Поиск и изучение лигандов протон-активируемых ионных каналов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.01, кандидат наук Нагаева Элина Ильдаровна

• Нагаева Элина Ильдаровна
• кандидат наук
• 2015

Оглавление диссертации кандидат наук Нагаева Элина Ильдаровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. История открытия ASICs и филогения

1.2. Гены и субъединичный состав ASICs

1.3. Строение и топология

1.3.1. До-кристаллическая эра

1.3.2. Пост-кристаллическая эра

- Экстраклеточный домен (ЭКД)

- Трансмембранный сегмент и ионная пора

- Механизм активации канала

1.4. Локализация и участие в физиологических процессах

1.4.1. ASICs в мозге

1.4.2. Субклеточная локализация

1.4.3. ASICs и синаптическая передача

1.4.4. Участие в синаптической пластичности

1.4.5. Участие в обучении, памяти и тревожных состояниях

1.4.6. Участие в патологических состояниях ЦНС

- Ишемия головного мозга

- Рассеянный склероз

- Эпилепсия

1.4.7. ASICs и боль

1.5. Фармакология ASICs

1.5.1. Синтетические соединения

1.5.2. Эндогенные модуляторы

1.5.3. Токсины из природных ядов

1.6. Обоснование работы

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ

3.1. Действие гидрофобных моноаминов на гомомерные ASICs

3.1.1. Действие на ASIC^ каналы

3.1.2. Действие на ASIC2a каналы

3.1.2. Сравнение действия соединений на нативные и рекомбинантные ASICla и ASIC2a каналы

3.1.3. Действие на ASIClb каналы

3.1.4. Действие на ASIC3 каналы

3.2. Структурно-функциональный анализ

3.2.1. Действие аналогов 9-аминоакридина на ASIC1a и ASIC2a каналы

3.2.2. Действие аналогов фенилциклогексила на ASIC1a и ASIC2a каналы

3.2.3. Действие производных адамантана на ASIC1a и ASIC2a каналы

3.2.4. Выводы по структурно-функциональному анализу

3.3. Анализ механизмов действия гидрофобных моноаминов на протон-активируемые ионные каналы

3.3.1. Сравнение механизмов действия мемантина и 9-аминоакридина на гомомерные ASIC1a каналы

- pH-зависимость действия

3.3.2. Механизм потенцирующего действия ИЭМ-1921 на ASIC2a каналы

- pH-зависимость действия

3.3.3. Потенциал-зависимость ингибирующего и потенцирующего действий

3.3.4. Сочетание ингибирующего и потенцирующего эффекта в пределах одного

канала

3.3.4. Выводы по анализу механизмов действия гидрофобных моноаминов

3.4. Новый эндогенный модулятор ASICs

3.4.1. Действие гистамина на протон-активируемые ионные каналы

3.4.2. Действие гистамина на ASICla каналы

-Возможные механизмы потенцирующего эффекта гистамина

Глава 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ASIC(s) - acid-sensing ion channel(s) - протон-активируемый ионный(е) канал(ы)

nASICs - native ASICs - нативные ASICs

cASICs - chicken ASICs - куриные ASICs

ЦНС - центральная нервная система

ПНС - периферическая нервная система

pH - водородный показатель

PcTX - псалмотоксин

NMDA - N-метил-Б-аспартат

9АА - 9-аминоакридин

ИЭМ - институт экспериментальной медицины

CHO клетки - Chinese hamster ovary - линия клеток яичника китайского хомячка ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота РНК - рибонуклеиновая кислота

Deg/ENaC - дегенерин эпителиальные натриевые каналы ТМ - трансмембранный домен ЭКД - экстраклеточный домен

DRG нейроны - dorsal root ganglion neurons - нейроны задних рогов спинного мозга

рН50 - pH раствора, вызывающего 50% активацию

IC50 - концентрация лиганда, вызывающая 50% ингибирования

EC50 - концентрация лиганда, вызывающая 50% потенцирования

PKA - протеинкиназа А

PICK1 - связывающий протеинкиназу С-альфа белок PSD95 - белок постсинаптического уплотнения-95 AKAP150 - протеинкиназа А заякоревающий белок

pKa - отрицательный десятичный логарифм константы диссоциации кислоты АТФ - аденозинтрифосфат

GABA - гамма-амино масляная кислота

ВПСТ - возбуждающий постсинаптический ток

ВПСП - возбуждающий постсинаптический потенциал

миРНК - малая интерферирующая РНК

CaMKП - кальмодулин-зависимая протеинкиназа II

GMQ - 2-гуанидин-4-метилкуиназолин

НПВС - нестероидные противовоспалительные средства

DAPI - 4',6-диамидино-2-фенилиндол

GFP - зелёный флуоресцентный белок

т - постоянная времени

цАМФ - циклический аденозинмонофосфат

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Поиск и изучение лигандов протон-активируемых ионных каналов»

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. Протон-активируемые ионные каналы (ASICs) относятся к суперсемейству лиганд-управляемых ионных каналов и активируются в ответ на локальное закисление внеклеточной среды.

Впервые протон-вызванные ионные токи были описаны Крышталем и Пидопличко в 1980 году (Krishtal & Pidoplichko, 1980). Авторы предположили, что понижение pH внеклеточной среды активирует популяцию управляемых протонами ионных каналов. Долгое время отсутствие селективных антагонистов порождало различные гипотезы относительно природы протон-вызванных токов. И только клонирование протон-активируемых ионных каналов в середине 90-х годов определило их в новое семейство лиганд-управляемых рецепторов. С этого времени начались полномасштабные исследования по локализации, фармакологии и физиологии ASICs.

Протон-активируемые ионные каналы широко распространены как в периферической (ПНС), так и в центральной нервной системе (ЦНС) позвоночных животных. Плотность экспрессии тех или иных субъединиц сильно отличается в зависимости от локализации. Так, субъединицы ASIC1a, ASIC2a и ASIC2b чаще можно встретить в ЦНС, в таких областях как гиппокамп, миндалевидное тело, мозжечок, полосатое тело, кора больших полушарий и обонятельные луковицы (Alvarez de la Rosa et al., 2002; Bolshakov et al., 2002; Wemmie et al., 2003). В ПНС, напротив, преобладают ASIC1b и ASIC3 субъединицы; их можно встретить в чувствительных нейронах задних корешков спинного мозга, тройничного и блуждающего нервов. Ввиду столь широкого распространения, большое количество исследований показывают вовлечённость протон-активируемых ионных каналов во многие патологические и нормальные физиологические процессы, такие как восприятие болевых стимулов (Wemmie et al., 2006), процессы синаптической пластичности, страх и депрессия (Wemmie et al., 2004), наркотическая зависимость (Kreple et al., 2014). Стоит отметить, что все сведения о физиологической роли протон-активируемых ионных каналов являются косвенными, поскольку основаны на экспериментальных данных, полученных на нокаутных животных.

Основной проблемой в изучении функции, строения и механизмов работы ASIC-

каналов является ограниченный набор фармакологических инструментов, способных

6

избирательно влиять работу каналов с разным субъединичным составом. Так, на настоящий момент обнаружены специфмческие ингибиторы только для гомомеров ASIC1a и ASIC3 псалмотоксин 1 (PcTX1) (Escoubas et al., 2000) и токсин APETx2 (Diochot et al., 2004), соответственно. Таким образом, поиск и разработка стратегий синтеза новых специфических лигандов ASICs является актуальной научной задачей. Обнаружение избирательных соединений даст ценный набор фармакологических инструментов для исследования физиологической функции протон-активируемых ионных каналов в ЦНС.

Цель и задачи работы. Ранее в лаборатории биофизики синаптических процессов ИЭФБ РАН был проведён скрининг гидрофобных моноаминовых соединений из числа блокаторов глутаматных рецепторов на наличие активности в отношении протон-активируемых ионных каналов. Именно этот класс соединений был выбран ввиду их простой химической структуры, включающей небольшую гидрофобную часть и терминальную аминогруппу. Такое строение предполагало решение сразу двух задач: поиск избирательных агонистов/антагонистов среди синтетических соединений, а также движение в сторону выявления эндогенных модуляторов из числа соединений схожих по структуре с гидрофобными моноаминами (катехоламины, серотонин, гистамин и пр.). В предварительных экспериментах на интернейронах гиппокампа крыс были обнаружены четыре блокатора NMDA рецепторов, способных также модулировать протон-вызванные токи через нативные ASICs (nASICs). Эти четыре соединения имели довольно схожие химические структуры, однако оказывали разнонаправленное действие на нативные рецепторы. Два из них, ИЭМ-1921 и ИЭМ-2117, увеличивали амплитуду тока через nASICs при совместной аппликации с кислым раствором. Другие два соединения, 9-аминоакридин и мемантин, напротив, ингибировали токи через nASICs. Соответственно, данная работа стала логичным продолжением проекта, начатого в 2012 году на интеренейронах гиппокампа.

Целью работы является изучение действия гидрофобных моноаминов на протон-активируемые ионные каналы (ASICs), а также поиск эндогенных лигандов этих каналов.

В соответствии с поставленной целью, были сформулированы следующие задачи:

1. Изучить действие четырёх найденных ранее соединений (9-аминоакридин, мемантин, ИЭМ-1921 и ИЭМ-2117) на все возможные гомомерные ASICs, экспрессированные в клетках линии CHO;

2. Выявить структурные компоненты гидрофобных моноаминов, определяющие их действие на протон-активируемые каналы разного субъединичного состава, используя структурно-функциональный подход;

3. Проанализировать механизм действия наиболее активных моноаминов: потенциал-зависимость, кинетику действия, конкуренцию с агонистом;

4. Подобрать и протестировать эндогенные структурные аналоги исследованных соединений на активность в отношении ASICs.

Научная новизна. В данной работе впервые было показано и охарактеризовано действие нового химического класса лигандов протон-активируемых ионных каналов -гидрофобных моноаминов. Эти соединения, имеющие простую химическую структуру и состоящие из компактной гидрофобной части и терминальной аминогруппы, способны разнонаправленно модулировать работу всех функционально-активных гомомеров ASICs, в зависимости от субъединичного состава каналов.

Также были определены некоторые структурные детерминанты действия гидрофобных моноаминов на ASICs. Наличие протонируемой аминогруппы является критичным условием для реализации как ингибирующей, так и потенцирующей активности. Гидрофобная часть может варьировать, при этом V-образные структуры являются более эффективными потенциаторами ASIC2a каналов, чем плоские. Расстояние между гидрофобной группой и аминогруппой определяет потенцирование ASIC1a и ASIC2а каналов. При наличии двух метиленовых спейсеров потенцируются ASIC1a каналы, а при непосредственном примыкании - ASIC2a. Кроме того, был начат анализ механизмов взаимодействия данного класса веществ с ASIC-каналами, показавший, что существует как минимум два различных механизма ингибирования -зависящий и не зависящий от потенциала мембраны.

Впервые был обнаружен эндогенный модулятор ASICs - гистамин, способный избирательно потенцировать ASIC1a каналы. Действие этого соединения зависело от pH активирующего раствора. Максимальное потенцирование достигалось при слабом закислении. Физиологическая роль данного эффекта может состоять в обеспечении

существенного тока через ASIC1a каналы при незначительном закислении в процессе синаптической передачи.

Теоретическая и практическая значимость данной работы заключается в том, что открытие нового класса лигандов протон-активируемых ионных каналов значительно расширило набор фармакологических инструментов, позволяющих избирательно влиять на каналы разного субъединичного состава. Намеченные в данной работе направления (выявленные структурно-функциональные закономерности, комплексность механизмов действия, открытие эндогенного модулятора) сами по себе являются довольно ёмкими, и дальнейшее их изучение представляется перспективным как с точки зрения фундаментальной, так и прикладной науки. Открытие непосредственного действия гистамина на ASICs позволяет по-новому взглянуть на физиологию гистаминергической системы, на её взаимовлияние с другими типами рецепторов. Кроме того, открытие взаимодействия ASICs и гистамина, делает поиск новых модуляторов/активаторов ASICs среди эндогенных моноаминов и их метаболитов весьма перспективным, приближая, тем самым, к более глубокому пониманию физиологической роли данного семейства каналов.

Результаты работы могут быть использованы для чтения лекций по физиологии, биологии клетки и биофизике для студентов биологических и медицинских специальностей высших учебных заведений.

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Гидрофобные моноамины - новый химический класс лигандов протон-активируемых ионных каналов, способных разнонаправленно модулировать их работу, в зависимости от субъединичного состава каналов.

2. Гистамин является избирательным эндогенным потенциатором ASIC1a, действие которого наиболее выражено при слабом закислении внеклеточной среды.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 печатных работах, 2 из которых - статьи в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ для размещения материалов кандидатских диссертаций (в том числе 1 статья в международном журнале), и 8 тезисов.

Апробация работы. Результаты исследования представлены в виде устных и стендовых докладов на Международном конгрессе FENS Featured Regional Meeting (Чехия, Прага, 2013); на Всероссийской молодежной конференции-школе «Нейробиология интегративных функций мозга» (Санкт-Петербург, 2013); на международной школе-конференции «Горизонты современной нейронауки» (Нижний Новгород, 2014); на девятом форуме европейской федерации нейробиологов 9th FENS Forum of Neuroscience (Милан, Италия, 2014); на IV съезде физиологов СНГ «Физиология и здоровье человека» (Сочи, Россия, 2014); на зимней международной научной школе «Современная биология и биотехнологии будущего» (Звенигород, Москва, 2015); на 11-м международном междисциплинарном конгрессе «Нейронаука для медицины и психологии» (Судак, 2015); на Международном конгрессе FENS Featured Regional Meeting (Салоники, Греция, 2015).

Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 124 страницах машинописного текста и состоит общей характеристики работы, обзора литературы по исследуемой теме - глава 1, описания методики - глава 2, описания результатов исследования и их обсуждения - глава 3, заключения - глава 4, выводов и списка литературы, который включает 193 источника (из них 190 иностранных). Работа иллюстрирована 25 рисунками и 7 таблицами.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. История открытия ASICs и филогения

Постоянство внеклеточной среды является необходимым условием гомеостаза нервной системы и организма в целом. Её химический состав должен поддерживаться в строго определённых рамках, обеспечивая нормальную работу клеточных структур. Одним из важнейших показателей, значение которого организму необходимо строго регулировать, является внеклеточная концентрация протонов. У большинства позвоночных в норме этот параметр, или водородный показатель (pH), равняется 7.4, но в результате нормальных или патологических процессов значение его может заметно варьировать. Логично было бы предположить, что в организме на этот случай имеются специальные рН-сенсоры, быстро реагирующие на изменение этого показателя.

Первое упоминание о токах, вызванных быстрым закислением внеклеточной среды, было сделано в 1980-м году Крышталем и Пидопличко (Krishtal & Pidoplichko, 1980). Они показали, что большая часть нейронов, выделенных из спинного и тройничного ганглиев крысы, активируется в ответ на изменение рН омывающего раствора с 7.4 до 6.9. При этом, входящие токи были следствием увеличения проницаемости мембраны для ионов Na+ и К+ (Na+>> К), их амплитуда увеличивалась с повышением концентрации протонов и достигала максимальной в точке рН=5.4. Позже этой же группой советских учёных подобные токи были описаны и в некоторых зонах мозга крысы (Врублёвский и др., 1985). Однако отсутствие избирательных фармакологических агентов и других конкретизирующих методов не позволяло сделать окончательный вывод о существовании нового типа ионных каналов. Доказательство было получено с расцветом молекулярной биологии в середине 90-х годов. Лаздунски с соавторами выделили из мозга крысы участок ДНК, кодирующий последовательность длиной в 526 аминокислоты и экспрессировали комплементарную РНК в ооцитах лягушки Xenopus laevis (Waldmann et al., 1997а). В результате этой манипуляции ооциты стали чувствительны к изменению pH внеклеточной среды: аппликация раствора с pH ниже 6.9 вызывала быстро нарастающий и спадающий вследствие десенситизации ток, подобный тому, который был ранее описан в чувствительных нейронах (Krishtal & Pidoplichko, 1981; Konnerth et al., 1987). Тогда же и было дано название этим рецепторам, характеризующее их как ионные каналы, чувствительные к закислению среды (Acid Sensing Ion Channels или сокращённо ASICs). Это название прочно

закрепилось в научной литературе, однако оно не является вполне корректным, поскольку другие ионные каналы также могут реагировать на изменение pH внеклеточной среды. Многие каналы TRP семейства, характеризующиеся полимодальностью активирующих стимулов, изменяют свою активность в присутствии повышенной концентрации протонов (Numata et al., 2011). Кроме того, протоны ингибируют нативные NMDA рецепторы с IC50 в районе pH = 7.2, вследствие чего около 40% каналов неактивны при физиологических значениях рН (Tang et al., 1990; Traynelis & Cull-Candy, 1990). В связи с этим, в данной работе будет использовано альтернативное название ASICs - "протон-активируемые ионные каналы" (proton-gated ion channels), которое также используется в англоязычной литературе и более корректно описывает рассматриваемый тип рецепторов.

Протон-активируемые ионные каналы - это катионные потенциал-независимые, амилорид-чувствительные ионные каналы, активирующиеся в ответ на увеличение внеклеточной концентрации протонов. Основываясь на данных генетического сиквенса и сходстве вторичной структуры белка, ASICs относят к суперсемейству дегенерин эпителиальных натриевых каналов (DEG/ENaC), к которому также принадлежат эпителиальные натриевые каналы (ENaC), FMRF-амид активируемые каналы (FaNaC) беспозвоночных, PPK (pickpocket) каналы Drosophila melanogaster, дегенирины (DEG) Caenorhabitis elegans, а также hiNaC (human intestine Na+ channels - человеческие Na+ каналы кишечника) и BLINaC (brain- liver-intestine amiloride-sensitive Na+ channel -мозговые - печёночные - кишечные амилорид-чувствительные Na+ каналы) млекопитающих (Kellenberger & Shild, 2002). Последние два типа рецепторов не так давно были переименованы в BASIC (bile acid-sensetive ion channels), поскольку было обнаружено, что они активируются под действием желчных кислот (Lefevre et al., 2014). Такое название им было дано потому, что их гомология с ASICs по аминокислотной последовательности несколько выше, чем у эпителиальных натриевых каналов, хотя они не способны активироваться в ответ на понижение рН. Для всех представителей семейства Deg/ENaC каналов характерна общая вторичная структура белка: короткие NH2 и COOH терминальные цитоплазматические концы, два трансмембранных домена (ТМ1 и ТМ2) и большой внеклеточный цистеин-богатый участок, составляющий более 50% всего белка (Canessa et al., 1994a; Jasti et al., 2007).

Недавнее исследование эволюции генов суперсемейства DEG/ENaC, показало, что эти гены встречаются во всех секвенированных геномах представителей царства Животных (Metazoa). Кроме того, DEG/ENaC гены были найдены в эукариотическом микроорганизме Naeglaria gluberi (Studer et al., 2011). Согласно другому генетически-эволюционному исследованию, проведённому большой группой учёных и опубликованному в журнале Nature (Putnam et al., 2008), гены ASICs accn1-4 и четыре гена ENaC (а, в, у и 8) каналов были получены путём двух-раундовой дупликации цельного генома на этапе зарождения позвоночных животных. Напротив, ген accn5, кодирующий BASIC каналы, обнаруживается задолго до появления позвоночных. Интересно, что у млекопитающих не существует ортологов FaNaC генов улитки Helix aspersa или ортологов PPK кодирующих генов Drosophila, что, по всей видимости, указывает на раннюю дивергенцию генов суперсемейства DEG/ENaC каналов (Рис.1.1).

Рисунок 1.1. Филогенетическое дерево суперсемейства дегенирин эпителиальных

натриевых каналов. Тёмно-серым показаны DEG/ENaC гены позвоночных животных, серым -

эукариотического микроорганизма Naeglaria gluberi (из Studer et а1., 2011)

14

1.2. Гены и субъединичный состав ASICs

Гены, кодирующие ASICs, были идентифицированы у многих видов позвоночных животных, начиная с круглоротых. На данный момент у млекопитающих известно 4 гена accn1-4, кодирующих как минимум 6 различных субъединиц: ASICla, ASIClb, ASIC2a, ASIC2b, ASIC3 и ASIC4. Первые две названные субъединицы являются альтернативными вариантами сплайсинга одного и того же гена accn2 и отличаются только последовательностью аминокислот, формирующей N-терминальный конец (Bassler et al., 2001). При этом, они сильно различаются как по биофизическим характеристикам, так и по профилю экспрессии. Например, крысиные ASICla каналы большей степени проницаемы для Na , чем для K+ (PNa/PK = 7.8), и гораздо менее проницаемы для Ca (PNa/PCa =18.5), широко распространены в центральных отделах нервной системы и могут входить в состав гетеромерных каналов. ASIClb в основном встречаются в сенсорных нейронах периферических ганглиев, гораздо более избирательны к ионам Na+, чем

K+ (PNa/PK = 14), и не пропускают ионы Ca .

Ген accnl вследствие посттранскрипционной модификации даёт два продукта -субъединицы ASIC2a и ASIC2b. Как и в случае с ASIC1 родственные субъединицы отличаются по своим свойствам, и самым важным отличием является неспособность ASIC2b формировать функционально активный гомомерный канал (Lingueglia et al., 1997). Однако в центральной нервной системе позвоночных часто встречаются гетеромеры ASIC1a/2b, которые имеют характеристики, отличные от каналов, в состав которых входит только субъединица ASIC1a. Интересно, что последовательности ASIC2a и ASIC2b отличаются по первым 185 аминокислотам с N-терминального хвоста. Принимая во внимание, что то же самое наблюдается и для сплайс-вариантов ASIC1, можно предположить, что именно этот участок белка отвечает за ионную селективность и активацию канала. Кроме того, схожий механизм образования альтернативных вариантов сплайсинга для двух разных генов одного семейства, может говорить об эволюционно более раннем его формировании, предшествующем дупликации первичного гена.

Ген accn3 впервые был клонирван в 1997 году Лаздунски с соавторами из DRG-нейронов (Dorsal Root Ganglion neurons - нейроны задних рогов спинного мозга) (Waldman et al., 1997). В связи с этим продукт клонированного гена изначально получил название DRASIC и в дальнейшем был переименован в ASIC3. В результате

транскрипции гена accn3 в нервной системе позвоночных животных, кроме человека, образуется один единственный белок длиною в 533 аминокислоты, имеющий 53% идентичности по нуклеотидной последовательности с ближайшим родственным геном accn2. Уникальным свойством каналов ASIC3 является наличие равновесной десенситизации, вследствие чего ток через эти каналы можно условно разделить на стационарный и пиковый компоненты. В связи с этим считается, что ASIC3 вносит вклад в болевую чувствительность пролонгированного действия, связанную с воспалением, травмами и постоперационными повреждениями (Deval et al., 2008; Yen et al., 2009; Deval et al., 2011). У человека обнаружено три различных белковых продукта гена accn3 (ASIC3a, -3b и -3с), различающихся по С-концевому внутриклеточному домену (Deval et al., 2010). Наиболее широко распространённой субъединицей является ASIC3a, и в отличие от крысиных ASIC3, у человека эта субъединица широко распространена не только в периферических сенсорных нейронах, но и в центральной нервной системе (Delaunay et al., 2012).

Субъединица ASIC4 кодируется геном accn4, который был впервые клонирован в 2000 году (Gründer et al., 2000). Продукт этого гена длиной в 539 аминокислоты имеет все признаки строения семейства DEG/ENaC каналов: два трансмембранных домена, короткие цитоплазматические N- и C-концы и большую внеклеточную цистеин-богатую петлю. Несмотря на это, ASIC4 лишь на 45% гомологичен по последовательности всем остальным представителям подсемейства ASICs и не способен активироваться в ответ на повышение концентрации протонов в среде. Не известно также входит ли он в состав функционирующих гетеромерных каналов, подобно ASIC2b субъединице. Транскрипты гена accn4 были идентифицированы во многих отделах ЦНС и спинного мозга позвоночных, при этом отмечается их полное отсутствие в DRG нейронах. Уровень экспрессии этого белка довольно низок в отделах ЦНС, где он был обнаружен, за исключением гипофиза, эндокринную функцию которого он, возможно, способен модулировать. Показано, что ASIC4 влияет на уровень экспрессии ASICla на поверхности мембраны CHO-клеток в случае коэкспрессии этих субъединиц (Donier et al., 2008). Однако недавние работы с нокаутными животными опровергли эти данные, показав, что отсутствие в организме ASIC4 субъединицы никак не сказывается на выраженности эпилептических припадков и реакции замирания, обусловленной страхом, - ASICla-опосредованных процессах (Lin & Chen, 2015). На сегодняшний день

ASIC4 является наименее изученным представителем подсемейства протон-активируемых ионных каналов.

На настоящий момент установлено, что функционально активный канал является тримером (Jasti et al., 2007; Baconguis & Gouaux, 2012; Bartoi et al., 2014) и может состоять как из одинаковых субъединиц (гомотример), так и из разных (гетеротример). Только ASIC1a, -1b, -2a и -3 субъединицы способны формировать рабочие гомомерные каналы; ASIC2b входит в состав функционирующих гетеромерных каналов, но не способен активироваться протонами в гомомерном состоянии. ASIC4 субъединица также неактивна в гомомерном состоянии, и кроме того не была найдена в составе гетеротримерных каналов (Gründer et al., 2000).

В зависимости от субъединичного состава, биофизические характеристики каналов сильно различаются. Хесселагер с соавторами (Hesselager et al., 2004) экспрессировали все возможные варианты гетеро- и гомотримерных (за исключением ASIC4) каналов ASIC крысы в линии клеток яичников китайского хомячка (CHO-K1), с целью выяснить влияние гетеромеризации на основные свойства протон-активируемых ионных каналов. Поскольку в нашей работе мы имели дело исключительно с крысиными гомомерными каналами, экспрессированными в CHO клетках, целесообразно будет описать данные вышеупомянутой статьи, однако только для гомомерных вариантов каналов. Самыми чувствительными к закислению среды из функционально-активных гомомеров оказались ASIC3 - 50% от максимально-возможной амплитуды наблюдалось при рН=6.4 (рН50). ASIC2a, напротив, не активировались, пока pH раствора не понижался до 5.2, при этом рН50 был равен 4.5. Два варианта альтернативного сплайсинга гена accn2 характеризовались средней чувствительностью к рН раствора и не сильно отличались друг от друга по этому параметру: рН50 для ASIC1a составил 5.8, для ASIC1b рН50 равнялся 6.1. Однако две родственные субъединицы сильно отличались по значению коэффициента Хилла (nH) -параметра отражающего кооперативность связывания молекул лиганда с лиганд-связывающим сайтом рецептора (Hill, 1910). Согласно этим данным, связывание первого протона с каналом ASIC^ никак не влияет на дальнейшее связывание дополнительных молекул лиганда, поскольку коэффициент Хилла для этого канала находится в районе единицы (nH=0.75). Для канала ASIC1b, напротив, характерно

кооперативное связывание молекул лиганда, так как коэффициент Хилла больше единицы и равняется 4.8.

Разные по составу каналы ASICs отличаются по кинетике спада ответа (скорости десенситицации рецептора), однако все они являются быстроактивирующимися каналами и максимальная амплитуда ответа достигается за десятые доли секунды. При этом скорость десенситизации сильно зависит от pH активирующего раствора, увеличиваясь с увеличением концентрации протонов. Сводная таблица по всем изученным параметрам четырёх различных гомомеров приведена ниже (Табл. 1). Из неё видно, что самыми медленными по кинетике десенситизации являются ASIC2a гомомеры, ASIC1a и ASIC1b слабо отличаются по этому параметру, а наиболее быстрой десенситизацией обладают ASIC3 каналы, а точнее пиковый компонент их тока.

Субъединица pH вызывающий 50% активации рецептора (pH50) Коэффициент Хилла Постоянная времени десенситизации при pH50 (Tdesens)

ASIC1a 5.8 0.75 0.64±0.09, n=4

ASIC1b 6.1 4.8 0.89±0.11, n=4

ASIC2a 4.5 2.2 1.4±0.2, n=7

ASIC3 6.4 1.60 0.29±0.02, n=9

Таблица 1.1. Функциональные характеристики гомомеров ASICs разного субъединичного состава, экспрессированных в клетках линии CHO (из Hesselager et. al., 2004)

1.3. Строение и топология

Как говорилось в предыдущем разделе, семейство ASICs имеет характерную для всех представителей дегенерин/эпителиальных натриевых каналов топологию белка относительно мембраны клетки. Рассмотрим её более подробно.

1.3.1. До-кристаллическая эра Протон-активируемые ионные каналы состоят из 500-560 аминокислот. Первичная структура белка включает в себя два трансмембранных участка (ТМ1 и ТМ2) в среднем по 20 аминокислот каждый, которых вполне достаточно для пронизывания липидного бислоя мембраны, два коротких цитоплазматических N- и С-конца по 35-90

аминокислот каждый и большой (~370 а.к.) экстраклеточный домен, соединяющий два трансмембранных участка (Рис. 1.2) (Saugstad et al., 2004). Первый экзон, кодирующий внутриклеточный N-конец, ТМ1 и начало экстраклеточной петли (~1/3), является наиболее вариабельным и именно он различается у альтернативных сплайс-вариантов генов accn1 и accn2. Экзоны, кодирующие последующие 2/3 части белка, довольно схожи у всех ASICs и являются ключевой характеристикой, объединяющей данную группу каналов в одно семейство. Этот же участок содержит консервативные цистеиновые остатки экстраклеточной петли, которые, предположительно, стабилизируют её структуру за счёт формирования дисульфидных мостиков (Firsov et al., 1999).

Практически все мембранные белки содержат как минимум один N-гликан в экстраклеточном домене, который необходим для правильного фолдинга белков, стабилизации их вторичной структуры и внутриклеточной транспортировки (Helenius & Aebi, 2004). Все ASICs также содержат хотя бы один сайт N-гликозилирования (Асн-ак-Сер/Тре, где ак - это любая аминокислота кроме пролина).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Нагаева Элина Ильдаровна, 2015 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Врублёвский С.В., Крышталь О.А., Осипчук Ю.В. и др. Протон-активируемая натриевая проводимость в нейронах головного мозга крысы Докл. Акад. Наук СССР. 1985. Т. 284. № 4. С. 990 - 993

2. Ещенко Н.Д. Биохимия психических и нервных болезней / СПб.: Изд-во С.-Петерб. Ун-та. 2004. С. 18

3. Ковальзон В.М. Роль Гистаминергической Системы Головного Мозга В Регуляции Цикла Бодрствование-Сон / Физиология Человека. 2013. Т. 39. № 6. С. 13 -23

4. Adams C.M., Price M.P., Snyder P.M. and Welsh M.J. Tetraethylammonium block of the BNC1 channel / Biophys. J. 1999. V. 76. № 3. P. 1377 - 1383

5. Alijevic O., Kellenberger S. Subtype-specific modulation of acid-sensing ion channel (ASIC) function by 2-guanidine-4-methylquinazoline / J. Biol. Chem. 2012. V. 287. № 43. P. 36059 - 36070

6. Allen N.J., Attwell D. Modulation of ASIC channels in rat cerebellar Purkinje neurons by ischaemia-related signals / J. Physiol. 2002. V. 543. № 2. P. 521 - 529

7. Alvarez de la Rosa D., Zhang P., Shao D., White F., Canessa C.M. Functional implications of the localization and activity of acid-sensitive channels in rat peripheral nervous system / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2002. V. 99. № 4. P. 2326 - 2331

8. Alvarez de la Rosa D., Krueger S.R., Kolar A., Shao D., Fitzsimonds R.M., Canessa C.M. Distribution, subcellular localization and ontogeny of ASIC1 in the mammalian central nervous system / J. Physiol. 2003. V. 546. № 1. P. 77 - 87

9. Anantharam A. and Palmer L.G. Determination of epithelial Na+ channel subunit stoichiometry from single-channel conductances / J. Gen. Physiol. 2007. V. 130. № 1. P. 55 -70

10. Araneda R.C., Lan J.Y., Zheng X., Zukin R.S., Bennett M. V. Spermine and arcaine block and permeate N-methyl-D-aspartate receptor channels. / Biophys. J. 1999. V. 76. № 6. P. 2899-2911

11. Aran T., Tomassini V., Sbardella E., De Ruiter M.B., Matthews L., Leite M.I., Gelineau-Morel R., Cavey A., Vergo S., Craner M., Fugger L., Rovira A., Jenkinson M., Palace J. Targeting ASIC1 in primary progressive multiple sclerosis: Evidence of neuroprotection with amiloride / Brain. 2013. V. 136. № 1. P. 106 - 115

12. Askwith C.C., Cheng C., Ikuma M., Benson C., Price M.P., Welsh M.J. Neuropeptide FF and FMRFamide potentiate acid-evoked currents from sensory neurons and proton-gated DEG/ENaC channels / Neuron. 2000. V. 26. № 1. P. 133 - 141

13. Askwith C.C., Wemmie J.A., Price M.P., Rokhlina T., Welsh M.J. Acid-sensing ion channel 2 (ASIC2) modulates ASIC1 H + -activated currents in hippocampal neurons/ J. Biol. Chem. 2004. V. 279. № 18. P. 18296 - 18305

14. Babini E., Paukert M., Geisler H.S., Gründer S. Alternative splicing and interaction with di- and polyvalent cations control the dynamic range of acid-sensing ion channel 1 (ASIC1) / J. Biol. Chem. 2002. V. 277. № 44. P. 41597 - 41603

15. Baconguis I., Gouaux E. Structural plasticity and dynamic selectivity of acid-sensing ion channel-spider toxin complexes / Nature. 2012. V. 489. № 7416. P. 400 - 405

16. Baconguis I., Bohlen C.J., Goehring A., Julius D., Gouaux E. X-ray structure of acid-sensing ion channel 1-snake toxin complex reveals open state of a Na(+)-selective channel / Cell. 2014. V. 156. № 4. P. 717 - 729

2+ "I-

17. Baron A., Schaefer L., Lingueglia E., Champigny G., Lazdunski M. Zn and H are Coactivators of Acid-sensing Ion Channels / J. Biol. Chem. 2001. V. 276. № 38. P. 35361 -35367

18. Baron A., Waldmann R., Lazdunski M. ASIC-like, proton-activated currents in rat hippocampal neurons / J Physiol. 2002. V. 539. № 2. P. 485 - 494

19. Baron A., Voilley N., Lazdunski M., Lingueglia E. Acid sensing ion channels in dorsal spinal cord neurons / J. Neurosci. 2008. V. 28. № 6. P. 1498 - 1508

20. Baron A., Diochot S., Salinas M., Deval E., Noël J., Lingueglia E. Venom toxins in the exploration of molecular, physiological and pathophysiological functions of acid-sensing ion channels / Toxicon. 2013. V. 75. P. 187 - 204

21. Bartoi T., Augustinowski K., Polleichtner G., Gründer S., Ulbrich M.H. Acid-sensing ion channel (ASIC) 1a/2a heteromers have a flexible 2:1/1:2 stoichiometry / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2014. V. 111. № 22. P. 8281 - 8286

22. Bässler E. L., Ngo-Anh T. J., Geisler H. S., Ruppersberg J. P., Gründer, S. Molecular and functional characterization of acid-sensing ion channel (ASIC) 1b / J. Biol. Chem. 2001. V. 276. №. 36. P. 33782 - 33787

23. Bohlen C.J., Chesler A.T., Sharif-Naeini R., Medzihradszky K.F., Zhou S., King D., Sánchez E.E., Burlingame A.L., Basbaum A.I., Julius D. A heteromeric Texas coral snake

toxin targets acid-sensing ion channels to produce pain / Nature. 2011. V. 479. № 7373. P. 410 - 414

24. Bohlen C.J., Julius D. Receptor-targeting mechanisms of pain-causing toxins: How ow? / Toxicon. 2012. V. 60. № 3. P. 254 - 264

25. Boiko N., Kucher V., Eaton B.A., Stockand J.D. Inhibition of neuronal degenerin/epithelial Na+ channels by the multiple sclerosis drug 4-aminopyridine / J. Biol. Chem. 2013. V. 288. № 13. P. 9418 - 9427

26. Bolshakov K. V, Essin K. V, Buldakova S.L., Dorofeeva N. a, Skatchkov S.N., Eaton M.J., Tikhonov D.B., Magazanik L.G. Characterization of acid-sensitive ion channels in freshly isolated rat brain neurons / Neuroscience. 2002. V. 110. № 4. P. 723-730

27. Brash A.R. Arachidonic acid as a bioactive molecule / Journal of Clinical Investigation. 2001. V. 107. № 11. P. 1339 - 1345

28. Brown R.E., Stevens D.R., Haas H.L. The physiology of brain histamine / Prog. Neurobiol. 2001. V. 63. № 6. P. 637 - 672

29. Cai Q., Qiu C.-Y., Qiu F., Liu T.-T., Qu Z.-W., Liu Y.-M., Hu W.-P. Morphine inhibits acid-sensing ion channel currents in rat dorsal root ganglion neurons / Brain Res. Elsevier. 2014. V. 1554. P. 12 - 20

30. Carnally S.M., Dev H.S., Stewart A.P., Barrera N.P., Van Bemmelen M.X., Schild L., Henderson R.M., Edwardson J.M. Direct visualization of the trimeric structure of the ASIC1a channel, using AFM imaging / Biochem. Biophys. Res. Commun. 2008. V. 372. № 4. P. 752 -755

31. Canessa C.M., Merillat A.M., Rossier B.C. Membrane topology of the epithelial sodium channel in intact cells / Am. J. Physiol. 1994a. V. 267. № 6. P.1682 - 1690

32. Chagot B., Escoubas P., Diochot S., Bernard C., Lazdunski M., Darbon H. Solution structure of APETx2, a specific peptide inhibitor of ASIC3 proton-gated channels / Protein Sci. 2005. V. 14. № 8. P. 2003 - 2010

33. Chalfie M., Wolinsky E. The identification and suppression of inherited neurodegeneration in Caenorhabditis elegans / Nature. 1990. V. 345. № 6274. P. 410 - 416

34. Champigny G., Voilley N., Waldmann R., Lazdunski M. Mutations causing neurodegeneration in Caenorhabditis elegans drastically alter the pH sensitivity and inactivation of the mammalian H+-gated Na+ channel MDEG1 / J. Biol. Chem. 1998. V. 273. № 25. 15418 - 15422

35. Chen H.S.V., Pellegrini J.W., Aggarwal S.K., Lei S.Z., Warach S., Jensen F.E., Lipton S.A. Open-channel block of N-methyl-D-aspartate (NMDA) responses by memantine: therapeutic advantage against NMDA receptor-mediated neurotoxicity/ J. Neurosci. 1992. V.12. № 11. P. 4427 - 4436

36. Chen X., Kalbacher H., Gründer S. The tarantula toxin psalmotoxin 1 inhibits acid-sensing ion channel (ASIC) 1a by increasing its apparent H+ affinity / J. Gen. Physiol. 2005. V. 126. № 1. P. 71 - 79

37. Chen X., Kalbacher H., Gründer S. Interaction of acid-sensing ion channel (ASIC) 1 with the tarantula toxin psalmotoxin 1 is state dependent / J. Gen. Physiol. 2006. V. 127. № 3. P. 267 - 276

38. Chen X., Orser B. a, MacDonald J.F. Design and screening of ASIC inhibitors based on aromatic diamidines for combating neurological disorders / Eur. J. Pharmacol. Elsevier. 2010. V. 648. № 1-3. P. 15 - 23

39. Chesler M. Regulation and modulation of pH in the brain / Physiol. Rev. 2003. V. 83. № 4. P. 1183 - 1221

40. Choi D.W. Glutamate neurotoxicity and diseases of the nervous system/ Neuron. 1988. V. 1. № 8. P. 623 - 634

41. Chu X.-P., Wemmie J.A., Wang W.-Z., Zhu X.-M., Saugstad J.A., Price M.P., Simon R.P., Xiong Z.-G. Subunit-dependent high-affinity zinc inhibition of acid-sensing ion channels / J. Neurosci. 2004. V. 24. № 40. P. 8678 - 8689

42. Chu X.-P., Xiong Z.-G.. Acid-sensing ion channels in pathological conditions / Adv. Exp. Med. Biol. 2013. V. 961. P. 419 - 431

43. Coryell M.W., Ziemann A.E., Westmoreland P.J., Haenfler J.M., Kurjakovic Z., Zha X. ming, Price M., Schnizler M.K., Wemmie J.A. Targeting ASIC1a Reduces Innate Fear and Alters Neuronal Activity in the Fear Circuit / Biol. Psychiatry. 2007. V. 62. № 10. P. 1140 -1148

44. Coryell M.W., Wunsch A.M., Haenfler J.M., Allen J.E., Ziemann A.E., Cook M.N., Dunning J.P., Margaret P., Rainier J.D., Liu Z., Light A.R., Langbehn D.R., Wemmie A. Acid-sensing ion channel-1a in the amygdala, a novel therapeutic target in depression-related behavior / J. Neurosci. 2009. V. 29. № 17. P. 5381 - 5388

45. Coscoy S., Lingueglia E., Lazdunski M., Barbry P. The Phe-Met-Arg-Phe-amide-activated sodium channel is a tetramer / J. Biol. Chem. 1998. V. 273. № 14. P. 8317 - 8322

46. Cowan WM, Kandel ER (2001) A brief history of synapses and synaptic transmission. Synapses, eds Cowan WM, Sudhoff TC, Stevens CF, Davies K (Johns Hopkins University Press, Baltimore), pp 1-87.

47. De Weille J., Bassilana F. Dependence of the acid-sensitive ion channel, ASIC1a, on extracellular Ca2+ ions / Brain Res. 2001. V. 900. № 2. P. 277 - 281

48. DeVries S.H. Exocytosed protons feedback to suppress the Ca current in mammalian cone photoreceptors/ Neuron. 2001. V.32. № 6. P. 1107 - 1117

49. Delaunay A., Gasull X., Salinas M., Noël J., Friend V. Human ASIC3 channel dynamically adapts its activity to sense the extracellular pH in both acidic and alkaline directions / Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2012. V. 109. № 32. P. 13124 - 13129

50. Deval E., Baron A., Lingueglia E., Mazarguil H., Zajac J.M., Lazdunski M. Effects of neuropeptide SF and related peptides on acid sensing ion channel 3 and sensory neuron excitability / Neuropharmacology. 2003. V. 44. № 5. P. 662 - 671

51. Deval E., Noël J., Lay N., Alloui A., Diochot S., Friend V., Jodar M., Lazdunski M., Lingueglia E. ASIC3, a sensor of acidic and primary inflammatory pain / EMBO J. 2008. V. 27 №. 22. P. 3047 - 3055

52. Deval E., Gasull X., Noël J., Salinas M., Baron A., Diochot S., Lingueglia E. Acid-sensing ion channels (ASICs): pharmacology and implication in pain / Pharmacol. Ther. 2010. V. 128. №. 3. P. 549 - 558

53. Deval E., Noël J., Gasull X., Delaunay A., Alloui A., Friend V., Eschalier A., Lazdunski M., Lingueglia E. Acid-sensing ion channels in postoperative pain / J. Neurosci. 2011. V. 31. № 16. P. 6059 - 6066

54. Diochot S., Baron A., Rash L.D., Deval E., Escoubas P., Scarzello S., Salinas M., Lazdunski M. A new sea anemone peptide, APETx2, inhibits ASIC3, a major acid-sensitive channel in sensory neurons / EMBO J. 2004. V. 23. № 7. P. 1516 - 1525

55. Diochot S., Baron A., Salinas M., Douguet D., Scarzello S., Dabert-Gay A.S., Debayle D., Friend V., Alloui A., Lazdunski M., Lingueglia E. Black mamba venom peptides target acid-sensing ion channels to abolish pain / 2012. Nature. 490. № 7421. P. 552 - 555

56. Donier E., Rugiero F., Jacob C., Wood J.N. Regulation of ASIC activity by ASIC4 -New insights into ASIC channel function revealed by a yeast two-hybrid assay / Eur. J. Neurosci. 2008. V. 28. № 1. P. 74-86

57. Dorofeeva N.A., Barygin O.I., Staruschenko A., Bolshakov K. V., Magazanik L.G. Mechanisms of non-steroid anti-inflammatory drugs action on ASICs expressed in hippocampal interneurons / J. Neurochem. 2008. V. 106. № 1. P. 429 - 441

58. Du J., Reznikov L.R., Price M.P., Zha X.-M., Lu Y., Moninger T.O., Wemmie J. a, Welsh M.J. Protons are a neurotransmitter that regulates synaptic plasticity in the lateral amygdala / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2014. V. 111. № 24. P. 8961 - 8966

59. Duan B., Wu L.-J., Yu Y.-Q., Ding Y., Jing L., Xu L., Chen J., Xu T.-L. Upregulation of acid-sensing ion channel ASIC1a in spinal dorsal horn neurons contributes to inflammatory pain hypersensitivity / J. Neurosci. 2007. V. 27. № 41. P. 11139 - 11148

60. Duan B., Wang Y.-Z., Yang T., Chu X.-P., Yu Y., Huang Y., Cao H., Hansen J., Simon R.P., Zhu M.X., Xiong Z.-G., Xu T.-L. Extracellular spermine exacerbates ischemic neuronal injury through sensitization of ASIC1a channels to extracellular acidosis / J. Neurosci. 2011. V. 31. № 6. P. 2101 - 2112

61. Dube G.R., Lehto S.G., Breese N.M., Baker S.J., Wang X., Matulenko M.A., Honore P., Stewart A.O., Moreland R.B., Brioni J.D. Electrophysiological and in vivo characterization of A-317567, a novel blocker of acid sensing ion channels / Pain. 2005. V. 117. № 1-2. P. 88 - 96

62. Escoubas P., De Weille J.R., Lecoq A., Diochot S., Waldmann R., Champigny G., Moinier D., Menez A., Lazdunski M. Isolation of a tarantula toxin specific for a class of proton-gated Na+ channels / J. Biol. Chem. 2000. V. 275. № 33. P. 25116 - 25121

63. Escoubas P., Bernard C., Lambeau G., Lazdunski M., Darbon H. Recombinant production and solution structure of PcTx1, the specific peptide inhibitor of ASIC1a protongated cation channels / Protein Sci. 2003. V. 12. № 7. P. 1332 - 1343

64. Ettaiche M., Guy N., Hofman P., Lazdunski M., Waldmann R. Acid-sensing ion channel 2 is important for retinal function and protects against light-induced retinal degeneration / J. Neurosci. 2004. V. 24. № 5. P. 1005 - 1012

65. Firsov D., Gautschi I., Merillat A.M., Rossier B.C., Schild L. The heterotetrameric architecture of the epithelial sodium channel (ENaC) / EMBO J. 1998. V. 17. № 2. P. 344 -352

66. Firsov D., Robert-Nicoud M., Gründer S., Schild L., Rossier B.C. Mutational analysis of cysteine-rich domains of the epithelium sodium channel (ENaC). Identification of cysteines essential for channel expression at the cell surface / J. Biol. Chem. 1999. V. 274. № 5. P. 2743 - 2749

67. Frey E.N., Pavlovicz R.E., Wegman C.J., Li C., Askwith C.C. Conformational Changes in the Lower Palm Domain of ASICla Contribute to Desensitization and RFamide Modulation / PLoS One. 2013. V. 8. № 8. e71733

68. Friese M.A., Craner M.J., Etzensperger R., Vergo S., Wemmie J.A., Welsh M.J., Vincent A., Fugger L. Acid-sensing ion channel-1 contributes to axonal degeneration in autoimmune inflammation of the central nervous system / Nat. Med. 2007. V. 13. № 12. P. 1483 - 1489

69. Garza A., Lopez-Ramirez O., Vega R., Soto E. The aminoglycosides modulate the acid-sensing ionic channel currents in dorsal root ganglion neurons from the rat / J. Pharmacol. Exp. Ther. 2010. V. 332. № 2. P. 489 - 499

70. Gao J., Duan B., Wang D.G., Deng X.H., Zhang G.Y., Xu L., Xu T. Le. Coupling between NMDA receptor and acid-sensing ion channel contributes to ischemic neuronal death / Neuron. 2005. V. 48. № 4. P. 635 - 646

71. Gonzales E.B., Kawate T., Gouaux E. Pore architecture and ion sites in acid-sensing ion channels and P2X receptors / Nature. 2009. V. 460. № 7255. P. 599 - 604

72. Grifoni S.C., Jernigan N.L., Hamilton G., Drummond H.A. ASIC proteins regulate smooth muscle cell migration / Microvasc. Res. 2008. V. 75. № 2. P. 202 - 210

73. Gründer S., Geissler H. S., Bässler E. L., Ruppersberg, J. P. A new member of acid-sensing ion channels from pituitary gland / Neuroreport. 2000. V. 11. № 8. P. 1607 - 1611

74. Gründer S., Chen X. Structure, function, and pharmacology of acid-sensing ion channels (ASICs): Focus on ASIC1a / Int. J. Physiol. Pathophysiol. Pharmacol. 2010. V. 2. № 2. P. 73 - 94

75. Hammarström S., Hamberg M., Samuelsson B., Duell E.A., Stawiski M., Voorhees J.J. Increased concentrations of nonesterified arachidonic acid, 12L-hydroxy-5,8,10,14-eicosatetraenoic acid, prostaglandin E2, and prostaglandin F2alpha in epidermis of psoriasis / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1975. V. 72. № 12. P. 5130 - 5134

76. Helenius A., Aebi M. Roles of N-linked glycans in the endoplasmic reticulum / Annu. Rev. Biochem. 2004. V. 73. P. 1019 - 1049

77. Hesselager M., Timmermann D.B., Ahring P.K. pH Dependency and desensitization kinetics of heterologously expressed combinations of acid-sensing ion channel subunits / J. Biol. Chem. 2004. V. 279. № 12. P. 11006 - 11015

78. Highstein S.M., Holstein G.R., Mann M.A., Rabbitt R.D. Evidence that protons act as neurotransmitters at vestibular hair cell-calyx afferent synapses / Proc. Natl. Acad. Sci. 2014. V. 111. № 14. P. 5421 - 5426

79. Hill A.V. The possible effects of the aggregation of the molecules of haemoglobin on its oxygen dissociation curve / J. Physiol. 1910. V. 40. P. 4 - 7

80. Holland P.R., Akerman S., Andreou A.P., Karsan N., Wemmie J.A., Goadsby P.J. Acid-sensing ion channel 1: A novel therapeutic target for migraine with aura / Ann. Neurol. 2012. V. 72. № 4. P. 559 - 563

81. Hu W.-W., Chen Z. Role of histamine and its receptors in cerebral ischemia / ACS Chem. Neurosci. 2012. V. 3. № 4. P. 238 - 247

82. Huang R.Q., Chen Z., Dillon G.H. Molecular basis for modulation of recombinant alpha1beta2gamma2 GABAa receptors by protons/ J. Neurophysiol. 2004. V. 92. № 2. P. 883

- 894

83. Huang Y., Jiang N., Li J., Ji Y.-H., Xiong Z.-G., Zha X.-M. Two aspects of ASIC function: Synaptic plasticity and neuronal injury / Neuropharmacology. 2015. V. 94. P. 42 - 48

84. Immke D.C., McCleskey E.W. Lactate enhances the acid-sensing Na+ channel on ischemia-sensing neurons / Nat. Neurosci. 2001. V. 4. № 9. P. 869 - 870

85. Immke D.C., McCleskey E.W. Protons open acid-sensing ion channels by catalyzing relief of Ca2+ blockade / Neuron. 2003. V. 37. № 1. P. 75 - 84

86. Jasti J., Furukawa H., Gonzales E.B., Gouaux E. Structure of acid-sensing ion channel 1 at 1.9 A resolution and low pH / Nature. 2007. V. 449. № 7160. P. 316 - 323

87. Jiang Q., Li M.-H., Papasian C.J., Branigan D., Xiong Z.-G., Wang J.Q., Chu X.-P. Characterization of acid-sensing ion channels in medium spiny neurons of mouse striatum / Neuroscience. 2009. V. 162. № 1. P. 55 - 66

88. Jing L., Chu X.-P., Jiang Y.-Q., Collier D.M., Wang B., Jiang Q., Snyder P.M., Zha X-M. N-Glycosylation of Acid-Sensing Ion Channel 1a Regulates Its Trafficking and Acidosis-Induced Spine Remodeling / J. Neurosci. 2012. V. 32. № 12. P. 4080 - 4091

89. Jones N.G., Slater R., Cadiou H., McNaughton P., McMahon S.B. Acid-induced pain and its modulation in humans / J. Neurosci. 2004. V. 24. № 48. P. 10974 - 10979

90. Jovov B., Tousson A., McMahon L.L., Benos D.J. Immunolocalization of the acid-sensing ion channel 2a in the rat cerebellum/ Histochem. Cell. Biol. 2003. V. 119. № 6. P. 437

- 446

91. Kadurin I., Golubovic A., Leisle L., Schindelin H., Gründer S. Differential effects of N-glycans on surface expression suggest structural differences between the acid-sensing ion channel (ASIC) 1a and ASIC1b / Biochem. J. 2008. V. 412. P. 469 - 475

92. Kellenberger S., Hoffmann-Pochon N., Gautschi I., Schneeberger E., Schild L. On the molecular basis of ion permeation in the epithelial Na+ channel / J. Gen. Physiol. 1999. V. 114. № 1. P. 13 - 30

93. Kellenberger S., Schild L. Epithelial sodium channel/degenerin family of ion channels: a variety of functions for a shared structure / Physiol. Rev. 2002. V. 82. № 3. P. 735 - 767

94. Kellenberger S., Gautschi I., Schild L. Mutations in the epithelial Na+ channel ENaC outer pore disrupt amiloride block by increasing its dissociation rate / Mol. Pharmacol. 2003. V. 64. № 4. P. 848 - 856

95. Kellenberger S., Grutter T. Architectural and Functional Similarities between Trimeric ATP-Gated P2X Receptors and Acid-Sensing Ion Channels / J. Mol. Biol. 2015. V. 427. № 1. P. 54 - 66

96. Kleyman T.R., Cragoe E.J. Amiloride and its analogs as tools in the study of ion transport / J. Membr. Biol. 1988. V. 105. № 1. P. 1 - 21

97. Konnerth A., Lux H.D., Morad M. Proton-induced transformation of calcium channel in chick dorsal root ganglion cells / J. Physiol. 1987. P. 386. P. 603 - 633

98. Kreple C.J., Lu Y., Taugher R.J., Schwager-Gutman A.L., Du J., Stump M., Wang Y., Ghobbeh A., Fan R., Cosme C. V, Sowers L.P., Welsh M.J., Radley J.J., LaLumiere R.T., Wemmie J. a. Acid-sensing ion channels contribute to synaptic transmission and inhibit cocaine-evoked plasticity / Nat. Neurosci. 2014. V. 17. № 8. P. 1083-1091

99. Krishtal O.A., Pidoplichko V.I. A receptor for protons in the nerve cell membrane / Neuroscience. 1980. V. 5. № 12. P. 2325 - 2327

100. Krishtal O.A., Pidoplichko V.I. Receptor for protons in the membrane of sensory neurons / Brain Res. 1981. V. 214. № 1. P. 150 - 154

101. Kuduk S.D., Chang R.K., Wai J.M.-C., Di Marco C.N., Cofre V., DiPardo R.M., Cook S.P., Cato M.J., Jovanovska A., Urban M.O., Leitl M., Spencer R.H., Kane S. a, Hartman G.D., Bilodeau M.T. Amidine derived inhibitors of acid-sensing ion channel-3 (ASIC3) / Bioorg. Med. Chem. Lett. Elsevier. 2009. V. 19. № 15. P. 4059 - 4063

102. Kuduk S.D., Di Marco C.N., Bodmer-Narkevitch V., Cook S.P., Cato M.J., Jovanovska A., Urban M.O., Leitl M., Sain N., Liang A., Spence R.H., Kane S.A., Hartman G.D., Bilodeau

M.T. Synthesis, structure-activity relationship, and pharmacological profile of analogs of the ASIC-3 inhibitor A-317567 / ACS Chem. Neurosci. 2010. V. 1. № 1. P. 19 - 24

103. Lefevre C.M., Diakov A., Haerteis S., Korbmacher C., Gründer S., Wiemuth D. Pharmacological and electrophysiological characterization of the human bile acid-sensitive ion channel (hBASIC) / Pflugers Arch. 2014. V. 466. № 2. P. 253 - 263

104. Lei Z., Li X., Wang G., Fei J., Meng T., Zhang X., Yu J., Yu J., Li J. Inhibition of acid-sensing ion channel currents by propofol in rat dorsal root ganglion neurons / Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2014. V. 41. № 4. P. 295 - 300

105. Leng T., Lin J., Cottrell J.E., Xiong Z.-G. Subunit and frequency-dependent inhibition of Acid Sensing Ion Channels by local anesthetic tetracaine / Mol. Pain. 2013. V. 9. № 1. P. 27 - 35

106. Lennox WG. The effect on epileptic seizures of varying the composition of the respired air/ Journal of Clinical Investigation. 1929. V.6. P.23 - 24

107. Li T., Yang Y., Canessa C.M. Interaction of the aromatics Tyr-72/Trp- 288 in the interface of the extracellular and transmembrane domains is essential for proton gating of acid-sensing ion channels / J. Biol. Chem. 2009. V. 284. № 7. P. 4689 - 4694

108. Li M., Inoue K., Branigan D., Kratzer E., Hansen J.C., Chen J.W., Simon R.P., Xiong Z.-G. Acid-sensing ion channels in acidosis-induced injury of human brain neurons / J. Cereb. Blood Flow Metab. 2010. V. 30. № 6. P. 1247 - 1260

109. Li W.-G., Yu Y., Zhang Z.-D., Cao H., Xu T.-L. ASIC3 channels integrate agmatine and multiple inflammatory signals through the nonproton ligand sensing domain / Mol. Pain. 2010. V. 6. P. 88 - 98

110. Li T., Yang Y., Canessa C.M. Asp433 in the closing gate of ASIC1 determines stability of the open state without changing properties of the selectivity filter or Ca2+ block / J. Gen. Physiol. 2011. V. 137. № 3. P. 289 - 297

111. Li T., Yang Y., Canessa C.M. Outlines of the pore in open and closed conformations describe the gating mechanism of ASIC1 / Nat. Commun. 2011. V. 2. № 399. P. 1 - 7

112. Li W.G., Yu Y., Huang C., Cao H., Xu T. Le. Nonproton ligand sensing domain is required for paradoxical stimulation of Acid-sensing Ion Channel 3 (ASIC3) channels by amiloride / J. Biol. Chem. 2011. V. 286. № 49. P. 42635 - 42646

113. Liechti L.A., Berneche S., Bargeton B., Iwaszkiewicz J., Roy S., Michielin O., Kellenberger S. A combined computational and functional approach identifies new residues

involved in pH-dependent gating of ASICla / J. Biol. Chem. 2010. V. 285. № 21. P. 16315 -16329

114. Lin J., Chu X., Maysami S., Li M., Si H., Cottrell J.E., Simon R.P., Xiong Z. Inhibition of acid sensing ion channel currents by lidocaine in cultured mouse cortical neurons / Anesth. Analg. 2011. V. 112. № 4. P. 978 - 981

115. Lin S., Sun W., Chen C. Neuropharmacology genetic exploration of the role of acid-sensing ion channels / Neuropharmacology. 2015. V. 94. P. 99 - 118

116. Lin W., Ogura T., Kinnamon S.C. Acid-activated cation currents in rat vallate taste receptor cells / J. Neurophysiol. 2002. V. 88. № 1. P. 133 - 141

117. Lin Y.C., Liu Y.C., Huang Y.Y., Lien C.C. High-density expression of Ca2+-permeable ASIC1a channels in NG2 glia of rat hippocampus / PLoS One. 2010. V. 5. № 9. P. 1 - 8

118. Lingueglia E., de Weille J. R., Bassilana F., Heurteaux C., Sakai H., Waldmann R., Lazdunski M. A modulatory subunit of acid sensing ion channels in brain and dorsal root ganglion cells / J. Biol. Chem. 1997. V. 272. № 47. P. 29778 - 29783

119. Lingueglia E., Deval E., Lazdunski M. FMRFamide-gated sodium channel and ASIC channels: A new class of ionotropic receptors for FMRFamide and related peptides / Peptides.

2006. V. 27. № 5. P. 1138 - 1152

120. Lingueglia E. Acid-sensing ion channels in sensory perception / J. Biol. Chem. 2007. V. 282. № 24. P. 17325 - 17329

121. Mango D., Barbato G., Piccirilli S., Panico M.B., Feligioni M., Schepisi C., Graziani M., Porrini V., Benarese M., Lanzillotta A., Pizzi M., Pieraccini S., Sironi M., Blandini F., Nicoletti F., Mercuri N.B., Imbimbo B.P., Nistico R. Electrophysiological and metabolic effects of CHF5074 in the hippocampus: Protection against in vitro ischemia / Pharmacol. Res. 2014. V. 81. P. 83 - 90

122. Mazzuca M., Heurteaux C., Alloui A., Diochot S., Baron A., Voilley N., Blondeau N., Escoubas P., Gelot A., Cupo A., Zimmer A., Zimmer A.M., Eschalier A., Lazdunski M. A tarantula peptide against pain via ASIC1a channels and opioid mechanisms / Nat. Neurosci.

2007. V. 10. № 8. P. 943 - 945

123. McKhann G.M. Seizure termination by acidosis depends on ASIC1a / Neurosurgery.

2008. V. 63. № 4. P. 816 - 822

124. Miesenbock G., De Angelis D.A., Rothman J.E. Visualizing secretion and synaptic transmission with pH-sensitive green fluorescent proteins/ Nature. 1998. V. 394. № 6689. P. 192 - 195

125. Mitchell W.G, Grubbs R.C. Inhibition of audiogenic seizures by carbon dioxide/ Science. 1956. V. 123. № 3189. P. 223 - 224

126. Molliver D.C., Immke D.C., Fierro L., Paré M., Rice F.L., McCleskey E.W. ASIC3, an acid-sensing ion channel, is expressed in metaboreceptive sensory neurons / Mol. Pain. 2005. V. 1. P. 35 - 43

127. Morris R.G.M. Spatial localization does not require the presence of local cues / Learning and Motivation. 1981. V. 12. № 2. P. 239 - 260

128. Nagaeva E.I., Potapieva N.N., Tikhonov D.B. The Effect of Hydrophobic Monoamines on Acid-Sensing Ion Channels ASIC1B/ Acta Naturae. 2015. V. 7. № 25. P. 27 - 33

129. Nicholson G.M., Little M.J., Tyler M., Narahashi T. Selective alteration of sodium channel gating by Australian funnel-web spider toxins / Toxicon. 1996. V. 34. № 11-12. P. 1443 - 1453

130. Numata T., Kiyonaka S., Kato K., Takahashi N., Mori Y (2011). Activation of TRP channels in mammalian systems. In: Zhu MX (ed.). TRP Channel. CRC Press: Boca Raton, FL, pp. 43-90.

131. Olson T.H., Riedl M.S., Vulchanova L., Ortiz-Gonzalez X.R., Elde R. An acid sensing ion channel (ASIC) localizes to small primary afferent neurons in rats / Neuroreport. 1998. V. 9. № 6. P. 1109 - 1113

132. Palmer M.J., Hull C., Vigh J., von Gersdorff H. Synaptic cleft acidification and modulation of short-term depression by exocytosed protons in retinal bipolar cells/ J. Neurosci. 2003. V. 23. № 36. P.11332 - 11341

133. Pasternack M., Smirnov S., Kaila K. Proton modulation of functionally distinct GABAa receptors in acutely isolated pyramidal neurons of rat hippocampus/ Neuropharmacology. 1996. V. 35. № 9 - 10. P. 1279 - 1288

134. Paukert M., Babini E., Pusch M., Grunder S. Identification of the Ca2+ blocking site of acid- sensing ion channel (ASIC) 1: implications for channel gating / J. Gen. Physiol. 2004. V. 124. № 4. P. 383 - 394

135. Paukert M., Chen X., Polleichtner G., Schindelin H., Grunder S. Candidate amino acids involved in H+ gating of acid-sensing ion channel 1a / J. Biol. Chem. 2008. V. 283. № 1. P. 572 - 581

136. Pignataro G., Simon R.P., Xiong Z.G. Prolonged activation of ASIC1a and the time window for neuroprotection in cerebral ischaemia/ Brain. 2007. V. 130. Pt. 1. P. 151 - 158

137. Price M.P., McIlwrath S.L., Xie J., Cheng C., Qiao J., Tarr D.E., Sluka K.A., Brennan T.J., Lewin G.R., Welsh M.J. The DRASIC cation channel contributes to the detection of cutaneous touch and acid stimuli in mice / Neuron. 2001. V. 32. № 6. P. 1071 - 1083

138. Price M.P., Gong H., Parsons M.G., Kundert J.R., Reznikov L.R., Bernardinelli L., Chaloner K., Buchanan G.F., Wemmie J.A., Richerson G.B., Cassell M.D., Welsh M.J. Localization and behaviors in null mice suggest that ASIC1 and ASIC2 modulate responses to aversive stimuli/ Genes. Brain Behav. 2014. V. 13. № 2. P. 179 - 194

139. Putnam N.H., Butts T., Ferrier D.E., Furlong R.F., Hellsten U., Kawashima T., Robinson-Rechavi M., Shoguchi E., Terry A., Yu J.K., Benito-Gutierrez E.L., Dubchak I., Garcia-Fernandez J., Gibson-Brown J.J., Grigoriev I.V., Horton A.C., de Jong P.J., Jurka J., Kapitonov V.V., Kohara Y., Kuroki Y., Lindquist E., Lucas S., Osoegawa K., Pennacchio L.A., Salamov A.A., Satou Y., Sauka-Spengler T., Schmutz J., Shin I.T., Toyoda A., Bronner-Fraser M., Fujiyama A., Holland L.Z., Holland P.W., Satoh N., Rokhsar D.S. The amphioxus genome and the evolution of the chordate karyotype / Nature. 2008. V. 453. № 7198. P. 1064 -1071

140. Rahman T., Smith E.S.J. In silico assessment of interaction of sea anemone toxin APETx2 and acid sensing ion channel 3 / Biochem. Biophys. Res. Commun. 2014. V. 450. № 1. P. 384 - 389

141. Salinas M., Rash L.D., Baron A., Lambeau G., Escoubas P., Lazdunski M. The receptor site of the spider toxin PcTx1 on the proton-gated cation channel ASIC1a / J. Physiol. 2006. V. 570. № 2. P. 339 - 354

142. Salinas M., Besson T., Delettre Q., Diochot S., Boulakirba S., Douguet D., Lingueglia E. Binding site and inhibitory mechanism of the mambalgin-2 pain-relieving peptide on acid-sensing ion channel 1a / J. Biol. Chem. 2014. V. 289. № 19. P. 13363 - 13373

143. Saez N.J., Mobli M., Bieri M., Chassagnon I.R., Malde A.K., Gamsjaeger R., Mark A.E., Gooley P.R., Rash L.D., King G.F. A dynamic pharmacophore drives the interaction

between Psalmotoxin-1 and the putative drug target acid-sensing ion channel 1a / Mol. Pharmacol. 2011. V. 80. № 5. P. 796 - 808

144. Saugstad J. A., Roberts J. A., Dong J., Zeitouni S., Evans R. J. Analysis of the membrane topology of the acid-sensing ion channel 2a / J. Biol. Chem. 2004. V. 279. № 53. P. 55514 - 55519

145. Scherkl R., Hashem A., Frey H.-H. Histamine in brain — its role in regulation of seizure susceptibility / Epilepsy Research. 1991. V. 10. № 2-3. P. 111 - 118

146. Schild L., Schneeberger E., Gautschi I., Firsov D. Identification of Amino Acid Residues in the a, P, and y Subunits of the Epithelial Sodium Channel (ENaC) Involved in Amiloride Block and Ion Permeation / J. Gen. Physiol. 1997. V. 109. № 1. P. 15 - 26

147. Sheng S., McNulty K.A., Harvey J.M., Kleyman T.R. Second transmembrane domains of ENaC subunits contribute to ion permeation and selectivity / J. Biol. Chem. 2001. V. 276. № 47. P.44091 - 44098

148. Sherwood T.W., Askwith C.C. Endogenous arginine-phenylalanine-amide-related peptides alter steady-state desensitization of ASIC1a / J. Biol. Chem. 2008. V. 283. № 4. P. 1818 - 1830

149. Sherwood T., Franke R., Conneely S., Joyner J., Arumugan P., Askwith C. Identification of protein domains that control proton and calcium sensitivity of ASIC1a / J. Biol. Chem. 2009. V. 284. № 41. P. 27899 - 27907

150. Sherwood T.W., Lee K.G., Gormley M.G., Askwith C.C. Heteromeric ASIC channels composed of ASIC2b and ASIC1a display novel channel properties and contribute to acidosis-induced neuronal death / J. Neurosci. 2011. V. 31. № 26. P. 9723 - 9734

151. Sluka K.A., Winter O.C., Wemmie J.A. Acid-sensing ion channels: A new target for pain and CNS diseases / Curr. Opin. Drug Discov. Devel. 2009. V. 12. № 5. P. 693 - 704

152. Smith E.S., Cadiou H., McNaughton P. Arachidonic acid potentiates acid-sensing ion channels in rat sensory neurons by a direct action / Neuroscience. 2007. V. 145. № 2. P. 686 -698

153. Snyder P.M., Cheng C., Prince L.S., Rogers J.C., Welsh M.J. Electrophysiological and biochemical evidence that DEG/ENaC cation channels are composed of nine subunits / J. Biol. Chem. 1998. V. 273. № 2. P. 681 - 684

154. Somjen G.G. Acidification of interstitial fluid in hippocampal formation caused by seizures and by spreading depression / Brain Research. 1984. V. 311. № 1. P. 186 - 188

155. Staruschenko A., Medina J.L., Patel P., Shapiro M.S., Booth R.E., Stockand J.D. Fluorescence resonance energy transfer analysis of subunit stoichiometry of the epithelial Na+ channel / J. Biol. Chem. 2004. V. 279. № 26. P. 27729 - 27734

156. Staruschenko A., Dorofeeva N.A., Bolshakov K. V., Stockand J.D. Subunit-dependent cadmium and nickel inhibition of acid-sensing ion channels / Dev. Neurobiol. 2007. V. 67. № 1. P. 97 - 107

157. Studer R.A., Person E., Robinson-Rechavi M., Rossier B.C. Evolution of the epithelial sodium channel and the sodium pump as limiting factors of aldosterone action on sodium transport / Physiol. Genomics. 2011. V. 43. № 13. P. 844 - 854

158. Swartz K.J., MacKinnon R. Hanatoxin modifies the gating of a voltage-dependent K+ channel through multiple binding sites / Neuron. 1997. V. 18. № 4. P. 665 - 673

159. Tang C.M., Dichter M., Morad M. Modulation of the N-methyl-D-aspartate channel by extracellular H+ Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1990. V. 87. № 16. P. 6445 - 6449

160. Taugher R.J., Lu Y., Wang Y., Kreple C.J., Ghobbeh A., Fan R., Sowers L.P., Wemmie J.A. The Bed Nucleus of the Stria Terminalis Is Critical for Anxiety-Related Behavior Evoked by CO2 and Acidosis / J. Neurosci. 2014. V. 34. № 31. P. 10247 - 10255

161. Traynelis S.F., Cull-Candy S.G. Proton inhibition of N-methyl-D-aspartate receptors in cerebellar neurones / Nature. 1990. V. 345. № 6273. P. 347 - 350

162. Ugawa S., Ueda T., Ishida Y., Nishigaki M., Shibata Y., Shimada S. Amiloride-blockable acid-sensing ion channels are leading acid sensors expressed in human nociceptors / J. Clin. Invest. 2002. V. 110. № 8. P. 1185 - 1190

163. Ugawa S., Inagaki A., Yamamura H., Ueda T., Ishida Y., Kajita K., Shimizu H., Shimada S. Acid-sensing ion channel-1b in the stereocilia of mammalian cochlear hair cells / Neuroreport. 2006. V. 17. № 12. P. 1235 - 1239

164. Ugawa S., Ishida Y., Ueda T., Inoue K., Nagao M., Shimada S. Nafamostat mesilate reversibly blocks acid-sensing ion channel currents / Biochem. Biophys. Res. Commun. 2007. Vol. 363. № 1. P. 203 - 208

165. Velisek L., Dreier J.P., Stanton P.K., Heinemann U., Moshe S.L. Lowering of extracellular pH suppresses low-Mg(2+)-induces seizures in combined entorhinal cortex-hippocampal slices/ Exp. Brain. Res. 1994. V. 101. № 1. P. 44 - 52

166. Vergo S., Craner M.J., Etzensperger R., Attfield K., Friese M.A., Newcombe J., Esiri M., Fugger L. Acid-sensing ion channel 1 is involved in both axonal injury and demyelination in multiple sclerosis and its animal model / Brain. 2011. V. 134. № 2. P. 571 - 584

167. Vessey J.P., Stratis A.K., Daniels B.A., Da Silva N., Jonz M.G., Lalonde M.R., Baldridge W.H., Barnes S. Proton-mediated feedback inhibition of presynaptic calcium channels at the cone photoreceptor synapse/ J. Neurosci. 2005. V. 25. № 16. P. 4108 - 4117

168. Voilley N. Acid-sensing ion channels (ASICs): new targets for the analgesic effects of non-steroid anti-inflammatory drugs (NSAIDs) / Curr. Drug Targets. Inflamm. Allergy. 2004. V. 3. № 1. P. 71 - 79

169. Wahlgren N.G., Ahmed N. Neuroprotection in cerebral ischaemia: facts and fancies -the need for new approaches / Cerebrovasc. Dis. 2004. V. 17. Suppl. 1. P. 153 - 166

170. Waldmann R., Champigny G., Voilley N., Lauritzen I., Lazdunski M. The mammalian degenerin MDEG, an amiloride-sensitive cation channel activated by mutations causing neurodegeneration in Caenorhabditis elegans / J. Biol. Chem. 1996. V. 271. № 18. P. 10433 -10436

171. Waldmann R., Bassilana F., De Weille J., Champigny G., Heurteaux C., Lazdunski M. Molecular cloning of a non-inactivating proton-gated Na+ channel specific for sensory neurons / Biochemistry. 1997a. V. 272. № 34. P. 20975 - 20978

172. Waldmann R., Champigny G., Bassilana F., Heurteaux C., Lazdunski M. A protongated cation channel involved in acid-sensing / Nature. 1997b. V. 386. № 6621. P. 173 - 177

173. Wang W., Duan B., Xu H., Xu L., Xu T. Le. Calcium-permeable acid-sensing ion channel is a molecular target of the neurotoxic metal ion lead / J. Biol. Chem. 2006. V. 281. № 5. P.2497 - 2505

174. Wang W., Yu Y., Xu T.L. Modulation of acid-sensing ion channels by Cu in cultured hypothalamic neurons of the rat / Neuroscience. 2007. V. 145. № 2. P. 631 - 641

175. Waxman S.G. Axonal conduction and injury in multiple sclerosis: the role of sodium channels / Nat. Rev. Neurosci. 2006. V. 7. № 12. P. 932 - 941

176. Wemmie J. A, Chen J., Askwith C.C., Hruska-Hageman A.M., Price M.P., Nolan B.C., Yoder P.G., Lamani E., Hoshi T., Freeman J.H., Welsh M.J. The acid-activated ion channel ASIC contributes to synaptic plasticity, learning, and memory/ Neuron. 2002. V. 34. № 3. P. 463 - 477

177. Wemmie J. a, Askwith C.C., Lamani E., Cassell M.D., Freeman J.H., Welsh M.J. Acid-sensing ion channel 1 is localized in brain regions with high synaptic density and contributes to fear conditioning/ J. Neurosci. 2003. V. 23. № 13. P. 5496 - 5502

178. Wemmie J. A, Coryell M.W., Askwith C.C., Lamani E., Leonard a S., Sigmund C.D., Welsh M.J. Overexpression of acid-sensing ion channel 1a in transgenic mice increases acquired fear-related behavior / Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2004. V. 101. № 10. P. 36213626.

179. Wemmie J.A, Price M.P., Welsh M.J. Acid-sensing ion channels: advances, questions and therapeutic opportunities / Trends Neurosci. 2006. V. 29. № 10. P. 578 - 586

180. Wemmie J. a, Zha X., Welsh M.J. Acid-Sensing Ion Channels (ASICs) and pH in Synapse Physiology. 2008. № 5. P. 661-681.

181. Weng J.Y., Lin Y.C., Lien C.C. Cell type-specific expression of acid-sensing ion channels in hippocampal interneurons / J. Neurosci. 2010. V. 30. № 19. P. 6548-6558

182. Woodbury D.M., Rollins L.T., Henrie J.R., Jones J.C., Sato T. Effects of carbon dioxide and oxygen on properties of experimental seizures in mice/ Am. J. Physiol. 1956. V.184. № 1. P.202 - 208

183. Woodhull A.M. Ionic blockage of sodium channels in nerve/ J. Gen. Physiol. 1973. V. 61. № 6. P. 687-708

184. Xiong Z.G., Zhu X.M., Chu X.P., Minami M., Hey J., Wei W.L., MacDonald J.F., Wemmie J.A., Price M.P., Welsh M.J., Simon R.P. Neuroprotection in ischemia: Blocking calcium-permeable acid-sensing ion channels / Cell. 2004. V. 118. № 6. P. 687 - 698

185. Xiong Z.-G., Chu X.-P., Simon R.P. Acid sensing ion channels—novel therapeutic targets for ischemic brain injury / Front. Biosci. 2007. V. 12. P. 1376 - 1386

186. Yen Y.T., Tu P.H., Chen C.J., Lin Y.W., Hsieh S.T., Chen C.C. Role of acid-sensing ion channel 3 in sub-acute-phase inflammation / Mol. Pain. 2009. V. 5. № 1. P. 1 - 16

187. Yu Y., Chen Z., Li W., Cao H., Feng E., Yu F., Liu H., Jiang H., Xu T. A nonproton ligand sensor in the acid-sensing ion channel / Neuron. 2010. V. 68. P. 61-72

188. Yu Y., Li W.G., Chen Z., Cao H., Yang H., Jiang H., Xu T. Le. Atomic level characterization of the nonproton ligand-sensing domain of ASIC3 channels / J. Biol. Chem. 2011. V. 286. № 28. P. 24996 - 25006

189. Zha X.M., Wemmie J.A., Welsh M.J. ASIC1a is a postsynaptic proton receptor that influences the density of dendritic spines/ Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2006. V. 103. № 44. P.16556 - 16561

190. Zha X., Costa V., Harding A.M.S., Reznikov L., Benson J., Welsh M.J. ASIC2 Subunits Target Acid-Sensing Ion Channels to the Synapse via an Association with PSD-95/ J. Neurosci. 2009. V. 29. № 26. P. 8438 - 8446

191. Zhang M., Wang H., Tracey K.J. Regulation of macrophage activation and inflammation by spermine: a new chapter in an old story / Crit. Care Med. 2000. V. 28. № 4 P.60 - 66

192. Ziemann A.E, Schnizler M.K., Albert G.W., Severson M.A., Howard M.A. 3rd., Welsh M.J., Wemmie J.A. Seizure termination by acidosis depends on ASIC1a/ Nat. Neurosci. 2008. V. 11. № 7. P. 816 - 822

193. Ziemann A.E., Allen J.E., Dahdaleh N.S., Drebot I.I., Coryell M.W., Wunsch A.M., Lynch C.M., Faraci F.M., Howard M. a, Welsh M.J., Wemmie J. a. The amygdala is a chemosensor that detects carbon dioxide and acidosis to elicit fear behavior / Cell. Elsevier Ltd. 2009. V. 139. № 5. P. 1012 - 1021