Показатели антиоксидантной защиты организма при экспериментальном дисбактериозе кишечника, обусловленном применением антибиотика широкого спектра действия тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Гапон, Марина Николаевна

• Гапон, Марина Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гапон, Марина Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Нормальная микрофлора, как фактор гомеостаза макроорганизма.

1.2. Дисбактериоз кишечника: определение понятия, причины возникновения, диагностика, принципы коррекции.

1.3. Значение свободнорадикального окисления и антиоксидантной системы в физиологических процессах макроорганизма и при некоторых заболеваниях органов пищеварения.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Постановка эксперимента.

2.2. Объекты и сроки исследований.

2.3. Методы исследований.

2.3.1. Биологические методы.

2.3.2. Микробиологические методы.

2.3.3. Биохимические методы.

2.3.4. Статистические методы.

РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 3. СОСТАВ МИКРОФЛОРЫ ТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА

ЖИВОТНЫХ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБАКТЕРИОЗЕ, ОБУСЛОВЛЕННОМ ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИБИОТИКА ШИРОКОГО

СПЕКТРА ДЕЙСТВИЯ.

ГЛАВА 4. ПОКАЗАТЕЛИ АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ

ОРГАНИЗМА В ДИНАМИКЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ДИСБАКТЕРИОЗА, ОБУСЛОВЛЕННОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АНТИБИОТИКА.

4.1. Показатели антиоксидантной защиты в эритроцитах животных при экспериментальном дисбактериозе кишечника.

4.2. Показатели антиоксидантной защиты в колоноцитах животных при экспериментальном дисбактериозе кишечника.

4.3. Содержание ТБК-активных продуктов в плазме крови, копрофильтратах и колоноцитах животных при экспериментальном дисбактериозе кишечника.

ГЛАВА 5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КИСЛОМОЛОЧНОГО ПРОДУКТА «НАРИНЭ» ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ДИСБАКТЕРИОЗЕ КИШЕЧНИКА.

5.1. Состав микрофлоры толстого кишечника животных в динамике экспериментального дисбактериоза при использовании кисломолочного продукта «Наринэ».

5.2. Показатели антиоксидантной защиты в эритроцитах и колоноцитах животных в динамике экспериментального дисбактериоза при использовании кисломолочного продукта «Наринэ».

5.3. Содержание ТБК-активных продуктов в плазме и копрофильтратах животных в динамике экспериментального дисбактериоза при использовании кисломолочного продукта «Наринэ».

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Показатели антиоксидантной защиты организма при экспериментальном дисбактериозе кишечника, обусловленном применением антибиотика широкого спектра действия»

АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ Организм человека и населяющая его микрофлора представляют единую экологическую систему, находящуюся в состоянии динамического равновесия (Воробьев А.А., Несвижский Ю.В., 1997; Шендеров Б.А., 1998, 1999; Gorbach S.L., 1986; Gorbach S.L. et al. 1988; Lloid D„ 1999). Достигнутые в последнее время успехи в изучении нормальной микрофлоры позволили сформулировать положение, что нормальная микрофлора организма человека является своеобразным экстракорпоральным органом «регулирующим биохимические реакции и физиологические функции макроорганизма в естественных условиях его обитания» (Воробьев А.А., Лыкова Е.А., 1999; Gibson G.R., Roberfroid М.В., 1999; Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацулевич Т.В., 2003). Загрязнение окружающей среды, накопление в ней разнообразных по механизму действия ксенобиотиков, широкое применение антибиотических препаратов приводят к нарушению эволюционно сложившегося равновесия между организмом и населяющей его микрофлорой, к изменению эндоэкологического статуса, включая состав и функциональную активность микрофлоры (Куваева И.Б., 1976; Голошва Е.В., 2003, 2005; Захарченко М.П., Гриневич В.Б., 2003; Захарченко М.П. с соавт., 2004). Изменение качественно-количественного состава и функциональной активности микрофлоры, населяющей сообщающиеся с внешней средой полости организма человека, определяются понятием дисбактериоз (Красноголовец В.Н., 1989; Барановский А.Ю., Кондрашина Э.А., 2002). Дисбактериозы, особенно дисбактериоз кишечника, в последнее время стал широко распространенным состоянием и регистрируется практически у 65-90% населения (Шендеров Б.А., 1988; Воробьев А.А., 1995; Воробьев А.А., Лыкова Е.А., 1999; Куваева И.Б., Ладодо К.С., 1991). Опасность этого состояния заключается в том, что нарушения состава и функциональной активности микрофлоры провоцируют возникновение и развитие в организме человека многочисленных и разнообразных по проявлению патологических процессов, снижающих качество и продолжительность жизни населения (Билибин А.Ф., 1970; Воробьев А.А., Абрамов Н.А., Бондаренко В.М., Шендеров Б.А., 1997; Haudberger Н., Nilsson L.F., 1996; Краснов В.В., 2003).

Достаточно полно освещены вопросы изменения характера микрофлоры при дисбактериозах разных отделов кишечника (Крамарь О.Г.,1984; Крамарь B.C., 1990; Коваленко А.Д. с соавт., 1991; Шендеров Б.А., 1998; Бондаренко В.М., Боев Б.В., Лыкова Е.А., Воробьев А.А., 1999; Коршунов В.М. с соавт., 1980, 1994, 1995, 1999), широко представлены работы о биологических свойствах условно-патогенной микрофлоры (Захарченко С.М., 2001; Леванова Л.А., Алешкин В.А., Воробьев А.А., 2002), предложены различные методы коррекции данного состояния (Горская Е.М., 1994, 1995; Боссарт В., Барзашка-Попова С.Н., 1990; Барзашка-Попова С.Н., 1990; Бондаренко В.М. с соавт., 1992, 1994; Златкина А.Р., 1999; Алешукина А.В., Патрушева Е.В., Голошва Е.В., 2000; Голошва Е.В., Алешукина А.В., Терновская Л.Н., 2000; Запруднов A.M., Мазанкова Л.Н., 2001; Гриневич В.Б., Захарченко М.М., 2003; Звягинцева Т.Д., Сергиенко Е.И., 2003; Хавкин А.И., 2004). Однако механизмы, приводящие к нарушению состава кишечной микрофлоры при действии на организм различных ксенобиотиков, в том числе и антибиотических препаратов до конца не ясны (Горская Е.М., 1994; Алиева Э.А., 2002). Остается неизвестным, нарушение состава микрофлоры является следствием или причиной изменений гомеостаза непосредственно в месте контакта микро- и макроорганизма (в эпителиоидных клетках кишечника) и организма в целом (Гуторова Л.Д.,1991; Ардатская М.Д. с соавт., 2001).

Известно, что одним из пусковых механизмов патологических состояний являются нарушения антиоксидантной защиты организма, которая регулирует уровень активных форм кислорода, которые при чрезмерной генерации являются повреждающими факторами (Белинский Б.Ф. с соавт.,

1992; Абрамченко В.В., 2001; Дубинина Е.Е., 2001; Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.В., 2001; Fridovich I., 1986). Однако в литературных источниках нет сведений о состоянии антиоксидантной защиты эпителиоидных клеток кишечника при таком широко распространенном состоянии, как дисбактериоз кишечника, обусловленный применением антибиотических препаратов.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

Целью настоящего исследования явилось определение состояния антиоксидантной защиты макроорганизма в динамике экспериментального дисбактериоза, обусловленного применением антибиотика широкого спектра действия (гентамицина).

Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать качественный и количественный состав микрофлоры кишечника в динамике экспериментального дисбактериоза, обусловленного введением гентамицина.

2. Исследовать состояние антиоксидантной защиты крови и колоноцитов в динамике экспериментального дисбактериоза.

3. Установить связь между состоянием микрофлоры кишечника и состоянием антиоксидантной защиты эритроцитов и колоноцитов при экспериментальном дисбактериозе.

4. Изучить влияние продукта функционального питания «Наринэ» на состояние микрофлоры и на некоторые показатели антиоксидантной защиты эритроцитов, колоноцитов в динамике экспериментального дисбактериоза.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые установлена взаимосвязь между нарушениями антиоксидантной защиты и нарушением микроэкологического равновесия в кишечном биоценозе.

Впервые установлено, что при дисбактериозе кишечника более выражены нарушения в состоянии антиоксидантной защиты эпителиоидных клеток кишечника.

Впервые показано, что увеличение содержания условно-патогенной микрофлоры сочетается с повышенным содержанием ТБК-продуктов в копрофильтратах, что может свидетельствовать о повышенной агрессивности местной среды и являться дополнительным диагностическим тестом.

Экспериментально обоснованы пути коррекции дисбактериоза кишечника и нарушений антиоксидантной защиты организма кисломолочным продуктом «Наринэ».

ОСНОВНЫЕ ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. При экспериментальном дисбактериозе, обусловленном применением антибиотика широкого спектра действия (гентамицина), происходят изменения в составе микрофлоры кишечника, выражающиеся в изменении состава эшерихий и увеличении содержания условно-патогенных микроорганизмов, при умеренном снижении численности нормальных эубионтов.

2. При экспериментальном дисбактериозе, обусловленном применением гентамицина, развивается дисбаланс всех звеньев АОЗ. Выявляется связь между состоянием антиоксидантной защиты макроорганизма, содержанием ТБК-активных продуктов в копрофильтратах и характером микрофлоры в динамике дисбактериоза.

3. Кисломолочный продукт функционального питания «Наринэ» можно расценивать как препарат профилактического действия. Использование «Наринэ» одновременно с применением антибиотика предотвращает выраженные изменения состава микрофлоры, способствует стабилизации окислительно-восстановительного гомеостаза макроорганизма.

ТЕОРЕТИЧЕСКАЯ И ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

В теоретическом плане работа расширяет представления о механизмах развития дисбактериоза, обусловленного применением антибиотика широкого спектра действия. Работа выполнена в рамках договора № 034/201/003 (2001-2005 г.г.) в соответствии с планом научно-исследовательских работ Ростов НИИМП по теме «Отношение паразит-хозяин в биотопах кишечника при лекарственном дисбактериозе».

Материалы диссертационной работы представлены в медицинской технологии «Технология диагностики местных метаболических и иммунологических нарушений при дисбактериозе», утвержденной Федеральной службой по надзору в сфере здравоохранения и социального развития (2006).

Полученные результаты позволили обосновать новые подходы к диагностике и профилактике дисбактериоза кишечника и использованы в аналитическом обзоре «Новые подходы к коррекции и профилактике дисбактериозов» (2004), получившем положительную оценку Департамента организации медицинской помощи населению и профилактики неинфекционных заболеваний Минздрава России и рекомендованном для использования практическими врачами.

Результаты экспериментальной работы используются в лекционном курсе по дисбактериозу кишечника на факультете усовершенствования врачей в Ростовском-на-Дону государственном медицинском университете.

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Основные положения диссертационной работы доложены на:

- Международной конференции «Пробиотики, пребиотики, симбиотики и функциональные продукты питания: Современное состояние и перспективы» (Москва, 2004);

- 69-ой итоговой научной сессии КГМУ (Курск, 2004);

4-ой межвузовской международной биохимической научно-практической конференции «Обмен веществ при адаптации и повреждении» Рост ГМУ (Ростов-на-Дону, 2005);

- Всероссийской научной конференции с международным участием, посвященной 100-летию со дня основания филиала «Иммунопрепарат» ФГУП НПО «Микроген» МЗ и CP РФ (Уфа, 2005);

- 71-ой итоговой научной конференции сотрудников КГМУ и Центрально-Черноземного научного Центра РАМН (Курск, 2006);

- 1-ой научно-практической конференции по рациональному и лечебному питанию Южного Федерального Округа. Теоретические основы рационального и лечебного питания. Рост ГМУ и МЗРО (Ростов-на-Дону, 2006).

ПУБЛИКАЦИИ

По материалам диссертации опубликовано 8 научных публикаций, в том числе в изданиях, рекомендованных ВАК - 2. Получен патент на изобретение «Питательная среда для выделения лактобактерий» № 2202609 от 20.04.2003 г. и

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Гапон, Марина Николаевна

ВЫВОДЫ

1. При экспериментальном дисбактериозе, обусловленном применением гентамицина, изменение состава кишечной микрофлоры характеризуется снижением содержания постоянных (резидентных) представителей микрофлоры (бифидо- и лактобактерий, в большей степени - эшерихий с нормальной ферментативной активностью), увеличением частоты обнаружения и численности эшерихий со сниженной ферментативной активностью, лактозонегативных энтеробактерий, протеев, золотистых стафилококков, грибов рода Candida.

2. При экспериментальном дисбактериозе существенно изменяется ферментативная активность всех звеньев антиоксидантной защиты, как эритроцитов, так и эпителиоидных клеток толстого кишечника (колоноцитов). Наиболее значительные изменения активности антиоксидантных ферментов отмечаются в колоноцитах, что указывает на нарушение адаптационно-компенсаторных механизмов антиоксидантной защиты на местном уровне.

3. Выявлена выраженная зависимость изменения активности показателей антиоксидантной защиты от характера изменений микрофлоры кишечника: максимальные изменения в активности ферментов АОЗ макроорганизма (на 17 сутки) соответствуют максимальному содержанию в составе кишечной микрофлоры золотистых стафилококков.

4. На протяжении всего срока развития дисбактериоза, обусловленного применением гентамицина, в плазме крови, колоноцитах и копрофильтратах экспериментальных животных обнаружено высокое содержание ТБК-активных продуктов (МДА), с более высоким их уровнем в копрофильтратах. Максимальные концентрации МДА в плазме, колоноцитах и копрофильтратах (на 17 сутки) соответствуют более высокому содержанию в кишечном биоценозе условно-патогенных микроорганизмов (золотистых стафилококков, грибов рода Candida) и низким значениям активности антиоксидантных ферментов колоноцитов: супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы.

5. Использование кисломолочного продукта «Наринэ» одновременно с антибиотиком предотвращает развитие выраженных дисбиотических изменений, способствует повышению активности антиоксидантных ферментов и содержания восстановленного глутатиона в эритроцитах, нормализует содержание ТБК-активных продуктов в плазме и копрофильтратах. Однако для полного восстановления функциональной активности АОС колоноцитов использования данного продукта недостаточно.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Организм человека и населяющая его микрофлора представляют собой единую высокоорганизованную, саморегулирующуюся эволюционно сложившуюся эндоэкологическую систему, где взаимодействие микрофлоры и макроорганизма, с их внутренними связями, обеспечивает поддержание гомеостаза и равновесия на метаболическом, клеточном и молекулярно-генетическом уровнях (Гриневич В.Б., Захарченко М.М., 2003). Участие микроорганизмов в обмене веществ, иммунной защите и других процессах, поддерживающих гомеостаз макроорганизма, позволило высказать предположение, что индигенная микрофлора представляет собой «метаболически и регуляторно весьма активный «дополнительный орган» человеческого организма» (Барановский А.Ю., Кондрашина Э.А., 2000; Шендеров Б.А., 1998). Взаимоотношения «хозяин-микрофлора» носят сложный характер и еще далеко не ясно, в каких формах они реализуются внутри эндоэкологической системы (Дубинин А.В. с соавт., 1991). Сбалансированность системы «хозяин-микрофлора» может нарушаться и при превышении интенсивности негативных внешних воздействий над пороговыми значениями адаптационной системы организма и при сдвигах в метаболической активности самой микрофлоры (Уголев A.M., 1985; Парфенов А.И., Осипов Г.А., Ручкина И.Н., 2003). Известно и то, что состав и функционирование нормальной микрофлоры того или иного биотопа во многом определяется состоянием среды их обитания (Бабин В.Н., Минушкин О.Н., Дубинин А.В. и др., 1998). Существенно влияют на качественный и количественный состав микрофлоры такие факторы как состав и количество слизи, разнообразие жидких и плотных структур, температура, поступление пищевых ресурсов, состояние барьерных тканей макроорганизма, локальная концентрация протонов (рН), факторы неспецифической резистентности, окислительно-восстановительный потенциал, концентрация кислорода и активность свободно-радикальных процессов (Захарченко М.П. и др., 2004).

Изменение этих параметров, независимо от причин их вызывающих, отражаются на составе и функционировании нормальной микрофлоры. Одной из самых распространенных причин вызывающих изменения этих параметров является воздействие ксенобиотиков (в частности антибиотиков). Существует мнение, что под действием ксенобиотиков, в первую очередь наступает повреждение микрофлоры кишечника, так как именно она в виде биопленки препятствует их проникновению в макроорганизм. Однако, по мнению Бабина В.Н. с соавторами (1998) « дисбактериоз есть не только нарушение видового состава и абсолютной численности популяций, но и более или менее значительные нарушения в системе хозяин-микрофлора ». Установление факта развития гипоксического состояния эпителиальных клеток кишечника, высказанное положение о способности колоноцитов продуцировать токсические формы кислорода, изменение физико-химических параметров контактной приэпителиальной зоны (Бабин В.Н., Минушкин О.Н., Дубинин А.В., и др., 1998) создают предпосылки для более детального исследования взаимоотношений «хозяин-микрофлора».

Учитывая, что развитие многих патологических состояний обусловлено нарушениями в антиоксидантной защите макроорганизма, целью нашего исследования стало выявление особенностей изменения микрофлоры толстого кишечника животных и состояния антиоксидантной защиты макроорганизма в динамике экспериментального дисбактериоза, обусловленного применением антибиотика широкого спектра действия.

Изучение характера полостной микрофлоры кишечника экспериментальных животных, получавших антибиотик широкого спектра действия (гентамицин), позволило установить, что применение антибиотического препарата приводит к существенным изменениям в составе кишечного микробиоценоза. При этом изменяется количество и частота обнаружения представителей как облигатной, так и транзиторной микрофлоры. Несмотря на то, что бифидо- и лактобактерии обнаруживаются в составе полостной микрофлоры кишечника у всех экспериментальных животных (частота распространения - 100%), их количество умеренно снижается - бифидобактерий до lg 7,5+0,3 против lg 8,5+0,5 в контроле, лактобактерий - lg 6,8+0,1 против lg 7,2+0,6 в контроле. Более существенные изменения отмечены в популяции эшерихий. Одновременно с уменьшением общего количества эшерихий отмечается уменьшение частоты обнаружения эшерихий с нормальной ферментативной активностью (до 50,0+6,1 %), увеличение содержания эшерихий со сниженной ферментативной активностью (lg 7,2+0,2 против lg 3,0+0,5 у интактных животных).

Среди транзиторной микрофлоры так же происходят выраженные изменения: увеличивается частота находок (с 80,0+2,6 % до 100 %) и количество лактозонегативных энтеробактерий (lg 5,7+0,1 против lg 3,3+0,1), бактерий рода Proteus (частота находок с 40,0+7,7 % до 90,0+1,3 %; количество lg 4,1+0,5 против 0,8+0,2 в контроле), грибов рода Candida (частота обнаружения до 50,0+6,1 %; количество lg 3,3+0,2 против lg 1,4+0,1 в контроле). Значительно изменяется состав кокковой флоры: возрастает численность коагулазоотрицательных стафилококков (до lg 4,7+0,3 против lg 3,5+0,5), увеличивается частота обнаружения и количество золотистых стафилококков (80,0+2,6 % против 0; lg 4,3+0,1 против 0).

Исследование изменений состава кишечной микрофлоры животных в динамике экспериментального дисбактериоза показало, что нарушения в микробиоценозе регистрируются уже на третьи сутки после окончания введения антибиотического препарата, нарастают к десятым-семнадцатым суткам наблюдения и по ряду показателей не достигают значений контрольной группы к тридцатым суткам исследования. Так, уже на третьи сутки наблюдения отмечается умеренное снижение количества бифидо- и лактобактерий, эшерихий с нормальной ферментативной активностью, увеличение содержания эшерихий со сниженной ферментативной активностью, лактозонегативных энтеробактерий, коагулазоотрицательных и золотистых стафилококков, бактерий рода Proteus. К десятому дню после отмены антибиотического препарата эти изменения приобретают более выраженный характер: количество бифидо- и лактобактерий становится на порядок ниже по сравнению с группой интактных животных, значительно уменьшается содержание эшерихий с нормальной ферментативной активностью, максимально высоких значений достигает количество лактозонегативных энтеробактерий, увеличивается и численность дрожжеподобных грибов рода Candida. Изменения в отношении индигенной микрофлоры сохраняются и на семнадцатые сутки наблюдения, обнаруживая некоторую тенденцию к повышению содержания нормальных эубионтов. Несколько иная зависимость выявляется среди представителей транзиторной условно-патогенной микрофлоры: если количество лактозонегативных энтеробактерий в составе кишечного биоценоза значительно уменьшается (с lg 5,8+0,4 на десятый день наблюдения до lg 4,0+0,7 на семнадцатый день), то количество золотистых стафилококков продолжает возрастать, достигая lg 5,3+0,4 на семнадцатые сутки против lg 4,0+0,2 на десятые сутки. В дальнейшие сроки наблюдения (двадцать четвертый и тридцатый дни после отмены антибиотического препарата) тенденция увеличения содержания в составе микрофлоры кишечника количества нормальных эубионтов стойко сохраняется, однако если содержание лактобактерий и эшерихий с нормальной ферментативной активностью к концу срока наблюдения достигает показателей контрольных животных, то количество бифидобактерий в кишечной микрофлоре животных, получавших антибиотик, остается еще низким (lg 7,7+0,3 против lg 8,5+0,5 в контроле). В этот же период в составе полостной микрофлоры экспериментальных животных регистрируется высокая численность золотистых стафилококков (lg 4,1+0,2), протеев (lg 3,1+0,1), грибов рода Candida (lg 4,0+0,2).

Так как состояние мукозной микрофлоры кишечника в большей степени отражает состояние местных условий среды кишечного биотопа (Несвижский Ю.В., 2003) было проведено исследование состава мукозной микрофлоры интактных и экспериментальных животных. Сопоставление количественного состава мукозной и полостной микрофлоры белых мышей не выявило различий в спектре выделяемых микроорганизмов. В составе как полостной, так и мукозной микрофлоры интактных животных присутствовали бифидо- и лактобактерии, эшерихии с нормальной и сниженной ферментативной активностью, энтерококки, коагулазоотрицательные стафилококки. Однако бифидобактерии в составе мукозной флоры определялись в большем, чем в полостной флоре, количестве (lg 9,2+0,6 против lg 8,5+0,5). В несколько меньшем количестве, чем в полостной микрофлоре, в составе мукозной содержались лактобактерии (lg 6,0+0,3 против lg 7,2+0,6), эшерихии с нормальной ферментативной активностью (lg 4,2+0,3 против lg 6,4+0,3), эшерихии со сниженной ферментативной активностью (lg 2,0+0,1 против lg 3,0+0,5) и лактозонегативные энтеробактерии (lg 2,3+0,1 против lg 3,3+0,1). Гемолитические эшерихии, протеи, золотистые стафилококки и грибы рода Candida в составе мукозной микрофлоры интактных животных отсутствовали.

При развитии экспериментального дисбактериоза изменения состава мукозной микрофлоры в целом соответствовали изменениям, отмечаемым в полостной микрофлоре кишечника. Однако снижение содержания бифидобактерий было отмечено в более выраженной степени, их количество при экспериментальном дисбактериозе соответствовало lg 5,6+0,3 против lg 9,2+0,6 у интактных животных. В составе мукозной микрофлоры так же как в составе полостной уменьшилась численность эшерихий с нормальной ферментативной активностью, статистически достоверно возросло количество и частота обнаружения эшерихий со сниженной ферментативной активностью, лактозонегативных энтеробактерий, протеев, грибов рода Candida, золотистых стафилококков.

До настоящего времени конкретные механизмы дисбаланса кишечной микрофлоры под влиянием различных по своей природе факторов риска, остаются до конца не выясненными. Типичной реакцией целостного организма на различные воздействия является стрессовый адаптационный синдром, при котором формируются изменения кишечного микробиоценоза. Дополнительным фактором, способствующим изменению количества облигатной микрофлоры, является продукция токсических метаболитов кислорода как следствие активации гексозомонофосфатного шунта (Дубинин А.В., Бабин В.Н., Раевский П.М., 1991; Ардатская М.Д., Минушкин О.Н., Прихно Н.И., Дубинин А.В., 2000; Захарченко М.П., Гриневич В.Б., Добрынин В.М., 2003; Захарченко М.П., Добрынин В.М., Захарченко М.М. с соавт., 2004; Ahmad M.S., Krishnan S., Ramakrishna B.S. et al., 2000). В связи с этим целесообразным является изучение ключевой стресслимитирующей, гомеостатической системы макроорганизма - антиоксидантной системы в динамике дисбактериоза, обусловленного применением антибиотика широкого спектра действия. Поэтому следующим этапом исследования явилось изучение состояния антиоксидантной защиты эритроцитов и колоноцитов в динамике экспериментального дисбактериоза.

Анализ результатов исследования показал, что в процессе развития экспериментального дисбактериоза происходят существенные изменения активности ферментов антиоксидантной защиты макроорганизма. Уже к третьему дню наблюдения отмечается снижение активности СОД в эритроцитах крови на 22,1 % (Р<0,05) по сравнению с животными контрольной группы. Начиная с десятого дня исследования активность СОД постепенно увеличивается, достигая своих максимальных значений к двадцать четвертому дню исследования. С несколько иной закономерностью изменяется активность каталазы. Достоверное снижение ее активности прослеживается на третьи, семнадцатые сутки наблюдения, достигая своих минимальных значений к двадцать четвертому дню исследования. Значительное снижение активности каталазы при высокой активности СОД свидетельствует о резком дисбалансе в функционировании сопряженных ферментов, который может указывать на накопление перекиси водорода в эритроцитах, что в свою очередь может способствовать активации процессов перекисного окисления липидов.

В динамике дисбактериоза происходят изменения и в состоянии глутатионового блока антиоксидантной системы эритроцитов. Если на третьи сутки наблюдения некоторое снижение активности ГПО (на 11,7 %, Р<0,05) и более выраженное повышение активности ГР (на 25,9 %, Р<0,05) можно расценивать как компенсаторный процесс, то к десятым суткам увеличение активности ГР (на 69,6 %, Р<0,05) и снижение содержания восстановленного глутатиона (на 19,5 %, Р<0,05) относительно контрольных величин может указывать на интенсивное использование его восстановленных эквивалентов. Максимальное повышение активности ГПО и ГР к семнадцатым суткам при количестве восстановленного глутатиона соответствующем контрольным значениям, может свидетельствовать о напряженности глутатионзависимого блока и истощении его адаптационно-компенсаторных механизмов.

Анализ активности основных ферментов антиоксидантной защиты эритроцитов экспериментальных животных в динамике дисбактериоза выявляет наличие напряженности антирадикальной защиты. Более выраженные изменения отмечаются на семнадцатый, двадцать четвертый день наблюдения. Определяемое в этот период значительное увеличение активности СОД на фоне снижения активности каталазы, по отношению к показателям интактных животных, на 17 сутки сопряжено с нормальным содержанием восстановленного глутатиона и несколько повышенной, относительно контроля, активностью ГПО, а на 24 сутки - со слегка сниженным содержанием восстановленного глутатиона и соответствующей контрольным значениям активностью ГПО. Повышенная относительно физиологического уровня активность ГР, определяемая на протяжении всего срока наблюдения в эритроцитах животных с экспериментальным дисбактериозом, при активности ГПО и количестве восстановленного глутатиона близких к контрольным значениям, могут свидетельствовать о ведущей роли глутатионового звена в антиоксидантной защите эритроцитов при развитии эксперименталього дисбактериоза.

Многие исследователи полагают, что симбионтная микрофлора кишечника оказывает трофическое обеспечение слизистой оболочки кишечника и, в частности, ее эпителиального слоя (Шендеров Б.А., 1998; Осипов Г.А. с соавт., 2001). Однако последствия разрушения этой экологической системы для организма в целом изучены недостаточно.

Функциональная целостность макроорганизма (как симбиотической системы) определяется наличием интегративных регуляторных и трофических связей между организмом хозяина и его микрофлорой. Именно колоноциты во многом, по-видимому, определяют «полноценность» этих связей и являются отражением развития дисбиоза кишечника, поэтому представилось необходимым исследовать состояние антиоксидантной защиты колоноцитов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гапон, Марина Николаевна, 2007 год

1. Абрамченко В.В. Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве. // СПб.: Издательство ДЕАН, 2001. - 400 с.

2. Алешукина А.В., Голошва Е.В. Колонизирующая способность лактобактерий, выделенных от людей с дисбактериозом кишечника. // Журн. Известия ВУЗов, Северо-Кавказский регион. 2003. - № 1. - С. 97 -99.

3. Алешукина А.В., Патрушева Е.В., Голошва Е.В. Симбионтная микрофлора желудочно-кишечного тракта человека. Дисбактериоз и его коррекция. Методические рекомендации. Ростов-на-Дону; Изд-во РГУ, -2000. - 22 с.

4. Алиева Э.А. Патогенетические механизмы заболеваний толстой кишки. // Педиатрия. 2002. - № 5. - С. 92.

5. Андреева Л.И., Кожемякин Л.А., Кишкун А.А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тиобарбитуратовой кислотой. // Лаб. дело. 1988. - № 11. - С. 19 - 20.

6. Ардатская М.Д. и др. Дисбактериоз кишечника современные аспекты изучения проблемы. Принципов диагностики и лечения (обзор). // Терапевт, архив. 2001. - 2. - С. 67 - 72.

7. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в бактериологических исследованиях. Л., 1962. - 250 с.

8. Бабин В.Н., Домарадский И.В., Дубинин А.В. Биохимические и молекулярные аспекты симбиоза человека и его микрофлоры // Росс, химический журнал. 2002. - Т. 38, № 6. - С. 66 - 78.

9. Бабин В.Н., Минушкин О.Н., Дубинин А.В. и др. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 6. - С. 76 -82.

10. Байбанов В.И., Карих Т.Л., Борунаева Л.А. и др. Нормализация кишечной микрофлоры и общего состояния мышей линии JCR под влиянием концентрата бифидобактерий. // Антибиотики и химиотерапия. 1997. - Т. 42, №3.-С. 20-24.

11. Барановский А.Ю., Кондрашина Э.Ю. Дисбактериоз и дисбиоз кишечника. СПб.: Питер, - 2002. - 224 с.

12. Барзашка-Попова С.Н. Коррекция микрофлоры и местного иммунитета при дисбактериозах с помощью лактобацилл: Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 1990.-21 с.

13. Белобородова Н.В. О микрофлоре хозяина и ее участии в ответе на инфекцию // Антибиотики и химиотерапия. 1998. - Т. 43, № 9. - С. 44 -48.

14. Белинский Б.Ф., Фецич Т.Г., Тимочко М.Ф. Изменение перекисного окисления липидов антиоксидантной активности в сыворотке крови больных раком легких в процессе лечения. // Экспер. онкология. 1992. -№ 6. - С. 65 - 67.

15. Бельмер С.В., Гасилина Т.В. Рациональная терапия дисбактериоза кишечника у детей // Клиническая медицина. 1998. - № 10. - С. 35 - 38.

16. Билибин А.Ф. Дисбактериоз, аутоинфекция и их значение в патологии человека. // Клин, медицина. 1970. - № 2. - С. 34-37.

17. Билибин А.Ф. Проблемы дисбактериоза в клинике. // Тер. Архив. 1978. -№5.-С. 13-18.

18. Билибин А.Ф., Маркова А.Е., Двуреченская Г.С. Эндогенные инфекции и перспективы их лечения. // Тер. архив. 1975. - № 8. - С. 9 -18.

19. Бондаренко В.М., Бондаренко А.В. Пути совершенствования этиопатогенетической терапии дисбактериозов // Журн. микробиол. -1998.-№5.-С. 96-101.

20. Бондаренко В.М., Бондаренко А.В., Долженко J1.B. Идеи И.И. Мечникова и развитие современного естествознания. Харьков. - 1995. - С. 38 - 39.

21. Бондаренко В.М., Боев Б.В., Лыкова Е.А., Воробьев А.А. Дисбактериозы желудочно-кишечного тракта // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатопроктологии, колопроктологии. 1998. - Т. 8, № 1. - С. 66 - 70.

22. Бондаренко В.М., Горская Е.М. Новые подходы к моделированию, диагностика и лечение дисбактериозов // Медицинские аспекты микробной экологии. М., 1992. - Вып. 6. - С. 23 - 26.

23. Бондаренко В.М. Учайкин В.Ф., Мурашева О.А. и др. Дисбактериоз: современные возможности профилактики и лечения // М.: OA «Партнер», 1994. 22 с.

24. Бондаренко В.М., Грачева Н.М., Мацулевич Т.В. Дисбактериоз кишечника у взрослых. // М., 2003. 50 с.

25. Боссарт В., Барзашка-Попова С.Н. Изучение влияния препарата из лактобактерий «Солко» на выживаемость и микрофлору кишечника у облученных животных. // ЖМЭИ. 1990. - № 11. - С. 22 - 31.

26. Бурлакова Е.Б., Джалябова Н.И., Гвахарил В.О. и др. Влияние липидов мембран на активность ферментов. // Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии. М., 1982. - С. 113 -140.

27. Бухарин О.В. Механизмы бактериальной персистенции // Персистенция бактерий / Под ред. О.В. Бухарина. Куйбышев, 1990. - С. 5 -14.

28. Бухарин О.В. Персистенция патогенных бактерий. М., 1999. - 360 с.

29. Валышев А.В., Зыкова J1.C., Коннова М.Е. Скрининговая диагностика дисбиоза кишечника. // Журн. микробиол. 1994, (приложение). - С. 71 -74.

30. Валышев А.В., Кирилов В.А., Кирилов Д.А., Бухарин. О.В. Влияние инулина на биологические свойства энтеробактерий.// Журн. микробиол. -2000.-№ 1.-С. 79-80.

31. Ван-дер-Ваай Д. Пищеварительный тракт как главный эндогенный источник бактерийных и гнойных инфекций. Важность поддержанияколонизационной резистентности. // Антибиотики и химиотерапия. -1992. № 6. - С. 36-41.

32. Васильева Т.У., Кухта В.Н. Содержание продуктов перекисного окисления липидов и состояние АОЗ системы эритроцитов в условиях охлаждения организма. // Вестн. АНБССР Сер. Биол. наук. 1983. - № 5. -С. 64 - 67.

33. Вилков Г.А., Лукаш И.А. Активность антиоксидантных ферментов в лимфоцитах при язвенной болезни. // В кн. «Материалы 4-го Всесоюзного съезда гастроэнтерологов. М.; Л. 1990, № 1- С. 174 - 175.

34. Владимиров Ю.А., Арганов А. И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Медицина, 1972. - 311 с.

35. Войчищина Л.Г., Чашинский В.Я., Въюницкая В.А. Применение спорообразующих бактерий в лечении больных дисбактериозом. // Врачебное дело. 1991. - № 12. - С. 73 - 75.

36. Воробьев А.А. Дисбактериозы актуальная проблема медицины. // Вестник РАМН. - 1997. - № 3. - С. 4 - 7.

37. Воробьев А.А. Изменение микрофлоры при различных заболеваниях. // Вестник РАМН. 1995. - № 5. - С. 59 - 63.

38. Воробьев А.А., Бондаренко В.М., Лыкова Е.А. и др. Микроэкологические нарушения при клинической патологии и их коррекция бифидосодержащими пробиотиками. // Вестник РАМН. 2004. - 2. - С. 13 -17.

39. Воробьев А.А., Иноземцев Л.О., Буданова Е.В. и др. Изменения микробиоценоза толстой кишки у больных различными заболеваниями // Вестник РАМН. 1995. - № 5. - С. 59 - 63.

40. Воробьев А.А., Лыкова Е.А. Бактерии нормальной флоры: биологические свойства и защитные функции // Журн. микробиол. 1999. - № 6. - С. 102 -105.

41. Воробьев А.А., Несвижский Ю.В., Липницкий Е.М., Аленов М.Н., Богданова Е.А., Корнев М.Л. Исследование пристеночной микрофлорыжелудочно-кишечного тракта человека в норме и при патологии. // Вестник РАМН. 2004. - 2. - С. 43 - 47.

42. Воробьев А.А., Несвижский Ю.В. Микрофлора человека: единство и противоположность. Современные проблемы аллергологии, клинической иммунологии и иммунофармакологии: Сб. научных трудов. М., 1997. - С. 137-141.

43. Воробьева Л.И. Микробиологический синтез витаминов. М.: МГУ, 1982. -117 с.

44. Гаврилов А.Ф. Бактерийные препараты в комплексном лечении больных острыми кишечными инфекциями: Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 1989.-21 с.

45. Гаврилова Н.Н. Создание и производство новых пробиотиков на основе бактериальных культур: Автореф. дисс. докт. биол. наук. Алма-Ата, 1993.-46 с.

46. Гартье П. Ацидофильные бактерии кишечника грудных детей. СПб.: Практическая медицина, 1910. - 25 с.

47. Голошва Е.В. Изучение колонизационной резистентности кишечника при дисбактериозах, обусловленных антибиотиками широкого спектра действия: Автореф. дисс. канд. биол. наук. г. Ростов-на-Дону, 2005. - 21 с.

48. Голошва Е.В. Микроэкологические нарушения в составе нормальной кишечной микрофлоры кишечника у людей с лекарственным дисбактериозом. // Журн. Известия ВУЗов, Северо-Кавказский регион. -2003,-№2.-С. 87- 88.

49. Голошва Е.В., Алешукина А.В., Терновсакя JI.H. Антагонистическая и адгезивная активность лактобактерий, выделенных от людей с дисбактериозом кишечника. // Сб. «Актуальные вопросы биологии и медицины». Нальчик, 1999. - С. 34 - 36.

50. Голошва Е.В., Терновская JI.H., Алешукина А.В. Некоторые особенности состава микрофлоры кишечника при дисбиозах у взрослых людей. // Сб. «Актуальные вопросы биологии и медицины». Нальчик, 1999. - С. 36 -37.

51. Гончарова Г.И., Дорофейчук В.Г. Микробная экология кишечника в норме и патологии. // Антибиотики и химиотерапия. 1989. - № 4. - С. 462 -466.

52. Гончарова Г.И., Семенова Л.П., Ляная A.M. Бифидофлора человека, ее нормализующие и защитные функции. // Антибиотики. 1987. № 8 - С. 179- 183.

53. Горская Е.М. Механизмы развития микроэкологических нарушений в кишечнике и новые подходы к их коррекции: Автореф. дисс. докт. мед. наук. М., 1994.-54 с.

54. Горская Е.М. Повышение неспецифической активности макроорганизма при пероральном применении эубиотиков из лактобацилл. // Иммунобиол. препараты. М., 1989. - С. 181 -185.

55. Горская Е.М. Протеолитическая активность содержимого толстой кишки в норме и при микроэкологических нарушениях. // Журн. микробиол. -1995.-№ 3-С. 116.

56. Готтшалк Г. Метаболизм бактерий. М.: Мир, 1982. - 310 с.

57. Гриневич В.Б., Захарченко М.М. Современные представления о значении кишечного микробиоценоза человека и способы коррекции его нарушений. // Новые СПб врачебные ведомости. 2003. - № 2 - С. 13-20.

58. Гриневич В.Б., Захарченко М.М. Современные представления о значении кишечного микробиоценоза человека и способы коррекции его нарушений. 4.2. Лечение дисбиоза кишечника. // Новые СПб. Врачебные ведомости. 2003. - С. 18 - 23.

59. Гукасян Г.Б и др. // Журн. микробиол., 2002. - № 5 - С. 63 - 65.

60. Гусев М.В., Минеева Л.А. Микробиология. - М.: Изд-во МГУ, 1992. -448 с.

61. Гуторова Л.Д. Механизмы развития дисбактериоза при антибактериальной терапии. // Современные методы профилактики и лечения в практической медицине: Матер, годичн. конф. Тадж.

62. Госмединститута / Под ред. Д.З. Закиряходжаева. Душанбе, 1991. - С. 56 -57.

63. Далидович К.К., Мараховский Ю.Х., Шалинская О.В. и др. Состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы у больных хроническим гастродуоденитом и язв. болезнью.// Журн. Здравоохранение Белоруссии Минск, 1989. - 7 с.

64. Доморадский И.В. Некоторые проблемы адаптации патогенных бактерий в окружающей среде. // Журн. микробиол. 1997. - № 4. - С. 31 - 35.

65. Доморадский И.В. Роль токсинов в экологии бактерий. // Журн. микробиол. 1993.-№ 1.-С. 103 - 105.

66. Дубинин А.В., Бабин В.Н., Раевский П.М. Трофические регуляторные связи кишечной микрофлоры и макроорганизма. // Клин. мед. 1991. - № 7. - С.24 - 28.

67. Дубинина Е.Е. Окислительная и антиокислительная система крови в онтогенезе. // Вопросы мед. химии. 1984. - Т. 5, № 5 - С. 28-33.

68. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса. // Вопросы мед. химии. 2001. - Т. 47, № 6. - С. 561 - 581.

69. Журавлева Т.Д. и др. Возрастные особенности свободно радикального окисления липидов и антиоксидантной защиты в эритроцитах здоровых людей. // Клиническая лаб. диагностика. 2002. - № 8. - С. 17.

70. Запруднов A.M., Мазанкова JT.H. Микробная флора кишечника и пробиотики. М., 2001. - 31 с.

71. Захарченко С.М. Клиническая микробиология и антимикробная терапия. -2001. Т. 3 - № 1. - С. 79-80.

72. Звягинцева Т.Д., Сергиенко Е.И. Дисбактериоз кишечника клиническое значение и перспективы лечения. //Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. 2003. - 3. - С. 70 - 74.

73. Зенков Н.К., Ланкин В.З., Меныцикова Е.Б. Окислительный стресс: Биохимический и патофизиологические аспекты. М.: МАИК «Наука/Интерпериодика», 2001. - 343 с.

74. Златкина А.Р. Современные подходы к коррекции дисбактериоза кишечника. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - Т. 9, № 3. - С. 64 - 66.

75. Карасева В.Г. Кишечный дисбактериоз в патогенезе гастроэнтерологических заболеваний у детей и его коррекция: Дисс. канд. мед. наук. Горький, 1986. - 189 с.

76. Кашкин К.П., Караев 3.0. Иммунная реактивность организма и антибиотическая терапия. // Л.: Медицина, 1984. 200 с.

77. Князева Т.П. Угроза не вынашивания берменности и значение системы АОЗ в диагностике и профилактике: Автореф. дисс. канд. мед. наук -Барнаул, 1997. 25 с.

78. Коган А.Х., Погромов А.П. Активные формы кислорода, лейкоциты и патогенез гастродуоденальной язвенной болезни. // Учебное пособие. М.; 1991.

79. Кожевников Ю.Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии. // Вопросы мед. химии. 1985. - Т. 5, № 6. - С. 2 - 7.

80. Комаров Ф.И., Коган А.Х., Хуцишвили М.Б., Лаптева О.Н. Роль свободно радикальных процессов в патологии желудочно-кишечного тракта. // Росс, журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии . 1999. - № 9 (5).-С. 170.

81. Конев С.В., Волотовский И.Д. Биоантиокислители в регуляции метаболизма в норме и патологии.// М.: Наука, 1982. С. 37 - 50.

82. Коршунов В.М. Проблемы регуляции микрофлоры кишечника. // Журн. микробиол. 1995. - № 3. - С. 48 - 59.

83. Коршунов В.М., Иванова Н.П., Кафарская Л.И. и др. Нормальная микрофлора кишечника, дисбактериозы и их лечение. // Методические разработки. М., 1994.

84. Коршунов В.М., Иконникова Т.Б., Кисина Е.В. Изучение микрофлоры полости и слизистой оболочки кишечника в норме и после гамма облучения // Журн. микробиол. 1980. - № 9. - С. 65 - 70.

85. Коршунов В.М., Володин Н.Н., Ефимов Б.А., Пикина А.Г. Микроэкология желудочно-кишечного тракта. Коррекция микрофлоры при дисбактериозах кишечника. Учебное пособие. // М.: МЗРФ, 1999. 80 с.

86. Костюк О.П., Чернышова Л.И., Волоха А.П. Физиологические и терапевтические свойства лактобактерий // Педиатрия. 1998. - № 1. - С. 71-76.

87. Костюшов Е.В. Роль свободно радикального окисления и антиоксдантной системы организма в процессе жизнедеятельности. // В кн.: Арамченко

88. B.В. Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве. СПб: Изд. ДЕАН, 2004. - 400 с.

89. Крамарь B.C. Колонизация микроорганизмами пищеварительного тракта людей в экологически неблагополучной обстановке. // Тез. итоговой годичной конф. ЦНИЛ Куйбышевского мединститута. Куйбышев, 1990.1. C. 17-18.

90. Крамарь О.Г. Микрофлоры и функциональное состояние толстого кишечника больных, страдающих дисбактериозом: Автореф. дисс. канд. мед. наук. -М., 1984.

91. Краснов В.В. Микрофлора кишечника и иммунитет. Клиническая лекция. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 2003. - 46 с.

92. Красноголовец В.Н. Дисбактериоз кишечника. М.: Медицина, 1989. -207 с.

93. Краткий определитель бактерий Берги: Пер. с англ./ Под ред. Дж. Хоулта. М.: Мир, 1980.-454 с.

94. Куваева И.Б, Ладодо К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей: диетическая коррекция. М.: Медицина, 1991. - 239 с.

95. Куваева И.Б. Обмен веществ организма и кишечная микрофлора. // М.: Медицина, 1976. 248 с.

96. Кулинский В.А., Колиниченко Л.С. Успехи биол. химии. М.: Наука, 1990. - Гл. 2: Обмен глутатиона - С. 157 - 180.

97. Кюнкрикова И.Е. Биокоррекция микрофлоры кишечника в комплексной терапии и профилактике дисбактериоза: Автореф. дисс. канд. мед. наук. Волгоград, 2000. - 19 с.

98. Лебедев В.В. Супероксидная теория патогенеза и терапии иммунных расстройств. // Вестник РАМН. 2004. - № 2. - С. 34 - 40.

99. Ленцнер А.А., Ленцнер Х.П. Актуальные проблемы микроэкологии человека в норме и патологии, ее коррекция: Республ. сб. научных тр. / Под ред. И.Н. Блохиной, К.Я. Соколовой. Горький, 1988. - С. 10 -14.

100. Лесняк С.В., Евтухова Л.Н, Шимчук Л.Ф. О свойствах препарата из нормальной микрофлоры человека // Антибиотики и микроэкология человека и животных. М.: ВНИИА, 1988. - С. 136 - 137.

101. Лыкова Е.И. Коррекция пробиотиками микроэкологических нарушений при гастродуоденальной патологии у детей // Журн. микробиол. 1996. -№2.-С. 88-91.

102. Мазанкова Л.Н., Лыкова Е.А. Пробиотики: характеристика препаратов и выбор в педиатрической практике. // Детские инфекции. 2004. - № 1. -С. 18-23.

103. Мазо В.К. Глутатион как компонент антиоксидантной системы ЖКТ. // Росс, журнал гастроэнтерологии, гепатологии и колопроктологии. 1998. -Т. 8. № 1. - С. 47-53.

104. Малова А.А., Еналева Д.Ш. Диагностика и лечение дисбактериоза кишечника: Методич. Пособие // Казань: изд. КазГМУ, 2000. 46 с.

105. Мальцева Н.Н., Шкарупета М.М, Пинегин Б.В. Иммуномодулирующие свойства некоторых микробов представителей нормальной микрофлоры кишечника. // Антибиотики и химиотерапия. 1992. - № 12. - С. 41 - 43.

106. Маянский А.Н. Дисбактериоз: современный взгляд на проблему. // Новые медицинские технологии. 2002. - № 2. - С. 28 - 30.

107. ИЗ. Маянский А.Н. Клиническая микробиология и антимикробная терапия. -2000.-Т. 2.-С. 61-64.

108. Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. М.: Медицина, 1987. - 347 с.

109. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А., Круговых Н.Ф., Труфакин В.А. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. // М.: фирма «Слово», 2006. 526 с.

110. Микаэлян Э.М., Мхитарян В.Г. Динамика перекисного окисления липидов при стрессе. // Биол. журнал Армении 1985. - Вып. 5. - С. 393 -399.

111. Микельсаар М.Э., Сийгур У.Х., Ленцнер А.А. Оценка количественного состава микрофлоры фекалий. // Лаб. Дело. 1990. - № 3 - С. 62 - 66.

112. Митрохин С.Д. Метаболиты нормальной микрофлоры человека в экспресс-диагностике и контроле лечения дисбиоза толстой кишки: Дисс. докт. мед. наук. М., 1998. - 37 с.

113. Моин В.М. Простой и специфический метод определения активности глутатионпероксидазы в эритроцитах. // Лаб. Дело. 1986. - № 12. - С. 724 -727.

114. Назаренко И.В., Фролов А.Г., Бобкова Е.Д. и др. Динамика активности некоторых внутриклеточных ферментов в зависимости от периода иклинических проявлений острых кишечных заболеваний (Материалы пленума правления РНОГ) // Рига, 1986. С. 662 - 663.

115. Несвижский Ю.В. Изучение изменчивости кишечного микробиоценоза человека в норме и при патологии. // Вестник РАМН. 2003. - № 1. - С. 49 -53.

116. Осипов А.Н., Азизова О.А., Владимиров Ю.А. Успехи биол. химии. -М.: Наука, 1990. Гл.: Активные формы кислорода и их роль в организме. -С. 40-45.

117. Павлюченко И.И. Окислительный стресс, его мониторинг и критерии оценки антиокислительной активности лекарственных препаратов и БАД: Автореф. дисс. докт. мед. наук Кубань, 2005. - 43 с.

118. Парфенов А.И., Осипов Г.А., Ручкина И.Н. Теоретические и прикладные вопросы дисбактериоза кишечника. // Гастроэнтерология. -2003.-Т. 5.-№6.-С. 328- 330.

119. Перетц Л.Г. Значение нормальной микрофлоры для организма человека. // М., 1955. 250 с.

120. Петрович Ю.А., Гуткин Д.В. Глутатионпероксидазы в системе антиоксидантной защиты мембран. // Пат. Физиол. И экспер. тер. 1981. -Вып. 5. - С. 76 - 78.

121. Пинегин Б.В., Мальцев В.Н., Коршунов В.М. Дисбактериозы кишечника. М.: Медицина, 1984. - 144с.

122. Поберезкина Н.Б., Лосинская Л.Ф. Биологическая роль супероксиддисмутазы // Укр. биохим. журн. 1989. - Т. 61, № 2. - С. 14 -27.

123. Подопригорова В.Г. Роль свободно радикального окисления липидов и антиоксидантных систем в патогенезе язвенной болезни желудка и 12-п. кишки, возможности коррекции антиоксидантами. Дисс. докт. мед. наук. -М., 1998.

124. Положенкова JI.A., Бурков С.Г., Брокерия О.А., Новиков С.В. Значение флоневина БС в лечении дисбактероза кишечника. // Клин, медицина. -1999.-№2.-С.40-43.

125. Полякова А.В., Бектаева Н.Н., Лещенко В.И. Опыт лечения эрозивно-язвенных эзофагитов с применением гипербарической оксигенации. // В кн. «Материалы 4-го Всесоюзного съезда гастроэнтерологов. М.: Л,- 1990. 1-С. 500-501.

126. Помойнецкий В.Д., Кубатиева А.А Ферменты клеточной защиты и методы их исследования. М.: Медицина, 1986. - 225 с.

127. Поспелова В.В., Рахимова Н.Г., Ханина Г.И. и др. Биопрепараты, нормализующие микрофлору кишечника: итоги двадцатилетних исследований по проблеме. // Успехи в области изучения и применения препаратов эубиотиков: Сб. научн. тр. М., 1990. - С. 172 - 180.

128. Постникова Е.А., Ефимов Б.А., Володин Н.Н., Кафарская Л.И. Поиск перспективных штаммов бифидобактерий и лактобацилл для разработки новых биопрепаратов. // Журнал микробиол., эпидемиол. и иммнобиол. -2004. 2. - С. 64 - 69.

129. Прокопенко В.М., Парцалис Г.К., Павлова Н.Г. и др. Глутатионзависимая система АОЗ при преждевременных родах. // Бюллетень экспер. Биол. и медицины. 2002. - Т. 133, № 5. - С. 511 - 513.

130. Рябиченко Е.В., Бондаренко В.М., Рябиченко В.В. Роль активных форм кислорода, генерируемых фагоцитами, в патогенезе заболеваний. // ЖМЭИ- 2000. № 4 (приложение) - С. 65 - 71.

131. Саркисян О.Г. Особенности изменений метаболических процессов при атрофических кольпитах и их коррекции. Дисс. канд. мед. наук Ростов-на-Дону, 2000. - 125 с.

132. Сергиенко М.Г. Клинико-биохимические особенности и эффективность метаболической терапии неспецифического язвенного колита: Автореф. дисс. канд. мед. наук Ростов-на-Дону, 2006. - 21 с.

133. Слиянов В.В. Новые подходы к разработке препаратов на основе лактобактерий для лечения дисбактериозов кишечника: Дисс. канд. мед. наук. М., 1993.- 143 с.

134. Смолянская А.З. Дисбактериозы инфекционные процессы смешанной этиологии. // Антибиотики и микроэкология человека и животных: Тр. ВНИИ антибиотиков. - М., 1988. - С. 32 - 35.

135. Соколовский В.В. Окислительно-восстановительные процессы в биохимическом механизме неспецифической реакции организма на действие экстремальных факторов внешней среды. JL: Медицина, 1989. -519 с.

136. Суплотов С.Н., Журавлева Т.Д., Баранцева JI.A. Рациональная оценка активности свободно радикального окисления липидов в эритроцитах периферической крови. // Клиническая лаб. диагностика. 2002. - № 10. -С. 46.

137. Тарасова Н.Б., Соколова К.Я. Новый препарат лактобактерий для профилактики и лечения дисбактериозов кишечника. // Материалы 11 Всесоюзного съезда эпидемиологов, микробиологов и паразитологов. -Тбилиси, 1970.-С. 40-41.

138. Тец В.В., Борисов Л.Б. Влияние антибиотиков на популяционную изменчивость бактерий. // Антибиотики и химиотерапия. 1988. № 4. - С. 299 - 303.

139. Ткач Е.П., Воеводика О.С. Активность супероксиддисмутазы у больных хронической ишемической болезнью кишечника. // Российскийжурнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1998. - № 8 -С. 114.

140. Торчинский Ю.М. Сульфгидрильные и дисульфидные группы белков. М.: Наука. -1971. -С. 228.

141. Торчинский Ю.М. Сера в белках. М.: Наука. 1977. - С. 303.

142. Уайт, Хендлер Ф., Смит Э. Основы биохимии. М.: Мир, 1978. - С. 65 -78.

143. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях. М., 1975.

144. Учайкин В.Ф. Дисбактериоз кишечника. // Руководство по инфекционным болезням у детей. М.: ГЭОТАР Медицина, 1998. - С. 462 -473.

145. Федорук О.Б. Энзимодиагностика осложненных форм язвенной болезни желудка и 12-п. кишки.: Автореф. дисс. канд. мед. наук // Горький, 1983.- 19 с.

146. Хавкин А.И. Микробиоценоз кишечника и иммунитет. // РМЖ 2003. -Том 11. -№ 3. - С. 122- 125.

147. Хавкин А.И. Нарушение микроэкологии кишечника. Принципы коррекции (методические рекомендации). // Москва 2004.

148. Хавкин А.И., Бельмер С.В. Микроэкология кишечника: методы неспецифической коррекции. // РМЖ 2003. - Том 11. - № 13. - С. 7.

149. Хуцишвили М.Б., Рапопорт С.И. Свободно радикальные процессы и их роль в патогенезе некоторых заболеваний органов пищеварения (часть 1). // Клиническая медицина. 2002. - № 10. - С. 10 - 16.

150. Циммерман Я.С. Дисбактериоз (дисбиоз) кишечника и / или «синдром избыточного бактериального роста» // Клиническая медицина. 2005. - № 4. - С. 14 - 22.

151. Циммерман Я.С., Циммерман И.Я. Антибиотикоассоциированная диарея и псевдомембранозный колит суть клинически манифестныеформы кишечного дисбиоза // Клиническая медицина. 2005. - № 12. - С. 12-19.

152. Чахава О.В., Горская Е.М., Рубан С.З. Микробиологические и иммунологические основы гнотобиологии. М.: Медицина, 1982. - 158 с.

153. Чебуркин А.В. По поводу диагноза «Дисбактериоз кишечника». // Педиатрия. 1999. - № 1. - С. 102 - 103.

154. Чевари С., Андяя Т., Штренгер Я. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте. / Лаб. дело, 1991.-№ 10.- С. 9-13.

155. Шамаль З.Ф., А.А. Жукова, Г.М. Суворова и др. Дисбактериоз и его лечение молоком «Наринэ» // Антропозитивные реакции и их профилактика: Сб. научн. тр. Хабаровск, 1988. - С. 47 - 49.

156. Шендеров Б.А. Значение колонизационной резистентности в патогенезе инфекционных заболеваний. // Иммунология инфекционных процессов. М., 1994. - С. 112 -122.

157. Шендеров Б.А. Медицинская микробная экология и функциональное питание. Том 1: Микрофлора человека и животных и ее функции. - М.: Грантъ, 1998.-С. 288.

158. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора и ее роль в поддержании здоровья человека. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. 1999. - Т. 7. - № 1. - С. 61 - 65.

159. Шендеров Б.А. Нормальная микрофлора человека и некоторые вопросы микроэкологической токсикологии // Антибиотики и биотехнология. -1987. -№3.- С. 164-170.

160. Шендеров Б.А. Перспективы исследований в области микроэкологии человека и животных. // Медицинские аспекты микробной экологии. -1992.-Вып. 6.-С. 8-9.

161. Шендеров Б.А., Гончарова Г.И. Медицинские аспекты микробной экологии кишечника. // Медицинские аспекты микробной экологии. -1992.-Вып. 6.-С. 132- 136.

162. Щербаков П.Л. Кудрявцева Л.В. Зайцева С.В. и др. Микробиоценоз кишечника: его нарушения и коррекция с использованием бактисубтилла //Педиатрия. 1998. - № 5. - С. 99 - 103.

163. Эфендиев A.M., Помойнецкий В.Д. Биохимические методы исследования активности ферментов, осуществляющих защиту клетки при повреждающих воздействиях (методические рекомендации). // Баку, 1985. -29 с.

164. Юсупова Л.Б. о повышении точности определения глутатионпероксидазы эртироцитов. // Лаб. дело 1989. - № 14. - С. 19 -21.

165. Bennister T.V., Rotilio G.A. A decade of superoxide dismutase activity // The Biology and chemistry of active oxygen. New-York - 1984. - P. 146 -189.

166. Bennister T.V., Rotilio G.A. A decade of superoxide dismutase activity // The biology and chemisry of active oxygen. New-York - 1984. - P. 146 - 189.

167. Bhaskar L, Ramakriscna B.S. Colonic mucosal autioxidaut enzymes and lipid peroxide levels in normal subjects and patients with ulcerative colitis. J. Gastroenterol. Hepathol. 1995. - 10 (2), P. 140 - 143.

168. Biemond P., Swaak, H.S. van Eijk, J.F. Koster // Free Radical Biol. Med. -1988. 4. - P. 185-198. (цит. По Осипову А.Н. Успехи биол. химии. - М.: Наука, 1990).

169. Biemond P., Swaak. H.S., J.F. Koster // Free radical Biol. Med. 1984. - 4. -P. 185- 198.

170. Browin K., Fridovich I. Superoxide radical and superoxide dismutases: threat and difense. // Act. Physiol. Scaud. 1980. - Suppl. 492. - P. 9 -18.

171. Carrel R.W., Rachmilowitz E.A., Winterbourn C.C. Activated oxygen and haemolysis // Brit. J. Haemet. 1975. - V. 30. - P. 259 - 264.

172. Clark D.A, Fornabatio D.M. Contributio of oxygen-devided free radicals to experimental necrotizing enterocolitis. Am J. Pathol. 1988; 130 (3) P. 537 -527.

173. Collins M.D., Gibson G.R. Probiotics and synbyotics: approaches for modulating the microbial ecology of the gut // Am. J. Clin. Nutr. 1999.- V. 69, №5.-P. 152- 154.

174. Dat D., Walker W.A., Protective nutrients and bacterial colonization in the nature human gut // Adv. Pediatr. 1999. - № 46. - P. 353-382

175. Dauglas K.T. // Adv. Enzymol. 1987. - V. 59. - P. 103 - 167 (цит. По Владимирову Ю.А. Биофизика - М.: ВИНИТИ, 1991. - т. 29).

176. Ellman G.L. Tissue sulhydryl groups // Arch. Biochem. Biophys. 1959. -V. 82. - P. 70 - 77.

177. Famularo G., Pieluigi M., Coccia R., Mastroivoco P. Microecology, bacterial vaginosis and probiotics: perspectives for bacteriotherapy // Med. Hypotheses. 2001. - V. 56, № 4. - P. 421 - 430.

178. Fernandes C.F. A novel in vitro technique to simmulate growth of Lactobacillus acidophylus in small bowell // J. Diary Sci. 1987. - № 7. - S.l. -H. 81 -83.

179. Fridovich I. Biological effects of so radicals // Arch. Biochem., Biophysis. -1986.-V. 247,(1).-P. 1-11.

180. Fridovich I. Superoxide dismutases // Adv. Enzymol. 1986. - V. 58. - P. 61 -97.

181. Fridovich I. The biology of oxygen radicals // Scianca. 1978. - V. 201. - P. 875 - 880.

182. Fuller R., Probiotics in man and animals. // J. Appl. Bacteriol. 1999. - V. 66,№5.-P. 365 - 378.

183. Gibson G.R., Roberfroid U.B. Colonic microbiota nutrition and heals. -Dortrecht: Kluwer Academic, 1999. 304 p.

184. Gorbach S.L. Function of the normal microflora. // Scaud. J. Infect. Dis. -1986.-№49.-P. 17-23.

185. Gorbach S.L., Barcha M., Giuliano M. Colonisation resistance of the human intestinal microflora: testing the hypothesis in bormal volunteers. // Eur. J. Clin. Microbiol. 1988. - V. 7. - P. 98 - 102.

186. Haudberger H, Nilsson L.F. Increased antibiotics resistance of intestinal bacteria. // Lacartidhingen. 1996. - V. 93 - P. 148 -151.

187. Lloid D. Microbiological ecology. How to avoid oxygen (comment) // Science. 1999. - V. 286. - P. 249.

188. Lowry C., Rosebrouph N., Farr A., Randall R. Protein measurement with the folin phenol. Reagent. // J. Biol. Chem. 1953. - V. 193. - P. 265 - 275.

189. Maridonneeau L., Garay R.P. The effect of lipid peroxidation on transport function in human erythrocytes. // Biomed. Biochem. Acta. 1983. V. 42. - P. 58-61.

190. Mc Cord T.M. The superoxide free radical: its biochemistry and pathophysiology. // Surgery. 1983. - V. 84. - P. 412 - 414.

191. Miller M., Dumdey R., Rapoports Superoxide radicals in the metabolism of the red cells. // Biomed. Biochem. Acta. V. 42. - P. 297 - 301.

192. Mistra H.P, Fridovich I. Biol. Chem. 1972. - V. 247. - P. 188.

193. Mirrals-Barrachina O. et al. Low levels of glutations in endoscopic biopsies of patients with Crohns colitis: the role of malnutricion. Clin. Nutr. 1999. 18 (5)-P.313 -317.

194. Naya M. J., Pereboom D., Ortego J. et al. Superoxide amons produced by inflammatory cells play an important part in the pathogentsis of acid and pensin induced esophagytes in rabbits. Gut 1997 40 - P. 175 - 181.

195. Peach S.L., Tabagchali S. Some studies of bacterial flora assosiated with the mucosa of the gastrointestinal tract. //Nahrung. 1984. - V. 28. - P. 627 - 629.

196. Piorce S., Tappel A.L. Glutations peroxidase activities from rat liver. // Biomed. Biochem. Acta. V. 3. - P. 27 - 36.

197. Schau X., Aw T.X. Jones D.P. Glutations dependent protection against oxidative injury // Pharmacol, and Ther. - 1990. - 47. - P. 61 - 63.

198. Van der Waai D. Colonization resistance of the digestive tract: mechanism and clinical consequence // Nahrung. 1987. - № 5. - P. 507 - 516.

199. Wetscher G.J., Hinder P.R., Bagchi D. et al. Free radical scavenges prevents reflux esophagytes in rats. // Ibid. 1995. - P. 292 - 296.

200. Wharton B.A., Balmer S.E., Scott P.H. Faecal flora in newborn. Effects of lactobacterin and related nutrients. // Adv. Exp. Med. Diol. 1994. - V.357. - P. 91-98.