Получение биоаналитических реагентов на основе полимерно-капсулированных полупроводниковых (CdSe)ZnS нанокристаллов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат химических наук Сизова, Светлана Викторовна

• Сизова, Светлана Викторовна
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Сизова, Светлана Викторовна

ВВЕДЕНИЕ.б

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ ПОЛУПРОВОДНИКОВЫЕ НАНОКРИСТАЛЛЫ ДЛЯ БИОЛОГИИ И МЕДИЦИНЫ.

1.1 Синтез полупроводниковых НК.

1.2 Оптические свойства НК.

1.3 Способы гидрофилизации полупроводниковых нк./.

1.3.1 Перевод НК в водную фазу посредством замещения ТОФО бифункциональными тиолсодержащими лигандами.

1.3.2 Перевод НК в водную фазу посредством гидрофобных взаимодействий между молекулами ТОФО и гидрофобными группами амфифильных полимерных молекул.

1.3.3 Включение НКв полимерные микросферы.

1.4 Способы иммобилизации биологических молекул на флуоресцентные НК.

1.5 Применение полупроводниковых НК в биологии и биотехнологии.

1.5.1 Использование НКв иммуноанализе.

1.5.2 Применение полупроводниковых НК в генных технологиях.

1.5.3 Мечение клеток и клеточных рецепторов.

1.5.4 Методы, основанные на резонансном переносе энергии флуоресценции(РЯЕТ).

1.5.4.1 РКЕТ-спектроскопия.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Получение биоаналитических реагентов на основе полимерно-капсулированных полупроводниковых (CdSe)ZnS нанокристаллов»

Интенсивное развитие широкого класса методов анализа, основанных на использовании различных флуоресцентных меток, сделало их одними из важнейших экспериментальных методов во многих научных дисциплинах. В частности, их применение в биотехнологии и медицине привело к появлению и развитию методов, облегчающих изучение живых клеток и клеточных структур, фундаментальных клеточных процессов и методов регистрации биоспецифических взаимодействий, находящих применение в медицинской диагностике и разнообразных биологических анализах.

В последние годы интенсивно разрабатываются подходы к визуализации процессов на уровне клеток, тканей и целых организмов, основанные на введении специализированных флуоресцентных меток. Одними из наиболее перспективных меток нового поколения являются флуоресцентные полупроводниковые нанокристаллы (НК), состоящие из элементов групп II-VI, III-V и имеющие структуру ядро/оболочка.

Полупроводниковым НК присущи два основных достоинства, отличающие их от органических флуорофоров: 1) широкий набор узких полос флуоресценции, положение которых зависит от диаметра НК и является управляемым параметром при возможности возбуждения излучением с одной длиной волны; при этом длина волны возбуждения может варьироваться для получения максимального отношения сигнал/шум с учетом конкретного изучаемого объекта; 2) высокая фотостабильность НК, в 100-4000 раз превышающая фотостабильность лучших органических флуорофоров. Такие свойства делают НК идеальными флуоресцентными биомаркерами в анализах, основанных на биоспецифическом взаимодействии «лиганд-рецептор» в разнообразных in vitro и in vivo биоаналитических системах, в которых использование традиционных органических флуорофоров ограничено недостаточной фотостабильностью и невозможностью одновременной регистрации в многопараметрических (многоцветных) системах. Кроме того, такие НК весьма перспективны для создания новых флуоресцентных сенсоров, действие которых основано на использовании эффекта резонансной передачи энергии (БКЕТ-эффект). Химический анализ многокомпонентных смесей, в частности, детектирование наличия в смеси определенных ионов металлов, биологических соединений и т.д., и анализ ряда физических параметров, таких как рН, электрохимический потенциал, температура в наномасштабных областях также является потенциальной областью применения данных сенсоров.

НК состава Сс18е/7п8 с диаметром 2-6 нм, используемые в данной работе, являются альтернативой органическим флуоресцентным меткам, традиционно применяемым в биотехнологии и медицине благодаря высокой яркости, возможности получения флуоресценции по всему оптическому диапазону и доступности. Оболочка из широкозонного полупроводника предохраняет флуоресцирующее ядро от влияния окружения и позволяет получить НК с квантовым выходом до 70%.

Одной из основных проблем использования таких флуоресцентных НК является трудность получения биосовместимых, легко конъюгируемых с биологическими молекулами флуоресцентных комплексов на их основе, что ограничивает их применение в медицине и биотехнологии в качестве эффективных флуоресцентных биомаркеров и сенсоров. Для решения указанной проблемы в настоящей работе разработан ряд способов модификации и функционализации поверхности НК для создания высокоэффективных и специфичных флуоресцентных биомаркеров и продемонстрированы примеры их использования в таких видах биоанализа, как реакция латексной агглютинации (РЛА), визуализация клеток и клеточных рецепторов, цитофлуориметрия.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Сизова, Светлана Викторовна, 2009 год

1. 1. Олейников В. А., Суханова A.B., Набиев И.Р. Флуоресцентные полупроводниковые НК в биологии и медицине // Российские нанотехнологии. - 2007.- Т.2.- № 1-2. С. 160-173.

2. Bruchez, M.Jr., Moronne, М., Gin, P., Weiss, S., Alivisatos. A.P. Semiconductor Nanociystals as Fluorescent Biological Labels // Science,- 1998.- V. 281.- p. 20132016.

3. Haugland, R.P. The Handbook A Guide to Fluorescent Probes and Labeling Technologies; Tenth Edition. Invitrogen Corporation // San Diego.- 2005.

4. A.L. Efros, A.L. Efros. "Interband Absorption of Light in a Semiconductor Sphere // Sov. Phys. Semicond.- 1982.- №16.- p. 772.

5. Екимов А.И., Онущенко A.A. Квантовый размерный эффект в оптических спектрах полупроводниковых микрокристаллов. Физика и техника полупроводников//ФШ/- 1982.-Т. 16.-С. 1215-1219.

6. Murray С.В., Norris DJ., Bawendi. M.G. Synthesis and Characterization of Nearly Monodisperse CdE (E = Sulfur, Selenium, Tellurium) . Semiconductor Nanociystallites. II J. Am.Chem. Soc.-1993.-V.l 15.- p. 8706-8715.

7. Peng X., Schlamp M.C., Kadavanich A.V., Alivisatos A.P. Epitaxial Growth of Highly Luminescent CdSe/CdS Core/Shell Nanocrystals with Photostability and Electronic Accessibility. II J. Am. Chem. Soc. -1997.V. 119.- P. 7019-7029.

8. Murray C.B., Kagan C.R., Bawendi M.G. Synthesis and Characterization of Monodisperse Nanocrystals and Close-Packed Nanociystal Assemblies.//^««. Rev. Mater. Sci.- 2000.-V. 30.- P. 545-610.

9. Hines M.A., Guyot-Sionnest. Synthesis and Characterization of Strongly Luminescing ZnS-Capped CdSe Nanociystals HP. J. Phys. Chem. B.- 1996.-V. 100.-P. 468.

10. Baranov A.V., Rakovich Yu.P., Donegan J.F., Perova T.S., Moore R.A., Talapin D.V., Rogach A.L., Masumoto, Y., Nabiev Effect of ZnS shell thickness on the phonon spectra in CdSe quantum dots///. Phys. Rev. B 2003.- V. 68.- P. 165306.

11. Sukhanova A., Devy J., Venteo L., Kaplan H., Artemyev M., Oleinikov V., • Klinov D., Pluot M., Cohen J.H.M., Nabiev I. Biocompatible fluorescent nanocrystalsfor immunolabeling of membrane proteins and cellsIIAnal. Biochem.- 2004.- V. 324, P. 60 67.

12. Henglein A. Small-particle research: physicochemical properties of extremely small colloidal metal and semiconductor particles //Chem. Rev.- 1989.- V. 89.- P. 1861.

13. Alivisatos A.P. Semiconductor clusters, nanocrystals, and quantum dots// Science.- 1996.- V. 271.- P. 933.

14. Nirmal M., Brus L.E. Luminescence photophysics in semiconductor nanocrystals HAcc. Chem. Res. 1999.- V. 32.- P. 407 - 414.

15. Dubertret B., Calame M., Libchaber A.J. Single-mismatch detection using gold-quenched fluorescent oligonucleotides//Nat. Biotechnol- 2001.- V. 19.- P. 365.

16. Elghanian R., Storhoff J .J., Mucic R.C., Letsinger R.L., Mirkin C.A. Selective Colorimetric Detection of Polynucleotides Based on the DistanceDependent Optical Properties of Gold Nanoparticles //Science.- 1991.- V. 277.- P. 1078.

17. De Smet Y., Deriemaeker L., Parloo E., Finsy R. On the Determination of Ostwald Ripening Rates from Dynamic Light Scattering Measurements // Langmuir.1999.-V. 15.-P. 2327.

18. C.W. Chan, S. Nie, Quantum dot bioconjugates for ultrasensitive nonisotopic detection. Science.- 281.- 1998.- P. 2016-2018.

19. Koberling F., Kolb U., Philipp G., Potapova I., Basche T., Mews A. Fluorescence Anisotropy and Crystal Structure of Individual Semiconductor Nanocrystals // J. Phys. Chem. B.- 2003.-V. 107.- N. 30.- p. 7463.

20. T. Kundu, J. Bereiter-Hahn, and I. Karl. Cell Property Determination from the Acoustic Microscope Generated Voltage Versus Frequency Curves UBiophys. J.2000.- V. 78.- P. 2270.

21. Dahan M., Laurence T., Pinaud F., Chemla D.S., Alivisatos A.P., Sauer M., Weiss S. Time-gated" biological imaging by use of colloidal quantum dots. // Opt. Lett.2001.- V. 26.-P. 825.

22. Lounis B., Bachtel H.A., Gerion D., Alivisatos P., Moerner W.E. Photon antibunching in single CdSe/ZnS quantum dot fluorescence //Chem. Phys. Lett.-2000.- V. 329.- P. 399 404.

23. Micic O.I., Cheong H.M., Fu H., Zunger A., Sprague J.R., Mascarenhas A., Nozik A J. Size-dependent spectroscopy of InP quantum dots///. Phys. Chem. B.- 1997.- V. 101.- P. 4904.

24. Prieto J:A., Armelles G., Groenen J., Cales R. Size and strain effects in the E-l-like optical transitions of InAs/InP self-assembled quantum dot structures. //Appl. Phys. Lett. 1999.- V. 74.- P. 99.

25. Hu J.T., Li L., Yang W., Manna L., Wang L., Alivisatos A.P. Linearly polarized emission from colloidal semiconductor quantum rods. //Science.- 2001.- Y. 292.- P. 2060.

26. Efros A.L. Luminescence polarization of CdSe microciystals//Phys. Rev. B.-1992.- V. 46.- P. 7448.

27. Empedocles S.A., Neuhauser R., Bawendi M.G. Three-dimensional orientation measurements of symmetric single chromophores using polarization microscopy //Nature, 1999, v. 399, p. 126.

28. J. Aldana, Y.A. Wang, X. Peng, Photochemical instability of CdSe nanocrystalls coated by hydrophilic thiols //J. Am. Chem. Soc. -2001.- V. 123.- P. 8844-8850.

29. S.F. Wuister, I. Swart, F. van Driel, S.G. Hickey, C. de Mello Donega, Highly luminescent water-soluble CdTe quantum dots //Nano Lett.- 2003.- V.3.- P. 503-507.

30. S. Pathak, S.K. Choi, N. Arnheim, M.E. Thompson, Hydroxylated quantum dots as luminescent probes,for in situ hybridization //J. Am. Chem. Soc.- 2001.-V. 123.- P. 4103-4104.

31. H.M. Mattoussi J.M, E. Goodman, G.P. Anderson, V.C. Sundar, F.V. Mikulec, M.G. Bawendi, Self-assembly of CdSe-ZnS quantum dot bioconjugates using an engineered recombinant protein // J. Am. Chem. Soc.- 2000.- V. 122.- P. 12142.

32. S. Kim, M.G. Bawendi, Oligomeric ligands for luminescent and stable nanocrystal quantum dots IIJ. Am. Chem. Soc.-2003.- V. 125.- P. 14652-14653.

33. Sukhanova A., Artemyev M., Sharapov O., Baranov A., Jardillier J.C., Nabiev I. Ultrasensitive non-isotopic water-soluble nanocrystals // European, Eurasian and USA patents EP1366347; US2004105973; W002073155. 09/03/2001.

34. Mitchell G.P., Mirkin C.A., Letsinger R.L. Programmed Assembly of DNA Functionalized Quantum Dots HJ. Am. Chem. Soc.- 1999.- V. 121.- P. 8122.

35. Willard D.M., Carillo L.L., Jung J. Van Orden A. CdSe-ZnS Quantum Dots as Resonance Energy Transfer Donors in a Model Protein-Protein Binding Assay IINano Lett.- 2001.-V. 9.- P. 469.

36. Hong R., Fischer N.O., Verma A., Goodman C.M., Emrick T., Rotello V.M. J. Control of Protein Structure and Function through Surface Recognition by Tailored Nanoparticle Scaffolds I/Am. Chem. Soc.- 2004.- V. 126.- P. 739.

37. Guo W., Li J.J., Wang Y.A., Peng X. Conjugation chemistry and bioapplications of semiconductor box nanocrystals prepared via dendrimer bridging.//C/2em. Mater.-2003.-V. 15.-P. 3125.

38. Kim S., Bawendi M.G. Oligomeric Ligands for luminescent and stable nanocrystal quantum dots HJ. Am. Chem. Soc.- 2003.-V. 125.- P. 146-52.

39. Sukhanova A., Devy J., Venteo L., Artemyev M., Oleinikov V. Biocompatible fluorescent nanocrystals for immunolabeling of membrane proteins and cells // Analytical Biochemistry.- 2004.- V. 324.- P. 60-67.

40. Pellegrino T., Manna L., Kudera S., Koktish D., Rogach A.L., Natile G., Parak W.J. Hydrophobic Nanocrystals Coated with an Amphiphilic Polymer Shell: A General Route to Water Soluble Nanociystals // Nano Lett.- 2004.- V. 4.- P. 703.

41. X. Wu, H. Liu, J. Liu, K.N. Haley, J.A. Treadway, J.P. Larson, N. Ge, F. Peale, M.P. Bruchez. Immunofluorescent labeling of cancer marker Her2 and other cellular targets with semiconductor quantum dots //Nat. Biotechnol.- 2003.-V.21.- P. 41-46.

42. Zhivko Zhelev, Hideki Ohba, and Rumiana Bakalova, Single Quantum Dot-Micelles Coated with Silica Shell as Potentially Non-Cytotoxic Fluorescent Cell Tracers, // J. Am. Chem. Soc.-2006.-V.128.- P. 6324-6325.

43. Han M., Gao X., Su J. Z., Nie S. Quantum-Dot-Tagged Microbeads for Multiplexed Optical Coding of Biomolecules //Nat. Biotechnol.- 2001.-V. 19.- P.631.

44. Radtchenko I. L., Sukhorukov G. B., Gaponik N., Kornowski A., Rogach A. L., Mohwald H. Uniform Complete Shells in One Step //Adv. Mater.-2001.- V.13.-P.1684.

45. Hirai T., Saito T., Komasawa I. Stabilization of CdS nanoparticles immobilized on thiol-modified polystyrene particles by encapsulation with polythiourethane HJ. Phys. Chem. 5.-2001.- V.105.-P. 9711.

46. Yang X., Zhang Y. Encapsulation of Quantum Nanodots in Polystyrene and Silica Micro-/Nanoparticles // Langmuir.-2004.-V.-20.- P. 6071.

47. Paul O'Brien, Siobhan S. Cummins, Dan Darcy, Angela Dearden, Ombretta Masala, Nigel L. Pickett, Steve Ryley and Andrew J. Sutherland, Quantum dot-labelled polymer beads by suspension polymerization HChem. Commww.-2003.-P. 2532-2533.

48. D. Wang, A. Rogach, F. Caruso, Semiconductor quantum dotlabeled microsphere bioconjugates prepared by stepwise selfassembly // Nano Lett. -2002.-V.2.-P. 857 -861.

49. Miiller F, Gotzinger S, Gaponik N, Weller H, Mlynek J, Benson Article Investigation of Energy Transfer between CdTe Nanocrystals on Polystyrene Beads and Dye Molecules for FRET-SNOM Applications// J Phys Chem Д-2004.-У.108.-P. 14527.

50. J. Riegler . O. Ehlert. T. Nann, A facile method for coding and labeling assays on polystyrene beads with differently colored luminescent nanocrystals. IIAnal Bioanal Chem.-2006.-V. 384.- P. 645-650.

51. Gao X., Nie S. Quantum dot-encoded mesoporous beads with high brightness and uniformity: rapid readout using flow cytomQtryIIAnal. Chem.-2004.- V. 76.- P. 24062410.

52. JoumaaN., Lansalot M., Thretz A., Elaissari A., Sukhanova A., Artemyev M.,Nabiev Г;, Cohen J.H.M. Synthesis of Quantum Dót-Tagged Submicrometer Polystyrene Particles by Miniemulsion Polymerization //Langmuir.-2006,- V. 22.- P. 1810.

53. Сизова C.B., Гонцова M.C., Генералова A.H., Зубов В.П., Артемьев М:В., Набиев И.Р., Баранов А.В., Мочалов К.Е., Олейников В.А. // Материалы VI Межд. Конф. «Лазерная физика и оптические технологии».- Гродно.-2006. -Ч. 1.-C. 278:

54. Slomkowski S. Polyacrolein containing microspheres: synthesis, properties and possible medical applications //Prog. Polym. Science.-1998.-V. 231- P. 815 874.

55. Bo C., Ping Z. A New Determining Method of Copper(III) Ions at ng ml(-l) Levels Based on Quenching of the Water-Soluble Nanocrystals Fluorescence. I I Anal. Bioanal: Chem. -2005.- V. 381.тР. 986-992.

56. Chan P.M., Yuen Г., Ruf F., Gonzalez-Maeso J., Seal fon S.С. Method for Multiplex Cellular Detection: of mRNAs Using Quantum Dot Fluorescent In Situ Hybridization. I/Nucleic Acids Research 2005.-V. 33.-P. 161.

57. Zhang C.Y., Ma I I., Nie S.M., Ding Y., Jin L., Chen D.Y. Quantum Dot-Labeled Trichosanthin. //Analyst.- 2000.-V. 125.-P. 1029-1031.

58. Berti L., Xie J:, Medintz I.L., Glazer A.N:, Mathies R.A. Energy Transfer Cassettes for Facile Labeling of Sequencing and PGR Primers. //Anal. Biochem.-2001 V. 292.- P. 188-197.

59. Ozkan M. Quantum Dots and Other Nanoparticles: What Can They Offer to Drug Discovery //Drug Discovery Today.--2004.- V. 9.- P. 1065-1071.

60. Goldman E.R., Medintz I.L., Mattoussi H. Luminescent Quantum Dots in Immunoassays. //Anal. Bioanal. Chem. -2006.- V. 384.- P. 560-563.

61. Zhang, P. Investigation of Novel Quantum Dots/Proteins/Cellulose Bioconjugate using NSOM and Fluorescence. HJ. Fluorescence.-2006.- V. 1,- P. 349-353.

62. Slocik J.M., Moore J.T., Wright D.W. Monoclonal Antibody Recognition of Histidine-Rich Peptide Encapsulated Nanoclusters. //NanoLett.-2002.- V. 2.- P. 169173.

63. Sandros M.G., Gao D., Benson D.E. A Modular, Nanoparticle-Based System for Reagentless Small Molecule Biosensing. HJ. Am. Chem. Soc-2005.-V. 127.- P. 12198-12199.

64. Sandros M.G., Gao D., Gokdemir C., Benson D.E. General. High-Affinity Approach for the Synthesis of Fluorophore Appended Protein Nanoparticle Assemblies. //Chem. Comm. -2005.-V. 22.- P. 2832-2834.

65. Sandros,M.G., Shete V., Benson D.E. Selective, Reversible, Reagentless Maltose Biosensing with Core-Shell Semiconducting Nanoparticles. //The Analyst- 2006.-V.131.- P. 229-235.

66. Medintz I.L., Clapp A.R., Mattoussi H., Goldman E.R., Fisher B:, Mauro J.M. Self-Assembled Nanoscale Biosensors Based on Quantum Dot FRET Donors //Nature Materials.- 2003.- V. 2.-P. 630-638.

67. Ding S.Y., Jones M., Tucker M.P., Nedeljkovic J.M., Wall J., Simon M.N., Rumbles G., Himmel M.E. Quantum Dot Molecules Assembled with Genetically Engineered ProteinsIINanoLetters.- 2003.-V. 3. P. 1581-1585.

68. Pinaud F., King D., Moore H.P., Weiss S. Bioactivation and Cell Targeting of Semiconductor CdSe/ZnS Nanocrystals with Phytochelatin-Related Peptides HJ. Am. Chem. Soc.-2004.- 126.-P. 6115- 6123.

69. Tsay J.M., Doose S., Weiss S. Rotational and Translational Diffusion of Peptide-Coated CdSe/CdS/ZnS Nanorods Studied by Fluorescence Correlation Spectroscopy II J. Am. Chem. Soc.-2006.-V. 128.-P. 1639-1647.

70. Tsay, J.M., Doose S., Pinaud F., Weiss S. Enhancing the Photoluminescence of Peptide-Coated Nanocrystals with Shell Composition and UV Irradiation. HJ. Phys. Chem. B.-2005.- V. 109.-P. 1669-1674.

71. Ji X.J., Zheng J.Y., Xu J.M., Rastogi V.K., Cheng T.C., DeFrank J.J., Leblanc R.M. (CdSe)ZnS Quantum Dots and Organophosphorus Hydrolase Bioconjugate as Biosensors for Detection of Paraoxon. HJ. Phys. Chem. J5.-2005.-V.109.-P. 37933799.

72. Constantine C.A., Gattas-Asfura K.M., Mello S.V., Crespo G., Rastogi V., Cheng T.-C., DeFrank J.J., Leblanc R.M. Layer-by-Layer Biosensor Assembly Incorporating Functionalized Quantum Dots // Langmuir.-2003.- V. 19.-P. 9863-9867.

73. Goldman E.R., Mattoussi H.M., Anderson G.P., Medintz I.L., Mauro J.M. Fluoroimmunoassays Using Antibody-Conjugated Quantum Dots //Methods Molecular Biology.-2005.- V. 303.-P. 19-34.

74. Goldman E.R., Balighian E.D., Kuno M.K., Labrenz S., Tran P.T., Anderson G.P., Mauro J.M., Mattoussi H. Luminescent Quantum Dot-Adaptor Protein-Antibody Conjugates for Use in Fluoroimmunoassays HPhys. Stat. Sol. B.-2002.-V.229.- P. 407-414.

75. Goldman E.R., Balighian E.D., Mattoussi H., Kuno M.K., Mauro J.M., Tran P.T., Anderson G.P. Avidin: A Natural Bridge for Quantum Dot-Antibody Conjugates HJ. Am. Chem. 5oc.-2002.-V. 124.-P. 6378-6382.

76. Li J., Zhao K., Hong X., Yuan H., Ma L., Li J.H., Bai Y.B., Li T.J. Prototype of Immunochromatographic Assay Strips Using Colloidal CdTe Nanocrystals as Biological Luminescent Label IIColloids and Surfaces B-Biointerfaces.-2005.-V. 40,-P. 179-182.

77. Jaiswal J.K., Mattoussi H., Simon S.M. Use of Quantum Dots for Live Cell Imaging //Nature Methods.- 2004.-V. 1.- P. 73-78.

78. Ornberg R.L., Harper T.F., Hongjian L. Western Blot Analysis with Quantum Dot Fluorescence Technology: a Sensitive and Quantitative Method for Multiplexed Proteomics //Nature Methods.-2005.- V. 2. -P. 79-81.

79. Makrides S.C., Gasbarro C., Bello J.M. Bioconjugation of Quantum Dot Luminescent Probes for Western Blot Analysis HBiotechniques.- 2005.- V.39.- P. 501-506.

80. Bakalova R., Zhelev Z., Ohba H., Baba Y. Quantum Dot-Based Western Blot Technology for Ultrasensitive Detection of Tracer Proteins HJ. Am. Chem. Soc. -2005.-V. 127. -P. 3928-9329.

81. Zhelev Z„ Bakalova R., Ohba H., Jose R., Imai Y., Baba Y. Uncoated, Broad Fluorescent, and Size-Homogeneous CdSe Quantum Dots for Bioanalyses HAnal. Chem. -2006.-V. 78.- P. 321-330.

82. Goldman E.R., Clapp A.R., Anderson G.P., Uyeda H.T., Mauro J.M., Medintz LL., Mattoussi H. Multiplexed Toxin Analysis Using Four Colors of Quantum Dot FluororeagentsIIAnal. Chem-2004.-V.76.-P. 684-688.

83. Heyduk T. Measuring protein conformational changes by FRET/ LRET l/Curr Opin Biotechnol.- 2002.-V.13.- P. 292-6.

84. Day R.N., Periasamy A., Schaufele F. Fluorescence resonance energy transfer microscopy of localized protein interactions in the living cell nucleus /I Methods.-2001.-V. 25.-P. 4-18.

85. Riegler J., Nann T. Application of luminescent nanocrystals as labels for biological molecules IIAnal Bioanal Chem.- 2004.- V.379.- P. 913-9.

86. Hohng S., Ha T. Single-molecule quantum-dot fluorescence resonance energy transfer /IChemphyschem.-2005.-Y. 6.- P. 956-60.

87. Pathak S., Choi S.K., Arnheim N., Thompson M.E. Hydroxylated quantum dots as luminescent probes for in situ hybridization ///. Am. Chem.Soc.- 2001.-V.123.-P. 4103-4.

88. Gerion D., Parak W.J., Williams S.C., Zanchet D., Micheel C.M., Alivisatos A.P. Sorting fluorescent nanocrystals with DNA IIJ. Am. Chem. Soc- 2002.- V.124.-P.7070-4.

89. Xiao Y., Barker P.E. Semiconductor nanocrystal probes for human metaphase chromosomes // Nucleic Acids Res 2004.-V. 32.

90. Mansson A., Sundberg M., Balaz M., Bunk R., Nicholls I.A., Omling P., et al. In vitro sliding of actin filaments labelled with single quantum dots UBiochem. Biophys. Res. Commun.- 2004.-V. 314.-P. 529-34.

91. Wu X.Y., Liu H.J., Liu J.Q., Haley K.N., Treadway J.A., Larson J.P., et al. Immunofluorescent labeling of cancer marker Her2 and other cellular targets with semiconductor quantum dots II Nat. Biotechnol. 2003.-V. 21.-P.41-6.

92. Hanaki K., Momo A., Oku T., Komoto A., Maenosono S., Yamaguchi Y. et al. Semiconductor quantum dot/albumin complex is a long-life and highly photostable endosome marker // Biochem. Biophys. Res. Commun.- 2003.-V. 302.-P. 496-501.

93. Hoshino A., Fujioka K., Oku T., Nakamura S., Suga M., Yamaguchi Y. et al. Quantum dots targeted to the assigned organelle in living cell // Microbiol. Immunol.-2004.- V.48.- P. 985-94.

94. Dahan M., Levi S., Luccardini C., Rostaing P., Riveau B., Triller A. Diffusion dynamics of glycine receptors revealed by single-quantum dot tracking HScience-2003.- V.302.-P. 442-5.

95. Howarth M, Takao K, Hayashi Y, Ting AY. Targeting quantum dots to surface proteins in living cells with biotin ligase // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-2005.-V. 102.-P. 7583-7588.

96. Raj an SS, Vu TQ. Quantum dots monitor TrkA receptor dynamics in the interior of neural PC12 cells IINano. Lett.- 2006.-V.6.-P. 2049 2059.

97. Sukhanova A., Venteo L., Cohen J.H.M., Pluot M., Nabiev I. Nano-biocaptures for research and diagnostics in inflammation diseases and cancer I ¡Ann. Acad. Pharm. Franc.-2006.-V. 64.-P. 125.

98. Wang L.-Y., Kan X.-W., Zhang M.-C., Zhu C.-Q., Wang L. Fluorescence for the determination of protein with fiinctionalized nano-ZnS// Analyst.-2002.- V. 127.-P. 1531 1534.

99. Goldman E.R., Medintz I.L., Whitley J.L. Avidin: A Natural Bridge for Quantum Dot-Antibody Conjugates// J. Amer. Chem.Soc.-2005.-N. 127.- P. 6744 -6751.

100. Riu J., Maroto A., Rius F.X. Nanosensors in environmental analysisIITalanta.-2006.-V. 69.- P. 288-301.

101. Goldman E.R., Clapp A.R., Anderson G.P., Yueda H.T., MauroJ.M., Medintz I.L., Mattoussi H. IIAn Multiplexed Toxin Analysis Using Four Colors of Quantum Dot Fluor or eagentsal. Chem.-2004.-V. 76.-P. 684 688.

102. Willard D.M., Van Orden A. Quantum dots: Resonant energy-transfer sensor IINat. Mater.-2003.-V. 2, P. 575 576.

103. Pohl D. W., Denk W. and Lanz M. Optical stethoscopy: Image recording with resolution lambda/20 //Appl. Phys. Lett.-1984.- V.44.- P. 651 653.

104. Lewis A, Isaacson M. Harootunian A and Murray A. Development of a 500 A spatial resolution light microscope. I. Light is efficiently transmitted through A/16 diameter apertures HUltramicroscopy- 1984.- V.13.- P. 227.

105. Betzig E., Trautman J.K., Harris T.D., Weiner J.S., Kostelak R.L., Breaking the Diffraction Barrier: Optical Microscopy on a Nanometer Scale I I Science-1991.- V. 251.-P. 1468- 1470.

106. Specht M., Pedarning J.D., Heckl W.M., Hansch T.W., Scanning plasmon near-field microscope II Phys.Rev.Lett .-1992.-V. 68.-P. 476 479.

107. Inouye Y., Kavata S., Near-field scanning optical microscope with a metallic probe tip // Opt.Lett.993.-V. 19.- P. 159 161.

108. Hollander R.B.G., Hilst N.F., Kooyman R.P.H., Near-field plasmon and force microscopy HUltramicroscopy.-1995.- V. 57.- P. 263 269.

109. Bachelot R., Gleyzes P., Boccara A.C., Near-field optical microscopy by local perturbation of differaction spot, Microscopy Microanalysis Microstructures, 1994, 5 (4-6), p. 389 397.

110. Zenhausern F., O'Boyle M.P., Wickramasinghe H.K., Apertureless near-field optical microscop II Appl.Phys.Lett.- 1994.-V. 65.-P. 1623 1625.

111. Гигантское комбинационное рассеяние. Под ред. Р.Ченга, Т. Фуртака.-1984.- М.- Мир.

112. Gerton J.M., Wade L.A., Lessard G.A., Ma Z., Quake S.R., Tip-Enhanced Fluorescence Microscopy ar 10 Nanometer Resolution // Physical Review Letters.-2004.-V. 9.- P. 18001.

113. Yang T.J., Lessad G.A., Quake S.R., An apertureless near-field microscope for fluorescence imagin I/Applied Physics letters- 2000.-V. 76.- P. 378 380.

114. Anderson N., Hartschuh A., Novotny L., Near-field Raman microscopy //Materials Today.-2005.-?. 50 54.

115. Novotny L. The history of near-field optics // Progress in optics.- 2007.-V. 50.-P. 137- 184.

116. Sekatskii S.K., Letkhov V.S., Single fluorescence centers on the tips of crystal needles: First observation and prospects for application in scanning one-atom fluorescence microscopy IIAppl. Phys.-\996.-~4. 63.- P. 525 530.

117. Секацкий С.К., Летохов B.C., Сканирующая оптическая микроскопия нанометрового разрешения с резонансным возбуждением флуоресценции образцов от одноатомного возбуждающего центра //Письма в ЖЭТФ,-1996.-636.- С. 311 -315.

118. Michaelis J., Hettich С., Mlynek J., Sandoghdar V., Optical microscopy using a single-molecule light source H Nature.-2000,- V. 405.- P. 325 328.

119. Vickery S.A., Dunn R. C., Scanning near-field fluorescence resonance energy transfer microscopy //Biophysical Journal -1999.- V. 76.-P.1812 1818.

120. Vickery S.A., Dunn R. C., Combining AFM and FRET for high resolution fluorescence microscopy HJournal of Microscopy.-2000. -V. 202. P.408 - 412.

121. Aigouy L., De Wilde Y., Mortier M., Gierak J., Bourhis E., Fabrication and Characterization of Fluorescent Rare-Earth-Doped Glass-Particle-Based Tips for Near-Field Optical Imaging Applications HApplied Optics.-2007.- V. 43.- P. 3829 -3837.

122. N. Chevalier, M. J. Nasse, J .C. Woehl, P. Reiss, J. Bleuse, F. Chandezon, S. Huant, CdSe-single-nanoparticle based active tips for near-field optical microscopy HNanotechnology.-2005.-V. 16.- P. 613-618.

123. United States Patent, 4,636,479, Martin; Francis J., Kung; Viola T. Enhanced agglutination method and kit. January 13,1987.

124. L. Spernarth, S. Magdassi. Preparation of ethyl cellulose nanoparticles from nano-emulsion obtained by inversion at constant temperature //Micro and Nano Letters.-2№1 2.- V.4.- P. 90 95.

125. Königsberg, W. Reduction of disulfide bonds in proteins with miioXbreitoV/Methods Enzymol.- 1972.- V.25.- P. 185.

126. В.И.Елисеева, Т.Р. Асламазова. Эмульсионная полимеризация в отсутствие эмульгатора и латексы на ее основе //Успехи химии.- 1991.-Т.60.- №4.-С. 398 -429.

127. Kondo A., Kawano T., Higashitani К. Immunological agglutination kinetics of latex particles with covalently immobilized antigens HJ. of Fermentation & Bioengin.- 1992.-V. 73.-N 6.- P. 435 439.

128. Okubo M., Yamamoto Y., Uno M. Immunoassay tests // J. ColloidPolym. Sci-1987.-V.265.-P. 1061.

129. Schmelz, O., Mews, A., Basche, Th., Herrmann, A., Mullen, K. Supramolecular complexes from CdSe nanocrystals and organic fluorophors. Langmuir, 2001, 17, 2861 -2865.

130. Leatherdale, C.A., Woo W.-K., Mikulec F.V., Bawendi M.G. On the absorption cross section of CdSe nanocrystal quantum dots. J. Phys. Chem. B, 2002, 106(31), 7619-7622.

131. Yu, W. W., Qu, L., Guo, W., Peng, X. Experimental determination of the extinction coefficient of CdTe, CdSe, and CdS nanocrystals. Chem. Mater., 2003, 15, 2854 - 2860.

132. Nazzal, A.Y., Wang, X., Qu, L., Yu, W., Wang, Y., Peng, X., Xiao, M. Environmental effects on photoluminescence of highly luminescent CdSe and CdSe/ZnS core/shell nanocrystals in polymer thin films. J. Phys. Chem. B, 2004, 108(18), 5507-5515.f)

133. Gattas-Asfura, K.M., Constantine, C.A., Lynn, M.J., Thimann, D.A., Ji, X., Leblanc, M.L. Characterization and 2D self-assembly of CdSe quantum dots at the air-water interface. J. Am. Chem. Soc.; 2005; 127(42), 14640 - 14646.

134. Рейхсфельд B.O., Еркова JI.H., Рубан B.JI. Лабораторный практикум по синтетическим каучукам.- М.: Химия.-1976,- С.226.

135. Б.Э. Геллер, А.А. Геллер, В.Г. Чиртулов //Практическое руководство по физикохимии волокнообразующих полимеров. М.- Химия,- 1996,- С. 243.

136. J. Hearn, М.С. Wilkinson, A.R. Goodall Polymer latices as model colloids // Colloid Interface 5a.-1981-V.14.- P.173.

137. Margel S., Rembaum A., Synthesis and characterization of poly(glutaraldehyde), a potential reagent for protein immobilization and cell separation // Macromol. Chem. Suppl.-\9%0.-N 13.-p. 19 24.

138. Kumakura V., Kaetsu I. Polymeric microspheres by reaction copolymerization of acrolein and various monomers at low temperature I/Coll. Polym. SW.-1984.-V. 262.-P. 450 454.