Полиморфизм гена белка, связывающего жирные кислоты (H-FABP), и его влияние на хозяйственно-полезные признаки свиней тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Арсиенко, Роман Юрьевич

• Арсиенко, Роман Юрьевич
• кандидат биологических наук
• 2003

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Арсиенко, Роман Юрьевич

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Локусы количественных признаков (QTL) 8 2.1.1. QTL свиней.

2.2. Генетические маркеры (ДНК-маркеры).

2.3. Гены-кандидаты

2.3.1. Позиционные гены-кандидаты

2.3.2. Функциональные гены-кандидаты

2.4. Генное картирование

2.5. Сравнительное генное картирование

2.6. Маркер-зависимая селекция

2.7. Молекулярная генная диагностика 22 2.7.1. ДНК-диагностика в свиноводстве

2.8. Гены белков, связывающих жирные кислоты, как гены- 28 кандидаты содержания внутримышечного жира у свиней

2.8.1. Внутримышечный жир

2.8.2. Гены белков, связывающих жирные кислоты (FABP)

2.8.3. Полиморфизм генов H-FABP и A-FABP

2.8.4. Влияние полиморфизма генов H-FABP и A-FABP на 33 хозяйственно-полезные признаки свиней

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Полиморфизм гена белка, связывающего жирные кислоты (H-FABP), и его влияние на хозяйственно-полезные признаки свиней»

Актуальность темы.

На формирование продуктивности сельскохозяйственных животных оказывают влияние как генетические, так и средовые факторы. В этой связи, при традиционном отборе животных по фенотипическому проявлению признаков оценка истинного генетического потенциала животных может быть занижена.

С развитием молекулярной генетики и молекулярной биологии становится возможным идентификация генов, напрямую или косвенно связанных с хозяйственно-полезными признаками (геномный анализ) [Foster, 1997]. Выявление предпочтительных с точки зрения селекции вариантов таких генов позволит дополнительно к традиционному отбору животных, например, по уровню удоя, содержания жира и т.п., проводить селекцию непосредственно на уровне ДНК, то есть по генотипу (маркер-зависимая селекция).

Использование генетических маркеров локусов количественных признаков сельскохозяйственных животных и, в частности, свиней открывает новые перспективы в селекции. Селекция по генотипу имеет ряд преимуществ перед традиционными методами. Она не учитывает изменчивость хозяйственно-полезных признаков, обусловленную внешней средой, делает возможным селекцию в раннем возрасте независимо от пола животных и в конечном итоге повышает эффективность селекции. Селекция по генотипу способствует идентификации и быстрому введению предпочтительных аллелей из ресурсных популяций в популяции реципиентов с целью повышения продуктивности и устойчивости к заболеваниям улучшаемых пород животных. Оценка животных по генетическим маркерам, связанным с локусами количественных признаков (QTL), особенно важна для таких признаков, которые фенотипически выявляются относительно поздно или только у животных одного пола (например, молочная продуктивность), а также для тех признаков, на уровень проявления которых значительное влияние оказывают внешние факторы. [Зиновьева Н.А. и др., 2002].

Прежде чем внедрить использование генетических маркеров в селекцию животных, необходимо выполнить ряд мероприятий, таких как: (1) выделить спектр генов-кандидатов, которые могут служить молекулярно-генетическими маркерами QTL; (2) разработать тест-системы для анализа их аллельного полиморфизма; (3) определить частоты встречаемости аллельных вариантов данных генов у различных пород сельскохозяйственных животных; (4) провести корреляционные исследования и (5) оценить эффективность использования генетических маркеров в селекции.

Было выдвинуто предположение, что на рост и воспроизводство оказывают влияние более 100 локусов, при этом около 10 из них имеют относительно сильное влияние на соответствующий признак. В настоящее время уже установлена хромосомная локализация ряда QTL свиней, обуславливающих такие селекционные признаки, как энергия роста, жирность туши, качество мяса, плодовитость, иммунный ответ [Rothschild, Plastow, 1999].

Одними из важнейших селекционных признаков свиней являются мясная продуктивность и качество мяса. Так как эти признаки характеризуются негативной корреляцией, то преимущественная селекция свиней по мясности приводит к значительному ухудшению качества мяса. Селекция свиней по качеству мяса и мясной продуктивности традиционными методами затруднена из-за низкого коэффициента наследуемости признака. В этой связи, возникает необходимость в выявлении и использовании в селекции генетических маркеров, напрямую или косвенно связанных с качественными и количественными признаками мясной продуктивности.

В качестве возможных маркеров признаков мясной продуктивности и качества мяса свиней рассматриваются гены семейства связывающих белков жирных кислот (FABP). Один из генов этого семейства - H-FABP представляет большой интерес в качестве гена-кандидата содержания внутримышечного жира - важнейшего показателя, определяющего качество мяса, а также в качестве возможного генетического маркера снижения содержания жира в туше свиней [Gerbens et al., 1997].

Цель и задачи исследования.

Целью диссертационной работы являлось выявление полиморфизма гена белка, связывающего жирные кислоты (H-FABP), и установление его влияния на проявление хозяйственно-полезных признаков свиней различных пород.

Для достижения цели диссертационной работы были поставлены следующие задачи:

1. Пополнить банк ДНК свиней различных пород и популяций.

2. Усовершенствовать методику определения полиморфизма гена Н-FABP свиней на основе анализа ПЦР-ПДРФ.

3. Установить частоты встречаемости аллелей и генотипов гена Н-FABP у различных пород и популяций свиней России.

4. Провести анализ взаимосвязи генотипов гена H-FABP с содержанием внутримышечного жира.

5. Провести анализ взаимосвязи полиморфных вариантов гена H-FABP с рядом хозяйственно-полезных признаков свиней.

Научная новизна.

Предложена методика определения аллельных вариантов гена H-FABP у различных пород свиней РФ. Определены частоты встречаемости аллелей и генотипов гена H-FABP у шести популяций трех пород свиней, разводимых в Российской Федерации. Изучено влияние вариантов исследуемого гена на содержание внутримышечного жира и другие хозяйственно-полезные признаки свиней.

Практическая ценность работы.

Пополнен банк ДНК свиней различных пород и созданы базы данных хозяйственно-полезных признаков свиней трех пород. Предложена методика выявления аллельных вариантов гена H-FABP для проведения популяционно-генетических исследований. Показана связь генотипа DD гена H-FABP с большей толщиной шпика и повышенным содержанием жира в тушах свиней.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Создан банк ДНК свиней трех пород (крупная белая - 6 популяций, белая короткоухая, уржумская).

• Предложен усовершенствованный метод выявления полиморфных вариантов гена H-FABP свиней.

• Выявлены различия в частотах встречаемости аллелей и генотипов исследуемого гена у свиней трех пород.

• Установлены тенденции влияния генотипов H-FABP на проявление хозяйственно-полезных признаков свиней.

Структура и объем работы.

Диссертация написана на 97 страницах, состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методика исследований, результаты исследований, обсуждение, выводы, практические предложения, список литературы. Работа включает 27 таблиц и 11 рисунков. Публикации результатов исследований. По материалам диссертации опубликовано 3 научные работы. Апробация работы.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Арсиенко, Роман Юрьевич

5. ВЫВОДЫ.

1. Пополнен банк ДНК 697 образцами, полученными от 8-ми популяций свиней трех пород (крупная белая, белая короткоухая, уржумская).

2. С помощью модификации ПЦР-ПДРФ анализа предложена методика диагностики полиморфизма гена белка, связывающего жирные кислоты (H-FABP) свиней, что позволило увеличить точность результатов и сократить временные затраты.

3. Выявлен полиморфизм по типам D и Н гена H-FABP у пород свиней: крупная белая, уржумская и белая короткоухая. Доли предпочтительных генотипов dd и НН варьировали в зависимости от породы и составляли у свиней крупной белой породы от 71,9 до 100%, уржумской - 92,4% и белой короткоухой - 89,8%.

4. Содержание внутримышечного жира у свиней с генотипом DdHH в среднем составляло 7,48±0,53%, в то время как у животных с генотипами DDHH и ddHH - соответственно, 6,75±0,42 и 6,44±0,50%.

5. Установлено снижение жирности туш у свиней, несущих аллель d гена H-FABP (dd и Dd < DD). Снижение толщины шпика, веса и процентного содержания внутреннего жира у помесных свиней с генотипом Dd составляло, соответственно, 4,5 мм, 0,3 кг и 0,8%, а у животных с генотипом dd - соответственно, 3,3 мм, 0,2 кг и 0,5% по сравнению с генотипом DD. Толщина шпика у свиноматок уржумской породы с генотипом Dd уменьшилась на 1,0 мм, а с генотипом dd - на 0,3 мм. Толщина шпика у свиноматок крупной белой породы с генотипом DdHH по сравнению с генотипом DDHH снизилась на 2,5 мм.

6. Выявлено уменьшение доли сала и увеличение доли мяса в тушах помесных свиней, несущих аллель d гена H-FABP, по сравнению с генотипом DD. У свиней с генотипом Dd доля сала уменьшилась на 8,9%, а доля мяса увеличилась на 7,0%, в то время как у животных с генотипом dd уменьшение доли сала составило 11,5%, а увеличение доли мяса - 10,9%.

7. Установлено превосходство по многоплодию у свиноматок с генотипом dd по сравнению с генотипами DD и Dd. Многоплодие свиноматок уржумской породы с генотипом dd в среднем по трем опоросам было выше, соответственно, на 1,4 и 1,5 поросенка на опорос (р<0,01), а у свиноматок крупной белой породы - соответственно, на 0,7 и 0,3 поросенка на опорос (р<0,05).

8. Выявлена повышенная молочность свиноматок крупной белой породы, несущих аллель d, по сравнению со свиньями, имеющими генотип DD. Свиноматки ГПЗ «Соколовка» с генотипами dd имели более высокую молочность на 7,9 кг, а животные с генотипом Dd - на 5,1 кг. Молочность свиноматок с генотипом Dd ГПЗ «Никоновское» превышала данный показатель у свиней с генотипом DD на 5,6 кг.

9. Установлено, что свиноматки с генотипом dd превосходили по показателю веса гнезда в 60 дней свиноматок, имеющих генотипы Dd и DD. Свиноматки уржумской породы с генотипом dd имели более высокий вес гнезда по сравнению с животными с генотипами Dd и DD, соответственно, на 31,4 и 15,6 кг, а животные крупной белой породы -соответственно, на 6,9 и 8,3 кг.

6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Лабораториям, занимающимся молекулярно-генетическими исследованиями свиней, рекомендуем использовать созданный нами банк ДНК свиней трех пород.

Для проведения диагностики полиморфизма гена H-FABP свиней рекомендуем использовать предложенные нами тест-системы.

2.9. Заключение.

Приведенный в настоящем разделе анализ литературных данных показывает, что генные карты и карты сцепления сельскохозяйственных животных, и в частности свиней, становятся с каждым годом все более плотными, что уже в ближайшем будущем позволяет прогнозировать идентификацию генетических маркеров и выявление предпочтительных с точки зрения селекции аллелей для каждого QTL. Учитывая преимущества селекции с использованием генетических маркеров, можно предположить, что маркер-зависимая селекция наряду с традиционными методами станет неотъемлемой частью селекционной работы в животноводстве.

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Реактивы и оборудование.

Реактивы

Название Фирма Страна

• 1. Агароза LifeTechnologies США

2. Бромид димидия Boehringer Германия

3. Додеци л сульфат натрия (SDS) Serva США

4. Дитиотреитол (ДТТ) Boehringer Германия

5. Изоамиловый спирт Merk Германия

6. Минеральное масло ICN США

7. Протеиназа К Диа-М Россия

8. Смесь дНТФ СибЭнзим Россия

9. Соляная кислота Merk Германия

Ю.Сульфат аммония Merk Германия

11 .Taq-полимераза Диалат Россия

12.Твин-20 Диа-М Россия

13.Трис-НС1 Roth Германия

14.Уксусная кислота Merk Германия

15.Хлорид натрия ДиаМ Россия

16.Хлорид магния Merk Германия

17.Хлороформ Roth США

18.Цитрат натрия ДиаМ Россия

19.Этилендиамидтетрауксусная Amersham Великобритания кислота (ЭДТА)

Оборудование.

Название Фирма Страна

1. Амплификатор Cyclotemp CTM Россия

2. Амплификатор Amply 4L-50 Biokom Россия

3. Бидистиллятор Millipore Франция

4. Водяная баня

5. Источник тока

6. Источник ультрафиолетового света

7. Прибор для горизонтального электрофореза

8. Термостат

9. Центрифуга для пробирок типа Eppendorf

Биоком

Eppendorf

Биоком

Bio-Rad

Биоком

Биоком

Россия

Россия

Россия

Россия

США

США

Для работы использовали 0,5 и 1,5 мл пробирки типа Eppendorf фирмы Биоком (Россия), одноразовую пластиковую посуду (Costar, США). Все растворы готовили на бидистиллированной диионизированной воде, очищенной на приборе Millia (Millipore).

3.2. Животные.

Для пополнения банка ДНК были отобраны пробы и выделена ДНК от свиней 6-ти популяций крупной белой породы из следующих племенных хозяйств: ГПЗ «Большое Алексеевское», ГПЗ «Никоновское», ГПЗ «Талдом» Московской области, ГПЗ «Соколовка» Кировской области, ГПЗ «Индустрия» Могилевской области и ГПЗ «Заднепровский» Витебской области; белой короткоухой породы из ГПЗ «Сампурский» Тамбовской области; уржумской породы из ГПЗ «Мухинский» Кировской области.

Исследования проводили по схеме, представленной на рисунке 3.

3.3. Отбор, хранение проб и выделение ДНК.

От опытных животных отбирали пробы кожи уха или пробы крови. Пробы крови консервировали путем добавления кислого нитратного раствора (ACD), добавляя на каждые 6 объемов крови 1 объем ACD [Gustavson et al., 1987, Зиновьева и др., 1998]. Пробы ткани непосредственно после их взятия замораживали при температуре -20°С и хранили в таком состоянии до момента использования.

Рисунок 3. Схема исследований.

Отбор проб выделение ДНК

Создание банка ДНК

Создание баз данных

Помесные свиньи, п=41

Белая Короткоухая, п=36

Крупная белая, п=483

Уржумская, п=178

Частоты аллелей

Частоты генотипов

Частоты аллелей

Частоты генотипов D

Q Q S

ТЗ Н

Анализ взаимосвязи с признаками продуктивности свиней

Содержание внутримышечного жира

Толщина шпика

Собственная продуктивность

Морфологический состав туш

Вес и процент внутреннего жира

РОССИЙСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ БИБЛИОТЕКА

ДНК выделяли посредством солевой экстракции, лизиса в буфере Кавасаки или перхлоратным методом с модификациями [Зиновьева и др., 1998; Гладырь и др. 2001]. Качество очистки и концентрацию выделенной ДНК определяли по методике Зиновьевой и др. [1998].

3.4. ПЦР-ПДРФ анализ гена H-FABP.

Выделенную ДНК тестировали по типу А гена H-FABP методом ПЦР-ПДРФ по методике, разработанной Nechtelberger с соавторами [2001], и по типам D и Н по методикам ПЦР-ПДРФ, оптимизированным в ходе выполнения диссертационной работы.

Реакции проводили в конечном объеме 25 мкл с 1 х ПЦР буфером (16,6 мМ (NH4)2S04; 67,7 мМ Трис - НС1, рН = 8,8; 0,1 (v/v) Tween 20), 1,5 мМ MgC12, 200мкМ диоксинуклеозидтрифосфатов, 30 пмоль каждого из праймеров и 1 Ед Taq - полимеразы.

Последовательности праймеров, используемых для ПЦР, представлены в таблице 6.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Арсиенко, Роман Юрьевич, 2003 год

1. Гладырь Е.А., Зиновьева Н.А., Попов А.Н., Марзанов Н.С., Эрнст Л.К., Брем Г. Методические рекомендации по определению вариантов каппа-казеина и бета-лактоглобулина крупного рогатого скота методом ПЦР-ПДРФ анализа // Дубровицы, 2001, 15 с.

2. Дрозденко Н.П., Калинин В.В., Раецкая Ю.И. Методические рекомендации по химическим и биохимическим исследованиям продуктов животноводства и кормов // Дубровицы, 1981, 86 с.

3. Зиновьева Н.А., Попов А.Н., Эрнст Л.К., Марзанов Н.С., Бочкарев В.В., Стрекозов Н.И., Брем Г. Методические рекомендации по использованию метода полимеразной цепной реакции в животноводстве // Дубровицы, 1998, 47 с.

4. Зиновьева Н.А., Гладырь Е.А., Эрнст Л.К., Брем Г. Введение в молекулярную генную диагностику сельскохозяйственных животных //ВИЖ, 2002, 112 с.

5. Кольман Я., Рем К.-Г. Наглядная биохимия // М.: Мир, 2000, с. 122.

6. Лабан Н.А., Василюк О.Я., Зиновьева Н.А., Гладырь Е.А. оценка стрессоустойчивости свиней различными методами // Вестник аграрной науки Причерноморья, 2002b, Вып. 3(17), с. 146-150.

7. Марзанов Н.С., Фролкин Д.А., Зиновьева Н.А., Попов А.Н., Данилин А.В., Брем Г. RYRl-ген у свиней отечественных и зарубежных пород // Доклады РАСХН, 2001, № 1, с. 34-36.

8. Меркурьева Е.К., Абрамова З.В., Бакай А.В., Кочиш И.И. Генетика // Учебник для студентов вузов по специальности "Зоотехния" М., Агропромиздат, 1991,446 с.

9. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. Скрининг RYR-гена свиней скороспелой мясной породы // Сборник материалов международной научной конференции «Молекулярно-генетические маркеры животных», Киев, 1999, С. 21-22

10. Рыжова Н.В., Калашникова Л.А. ДНК-диагностика стрессчувствительности свиней скороспелой мясной породы Диагностика полиморфных вариантов RYRl-гена. // Вестник РАСХН, 2000, N1, С. 68-71

11. Рыжова Н.В., Калашникова JI.A., Новиков А.А. Частота встречаемости мутантного аллеля RYRl-гена в популяциях свиней крупной белой породы // Доклады РАСХН, 2001, N 6, С. 31-35

12. Фролкин Д.А. Скрининг гена злокачественного гипертермического синдрома (MHS) у свиней // Автореф. канд. дисс., ВИЖ, 2000.

13. Andersson-Eklund L., Marklund L., Lundstrom K., Haley C.S., Andersson K., Hansson I., Moller M., Andersson L. Mapping quantitative trait loci for carcass and meat quality traits in a wild boar x Large White intercross // J Anim Sci., 1998, 76, 694-700.

14. Band M.R., Larson J.H., Rebeiz M, Green CH.A., Heyen D.W., Donovan J., Windish R., Steining CH., Mahyuddin P., Womack J.E., Lewin H.A. An ordered comparative map of the cattle and human genomes // Genome Res., 2000, 10, 1359-1368.

15. Barendse W., Vaiman D., Kemp S.J., Sugimoto Y., Armitage S.M., Williams J.L., Sun H.S., Eggen A., Agaba M., Aleyasin S.A., Band M., Bishop M.D., Buitkamp J., Byrne K., Collins F., Cooper L., Coppettiers

16. W., Denys В., Drinkwater R.D., Eastereday K., Elduque C., Ennis S., Erhardt G., Li L., Lil L. A medium-density genetic linkage map of the bovine genome // Mamm. Genome, 1997, 8, 21-28.

17. Bishop M.D., Kappes S.M., Keele J.W., Stone R.T., Sunden S.L., Hawkins G.A., Toldo S.S., Fries R., Grosz M.D., Yoo J.A. A genetic linkage map for cattle//Genetics, 1994, 136,619-639.

18. Brem G., Brenig B. Molekulare Genotyp-Diagnostik des Malignen Hyperthermic-Syndroms zur effizienten Zucht stressresistenter Schweine // Wien. Tierarztl. Msch., 1992, 79, 301-305.

19. Brenig В., Brem G. Molecular cloning and analysis of the porcine 'Halothane' gene // Arch. Anim. Breed., 1992, 35, 129-135.

20. Brunner R.M., Henke M., Guerin G., Goldammer Т., Seyfert H.M., Schwerin M. The macrophage expressed variant of the bovine lysozyme-encoding gene maps to chromosome 5q23 // Mamm. Genome 1994, 5, 834.

21. Carey J.O., Neufer P.D., Farrar R.P., Veerkamp J.H., Dohm G.L. Transcriptional regulation of muscle fatty acid-binding protein // Biochem J., 1994, 298, Pt 3, 613-617.

22. Casas E., Prill-Adams A., Price S.G., Clutter A.C., Kirkpatrick B.W. Relationship of growth hormone and insulin-like growth factor-1 genotype with growth and carcass traits in swine // Anim. Genet., 1997a, 28, 88-93.

23. Casas E., Prill-Adams A., Price S.G., Clutter A.C., Kirkpatrick B.W. Mapping genomic regions associated with growth rate in pigs // J. Anim. Sci., 1997b, 75,2047-2053.

24. De Koning D.J., Janss L.L.J., Van Arendonk J.A.M., Van Oers P.A.M., Groenen M.A.M. Mapping major genes affecting meat quality in meishan cross breds using standard linkage software // Proc. 6th World Cong. Genet. Appl. Livest. Prod., 1998, 26, 410.

25. Emnett R., Moeller S., Irvin K., Rothschild M., Plastow G., Goodwin R. Association Studies with Heart Fatty Acid Binding Protein-1 and Calpastatin // The Ohio state university Bulletin: Research and Reviews: Swine 2001, Special Circular 185-01, 2001.

26. Foster M. Genomanalyse // Tierzucht und allgemeine Landwirtschaftslehre fur Tiermediziner. Herausgegeben von KrauBlich H, Brem G., Enke Verlag, 1997, S. 77-109.

27. Fujii J., Otsu K., Zorzato F., De Leon S., Khanna V.K., Weiler J.E., O'Brien P.J., Maclennan D.H. Identification of a mutation in porcine ryanodine receptor associated with malignant hyperthermia // Science, 1991,253,448-451.

28. Geldermann H., Mtiller E., Beeckmann P., Knorr C., Yue G., Moser G. Mapping of quantitative trait loci by means of marker genes in F2 generations of wild boar Pietrain and Meishan pigs // J Anim Breed Genet., 1996, 113,381-387.

29. Georges M., Massey J.M. Velogenetics, or the synergistic use of marker assisted selection and germ-line manipulation // Theriogenology, 1991, 35, 151-159.

30. Gerbens F., Rettenberger G., Lenstra J.A., Veerkamp J.H., Те Pas M.F. Characterization, chromosomal localization, and genetic variation of theporcine heart fatty acid-binding protein gene // Mamm. Genome, 1997, 8, 328-332.

31. Gerbens F., Harders F.L., Groenen M.A., Veerkamp J.H., Те Pas M.F. A dimorphic microsatellite in the porcine H-FABP gene at chromosome 6 // Anim Genet., 1998a, 29(5), 408.

32. Gerbens F., Verburg F.J., Van Moerkerk H.T., Engel В., Buist W., Veerkamp J.H., Те Pas M.F. Associations of heart and adipocyte fatty acid-binding protein gene expression with intramuscular fat content in pigs //J Anim Sci., 2001, 79(2), 347-354.

33. Glatz J.F., van der Vusse G.J. Intracellular transport of lipids // Mol Cell Biochem., 1989, 88(1-2), 37-44.

34. Glatz J.F., Borchers Т., Spener F., van der Vusse G.J. Fatty acids in cell signalling: modulation by lipid binding proteins // Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids, 1995, 52(2-3), 121-127.

35. Glatz J.F., Luiken J.J., van Nieuwenhoven F.A., Van der Vusse G.J. Molecular mechanism of cellular uptake and intracellular translocation of fatty acids // Prostaglandins Leukot Essent Fatty Acids, 1997, 57(1), 3-9.

36. Grindflek E., Szyda J., Liu Z., Lien S. Detection of quantitative trait loci for meat quality in a commercial slaughter pig cross // Mamm. Genome., 2001, 12, 299-304.

37. Grunwald K. A., Schuler K., Ulmen P.J., Lipton B.A., Kaiser M., Buhman K., Attie A. D. Identification of a novel Arg—>Cys mutation in the LDL receptor that contributes to spontaneous hypercholesterolemia in pigs // J. Lipid Res., 1999, 40,475-485.

38. Gu Z.X., Womack J.E., Kirkpatrick B.W. Synteny mapping of four genes from the short arm of human chromosome 19 to bovine chromosome 7 // Cytogenet. Cell Genet., 1997, 79, 225-227.

39. Gustafson S., Proper J.A., Bowie E.J.W., Sommer S.S. Parameters affecting the yield of DNA from human blood // Anal. Biochem., 1987, 165, 294-296.

40. Guthmann F., Hohoff C., Fechner H., Humbert P., Borchers Т., Spener F., Rustow B. Expression of fatty-acid-binding proteins in cells involved in lung-specific lipid metabolism // Eur J Biochem., 1998, 253(2), 430-436.

41. Hasler-Rapacz J., Kempen H.J., Princen H.M., Kudchodkar B.J., Lacko A., Rapacz J. Effects of simvastatin on plasma lipids and apolipoproteins in familial hypercholesterolemic swine // Arterioscler Thromb Vase Biol., 1996, 16(1), 137-143.

42. Hawken R.J., Murtaugh J., Flickinger G.H., Yerle M., Robic A., Milan D., Gellin J., Beattie C.W., Schook L., Alexander L.J. A first-generationporcine whole-genome radiation hybrid map // Mamm. Genome, 1999, 10, 824-830.

43. Henke M., Hobom G., Senft В., Seyfert H.M. Structural deviations in a bovine low expression lysozyme-encoding gene active in tissues other than stomach//Gene, 1996, 178, 131-137.

44. Janss L.L., van Arendonk J.A., Brascamp E.W. Bayesian statistical analyses for presence of single genes affecting meat quality traits in a crossed pig population//Genetics, 1997, 145(2), 395-408.

45. Jefreys A.J., Wilson V., Thein S.L. Individual-specific 'fingerprints' of human DNA, Nature, 1985, 316, 76-79.

46. Jiang Z.H., Gibson J.P. Genetic polymorphisms in the leptin gene and their association with fatness in four pig breeds // Mamm Genome, 1999, 10(2), 191-193.

47. Kijas J.M., Juneja R.K., GafVert S., Andersson L. Detection of the causal mutation for canine leukocyte adhesion deficiency (CLAD) using pyrosequencing // Anim Genet., 2000, 31(5), 326-328.

48. Knorr C., Moser G., Mtiller E., Geldermann H. Associations between GH gene variations with performance traits in F2 generations of European Wild Boar, Pietrain and Meishan Pigs // Anim. Genet., 1997,28, 124-128.

49. Kwok P.Y., Deng Q., Zakeri H., Taylor S.L., Nickerson D.A. Increasing the information content of STS-based genome maps: identifying polymorphisms in mapped STSs// Genomics, 1996, 31, 123-126.

50. Leitch A.R., Schwarzacher Т., Jachson D., Leitch I.J. Microscopy Handbooks 27: In situ hybridization. BIOS Scientific Publishers, Oxford, 1994, 68-70.

51. Lenstra J.A., Van Boxtel J.A., Zwaagstra K.A., Schwerin M. Short interspersed nuclear element (SINE) sequences of the Bovidae. Anim. Genet, 1993, 24,33-39.

52. Lin W.H., Huang L.S., Ren J., Deng S.H., Wang W.J., Liu B.S., Zhou L.H., Chen C. Y. Research on genetic variation of heart fatty acid-binding protein gene in ten pig breeds // Yi Chuan Xue Bao, 2002, 29(1), 12-15.

53. Meadus W.J., Maclnnis R., Robertson W.M. Evaluation of the genetic markers: HFABP and AFABP in the control of marbling fat in pork // Advances in Pork Production, 2001, 12, Abstr. 2.

54. Messer L., Wang L., Yelich J., Pomp D., Geisert R., Rothschild M.F. Linkage mapping of the retinoic acid receptor-gamma gene to porcine chromosome 5 //Anim. Genet., 1996a, 27, 175-177.

55. Messer L., Wang L., Legault C., Rothschild M.F. Mapping and investigation of candidate genes for litter size in French Large White pigs. Anim. Genet., 1996b, 27 (Suppl. 2), 114.

56. Messer L., Wang L., Yelich J., Pomp D., Geisert R., Rothschild M.F. Linkage mapping of the retinol-binding protein 4 (RBP4) gene to porcine chromosome 14 // Mamm. Genome, 1996c, 7, 396.

57. Molenaar A.J., Davis S.R., Wilkins R.J. Expression of alpha-lactalbumin, alpha-S 1 -casein, and lactoferrin genes is heterogeneous in sheep and cattle mammary tissue // J.Histochem. Cytochem., 1992,40, 611-618.

58. Moore S.S., Byrne K., Berger K.T., Barendse W., McCarthy F., Womack J.E., Hetzel D.J. Characterization of 65 bovine microsatellites // Mamm. Genome, 1994, 5, 84-90.

59. Nechtelberger D., Pires V., Soolknet J., Stur I., Brem G., Mueller M., Mueller S. Intramuscular fat content and genetic variants at fatty acidbinding protein loci in Austrian pigs // J Anim Sci., 2001, 79(11), 27982804.

60. Nezer C., Moreau L., Brouwers В., Coppieters W., Dettilleux J., Hanset R., Karim L., Kvasz A., Leroy P., Georges M. An imprinted QTL with major effect on muscle mass and fat deposition maps to the IGF2 locus in pigs // Nat. Genet., 1999, 21, 155-156.

61. Nicholas F.W. Introduction to Veterinary Genetics. Oxford University Press, Oxford, New York, Tokyo, 1996, 19-21, 34, 69-71, 254, 270.

62. Nielsen V.H., Larsen N.J., Ageraard N. Association of DNA polymorphism in the growth hormone gene with basal plasma growth hormone concentration and production traits in pigs. J. Anim. Breeding and Genet., 1995, 112, 205-221.

63. Nielsen V.H., Davoli R., Korsgaard I.R., Thomsen В., Bigi D., Ruso V. Association of a DNA Polymorphism in the aminopepitdase N (ANPEP) locus with production traits in pigs // Anim. Genet., 1996, 27 (Suppl. 2), 115.

64. Ovilo, C.M., Perez-Enciso M., Barragan C., Clop A., Rodriguez C., Oliver M.A., Того M.A., Noguera J.L. A QTL for intramuscular fat and backfat thickness is located on porcine chromosome 6 // Mamm. Genome, 2000b, 11,344-346.

65. Ovilo C., Oliver A., Noguera J.L., Clop A., Barragan C., Varona L., Rodriguez С., Того M., Sanchez A., Perez-Enciso M., Silio L. Test for positional candidate genes for body composition on pig chromosome 6 // Genet Sel Evol., 2002, 34(4), 465-479.

66. Owada Y., Yoshimoto Т., Kondo H. Spatio-temporally differential expression of genes for three members of fatty acid binding proteins indeveloping and mature rat brains I I J. Chem Neuroanat., 1996, 12(2), 113122.

67. Paszek A.A., Wilkie P.J., Flickinger G.H., Rohrer G.A., Alexander L.J., Beattie C.W., Schook L.B. Interval mapping of growth in divergent swine cross//Mamm Genome, 1999,10, 117-122.

68. Prinsen C.F., Veerkamp J.H. Transfection of L6 myoblasts with adipocyte fatty acid-binding protein cDNA does not affect fatty acid uptake but disturbs lipid metabolism and fusion // Biochem J., 1998, 15, 329 (Pt 2), 265-273.

69. Rathje T.A., Rohrer G.A., Johnson R.K. Evidence for quantitative trait loci affecting ovulation rate in pigs // J Anim Sci., 1998, 75,1486-1494.

70. Rebeiz M., Lewin H.A. COMPASS of 47787 cattle ESTs // Anim. Biotechnol., 2000, 11, 75-241.

71. Rexroad C.E., Owens E.K., Johnson J.S., Womack J.E. A 12000 rad whole genome radiation hybrid panel for high resolution mapping in cattle // Anim. Genet., 2000, 31,262-265.

72. Richardson K.K., Crosby R.M., Good P.J., Rosen N.L., Mayfield J.E. Bovine DNA contains a single major family of interspersed repetitive sequences // Eur. J. Biochem., 1986, 154, 349-354.

73. Rohrer G.A. Identification of quantitative trait loci affecting birth characters and accumulation of backfat and weight in a Meishan-White Composite resource population // J Anim Sci., 2000, 78, 2547-2553.

74. Rohrer G.A, Keele J.W. Identification of quantitative trait loci affecting carcass composition in swine: I. Fat deposition traits // J Anim Sci., 1998a, 76, 2247-2254

75. Rohrer G.A, Keele J.W. Identification of quantitative trait loci affecting carcass composition in swine: II. Muscling and wholesale product yield traits //J Anim Sci., 1998b, 76, 2255-2262.

76. Rothschild M.F., Messer L., Day A., Wales R., Short Т., Southwood O., Plastow G. Investigation of the retinol-binding protein 4 (RBP4) gene as acandidate gene for increased litter size in pigs // Mamm. Genome, 2000, 11,75-77.

77. Rothschild M.F., Liu H.C., Tuggle C.K., Yu T.P., Wang L. Analysis of pig chromosome 7 genetic markers for growth and carcass performance traits // J Anim Breed Genet., 1995, 112, 341-348.

78. Rothschild M.F., Plastow G.S. Advances in pig genomics and industry applications // AgBiotechNet 1999, 1, ABN 007

79. Saiki R.K., Gelfand D.H., Stoffel S., Scharf S.J., Higuchi R., Horn G.T., Mullis K.B., Erlich H.A. Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA-polimerase // Science, 1988, 239,487-491.

80. Schwerin M. Struktur und Funktion von Genen beim Nutztier // In: 18. Hiilsenberger Gesprache 2000, Weimar, 2000, 28-34.

81. Stancekova K., Vasicek D., Peskovicova D., Bulla J., Kubek A. Effect of genetic variability of the porcine pituitary-specific transcription factor (PIT-1) on carcas traits in pigs // Anim. Genet., 1999, 30(4), 313-315.

82. Steinhoff U.M., Senft В., Seyfert H.M. Lysozyme-encoding bovine cDNAs from neutrophile granulocytes and mammary gland are derived from a different gene than stomach lysozymes // Gene, 1994, 143, 271276.

83. Soumillion A., Erkens J.H., Lenstra J.A., Rettenberger G., Те Pas M.F. Genetic variation in the porcine myogenin gene locus // Mamm. Genome, 1997a, 8(8), 564-568.

84. Soumillion A., Rettenberger G., Vergouwe M.N., Erkens J.H., Lenstra J.A., Те Pas M.F. Assignment of the porcine loci for MYOD1 to chromosome 2 and MYF5 to chromosome 5 // Anim Genet., 1997b, 28(1), 37-38.

85. Tautz D. Hypervariability of simple sequences as a general source for polymorphic DNA markers //Nucleic. Acids. Res., 1989,17, 6463-6471.

86. Те Pas M.F.W., Soumillion A., Rettenberger G., Van Den Bosch T.J., Veninga G., Meuwissen, T.H.E. Characterization of the porcine myogenin gene locus and association between polymorphisms and growth traits // Anim. Genet., 1996, 27 (Suppl. 2), 117.

87. Urban Т., Mikolasova R., Kuciel J., Ernst M., Ingr I. A study of associations of the H-FABP genotypes with fat and meat production of pigs // J. Appl. Genet., 2002,43(4), 505-509.

88. Wada Y., Akita Т., Awata Т., Furukawa Т., Sugai N., Inage Y., Ishii K., Ito Y., Kobayashi E., Kusumoto H., Matsumoto Т., Mikawa S., Miyake M., Murase A., Shimanuki S., Sugiyama Т., Uchida Y., Yanai S., Yasue H.

89. Quantitative trait loci (QTL) analysis in a Meishan x Gottingen cross population I I Anim Genet., 2000, 31, 376-384.

90. Wang L., Yu T.P., Tuggle C.K., Liu H.G., Rothschild M.F. A directed search for quantitative trait loci on chromosomes 4 and 7 in the pig // J Anim Sci., 1998, 76, 2560-2567.

91. Womack J. E., Johnson J.S., Owens E.K., Rexroad C.E., Schlaepfer J., Yang Y.P. A whole-genome radiation hybrid panel for bovine gene mapping // Mamm. Genome, 1997, 8, 854-856.

92. Yu T.-P., Tuggle C.K., Schmitz C.B., Rothschild M.F. Association of PITI polymorphisms with growth and carcass traits in pig // J. Anim. Sci., 1995, 73, 1282-1288.

93. Yu T.-P., Wang L., Tuggle C.K., Rothschild M.F. Mapping genes for fatness and growth on pig chromosome 13: A search in the region close to the pig PITI gene // J. Anim. Breed. Genet., 1998, 116, 269-280.

94. Zhao, Y. F., Li N., Chen Y., Wu Ch. X. Preliminary research on RFLP's of the FSH beta subunit gene // Acta Vet. Zootech. Sinica, 1998, 29, 23-26.

95. Zimmerman A.W., Veerkamp J.H. Members of the fatty acid-binding protein family inhibit cell-free protein synthesis // FEBS Lett., 1998, 437(3), 183-186.

96. Zschiesche W., Kleine A.H., Spitzer E., Veerkamp J.H., Glatz J.F. Histochemical localization of heart-type fatty-acid binding protein in human and murine tissues//Histochem Cell Biol., 1995, 103(2), 147-156.