"Полиморфизм генов интерлейкина-4 и их связь с вентиляционной функцией легких, реактивностью бронхов и атопическим воспалением в семьях больных бронхиальной астмой" тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.43, Дубаков, Алексей Владимирович

• Дубаков, Алексей Владимирович
• 2005

Оглавление диссертации Дубаков, Алексей Владимирович

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ГЕНЕТИЧЕСКИХ ОСНОВАХ И ФЕНОТИПИЧЕСКИХ ПРОЯВЛЕНИЯХ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ.1Q

1.1. Бронхиальная астма как мультифакторное заболевание.

Ген Интерлейкина-4 и Б А.

1.2. Фенотипические проявления бронхиальной астмы. Роль суррогатных" маркеров в диагностике Б А.

1.2.1 Эффекгорные клетки и медиаторы.

1.2.2 Повреждение эпителия.

1.2.3. Повышение сосудистой проницаемости.

1.2.4. Нейрогенная регуляция.

1.2.5. Восприимчивость дыхательных путей.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.2.Методы исследования

2.2.1 .Клиническое обследование.

2.2.2. Аплергологическое обследование.

2.2.3. Иммунологическое обследование.

2.2.4. Генотипирование.

2.2.5. Статистика.

2.2.6.Характеристика метода лечения.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Характеристика функции внешнего дыхания в семьях больных бронхиальной астмой.

3.2. ГИПЕРРЕАКТИВНОСТЬ БРОНХОВ, РАСПРЕДЕЛЕНИЕ lg Е, ИЛ

И ПОЛИМОРФИЗМ ГЕНОВ IL4, IL4RA В СЕМЬЯХ БОЛЬНЫХ БА.

3.2.1. Распределение lg Е в семьях больных бронхиальной астмой

3.2.2. Распределение ИЛ-4 у больных БА.

3.2.3. Гиперреактивность бронхов в семьях больных БА.

3.2.4. Связи между уровнем lg Е и ИЛ-4, выраженностью сенсибилизации, функцией внешнего дыхания и реактивностью бронхов в семьях больных атопической БА.

3.2.5. Ассоциация полиморфизма гена ИЛ-4 с БА и ее патогенетическими признаками.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «"Полиморфизм генов интерлейкина-4 и их связь с вентиляционной функцией легких, реактивностью бронхов и атопическим воспалением в семьях больных бронхиальной астмой"»

Актуальность проблемы: бронхиальная астма (БА) - хроническое воспалительное заболевание дыхательных путей, обусловленное комплексным взаимодействием клеток воспаления, медиаторов, клеток и тканей бронхов, приводящем к острой бронхоконстрикции, отеку бронхиальной стенки, гиперсекреции и перестройке бронхиального дерева. Следствием воспаления является гиперреактивность бронхов [5]. В большинстве случаев Б А- семейное заболевание, что позволяет предположить ее наследственную природу [ 76, 77, 78]. Исследование генетических основ данного страдания имеет несомненное клиническое и научное значение.

Б А- фенотипически гетерогенное заболевание, что затрудняет клиническую диагностику. Много внимания уделяется «суррогатным» маркерам БА, особенно бронхиальной гиперреактивности (bronchial hyperresponsiveness - BHR) на физико-химические стимулы, предрасположенности к гиперпроизводству IgE на антигены окружающей среды (атопии). Однако BHR и атопия отмечены и у асимптоматичных; индивидов [153]. Таким образом, не ясно, являются ли BHR и атопия различными проявлениями одного молекулярного дефекта или же они имеют разную этиологию.

1. Среди большого числа генов-кандидатов БА и атопии внимание исследователей в большой степени привлечены к гену IL4. Ил-4 часто называют «критическим цитокином воспаления» [72]. Именно Ил-4 на начальных стадиях развития воспаления, связываясь со своим рецептором на поверхности В-клеток, переключает их на производство IgE. Еще одной функцией Ил-4 является активация экспрессии высоко-аффинного рецептора к IgE на CD23+B клетках. Ил-4 также индуцирует эндотелиальные клетки на производство молекул адгезии, что приводит к селективной аккумуляции эозинофилов в очаге воспаления. Наконец, Ил-4 является сигналом дифференциации Т-клеток в СБ4+хелперы типа 2, которые затем высвобождают дополнительное количество Ил-4 [117].

2. Конечным этапом каскада иммунных реакций является увеличение образования IgE, непосредственно приводящем к бронхиальной обструкции: IgE, высвобождаемый активированными В-клетками, связывается с рецепторами мастоцитов, инициируя серию внутриклеточных событий, приводящих к высвобождению медиаторов воспаления и хемокинов: гистамина, простагландинов, лейкотриенов, фактора активации тромбоцитов, дегранулированных протеаз, эотаксина и др. [62]. Действуя в совокупности, все эти факторы приводят к микроизменениям сосудов стенок воздухоносных путей, сокращениям гладкой мускулатуры бронхов, гиперсекреции слизи.

3. При всей гетерогенности механизмов Б А, степень гиперреактивности дыхательных путей косвенно отражает выраженность патологического процесса [30, 116, 149]. Проведение ингаляционных тестов на BHR имеет диагностическое и прогностическое значение и используется как общепринятый стандарт [67, 69]. В настоящее время фармакологические провокации с гистамином и метахолином являются основными, но более предпочтителен метахолин [156]. Однако, несмотря на длительное использование этого теста в клинической практике, в настоящее время еще не изучен характер изменения BHR в семьях больных БА от поколения к поколению. Не выясненным остается вопрос о сопряженности генетического дефекта IL4 у пациентов с наличием клинических признаков BHR и атопии.

Решение этих задач имеет важное значение для первичной профилактики БА, уточнения роли атопии, вентиляционной функции легких, BHR при разных клинических вариантах заболевания.

Цель исследования: изучить связь между уровнем ИЛ-4 и IgE в крови, полиморфными вариантами генов IL4, IL4RA, вентиляционной функцией легких и реактивностью бронхов в семьях больных Б А, установить их значимость в формировании заболевания.

Задачи:

1. Охарактеризовать вентиляционную функцию легких в семьях больных БА.

2. Исследовать распределение признака BHR в семьях больных БА и степени ее выраженности.

3. Оценить вклад синтеза IgE и ИЛ-4 в формирование иммунного воспаления при БА.

4. Выявить наличие взаимосвязей между полиморфизмом генов IL4, IL4RA, уровнем IgE и ИЛ-4, вентиляцией легких, выраженностью BHR и тяжестью БА.

Научная новизна: по результатам проведенных комплексных функциональных, аллергологических, иммунологических и генетических исследований получены новые знания о вкладе полиморфизма генов IL4 и IL4RA в атопическое воспаления (IgE, ИЛ-4), изменение вентиляционной функции легких и реактивность бронхов у больных атопической БА.

Установлено, что вентиляционная функция легких у больных Б А достоверно отличается от таковой у здоровых членов их семей. При этом рестриктивные изменения вентиляции не характерны для данного варианта астмы, а обструктивные проявляются при среднетяжелой форме, начинаясь с уровня мелких бронхов. При тяжелой БА обструкция более выражена и распространена по всему бронхиальному дереву.

Установлен вклад полиморфных вариантов генов IL4(C-589T) и IL4RA (I50V) в детерминацию изменчивости показателей проходимости бронхов. Показана взаимосвязь между реактивностью бронхов, проходимостью дыхательных путей и маркерами атопии (IgE, ИЛ-4). Установлено, что комбинации полиморфных IL4 и IL4RA сочетаются с атопией при Б А. Найдены варианты полиморфизмов, ассоциированные со степенью тяжести заболевания.

Практическая значимость: показана необходимость мониторирования вентиляционной функции легких и определение BHR для диагностики БА и контроля эффективности лечения. Обоснована необходимость определения уровня атопических триггеров в целях сохранения функциональной целостности легких. Полученные данные о сочетании полиморфных генов IL4 и IL4RA с уровнем IgE, атопией и тяжестью Б А могут быть использованы как дополнительный критерий предиктивной диагностики данного заболевания.

Внедрение: полученные результаты используются в работе клиник Сибирского государственного медицинского университета, аллергологического отделения областной детской больницы г. Томска и Областного детского центра клинической иммунологии и аллергологии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. У больных атопической бронхиальной астмой выявляются значимые изменения вентиляционной функции легких по сравнению со здоровыми членами их семей. Показатели вентиляции легких у больных среднетяжелой и тяжелой БА достоверно ниже чем при легкой (интермиттирующей и персистирующей) из-за нарастающей обструкции, начинающейся с дистальных. отделов бронхов. Вентиляционная функция легких значимо улучшается на фоне базисной терапии. Реактивность бронхов не ассоциируется с тяжестью заболевания, но изменяется количественно в разные фазы БА, уменьшаясь в период ремиссии.

2. Для атопической бронхиальной астмы установлена гиперпродукция IgE, ИЛ-4 и их связь с вентиляционными показателями и реактивностью бронхов.

3. Полиморфизм генов IL4 и IL4RA связан с изменением проходимости бронхов, атопией и гиперпродукцией IgE. Выявлены комбинации полиморфных генов IL4, IL4RA, специфичные для легкой, среднетяжелой и тяжелой формы БА.

Апробация: основные результаты работы доложены и обсуждены на конференции кафедры пропедевтики внутренних болезней и на заседании апробационного совета СГМУ (2003г.)

По материалам диссертации опубликовано 7 работ, из них - 6 в центральной печати.

Структура и объем работы: диссертация построена по традиционному плану, состоит из введения, трех глав, обсуждения результатов исследования, выводов, практических рекомендаций, указателя литературы, который содержит 14 отечественных и 156 зарубежных источников. Работа изложена на 112 страницах машинописного текста, иллюстрирована 29 таблицами и 16 рисунками.

Заключение диссертации по теме «Пульмонология», Дубаков, Алексей Владимирович

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что показатели вентиляционной функции легких у больных атопической Б А достоверно ниже, чем у здоровых членов их семей. Рестриктивные изменения не характерны для данного варианта астмы. Обструктивные изменения проявляются при среднетяжелой Б А, начинаясь с уровня мелких бронхов, и усиливаясь при тяжелой БА, с распространением по всему бронхиальному дереву.

2. Гиперреактивность не зависит от тяжести БА, но изменяется количественно в разные фазы заболевания, снижаясь в период ремиссии.

3. При атопической БА определяется гиперпродукция IgE и ИЛ-4 с их взаимной корреляцией. Показатели IgE и ИЛ-4 ассоциируют с реактивностью бронхов и проходимостью дыхательных путей

4. Полиморфизм генов С-589Т (IL4), I50V(IL4RA) связан с изменением показателей проходимости бронхов. При сочетании полиморфных вариантов II — СТ+ТТ определяется более низкая величина ОФВ1, по сравнению с альтернативными вариантами, а при сочетании W - СТ+ТТ - более высокая. Показатели МОСбО значимо больше при сочетании W - СТ+ТТ, чем при сочетаниях II - СТ+ТТ, W - СС, W - СС+ТТ. Величина МОС75 значимо выше у носителей W - СТ+ТТ, чем при комбинации W - СС.

5. Полиморфные варианты IL4 и IL4RA, ассоциированы с атопией и гиперпродукцией IgE при БА. Уровень IgE значимо выше при сочетании GC+CC - QQ и GG - QQ, чем при вариантах GC+CC - QR+RR, GG - QQ - для полиморфизмов G+717T (IL4), Q551R (IL4RA). Показатели IgE значимо больше при комбинациях СС — QQ, (СТ+ТТ) - (QR+RR), чем при вариантах СС — (QR+RR), CT+QQ - для сочетания полиморфизмов С-589Т (IL4), Q551R (IL4RA). При наличии атопии доминируют полиморфные варианты IL4RA (I50V, Q551R) - II - (QR+RR), IV - (QR+RR), W - QQ, W - (QR+RR), а при ее отсутствии - II - QQ, IV - QQ.

6. Установлены комбинации полиморфизмов IL4(G+717C) и IL4RA(I50V), характерные для БА легкой, средней и тяжелой формы. Для легкой БА доминирующим является сочетание IV - (GC+CC), для средне-тяжелой - IV -GG , для тяжелой - II - (GC+CC). Найдены полиморфные варианты IL4RA (I50V, Q551R), связанные со степенью тяжести БА. При легкой БА преобладает комбинация IV - QQ и отсутствует W - (QR+RR), при среднетяжелой наиболее выражено сочетание IV -QQ, при тяжелой БА доминирует набор II -QQ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Определение уровня атопических триггеров (IgE, ИЛ-4) необходимо проводить лицам в семьях больных атопической БА с целью выявления факторов риска развития данного заболевания.

2. Мониторинг вентиляционной функции легких и определение BHR в семьях больных БА необходимы с целью выявления скрытых проявлений болезни, верификации диагноза и контроля эффективности лечения.

3. Исследование полиморфных вариантов генов IL4, IL4RA может быть использовано как дополнительный критерий предиктивной диагностики течения БА.

Список литературы диссертационного исследования Дубаков, Алексей Владимирович, 2005 год

1. Абросимов В.Н. Воспаление и гиперреактивность дыхательных путей при бронхиальной астме / В.Н. Абросимов, В.Г. Порядин // Тер. архив. 1994. - № 11. —С. 60-64.

2. Балаболкин И.И. Современные концепции патогенеза и терапии бронхиальной астмы у детей / И.И. Балаболкин // Педиатрия.-1995. № 5. - С. 73-76.

3. Бронхиальная астма. Глобальная стратегия // Пульмонология. — 1996. -Приложение. 166.С.

4. Бронхиальная астма. Сальбутамол / Под ред. А.Г.Чучалина, И. Хамида. -М.: ФАРМЕДИНФО, 1992. С.44-46.

5. Бронхиальная астма: В 2 т. / Под ред. А.Г. Чучалина- М.: Агар, 1997 Т. 1 -С. 82-89.

6. Бронхиальная астма: В 2 т. / Под ред. А.Г. Чучалина. М.: Агар, 1997 - Т. 2 -432 с.

7. Княжеская Н.П. Диагностика и ступенчатый подход к классификации и лечению бронхиальной астмы / Н.П. Княжеская // Рус. мед. журн. 1997. - Т. 5, №22.-С. 1418-1423.

8. Кулманакова И.М. Клинико-генетические аспекты атопии у детей, больных бронхиальной астмой, и членов их семей. Автореф. дис. . канд. мед. наук / И.М. Кулманакова. Томск, 2001. - 23 с.

9. Методика проведения и унифицированная оценка результатов функционального исследования механических свойств аппарата вентиляции на основе спирометрии: Пособие для врачей. СПб., 1996. - 48 с.

10. Пузырев В.П. Генетические основы этиопатогенеза бронхиальной астмы /

11. B.П. Пузырев, Л.М. Огородова, О.А. Салюкова // Сиб. мед. журн. 1998 - № 1.1. C. 82-85.

12. Пузырев В.П. Патологическая анатомия генома человека / В.П. Пузырев, В.А. Степанов. Новосибирск: Наука, 1997. - 224 с.

13. Стандартизация тестов исследования легочной функции // Пульмонология. Приложение. - 1993. - 92 с.

14. Черняк А.В. Гиперреактивность дыхательных путей при астме: механизмы развития и влияние терапии / А.В. Черняк // Рус. мед. журн. 1997. - Т. 5, № 23. -С.1418-1423.

15. Чучалин А.Г. Бронхиальная астма: глобальная стратегия / А.Г. Чучалин // Тер. архив. 1994. - № 3. - С. 3-8.

16. A genome-wide search for quantitative trait loci underlying asthma / S.E. Daniels, S. Bhattacharrya, A. James et al; // Nature. 1996. - Vol. 383. - P. 247-250.

17. Adelrote A.L.E. International consensus report on diagnosis and management of asthma / A.L.E. Adelrote // Eur. Respir. J. 1992. - Vol. 5. - P. 601-641.

18. Airway mucosal inflammation in occupational asthma indused by toluene diisocyanate / M. Saetta, A. DiStefano, P. Maestrelli et al. // Am. Rev. Respir. Dis. -1992.-Vol. 147.-P. 160-168.

19. Allergic and nonallergic asthmatics have distinct pattern of T-cell activation and cytokine production in peripheral blood and bronchoalveolar lavage / C. Walker, E. Bode, I. Boer et al. // Am. Rev. Respir. Dis. 1992. - Vol. 146. - P. 109-115.

20. American Thoracic Society. Standarts for the diagnosis and care of patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) and asthma / American Thoracic Society // Am. Rev. Respir. Dis. 1987. - Vol. 136. - P. 225-244.

21. American Toracic Society Guidelines for methacholine and exercise challenge testing // Am. Resp. Crit. Care. Med. 2000. - Vol. 161. - P. 309-329.

22. An interleukin-4-indused transcription factor: IL-4 stat / J. Hou, U. Schindler, W.J. Henzel et al. // Science. -1994. Vol. 265 - P. 1701 - 1706.

23. Analyses of Tcrvb8, IL-4 and IFN-y as genetic predisposition factors for atopic IgE response in murine model / G. Venugopal, M. Yang, Zh. Luo et al. // J. Immunol. -1995-P. 5463-5470.

24. Anees W. Use of pulmonary function tests in the diagnosis of occupational asthma / W. Anees //Ann. Allergy Asthma Immunol. 2003. Vol. 90, N 5. - P. 4751.

25. Arm J.P. The pathology of bronchial asthma / J.P. Arm, Т.Н. Lee // Adv. Immunol. 1992. - Vol. 51. - P. 323-382.

26. Barnes P.J. Airway inflammation and autonomic control / P.J. Barnes // Eur. J. Respir. Dis.- 1986.-Vol. 69, Suppl. 147.-P. 80-87.

27. Barnes P ,J. Neural control of human airways in health and disease / P.J. Barnes // Am. Rev. Respir. Dis. 1986. - Vol. 134. - P. 1289-314.

28. Barnes P.J. Neuropeptides in the lung: localization, function, and pathophysiologic implications / P.J. Barnes // J. Allergy Clin. Immunol. 1987. -Vol. 79.-P. 285-289.

29. Barnes P.J. New concept in the pathogenesis of bronchial responsiveness and asthma / P.J. Barnes // J. Allergy Clin. Immunol. 1989. - Vol. 83. - P. 1013-1026.

30. Berman J.S. Airway eosinophils and lymphocytes in asthma. Beards of a feather? / J.S. Berman // Am. Respir. Dis. 1992. - Vol. 145. - P. 1246-1248.

31. Bernstein L. Gaidelines for clinical investigation of non-bronchodilatator antiasthmatic drugs / L. Bernstein // Ibid. P. 489-546.

32. Bradding P. The role of must cell in asthma: a ressessment / P. Bradding // Curr. Opin. Allergy Clin. Immunol. 2003. - Vol. 3, N 1. - P. 45-50.

33. Britton J. Airway hyperresponsiveness and the clinical diagnosis of asthma: Hystamine or history / J, Britton // J. Allergy Clin. Immunol. 1992. - Vol. 89. - P. 19-22.

34. Britton J. Is hyperreactivity the same as asthma? / J. Britton // Eur. Respir. J. -1988.-Vol. 1-P. 497-499.

35. Broid D. Eosinofils express interleurin S and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor mRNA at sites of allergic inflammatuon in asthmatic / D. Broid, M.M. Pain, G.S. Firestein // J. Clin. Invest. 1992. - Vol. 90. - P. 1414-1424.

36. Busse W.W. Mechanisms of inflammation in asthma / W.W. Busse, W.S. Calhoun, J.P. Sedjwick // Am. Rev. Resp. Dis. 1993. - Vol. 147. - P. 20-24.

37. Campbell A.M. Bronchial epithelial cells in asthma / A.M. Campbell // Allergy.1997. Vol. 52. - P. 483-489.

38. Capcar D. Role of viral infection in asthma / D. Capcar, W.W. Busse // Immunol. Allergy Clin. North Am. 1993. - Vol. 13, N 4. - P. 745-767.

39. Cellular and immunological markers of allergic and intrinsic bronchial asthma / J.C. Virchov, C. Kroegel, C. Walker, H. Matthys // Lung. 1994. - Vol. 172. - P. 313-334.

40. Chemokines in astma: cooperative interaction between chemokines and IL-13 / N. Zimmerman, G.K. Hershey, P.S. Foster, M.E. Rothenberg // J Allergy Clin Immunol. 2003. - Vol. 111, N 2. - P. 227-242.

41. Chung K.F. Chronic inflammanion in asthma / K.F. Chung // Eur. Respir. Rev.1998. Vol. 62, N 8. - P. 999-1006.

42. Cloned Thl cells confer eosinophilic inflammation and bronchial hyperresponsiveness / O. Kaminuma, A. Mori // Int. Arch. Allergy Immunol. 1999. -Vol.118.-P. 136-139.

43. Cockroft D.W., Hargreave F.E. Airway responsiveness. Relevance of random population data to clinical usefulness / D.W. Cockroft, F.E. Hargreave // Ibid. 1990. -Vol. 1-P. 497-500.

44. Comparison of bronchial reactivity and peak expiratory flow variability measurements for epidemiologic studies / B.G. Higgins, J.R. Britton, S. Chinn et al. // Ibid;- 1992. — Vol. 145.-P. 588-593.

45. Complete nucleotide sequence of the chromosomal gene for human IL-4 and its expression / N. Arai, D. Nomura, D. Villaret et al. // J. Immun. 1989. - Vol. 142 -P. 274-282.

46. Corrigan C.J. Role of T-lymphocytes and lymphokines / С.J. Corrigan, A.B. Kay // Br. Med. Bull. 1992. - Vol. 48. - P. 72-84.

47. Development of allergen-specific T-cells memory in atopic and normal children / S.L. Prescott, C. Macaubas, T. Smallacombe et al. // Lancet. 1999. - Vol. 353. - P. 196-200.

48. Dunnill M.S. The pathology of asthma with special reference to changes in the bronchial mucosa / M.S. Dunnill // J. Clin. Path. 1960. - Vol. 13. - P. 27-33.

49. Empey D.W. Mechanisms of bronchial hyperreactivity in normal subjects after upper respiratory tract infection // Am. Rev. Respir. Dis. 1976. - Vol. 113. — P. 131.

50. Eosinophilic inflammation in asthma / J. Bousquet, P. Chanez, J.Y. Lacoste, et al. // New Engl. J. Med. 1990. - Vol. 62; N 8. - P. 1020-1023.

51. Eosinophilic inflammation in the bronchial mucosa of children with bronchial asthma / P. Phunek, W.R. Roche, J. Turzikora et al. // Eur. Resp. J. 1997. - Vol. 193, Suppl.25.-P. 160.

52. Evidence for a locus regulating total serum IgE levels mapping on chromosome 5 / D.A. Meyers, D.S. Postma, C.I. Panhuysen et al. // Genomics -1994. Vol. 23 -P. 119-120.

53. Evidence for compartmentalization of functional subsets of CD2+ T-lymphocytes in athopic patients / E.A. Wierenga, M. Snoek, C. de Groot et al. // J. Immunol.- 1990.-Vol. 144.-P. 4651-4656.

54. Expression of RANTES mRNA and protein in airways of patients with mild asthma / N. Berkman, V.L. Krishnan, T. Gilbey et al. // Am. J. Respir. Crit. Care. Med.-1996.-Vol. 154.-P. 1804-1811.

55. Expression of vRNA for interleukins in mucosal bronchial biopsies from asthma / Q. Hamid, M. Azzawi, S. Ying et al. // J. Clin. Invest. 1991. - Vol. 87. - P. 15411546.

56. Fahu J.V. Airway inflammation and remodelling in asthma / J.V. Fahu, D.B. Corry, H.A. Boushey // Cur. Opin. Pukm. Med. 2000. - Vol. 6, N 1. - P. 15-20.

57. Fireman P. Understanding asthma pathophisiology / P. Fireman // Allergy Asthma Proc. 2003. - Vol. 24, N 2. - P. 79-83.

58. Galli S.J. New concept about the mast cell / S.J. Galli // New Engl. J. Med. -1993. Vol. 328 - P. 257-265.

59. Generation of interleukin 4(IL-4)-produsing cells in vivo and in vitro. IL-2 and IL-4 are required for in vitro generation of IL-4-produsing cells / G. Le Gros, S.Z. Ben-Sasson, R. Seder et al. // J. Exp. Med. 1990. - Vol. 172. - P. 921-929.

60. Genetic control of serum IgE levels and asthma: linkage disequilibrium studies in an isolated population Т./ Laitinen, P. Kauppi, J. Ignatius et al. // Hum. Mol. Genet. 1997. - Vol. 6, N 12. - P. 2069-2076.

61. Genetic polymorphisms of p2-adrenergetic receptor in nocturnal and nonnocturnal asthma: evidence that Glu 16 correlates with the nocturnal phenotype / J. Turki, J. Рак, S.A. Green et al. // Clin. Invest. 1995. - Vol. 95. - P. 1635-1641.

62. Genetic susceptibility to asthma: bronchial hyperresponsiveness coinherited with a major gene for atopy / D.S. Postma, E.R. Bleecker, P.J. Amelung et al. // New Engl. J. Med. 1995. - Vol. 333. - P. 894-900.

63. Guidelines for standartisation of bronchial challenges with (nonspecific) bronchoconstricting agents / N.M. Eiser, K.F. Kerrebijn // Bull. Eur. Physiopathol. Respir. 1993. - Vol. 19. - P. 495-514.

64. Hall J. The challenges and opportunities of times of change / J. Hall // Am. J. Hum. Genet. 1996. - Vol. 58. - P. 649 -656.

65. Hargreave F.E. The assessment and treatment of asthma: a conference report / F.E. Hargreave, J. Dolovich, M.T. Newhouse // Ibid. 1990. - Vol. 85. - P. 10981111.

66. Hashimoto T. Correlation between respiratory function and airway inflammation in asthma // Arch. Allergy Immunol. 1999. - Vol. 120, Suppl 1. - P. 82-85.

67. Henderson R.A. Activation of human dendritic cells followng infection and mycobacterium tuberculosis / R.A. Henderson, S.C. Watkins, J. Flynn // J. Immunol. 1997.-Vol. 159.-P. 635-643.

68. Hershey G.K.K. The assotiation of atopy with a gain-of-function mutation in the a subunit of the interleukin-4 receptor // New Engl. J. Med. 1997. - Vol. 337, N 24. -P. 1720-1725.

69. High affinity IgE receptor-bearing cells in bronchial biopsis from atopic and nonatopic asthma / M. Humbert, J.A. Grant, L. Taborda-Barata et al. // Am. Respir. Crit. Caremed. 1996.-Vol. 153.-P. 1931-1937.

70. Hogan S.P. Interleukin-5-producing CD4(+) Tcells play a pivotal role in aeroallergen-induced eosinophilia, bronchial hyperactivity, and lung damage in mice // Amer. Respir. Crit. Care Med. 1998. - Vol. 157. - P. 210-218.

71. Holgate S.T. Airways remodelling / S.T. Holgate // Eur. Respir. Rev. 1998. -Vol.8: 62.-P. 1007-1011.

72. Holgate S.T. Asthma genetics: Waiting for exhale / S.T. Holgate // Nat. Genet. -1997 Vol. 15, N 4 - P. 227-229.

73. Holgate S.T. The cellular and mediator basis of asthma in relation to nature history / S.T. Holgate // Lancet. 1997. - Vol. 350, Suppl. 11.- P. 5-9.

74. Holgate S.T. The pathogenesis and significance of bronchial hyperresponsiveness in airways disease / S.T. Holgate, R. Beasley, O.P. Twentyman //Clin. Sci. 1987.-Vol. 73.-P. 561-572.

75. Hyperreactive site in the airway tree of asthmatic patients revealed by thickening of bronchial muscles: a morphometric study / M. Ebina, H. Yalgashi, R. Chiba et al. // Am. Rev. Respir. Dis. 1990. - Vol. 141. - P. 1327-1332.

76. IL-4 directs the development of Th2-like helper effectors / S.L. Swain, A.D. Weinberg, M. English, G. Huston // J. Immunol. 1990. - Vol. 145. - P. 3796-3806.

77. ILe50Val variants or IL-4Ra upregulates IgE synthesis and assotiates with atopic asthma / H. Mitsuyasu, Izuhara, X.Q. Mao et al. // Nat. Genet. 1998. - Vol. 19, N 6. -P. 119-120.

78. Indor allergen exposure is a risk factor for sensitisation during the first tree years of life / U. Wahn, S. Lau, R. Bergman at al. // J. Allergy Clin. Immunol. 1997. -Vol. 99.-P. 763-969.

79. Induction of nitric oxide synthase in asthma / Q. Hamid, D.R. Springall, V. Riveros-Moreno et al. // Lancet. 1993. - Vol. 342. - P. 1510-1514.

80. Interleukin (IL)-4 and IL-13 act on human lung fibroblasts. Implication in astma / C. Doucet, D. Brouty-Boye, C. Pottin-Clemenceau et al. // J. Clin. Invest. 1998. -Vol. 101, N10.-P. 2129-2139.

81. Jacoby D. Mediator functions of epithelial cells / D. Jacoby // Asthma and Rhinitis / Eds. S.T. Holgate, W. Busse. 2. ed. - Oxford: Blackwell Science, 1998. -P.96

82. Johnson S.R. Synthetic function of airway smooth muscle in asthma / S.R. Johnson, A.J. Knox//TIPS.- 1997.-Vol. 18.-P. 288-292.

83. Joos GF. Indirect aairway challenges // Eur. Respir. J. 2003. - Vol. 21, N 6. -P. 1050-1068.

84. Juniper E.F. Histamine and methacholine inhalation tests: tidal breathing method. Laboratory Procedure and standartization. Lund: A.B. Druco, 1991. - 21 p.

85. Kay A.B. 'Helper' (CD4+) cells and eosinophilia in allergy and asthma / A.B. Kay // Am. Rev. Respir. Dis 1992. - Vol. 145. - P. 22-26.

86. Kay A.B. Allergy and Allergic Disease / A.B. Kay. London: Blackwell Sci. Publ., 1997.-62p.

87. Kay A.B. Astma, Eosinophils and neutrophils / A.B. Kay, C.J. Corrigan // Br. Med. Bull. 1992. - Vol. 48. - P. 51-64.

88. Kita H. Chemokines active on eosinophils. Potential roles in allergic inflammation / H. Kita, G.J. Gleich // J. Exp. Med. 1996. - Vol. 183. - P. 24212426.

89. Kohl L. IL-4 independent induction of airway hyperresponsiveness by Th2, but not Thl cells / L. Kohl, J.S. Tepper, K. Bottomly // J. Immunol. 1998. - Vol. 161. -P. 3813-3816.

90. Kroegel C. Is there a place for intrinsic asthma as a distinct immunopathological entiti? / C. Kroegel, C. Walker // Eur; Respir. J. -1997. Vol. 10. - P. 513-517.

91. Lackie P.M. The impact of allergen on the airway epithelium / P.M. Lackie // Clin. Exp. Allergy.- 1997.-Vol. 27.-P. 1383-1386.

92. Lambert A.L. Transfer of allergic airway responses with serum and lymphocytes from rats sensitized to dust mite // Am. J. Respir. Crit. Care Med. 1998. - Vol. 157. -P. 1991-1999.

93. Langley-Evans S. Fetal programming of immune function and respiratory disease / S. Langley-Evans // Clin. Exp. Allergy. 1997. - Vol. 27. - P. 1377-1379.

94. Le Souef P. Genetic of asthma: what do we need to know? / P. Le Souef // Pediatr. Pulmonol. 1997. - Vol. 15. - P. 3-8.

95. Lee Т.Н. Cytokine networks in the patogenesis of bronchial asthma: implications for therapy / Т.Н. Lee // J. Roy. Coll. Phis. Lond. 1998. - Vol. 32. - P. 56-64.

96. Li X. Increased vascularity of the bronchial mucosa in mild asthma / X. Li, J.W. Wilson // Am. J. Respir. Crit. Care. Med. 1997. - Vol. 156. - P. 229-233.

97. Li X.M. Induction of pulmonary allergic responses by antigen-specific Th2 cells // j;Immunol. 1998.-Vol. 160.-P. 1378-1384.

98. Linkage analyses of IL-4 and other chromosome 5q31.1 markers and total serum IgE concentration / D.J. Marsh, J.D. Neely, D.R. Breazeale et al. // Science. — 1994. -Vol. 264 -P. 1152-1156.

99. Matzinger P. Tolerance, Danger and the extended family / P. Matzinger // Ann. Rev. Immunol. 1994. - Vol. 12. - P. 991-1045.

100. Modulation of airway inflammation by passive transfer of allergen-specific Thl and Th2 cells in a mouse model of asthma / D.A. Randolph, C.J.L. Carruthers, S.J. Szabo et al. // J. Immunol. 1999. - Vol. 162. - P. 1375-2383.

101. Moll T. In vitro degradation of endothelial catenins by a neural protease / T. Moll, T. Dejana, D. Vestweber // J. Cell. Biol. 1998. - Vol. 140. - P. 403-407.

102. Mossman T.R. Thl and Th2 cells: different patterns of lymphokine secretion led to different functional properties / T.R. Mossman, R.L. Coffman // Ann. Rev. Immunol. 1989.-Vol. 7. - P. 145-173.

103. National Heart Lung and Blood Institute. International consensus report on diagnosis and treatment of asthma / National Heart Lung and Blood Institute, National Institute of Health Bethesda (Maryland) // Eur. Respir. J. 1992. - N 5. - P. 601-641.

104. National Institutes of Health. Guidelines for the Diagnosis and Management of Asthma / National Institutes of Health // Publication. 1997. - N 97. - P. 4051.

105. Paoletti P. Bronchial Hyperresponsiveness, genetic predisposition and environmental factors: importance of epidemiological research / P. Paoletti, G. Viegi, L. Carozzi // Eur. Respir J. Vol. 5. - P. 910-912.

106. Paul W.E., Seder R.A. Lymphocyte response and cytokines // Cell. 1994. -Vol. 76-P. 241-251.

107. Pauwels R. Bronchial Hyperresponsiveness / R. Pauwels. // Allergy and allergic disease / Ed. A.B. Kay. Oxford: Blackwell Science, 1997. - P. 682-691.

108. Pauwels R. Bronchial hyperresponsiveness is not bronchial asthma R./ Pauwels, G. Joos, M. Van der Straeten // Clin. Allergy. 1998. - Vol. 18. - P. 317-321.

109. Pauwels R. Chronicity and progression of asthma / R. Pauwels // Eur. Respir. Rev. 1998. - Vol. 62, N 8. - P. 1016-1019.

110. Pin I. Mechanisms of bronchial hyperreactivity: role of airway infllammation and atopy /1. Pin, P. Godard // Rev. des Maladies Respir. 1994. - Vol. 11, N 2. - P. 111-122.

111. Prevalence of asthma and atopy in two areas of West and East Germany / E. von Mutius, F.D. Martinez, C. Fritzsch et al. // Am. Rev. Respir. Crit. Care Med. 1994. -Vol. 149.-P. 358-364.

112. Prevalence of the respiratory symptoms, bronchial hyperresponsiveness and atopy among adults; West and East Germany / D. Nowak, J. Heinrich, R. .Forres et al. // Eur. Respir. J. 1996. - Vol. 9. - P. 2541-2552.

113. Prevention of the development of immediate hypersensivity and airway hyperresponsiveness following in vivo treatment with soluble IL-4-receptor / H. Renz, K. Bradley, K. Enssle et al. // Int. Arch. Allergy Immunol. 1996. - Vol. 109. -P. 167-176.

114. Reactivity of the bronchial tree to different stimuli / K. De Vries, H. Booij-Noord, R. Van der Lende et al. // Bronches. 1968. - Vol. 18. - P. 439-542.

115. Redington A.E. Airway remodelling in asthma / A.E. Redington, P.H. Howarth // Torax. 1997. - Vol. 52. - P. 310-312.

116. Rempel J.D. In vivo IL-12 administration induces profound but transient commitment to helper cell type 1 assotiated pattern of cytokine and antibody production / J.D. Rempel, M.D. Weng, K.T. Hayglass // J. Immunol. 1997. - Vol. 159. -P. 1490-1496.

117. Renz H. Soluble interleukin-4 receptor (SIL-4) in allergic diseases / H. Renz // Inflam. Res. 1999. - Vol. 48. - P. 425-431.

118. Requirement for IL-13 independently of IL-4 in experimental asthma / G. Grunig, M. Warnock, R. Venkayya et al. // Sci. 1998 . - Vol. 282, N 5397. - P. 2261-2263.

119. Ricci M. Pathogenetic mechanisms and genetic aspects of bronchial asthma / M. Ricci, A. Matucci, O. Rossi // ACI International. 1997. - Vol. 9, N 5 - P. 141-148.

120. Robinson C. Interaction between eosinophils and the airway epithelium / C. Robinson, J.E. Carver // Inflammatory Mechanisms of asthma / Eds. S.T. Holgate, W. Busse; Lung Biology in Health and Disease. New York: Marcel Dekker, 1998. - P. 263-288.

121. Rogers D. E. Airway hyperresponsiveness-relation to asthma and inflammation / D.E. Rogers, B.J. O'connor // Torax. 1993. - Vol. 48. - P. 1095-1096.

122. Role and contribution of viral respiratory infections to asthma / W.W. Busse, P. Godard, P. Howarth et al. // Eur. J. Allergy Clin. Immunol. 1993. - Vol. 48, Suppl. 17.-P. 57-61.

123. Romagnani S. Development of Th-1 and Th-2 dominated immune responses: what about the polarizing signal? / S. Romagnani // Int. J. Lab. Res. 1996. - Vol. 26. -P. 83-98.

124. Rosenvasser L.J. Interleukin-4 and the genetics of atopy / L.J. Rosenvasser // New Engl. J. Med. 1997 . - Vol. 337 - P. 1766 -1767.

125. Schoor J.V. Indirect bronchial hyperresponsiveness in asthma: mechanisms, pharmacology and implication for clinical research / J.V. Schoor, G.F. Joos, R.A. Pauwels // Eur. Resp. J. 2000. - Vol. 16. - P. 514-533.

126. Sears M.R. Descriptive epidemiology of asthma / M.R. Sears // Lancet. 1997. -Vol.350, Suppl. 11.-P. 1-4.

127. Sensivity and specificity of hystamine PC20 determinatuon in a random selection of young college students / D.W. Cockroft, K.Y. Murdock, B.A. Berschede, B.P. Gore // J. Allergy Clin. Immunol. 1992. - Vol. 89. - P. 23-30.

128. Sensivity and spicificity of the hystamine challenge test for the diagnosis of asthma in an unselected sample of children and adolescents / V. Backer, S. Groth, A. Dirksen et al. // Eur. Respir. J. 1991. - N 4. - P. 1093-1100.

129. Sheffer A.L.E. International consensus report on diagnosis and management of asthma / A.L.E. Sheffer // Eur. Respir. J. 1992. - Vol. 5. - P. 601-641.

130. Spielman R.S The TDT and other family-based tests for linkage disequilibrium and assotiation / Spielman R.S., Ewens W.J. // Am. J. Hum. Genet. 1996. - V.59. -P.983-984.

131. SSC polymorphism in interleukin gene / L. Borish, J.J. Mascali, M. Klinnert et al. // Hum. Mol. Genet. 1994. - Vol. 3 - P. 1710.

132. Standardization of inhalation provocation tests: two technics of aerosol generation and inhalation compared / G. Ryan, M.B. Dolovich // Ibid. 1981. - Vol. 123.-P. 195-199.

133. Stavnezer J. Antibody class switching / J. Stavnezer // Adv. Immunol. — 1996 . -Vol. 61.-P.79-146.

134. Sterc P.J. Bronchial hyperresponsiveness: the need for a distinction between hypersensitivity and excessive airway narrowing / P.J. Sterk, E.H. Bel // Eur. Respir. J. 1989. - Vol. 2. - P. 267-274.

135. Sterc P.J.,Fabbri L.M. The hysical properties of a jet nebulazer and their relevance for the histamine provocation tests // Bull. Eur. Physiopathol. Respir. -1983.-Vol. 19.-P. 27-36.

136. Sterc PJ. Airway hyperresponsiveness: using bronchial challenge tests in research and management of asthma / P.J. Sterk // J. Aerosol. Med. 2002. - Vol. 15, N2.-P. 123-129.

137. Sterk P.J. Bronchial hyperresponsiveness: the need for a distinction between hypersensitivity and excessive airway narrowing / P.J. Sterk, E.H. Bel // Eur. Respir. J. 1989.-N2-P. 267-274.

138. Subepithelial fibrosis in stable atopic asthma / W.R. Roche, R. Beasley, J.H. Williams, S.T. Holgate // Lancet. 1989. - Vol. 1. - P. 520-524.

139. Takizava T. Muscle and mucous gland size in the major broncyi of patients with chronic bronchitis, asthma and asthmatic bronchitis / T. Takizava, W.M. Thurlbeck // Am. Respir. Dis. 1971.-Vol. 104.-P. 331-336.

140. The Collaborative Study on the Genetics of Asthma. A genome- wide search for asthma susceptibility loci in ethnically diverse population // Nature Genet. — 1997. -Vol. 15-P. 389-392.

141. The effect of an inhaled corticosteroid on airway inflammation and sympthoms of asthma / R. Djukanovich, J.W. Wilson, K.M. Britten et al. // Am. Rev. Respir. Dis. 1992. - Vol. 145. - P. 669-674.

142. The new asthma genetics and its implications for public health // Public Health. Rev. 1998. - Vol. 26, N 2. - P. 127-144.

143. The role of bronchoprovocation / F.E. Hargreave, J.N. Fink, D.W. Cockroft et al. // J. Allergy Clin. Immunol. 1986. - Vol. 78. - P. 517-524.

144. The role of cockroach allergy and exposure to cokroach allergen in causing morbidity among inner-city children with asthma / D.L. Rosenstreich, P. Eggltstone, M. Kattan et al. // New Engl. J. Med. 1997. - Vol. 336. - P. 1356-1363.

145. The role of cytokines and arachidonic acid metabolites in the development of airway hyperresponsiveness / H. Nagai, H.Tanaka // Nippon Yakurigaku Zasshi. -1998. Vol. 111, N 4. - P. 233-241.

146. The structure of large and small airways in non-fatal and fatal asthma / N. Carrol, J. Elliot, A. Morton, A. James // Am. Rev. Respir. Dis. 1993. - Vol. 147. - P. 405410.

147. Tournoy K.G. Airway eosinophilia is not a requirement for allergen-indused airway hyperresponsiveness // Clin. Exp. Allergy-2000. Vol. 30, N 1. - P. 79-85.

148. Tournoy K.G. Is Thl solution for Th2 in asthma ? / K.G. Tournoy, J.C. Kips, R. Pauwels // Clin. Exp. All. 2002. - Vol. 31. - P. 17-29.

149. Townley R.G. Airway hyperesponsiveness: a story of mise and men and cytokines / R.G. Townley, M. Horiba // Clin. Rev. Allergy Immunol. 2003. - Vol. 24, N1.- P. 85-110.

150. Vrugt B. Inflammation and bronchial hyperresponsiveness in allergic asthma and chronic obstructive pulmonary disease / B. Vrugt, R. Aalbers // Respir. Medicine. -1993. Vol. 87, Suppl. B. - P. 3-7.

151. Walley A.J. Investigation of an interleukin-4 promoter polymorphism for assotiation with asthma and atopy / A.J. Walley, .W.O.C.M. Cookson // J. Med. Genet. 1996 . - Vol. 33 - P. 689-692.

152. Wills-Karp M. Immunologic basis of antigen induced airway hyperresponsiveness / M. Wills-Karp // Ann. Rev. Immunol. 1999. - Vol. 17. - P. 255-281.

153. Woolcock A.J. Assessment of bronchial responsiveness as a gude to prognosis and therapy in asthma / A J. Woolcock, Ch.R. Jenkins // Ibid. Vol. 1. - P. 753-765.

154. Woolcock A.J. Evidence for the increase in asthma world-wide / A.J. Woolcock, J.K. Peat // The Rising Trends in Asthma: Ciba Foundation Symposium № 206 / Eds. D.J. Chadwick, G. Cardew. Chichester: Jahn Wiley & Sons, 1996. - P. 122-139.

155. Xu J. Mechanisms of bronchial hyperresponsiveness: the interaction of endothelin-1 and other cytokines / J. Xu, N.S. Zhong // Respirologi. 1999. - Vol. 4, N4.-P. 413-417.

156. Yao TC. The RANTES promoter polymorphism: A genetic risk factor for near-fatal asnhma in Chinese children // Allergy Clin Immunol. 2003. - Vol. 111, N 6. -P. 1285-1292.