Первичное действие аденовирусного онкогена E1A на JNK/cJUN путь и регуляцию клеточного цикла у трансформантов E1A+E1B-19кДа и E1A+cHa-Ras тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат биологических наук Бричкина, Анна Игоревна

• Бричкина, Анна Игоревна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бричкина, Анна Игоревна

1.1. Актуальность проблемы.

1.2. Цель и задачи исследования.

ГЛАВА 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Общая характеристика фенотипа трансформированных клеток.

2.2. Аденовирусный онкоген El А: структура и клеточные функции.

2.2.1. Мишени белка El А - регуляторы клеточного цикла.

2.2.2. El А в регуляции транскрипции на уровне модуляции активности хроматина.

2.2.3. Транскрипционный фактор API как мишень онкобелка El А.

2.2.4. Цитоплазматические мишени Е1А.

2.2.5. El А как «опухолевый супрессор».

2.2.6. Индукция апоптоза белком El А: секвестрирование р53.

2.3. Клеточные функции белка Е1В-19кДа.

2.4. Функции белка Ras в проведении сигнала и трансформации клеток.

2.5. Регуляция клеточного цикла.

2.5.1. Комплексы циклинов с циклин-зависимыми киназами как ключевые регуляторы прохождения клетки по циклу.

2.5.2. Белки семейства ретинобластомы - негативные регуляторы перехода G1/S.

2.6. Транскрипционный фактор API.

2.6.1. Структура и регуляция активности cJun.

2.6.2. cJun в пролиферации.

2.6.3. cJun в трансформации и опухолевой прогрессии клеток.

2.6.4. cJun как регулятор апоптоза.

2.7. Стресс киназы семейства JNK.

2.7.1. Регуляция активности киназ JNK.

2.7.2. JNK как регулятор транскрипционного фактора API.

2.7.3. Роль JNK в пролиферации и опухолевой прогрессии.

2.8. Малые ГТФазы семейства Rho.

2.8.1. Роль Rho ГТФаз в реорганизации цитоскелета и трансформации клеток.

2.8.2. Роль белков Rho в регуляции транскрипции генов и пролиферации.

ГЛАВА 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

3.1. Клеточные линии и их культивирование, получение стабильных трансформантов, временные трансфекции.

3.2. Анализ клеточного цикла методом проточной цитофлуориметрии.

3.3. Конструирование плазмид.

3.4. Иммуноблотинг и иммунопреципитация.

3.5. Анализ киназной активности in vitro.

3.6. Метаболическое мечение.

3.7. Оценка люциферазной активности для тестирования активации JNK/cJun пути.

3.8. Оценка роста клеток в полужидком агаре.

3.9. Оценка апоптотической гибели клеток методом фрагментации ДНК.

3.10. Кривая роста.

3.11. Ядерно-цитоплазматическое фракционирование клеток.

3.12. Оценка активности малой ГТФазы Cdc42.

ГЛАВА 4. РЕЗУЛЬТАТЫ

4.1. Влияние онкобелка Е1А на активность JNK/cJun пути.

4.1.1. Описание эстрадиол-индуцибельных ДНК-конструкций, кодирующих онкобелок El А.

4.1.2. Е1А временно активирует киназу JNK.

4.1.3. Е1А активирует транскрипционный фактор cJun за счет активации киназы JNK.

4.1.4. Е1А активирует киназу JNK в цитоплазме.

4.1.5. Активация JNK/cJun пути онкобелком Е1А опосредована активацией Cdc42->MEKK1->MKK4,7 сигнального каскада.

4.1.6. Анализ функционирования JNK/cJun пути у Е1Аэкспрессирующих трансформантов.

4.2. Исследование способности Е1А-экспрессирующих трансформантов регулировать прохождение по клеточному циклу.

4.2.1. Характеристика Е1А-экспрессирующих трансформантов.

4.2.2. Анализ содержания циклинов и киназ G1-фазы и формирование их комплексов после облучения.

4.2.3. Анализ функционирования ингибитора p21/Wafl у Е1А-экспрессирующих трансформантов после облучения.

4.2.4. Анализ активности циклин-зависимых киназ после облучения.

4.2.5. Роль фосфорилирования в регуляции функционирования циклин-зависимых киназ у El А-трансформантов.

4.2.6. Состояние фосфорилирования белков семействаpRb у ElА-трансформантов.

Г JIB ABA 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Первичное действие аденовирусного онкогена E1A на JNK/cJUN путь и регуляцию клеточного цикла у трансформантов E1A+E1B-19кДа и E1A+cHa-Ras»

1.1. Актуальность проблемы

Одним из основных направлений современной клеточной биологии является изучение молекулярных механизмов превращения нормальной клетки в опухолевую. Значительный прогресс в исследовании молекулярных механизмов канцерогенеза связан с открытием группы генов, которые были названы протоонкогенами. В нормальных клетках они участвуют в регуляции клеточной пролиферации на всех уровнях передачи митогенных сигналов: от рецепторов и промежуточных белков сигнальных каскадов (ras, c-src) до ядерных транскрипционных факторов (с-тус, c-jun, c-fos). Другим достижением клеточной биологии стало открытие так называемых опухолевых супрессоров (р53, семейство pRb) -клеточных генов, инактивация которых резко увеличивает вероятность развития новообразований в связи с нарушением строгого контроля целостности генома. Большинство известных протоонкогенов и опухолевых супрессоров являются компонентами сигнальных путей, контролирующих клеточный цикл, апоптоз, целостность генома и дифференцировку. Превращение нормальных клеток в опухолевые является многоэтапным процессом, связанным с совместной активацией протоонкогенов и инактивацией опухолевых супрессоров, приводящих к приобретению клетками признаков неопластической трансформации: автономной пролиферации, отсутствия контактного ингибирования пролиферации и независимости роста клеток от субстрата, генетической нестабильности (Hanahan and Weinberg, 2000).

В случае вирус-индуцированной трансформации было показано, что продукты ранних генов ДНК-содержащих вирусов, в частности гена Е1А аденовирусов, взаимодействуют и изменяют активность многочисленных клеточных белков. Основными мишенями El А являются негативные регуляторы клеточного цикла, транскрипционные факторы и белкимодуляторы активности хроматина, большинство из которых либо опухолевые супрессоры, либо протоонкогены. Е1А взаимодействует с опухолевыми супрессорами - белками семейства ретинобластомы (pRb), ингибиторами циклиновых киназ p21/Wafl и p27/Kip, инактивация которых достаточна для перехода клеток из фазы G1 в S. Е1А может напрямую влиять на транскрипционную программу клетки, изменяя cJun-зависимую транскрипцию генов. Известно, что транскрипционный фактор cJun необходим для пролиферации клеток, поэтому влияние Е1А на cJun может быть важным этапом Е1А-индуцированной трансформации. Менее изученным способом влияния Е1А на экспрессию генов является изменение активности хроматина за счет взаимодействия с белками рЗОО/СВР, PCAF и CtBP, модулирующими ацетилирование гистонов (Frisch and Mymryk, 2002). Белок El А имеет преимущественно ядерную локализацию и, соответственно, ядерные мишени. Однако ряд данных свидетельствует о наличии мишеней Е1А среди цитоплазматических белков, таких как RACK1, Ran и регуляторные субъединицы 26S протеасомы, что говорит в пользу возможного влияния Е1А на сигнальные компоненты клетки. Е1А является хорошо изученным и часто используемым онкогеном в работах по выяснению механизмов трансформации клеток. В итоге многочисленных исследований были картированы сайты взаимодействия онкобелка Е1А с клеточными белками-регуляторами пролиферации, а с помощью генетических подходов были выявлены районы, ответственные за иммортализацию и трансформацию клеток грызунов. Поиск мишеней онкобелка Е1А может служить перспективным направлением для выявления новых клеточных мишеней - потенциальных кандидатов на роль онкогенов или опухолевых супрессоров.

Известно, что введение гена Е1А в первичные клетки грызунов одновременно со стимуляцией пролиферации запускает программу апоптоза, и с низкой частотой Е1А иммортализует клетки грызунов.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Бричкина, Анна Игоревна

ВЫВОДЫ

1. Онкобелок Е1А активирует в цитоплазме Сёс42->МЕКК1->МКК4,7-> ЖК сигнальный каскад, что приводит к повышению трансактивации транскрипционного фактора с1ип.

2. За активацию ЖК/с1ип пути отвечает Ы-концевой участок онкобелка Е1А (а.к. 4-26).

3. Первичное действие онкобелка Е1А, вызывающее активацию ЖК и с.Гип, сохраняется в стабильных Е1А-трансформантах при комплементации со вторым онкогеном, подавляющим Е1А-индуцированный апоптоз. Активность с.Гип-димеров в стабильных Е1А-трансформантах связана не только с действием онкобелка Е1А, а дополнительно модифицируется комплементирующим онкогеном.

4. Комплементация Е1А с онкогеном cHa-Ras вызывает полную морфологическую трансформацию эмбриональных фибробластов крысы, при которой нарушается работа контрольных точек клеточного цикла, тогда как онкоген Е1В-19кДа при комплементации с El А позволяет получить линию с сохранением способности осуществлять Gl/S-блок клеточного цикла после повреждения ДНК.

5. В процессе трансформации мишенями онкобелка El А являются негативные регуляторы клеточного цикла - pRb и p21/Wafl, которые инактивируются независимо от действия коплементирующего онкогена. Инактивация pRb и p21/Wafl не является достаточным условием для нерегулируемой пролиферации Е1А-трансформантов.

6. Блок G1/S после облучения у Е1А-трансформантов, связанный с подавлением активности комплексов CyclE-Cdk2, не зависит от характера фосфорилирования опухолевого супрессора pRb.

СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ

ДИССЕРТАЦИИ

1. Бричкина А.И., Тарарова Н.Д., Аксенов Н.Д., Поспелова Т.В. Изучение функционирования ингибитора циклин-зависимых киназ p27/Kip в клетках-трансформантах Е1А+Е1В-19кДа и ElA+cHa-Ras, различающихся по способности реализовать G1-блок при сывороточном голодании. Цитология. 2000. 42 (12): 1148-1153.

2. Бричкина А.И., Тарарова Н.Д., Аксенов Н.Д., Поспелов В.А., Поспелова Т.В. Трансформанты, полученные из эмбриональных фибробластов крысы комплементацией онкогенов Е1А+Е1В-19кДа и ElA+cHa-Ras, различаются по способности реализовать блок G1/S в условиях сывороточного голодания. Цитология. 2001. 43 (11): 1024-1030.

3. Булавин Д.В., Тарарова Н.Д., Бричкина А.И., Аксенов Н.Д., Поспелов В.А., Поспелова Т.В. Перенос онкогенов Е1А и Е1В-19кДа в эмбриональные фибробласты крысы не отменяет способности трансформантов останавливаться в клеточном цикле после у-облучения. Мол. Биол. 2002. 36 (1): 58-65.

4. Бричкина А.И., Аксенов Н.Д., Поспелов В.А., Поспелова Т.В. Анализ механизмов реализации кратковременного блока G1/S в трансформантах Е1А+Е1В-19кДа после облучения. Цитология. 2003. 45 (12): 1203-1210.

5. Brichkina A., Aksenov N., Pospelov V., Pospelova Т. Mechanism of Gl/S check-point control in ElA+ElB-19kDa transformed cells following DNA damage. ISREC Conference on Cell and Molecular Biology of Cancer. Lausanne, Switzerland, January 22-25, 2003. P. 33.

6. Brichkina A., Angel P., Herrlich P. Activation of JNK kinase by El A oncoprotein. The International Summer School: Molecular Mechanisms in Homeostasis and Disease. Island of Spetses (Greece), 29 August - 08 September 2003.

7. Brichkina A., Angel P., Herrlich P. Activation of JNK kinase by El A oncoprotein. Beatson International Cancer Conference "Cell Cycle, Senescence, Apoptosis and Cancer". Glasgow, Scotland, June 20-23, 2004. Abstract book, № 42.

8. Brichkina A., Angel P., Pospelova Т., Herrlich P. Activation of JNK/cJun by adenoviral E1A oncoprotein. FEBS-EMBO Advanced Lecture Course: Molecular Mechanisms in Signal Transduction and Cancer. Island of Spetses (Greece), August 15-26, 2005.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В нашей работе мы выявили новый аспект плейотропного действия онкобелка Е1А на клетку - быстрое влияние на транскрипционную программу начиная с цитоплазмы, где он вызывает активацию Сс1с42->МЕКК1->МКК4,7->ЖК сигнального каскада, приводящую в конечном итоге к активации транскрипционного фактора сЛт. Ранее уже отмечалось, что Е1А может влиять на активность Сс1с42, но на уровне транскрипции, тогда как мы впервые показали прямое действие Е1А на Сс1с42—>ЖК->с1ип сигнальный каскад. По всей видимости, активация Сс1с42 может выступать важным этапом действия онкогена Е1А, причем, возможно, не только на уровне активации ЖК/с-Гип каскада, как мы обнаружили, но и, вероятно, за счет реорганизации цитоскелета.

Эксперименты по изучению первичного действия Е1А позволили выявить участок белка Е1 А, отвечающего за активацию сЛт - это крайний ]Ч-концевой участок (а.к. 4-26). Ранее было показано, что онкоген Е1А с делетированным ТЧ-концевым участком не может трансформировать клетки. Кроме того, известно, что сМп-/- клетки плохо пролиферируют, быстро стареют и не могут быть трансформированы онкогенами. Следовательно, активация именно JNK/cJun пути, вероятно, является одним из важнейших событий в процессе Е1А-индуцированной трансформации.

Первичное действие онкогена Е1А на активность cJun как транскрипционного фактора проявляется и в стабильных Е1А-экспрессирующих клеточных линиях, в которых El А интегрирован в геном вместе с генами Е1В-19кДа или cHa-Ras, блокирующими апоптоз и вызывающими трансформацию. Однако действие онкобелка Ras дополнительно усиливает активность димеров cJun/ATF2 вероятно за счет постоянной активации разных ветвей МАР-киназного каскада, чего не происходит в случае комплементации El А с геном El В. Так как известно, что повышенная активация димеров cJun/ATF2 может быть причиной независимости пролиферации от ростовых факторов, поэтому не исключено, что у трансформантов ElA+Ras высокая активность cJun/ATF2 может являться основой становления признака автономной пролиферации.

Мишенями El А в клетке являются как протоонкоген c-jun, так и опухолевые супрессоры pRb и p21/Wafl, изменение функционирования которых может быть достаточным для индукции пролиферации онкобелком El А. Однако, как мы показали, инактивации pRb и p21/Waf недостаточно для полной потери контроля за клеточным циклом у Е1А-экспрессирующих клеток. Функционирование онкогена Е1В-19кДа приводит к появлению у Е1А-трансформантов способности осуществлять блок G1/S клеточного цикла, который связан с подавлением активности комплексов CyclE-Cdk2, но не за счет действия ингибитора p21/Wafl, а, вероятно, за счет изменений уровня фосфорилирования Cdk2. Ключевыми мишенями комплексов CyclE-Cdk2, определяющими вход в фазу S, являются не белки семейства pRb, а другие регуляторы индукции репликации ДНК.

Известно, что действие онкобелка Е1А на транскрипционный фактор с1ип и опухолевые супрессоры рШэ и р21/^аП связано как со стимуляцией пролиферации клеток, так и одновременно с запуском программы апоптотической гибели клетки. Вызовет ли онкоген Е1А трансформацию клетки с полной потерей контроля прохождения по клеточному циклу или такой контроль сохранится; будет ли клетка иметь высокую про-апоптотичскую готовность или станет устойчивой к повреждающим воздействиям - это исход, который будет зависеть от того, как будет изменена система передачи сигнала в цитоплазме клетки вторым онкогеном. Обнаруженное нами парадоксальное действие антиапоптотического гена Е1В, связанное не только с подавлением программы Е1А-индуцированного апоптоза, но и с восстановлением способности клеток блокировать прохождение по клеточному циклу после стрессорных воздействий, свидетельствует о более сложных механизмах становления и проявления трансформированного фенотипа.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бричкина, Анна Игоревна, 2005 год

1. Бричкина А.И., Аксенов Н.Д., Поспелов В.А., Поспелова Т.В. 2003. Анализ механизмов реализации кратковременного блока в 1/8 в трансформантах Е1А+Е1В-19кДа после облучения. Цитология. 45 (12): 1203-1210.

2. Копнин Б.П. 2002. Неопластическая клетка. Основные свойства и механизмы их возникновения. Практическая онкология. 3 (4): 229235.

3. Кураш Ю.К., Розанов Ю.М., Булавин Д.В., Поспелов В.А., Поспелова Т.В. 1998. Анализ структуры клеточного цикла и апоптоза Е1Ааё5-иммортализованных клеток крысы после действия ДНК-повреждающих агентов. Мол. Биол. 32 (2): 349-357.

4. Adler V., Franklin C.C., Kraft A.S. 1992. Phorbol esters stimulate the phosphorylation of c-Jun but not v-Jun: regulation by the N-terminal delta domain. Proc Natl Acad Sci USA. 89(12): 5341-5.

5. Akusjarvi G. 1993. Proteins with transcription regulatory properties encoded by human adenoviruses. Trends Microbiol. 1:163-170

6. Alevizopoulos K., Catarin В., Vlach J., Amati B. 1998. A novel function of adenovirus El A is required to overcome growth arrest by the Cdk2 inhibitor p27Kip. EMBO J 17: 5987-5997.

7. Alevizopoulos K., Vlach J., Hennecke S., Amati B. 1997. Cyclin E and c-Myc promote cell proliferation in the presence of pl6INK4a and of hypophosphorylated retinoblastoma family proteins. EMBO J. 16: 53225333

8. Angel P., Karin M. 1991. The role of Jun, Fos and the AP-1 complex in cell-proliferation and transformation. Biochim Biophys Acta. 1072(2-3): 129-57.

9. Aprelikova O., Xiong Y., Liu E.T. 1995. Both pl6 and p21 families of cyclin-dependent kinase (CDK) inhibitors block the phosphorylation of cyclin-dependent kinases by the CDK-activating kinase. J. Biol. Chem. 270: 18195-18197.

10. Arata Y., Fujita M., Ohtani K., Kijima S., Kato J.Y. 2000. Cdk2-dependent and -independent pathways in E2F-mediated S phase induction. .J Biol. Chem. 275:6337-45

11. Arias J., Alberts A.S., Brindle P., Claret F.X., Smeal Т., Karin M., Feramisco J., Montminy M. 1994. Activation of cAMP and mitogen responsive genes relies on a common nuclear factor. Nature. 370(6486): 226-9.

12. Bagchi S., Raychaudhuri P., Nevins JR. 1990. Adenovirus E1A proteins can dissociate heteromeric complexes involving the E2F transcription factor: a novel mechanism for El A trans-activation. Cell. 62(4):659-69.

13. Bakiri L., Lallemand D., Bossy-Wetzel E., Yaniv M. 2000. Cell cycle-dependent variations in c-Jun and JunB phosphorylation: a role in the control of cyclin D1 expression. EMBO J. 19(9):2056-68.

14. Barlat I., Fesquet .D, Brechot C., Henglein B., Dupuy d'Angeac A., Vie A., Blanchard J.M. 1993. Loss of the Gl-S control of cyclin A expression during tumoral progression of Chinese hamster lung fibroblasts. Cell Growth Differ. 4(2):105-13.

15. Bartek J., Lukas J. 2001 a. P27 destruction: Cksl pulls the trigger. Nat. Cell. Biol. 3:95-98.

16. Bartek J., Lukas J. 2001 6. Are all cancer genes equal? Nature 411: 10011002.

17. Bayley S. and Mymryk J. 1994. Adenovirus El A proteins and transformation. Int. J. One. 5: 425-444.

18. Behrens A., Jochum W., Sibilia M., Wagner E.F. 2000. Oncogenic transformation by ras and fos is mediated by c-Jun N-terminal phosphorylation. Oncogene. 19(22): 2657-63.

19. Behrens A., Sibilia M., Wagner E.F. 1999. Amino-terminal phosphorylation of c-Jun regulates stress-induced apoptosis and cellular proliferation. Nat Genet. 21(3): 326-9.

20. Ben-Porath I. and Weinberg R. 2005. The signals and pathways activating cellular senescence. Int J Biochem Cell Biol. 37(5): 961-76.

21. Binetruy B., Smeal T., Karin M. 1991. Ha-Ras augments c-Jun activity and stimulates phosphorylation of its activation domain. Nature. 351(6322): 122-7.

22. Boguski M.S., MacCormick F. 1993. Proteins regulating Ras and its relatives. Nature 366: 643- 654.

23. Bossy-Wetzel E., Bakiri L., Yaniv M. 1997. Induction of apoptosis by the transcription factor c-Jun. EMBO J. 16(7): 1695-709.

24. Bottazzi M.E., Zhu X., Bohmer R.M., Assoian R.K. 1999. Regulation of p21(cipl) expression by growth factors and the extracellular matrix reveals a role for transient ERK activity in G1 phase. J. Cell Biol. 146: 1255-1264

25. Boyle W.J., Smeal T., Defize L.H., Angel P., Woodgett J.R., Karin M., Hunter T. 1991. Activation of protein kinase C decreases phosphorylation of c-Jun at sites that negatively regulate its DNA-binding activity. Cell. 64(3): 573-84.

26. Braga V. 1999. Small GTPases and regulation of cadherin dependent cell-cell adhesion. J. Clin. Pathol. 52: 197-202.

27. Braga V. 2000. The crossroads between cell-cell adhesion and motility. Nat Cell Biol. 2(10): E182-4.

28. Brichkina A., Wilhelm D., Diekmann A., Pospelova T., Angel P., Herrlich P. 2005. Extranuclear adenoviral El A activates JNK through Cdc42. In progress.

29. Bringold F., Serrano M. 2000. Tumor suppressors and oncogenes in cellular senescence. Exp. Gerontol. 35:317-329

30. Brown P.H., Alani R., Preis L.H., Szabo E., Birrer M.J. 1993. Suppression of oncogene-induced transformation by a deletion mutant of c-jun. Oncogene. 8(4):877-86.

31. Cai K., Dynlacht B.D. 1998. Activity and nature of p21(WAFl) complexes during the cell cycle. Proc Natl Acad Sci USA. 95(21):12254-9.

32. Cajal S., Sanchez-Prieto R. Modulation of PI3K/Akt pathway by Ela mediates sensitivity to cisplatin. Oncogene. 21 (46): 7131-6.

33. Campbell S.L., Khosravi-Far R., Rossman K. L., Clark G.J., Der C.J. 1998. Increasing complexity of Ras signaling. Oncogene 17: 1395-1413.

34. Chattopadhyay D., Ghosh M.K., Mai A., Harter M.L. 2001. Inactivation of p21 by El A leads to the induction of apoptosis in DNA-damaged cells. J. Virol. 75: 9844-9856.

35. Chen G., Branton P.E., Yang E., Korsmeyer S.J., Shore G.C. 1996. Adenovirus E1B 19-kDa death suppressor protein interacts with Bax but not with Bad. J. Biol. Chem. 271:24221-24225.

36. Chen S., Gardner D.G. 2004. Suppression of WEE 1 and stimulation of CDC25A correlates with endothelin-dependent proliferation of rat aortic smooth muscle cells. J Biol Chem. 279(14): 13755-63.

37. Chen J., Saha P., Kornbluth S., Dynlacht B.D., Dutta A. 1996. Cyclin-binding motifs are essential for the function of p21CIPl. Mol. Cell. Biol. 16: 4673-4682.

38. Cheng M., Olivier P., Diehl J.A., Fero M., Roussel M.F., Roberts J.M., Sherr C.J. 1999. The p21(Cipl) and p27(Kipl) CDK 'inhibitors' are essential activators of cyclin D-dependent kinases in murine fibroblasts. EMBOJ. 18: 1571-1583.

39. Chiariello M., Gomez E., Gutkind J. 2000. Regulation of cyclin-dependent kinase (Cdk) 2 Thr- 160 phosphorylation and activity by mitogen-activated kinase in late G1 phase. Biochem. J. 349: 869-876

40. Chiou S.K., Tseng C.C., Rao L., White E. 1994. Functional complementation of the adenovirus E1B 19-kilodalton protein with Bcl-2 in the inhibition of apoptosis in infected cells. J Virol. 68:6553-6566

41. Chiou S.K., White E. 1998. Inhibition of ICE-like proteases inhibits apoptosis and increases virus production during adenovirus infection. Virology 244:108-118

42. Clark W., Gillespie D.A. 1997. Transformation by v-Jun prevents cell cycle exit and promotes apoptosis in the absence of serum growth factors. Cell Growth Differ. 8(4): 371-80.

43. Classon M., Dyson N. 2001. P107 and pl30: versatile proteins with interesting pockets. Exp. Cell. Res. 264: 135-147.

44. Clurman B.E., Sheaff R.I., Thress K., Groudine M., Roberts J. 1996. Turnover of cyclin E by the ubiquitin-proteasome pathway is regulated by cdk2 binding and cyclin phosphorylation. Genes. Dev. 10: 1979-1990

45. Cobrinik D. 2005. Pocket proteins and cell cycle control. Oncogene. 24(17): 2796-809.

46. Coso O.A., Chiariello M., Yu J.C., Teramoto H., Crespo P., Xu N., Miki T., Gutkind JS. 1995. The small GTP-binding proteins Racl and Cdc42 regulate the activity of the JNK/SAPK signaling pathway. Cell. 81(7): 1137-46.

47. Coverley D., Pelizon C., Trewick S., Laskey R.A. 2000. Chromatin-bound Cdc6 persists in S and G2 phases in human cells, while soluble Cdc6 is destroyed in a cyclin A-cdk2 dependent process. J. Cell Sci. 113:1929-38

48. Dannenberg J.H., van Rossum A., Schuijff L., te Riele H. 2000. Ablation of the retinoblastoma gene family deregulates G(l) control causing immortalization and increased cell turnover under growth-restricting conditions. Genes Dev. 14(23): 3051-64.

49. Davis RJ. 2000. Signal transduction by the JNK group of MAP kinases. Cell. 103(2):239-52.

50. De Gregori J., Leone G., Miron A., Jakoi L., Nevin J.R. 1997. Distinct roles for E2F proteins in cell growth control and apoptosis. Proc. Natl. Acad. Sci. 94: 7245-7250.

51. Debbas M., White E. 1993. Wild-type p53 mediates apoptosis by E1A, which is inhibited by E1B. Genes Dev. 7: 546-554.

52. Delavaine L., La Thangue N.B. 1999. Control of E2F activity by p21Wafl/Cipl. Oncogene 18: 5381-5392.

53. Deleu L., Shellard S., Alevizopoulos K., Amati B., Land H. 2001. Recruitment of TRRAP required for oncogenic transformation by El A. Oncogene. 20 (57): 8270-5.

54. Devary Y, Gottlieb RA, Lau LF, Karin M. 1991. Rapid and preferential activation of the c-jun gene during the mammalian UV response. Mol Cell Biol. 11(5): 2804-11.

55. Diffley J.F. 2001. DNA replication: building the perfect switch. Curr.1. Biol. 11(9): 367-370

56. Douglas J. and Quinlan M. 1996. Structural limitations of the Ad5 El A 12S nuclear localization signal. Virology 220:339-49.

57. Duyndam MC., van Dam H., Smits PH, Verlaan M., van der Eb A., Zantema A. 1999. The N-terminal transactivation domain of ATF2 is a target for the co-operative activation of the c-jun promoter by p300 and 12S E1A. Oncogene. 18 (14): 2311-2321.

58. Duyndam MC., van dam H., van der Eb A., Zantema A. 1996. The CR1and CR3 domains of the adenovirus type 5 El A proteins can independently mediate activation of ATF-2. J Virol. 70 (9): 5852-9.

59. Dyson N. 1998. The regulation of E2F by pRB-family proteins. Genes. Dev. 12: 2245-62.

60. Eferl R., Wagner EF. 2003. AP-1: a double-edged sword in tumorigenesis. Nat Rev Cancer. 3(11): 859-68.

61. El Deiry W.S., Tokino T., Vlculescu V.E., Levy D.B., Parsons R., Trent J.M., Lin D., Merser W.E., Kinzler K.W., Vogelstein B. 1993. Wafl, a potential mediator of p53 tumor supression. Cell 75: 817-825.

62. Endter C, Dobner T. 2004. Cell transformation by human adenoviruses.

63. V Curr Top Microbiol Immunol. 273: 163-214.

64. Evan G.I., Wyllie A.H., Gilbert C.S., Littlewood T.D., Land H., Brooks M., Waters C.M., Penn L.Z., Hancock D.C. 1992. Induction of apoptosis in fibroblasts by c-myc protein. Cell 69:119-28

65. Ewen M.E. 2000. Where the cell cycle and histones meet. Genes Dev. 14: 2265-2270

66. Ezhevsky S.A., Nagahara H., Vocero-Akbani A.M., Gius D.R., Wei M.C., Dowdy S.F. 1997. Hypo-phosphorylation of the retinoblastoma protein (pRb) by cyclin D:Cdk4/6 complexes results in active pRb. Proc. Natl. Acad. Sci. 94: 10699-10704

67. Faha B., Harlow E., Lees E. 1993. The adenovirus ElA-associated kinase consists of cyclin E-p33cdk2 and cyclin A-p33cdk2. J. Virol. 67: 24562465.

68. Falck J., Mailand N., Syljuasen R.G., Bartek J., Lukas J. 2001. The ATM-Chk2-Cdc25A checkpoint pathway guards against radioresistant DNA synthesis. Nature 410: 766-767.

69. Farrow S.N., White J.H., Martinou I., Raven T., Pun K.T., Grinham C.J., Martinou J.C., Brown R. 1995. Cloning of a bcl-2 homologue by interaction with adenovirus E1B 19K. Nature 375: 431-436

70. Findeisen M., El-Denary M., Kapitza T., Graf R., Strausfeld U. 1999. Cyclin A-dependent kinase activity affects chromatin binding of ORC, Cdc6, and MCM in egg extracts of Xenopus laevis. Eur. J. Biochem. 264:415-426

71. Flinterman M., Guelen L., Ezzati-Nik S., Killick R., Melino G., Tominaga K., Mymryk JS., Gaken J., Tavassoli M. 2005. El A activates transcription of p73 and Noxa to induce apoptosis. J Biol Chem. 280(7): 5945-59.

72. Frisch SM. and Mymryk JS. 2002. Adenovirus-5 E1A: paradox and paradigm. Nat Rev Mol Cell Biol. 3 (6): 441-52.

73. Frisch SM. 1991. Antioncogenic effect of adenovirus El A in human tumor cells.Proc Natl Acad Sei USA. 88(20): 9077-81.

74. Frisch SM. 1994. E1A induces the expression of epithelial characteristics. J Cell Biol. 127 (4): 1085-96.

75. Galaktionov K., Chen X., Beach D. 1996. Cdc25 cell-cycle phosphatase as a target of c-myc. Nature 382: 511-517.

76. Galaktionov K., Lee A.K., Eckstein J., Draetta G., Meckler J., Loda M., Beach D. 1995. CDC25 phosphatases as potential human oncogenes. Science 269: 1575-1577.

77. Gallo KA., Johnson GL. 2002. Mixed-lineage kinase control of JNK and p38 MAPK pathways. Nat Rev Mol Cell Biol. 3(9):663-72

78. Geng Y, Whoriskey W, Park MY, Bronson RT, Medema RH, Li T, Weinberg RA, Sicinski P. 1999. Rescue of cyclin D1 deficiency by knockin cyclin E. Cell. 97(6):767-77.

79. Geng Y., Yu Q., Sicinska E., Das M., Schneider JE., Bhattacharya S., Rideout WM., Bronson RT., Gardner H., Sicinski P. 2003. Cyclin E ablation in the mouse. Cell. 114(4): 431-43.

80. Graham FL., van der Eb AJ. 1973. A new technique for the assay of infectivity of human adenovirus 5 DNA. Virology. 52(2): 456-67.

81. Grigoriadis AE., Schellander K., Wang ZQ., Wagner EF. 1993. Osteoblasts are target cells for transformation in c-fos transgenic mice. J Cell Biol. 122(3):685-701.

82. Grooteclaes ML., Frisch SM. 2000. Evidence for a function of CtBP in epithelial gene regulation and anoikis. Oncogene. 19(33):3823-8.

83. Grossman S.R. 2001. p300/CBP/p53 interaction and regulation of the p53 response. Eur J. Biochem. 268:2773-2778

84. Gupta S., Barrett T., Whitmarsh A.J., Cavanagh J., Sluss H.K., Derijard B., Davis RJ. 1996. Selective interaction of JNK protein kinase isoforms with transcription factors. EMBO J. 15(11):2760-70.

85. Guttridge D.C., Albanese C., Reuther I.Y., Pestell R.G. Baldwin A.S. 1999. NF-kappaB controls cell growth and differentiation through transcriptional regulation of cyclin Dl. Mol. Cell Biol. 5785-5799.

86. Hagmeyer B.M., Angel P., van Dam H. Modulation of AP-l/ATF transcription factor activity by the adenovirus-ElA oncogene products. Bioessays. 1995. 17: 621-9.

87. Hahn W. and Weinberg R. 2002. Rules for making human tumor cells. N Engl J Med. 347 (20): 1593-603.

88. Ham J., Babij C., Whitfield J., Pfarr C.M., Lallemand D., Yaniv M., Rubin L.L. 1995. A c-Jun dominant negative mutant protects sympathetic neurons against programmed cell death. Neuron. 14(5):927-39.

89. Han J., Sabbatini P., Perez D., Rao L., Modha D., White E. 1996. The E1B 19K protein blocks apoptosis by interacting with and inhibiting the p53-inducible and death-promoting Bax protein. Genes Dev. 10: 461477

90. Hanahan D. and Weinberg R. 2000. The hallmarks of cancer. Cell. 100(1): 57-70.

91. Hancock J.F., Paterson H., Marshall C.J. 1990. A polybasic domain or palmitoylation is required in addition to the CAAX motif to localize p21ras to the plasma membrane. Cell. 63(1): 133-9.

92. Harbour J.W., Dean D.C. 2000 a. The Rb/E2F pathway: expanding roles and emerging paradigms. Genes. Dev. 14: 2393-2409.

93. Harbour J.W., Dean D.C. 2000 b. Chromatin remodeling and Rb activity. Curr. Opin. Cell. Biol. 12: 685-689

94. Harper J.W., Adami G.R., Wei N., Keyomarsi K., Elledge S.J. 1993. The p21 Cdk-interacting protein Cipl is a potent inhibitor of G1 cyclin-dependent kinases. Cell 75:805-816.

95. Hatakeyama M. and Weinberg R.A. 1995. The role of pRb in cell cycle control. Progress in Cell Cycle Res. 1:9-19.

96. Helt A.M. and Galloway D.A. 2003. Mechanisms by which DNA tumor virus oncoproteins target the Rb family of pocket proteins. Carcinogenesis. 24 (2): 159-69.

97. Henry H., Thomas A., Shen Y., White E. 2002. Regulation of the mitochondrial checkpoint in p53-mediated apoptosis confers resistance to cell death. Oncogene. 21(5): 748-60.

98. Herber B., Truss M., Beato M., Muller R. 1994. Inducible regulatory elements in the human cyclin D1 promotor. Oncogene. 9: 2105-2107.

99. Herrera R.E., Sah V.P., Williams B.O., Makela T.P., Weinberg R.A., Jacks T. 1996 Altered cell cycle kinetics, gene expression, and G1 restriction point regulation in Rb-deficient fibroblasts. Mol. Cell. Biol. 16: 2402-2407.

100. Hibi M., Lin A., Smeal T., Minden A., Karin M. 1993. Identification of an oncoprotein- and UV-responsive protein kinase that binds and potentiates the c-Jun activation domain. Genes Dev. 7(11):2135-48.

101. Hicks G.G., Egan S.E., Greenberg A.H., Mowat M. 1991. Mutant p53 tumor suppressor alleles release ras-induced cell cycle growth arrest. Mol. Cell Biol. 11:1344-52

102. Hitomi M., Shu J., Agarwal M., Agarwal A., Stacey D. 1998. P2 jWafi inhibits the activity of cyclin dependent kinase 2 by preventing its activating phosphorylation. Oncogene. 17: 959-969.

103. Hofmann F., Livingston D.M. 1996. Differential effects of cdk2 and cdk3 on the control of pRb and E2F function during G1 exit. Genes Dev. 10:851-61

104. Holmes J.K., Solomon M.J. 2001. The role of Thrl60 phosphorylation of Cdk2 in substrate recognition. Eur. J. Biochem. 268: 4647-4652.

105. Huang D.C., Cory S., Strasser A. 1997. Bcl-2, Bcl-XL and adenovirus protein ElB19kD are functionally equivalent in their ability to inhibit cell death. Oncogene 14:405-414

106. Hung M.C., Wang S.C. 2000. Suppressing HER2/neu-mediated cell transformation by transcriptional repressors. Breast Dis. 11: 133-44.

107. Hunter T., Pines J. 1994. Cyclins and cancer. II: Cyclin D and CDK inhibitors come of age. Cell. 79(4):573-82.

108. Ikeda M.A. and Nevins J.R. 1993. Identification of distinct roles for separate El A domains in disruption of E2F complexes. Mol Cell Biol. 13(11): 7029-35.

109. Ip Y.T. and Davis R.J. 1998. Signal transduction by the c-Jun N-terminal kinase (JNK)--from inflammation to development. Curr Opin Cell Biol. 10(2): 205-19.

110. Iwasa H., Han J., Ishikawa F.2003. Mitogen-activated protein kinasep38 defines the common senescence-signalling pathway. Genes Cells. 2003 8(2): 31-44.

111. Jochemsen AG., Bernards R., van Kranen HJ., Houweling A., Bos JL, van der Eb AJ. 1986. Different activities of the adenovirus types 5 and 12 El A regions in transformation with the EJ Ha-ras oncogene. J Virol. 59(3): 684-91.

112. Jochum W., Passegue E., Wagner EF. 2001. AP-1 in mouse development and tumorigenesis. Oncogene. 20(19):2401-12.

113. Johnson RS., van Lingen B., Papaioannou VE., Spiegelman BM. 1993. A null mutation at the c-jun locus causes embryonic lethality and retarded cell growth in culture. Genes Dev. 1993. 7(7B):1309-17.

114. Joyce D., Bouzahzah B., Fu M., Albanese C., D'Amico M., Steer J.,

115. Klein JU., Lee RJ., Segall J.E., Westwick J.K., Der CJ., Pestell RG. 1999. Integration of Rac-dependent regulation of cyclin D1 transcription through a nuclear factor-kappaB-dependent pathway. J Biol Chem. 274(36):25245-9.

116. Kaldis P., Russo A.A., Chou H.S., Pavletich N.P., Solomon M.J. 1998. Human and yeast cdk-activating kinases (CAKs) display distinct substrate specificities. Mol. Biol. Cell. 9 (9): 2545-2560.

117. Kaldis P., Solomon M.J. 2000. Analysis of CAK activities from human cells. Eur. J Biochem. 267:4213-4221Kaldis P. 1999. The cdkactivating kinase (CAK): from yeast to mammals. Cell. Mol. Life. Sci.55:284-96

118. Kannabiran C., Morris G.F., Mathews M.B. 1999. Dual action of the adenovirus El A 243R oncoprotein on the human proliferating cell nuclear antigen promoter: repression of transcriptional activation by p53. Oncogene 18:7825-33

119. Karin M. 1992. Casein kinase II is a negative regulator of c-Jun DNA binding and AP-1 activity. Cell. 70(5):777-89.

120. Kasof G.M., Goyal L., White E. 1999. Btf, a novel death-promoting transcriptional repressor that interacts with Bcl-2-related proteins. Mol. Cell Biol. 19:4390-4404.

121. Katabami M., Donninger H., Hommura F., Leaner VD., Kinoshita I., Chick JF., Birrer MJ. 2005. Cyclin A is a c-Jun target gene and is necessary for c-Jun-induced anchorage-independent growth in RAT la cells. J Biol Chem. 280(17): 16728-3 8.

122. Kawasaki M., Hisamoto N., lino Y., Yamamoto M., Ninomiya-Tsuji J., Matsumoto K. 1999. A Caenorhabditis elegans JNK signal transduction pathway regulates coordinated movement via type-D GABAergic motor neurons. EMBO J. 18(13): 3604-15.f

123. Keblusek P., Dorsman J.C., Amina F.S., Teunisse S., Teunissen H.,van der Eb A. J., Zantema A. 1999. The adenoviral El A oncoprotein interfere with the growth-inhibiting effect of the Cdk-inhibitor p21CIPI/wafi. j Qf General vir0i0gy. go; 381-390.

124. Keenan SM, Bellone C, Baldassare JJ. 2001. Cyclin-dependent kinase 2 nucleocytoplasmic translocation is regulated by extracellular regulated kinase. J Biol Chem. 276(25): 22404-9.

125. Kennedy N.J. and Davis R.J. 2003. Role of JNK in tumor development. Cell Cycle. 2(3): 199-201.

126. Kennedy N.J., Sluss H.K., Jones SN., Bar-Sagi D., Flavell R.A., Davis R.J. 2003. Suppression of Ras-stimulated transformation by the JNK signal transduction pathway. Genes Dev. 17(5): 629-37.

127. Kirkin V., Joos S., Zornig M. 2004. The role of Bcl-2 family members in tumorigenesis. Biochim Biophys Acta. 1644(2-3): 229-49

128. Kjoiler L. and Hall A. 1999. Signaling to Rho GTPases. Exp Cell Res. 253(1): 166-79.

129. Kleinberger T. and Shenk T. 1991. A protein kinase is present in a complex with adenovirus El A proteins. Proc Natl Acad Sci U S A. 88 (24): 11143-7

130. Kohl N.E., Ruley H.E. 1987. Role of c-myc in the transformation of REF52 cells by viral and cellular oncogenes.Oncogene 2:41-8

131. Kolbus A., Herr I., Schreiber M., Debatin K.M., Wagner EF., Angel P. 2000. c-Jun-dependent CD95-L expression is a rate-limiting step in the induction of apoptosis by alkylating agents. Mol Cell Biol. 20(2):575-82.

132. Kouzarides T. 1999. Histone acetylases and deacetylases in cell proliferation. Curr. Opin. Genet. Dev. 9: 40-48.

133. Kovary K., Bravo R. 1991. The jun and fos protein families are both required for cell cycle progression in fibroblasts. Mol Cell Biol.11(9):4466-72.

134. Lawler S., Fleming Y., Goedert M., Cohen P. 1998. Synergistic activation of SAPK1/JNK1 by two MAP kinase kinases in vitro. Curr Biol. 8(25): 1387-90.

135. Lee W.H., Shew J.Y., Hong F.D., Sery T.W., Donoso L.A., Young L.J., Bookstein R., Lee E.Y. 1987. The retinoblastoma susceptibility gene encodes a nuclear phosphoprotein associated with DNA binding activity. Nature 329: 642-645.

136. Lees E. 1995. Cyclin dependent kinase regulation. Curr. Opin. Cell. Biol. 7: 773-780.

137. Lees E., Faha B., Dulic V., Reed S.I., Harlow E. 1992. Cyclin E/cdk2 and cyclin A/cdk2 kinases associate with pi07 and E2F in a temporally distinct manner. Genes. Dev. 6: 1874-1885.

138. Lei K., Davis R.J. 2003. JNK phosphorylation of Bim-related members of the Bcl2 family induces Bax-dependent apoptosis. Proc Natl Acad Sci USA.

139. Le-Niculescu H., Bonfoco E., Kasuya Y., Claret FX., Green DR., Karin M. 1999. Withdrawal of survival factors results in activation of the JNK pathway in neuronal cells leading to Fas ligand induction and cell death. Mol Cell Biol. 19(1):751-63.

140. Lents N.H., Keenan S.M., Bellone C., Baldassare J.J. 2002. Stimulation of the Raf/MEK/ERK cascade is necessary and sufficient for activation and Thr-160 phosphorylation of a nuclear-targeted CDK2. J Biol Chem. 277(49):47469-75

141. Liao Y. and Hung MC. Regulation of the activity of p38 mitogen-activated protein kinase by Akt in cancer and adenoviral protein E1A-mediated sensitization to apoptosis. Mol Cell Biol. 23 (19): 6836-48.

142. Lin A., Frost J., Deng T., Smeal T., al-Alawi N., Kikkawa U., Hunter T., Brenner D., Karin M. 1992. Casein kinase II is a negative regulator of c-Jun DNA binding and AP-1 activity. Cell. 70(5): 777-89.

143. Lin A. 2002. Activation of the JNK signaling pathway: breaking the brake on apoptosis. Bioessays. 25(l):17-24.

144. Liu F., Matsuura I. 2005. Inhibition of Smad antiproliferative function by CDK phosphorylation. Cell Cycle. 4(1): 63-6.

145. Liu F. and Green MR. 1990. A specific member of the ATF transcription factor family can mediate transcription activation by the adenovirus El A protein. Cell. 61 (7): 1217-1224.

146. Lomonosova E., Subramanian T., Chinnadurai G. 2005. Mitochondrial localization of p53 during adenovirus infection and regulation of its activity by E1B-19K. Oncogene. 24(45): 6796-808.

147. Lowe S.W. 1999. Activation of p53 by oncogenes. Endocr. Relat. Cancer. 6:45-48.

148. Lowe S.W., Ruley H.E. 1993. Stabilization of the p53 tumor suppressor is induced by adenovirus 5 El A and accompanies apoptosis. Genes Dev. 7: 535-545.

149. Lozano E., Betson M., Braga V.M. 2003. Tumor progression: Small GTPases and loss of cell-cell adhesion. Bioessays. 25(5): 452-63.

150. Lucas J., Herzinger T., Hansen K., Moroni M., Reznizky D., Helin K., Reed S., Bartek J. 1997. CyclinE-induced S phase whithout inactivation pRb/E2F pathway. Genes Dev. 11: 1479-1492.

151. Lukas J., Lukas C., Bartek J. 2004. Mammalian cell cycle checkpoints: signalling pathways and their organization in space and time. DNA Repair (Amst). 3(8-9):997-1007.

152. Madison DL., Yaciuk P., Kwok RP., Lundblad JR. 2002. Acetylation of the adenovirus-transforming protein El A determines nuclear localization by disrupting association with importin-alpha. J Biol Chem. 277 (41): 38755-63.

153. Mailand N., Falck J., Lukas C., Syljuasen R.G., Welcker M., Bartek J., Lukas J. 2000. Rapid destruction of human Cdc25A in response to DNA damage. Science 288: 1425-1429.

154. Maity A., McKenna W.G., Muschel R.J. 1995. Evidence for post-transcriptional regulation of cyclin B1 mRNA in the cell cycle and following irradiation in HeLa cells. EMBO J. 4: 603-609

155. Mai A., Chattopadhyay D., Ghosh M.K., Poon R.Y., Hunter T., Harter M.L. 2000. P21 and retinoblastoma protein control the absence of DNA replication in terminally differentiated muscle cells. J Cell. Biol. 149: 281-292.

156. Malliri A., van Es S., Huveneers S., Collard JG. 2004. The Rac exchange factor Tiaml is required for the establishment and maintenance of cadherin-based adhesions. J Biol Chem. 279(29): 30092-8.

157. Mann D.J., Jones N.C. 1996. E2F-1 but not E2F-4 can overcome pl6-induced G1 cell-cycle arrest. Curr. Biol. 6:474-483

158. McCabe M.T., Azih OJ., Day ML. 2005. pRb-Independent growth arrest and transcriptional regulation of E2F target genes. Neoplasia. 7(2): 14151.

159. McMahon M., Woods D. 2001. Regulation of the p53 pathway by Ras, the plot thickens. Biochim. Biophys. Acta 1471:63-71

160. Medema R.H., Klompmaker R., Smits V.A., Rijksen G. 1998. P21wafl can block cells at two points in the cell cycle, but does not interfere with processive DNA-replication or stress-activated kinases. Oncogene 16(4): 431-441.

161. Minden A., Lin A., Claret FX., Abo A., Karin M. 1995. Selective activation of the JNK signaling cascade and c-Jun transcriptional activity by the small GTPases Rac and Cdc42Hs. Cell. 81(7): 1147-57.

162. Montminy M. 1994. Activation of cAMP and mitogen responsive genes relies on a common nuclear factor. Nature. 370(6486):226-9.

163. Moroy T, Geisen C. 2004. Cyclin E. Int J Biochem Cell Biol. 36(8): 1424-39

164. Morrison A.J., Sardet C., Herrera R.E. 2002. Retinoblastoma protein transcriptional repression through histone deacetylation of a single nucleosome. Mol Cell Biol. 22(3):856-65.

165. Morris L., Allen K., La Thangue N. 2000. Regulation of E2F transcription by CyclinE-Cdk2 kinase mediated through p300/CBP co-activators. Nat. Cell Biol. 2: 232-239.

166. Morrison D.K., Cutler R.E. 1997. The complexity of Raf-1 regulation. Curr. Opin. Cell. Biol. 9:174-9

167. Morton S., Davis R.J., McLaren A., Cohen P. 2003. A reinvestigation of the multisite phosphorylation of the transcription factor c-Jun. EMBO J. 2003. 22(15):3876-86.

168. Mymryk J.S., Shire K., Bayley S.T. 1994. Induction of apoptosis by adenovirus type 5 El A in rat cells requires a proliferation block. Oncogene 9:1187-93

169. Mymryk J.S. and Bayley S.T. 1993. Multiple pathways for gene activation in rodent cells by the smaller adenovirus 5 El A protein and their relevance to growth and transformation. J Gen Virol. 74 (10): 213141.

170. Mymryk J.S. 1996. Tumour suppressive properties of the adenovirus 5 E1A oncogene. Oncogene. 13(8): 1581-9.

171. Nishina H., Wada T., Katada T. 2004. Physiological roles of SAPK/JNK signaling pathway. J Biochem (Tokyo). 136(2):123-6.

172. Noda A., Nigg Y., Venable S.F., Pereira-Smith O.M., Smith J.R. 1994. Cloning of senescent cell-derived inhibitors of DNA synthesis using an expression screen. Exp. Cell Res. 211: 90-98.

173. Nomura H., Sawada Y., Ohtaki S. 1998. Interaction of p27 with El A and its effect on CDK kinase activity. Biochem. Biophys. Res. Commun. 248 (2): 228-34.

174. O'Brien V. 1998. Viruses and apoptosis. J Gen. Virol .79:18331845

175. Offringa R., Smits A.M., Houweling A., Bos J.L., van der Eb AJ. 1988. Similar effects of adenovirus El A and glucocorticoid hormones on the expression of the metalloprotease stromelysin. Nucleic Acids Res. 16: 0973-84.

176. Offringa R., Gebel S., van Dam H., Timmers M., Smits A., Zwart R., sten B., Bos JL., van der Eb A., Herrlich P. 1990. A novel function of the transforming domain of El a: repression of AP-1 activity. Cell. 62 (3): 527-38.

177. Ohtsubo M. and Roberts J.M. 1993. Cyclin-dependent regulation of G1 in mammalian fibroblasts. Science 259: 1908-1912

178. Ohtsubo M., Theodoras A.M., Shumacher J., Roberts J.M., Pagano M. 1995. Human cyclin E, nuclear protein essential for the Gl-to-S transition. Mol. cell Biol. 15: 2612-2624.

179. Olson M.F., Paterson H.F., Marshall C.J. 1998. Signals from Ras and Rho GTPases interact to regulate expression of p21Wafl/Cipl. Nature. 394(6690):295-9.

180. O'Reilly L.A,. Huang D.C., Strasser A. 1996. The cell death inhibitor Bcl-2 and its homologues influence control of cell cycle entry. EMBO J. 15(24): 6979-90.

181. Pagano M., Pepperkok R., Verde F., Ansorge W., Draetta G. 1992. Cyclin A is required at two points in the human cell cycle. EMBO J. 11:961-971

182. Papavassiliou AG. 1993. c-Jun phosphorylation in signal transduction and gene regulation. Anticancer Res. 13(6A):2213-20.

183. Pardee A.B. 1974. A restriction point for control of normal animal cell proliferation. Proc. Natl. Acad. Sci. 71: 1286-1290.

184. Petersen B.O., Lukas J., Sorensen C.S., Bartek J., Helin K. 1999. Phosphorylation of mammalian CDC6 by cyclin A/CDK2 regulates its subcellular localization. EMBO J. 18:396-410

185. Phillips A.C., Bates S., Ryan K.M., Helin K., Vousden K.H. 1997. Induction of DNA synthesis and apoptosis are separable functions of E2F-1. Genes Dev. 11: 1853-1863.

186. Potapova O., Gorospe M., Bost F., Dean N.M., Gaarde W.A., Mercola D., Holbrook NJ. 2000. c-Jun N-terminal kinase is essential for growth of human T98G glioblastoma cells. J Biol Chem. 275(32): 24767-75.

187. Pulverer B.J., Kyriakis J.M., Avruch J., Nikolakaki E., Woodgett J.R. 1991. Phosphorylation of c-jun mediated by MAP kinases. Nature. 353(6345):670-4.

188. Quinlan M.P. 1993. E1A 12S in the absence of E1B or other cooperating oncogenes enables cells to overcome apoptosis. Oncogene. 8(12): 3289-96.

189. Rank K.B., Evans D.B., Sharma S.K. 2000. N-terminal domains of cyclin-dependent kinase inhibitory proteins block the phosphorylation ofcdk2/Cyclin E by the CDK-activating kinase. Biochem. Biophys. Res. Commun. 271: 469-473

190. Rao L., Modha D., White E. 1997. The E1B 19K protein associates with lamins in vivo and its proper localization is required for inhibition of apoptosis. Oncogene 15:1587-1597

191. Rebollo A., Dumoutier L., Renauld J.C., Zaballos A., Ayllon V., Martinez-A C. 2000. Bcl-3 expression promotes cell survival following interleukin-4 deprivation and is controlled by API and API-like transcription factors. Mol Cell Biol. 20(10):3407-16.

192. Rennefahrt U.E., Illert B., Kerkhoff E., Troppmair J., Rapp UR. 2002. Constitutive JNK activation in NIH 3T3 fibroblasts induces a partially transformed phenotype. J Biol Chem. 277(33): 29510-8.

193. Resnitzky D., Reed S.I. 1995. Different roles for cyclins D1 and E in regulation of the Gl-to-S transition. Mol. Cell Biol. 15:3463-3469

194. Ridley A.J. 2004. Rho proteins and cancer. Breast Cancer Res Treat. 84(1): 13-9.

195. Rodrigues G.A., Park M., Schlessinger J. 1997. Activation of the JNK pathway is essential for transformation by the Met oncogene. EMBO J. 16(10): 2634-45.

196. Russo A.A., Jeffrey P.D., Patten A.K., Massague J., Pavletich N.P. 1996. Crystal structure of the p27Kipl cyclin-dependent-kinase inhibitor bound to the cyclin A-Cdk2 complex. Nature. 382: 295-296.

197. Sabapathy K., Hochedlinger K., Nam S.Y., Bauer A., Karin M., Wagner E.F. 2004. Distinct roles for JNK1 and JNK2 in regulating JNK activity and c-Jun-dependent cell proliferation. Mol Cell. 15(5): 713-25.

198. Sabapathy K., Wagner E.F. 2004. JNK2: a negative regulator of cellular proliferation. Cell Cycle. 3(12): 1520-3.

199. Sabbatini P., Chiou S.K., Rao L., White E. 1995. Modulation of p53-mediated transcriptional repression and apoptosis by the adenovirus E1B 19K protein. Mol. Cell Biol. 15: 1060-1070

200. Sage J., Mulligan G.J., Attardi L.D., Miller A., Chen S., Williams B., Theodorou E., Jacks T. 2000. Targeted disruption of the three Rb-related genes leads to loss of G(l) control and immortalization. Genes Dev. 14(23): 3037-50.

201. Saha P., Chen J., Thome K.C., Lawlis S.J., Hou Z.H., Hendricks M., Parvin J.D., Dutta A. 1998. Human CDC6/Cdcl8 associates with Orel and cyclin-cdk and is selectively eliminated from the nucleus at the onset of S phase. Mol. Cell Biol. 18:2758-2767

202. Saha P., Eichbaum Q., Silberman E.D., Mayer B.J., Dutta A. 1997. P21CIP1 and Cdc25A: competition between an inhibitor and an activator of cyclin-dependent kinases. Mol. Cell. Biol. 17(8): 4338-4345.

203. Schmidt A., Hall A. 2002. Guanine nucleotide exchange factors for Rho GTPases: turning on the switch. Genes Dev. 16(13): 1587-609.

204. Schneider E, Montenarh M, Wagner P. 1998. Regulation of CAK kinase activity by p53 .Oncogene. 17(21 ):2733-41.

205. Schreiber M., Kolbus A., Piu F., Szabowski A., Mohle-Steinlein U., Tian J., Karin M., Angel P., Wagner E.F. 1999. Control of cell cycle progression by c-Jun is p53 dependent. Genes Dev. 13(5):607-19.

206. Schulze A., Mannhardt B., Zerfass-Thome K., Zwerschke W., Jansen-Durr P. 1998. Anchorage-independent transcription of the cyclin A gene induced by the E7 oncoprotein of human papillomavirus type 16. J Virol.72(3):2323-34.

207. Schutte J., Minna J.D., Birrer M.J. Deregulated expression of human c-jun transforms primary rat embryo cells in cooperation with an activated c-Ha-ras gene and transforms rat-la cells as a single gene. Proc Natl Acad SciUS A. 86(7):2257-61.

208. See R.H, Shi Y. 1998. Adenovirus E1B 19,000-molecular-weight protein activates c-Jun N-terminal kinase and c-Jun-mediated transcription. Mol. Cell Biol. 18:4012-4022

209. Serrano M., Lee H., Chin L., Cordon Cardo C., Beach D. and DePinho R.A. 1996. Role of the JNK4a locus in tumor supression and cell mortality. Cell 85: 27-37.

210. Serrano M., Lin A.W., McCurrach M.E., Beach D., Lowe S.W. 1997. Oncogenic ras provokes premature cell senescence associated with accumulation of p53 and pl6INK4a. Cell 88:593-602

211. Severino A., Baldi A., Cottone G., Han M., Sang N., Giordano A., Mileo A., Paggi M., De Luca A. RACK1 is a functional target of the El A oncoprotein. J Cell Physiol. 2004 199:134-9

212. Sewing A., Wiseman B., Lloyd A.C., Land H. 1997. High-intensity Raf signal causes cell cycle arrest mediated by p21Cipl. Mol. Cell Biol. 17:5588-97

213. Shan B., Lee W.H. 1994. Deregulated expression of E2F-1 induces S-phase entry and leads to apoptosis. Mol. Cell Biol. 14:8166-8173

214. Shaulian E., Karin M. 2001. AP-1 in cell proliferation and survival. Oncogene. 20: 2390-2400.

215. Shaulian E., Karin M. 2002. AP-1 as a regulator of cell life and death. Nature Cell Biol. 4: E131-E136.

216. Shaulian E., Schreiber M., Piu F., Beeche M., Wagner E.F., Karin M. 2000. The mammalian UV response: c-Jun induction is required for exit from p53-imposed growth arrest. Cell. 2000 Dec 8;103(6):897-907.

217. Sherr C.J, Weber J.D. 2000. The ARF/p53 pathway. Curr. Opin. Genet. Dev. 10:94-99

218. Sherr C.J., RobertsJ.M. 1995. Inhibitors of mammalian G1 cyclin-dependent kinases. Genes Dev., 9: 1149-1163.

219. Sherr C.J., Roberts J.M. 1999. CDK inhibitors: positive and negative regulators of G1-phase progression. Genes. Dev. 13: 1501-1512

220. Sherwin S.A., Rapp U.R., Benveniste R.E., Sen A., Todaro G.J. 1978. Rescue of endogenous 30S retroviral sequences from mouse cells by baboon type C virus. J Virol. 26:257-64

221. Shields JM., Pruitt K., McFall A., Shaub A., Der CJ. Understanding Ras: 'it ain't over 'til it's over'. Trends Cell Biol. 2000 Apr; 10(4): 147-54.

222. Shim J., Lee H., Park J., Kim H., Choi E.J. 1996. A non-enzymatic p21 protein inhibitor of stress-activated protein kinases. Nature 381:804806

223. Smeal T., Binetruy B., Mercola D.A., Birrer M., Karin M. 1991. Oncogenic and transcriptional cooperation with Ha-Ras requires phosphorylation of c-Jun on serines 63 and 73. Nature. 1354(6353):494-6.

224. Smits V.A., Klompmaker R., Vallenius T., Rijksen G., Makela T.P., Medema R.H. 2000. P21 inhibits Thrl61 phosphorylation of Cdc2 to enforce the G2 DNA damage checkpoint. J. Biol. Chem. 275 (39): 3063830643.

225. Smits VA, Medema RH. 2001. Checking out the G(2)/M transition. Biochim Biophys Acta. 1519(1-2): 1-12.

226. Song H., Hanlon N., Brown N.R., Noble M.E., Johnson L.N., Barford D. 2001. Phosphoprotein-protein interactions revealed by the crystal structure of kinase-associated phosphatase in complex with phosphoCDK2. Mol. Cell. 7: 615-626.

227. Sulciner D.J., Irani K., Yu Z.X., Ferrans V.J., Goldschmidt-Clermont P., Finkel T. 1996. Racl regulates a cytokine-stimulated, redox-dependent pathway necessary for NF-kappaB activation. Mol Cell Biol. 16(12): 7115-21.

228. Takuwa N., Takuwa Y. 1997. Ras activity late in G1 phase required for p27kipl downregulation, passage through the restriction point, and entry into S phase in growth factor-stimulated NIH 3T3 fibroblasts. Mol. Cell Biol. 17:5348-58

229. Teodoro J.G., Shore G.C., Branton P.E. 1995. Adenovirus E1A proteins induce apoptosis by both p53-dependent and p53-independent mechanisms. Oncogene. 11:467-474.

230. Thomas A., Giesler T., White E. 2000. P53 mediates Bcl-2 phosphorylation and apoptosis via activation of the Cdc42/JNK1 pathway. Oncogene. 19: 5259-5269.

231. Thomas A., White E. 1998. Suppression of the p300-dependent mdm2 negative-feedback loop induces the p53 apoptotic function. Genes Dev. 12:1975-1985

232. Thompson T.A., Kim K., Gould M. N. 1998. Harvey ras results in a higher frequency of mammary carcinomas than Kirsten ras after direct retroviral transfer into the rat mammary gland. Cancer Res. 58: 50975104.

233. Tin Su T. 2001. Cell cycle: How, when and why cells get rid of cyclin A. Curr. Biol. 11: 467-469

234. Tournier C., Hess P., Yang D.D., Xu J., Turner T.K., Nimnual A., Bar-Sagi D., Jones S.N., Flavell R.A., Davis R.J. 2000. Requirement of JNK for stress-induced activation of the cytochrome c-mediated death pathway. Science. 288(5467): 870-4.

235. Trentin J.J., Yabe Y., Taylor G. 1962 The quest for human cancer viruses: a new aproach to an old problem reveals cancer induction in hamster by human adenoviruses. Science. 137: 835-41.

236. Turnell A., Grand R, Gorbea C., Zhang X., Wang W., Mymrik J., Gallimore P. 2000. Regulation of the 26S proteasome by adenovirus El A. EMBO. 19: 4759-73

237. Van Dam H., Offringa R., Meijer I., Stein B., Smits AM., Herrlich P., Bos JL., van der Eb A. 1990. Differential effects of the adenovirus El A oncogene on members of the AP-1 transcription factor family. Mol Cell Biol. 10(11): 5857-64.

238. Vigo E., Muller H., Prosperini E., Hateboer G., Cartwright P., Moroni M.C., Helin K. 1999. CDC25A phosphatase is a target of E2F and is required for efficient E2F-induced S phase. Mol. Cell. Biol. 19 (9): 6379-6395.

239. Viniegra J.G., Losa J.H., Sanchez-Arevalo V.J., Parada Cobo C., Soria V.M., Ramon y Cajal S., Sanchez-Prieto R. 2002. Modulation of PI3K/Akt pathway by Ela mediates sensitivity to cisplatin. Oncogene. 21(46):7131-6.

240. Vogt P.K., Bader A.G. 2005. Jun: stealth, stability, and transformation. Mol Cell. 19(4):432-3.

241. Vogt P.K. 2001. Jun, the oncoprotein. Oncogene. 20(19): 2365-77.

242. Vries R.G., Prudenziati M., Zwartjes C., Verlaan M., Kalkhoven E., Zantema A. 2001. A specific lysine in c-Jun is required for transcriptional repression by El A and is acetylated by p300. EMBO J. 20 (21): 20952103.

243. Wada T. and Penninger JM. 2004. Stress kinase MKK7: savior of cell cycle arrest and cellular senescence. Cell Cycle. 3(5):577-9.

244. Wang J., Chenivesse X., Henglein B., Brechot C. 1990. Hepatitis B virus integration in a cyclin A gene in a hepatocellular carcinoma. Nature. 343(6258): 555-7.

245. Watson A., Eilers A., Lallemand D., Kyriakis J., Rubin L.L., Ham J.1998. Phosphorylation of c-Jun is necessary for apoptosis induced by survival signal withdrawal in cerebellar granule neurons. J Neurosci. 18(2): 751-62.

246. Weber J.D., Taylor L.J., Roussel M.F., Sherr C.J., Bar-Sagi D.1999. Nucleolar Arf sequesters Mdm2 and activates p53. Nat. Cell Biol. 1:20-6

247. Weinberg R.A. 1995. The retinoblastoma protein and cell cycle control. Cell 81: 323-330.

248. Weiss C., Schneider S., Wagner E.F., Zhang X., Seto E., Bohmann D. JNK phosphorylation relieves HDAC3-dependent suppression of the transcriptional activity of c-Jun. EMBO J. 2003 Jul 15;22(14):3686-95.

249. Welsh C.F. 2004. Rho GTPases as key transducers of proliferative signals in gl cell cycle regulation. Breast Cancer Res Treat. 84(l):33-42.

250. Wen W., Taylor S.S., Meinkoth J.L. 1995. The expression and intracellular distribution of the heat-stable protein kinase inhibitor is cell cycle regulated. J Biol Chem. 270(5): 2041-6.

251. Weston C.R., Davis R.J. 2002. The JNK signal transduction pathway. Curr Opin Genet Dev. 12(1): 14-21.

252. White E. 1998. Regulation of apoptosis by adenovirus El A and E1B oncogenes. Seminars in Virology 8: 505-513.

253. White E., Cipriani R. 1989. Specific disruption of intermediate filaments and the nuclear lamina by the 19-kDa product of the adenovirus E1B oncogene. Proc. Natl. Acad .Sci U S A 86:9886-90

254. White E., Cipriani R. 1990. Role of adenovirus E1B proteins in transformation: altered organization of intermediate filaments in transformed cells that express the 19-kilodalton protein. Mol. Cell Biol. 10:120-130

255. White E., Grodzicker T., Stillman B.W. 1984. Mutations in the gene encoding the adenovirus early region IB 19,000-molecular-weight tumor antigen cause the degradation of chromosomal DNA. J Virol. 52:410-419

256. Whitmarsh A.J., Cavanagh J., Tournier C., Yasuda J., Davis R.J. 1998. A mammalian scaffold complex that selectively mediates MAP kinase activation. Science. 281(5383): 1671-4.

257. Whitmarsh A.J., Davis R.J. 1998. Structural organization of MAP-kinase signaling modules by scaffold proteins in yeast and mammals. Trends Biochem Sci. 23(12):481-5.

258. Whyte P., Williamson N.M., E. Harlow. 1989. Cellular targets for transformation by the adenovirus El A proteins. Cell 56: 67-75.

259. Wilkinson M.G., Millar J.B. 2000. Control of the eukaryotic cell cycle by MAP kinase signaling pathways. FASEB J. 14:2147-57.

260. Wisdom R., Johnson R.S, Moore C. 1999. c-Jun regulates cell cycle progression and apoptosis by distinct mechanisms. EMBO J. 4; 18(1): 18897.

261. Wohlschlegel J.A., Dwyer B.T., Takeda D.Y., Dutta A. 2001. Mutational analysis of the Cy motif from p21 reveals sequence degeneracy and specificity for different cyclin-dependent kinases. Mol. Cell. Biol. 21:4868-4874.

262. Woo M.S., Sanchez I., Dynlacht B.D. 1997. P130 and pl07 use a conserved domain to inhibit cellular cyclin-dependent kinase activity. Mol. Cell. Biol. 17: 3566-3579.

263. Yamamoto K., Ichijo H., Korsmeyer S.J. 1999. BCL-2 is phosphorylated and inactivated by an ASKl/Jun N-terminal proteinkinase pathway normally activated at G(2)/M. Mol Cell Biol. 19(12): 8469-78.

264. Yamazaki D., Kurisu S., Takenawa T. 2005. Regulation of cancer cell motility through actin reorganization. Cancer Sci. 96(7): 379-86.

265. Yu D.H., Scorsone K., Hung M.C. 1991. Adenovirus type 5 El A gene products act as transformation suppressors of the neu oncogene. Mol Cell Biol. Mar; 11(3): 1745-50.

266. Yujiri T., Sather S., Fanger G.R., Johnson G.L.1998. Role of MEKK1 in cell survival and activation of JNK and ERK pathways defined by targeted gene disruption. Science. 1998. 282(5395):1911-4.

267. Zarkowska T. and Mittnacht S. 1997. Differential phosphorylation cf the retinoblastoma protein by Gl/S cyclin-dependent kinases. J. Biol. Chem. 19: 12738-12746.

268. Zerler B., Moran B., Maruyama K., Moomaw J., Grodzicker T., Ruley H.E. 1986. Adenovirus El A coding sequences that enable ras and pmt oncogenes to transform cultured primary cells. Mol Cell Biol. 6(3):887-99.

269. Zhang H. Xiong Y., Beach D. 1993. Proliferating cell nuclear antigen and p21 are components of multiple cell cycle kinase complexes. Mol. Biol. Cell. 4 (9): 897-906.

270. Zhang H.S., Gavin M., Dahiya A., Postigo A.A., Ma D., Luo R.X., Harbour J.W., Dean D.C. 2000. Exit from G1 and S phase of the cell cycle is regulated by repressor complexes containing HDAC-Rb-hSWI/SNF andRb-hSWI/SNF. Cell 101: 79-89.

271. Zhao J., Kennedy B.K., Lawrence B.D., Barbie D.A., Matera A.G., Fletcher J.A., Harlow E. 2000. NPAT links cyclin E-Cdk2 to the regulation of replication-dependent histone gene transcription. Genes Dev. 14:2283-2297

272. Zhou B.B., Elledge S.J. 2000. The DNA damage response: putting checkpoints in perspective. Nature 408: 433-439.

273. Zhu J., Woods D., McMahon M., Bishop J.M. 1998. Senescence of human fibroblasts induced by oncogenic Raf. Genes Dev. 12:2997-3007

274. Zindy F., Eischen C.M., Randle D.H., Kamijo T., Cleveland J.L., Sherr C.J., Roussel M.F. 1998. Myc signaling via the ARF tumor suppressor regulates p53-dependent apoptosis and immortalization. Genes Dev. 12:2424-24331791. БЛАГОДАРНОСТИ

275. Отдельное спасибо моему «немецкому» руководителю Питеру Херрлиху за возможность работать в его институтах в Германии, веру в меня и развитие во мне самостоятельности в научной работе.

276. Я благодарю заведующего лабораторией Валерия Анатольевича Поспелова за научные дискуссии, под держку и интерес к моей работе.

277. Особое спасибо моему второму «немецкому» соруководителю Питеру Ангелу (Немецкий центр рака, Гейдельберг, Германия) за научные консультации и экспериментальную помощь в работе.

278. Я благодарю Николая Аксенова за помощь в проведении экспериментов проточной цитометрии.

279. Огромное спасибо моим коллегам и сотрудникам нашей лаборатории за помощь и прекрасную душевную атмосферу, делающую работу в радость. Отдельное спасибо Татьяне Вадимовне Быковой и Ане Нелюдовой за стилистические правки при прочтении автореферата.

280. Спасибо моим друзьям, родителям и близким за заботу и поддержку.