Первичная открытоугольная глаукома:диагностическое значение протеомного анализа слезы и жидкости передней камеры глаза тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.07, кандидат наук Самохина Надежда Ильдаровна

• Самохина Надежда Ильдаровна
• кандидат наук
• 2020

Оглавление диссертации кандидат наук Самохина Надежда Ильдаровна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Стр.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Методы исследования в ранней диагностике первичной открытоугольной глаукомы

1.2 Возможности использования протеомного анализа в исследовании биологических жидкостей

1.3 Современные представления о слезной жидкости

1.4 Современные представления о жидкости передней камеры глаза

1.5 Возможности протеомного анализа слезы и жидкости передней

камеры глаза в диагностике офтальмопатологии

1.5.1 Белки, выявленные при протеомном анализе слезы, жидкости передней камеры глаза и плазмы крови

1.5.2 Результаты протеомного анализа при офтальмопатологии

1.6 Возможности протеомного анализа слезы и жидкости передней

камеры глаза в диагностике первичной открытоугольной глаукомы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Характеристика клинического материала

2.2 Клинико-функциональные методы исследования

2.3 Методы получения биоматериалов для биохимических исследований

2.3.1 Забор слезной жидкости

2.3.2 Забор жидкости передней камеры глаза

2.4 Методы протеомного изучения жидкости передней камеры глаза 46 2.4.1 Методы пробоподготовки

2.4.2 Методы протеомного анализа

2.5 Методы биоинформационного анализа и статистическая обработка данных

2.5.1 Обработка данных в программе MaxQuant

2.5.2 Обработка данных в программе Perseus

2.5.3 Анализ аннотации белков жидкости передней камеры глаза элементами Gene Ontology

2.5.4 Статистический анализ

2.6 Методы изучения белков слезной жидкости

2.6.1 Иммуноблоттинг на сухой мембране

2.6.2 «Классический» Вестерн-блоттинг 59 ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Белки жидкости передней камеры глаза, полученные в результате протеомного анализа, и их функции

3.2 Состав протеома жидкости передней камеры глаза

3.3 Распределение белков жидкости передней камеры глаза в выделенных клинических подгруппах

3.4 Характеристика белков жидкости передней камеры глаза, выделенных только в подгруппе «катаракта + первичная открытоугольная глаукома»

3.5 Характеристика белков жидкости передней камеры глаза, выделенных в подгруппах «катаракта» и «катаракта +

псевдоэксфолиативный синдром»

3.6 Аполипопротеин D - потенциальный биомаркер

псевдоэксфолиативного синдрома

3.7 Сравнение полученного протеома жидкости передней камеры глаза

с другими базами данных

3.8 Результаты анализа слезной жидкости

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

Практические рекомендации

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВГД - внутриглазное давление

ДЗН - диск зрительного нерва

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

ед - единица

ЖХ-МС/МС / LC-MS/MS - жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией / liquid chromatography-mass spectrometry кВ - киловольт

КЧСМ - критическая частота слияния мельканий

мМ - миллимолярный

мм рт ст - миллиметр ртутного столба

НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат

ОЗСК - острота зрения с коррекцией

ОКТ - оптическая когерентная томография

ПААГ - полиакриламидный гель

ПОУГ - первичная открытоугольная глаукома

ПЭС - псевдоэксфолиативный синдром

СНВС - слой нервных волокон сетчатки

эВ - электрон-вольт

°С - градус Цельсия

3a-HSD (3a-hydroxysteroid dehydrogenase) - 3а-гидроксистероиддегидрогеназа ANGPTL7 (angiopoietin-related protein 7) - ангиопоэтин-подобный белок 7 AP4A (diadenosine tetraphosphate) - диаденозина тетрафосфат Apo-C III (apolipoprotein C III) - аполипопротеин C III Apo-D (apolipoprotein D) - аполипопротеин D

BDNF (brain-derived neurotrophic factor) - нейротрофический фактор мозга

BSA (bovine serum albumin) - бычий сывороточный альбумин

BSS (balanced sterile sodium solution) - сбалансированный солевой раствор

CD44 - интегральный клеточный гликопротеин

FASP (filter aided sample preparation) - подготовка образца с использованием фильтра

FDR (false discovery rate) - число ложноположительных результатов FDT-периметрия (Frequency Doubling Technology Perimetry) - периметрия с удвоением пространственной частоты

Gorilla - Gene Ontology enRIchment anaLysis and visuaLizAtion tool

GRP78 (78 kDa glucose-regulated protein) - белок, регулируемый глюкозой

kDa

HRT (Heidelberg retina tomograph) - Гейдельбергская ретинотомография Hsp (Heat-shock protein) - белок теплового шока

HUPO (Human Proteome Organization) - международный консорциумом «Протеом человека» Ig (immunoglobulin) - иммуноглобулин kDa (kilodalton) - кДа - килодальтон

LFQ (label-free quantitation) - метод определения интенсивности сигнала m/z - масса/заряд

ORA (Ocular Response Analyzer) - анализатор биомеханических свойств глаза

PDGF (platelet-derived growth factor) - фактор роста тромбоцитов

pH (лат. pondus Hydrogenii) - водородный показатель

PTGDS (Prostaglandin-H2 D-isomerase) - простагландин H2 D-изомераза

PVDF (polyvinylidene fluoride / polyvinylidene difluoride)

поливинилиденфторид

SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) - кислый кальций-связывающий богатый цистеином белок

SWAP (Short-Wavelength Automated Perimetry) - коротковолновая автоматизированная периметрия

Tris (tris(hydroxymethyl)aminomethane) - трис(гидроксиметил)аминометан

VEGF А (vascular endothelial growth factor А) - сосудистый эндотелиальный фактор роста А

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Первичная открытоугольная глаукома:диагностическое значение протеомного анализа слезы и жидкости передней камеры глаза»

ВВЕДЕНИЕ Актуальность темы

Глаукома является социально значимой болезнью вследствие того, что охватывает большие группы населения и может приводить к слепоте.

Потеря зрения у людей всех возрастов является проблемой современной офтальмологии [1, 2]. Как правило, при обследовании у одного из трех пациентов старше 65 лет выявляется снижение остроты зрения и одной из причин может быть глаукома [3, 4]. Поэтому данное заболевание имеет большое медико-социальное значение и является одним из приоритетных направлений современной офтальмологии.

Проблема ранней диагностики глаукомы еще далека от своего решения. И, несмотря на значительные успехи в разработке современных патогенетически обоснованных медикаментозных и хирургических методов лечения глаукомы, не всегда удается добиться стабилизации глаукомного процесса и предотвратить инвалидизацию пациентов.

Течение глаукомы, как правило, бессимптомное с прогрессирующим снижением зрительных функций [5]. Традиционные методы диагностики основаны на выявлении уже имеющейся клинически значимой симптоматики -дефекты полей зрения, изменение диска зрительного нерва [9, 10]. Установлено, что клинически определяемые изменения поля зрения у больных глаукомой наблюдаются при потере около 40% зрительных волокон [11]. Таким образом, данную диагностику заболевания в начальной стадии трудно назвать ранней. Динамика заболевания, согласно принятой классификации, также оценивается в основном по наличию или отсутствию прогрессирования изменений ДЗН и поля зрения.

В связи с этим, продолжается поиск новых методов, позволяющих обнаружить самые ранние доклинические нарушения у больных глаукомой, так

как успех медикаментозного и хирургического лечения больных глаукомой во многом зависит от своевременной постановки диагноза.

В последние десятилетия увеличивается число 40-60-летних пациентов трудоспособного возраста с диагнозом «катаракта», что требует проведения оперативного лечения. По статистике, диагноз «первичная открытоугольная глаукома» впервые устанавливается как раз в этом возрасте или несколько позже.

Что касается исследований, направленных на поиск методов ранней диагностики глаукомы, есть уникальная возможность взять во время операции факоэмульсификации катаракты на исследование жидкость передней камеры глаза для проведения тонкого биохимического анализа. По сравнению со слезой, жидкость передней камеры содержит меньше контаминантов.

Одним из новых перспективных направлений биомедицинских исследований является протеомный анализ глазных жидкостей и тканей. Главной целью клинической протеомики является обнаружение нового белкового или пептидного биомаркера, который связан с определенным заболеванием. Сравнение протеомов здорового человека и больного позволяет выявить конкретные белки, потенциально вовлеченные в развитие болезни, которые в дальнейшем могут стать мишенями для новых лекарственных препаратов. Кроме того, если такие белки уже известны, анализ протеома может использоваться как метод ранней диагностики различных заболеваний.

Одним из основных методов протеомики является масс-спектрометрия белков, которая позволяет установить количественный и качественный состав в исследуемом образце. В настоящее время в медицине применение методов протеомного анализа позволяет выявить маркеры некоторых заболеваний на ранней стадии болезни.

Степень разработанности проблемы

Анализ работ, посвященных поиску возможных биомаркеров первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ), выявил недостаточную степень разработанности данной проблемы. В России не проводились исследования жидкости передней камеры глаза и слезы пациентов с катарактой, глаукомой и псевдоэксфолиативным синдромом методами протеомного анализа. В зарубежной литературе есть работы, посвященные поиску биомаркеров глаукомы, однако не было выявлено ни одного достоверно доказанного маркера.

Протеомный анализ жидкости передней камеры глаза и слезы позволяет не только определить состав белков исследуемой биологической жидкости, но и выявить изменения состава при развитии заболевания. Проблема поиска биомаркера при первичной открытоугольной глаукоме чрезвычайно актуальна в связи с трудностью диагностики заболевания на ранней стадии. Причины возникновения псевдоэксфолиативного синдрома также не до конца ясны. При этом данный синдром может встречаться как при первичной открытоугольной глаукоме, так и изолированно. Таким образом, протеомные исследования слезы и жидкости передней камеры при глаукоме и псевдоэксфолиативном синдроме очень важны для развития представлений о патогенезе данных заболеваний.

Цель данного исследования - усовершенствовать диагностику первичной открытоугольной глаукомы путем использования протеомного анализа жидкости передней камеры глаза и слезы.

Задачи исследования

1. Идентифицировать белковый состав жидкости передней камеры глаза методом протеомного анализа.

2. Оценить протеомный профиль жидкости передней камеры глаза и установить возможные биомаркеры первичной открытоугольной глаукомы.

3. Определить наличие выявленных в жидкости передней камеры глаза биомаркеров в слезе.

4. Оценить диагностическую значимость выявленных биомаркеров в установке диагноза первичной открытоугольной глаукомы.

5. Сопоставить протеомный профиль слезы и жидкости передней камеры глаза пациентов с первичной открытоугольной глаукомой и пациентов без подтвержденного диагноза глаукома.

Материал и методы исследования Под наблюдением находились 60 пациентов, из них 24 мужчин (24 глаза), 36 женщин (36 глаз). Все больные были клинически обследованы с использованием стандартных методик (визометрия, тонометрия, гониоскопия, офтальмоскопия, периметрия, определение критической частоты слияния мельканий) и расширенного комплекса диагностических методик (тонография, пахиметрия, компьютерная периметрия, оптическая когерентная томография).

Забор слезной жидкости осуществлялся с помощью инсулинового шприца с одноразовой канюлей из нижнего конъюнктивального свода обследуемых накануне операции. Забор жидкости передней камеры проводился во время первого этапа операции факоэмульсификации катаракты. Протеомный анализ жидкости передней камеры глаза проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометрией по описанному далее протоколу. Слезная жидкость исследовалась методами вестерн-блоттинг и дот-блоттинг.

Методологическая и теоретическая база диссертационного исследования Методологической и теоретической основой диссертационного исследования послужили работы зарубежных и отечественных исследователей, посвященные поиску возможных биомаркеров первичной открытоугольной глаукомы.

Для решения поставленных целей и задач при проведении исследования были применены клинический метод, инструментальный метод, биохимический метод, статистический метод. В работе были исследованы образцы жидкости передней камеры глаза 29 пациентов с катарактой, глаукомой и псевдоэксфолиативным синдромом методом хромато-масс-спектрометрии на приборе высокого разрешения и образцы слезной жидкости методом вестерн-блоттинга.

Основные научные положения, выносимые на защиту

1. При исследовании жидкости передней камеры глаза пациентов с первичной открытоугольной глаукомой было идентифицировано 12 белковых групп, не выявленных в других клинических группах. Полученные данные позволяют проводить дальнейшие исследования по определению данных белков в жидкости передней камеры глаза и установлению возможного биомаркера ПОУГ.

2. Объединение в одну группу белков жидкости передней камеры пациентов с катарактой в сочетании с ПЭС и без него, показывает наибольшее количество специфических белков (45 белковых групп). В данной объединенной группе представлены структурные компоненты вещества хрусталика, а наиболее обогащенный биологический процесс - дифференцировка кератиноцитов (p-value = 2,57 х 10-4). Предположительно, развитие катаракты сопровождается повреждением вещества хрусталика, что приводит к выделению в жидкость передней камеры его компонентов.

3. Исследование объединенного протеома жидкости передней камеры глаза для выявления определенных структурно-функциональных групп белков с использованием категорий Gene Ontology установило, что основной функцией протеома жидкости передней камеры является активность по ингибированию эндопептидаз, что является важным для предотвращения расщепления белков и нарушения прозрачности внутриглазных сред.

4. Выявленный при протеомном исследовании жидкости передней камеры белок аполипопротеин Э является потенциальным биомаркером псевдоэксфолиативного синдрома, что позволяет проводить раннюю диагностику данного синдрома.

Научная новизна исследования

1. В данном научном исследовании в жидкости передней камеры впервые идентифицированы 12 белковых групп, характерных для первичной открытоугольной глаукомы. Выявленные белки являются потенциальными биомаркерами данного заболевания. Это открывает перспективу для дальнейших исследований для поиска маркеров ПОУГ, прогнозирования течения данного заболевания и оценки эффективности проводимой терапии.

2. В ходе протеомного исследования жидкости передней камеры глаза впервые были идентифицированы группы белков, ранее не описанные в составе жидкости передней камеры и выявлены группы белков, характерные для катаракты, псевдоэксфолиативного синдрома и глаукомы.

3. На основании проведенного исследования определено, что основная функция белков жидкости передней камеры глаза - ингибирование эндопептидаз.

4. Установлено, что белок аполипопротеин D является потенциальным биомаркером псевдоэксфолиативного синдрома.

5. Объединение в одну группу белков жидкости передней камеры пациентов с катарактой в сочетании с псевдоэксфолиативным синдромом и без него, показало наибольшее количество специфических белков.

Теоретическая и практическая значимость

1. При проведении исследования жидкости передней камеры глаза необходимо обращать внимание на 12 белковых групп, выявленных при первичной открытоугольной глаукоме, так как данные белки являются потенциальными биомаркерами первичной открытоугольной глаукомы.

2. Анализ жидкости передней камеры глаза методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с высокоточной тандемной масс-спектрометрией является высокоточным и позволяет проводить дифференциальную диагностику таких заболеваний, как первичная открытоугольная глаукома и псевдоэксфолиативный синдром.

Соответствие диссертации Паспорту научной специальности

В соответствии с формулой научной специальности 14.01.07 - «Глазные

болезни (медицинские науки)», охватывающей проблемы разработки новых и

усовершенствование известных методов обследования органа зрения и его

придатков, методов диагностики различных заболеваний; изучение и

совершенствование методов диспансеризации пациентов с глаукомой и другими

видами прогрессирующей патологии глаза, в диссертационном исследовании

набраны 4 группы пациентов с катарактой, первичной открытоугольной

глаукомой и псевдоэксфолиативным синдромом. Все больные были клинически

обследованы с использованием стандартных и расширенного комплекса

диагностических методик.

В соответствии с формулой научной специальности 03.01.04 - «Биохимия

(биологические науки, химические науки, медицинские науки)», охватывающей

проблемы установления химического состава живых организмов, выявления

закономерностей строения, содержания и преобразования в процессе

жизнедеятельности организмов химических соединений, общих для живой

материи в целом; теоретические и прикладные проблемы закономерностей

химических превращений в живых организмах, молекулярных механизмов

интеграции клеточного метаболизма, связей биохимических процессов с

деятельностью органов и тканей, с жизнедеятельностью организма для решения

задач сохранения здоровья человека, выяснения причин различных болезней и

изыскания путей их эффективного лечения, в диссертационном исследовании

проведена идентификация протеомного профиля жидкости передней камеры

14

глаза пациентов с катарактой, первичной открытоугольной глаукомой и псевдоэксофлиативным синдромом и выявлены белки, характерные для каждой группы пациентов.

Соответствие диссертации области исследования Область диссертационного исследования Самохиной Н.И. включает разработку новых методов диагностики первичной открытоугольной глаукомы и соответствует п. №1 и №7 паспорта специальности 14.01.07 - «Глазные болезни (медицинские науки)», №3 и №10 паспорта специальности 03.01.04 -«Биохимия (биологические науки, химические науки, медицинские науки)».

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Понятие «глаукома» объединяет большую группу заболеваний глаза с различной этиологией. Все эти заболевания включают в себя повышение внутриглазного давления (ВГД) выше толерантного для зрительного нерва уровня, развитие глаукомной оптической нейропатии с последующей атрофией (с экскавацией) головки зрительного нерва, возникновение типичных дефектов поля зрения [5].

В патогенезе глаукомы важнейшее значение имеет нарушение гидродинамики глаза, соотношения продукции и оттока внутриглазной жидкости. Внутриглазная жидкость вырабатывается в задней камере глаза отростками цилиарного тела, а затем через отверстие зрачка поступает в переднюю камеру глаза, откуда направляется к углу передней камеры [6]. Отток водянистой влаги из передней камеры осуществляется через трабекулы, однако в зависимости от направления он может быть разделен на транстрабекулярный (синусный), осуществляемый сквозь трабекулы по интратрабекулярным пространствам и паратрабекулярный (увеальный). Последний состоит из интратрабекулярных щелей увеальных трабекул, непрерывно переходящих в межмышечные пространства цилиарной мышцы, сообщающиеся с супрацилиарным пространством [7, 8].

В патогенезе глаукомной оптической нейропатии принимают участие механические, сосудистые, метаболические факторы [1]. Повышение ВГД оказывает прямое повреждающее действие на структуры диска зрительного нерва (ДЗН). Дисциркуляторные нарушения приводят к изменению ауторегуляции кровотока к головке зрительного нерва, ишемии и гипоксии ткани ДЗН (механико-васкулярная теория патогенеза глаукомы) [9]. Эти факторы являются причиной дистрофии и деструкции аксонов, нарушения аксоплазматического тока и гибели ганглиозных клеток сетчатки.

Прогрессирующая атрофия тел ганглиозных клеток и их аксонов приводит к характерным изменениям ДЗН с развитием глаукоматозной экскавации.

В настоящее время широко используется классификация глаукомы, в которой учитываются форма и стадия заболевания, состояние уровня ВГД и динамика зрительных функций [2]. По происхождению глаукому подразделяют на первичную, вторичную и сочетанную с дефектами развития глаза или других органов [10]. По механизму повышения ВГД выделяют открытоугольную глаукому, закрытоугольную, с дисгенезом угла передней камеры, с претрабекулярным и периферическим блоком [2].

Первичная открытоугольная глаукома может возникать у лиц в возрасте старше 35 лет и, в основном, диагностируется в диапазоне от 55 до 60 лет. Этиология данного заболевания неизвестна. Угол передней камеры открыт и не склонен к закрытию. Поражаются оба глаза, но при этом патологический процесс асимметричен, иногда по времени существенно. Течение заболевания практически бессимптомно вплоть до появления существенных дефектов в поле зрения, заставляющих пациента обратиться к врачу. Иногда больные жалуются на ощущение тяжести, распирания в глазу, ощущения ложной слезы, отмечают частую смену очков, причем как для дали, так и для близи.

Возможные признаки заболевания: нарушение контрастной чувствительности, темновой адаптации, цветоощущения и проведения зрительного ощущения по off-каналам. Дефекты в поле зрения появляются с момента возникновения парацентральных скотом, расширения слепого пятна, дугообразной скотомы Бъеррума, назальной ступеньки. Затем суживаются границы поля зрения с носовой стороны, далее по мере прогрессирования заболевания - сверху, снизу и с височной сторон, до трубчатого поля зрения. В финале - слепота с остаточным островком светоощущения с темпоральной стороны.

ПОУГ разделяется на глаукому с повышенным внутриглазным давлением, глаукому с нормальным внутриглазным давлением, псевдоэксфолиативную, пигментную. При первичной глаукоме патогенные процессы, возникающие в углу передней камеры, дренажной системе глаза или в головке зрительного нерва, предшествующие возникновению заболевания, не имеют самостоятельного значения. Они являются начальными этапами патогенеза глаукомы [2, 10].

Механизм нарушения оттока водянистой влаги при ПОУГ связан с развитием трабекулопатии и функционального блока шлеммова канала. Развитие трабекулопатии обусловлено возрастными изменениями и/или (псевдо) эксфолиативным синдромом (ПЭС) или синдромом пигментной дисперсии. Изменение гидродинамики глаза приводит к повышению ВГД выше толерантного уровня и развитию атрофии ДЗН по глаукомному типу.

Традиционный интерес офтальмологов к проблеме глаукомы обусловлен многообразием клинических форм, сложностью патогенеза, ранней диагностики и лечения, медикосоциальной значимостью глаукомы [11]. Распознавание глаукомы на развитой и далекозашедшей стадиях, как правило, не представляет затруднений.

Особенности диагностики начальной стадии глаукомы вызваны главным образом двумя причинами: отсутствием точной границы между здоровьем и болезнью и относительностью всех нормативов, с которыми приходится иметь дело врачу. Ранняя (своевременная) диагностика необходима для выявления глаукомы до развития атрофических процессов в ДЗН, слое нервных волокон сетчатки и появлении типичных дефектов в поле зрения [12].

1.1 Методы исследования в ранней диагностике первичной открытоугольной глаукомы

Обследование на глаукому должно быть комплексным и не растянутым во

времени [12]. Стандартные диагностические методики включают в себя

18

суточную тонометрию, биомикроскопию, гониоскопию, офтальмоскопию, периметрию. В расширенный комплекс диагностических методик входит тонография, эластотонометрия, исследование уровня ВГД по хронобиологическим схемам и/или почасовая тонометрия, динамическая контурная тонометрия, транспальпебральная тонометрия, нагрузочные и/или разгрузочные пробы, исследование морфометрических и биомеханических свойств фиброзной оболочки глаза (пахиметрия, исследование вязкоэластических свойств), фотографирование (исследование) глазного дна с помощью фундус-камеры, Гейдельбергская ретинотомография, и/или лазерная поляриметрия, и/или оптическая когерентная томография (ОКТ), компьютерная периметрия, исследование кровообращения глаза, исследование перфузионного давления, флюоресцентная ангиография, ультразвуковые методы исследования, электрофизиологические методы исследования [12]. В настоящее время с учетом современных технологий для ранней диагностики ПОУГ (мониторинга) наиболее информативными методами исследования признаны бесконтактная тонометрия ORA, динамическая контурная тонометрия Pascal, ОКТ и коротковолновая автоматизированная или сине-жёлтая периметрия.

При обследовании одним из важнейших исследуемых показателей является уровень внутриглазного давления, что особенно важно у лиц с начальной стадией глаукомы, когда еще сложно установить другие характерные морфофункциональные изменения, или у больных с глаукомой нормального давления. При однократном измерении ВГД и получении величины, превышающей среднестатистическую верхнюю границу нормы на 2-4 мм, необходимо проводить тщательное дообследование пациента для исключения глаукомы. При этом, прежде всего необходимо повторное измерение уровня ВГД, так как возможны ошибки измерений, связанные с давлением на глазное яблоко, оказываемое специалистом, субъективной оценкой результатов и неточностью калибровки тонометров [12].

На сегодняшний день для измерения уровня ВГД используют аппланационную тонометрию по методу Маклакова, аппланационную тонометрию по методу Гольдмана, пневмотонометрию, бесконтактную тонометрия ORA, динамическую контурную тонометрию Pascal [13].

В настоящее время для коррекции показателей тонометрии необходимо исследование центральной толщины роговицы (пахиметрия). Данное исследование проводится ультразвуковым А-сканированием (контактным или иммерсионным способом). В соответствии с показателями пахиметрии центральную толщину роговицы принято классифицировать на тонкие (<520 мкм), нормальные (от 521 до 580 мкм) и толстые (>581 мкм). В то же время принято условное дополнительное деление тонких и толстых роговиц на ультратонкие (441-480 мкм) и ультратолстые (601-644 мкм).

Анализатор биомеханических свойств глаза Ocular Response Analyzer (ORA, Reichert Inc., США) является бесконтактным тонометром, работающим по принципу динамической двунаправленной аппланации роговицы. Измерения, произведенные на ORA, позволяют оценить ВГД по Гольдману, ВГД роговично-компенсированное, корнеальный гистерезис, фактор резистентности роговицы, центральную толщину роговицы [14].

Динамическая контурная тонометрия Pascal - модификация контактной тонометрии, исключающая влияние толщины роговицы на показатели измерения ВГД. Динамический контурный тонометр Pascal устанавливается на биомикроскоп, и на его экране учитывается среднее минимальное ВГД и амплитуда глазного пульса давления. Влияние толщины роговицы и ригидность элиминируются при помощи специального микросенсора, чувствительного к давлению и имитирующего кривизну роговицы [15].

Другой важный диагностический метод при глаукоме - гониоскопия -

изучение угла передней камеры, недоступного непосредственному

наблюдению. Осмотр угла передней камеры необходимо проводить для

20

постановки диагноза и для решении вопроса о дальнейшей тактике лечения (терапевтическое, лазерное или хирургическое), а также в послеоперационном периоде.

При обследовании пациента с подозрением на глаукому одним из важнейших этапов является исследование диска зрительного нерва. Наиболее оптимальным методом определения изменений структуры ДЗН является стереоскопия. При этом возможно проведение непрямой офтальмоскопии на щелевой лампе с линзами 60Д, 78Д или 90Д или прямой офтальмоскопии через центральную часть линзы Гольдмана.

При проведении офтальмоскопии прежде всего следует обращать внимание на окраску ДЗН. Для глаукомы характерны атрофические изменения в ДЗН, которые клинически проявляются в побледнении атрофических участков диска. Также следует оценивать размер экскавации ДЗН. По литературным данным, размер экскавации диска от 0,0 до 0,3 следует относить к нормальным размерам, от 0,4 до 0,6 - к группе относительного увеличения, а больше 0,6 - к группе повышенного риска развития глаукоматозной атрофии.

В начальной стадии глаукомы четких различий между физиологической и глаукоматозной экскавацией не существует. Постепенно происходит уменьшение ширины нейроретинального пояска. Истончение может быть равномерным по всей окружности, локальным, краевым или сочетанным. Обычно принимают во внимание форму и относительный размер экскавации, ее глубину, характер височного края [13, 16].

При офтальмоскопии возможна общая оценка состояния ДЗН, так как невозможно провести количественную оценку его морфометрической структуры. В настоящее время самыми точными методами исследования ДЗН является оптическая когерентная томография и ее ангио-разновидность, Гейдельбергская ретинальная томография (ИЯТ), а также комбинация этих методик [17].

ОКТ - по сути, метод, позволяющий оценить на гистологическом уровне морфологию тканей (форму, структуру, размер, пространственную организацию в целом) и их составных частей. Приборы, которые включают в себя современные ОКТ-технологии и такие методы, как фотоакустическая томография, спектроскопическая томография, поляризационная томография, допплерография и ангиография, эластография, оптофизиология, дают возможность оценить функциональное (физиологическое) и метаболическое состояние исследуемых тканей. В зависимости от возможностей, которыми может располагать ОКТ, ее принято классифицировать на морфологическую, функциональную и мультимодальную. ОКТ-ангиография является неинвазивной трехмерной альтернативой обычной ангиографии. К преимуществам метода относятся неинвазивность исследования, отсутствие необходимости применения флуоресцентных красителей, возможность измерения глазного кровотока в сосудах в количественном выражении [18].

ИЯТ обеспечивает измерение таких морфометрических параметров ДЗН, как размер, контур и форма, нейроретинальный поясок, экскавация, а также измерение перипапиллярной сетчатки и слоя нервных волокон сетчатки (СНВС). Также при ИЯТ происходит математический анализ полученных результатов и их сопоставление с заложенной в компьютерную систему базой данных. Ретинотомографы позволяют проводить диагностический поиск ранних повреждений ДЗН и СНВС у пациентов с подозрением на глаукому, а также мониторинг оптической нейропатии.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Самохина Надежда Ильдаровна, 2020 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Нестеров А.П. Глаукома // М.: Медицина. 1995. 246 с.

2. Нестеров А.П., Егоров Е.А. Классификация глаукомы // Клиническая офтальмология. 2001. № 2 (2). С. 35-38.

3. Quigley H.A. Number of people with glaucoma worldwide // Br. J. Ophthalmol. 1996. Vol. 80 (5). P. 389-393.

4. Quillen D.A. Common causes of vision loss in elderly patients // Am Fam Phisician. 1999. Vol. 60 (1). P. 99-108.

5. Егоров Е.А. Клинические лекции п5о офтальмологии // М.: Гэотар-Медиа. 2007. 20 с.

6. Grub M., Mielke J. Aqueous humor dynamics // Ophthalmology. 2004. Vol. 101 (4). P. 357-365.

7. Золотарев А.В., Карлова Е.В., Николаева Г.А. Роль трабекулярной сети в осуществлении увеосклерального оттока. // Клиническая офтальмология. 2006. № 2. С. 67-69.

8. Nilsson S.F. The uveoscleral outflow routes // Eye. 1997. Vol. 11 (2). P. 149-154.

9. Hayreh S.S. The pathogenesis of optic nerve lesions in glaucoma // Transactions. Section on Ophthalmology. American Academy of Ophthalmology and Otolaryngology. 1976. Vol. 81 (2). P. 197-213.

10.Кански Д.Д. Клиническая офтальмология: систематизированный подход. Глава 13. Глаукома // М.: Логосфера. 2010. С. 13-32.

11.Егоров Е.А., Ставицкая Т.В., Налобнова Ю.В. Электрофизиологические и психофизические методы исследования в ранней диагностике глаукомы // Клиническая офтальмология. 2003. № 4 (2). С. 68-70.

12.Егоров Е.А., Астахов Ю.С., Щуко А.Г. Национальное руководство по глаукоме для практикующих врачей // М.: Гэотар-Медиа. 2011. 280 с.

13.Егоров Е.А., Астахов Ю.С., Щуко А.Г. Национальное руководство по глаукоме: путеводитель для поликлинических врачей // М.: Гэотар-Медиа. 2008. C. 9-55.

14.Егоров Е.А., Васина М.В. Значение исследования биомеханических свойств роговой оболочки в оценке офтальмотонуса // Клиническая офтальмология. 2008. № 1 (9). С. 1-4.

15.Костова С., Ангелов Б., Петкова Н. Сравнительное исследование внутриглазного давления при первичной открытоугольной глаукоме, измеренного с помощью контурного динамического тонометра Pascal, аппланационного тонометра Goldmann и аппланационного тонометра Маклакова // Клиническая офтальмология. 2009. № 4 (10). С. 123-125.

16. Нестеров А.П. Глаукома (изд. 2-е) // М.: МИА. 2008. 360 с.

17.Гапонько О.В., Куроедов А.В., Городничий В.В., Огородникова В.Ю., Захарова М.А., Кондракова И.В., Кузнецов К.В., Фомин Н.Е. Новые морфометрические маркеры диагностики глаукомы // Клиническая офтальмология. 2016. № 1 (16). С. 1-6.

18. Захарова М.А., Куроедов А.В. Оптическая когерентная томография: технология, ставшая реальностью // Клиническая офтальмология. 2015. № 4 (15). С. 204-211.

19.Сердюкова С.А., Симакова И.Л. Компьютерная периметрия в диагностике первичной открытоугольной глаукомы // Офтальмологические ведомости. 2018. № 1 (11). С. 54-65.

20.Grus F.H., Joachim S.C., Pfeiffer N. Proteomics in ocular fluids // Wiley-VCH. 2007. Vol. 1 (8). P. 876-888.

21.Anderson N.L., Anderson N.G.. Proteome and proteomics: new technologies, new concepts, and new words // Electrophoresis. 1998. Vol. 19 (11). P. 1853-1861.

22.Engholm-Keller K., Larsen M.R. Technologies and challenges in large-scale phosphoproteomic // Proteomics. 2013. Vol. 13 (6). P. 910-931.

23.James P. Protein identification in the post-genome era: the rapid rise of proteomics // Quarterly reviews of biophysics. 1997. Vol. 30 (4). P. 279-331.

24.Говорун В.М., Арчаков А.И. Протеомные технологии в современной биомедицинской науке // Биохимия. 2002. № 10 (67). С. 1341-1359.

25.Shi R., Kumar C., Zougman A., Zhang Y, Podtelejnikov A, Cox J, Wisniewski JR, Mann M. Analysis of the mouse liver proteome using advanced mass spectrometry // J Proteome Res. 2007. Vol. 6 (8). P. 2963-2972.

26.Nelsestuen G.L., Zhang Y., Martinez M.B., Key N.S., Jilma B., Verneris M., Sinaiko A., Kasthuri R.S. Plasma protein profiling: unique and stable features of individuals // Proteomics. 2005. Vol. 5 (15). P. 4012-4024.

27.Hu S., Loo J.A., Wong D.T. Human body fluid proteome analysis // Proteomics. 2006. Vol. 6 (23). P. 6326-6353.

28.Власова М.А., Мошковский С.А., Сафарова М.Р., Макаров О.В., Арчаков А.И. Молекулярная диагностика рака яичника с использованием протеомных технологий // Биомедицинская химия. 2005. № 51 (4). С. 367-383.

29.Soltys S.G., Shi G., Tibshirani R. et al. The use of plasma SELDI-TOF MS proteomic patterns for detection of head and neck squamous cell cancers (HNSCC) // Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 2003. Vol. 57. P. 202.

30.Zhang Z., Bast R.C., Yu Y. et al. Three biomarkers identified from serum proteomic analysis for the detection of early stage ovarian cancer // Cancer Res. 2004. Vol. 64. P. 5882-5890.

31.Знаменская Л.Ф. Протеомные технологии в изучении патогенеза псориаза // Вестник дерматологии и венерологии. 2011. № 3. С. 27-33.

32.Гасанов М.З., Батюшин М.М., Терентьев В.П., Садовничая Н.А. Протеомный спектр мочи пациентов с хроническим гломерулонефритом // Клиническая нефрология. 2012. № 5. С. 28-32.

33.Grus F.H., Podust V.N., Bruns K., Lackner K., Fu S., Dalmasso E.A., Wirthlin A., Pfeiffer N. SELDI-TOF-MS ProteinChip array profiling of tears from patients with dry eye // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2005. Vol. 46. P. 863-876.

34.Ohashi Y., Ishida R., Kojima T., Goto E., Matsumoto Y., Watanabe K., Ishida N., Nakata K., Takeuchi T., Tsubota K. Abnormal protein profiles in tears with dry eye syndrome // Am. J. Ophthalmol. 2003. Vol. 136. P. 291-299.

35.Scherz W. Keratoconjunctivitis sicca caused by denervation of lacrimal gland // Klin. Monatsbl. Augenheilkd. 1979. Vol. 174. P. 188-192.

36.Fine H.F., Baffi J., Reed G.F., Csaky K.G., Nussenblatt R.B. Aqueous humor and plasma vascular endothelial growth factor in uveitis-associated cystoid macular edema // Am. J. Ophthalmol. 2001. Vol. 132. P. 794-796.

37.Chen H., Wu L., Pan S., Wu D.Z. An immunologic study on age-related macular degeneration // Yan Ke Xue Bao. 1993. Vol. 9. P. 113-120.

38.Ethen C.M., Reilly C., Feng X., Olsen T.W., Ferrington D.A. The proteome of central and peripheral retina with progression of age-related macular degeneration // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2006. Vol. 47. P. 2280-2290.

39.Gurne D.H., Tso M.O., Edward D.P., Ripps H. Antiretinal antibodies in serum of patients with age-related macular degeneration // Ophthalmology. 1991. Vol. 98. P. 602-607.

40.Patel N., Ohbayashi M., Nugent A.K., Ramchand K., Toda M., Chau K.Y., Bunce C., Webster A., Bird A.C., Ono S.J., Chong V. Circulating anti-retinal antibodies as immune markers in age-related macular degeneration // Immunology. 2005. Vol. 115. P. 422-430.

41.Penfold P.L., Provis J.M., Furby J.H., Gatenby P.A., Billson F. A. Autoantibodies to retinal astrocytes associated with age-related macular degeneration // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1990. Vol. 228. P. 270-274.

42.Funatsu H., Yamashita H., Noma H., Mimura T., Yamashita T, Hori S. Increased levels of vascular endothelial growth factor and interleukin-6 in the aqueous humor of diabetics with macular edema // Am. J. Ophthalmol. 2002. Vol. 133. P. 70-77.

43.Patel J.I., Tombran-Tink J., Hykin P.G., Gregor Z.J., Cree I.A. Vitreous and aqueous concentrations of proangiogenic, antiangiogenic factors and other cytokines in diabetic retinopathy patients with macular edema: Implications for structural differences in macular profiles // Exp. Eye. Res. 2006. Vol. 82. P. 798-806.

44.Бродская М.В., Бабижаев М.А., Ермолин Г.А. Об участии фибронектина в механизмах дистрофических изменений дренажной системы глаз при открытоугольной глаукоме // Вестник офтальмологии. 1988. № 104 (6). С. 10-13.

45.Hu D.N., Ritch R., Liebmann J., Liu Y., Cheng B., Hu M.S. Vascular endothelial growth factor is increased in aqueous humor of glaucomatous eyes // J. Glaucoma. 2002. Vol. 11. P. 406-410.

46.Knepper P.A., Mayanil C.S., Goossens W., Wertz R.D., Holgren C., Ritch R., Allingham R.R. Aqueous humor in primary open-angle glaucoma contains an increased level of CD44S // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2002. Vol. 43. P. 133-139.

47.Kuchle M., Ho T.S., Nguyen N.X., Hannappel E., Naumann G.O.H. Protein quantification and electrophoresis in aqueous humor of pseudoexfoliation eyes // Invest Ophthalmol Vis Sci. 1994. Vol. 35. P. 748-752.

48.Vesaluoma M., Mertaniemi P., Mannonen S., Lehto I., Uusitalo R., Sarna S., Tarkkanen A., Tervo T. Cellular and plasma fibronectin in the aqueous humour of primary open-angle glaucoma, exfoliative glaucoma and cataract patients // Eye. 1998. Vol. 12. P. 886-890.

49. Сомов Е.Е., Бржеский В.В. Слеза // СПб.: Наука; 1994. 156 с.

50.Мошетова Л.К., Волков О.А. Современное представление о слезной жидкости, значение ее в диагностике // Клиническая офтальмология. 2004. № 5 (4). С. 138141.

51.Holly F.J., Lemp M.A. Tear physiology and dry eyes // Surv. Ophthalmol. 1977. Vol. 22. P. 69-87.

52.Schein O.D., Munoz B., Tielsch J.M., Bandeen-Roche K., West S. Prevalence of dry eye among the elderly // Am. J. Ophthalmol. 1997. Vol. 124. P. 723-728.

53.Gachon A.M., Richard J., Dastugue B. Human tears: Norma protein pattern and individual protein determinations in adults // Curr. Eye Res. 1982. Vol. 2. P. 301-308.

54.Pietsch R.L., Pearlman M.E. Human tear lysozyme variables // Arch. Ophthalmol. 1973. Vol. 90. P. 94-96.

55.Broekhuyse R.M. Tear lactoferrin: A bacteriostatic and complexing protein // Invest. Ophthalmol. 1974. Vol. 13. P. 550-554.

56.Molloy M.P., Bolis S., Herbert B.R., Ou K. Tyler M.I., van Dyk D.D., Willcox M.D., Gooley A.A., Williams K.L., Morris C.A., Walsh B.J. Establishment of the human reflex tear two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis reference map: new proteins of potential diagnostic value // Electrophoresis. 1997. Vol. 18. P. 2811-2815.

57.Dogru M., Katakami C., Inoue M., Tear function and ocular surface changes in noninsulin-dependent diabetes mellitus // Ophthalmology. 2001. Vol. 108. P. 586592.

58.Evans V., Vockler C., Friedlander M., Walsh B., Willcox M.D. Lacryglobin in human tears, a potential marker for cancer // Clin. Exp. Ophthalmol. 2001. Vol. 29. P. 161163.

59.Herber S., Grus F.H., Sabuncuo P., Augustin A.J., Changes in the tear protein patterns of diabetic patients using two-dimensional electrophoresis // Adv. Exp. Med. Biol. 2002. Vol. 506. P. 623-626.

60.Herber S., Grus F.H., Sabuncuo P., Augustin A.J. Twodimensional analysis of tear protein patterns of diabetic patients // Electrophoresis. 2001. Vol. 22. P. 1838-1844.

61.Stolwijk T.R., Kuizenga A., van Haeringen N.J., Kijlstra A. Oosterhuis J.A., van Best J.A. Analysis of tear fluid proteins in insulin-dependent diabetes mellitus // Acta Ophthalmol. 1994. Vol. 72. P. 357-362.

62.Civan M.M., Macknight A.D. The ins and outs of aqueous humour secretion // Exp. Eye Res. 2004. Vol. 78. P. 625-631.

63.Jonsson M., Markstrom K., Behndig A. Slit-scan tomography evaluation of the anterior chamber and corneal con figurations at different ages // Acta Ophthalmol. Scand. 2006. Vol. 84. P. 116-120.

64.Toris C.B., Yablonski M.E., Wang Y.L., Camras C.B. Aqueous humor dynamics in the aging human eye // Am. J. Ophthalmol. 1999. Vol. 127. P. 407-412.

65.Weinstein B.I., Iyer R.B., Binstock J.M. et al. Decreased 3 alpha-hydroxysteroid dehydrogenase activity in peripheral blood lymphocytes from patients with primary open angle glaucoma // Exp Eye Res. 1996. Vol. 62 (1). P. 39-45.

66.Katoh Y., Katoh M. Comparative integromics on Angiopoietin family members // Int J Mol Med. 2006. Vol. 17 (6). P. 1145-1149.

67.Camenisch G., Pisabarro M.T., Sherman D. et al. ANGPTL3 stimulates endothelial cell adhesion and migration via integrin alpha v beta 3 and induces blood vessel formation in vivo // J Biol Chem. 2002. Vol. 277 (19). P. 17281-17290.

68.Oike Y., Yasunaga K., Suda T. Angiopoietin-related/angiopoietin-like proteins regulate angiogenesis // Int J Hematol. 2004. Vol. 80 (1). P. 21-8.

69.Sukonina V., Lookene A., Olivecrona T., Olivecrona G. Angiopoietin-like protein 4 converts lipoprotein lipase to inactive monomers and modulates lipase activity in adipose tissue // Proc Natl Acad Sci USA. 2006. Vol.103 (46). P. 17450-17455.

70.Kuchtey J., Kallberg M.E., Gelatt K.N. et al. Angiopoietin-like 7 secretion is induced by glaucoma stimuli and its concentration is elevated in glaucomatous aqueous humor // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008. Vol. 49 (8). P. 3438-3448.

71.Castany M., Jordi I., Catala J., Gual A., Morales M., Gasull X., Pintor J. Glaucoma patients present increased levels of diadenosine tetraphosphate, Ap(4)A, in the aqueous humour // Exp Eye Res. 2011. Vol. 92 (3). P. 221-226.

72.Bochner B.R., Lee P.C., Wilson S.W., Cutler C.W., Ames B.N. AppppA and related adenylylated nucleotides are synthesized as a consequence of oxidation stress // Cell. 1984. Vol. 37 (1). P. 225-232.

73.Ghaffariyeh A., Honarpisheh N., Heidari M.H. et al. Brain-derived neurotrophic factor as a biomarker in primary open-angle glaucoma // Optom Vis Sci. 2011. Vol. 88 (1). P. 80-85.

74.Duan X., Xue P., Wang N. et al. Proteomic analysis of aqueous humor from patients with primary open angle glaucoma // Mol Vis. 2010. Vol. 16. P. 2839-2846.

75.Entwistle J., Hall C.L., Turley E.A. HA receptors: regulators of signaling to the cytoskeleton // J Cell Biochem. 1996. Vol. 61. P. 569-577.

76.Sherman L., Sleeman J., Dall P., Hekele A., Moll J., Ponta H., Herrlich P. The CD44 proteins in embryonic development and in cancer // Curr Top Microbiol Immunol. 1996. Vol. 213 (1). P. 249-269.

77.Kaya G., Rodriguez I., Jorcano J.L., Vassalli P., Stamenkovic I. Selective suppression of CD44 in keratinocytes of mice bearing an antisense CD44 transgene driven by a tissue-specific promoter disrupts hyaluronate metabolism in the skin and impairs keratinocyte proliferation // Genes Dev. 1997. Vol. 11. P. 996-1007.

78.Chaitin M.H., Wortham H.S., Brun-Zinkernagel A.M. Immunocytochemical localization of CD44 in the mouse retina // Exp Eye Res. 1994. Vol. 58. P. 359-365.

79.Nishina S., Hirakata A., Hida T., Sawa H., Azuma N. CD44 expression in the developing human retina // Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 1997. Vol. 35. P. 9296.

80.Knepper P.A., Miller A.M., Choi J., Wertz R.D., Nolan M.J., Goossens W., Whitmer S., Yue B.Y., Ritch R., Liebmann J.M., Allingham R.R., Samples J.R. Hypophosphorylation of aqueous humor sCD44 and primary open-angle glaucoma // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2005. Vol. 46. P. 2829-2837.

81.Kuchtey J., Rezaei K.A., Jaru-Ampornpan P., Sternberg P.J., Kuchtey R.W. Multiplex cytokine analysis reveals elevated concentration of interleukin-8 in glaucomatous aqueous humor // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010. Vol. 51. P. 6441-6447.

82.Sawada H., Fukuchi T., Tanaka T., Abe H. Tumor necrosis factoralpha concentrations in the aqueous humor of patients with glaucoma // Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010. Vol. 51. P. 903-906.

83.Sakanaka M., Wen T.C., Matsuda S. et al. In vivo evidence that erythropoietin protects neurons from ischemic damage // Proc Natl Acad Sci USA. 1998. Vol. 95 (8). P. 4635-4640.

84.Mokbel T.H., Ghanem A.A., Kishk H. et al. Erythropoietin and soluble CD44 levels in patients with primary open-angle glaucoma // Clin Experiment Ophthalmol. 2010. Vol. 38 (6). P. 560-565.

85.Cumurcu T., Bulut Y., Demir H.D., Yenisehirli G. Aqueous humor erythropoietin levels in patients with primary open-angle glaucoma // J Glaucoma. 2007. Vol. 16 (8). P. 645-648.

86.Chai F., Luo R., Li Y. et al. Down-regulation of GRP78 in human glaucomatous trabecular meshwork cells // Mol Vis. 2010. Vol. 16. P. 1122-1131.

87.Nemeth E., Tuttle M.S., Powelson J. et al. Hepcidin regulates cellular iron efflux by binding to ferroportin and inducing its internalization // Science. 2004. Vol. 306 (5704). P. 2090-2093.

88.Gnana-Prakasam J.P., Martin P.M., Mysona B.A. et al. Hepcidin expression in mouse retina and its regulation via lipopolysaccharide/Toll-like receptor-4 pathway independent of Hfe // Biochem J. 2008. Vol. 411 (1). P. 79-88.

89.Sorkhabi R., Ghorbanihaghjo A., Javadzadeh A. et al. Aqueous humor hepcidin prohormone levels in patients with primary open angle glaucoma // Mol Vis. 2010. Vol. 16. P. 1832-1836.

90.Ghanem A.A., Mady S.M., El Awady H.E., Arafa L.F. Homocysteine and hydroxyproline levels in patients with primary open-angle glaucoma // Curr Eye Res. 2012. Vol. 37 (8). P. 712-718.

91.Howell K.G., Vrabel A.M., Chowdhury U.R. et al. Myocilin levels in primary open-angle glaucoma and pseudoexfoliation glaucoma human aqueous humor // J Glaucoma. 2010. Vol. 19 (9). P. 569-575.

92.Moncada S., Palmer R.M., Higgs E.A. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology // Pharmacol Rev. 1991. Vol. 43 (2). P. 109-142.

93.Ragolia L., Palaia T., Paric E., Maesaka J.K. Prostaglandin D2 synthase inhibits the exaggerated growth phenotype of spontaneously hypertensive rat vascular smooth muscle cells // J Biol Chem. 2003. Vol. 278 (24). P. 22175-22181.

94.Aho V.V., Nevalainen T.J., Paavilainen V., Saari K.M. Group II phospholipase A2 content of tears in patients with senile cataract and primary open-angle glaucoma // Eur J Ophthalmol. 2002. Vol. 12 (1). P. 40-43.

95.Ronkko S., Rekonen P., Kaarniranta K. et al. Phospholipase A2 in chamber angle of normal eyes and patients with primary open angle glaucoma and exfoliation glaucoma // Mol Vis. 2007. Vol. 13. P. 408-417.

96.Tripathi R.C., Kolli S.P., Borisuth N.S., Tripathi B.J. Identification and quantification of transferrin receptors on trabecular cells // Invest Ophthalmol Vis Sci. 1992. Vol. 33 (12). P. 3449-3454.

97.Monaco H.L., Rizzi M., Coda A. Structure of a complex of two plasma proteins: transthyretin and retinol-binding protein // Science. 1995. Vol. 268 (5213). P. 10391041.

98.Grus F.H., Joachim S.C., Sandmann S. et al. Transthyretin and complex protein pattern in aqueous humor of patients with primary open-angle glaucoma // Mol Vis. 2008. Vol. 14. P. 1437-1445.

99.Бржеский В.В. Изменения роговицы ксеротической природы // Новое в офтальмологии. 2014. № 3. С. 80-87.

100. Pflugfelder S.C. Antiinflammatory therapy for dry eye // Am. J. Ophthalmol. 2004. Vol. 137. P. 337-342.

101. Kijlstra A., Jeurissen S.H., Koning K.M. Lactoferrin levels in normal human tears // Br. J. Ophthalmol. 1983. Vol. 67. P. 199-202.

102. Ермакова Н.А., Рабданова О.Ц. Основные этиологические факторы и патогенетические механизмы развития возрастной макулярной дегенерации // Клиническая офтальмология. 2007. № 8 (3). С. 125-128.

103. Бобкова И.Н., Чеботарева Н.В., Козловская Л.В., Непринцева Н.В. Защитное действие белков теплового шока при заболеваниях почек // Клиническая нефрология. 2011. № 6. С. 59-66.

104. Вельков В.В. С-белок - структура, функция, методы определения // Медицинский дайджест. Медэксперт. 2008. № 2. С. 33-36.

105. Anderson D.H., Mullins R.F., Hageman G.S., Johnson L.V. A role for local inflammation in the formation of drusen in the aging eye // Am. J. Ophthalmol. 2002. Vol. 134. P. 411-431.

106. Годзенко А.А. Перспективы лечения увеита при ревматических заболеваниях // Современная ревматология. 2011. Vol. 2. P. 37-42.

107. Аветисов С.Э. Офтальмология. Национальное руководство // М.: Гэотар-Медиа. 2008. С. 482-523.

108. Lightman S., Uveitis: What do we know and how does it help? // Clin. Exp. Ophthalmol. 2001. Vol. 29. P. 48-51.

109. Мошетова Л.К., Аржиматова Г.Ш., Строков И.А., Яровая Г.А. Современная антиоксидантная терапия диабетической ретинопатии // Клиническая офталтмология. 2006. № 7 (1). С. 36-38.

110. Lueder G.T., Silverstein J. Screening for retinopathy in the pediatric patient with type 1 diabetes mellitus // Pediatrics. 2005. Vol. 116. P. 270-273.

111. Воробьева И.В., Меркушенкова Д.А., Эстрин Л.Г. Роль фактора роста эндотелия сосудов в развитии диабетической ретинопатии и диабетического макулярного отека у больных сахарным диабетом второго типа // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. 2012. № 3. С. 48-55.

112. Соловьева Н.И. Основные металлопротеиназы соединительно-тканного матрикса // Биоорганическая химия. 1994. № 20 (2). С. 143-152.

113. Schlotzer-Schrehardt U., Lommatzsch J., Kuchle M., Konstas A. G., Naumann G. O. Matrix metalloproteinases and their inhibitors in aqueous humor of patients with pseudoexfoliation syndrome/glaucoma and primary open-angle glaucoma // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 2003. Vol. 44. P. 1117-1125.

114. Ruoslahti E. Fibronectin and its receptors // Annu Rev Biochem. 1988. Vol. 57. P. 375-413.

115. Schlatzer-Schrehardt U., Darfler S., Naumann G.O.H. Immunohistochemical localization of basement membrane components in pseudoexfoliation material of the lens capsule // Curr. Eye Res. 1992. Vol. 11. P. 343-355.

116. Kim K.S., Lee B.H., Kim I.S. Measurement of fibronectin concentrations in human aqueous humor // Korean J. Ophthalmol. 1992. Vol. 6. P. 1-5.

117. Knepper P.A., Goossens W., Mayanil C.S. CD44H localization in primary open-angle glaucoma // Invest Ophthalmol. Vis. Sci. 1998. Vol. 39. P. 673-680.

118. Tezel G., Hernandez R., Wax M. Immunostaining of heat shock proteins in the retina and optic nerve head of normal and glaucomatous eyes // Arch. Ophthalmol. 2000; Vol. 118. P. 511-518.

119. Park K., Cozier F., Ong O., Caprioli J. Induction of heat shock protein 72 protects retinal ganglion cells in a rat glaucoma model // Arch. Ophthalmol. 2006. Vol. 137. P. 89-97.

120. Wiechelman K., Braun R., Fitzpatrick J. Investigation of the bicinchoninic acid protein assay: Identification of the groups responsible for color formation // Analytical Biochemistry. 1988. Vol. 175 (1). P. 231-237.

121. Smith P.K., Krohn R.I., Hermanson G.T., Mallia A.K., Gartner F.H., Provenzano M.D., Fujimoto E.K., Goeke N.M., Olson B.J., Klenk D.C. Measurement of protein using bicinchoninic acid // Anal Biochem. 1985 Vol. 150 (1). P. 76-85.

122. Neuhauser N., Nagaraj N., McHardy P., Zanivan S., Scheltema R., Cox J., Mann M. High performance computational analysis of large-scale proteome data sets to assess incremental contribution to coverage of the human genome // J Proteome Res. 2013. Vol. 12 (6). P. 2858-2868.

123. Cox J., Neuhauser N., Michalski A., Scheltema R.A., Olsen J.V., Mann M. Andromeda: a peptide search engine integrated into the MaxQuant environment // J Proteome Res. 2011. Vol. 10 (4). P. 1794-1805.

124. Rivals I., Personnaz L., Taing L., Potier M.C. Enrichment or depletion of a GO category within a class of genes: which test? // Bioinformatics. 2007. Vol. 23 (4). P. 401-7.

125. Benjamini Y., Hochberg Y. Controlling the false discovery rate: a practical and powerful approach to multiple testing // Journal of the Royal Statistical Society, Series B. 1995. Vol. 57 (1). P. 11.

126. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. Vol. 227. P. 680-685.

127. Naryzhny S.N. Blue Dry Western: simple, economic, informative, and fast way of immunodetection // Anal. Biochem. 2009. Vol. 392 (1). P. 90-5.

128. Harlow E., Lane D. Using Antibodies: A Laboratory Manual // New York: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988.

129. Blake J.A., Dolan M., Drabkin H., Hill D.P. et al. Gene ontology annotations and resources // Nucleic Acids Res. 2013. Vol. 41. P. 530-535.

130. Sharma K.K., Santhoshkumar P. Lens aging: effects of crystallins // Biochim. Biophys. Acta. 2009. Vol. 1790 (10). P. 1095-1108.

131. Rao G., Santhoshkumar P., Sharma K.K. Anti-chaperone betaA3/A1(102-117) peptide interacting sites in human alphaB-crystallin // Mol. Vis. 2008. Vol. 14. P. 666-674.

132. Bouck N. PEDF: anti-angiogenic guardian of ocular function // Trends Mol. Med. 2002. Vol. 8. P. 330-334.

133. Schittek B., Hipfel R., Sauer B., Bauer J. et al. Dermcidin: a novel human antibiotic peptide secreted by sweat glands // Nat. Immunol. 2001. Vol. 2. P. 11331137.

134. Urade Y., Hayaishi O. Prostaglandin D synthase: structure and function // Vitam. Horm. 2000. Vol. 58. P. 89-120.

135. Bantscheff M., Schirle M., Sweetman G., Rick J., Kuster B. Quantitative mass spectrometry in proteomics: a critical review // Analytical and Bioanalytical Chemistry. 2007. Vol. 389 (4). P. 1017-1031.

136. Talmud P.J., Humphries S.E. Apolipoprotein C-III gene variation and dyslipidaemia // Curr. Opin. Lipidol. 1997. Vol. 8 (3). P. 154-158.

137. Kaushansky K., Lichtman M., Beutler E., Kipps T., Prchal J., Seligsohn U. Williams Hematology // McGraw-Hill. 2010. Edition 8. P. 1833-1834, 2040-2041.

138. Boffa M.B., Reid T.S., Joo E., Nesheim M.E., Koschinsky M.L. Characterization of the gene encoding human TAFI (thrombin-activable fibrinolysis inhibitor; plasma procarboxypeptidase B) // Biochemistry. 1999. Vol. 38 (20). P. 6547-6558.

139. Retief E., Parker M.I., Retief A.E. Regional chromosome mapping of human collagen genes alpha 2(I) and alpha 1(I) (COLIA2 and COLIA1) // Hum Genet. 1985. Vol. 69 (4). P. 304-308.

140. Hata R., Kurata S., Shinkai H. Existence of malfunctioning pro alpha2(I) collagen genes in a patient with a pro alpha 2(I)-chain-defective variant of Ehlers-Danlos syndrome // Eur J Biochem. 1988. Vol. 174 (2). P. 231-237.

141. Brewton R.G., Wood B.M., Ren Z.X., Gong Y., Tiller G.E., Warman M.L., Lee B., Horton W.A., Olsen B.R., Baker J.R. et al. Molecular cloning of the alpha 3 chain of human type IX collagen: linkage of the gene COL9A3 to chromosome 20q13.3 // Genomics. 1996. Vol. 30 (2). P. 329-336.

142. Wu J.J., Woods P.E., Eyre D.R. Identification of cross-linking sites in bovine cartilage type IX collagen reveals an antiparallel type II-type IX molecular relationship and type IX to type IX bonding // J Biol Chem. 1992. Vol. 267 (32). P. 23007-23014.

143. Sörman A., Zhang L., Ding Z., Heyman B. How antibodies use complement to regulate antibody responses // Mol Immunol. 2014. Vol. 61 (2). P. 79-88.

144. Mayilyan K.R. Complement genetics, deficiencies, and disease associations // Protein Cell. 2012. Vol. 3 (7). P. 487-496.

145. Северин Е.С. Биохимия: учебник для вузов // Гэотар-Медиа. 2003. Стр. 712-715.

146. Bach L.A. Insulin-Like Growth Factor Binding Proteins // Pediatr Endocrinol. 2015. Vol. 13 (2). P. 521-30.

147. Gullu G., Karabulut S., Akkiprik M. Functional roles and clinical values of insulin-like growth factor-binding protein-5 in different types of cancers // Chinese journal of cancer. 2012. Vol. 31. P. 266-280.

148. Baxter R.C. IGF binding proteins in cancer: mechanistic and clinical insights // Nature reviews Cancer. 2014. Vol. 14. P. 329-341.

149. Akkiprik M., Feng Y., Wang H., Chen K., Hu L., Sahin A., Krishnamurthy S., Ozer A., Hao X., Zhang W. Multifunctional roles of insulin-like growth factor binding protein 5 in breast cancer // Breast cancer research: BCR. 2008. Vol. 10. P. 212.

150. Janosi J.B., Ramsland P.A., Mott M.R., Firth S.M., Baxter R.C., Delhanty P.J. The acid-labile subunit of the serum insulin-like growth factor-binding protein complexes. Structural determination by molecular modeling and electron microscopy // J Biol Chem. 1999. Vol. 274. P. 23328-23332.

151. Ferri G.L., Noli B., Brancia C., D'Amato F., Cocco C. VGF: an inducible gene product, precursor of a diverse array of neuro-endocrine peptides and tissue-specific disease biomarkers // Journal of chemical neuroanatomy. Vol. 42. P. 249-261.

152. Busse S., Steiner J., Micheel J., Dobrowolny H., Mawrin C., Krause T.J., Adamaszek M., Bogerts B., Bommhardt U., Hartig R., Busse M. Age-related increase of VGF-expression in T lymphocytes // Aging (Albany NY). 2014. Vol. 6 (6). P. 440453.

153. Ekizoglu S., Ulutin T., Guliyev J., Buyru N. PRR4: A novel downregulated gene in laryngeal cancer // Oncol Lett. 2018. Vol. 15 (4). P. 4669-4675.

154. Aluru S.V., Agarwal S., Srinivasan B., Iyer G.K., Rajappa S.M., Tatu U., Padmanabhan P., Subramanian N., Narayanasamy A. Lacrimal proline rich 4 (LPRR4) protein in the tear fluid is a potential biomarker of dry eye syndrome // PLoS One. 2012. Vol. 7 (12). P. 51979.

155. Sage H., Johnson C., Bornstein P. Characterization of a novel serum albumin-binding glycoprotein secreted by endothelial cells in culture. // J. Biol. Chem. 1984. Vol. 259 (6). P. 3993-4007.

156. Kupprion C., Motamed K., Sage E.H. SPARC (BM-40, osteonectin) inhibits the mitogenic effect of vascular endothelial growth factor on microvascular endothelial cells // J. Biol. Chem. 1998. Vol. 273 (45). P. 29635-29640.

157. Funk S.E., Sage E.H. The Ca2(+)-binding glycoprotein SPARC modulates cell cycle progression in bovine aortic endothelial cells // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1991. Vol. 88 (7). P. 2648-2652.

158. Chowdhury U.R., Madden B.J., Charlesworth M.C., Fautsch M.P. Proteome analysis of human aqueous humor // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2010. Vol. 51. P. 4921-4931.

159. Bennett K.L., Funk M., Tschernutter M., Breitwieser F.P. et al. Proteomic analysis of human cataract aqueous humour: comparison of one-dimensional gel LCMS with two-dimensional LCMS of unlabelled and iTRAQR-labelled specimens // J. Proteomics. 2011. Vol. 74. P. 151-166.

160. Murthy K.R., Rajagopalan P., Pinto S.M., Advani J. et al. Proteomics of human aqueous humor // OMICS. 2015. Vol. 19. P. 283-293.

161. Ji Y., Rong X., Ye H., Zhang K., Lu Y. Proteomic analysis of aqueous humor proteins associated with cataract development // Clin. Biochem. 2015. Vol. 48. P. 1304-1309.

162. Horwitz J. Alpha-crystallin // Exp. Eye Res. 2003. Vol. 76. P. 145-153.

163. Yi J., Yun J., Li Z.K., Xu C.T., Pan B.R. Epidemiology and molecular genetics of congenital cataracts // Int. J. Ophthalmol. 2011. Vol. 4. P. 422-432.

164. Bhatia S., Knoch B., Wong J., Kim W.S. et al. Selective reduction ofhydroperoxyeicosatetraenoic acids to their hydroxy derivatives by apolipoprotein D: implications for lipid antioxidant activity and Alzheimer's disease // Biochem. J. 2012. Vol. 442. P. 713-721.

165. Oakley A.J., Bhatia S., Ecroyd H., Garner B. Molecular dynamics analysis of apolipoprotein-D - lipid hydroperoxide interactions: mechanism for selective oxidation of Met-93 // PLoS One. 2012. Vol. 7 (3). P. 34057.

166. De Magalhaes J.P., Curado J., Church G.M. Meta-analysis of age-related gene expression profiles identifies common signatures of aging // Bioinformatics. 2009. Vol. 25. P. 875-881.

167. Loerch P.M., Lu T., Dakin K.A., Vann J.M. et al. Evolution of the aging brain transcriptome and synaptic regulation // PLoS One. 2008. Vol. 3. P. 3329.

168. Zenkel M., Poschl E., von der Mark K., Hofmann-Rummelt C. et al. Differential gene expression in pseudoexfoliation syndrome. Invest. Ophthalmol // Vis. Sci. 2005. Vol. 46. P. 3742-3752.

169. Najyb O., Brissette L., Rassart E. Apolipoprotein D internalization is a basigindependent mechanism // J. Biol. Chem. 2015. Vol. 290. P. 16077-16087.

170. Ganfornina M.D., Do Carmo S., Lora J.M., Torres-Schumann S. et al. Apolipoprotein D is involved in the mechanisms regulating protection from oxidative stress // Aging Cell. 2008. Vol. 7. P. 506-515.

171. Do Carmo S., Jacomy H., Talbot P.J., Rassart E. Neuroprotective effect of apolipoprotein D against human coronavirus OC43-induced encephalitis in mice // J. Neurosci. 2008. Vol. 28. P. 10330-10338.

172. Thomas E.A., Copolov D.L., Sutcliffe J.G. From pharmacotherapy to pathophysiology: emerging mechanisms of apolipoprotein D in psychiatric disorders // Curr. Mol. Med. 2003. Vol. 3. P. 408-418.

173. Thomas E.A., George R.C., Sutcliffe J.G. Apolipoprotein D modulates arachidonic acid signaling in cultured cells: Implications for psychiatric disorders // Prostaglandins Leukot. Essent. Fat. Acids. 2003. Vol. 69. P. 421-427.

174. Kim T.W., Kang J.W., Ahn J., Lee E.K. et al. Proteomic analysis of the aqueous humor in age-related macular degeneration (AMD) Patients // J. Proteome Res. 2012. Vol. 11. P. 4034-4043.

175. Mallick P., Kuster B., Proteomics: a pragmatic perspective // Nat. Biotechnol. 2010. Vol. 28. P. 695-709.

176. Mandal N., Heegaard S., Prause J.U., Honore B., Vorum H. Ocular proteomics with emphasis on two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry // Biol. Proced. Online. 2009. Vol. 12. P. 56-88.

177. Richardson M.R., Price M.O., Price F.W., Pardo J.C. et al. Proteomic analysis of human aqueous humor using multidimensional protein identification technology // Mol. Vis. 2009. Vol. 15. P. 2740-2750.