Показатели гемограммы и сывороточные маркеры воспаления при фебрильных инфекциях у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.10, кандидат наук Мельничук, Олег Сергеевич

• Мельничук, Олег Сергеевич
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Мельничук, Олег Сергеевич

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. Современные принципы диагностики тяжелых бактериальных

инфекций у детей (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Фебрильные инфекции у детей

1.2. Лабораторные маркеры фебрильных инфекций

1.2.1. Уровень лейкоцитов, нейтрофилов и незрелых гранулоцитов как

маркер бактериального воспаления

1.2.2. С-реактивный белок

1.2.3. Прокальцитонин

1.2.4. Эквивалент содержания гемоглобина в ретикулоцитах (RET-He)

1.3. Использование лабораторных маркеров при фебрильных инфекциях у детей

1.3.1. Стабильность показателей гемограммы

1.3.2. Референсные интервалы

1.3.3. Диагностические характеристики лабораторного теста

ГЛАВА 2. Объем и методы исследования

2.1. Определение стабильности показателей гемограммы

2.2. Расчет референсных интервалов показателей гемограммы

2.3. Диагностические характеристики лабораторных маркеров тяжелой бактериальной инфекции

2.4. Статистические методы исследования

ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований

3.1. Стабильность показателей гемограммы в зависимости от времени и температуры хранения образцов крови

3.2. Референсные интервалы показателей гемограммы у детей

3.3. Оценка диагностических характеристик лабораторных тестов у детей с

фебрильными инфекциями

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Показатели гемограммы и сывороточные маркеры воспаления при фебрильных инфекциях у детей»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования и степень ее разработанности

Фебрильные инфекции у детей младшего возраста обусловливают до 2035% обращений к врачу и госпитализаций в этой возрастной группе [3,110,153]. Тяжелые бактериальные инфекции (ТБИ) при этом встречаются у 10-25% обратившихся, но именно эти состояния могут иметь крайне неблагоприятный прогноз в случае несвоевременной диагностики [37,76]. Для детей с ТБИ быстрое установление диагноза и назначение антибактериальной терапии являются жизненно важными [25,107]. Вместе с тем неоправданное назначение антибиотиков детям с вирусной лихорадкой способствует росту микробной резистентности, увеличивает затраты на лечение и повышает частоту лекарственных побочных эффектов.

Особые трудности представляет диагностика ТБИ при отсутствии видимого очага бактериальной инфекции, а такие пациенты составляют до 20% лихорадящих детей [30,101]. Клиническая картина болезни в этих случаях представлена лихорадкой и интоксикацией различной степени. Большое значение при оценке вероятности ТБИ имеют возраст (к группе риска по развитию ТБИ относятся дети до 36 месяцев); наличие сопутствующей патологии (у иммунокомпрометированных больных риск ТБИ особенно высок); выраженность катаральных явлений (наличие катара характерно для вирусных инфекций) [55].

Исследование показателей гемограммы у детей с лихорадкой исторически является наиболее распространенным лабораторным тестом в педиатрической практике [30]. Тем не менее, опираясь на данные клинического осмотра пациента, различные клинические индексы и шкалы риска ТБИ, а также показатели гемограммы, однозначно диагностировать тяжелую бактериальную инфекцию бывает сложно [87,112,144]. Практическое использование лабораторных тестов, прежде всего различных маркеров бактериальных инфекций, в диагностике ТБИ предполагает наличие определенного стандарта (т.е. определенной величины или

интервала величин), с которым можно сравнить полученный результат. Очевидно, надежная интерпретация любого теста возможна только при применении адекватных стандартов. В качестве стандарта можно использовать ряд подходов: (1) сопоставление результатов лабораторного теста с референсным интервалом (РИ) и (2) сравнение результата теста с пороговым значением (cut-off).

РИ параметров гемограммы у детей давно не пересматривались. Многие современные справочники до настоящего времени ссылаются на публикации 1960-70-х годов, когда основным методом оценки количества клеток крови являлся подсчет в камере Горяева и микроскопическое исследование мазка крови — подсчет субпопуляций лейкоцитов на 100 клеток. Данный метод недостаточно стандартизирован и отличается низкой воспроизводимостью.

Современные гематологические анализаторы, использующие проточную цитометрию с флуоресцентными красителями, представляют результат после анализа тысяч клеток. Это позволяет надежно дифференцировать основные субпопуляции лейкоцитов в приборах с функцией 5-DIFF. Однако из-за отсутствия РИ показателей гемограммы, адаптированных к новым методикам, клиническое использование результатов автоматизированного анализа крови может быть затруднительным.

Широкое применение в диагностике ТБИ нашли маркеры острого воспаления С-реактивный белок (С-РБ) и прокальцитонин (ПКТ) [108,139]. Однако их диагностическая ценность относительна и требует дополнительных исследований [1,66,100,138].

В связи с этим возникает необходимость разработки и внедрения в педиатрическую практику эффективных лабораторных подходов в дифференциальной диагностике ТБИ у детей с лихорадкой.

Цель исследования — определить референсные интервалы показателей гемограммы и установить закономерности изменения этих показателей и сывороточных маркеров воспаления при тяжелых бактериальных инфекциях у детей.

Задачи исследования

1. Проанализировать влияние времени и условий хранения образцов крови на показатели гемограммы.

2. Определить референсные интервалы показателей гемограммы у здоровых детей и описать их возрастные особенности.

3. Выявить изменения лабораторных маркеров воспаления при фебрильных инфекциях у детей.

4. Определить и сравнить диагностическую точность, чувствительность, специфичность, отношение правдободобия и посттестовую вероятность положительного и отрицательного результатов исследованных маркеров воспаления при дифференциальной диагностике тяжелых бактериальных инфекций у детей с инфекционной лихорадкой.

Научная новизна

Проведенный анализ данных о влиянии времени и температуры хранения образцов крови на показатели гемограммы показал, что большинство показателей (гемоглобин, эритроциты, МСН, эквивалент содержания гемоглобина в ретикулоцитах (ЯЕТ-Не), лейкоциты, нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, базофилы, тромбоциты) стабильны в течение как минимум 24 ч вне зависимости от температуры хранения. Доказана возможность хранения образцов крови при 4-8°С в течение 72 ч без существенных изменений всех изученных параметров (за исключением гематокрита, МСУ и числа эозинофилов). Эти результаты могут быть положены в основу планирования преаналитического этапа работы лаборатории.

Впервые у детей рассчитаны референсные интервалы ретикулоцитов, фракций незрелых (И^Р) и зрелых (ЬБЯ) ретикулоцитов, КЕТ-Не, ширины распределения эритроцитов по объему (RDW-CV) для гематологического анализатора.

По результатам трехлетнего исследования точности постановки пациенту диагноза тяжелой бактериальной инфекции с учетом результатов исследованных

лабораторных маркеров воспаления установлено, что уровень С-РБ обладает более высокой диагностической точностью, по сравнению с уровнем ПКТ, числом лейкоцитов, нейтрофилов, незрелых гранулоцитов, уровнем RET-He.

Установленные пороговые значения исследованных показателей позволяют оценить влияние результата лабораторного исследования на посттестовую вероятность тяжелой бактериальной инфекции у конкретного пациента.

Разработан алгоритм оценки посттестовой вероятности тяжелой бактериальной инфекции в зависимости от результата лабораторного исследования (уровень лейкоцитов, нейтрофилов, незрелых гранулоцитов, RET-He, С-РБ, ПКТ), что существенно облегчает принятие решения о терапевтической тактике у детей с фебрильными инфекциями.

Теоретическая и практическая значимость

В исследовании проанализировано влияние времени и температуры хранения образцов крови на основные показатели гемограммы, что обосновывает адекватное планирование преаналитического этапа выполнения анализов.

Рассчитаны и внедрены в практическую работу клиник ФГБНУ НЦЗД референсные интервалы показателей гемограммы у детей для гематологического анализатора, согласно международным рекомендациям CLSI С28-АЗ [59].

Установлено, что медианы лейкоцитов, нейтрофилов, незрелых гранулоцитов, С-РБ и ПКТ были статистически значимо выше у пациентов с тяжелой бактериальной инфекцией. Впервые доказано, что уровень RET-He у детей с тяжелой бактериальной инфекцией существенно ниже по сравнению с пациентами с другими фебрильными инфекциями.

Проведенный анализ диагностической точности лабораторных маркеров воспаления свидетельствует о том, что при дифференциальной диагностике тяжелой бактериальной инфекции у детей младшего возраста наиболее информативным показателем является уровень С-РБ (AUC 0,95). При уровне С-РБ >37 мг/л вероятность тяжелой бактериальной инфекции составляет 70%, а при уровне С-РБ <37 мг/л - 4%.

Положения, выносимые на защиту

1. Стабильность показателей гемограммы в зависимости от температуры и времени хранения образцов крови позволяет правильно планировать преаналитический этап лабораторных исследований.

2. Рассчитанные референсные интервалы показателей гемограммы для гематологического анализатора могут быть использованы в клинической практике педиатров.

3. Установленный уровень порогового значения уровня лейкоцитов, нейтрофилов, незрелых гранулоцитов, КЕТ-Не, С-РБ, ПКТ может быть использован для диагностики тяжелой бактериальной инфекции у детей с фебрильными инфекциями.

4. Наибольшей диагностической точностью при дифференцировании тяжелой бактериальной инфекции у детей с инфекционной лихорадкой обладает исследование уровня С-РБ.

Внедрение результатов работы в практику

Полученные данные о стабильности показателей гемограммы и разработанные референсные интервалы этих показателей внедрены в централизованной клинико-диагностической лаборатории НИИ педиатрии ФГБНУ НЦЗД. Разработанный алгоритм клинико-лабораторной диагностики тяжелой бактериальной инфекции у детей с фебрильными инфекциями применяется в повседневной клинической практике в отделении неотложной педиатрии с группой анестезиологии и реанимации НИИ профилактической педиатрии и восстановительного лечения ФГБНУ НЦЗД. Результаты диссертационного исследования внедрены в материалы лекций и используются в учебной программе на кафедре педиатрии и ревматологии в ГБОУ ВПО Первого МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России.

Личный вклад соискателя

Все этапы диссертационной работы были выполнены при непосредственном участии автора. Автор участвовал в разработке структуры исследования, выполнял сбор клинических и лабораторных данных, непосредственно проводил анализ показателей гемограммы, сывороточных маркеров воспаления С-РБ и ПКТ. Самостоятельно выполнена статистическая обработка данных исследования и интерпретация полученных результатов.

Апробация работы

Материалы диссертации были доложены и рекомендованы к защите на совместной научной конференции лабораторного отдела, клинических подразделений ФГБНУ НЦЗД и кафедры Клинической лабораторной диагностики ГБОУ ДПО РМАПО Минздрава России от 19 июня 2014 г.

Основные положения диссертации были доложены на ХУ-ХУШ Конгрессах педиатров России (Москва, 2011, 2012, 2013, 2014 гг.), XVI Научно-практической конференции «Высокие технологии и модернизация в лабораторной медицине» (Москва, 2011 г.), Всероссийском конгрессе «Инфекционные болезни у детей» (Санкт-Петербург, 2011 г.), XIX и XX Европейских конгрессах по клинической химии и лабораторной медицине 1РСС-\УогМ1аЬ-Еиготес11аЬ (Берлин, 2011 г., Милан, 2013 г.), XVIII Всероссийской научно-практической конференции «Аналитическая надежность и диагностическая значимость лабораторной медицины» (Москва, 2013 г.), III Конгрессе педиатров Урала (Екатеринбург, 2014 г.) XIX Всероссийской научно-практической конференции «Консолидация науки и практики в лабораторной медицине» (Москва, 2014), научно-практических региональных конференциях педиатров (Рязань, 2011 г., Казань, 2012 г., Москва, 2010-12 гг., Якутск, 2013 г., Петропавсловск-Камчатский, 2013 г., Магадан, 2014 г., Хабаровск, 2014 г.).

Проведение диссертационного исследования одобрено локальным независимым этическим комитетом при ФГБНУ НЦЗД, протокол № 11 от 14 ноября 2011 г.

Публикации по теме диссертации: По теме диссертации опубликовано 7 печатных работ, из них 6 публикаций в российских изданиях, входящих в перечень ВАК.

Структура и объем диссертации

Диссертация изложена на 96 страницах машинописного текста, иллюстрирована 10 рисунками и 12 таблицами. Работа содержит следующие главы: «Введение», «Обзор литературы», «Объем и методы исследования», «Результаты собственных исследований», «Заключение», «Выводы» и «Практические рекомендации». Список литературы содержит 155 источников (21 отечественных и 134 зарубежных).

/

ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННЫЕ ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ ТЯЖЕЛЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ У ДЕТЕЙ. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Фебрильные инфекции у детей

Фебрильные инфекции у детей младшего возраста обусловливают до 2035% обращений к врачу и госпитализаций в этой возрастной группе [80,110,153]. Каждый ребенок младше 5 лет ежегодно переносит в среднем от 3 до 6 инфекционных эпизодов, сопровождающихся лихорадкой [23,110,135]. В большинстве случаев такие инфекции протекают доброкачественно и не представляют угрозы жизни и здоровью ребенка. Однако в ряде случаев фебрильная лихорадка обусловлена тяжелой бактериальной инфекцией (ТБИ), которая требует активной тактики ведения пациента и назначения антибактериальных препаратов.

ТБИ встречаются у 10-25% обратившихся детей с лихорадкой, и именно эти состояния могут иметь крайне неблагоприятный прогноз в случае несвоевременной диагностики [76]. К ТБИ относят пневмонию, пиелонефрит, менингит, бактериемию, сепсис [91,114,141]. Риск развития и неблагоприятных исходов ТБИ особенно высок у детей младше 3 лет [55].

Дополнительные трудности представляет дифференциальная диагностика ТБИ у лихорадящих детей при отсутствии видимого очага инфекции. Эти пациенты составляют до 20% всех лихорадящих детей [30,76,105]. Причиной лихорадки без видимого очага инфекции могут быть серьезные состояния, в частности, скрытая (оккультная) бактериемия. Термин «бактериемия» был предложен для обозначения роста бактерий в крови у детей в возрасте от 3 до 36 месяцев с лихорадкой без видимого очага инфекции [43]. Клиническая картина болезни в этих случаях представлена лихорадкой и интоксикацией различной степени.

Во многих странах вакцинация против Haemophilus influenzae тип Ъ и Streptococcus pneumoniae, основных возбудителей ТБИ, позволила значительно

(до 1-2%) снизить распространенность этих инфекций в возрастной группе детей до 36 месяцев [35,81,86,149,152]. В отсутствие вакцинации против основных возбудителей ТБИ, распространенность бактериемии достигала 12%. При этом на долю пневмококка приходилось 50-90% случаев заболеваемости, от 3 до 25% случаев вызывала Н. influenzae типа Ь, а остальные случаи бактериемии были обусловлены Salmonella ssp. и Neisseria meningitidis [31,93]. Одновременно со снижением распространенности бактериемии и менингита на фоне вакцинации от пневмококка и гемофильной палочки во многих странах сократилась и заболеваемость пневмококковой пневмонией [117].

Для дифференциальной диагностики фебрильных инфекций у детей предложены различные клинические шкалы [38,62]. Они основаны на одновременном учете некоторого числа клинических признаков, каждый из которых делает свой вклад в общий «счет». Например, широко используемая в клинике Йельская шкала оперирует шестью признаками: характер крика, реакция на обращение родителей, положение, цвет кожных покровов, степень гидратации и эмоциональный контакт. При оценке по этой шкале в 10 и менее баллов риск ТБИ составляет 3%, оценка > 16 баллам повышает риск ТБИ до 92% [39]. Очевидно, что значения 11-15 баллов не будут надежно дифференцировать ТБИ.

Craig J.C. и соавторы [55] оценивали диагностическую значимость 40 клинических признаков по выявлению риска ТБИ у детей младше 5 лет с лихорадкой в условиях отделения реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ) и построили математическую модель на 15781 пациенте. Данное исследование показало, что 7% всех пациентов ОРИТ поступают с диагнозами инфекции мочевыводящих путей (ИМП), пневмонии и бактериемии, но лишь 70-80% из них получают антибактериальную терапию при первичном осмотре, тогда как 20% детей неоправданно получают антибиотики. Было также установлено, что использование математической модели на основе клинических данных при первичном медицинском осмотре позволяет повысить чувствительность клинического осмотра при выявлении ТБИ в условиях ОРИТ [55].

В целом, математические модели, учитывающие только клинические данные, не отличаются высокой диагностической точностью, что, вероятно, связано широким индивидуальным разнообразием симптомов, и, прежде всего, субъективностью их оценки [87,112,113,144].

Важное место в диагностике ТБИ у детей с фебрильными инфекциями занимают лабораторные исследования. Выявление возбудителя инфекции с помощью классических микробиологических методов служит «золотым стандартом» верификации ТБИ. К недостаткам культурального исследования следует отнести длительность получения результата (24-48 ч). Подобного рода промедление неприемлемо в реальной практике, поэтому данный метод не может использоваться как основное лабораторное исследование для дифференциальной диагностики ТБИ и принятия решения о терапевтической тактике [63].

1.2. Лабораторные маркеры фебрильных инфекций

В качестве маркеров бактериального воспаления в разное время было предложено использовать несколько десятков лабораторных показателей [84]. Наиболее информативными и надежными считают показатели гемограммы (общее число лейкоцитов, нейтрофилов), а также некоторые сывороточные параметры, в частности, С-реактивный белок (С-РБ) и прокальцитонин (ПКТ) [24]. Помимо этих уже ставших рутинными маркеров, современные лабораторные аналитические системы дают возможность исследовать и другие показатели, в частности, незрелые гранулоциты и RET-He [150], диагностическая значимость которых у детей с фебрильными инфекциями изучена недостаточно и требует верификации.

1.2.1. Уровень лейкоцитов, нейтрофилов и незрелых гранулоцитов как маркер бактериального воспаления

Лейкоциты (в переводе с греческого leukos — белый и kytos — клетка) -группа белых клеток крови, которые образуются в костном мозге и лимфатических узлах. Основная функция лейкоцитов — защита организма от

микробов и чужеродных клеток. Повышение уровня лейкоцитов в периферической крови может быть связано с несколькими факторами:

• Опухолевая трансформация стволовой клетки, что приводит к пролиферации ростков кроветворения и увеличению клеток крови, в том числе и лейкоцитов;

• Повышенное образование лейкоцитов за счет ускорения их созревания в органах кроветворения под действием естественных стимулирующих факторов лейкопоэза (физические и химические факторы воспаления, продукты распада тканей, гипоксия, образование иммунных комплексов, токсины, повышенная активность гипофизарно-надпочечниковой системы);

• Выраженная сосудистая реакция ,в результате которой из кровяных депо высвобождается большое количество лейкоцитов.

Наиболее распространенным является феномен повышения уровня лейкоцитов за счет субпопуляции нейтрофилов. Нейтрофильный лейкоцитоз — это универсальный гематологический синдром острых ситуаций, стресса различного происхождения, от психического и физического напряжения до тяжелых воспалительных и гнойно-септических процессов, разного рода болевых синдромов, травм и тканевых деструкций. В физиологических условиях продолжительность формирования зрелого гранулоцита в костном мозге составляет 10-13 суток. Родоначальницей всех клеточных элементов костного мозга является стволовая клетка, которую «ориентируют» в сторону нейтрофилов колониестимулирующие факторы: гранулоцитарный (Г-КСФ) и гранулоцитарно-макрофагальный (ГМ-КСФ). Первая морфологически узнаваемая клетка в этом направлении — миелобласт, последующие стадии делящихся и развивающихся клеток — промиелоцит и миелоцит. Метамиелоцит и палочкоядерный гранулоцит более не делятся, а только созревают до сегментоядерных нейтрофилов [11,12].

В норме около 90% всех зрелых сегментоядерных нейтрофилов содержится в костном мозге, 2-3% в периферической крови и 5-8% в тканях. В циркуляции находится около половины нейтрофилов периферической крови, вторую

половину составляет пристеночный пул клеток, который формируется за счет легко обратимой адгезии на эндотелиальной поверхности микрососудистого русла (сосудистый гранулоцитарный резерв). В крови нейтрофилы находятся около 10 часов, после чего мигрируют в ткани. Важнейшая функция нейтрофилов — способность к фагоцитозу и деструкции микробов, инородных тел и клеточного детрита. В нейтрофилах содержатся многочисленные ферменты (кислые протеиназы, миелопероксидаза, лизоцим, лактоферрин, щелочная фосфатаза и другие) [11,12].

Общее число лейкоцитов и абсолютное число нейтрофилов на протяжении длительного периода времени активно используется для оценки риска наличия ТБИ у детей с лихорадкой без видимого очага инфекции [28,30,108,121]. В последние годы появилась возможность учитывать «левый сдвиг» лейкоцитов с помощью гематологических анализаторов. Некоторые модели инструментов способны учитывать фракции незрелых гранулоцитов, что расширяет диагностические возможности при острых инфекциях. В основе технологии определения незрелых гранулоцитов лежит метод проточной цитометрии с применением флюоресцентного красителя. Дифференцировка лейкоцитов происходит посредством определения концентрации нуклеиновых кислот (интенсивность флюоресцентного сигнала пропорциональна их концентрации), оценки внутренней структуры и размера клетки. У пациентов с ТБИ при анализе основных субпопуляций лейкоцитов определяются и незрелые гранулоциты, которые свидетельствуют о «левом сдвиге» до миелоцитов и промиелоцитов (Рисунок 1.2.1).

Уровень незрелых гранулоцитов использовался в ряде работ как дополнительный маркер инфекционно-воспалительного процесса. Например, число незрелых гранулоцитов может являться прогностическим фактором сепсиса [26].

DI FF

Незрелые гранулоциты (НГ)

Миелоцит Промиелоцит II Промиелоцит I

Рисунок 1.2.1 Скатерограмма лейкоцитарного канала образца крови

пациента с ТБИ

Примечание. Выделенное синее облако - незрелые гранулоциты (миелоциты и промиелоциты).

Такой вывод был сделан по результатам исследования доли незрелых гранулоцитов у пациентов с положительным и отрицательным результатом культурального исследования крови. Уровень незрелых гранулоцитов был значимо выше у пациентов с положительным результатом культурального исследования крови, чем у пациентов с отрицательным результатом. Было также установлено, что содержание незрелых гранулоцитов > 3% является специфическим предиктором сепсиса и может использоваться для ускорения принятия решения о тактике лечения пациента [26].

При поиске ранних маркеров неонатального сепсиса Bender L. и соавторы [34] разделили 123 новорожденных на две группы: (1) пациенты с выявленной бактериемией и имеющие признаки сепсиса - п=29, и (2) новорожденные без признаков сепсиса - п=94. У каждого новорожденного проанализировали показатели гемограммы и установили, что отношение (незрелые гранулоциты/нейтрофилы) может быть использовано при скрининге сепсиса.

1.2.2. С-реактивный белок

В 1930 году Уильям С. Тиллет (William S. Tillet) и Томас Френсис (Thomas Frances) обнаружили в сыворотке больных пневмококковой пневмонией пептид, который в присутствии ионов кальция образовывал преципитат, соединяясь с пневмококковым С-полисахаридом. Данная субстанция получила название С-реактивный белок (С-РБ) [140].

С-РБ принадлежит к белкам острой фазы воспаления и является альфа2-глобулином. Его молекула состоит из 5 одинаковых субъединиц, связанных между собой кольцевой структурой. С-РБ синтезируется преимущественно гепатоцитами, основным регулятором продукции негликозилированного протеина является интерлейкин-6 (IL-6) [21]. С-РБ играет важную роль при воспалении: на ранней стадии С-РБ участвует в активации фагоцитов, индуцируя хемотаксис и выработку супероксида.

С-РБ связывается с бактериальными полисахаридами, поврежденными мембранами и с экспонированными ядерными антигенами [20]. Это, в свою очередь, приводит к связыванию с Clq-компонентом комплемента и активации его классического каскада. С-РБ также связывается с Fc-рецепторами и повышает фагоцитоз определенных антигенов и микроорганизмов [20].

У здоровых лиц концентрация С-РБ не превышает 5 мг/л [7]. В ответ на воспаление или повреждение тканей уровень С-РБ повышается через 4-6 ч после начала воспаления и удваивается каждые 8 ч, достигая своего максимума к 36 ч. [61,95]. Динамика С-РБ позволяет использовать этот показатель при дифференциальной диагностике ТБИ у детей с различной длительностью лихорадки [121]. Например, было показано, что диагностические характеристики С-РБ одинаково полезны при выявлении ТБИ у детей с длительностью лихорадки как < 12 ч., так и > 12 ч.

С-РБ используется в качестве маркера инфекции у детей с нейтропенией [109]. Было показано, что анализ С-РБ полезен при дифференциальной диагностике пневмонии от других инфекций дыхательных путей [115]. Широкое

применение С-РБ нашел в лабораторной диагностике ТБИ у детей младшего возраста [108,123,139].

1.2.3 Прокальцитонин

Прокальцитонин (ПКТ) является предшественником кальцитонина (КТ) — гормона, который получил свое название благодаря тому, что он секретируется в ответ на острую гиперкальциемию, оказывая гипокальциемический эффект. При изучении патогенеза гипокальциемии у женщин с синдромом токсического шока, вызванного стафилококковой инфекцией, было обнаружено, что гипокальциемия сопровождалась увеличением в сотни раз уровня субстанции, получившей название «иммунореактивный кальцитонин», поскольку она реагировала с антисывороткой к КТ [50].

ПКТ состоит из 116 аминокислот и включает три пептида: (1) И-концевую последовательность из 57 аминокислот (Ы-ПКТ); (2) расположенный в середине незрелый КТ, который содержит концевой глицин; (3) 21-аминокислотный С-концевой пептид КТ I (катакальцин). ПКТ кодируется геном САЬС-1, экспрессия которого в обычных условиях (в отсутствии воспаления, сепсиса) ограничивается нейроэндокринными клетками щитовидной железы и легких, хотя незначительное содержание мРНК ПКТ обнаруживали также в печени и других тканях. Однако при сепсисе ситуация радикально меняется. Например, в условиях экспериментального сепсиса у хомяков повышение экспрессии мРНК ПКТ было обнаружено в тканях надпочечников, селезенки, спинного и головного мозга, печени, поджелудочной железы, кишки, легких, жировой ткани, яичках, желудке [116]. Необычайное разнообразие тканей, которые потенциально способны экспрессировать ген САЬС-1 и продуцировать ПКТ, обусловливает драматическое повышение уровня ПКТ в сыворотке пациентов с сепсисом.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Мельничук, Олег Сергеевич, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бакрадзе, М.Д. Как отличить бактериальную инфекцию от вирусной, и чем ее лечить / М.Д. Бакрадзе, И.В. Чащина, В.К. Таточенко, И.Л. Митюшин // Педиатрическая фармакология. —2013. Т. 10, № 4. С. 139-144.

2. Баранов, A.A. Показатели ретикулоцитарных индексов у здоровых детей / A.A. Баранов, Е.Л. Семикина, О.С. Мельничук и др. // Вопросы диагностики в педиатрии.—2010.—Т. 2,№4. —С. 17-21.

3. Баранов, A.A. Лихорадочные синдромы у детей / Под ред. A.A. Баранов, В.К. Таточенко, М.Д. Бакрадзе. — М.: Союз педиатров России, 2011. — 25 с.

4. Волкова, E.H. Референтные значения показателей клинического анализа крови доноров / E.H. Волкова, С.А. Луговская, Е.М. Данилова, М.С. Тройская // Клиническая лабораторная диагностика. — 2011. — № 6. — С. 26-32.

5. Волкова, С.А. Показатели гемограммы в популяции взрослого работающего населения / С.А. Волкова, H.A. Маянский, H.H. Боровков и др. // Гематология и трансфузиология. — 2008. — Т. 53, № 1. — С. 21-27.

6. Джанг, Б. Референсные интервалы лабораторных исследований в педиатрии: проект КАЛИПЕР / Б. Джанг, X. Адели // Вопросы диагностики в педиатрии. — 2009. — Т. 1, № 3. — С. 6-13.

7. Долгов, В.В. Турбидиметрия в лабораторной практике / В.В. Долгов, О.П. Шевченко, A.A. Шарышев. —М. : Реафарм, 2007. — 175 с.

8. Долгов, В.В. Лабораторная диагностика анемий / В.В. Долгов, С.А. Луговская, В.Т. Морозова, М.Е. Почтарь. — 2-е изд., доп. — М.-Тверь : ООО «Изд-во «Триада», 2009. — 147 с.

9. Клиническая эпидемиология. Основы доказательной медицины / под ред. С.Е. Бащинского, С.Ю. Варшавского М. : Медиа Сфера, — 1998. — 352 с.

Ю.Коленкин, С.М. Клинико-диагностическое значение показателей автоматизированного исследования ретикулоцитов : дисс. ... канд. мед. наук : 14.03.10 / Коленкин Сергей Миронович. — М., 2004. — 117 с.

11. Луговская, С.А. Гематологический атлас / С.А. Луговская, М.Е. Почтарь. — 2-е изд., исправ. и доп. —М.- Тверь : ООО «Изд-во «Триада», 2006. — 296 с.

12.Луговская, С.А. Лабораторная гематология / С.А. Луговская, В.Т. Морозова, М.Е. Почтарь, В.В. Долгов. — М.-Тверь : Триада, 2006. — 224 с.

13.Луговская, С.А. Ретикулоциты / С.А. Луговская, М.Е. Почтарь. — М. — 2006.

— 60 с.

14.Маянский, H.A. Гепцидин: основной регулятор обмена железа и новый диагностический маркер / H.A. Маянский, Е.Л. Семикина // Вопросы диагностики в педиатрии. — 2009. — № 1. — С. 18.

15.Маянский, H.A. Референсные интервалы лейкоцитов и тромбоцитов у детей, полученные с помощью автоматического гематологического анализатора / H.A. Маянский, A.C. Балабанов, Е.А. Копыльцова и др. // Вопросы диагностики в педиатрии. — 2011. — Т. 3, № 6. — С. 5-10.

16.Маянский, H.A. Референсные интервалы некоторых биохимических и иммунохимических лабораторных исследований у здоровых новорожденных в раннем неонатальном периоде / H.A. Маянский, E.H. Понамаренко, A.C. Балабанов и др. // Вопросы диагностики в педиатрии. — 2012. — Т. 4, № 5. — С. 20-25.

17.Практическое руководство по детским болезням / под общей ред. В.Ф. Коколиной, А.Г. Румянцева / том 4 Гематология/Онкология детского возраста / под ред. А.Г. Румянцева, Е.В. Самочатовой. — М. : Медпрактика, — 2005. — 791 с.

18.Ратманова, Г.А. Нейтропении в педиатрической практике / Г.А. Ратманова, Т.В. Руссова, О.В. Кузнецова и др. // Вопросы диагностики в педиатрии. — 2009. — № 2. — С. 69-72.

19.Тиц, Н. Клиническое руководство по лабораторным тестам / под ред. Н. Тиц.

— М. : Юнимед-пресс, 2013.

20.Фомин, В.В. С-реактивный белок и его значение в кардиологической практике / В.В. Фомин, Л.В. Козловская // Журнал доказательной медицины для практикующих врачей. — 2003. — № 5. — С. 17-23.

21.Шевченко, О.П. Белки острой фазы воспаления / О.П. Шевченко // Лаборатория. — 1996. — № 1. — С. 35-39.

22.Akobeng, А.К. Understanding diagnostic tests 1: sensitivity, specificity and predictive values / A.K. Akobeng // Acta Paediatr. — 2007. — Vol. 96, No 3. — P. 338-341.

23.Alpern, E.R. Epidemiology of pediatric emergency medicine research network / E.R. Alpern, R.M. Stanley, M.H. Gorelick et al. // Pediatr. Emerg. Care. — 2006. — Vol. 22. —P. 689-699.

24.Andreola, B. Procalcitonin and C-reactive protein as diagnostic markers of severe bacterial infections in febrile infants and children in the emergency department / B. Andreola, S. Bressan, S. Callegaro et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2007. — Vol. 26, No 8. —P. 672-677.

25.Angus, D.C. Epidemiology of severe sepsis in the United States: analysis of incidence, outcome, and associated costs of care / D.C. Angus, W.T. Linde-Zwirble, J. Lidicker et al. // Crit. Care Med. —2001. — Vol. 29, No 7. — P. 1303-1310.

26.Ansari-Lari, M.A. Immature granulocyte measurement using the Sysmex XE-2100. Relationship to infection and sepsis / M.A. Ansari-Lari, T.S. Kickler, MJ. Borowitz // Am. J. Clin. Pathol. — 2003. — Vol. 120, No 5. — P. 795-799.

27.Attia, J. Moving beyond sensitivity and specificity: using likelihood ratios to help interpret diagnostic tests / J. Attia // Austr. Prescr. — 2003. — Vol. 26, No 5. — P. 111-113.

28.Baker, M.D. Evaluation and management of infants with fever / M.D. Baker // Pediatr. Clin. North Am. — 1999. — Vol. 46. — P. 1061-1071.

29.Baker, R.D. Committee on Nutrition American Academy of Pediatrics. Diagnosis and prevention of iron deficiency and iron-deficiency anemia in infants and young children (0-3 years of age) / R.D. Baker, F.R. Greer // Pediatrics. — 2010. — Vol. 126, No 5. —P. 1040-1050.

30.Baraff, L.J. Management of fever without source in infants and children / L.J. Baraff // Ann. Emerg. Med. — 2000. — Vol. 36, No 6. — P. 602-614.

31.Bass, J.W. Antimicrobial treatment of occult bacteremia: a multicenter cooperative study / J.W. Bass, R.W. Steele, R.R. Wittier et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 1993.

— Vol. 12, No 6. — P. 466—473.

32.Becker, K.L. Procalcitonin and the calcitonin gene family of peptides in inflammation, infection, and sepsis: a journey from calcitonin back to its precursors / K.L. Becker, E.S. Nylen, J.C. White et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. — 2004. — Vol. 89.—P. 1512-1525.

33.Bellamy, G.J. Total and differential leucocyte counts in infants at 2, 5 and 13 months of age / G.J. Bellamy, R.F. Hinchliffe, K.C. Crawshaw et al. // Clin. Lab. Haematol.

— 2000. — Vol. 22, No 2. — P. 81-87.

34.Bender, L. Early and late markers for the detection of early-onset neonatal sepsis / L. Bender, J. Thaarup, K. Varming et al. // Dan. Med. Bull. — 2008. — Vol. 55, No 4.

— P. 219-223.

35.Black, S. Post licensure surveillance for pneumococcal invasive disease after use of heptavalent pneumococcal conjugate vaccine in Northern California Kaiser Permanente / S. Black, H. Shinefield, R. Baxter et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2004. — Vol. 23. — P. 485-489.

36.Blasutig, I.M. Analytical evaluation of the VITROS 5600 Integrated System in a pediatric setting and determination of pediatric reference intervals / I.M. Blasutig, B. Jung, V. Kulasingam et al. // Clin. Biochem. — 2010. — Vol. 43. — P. 1039-1044.

37.Bleeker, S.E. Validating and updating a prediction rule for serious bacterial infection in patients with fever without source / S.E. Bleeker, G. Derksen-Lubsen, D.E. Grobbee et al. // Acta Paediatr. — 2007. — Vol. 96, No 1. — P. 100-104.

38.Bonadio, W.A. Relationship of fever magnitude to rate of serious bacterial infections in infants aged 4-8 weeks / W.A. Bonadio, K. McElroy, P.L. Jacopy, D. Smith // Clin. Pediatr. (Phila). — 1991. — Vol. 30. — P. 478-480.

39.Bonadio, W.A. The history and physical assessments of the febrile infant. / W.A. Bonadio // Pediatr. Clin. North. Am. — 1998. — Vol. 45, No 1. — P. 65-77.

40.Bourner, G. Performance evaluation of the latest fully automated hematology analyzers in a large, commercial laboratory setting: a 4-way, side-by-side study / G.

Bourner, J. Dhaliwal, J. Sumner // Lab. Hematol. 2005. — Vol. 11, No 4. — P. 285297.

41.Brugnara, C. Reticulocyte hemoglobin equivalent (Ret He) and assessment of iron-deficient states / C. Brugnara, B. Schiller, J. Moran // Clin. Lab. Haem. — 2006. — Vol. 28. —P. 303-308.

42.Burgess, T.L. Constitutive and regulated secretion of proteins / T.L. Burgess, R.B. Kelly // Annu Rev. Cell Biol. — 1987. — Vol. 3. — P. 243-293.

43.Burke, J.P. Pneumococcal bacteremia. Review of 111 cases, 1957-1969, with special reference to cases with undetermined focus / J.P. Burke, J.O. Klein, H.M. Gezon et al. //Am. J. Dis. Child. — 1971. — Vol. 121, No 4. — P. 353-359.

44.Buttarello, M. The new reticulocyte parameter (Ret-Y) of the Sysmex XE 2100: its use in the diagnosis and monitoring of posttreatment sideropenic anemia / M. Buttarello, V. Temporin, R. Ceravolo et al. // Am. J. Clin. Pathol. — 2004. — Vol. 121. —P. 489-495.

45.Campbell, G. Advances in statistical methodology for the evaluation of diagnostic and laboratory tests / G. Campbell // Stat. Med. — 1994. — Vol. 13. — P. 499-450

46.Caraguel, C.G. The two-step Fagaris nomogram: ad hoc interpretation of a diagnostic test result without calculation / C.G. Caraguel, R. Vanderstichel // Evid. Based Med.— 2013. — Vol. 18, No 4. —P. 125-128.

47.Carrol, E.D. Procalcitonin as a diagnostic marker of meningococcal disease in children presenting with fever and a rash / E.D. Carrol, P. Newland, F.A. Riordan et al. // Arch. Dis. Child. — 2002. — Vol. 86, No 4. — P. 282-285.

48.Chan, M. Canadian Laboratory Initiative on Pediatric Reference Interval Database (CALIPER): Pediatric Reference Intervals for an Integrated Clinical Chemistry and Immunoassay Analyzer, Abbott Architect ci8200 / M. Chan, I. Seiden-Long, M. Aytekin et al. // Clin. Biochem. — 2009. — Vol. 42. — P. 885-891.

49.Charles, P.E. Serum procalcitonin for the early recognition of nosocomial infection in the critically ill patients: a preliminary report / P.E. Charles, E. Kus, S. Ahoc et al. // BMC Infect. Dis. — 2009. — Vol. 9. — P. 49.

50.Chesney, R.W. Pathogenic mechanisms of the hypocalcemia of the staphylococcal toxic-shock syndrome / R.W. Chesney, D.M. Mc Carron, J.G. Haddad et al. // J. Lab. Clin. Med. — 1983. — Vol. 101. —P. 576-585.

51.Chung, B.H. Chronic benign neutropenia among Chinese children / B.H. Chung, G.C. Chan, T.L. Lee et al. // Hong Kong Med. J. — 2004. — Vol. 10, No 4. — P. 231—236.

52.Clinical policy for children younger than three years presenting to the emergency department with fever // Ann. Emerg. Med. 2003. Vol. 42. P. 530-545.

53.Colantonio, D.A. Closing the gaps in pediatric laboratory reference intervals: a CALIPER database of 40 biochemical markers in ahealthy and multiethnic population of children / D.A. Colantonio, L. Kyriakopoulou, M.K. Chan et al. // Clin. Chem. — 2012. — Vol. 58, No 5. — P. 854-868.

54.Cornbleet, P.J. Clinical utility of the band count / P.J. Cornbleet // Clin. Lab. Med. — 2002. — Vol. 22. — P. 101-136.

55.Craig, J.C. The accuracy of clinical symptoms and signs for the diagnosis of serious bacterial infection in young febrile children: prospective cohort study of 15781 febrile illnesses / J.C. Craig, G.J. Williams, M. Jones et al. // BMJ. — 2010. — Vol. 340 —P. 1594.

56.Cuhadar, S. Stability studies of common biochemical analytes in serum separator tubes with or without gel barrier subjected to various storage conditions / S. Cuhadar, A. Atay, M. Koseoglu et al. // Biochem. Med. (Zagreb). — 2012. — Vol. 22, No 2. —P. 202-214.

57.D'Angelo, G. Ethnic and genetic causes of neutropenia: clinical and therapeutic implications / G. D'Angelo // Lab. Hematol. — 2009. — Vol. 15. — P. 25-29.

58.de Mast, Q. Mild increases in serum hepcidin and interleukin-6 concentrations impair iron incorporation in haemoglobin during an experimental human malaria infection / Q. de Mast, E.C. van Dongen-Lases, D.W. Swinkels et al. // Br. J. Haematol. — 2009. — Vol. 145. — P. 657-664.

59.Defíning, establishing, and verifying reference intervals in the clinical laboratory; approved guideline / — third edition. CLSI document C28—A3. Wayne, PA: — CLSI; —2008.

60.Diagnostic tests. Users' guides to the medical literature / G. Guyatt, D. Rennie, editors. — In. : AMA Press, 2002. — P. 121-140.

61.Du Clos, T.W. Function of C-reactive protein / T.W. Du Clos // Ann. Med. — 2000.

— Vol. 32.—P. 274-278.

62.Eagles, D. International survey of emergency physicians priorities for clinical decision rules / D. Eagles, I.G. Stiell, C.M. Clement et al. // Acad. Emerg. Med. — 2008.—Vol. 15, No 2.—P. 177-182.

63.Elhassanien, A.F. Fever without source in infants and young children: dilemma in diagnosis and management / A.F. Elhassanien, A.A. Hesham, F. Alrefaee // Risk Manag. Healthc. Policy. — 2013. — Vol. 29, No 6. — P. 7-12.

64.Espallardo, N.L. Decisions on diagnosis in family practice: use of sensitivity, specificity, predictive values and likelihood ratios / N.L. Espallardo // Asia Pacific Family Medicine. — 2003. — Vol. 2. — P. 229-232.

65.Fagan, T.J. Nomogram for Bayes theorem / T.J. Fagan // N. Engl. J. Med. — 1975.

— Vol. 293. —P. 257.

66.Fernández Lopez, A. Spanish Society of Pediatric Emergencies. Procalcitonin in pediatric emergency departments for the early diagnosis of invasive bacterial infections in febrile infants: results of a multicenter study and utility of a rapid qualitative test for this marker / A. Fernández Lopez, C. Luaces Cubells, J.J. Garcia García, J. Fernández Pou // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2003. — Vol. 22, No 10. — P. 895-903.

67.Ferry-Masferrer, M. Multicentric reference values: shared reference limits / M. Ferry-Masferrer, X. Fuentes-Arderiu, V. Alvarez-Funes et al. // Eur. J. Clin. Chem. Clin. Biochem. — 1997. — Vol. 35, No 9. — P. 715-718.

68.Ferry-Masferrer, M. Regional reference values for some quantities measured with the ADVIA Centaur analyser. A model of co-operation between the in vitro diagnostic industry and clinical laboratories / M. Ferry-Masferrer, X. Fuentes-

Arderiu, M. Goma-Llongueras et al. // Clin. Chem. Lab. Med. — 2001. — Vol. 39, No 2.—P. 166-169.

69.Fioredda, F. Congenital and Acquired Neutropenia Consensus Guidelines on Diagnosis From the Neutropenia Committee of the Marrow Failure Syndrome Group of the AIEOP / F. Fioredda, M. Calvillo, T. Coliva et al. // Pediatr. Blood Cancer. — 2011.—Vol. 57. —P. 10-17.

70.Fischer, J.E. A readers' guide to the interpretation of diagnostic test properties: clinical example of sepsis / J.E. Fischer, L.M. Bachman, R. Jaeschke // Intensive Care Med. —2003. —Vol. 29. — P. 1043-1051.

71.Fluss, R. Estimation of the Youden Index and its associated cutoff point / R. Fluss, D. Faraggi, B. Reiser // Biom. J. — 2005. — Vol. 47. — P. 458-472.

72.Fuentes-Arderiu, X. Multicentric reference values for some quantities measured with Tina-Quant reagents systems and RD/Hitachi analysers / X. Fuentes-Arderiu, M. Ferry-Masferrer, J.M. Gonzales-Alba et al. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. — 2001. — Vol. 61, No 4. — P. 273-276.

73.Fuentes-Arderiu, X. Multicentre physiological reference values for some urinary component-to-creatinine (creatininium) concentration ratios / X. Fuentes-Arderiu, R. Mas-Serra, C. de-Ny-Lengaran et al. // Clin. Chem. Lab. Med. — 2005. — Vol. 43, No 9.—P. 958-962.

74.Fuentes-Arderiu, X. Multicentre physiological reference intervals for serum concentrations of immunoglobulins A, G and M, complement C3c and C4 measured with Tina-Quant reagents systems / X. Fuentes-Arderiu, E. Alonso-Gregorio, V. Alvarez-Funes et al. // Clin. Chem. Lab. Med. — 2007. — Vol. 45, No 3. — P. 387390.

75.Galetto-Lacour, A. Bedside procalcitonin and C-reactive protein tests in children with fever without localizing signs of infection seen in a referral center / A. Galetto-Lacour, S.A. Zamora, A. Gervaix // Pediatrics. — 2003. — Vol. 112. — P. 10541060.

76.Galetto-Lacour, A. Identifying severe bacterial infection in children with fever without source / A.Galetto-Lacour, A. Gervaix // Expert Rev. Anti Infect. Ther. — 2010. —Vol. 8,No 11.—P. 1231-1237.

77.Gendrel, D. Comparison of procalcitonin with C-reactive protein, interleukin-6 and interferon-alpha for differentiation of bacterial versus viral infections / D. Gendrel, J. Raymond, J. Coste et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 1999. — Vol. 18. — P. 875-881.

78. Gendrel, D. Procalcitonin as a marker of bacterial infection / D. Gendrel, C. Bohuon // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2000. — Vol. 19. — P. 679-688.

79.Gill, C.J. Why clinicians are natural Bayesians / C.J. Gill, L. Sabin, H. Schmid // BMJ. — 2005. — Vol. 330. — P. 1080-1083.

80.Girodias, J.B. Approach to the febrile child: A challenge bridging the gap between the literature and clinical practice / J.B. Girodias, B. Bailey // Paediatr. Child Health. — 2003. — Vol. 8. — P. 76-82.

81.Greenhow, T.L. Changing epidemiology of bacteremia in infants aged 1 week to 3 months / T.L. Greenhow, Y.Y. Hung, A.M. Herz // Pediatrics. — 2012. — Vol. 129, No 3. —P. 590-596.

82.Haddy, T.B. Benign ethnic neutropenia: what is a normal absolute neutrophil count? / T.B. Haddy, S.R. Rana, O. Castro // J. Lab. Clin. Med. — 1999. — Vol. 133. — P. 15-22.

83.Harris, E.K. On dividing reference data into subgroups to produce separate reference ranges / E.K. Harris, J.C. Boyd // Clin. Chem. — 1990. — Vol. 36, No 2. — P. 265270.

84.Hatherill, M. Diagnostic marker of infection: comparison of procalcitonin with C reactive protein and leucocyte count / M. Hatherill, S.M. Tibby, K. Sykes et al. // Arch. Dis. Child. — 1999. — Vol. 81. — P. 417-421.

85.Hedberg, P. Aging stability of complete blood count and white blood cell differential parameters analyzed by Abbott CELL-DYN Sapphire hematology analyzer / P. Hedberg, T. Lehto // Int. J. Lab. Hematol. — 2009. — Vol. 31, No 1. — P. 87-96.

86.Herz, A.M. Changing epidemiology of outpatient bacteremia in 3- to 36-month-old children after the introduction of the heptavalent-conjugated pneumococcal vaccine /

A.M. Herz, T.L. Greenhow, J. Alcantara et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2006. — Vol. 25. —P. 293-300.

87.Hewson, P. Clinical markers of serious illness in young infants: a multicentre follow-up study / P. Hewson, Z. Poulakis, F. Jarman et al. // J. Paediatr. Child Health. — 2000. — Vol. 36, No 3. — P. 221-225.

88.Horn, P.S. A robust approach to reference interval estimation and evaluation / P.S. Horn, A.J. Pesce, B.E. Copeland // Clin. Chem. — 1998. — Vol. 44. — P. 622-631.

89.Horn, P.S. Reference Intervals a user's guide / P.S. Horn, AJ. Pesce. — Washington DC : AACC Press. — 2005. — P. 29-36.

90.Hsiao, A.L. Fever in the new millennium: a review of recent studies of markers of serious bacterial infection in febrile children / A.L. Hsiao, M.D. Baker // Curr. Opin. Pediatr. — 2005. — Vol. 17, No 1. — P. 56-61.

91.Hsiao, A.L. Incidence and predictors of serious bacterial infections among 57 to 180 day old infants / A.L. Hsiao, L. Chen, D. Baker // Pediatrics. — 2006. — Vol. 117. — P. 1695-1699.

92.1saacman, D.J. Utility of the serum C-reactive protein for detection of occult bacterial infection in children / DJ. Isaacman, B.L. Burke // Arch. Pediatr. Adolesc. Med. — 2002. — Vol. 156. — P. 905-909.

93.Jaffe, D.M. Antibiotic administration to treat possible occult bacteremia in febrile children / D.M. Jaffe, R.R. Tanz, A.T. Davis et al. // N. Engl. J. Med. — 1987. — Vol. 317, No 19. —P. 1175-1180.

94. James R.M. The investigation and management of chronic neutropenia in children / R.M. James, S.E. Kinsey // Arch. Dis. Child. — 2006. — Vol. 91. — P. 852-858.

95.Jaye, D.L. Clinical applications of C-reactive protein in pediatrics / D.L. Jaye, K.B. Waites // Pediatr. Infect. Dis. J. — 1997. — Vol. 16. — P. 735-746.

96.Johnson, M. Three-way evaluation of high throughput haematology analysers-Beckman Coulter LH 750, Abbott Cell-Dyn 4000, and Sysmex XE 2100 / M. Johnson, C. Samuels, N. Josza, K. Gorney // Lab. Hematol. — 2002. — Vol. 8. — P. 230-238.

97 Jung, B. Clinical laboratory reference intervals in pediatrics: the CALIPER initiative / B. Jung, K. Adeli // Clin. Biochem. — 2009. —Vol. 42. — P. 1589-1595.

98.Karavanaki, K. Transient and chronic neutropenias detected in children with different viral and bacterial infections / K. Karavanaki, S. Polychronopoulou, M. Giannaki et al. // Acta Paediatr. — 2006. — Vol. 95. — P. 565-572.

99.Koster, M.J. Diagnostic properties of C-reactive protein for detecting pneumonia in children / M.J. Koster, B.D. Broekhuizen, M.C. Minnaard et al. // Respir. Med. — 2013. — Vol. 107, No 7. — P. 1087-1093.

100. Lacour, A.G. Procalcitonin, IL-6, IL-8, IL-1 receptor antagonist and C-reactive protein as identifi cators of serious bacterial infections in children with fever without localising signs / A.G. Lacour, A. Gervaix, S.A. Zamora et al. // Eur. J. Pediatr. — 2001. — Vol. 160. — P. 95-100.

101. Lacour, A.G. Score Identifying Serious Bacterial Infections in Children With Fever Without Source / A.G. Lacour, S.A. Zamora, A.A. Gervaix // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2008. — Vol. 27. — P. 654-656.

102. Lang, T.A. How to report statistics in medicine: annotated guidelines for authors, editors, and reviewers / T.A. Lang, M. Secic. — Philadelphia : American College of Physicians, 1997.

103. Layios, N. Procalcitonin usefulness for the initiation of antibiotic treatment in intensive care unit patients / N. Layios, B. Lambermont, J.L. Canivet et al. // Crit. Care Med. — 2012. — Vol. 40. — P. 2304-2309.

104. Le Bastard, N. Longitudinal stability of cerebrospinal fluid biomarker levels: fulfilled requirement for pharmacodynamic markers in Alzheimer's disease / N. Le Bastard, L. Aerts, K. Sleegers et al. // J. Alzheimers Dis. — 2013. — Vol. 33, No 3. — P. 807-822.

105. Lee, G.M. Risk of bacteremia for febrile young children in the post- Haemophilus influenzae type b era / G.M. Lee, M.B. Harper // Arch. Pediatr. Adolesc. Med. — 1998. — Vol. 152, No 7. — P. 624-628.

106. Luaces-Cubells, C. Procalcitonin to detect invasive bacterial infection in non-toxic-appearing infants with fever without apparent source in the emergency

department / C. Luaees-Cubells, S. Mintegi, JJ. García-García et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2012. — Vol. 31, No 6. — P. 645-647

107. Mantadakis, E. Serum procalcitonin for prediction of renal parenchymal involvement in children with urinary tract infections: a meta-analysis of prospective clinical studies / E. Mantadakis, E. Plessa, E.K. Vouloumanou et al. // J. Pediatr. — 2009.—Vol. 155,No6.—P. 875-881.

108. Manzano, S. Markers for bacterial infection in children with fever without source / S. Manzano, B. Bailey, A. Gervaix et al. // Arch. Dis. Child. — 2011. — Vol. 96, No 5.—P. 440-446

109. Martinez-Albarran, M. Procalcitonin and C-reactive protein serum levels as markers of infection in a pediatric population with febrile neutropenia and cancer / M. Martinez-Albarran, J. Perez-Molina Jde, S. Gallegos-Castoreña et al. // Pediatr. Hematol. Oncol. — 2009. — Vol. 26. — P. 414-425.

110. Massin, M.M. Spectrum and frequency of illness presenting to a pediatric emergency department / M.M. Massin, J. Montesanti, P. Gerard, P. Lepage // Acta Clin. Bel. —2006. —Vol. 61. —P. 161-165.

111. Mast, A.E. Reticulocyte hemoglobin content / A.E. Mast, M.A. Blinder, D.J. Dietzen // Am. J. Hematol. — 2008. — Vol. 83. — P. 307-310.

112. McCarthy, P.L. Observation scale to identify serious illness in febrile children / P.L. McCarthy, M.R. Scarpe, S.Z. Spiesel et al. // Pediatrics. — 1982. — Vol. 70. — P. 802-809.

113. McCarthy, P.L. Predictive value of abnormal physical examination findings in illappearing and well-appearing febrile children / P.L. McCarthy, R.M. Lembo, M.A. Baron et al. // Pediatrics. — 1985. — Vol. 76. — P. 167-171.

114. McGowan, J.E. Bacteraemia in febrile children seen in a "walk-in" pediatric clinic / J.E. McGowan, L. Bratton, J.O. Klein, M. Finaland // N. Engl. J. Med. — 1973.—Vol. 288.—P. 1309-1312.

115. Melbye, H. The course of C-reactive protein response in untreated upper respiratory tract infection / H. Melbye, D. Hvidsten, A. Holm et al. // Br. J. Gen. Pract. — 2004. — Vol. 54. — P. 653-658.

116. Muller, B. Ubiquitous expression of the calcitonin-1 gene in multiple tissues in response to sepsis / B. Muller, J.C. White, E.S. Nylen et al. // J. Clin. Endocrinol. Metab. — 2001. — Vol. 86. — P. 396-404.

117. Murphy, C.G. Clinical predictors of occult pneumonia in the febrile child / C.G. Murphy, A.C. van de Pol, M.B. Harper et al. // Acad. Emerg. Med. — 2007. — Vol. 14, No 3. — P. 243-249.

118. Perkins, N.J. The inconsistency of'optimal' cutpoints obtained using two criteria based on the receiver operating characteristics curve / N.J. Perkins, E.F. Schisterman // Am. J. Epidemiol. — 2006. — Vol. 163. — P. 670-675.

119. Pewsner, D. Ruling a diagnosis in or out with "SpPIn" and "SnNOut": a note of caution / D. Pewsner, M. Battaglia, C. Minder et al. // BMJ. — 2004. — Vol. 329, No 7459. —P. 209-213.

120. Pierre, R.V. Peripheral blood film review. The Demise of the Eyecount Leukocyte Differential / R.V. Pierre // Clin. Lab. Med. — 2002. — Vol. 22. — P. 279-297.

121. Pratt, A. Duration of fever and markers of serious bacterial infection in young febrile children / A. Pratt, M.W. Attia // Pediatr. Int. — 2007. — Vol. 49. — P. 3135.

122. Preas, H.L. Effects of anti-inflammatory agents on serum levels of calcitonin precursors during human experimental endotoxemia / H.L. Preas, E.S. Nylen, R.H. Snider et al. // J. Infect. Dis. — 2001. — Vol. 184. — P. 373-376.

123. Pulliam, P.N. C-reactive protein in febrile children 1 to 36 months of age with clinically undetectable serious bacterial infection / P.N. Pulliam, M.W. Attia, K.M. Cronan // Pediatrics. — 2001. — Vol. 108. — P. 1275-1279.

124. Ricos, C. Current databases on biological variation: pros, cons and progress / C. Ricos, V. Alvarez, F. Cava et al. // Scan. J. Clin. Lab. Invest. — 1999. — Vol. 59, No 7.—P. 491-500.

125. Roberts, N.B. A study on the stability of urinary free catecholamines and free methyl-deravatives at different pH temperature and time storage / N.B. Roberts, G.

Higgins, M. Sargazi // Clin. Chem. Lab. Med. — 2010. — Vol. 48, No 1. — P. 8187.

126. Rossum, A.M. Procalcitonin as an early marker of infection in neonates and children / A.M. Rossum, R.W. Wulkan, A.M. Oudesluys-Murphy // Lancet Infect. Dis. — 2004. — Vol. 4. — P. 620-630.

127. Rustad, P. The Nordic Reference Interval Project 2000: recommended reference intervals for 25 common biochemical properties / P. Rustad, P. Felding, L. Franzson et al. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. — 2004. — Vol. 64, No 4. — P. 271-284.

128. Sackett, D.L. Evidence based medicine. How to practice and teach EBM / D.L. Sackett, S. Straus, W.S. Richardson et al. — 2nd ed. Edinburgh: Churchill Livingstone, 2000. — P. 67-93.

129. Sackett, D.L. The architecture of diagnostic research / D.L. Sackett, R.B. Haynes // BMJ. — 2002. — Vol. 324. — P. 539-541.

130. Sanders, S. The utility of serum C-reactive protein in differentiating bacterial from nonbacterial pneumonia in children: a meta-analysis of 1230 children / S. Sanders, A. Barnett, I. Correa-Velez et al. // Pediatr. Infect. Dis. J. — 2008. — Vol. 27, No 2. —P. 95-99.

131. Schoorl, M. Temporary impairment of reticulocyte haemoglobin content in subjects with community-acquired pneumonia / M. Schoorl, D. Snijders, M. Schoorl et al. // Int. J. Lab. Hematol. — 2012. — Vol. 34, No 4. — P. 390-395.

132. Schouten, J.A. Optimizing the antibiotics policy in the Netherlands. VIII. Revised SWAB guidelines for antimicrobial therapy in adults with community-acquired pneumonia / J.A. Schouten, J.M. Prins, M. Bonten et al. // Ned. Tijdschr. Geneeskd. — 2005. — Vol. 149, No 45. — P. 2495-2500.

133. Schuetz, P. Procalcitonin to guide initiation and duration of antibiotic treatment in acute respiratory infections: an individual patient data meta-analysis / P. Schuetz, M. Briel M., M. Christ-Crain et al. // Clin. Infect. Dis. — 2012. — Vol. 55. — P. 651662.

134. Senthilnayagam, B. Automated measurement of immature granulocytes: performance characteristics and utility in routine clinical practice / B.

Senthilnayagam, T. Kumar, J. Sukumaran et al. // Patholog. Res. Int. — http://dx.doi.org/10.1155/2012/483670.

135. Slater, M. Evaluation of the infant with fever without source: an evidence based approach / M. Slater, S.E. Krug // Emerg. Med. Clin. North. Am. — 1999. — Vol. 17, No 1. —P. 97-126.

136. Steinwald, P.M. Elevated calcitonin precursor levels are related to mortality in an animal model of sepsis / P.M. Steinwald, K.T. Whang, K.L. Becker et al. // Crit. Care. — 1999. — Vol. 3. — P. 11-16.

137. Taylor, M.R. Hematological reference ranges for schoolchildren / M.R. Taylor, C.V. Holland, R. Spencer et al. // Clin. Lab. Haem. — 1997. — Vol. 19. — P. 1-15.

138. Thayyil, S. Is procalcitonin useful in early diagnosis of serious bacterial infections in children? / S. Thayyil, M. Shenoy, M. Hamaluba et al. // Acta Paediatr. — 2005 —Vol. 94.—P. 155-158.

139. Thompson, M. Systematic review and validation of prediction rules for identifying children with serious infections in emergency departments and urgent-access primary care / M. Thompson, A. Van den Bruel, J. Verbakel et al. // Health Technol. Assess. — 2012. — Vol. 16, No 15. — P. 1-100.

140. Tillet, W. Serological reaction in pneumonia with a non-protein somatic fraction of Pneumococcus / W. Tillet, T. Francis // J. Exp. Med. — 1930. — Vol. 52. — P. 561-571.

141. Trainor, J.L. Children with first-time simple febrile seizures are at low risk of serious bacterial illness / J.L. Trainor, L.C. Hampers, S.E. Krug, R. Listernick // Acad. Emerg. Med. —2001. — Vol. 8. — P. 781-787.

142. Tukey, J.W. Exploratory Data Analysis / J.W. Tukey. — MA: Addison-Wesley Reading, 1977.

143. Ullrich, C. Screening healthy infants for iron deficiency using reticulocyte hemoglobin content / C. Ullrich, A. Wu, C. Armsby et al. // JAMA. — 2005. — Vol. 294,No 8.—P 924-930.

144. Van den Bruel, A. The evaluation of diagnostic tests: evidence on technical and diagnostic accuracy, impact on patient outcome and cost-effectiveness is needed / A.

Van den Bruel, I. Cleemput, B. Aertgeerts et al. // J. Clin. Epidemiol. — 2007. Vol. 60, No 11. — P. 1116-1122.

145. Van den Bruel, A. Diagnostic value of laboratory tests in identifying serious infections in febrile children: systematic review / A. Van den Bruel, M.J. Thompson, T. Haj-Hassan et al. // BMJ. — 2011. — Vol. 342. P. 1124-1129.

146. van Rossum, A.M. Procalcitonin as an early marker of infection in neonates and children / A.M. van Rossum, R.W. Wulkan, A.M. Oudesluys-Murphy // Lancet Infect. Dis. — 2004. — Vol. 4. — P. 620-630.

147. Vlacha, V. The clinical significance of non-malignant neutropenia in hospitalized children / V. Vlacha, G. Feketea // Ann. Hematol. — 2007. — Vol. 86. — P. 865870.

148. von Lilienfeld-Toal, M. Markers of bacteremia in febrile neutropenic patients with hematological malignancies: procalcitonin and IL-6 are more reliable than C-reactive protein / M. von Lilienfeld-Toal, M.P. Dietrich, A. Glasmacher et al. // Eur. J. Clin. Microbiol. Infect. Dis. — 2004. — Vol. 23, No 7. — P. 539-544.

149. Waddle, E. Outcomes of febrile children without localizing signs after pneumococcal conjugate vaccine / E. Waddle, R. Jhaveri // Arch. Dis. Child. — 2009. — Vol. 94, No 2. — P. 144-147.

150. Weimann, A. Laboratory haematological changes in the field of intensive care medicine — the extended differential blood count / A. Weimann, K. Weimann, A. Lun // Anasthesiol. Intensivmed. Notfallmed. Schmerzther. — 2009. — Vol. 44. — P. 164-170.

151. Whang, K.T. Procalcitonin and proinflammatory cytokine interactions in sepsis / K.T. Whang, S.D. Vath, K.L. Becker et al. // Shock. — 2000. — Vol. 14. — P. 7378.

152. Wilkinson, M. Prevalence of occult bacteremia in children aged 3 to 36 months presenting to the emergency department with fever in the postpneumococcal conjugate vaccine era / M. Wilkinson, B. Bulloch, M. Smith // Acad. Emerg. Med. — 2009. — Vol. 16, No 3. — P. 220-225.

153. Wing, R. Fever in the pediatric patient / R. Wing, M.R. Dor, P.A. McQuilkin // Emerg. Med. Clin. North Am. — 2013. — Vol. 31, No 4. — P. 1073-1096.

154. Wu, J.Y. Use of serum procalcitonin to detect bacterial infection in patients with autoimmune diseases: a systematic review and meta-analysis / J.Y. Wu, S.H. Lee, C.J. Shen et al. // Arthritis Rheum. — 2012. — Vol. 64, No 9. — P. 3034-3042.

155. Young, D.S. Effect of Drugs on Clinical Laboratory Tests / D.S. Young // Ann. Clin. Biochem. — 1997. — Vol. 34. — P. 579-581.