Показатели антиоксидантной системы эритроцитов при ожоговой травме тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Еремина, Татьяна Владимировна

• Еремина, Татьяна Владимировна
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Еремина, Татьяна Владимировна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ФЕРМЕНТЫ АНТИРАДИКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ ЭРИТРОЦИТОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ

1.1. Роль свободнорадикальных процессов в патогенезе ожоговой болезни

1.2. Компоненты антиоксидантной системы и их состояние при патологических процессах

1.3. Антиоксиданты как медикаментозные средства

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Клиническая характеристика больных

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методика определения числа эритроцитов

2.2.2. Методика определения активности глюкозо-6-фосфат-дегидрогеназы (Г-6-ФДГ)

2.2.3. Методика определения активности сукцинатдегидрогена-зы (СДГ)

2.2.4. Методика определения активности каталазы

2.2.5. Методика определения активности супероксиддисмутазы

(сод)

2.2.6.Методика определения количества тйоловых (§Н) групп49

2.2.7. Методика определения резистентности эритроцитов (ОРМ Эр)

2.3. Статистическая обработка полученных результатов

2.4. Основные биохимические показатели лиц контрольной группы

ГЛАВА 3. ИЗМЕНЕНИЯ СОСТОЯНИЯ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ЭРИТРОЦИТОВ В ОСТРЫЙ ПЕРИОД ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ

3.1. Активность Г-6-ФДГ в острый период ожоговой болезни

3.2. Активность СДГ в острый период ожоговой болезни

3.3. Активность каталазы в острый период ожоговой болезни

3.4. Уровень ЭН-групп в острый период ожоговой болезни

3.5. Активность СОД в острый период ожоговой болезни у боль ных с индексом Франка 61-120

ГЛАВА 4. ИЗМЕНЕНИЯ СОСТОЯНИЯ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ЭРИТРОЦИТОВ У ОЖОГОВЫХ БОЛЬНЫХ В ПЕРИОД СЕПТИКОТОКСЕМИИ

4.1. Активность Г-6-ФДГ у ожоговых больных в период септи-котоксемии

4.2. Активность СДГ у ожоговых больных в период септи-

котоксемии

4.3. Активность каталазы у ожоговых больных в период септико-токсемии

4.4. Уровень БН-групп у ожоговых больных в период септикоток-семии

4.5. Активность СОД у ожоговых больных индексом Франка 61120 в период септикотоксемии

ГЛАВА 5. СОСТОЯНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ЭРИТРОЦИТОВ У ОЖОГОВЫХ БОЛЬНЫХ В ПЕРИОД РЕКОН-ВАЛЕСЦЕНЦИИ

5.1. Активность Г-6-ФДГ у ожоговых больных в период реконва-лесценции

5.2. Активность СДГ у ожоговых больных в период реконвалес-ценции

5.3. Активность каталазы у ожоговых больных в период рекон-валесценции

5.4. Уровень БН-групп у ожоговых больных в период реконвалес-ценции

5.5. Активность СОД у ожоговых больных с индексом Франка 61120 в период реконвалесценции

ГЛАВА 6. ИЗМЕНЕНИЯ СОСТОЯНИЯ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ ЭРИТРОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ С ЛЕТАЛЬНЫМ ИСХОДОМ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ

6.1. Активность Г-6-ФДГ у больных с летальным исходом ожоговой болезни

6.2. Активность СДГ у больных с летальным исходом ожоговой болезни

6.3. Активность каталазы у больных с летальным исходом ожоговой болезни

6.4. Уровень БН-групп у ожоговых больных с летальным исходом ожоговой болезни

ГЛАВА 7. ОСМОТИЧЕСКАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ МЕМБРАН ЭРИТРОЦИТОВ (ОРМ Эр) ПРИ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ

7.1. ОРМ Эр у больных в острый период ожоговой болезни

7.2. ОРМ Эр у ожоговых больных в период септикотоксемии

7.3. ОРМ Эр у ожоговых больных в период реконвалесценции

7.4. ОРМ Эр у больных с летальным исходом ожоговой болезни

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений:

Эр - эритроциты;

ПОЛ - перекисное окисление липидов;

АОС - антиоксидантная система;

Г-6-ФДГ - глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа;

СДГ - сукцинатдегидрогеназа;

КАэр - каталаза интактных эритроцитов;

КАгем - каталаза гемолизата, общая каталаза эритроцитов;

СОД - супероксиддисмутаза;

ОРМ Эр - осмотическая резистентность мембран эритроцитов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Показатели антиоксидантной системы эритроцитов при ожоговой травме»

ВВЕДЕНИЕ

В настоящее время в медицинской практике часто встречаются больные, страдающие ожоговой болезнью, которая возникает вследствие бытовых, производственных травм и различных катастроф. Термические ожоги по частоте возникновения, тяжести течения, осложнений и летальных исходов занимают одно из ведущих мест в клинической практике (8, 31, 164).

Ожоговую травму нельзя отнести к числу тех форм патологии, которая обойдена вниманием экспериментаторов и клиницистов. В последнее время специалисты самого широкого профиля (биохимики, биофизики, патофизиологи, морфологи, фармакологи) внесли свой существенный вклад в изучение роли свободных радикалов в патогенезе ожоговой болезни как на экспериментальных моделях (15, 193, 206, 207), так и в клинике (7, 39, 105, 132). Известно, что с первых часов после термической травмы идет повышенная генерация активных форм кислорода, запускающих множество цепных реакций перекисного окисления липидов (ПОЛ) со всеми вытекающими негативными последствиями для организма. В настоящее время существует большое количество работ (4, 20, 69, 157, 205, 247), посвященных изучению вопроса о состоянии энергетического обмена и ПОЛ при ожоговой болезни. В результате активации свободно-радикальных процессов при ожоговой болезни происходят сдвиги и в состоянии компонентов антиоксидантной системы (АОС) эритроцитов, что может усугубить явление гипоксии, развивающейся на фоне нарушений функций внешнего дыхания, сердечно-сосудистой системы, расстройств микроциркуляции (92, 146, 148). При этом характер изменений физиологических и биохимических функций зависит от периода заболевания - ожогового шока, ожоговой токсемии, септикотоксемии, периода активных репаративных процессов (100).

Однако состояние АОС эритроцитов до сих пор остается мало изученным. Хотя целесообразность и необходимость данных исследований не вызывает сомнения, так как реактивным оксигенным радикалам в эритроцитах и ферментам утилизирующим их приписывается позитивная функция. А именно: они участвуют в инициации процессов оксигенации гемоглобина, а также в антибактериальной защите организма (176).

Значительное внимание продолжает уделяться проблеме фармакологической регуляции процессов свободнорадикального окисления с целью предотвращения деструкции биополимеров, и антиок-сидантная терапия начинает занимать прочное место в лечении обожженных. В эксперименте, наряду с известными препаратами-антиоксидантами, например, альфа-токоферолом, ретинолом, витамином С (18, 204, 208), испытаниям подвергнуты многие другие химические агенты, претендующие на роль фармакологических анти-оксидантов для лечебных целей. Экспериментально доказан антиок-сидантный эффект введения альфа-токоферола в комплексе с препаратом флакумином, карбатона - соединения, относящегося к пиридиновому ряду (7), предпринимаются попытки применения при термической травме антиоксидантов иного класса - экранированных фенолов (дибунола, фенозана) (4, 24). Однако в клинической практике наиболее частое применение получили аскорбиновая кислота, ретинол, а-токоферол. Но их назначение в большинстве случаев не контролируется биохимическими исследованиями.

Целью настоящей работы явилось установление роли нарушений ряда показателей антиоксидантной системы эритроцитов при ожоговой травме различной тяжести, что позволит определить пути их целенаправленной фармакологической коррекции.

Основные задачи исследования:

1. Изучить осмотическую резистентность мембран эритроцитов (ОРМ Эр) у разной категории больных, при различных степенях тяжести и периодах ожоговой болезни.

2. Исследовать активность ферментативных и уровень неферментативных компонентов АОС эритроцитов при различных степенях и периодах ожоговой болезни, у разной категории больных: глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ), сукцинатдегидрогеназы (СДГ), каталазы интактных эритроцитов (КАэр) и их гемолизата (КАгем, общей каталазы эритроцитов), супероксиддисмутазы (СОД), содержание SH-rpynn.

3. Проанализировать соотношение показателей АОС и резистентности эритроцитов в зависимости от степени тяжести, периода, исхода заболевания.

4. Изучить возможности использования показателей АОС, ОРМ Эр для оценки степени тяжести, периода и исхода заболевания.

5. Оценить изменения в системе антирадикальной защиты и ОРМ Эр в процессе назначаемой традиционной патогенетической терапии.

6. Определить информативность исследованных показателей состояния АОС эритроцитов и ОРМ Эр для оценки эффективности проводимой терапии.

Научная новизна:

В настоящей работе впервые проведен комплексный анализ показателей АОС эритроцитов, ОРМ Эр у ожоговых больных в зависимости от тяжести и периода заболевания, у больных с сопутст-

вующими ожогами дыхательных путей и у ожоговых больных с летальным исходом заболевания.

Представлены критерии эффективности традиционной патогенетической терапии с учетом биохимических показателей эритроцитов.

Научно-практическая значимость работы:

На основе биохимических исследований разработаны диагностические критерии для объективной оценки тяжести состояния ожогового больного, исхода заболевания и эффективности проводимой терапии.

Полученные результаты представляют научно-теоретический интерес в выяснении и уточнении патобиохимической и патофизиологической картины ожоговой болезни и могут быть рекомендованы для использования в ожоговых отделениях клиник с целью оценки эффективности проводимой терапии и прогнозирования исхода заболевания.

Способ диагностики степени «окислительного стресса» используется в Краевой клинической больнице и Краснодарской отделенческой клинической больнице С,- К. ж. д.

Основные положения диссертации включены в лекционные разделы спецкурсов на кафедре биохимии Кубанской государственной медицинской академии. Основные положения выносимые на защиту:

1. В период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии значительно снижается ОРМ Эр. Изменения устойчивости мембран эритроцитов пропорциональны тяжести ожоговой травмы.

2. Острый период ожоговой болезни при обширных и критических термических поражениях и сопутствующих ожогах дыхательных путей характеризуется существенными нарушениями работы

АОС эритроцитов, что выражается повышением активности Г-6-ФДГ и КАэр, снижением количества БН-групп и активности СДГ.

3. В период септикотоксемии выявлена декомпенсация АОС эритроцитов, проявляющаяся в снижении активности КАгем, Г-6-ФДГ, СДГ, уровня тиоловых групп.

4. Выраженность метаболических сдвигов в АОС эритроцитов и изменений ОРМ Эр зависит от тяжести и периода заболевания.

5. Изменения активности ферментативных и концентрации неферментативных (БН-групп) компонентов АОС эритроцитов свидетельствуют о напряженности этой системы и о ее роли в поддержании гомеостаза в острый период ожоговой болезни и период септикотоксемии.

6. В период реконвалесценции выявлена позитивная динамика исследуемых компонентов АОС эритроцитов, однако при обширных и глубоких термических поражениях и сопутствующих ожогах дыхательных путей полной стабилизации АОС не происходит; а у больных с летальным исходом ожоговой болезни перед смертью наступают значительные сдвиги в состоянии АОС эритроцитов.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ФЕРМЕНТЫ АНТИРАДИКАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ ЭРИТРОЦИТОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ОЖОГОВОЙ БОЛЕЗНИ 1.1. Роль свободнорадикальных процессов в патогенезе

ожоговой болезни

Ожоговая травма не является лишь локальным повреждением кожных покровов и подлежащих тканей, а сопровождается совокупностью местных и общих изменений, развивающихся в организме под действием термического фактора и определяющих в конечном итоге ту форму патологии, которая получила название ожоговой болезни (100, 158). Важное место в развитии многочисленных морфо-функциональных изменений при ожоговой болезни отводится сво-боднорадикальным процессам (203).

Но прежде чем перейти к рассмотрению роли свободно-радикальных процессов в патогенезе ожоговой болезни, необходимо несколько остановиться на понятии «перекисное окисление липи-дов» (ПОЛ). Под термином «ПОЛ» часто обозначают широкий круг процессов окисления молекулярным кислородом жирно-кислотных компонентов липидов с образованием первичных продуктов - пе-роксидов. К таким процессам может быть отнесена окислительная деструкция липидов пищевых продуктов, окисление липолеатов в присутствии липоксидазы, НАДФН и аскорбатзависимое окисление липидов в биологических мембранах. Однако после появления в 1963 году гипотезы Хохштейна и Эрхстерма о двух путях микросо-мального окисления липидов, термином ПОЛ стали обозначать неферментативное окисление липидов биомембран. В последующем появилось альтернативное название - свободнорадикальное окисление (80, 81). В настоящее время оба термина применяются как рав-

ноценные для обозначения чаще всего процессов, фиксируемых до появления продуктов, имеющих максимум поглощения при длине волны 232 нм или реагирующих с 2 - тиобарбитуровой кислотой (в частности малоновый диальдегид - МДА), и сопряженных диеновых пероксидов жирных кислот (187). Смешение терминов оправдано тем, что появляется все больше доказательств (13, 23) достаточной условности разделения ферментативного и неферментативного окисления липидов биомембран. Показано, что оба процесса имеют одинаковые субстраты, реагенты и продукты. В качестве субстрата выступают остатки полиненасыщенных жирных кислот фосфолипидов, преимущественно кислот состава С^з, Сго:з, Сю-л, С22.6, в качестве исходного реагента - молекулярный кислород. ПОЛ происходит как в гомогенной, так и гетерогенной системе по свободнорадикальному цепному механизму В мембранах эритроцитов содержание полиено-вых жирных кислот достигает 12-13% от общего их количества, что делает мембрану исключительно чувствительной к действию реактивных оксигенных радикалов (174, 188).

Существуют различные взгляды на физиологическую роль ПОЛ и пероксидов. Но в последнее время полагают, что ПОЛ следует считать физиологическим процессом. А пероксиды - продуктами обмена нормальных метаболизирующих клеток. Низкий уровень пероксидов, свойственный нормальным тканям, объясняется сбалансированностью в организме процессов их образования и распада. Процесс ПОЛ при этом является одним из инструментов быстрой модификации свойств биологических мембран и мембранозависимых процессов (9, 23). Активные формы кислорода участвуют в метаболических процессах организма, связанных с обменом липидов, белков, нуклеиновых кислот, в синтезе простагландинов, лейкотриенов, тромбоксанов (14, 60), кроме того активные формы кислорода ока-

зывают бактерицидное действие, вызывают окислительное разрушение ксенобиотиков, участвуют в процессах пино- и фагоцитоза (96, 131, 140, 169). При патологии баланс нарушается и, как правило, увеличивается концентрация пероксидов, которые меняют физические и биологические свойства мембран. Высказано мнение, что токсический эффект продуктов ПОЛ выражается в ряде биохимических сдвигов, прежде всего в инактивации сульфгидрильных групп белков, активации липаз, изменении дисперсности липидов в цитоплазме клетки, в разобщении и подавлении окислительного фосфо-рилирования. Следствием этих процессов является нарушение микроструктуры и функции плазматических и субклеточных мембран, изменение метаболизма и репродукции клеток (187). В частности, что касается эритроцитов, активация ПОЛ приводит к нарушениям матричной и барьерной функции мембран эритроцитов, изменению активности ферментных систем, ослаблению белок-липидных взаимодействий и как следствие этого к структурной дезорганизации клеток в целом (33, 34, 42).

Поскольку интенсивность ПОЛ повышается при различных патологических состояниях, целесообразно рассмотреть электронную структуру кислорода в разных состояниях. При нормальном парциальном давлении и в невозбужденном состоянии молекулярный кислород не токсичен и обладает малой реакционной способностью, то есть содержит два неспаренных электрона (е~) с параллельно ориентированными спинами (14, 95, 174). Таким образом, молекулярный кислород в триплетном состоянии имеет по одному электрону на каждой из двух внешних орбиталей. Каждая из этих орби-талей может принять еще один электрон. Взаимодействие кислорода с донором электронов затруднено, так как присоединение пары электронов к молекуле кислорода в триплетном состоянии должно

привести к обращению спина присоединенного электрона. Обращение спина относительно медленный процесс и поэтому окислительная активность О2 в триплетном состоянии невысока (115, 213).

Свободный радикал - атом или молекула - обладающая свободным электроном на внешней орбитали. Это химически очень активный электрон, стремящийся изъять из своего окружения еще электрон, способный реконструировать более стабильную пару (35). Молекула, за счет которой осуществляется эта реакция, в свою очередь становится свободным радикалом, и это является отправным пунктом цепной реакции. В отсутствии биологических соединения, способного быстро элиминировать свободные радикалы, повреждение клетки будет необратимо (181).

Н20

Митохондриальное восстановление О2 (~ 95%)

ц 0 у. Внемитохондриальное 2 2 ' восстановление О2

\ /

\ /

ОН- + Н20

(~ 5%)

О,

Рис. 1. Схема планетарного строения молекулы 02

и пути его внутриклеточного восстановления. 1 и 2 - ядра О2; а и а1, |3 и (З1 - разнонаправленные спины электронов; с и с1 - орбитали электронов вокруг ядер.

Полагают, что в организме здорового человека около 5% 02 ускользает от основного четырехвалентного восстановления из-за спинового ограничения его электронов. Как видно на рис. 1, предложенным Сторожуком П. Г. и Сторожуком А. П. (174), кислород

самопроизвольно или ферментативно восстанавливается одно-, двух- или трехэлектронным путем с переходом в реактивные окси-генные радикалы - О2", ОН и Н2О2. Перенос одного электрона на молекулу кислорода сопровождается образованием супероксидного анион-радикала (О2"). По своим свойствам супероксидный анаон-радикал является, скорее, восстановителем, нежели окислителем. Перенос на кислород двух электронов сопровождается образованием диамагнитного пероксианиона кислорода Ог", который легко прото-нируется, превращаясь Н2О2, окислитель средней силы. И наконец, перенос на молекулу кислорода трех электронов сопровождается расщеплением связи 0-0 и образованием ион-радикала О", мгновенно протонирующегося с образованием наиболее сильного окислителя - гидроксильного радикала ОН . Второй атом кислорода превращается в гидроксил воды ОН". Четырехэлектронное восстановление кислорода приводит к образованию двух гидроксилов воды (14, 174).

Супероксидный радикал и перекись водорода, распадаются, как правило, с образованием гораздо более реакционноспособных гидроксильных радикалов. Супероксидный радикал в реакции дис-мутации дает перекись водорода и синглетный кислород, если реакция протекает самопроизвольно, и триплетный кислород, если она катализируется супероксиддисмутазой. Эту реакцию следует рассматривать в качестве второго возможного непрямого пути образования Н2О2 в клетке, наряду с прямым двухэлектронным восстановлением молекулярного кислорода. Супероксид-анионы в реакциях с перекисью водорода (реакция Габера-Вайса), а также в реакции ионов переходных металлов (например, железа) с пероксидом водорода (реакция Фентона) конвертируются в наиболее токсичные из кислородных свободных радикалов - гидроксильные радикалы

(ОН), которые и ответственны за биологические эффекты Ог". Таким образом, реакции Габера-Вайса и Фентона являются поставщиками наиболее активных окислительных частиц - гидроксильных радикалов - и представляют собой непрямой путь их образования в клетке. ОН - радикалы отщепляют атом водорода у полиненасыщенных жирных кислот биомембран и таким образом инициируют ПОЛ (11, 14, 78, 169, 230).

В настоящее время в литературе (11, 166, 174, 183, 197) особое внимание уделяется взаимодействию гемоглобина (Нв) с Н2О2, поскольку конкретная схема реакции, протекающая при таком взаимодействии, еще далека от полного понимания. Существует как бы две точки зрения. Так, с одной стороны, обнаружено, что в результате реакции окси-Нв с избытком Н2Ог происходит быстрое образование мет-Нв. Деградация мет-Нв в присутствии Н2О2 сопровождается освобождением свободного железа, взаимодействие которого с Н2О2 приводит к генерации ОН. С другой стороны, взаимодействие окси-Нв и мет-Нв с Н2О2 при определенных условиях протекает через стадию образования феррил-Нв и/или феррил-радикалов Нв. Эти радикалы также характеризуются высокой окисляющей активностью и индуцируют реакцию свободно-радикального окисления липидов. Последнее особенно важно в связи с тем, что Нв способен генерировать феррил-радикалы в присутствии низких концентраций Н2О2. Если учесть, что кровь человека содержит высокие уровни Нв и низкие уровни Н2О2, то их взаимодействие может представлять один из путей образования кислородных радикалов in vivo. В патогенезе гнойно-воспалительных процессов имеет место изменение пула железа. Нарушение депонирования металла и увеличение содержания растворенного в биожидкостях двухвалентного железа могут явиться причиной инициации ПОЛ (34).

Кроме супероксидного анион-радикала (02"), гидроксильного радикала (ОН), перекиси водорода (Н2О2) в инициации ПОЛ может участвовать синглетный кислород (!02), возникающий, например, в самопроизвольной некатализируемой реакции дисмутации супероксидных радикалов, биосинтезе простагландинов, ПОЛ в микросомах и др. Ему отводят одну из важнейших ролей. Реагируя с биополимерами и образуя перекисные соединения, lOj вызывает появление свободных радикалов (14, 165). Таким образом, активные формы кислорода проявляют свою токсичность потому, что инициируют цепные реакции ПОЛ. Перекисное окисление липидов вызывает образование различных высокореакционных соединений, таких, как свободные радикалы, гидропероксиды, альдегиды, эпоксиды, которые так же способны повреждать и модулировать функции макромолекул и клеточных структур (34).

О значительной роли свободнорадикального окисления в патогенезе ожоговой болезни свидетельствуют работы (7, 71, 150, 178, 221, 222 и др.). Уже сама по себе ткань, подвергшаяся термическому действию, является мощным источником свободных радикалов. С первых часов после термической травмы в организме идет активная мобилизация клеток, обеспечивающих эффективность воспалительной реакции, в первую очередь нейтрофилов, а также макрофагов. «Метаболический взрыв» этих клеток сопровождается генерацией активных форм кислорода, которые также вовлекаются в механизм свободно-радикальной деструкции биополимеров. Эритроциты становятся одной из первых клеточных структур, включающихся в ответную реакцию организма на повреждение (73, 110). Так, активные формы кислорода, продуцируемые нейтрофилами, играют большую роль в активации комплемента и повреждении клеточных мембран эритроцитов (внутрисосудистый гемолиз) при термической травме

(7, 209, 224). На основании усиленной гибели эритроцитов, наблюдающейся в первые дни после ожогов, ожоговую анемию, как правило, относят к гемолитическим. При тяжелом ожоговом шоке в первые сутки разрушается до 20-30% циркулирующих эритроцитов. Кроме того, срок жизни эритроцитов у обожженных снижается и составляет до 30% от нормальной величины (119). Ранее возникновение и непрерывное нарастание анемии - характерное проявление ожоговой болезни (21, 157, 195, 247). Прогрессируя на протяжении заболевания, она способствует истощению резервных возможностей организма пострадавших людей, влияет на прогноз и исход ожоговой болезни. Чем тяжелее ожоговая травма и выражение токсемия, тем значительнее гемолиз и анемия (153).

Свободные радикалы кислорода вызывают прямое повреждение ДНК, липидов, белков, способствуют образованию пероксидных радикалов и пероксидов. Повышение ПОЛ при ожоговой болезни изменяет фосфолипидный состав и уменьшает содержание сульф-гидрильных групп в мембранах, модифицируя липид-белковые взаимодействия и уменьшая текучесть мембран (17, 134). Высокий уровень ПОЛ приводит к нарушению активности мембраносвязанн-ных ферментов (68, 70, 145, 238). Предполагается (122), что важное место в дестабилизации мембран эритроцитов играют и продукты, возникающие в результате активации эндогенных фосфолипаз А2 (лизофосфолипиды). Все это приводит к изменению резистентности мембран эритроцитов, которая сопряжена со столь важными для функции эритроцитов свойствами, как их целостность и форма. В крови обожженных в период шока снижается число эритроцитов нормальной формы (дискоцитов) и увеличивается число переходных и дегенеративных форм (69, 70, 132, 225), склонных к гемолизу, агрегации и в значительной степени теряющих способность к транс-

порту О2. Позднее происходит компенсаторная реакция костного мозга, продуцирующего аномальные незрелые эритроциты типа микроцитов (69). Осмотическая резистентность мембран эритроцитов при ожоговой болезни, по мнению тех же авторов (69), практически не исследовалась. Поэтому изучение данного показателя состояния эритроцитов видится нам необходимым.

После термической травмы содержания продуктов ПОЛ повышается более чем в 1,5 раза по сравнению с контрольными величинами (18). Усиление свободно-радикального окисления сопровождается увеличением потребления фагоцитами кислорода и переводом его в активные формы супероксиданиона (О2") или синглетного кислорода, которые могут инициировать нарушения микроциркуляции, сочетающиеся с переходом полинуклеарных клеток в маргинальный пул и склеиванием тромбоцитов, нарушением проницаемости капилляров и образованием отека (134). Усиленное образование 0{ при термической травме может активировать неферментативное ПОЛ и стимулировать метаболические превращения арахидоновой кислоты до простациклина, простагландинов, тромбоксанов и лей-котриенов, влияющих на просвет сосудов, адгезию и хемотаксис полиморфно-ядерных лейкоцитов, проницаемость сосудов (146). Степень активации аскорбатзависимого ПОЛ, по мнению ряда авторов (145, 184), по мере развития патологии, понижается, т.е. способность липидов к окислению при индукции процесса in vitro понижается, хотя количество продуктов ПОЛ in vivo увеличивается.

Ожоговая болезнь характеризуется нарушением гомеостатиче-ских механизмов транспорта и утилизации кислорода вследствие возникновения циркуляторной, гемической, гипоксической и тканевой форм гипоксии (29). Возникающая после термической травмы централизация кровообращения, которая носит приспособительный

характер и обеспечивает в посттравматический период кровоснабжение сердца, легких, мозга, приводит к существенному нарушению регионального и периферического кровообращения. Это может проявляться, в частности, в ослаблении артериального притока к печени, уменьшении скорости портального кровотока, что в свою очередь приводит к уменьшению степени насыщения гемоглобина кислородом и падению напряжения кислорода в печени до 20-40 мм рт. ст. (146, 162). Нарушение микроциркуляции, падение артериального давления и уменьшение объема циркулирующей крови являются также важными факторами, способствующими развитию циркуля-торной гипоксии. Возникновение гипоксического состояния и последующей анемии способствуют повышенный гемолиз, гемоглоби-немия и уменьшение скорости синтеза гема (21). Но, несмотря на снижение напряжения кислорода при развивающейся гипоксии, ПОЛ не ослабевает, а даже усиливается. Это связано с тем, что в этих условиях при функционировании митохондриальных цепей переноса электронов накапливаются продукты ПОЛ, обусловленные в основном избытком доноров электронов - восстановленных переносчиков (40, 48, 112).

Повышение уровня ПОЛ имеет место как в период ожогового шока, так и в период ожоговой токсемии. Уровень ПОЛ в период ожогового шока определяется степенью термического поражения и возникновением болевого стресса. Усиление ПОЛ в период ожоговой токсемии коррелирует с тяжестью состояния больных и клиническими признаками интоксикации (15, 121, 146,178).

Известны данные о повышении уровня ПОЛ при многих других заболеваниях. Острые воспалительные процессы, которые характерны и для ожоговой болезни, относятся к цепным и каскадным реакциям организма, в которых каждая следующая стадия протекает

быстрее предыдущей (190). По современным представлениям, увеличение интенсивности цепных реакций свободнорадикального окисления липидов биомембран рассматривается как первичный молекулярный механизм воспаления, который приводит к освобождению протеолитических ферментов и медиаторов воспаления - серо-тонина, гистамина, брадикинина, простагландина. Таким образом, медиаторы воспаления обладают прооксидантным действием (35, 124, 187). Имеются обширные литературные данные, свидетельствующие о повышении ПОЛ при различных воспалительных процессах. Активацию свободно-радикального окисления наблюдали при менингококковой инфекции (144), остром панкреатите (75), гепатите (43, 136), бронхитах (72, 91), воспалении легких (198), гриппозной инфекции (44), ревматоидном артрите (219).

Обнаружено также, что депрессивные состояния (93), ишеми-ческие и гипоксические нарушения, болезни Паркинсона и Альц-геймера (139, 241) сопровождаются повышенным ПОЛ. В патогенезе ишемии и инфаркта миокарда одним из ключевых звеньев является интенсивное образование свободных радикалов (53, 79, 111). При атеросклерозе активные формы кислорода вызывают окислительную модификацию липопротеинов низкой плотности (6). Показана активация ПОЛ при гастродуоденальных кровотечениях язвенной этиологии (64), при хронической почечной недостаточности (49). Выяснено также, что стимулирование ПОЛ цитоплазматических мембран происходит и при отравлениях (1, 35, 123).

Таким образом, согласно литературным данным, в нарушении микроструктуры и функции плазматических и субклеточных мембран при ожоговой болезни и других патологиях одну из главных ролей играют свободнорадикальные процессы.

1.2. Компоненты антиоксндантной системы и их состояние при патологических процессах

Избыток свободных радикалов при патологических процессах в организме направлен на три главные "клеточные цели": во-первых, на мембраны, так как полиненасыщенные жирные кислоты, содержащиеся в фосфолипидах, особенно чувствительны к свободным радикалам на уровне двойных связей. Возникает аутокаталити-ческая реакция, которая распространяется и воздействует на архитектонику мембран вплоть до полного лизиса; во-вторых, на нуклеиновые кислоты - свободные радикалы вызывают "переломы" хромосом с последующим нарушением мультипликации, трансмиссии и репликации генетической информации; в-третьих, на белки -главным образом на белки с сульфгидрильными группами - свободные радикалы способствуют образованию сшивок в белках, деградации белков и аминокислот и т.д. (214, 217, 218, 235, 244).

Ключевую роль в регуляции образования свободных радикалов играет сложно организованная, многоуровневая система. Существует концепция, согласно которой защита от действия свободных радикалов предполагает существование физиологических и биохимических механизмов, включающих значительное снижение напряжения кислорода в тканях по сравнению с атмосферным, четырех-электронное восстановление основной массы кислорода без образования свободных радикалов, энзимное удаление образовавшихся супероксидного анион-радикала, перекиси водорода и других ин-термедиатов кислорода (250).

Молекулярные механизмы поддержания гомеостаза представлены биохимическими системами клеток, среди которых важное значение имеют системы ферментативной и неферментативной ан-

тирадикалыюй и антиперекиской защиты, нейтрализующие токсическое действие активных форм кислорода и вторичных перекисных соединений (42). К защитным системам организма от свободноради-кального повреждения можно отнести три основные: 1. Ферменты-антиоксиданты - супероксиддисмутаза, каталаза, глугатионперокси-даза и глугатионредуктаза, церулоплазмин образуют первую линию антиоксидантной защиты организма; 2. Вторую линию защиты образуют неэнзимные "скэвенжеры", способные отдавать свободным радикалам ион водорода, снижая тем самым их реакционную способность. К жирорастворимым скэвенжерам относят -токоферол, каро-тиноиды, убихиноны, стероиды; к водорастворимым - аскорбиновую кислоту, сульфгидрильные соединения и т.д.; 3. Комплексные ионы металлов, тормозящие окисление и восстановление свободных радикалов (202, 211). Основные компоненты АОС эритроцитов представлены на рис. 2, взятом из работы П. Г. Сторожука и А. П. Сто-рожука (174).

Супероксиддисмутаза ( КФ 1.15.1.1) (СОД) является ключевым ферментом антиоксидантной защиты в организме, открытый в 1969 году Мс Cord J.M. и Fridovich I. (236). СОД катализирует процесс дисмутации супероксидных анион-радикалов кислорода и регулирует ПОЛ на стадии инициации (94, 138, 220). СОД является единственным среди известных антиоксидантных ферментов, непосредственно обеспечивающим обрыв цепей кислородзависимых свободнорадикальных реакций, осуществляя рекомбинацию супероксидного анион радикала с образованием перекиси водорода и триплетного кислорода.

НАДФ -уС Г"б"Ф

^ Р-5-Ф 3 Ог+НАДФН -02" + НАДФ + Н1"

Рис. 2. Схема основных (ферментативных и самопроизвольных) путей генерации и устранения реактивных оксигенных радикалов в эритроцитах.

1-глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, 2-фосфоглюконатдегидрогеназа, 3-НАДФН-оксидаза, 4 - спонтанное окисление Нь в МеЙНЬ, 5 - глютатионредуктаза, 6 -глютатионпероксидаза, 7-супероксиддисмутаза, 8-каталаза, 9-спонтанная реакция Фентона с Бе2+, 10-спонтанная реакция Хеби-Вейса с Бе3+, 11-высвобождение Бе2+ из НЬ под действием ОН", 12-одно-электронное восстановление СЬ в присутствии свободного Бе2+, 13 - ФАДНг- оксидаза, 14 - ФАД-зависимая дегидрогеназа, 15 - метгемоглобинредуктаза.

СОД принадлежит важная роль в поддержании определенного уровня свободнорадикального окисления полиеновых ацилов фосфолипидов мембран - одного из важных условий клеточного гомеостаза (216, 223). Фермент относится к металлопротеинам, и в организме млекопитающих известно три его формы в зависимости от металла: одна содержит ионы марганца и располагается в мат-риксе митохондрий, другая - ионы меди и цинка - находится в цитоплазме клеток и в наружной мембране митохондрий, еще одна СОД, отличающаяся от первых двух, найдена в плазме крови (52,

59, 154). Регуляция активности СОД осуществляется всей многокомпонентной редокс-системой клетки. Интермедиаты окислительно-восстановительного метаболизма, являясь генераторами супероксида, могут выполнять триггерную роль: инициировать синтез фермента при увеличении концентрации доноров электронов или подавлять активность при смещении донорно-акцепторного равновесия в сторону накопления акцепторов (223).

Активность СОД связана с интенсивностью перекисного окисления липидов и зависит от накопления интермедиатов ПОЛ. С одной стороны накопление токсических перекисных продуктов вызывает подавление СОД, а с другой, по принципу обратной связи, снижение активности СОД, обусловленное действием различных факторов, может привести к увеличению содержания перекисей липидов (59, 84,102).

Нарушение регуляции СОД может вызывать накопление супероксидного анион - радикала, других интермедиатов кислорода и перекисей липидов, которое в свою очередь приводит к нарушению структурной и функциональной организации клеточных мембран, их проницаемости и ионному дисбалансу, повреждению ДНК, мутациям и нарушению биосинтеза белка, разобщению окислительного фосфорилирования и окислению БН-групп белков, образованию стабильных реактивных комплексов с витаминами, гормонами, лекарствами (58, 59, 137, 244).

Супероксиддисмутаза в присутствии перекиси водорода и кислорода способна генерировать супероксидные анион-радикалы, то есть катализировать реакцию, обратную дисмутированию (138). На основании этих данных можно предположить, что СОД выполняет в организме не только защитную, но и регуляторную функцию.

Перекись водорода, образующаяся в результате дисмутации супероксидного анион-радикала (в присутствии или в отсутствии СОД) - основной источник гидроксильных радикалов в живых системах (32, 34). Разложение перекиси водорода в присутствии ионов металлов переменной валентности, описываемое реакциями Фенто-на и Хабера-Вайса, служит основным путем образования гидроксильных радикалов. Взаимодействие гидроксильных радикалов с биомолекулами обычно приводит к образованию другого менее ре-акционноспособного радикала, который способен к диффузии и продолжению цепной реакции за счет взаимодействия с новыми молекулами, Примером такого цепного процесса служит перекисное окисление ненасыщенных жирных кислот, инициируемое гидро-ксильным радикалом (130,149).

Выявлено изменение активности СОД при ожоговой болезни. Так, у больных с термическими поражениями (п=8) в первую неделю после ожоговой травмы активности СОД крови была выше нормы в 2,4 раза (105). Экспериментальное изучение СОД в мозге и печени в первую неделю после ожоговой травмы (3, 121) показало, что в мозге активность СОД изменяется незначительно, тогда как в печени она подавляется в большей степени. Достоверное понижение активности фермента установлено в печени в 1 и 7 день.

Активность СОД определялась и при других заболеваниях. Так, активности СОД эритроцитов повышается при эритремии (хроническом лейкозе) (135), вирусном гепатите В средней тяжести (196), хронических заболеваниях печени (106), гриппозной инфекции (44), тяжелом течении инсульта (74). Отмечено увеличение активности СОД под влиянием средств анестезиологического обеспечения (173). Известно, что активность СОД зависит от уровня 02 и его реакционноспособных интермедиатов в тканях. Образующийся в

результате метаболизма кислорода Ог~ является активатором и инициирующим фактором для СОД. При гипоксии снижение поступления кислорода может явиться причиной низкой активности СОД. Так, активность СОД эритроцитов снижается при хронической гипоксии у новорожденных детей (61) и у больных сепсисом (159).

Подавление образования гидроксильных радикалов в результате трехэлектронного восстановления перекиси водорода в клетке осуществляют два класса ферментов: каталаза и пероксидаза. Они осуществляют двухэлектронное восстановление перекиси водорода до воды без выделения в окружающую среду промежуточных сво-боднорадикальных продуктов (32, 34, 35).

Каталаза (КА) (КФ 1.11.1.6), являясь синергистом СОД в клетке, препятствует накоплению перекиси водорода - ингибитора СОД (226). К А - железосодержащий геминовый фермент и состоит из четырех субъединиц, каждая из которых имеет в качестве простетиче-ской группы железопротопорфирин IX (12). Между активностью ка-талазы и супероксиддисмутазы обнаружена высокая степень корреляции (67, 201). Распространена КА повсеместно, однако в миокарде и мозговой ткани ее мало. Это, по-видимому, обусловлено особенностями структуры и обмена в этих органах, а также тем, что ката-лазную функцию в них выполняет пероксидаза (52). Наибольшие количества КА обнаружены в эритроцитах, печени и почках (87).

В эритроцитах КА выполняет важные функции. Прежде всего КА устраняет токсический пероксид, так как сам гемоглобин является источником оксирадикалов, образование которых возможно при автоокислении гемопротеина. Таким образом, КА защищает гемоглобин от превращения его в метгемоглобин (см. рис. 2). Вместе с другими антиоксидантами (СОД, глутатионпероксидаза) КА подавляет ПОЛ эритроцитарных мембран, склонных к деструкции биопо-

лимеров под действием активных форм кислорода из-за относительно высокого содержания полиненасыщенных жирных кислот, а также из-за присутствия большого количества вне- и внутриклеточного кислорода (11, 83). КА принимает участие в реакциях инициации оксигенации гемоглобина. Этот процесс происходит в легочных альвеолах. Кислород, высвободившийся из перекиси водорода, и получивший ускорение при помощи КА, присоединяется к гему первой субъединицы молекулы гемоглобина, он инициирует многочисленные конформационные изменения, которые последовательно происходят во второй, третьей и четвертой субъединицах гемоглобина. Только после присоединения первой молекулы 02 начинает срабатывать эффект кооперативного функционирования субъединиц гемоглобина, и одна за другой постепенно оксигенируются, но уже за счет кислорода альвеолярного воздуха. Предполагается, что КА придает и антибактериальные свойства эритроцитам (169,172).

Известно две формы фермента: КА мембранная и КА цито-плазматическая. Активность КА эритроцита во много раз превышает потребность в этом ферменте для расщепления Н2О2. Каталаза относится к ферментам, которые наиболее длительно сохраняют свою высокую активность. Почти не требуют энергии активации, скорость реакции этого фермента лимитирует лишь скорость диффузии субстрата к активному центру (87, 116).

Активность данного фермента изменяется при различных заболеваниях. Что же касается ожоговой болезни, то экспериментально было выявлено повышение активности сывороточной каталазы в первые дни после термической травмы (233). Отмечено возрастание каталазной активности под влиянием алкоголя (141), сигаретного дыма (200, 227), при отравлении ртутными парами (240), под влиянием средств анестезиологического обеспечения (107), кадмия (242).

Повышение активности КА под действием физических и химических факторов свидетельствует, по-видимому, о возрастании неспецифической резистентности организма. При железодефицитной анемии (160), тяжелой апластической анемии (65), гриппозной инфекции (44), ревматоидном артрите (228), ишемии головного мозга (19, 55), инфаркте миокарда (60, 231) имеет место снижение активности фермента.

Основное значение в функционировании компонентов АОС играют доноры водорода. Важное положение в этом отношении в эритроцитах занимает пентозофосфатный путь окисления глюкозы и гликолиз (169, 186).

Ключевым ферментом пентозофосфатного пути окисления глюкозы является глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (Г-6-ФДГ), КФ 1.1.1.49., - НАДФ-содержащий фермент, находящийся на внутренней поверхности липидного биослоя эритроцитов (47, 177). НАДФН в эритроцитах выступает регулятором отношения восстановленного и окисленного глутатиона (см. рис. 2), который способен поддерживать в восстановленном виде цистеиновые остатки гемоглобина и мембранных белков эритроцитов. Г-6-ФДГ эритроцитов входит в систему, поддерживающую на постоянном уровне концентрацию как свободных радикалов, так и самих гидроперекисей. Таким образом, наряду с СОД, КА, восстановленным глутатионом Г-6-ФДГ осуществляет защиту эритроцитов от агрессивного действия активных форм кислорода, является энзимом, обеспечивающим нормальную работу ферментативных компонентов АОС (25, 121,138).

Энергетические потребности красных кровяных клеток, необходимые для поддержания механической целостности и формы эритроцитов, покрываются благодаря ферментным системе гликолиза и апотомическому окислению углеводов (пентозофосфатного

шунта). Посредством Г-6-ФДГ апотомического пути окисления глюкозы в эритроцитах образуется восстановленная форма НАДФ, необходимая для поддержания в восстановленном состоянии три-пептида глутатиона, а также тесно связанных с ним в функциональном отношении сульфгидрильных (SH) групп белков эритроцитар-ных мембран, кроме того благодаря НАДФН, как источнику водорода в эритроцитах, ограничивается накопление метгемоглобина, неспособного связывать кислород (45, 113). Генетически обусловленный дефицит Г-6-ФДГ в эритроцитах приводит к недостаточному образованию НАДФН, а следовательно, и к дефициту водорода, необходимого для восстановления окисленного глутатиона, в результате такие эритроциты становятся чувствительными к действию различных окислителей, назначение которых в виде лекарственных средств может вести к гемолизу (25, 113).

В работах Рябинина В.Е. и Лифшица Р.И (146), Мхитарян В.Г. и соавт. (121) имеются сообщения о повышение активность Г-6-ФДГ в печени после ожоговой травмы. Но несмотря на интенсивное образование НАДФН при ожоговой болезни, сообщают авторы (146), наблюдается преобладание окисленных форм нуклеотида. Рябинин В.Е. и Лифшиц Р.И. объясняют это тем, что уже в ранний период после термической травмы активируется глюконеогенез и происходит компенсаторное усиление реакций биосинтеза жиров, использующих НАДФН.

При некоторых заболеваниях может снижаться уровень потребления клеткой глюкозо-6-фосфата, которая аплостерически активирует Г-6-ФДГ, обеспечивающую утилизацию фосфорилирован-ной глюкозы (47). Так, повышение активности фермента выявлено в период разгара септического процесса (159), при псориазе и нейродермите (156), при различных формах гипоксии (46, 54, 72). Горо-

шинская И. А. и соавт. (47) выявили, что острое стрессовое воздействие (гипероксия, гипоксия и действие низкой температуры) вызывает практически одинаковое увеличение активности Г-6-ФДГ в сыворотке крови, обусловленное, по мнению авторов, выходом фермента как из эритроцитов, так и из клеток других тканей из-за дестабилизации их плазматических мембран. Гипоферментемия характерна при высокой концентрации наркотических анальгетиков (155), при ишемическом инсульте в период прогрессирования (74), на ранних сроках беременности (175), интоксикации фосфорорганически-ми соединениями (180).

Сукцинатдегидрогеназа (СДГ) - КФ 1.3.99.1. - ФАД-зависимая дегидрогеназа, являющаяся компонентом цикла трикарбоновых кислот и локализованная в митохондриях. Эритроцит не имеет митохондрий и наличие полного цикла Кребса в нем является спорным. Но наличие ферментов и отдельных реакций этого цикла в эритроцитах неоспоримо. Так, активность СДГ в клетке достаточно высока, что возможно связано с многообразной функцией ФАД в процессах метаболизма (45, 232). ФАД ферментов способен восстанавливаться как в одно- так и в двухэлектронных реакциях, что позволяет ему вступать в окислительно-восстановительные реакции со свободными радикалами (30). В эритроцитах СДГ, видимо, принимает участие в образование Н2О2 (116, 174). Из представленных на рис. 2 реакций видно, что акцептором водорода в эритроцитах является 02. В одних случаях ФАДН2, взаимодействуя с Ог и поочередно отдавая ГТ, генерирует Ог", а в других, также взаимодействуя с 02 и отдавая сразу оба атома еГ , образует H202. Таким образом, СДГ может непосредственно включаться в процессы инициации оксигена-ции гемоглобина (174).

Рябинин В.Е, Лифшиц Р.И. и др. (147) выявили уменьшение активности СДГ в миокарде, печени и почках в период шока и токсемии при ожоговой болезни. Выявлена повышенная активность СДГ эритроцитов при беременности (175) и физиологических родах (171).

Помимо ферментативной системы клеточной защиты известна и неферментативная. Одним из ее представителей является а-токоферол (витамин Е). Он - необходимый компонент биологических мембран, во многом обеспечивающий их структурно-функциональную стабильность - локализован в гидрофобной зоне липидного биослоя (51, 56). Важна и бесспорна его роль как антиок-сиданта, взаимодействующего с липидными радикалами. Как известно, в процесс ПОЛ вовлекаются прежде всего полиеновые жирные кислоты, и соответственно образуются алкильные, алкилпере-кисные оксиалкильные радикалы полиненасыщенных жирных кислот, взаимодействующие с токоферолом. Наряду с этим, токоферол способен образовывать комплексы с полиненасыщенными жирно-кислотными остатками фосфолипидов, а также со свободными по-лиеновыми жирными кислотами. При исследовании природы комплексов а-токоферола со свободными жирными кислотами было установлено, что их образование происходит за счет двух типов взаимодействия: водородной связи ОН-группы хроманового ядра а-токоферола с карбоксильной группой жирной кислоты и ван-дер-Ваальсовы взаимодействия цис-ненасыщенных двойных связей ацильных цепей жирных кислот с метальными группами хроманового ядра а-токоферола (63,185,199).

Другой витамин - ретинол (витамин А) - является обязательным компонентом мембранных структур клеток животных, участву-

ет в синтезе мембранных гликопротеинов и гликолипидов, влияет на синтез фосфолипидов, регулирует активность ряда мембранносвя-занных ферментов. Действие ретинола двояко. В литературе имеются указания на его антиоксидантную активность, так и на проокси-дантные свойства. При недостатке витамина A in vivo процессы ПОЛ не усиливаются. Тем самым ретинол сущетвенно отличается от а-токоферола, дефицит которого вызывает выраженное усиление ПОЛ в организме. В связи с этим можно предполагать, что физиологическая роль антиоксидантных эффектов витамина А может быть выявлена лишь в особых условиях, характеризующихся дефицитом других антиоксидантов и действием факторов, стимулирующих ПОЛ в организме (86). Все же, по мнению некоторых авторов (22, 239), недостаток ретинола изменяет функции биомембран, что проявляется в увеличении их проницаемости, изменении сродства мембранных структур к лигандам и в уменьшении активности липидза-висимых ферментов метаболизма чужеродных соединений.

Одним из важнейших природных антиоксидантов является и водорастворимая аскорбиновая кислота (витамин С) (82, 191, 229), которая в зависимости от условий, также как и ретинол, может выступать как про- так и антиоксидантом (86, 181). При высокой кон-

л

центрации ионов (10" М) аскорбиновая кислота является антиокси-дантом ПОЛ, а при низких концентрациях ионов Fe (< 10" М) она является прооксидантом. При совместном действии аскорбиновая кислота и рутин (витамин Р) на Fe -индуцированное ПОЛ проявляют аддитивное антиоксидантное воздействие при высоких концентрациях ионов Fe . Однако в области низких концентраций ионов Fe2+, используемых для инициирования ПОЛ, рутин выступает антогонистом прооксидантного действия аскорбиновой кислоты (57).

Большое внимание в литературе уделяется тиоловым группам, так как 8Н-группы в составе белковых молекул играют важную роль в течение основных метаболических процессов (см. рис. 2). Так, с ними связаны каталитическая функция ферментов, процессы тканевого дыхания, мышечного сокращения, клеточной проницаемости, свертывания крови (177).

Тиоловые соединения способны быстро и обратимо окисляться, поэтому они оказываются наиболее чувствительными к воздействиям самой различной природы и интенсивности, которые вызывают разнонаправленные фазовые изменения содержания 8Н-групп (82, 97). Восстановленная форма глутатиона играет роль своеобразного сульфгидрильного буфера, который поддерживает в восстановленном состоянии БН-группы гемоглобина и других эритроцитар-ных белков, в том числе мембранных. Это обеспечивает как поддержание структуры эритроцита, так и нормальное функционирование гемоглобина (177). Уменьшение уровня 8Н-групп приводит, видимо, к изменениям в плазматической мембране эритроцитов, что сказывается на их резистентности. Такие эритроциты становятся чувствительными к гемолизу (160).

Функционирование ферментативных компонентов АОС зависит от состояния 8Н-групп. Так, тиоловые группы поставляют водород для реакций дисмутации, защищая клетки от токсического действия супероксидного радикала (181).

Очень часто тяжесть заболевания, а также периоды его обострения коррелируют со степенью снижения 8Н-групп (136). Все формы патологии печени (106), язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки (192), аллергические заболевания, грипп (97), рожистое заболевание (189) характеризуются падением уровня 8Н-групп и повышением уровня 8-8-групп. Экстремальные воздействия

на организм приводят к усилению свободно-радикального окисления, и адаптация в значительной степени зависит от возможностей антиоксидантной защиты. В эксперименте было выявлено (3, 121), что после ожоговой травмы происходит достоверное уменьшение содержания связанных с белками SH-групп в мозге и печени, что сказывается на состоянии АОС. Начальный этап адаптации человека к условиям Севера характеризуется также снижением уровня глута-тиона и сульфгидрильных групп белков (128).

Подобные изменения состояния тиолдисульфидной системы являются показателем развития адаптивной реакции и позволяют непосредственно оценить уровень неспецифической резистентности организма. Сдвиг окислительно-восстановительного равновесия в сторону накопления окисленных эквивалентов рассматривается как признак снижения неспецифической резистентности организма (161).

Кроме основных антиоксидантов, рассмотренных нами выше, функцию обрыва цепи реакций ПОЛ могут выполнять из жирорастворимых витаминов - филлохинон; из водорастворимых - никотиновая кислота, пиридоксин; белки сыворотки крови - альбумин, це-рулоплазмин, трансферрин, гаптоглобин; а также тироксин, фосфо-липиды, эстрогены, некоторые антибиотики, органический кислоты (лимонная кислота и др), глюкоза, мочевина и даже билирубин (2, 52, 71, 114, 179, 182, 215, 246, 249). Так, экспериментально выявлено повышение активности антиоксидантов крови, в частности церуло-плазмина, при термических ожогах. Через 24 часа после термической травмы уровень церулоплазмина возрастал более чем в 2 раза (38).

На роль пептидных антиоксидантов могут претендовать сред-немолекулярные пептиды или так называемые «средние молекулы»

(СМ) - гетерогенной группы вещества, в основном пептидной природы, молекулярная масса которых колеблется в диапазоне 3005000 Да. Они были выделены из крови обожженных и здоровых животных (147) и крови обожженных пациентов (184). СМ рассматриваются в настоящее время как универсальные признаки эндогенной интоксикации, которая играет важную роль в клинике ожоговой болезни (при тяжелых термических поражениях), во многом определяя ее течение и исход (26, 36, 37, 125). С другой стороны, СМ, по мнению авторов (184), не являются абсолютно «вредными» для организма, как считалось ранее. В их состав наряду с токсическими веществами входят и важные регуляторные компоненты, обладающие антиоксидантными свойствами. В частности, установлено, что в концентрации 0,6 мг/мл, соответствующей содержанию СМ в сыворотке крови пострадавших с ожогами средней тяжести, эти вещества практически полностью блокируют аскорбатзависимое окисление липидов (ПОЛ) в тканевых гомогенатах.

Исследование нами антиоксидантной системы эритроцитов объясняется необходимостью изучения тонких механизмов развития ожоговой болезни для поиска новых, эффективных средств лечения.

1.3. Антиоксиданты как медикаментозные средства

Усиление неферментативного свободно-радикального окисления липидов сопутствует возникновению многих хронических заболеваний. Для лечения таких патологических состояний, как ишемия, атеросклероз, воспалительные процессы и др, а также патологических состояний организма, возникающих при гипоксии, эмоционально-болевом стрессе, ожогах, судорогах, в последнее время все шире используются биоантиоксиданты, являясь эффективными ак-

цепторами свободных радикалов и ингибиторами процессов ПОЛ в клеточных мембранах.

В наши дни значительное место в лечение ожоговой болезни занимает антиоксидантная терапия. Ведущее место из арсенала различных антиоксидантов занимают витамины и прежде всего а-токоферол. Положительное влияние витамина Е при термической травме экспериментально подтверждено рядом иследователей. Так, например, показано (7), что применение а-токоферола в комбинации с селенитом натрия оказывает нормализующее действие на активность ряда ферментов кардиомиоцитов обожженных животных, ультраструктуру плазматических мембран и внутриклеточных мембран этих клеток, в частности, митохондрий, гемокапилляров сердца, а также гемокапилляров головного мозга. Что касается антиокси-дантного эффекта а-токоферола, то в литературе имеются сообщения, что применение при ожоговой травме витамина Е (206) сопровождается уменьшением свободно-радикального окисления липи-дов, повышением антиоксидантной защиты и устойчивости эритроцитов. В работе же Бекяровой и др. отмечено (18), что введение а-токоферола крысам вызывало снижение эндогенных продуктов ПОЛ у животных контрольной группы и резкое уменьшение их количества при введении его до термовоздействия. Действие токоферола, примененного после термотравмы, было значительно слабее. По мнению данных авторов, защитный эффект витамина Е при термической травме не сводится к его антиоксидантному действию, но в значительной степени реализуется благодаря его «нерадикальным» стабилизирующим свойствам и прежде всего способности образовывать комплексы со свободными жирными кислотами и лизофосфо-липидами.

Имеются сообщения о применении а-токоферола и других витаминов в качестве медикаментозного средства при лечении различных заболеваний. В современной литературе обсуждается возможность использования биоантиоксидантов в терапии ишемической болезни и атеросклероза, бронхолегочных.и др. патологий (10). Исследованы системы антиокислительной защиты у больных гипертонической болезнью при обогащении диеты полиненасыщенными жирными кислотами и витамином Е (28), у больных с язвой желудка и двенадцатиперстной кишки при включении а-токоферола в традиционную фармакотерапию (192), перспективы сочетанного использования в клинике а-токоферола и витамина А или Р-каротина (167), антиоксидантный эффект витамина Е при курении (210, 212). Изучено, избирательное влияние комплекса витаминов Е, А, С на анти-оксидантную защиту опухолевых и нормальных тканей и выяснено, что данные витамины в определенных дозах избирательно усиливают антиоксидантную защиту нормальных, но не злокачественных тканей (117). Экспериментально выяснено (85), что ретинол, а также транс-ретиноевая кислота подавляют процессы ферментативного и неферментативного ПОЛ в микросомах печени. Придается важное значение, как антиоксидантам, флавоноидам, относящимся к группе витамина Р. Флавоноиды могут, во-первых, образовывать прочные комплексы с различными ионами металлов, во-вторых, взаимодействовать со свободными радикалами. В клинической практике флавоноиды применяются для увеличения резистентности капиллярных сосудов, что, очевидно, обусловлено предохранением мембран стенок сосудов от повреждающего действия свободных радикалов (57).

Исследование в эксперименте на животных другого атиокси-данта, относящегося к соединениям пиридинового ряда - карбатона выявило нормализующий эффект этого препарата на показатели

энергетического метаболизма в крови и некоторых внутренних органов при ожоговой болезни, что связано с подавлением ПОЛ и сохранением структуры клеточных мембран (7, 194). Имеются сообщения о применении в эксперименте при термической травме (4, 24) и других патологиях (108) антиоксидантов иного класса - экранированных фенолов (дибунола, фенозана). В последнее время многие авторы видят перспективным использование лекарственных препаратов на основе карнозина ф-аланина -Ь-гистидина) и его аналогов - гистидинсодержащих дипептидов анзерина и гомокарнозина. Кар-нозин обладает антиоксидантной активностью (в широком понимании этого термина) и способен связываться с перекисью водорода, ингибировать аскорбатзависимое свободно-радикальное окисление липидов и непосредственно взаимодействовать с первичными молекулярными продуктами перекисного окисления, пероксидным радикалом, гипохлорит-радикалом, синглетным кислородом (50, 62).

Экспериментальные исследования применение препарата ор-готеина, состоящего на 80% из СОД, при ожоговой болезни показали его эффективность как антиоксиданта (5). В условиях, реально существующих в очагах воспаления (небольшое снижение рН, присутствие перекиси водорода), СОД может в значительной мере инак-тивироваться. Было показано, что под действием лазерного излучения происходит восстановление спектра электроннопарамагнитного резонанса нативного фермента и активности СОД (34). При геморрагическом шоке введение СОД способствует улучшению микроциркуляции. Это происходит, по-видимому, не только вследствие восстановления системной гемодинамики, но и, вероятно, путем дезагрегирующего действия СОД на форменные элементы крови (151). По данным литературы, антиоксиданты, уменьшая процессы свободно-радикального окисления, повышают и стабилизируют элек-

трокинетический потенциал эритроцитов и создают электромагнитное равновесие между форменными элементами крови в сосудистой стенке (41, 120). Кроме того, в моделях на животных было показано, что обработка воспаленных участков кожи СОД приводит к полной ликвидации инфильтрата ткани (66). Имеются сообщения об использовании при лечении артритов препаратов фермента СОД и низкомолекулярных антиоксидантов (89).

Львовской Е.И, Ефименко Г.П, Лифшиц Р.И. и др. (103) предложили применение в качестве антиоксиданта препарата БИТО (биологический ингибитор токсичных олигопептидов), содержащего в составе не менее 75% а- и |3-глобулинов, церулоплазмин, незначительные количества a¡-антитрипсина, а2-макроглобулина, иммуноглобулины классов A, G. М. По мнению данных авторов (104), использование белков плазмы крови (альбуминов, церулоплазмина, гаптоглобина, трансферрина) как антиоксидантов чрезвычайно перспективно.

Таким образом, введение in vivo антиоксидантов, влияющих на антиокислительную активность липидов и интенсивность ПОЛ, приводит к изменению липидного, в частности фосфолипидного, состава мембран. Применение антиоксидантов при ожоговой болезни нормализует активность ферментов. С другой стороны, антиокси-данты могут оказывать лечебное действие при ожоговой болезни, например ускоряют заживление ожоговых ран (24, 76).

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Еремина, Татьяна Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Ожоговая травма характеризуется выраженными сдвигами процессов обезвреживания реактивных оксигенных радикалов в эритроцитах и нарушением структуры эритроцитарных мембран, показателями чего служат изменения активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, сукцинатдегидрогеназы, супероксиддисмута-зы, каталазы, содержания тиоловых групп и нарушение осмотической резистентности мембран эритроцитов.

2. Глубина и направленность метаболических сдвигов в анти-оксидантной системе эритроцитов зависят от тяжести ожоговой травмы, периода и продолжительности заболевания.

3. Увеличение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, каталазы интактных эритроцитов, снижение активности сукцинатдегидрогеназы, количества тиоловых групп, осмотической устойчивости мембран эритроцитов в острый период ожоговой болезни оказывались тем значительнее, чем тяжелее была термическая травма. Наиболее глубокие изменения со стороны этих показателей обнаружены в группах с обширными и критическими ожогами и с сопутствующими ожогами дыхательных путей: активность Г-6-ФДГ повышалась на 37% и 46%, КАэр - на 62% и 66%, активность СДГ снижалась на 63,5% и 67%, концентрация 8Н-групп - на 63% и 66%, ОРМ Эр - на 36% и 33% соответственно.

4. Снижение антиоксидантной защиты эритроцитов в период септикотоксемии свидетельствует о лабильности адаптационных механизмов эритроцитов, о серьезных гомеостатических сдвигах в организме в целом. В каждой группе ожоговых больных отмечены индивидуальные колебания биохимических показателей эритроцитов при одинаковой их направленности.

5. Традиционная патогенетическая терапия приводит к улучшению показателей антиокислительной защиты эритроцитов и нормализации их осмотической устойчивости. Однако в группах больных с обширными и критическими термическими поражениями и сопутствующими ожогами дыхательных путей активность каталазы гемолизата, сукцинатдегидрогеназы, содержание тиоловых групп эритроцитов перед выпиской из стационара были снижены: активность КАгем - на 19% и 15%, СДГ - на 26% и 21%, уровень БН-групп - на 29% и 28% соответственно, что свидетельствует о медленно идущих процессах реабилитации.

6. У ожоговых больных с летальным исходом заболевания отмечено прогрессирующее снижение активности каталазы, сукцинатдегидрогеназы, количества сульфгидрильных групп эритроцитов на всех этапах исследования. В терминальной стадии они приобретают критически низкие значения. Исследованные показатели могут служить прогностическими тестами для данной категории больных.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проблема термических поражений продолжает оставаться одним из сложных и важных разделов экспериментальной и клинической медицины. При обширных и глубоких ожогах возникают значительные сдвиги как в функции, так и в морфологии почти всех органов и систем, причем причинная взаимосвязь нарушения находится на клеточном и субклеточном уровне, что приводит к расстройству гомеостаза в целом и развитию ожоговой болезни.

Роль биохимических нарушений в патогенезе ожоговой болезни признается большинством исследователей. В настоящее время известно большое количество работ, посвященных изучению вопроса о состоянии ПОЛ при термических ожогах, некоторых компонентов АОС печени, мозга, почек, крови (4, 103, 105, 109, 121, 152, 221, 233 и др.). Однако мало изученными остаются до сих пор изменения метаболизма в эритроцитах, недостаточно исследована активность ферментов, участвующих в инициации оксигенации гемоглобина. Известно, что при ожоговой травме имеются все предпосылки для нарушения окислительных процессов и возникновения гипоксии (146, 148, 151). Одной из причин развития гипоксии являются сдвиги в сбалансированном функционировании АОС эритроцитов, приводящие к расстройству механизмов утилизации и транспорта кислорода. До настоящего времени практически отсутствует комплексный подход в исследовании компонентов АОС эритроцитов, как правило, не прослежена антиокислительная активность эритроцитов в динамике ожоговой болезни: от поступления до выписки больного из стационара. Поэтому изучение состояния компонентов АОС эритроцитов, их резистентности представляло теоретический и практический интерес, так как это позволило бы расширить патобиохимиче-скую картину ожоговой болезни на уровне клетки, оценить тяжесть патологического процесса в различные периоды заболевания, прогнозировать его исход и контролировать эффективность проводимого лечения.

Ожоговая травма - сильнейший стресс для всего организма, приводящий к существенным сдвигам в работе клеток, а значит, и расстройствам функционирования органов и их систем в целом. Эритроциты одними из первых включаются в ответную реакцию организма на термическое повреждение. С первых часов после травмы резко усиливается ПОЛ и возникает явление гипоксии в следствие нарушения кислородзависимых гомеостатических механизмов (4, 7, 39, 146). Все это существенно сказывается на состоянии АОС эритроцитов, на механизме инициации оксигенации гемоглобина.

Для оценки состояния АОС эритроцитов нами исследовалась активность СДГ, способной косвенно стимулировать генерацию пе-роксида и таким образом включаться в инициацию оксигенации гемоглобина. Изучалась активность каталазы цельных и гемолизиро-ванных эритроцитов, которая не только устраняет токсический пе-роксид, но и принимает непосредственное участие в инициации оксигенации гемоглобина. Для более полного представления об АОС эритроцитов у одной из групп ожоговых больных (с обширными и критическими ожогами - индекс Франка 61-120) определялась активность СОД - важнейшего фермента антиоксидантной защиты, катализирующего процесс дисмутации супероксидных анион радикалов и катиона ЕГ с образованием Н2О2, тем самым блокирующего ПОЛ на стадии инициации. В качестве показателя энергетического баланса эритроцитов, критерия защиты гемоглобина от превращения в метгемоглобин, вероятность которого возрастает из-за повышения концентрации реактивных оксигенных радикалов, мы проследили динамику ключевого фермента пентозофосфатного пути - Г-6-ФДГ.

Г-6-ФДГ обеспечивает эритроцит НАДФН, который, поставляя протоны водорода, принимает участие в поддержании на постоянном уровне содержания как свободных радикалов, так и гидроперекисей (121, 184), включенный в метаболическую цепь НАДФН способствует генерации супероксидного аниона.

Определяли уровень неферментативных компонентов АОС эритроцитов - 8Н-групп, также служащих источниками атомов водорода для защиты эритроцитов от активных форм кислорода (97, 181). В качестве реологического показателя эритроцитов исследовали осмотическую резистентность их мембран (ОРМ Эр).

Поскольку в литературе встречается небольшое количество работ, посвященных определению физиологических норм перечисленных биохимических показателей, нами была подобрана контрольная группа практически здоровых людей (25 чел.), по возрасту сопоставимых с ожоговыми больными. У контрольной группы были изучены активность СОД, СДГ, КАэр и КАгем, Г-6-ФДГ, уровень сульфгидрильных групп, ОРМ Эр. Эти величины принимались за норму, и с ними сравнивались отклонения данных показателей эритроцитов у ожоговых больных.

Больные были разделены на 5 групп в зависимости от тяжести ожоговой травмы и исхода заболевания. Тяжесть ожога рассчитывали по индексу Франка: 1 группа - индекс Франка меньше 30 (нетяжелые ожоги), 2 группа - индекс Франка 30-60 (тяжелые ожоги), 3 группа - индекс Франка 61-120 (обширные и критические ожоги), 4 группа - больные с индексом Франка 28-53 и с сопутствующими ожогами дыхательных путей, 5 группа - больные с летальным исходом заболевания.

Было установлено, что в острый период ожоговой болезни у больных имелись значительные отклонения в состоянии АОС эритроцитов, которые носили, как правило, компенсаторный характер, особенно в первой половине данного периода - ожогового шока и ранней ожоговой токсемии. При этом изменения были тем существеннее, чем тяжелее ожоговая травма.

Так, между активностью Г-6-ФДГ и степенью ожога отмечалась прямо пропорциональная зависимость. Если в первые дни пребывания ожоговых больных в стационаре (1-4 день) при индексе Франка меньше 30 активность фермента возрастала на 15,4% по отношению к контрольной величине (контроль - 210,7±3,5 мкМ НАДФНУ109Эр/мин) - 243,2±5,4 мкМ НАДФНУ109Эр/мин, то при индексе Франка 30-60 увеличивалась на 28%, при обширных и критических ожогах (индекс Франка 61-120) она было выше нормы на 37%, а у больных с сопутствующими ожогами дыхательных путей -на 46,3%. По окончания периода острой ожоговой токсемии (период разгара септического процесса при тяжелых и критических ожогах) активность Г-6-ФДГ сохранялась несколько повышенной, особенно в группах с индексом Франка 61-120 (на 21,8%) и сопутствующими ожогами дыхательных путей (на 34,7%). Лишь в 1-ой группе (индекс Франка меньше 30) активность фермента соответствовала контролю - 215,7±3,2 мкМ НАДФН/109Эр/мин.

Повышение активности фермента в острый период ожоговой болезни, возможно, обусловлено снижением парциального давления кислорода в крови и развитием гипоксии после ожоговой травмы, в результате чего в эритроцитах возрастает концентрация неокислен-ной фосфорилированной глюкозы, которая аллостерически активирует Г-6-ФДГ (47). Увеличение активности Г-6-ФДГ способствует восстановлению НАДФ, необходимого для поддержания механической целостности и формы эритроцитов, их электролитного состава, гемоглобина в функционально активном состоянии, а также компонентов АОС эритроцитов (25, 45, 174), а с другой стороны, повышение активности фермента свидетельствует о наличии гипоксии при ожоговой болезни.

Снижение активности СДГ в острый период ожоговой болезни коррелировало с тяжестью термического повреждения. В 1-4 день заболевания при ожогах, соответствующих индексу Франка меньше 30 и индексу Франка 30-60, активность фермента понизилась по отношению к контрольной величине (контроль - 136,7±3,2 мкМ НТС/109 Эр/мин) на 28% и 49,7% соответственно, при индексе Франка 61-120 активность СДГ уменьшилась на 63,5% (49,9±2,5 мкМ НТС/109 Эр/мин), при сопутствующих ожогах дыхательных путей - на 67% (45,0±3,1 мкМ НТС/109 Эр/мин). Во второй половине острого периода ожоговой болезни активность СДГ оставалась сниженной в 3-ей (на 68%) и 4-ой (на 66,2%) группах. А во 2-ой группе активность фермента несколько возросла по сравнению с предыдущей величиной и составила 58,2% от нормы. В 1-ой группе активность СДГ составила 86,2% от контроля. Выраженное падение активности фермента во 2-ой, 3-ей и 4-ой группах, вероятно, приводит к дефициту ФАДН, участвующего в метаболизме реактивных оксигенных радикалов в эритроцитах (174).

Информативным показателем, характеризующим тяжесть патологического процесса, была каталаза. Этот фермент не только устраняет агрессивный пероксид, но и играет главную роль в процессах инициации оксигенации гемоглобина (169, 172, 174, 175). В период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии увеличение активности каталазы можно считать приспособительной реакцией, направленной на компенсацию основной функции эритроцитов - транспорта кислорода в условиях резкого снижения числа эритроцитов и развивающейся гипоксии. Не исключена также аллостерическая активация фермента возросшей концентрацией реактивных оксигенных радикалов . При этом, если повышение активности КАэр прямо пропорционально зависело от тяжести термической травмы, то такой динамики в отношении КАгем не выявлено. Так, при индексе Франка меньше 30 активность КАэр повысилась на 32,2% (контроль -5,4±0,05 ммоль Н202/109 Эр/мин), индексе Франка 30-60 - на 49,4%, индексе Франка 61-120 - на 65,6%, в группе с сопутствующими ожогами дыхательных путей - на 62%. Пик активности КАгем приходился на 2-ую группу (индекс Франка 30-60) - на 51,4% выше контроля (контроль - 56,4±1,12 ммольН202/Ю9 Эр/мин), в 1-ой группе (индекс Франка меньше 30) КАгем тоже достаточно повышена - на 41,3%, то в 3-ей (индекс Франка 61-120) и 4-ой (ожог дыхательных путей, индекс Франка 28-53) группах активность КАгем не столь высока - соответственно на 27,3% и 23,2% больше нормы. Вероятно, это связано с перераспределением мембранной и плазматической каталазы и участием фермента в устранении внеэритроцитарного пероксида. При этом увеличение активности КАгем у большинства больных с индексом Франка 61-120 и сопутствующими ожогами дыхательных путей было кратковременным, и на 3-4 день отмечалась тенденция к снижению активности общей каталазы. По окончании периода острой ожоговой токсемии активность КАгем оставалась повышенной только в 1-ой группе (+19,1%). Во второй группе КАгем оставалась в пределах нормы. В остальных группах активность фермента стала ниже контроля: в 3-ей - на 21,3%, в 4-ой - на 17,9%. Не исключено, что в этот период происходит ингибирование внутриэритроцитарной каталазы. В это время активность КАэр была статистически достоверно повышена во всех группах: в 1-ой - на 13,9%, во 2-ой - на 25,9% группах, в группах с обширными и критическими термическими поражениями и у больных с сопутствующими ожогами дыхательных путей активность фермента составила соответственно 116,1% и 118,7% от нормы. Такое состояние активности КАэр свидетельствовало, по-видимому, об изменении проницаемости мембран эритроцитов, а сниженная активность общей каталазы эритроцитов, вероятно, не обеспечивала нормального протекания процесса инициации оксигенации гемоглобина, что существенно отражалось на функциональном состоянии эритроцитов.

В группе с обширными и критическими ожогами определяли активность одного из ключевых ферментов АОС эритроцитов -СОД. Если в период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии (1-4 день) активность фермента составляла 121,4% от нормы -144,2±3,6 мкМ НТС/109 Эр/мин (норма - 118,8±2,7 мкМ НТС/109 Эр/мин), то во второй половине острого периода ожоговой болезни (разгар септического процесса) активность СОД снижалась на 38,6%. Таким образом, на начальном этапе острого периода заболевания незначительно повышенная активность СОД и общей каталазы начинает падать, и по окончании периода токсемии активность данных ферментов имеет низкие величины. Значительное уменьшение активности СОД в период разгара септического процесса отражало, вероятно, длительное и интенсивное поступление в кровоток высоких концентраций активных форм кислорода, которые приводят к декомпенсации адаптационных механизмов эритроцитов. С другой стороны, известно, что активность СОД зависит от уровня 02 и его реакционноспособных интермедиатов в тканях (61). Образующийся в результате метаболизма кислорода 02 ~ является инициирующим фактором для СОД. Гипоксия может явиться причиной низкой активности СОД.

Тиоловые группы - высокочувствительные неферментативные компоненты АОС. К БН-содержащим соединениям эритроцитов относятся восстановленная форма глутатиона, а также эритроцитарные белки и гемоглобин. Взаимодействуя с активными формами кислорода, SH-группы защищают клетки от их токсического влияния. Таким образом они поддерживают структурно-функциональные свойства эритроцитов (97, 121, 146, 181, 238). В период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии содержание SH-групп эритроцитов было снижено во всех группах. Так, при индексе Франка меньше 30 их количество уменьшилось до 16,7±0,32 ммоль/л (-23,4%) по сравнению с контрольной группой (21,8±0,47 ммоль/л). При тяжелых ожогах (индекс Франка 30-60) уровень сульфгидрильных групп снизился на 39,3%. Но наиболее значительное снижение SH-групп происходило при обширных и критических ожогах (индекс Франка 61-120) и сопутствующих ожогах дыхательных путей (индекс Франка 28-53) -на 63,2% (8,02±0,24 ммоль/л) и 66% (7,4±0,32 ммоль/л) соответственно. Причиной уменьшения концентрации тиоловых групп в острый период ожоговой болезни являются, по-видимому, гипоксия, приводящая к образованию активных форм кислорода путем неполного его восстановления (48, 111), воздействие токсинов, высвобождающихся из поврежденных тканей. Во второй половине острого периода ожоговой болезни содержание сульфгидрильных групп хотя и несколько повысилось, но было еще крайне снижено в 3-ей (55,4%) и 4-ой (-51,4%) группах, что свидетельствовало о снижении неспецифической антиоксидантной резистентности организма в целом (161).

Осмотическая резистентность мембран эритроцитов в первые дни после ожоговой травмы была крайне снижена. Так, если в 1-ой группе ОРМ Эр уменьшилась на 7,1% по отношению к контролю (контроль соответствует 0,42% р-ру NaCI - 042±0,001), во 2-ой группе - на 19,1%, то в 3-ей группе ОРМ Эр понизилась на 35,7%, а в 4ой группе - на 33,3%. Падение осмотической устойчивости эритроцитов было обусловлено, видимо, воздействием термического фактора (21, 69, 157), сдвигами концентрации электролитов, белков, рН плазмы (16, 70, 98, 99, 126, 163, 237), повышением ПОЛ и нарушением сбалансированного функционирования АОС эритроцитов. При этом изменяются физико-химические свойства эритроцитарных мембран. Прежде всего повышается их проницаемость для ионов Na+, К+, Н202, возрастает активность АТФаз (126, 243, 251). К 10-15 дню ОРМ Эр увеличивается по сравнению с ранней ожоговой токсемией, но у больных со значительными ожогами сохраняется несколько сниженной. Так, в группе с индексом Франка 61-120 ОРМ Эр соответствовала 0,465±0,003, в группе с сопутствующими ожогами дыхательных путей - 0,46±0,005.

Таким образом, воздействие термического фактора вызывает напряжение в функционировании как неферментативного (окисление SH-групп), так ферментативного звеньев АОС эритроцитов (КА-эр, КАгем, СОД, Г-6-ФДГ, СДГ). При этом, вероятно, нарушается функциональная целостность эритроцитарных мембран, связанная с изменением их проницаемости, текучести, вязкости.

В период септикотоксемии влияние ПОЛ, токсинов бактериального и тканевого происхождения, продолжающееся нарушение белок-синтезирующей функции красного костного мозга (92, 158, 245) приводят к декомпенсации компонентов антиоксидантной системы эритроцитов. Эти изменения были наиболее выражены в 3-ей и 4-ой группах. В 1-ой группе период ожоговой токсемии (первые 1015 дней заболевания), как правило, сменялся реконвалесценцией.

Во 2-ой группе в период септикотоксемии активность Г-6-ФДГ приближалась к контрольной величине. В 3-ей группе активность Г-6-ФДГ уменьшилась на 13%. В 4-ой группе активность Г-6

ФДГ проявляла тенденцию к снижению - 93,2% относительно нормы (0,05<р<0,1). Дефицит НАДФН приводит, видимо, к недостатку восстановленного глутатиона, в результате чего эритроциты становятся чувствительными к действию активных форм кислорода, теряют свою устойчивость и склонны к гемолизу (25).

Активность СДГ во всех группах оставалась сниженной и практически не изменилась по сравнению с предыдущим периодом. Во 2-ой группе она составила 53,6%, в 3-ей - 27,7% и 4-ой - 31,3% относительно нормы. Такое падение активности СДГ, по всей вероятности, отражало глубину расстройства метаболизма сукцината в эритроцитах.

Длительное тяжелое течение ожоговой болезни, постоянно провоцирующее повышенную генерацию реактивных оксигенных радикалов, возможное нарушение всасывания железа в результате поражения желудочно-кишечного тракта, выброс в кровь незрелых форм эритроцитов (31, 69, 92) приводят к еще более выраженной функциональной недостаточности каталазы - важнейшего компонента АОС эритроцитов. Активность КАэр во 2-ой группе приближалась к норме, а КАгем составила 76,1% от контроля, в 3-ей группе КАэр соответствовала 80,6%, а КАгем - 51,8%, в 4-ой - 85,6% и 57,3% соответственно. В период септикотоксемии отмечается (243) снижение устойчивости эритроцитов к пероксиду, наиболее выраженное чем в первые дни после ожога. Активные формы кислорода, прежде всего пероксид водорода, оказывали ингибирующий эффект на СОД эритроцитов у больных 3-ей группы (индекс Франка 61120). У них активность СОД составила 40,2% относительно контрольной величины.

Концентрация тиоловых групп эритроцитов у больных 2-ой, 3-ей и 4-ой групп была снижена. Однако некоторая положительная динамика SH-групп отмечалась у больных с индексом Франка 30-60 (81,3% от нормы). При обширных и критических ожогах (индекс Франка 61-120) их было 37,8%, в группе с сопутствующими ожогами дыхательных путей - 44%. Из этих данных видно, что содержание тиоловых групп практически не изменилось по сравнению с предыдущим периодом.

Низкий уровень тиоловых групп, вероятно, связан с тем, что их водород был использован для обезвреживания реактивных окси-генных радикалов, а также происходило блокирование SH-групп эндогенными токсическими веществами, образующимися в большом количестве в этот период болезни.

Снижение активности КАэр, КАгем, СОД, Г-6-ФДГ, СДГ и низкая концентрация тиоловых групп у ожоговых больных отражают лабильность АОС эритроцитов, обусловленную воздействием реактивных оксигенных радикалов и токсинов эндогенного и бактериального происхождения. При этом, как известно, необезвреженные супероксид-анионы в реакциях с перекисью водорода превращаются в наиболее агрессивные из кислородных свободных радикалов -гидроксильные радикалы, инициирующие ПОЛ (14, 34, 35, 169, 227) и высвобождающие Fe++ из ферритина и гемоглобина (173). Уменьшение активности каталазы, СОД, вероятно, являлось одной из причин замедления процесса заживления ожоговых ран.

В период септикотоксемии отмечалось незначительное статистически достоверное повышение осмотической стойкость эритроцитов у больных с индексом Франка 61-120 и у пяти пациентов с сопутствующими ожогами дыхательных путей (ОРМ Эр соответствовала в среднем 0,39% NaCI). Некоторое увеличение осмотической стойкости эритроцитарных мембран, возможно, было связано с ускорением эритропоэза и обновлением эритроцитарной массы. Не исключено, что воздействие токсинов, ПОЛ в период септикотоксемии приводило к изменению вязко-эластических свойств мембран эритроцитов и повышению их ригидности. Увеличение микровязкости липидного биослоя мембран эритроцитов способствует снижению пластичности и деформируемости клетки, что может привести к задержке эритроцитов в микрососудистом русле и внутрикапиллярно-му гемолизу.

Проведенная комплексная патогенетическая терапия позволила перевести больных в стадию реконвалесценции, что положительно отразилось на исследуемых показателях эритроцитов.

Активность Г-6-ФДГ во всех группах в период выздоровления приблизилась к контрольной величине. Нормализация активности Г-6-ФДГ положительно отражается на структурно-функциональных свойствах эритроцитов. Такая же закономерность в активности фермента отмечена и в работе Панченкова Н. Р. с соавт. (132).

В период рековалесценции у больных с индексом Франка меньше 30 активность СДГ приблизилась к контрольной величине (контроль - 136,7±3,2 мкМ НТС/109 Эр/мин) - 134,5±2,7 мкМ НТС/109Эр/мин (98 ,4%). При индексе Франка 30-60 активность фермента составила 88% от нормы (121,4±5,2 мкМ НТС/109 Эр/мин). При индексе Франка 61-120 и в группе с сопутствующими ожогами дыхательных путей активность СДГ была далека от контрольной величины - 101,4±2,6 (74,2%) и 108,3±3,5 мкМ НТС/109 Эр/мин (79,2%) соответственно.

Активность каталазы у всех больных имела позитивную динамику. В 1-ой группе, у которой период выздоровления сменял период токсемии, минуя септикотоксемию, активность КАэр и КАгем нормализовалась. Во 2-ой группе активность фермента также приближалась к контролю. Активность каталазы в 3-ей и 4-ой группах больных имела позитивную динамику, но нормы не достигала. В 3-ей группе активность КАэр была ниже контрольной величины на 12,6% , а КАгем - на 19,3% . В 4-ой группе активность КАэр составила 91,3% относительно нормы, а КАгем - 84,8%. Активность СОД, изучаемой в 3-ой группе, повышалась по сравнению с периодом септикотоксемии, но оставалась еще несколько сниженной (на 28,7%).

Концентрация БН-групп в ходе лечения ожоговых больных претерпевала положительную динамику, но не во всех случаях достигала контрольной величины (контроль - 21,8±0,47 ммоль/л). В 1-ой группе уровень сульфгидрильных групп приблизился к норме -20,73±0,49 ммоль/л. Во 2-ой группе содержание тиоловых групп составило 19,26±0,58 ммоль/л (88,3% от нормы). В 3-ей группе (15,52±0,27 ммоль/л, 71,2%) и в группе больных с сопутствующими ожогами дыхательных путей (15,72±0,41 ммоль/л, 72%) уровень 8Н-групп оставался сниженным. Таким образом, нормализация концентрации БН-групп у больных 3-ей и 4-ой групп в значительной степени запаздывала по сравнению с клиническим выздоровлением больных.

В период реконвалесценции ОРМ Эр у большинства ожоговых больных приближалась к контрольному уровню, что свидетельствовало о нормализации липид-липидных и белок-липидных взаимодействий в мембранах эритроцитов.

Таким образом, исследуемые нами показатели АОС эритроцитов в группах больных с обширными и критическими ожогами (индекс Франка 61-120) и с индексом Франка 28-53 и сопутствующими ожогами дыхательных путей в большинстве случаев не достигли величин нормы. Это свидетельствует о том, что термическая травма, провоцирующая избыточную генерацию реактивных оксигенных радикалов, токсинов различного происхождения, вызывает серьезные нарушения метаболизма красных клеток крови, и процесс восстановления их адаптационных механизмов в той или иной мере отражает нормализацию обмена веществ в организме в целом.

При изучении компонентов АОС эритроцитов и ОРМ Эр у больных с летальным исходом ожоговой болезни (п=13), смерть которых пришлась в большинстве случаев (п=12) на период сепсиса, отмечались более существенные их изменения по сравнению с группами больных с благоприятным исходом заболевания.

Активность Г-6-ФДГ в период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии, также как и в группах с аналогичной тяжестью ожогов, была повышена и составляла 134% от контрольной величины. По окончанию острого периода активность фермента на 25,5% превышала норму. В период септикотоксемии активность Г-6-ФДГ снижалась на 34,2% по сравнению с нормой. Снижение активности этого фермента - показатель нарушения механизмов сохранения механической целостности эритроцитарной мембраны, поддержания гемоглобина в функционально активном состоянии, регуляцию уровня активных форм кислорода.

Активность СДГ также подвергалась прогрессирующему снижению. В период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии активность фермента была 40,8±3,4 мкМ НТС/109 Эр/мин (29,8% от контроля), в разгар септического процесса - 18,5±1,4 мкМ НТС/109 Эр/мин (13,5%), перед смертью активность СДГ оставалась такой же низкой - 13%. Снижение активности СДГ свидетельствовало о дефиците восстановленного ФАД и глубоких сдвигах метаболизма в эритроцитах.

Активность КАэр в 1-4 день на 59% (8,59±0,2 ммоль Н202/109 Эр/мин) превышала контрольную величину, КАгем соответствовала

71,5±1,58 ммоль Н202/Ю9 Эр/мин (126,8%). На 10-15 день КАэр находилась в пределах нормы (5,24±0,15 ммоль/109 Эр/мин), а КАгем снижалась на 55,7% (25,0±1,23 ммоль/109 Эр/мин). Перед смертью активность КАэр составила 59,3% от контроля, а КАгем снизилась на 74,8%. Мы полагаем, что такая динамика активности каталазы отражалась на инициации оксигенации гемоглобина, от чего усугублялось явление гипоксии у данных больных.

У больных с летальным исходом с первых дней после термической травмы отмечалось значительное уменьшение содержания тиоловых групп эритроцитов. Оно было более выраженным чем в других группах ожоговых больных. Это явилось отображением снижения неспецифической резистентности организма. Так, в 1-4 день болезни концентрация 8Н-групп соответствовала 6,46±0,44 ммоль/л (на 70,4% ниже контроля), к 10-15 дню - 5,22±0,42 ммоль/л (на 76% ниже нормы). В период септикотоксемии (перед летальным исходом) уровень сульфгидрильных групп уменьшался значительно - до 3,2±0,28 ммоль/л (14,7% от нормы), что также являлось неблагоприятным прогностическим признаком.

Осмотическая резистентность мембран эритроцитов у больных с летальным исходом заболевания в период ожогового шока и ранней ожоговой токсемии снижалась на 38%, по окончанию острого периода ожоговой болезни она соответствовала 85,7% относительно контроля. В период септикотоксемии ОРМ Эр несколько повышалась по сравнению с нормой и соответствовала в среднем 0,385% МаС1. Увеличение осмотической стойкости эритроцитов, вероятно, приводило к некоторой блокаде доступа в них глюкозы, О2, ионов, различных метаболитов.

Увеличение ОРМ Эр могло привести к некоторой блокаде доступа в эритроциты глюкозы, 02, ионов, различных метаболитов.

Таким образом, нарушение функциональной способности АОС эритроцитов, изменение осмотической устойчивости их мембран у больных с летальным исходом заболевания, вероятно, связано не только с воздействием активных форм кислорода, токсинов, но и значительными сдвигами в метаболизме организма в целом (248), несовместимыми с жизнью.

Подводя итоги проведенного исследования можно заключить, что ожоговая болезнь характеризуется существенными нарушениями в функционировании антиоксидантной системы эритроцитов и осмотической резистентности их мембран, выраженность и направление которых зависит от тяжести термического поражения и продолжительности заболевания. Декомпенсация антиоксидантной системы эритроцитов в период септикотоксемии опосредуется, по-видимому, длительным прогрессированием патологического процесса, который усложняется по мере развития ожоговой болезни.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Еремина, Татьяна Владимировна, 1999 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авербах Т. Е., Фаустов А. С., Леонов А. Н. Влияние гипербарической оксигенации на перекисное окисление липидов при отравлении стиролом в эксперименте. //Патологическая физиология и экспериментальная терапия. - 1993 - №2. - С. 32-33.

2. Агаджанов М. И. Изменение протеолитической активности сыворотки крови нижних конечностей при внутриартериальном введении ферментов в эксперименте. //Журнал эксперим. и клинич. медицины. - 1979. - №4. - С. 14-22.

3. Агаджанов М. И. Роль липидной пероксидации и некоторых ан-тиоксидантов в патогенезе ожоговой болезни и влияние а-токоферола на ее течение. //Журнал эксперим. и клинич. медицины. - 1977.-Т. 17,№5.-С. 68-78.

4. Агаджанов М. И., Барсегян Л. А., Григорян В. С., Казарян Ш. А. Сравнительное действие ряда фенольных антиоксидантов на содержание гидроперекисей в тканях белых крыс. //Журн. эксперим. и клинич. медицины. - 1985. - Т.25, №6. - С. 522-525.

5. Агаджанов М. И., Симонян М. А., Казарян Ш. А. Влияние препарата супероксиддисмутазы на содержание эндогенной суперок-сиддисмутазы и перекисное окисление липидов при термических ожогах. //Вопр. мед. химии. - 1989. - Т. 35, №4. - С. 28-30.

6. Азизова О. А., Вахрушева Т. Н., Дремина Е. С., Шаров В. С., Перова Н. В., Озерова И. Н., Мазаев В. П. Динамика образования первичных и вторичных продуктов ПОЛ при медь-зависимом окислении ЛПНП сыворотки крови больных ишемической болезнью сердца. //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1996. - Т. 122, № 7. - С. 32-36.

7. Азолов В. В., Жегалов В. А., Пономарева Н. А., Бенуа Н. И., Па-хомова Н. П. Свободнорадикальные процессы как основа метаболических расстройств. //Сборник научных трудов: Актуальные вопросы патогенеза, клиники и лечения ожоговой болезни. - Горький, 1990.-С. 10-18.

8. Азолов В. В., Жегалов В. А., Пономарева Н. А., Бенуа Н. И., Па-хомова Н. П. Изучение летальности среди обожженных и возможности прогнозирования смертельных исходов при термической травме. //Сборник научных трудов. Актуальные вопросы патогенеза, клиники и лечения ожоговой болезни - Горький, 1990. - С. 4755.

9. Айдарханов Б. Б., Пошлина Э. А., Ленская Е.Г. Молекулярные аспекты механизма антиокислительной активности витамина Е: особенности действия а- и у-токоферолов. //Вопр. мед. химии. -1989.-№3,-С. 2-9.

10. Ананенко А. А., Политова Л. Н., Зверева В. И., Султанов А. Т. Значение антиоксидантной терапии при острой пневмонии у детей раннего возраста. //1-й Всесоюзный конгресс по болезням органов дыхания (Сборник резюме). - Киев, 1990. - С. 631.

11. Андреюк Г. М., Киселев П. А. Инициирование перекисного окисления липидов в результате превращения гемоглобина в геми-хром под действием свободных жирных кислот. //Биохимия. - 1988. -Т. 53, №6.-С. 1017-1024.

12. Артемчик В. Д., Курченко В. П., Метелица Д. И. Пероксидазная активность каталазы по отношению к ароматическим аминам. //Биохимия. - 1985. - Т. 50, №5. - С. 826-832.

13. Арчаков А. И. Микросомальное окисление. - М.: Наука, 1975. -326 с.

14. Арчаков А. И., Мохосоев И. М. Модификация белков активным кислородом и их распад. //Биохимия. - 1989. - Т. 54,№2. - С. 179186.

15. Атаджанова 3. Р., Борисов С. Е., Удовиченко В. И. Перекисное окисление липидов при ожоговом шоке у крыс, адаптированных к высотной гипоксии. //Патол. физиология и эксперим. терапия.-1986. - Вып. 3,-С. 42-44.

16. Баган О. Ф., Кияшко А. А., Шершун Г. Г. Нарушение структуры мембран в острой стадии ожоговой болезни. //Ожоговая болезнь: тез. докл. V Респ. науч. конф. «Патогенез и лечение острых периодов ожоговой болезни». - Киев, 1984. - С. 97-98.

17. Баджинян С. А., Агаджанов М. И. Влияние витамина Е на уровень перекисного окисления липидов и проницаемость биослойных мембран в сердце крыс после ожоговой травмы. //Журнал эксперим. и клинич. медицины. - 1983. - Т. 23, №2. - С. 105-108.

18. Бекярова Г. И., Маркова М. П., Каган В. Г. Защита а-токо-феролом эритроцитов от гемолиза, индуцированного термической травмой. //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1989. - Т. 107, №4.-С. 413-415.

19. Беленичев И. Ф., Башкин И. Н„ Визир В. А. Изучение аатиокси-дантных свойств метаболитов цикла трикарбоновых кислот при экспериментальной ишемии миокарда и головного мозга. //Фармакологическая коррекция гипоксических состояний (Материалы 2-й Всесоюзной конференции). - Гродно, 1991. - С. 400-401.

20. Белоусов И. М., Богославская С. Р., Самойленко Г. Е. Особенности анемии у обожженных детей. //Патогенез и лечение термических поражений и их последствий у детей: тез. 6-й Респ. науч. конф. - Харьков, 1988. - С. 30-31.

21. Бернат И. Патогенез ожоговой анемии. - Будапешт: Изд-во Академии наук Венгрии, 1975.-261 с.

22. Богданов Н. Г., Пентюк А. А., Гуцол В. И., Луцюк Н. Б. Влияние дефицита ретинола на активность и солюбилизацию некоторых ферментов мембран эндоплазматического ретикулума печени крыс. //Биохимия. - 1986. - Т.51, №2. - С. 242-248.

23. Бурлакова Е. Б, Храпова Н. Г. Перекисное окисление липидов мембран и природные антиоксиданты. //Успехи химии. - 1985. -Т.54, №9. - С. 1540-1558.

24. Бурлакова Е. Б., Заец Т. Л., Дубинская Н. И., Молочкина Е. М., Архипова Г. В. Влияние антиоксидантов на изменение состава липидов лизосом печени крыс после термического ожога. //Пат. физиология. - 1984. - №5. - С. 13-17.

25. Бышевский А. Ш., Терсенов О. А. Биохимия для врача. - Екатеринбург: Изд-во «Уральский рабочий», 1994. - 384 с.

26. Вальдман Б. М., Волчегорский И. А., Пужевский А. С., Яровин-ский Б. Г., Лифшиц Р. И. Среднемолекулярные пептиды крови как эндогенные регуляторы перекисного окисления липидов в норме и при термических ожогах. //Вопр. мед. химии. - 1991. - Т. 37, №1. -С. 23-26.

27. Василевская Н. Л. Методика определения резистентности эритроцитов. //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1955. - Т. 40, LX, №12,- С. 68-72.

28. Васильев А. В., Бияшева И. Р., Покровская Г. Р., Мальцев Г. Ю., Варсанович Е. А., Орлова Л. А., Сото С. X. Исследование системы антиокислительной защиты у больных гипертонической болезнью при обогащении диеты полиненасыщенными жирными кислотами w 3 и а-токоферола. //Вопр. мед. химии. - 1994. - Т. 40, №3. - С. 5356.

29. Виницкая Р. С., Чернышева Л. М. Происхождение гипоксемии у больных с ожоговой травмой. //Хирургия. - 1980. - №5. - С. 37-41.

30. Виноградов А. Д., Гаврикова Э. В., Головешкина В. Г. Кинетические и структурные характеристики компонентов сукцинатдегид-рогеназы, реагирующих с естественными и искусственными акцепторами электронов. //Биохимия. - 1976. - Т. 41, №7. - С. 1155-1168.

31. Вихриев Б. С., Бурмистров В. М. Ожоги: Руководство для врачей. - Л.: Медицина, 1986. - 271 с.

32. Владимиров Ю. А., Азизова О. А., Деев А. И. Определение и номенклатура свободных радикалов. //Итоги науки и техники,-М.,1991. - С. 33-34.

33. Владимиров Ю. А. Роль нарушений свойств липидного слоя мембран в развитии патологических процессов. //Пат. физиология и эксперим. терапия. - 1989. - №4. - С. 7-19.

34. Владимиров Ю. А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного слоя биологических мембран. //Биофизика. - 1987. - Т. 32, №5 - С. 830-844.

35. Владимиров Ю. А., Арчаков А. И. Перекисное окисление липидов в биомембранах. - М.: Наука, 1972. - 252 с.

36. Волчегорский И. А., Вальдман Б. Н., Скобелева Н. А., Лифшиц Р. И., Зурочка А. В. Модулирующее действие среднемолекулярных пептидов на течение ожоговой болезни в эксперименте. //Патол. физиология и эксперим. терапия. - 1992. - №1. - С. 31-35.

37. Волчегорский И. А., Костин Ю. К., Скобелева Н. А., Цейликман В. Э., Лифшиц Р. И. «Средние молекулы» как эндогенные модуляторы стресса. //Патол. физиология и эксперим. терапия. - 1994. -№4. - С. 23-26.

38. Волчегорский И. А., Львовская Е. И., Глузмин М. И., Колесников О. Л., Телешева Л. Ф., Гиниатуллин Р. У. Изменение антиокис-

лительной активности сыворотки крови при воспалительной патологии. //Вопр. мед. химии. - 1997. - Т.43, №4. - С. 233-238.

39. Волчегорский И. А., Налимов А. Г., Яровинский Б. Г., Лифшиц Р. И. Сопоставление различных подходов к определению продуктов перекисного окисления липидов в гептан-изопропанольных экстрактах крови. //Вопр. мед. химии. - 1989. -Т. 35, вып. 1. - С. 127131.

40. Галкин Б. Н., Баринов В. А., Тиунов Л. А., Филиппова Т. О., Иванова В. А., Головенко Н. Я., Литвинова Л. А. Влияние тилорона на системы перекисного окисления и антиперекисной защиты в норме и при гипоксии. //Вопр. мед. химии. - 1990. - Т. 36, № 1. - С. 60-62.

41. Герасимов А. М., Фурцева Л. И. Биохимическая диагностика в травматологии и ортопедии. - М., 1986. - С. 207-223.

42. Голиков С. Н., Саноцкий И. В., Тиунов Л. А. Общие механизмы токсического действия. - Л.: Медицина, 1986. - 280 с.

43. Гонский Я. И., Корда М. М., Клищ И. Н., Фира Л. С. Роль анти-оксидантной системы в патогенезе токсического гепатита. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1996. - № 2. - С. 43-45.

44. Горбунов Н. В., Волгарев А. П., Брайловская И. В., Быкова Н. О., Аврова Н. Ф., Киселев О. И. Активация свободнорадикальных реакций и изменение состояния системы антиоксидантной защиты в крови при токсической экспериментальной гриппозной инфекции. //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1992. - Т. 114, № 7. - С. 42-44.

45. Горжейши Я. Основы клинической биохимии. - Прага: Государственное издательство медицинской литературы , 1967. - 680 с.

46. Горошинская И. А. Роль моноаминооксидазы в мехавизме нарушений метаболизма при гипоксии. //Фармакологическая коррек-

ция гипоксических состояний (Материалы 2-й Всесоюзной конференции). - Гродно, 1991. - С. 412-413.

47. Горошинская И. А., Ананян А. А., Броновицкая 3. Г., Шугалей

B. С. Активность глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в сыворотке крови крыс при гипероксии, гипоксии и холодовом воздействии. //Вопр. мед. химии. - 1984. - Т.ЗО, №1. - С.60-63.

48. Горошинская И. А., Могильницкая Л. В., Немашкалова Л. А., Ходакова А. А. Состояние мембранных ферментов клетки при гипоксии и защитный эффект пиразидола. //Биохимия. - 1993. - Т. 58, № 1. - С. 62-68.

49. Гринштейн Ю. И., Лундина Т. А., Кнубовец Т. Л., Сибельдина Л. А., Седов К. Р. Свободнорадикальное окисление и канальцевые дисфункции у больных с хроничбеской почечной недостаточностью. // Тер. архив. - 1991. - Т. 63, № 6. - С. 62-65.

50. Гуляева Н. В. Перспективы создания лекарственных препаратов на основе карнозина. // Биохимия. - 1992. - Т. 57, №9. - С. 13981403.

51. Давиташвили Н. Г., Ерин А. Н., Прилипко Л. Л. Механизмы стабилизации синаптосом а-токоферолом при активации перекис-ного окисления липидов. //Биохимия. - 1986. - Т. 51, №3. - С. 472477.

52. Давыденкова Е. Ф., Шафран М. Г. Атеросклероз и процесс пе-рекисного окисления липидов. //Вест. АМН СССР. - 1989. - №3. -

C. 10-18.

53. Давыдов Б. В., Голиков П. П., Марченко В. В., Рябинин В. А., Голиков А. П. Влияние ингибитора ангиотензинпревращающего фермента рамиприла на процессы перекисного окисления липидов и состояние эндогенной антиоксидантной системы у больных ин-

фарктом миокарда. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1997. -№4.-С. 3-5.

54. Денисенко П. П„ Сафонова А. Ф., Усатенко М. С., Петрова М. А., Бурмистров С. О. Влияние антигипоксантов ка активность ферментов при токсическом отеке легких. //Фармакологическая коррекция гипоксических состояний (Материалы 2-й Всесоюзной конференции). - Гродно, 1991. - С. 12-13.

55. Джанджгава Т. Г., Шакаришивили Р. Р. Активность ферментов антиокислительной защиты и содержание продуктов перекисного окисления липидов в сыворотке крови и цереброспинальной жид- • кости больных ишемической болезнью мозга. //Вопр. мед. химии. -1992.-Т. 38, №2,- С. 33-35.

56. Дмитриев Л. Ф., Верховский М. И. О механизме взаимодействия токоферола с перекисными радикалами. //Биохимия. - 1990. - Т. 55, №11. -С. 2025-2029.

57. Дорожко А. И.. Бродский А. В., Афанасьев И. Б. Хелатирующее и антирадикальное действие рутина в процессе перекисного окисления липидов микросом и липосом. //Биохимия. -1988. - Т. 53, №10.-С. 1660-1666.

58. Дубинина Е. Е. Биологическая роль супероксидного анион-радикала и супероксиддисмутазы в тканях организма. //Успехи совр. биологии. - 1989. - Т.108, вып. 1 (4). - С. 3-18.

59. Дубинина Е. Е. Некоторые особенности функционирования ферментативной антиоксидантной защиты плазмы крови человека. //Биохимия. - 1993. - Т. 58, №2.- С. 268-273.

60. Дубинина Е. Е., Бурмистров С. О., Ходов Д. А., Поротов И. Г. Окислительная модификация белков сыворотки крови человека, метод ее определения. //Вопр. мед. химии. - 1995. - Т. 41, №1. - С. 24-26.

61. Дубинина Е. Е., Ефимова JI. Ф., Софронова JI. Н., Геронимус А. JI. Сравнительный анализ активности супероксиддисмутазы и ката-лазы эритроцитов и цельной крови у новорожденных детей при хронической гипоксии. //Лаб. дело. - 1988. - №8. - С. 16.

62. Дупин А. М., Беманандзара М., Стволинский С. Л., Болдырев А. А., Северин С. Е. Мышечные дипептиды - природные ингибиторы перекисного окисления липидов. //Биохимия. - 1987. - №5. - С. 782-786.

63. Ерин А. Н., Горбунов Н. В., Брусованик В. И., Тюрин В. А., Прилипка Л. Л. Стабилизация синаптических мембран а-токоферолом от повреждающего действия фосфолипаз. Возможный механизм биологического действия витамина Е. //Биохимия. - 1985. -Т. 50, №6.-С. 998-1004.

64. Ермолов А. С., Пахомова Г. В., Тверитнева Л. Ф., Матвеева С. Б., Марченко В. В., Голиков П. П. Влияние блокатора Н2-рецепторов гистамина - зантака на перекисное окисление липидов и антиоксидантную систему у больных гастродуоденальными кровотечениями язвенной этиологии. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1996. - № 1. - С. 23-25.

65. Жаров В. Н., Филиппов И. К., Баканов М. И., Кошель И. В. Динамика показателей перекисного окисления липидов в эритроцитах при лечении детей с приобретенной тяжелой апластической анемией. //Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1994 - Т. 117, №1,- С. 36-38.

66. Журкин А. Т., Дубинина Е. Е., Гундалах А.И. Активность супероксиддисмутазы в эритроцитах крови больных вирусным гепатитом. //Лаб. дело. - 1986. - №7. - С. 420.

67. Зиямутдинова Э. К., Хоммухамедова Н. М. Изучение каталазной и супероксиддисмутазной активности плазмы крови и органов у

животных с хроническим гепатитом. //Тезисы док. 5 конф. биохимиков респ. Средней Азии и Казахстана. - Ташкент, 1991.- С. 232.

68. Заец Т. Л., Бурлакова Е. Б., Сологуб В. К., Архипова Г. В., Мо-лочкина Е. М. Изменения проницаемости и состава лизосомальных мембран клеток печени после термического ожога. //Бюлл. экспе-рим. биологии и мед. - 1980. - Т. 89, №7. - С. 60-61.

69. Заец Т. Л., Лавров В. А., Марчук А. И., Носова И. М. Изменение некоторых свойств эритроцитарной мембраны и структуры эритроцитов при тяжелых ожогах в эксперименте. //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1990. - Т. 109, №1.- С. 27-30.

70. Заец Т. Л., Сологуб В. К. Патология биологических мембран при термических ожогах. //Ожоговая болезнь: тез. докл. V Респ. науч. конф. «Патогенез и лечение острых периодов ожоговой болезни».-Киев, 1984.-С. 25.

71. Захарова Н. Б., Хвостова Н. В., Шведова Р. Ф. Значение повреждения белкового и липидного состава эритроцитарных мембран в развитии снижения текучих свойств при экстремальных состояниях. //Вопр. мед. химии. - 1991. - Т. 37, №1. - С. 53-56.

72. Звягинцева Ю. Г. Антиоксидантная система эритроцитов у больных неаллергической бронхиальной астмой и ее изменения при медикаментозной коррекции: Дис. канд. мед. наук. - Краснодар, 1996. - 164 с.

73. Игнатов С. В. Система эритрона при ожогах. // Гематология и трансфузиология. - 1990. - №3. - С. 23-26.

74. Имананаха А. Н., Кобина Кеме-Эби И. Динамика активности каталазы, супероксиддисмутазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы при диагностике степени тяжести и прогнозирование исходов ише-мического инсульта. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. - Краснодар, 1988. - С. 40-45.

75. Калмыкова Ю. А., Бубнова В. И., Свечникова Л. В., Черногубо-ва Е. А., Шепелев А. П. Мембраны эритроцитов и антиоксидантная обеспеченность при экспериментальном остром панкреатите. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1992. - № 3. - С. 27-29.

76. Кияшко А. А. Нарушения гомеостаза и их коррекция у обожженных. - Киев. - 1980. - 126 с.

77. Князева Л. И., Конопля А. И., Горяйнов И. И. Коррекция маг. нитно-лазерным облучением вторичного иммунодефицитного состояния при остром панкреатите и ожоговой травме. //Пат. физиология и эксперим. терапия. - 1997. - №3. - С. 29-31.

78. Коган А. X., Грачев С. В., Елисеева С. В., Болевич С. Свойство углекислого газа ингибировать генерацию супероксидного анион-радикала клетками и его биомедицинское значение. //Вопр. мед. химии. - 1996. - Т. 42, №3. - С. 193-202.

79. Коган А. X., Кудрин А. Н, Кактурский Л. В., Лосев Н. И. Сво-боднорадикальные перекисные механизмы патогенеза ишемии и инфаркта миокарда и их фармакологическая регуляция. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1992. - № 2. - С. 5-15.

80. Козлов Н. Б., Забросаева Л. И., Лейтман М. Б. Усовершенствованный метод количественного определения гидроперекисей липи-дов, изменение их содержания в тканях при воздействии на организм высокой внешней температуры. //Вопр. мед. химии. - 1980. -Т.26, №1. - С. 130-133.

81. Козлов Ю. П., Данилова В. С., Каган В. Е., Ситковский М. В. Свободно-радикальное окисление. - М.: Изд-во Московского университета, 1972. - 88 с.

82. Колибаба С. С., Фищенко А. Я., Желиба Н. Д. Содержание сульфгидрильных групп и аскорбиновой кислоты в крови больных калькулезным холециститом. //Врач. Дело. - 1983. - №6. - С. 84-86.

83. Комов В. П., Рахманова Т. Ф. О молекулярной гетерогенности каталазы в эритроцитах человека. // Биохимия. - 1974. - Т. 39, №6. -С.1128-1131.

84. Конвай В. Д., Лукошин А. В., Смирнова В. Д. О возможных механизмах перекисного окисления липидов печени крыс и восстановительном периоде после механической асфиксии. //Вопр. мед. химии. - 1982, - Т.28, №4. - С. 42-46.

85. Конь И. Я., Горгошидзе Л. Ш. Действие ретиноевой кислоты на перекисное окисление липидов в микросомах печени крыс in vitro. //Бюлл. эксперим. биологии. - 1985. - №4. - С. 428-429.

86. Конь И. Я., Горгошидзе Л. Ш., Васильева О. Н., Кулакова С. М. Витамин А и перекисное окисление липидов: влияние недостаточности ретинола. //Биохимия. - 1986. - Т. 51, №1. - С. 70-76.

87. Королюк М. А., Иванова Л. И., Майорова И. Г., Токарев В. Е. Метод определения активности каталазы. //Лаб. дело. - 1988,- №1.-С. 16.

88. Корочанская С. П. Сравнительная характеристика методов определения сульфгидрильных групп. //Лаб. дело. - 1968. - №12. - С. 755 -756.

89. Костюк В. А., Потапович А. И., Сорока Н. Ф. Антиокислительная активность противоартритных препаратов. //Вопр. мед. химии. - 1990.-Т. 36, №3,-С. 37-39.

90. Крайнев С. И. Методика параллельного определения каталазной активности интактных эритроцитов, активности и каталитической емкости гемолизата в одном объеме крови. // Лаб. дело. - 1967,-№9. - С.562 - 563.

91. Кубышкин А. В. Значение свободнорадикального окисления в развитии бронхолегочных заболеваний (обзор). //Советская медицина. - 1989.-№ 6. - С. 26-30.

92. Кузин М. И., Сологуб В. К., Юденич В. В. Ожоговая болезнь. -М.: Медицина, 1982. - 160 с.

93. Кучеренко А. О. Свободнорадикальные процессы в крови и слюне людей при эмоциональном напряжении: Автореф. дисс. ... канд. биол. наук. - Ростов-на-Дону, 1998. - 23 с.

94. Ланкин В. 3. Антиоксидантные ферменты. //Тез. докладов III Всесоюз. конф. «Биоантиоксиданты» - М., 1989. - Т. 2. - С. 33.

95. Лашкина Е. А., Степуро И. И. Гемоглобин как источник 02 радикалов при гипоксических состояниях. //Фармакологическая коррекция гипоксических состояний (Материалы 2-й Всесоюзной конференции). - Гродно, 1991. - С. 433-434.

96. Лемешко В. В., Никитченко Ю. В., Свиг И. В. Перекисное окисление липидов биомембран и его ферментативная регуляция при старении крыс. //Укр. биохим. журнал - 1987. - Т. 59, №2. - С. 5057.

97. Леонтьева Г. Ф., Гончарова Л. Л., Дубровина Т. Я. Тиолдисуль-фидная система как один из элементов компенсаторных механизмов при гриппе. //Вест. АМН СССР. - 1991. - №4. - С. 40-44.

98. Лифшиц Р. И. Биохимия экстремальных состояний. - Челябинск, 1977.- 133 с.

99. Лифшиц Р. И. Биохимия экстремальных состояний. - Томск, 1980. - 121 с.

100. Лифшиц Р. И. Вопросы биохимии ожоговой травмы. - Челябинск, 1973. - 142 с.

101. Лифшиц Р. И. Метаболические основы острой ожоговой токсемии. - Омск, 1977. - 130 с.

102. Лукаш А. И., Внуков В. В., Кучеренко А. О., Ананян А. А., Милютина Н. П., Прокофьев В. Н. Свободнорадикальные процессы в

слюне людей при эмоциональном стрессе. //Физиология человека. -1997. - Т. 23, №6. - С.106-109.

103. Львовская Е. И., Ефименко Г. П., Лифшиц Р. И. Влияние препарата БИТО и некоторых сывороточных антиоксидантов на интенсивность процессов перекисного окисления липидов при термической травме. //Патол. физиолог, и эксперим. терапия. - 1995. - №3. -С. 31-34.

104. Львовская Е. И., Ефименко Г. П., Лифшиц Р. И., Сачко А. А. Влияние препарата БИТО на скорость заживления ожоговой поверхности и содержание молекулярных продуктов перекисного окисления липидов при термической травме. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1996. - №3. - С. 24-26.

105. Макаревич О. П., Голиков П. П. Активность супероксиддисмута-зы крови в острый период различных заболеваний. //Лаб. дело. -1983,-№6. -С. 24-27.

106. Макаренко Е. В., Козловский И. В. Антиоксидантная система эритроцитов при хронических заболеваниях печени. //Тер. архив. -1989.-Т. 61, №9.-С. 115-118.

107. Малышев Ю. П. Влияние анестезиологического пособия и оперативного лечения на каталазную активность и проницаемость мембраны эритроцита у больных язвенной болезнью и раком желудка. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимоло-гии. - Краснодар, 1985. - Выпуск 2. - С. 103-106.

108. Матвеев. С. Б., Марченко В. В., Голиков П. П. Влияние дибунола на перекисное окисление липидов и уровень а-токоферола в сердце крыс при острой кровопотере. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1992. - №1. - С. 5-6.

109. Матюшичев В. Б., Шамратова В. Г., Ахунова А. Р., Герчиков А. Я. Электрофоретическая подвижность и окислительный статус

эритроцитов крови крыс при ожоге. //Цитология. - 1997. - Т. 39, №2-3. -С. 177-180.

110. Маянский А. Н., Маянский Д. Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге. - Новосибирск: Наука, 1989. - 340 с.

111. Меерсон Ф. 3. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца. - М.: Медицина, 1984. - 272 с.

112. Меерсон Ф. 3. Физиология адаптивных процессов. - М., 1986. -628 с.

113. Меньшиков В. В. Руководство по клинической лабораторной диагностике. - М.: Медицина, 1982. - 567 с .

114. Меньшикова Е. Б., Зенков Н. К., Шергин С. М. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты и антиоксиданты. - Новосибирск, 1994.-203 с.

115. Метелица Д. И. Активация кислорода ферментными системами. - М.: Наука, 1982. - 255 с.

116. Мецлер Д. Биохимия, химические реакции в живой клетке. - М.: Мир, 1980,- Т.2.- 606 с.

117. Мозозкина Т. С., Суколинский В. Н.. Стрельников A.B. Избирательное влияние комплекса витаминов Е, А, С на антиоксидантную защиту опухолевых и нормальных тканей. //Вопр. мед. химии. -1991.-Т. 37, №6.-С. 59-61.

118. Мотульский Л. Г., Кемпель И. М. Спектрофотометрический метод определения активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы в эритроцитах. // В кн. "Биохимические методы исследования в клинике". - М.: Медицина, 1969. - С.154 - 156.

119. Муразян Р. И. Клиника и трансфузионное лечение ожогового шока. - М.: Медицина, 1973. - 190 с.

120. Муранов К. О., Гашев С. Б., Смирнов JI. Д., Шведова А. А., Ри-тов В. Б., Каган В. Е. Ингибирование агрегации тромбоцитов анти-

оксидантами. //Бюлл. эксперим. биологии. - 1986. - №3. - С. 337339.

121. Мхитарян В. Г., Агаджанов М. И., Геворкян Д. М., Микаелян Э. М. Ферментные механизмы антирадикальной защиты клетки при экстремальных состояниях. //Вест. АМН СССР. - 1982. - №9. - С. 15-19.

122. Мхитарян В. Г., Агаджанов М. И., Казарян П. А. Влияние си-токоферола на активность некоторых ферментов биосинтеза и распада фосфолипидов при ожоговой травме. //Вопр. мед. химии. -1979. - №6.-С. 698-704.

123. Мышкин В. А., Башкатов С. А., Вакарица А. Ф., Софронов Г. А., Толстиков Г. А., Еникеев Д. А. Влияние оксиметилурацила и атропина на свободнорадикальное окисление липидов и состояние мембран у крыс при отравлении карбофосом. //Патол. физиолог, и эксперим. терапия. - 1993. - №2,- С. 47-49.

124. Насыров X. М., Кондратенко Р. И. К прооксидантному действию медиаторов воспаления. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. -1992.-№3,-С. 12-14.

125. Нестеренко В. С., Лифшиц Р. И., Пискарев А. В., Ефименко Г. П. Изменение тяжести ожогового шока у облученных животных под влиянием а и ß-глобулинов сыворотки крови. //Патол. физиология и эксперим. терапия. - 1990. - №4. - С. 15-16.

126. Нефедова Т. В., Кубатиева A.A. Изменение резистентности мембран эритроцитов при развитии эндотоксинового шока. //Патол. физиолог, и эксперим. терапия. - 1991. - №4. - С. 20-22.

127. Однопозов А. К., Лифшиц Р. И., Горкин В. 3. Активность сывороточных аминоксигеназ и у-глутамилтранспептидазы при ожоговой болезни. //Вопр. мед. химии. - 1988. - №2. - С. 68-72.

128. Озереденко В. Г., Федорова Л. П., Рысалиева 3. К., Ибраимкулов С. Д., Курганский О. В. Антиоксидантная защитная система в условиях высокогорья. //Патол. физиолог, и эксперим. терапия. - 1991. -№1. - С. 37-39.

129. Орлов А. Н. Ожоговая инфекция. - Л.: Медицина, 1973. - 198 с.

130. Осипов А. Н., Азизова О. А., Владимиров Ю. А. Активные формы кислорода и их роль в организме. //Успехи биол. химии. - М., 1990. - С. 180-208.

131. Панченко Л. Ф., Герасимов А. М., Антоненков В. Д. Роль перок-сисом в клетке. - М.: Медицина, 1981. - 208 с.

132. Панченков Н. Р., Борзова Л. В., Аграненко Л. В., Быкова И. А., Телеленова Н. Н, Ряполова И. В., Дягилева О. А., Муразян Р. И., Козинец Г. И. Исследование эритроцитов больных с ожогами. //Пробл. гематол. - 1979. - №5. - С. 20-22.

133. Пекарский Д. Е., Захаренко О. М. Острая ожоговая токсемия. //Клинич. хирургия. - Изд-во «Здоровье», Киев, 1980. - №3. - С. 5559.

134. Петрович Ю. А., Гуткин Д. В. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса. //Пат. физиолог. и эксперим. терапия. - 1986. - №5. - С. 85-92.

135. Петухов В. И., Кумерова А. О., Леце А. Г., Силова А. А., Шне-стере А. П., Крищуна М. А., Миронова Н. А. Эритремия: активность антиоксидантных ферментов эритроцитов, связь с дефицитом железа. //Тер. архив. - 1997. - Т. 69, №4. - С. 57-61.

136. Пидэмский Е. Л., Тульбович Г. А., Голенева А. Ф., Кошмякова Н. В. Перекисное окисление липидов при асептическом воспалении и воздействии флоголитиков и антиоксидантов. // Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1990. - № 1. - С. 19-21.

137. Поберезкина Н. Б., Осинская Л. Ф. Биологическая роль суперок-сиддисмутазы. //Укр. биохим. журнал. - 1989. - Т.61, №2. - С. 1427.

138. Помойнецкий В. Д., Кубатиева А. А. Ферменты клеточной защиты и методы их исследования. - М.: Медицина, 1986. - 225с.

139. Промыслов М. Ш., Демчук М. А., Порядина Л. В., Воронов В. Г. Хемилюминесцентный метод исследования свободнорадикального окисления липидов в мозге кроликов при черепно-мозговой травме. //Вопр. мед. химии. - 1997. - Т. 43, № 4. - С. 208-211.

140. Радбиль О. С. Свободные радикалы и заболевания органов пищеварения. //Клин. мед. - 1989. - №3. - С. 17-21.

141. Резников А. И., Бондаренко С. И. Состояние алкогольокисляю-щих ферментов при острых интоксикациях этиловым алкоголем. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. -Краснодар, 1990. - С. 67-70.

142. Рессель Л. К., Тодоров И. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. - София, 1961. - С. 259.

143. Романчук Л. А., Рубина X. М. Спектрофотометрический метод определения сульфгидрильных групп крови. //Вопр. мед. химии. -1961. - вып. 6. - С. 652.

144. Рослый И. М., Ромм А. Р., Азизова О. А., Владимиров Ю. А. Пе-рекисное окисление липидов в крови больных гнойными менингитами. //Патол. физиол. и эксперим. терапия. - 1990. - № 4. - С. 4041.

145. Рябинин В. Е., Лифшиц Р. И. Влияние ожоговой травмы на активность НАДФН- и НАДН-зависимых компонентов цепи переноса электронов микросом печени мышей. //Вопр. мед. химии. - 1985. -Т. 31, №5.-С. 38-40.

146. Рябинин В. Е., Лифшиц Р. И. Состояние и возможные механизмы нарушений кислородзависимых процессов при ожоговой болезни (обзор). //Вопр. мед. химии. - 1990. - Т. 36, вып. 1. - С. 7-12.

147. Рябинин В. Е., Лифшиц Р. И., Чарная Л. Ф., Вальдман Б. М., Ефименко Г. П. Функциональное состояние митохондрий в период ранней ожоговой токсемии и при воздействии среднемо-лекулярных пептидов крови. //Вопр. мед. химии. - 1984. - Т. 30, №3,-С. 113-116.

148. Рябов Г.А. Гипоксия критических состояний. - М.: Медицина, 1988.-288 с.

149. Савов В. М., Каган В. Е., Прилипко Л. Л. Участие перекисных радикалов и активных форм кислорода в перекисном окислении липидов микросомальных мембран, индуцируемом органическими перекисями. //Вопр. мед. химии. - 1980. - №5. - С. 623-626.

150. Саломатин В. В., Лютов А. Г., Еникеева С. А., Чарная Л. Ф., Зу-рочка А. В., Долгушин И. И. Влияние ai-Кислого гликопротеина на хемилюминесценцию нейтрофилов и перекисное окисление липидов при экспериментальной термической травме. //Вопр. мед. химии - 1993. - Т.39, №3. - С. 24-26.

151. Сергиенко В. Ю., Кочетыгов Н. И., Агаджанов М. И., Симонян М. А. Применение супероксиддисмутазы при инфузионной терапии геморрагического шока в эксперименте. //Патол. физиол. и экспе-рим. терапия. - 1992. - №1. - С. 29-31.

152. Сеферова Р. И., Маненко И. Д., Аветисова Н. Л. Внутриклеточные окислительно-восстановительные процессы в тканях при гипертермии. //Патол. физиолог, и эксперим. терапия. - 1993. - №2. -С. 25-27.

153. Сидорова Л. Г., Муразян Р. И., Корякина И. К. Жизнеспособность аутологичных эритроцитов и эритроцитов донорской крови

различных сроков хранения у ожоговых больных в периоды острой токсемии и септикотоксемии. //Гематология и трансфузиология. -1985. - Т.30, №5. - С. 25-28.

154. Симонян М. А., Геворкян Д. М., Мхитарян В. Г. Количественное изменение Си-, Zn-супероксиддисмутазы, выделенных из печени крыс при аллоксановом диабете. //Бюлл. эксперим. биол. и мед. -1987. - Т. 53, №3. - С. 306-308.

155. Скляр В. А. Изменение активности ферментов антиокислительной системы крови под влиянием наркотических анальгетиков. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. -Краснодар, 1988. - С. 28-39.

156. Скляр В. А., Сивак В. В. Состояние антиокислительной системы эритроцитов в крови больных псориазом и нейродермитом. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. -Краснодар, 1990. - С. 46-54.

157. Слесаренко С. В. Анемия при ожоговой болезни и возможности ее коррекции. //Вестник хирургии. - 1997. - Т. 156, №4. - С. 37-41.

158. Слободин В. Б., Лифшиц Р. И. Коррекция метаболических расстройств при ожоговой болезни (Методические рекомендации). -Иваново, 1981.-19 с.

159. Соболева М. К., Шарапов В. И. Жирнокислотный состав и функциональное состояние эритроцитарных мембран у больных сепсисом. //Вопр. мед. химии. - 1993. - Т.39, №5. - С. 19-21.

160. Соболева М. К., Шарапов В. И., Грек О. Р. Жирные кислоты ли-пидной фракции эритроцитарных мембран и интенсивность реакций перекисного окисления липидов при дефиците железа. //Бюлл. эксперим. биол. и мед. - 1994. - Т. 117, №6. - С. 600-602.

161. Соколовский В. В, Тиоловые аатиоксиданты в молекулярных механизмах неспецифической реакции организма на эксперимен-

тальное воздействие. // Вопр. мед. химии. - 1988,- Т.34, №6. - С. 211.

162. Сологуб В. К., Винокурова И. Ю., Каем Р. И. Изменения микроциркуляции у обожженных в период септикотоксемии. //Хирургия. - 1977.-№ 6.-С. 41-43.

163. Сологуб В. К., Заец Т. JI. Минимальный и оптимальный объем лабораторных исследований при глубоких и обширных термических поражениях. //Лаб. дело. - 1987. - №10. - С. 756-761.

164. Солтанов Б. С., Аширов А. А., Родин В. Н. Современные проблемы термических ожогов. //Здравоохранение Туркменистана. -1988. -№5.-С. 28-32.

165. Степуро И. И. Антиоксидантные свойства витаминов и их комплексов с белками крови. //Вопр. мед. химии. - 1992. - Т. 38, №4. -С. 26-33.

166. Степуро И. И., Игнатенко В. А., Сушко Л. И., Чайковская Н. А. Роль форм гемоглобина в стабилизации эритроцитов при воздействии свободных радикалов кислорода и легкоокисляющихся соединений. //Фармакологическая коррекция гипоксических состояний (Материалы 2-й Всесоюзной конференции). - Гродно, 1991. - С.480-481.

167. Сторожок Н. М., Кутузова И. В. Ингибирующие эффекты смесей а-токоферола с Р-каротином или витамином А при окислении эфи-ров полиненасыщенных жирных кислот. //Вопр. мед. химии. - 1996. -Т. 42, №1,-С. 16-22.

168. Сторожук П. Г. Каталаза эритроцитов при стрессовых состояниях организма. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной эн-зимологии. - Краснодар, 1985. - Выпуск 2. - С.78-87.

169. Сторожук П. Г. Концепция наличия в эритроцитах ферментной системы, инициирующей оксигенацию гемоглобина. //Некоторые

вопросы медицинской и прикладной энзимологии. - Краснодар, 1988.-С. 4-14.

170. Сторожук П. Г. Методика определения активности сукцинатде-гидрогеназы в эритроцитах и ее клиническое значение на примере физиологически протекающей беременности. //Новые технич. решения в диагностике и лечении патологии органов билиарно-дуоденальной зоны. Новое в медицине: тезисы научной конференции. - Краснодар, 1990. - С. 121-123.

171. Сторожук А. П., Леонов А. В. Активность ферментов антиокси-дантной системы эритроцитов у рожениц при физиологических родах и кесаревом сечении. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. - Краснодар, 1990. - С. 20-27.

172. Сторожук П. Г., Скляр В. А. Экспериментальное подтверждение концепции о наличии в эритроцитах ферментной системы инициирующей оксигенацию гемоглобина. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. - Краснодар, 1988. - С. 15-27.

173. Сторожук П. Г., Сторожук А. П. Клиническое значение определения активности супероксиддисмутазы в эритроцитах при анестезиологическом обеспечении оперируемых гастроэнтерологических больных. //Вестник интенсивной терапии. - 1998. - №4. - С. 15-16.

174. Сторожук П. Г., Сторожук А. П. Образование и устранение реактивных оксигенных радикалов в эритроцитах и их биологическая роль (с учетом интенсивной терапии). //Вестник интенсивной терапии. - 1998. - №4. - С. 17-21.

175. Сторожук П. Г., Сторожук А. П. Состояние ферментной системы эритроцитов, ининциирующей процессы оксигенации гемоглобина в различные стоки физиологически протекающей беременности. //Некоторые вопросы медицинской и прикладной энзимологии. -Краснодар, 1990. - С. 11-19.

176. Сторожук П. Г., Сторожук А. П., Быков И. М. Позитивная роль реактивных оксигенных радикалов в эритроцитах. //International Journal on immunorehabilitation. - №4, 1997. - С. 164-170.

177. Страйер Л. Биохимия. - М.: Мир, 1984,- Т.1.- 227 с.

178. Таран Ю. П., Шишкина Л: Н., Евсеенко Л. С., Кукушкина Г. В. Влияние 6-метилурацила на параметры системы регуляции перок-сидного окисления липидов при термическом ожоге. //Патол. физиология и эксперим. терапия. - 1995. - №1. - С. 40-42.

179. Тарасьев М. Ю., Сабуренкова Е. П., Данцич И. И., Мошков К. А.. Рыльков В. В. О влиянии конформации церулоплазмина на его активность: значение клинического анализа. //Вопр. мед. химии. -1991.-Т. 37, №5.-С. 43-46.

180. Терехин Г. В., Елькин А. И., Яворский А. Н., Фесюк А. Ф. Эффективность антигипоксантов при острой интоксикации фосфорор-ганическими средствами. //Фармакологическая коррекция гипокси-ческих состояний (Материалы 2-й Всесоюзной конференции). -Гродно, 1991.-С. 337.

181. Терехина Н. А., Петрович Ю. А. Свободно-радикальное окисление и антиоксидантная система (теория, клиническое применение, методы). - Пермь, 1992. - 35 с.

182. Теселкин Ю. О., Бабенкова И. В, Любицкий О. Б., Клебанов Г. И., Владимиров Ю. А. Определение антиоксидантной активности плазмы крови с помощью системы гемоглобин-пероксид водорода-люминол. //Вопр. мед. химии. - 1998. - Т. 44, №1. - С. 70-76.

183. Теселкин Ю. О., Бабенкова И. В., Любицкий О. Б., Клебанов Г. П., Владимиров Ю.А. Ингибирование сывороточными антиокси-дантами окисления люминола в присутствии гемоглобина и перок-сида водорода. //Вопр. мед. химии. - 1997. - Т. 43, №2. - С. 87-93.

184. Туликова 3. А., Осипович В. К. Влияние средних молекул, выделенных из сыворотки крови обожженных пациентов, на состояние процессов перекисного окисления липидов в тканях животных. //Вопр. мед. химии. - 1990. - Т. 36, №3. - С. 24-26.

185. Тюрин В. А., Корольков С. Н., Каган В. Е. Трансбиослойное распределение а-токоферола и ассиметрия липидов в мембранах нервной ткани. //Биохимия. - 1989. - Т. 54, №6. - С. 940-947.

186. Уайт А., Хендлер Ф., Смит Э., Хилл Р., Леман Н. Основы биохимии. - М.: Мир, 1981. - Т. 1-3. - 1878 с.

187. Ушкалова В. Н., Иоанидис Н. В., Кадочникова Г. Д., Деева 3. М. Контроль перекисного окисления липидов. - Новосибирск, 1993. -181 с.

188. Филипченко Е. М. Липиды плазмы крови, тромбоцитов и эритроцитов у больных язвенной болезнью желудка и двенадцатиперстной кишки и их динамика при лечении: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. - Краснодар, 1997. - 19 с.

189. Фролов В. М., Ричнев В. Е., Журавлева Н. В., Баскаков И. Н. Исследование уровня сульфгидрильных групп в крови больных рожей в качестве теста, характеризующего вероятность развития рецидива. //Лаб. дело. - 1986. - №2. - С. 98.

190. Хорст А. Молекулярные основы патогенеза болезней. - М.: Медицина, 1982. - 456 с.

191. Храпова Н. Г. Биохимия липидов и их роль в обмене веществ. -М., 1981.- 147 с.

192. Черногубова Е. А. Нарушения антиоксидантной системы крови и их коррекция при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки: Автореф. дисс. ... канд. биол. наук. - Ростов-на-Дону, 1998.-26 с.

193. Шадыро О. П., Шилов Г. Н., Тимощук В. А., Власова В. И., Фе-дулов А. С., Мезен Н. И. Биоантиоксидантная активность 3,5 - ди-трет-бутилиирокатехина и его влияние на гипоксию, воспалительный процесс, болевой синдром и ожоги. //Вопр. мед. химии. -1997. -Т. 43, вып. 3,-С. 153-157.

194. Шершан Г. Г., Каган О. Ф., Кияшко А. А., Батвин И. Н., Рубина JI. М. Коррекция протеолитических нарушений и резистентности эритроцитов антиоксидантом карбатоном в экспериментальных ожогах. //Укр. биохимич. журнал. - 1986. - Т. 58, №3. - С. 78-80.

195. Шепотько А. И. Патофизиологические особенности раннего периода ожоговой болезни. //Журнал эволюц. и клинич. медицины. -1975.-Т.15,№3,-С. 42-47.

196. Шувалова Е. П., Антонова Т. В., Барановская В. Б. Значение систем антиоксидантной защиты крови в адаптации к инфекционному процессу при вирусном гепатите В. //Тер. архив. - 1991. - Т. 63, №11.-С. 47-49.

197. Якутова Э. Ш, Осипов А. Н., Костенко О. В., Арнхольд И., Арнольд К., Владимиров Ю. А. Взаимодействие гипохлорита с окси-гемоглобином приводит к освобождению железа в каталитически активной форме. //Биофизика. - 1992. - Т. 37, №6. - С. 1021-1028.

198. Ярош А. М. Перекисное окисление липидов в крови при воспалении легких. //Бюлл. эксперим. биологии и медицины. - 1984. - Т. 97, №4.-С. 486-488.

199. Abella А., Messaoudi С., Laurent D., Marot D., Chalas J., Breux J., Claise C., Lindenbaum А. A method for simultaneous determination of plasma and erythrocyte antioxidant status. Evaluation of the anti-oxidant activity of vitamin E in healthy volunteers. //Br. J. Clin. Pharmacol. -1996. - Vol. 42, N6. - P. 737-741.

200. Abou Seif M. A. Blood antioxidant status and urine sulfate and thiocyanate levels in smokers. //J. Biochem. Toxicol. - 1996. - Vol. 11, N3.-P. 133-138.

201. Ahnia B. S., Kiran U. Correlation between superoxide and catalase in red blood cells in different animals. //Curr. sol. - 1978. - 47, N5. -P. 544545.

202. Bast A., Haenen G. R. M. M., Doelman C. J. A. Oxidants and antioxidants: State of the art. //Amer. J. Med. - 1991. - 91, Suppl. 3C. -P. 25-135.

203. Baxter C. R Fluid volume and electrolyte changes of the early postburn period. //Clin. Plast. Surg.- 1974. -N6. - P. 693-703.

204. Bekiarova G., Kozarev I. Changes in the osmotic resistance of the erythrocytes in thermal trauma and the role of free-radical oxidation. //Khirurgiia. - 1991. - Vol. 44, N2. - P. 43-45.

205. Bekiarova G., Kozarev I. The correlation between the activity of free-radical peroxidation and erythrocyte hemolysis in experimental thermal trauma. //Khirurgiia. -1991. - Vol. 44, N3 - P. 1-7.

206. Bekyarova G., Kozarev I., Yankova T.Dependence between the free-radical peroxidation, the activity of the superoxide dismutase, glucoses-phosphate dehydrogenase and erythrocytes haemolysis after thermal trauma and alpha-tocopherol treatment. //Acta Physiol. Pharmacol. Bulg. - 1989. - Vol. 15, N2. - P. 68-73.

207. Bekyarova G., Yankova T. Marinov M. Lipofuscin product accumulation, insufficient antioxidant defence in erythrocytes and plasma and enhanced susceptibility to oxidative haemolysis after thermal trauma. //Acta Chir. Plast. - 1997. - Vol 39, N2. - P. 60-64.

208. Bekyarova G., Yankova T., Galunska B. Increased antioxidant capacity, suppression of free radical damage and erythrocyte aggrerability after combined application of alpha-tocopherol and FC-43

perfluorocarbon emulsion in early postburn period in rats. //Artif. Cells. Blood. Substit. Immobil. Biotechnol. - 1996. - Vol. 24, N6. - P. 629641.

209. Bekyarova G., Yankova T., Kozarev I. Suppressive effect of FC-43 perfluorocarbon emulsion on enhanced oxidative haemolysis in the early postburn phase. //Burns. - 1997. - Vol. 23, N2. - P. 117-121.

210. Brown K. M., Morrice P. C., Arthur J. R., Duthie G. G. Effects of vitamin E supplementation on erythrocyte antioxidant defence mechanisms of smoking and non-smoking men. //Clin. Sci-Colch. - 1996. -Vol. 91, N1,-P. 107-111.

211. Cantoni O., Fumo M., Cattabeni F. Role of metal ions in oxidant cell injury. //Biol. Trace. Elem. Res. - 1989. - N21. - P. 277-281.

212. Duthie G. G., Arthur J. R., James W. P.Effects of smoking and vitamin E on blood antioxidant status. //Am. J. Clin. Nutr. - 1991. - Vol. 53, N4.-P. 1061-1063.

213. Fisher A. B. Symposium of extension of oxygen tolerans. //Introdaction. Exp. Lung Res. - 1988. - Vol. 14. - P. 865-868.

214. Freeman B. A., Crapo J. Biology disease: free radicals and tissue injury. //Lab. Invest. - 1982. - 47, N5. - P. 412-426.

215. Frei B., Stocker R., Ames B. N. Antioxidant defenses and lipid peroxidation in human blood plasma. //Proc. Natl. Acad. Sci USA. -1988. - Vol. 85, N24. - P. 9748-9752.

216. Fridovich J. Superoxide dismutases. //Adv. Enzymolog. - 1986. -N58.-P 61-97.

217. Fridovich J. The biology of oxygen radicals. The superoxid radical is an agent ob oxygen toxicity, superoxide dismutase provide an important defence. //Science. - 1978.-201, N4359. - P. 875-880.

218. Galeotti T., Masotti L., Borello S. Oxi-radical metabolism and control of tumour growth. //Xenobitica. - 1991. - N21. - P. 1041-1052.

219. Gambhir J. K., Lali P., Jain A. K.Correlation between blood antioxidant levels and lipid peroxidation in rheumatoid arthritis. //Clin. Biochem. - 1997. - Vol. 30, N4. - P. 351-355.

220. Grieger M., Schulz St. Bestimmung der Superoxiddismutase (SOD) in der Erythrozyten deim Glucose-6-Phosphatdehydrogenase - Mangel. // Folia Haematol. (DDR). - 1983. -Vol. 110, N3.- P. 427-436.

221. Hansbrough J. F., Wikstrom T., Braide M., Tenenhaus M., Renne-kampff O. H., Kiessig V., Bjursten L. M. Neutrophil activation and tissue neutrophil sequestration in a rat model of thermal injury. //J. Surg. Res. - 1996. -Vol. 61, N1.- P. 17-22.

222. Hansbrough J. F., Wikstrom T., Braide M., Tenenhaus M., Renne-kampff O. H., Kiessig V., Zapata-Sirvent R., Bjursten L. M. Effects of E-selectin and P-selectin blockade on neutrophil sequestration in tissues and neutrophil oxidative burst in burned rats. //Crit-Care-Med. - 1996. -Vol. 24, N8.-P. 1366-1372.

223. Hassan H. M. Biosynthesis and regulation of superoxide dismutases. //Free Radical. Biol, and Med. - 1988. - N5,- P. 377-385.

224. Hatherill J. R., Till G. O., Bruner L. H., Ward P. A. Thermal injury, intravascular hemolysis, and toxic oxygen products. //J. Clin. Invest. -1986. - Vol. 78, N3. - P. 629-636.

225. Hilton J. G. Effects of thermal trauma on dog erythrocyte ATPase and shape. //Burns. Incl. Therm. Inj. - 1985. - Vol. 12, N2. - P. 78-83.

226. Hodgson E.K., Fridovich J. The interaction of bovine erythrocyte superoxide dismutase with hydrogen peroxide: inactivation of the enzyme. //Biochemistry. - 1975. - Vol. 14, N24. - P. 5294-5299.

227. Hulea S. A., Olinescu R., Nita S., Crocnan D., Kummerow F. A. Cigarette smoking causes biochemical changes in blood that are suggestive of oxidative stress: a case-control study. //J. Environ. Pathol. Toxicol. Oncol. - 1995. - Vol. 14, N3-4. - P. 173-180.

228. Imadaya A., Terasawa K., Tosa H., Okamoto M., Toriizuka K. Erythrocyte antioxidant enzymes are reduced in patients with rheumatoid arthritis. //J. Rheumatol. - 1988. - Vol. 15, N11. - P. 16281631.

229. Jacob R. A., Kelley D. S., Pianalto F. S., Swendseid M. E., Henning S.M., Zhang J. Z., Ames B. N., Fraga C. G., Peters J. H. Immuno-competence and oxidant defense during ascorbate depletion of healthy men. //Am. J. Clin. Nutr. - 1991. - Vol. 54, N6. - P. 1302-1309.

230. Jenkinson S. C. Free radical effects on lung metabolism. //Clin. Chest Med. - 1989. - Vol. 10, N1. - P. 37-47.

231. Kumari S., Menon P, Changes in levels of lipid peroxides and ac tivities of superoxide dismutase and catalase in isoproternol induced myocardial infarction in rats. //Indian. J. Exp, Biol. - 1987. - Vol. 25, N6.-P. 419-423.

232. Kun E., Abood G. Colorimetric estimation of succinic dehydrogenase by tripheniltetrasolium chloride. //Science. - 1979. - Vol. 44, N2. -P.1527-1529.

233. Leff J. A., Burton L. K., Berger E. M., Anderson B. O., Wilke C. P., Repine J. E. Increased serum catalase activity in rats subjected to thermal skin injury. //Inflammation. - 1993. - Vol. 17, N2. - P. 199-204.

234. Lindberg R. B., Latta R. L. Phage typing of Pseudomonas aeruginosa, Clinical epidemiologic considerations. //J. Infect. Dis. -1974.-V. 130,N5.-P. 533-538.

235. McCord T. M. Superoxide production and human disease. //J. Cell Biochem. - 1991. -N15c. - P. 108.

236. McCord T. M., Fridovich I. Superoxidedismutase and its function for erythrocuprein. //J. Biol. Chem. - 1969. -N244. - P. 6049-6055.

237. Meng F., Chen Y., Ge S. Erythrocyte membrane during shock stage in burned rats. //Chung Hua Cheng Hsing Shao Shang Wai Ko Tsa Chih. -1994. - Vol. 10, N2. - P. 134-137.

238. Meng X. M. Mechanism of damage to erythrocytes after burn injury in ratchanges in lipid peroxidation, antioxidant function and sulfhydryl groups. //Chung Hua Cheng Hsing Shao Shang Wai Ko Tsa Chih. -1991,- Vol. 7, N3,-P. 205-207.

239. Omaye S. T., Burri B. J., Swendseid M. E., Henning S. M., Briggs L. A., Bowen H. T., Ota R. B. Blood antioxidants changes in young women following beta-carotene depletion and repletion. //J. Am. Coll. Nutr. -1996.-Vol. 15, N5.-P. 469-474.

240. Perrin-Nadif R., Dusch M., Koch C., Schmitt P., Mur J. M. Catalase and superoxide dismutase activities as biomarkers of oxidative stress in workers exposed to mercury vapor. //J. Toxicol. Environ. Health. - 1996. -Vol. 48, N2.-P. 107-119.

241. Poirier J., Barbeau A. Erythrocyte antioxidant activity in human patients with Parkinson's disease. //Neurosci-Lett. - 1987. - Vol. 75 N3. - P. 345-348.

242. Sarkar S., Yadav P., Bhatnagar D. Cadmium-induced lipid peroxidation and the antioxidant system in rat erythrocytes: the role of antioxidants. //Trace Elem. Med. Biol. - 1997. - Vol. 11, N1 - P. 8-13.

243. Sheng Z. Y., Lai Y. F., Wang H. B., Zhao Y. Changes in erythrocyte membranes in burned rabbits. //Burns. Incl. Therm. Inj. - 1988. - Vol. 14,N4.-P. 287-291.

244. Sles H. Oxidative stress - from basic research. //Amer. J. Med. -1991. -N91. - P. 531 - 538.

245. Starkopf J., Tamme K., Zilmer M., Talvik R., Samarutel J. The evidence of oxidative stress in cardiac surgery and septic patients: a

comparative study. //Clin. Chim. Acta. - 1997. - Vol. 262, N1-2. - P. 77-88.

246. Stocker R., Glazer A. N., Ames B. N. Antioxidant activity of albumin-bound bilirubin. //Proc. Natl. Acad. Sci USA. - 1987. - Vol. 84, N16.-P. 5918-5922.

247. Tabbara I. A. Hemolytic anemias. Diagnosis and management. //Med. Clin. North. Am. - 1992. - Vol. 76, N3. - P. 649-668.

248. Wallner S. F., Warren G. H. The haematopoitetic response to burning: an autopsy study. //Burns. Incl. Therm. Inj. - 1985. - Vol. 12, N1. -P. 22-27.

249. Wayner D. D., Burton G. W., Ingold K. U., Barclay L. R., Locke S. J. The relative contributions of vitamin E, urate, ascorbate and proteins to the total peroxyl radical-trapping antioxidant activity of human blood plasma. //Biochim. Biophys. Acta. - 1987. - Vol. 924, N3. - P. 408-419.

250. Wendel A. Enzymes acting against reactive oxygen. //Enzymes Tools and Targets. - Hannover, 1988. - P. 161-167.

251. Yuan Y., Fang Z. Y., Zhang Z. H. Changes in the rate of haemolysis during the early stage after burns in the rabbit. //Burns. Incl. Therm. Inj. - 1988. - Vol. 14, N5. - P. 365-368.

Министерство пугеГ! сообщения РФ Северо-Кавказская железная дорога КРАСНОДАРСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ ОТДЕЛЕНЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА

350072, г. Краснодар, ул. Московская, 96 Тел. 57-92-55 Расч. сч. 000421101 в Коммерческом Краснодарбанке г. Краснодара

Способ дополнительной диагностики степени «окислительного стресса» и эндотоксикоза I условиях острой и хронической патологии (ожоговая травма, хирургическая патология толстое кишки, нефропатология).

2. НАИМЕНОВАНИЕ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЫ

«Антиоксидантная система эритроцитов при экстремальных и хронических состояниях): Выполненной в Кубанской государственной медицинской академии на кафедре биохимии 1 хирургии педиатрического и стоматологического факультетов.

Научный руководитель: заведующий кафедрой биохимии профессор П.Г. Сторожук заведующий кафедрой хирургии педиатрического и стоматологического факультетов доцен С.Е. Гуменюк, доцент кафедры биохимии И.И. Павлюченко.

1. ИСПОЛНИТЕЛЬ: ассистент кафедры хирургии педиатрического и сгоматологическог факультетов С.Н. Потемин, аспирант кафедры биохимии Т.В. Еремина.

2. НАИМЕНОВАНИЕ УЧРЕЖДЕНИЯ, ВНЕДРИВШЕГО РАЗРАБОТКУ И ДАТ, ВНЕДРЕНИЯ:

Краснодарская отделенческая клиническая больница С.-К.ж.д. Ноябрь 1998 г.

3. ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ВНЕДРЕНИЯ И ИХ ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТ! МЕДИКО-СОЦИАЛЬНАЯ, ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ. Внедрение предложение имеет важное медико-социальное значение, так как в результате применена дополнительных методов диагностики степени «окислительного стресса» и эндотоксико; удается скорректировать медикаментозные и хирургические методы лечения с применение современных антиоксидантов. что способствует оптимизации процесса терапии и реабилитаци больных с острой и хронической патологией.

4. ПРИ ВНЕДРЕНИИ ПОЛУЧЕН ГОДОВОЙ ЭКОНОМИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ: Сократили« сроки пребывания в стационаре на 10-14 дней у больных с ожоговой болезнью и на 4-5 дней колопроктологических больных, что дало экономический эффект в 14000 рублей.

на №

№ ¿¿Л

от 3.. // М г.

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

1. НАИМЕНОВАНИЕ ВНЕДРЕННОГО ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Г лавный врач

Зав. лабораторным с

Г лавный бухгалтер

С.М. Жук

Т.Н. Серопьян

О.В. Чернобабова

г. Кра следар-350086 1-го Мая № 167 КРАЕВАЯ ШНГИИЧЕСКЛ БОЛЬНИЦА

АКТ ВНЕДРЕНИЯ

1. НАИМЕНОВАНИЕ ВНЕДРЕННОГО ПРЕДЛОЖЕНИЯ:

Способ дополнительной диагностики степени «окислительного стресса» и эндотоксикоза в условиях острой и хронической патологии (ожоговая травма, гепатопатология, нефропатология).

2. НАИМЕНОВАНИЕ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОЙ РАБОТЫ: «Антиоксидантная система эритроцитов при экстремальных состояниях»,выполнен ной в Кубанской государственной медицинской академии на кафедре биохимии и травматологии.

Научный руководи гель: заведующий кафедрой биохимии профессор П.Г.Сторожук, доцент кафедры биохимии И.И.Павлюченко и доцент кафедры травматологии Е.Г.Лысых

3. ИСПОЛНИТЕЛЬ: аспирант кафедры биохимии Т.В.Еремина.

4. НАИМЕНОВАНИЕ УЧРЕЖДЕНИЯ, ВНЕДРИВШЕГО РАЗРАБОТКУ И ДАТА ВНЕДРЕНИЯ:

Краснодарская краевая клиническая больница. Ноябрь 1998 г.

5. ОСНОВНЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ ВНЕДРЕНИЯ И ИХ ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ, МЕДИКО-СОЦИАЛЬНАЯ, ЭКОНОМИЧЕСКАЯ ЭФФЕКТИВНОСТЬ. Внедренное предложение имеет важное медико-социальное значение, так как в результате применения дополнительных методов диагностики степени «окислительного стресса» и эндотоксикоза удается скорректировать медикаментозные и хирургические методы лечения с применением современных антиоксидантов, что способствует оптимизации процесса терапии и реабилитации больных с ожоговой травмой, острой и хронической гепато- и нефропатологией.

6. ПРИ ВНЕДРЕНИИ ПОЛУЧЕН ГОДОВОЙ ЭКОНОМИЧЕСКИЙ ЭФФЕКТ: Сократились сроки пребывания в стационаре на 6-10 дней, что дало экономический эффект в 8000 -12000 рублей.

Главный врач

Зав.ожоговы м отделен и см

у

Главный бухгалтер