Оценка воздействия неблагоприятных факторов среды на морских двустворчатых моллюсков с помощью метода ДНК-комет тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.08, кандидат биологических наук Слободскова, Валентина Владимировна

• Слободскова, Валентина Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Слободскова, Валентина Владимировна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общая характеристика загрязнения морских вод.

1.1.1. Нефть и нефтепродукты.

1.1.2. Тяжелые металлы.

1.1.3. Пестициды (хлорированные углеводороды).

1.1.4. Радиоактивное загрязнение.

1.2. Биологический мониторинг.

ГЛАВА 2. РАЙОН РАБОТ. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Район работ.

2.2. Общая биологическая характеристика объектов исследования.

2.3. Общие условия проведения экспериментов.

2.4. Биохимические методики.

2.4.1. Микроэлектрофорез единичных клеток.

2.4.2. Определение продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ).

2.4.3. Определение металлов.

ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ГЕНОТОКСИЧНОСТИ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ

НА ПРИМЕРЕ КАДМИЯ) В КЛЕТКАХ ЖАБР РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ДВУСТВОРЧАТЫХ МОЛЛЮСКОВ.

ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ДЕФИЦИТА КИСЛОРОДА НА ЦЕЛОСТНОСТЬ ДНК КЛЕТОК ЖАБР ДВУСТВОРЧАТЫХ МОЛЛЮСКОВ.

4.1. Деструкция ДНК клеток жабр двустворчатого моллюска Corbicula japónica, обитающего в приливно-отливной зоне.

4.2. Влияние аноксии и последующей реокснгенации на целостность

ДНК клеток жабр Mizuhopecten yessoensis.

ГЛАВА 5. ОЦЕНКА КАЧЕСТВА ВОД ПРИБРЕЖНОЙ ЗОНЫ ЗАЛИВА ПЕТРА ВЕЛИКОГО НА ОСНОВЕ ГЕНОТОКСИЧНОСТИ.

5.1. Mizuhopectenyessoensis.

5.2. Crenomytilus grayanus.

5.3. Corb icula japónica.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка воздействия неблагоприятных факторов среды на морских двустворчатых моллюсков с помощью метода ДНК-комет»

Актуальность работы

Активная хозяйственная деятельность человека приводит к поступлению в прибрежную зону химических соединений различного происхождения, включая такие опаснее вещества, как тяжелые металлы, пестициды и нефтеуглеводороды. Обитатели прибрежных морских акваторий, особенно вблизи урбанизированных территорий, уже сейчас испытывают воздействие повышенных концентраций Сё. Это влияние нередко проявляется в виде постепенного накопления металла в тканях различных организмов и его миграции по пищевым цепям, что представляет серьезную угрозу для жизнедеятельности гидробионтов и здоровья человека (Шулькин, 2004).

Кроме того, для водных масс прибрежных районов характерны резкие изменения многих абиотических факторов - температуры, солености и особенно концентрации кислорода и других, которые оказывают существенное влияние на жизнедеятельность обитающих здесь живых организмов. Известно, что зоны гипоксии, образующиеся в различных акваториях шельфа Мирового океана, приводят к гибели отдельных видов гидробионтов и трансформации экосистем (\Уи, 2002). В свою очередь, вариабельность абиотических факторов может изменять биодоступность и, соответственно, токсичность загрязняющих веществ. Поэтому в зонах с нестабильной экологической обстановкой возникает множество синергических и антагонистических комбинаций, маскирующих эффекты антропогенных факторов. При этом использование традиционных гидробиологических методов оценки негативных изменений в экосистемах не позволяет оперативно оценить экотоксикологическую ситуацию в акваториях.

В связи с этим представляется целесообразным применение подходов, основанных на анализе отдельных ключевых биохимических параметров молекулярных биомаркеров), отражающих общее изменение физиологического состояния организма в ответ на воздействие неблагоприятных факторов среды (Строганов, 1962, 1973; Панин, 1983; Остроумов, 1986; Сидоров, 1987; Лукьянова, 2001). Основное преимущество использования неспецифических молекулярных маркеров заключается не только в высокой чувствительности, точности и экспрессности определения, но и в установлении причинно-следственных связей при взаимодействии организма и среды, что открывает возможность предсказывать изменения в популяциях и сообществах в загрязненных районах. Оценка опасности развития отдаленных эффектов может быть более эффективной, если основывается на данных о генотоксичности поллютантов (Depledge,1998). Учитывая исключительную роль генома в функционировании биологических систем, выявление повреждений в структуре молекулы ДНК следует отнести к наиболее важным проявлениям токсичности. В последние годы было разработано много методов, позволяющих регистрировать повреждения ДНК, а также исследовать процессы репарации. Наибольший интерес представляют показатели, характеризующие уровень повреждения ДНК, который выявляется в настоящее время с помощью метода ДНК-комет.

Подобного рода исследования в экотоксикологии только начинаются (Lam, 2009; Слободскова и др., 2010 а, б; Слободскова и др., 2011 а, б). Но именно в этом направлении следует ожидать появления интересных научных публикаций, учитывая широкое распространение в медико-биологических исследованиях метода-ДНК-комет, позволяющего оценивать состояние генома индивидуальной клетки (Jha, 2008).

Цель и задачи работы

Выявить степень повреждения ДНК морских организмов, испытывающих воздействие негативных факторов окружающей среды.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. В экспериментальных условиях оценить генотоксичность кадмия на клетки жабр двустворчатых моллюсков с помощью метода ДНК-комет;

2. Выявить влияние дефицита кислорода на целостность ДНК клеток жабр двустворчатых моллюсков;

3. На основе кометного анализа провести оценку физиологического состояния двустворчатых моллюсков из ряда прибрежных акваторий.

Научная новизна

Впервые проведена генотоксическая оценка прибрежных акваторий залива Петра Великого с использованием метода ДНК-комет. Установлено, что дефицит кислорода в окружающей среде сопровождается накоплением повреждений в структуре молекулы ДНК.

Выявлено, что у моллюсков, обитающих в акваториях с высокой антропогенной нагрузкой, деструктивным изменениям подвержена более чем 1/3 часть генома жаберных клеток.

Практическая значимость

Результаты работы могут быть использованы при проведении мониторинга воздействия загрязнения на морские организмы и прогноза устойчивости прибрежных экосистем при антропогенной трансформации водных объектов.

Метод ДНК-комет может быть применен в аквакультуре для оценки физиологического состояния гидробионтов.

Основные защищаемые положения:

1. Естественные (дефицит кислорода) и техногенные (кадмий [Сё]) факторы среды инициируют деструктивные изменения в геноме двустворчатых моллюсков.

2. Метод ДНК-комет является чувствительным подходом в экодиагностике, направленным на изучение состояния водной среды и выявление патологических изменений в прибрежных экосистемах.

Личный вклад автора

Диссертационная работа является обобщением результатов исследований автора, проведенных в 2008-2011 гг. Тема, цель, задачи, объекты, методы и программа исследований определены автором совместно с научным руководителем. Анализ и обобщение полученных результатов, формулировка выводов и основных защищаемых положений сделаны лично автором при направляющем и корректирующим участии научного руководителя.

Публикации и апробация работы

Результаты и основные положения диссертации были представлены и обсуждены на международных и всероссийских конференциях: PICES Seventeen Annual Meeting/Beyond observations to schieving understanding and forecasting in a changing North Pacific: Forward to the FUTURE (Dalan, China 2008); «Исследования мирового океана» (Владивосток, 2008); «Актуальные проблемы экологии, морской биологии и биотехнологии» (Владивосток, 2008); «Геология, география и экология океана» (Ростов-на-Дону, 2009); 17th International Pectinid Workshop (Santiago de Compostela, Spain, 2009); «Океанологические исследования» (Владивосток, 2009); «Современные проблемы геологии, геохимии и геоэкологии Дальнего Востока России» (Владивосток, 2010); «Проблемы экологии морского шельфа» (Владивосток, 2010); «Современные проблемы гидроэкологии» (Санкт-Петербург, 2010); «Современные проблемы физиологии и биохимии водных организмов» (Петрозаводск, 2010); PICES/North Pacific Ecosystems Today, and Challenges in Undestanding and Forecasting Change (Portland, OR, U.S.A., 2010); «Чтения памяти В.Я. Леванидова» (Владивосток, 2011); «Океанологические исследования» (Владивосток, 2011); «Проблемы экологии морского шельфа» (Владивосток, 2011).

Публикации

По теме диссертации опубликовании 18 научных работ, из них 3 статьи в изданиях, рекомендованных ВАК.

Заключение диссертации по теме «Экология (по отраслям)», Слободскова, Валентина Владимировна

107 ВЫВОДЫ

1. Показано, что аккумуляция кадмия вызывает деструктивные изменения молекулы ДНК в клетках жабр изученных двустворчатых моллюсков Corbicula japónica, Mizuhopecten yessoensis, Modiolus kurilensis. Корбикула японская отличается от других видов моллюсков высокой скоростью накопления кадмия в жабрах и скоростью образования повреждений молекулы ДНК.

2. Установлено, что дефицит кислорода в среде обитания (аноксия) приводит к деструкции ДНК клеток жабр Corbicula japónica, Mizuhopecten yessoensis.

3. Реоксигенация способствует восстановлению ДНК у гребешков после действия аноксии.

4. С помощью метода ДНК-комет у С. japónica, обитающих в лагуне Лебяжьей, были отмечены повреждения молекулы ДНК вследствие естественной аноксии, вызванной застойными процессами и нарушением обмена вод вследствие строительства дамбы и моста.

5. Выявлена глубокая деградация молекулы ДНК у корбикул, обитающих в эстуарии р. Раздольная и лагуне Тихая, у гребешков на акватории, прилегающей к г. Владивосток (м. Кунгасный), и у мидий в бух. Горностай. Отмечено, что деструктивным изменениям подвержена практически 1/3 часть молекулы ДНК клеток жабр моллюсков.

6. Показана возможность и перспективность использования метода ДНК-комет в качестве биомаркера загрязнения прибрежных акваторий залива Петра Великого.

108

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Слободскова, Валентина Владимировна, 2012 год

1. Арзамасцев И.С., Яковлев Ю.М., Евсеев Г.А., Гульбин В.В., Клочкова Н.Г., Селин Н.И., Ростов И.Д., Юрасов Г.И., Жук А.П., Буяновский А.И. Атлас промысловых беспозвоночных и водорослей Дальнего Востока России. Владивосток: Изд-во «Аванте». 2001. 192 с.

2. Атлас двустворчатых моллюсков дальневосточных морей России // Сост. C.B. Явнов; Науч. ред. С.Е. Поздняков // Атласы промысловых и перспективных для промысла гидробионтов дальневосточных морей России. Владивосток: Дюма. 2000. 168 с.

3. Благой Ю.П. Взаимодействие ДНК с биологически активными веществами (ионами металлов, красителями, лекарствами) // Соросовский образовательный журнал. 1998. № 10. С. 18-24.

4. Брагинский Л.П., Комаровский Ф.Я., Мережко Ф.И. Персистентные пестициды в экологии пресных вод. Киев: Наук, думка, 1979. 143 с.

5. Васьковский М. Г. Гидрологичекое районирование, основные черты режима рек и водный баланс Приморья // Ресурсы поверсхностных вод СССР. 1972. Вып. Зю Лю: Гидрометеоиздат. С. 90-103.

6. Ващенко М.А. Загрязнение залива Петра Великого Японского моря и его биологические последствия // Биол. моря. 2000. Т. 26. № 3. С. 149—

7. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах // М.: Наука. 1972. 242 с.

8. Волова Г. Н. Основные биоценозы континентальных водоемов Южного Приморья // Дальневост. гос. ун-т. Уч. Зап. 1971. Т. 15, вып. 3. С. 32-56.

9. Галышева Ю.А. Сообщества макробентоса сублиторали залива Восток Японского моря в условиях антропогенного воздействия // Биол. моря. 2004. Т. 30, №6. С. 423-431.

10. Данилян В.А., Высоцкий B.JI, Каткова М.Н., Крышев И.И. Дозовые нагрузки на гидробионты и население в районах эксплуатации кораблей с ЯЭУ // Атом, энергия. 2002. Т. 92, вып. 2. С. 158-168.

11. Довженко Н.В., Куриленко A.B., Бельчева H.H., Челомин В.П. Окислительный стресс, индуцируемый кадмием в тканях двустворчатого моллюска Modiolus modiolus II Биол. моря. 2005. Т. 31, № 5. С. 358-362.

12. Долговременная программа охраны природы и рационального использования природных ресурсов Приморского края до 2005 г. Экологическая программа. Часть 2. Владивосток: Дальнаука. 1992. 276 с.

13. Израэль Ю.А. Экология и контроль состояния природной среды. JL: Гидрометеоиздат, 1979. 375 с.

14. Израэль Ю.А., Цыбань A.B. Экология и проблемы комплексного глобального мониторинга // Комплексный глобальный мониторинг Мирового океана: Тр. I Междунар. Симпоз. Таллин, 1983 г. Л.: Гидрометеоиздат, 1985. Т. 1. С. 19-48.

15. Истомина A.A., Довженко Н.В., Челомин В.П. Реакция антиоксидантной системы на аноксию и реоксигенацию у морского двустворчатого моллюска Scapharca Broughtoni II Вестник МГОУ. 2010. Вып. 4. С. 3941.

16. Истомина A.A., Довженко Н.В., Бельчева H.H., Челомин В.П. Активность антиоксидантных ферментов у разных видов моллюсков в условии гипоксии/аноксии // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2011 а. Т. 13, № 1 (5). С. 1106-1108.

17. Истомина A.A., Довженко Н.В., Бельчева H.H., Челомин В.П. Раздельное и совместное действие недостатка кислорода и меди на антиоксидантную систему Littorina mandschurica II Вестник МГОУ. 2011 б. Серия «Естественные науки». №1. С. 17-21.

18. Лукьянова О.Н. Молекулярные биомаркеры. Владивосток: Изд-во ДВГАЭУ, 2001. 196 с.

19. Лукьянова О.Н., Шмидт Т.Я. Каротиноиды морских беспозвоночных при действии загрязнения // Биол. моря. 1993. № 2. С. 92-101.

20. Лутаенко К.А. Фауна двустворчатых моллюсков Амурского залива (Японское море) и прилегающих районов // Бюллетень Дальневосточного малакологического общества. Владивосток. Дальнаука. 2002. Вып. 6. С. 5-61.

21. Лучшева Л. Н. Содержание ртути в компонентах экосистемы бухты Алексеева (залив Петра Великого Японского моря) // Биол. моря. 1995. Т. 21, №6. С. 412-415.

22. Моисеенко Т.И Водная экотоксикология: Теоретические и прикладные аспекты. М.: Наука, 2009. 400 с.

23. Никаноров A.M., Жулидов A.B., Покаржевский А.Д. Биомониторинг тяжелых металлов в пресных экосистемах // Л.: Гидрометеоиздат, 1985. 144 с.

24. Никулина Т.В. Оценка экологического состояния р. Раздольная по составу индикаторных видов водорослей // Вестник ДВО РАН. 2006. № 6. С. 7178.

25. Огородникова A.A. Эколого-экономическая оценка воздействия береговых источников загрязнения на природную среду и биоресурсы залива Петра Великого. Владивосток: ТИНРО-Центр. 2001. 193 с.

26. Орлов Д.С., Садовникова Л.К., Лозановская И.Н. Экология и охрана биосферы при химическом загрязнении: Учеб. пособие для хим.-технол. и биол. спец. вузов. М.: Высш. шк., 2002. 334 с.

27. Остроумов С.А. Введение в биохимическую экологию. М.: Изд-во МГУ, 1986. 176 с.

28. Панин JI.E. Биохимические механизмы стресса. Новосибирск: Наука, 1983. 190 с.

29. Патин С.А. Загрязнение Мирового океана и его биопродуктивность // Биологические ресурсы гидросферы и их использование. Биологические ресурсы Мирового океана. М.: Наука, 1979. С. 208-230.

30. Перельман А.И., Касимов Н.С. Геохимия ландшафтов. М.: Астрея 2000, 1999. 768 с.

31. Подгурская О.В., Кавун В.Я. Сравнительный анализ субклеточного распределения тяжелых металлов в органах двустворчатых моллюсков Crenomytilus grayanus и Modiolus modiolus в условиях хронического загрязнения // Биол. моря. 2005. Т. 31, № 6. С. 435-442.

32. Подорванова Н.Ф., Ивашинникова Т.С., Петренко B.C., Хомичук JI.C. Основные черты гидрохимии залива Петра Великого (Японское море). Владивосток. 1989. 201 с.

33. Проблемы химического загрязнения вод Мирового океана: Эколого-токсикологические аспекты загрязнения морской среды / под ред. Патина A.C. JL: Гидрометеоиздат, 1985. Т. 5. 120 с.

34. Раков В. А. Современное состояние, перспективы использования и сохранения экосистем морских лагун и эстуариев юга Дальнего Востока // Природа без границ: Матер. I Междунар. экологического форума. Ч. 1. Владивосток, 2006. С. 267-270.

35. Сидоров B.C. К вопросу об эколого-биохимическом мониторинге // Первый симпоз. по экол. биохимии рыб: Тез. докл. Всесоюз. симпоз. Ярославль: Ин-т биологии внутр. вод, 1987. С. 174-176.

36. Слободскова В.В., Солодова Е.Е., Слинько E.H., Челомин В.П. Оценка генотоксичности кадмия в клетках жабр двустворчатого моллюска Corbicula japónica с помощью метода ДНК-комет // Биол. моря. 2010 а. Т. 36, № 4. С. 303-308.

37. Слободскова В.В., Солодова Е.Е., Челомин В.П. Использование моллюска Corbicula japónica (Bivalvia) для оценки геноксичности эстуарных вод // Вестник МГОУ. Серия «Естественные науки». 2011а. № 2. С. 86-91.

38. Слободскова В.В., Солодова Е. Е., Челомин В. П. Генотоксический мониторинг моргских лагун залива Петра Великого // Известия Самарского научного центра РАН. 20116. Т. 13, №1(6). С. 1382-1385.

39. Сойфер В.Н. Репарация генетических повреждений // Соросовский образовательный журнал. 1997. № 8. С. 4-13.

40. Сойфер В.Н. Радиоэкология северного шельфа Японского моря. Владивосток: Дальнаука, 2002. 254 с.

41. Соломатина В.Д. Особенности метаболизма рыб в условиях радиоактивного загрязнения // Гидробиологический журнал. Т. 36, № 3, 2000. С. 51-57.

42. Строганов Н.С. Экологическая физиология рыб. М., 1962. 444 с.

43. Строганов Н.С. Теоретические аспекты действия пестицидов на водные организмы// Эксперим. вод. Токсикол. 1973. Вып. 5. С. 11-17.

44. Телитченко М.М., Остроумов С.А. Введение в проблемы биохимической экологии. М.: Наука, 1990. 286 с.

45. Тронов В.А., Пелевина И.И. Метод ДНК-комет индивидуальных клеток. Принцип и применение метода // Цитология. 1996. Т. 38, № 4/5. С. 427439.

46. Тронов В.А., Терещенко Д.Г., Конопляников М.А. Механизм радиационной гибели лимфоцитов периферической крови человека, оцениваемая методом ДНК-комет//Биофизика. 1998. Т. 43, вып. 1. С. 115-124.

47. Тронов В.А., Никольская Т.А., Конопляников М.А. ДНК-кометы как маркер клеточной гибели // Биофизика. 1999. Т. 44, вып. 2. С. 288-295.

48. Федорец Ю.В. Экология ихтиопланктонных сообществ морского мелководья и эстуариев рек северной части залива Петра Великого // Автореф. дисс. канд. биол. наук. Владивосток, 2010. 24 с.

49. Фокина H. Н., Нефедова 3. А., Немова H. Н. Липидный состав мидий Mytilus edulis L. Белого моря. Влияние некоторых фактров среды обитания. Петрозаводск: Карельский науч. центр РАН, 2010. 243 с.

50. Хорн Р. Морская химия (структура воды и химия гидросферы) = Marine Chemistry (The structure of Water and the Chemistry of Hydrosphere) — Москва: Мир, 1972. 213 с.

51. Хочачка П., Сомеро Д. Стратегия биохимической адаптации (Ред. Крепе Е.М.). М.: Мир, 1977. 398 с.

52. Христофорова Н.К. Биоиндикация и мониторинг загрязнения морских вод тяжелыми металлами. Л.: Наука, 1989. 192 с.

53. Цыбань А.В. Научное обоснование программы комплексного экологического мониторинга океана (программа МОНОК) // Продуктивность и охрана морских и пресных вод: Тр. Всесоюз. гидробиол. об-ва. Изд-во «Наука», 1989. Т. 29. С. 79-94.

54. Челомин В.П. Экотоксикологические аспекты биоаккумуляции кадмия (на примере двустворчатых моллюсков) // Автореф. дисс. докт. биол. наук. Владивосток, 1998 а. 50 с.

55. Челомин В.П., Бельчева Н.Н., Захарцев М.В. Биохимические механизмы адаптации мидии Mytilus trossulus к ионам кадмия и меди // Биол. моря. 1998 б. Т. 24, №5. С. 319-325.

56. Шулькин В. М. Металлы в экосистемах морских мелководий. Владивосток: Дальнаука, 2004. 279 с.

57. Шулькин В.М., Кавун В.Я., Ткалин А.В., Пресли Б.Дж. Влияние концентрации металлов в донных отложениях на их накоплениемитилидами Crenomytilus grayanus и Modiolus kurilensis II Биология Моря. 2002. Т. 28, № 1. С. 53-60

58. Шулькин В. М., Семыкина Г. В. Сезонная и многолетняя изменчивость содержания и выноса биогенных соединений р. Раздольной (Приморский край) // Водные ресурсы. 2005. Т. 32, № 5. С. 575-583.

59. Юфит С. С. Яды вокруг нас: Вызов человечеству. М.: Классике стиль, 2002. 367 с.

60. Явнов С.В., Раков В.А. Корбикула. Владивосток: ТИНРО-центр, 2002. 145 с.

61. Adams S.M. Assessing cause and effect of multiple stressors on marine systems // Mar. Pollut. Bull. 2005. Vol. 51, № 8/12. P. 649-657.

62. Adb-Allah G.A., El-Fayoumi R.I., Smith M.J., Heckmann R.A., O'Neill K.L. A comparative evaluation of aflatoxin Bj genotoxicity in fish models using the comet assay // Mutat. Res. 1999. Vol. 446. P. 181-188.

63. Almeida E.A., Baini A.C.D., Dafre A.L., Gomes O.F., Medeiros M.H.G., Di Mascio P., Oxidative stress in digestive gland and gill of the brown mussel {Perna perna) exposed to air and re-submersed. // J. Exp. Mar. Biol. Ecol. 2005.Vol. 318. P. 21-30.

64. Almeida E.A., Bainy A.C.D., Loureiro A.P.M., Martinez G.R., Miyamoto S., Onuki J., Barbosa L.F., Garcia C.C.M., Prado F.M., Ronsein G.E., Sigolo

65. Blus L.I. Organochlorine pesticedes // Handbook of Ecotoxicology / Ed. D.J.

66. Hoffman et. al. N.Y.: Lewis Pabl., 2005. P. 314-329. Buege J.A., Aust S.D. Microsomal lipid peroxidation // Methods in Enzymology.

67. Chelomin V.P., Bobkova E.A., Lukyanova O.N., Chekmasova N.M. Cadmium-induced alterations in essential trace element homoeostasis in the tissues of scallop Mizuhopecten yessoensis II Comp. Biochem. Physiol. 1995. Vol. 110 C, № 3. P. 329-335.

68. Couch J.A. Atrophy of diverticular epithelium as an indicator of environmentaliirritants in the oyster, Crassostrea Virginica // Mar. Environ. Res. 1984. Vol. 14. P. 525-526.

69. Davies J.F., Kratzer T.W. Fate of environmental pollutants // Water Environ. Res.1996. Vol. 68, № 4. P. 737-755.

70. Deventer K. Detection of genotoxic effects on cell of liver and gill of B. rerio by means of single cell gel electrophoresis // Bull. Environ. Contam. Toxicol. 1996. Vol. 56. P. 911-918.

71. Dickhut R.M., Justafson K.E. Atmospheric inputs of selected polycyclic hydrocarbons and polychlorinated biphenyls to Southern Chesapeake Bay // Mar. Pollut. Bull. 1995. Vol. 30. P. 385-396.

72. Emmanouil C., Sheehan T.M.T., Chipman J.K. Macromolecule oxidation and DNA repair in mussel {Mytilus edulis L.) gill following exposure to Cd and Cr (VI) // Aquat. Toxicol. 2007. Vol. 82. P. 27-35.

73. Farrington J.W. Biogeochemical processes governing exposure and uptake of organic pollutant compounds in aquatic organisms // Environmental Health Perspectives. 1991. Vol. 90. P. 75-84.

74. Fisher N.S., Reinfelder J.R. The trophictransfer of metalsin marine systems // Metall speciation and bioavailability in aquatic systems. New York; Londan; John Wiley and Sons. 1995. P. 363-396.

75. Frazier J.M. Bioaccumulation of cadmium in marine organisms// Environ. Health Perspect. 1979. Vol. 28. P. 75-79.

76. Frenzilli G., Nigro M.,. Lyons B. P The Comet assay for evaluation of genotoxic impact in aquatic environments // Mutat. Res. 2009. Vol. 681. P. 80-92.

77. Halliwell B. Oxidative DNA damage: meaning and measurement // DNA and Free Radicals. Halliwell B. Auroma O.I. (Eds.), Ellis Horwood, New York. 1993. P. 67-79.

78. Hartmann M., Hartwig A. Disturbance of DNA damage recognition after UV-irradiation by nickel (II) and cadmium (II) in mammalian cells // Carcinogenesis. 1998. Vol. 19, № 4. P. 617-621.

79. Heath A.G. Water pollution and fish phisiology. L.: Lewis Pabl., 2002. 506 p.1.avalko J. Effects of oil spills on Arctic marine ecosystems. 2005. www, arcop. fi/reports/D4232.pdf.

80. Jacobson K.B., Turner J.E. The interaction of cadmium and certain other metal ions with proteins and nucleic acids // Toxicology. 1980. Vol. 16. P. 1-37.

81. Jebali J., Banni M. Oxidative DNA damage levels and catalase activity in the clam Ruditapes decussates as pollution biomarkers of Tunisian marine environment // Environ. Monit. Assess. 2007. Vol. 124. P. 195-200.

82. Jha A.N. Ecotoxicological applications and significance of the Comet assay // Mutagenesis. 2008. Vol. 23, Issue 3. P. 207-221.

83. Klobukar G.I.V., Stambur A., Hylland K., Pavlica M. Detection of DNA damage in haemocytes of Mytilus galloprovincialis in the coastal ecosystems of Kastelf and Trogir bays, Groatia // Scien. of the total environ. 2008. Vol. 405. P. 330-337.

84. Aquat. Toxicol. 1995.Vol. 33. P. 177-181.1.pez-Ortal P., Souza V., Bucio L., Gonzalez E., Gutierrez-Ruiz M.C. DNAdamage produced by cadmium in a human fetal hepatic cell line // Mutation

85. Res. 1999. Vol. 439. P. 301-306.1.ureiro A.P.M., Di Mascio P., Gomes O.F., Medeiros M.H.G. trans,trans-2,42 '

86. Mitchelmore C.L., Birmelin C., Livingstone D.R., Chipman J.K. Detection of DNA strand breaks in isolated mussels {Mytilus edulis) digestive gland cells using the "Comet" assay // Ecotoxicology and Environmental Safety. 1998. Vol. 41. P. 51-58.

87. Mitchelmore C.L., Hyatt S. Assessing DNA damage in cnidarians using the Comet assay // Mar. Environ. Res. 2004. Vol. 58. P. 707-711.

88. Moore M.N., Livingstone D.R., Widdows J., Lowe D.M., Pipe R.K. Molecular, cellular and physiological effects of oil-derived hydrocarbons on mollusks and their use in impact assessment // Phil. Trans. R. Soc. Lond. 1987. Vol. 316. P. 603-623.

89. Moore M.N., Livingstone D.R., Widdows J. Hydrocarbons in marine mollusks: Biological effects and ecological consequences // Metabolism of polycyclic aromatic hydrocarbons in the aquatic environment. CRC Press, Boca Raton, FL.1989. P. 291-328.

90. Mouron S.A., Golijow C.D., Dulout F.N. DNA damage by cadmium and arsenic salts assessed by the single cell gel electrophoresis assay// Mutation Res. 2001. Vol. 498. P. 47-55.

91. Nacci D.E., Cayula S., Jackim E. Detection of DNA damage in individual cells from marine organisms using the single cell gel assay // Aquat. Toxicol. 1996. Vol. 35. P. 197-210.

92. Neff J.M., Hillman R.E., Carr R.S., Buhl R.L., Lahey J.I. Histopathologic and biochemical responses in arctic marine bivalve mollusks exposed to experimentally spilled oil // Arctic. 1987. Vol. 40, Issue 1. P. 220-229.

93. Negreiros, L.A., Silva, B.F., Paulino, M.G., Fernandes, M.N., Chippari-Gomes, A.R. Effects of hypoxia and petroleum on the genotoxic and morphological parameters of Hippocampus reidi II Comp. Biochem. Physiol. 2011. Vol. 153C. P. 408-414.

94. Olive P.L., Banath J.P., Durand R.E. Heterogeneity in radiation-induced DNA damage and repair in tumor and normal cells measured using the "comet" assay // Radiat. Res. 1990. Vol. 122. P. 86-94.

95. Ostling O., Johanson K.J. Microelectrophoretic study of radiation-induced DNA damages in individual mammalian cells // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1984. Vol. 123. P. 291-298.

96. Pruski A.M., Dixon D.R. Effects of cadmium on nuclear integrity and DNA repair efficiency in the gill cells of Mytilus edulis L. // Aquat. Toxicol. 2002. Vol.57. P. 127-137.

97. Reisch D.J., Oshida P.S., Mearns A.J., Ginn T.C. Effect of pollution on marine organisms // Water Environ. Res. 1996. Vol. 68, № 4. P. 784-796.

98. Robertson A. Petroleum hydrocarbons // AMAP Assessment Report: Arctic Pollution Issues. Arctic Monitoring and Assessment programme (AMAP). 1998. Oslo. Norway. P. 661-716.

99. Rodrigues-Ariza A., Alhama J., Diaz-Mendez F.M., Lopez-Barea J. Content of 8-oxodG in chromosomal DNA of Sparatus fish as biomarker of oxidative stress and environmental pollution // Mutation Res. 1999. Vol. 438. P. 97107.

100. Rodriguez H., Drouin R., Holmquist G.P. et al. Mapping of copper/hydrogen peroxide-induced DNA damage at nucleotide resolution in human genomic DNA by ligation-mediated polymerase chain reaction // J. Biol. Chem. 1995. Vol. 270. P. 17633-17640.

101. Romero, M.C., Ansaldo, M., Lovrich, G.A. Effect of aerial exposure on the antioxidant status in the subantarctic stone crab Paralomis granulose (Decapoda: Anomura) // Comp. Biochem. Physiol. 2007. Vol. 146C. P. 5459.

102. Sarkar A., Gaitonde D.C.S., Sarkar A., Vashistha D., D'Silva C., Dalai S.G. Evaluating of impairment of DNA integrity in marine gastropods (Cronia contracta) as a biomarker of genotoxic contaminants in costal water around

103. Goa, West coast of India // Ecotocxicol. and Environ. Saf. 2008. Vol. 71. P. 473-482.

104. Shugart L.R. DNA damage as a biomarker of exposure // Ecotoxicology. 2000. Vol. 9. P. 329-340.

105. Sole M., Porte C., Albaiges J. The use of biomarkers for assessing the effects of organic pollution in mussels // The Sci. Total Environ. 1995. Vol. 159. P. 147-153.

106. Speit G., Hartmann A. The Comet assay a sensitive genotoxicity test for the detection of DNA damage and repair // Methods Mol. Biol. 2006. Vol. 2314. P. 275-286.

107. Taban I. C., Bechmann R. K., Torgrimsen S., Baussant T.and Sanni S. Detection of DNA damage in mussels and sea urchins exposed to crude oil using Comet assay // Mar. Environ. Res. 2004. № 58. P. 701-705.

108. Walker C.H., Hopkin S.P, Sibly R.M., Peakall D.B. Princeples of Ecotoxicology. L.: Taylor and Francis, 2001. 307 p.

109. Wang Y., Fang J., Leonard S.S., Rao K.M.K. Cadmium inhibits the electron transfer chain and induces reactive oxygen species // Free Radical Biol. Med. 2004. Vol. 36. P. 1434-1443.

110. Wilson J.T., Pascoe P.L., Parry J.M., Dixon D.R. Evaluation of the comet assay as a method for the detection of DNA damage in the cells of a marine invertebrate, Mutilus edulis L. (Mollusca: Plecypoda) // Mutat. Res. 1999. Vol. 399. P. 87-95.

111. Wu R.S.S. Hypoxia: from molecular responses to ecosustem responses // Mar. Pollut. Bui. 2002. Vol. 45. P 35-45.