.
45. African swine fever virus encodes a CD2 homolog responsible for the adhesion of erythrocytes to infected cells / J.M. Rodriguez, R.J. Yanez, F. Almazan et al. // J. Virol. -1993. - Vol. 67, №9. - P. 5312-5320.
46. African swine fever virus gene A179L, a viral homologue of bcl-2, protects cells from programmed cell death / A. Brun, C. Rivas , M. Esteban et al. // Virology. - 1996. - Vol. 225, №1. - P. 227-230.
47. African swine fever virus gene j13L encodes a 25-27 kDa virion protein with variable numbers of amino acid repeats / H. Sun , S.C. Jacobs, G.L. Smith et al. // J. Gen. Virol. - 1995. - Vol. 76, №5. - P. 1117-1127.
48. African swine fever virus genome content and variability / L.K. Dixon, S.A. Baylis, S. Vydelingum et al. // Arch. Virol. Suppl. - 1993. - Vol. 7, - P. 185-99.
49. African swine fever virus Georgia 2007 with a deletion of virulence-associated
gene 9GL (B119L), when administered at low doses, leads to virus attenuation in swine and induces an effective protection against homologous challenge / V. O'Donnell, L.G. Holinka, P.W. Krug, D.P. Gladue // J. Virol. - 2015. - Vol. 86, №16. - P. 8556-8566.
50. African swine fever virus IAP homologue inhibits caspase activation and promotes cell survival in mammalian cells / M.L. Nogal, G. Gonzalez de Buitrago, C. Rodriguez et al. // J. Virol. - 2001. - Vol. 75, №6. - P. 2535-2543.
51. African swine fever virus infection in the argasid host, Ornithodoros porcinus porcinus / S.B. Kleiboeker, T.G. Burrage, G.A. Scoles et al. // J. Virol. - 1998. - Vol. 72, №3. - P. 1711-1724.
52. African swine fever virus infection of bone marrow: lesions and pathogenesis / J.C. Gomez-Villamandos, M.J. Bautista, L. Carrasco et al. // Vet. Pathol. - 1997b. - Vol. 34, №2. - P. 97-107.
53. African swine fever virus infection of the bushpig (Potamochoerus porcus) and its significance in the epidemiology of the disease / E.C. Anderson, G.H. Hutchings, N. Mukarati, P. J. Wilkinson // Vet. Microbiol. - 1998. - Vol. 62, №1. - P.1-15.
54. African swine fever virus is enveloped by a two-membraned collapsed cisterna derived from the endoplasmic reticulum / G. Andres, R. Garcia-Escudero, C. Simon-Mateo, E. Vinuela // J. Virol. - 1998. - Vol. 72, №11. - P. 8988-9001.
55. African Swine fever Virus is wrapped by the endoplasmic reticulum / I. Rouiller, S.M. Brookes, A.D. Hyatt et al. // J. Virol. - 1998. - Vol. 72, №3. - P. 2373-2387.
56. African swine fever virus isolate, Georgia, 2007 / R.J. Rowlands, V. Michaud, L. Heath et al. // Emerg. Infect. Dis. - 2008. - Vol. 14, №12. - P. 1870-1874.
57. African swine fever virus multigene family 360 and 530 genes affect host interferon response / C.L. Afonso, M.E. Piccone, K.M. Zaffuto et al. // J. Virol. - 2004. -Vol. 78, №4. - P. 1858-1864.
58. African swine fever virus p72 genotype IX in domestic pigs, Congo, 2009 / C. Gallardo, R. Anchuelo, V. Pelayo et al. // Emerg. Infect. Dis. - 2011. - Vol. 17, №8. - P. 1556-1558.
59. African swine fever virus pB119L protein is a flavin adenine dinucleotide-linked sulfhydryl oxidase / I. Rodriguez, M. Redrejo-Rodriguez, J.M. Rodriguez et al. // J. Virol. - 2006. - Vol. 80, №7. - P. 3157-3166.
60. African swine fever virus polyproteins pp220 and pp62 assemble into the core shell // G. Andres, A. Alejo, J. Salas, M.L. Salas // J. Virol. - 2002. - Vol. 76, №24. - P.12473-12482.
61. African swine fever virus protein p17 is essential for the progression of viral membrane precursors toward icosahedral intermediates / C. Suarez, J. Gutierrez-Berzal, G. Andres et al. // J. Virol. - 2010. - Vol. 84, №15. - P. 7484-7499.
62. African swine fever virus proteins involved in evading host defence systems / L.K. Dixon, C.C. Abrams, G. Bowick et al. // Vet. Immunol. Immunop. - 2004. - Vol. 100, №3-4. - P. 117-134.
63. African swine fever virus replication and genomics / L.K. Dixon, D.A. Chapman, C.L. Netherton, C. Upton // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 3-14.
64. African swine fever virus serodiagnosis: a general review with a focus on the analyses of African serum samples / C. Cubillos, S. Gomez-Sebastian, N. Moreno et al. // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 159-167.
65. African swine fever virus specific porcine cytotoxic T cell activity / C.L. Martins, M.J. Lawman, T. Scholl et al. // Arch. Virol. - 1993. - Vol. 129, №1-4. - P. 211-25.
66. African Swine Fever Virus structural protein p54 Is essential for the recruitment of envelope precursors to assembly sites / J.M. Rodriguez, R. Garcia-Escudero, M.L. Salas, G. Andres // J. Virol. - 2004. - Vol. 78, №8. - P. 4299-1313.
67. African swine fever virus structural protein p72 contains a conformational neutralizing epitope / M.V. Borca, P. Irusta, C. Carrillo et al. // Virology. - 1994. - Vol. 201, №2. - P. 413-418.
68. African swine fever virus structural protein pE120R is essential for virus transport from the assembly sites to the plasma membrane but not for infectivity / G. Andres, R. Garcia-Escudero, E. Vinuela, M. L. Salas, and J. M. Rodriguez // J. Virol. - 2001. - Vol.
75, №15. - P. 6758-6768.
69. African swine fever virus trans-prenyltransferase / A. Alejo, R.J. Yanez, J.M. Rodriguez et al. // J. Biol. Chem. - 1997. - Vol. 272, №14. - P.9417-23.
70. African swine fever virus: a B cell-mitogenic virus in vivo and in vitro / H. Takamatsu, M.S. Denyer, C. Oura et al. // J. Gen. Virol. - 1999. - Vol. 80, №6. - P. 14531461.
71. African Swine Fever. Chapter 2.8.1.//Manual of Diagnostic Tests and Vaccines for Terrestrial Animals / OIE. -Paris, 2012. -P. 1067 -1079).
72. African swine fever: how can global spread be prevented? / S. Costard, B. Wieland, W. de Glanville et al. // Philos. Trans. R. Soc. Lond., B, Biol. Sci. - 2009. - Vol. 364, №1530. - P. 2683-96.
73. Alcami, A. A soluble receptor for interleukin-1 beta encoded by vaccinia virus: a novel mechanism of virus modulation of the host response to infection / A. Alcami, G.L. Smith // Cell. - 1992. - Vol. 71, №1. - P. 153-167.
74. Alejo, A. The African swine fever virus prenyltransferase is an integral membrane trans-geranyl geranyl-diphosphate synthase / A. Alejo, G. Andres, M. L. Salas // J. Biol. Chem. - 1999. - Vol. 276, №25. - P.18033-18039.
75. Alejo, A. African swine fever virus proteinase is essential for core maturation and infectivity / A. Alejo, G. Andres, M. L. Salas. // J. Virol. - 2003. - Vol. 77, №10. - P.5571-5577.
76. Amino acid tandem repeats within a late viral gene define the central variable region of African swine fever virus / P.M. Irusta, M.V. Borca, G.F. Kutish et al. // Virology. - 1996. - Vol. 220, №1. - P. 20-27.
77. An African swine fever virus Bc1-2 homolog, 5-HL, suppresses apoptotic cell death / C. L. Afonso, J. G. Neilan, G. F. Kutish, D. L. Rock // J. Virol. - 1996. - Vol. 70, №7. - P. 4858 -4863.
78. An African swine fever virus gene with homology to DNA ligases / J.M. Hammond, S.M. Kerr, G.L. Smith, L.K. Dixon // Nucleic Acids Res. - 1992. - Vol. 20,
№11. - P. 2667-2671.
79. An engineered non-toxic superantigen increases cross presentation of hepatitis B virus nucleocapsids by human dendritic cells / J.D. McIntosh, K. Manning, S. Chokshi et al. // PLoS ONE. - 2014. - Vol. 9, №4. - p. 93598.
80. An immunohistochemical study of the tonsils in pigs with acute African swine fever virus infection / M. Fernandez de Marco, F.J. Salguero, M.J. Bautista et al. // Res. Vet. Sci. - 2007. - Vol. 83, №2. - P. 198-203.
81. An investigation Into natural resistance to African swine fever in domestic pigs from an endemic area in southern Africa / M.L. Penrith, G.R. Thomson, A.D. Bastos et al. // Rev. Sci. Tech. - 2004. - Vol. 23, №3. - P. 965-977.
82. An investigation into the first outbreak of African swine fever in the Republic of Mauritius / B.A. Lubisi, R.M. Dwarka, D. Meenowa, R. Jaumally // Transbound. Emerg. Dis. - 2009. - Vol. 56, №5. - P. 178-188.
83. Analysis of the complete nucleotide sequence of African swine fever virus / R.J. Yanez, J.M. Rodriguez, M.L. Nogal et al. // Virology. - 1995. - Vol. 208, №1. - P. 249278.
84. Andres, G. Assembly of African swine fever virus: role of polyprotein pp220 / G. Andres, C. Simon-Mateo, E. Vinuela // J. Virol. - 1997. - Vol. 71, №3. - P. 2331-2341.
85. Antigenic and immunogenic properties of a chimera of two immunodominant African swine fever virus proteins / M.G. Barderas, F. Rodriguez, P. Gomez-Puertas et al. // Arch. Virol. - 2001. - Vol. 146, №9. - P. 1681-1691.
86. Antigenic and immunogenic properties of a chimera of two immunodominant African swine fever virus proteins / M.G. Barderas, F. Rodriguez, P. Gomez-Puertas et al. // Arch. Virol. - 2001. - Vol. 146, №9. - P. 1681-1691.
87. Antigenic properties and diagnostic potential of African swine fever virus protein pp62 expressed in insect cells / C. Gallardo, E. Blanco, J.M. Rodriguez et al. // J. Clin. Microbiol. - 2006. - Vol. 44, №3. - P. 950-956.
88. Apoptosis in lymph nodes in acute African swine fever. / L. Carrasco, F.C. de Lara,
J. Martin de las Mulas et al. // J. Comp. Pathol. - 1996b. - Vol. 115, №4. - P. 415-428.
89. Arias, M., Sanchez-Vizcaino, J.M., 2002. African swine fever. In: Morilla, A., Yoon, K.J., Zimmerman, J.J. (Eds.), Trends in Emerging Viral Infections Of Swine. Iowa State Press, Ames, IA, pp. 119-124.
90. Arnot, L.F. Molecular monitoring of African swine fever virus using surveys targeted at adult ornithodoros ticks: a reevaluation of Mkuze game reserve, South Africa / L.F. Arnot, J.T. Du Toit, A.D. Bastos // Onderstepoort J. Vet. Res. - 2009. - Vol. 76, №4. - P. 385-392.
91. Assessment of African Swine Fever Diagnostic Techniques as a Response to the Epidemic Outbreaks in Eastern European Union Countries: How To Improve Surveillance and Control Programs / C. Gallardo, R. Nieto, A. Soler et al. // J. Clin. Microbiol. - 2015. - Vol. 53, №8. - P. 2555-2565.
92. Bacterial lipoprotein based expression vectors as tools for the characterisation of African swine fever virus (ASFV) antigens / A. Leitao, A. Malur, C. Cartaxeiro et al. // Arch. Virol. - 2000. - Vol. 145, №8. - P. 1639 -1657.
93. Bacterial lipoprotein based expression vectors as tools for the characterisation of African swine fever virus (ASFV) antigens / A. Leitao, A. Malur, C. Cartaxeiro et al // Arch. Virol. - 2000. - Vol. 145, №8. - P. 1639-57.
94. Baroudy, B.M. Incompletely base-paired flip-flop terminal loops link the two DNA strands of the vaccinia virus genome into one uninterrupted polynucleotide chain / B.M. Baroudy, S. Venkatesan, B. Moss // Cell. - 1982. - Vol. 28, №2. - P. 315-324.
95. Beard, W.A. DNA lesion bypass polymerases open up / W.A. Beard, S.H. Wilson // Structure. - 2001. - Vol. 9, №9. - P. 759-64.
96. Biogenesis of poxviruses: transitory expression of Molluscum contagiosum early functions / G. McFadden, W.E. Pace, J. Purres, S. Dales // Virology. - 1979. - Vol. 94, №2. - P. 297-313.
97. Blome, S Gabriel C, Beer M.Pathogenesis of African swine fever in domestic pigs and European wild boar / S. Blome // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 122-130.
98. Booth, T.F. Wax lipid secretion and ultrastructural development in the egg-waxing (Gene's) organ in ixodid ticks / T.F. Booth // Tissue Cell. - 1989. - Vol. 21, №№1. - P. 113122.
99. Breese, S.S.Jr. Electron microscope observation of African swine fever virus in tissue culture cells / S.S. Breese Jr., C.J. DeBoer // Virology. - 1966. - Vol. 28, №3. - P. 420-428.
100. Bulimo, W.D. An ARID family protein binds to the African swine fever virus encoded ubiquitin conjugating enzyme, UBCv1 / W.D. Bulimo, J.E. Miskin, L.K. Dixon // FEBS Lett. - 2000. - Vol. 471, №1. - P. 17-22.
101. Camacho, A. Protein p22 of African swine fever virus: an early structural protein that is incorporated into the membrane of infected cells / A. Camacho, E. Vinuela // Virology. - 1991. - Vol. 181, №1. - P. 251-257.
102. Changes in macrophages in spleen and lymph nodes during acute African swine fever: expression of cytokines / F.J. Salguero, E. Ruiz-Villamor, M.J. Bautista et al. // Vet. Immunol. Immunop. - 2002. - Vol. 90, №1-2. - P. 11-22.
103. Characterization of a ubiquitinated protein which is externally located in African swine fever virions / P.M. Hingamp, M.L. Leyland, J. Webb et al. // Journal of virology. - 1995. - Vol. 69, №3. - P. 1785-1793.
104. Characterization of African swine fever virion proteins j5R and j13L: immuno-localization in virus particles and assembly sites / S.M. Brookes, H. Sun, L.K. Dixon, R.M. Parkhouse // J. Gen. Virol. - 1998b. - Vol. 79, №5. - P. 1179-1188.
105. Characterization of the African swine fever virion protein j 18L / H. Sun , J. Jenson, L.K. Dixon, M.E. Parkhouse // J. Gen. Virol. - 1996. - Vol. 77, №5. - P. 941-946.
106. Characterization of the African swine fever virus structural protein p14.5: a DNA binding protein / L. Martinez-Pomares, C. Simon-Mateo, C. Lopez-Otin, E. Vinuela // Virology. - 1997. - Vol. 229, №1. - P. 201-211.
107. Chronic pain in Maputo, Mozambique: new insights / K. Ferreira, M.T. Schwalbach, J. Schwalbach, J. Speciali // Pain. Med. - 2013. - Vol. 14, №4. - P. 551-553.
108. Cobbold, C. A virally encoded chaperone specialized for folding of the major capsid protein of African swine fever virus / C. Cobbold, M. Windsor, T. Wileman // J. Virol. - 2001. - Vol. 75, №16. - P. 7221 -7229.
109. Comparative analysis of African swine fever virus genotypes and serogroups / A. Malogolovkin, G. Burmakina, I. Titov et al. // Emerg. Infect. Dis. - 2015. - Vol. 21, №2.
- P. 312-315.
110. Comparison of a radioimmunoprecipitation assay to immunoblotting and ELISA for detection of antibody to African swine fever virus / C. Alcaraz, M. De Diego , M.J. Pastor, J.M. Escribano // J. Vet. Diagn. Invest. - 1990. - Vol. 2, №3. - P. 191-196.
111. Comparison of the genome sequences of non-pathogenic and pathogenic African swine fever virus isolates / D.A. Chapman, V. Tcherepanov, C. Upton, L.K. Dixon // J. Gen. Virol. - 2008. - Vol. 89, №2. - P. 397-408.
112. Confirmación de sueros positivos a ELISA- peste porcina africana, mediante la técnica de 'Immunoblotting'. Utilización de las proteínas inducidas porel virus con pesos moleculares comprendidos entre 23 y 35 kilodaltons, en el desarrollo de un 'kit' de diagnóstico. (Confirmation of sera positive by ASF ELISA with the immunoblotting technique. Use of virus-induced proteins of23 -25 kDa in the development of a diagnostic kit.) / J.M. Escribano, M.J. Pastor, M. Arias, J.M. Sanchez- Vizcaino // Med. Vet. - 1990.
- Vol. 7. - P. 135 -141.
113. Crowther, J.R. Solid-phase radioimmunoassay techniques for the detection of African swine fever antigen and antibody / J.R. Crowther , R.C. Wardley , P.J. Wilkinson // J. Hyg. (Lond). - 1979. - Vol. 83, №2. - P. 353-361.
114. Da Silva, M. Vaccinia virus G8R protein: a structural ortholog of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) / M. Da Silva, C. Upton // PLoS ONE. - 2009. - Vol. 4, №5. -pp. 5479.
115. De Bruyns, A. Construction of Modular Lentiviral Vectors for Effective Gene Expression and Knockdown / A. de Bruyns, B. Geiling, D. Dankort // Methods Mol. Biol. - 2016. - Vol.1448. - P. 3-21.
116. De Leon, P, Bustos MJ, Carrascosa AL // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - Р. 168-79.
117. Deletion of a CD2-like gene, 8-DR, from African swine fever virus affects viral infection in domestic swine / M.V. Borca, C. Carrillo, L. Zsak et al. // J. Virol. - 1998. -Vol. 72, №4. - Р. 2881-2889.
118. Detection of African swine fever virus by loop-mediated isothermal amplification / H.E. James, K. Ebert, R. McGonigle et al. // J. Virol. Methods. - 2010. - Vol. 164, №12. - Р. 68-74.
119. Detection of an element of the SV40 late promoter in vectors used for expression studies in COS cells / R. Cattaneo, H. Will , G. Darai et al. // EMBO J. - 1983. - Vol. 2, №4. - Р. 511-514.
120. Development of the hybrid Sleeping Beauty: baculovirus vector for sustained gene expression and cancer therapy / W.Y. Luo, Y.S. Shih, C.L. et al. // Gene. Ther. - 2012. - Vol. 19, №8. - Р. 844-851.
121. Disease Information Database. Retrieved. 2013 September 16 [Электронный ресурс] /OIE// World Animal Health Information Database (WAHIS Interface). - Режим доступа: http: //www.oie. int/wahis_2/public/wahid.php/Diseaseinformation/
122. Disruption of nuclear organization during the initial phase of African swine fever virus infection / M. Ballester, C. Rodriguez-Carino, M. Perez et al. // J. Virol. - 2011. -Vol. 85, №16. - Р. 8263-8269.
123. Dixon, L.K. Molecular cloning and restriction enzyme mapping of an African swine fever virus isolate from Malawi / L.K. Dixon // J. Gen. Virol. - 1988. - Vol. 69, №7. - Р. 1683-1694.
124. DNA polymerase X from African swine fever virus: quantitative analysis of the enzyme-ssDNA interactions and the functional structure of the complex / M.J. Jezewska, A. Marcinowicz, A.L. Lucius, W. Bujalowski // J. Mol. Biol. - 2006. - Vol. 356, №1. - Р. 121-141.
125. DNA polymerase X of African swine fever virus: insertion fidelity on gapped DNA
substrates and AP lyase activity support a role in base excision repair of viral DNA / R. Garcia-Escudero, M. Garcia-Diaz, M.L. Salas et al. // J. Mol. Biol. - 2003. - Vol. 326, №5. - P. 2003 1403-1412.
126. Emergence of African swine fever virus, northwestern Iran / P. Rahimi, A. Sohrabi, J. Ashrafihelan et al. // Emerg. Infect. Dis. - 2010. - Vol. 16, №12. - P. 1946-1948.
127. Epidemiology of African swine fever virus / S. Costard, L. Mur, J. Lubroth et al. // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 191-197.
128. EpiMAN-SF: a decision-support system for managing swine fever epidemics / K.D. Stark, R.S. Morris, H.J. Benard, M.W. Stern // Rev. Sci. Tech. -. 1998.- Vol. 17, №3. - P. 682-690.
129. Esparza, I. Effect of interferon-alpha, interferon-gamma and tumour necrosis factor on African swine fever virus replication in porcine monocytes and macrophages / I. Esparza, J.C. Gonzalez, E. Vinuela // J. Gen. Virol. - 1988. - Vol. 69, №12. - P. 29732980.
130. Evans, E. Characterization of vaccinia virus DNA replication mutants with lesions in the D5 gene / E. Evans, P. Traktman // Chromosoma. - 1992. - Vol. 102, №1. - P. 7282.
131. Evolutionary genomics of nucleo-cytoplasmic large DNA viruses / L.M. Iyer, S. Balaji, E.V. Koonin, L. Aravind // Virus Res. - 2006. - Vol. 117, №1. - P. 156-184.
132. Experimental African swine fever: apoptosis of lymphocytes and virus replication in other cells / J.C. Gomez-Villamandos, J. Hervas, A. Mendez et al. // J. Gen. Virol. -1995b. - Vol. 76, №9. - P. 2399-2405.
133. Expression at mRNA level of cytokines and A238L gene in porcine blood-derived macrophages infected in vitro with African swine fever virus (ASFV) isolates of different virulence m / S. Gil, M. Spagnuolo-Weaver, A. Canals et al. // Arch. Virol. - 2003. - Vol. 148, №11. - P. 2077-2097.
134. Expression of a preproinsulin-beta-galactosidase gene fusion in mammalian cells / D.A. Nielsen , J. Chou, A.J. MacKrell et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 1983. - Vol.
80, №17. - P. 5198-5202.
135. Expression, cellular localization and antibody responses of the African Swine Fever virus genes B602L and K205R / B. Gutierrez-Castaneda , A.L. Reis , A. Corteyn et al. // Arch. Virol. - 2008. - Vol. 153, №12. - P. 2303-2306
136. Family Asfarviridae/ Dixon L.K., Costa J.V., Escribano J.M. et al. // Virus taxonomy: Seventh Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. -San Diego: Summers Academic Press, 2000. - P. 159-165.
137. General morphology and capsid fine structure of African swine fever virus particles / J.L. Carrascosa, J.M. Carazo, A.L. Carrascosa et al. // Virology. - 1984. - Vol. 132, №1.
- P. 160-172.
138. Genetic characterization of African swine fever viruses from outbreaks in southern Africa (1973-1999) / C.I. Boshoff, A.D. Bastos, L.J. Gerber, W. Vosloo // Vet. Microbiol.
- 2007. - Vol. 121, №1-2. - P. 45-55.
139. Genetic variation of African swine fever virus: variable regions near the ends of the viral DNA / R. Blasco, I. de la Vega, F. Almazan et al. // Virology. - 1989. - Vol. 173, №1. - P. 251-257.
140. Genotyping field strains of African swine fever virus by partial p72 gene characterization / A.D. Bastos, M.L. Penrith, C. Cruciere et al. // Arch. Virol. - 2003. -Vol. 148, №4. - P. 693-706.
141. Giberson, A.N. Chromatin structure of adenovirus DNA throughout infection / A.N. Giberson, A.R. Davidson, R.J. Parks // Nucleic Acids Res. - 2012. - Vol. 40, №6.
- P. 2369-2376.
142. Goatley, L.C. Processing and localization of the african swine fever virus CD2v transmembrane protein / L.C. Goatley, L.K. Dixon // J. Virol. - 2011. Vol. 85, №7. - P. 3294-305.
143. Granja, A. G. A238L inhibits NF-ATc2, NF-kappa B, and c-Jun activation through a novel mechanism involving protein kinase C-theta-mediated up-regulation of the amino-terminal transactivation domain of p300 / A. G. Granja, N.D. Perkins, Y. Revilla
// J. Immunol. - 2008. - Vol. 180, №4. - P. 2429-2442.
144. Grimm, S. The art and design of genetic screens: mammalian culture cells / S. Grimm // Nature Rev. Gen. - 2004. - Vol. 5. - P. 179-189.
145. High-level expression in Escherichia coli of the gene coding for the major structural protein (p72) of African swine fever virus / J.M. Freije, M. Munoz, E. Vinuela, C. Lopez-Otin // Gene. - 1993. - Vol. 123, №2. - P. 259-262.
146. HIP-55 is important for T-cell proliferation, cytokine production, and immune responses / J. Han, J.W. Shui, X. Zhang et al. // Mol. Cell. Biol. - 2005. - Vol. 25, №16.
- P. 6869-6878.
147. Host cell targets for African swine fever virus / R. Munoz-Moreno, I. Galindo, M.A. Cuesta-Geijo et al. // Virus Res. - 2015. - Vol. 209. - P. 118-127.
148. Hutchings, G.H. Indirect sandwich ELISA for antigen detection of African swine fever virus: comparison of polyclonal and monoclonal antibodies / G.H. Hutchings , N.P. Ferris // J. Virol. Methods. - 2006. - Vol. 131, №2. - P. 213-217.
149. Identification of a New Genotype of African Swine Fever Virus in Domestic Pigs from Ethiopia / J.E. Achenbach, C. Gallardo, E. Nieto-Pelegrin et al. // Transbound. Emerg. Dis. - 2016. - P. 12511.
150. Identification of a variable region of the African swine fever virus genome that has undergone separate DNA rearrangements leading to expansion of minisatellite-like sequences / L.K. Dixon, C. Bristow, P.J. Wilkinson, K.J. Sumption // J. Mol. Biol. - 1990.
- Vol. 216, №3. - P. 677-688.
151. Immunohistopathological study of African swine fever (strain E-75)-infected bone marrow / F. Rodriguez, J. Martin de las Mulas, P. Herraez et al. // J Comp Pathol. -1996.
- Vol. 114, №4. - P. 399-406.
152. In vivo depletion of CD8+ T lymphocytes abrogates protective immunity to African swine fever virus / C.A. Oura, M.S. Denyer, H. Takamatsu, R.M. Parkhouse // J. Gen. Virol. - 2005. - Vol. 86, №9. - P. 86, 2445-50.
153. Inducible gene expression from African swine fever virus recombinants: analysis
of the major capsid protein p72 / R. Garcia-Escudero, G. Andres, F. Almazan, E. Vinuela // J. Virol. - 1998. - Vol. 72, №4. - P. 3185-3195.
154. Inhibition of apoptosis by the African swine fever virus Bcl-2 homologue: role of the BH1 domain / Y. Revilla, A. Cebrian, E. Baixeras et al. // Virology. - 1997. - Vol. 228, №2. - P. 400-404.
155. Inhibition of nuclear factor kappaB activation by a virus-encoded IkappaB-like protein / Y. Revilla, M. Callejo, J.M. Rodriguez et al. // J. Biol. Chem. - 1998. - Vol. 273, №9. - P. 5405-5411.
156. Interactions between Piccolo and the actin/dynamin-binding protein Abp1 link vesicle endocytosis to presynaptic active zones / S.D. Fenster, M.M. Kessels, B. Qualmann et al. // J. Biol. Chem. - 2003. - Vol. 278, №22. - P. 20268-20277.
157. Intracellular localization of the UL31 protein of herpes simplex virus type 2 / H.Y. Zhu, H. Yamada, Y.M. Jiang et al. // Arch. Virol. - 1999. - Vol. 144, №10. - P. 19231935.
158. Intracellular virus DNA distribution and the acquisition of the nucleoprotein core during African swine fever virus particle assembly: ultrastructural in situ hybridisation and DNase-gold labelling / S.M. Brookes, A.D. Hyatt, T. Wise, R.M.E. Parkhouse // Virology. - 1998a. - Vol. 249, №1. - P. 175-188.
159. Intra-genotypic resolution of African swine fever viruses from an East African domestic pig cycle: a combined p72-CVR approach / B.A. Lubisi, A.D. Bastos, R.M. Dwarka, W. Vosloo // Virus Genes. - 2007. - Vol. 35, №3. - P. 729-735.
160. Intranuclear detection of African swine fever virus DNA in several cell types from formalin-fixed and paraffin-embedded tissues using a new in situ hybridisation protocol / M. Ballester, I. Galindo-Cardiel, C. Gallardo et al. // J. Virol. Methods. - 2010. - Vol. 168, №1-2. - P. 38-43.
161. Introduction of African swine fever into the European Union through illegal importation of pork and pork products / S. Costard, B.A. Jones, B. Martinez-Lopez et al. // PLoS ONE. - 2013b. - Vol. 8, №4. - P. 61104.
162. Iyer, L.M. Common origin of four diverse families of large eukaryotic DNA viruses / L.M. Iyer, L. Aravind, E.V. Koonin // J. Virol. - 2001. - Vol. 75, №23. - P. 11720 -11734.
163. Jori, F. Role of wild suids in the epidemiology of African swine fever / F. Jori, A.D. Bastos // Ecohealth. - 2009. - Vol. 6, №2. - P. 296-310.
164. Keller, J.M. Activation of the SV40 late promoter: direct effects of T antigen in the absence of viral DNA replication / J.M. Keller, J.C. Alwine // Cell. - 1984. - Vol. 36, №2.
- P. 381-389.
165. Kessels, M.M. Association of mouse actin-binding protein 1 (mAbp1/SH3P7), an Src kinase target, with dynamic regions of the cortical actin cytoskeleton in response to Rac1 activation / M.M. Kessels, A.E. Engqvist-Goldstein, D.G. Drubin // Mol. Biol. Cell.
- 2000. - Vol. 11, №1. - P. 393-412.
166. Kleiboeker, S.B. Pathogenesis of African swine fever virus in Ornithodoros ticks / S.B. Kleiboeker, G.A. Scoles // Anim. Health. Res. - 2001. - Vol. 2, №2. - P. 121-128
167. Laemmli, U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage / U.K. Laemmli // Nature. - 1970. - Vol. 227, №4. - P. 680-685.
168. Mammalian Abp1, a signal-responsive F-actin-binding protein, links the actin cytoskeleton to endocytosis via the GTPase dynamin / M.M. Kessels, A.E. Engqvist-Goldstein, D.G. Drubin, B. Qualmann // J. Cell. Biol. - 2001. - Vol. 153, №2. - P. 351366.
169. Mammalian actin binding protein 1 is essential for endocytosis but not lamellipodia formation: functional analysis by RNA interference / S. B. Mise-Omata, B. Montagne, M. Deckert et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2003. - Vol. 301, №3. - P. 704710.
170. Mao, S.Y.Overview of antibody use in immunocytochemistry / S.Y. Mao, L.C. Javois, U.M. Kent // Methods Mol. Biol. - 1994. - Vol. 34. - P. 3-11.
171. Mapping and sequence of the gene encoding protein p17, a major African swine fever virus structural protein / C. Simon-Mateo, J.M. Freije, G. Andres et al. // Virology.
- 1995. - Vol. 206, №2. - P. 1140-1144.
172. Martins, C.L. Porcine immune responses to African swine fever virus (ASFV) infection / C.L. Martins, A.C. Leitao // Vet. Immunol. Immunopathol. - 1994. - Vol. 43, №1-3. - P. 99-106.
173. Mechanism of inactivation of NF-kappa B by a viral homologue of I kappa b alpha. Signal-induced release of i kappa b alpha results in binding of the viral homologue to NF-kappa B / S.W. Tait, E.B. Reid, D.R. Greaves et al. // J. Biol. Chem. - 2000. - Vol. 275, №44. - P. 34656-34664.
174. Mechanisms of up-regulation of D2L dopamine receptors by agonists and antagonists in transfected HEK-293 cells / T.M. Filtz, W. Guan, R.P. Artymyshyn et al. // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1994. - Vol. 271, №3. - P. 1574-1582.
175. Metabolic control of recombinant protein N-glycan processing in NS0 and CHO cells / K.N. Baker, M.H. Rendall, A.E. Hills et al. // Biotechnol. Bioeng. - 2001. - Vol. 73, №3. - P. 188-202.
176. Modulation of p53 cellular function and cell death by African swine fever virus / A.G. Granja, M.L. Nogal, C. Hurtado et al. // J. Virol. - 2004. - Vol. 78, №13. - P. 71657174.
177. Modulation of T cell and monocyte function in the spleen following infection of pigs with African swine fever virus / A. Childerstone, H. Takamatsu, H Yang et al. // Vet. Immunol. Immunopathol. - 1998. - Vol. 62, №4. - P. 281-296.
178. Molecular cloning of HEK, the gene encoding a receptor tyrosine kinase expressed by human lymphoid tumor cell lines / I.P. Wicks , D. Wilkinson, E. Salvaris, A.W. Boyd // Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. - 1992. - Vol. 89, №5. - P. 1611-1615.
179. Molecular epidemiology of African swine fever in East Africa / B.A. Lubisi, A.D. Bastos, R.M. Dwarka, W. Vosloo // Arch. Virol. - 2005. - Vol. 150, №12. - P. 2439-2452.
180. Molecular epidemiology of African swine fever virus studied by analysis of four variable genome regions / R.J. Nix, C. Gallardo, G. Hutchings et al. // Arch.Virol. - 2006.
- Vol. 151, №12. - P. 2475-2494.
181. Monitoring of African swine fever in the wild boar population of the most recent endemic area of Spain / L. Mur , M. Boadella, B. Martinez-Lopez et al. // Transbound. Emerg. Dis. - 2012. - Vol. 59, №6. - P. 526-531.
182. Montogomery, R. E. On a form of swine fever ocurring in British East Africa / R.E. Montogomery // J. Comp. Patho. - 1921. - Vol. 34, - P. 159-191.
183. Multigene families in African swine fever virus: family 505 / J.M. Rodriguez, R.J. Yanez, R. Pan et al. // J. Virol. - 1994. - Vol. 68, №4. - P. 2746-2751.
184. Neutralizing antibodies to African swine fever virus proteins p30, p54, and p72 are not sufficient for antibody-mediated protection / J.G. Neilan, L. Zsak, Z. Lu et al. // (2004). Virology. - 2004. - Vol. 319, №2. - P. 337-342.
185. Neutralizing antibodies to different proteins of African swine fever virus inhibit both virus attachment and internalization / P. Gomez-Puertas, F. Rodriguez, J. M. Oviedo et al. // J. Virol. - 1996. - Vol. 70, №8. - P. 5689-5694.
186. Nuthall, K. Smart way to tackle cancer / K. Nuthall // Nurs. Stand. - 2009. - Vol. 23, №40. - p. 28.
187. OIE, 2014. World Animal Health Information Disease (WAHID). World Organisation of Animal Health, Paris France.
188. Optimization and validation of recombinant serological tests for African Swine Fever diagnosis based on detection of the p30 protein produced in Trichoplusia ni larvae / D.M. Perez-Filgueira, F. Gonzalez-Camacho, C. Gallardo et al. // J. Clin. Microbiol. -2006. - Vol. 44, №9. - P. 3114-3121.
189. Oura, C.A. African swine fever: a disease characterized by apoptosis / C.A. Oura, P.P. Powell, R.M. Parkhouse // J. Gen. Virol. - 1998. - Vol. 79, №6. - P. 1427-1438.
190. Oura, C.A. Virological diagnosis of African swine fever-comparative study of available tests / C.A. Oura, L. Edwards, C.A. Batten // Virus. Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 150-158.
191. Paez, E. Interferon cures cells lytically and persistently infected with African swine fever virus in vitro / E. Paez, F. Garcia, C. Gil Fernandez // Arch. Virol. - 1990. - Vol.
112, №1-2. - P. 115-127.
192. Pan, I.C. Hypergammaglobulinemia in swine infected with African swine fever virus / I.C. Pan, C.J. De Boer, W.P. Heuschele // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. - 1970. - Vol. 134, №2. - P. 367-371.
193. Particle tracking analysis for the intracellular trafficking of nanoparticles modified with African swine fever virus protein p54-derived peptide / H. Akita, K. Enoto, H. Tanaka, H. Harashima // Mol. Ther. - 2013.- Vol. 21, №2. P. 309-317.
194. Passively transferred African swine fever virus antibodies protect swine against lethal infection / D.V. Onisk, M.V. Borca, G. Kutish et al. // Virology. - 1994. - Vol. 198, №1. - P. 350-354.
195. Pathogenesis of highly virulent African swine fever virus in domestic pigs exposed via intraoropharyngeal, intranasopharyngeal, and intramuscular inoculation, and by direct contact with infected pigs / E.B. Howey, V. O'Donnell, H.C. de Carvalho Ferreira et al. // Virus. Res. - 2013. - Vol. 178, №2. - P. 328-339.
196. Pharmacological and physiological properties of a putative ganglionic nicotinic receptor, alpha 3 beta 4, expressed in transfected eucaryotic cells / E.T. Wong, S.G. Holstad, S.J. Mennerick et al. // Brain Res. Mol. Brain Res. - 1995. - Vol. 28, №1. - P. 101-109.
197. Phylogenomic analysis of 11 complete African swine fever virus genome sequences / E.P. de Villiers, C. Gallardo, M. Arias et al. // Virology. - 2010. - Vol. 400, №1. - P. 128-136.
198. Pini, A. African swine fever: an epizootiological review with special reference to the South African situation / A. Pini, L.R. Hurter, J S Afr Vet Assoc. - 1975. - Vol. 46, №3. - P. 227-232
199. Plowright W, Parker J. The stability of African swine fever virus with particular reference to heat and pH inactivation / W. Plowright, J. Parker // Arch. Gesamte. Virusforsch. - 1967. - Vol. 21, №3. - P. 383-402.
200. Portugal, R. Novel approach for the generation of recombinant African swine fever
virus from a field isolate using GFP expression and 5-bromo-2'-deoxyuridine selection / R. Portugal, C. Martins, G.M. Keil // J. Virol. Methods. - 2012. - Vol. 183, №1. - P. 8689.
201. Post-transcriptional regulatory elements for enhancing transient gene expression levels in mammalian cells / Mariati, S.C. Ho, M.G. Yap, Y. Yang // Methods Mol. Biol. -2012. - Vol. 801. - P. 125-35.
202. Post-translational regulation and modifications of flavivirus structural proteins / J.A. Roby, Y.X. Setoh , R.A. Hall, A.A. Khromykh // J. Gen. Virol. - 2015. - Vol. 96, №7. - P. 1551-1569.
203. Potential use of oral fluid samples for serological diagnosis of African swine fever / L. Mur, C. Gallardo, A. Soler et al. // Vet. Microbiol. - 2013. - Vol. 165, №1-2. - P. 135139.
204. Powell, P.P. An IkappaB homolog encoded by African swine fever virus provides a novel mechanism for downregulation of proinflammatory cytokine responses in host macrophages / P.P. Powell, L.K. Dixon, R.M. Parkhouse // J. Virol. - 1996. - Vol. 70, №12. - P. 8527-8533.
205. Proinflammatory cytokines induce lymphocyte apoptosis in acute African swine fever infection / F.J. Salguero, P.J. Sanchez-Cordon, A. Nunez et al. // J. Comp. Pathol. -2005. - Vol. 132, №4. - P. 289-302.
206. Prokaryotic expression, purification and antigenicity analysis of African swine fever virus pK205R protein / X. Wu, L. Xiao, B. Peng et al. // Vet. Sci. - 2016. - Vol. 19, №4. - P. 41-48.
207. Proteolytic processing in African swine fever virus: evidence for a new structural polyprotein, pp62 / C. Simon-Mateo, G. Andres, F. Almazan, E. Vinuela // J. Virol. -1997. - Vol. 71, №8. - P. 5799-5804.
208. PVS: a web server for protein sequence variability analysis tuned to facilitate conserved epitope discovery / M. Garcia-Boronat, C.M. Diez-Rivero, E.L. Reinherz, P.A. Reche // Nucleic Acids Res. - 2008. - Vol. 36. - P. 35-41.
209. Qualitative risk assessment in a data-scarce environment: a model to assess the impact of control measures on spread of African Swine Fever / B. Wieland, S. Dhollander, M. Salman, F. Koenen // Prev. Vet. Med. - 2011. - Vol. 99, №1. - P. 4-14.
210. Rapid and Simple Method for Purification of Nucleic Acids / R. Boom, C.J. Sol, M.M. Salimans et al. // J. Clin. Microbiol. - 1990. - Vol. 28, №3. - Р. 495-503.
211. Recognizing Africane swine fever. A field manual N9 [Электронный ресурс] / FAO. -Rome, 2000.- Режим доступа: http: //www. fao. org/docrep/004/X8060E/X8060E00.HTM
212. Recombinant antigen targets for serodiagnosis of African swine fever / C. Gallardo, A.L. Reis, G. Kalema-Zikusoka et al. // Clin. Vaccine Immunol. - 2009. - Vol. 16, №7. -Р. 1012-1020.
213. Regulation of inducible nitric oxide synthase expression by viral A238L-mediated inhibition of p65/RelA acetylation and p300 transactivation / A.G. Granja, P. Sabina, M.L. Salas et al. // J. Virol. - 2006b. - Vol. 80, №21. - Р. 10487-10496.
214. Replication of African swine fever virus DNA in infected cells / G. Rojo, R. Garcia-Beato, E. Vinuela et al. // Virology. - 1999. - Vol. 257, №2. - P. 524-536.
215. Repression of African swine fever virus polyprotein pp220-encoding gene leads to the assembly of icosahedral core-less particles / G. Andres, R. Garcia-Escudero, M. L. Salas, J. M. Rodriguez // J. Virol. - 2002. - Vol. 76, №6. - Р. 2654-2666.
216. Review of the sylvatic cycle of African swine fever in sub-Saharan Africa and the Indian ocean / F. Jori, L. Vial, M.L. Penrith et al. // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. -Р. 212-227.
217. Role of the host cell nucleus in the replication of African swine fever virus DNA / R. Garcia-Beato, M.L. Salas, E. Vinuela, J. Salas / Virology. - 1992. - Vol. 188, №2. - Р. 637-649.
218. Salas, M.L. African swine fever virus morphogenesis / M.L. Salas, G. Andres // Virus Res. - 2013. - Vol. 173, №1. - P. 29-41.
219. Salas, M.L. Polyadenylation, methylation, and capping of the RNA synthesized in
vitro by African swine fever virus / M.L. Salas, J. Kuznar, E. Vinuela // Virology. - 1981.
- Vol. 113, №2. - P., 489-491.
220. Sanchez-Vizcaino, J.M. African swine fever diagnosis update / J.M. Sanchez-Vizcaino, L. Mur // Dev. Biol. (Basel). - 2013. - Vol. 135, - P. 159-165.
221. Sanchez-Vizcaino, J.M. African swine fever: an epidemiological update / J.M. Sanchez-Vizcaino, L. Mur, B. Martinez-Lopez // Transbound. Emerg. Dis. - 2012. - Vol. 59, №1. - P. 27-35.
222. Santaren, J.F. African swine fever virus-induced polypeptides in Vero cells / J.F. Santaren, E. Vinuela // Virus Res. - 1986. - Vol. 5, №4. - P. 391-405.
223. Schlafer, D.H. African swine fever in neonatal pigs: passively acquired protection from colostrum or serum of recovered pigs / D.H. Schlafer, C.A. Mebus, J.W. McVicar // Am. J. Vet. Res. - 1984. - Vol. 45, №7. - P. 1367-1372.
224. Scientific review on African swine fever / J.M. Sanchez-Vizcaino, B. Martinez-Lopez, M. Martinez-Aviles et al. // External Scientific Report submitted to EFSA, - 2009.
- p. 141.
225. Serodiagnosis of African swine fever using the recombinant protein p30 expressed in insect larvae / M.G. Barderas, A. Wigdorovitz, F. Merelo et al. // J. Virol. Methods. -2000. - Vol. 89, №1-2. - P. 129-136.
226. Simeon-Negrin, R. Erradication African swine fever in Cuba (1971 and 1980) / R. Simeon-Negrin, M. Frias Lepoureau. In: A. Moralla, K.J. Yoon, J.J. Zimmerman (editors), Triends in emerging viral infections of swine. Ames: Iowa State Press; 2002, pp. 119-124.
227. Simon-Mateo, C. Polyprotein processing in African swine fever virus: a novel gene expression strategy for a DNA virus / C. Simon-Mateo, G. Andres, E. Vinuela // EMBO J. - 1993. - Vol. 12, №7. - P. 2977-2987.
228. Solution structure of a viral DNA polymerase X and evidence for a mutagenic function / A.K. Showalter, I.J. Byeon, M.I. Su, M.D. Tsai // Nat. Struct. Biol. - 2001. -Vol. 8, №11. - P. 942-946.
229. Sonenshine, D. E. Biology of tick / D.E. Sonenshine // New York: Oxford University press. - 1991. -Vol. 1, p. 447.
230. Stable expression of cloned rat GABAA receptor subunits in a human kidney cell line / B.J. Hamilton, D.J. Lennon, H.K. Im et al. // Neurosci. Lett. - 1993. - Vol. 153, №2.
- P. 206-209.
231. Structure and expression in E. coli of the gene coding for protein p10 of African swine fever virus / M. Munoz, J.M. Freije, M.L. et al. // Arch. Virol. - 1993. - Vol. 130, №1-2. - P. 93-107.
232. Studier, F.W. Use of bacteriophage T7 RNA polymerase to direct selective highlevel expression of cloned genes / F.W. Studier, B.A. Moffatt // J. Mol. Biol. - 1986. -Vol. 189, №1. - P. 113-130.
233. Subcellular changes in the tonsils of pigs infected with acute African swine fever virus / J.C. Gomez-Villamandos, J. Hervas, C. Moreno et al. // Vet. Res. - 1997a. - Vol. 28, №2. - P. 179-189.
234. The African swine fever virus g5R protein possesses mRNA decapping activity / S. Parrish, M. Hurchalla, S.W. Liu, B. Moss // Virology. - 2009. - Vol. 393, №1. - P. 177182.
235. The African swine fever virus protein j4R binds to the alpha chain of nascent polypeptide-associated complex / L.C. Goatley, S.R. Twigg, J.E. Miskin et al. // J. Virol.
- 2002. - Vol. 76, №19. - P. 9991-9999.
236. The African swine fever virus proteins p54 and p30 are involved in two distinct steps of virus attachment and both contribute to the antibody-mediated protective immune response / P. Gomez-Puertas, F. Rodriguez, J.M. Oviedo et al. // Virology. - 1998. - Vol. 243, №2. - P. 461-471.
237. The African swine fever virus thymidine kinase gene is required for efficient replication in swine macrophages and for virulence in swine / D.M. Moore, L. Zsak, J.G. Neilan et al. // J. Virol. - 1998. - Vol. 72, №12. - P. 10310-10315.
238. The African swine fever virus virion membrane protein pE248R is required for
virus infectivity and an early postentry event / I. Rodriguez, M.L. Nogal, M. Redrejo-Rodriguez et al. // J. Virol. - 2009. - Vol. 83, №23. - P. 12290-12300.
239. The Asfarviridae / L.K. Dixon, J.M. Escribano, C. Martins et al. // In: C.M. Fauquet, M.A. Mayo, J. Maniloff, U. Desselberger, L.A. Ball (editor), Virus taxonomy: Eighth report of the International Committee on Taxonomy of Viruses. London: Elsevier Academic Press, 2005.
240. The biological effects induced in mice by p36, a proteinaceous factor of virulence produced by African swine fever virus, are mediated by interleukin-4 and also to a lesser extent by interleukin-10 / M. Vilanova, P. Ferreira, A. Ribeiro, M. Arala-Chaves // Immunology. - 1999. - Vol. 96, №3. - P. 389-395.
241. The CD2v protein enhances African swine fever virus replication in the tick vector, Ornithodoros erraticus / R.J. Rowlands, M.M. Duarte, F. Boinas et al. // Virology. - 2009.
- Vol. 393, №2. - P. 319-328.
242. The C-type lectin homologue gene (EP153R) of African swine fever virus inhibits apoptosis both in virus infection and in heterologous expression / C. Hurtado, A.G. Granja, M.J. Bustos et al. // Virology. - 2004. - Vol. 326, №1. - P. 160-170.
243. The C-type lectin homologue gene (EP153R) of African swine fever virus inhibits apoptosis both in virus infection and in heterologous expression / C. Hurtado, A.G. Granja, M.J. Bustos et al. // Virology. - 2004. - Vol. 326, №1. - P. 160-170.
244. The evolution of adaptive immunity in vertebrates / M. Hirano, S. Das, P. Guo, M.D. Cooper // Adv. Immunol. - 2011. - Vol. 109, - P. 125-157.
245. The Last Ten Years of Advancements in Plant-Derived Recombinant Vaccines against Hepatitis B / Y.H. Joung, S.H. Park, K.B. Moon et al. // Int. J. Mol. Sci. - 2016.
- Vol. 17, №10. - p. 1715.
246. The MyD116 African swine fever virus homologue interacts with the catalytic subunit of protein phosphatase 1 and activates its phosphatase activity / J. Rivera, C. Abrams, B. Hernaez et al. // J. Virol. - 2007. - Vol. 81, №6. - P. 2923-2929.
247. The non-haemadsorbing African swine fever virus isolate ASFV/NH/P68 provides
a model for defining the protective anti-virus immune response / A. Leitao, C. Cartaxeiro, R. Coelho et al. // J. Gen. Virol. - 2001. - Vol. 82, №3. - P. 513-523.
248. The role of antibody in protection against African swine fever virus / R.C. Wardley, S.G. Norley, P.J. Wilkinson, S. Williams // Vet. Immunol. Immunop. - 1985. - Vol. 9, №3. - P. 201-212.
249. The sequences of the ribonucleotide reductase genes from African swine fever virus show considerable homology with those of the orthopoxvirus, vaccinia virus / M. Boursnell, K. Shaw, R.J. Yanez et al. // Virology. - 1991. - Vol. 184, №1. - P. 411-416.
250. The SH3 domain-containing adaptor HIP-55 mediates c-Jun N-terminal kinase activation in T cell receptor signaling / J. Han, R. Kori, J.W. Shui et al. // J. Biol. Chem.
- 2003. - Vol. 278, №52. - P. 52195-52202.
251. The structural protein p54 is essential for African swine fever virus viability / F. Rodriguez, V. Ley, P. Gomez-Puertas et al. // Virus Res. - 1996. - Vol. 40, №2. - P. 161-167.
252. The Tat protein of human immunodeficiency virus type-1 promotes vascular cell growth and locomotion by engaging the alpha5beta1 and alphavbeta3 integrins and by mobilizing sequestered basic fibroblast growth factor / G. Barillari, C. Sgadari, V. Fiorelli et al. // Blood. - 1999. - Vol. 94, №2. - P. 663-672.
253. The viral protein A238L inhibits TNF-alpha expression through a CBP/p300 transcriptional coactivators pathway / A.G. Granja, M.L. Nogal, C. Hurtado et al. // J. Immunol. - 2006a. - Vol. 176, №1. - P. 451-462.
254. Three African swine fever virus genes encoding proteins with homology to putative helicases of vaccinia virus / S.A. Baylis, S.R. Twigg, S. Vydelingum et al. // J. Gen. Virol.
- 1993. - Vol. 74, №9. - P. 1969-1974.
255. Thrombocytopenia associated with apoptotic megakaryocytes in a viral haemorrhagic syndrome induced by a moderately virulent strain of African swine fever virus / J.C. Gomez-Villamandos, M.J. Bautista, L. Carrasco et al. // J. Comp. Pathol. -1998. - Vol. 118, №1. - P. 1-13.
256. Transcription and translation maps of African swine fever virus / M.L. Salas, J. Rey-Campos, J.M. Almendral et al. // Virology. - 1986. - Vol. 152, №1. - P. 228-240.
257. Transcriptome study and identification of potential marker genes related to the stable expression of recombinant proteins in CHO clones / U. Jamnikar, P. Nikolic, A. Belic et al. // BMC Biotechnol. - 2015. - Vol. 15. - p. 98.
258. Ultrastructural changes related to the lymph node haemorrhages in acute African swine fever / L. Carrasco, F. Chacon-M de Lara, J. Martin de Las Mulas et al. // Res. Vet. Sci. - 1997. - Vol. 62, №3. - P. 199-204.
259. Vallee, I. African swine fever virus infection of porcine aortic endothelial cells leads to inhibition of inflammatory responses, activation of the thrombotic state, and apoptosis / I. Vallee, S.W. Tait, P.P. Powell // J. Virol. - 2001. - Vol. 75, №21. - P. 1037210382.
260. Variable and constant regions in African swine fever virus DNA // R. Blasco, M. Aguero, J.M. Almendral, E. Vinuela // Virology. - 1989b. - Vol. 168, №2. - P. 330-338.
261. Vectors for selective expression of cloned DNAs by T7 RNA polymerase / A.H. Rosenberg, B.N. Lade, D.S. Chui et al. // Gene. - 1987. - Vol. 56, №1. - P. 125-135.
262. Virulent African swine fever virus isolates are neutralized by swine immune serum and by monoclonal antibodies recognizing a 72-kDa viral protein / L. Zsak, D.V. Onisk, C.L. Afonso, D.L. Rock // Virology. - 1993. - Vol. 196, №2. - P. 596 -602.
263. Virus association with lymphocytes in acute African swine fever / A.L. Carrasco, F.C. de Lara, J. Martin de las Mulas et al. // Vet. Res. - 1996a. - Vol. 27, №3. - P. 305312.
264. Vlasova, N.N. Perspective of using the recombinant DNA -technology to control the spread of the African swine fever / N.N. Vlasova, V.M. Balyshev, A.S. Kazakova // Procedia in Vaccinology. - 2011. - Vol. 4, - P. 92-99.
265. Wesley, R.D. Genome relatedness among African swine fever virus field isolates by restriction endonuclease analysis / R.D. Wesley, A.E. Tuthil // Prev. Vet. Med. - 1984. - Vol. 2, №1-4. - P. 53-62.
266. Wurm, F. M. Production of recombinant protein therapeutics in cultivated mammalian cells / F.M. Wurm // Nature Biotechnol. - 2004. - Vol. 22. - p. 1393-1398.
267. Yi, L. Preparation and Identification of a Single-chain Variable Fragment Antibody Against Canine Distemper Virus / L. Yi, S. Cheng // Monoclon Antib Immunodiagn Immunother. - 2015. - Vol. 34, №4. - P. 228-232.
Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.