Получение и изучение свойств препаратов фактора переноса против некоторых вирусных и бактериальных инфекций животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.06, кандидат биологических наук Кухаркина, Ольга Венедиктовна

• Кухаркина, Ольга Венедиктовна
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кухаркина, Ольга Венедиктовна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

• - лп

1.1. Медиаторы иммуннои системы.

1.2. Характеристика фактора переноса.

1.3. Химическая природа фактора переноса.

1.4. Свойства фактора переноса.

1.5. Механизм действия фактора переноса.

1.6. Животные, используемые для получения фактора переноса.

1.7. Получение фактора переноса

1.7.1. Выбор доноров

1.7.2. Подготовка антигена

1.7.3. Сенсибилизация доноров для репродукции фактора переноса.

1.7.4. Выделение лимфоцитарной массы из тканей и жидкостей организма доноров.

1.7.5. Получение диализата экстракта лейкоцитов.

1.8. Тестирование активности фактора переноса в диализатах экстрактах лейкоцитов.

1.8.1. Реакция замедления миграции лейкоцитов.

1.8.2. Реакция гиперчувствительности замедленного типа у животных.

1.9. Применение препаратов фактора переноса для лечения и профилактики инфекционных болезней животных и человека.

1.9.1. Применение фактора переноса для лечения болезней людей.

1.9.2. Экспериментальное изучение фактора переноса на животных.

1.9.3. Осложнения, возникающие у животных и человека при введении фактора переноса.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение и изучение свойств препаратов фактора переноса против некоторых вирусных и бактериальных инфекций животных»

Актуальность темы. Общеизвестно, что при многих заболеваниях, вызванных вирусными, бактериальными и другими инфекционными агентами, преимущественно главным фактором защиты организма является специфический гуморальный иммунный ответ [1,2]. Но при всей важности гуморальной формы реагирования отмечают, что, в первую очередь, гуморальные реакции имеют под собой клеточную основу [3].

Клеточно-опосредованной формой реагирования называют такие формы иммунных реакций, в которых эффекторными клетками являются лимфоциты, имеющие специфические рецепторы к тем или иным антигенам. Клеточно-опосредованный иммунитет (КОИ) передается клетками костного мозга, селезенки, лимфатических узлов и крови [9].

За клеточно-опосредованный иммунитет ответственны сформированные в тимусе Т-лимфоциты, которые встречаются особенно в тимусзависимых зонах лимфоидных органов, в лимфе (около 80 % всех лимфатических клеток, в выходящей из лимфатических узлов лимфе), а так же крови [5].

При воздействии антигена в иммунокомпетентных Т-клетках начинаются процессы деления и дифференцирования, в результате которых образуется популяция специфически сенсибилизированных лимфоцитов.

Сенсибилизированные лимфоциты содержат фактор, способный переносить опосредованный клетками иммунитет на несенсибилизированные лимфоциты. Эта способность была открыта в 1949 году, а фактор, отвечающий за перенос клеточно-опосредованного иммунитета, был назван фактором переноса (ФП). Это низкомолекулярная антигенспецифическая гетерогенная смесь пептидов и рибонуклеопептидов, способная специфически переносить ГЗТ к определенным антигенам [6].

Необходимость изучения передачи клеточного иммунитета с помощью фактора переноса обусловлена тем, что эта проблема недостаточно раскрыта. Многие исследователи предполагают, что трансфер фактор (TF) сможет обеспечить защиту организма от заболеваний, вызванных различными инфекционными агентами [15, 27, 43, 62, 69, 95, 107, 118, 122, 129, 136, 144, 162, 173, 182, 205].

Так как для препаратов фактора переноса не существует видового барьера, он может быть универсальным для любого вида животного и человека. Препараты, приготовленные из лимфоцитов крови и лимфоидных органов не иммуногенны, не токсичны, поэтому их применение безопасно. Иммунитет развивается по типу гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) и сохраняется от нескольких месяцев до года [2, 25]. Все представленные данные говорят о необходимости изучения передачи клеточно-опосредованного иммунитета с помощью лимфоцитов, полученных от сенсибилизированных организмов.

Для испытания фактора переноса применяют тесты по оценке клеточного иммунитета [20].

В изучении клеточного иммунитета большую роль вносит познание возможности передачи состояния сенсибилизированности от одного организма другому с помощью иммунных лимфоцитов [4]. Реакция организма на введение иммунных лимфоцитов развивается по типу замедленной гиперчувствительности. Это может быть определено соответствующими кожными тестами. Развитие реакции ГЗТ хорошо коррелируетря с реакцией ингибиции миграции лейкоцитов in vitro. Реакция ингибиции миграции лейкоцитов (ИМЯ) является наиболее точным тестом для оценки клеточно-опосредованного иммунного ответа.

Заболевания молодняка крупного рогатого скота (КРС) наносят большой экономический ущерб, несмотря на наличие средств специфической и неспецифической профилактики, поэтому необходим новый подход к решению этой проблемы. Использование препаратов ФП в ветеринарной практике является новым направлением иммунологической науки, и ряд вопросов по этой теме остается не решенным.

Диссертация имеет характер поискового экспериментального исследования, которое является фрагментом научной темы по изучению клеточных медиаторов и новых средств специфической профилактики.

Цели и задачи исследования. Основной целью работы было экспериментальное изучение возможности использования препаратов ФП для профилактики некоторых инфекционных болезней молодняка КРС.

Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

- оптимизировать методику получения лимфоцитарной массы из лимфоидных органов, молозива и периферической крови животных;

- получить иммунопотенцирующий препарат фактора переноса на основе диализата экстракта лейкоцитов (ДЭЛ) крови, лимфатических узлов, селезенки, молозива;

- протестировать иммунологическую активность ДЭЛ против некоторых бактериальных и вирусных инфекций;

- изучить особенности иммунитета, возникающего в ответ на введение препаратов фактора переноса на основе ДЭЛ; определить взаимодействие клеточного и гуморального иммунитета при различных способах активации им мунекомпетентных клеток;

- разработать научно-методическую документацию для оценки клеточно-опосредованного иммунитета (КОИ) животных.

Научная новизна работы. Научная новизна проведенных экспериментальных исследований состоит в том, что:

- разработана схема сенсибилизации животных доноров ДЭЛ;

- получены препараты ФП на основе ДЭЛ к вирусным и бактериальным антигенам;

- разработана методика получения препаратов TF из периферической крови, лимфоидных органов, молозива;

- определена возможность перенесения КОИ ксеногенным животным с помощью ДЭЛ;

- определены сроки возникновения клеточного и гуморального иммунитета у животных при иммунизации и гипериммунизации вирусными антигенами;

- отмечено равноценное влияние клеточного и гуморального иммунитета при защите организма животных от кишечных инвазий;

Практическая ценность результатов исследования. Экспериментальные материалы вошли в нормативно техническую документацию по получению и тестированию препаратов ФП на основе ДЭЛ, одобренную ученым советом и утвержденную директором института.

- регламент по получению препаратов ДЭЛ из лимфоцитов селезенки, лимфатических узлов и лейкоцитов периферической крови и молозива;

- методические рекомендации по тестированию иммунологической активности TF in vitro в реакции замедления миграции лейкоцитов под слоем агарозы;

- методические рекомендации по тестированию активности иммуностимулятора in vivo в реакции гиперчувствительности замедленного типа.

Публикация научных исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и опубликованы в материалах научных конференций: «Достижения молодых ученых в ветеринарную практику» (г. Владимир, ВНИИЖЗ, 2000 г.); «Современные проблемы селекции, ветеринарной генетики и защиты животных» (г. Витебск, Республика Беларусь, 2001 г.); «Мониторинг распространения и предотвращения особо опасных болезней животных» г г. Самарканд, Республика Узбекистан, 2001 г.); «Вет. медицина: Мжвщ. тем. наук., зб. 80 рок. 1ЕКВМ» (г. Харьков, Республика Украина 2002 г.); «Актуальные проблемы свиней крупного и мелкого рогатого скота» (г. Владимир, 2002 г.), «Современные вопросы патологии сельскохозяйственных животных» (г. Минск, Республика Беларусь, 2003 г.), «Актуальные проблемы инфекционной патологии животных» (г. Владимир, 2003 г.).

Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 140 страницах и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, выводы, практические предложения, приложения. Список литературы включает 209 источников, в том числе 27 работ на русском языке. Работа иллюстрирована 10 рисунками и 24 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Вирусология», Кухаркина, Ольга Венедиктовна

6. выводы

1. Экспериментально показано, что лимфоциты, выделенные из крови, молозива и лимфоидных органов (лимфоузлов и селезенки) животных, иммунизированных против ротавирусной инфекции телят, парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота и сальмонеллеза индуцируют у несенсибилизированных реципиентов развитие клеточного иммунитета.

2. Разработана методика получения лимфоцитарной массы из периферической крови животных, лимфоидных органов и молозива коров.

3. Оптимизирован способ получения препарата фактора переноса на основе диализата экстракта лейкоцитов из крови, молозива и лимфоидных органов (лимфоузлов и селезенки) иммунизированных доноров.

4. Усовершенствованы методы определения иммуногенной активности фактора переноса in vivo в реакции гиперчувствительности замедленного типа и in vitro в реакции ингибиции миграции лейкоцитов под слоем агарозы.

5. Изучены особенности сенсибилизации организма доноров в зависимости от дозы антигена, вводимого животному и влияние этой дозы на скорость создания клеточно-опосредованного иммунитета у животных.

6. Установлено, что препарат фактора переноса, полученный из лимфоцитов, иммунизированных животных, обладает строгой антигенспецифичностью и позволяет передавать клеточно-опосредованный иммунитет ксеногенным животным, минуя видовой барьер.

7. Определены сроки возникновения клеточного и гуморального иммунитета у животных при введении препаратов фактора переноса на основе диализата экстракта лейкоцитов при иммунизации и гипериммунизации животных вирусными антигенами.

8. Показано, что препарат фактора переноса усиливает иммунный ответ телят на введение вакцины против ротавирусной инфекции крупного рогатого скота по сравнению с одной вакцинацией.

9. С помощью реакции ИМЯ под слоем агарозы и РДП были установлены сроки возникновения клеточного (3-7 дней) и гуморального (12-14 дней) иммунитета кроликов на введение ротавирусного антигена крупного рогатого скота.

7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для практического применения предлагаются следующие инструкции и методические рекомендации: временные технические условия на препарат фактора переноса против вирусных и бактериальных инфекций животных;

- временное наставление по применению препаратов фактора переноса против вирусных и бактериальных инфекций животных; инструкция по получению ДЭЛ из лимфоцитов селезенки, лимфатических узлов и лейкоцитов периферической крови и молозива; методические рекомендации по тестированию иммунологической активности ДЭЛ in vitro (реакции замедления миграции лейкоцитов под слоем агарозы); методические рекомендации по тестированию активности

ДЭЛ in vivo (реакция гиперчувствительности замедленного типа)

Инструкция и методические рекомендации рассмотрены и одобрены ученым советом (протокол №14 от 4.10.2002 г.) и утверждены директором ФГУ «Федерального центра охраны здоровья животных».

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кухаркина, Ольга Венедиктовна, 2003 год

1. Авербах М. М., Герберт В .Я., Литвинов В. И. Повышенная чувствительность замедленного типа и инфекционный процесс .-М.: Медицина, 1974.-С.113.

2. Алкан С. Оценка антиген-специфической пролиферации мышиных Т-клеток// Методы исследований в иммунологии М., 1981.-С.320-326.

3. Арала-Чейвз П., Хоренгейма М., Гаует М., Фуденберг X. Биологические и клинические аспекты фактора переноса // Иммунологическая инженерия / Под ред. Д. Джирша. -М., Медицина, 1982.-С.53-104.

4. Бакулов И.А. Методологические рекомендации по изучению клеточного иммунитета у свиней при вирусных инфекциях.- Покров, 1988.-С.9-11, 65-69.

5. Бастен А., Крофт С. Фактор переноса: клиническое использование и экспериментальные данные // Иммунологическая инженерия / Под ред. Д. Джирша. -М.,Медицина, 1982.-С. 105-148.

6. Бернет Ф. Клеточная иммунология .-М.: Мир,1971.-С. 542.

7. Брондз Б.Д. Т-лимфоциты и их рецепторы в иммунологическом распозновании.-М.:Медицина,1987.-С.З,4,85,233,305.

8. Бучвальд С., Перепечкина Н.П., Салов В.Ф., Мац А. Н. Местный специфический иммунный ответ к белку A Staphylococcus aureus в лимфоидной ткани миндалин человека //ЖМЭИ.-1985.-№5.-С. 78-83.

9. Вершигора А.Е. Общая иммунология. Киев: Высшая школа 1989-С.520-523.

10. Грин М. И., Шаттен С., Бранберг Д.С. Реакция гиперчувствительности замедленного типа // Иммунология. М., 1989.-Т.З.-С.152.

11. Майер В., Валаскова М.И. др. Концентрирование мышиного антигенспецифического фактора переноса с известной активностью //Acta Virol.-1983.-Т.27, №3.-С.228-237.

12. Мац А.Н., Перепечкина Н.П. Аффинолейкин биофармацевтический препарат для инструктивной противоинфекционной иммунотерапии при недостаточности клеточного иммунитета // Микробиологический журн.-1998.-№ 2.-С.78-83.

13. Петров Р.В., Хаитов P.M., Пинегин Б.В. и др. Оценка иммунного статуса человека при массовых обследованиях, методические рекомендации для научных работников и врачей практического здравоохранения // Иммунология.-1992.-№6.-С. 51-62.

14. Погодина В.В., Левин Л.С., Перепечкина Н.П., Мац А.Н. Влияние препаратов специфического и неспецифического трансфер-фактора на течение экспериментального клещевого энцефалита // Вопр. вирусологии.-1989.-№8.-С.689-693.

15. Серов В.В., Кактурский Л.В. Гиперчувствительность замедленного типа М.: Архив патологии, 1973.-C.3-19.

16. Фримель X., Брок И. Основы иммунологии.- М. Мир:1986.-С.127-128.

17. Шивинда А.Э., Степанюк О., Скибицкий В.Г., Получение, тестирование и перспективы использования диализированного экстракта лейкоцитов, содержащих фактор переноса // Науковий вюник Нацюнального аграрного уыверситету.- Киев., 1998. Вип.- 6.-С. 94-101.

18. Шивинда А.Э Получение антигенспецифического ДЭЛ против ротавирусного и эшерихийного антигенов // Животноводство Украины.-1998.-№2.-С.16.

19. Шивинда А.Э Об индукции специфической резистентности и других факторов иммунитета при помощи ДЭЛ // Ветеринарна медицина Украини.-1998.- №4.-С.14-15.

20. Шредер И., Лоуренс У. Выделение фактора переноса // Иммунологические методы / Под ред. X. Фримеля М., Мир,1979.-С.187-194.

21. Шредер И., Перепечкина Н.П., Мац А.Н., Медуницын Н.В Адъювантные свойства препаратов трансфер-фактора из лимфоцитов миндалин человека // ЖМЭИ.-1979.-№2.-С.103-108.

22. Шиши В., Хайкене X. Кожные реакции замедленного типа // Иммунологические методы. М„ 1987.-С.342-348.

23. Шмидтмайерова X., Черман И., Рей Ф. Ингибирование вируса иммунодефицита человека ультрафильтратом лизированных лейкоцитов // Acta Virol.- 1990,- Т.34.-С.262-270.

24. Юшкова Т.А., Юшков В.В Иммуномоделирующая активность трансфер-факторного препарата трансфлавина, специфичного вирусу клещевого энцефалита //ЖМЭИ.- 1998.-№2.-С.83-85.

25. Ablash D.V.,Kruegtr G.R.,Levine Р.Н. et.al. In vivo effects of human herpes virus-6 (HSV) specific Transfer Factor in two patients with chronic fatigue sundrome // X lnt.Symp. of Transfer Factor: Abst. Book. Bologna. 1995.-P.18.

26. Annamalia A.E., Pal P.K., Colman R.F. Purification of nucleoside peptides by chromatography on dihydroxyboryl substituted polyacrylamide and cellulose animal // Anal. Biochem.-V.99.- P. 85-91.

27. Arala-Chaves M. P., Klesius P. H., Fudenberg H. H. Evidence for specific and non-specific effects of dialyzable leukocyte extracts (containing transfer activity) in mice // Immune Regulators in Transfer Factor. New York-1979.- P.15-26.

28. Arala-Chaves M. P., Lebaco L. G., Heremans I.F. Fractionation of human leukocyte exstracts transferring delayed hypersensitivity to tuberculin // Int. Arch. Allergy appl. / Immunol -1967.- V.31 .-P.353-356.

29. Arala-Chaves M.P., Ramos M.f Rosado R., Branco P Transfer factor "in vitro". Additional data concerning a new method // Int. Arch. Allergy Appl. / Immunol .-1974.-V.46.-P.612-618.

30. Arala-Chaves M. P., Rui Proenca and Miguel de Sousa. Transfer factor in case of complex immunodeficiency // Cell. Immunology. -1974.- V.10.-P.317-379.

31. Arala-Chaves M.P., Silva A., Porto M., Picoto A. In vitro and vivo studies of the target cell for dialyzable leukocyte extracts: Evidence for recipient specificity //Clin. Immunology and lmmunopathology.-1977.-№8.-P.430-447.

32. Arrenbrecht S., Aker O., Dubs R. et.al. Transfer factor in rats. // Immune Regulators in Transfer Factor / Eds. Khan A. et.al. New -York ets, 1979.-P.643.

33. Ascher M.S., Shneider W.I., Valentine F.T. In vitro properties of leukocytes dialysates countaining transfer factor// Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1974.- V.71.-P.1178.

34. Barnet K.p Vasek A., Cech K., Pakarek I. The effect of fractions of DLE-TF on GM-progenitors of haemopoetic cells in vitro. // X Int. Symp.of transfer factor: Abstr. Book.- Bologna ,1995.- P.9.

35. Bennett R.M., Gabor G.T., Merritt DNA binding to human leukocytes: evidence for receptor-mediated association and degradation of DNA // Clin lnvest.-1985.- V.76.- P.1.

36. Bennett R.M., Hefeneider S.H., Bakke A., et.al. The production and characterization of murine monoclonal antibodies to a DNA receptor on human leukocytes// Immunology. 1988.-V.140. P.2937.

37. Bhardwaj N. Brummer E., Foster U Transfer of DTL to SK-SD and tetanus, toxoid in BALB mice by Transfer Factor preparated from purified subpopulations-of murine lymphocytes // Immune Regulators in Transfer Factor.- New -York ets.- 1979.-P.285.

38. Bisutti L., Blotta A., Mastrorille M. Transfer factor adjuvant therapy in nonsmall cell lung carcinoma (NSCLC) after surgery radiotherapy // Exp. Pathol.-1987.-V.3, №4.- P.565-568.

39. Blume M.R., Rosendaum E.N., Cocher R.I. Dialyzable leukocyte extracts (specific and adjuvant) against disseminated melanoma // Cancer.-1981.- V.47, №5.-P.11-16.

40. Borisova E.V., Cheusova Z.V., Lobo A.A., Borisov V.A The suppression of the T-effector and Transfer Factor by Salmonella lipopolysacharide // X Int. Symp.of Transfer Factor: Abstr. Book.- Bologna, 1995.-P.15.

41. Borkowsky W., Lawrence H. Effects of human leukocyte dialyzates containing transfer factor in the direct Leukocyte Migration inhibition (LMI) / Specifity of Transfer Factor // Nature -1976.-V.262.-P.155-156.

42. Buchwald S., Perepechkina N., Salov V., Mats A. The local specific immune response to Staphylococcus aureus protein A in human tonsillar lymphoid tissue //Microbiol. Epidemiol. lmmunobiol.-1985.-№5.-P.78-83.

43. Bukowski R.M., Deodhar S., Hewlett J.S., Greenstreet R. Randomized controlled trial of transfer factor in stage (malignant melanoma ) // Cancer. -1983.-V.51, №2.-P.269-272.

44. Burger D.R., Klesius P.H., Vandenberk A.A., et al. Transfer of keyhole limpet hemocyanin dermal reactivity to man with bovine Transfer Factor // Cell.lmmunol.-1979.-V.43.-P.192-196.

45. Buchwald S., Schroder I., Mats A., Perepechkina N. Leukocyte dialysates and transfer factor.- Bratislava, 1987. -P. 305-313.

46. Burger D., Vanderbark A., Vetto R. Human Transfer Factor: specificity and structural models // Immunobiology of Transfer Factor / Eds. Kirkpatrik D., Burger H., Lowrence. -New-York, 1983.-P.33-42.

47. Burger D., Vandenbark A., Daves D Human Transfer Factor: fractionation ^ and biological activity// lmmunol.-1976.-V.117, №3.-P.789-796.

48. Burger D., leter W. Cell-free passive transfer of delayed hypersensitivity to chemicals in guinea pigs // Infect. lmmunol.-1971.-№4.P.575.

49. Cabera-Quiroga RM Estroda Parra S.f Padierna-Olivos L. Effects of DLE in patients with herpes // Research and Application of Transfer Factor and DLE / Huo Bao Lai, Wang Ru-Zhan, Zou Zhao Fen.-Beijing(China), Xucyuan. Press. -1989.-P.292-305.

50. Carey I., Leberman M., Toossi Z. Augmentation of skin test reactivity and lymphocyte blastogenesis in patients with AIDS treated with Transfer Factor // JAVMA .-1987.-V.275, № 5.-P.651-655.

51. Carey I., Leberman M Treated of AIDS with transfer factor // JAVMA V.258,24.-P.3515-3516.

52. Cech T. The chemistry of cell splicing of RNA and RNA enzymes // Science.-1987.-V.235.-P.1531.

53. Capman S., Kirkpatrik C. The two step leukocyte migration inhibition factor (LIF) .It is use in evaluation of cellular immune function in patients with immunodeficiency diseases // Cell. Immunol.-1978.-V.37.-P.209-220.

54. Cilchirst G., Ivins I., Ritt R. Adjuvant therapy for nonmetastatic octeogenic sarcoma: an evaluation of Transfer Factor versus combination chemotherapy //

55. Cancer Treat Rep.-1978.-V.62, № 2.-P.289.

56. Clausen I. The agarose migration technique for in vitro demonstration of cell mediated immunity in man // Danish. Med. Bull. -1975.-V.22.-P.181-194.

57. Clinton B., Magoc T. Leshmania enrietti infections in guinea pigs Transfer Factor obtained from convalescent yet immune animals // Transfer Factor: Basic Properties and clinical Applications / Eds. Ascher M, Gottlieb A.- New York,.-1976.-P.709.

58. Corrado F., De Vinci C., Corrado G., Pizza G. Immunotherapy of renal cellcarcinoma // Clinical and Experimental Developments / Eds. Debruyn M.-Berlin, 1991.-P.105-125.

59. Clowle A. Delayed hypersensitivity in the mouse // Adv.lmmunol.-1975.-V.20.-P. 197-264.

60. Debruyn M., Cornu G., Heremans Bracke T. Dialyzable leukocyte extracts in treatment of childhood leukemia // Haematology.-1976.-V.44, №2.-P.243-247.

61. De Corgolas M., Verdejo M., Fernandez M. Therapeutic approaches to cryptosporidiosis. A review of the literature // Rev. Clin. Res. Esp. -1993.-V.193.-№6.-P.322-328.

62. Delgado R., Romano E., Beffort E. Dialyzable leukocyte extract therapy in immunodepressed patients with cutaneous leishmaniasis // Clin. Immunol, and lmmunopathoI.-1981.-V.19.-P.351.

63. Dunnick W., Bach F. Guinea-pig "Transfer Factor in vitro". Physical and chemical properties and partial purification // Transfer Factor: Basic, properties and clinical applications / Eds. Asher M., Gottlieb A., Kirkpatrik C.- New York, 1975.-P.185.

64. Dwyer J.M. Transfer Factor revisited in the age of molecular biology // X Int. Symp. of Transfer Factor: Abstract Book. Bologna, 1995.-P.42.

65. Eichberg I., Steell R., Katler S. Cellular immunity in gnotobiotic primates induced by Transfer Factor // Cell. Immunol. -1976.- V.26.-P.114.

66. Fazio M., Camevale-Schianca F., Sabidussi A. Serial in vitro transfer of hypersensitivity to cancer antigens by sensitised lymphocytes // Panminerva med.-1995.-V.37.-P.386-389.

67. Fazio M., Negri L., Mostromatteo V. Osteosarcoma specific transfer factor: preliminary clinical results // Exp. Pathol. -1987.-V.3, №4.-P.250-254.

68. Fellowes R., Lehner T. An investigation of the T-cell requirements of In vitro antibody forming B-cell detected by the ELISPOT assay and a comparison with antibody synthesis // Immunol. Methods.-1990.-V. 132.- P171.

69. Fudenberg H. Ophtalmologic herpes zoster: complete remission in six hours with dialyzable Transfer Factor//Clin. Lab. lmmunol.-1985.-V.18.-P.49-51.

70. Fudenberg H., Levin V. The therapeutic uses of Transfer Factor (Invited review) II Hosp. Pract.-1974.-V.9.-P95-104.

71. Fudenberg H., Pizza G.Transfer Factor- new frontiers // Progress in Drug Research.-1994.-V. 42.-P.309-400.

72. Fudenberg H. Transfer Factor: Past, present, future // Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol -1989.-V.29. -P. 475-516.

73. Fudenberg H., Spitler L., Levin A. Treatment of immune defiance //Pathology. 1972.-V.69.-P.529-536.

74. Fudenberg H.H., Fudenberg H.L. Transfer Factor: past, present, future // Research and applications of Transfer Factor and DLE / Eds. Huo D., Wang R., Zou Z.-Beijing (Chine),-1989.-P.551-598.

75. Fudenberg H., Tsang K. Theories and models in cellular transformation.-New-York : London: Acad. Press, 1985.-P.23-34.

76. Fudenberg H., Tsang K. In utero osteosarcoma tolerized hamster: a model for human cancer and immunocyte differentiation // Theories and Models in Cellular Transformation / Saanti L., Zardi L- London, 1985.-P23-43.

77. Fujisawa T., Yamaguchi Y., Kimura H. Randomized controlled trial of transfer factor immunochemotherapy as an adjunct to surgical treatment for primary adenocarcinoma of the lung // Jap. J. Sung.-1984.-V.14, № 6.-P.452-458.

78. Galbraith G., Fudenberg H. Transfer Factor// Dermatology, Immunology and Allergy .-1985 .-V.3.- P.889-898.

79. Giambione i., Klesius P. Adoptive transfer of delayed wattle reactivity in chickens with dialyzable leukocyte extract containing Transfer Factorl 983 //Poultry Sci.- 1983.-V.62, №5. -P.767-777.

80. Goldenberg G. J., Brandes L. J, Lau W. H., et al. Cooperative trial of immunitherapy for nasopharyngeal carcimoma with transfer factor from donors with Epstein-Barr virus antibody activity // Cancer Treat. Rep. -1985.-V.69, № 7-8.-P.761-767.

81. Goldenberg G., Brandes L. Transfer Factor in treatment of nasopharyngeal carcinoma // Cancer Res. -1976.-V.36.- P.720-724.

82. Gonzalez R.f Wong P., Spitler L. Malignant melanoma: Dialyzable leukocyte extract -possible solution? // Cancer.-1980.-V.45, №1.- P.57-61.

83. Goust I., Marescot M., Lesourd B., Doumercq S. Characterization of human dialyzable transfer factor from normal and chronic lymphoid leukemia sources // Biomedicine .-1976.-V.24.- P.39.

84. Hainaid I., Dormont D., Haguesuer G., et. al. Immunobiology of Transfer Factor / Eds. Kirkpatrick et.al. -New-York, 1983.- P.273-277.

85. Hana N. Stara I., Bogyszava I. Results of long-term treatment of recurrent anteriors uveitis by Transfer Factor // X Int. Symp.of Transfer Factor: Abstr. Book.- Bologna, 1995.- P.32.

86. Hancock N., Bruce L., Sokal R., Clark A Transfer Factor in Hodgkin- s disease :A randomized clinical and immunolodical study // Cancer Clin. Oncol. -1986.-24.-№ 5.-P.929-933.

87. Heinonen E., Grohn P., Tarkkanen I. Transfer Factor in Hodgkin- s disease // Immunology .-1985.- № 11.-P.73-79.

88. Hoffman P., Sputler L., Hsu M.f Fudenberg H. Leukocyte migration-inhibition in agarose // Cell. Immunol.- 1975.-V.18,- P.20-21.

89. Ivins I., Ritts R., Pritchard G. Transfer Factor in treatment of osteosarcoma: a randomized double blind study // Ann. New York. Asad.Sci.-1976.-P.558.

90. Karhumaki E., Marnela K., Krohn K. Chromatographic and enzymatic effects on Transfer Factor like activity from human leukocytes and porcine spleen dialyzate // nt. J. Biochem.-1988.-V. 20, №10.-P. 1067-1072.

91. Kirkpatrick C., Burger D., Lawrence H Immunobiology of Transfer Factor. -New York: Academic. Press. -1983.

92. Kirkpatrick C., Greenberg L. Treatment of chronic mucocutaneous candidiasis with Transfer Factor // Immune regulators and Transfer Factor / Khan A., Kirkpatrick C., Hill N.- New-York, 1979.-P. 97-105.

93. Kirkpatrick C., Hamax A., Morton L. Murine transfer factor: dose response relationships and routes of administration // Cell. lmmunoi.-1995 .-№2.-P203-206.

94. Kirkpatrick C.H., Smith T.K. Specific and non-specific activities in dialyzable Transfer Factor II Symposium II leukocyte culture conference.-Tucson, 1976.-Arizona.

95. Kleisius P., Fudenberg H. Bovine Transfer Factor: in vitro transfer of cell -mediated immunity to cattle with alcohol precipitates // Clin. Immunol and Immunopathol .-1977.-V.8.- P.238-246.

96. Kleisius P., Kirkpatrick C. Dialyzable leukocyte extract containing transfer factor its future in veterinary medicine // Immunoblology of Transfer Facnor / Eds. Kirkpatrick C. H., Lawrence H.S., Burger D.R.- New - York.- 1983.-P.129-142.

97. Kleisius P., Quails D., Elston A., Fudenberg H. Effects of bovine transfer factor in mouse coccidiosis (Eimeria ferrlsi) // Clin. Immunol and Immunopathol.-1978.-V.10.-P.214-221.

98. Kleisius P., Kristenson F., Ernst I., Kramer T. Bovine transfer factor: Isolation and characteristics // Transfer Factor: Basic Properties and Applications / Eds. Ascher M., Gottlirb A., Kirkpatrick C.-New-York -1976.-P.311.

99. Komatsu T. Effects of dialyzable leukocyte extracts (DLE) and inosine on stimulated lymphocytes // Bull. Tokyo Med. Dent. Univ.-1989.- V.36, № 3.-P.35-40.

100. Lawrence H. The cellular transfer of coetaneous hypersensitivity to tuberculin in man // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. -1949.- V.71.- P.516-522.

101. Lawrence H. The transfer in humans of delayed skin sensitivity to streptococcal M substance and to tuberculin with disrupted leukocytes // Clin. Invest.-1955.-V.32.- P.219-230.

102. Lawrence H. Transfer Factor // Adv. Immunol. / Eds. Dixon F., Kunkel H. -New York, Asad. Press.-1969.-V. 11.-P. 159-266.

103. Lawrence H., Valentine T. Transfer Factor in delayed hypersensitivity // Ann. New York.-1970.-P.169,269.

104. Lawrence H. Transfer Factor in cellular immunity // The Harvey Lectures Series 68.-New-York. -1974.-V.126.-P.486-489.

105. Lawrence H. Deletion of antigen-specific activity from leukocyte dialysate containing Transfer Factor by antigen-coated polisterine II Immunology. -1981.-V.126.-P.486-489.

106. Lawrence H., Pappenheimer A. Transfer of delayed hypersensitivity to diphtheria toxin in man // Exper. Med. -1956.-V.104.-P.321.

107. Lee W., Holley H., Stewart I., Galbraith G. Refractory esophageal candidiasis associated with a plasma inhibitor T-lymphocytes function: Response to plasma exchange//Amer .J. Med. Sci.-1986.-V.292.-P.47-54.

108. Levin A., Byers V. Osteogenic sarcoma immunologic parameters before and during immunotherapy with tumor specific transfer factor // Clin. Invest.-1975.-V.55.-P.487.

109. Levine P., Pizza I., Cannon G. Transfer Factor as an immunostimulator in nasopharyngeal carcinoma / Eds. Grundmann et.al.-Stuttgart, New-York.-1988.-V.5.-P.137-168.

110. Lewis D.E., Cramer J. D., Reed R. E. Detection of a new protein component In canine plasma after transfer factor administration: correlation with delayed -type skin reactivity // Immune Regulators in Transfer Factor. New-York.-1979.-P. 93-116.

111. Li Z. Studies on porcine spleen cell dialysate: experimental application of Transfer Factor in veterinary and human medicine // Leukocyte Dialysates and Transfer Factor / Eds.Mayer V., Borvak J. Inst. Virol., Slovak, 1987.-P. 478-490.

112. Liburd E., Pabst H., Armstrong W. Transfer factor in rat coccidiosis // Cell. lmmunol.-1972.-№ 5.- P.486-489.

113. Littman B., Rocklin R., Parkman R., David I. Transfer factor treatment of chronic mucocutaneous candidiasis : requirement for donor reactivity to Candida antigen//Clin . Immunol, and Immunopathol.- 1987.-V. 9.-P. 97-103.

114. Lokaj I. Dialysate of leukocyte homogenate in the treatment of sepsis // Bratisl .Lek. Listy. -1988- V.89, № 8.- P.586-590.

115. Louie E., Borcowsky W., Klesius P. et. al. Treatment of cryptosporidiosis with oral bovine transfer factor // Clin. Immunol, and Immunopathol .-1987.-V.44, №3. P.329-334.

116. Lukacs K., Kavai M., Berenyi E. Early stades of Hodgkin's diseases and transfer factor//Haematologia Buolap.- 1985.-V.18.-P. 105-110.

117. Maddison S. E., Hickriin M. D, Conway B.P., Kagan I.G. Transfer Factor: delayed hypersensitivity to Schistosoma mansoni and tuberculin in Macaca mulatta // Science.-1972.V.178.-P.757.

118. Maddison S. E., Hickriin M. D., Kagan I. G. Schistosoma mansoni reduction in clinical manifestation and in worm burdens conferred by serum and transfer factor from immune on normal rhesus monkey // Exp. Parasitol.-1976.-V.39.-P.29-39.

119. McMeeking A., Borkowsky W., Klesius P. A controlled trial of bovine dialyzable leukocyte extract for cryptosporidiasis in patients with AIDS // Infect. Dis.-1990.-V.161 .-P. 108-112.

120. Meduri R., Campos E., Scorolly L. The transfer factor in recurrent herpetic keratitis and kerato-uveitis // X Int. Symp. on Transfer Factor : Abst. Book.-Bologna.1995.-P.31.

121. Metcalf I., lohn I., Wilson G. Mycobacterium fortuitum pulmonary infection associated with an antigen-selective defect in cellular immunity // Amer. J. Med.-1981.-V.71.-P.485.

122. Mikula I. Stabilization of Salmonella-specific dialyzable leukocyte extracts // Vet. Immunol, and lmmunopathol.-1993.-V.32, №1/2.-P.103-112.

123. Mikula I Dialyzable leukocyte extract used in the prevention of Salmonella infection in calves // Vet. Immunol, and Immunopathol .-1993.-V.32, №1/2.-P. 113-124.

124. Miller L., Spitler L., Allen R., Mitor D. A randomized double-blind, plasedp-controlled trial of transfer factor as adjuvant therapy for malignant melanoma // Cancer.-1988.-V.61, № 8.-P.1543-1549.

125. Montie I., Borkowski R., lames R. A clinical review of immunotherapy of disseminated renal adenocarcinoma//Sung. Oncol.-1982.-V.21, № 1.-P.5-8.

126. Mydill. I. Transfer Factor as an immunomodulator in Hodgkin's disease//Cheek. Pediatr.-1991.-V.46, №5.-P.105-109.

127. Neidhart I., Schwartz P., Myrphy S. Transfer Factor: Isolation of a biologically active component // Cell.lmmunol.-1973.-V.9.-P.319-323.

128. Nelson D. Macrophages and Immunity.-Amsterdam, 1969.

129. Nkrumah F., Pizza G., Neequaye J. Transfer Factor in prevention of Burkitt's lymphoma relapses // Limphokine Res.-1985.-V.4, №3.-P.237-241.

130. O'Dorisio N. Niedhart I., Lo Buglio. A . Identification of hypoxantine as a major component of chromatografically prepared transfer factor // Transfer

131. Factor: Basic Properties and Clinic Applications / Eds. Ascher M., Ascher A., Gottied A., Kirkpatrick .- New-York, 1976.-P215-224.

132. Oetteg H., Old L., Farrow J. Transfer factor in mastitis: a preliminary results // Clin. lnvest.-1971.-V.50.-P71-74.

133. Pekarek I., Cech K., Barnet K. The clinical use of specific transfer factor // Recent advances in Transfer Factor and dialyzable leukocyte extracts .-Tokyo, 1992.-P.256-263.

134. Percopo V., Taddeo F., Cobellis L., Tesauro B. Immunostimulation in sepsis//Ann. Hal. Chir.- 1994.-V.65, №1.-P45-48.

135. Perepechkina N., Raikher L.t Parhomenko T. Differential ultrafiltration as a main method of purification of transfer factor preparations // X Int. Symp. on Transfer Factor: Abstr. Book.-Bologna, 1995.-P.60.

136. Pizza G., De Vinci G., Viza D. et. al. Orally administrated HSV specific transfer factor prevents genital or labial herpes // X Int. Symp. on Transfer Factor: Abstr. Book.-Bologna, 1995.-P.29.

137. Pizza G., Meduri R., De Vinci C. Transfer Factor prevents relapses in herpes keratitis patients. A pilot study // Biotherapy.-1995.-V.8.-P.63-68.

138. Pizza G., Viza D., Corrado F. Effects of in vitro produces transfer factor on the immune respons of cancer patients // Eur. J. Cancer.-1977.-V.13.-P.917-923.

139. Pozdnyakova V., Maichuk Y., Pozdnyakov V., Matz A. Transfer Factor preparation " Affinoleukin" in the therapy of ophtalmoherpes with a tendency to take a prolonged course // X Int. Symp. on Transfer Factor: Abstr. Book.-Bologna, 1995.-P.33.

140. Qi H., Zhu X . HSV-1 specific transfer factor for treatment of herpes simplex keratitis // Recent advances in Transfer Factor and Dialysable Leukocyte Extracts / Eds. Fujisawa S., Sasakawa S., Jikura Y. -Tokyo, 1992.-P.227-230.

141. Radosevich I., Scott G., Olson G. Delayed type hypersensitivity responses induced by bovine colostral components // Amer. J. Vet. Res. -1985.-V.46,№4.-P.875-878.

142. Rapaport F., Millar I., Pappagianis D., Smith G. Transfer of delayed hypersensitivity to coccidioidin in man // Immunology. -1960.-V.80.-P.358-367.

143. Robert S., Holzman G.f Sherwood R. In vitro augmentation of lymphocytes sheep rosette formation by leukocyte dialyzates // lmmunology.-1977.-V.118.-P.5.

144. Rosenberg A., Lotze M., Muul L. Transfer factor in disseminated adenocarcenoma// New. Eng. J. Med.- 1987.-P.1223-1230.

145. Ross I., Halliday W. Investigation of transfer factor activity in the transfer of immunity to Trichostongylus acei infections in sheep // Res. Vet. Sci.-1979.-V.26.-P.41-46.

146. Rozzo S., Boymel I., Kirkpatrick C. Composition and purification of transfer factor // Recent advances of Transfer Factor and dialysable leukocyte extracts / Eds. Fujisawa T.-Tokyo, 1992.-P. 11-22.

147. Salaman M. The state of Transfer Factor // Immunology today.-1982.-P.3-4.

148. Scroder I., Rovensky I. In vitro determination of effects of dialysable leukocyte extracts containing transfer factor activity // Allergology.-1982.-V.10.-P.171.

149. Schu Z., Sicai S. Survey on the specific immune activity of oral antihepatic B placenta transfer factor // X Int. Symp. on Transfer Factor: Abstr. Book.-Bologna, 1995.-P.26.

150. Schwartz R., leter W. Oral administration of human dialysable transfer factor in patients with psoriasis //Arch. Dermatol.-1981.-V.117.-P.3-4.

151. Schwarz M„ Gutterman J., Burgess M. Dialysable leukocyte extracts in malignant melanoma: a double-blind study// Cancer.-1980.-45.-P.250-256.

152. Sharma M., Aharaki F., Ala F. Preliminary results of transfer factor therapy of persistent coetaneous leishmania infection // Clin. Immunol, and Immunophatol. -1979.-V.12.-P.183-187.

153. Sharma M., Firouz R., Ala F. Transfer factor therapy in human cutaneous leishmania (CLI): A double-blind clinical trial // Immune Regulators and Transfer Factor / Eds. Khan A., Kirkpatrick C., Hill N.- New-York, 1979.-P.563-570.

154. Shifrine M., Thilsted I. Canine transfer factor // Transfer Factor: Basic, Properties and Clinical Applications / Eds. Asher M., Gottlieb A., Kirkpatrick C.1. New-York, 1976.-P.349.

155. Sirianni M., Fiorilli M., Pana A., et al. In vitro transfer of specific reactivity to cytomegalovirus and Candida to cord blood leukocytes with dialysable leurocyte extracts//Clin. Immunol. Immunopatho!.- 1979.-V.14.-P.300.

156. Smith G., Morse P., Deraps G. Treatment of disséminât mastitis using specific and nobspecific transfer factor// Surgery .-1973.-V.74.-P.59-63.

157. Snirc I., Mikula I., Pistl I. The introduction of specific protection against Actinobacillus pleuropneumoniae infection by specific DLE // Acta. Microbiol. Hung.-1993.-V.40, №4.-P.325-333.

158. Soborg M., Bendixen G. Human lymphocyte migration as a parameter of hypersensensitivity. Acta med. Scand.- 1967.-P.181, 247-256/

159. Spitler L., Levin A., Stites D., Fudenberg H. The Wiskott- Aldrich syndrome results of therapy II Clin. Invest.-1972.-V.51 .-P.3216.

160. Spitler L., Levin A., Fudenberg H. Transfer Factor: Results of therapy // Primary Immunodeficiency Diseases in Man / Eds. Bergsma D., Good R., Finstad F., Paul N.-Birth. New-York, 1975.-V.11, №1 .-P.449-456.

161. Spilter L., Webb D., Muller C., Fudenberg H. Studies on the characterization of Transfer Factor // Clin. Invest.-1973.-V.52.-P.80.

162. Steele R., Myers M., Vinsent M. Transfer factor of the prevention of varicella zoster infection in childhood leukemia// New. Engl. J. Med.-1980.-V.303.-P.55.

163. Tsang K., Fudenberg H. Transfer factor and other T-cells derived factor (non-LKS) // Spriger Seminars in Immunopethology .-1986.-V.8.-P.4-12.

164. Tsang K., Fudenberg H., Pan I. Transfer of osteosarcoma specific cellmediated immunity in hamsters by rabbit dialyzable leukocyte extracts // Cell. lmmunol.-1985.-V.90.-295-302.

165. Turk I. Delayed hypersensitivity. Amsterdam, 1967.

166. Urbach F., Sones M., Israel H. Passive transfer of tuberculin sensitivity to patients with sareoidiosis // New. Engl. J. Med.-1952.-V.247.-P.794.

167. Vassali P., McLusky R. Inflammation, immunity and hypersensitivity. New-York: Harper.-1971 .-P. 179.

168. Vershigora A., Lyubchenko T., Goleva E. Human specific transfer factor of cell-mediated immunity to Staphylococcus antigen substances // X Int. Symp. of Transfer Factor: Abstr. Book.-Bologna, 1995.-P.14.

169. Vetto R., Burger D., Nolte I., Vandenbark A. Transfer factor immunotherapy in cancer // Transfer Factor: Basic, Properties and Clinical Applications / Eds. Ascher M., Gottlieb A., Kirkpatrick H.-New-York, 1976.-P.523-536.

170. Viza D. Specific transfer factor for the treatment of AIDS // X Int. Symp. of Transfer Factor: Abstr. Book.-Bologna, 1995.-P.5.

171. Viza D., Lefesire A., Parrasco M. A preliminary report on three AIDS patients treated with anti-HIV specific Transfer Factor// Exp.Pathol.-1987.-V.3, №4.-P.653-659.

172. Viza D., Rosenfeld F., Philips I., Davies D. Specific bovine transfer factor for the treatment of herpes infections // Immunobiology of Transftr Facnor / Eds. Kirkpatrick C., Lawrence H., Burger D. -1983. New York, P.245-260.

173. Viza D., Vich I., Philips I. Use specific transfer factor for the prevention or the treatment of herpes infection in mice and man // Exp. Pathol.- 1987.- V.3.- P. 407-420.

174. Viza D., Vich I., Philips I. Specific transfer factor protects mice against lethal challenge with herpes simplex virus // Cell. Immunol.-1986.-V.100.-P.555-562.

175. Volita A. Studies on the chemical nature of dialyzable transfer factor comparison of human leukocyte dialysate and dialysates derived from human serum and from mammalian lymphoid and non-lymphoid organs // lmmunobiology.-1979.-V.156.-P.353.

176. Wesley A., Dunnick I., Fritz H. Specifity and structural analysis of a guinea pig Transfer Factor-like activity// lmmunology.-1976.-V.18.-P.1944-1950.

177. Whyte R., Shork M., Sloan H. Transfer factor in bronchogenic carcinoma:a long-term follow-up//Ann. Thorax. Sung.-1992.-V.53, №3.-P.391-396.

178. Wilson G., Fudenberg H. Leukocyte migration inhibition as a method of assaying of transfer activities // Lymphokines / Eds. Pick E., Landy M.-1981.-V.4.-P.107.

179. Wilson G., Fudenberg H. Is controversy about transfer factor therapy nearing an end // Immunol. Today.-1983.-V.4.-P. 157-161.

180. Wilson G., Fudenberg H., Bahm V. Distinct components in dialyzable leukocyte extracts (DLE) have specific and non-specific effects on cellular immunity as shown by leukocyte migration inhibition // Trans. Assoc. Am. Physicians.-1978.-V.91 .-P.294.

181. Wilson G., Fudenberg H., Paddock G. Detected of dialyzable transfer factor in vitro. Structural and chemical characterization of the activity specific for tuberculin//Ann. New-York. Acad. Sci.-1979.-V.332.-P.579.

182. Wilson G., Paddock G., Fudenberg H. Bovine transfer factor an oligoribonucleotide which initiates antigen-specific lymphocyte responsiveness // Thymus.-1982.-V.4.-P.335.

183. Wilson G., Poidexter CM Fort I., Ludden K. De novo initiation of specific cellmediated immunity responsiveness in chickens by Transfer Factor (specific immunity indices) obtained from bovine colostrum and milk // Acta Virol.-1988.-V.32.-P.6-18.

184. Wilson G., Welch T., Fudenberg H. A component in human dialyzable Transfer Factor that induces delayed hypersensitivity in guinea-pigs // Clin. Immunol and Immunopathol.- 1977.-V.7.-P.189.

185. Wolf R., Fudenberg HM Gilliam I. Transfer factor therapy in a case of pemphigus vegetans associated with chronic mucocutaneous candidiasis // Clin. Immunol and Immunopathol .-1978.-№ 10.-P.292-297.

186. Wybran I., Levin A., Spitler L., Fudenberg H. Rosette forming cells: immunologic deficiency diseases and Transfer Factor // New. Engl. J. Med.-1973.-V.288.-P.710-713.

187. Xiu-Ying Z. Observation of curative effect on brucella specific Transfer Factor for the milk cows with brucellosis // Current researches in Transfer Factor // Eds. Zou Zhao Fen., Huo Bai., Lai Beijing, Chine.-1993.-P.187-194.

188. Xong W., Huo Bai Lai. The clinical test summarization of pain peptide oral liquor (DLE-TF) on the treatment of chronic hepatitis B /IX Int. Symp. on Transfer Factor: Abstr. Book .-Bologna, 1995.-P.25.