Оценка качества и стандартизация композиций на базе диквертина тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 15.00.02, кандидат фармацевтических наук Савватеев, Алексей Михайлович

• Савватеев, Алексей Михайлович
• кандидат фармацевтических наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Савватеев, Алексей Михайлович

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА

Характеристика диквертина и компонентов комбинированных препаратов на его основе (обзор литературы)

1.1 Флавоноиды

1.1.1. Классификация и строение

1.1.2. Антиоксидантные свойства

1.1.3. Физико-химические методы исследования

1.1.4. Состав и стандартизация диквертина

1.2. Аскорбиновая кислота

1.3. Ацетилсалициловая кислота

1.4. [1-Каротин

1.5. Фармакологические аспекты исследования диквертина и комбинированных препаратов на его основе

1.5.1. Диквертин

1.5.2. Асковертин

1.5.3. Саливертин

1.5.4. Каровертин

ГЛАВА

Анализ и стандартизация комбинированных препаратов на базе диквертина (обсуждение результатов)

2.1. Обоснование методических подходов к анализу многокомпонентных смесей на базе диквертина

2.2. Физико-химическая характеристика дигидрокверцетина как стандартного образца

2.3. Анализ и стандартизация диквертина

2.4. Способ определения дигидрокверцетина в растительном сырье

2.5. Разработка методов анализа диквертина и аскорбиновой кислоты -действующей основы комбинированного препарата «Асковертин»

2.5.1. Спектрофотометрический метод анализа асковертина с предварительной твердофазной экстракцией компонентов

2.5.2. Разработка унифицированной методики анализа асковертина методом ВЭЖХ

2.6. Разработка методов анализа диквертина и ацетилсалициловой кислоты - действующей основы разрабатываемого комбинированного препарата «Саливертин»

2.6.1. Спектрофотометрический метод анализа саливертина с предварительной твердофазной экстракцией компонентов

2.6.2. Разработка унифицированной методики анализа саливертина методом ВЭЖХ

2.7. Разработка методики анализа БАД «Каровертин» и ее оптимизация

2.8. Валидация методик анализа композиций на базе диквертина

2.8.1. Валидация методики хроматографического анализа препарата диквертин

2.8.2. Валидация методики хроматографического анализа препарата асковертин

2.8.3. Валидация методики хроматографического анализа разрабатываемого препарата саливертин

ГЛАВА

Экспериментальная часть

3.1. Объекты исследования

3.2. Методы исследования

3.3. Подготовка проб и условия эксперимента

3.4. Формулы количественных расчетов

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка качества и стандартизация композиций на базе диквертина»

Для России с ее богатейшими растительными ресурсами, где к медицинскому применению разрешено около 200 видов растительного сырья [9,49], наиболее характерен широкий масштаб производства фитопрепаратов. Фитопрепараты составляют около 40% номенклатуры лекарственных средств, выпускаемых в нашей стране [2]. В состав большинства из них входят в том или ином количестве флавоноидные соединения.

Относительно недавно этот список пополнился препаратом Диквертин®, состав которого представлен тремя флавоноидными соединениями при подавляющем количестве (90% и выше) одного из них - дигидрокверцетина [104].

Диквертин выделен из древесины лиственницы и обладает антиоксидантными и капилляропротекторными свойствами [35]. Банк присущих диквертину фундаментальных фармакологических свойств обеспечивает ему базисный статус для создания на его основе препаратов, комбинированных с другими лекарственными средствами с целью оптимизации отдельных видов фармакологического действия (усиления некоторых эффектов, расширения спектра показаний, снижения уровня нежелательных побочных эффектов и т. п.).

В последние годы проведены совместные исследования по разработке таких комбинированных препаратов сотрудниками НИИ фармакологии ТНЦ СО РАМН и кафедры органической химии ММА им. И.М. Сеченова. Наиболее продвинутыми являются работы по созданию сочетанных с диквертином препаратов, в составе которых в роли «второго партнера» выступают известные и хорошо зарекомендовавшие себя лекарственные вещества - аскорбиновая кислота, ацетисалициловая кислота, [3-каротин.

Препарат, сочетающий диквертин и аскорбиновую кислоту, зарегистрирован как ангиопротекторное лекарственное средство Асковертин® [109]. Препарат, сочетающий диквертин и ацетилсалициловую кислоту (под рабочим названием Саливертин), прошел стадию доклинического изучения с выявлением антитромбоцитарного и гемореологического действия [66]. Сочетание диквертина с двумя компонентами - аскорбиновой кислотой и [3-каротином - используется как биологически активная добавка к пище «Каровертин», служащая источником антиоксидантов [76].

Диквертин [4], асковертин [61] и саливертин [66] составляют принципиально новую группу гемореологических лекарственных препаратов [70]. Актуальность создания препаратов этого класса диктуется острой необходимостью применения их в лечении заболеваний, связанных с гемореологическими расстройствами, выражающимися прежде всего в формировании синдрома повышенной вязкости крови (синдром гипервязкости крови). Гемореологические расстройства осложняют течение таких заболеваний, как нарушение мозгового кровообращения, ишемическая болезнь сердца, артериальная гипертензия и др. [114, 182].

В то же время известны сведения о возможности предотвращения негативного влияния синдрома гипервязкости крови с помощью антиоксидантов [71, 139, 162]. Отсюда становится понятной идея создания группы гемореологических препаратов на базе антиоксидантного препарата диквертина путем «обогащения» его другими известными и применяемыми в медицине веществами, обладающими также антиоксидантными (аскорбиновая кислота, Р-каротин) или антиагрегационными (ацетилсалициловая кислота) свойствами.

Появление новых комбинированных препаратов в силу усложнения состава действующих веществ, существенно различающихся по свойствам, ставит задачу поиска оптимальных путей их фармацевтического анализа.

Актуальность настоящей работы определяется необходимостью совершенствования на современном физико-химическом уровне стандартизации базового фитопрепарата диквертина, а также создания системы стандартизации новых комбинированных препаратов.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлась разработка методического подхода к оптимизации хроматографического анализа в качестве сквозного метода стандартизации как базового препарата диквертина, так и комбинированных препаратов на его основе.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи: • модификация и унификация методик анализа диквертина - от растительного сырья, субстанции, стандартного образца до лекарственной формы;

• совершенствование методик спектрального (УФ-, ИК-, ЯМР-) анализа стандартного образца дигидрокверцетина;

• разработка методик хроматографического анализа с учетом специфичности состава комбинированных препаратов - асковертина, саливертина и БАД каровертина;

• валидация предлагаемых методик на основе изучения соответствующих валидационных характеристик;

• включение разработанных методик в соответствующую фармакопейную документацию.

Научная новизна. Предложен единый методический подход к стандартизации комбинированных препаратов на базе диквертина путем сквозного использования метода ВЭЖХ в сочетании со специфичностью пробоподготовки.

Определены оптимальные хроматографические условия эффективного разделения сочетаний флавоноидных компонентов диквертина и аскорбиновой кислоты, компонентов диквертина и ацетилсалициловой и салициловой кислот в составе комбинированных препаратов - асковертина и саливертина соответственно. Разработаны селективные и воспроизводимые методики качественного и количественного анализа действующих веществ комбинированных препаратов.

Предложены спектральные (УФ-, ИК-, ЯМР1Н, ЯМР13С) и хроматографические критерии подлинности и оценки качества стандартного образца дигидрокверцетина.

Разработан оригинальный комбинированный способ сочетания методов твердофазной экстракции, ВЭЖХ и спектрофотометрии для анализа разнополярных компонентов каровертина.

Впервые разработана система стандартизации лекарственного растительного сырья - древесины лиственницы цельной и измельченной.

Практическая значимость. Методики анализа действующих веществ препаратов диквертина, асковертина и саливертина валидированы и унифицированы с целью определения таких фармакопейных показателей, как подлинность, родственные соединения, посторонние примеси, растворение, однородность дозирования, количественное определение. Разработанные аналитические методики включены в зарегистрированные фармакопейные статьи: ФСП 42-0083-7320-06

Лиственницы древесина Larix lignum цельная, измельченная «ангро»;

ФС 42-0162-06 «Дигидрокверцетин-стандартный образец»; ФСП 42-0083-0185-06

Диквертин®»; ФСП 42-0083-0186-06 «Диквертин® таблетки 20 мг»;

ФСП 42-0542-5494-04 «Асковертин® таблетки»; в проект фармакопейной статьи

Саливертин таблетки; в Технические условия ТУ 9352-001-1242812-04

Биологически активная добавка к пище «Каровертин».

Предложенные методики апробированы на производственных сериях таблеток диквертина и опытных сериях асковертина и саливертина.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Результаты изучения хроматографических характеристик флавоноидных компонентов диквертина. Усовершенствованная методика стандартизации и оценки качества диквертина методом ВЭЖХ.

• Спектральная (УФ-, ИК-, ЯМР *Н и ЯМР13С) и хроматографическая характеристика дигидрокверцетина как стандартного образца и оценка его индивидуальности и степени чистоты.

• Оптимальные хроматографические параметры ВЭЖХ для одновременного качественного и количественного анализа аскорбиновой кислоты и флавоноидов диквертина. Валидированная и унифицированная для определения суммы фармакопейных показателей методика стандартизации препарата асковертина методом ВЭЖХ.

• Оптимальные хроматографические параметры ВЭЖХ для одновременного качественного и количественного анализа ацетилсалициловой кислоты, примеси салициловой кислоты и флавоноидов диквертина. Валидированная и унифицированная для определения фармакопейных показателей методика стандартизации желудочно-резистентных таблеток препарата саливертина методом ВЭЖХ.

• Комплексный аналитический подход (твердофазная экстракция, ВЭЖХ, спектрофотометрия) к анализу компонентов каровертина.

• Стандартизация лекарственного растительного сырья - древесины лиственницы цельной, измельченной «ангро».

• Результаты изучения возможности использования разработанных методик в анализе опытно-промышленных серий асковертина и лабораторных серий саливертина.

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук.

Диссертационная работа выполнена в рамках комплексной темы кафедры органической химии ММА им. И.М. Сеченова: «Физико-химические основы стандартизации и биотрансформации лекарственных средств и биологически активных добавок к пище». Номер госрегистрации 01200110547.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия и фармакогнозия», Савватеев, Алексей Михайлович

ВЫВОДЫ

1. Разработан единый аналитический подход к стандартизации и оценке качества в цепи объектов: древесина лиственницы - биофлавоноидный комплекс диквертин комбинированные препараты на базе диквертина: асковертин (с аскорбиновой кислотой), саливертин (с ацетилсалициловой кислотой), Б АД каровертин (с аскорбиновой кислотой и Р-каротином). Аналитический подход, включающий этапы соответствующей пробоподготовки и анализа методом ВЭЖХ, применим для определения фармакопейных показателей как субстанций, так и лекарственных форм.

2. С помощью комплекса физико-химических методов установлено, что стандартный образец дигидрокверцетина (производства ООО «Флавир», г. Иркутск) представляет собой индивидуальное соединение высокой степени чистоты, отвечающее структуре

2/?3^)-23-ДигидрсьЗ,5,7-тригидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-4Я-1-бензогафан-4она. Предложены спектральные и хроматографические методики анализа,

1 < 1 обеспечивающие достоверность подлинности (ИК-, ЯМР Н и ЯМР С спектры) и чистоты (ВЭЖХ, ЯМР 'Н и УФ-спекгроскопия) дигидрокверцетина. Исследованные образцы дигидрокверцетина соответствуют фармакопейным требованиям, предъявляемым к государственным стандартным образцам, и могут быть использованы для анализа лекарственных средств и лекарственного растительного сырья.

3. Определены оптимальные условия разделения и анализа флавоноидных компонентов диквертина с использованием обращенно-фазного варианта ВЭЖХ на октадецилсилановых сорбентах в градиентном режиме элюирования. Предложена усовершенствованная методика стандартизации субстанции и таблеток диквертина с применением стандартного образца дигидрокверцетина и обосновано ее применение для анализа основного компонента дигидрокверцетина и родственных соединений -дигидрокемпферола и нарингенина.

4. Установлено, что оптимальное разделение полярной и гидрофильной аскорбиновой кислоты и менее полярных и более гидрофобных флавоноидных компонентов диквертина достигается на сорбентах с привитой циано-фазой в режиме обращенно-фазного элюирования. На основе изученных хроматографических характеристик композиции диквертина и аскорбиновой кислоты предложена унифицированная методика стандартизации субстанции и таблеток препарата асковертина.

5. Разработаны эффективные способы пробоподготовки и одновременного анализа методом ВЭЖХ ацетилсалициловой кислоты, флавоноидных компонентов диквертина и салициловой кислоты (как возможной примеси) в таблетках саливертина, покрытых желудочно-резистентной оболочкой. В предлагаемых хроматографических условиях эффективность колонки по пику дигидрокверцетина составила не менее 5000 т. т., по пику ацетилсалициловой кислоты не менее 7000 т. т., степень разделения всех пиков не ниже 2,5, фактор симметрии близок к единице. Относительное стандартное отклонение площади пика дигидрокверцетина 2,4%, ацетилсалициловой кислоты 1,2%. Все хроматографические параметры соответствуют современным фармакопейным требованиям.

6. Предложен селективный и воспроизводимый способ анализа композиции диквертина, аскорбиновой кислоты и р-каротина, как основы Б АД каровертин и одноименного разрабатываемого препарата. Способ основан на предварительном фракционировании компонентов смеси методом твердофазной экстракции и последующем анализе фракций методом ВЭЖХ (аскорбиновая кислота и компоненты диквертина) и УФ-спектрофотометрии ф-каротин).

7. Изучен комплекс валидационных характеристик предложенных методов анализа и стандартизации препаратов диквертин, асковертин и саливертин в субстанции и лек. формах. По результатам валидации установлено, что все разработанные методики являются специфичными для определения содержания действующих веществ, характеризуются корректной точностью (правильностью) и воспроизводимостью, линейной зависимостью в аналитической области ± 30% по отношению к заявленному содержанию действующих веществ в препарате, что позволяет использовать их для достоверной оценки качества препаратов.

8. Показано, что унифицированные методики анализа препаратов диквертин, асковертин и саливертин можно использовать для сквозной стандартизации препаратов по фармакопейным показателям подлинность, родственные соединения, посторонние примеси, растворение, однородность дозирования, количественное определение. Методики включены в нормативную документацию по стандартизации и контролю качества вышеперечисленных препаратов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Савватеев, Алексей Михайлович, 2007 год

1. Агафонов A.A., Раменская Г.В., Копылова М.М. Изучение влияния различных лекарственных форм на фармакокинетику препарата (на примере обычных и растворимых таблеток аспирина) // Материалы Российского нац. конгр. «Человек и лекарство». М., 2002. - С. 11.

2. Акашкина J1.B., Российская Г.И., Лякина М.Н. Разработка и стандартизация фитопрепаратов // Материалы II между нар. съезда «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». Санкт-Петербург Валаам, 1998. - С. 9-13.

3. Алиев О.И., Васильев A.C., Маслов М.Ю. и др. Гемореологическое средство: Пат. № 2141320 Россия. Опубл. в Б.И., 1999. -№ 32.

4. Антонова Г.Ф., Тюкавкина H.A. Водорастворимые вещества лиственницы и возможности их использования // Химия древесины. 1983. - № 2. - С. 89-96.

5. Альберт А. Избирательная токсичность. М.: Медицина, 1989. Т. 2. - С. 370-371.

6. Арзамасцев А.П., Сокольская Т.И., Садчикова Н.П. и др. Стандартные образцы и их применение при оценке качества лекарственных средств // В кн.: Настойки, экстракты, эликсиры и их стандартизация. Санкт-Петербург: СпецЛит, 2001.-С. 185-190.

7. Арзамасцев А.П., Садчикова Н.П., Харитонов ЮЛ. Валидация фармакопейных методов (проект ОФС) // Ведомости научного центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств. МЗ РФ, 2001. № 1. - С. 28-29.

8. Атлас лекарственных растений России. Под ред. В.А. Быкова. М., 2006. 345 с.

9. Ахтанова Н.К., Тюкавкина H.A., Ручкин В.Е. и др. Комплексное исследование препаратов солодки голой методом ВЭЖХ // Междунар. научный симп. «Методы контроля лекарственных средств». Ашхабад, 1991. С. 17.

10. Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О., Ребров Л.Б. и др. Механизм ингибирующегодействия дигидрокверцетина на процесс пероксидного окисления фосфолипидов мембран // Биомедицинские технологии и радиоэлектроника. -2003.-№6.-С. 37-43.

11. Балаболкин М.И., Недосугова JI.B., Рудько И.А. и др. Применение антиоксидантов флавоноидного ряда в лечении диабетической ретинопатии при сахарном диабете 2 типа // Проблемы эндокринологии. 2003. - № 3. - С. 3-6.

12. Биофлавоноиды и проницаемость капилляров. Пер. с англ. М.: Изд. Иностранной литературы, 1957. 204 с.

13. Бобырева JI.E. Антиоксиданты в комплексной терапии диабетических ангиопатий // Эксперим. и клинич. фармакология. 1998. - Т. 61, № 1. - С. 7480.

14. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252 с.

15. Воскобойникова И.В., Геодакян C.B., Тюкавкина H.A. и др. Количественное определение дигидрокверцетина методом ВЭЖХ // Фармация. 1992. - № 6. -С.74-75.

16. Галенок В.А., Гостинская Е.В., Диккер В.Е. Гемореология при нарушенияхсахарного диабета. Новосибирск: Наука, 1987. 262 с.

17. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск: Наука Сибирское отделение, 1990.-С. 14-37.

18. Глущенко H.H., Плетенева Т.В., Попков В.А. Фармацевтическая химия (учебник). М.: Академия, 2004. С. 221-228.

19. Голубятникова Г.А., Захарченко В.Н., Ларионов С.М. и др. Вязкость крови и ее роль в нарушениях микроциркуляции у больных сахарным диабетом // Тер. архив. 1982. - Т. 54, № 2. - С. 102-107.

20. Государственная Фармакопея XI изд. Вып. 1 и 2. М.: 1998 (репринтное издание).

21. Государственная Фармакопея XI. М.: Медицина, 1987. Вып. 1. - С. 95-113. -Вып. 2. - С. 294.

22. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга. М.: Медицина, 2001. 328 с.

23. Девис М., Остин Дж., Патридж Д. Витамин С: Химия и биохимия. М.: Мир, 1999.- 176 с.

24. Дорсон Р., Элиот Д., Элиот У., Джонс К. Справочник биохимика. Пер. с англ. М.: Мир, 1991.-544 с.

25. Запрометов М.Н. Фенольные соединения. Распространение, метаболизм и функции в растениях. М.: Наука, 1993. 272 с.

26. Захарова H.A., Богданов Г.Н., Запрометов М.Н. и др. Антирадикальная эффективность некоторых природных фенольных соединений // Журн. общей химии. 1972. - Т. 42, № 6. - С. 1414-1420.

27. Зенков Н.К., Кандалинцева Н.В., Ланкин В.З. и др. Фенольные биоантиоксиданты. Новосибирск: СО РАМН, 2003. 328 с.

28. Ильюченок Т.Ю., Хоменко А.И., Фригидова Л.М. и др. Фармакологические и радиозащитные свойства некоторых производных у-пирона (флавононы и флавонолы) // Фармакол. и токсикол. 1975. - Т. 38, № 5. - С. 607-612.

29. Карпов Ю.А. Роль ацетилсалициловой кислоты в профилактике атеротромботических осложнений сердечно-сосудистых заболеваний // Фарматека. 2004. - № 8. - С. 24-28.

30. Клиническая оценка лабораторных тестов. Под ред. Н.У. Тица. М.: Медицина, 1986.-480 с.

31. Колхир В.К., Тюкавкина H.A., Быков В.А. и др. Диквертин новое антиоксидантное и капилляропротекторное средство // Хим.-фарм. журн. -1995.-Т. 29,№9.-С. 61-64.

32. Колхир В.К., Тюкавкина H.A., Быков В.А. Новое антиоксидантное средство «Диквертин» // Практическая фитотерапия. 1997. - № 1. - С. 12-16.

33. Кондакова Н.В., Сахарова В.В., Рипа Н.В. и др. Радиопротекторная активность дигидрокверцетина в экспериментах in vitro и in vivo II Биомедицинские технологии. M., 1998. С. 66-70.

34. Корягин A.C., Крылова Е.А., Лукьянова Л.Д. Влияние убихинона-10 на систему крови при радиационном облучении крыс // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2002. - Т. 133, № 6. - С. 650-652.

35. Котов C.B., Калинин А.П., Рудакова И.Г. Диабетическая нейропатия. М.: Медицина, 2000. 232 с.

36. Кубатиев A.A., Ядигарова З.Т., Рудько И.А. и др. Влияние диквертина на содержание циклических нуклеотидов в тромбоцитах // Бюл. эксперим. биол. и мед. 1999. - Т. 128, № 9. - С. 267-269.

37. Кубатиев A.A., Ядигарова З.Т., Рудько И.А. и др. Диквертин эффективный ингибитор агрегации тромбоцитов флавоноидной природы // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. - 1999. - № 3. - С. 47-50.

38. Кубатиев A.A., Ядигарова З.Т., Рудько И.А. и др. Подавление диквертином АДФ- и тромбин-индуцированного накопления цитоплазматического кальция в тромбоцитах человека // Хим.-фарм. журн. 1999. - Т. 33, № 12. - С. 3-4.

39. Куркин В.А. Фармакогнозия (учебник). Самара: ООО «Офорт», ГОУ ВПО «СамГМУ», 2004. С. 221-223.

40. Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н. Свободнорадикальные процессы внорме и при заболеваниях сердечно-сосудистой системы. М., 2000. 59 с.

41. Панкин В.З., Тих азе А.К., Коновалова Г.Г. и др. Концентрационная инверсия антиоксидантного и прооксидантного действия (3-каротина в тканях in vivo II Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1999. - Т. 128, вып. 9. - С. 314-316.

42. Лаптева К.И., Луцкий В.И., Тюкавкина Н.А. Некоторые флаваноны и флаванонолы ядровой древесины Larix dahurica II Химия природ, соед. 1974. - № 1.-С. 97-98.

43. Левгов В.В., Регирер С.А., Шадрина Н.Х. Реология крови. М.: Медицина, 1982. 272 с.

44. Лекарственные растения государственной фармакопеи. Фармакогнозия. М.: АНМИ, 2003. С. 82-84; С. 507-508.

45. Люсов В.А., Белоусов Ю.Б. Роль гемостаза и реологии крови в патогенезе ишемической болезни сердца // Кардиология. 1986. - Т. 26, № 5. - С. 8-14.

46. Максютина Н.П., Литвиненко В.И. Методы выделения и исследования флавоноидных соединений // Материалы I Всес. симп. «Фенольные соединения и их биологические функции». М.: Наука, 1968. С. 7-25.

47. Меньшикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К. и др. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. М.: Слово, 2006. 556 с.

48. Недосугова Л.В., Волковой А.К., Рудько И.А. и др. Сравнительная оценка эффективности биофлавоноидов Диквертина и Танакана в терапии сахарного диабета 2 типа // Клинич. фармакол, и терапия. 2000. - Т. 9, № 4. - С. 65-67.

49. ОСТ 91500.05.001-00 «Стандарты качества лекарственных средств. Основные положения». МЗ РФ. М., 2000.

50. ОФС 42-0003-00 «Растворение».

51. Петренко Ю.М., Владимиров Ю.А. Новое свойство аспирина и других салицилатов. Их способность к генерации радикалов за счет хелатирующе-окисляющего действия на катионы железа // Эксперим. и клинич. фармакология. 1998. - Т. 61, № 1. - С. 44-50.

52. Плецитый К.Д., Давыдова Т.В., Фомина В.Г. и др. Изучение иммуномоделирующих свойств ß-каротина в клинике // Вопр. питания. 1995. - № 6. - С. 14-16.

53. Плотников М.Б., Алиев О.И., Маслов М.Ю. и др. Коррекция синдрома повышенной вязкости крови в условиях ишемии мозга у крыс комплексом диквертина и аскорбиновой кислоты // Эксперим. и клинич. фармакология. -1999. Т. 62, № 6. - С. 45-47.

54. Плотников М.Б., Тюкавкина H.A., Алиев О.И. Гемореологическое средство: Пат. № 21502821076 Россия. Опубл. в Б.И., 2000. № 16.

55. Плотников М.Б., Логвинов C.B., Пугаченко Н.В. и др. Церебропротекторные эффекты смеси диквертина и аскорбиновой кислоты // Бюл. эксперим. биол. и мед.-2000.-Т. 130, № 11.-С. 543-547.

56. Плотников М.Б., Алиев О.И., Маслов М.Ю. и др. Поиск и изучение средств растительного происхождения, обладающих гемореологической активностью // Тромбоз, гемостаз, реология. 2000. - № 3. - С. 32-35.

57. Плотников М.Б., Маслов М.Ю., Алиев О.И. и др. Гемореологическое действие асковертина при аллоксановом диабете у крыс // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. 2001. -№ 4. - С. 26-28.

58. Плотников М.Б., Алиев О.И., Ямкин A.B. Влияние композиции ацетилсалициловой кислоты и диквертина на реологические показатели крови при инфаркте миокарда у крыс // Тромбоз, гемостаз и реология. 2001. - № 2. - С. 30-32.

59. Плотников М.Б., Гольдберг Е.Д. Тюкавкина H.A. и др. Средство с антиагрегантной и гемореологической активностью: Пат. № 2180848 Россия. Опубл. в Б.И., 2002. № 9.

60. Плотников М.Б., Ямкин A.B., Алиев О.И. Антиагрегантная и гемореологическая активность комплекса ацетилсалициловой кислоты идиквертина при спонтанной артериальной гипертензии у крыс // Бюл. эксперим. биол. и мед. 2002. - Приложение 1. - С. 35-37.

61. Плотников М.Б., Тюкавкина H.A., Плотникова Т.М. Лекарственные препараты на основе диквертина. Томск: Изд-во Томского университета, 2005.-228 с.

62. Плотникова Т.М. Антигипоксанты как средства церебропротекторной терапии ишемического инсульта: Автореф. дис. .д-ра мед. наук. Томск, 1998.-47 с.

63. Раменская Г.В., Агафонов A.A., Копылова М.М. и др. Сравнительный анализ растворимых шипучих таблеток ацетилсалициловой кислоты ТАСПИР и UPSARIN UPSA // Фармация. 2002. - № 6. - С. 30-31.

64. Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ. Методические рекомендации МР 2.3.1. 1915-04. М., 2004. 36 с.

65. Руленко И.А., Тюкавкина H.A., Колесник Ю.А. ВЭЖХ как метод стандартизации нового фитопрепарата «Диквертин» // Формирование приоритетов лекарственной политики: Материалы Российской нац. конф. М., 1995.-С. 185-186.

66. Свидетельство о государственной регистрации № 77.99.23.3.У.6677.12.04 от 01.12.2004 г. биологически активной добавки к пище «Каровертин».

67. Селиванова И.А. Физико-химические основы создания лекарственных средств и пищевых добавок на базе биологически активных веществ древесины Larix Gmelinti Rupr. (Rupr.) и Larix sibirica Ledeb.: Дис. .д-ра фарм. наук. М., 1998. 276 с.

68. Селиванова И.А., Тюкавкина H.A., Колесник Ю.А. и др. Исследование кристаллической структуры дигидрокверцетина // Хим.-фарм. ж. 1999. -Т. 33,№4.-С. 51-53.

69. Сергеев A.B., Коростылев С.А., Шеренешева Н.И. Иммуномодулирующая и антиканцерогенная активность каротиноидов // Вопр. медицинской химии. -1992.-Ха 4.-С. 25-30.

70. Сергунова В.Е., Самылина И.А., Сорокина A.A. Исследования по стандартизации растительных сборов с плодами шиповника // Фармация. -2004.-№ 1.-С.

71. Тарасова Е.А. Применение нового антиоксидантного препарата диквертин в лечении больных ишемической болезнью сердца // Практическая фитотерапия. 1999.-№ 1.-С. 37^41.

72. Теселкин Ю.О., Жамбалова Б.А., Бабенкова И. В. и др. Антиоксидантные свойства дигидрокверцетина // Биофизика. 1996. - Т. 41, № 3. - С. 620-624.

73. Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Клебанов Г.И. и др. Антиоксидантное действие дигидрокверцетина при общем у-облучении // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. 1999. - № 2. - С. 45^48.

74. Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Колхир В.К. и др. Антиоксидантное действиедигидрокверцетина при тетрахлорметановом гепатите у крыс // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. 1999. - № 3. - С. 44-47.

75. Теселкин Ю.О. Антиоксидантная активность плазмы крови как критерий оценки функционального состояния антиоксидантной системы организма и эффективности применения экзогенных антиоксидантов: Дис. . д-ра биол. наук. М., 2003. 272 с.

76. Тутельян В.А., Алексеева И.А. Витамины антиоксидантного ряда: обеспеченность населения и значение в профилактике хронических заболеваний // Клинич. фармакол. и терапия. 1995. - № 1. - С. 90-92.

77. Тутельян В.А. Биологически активные добавки к пище в современной медицине // Материалы II междунар. съезда «Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения». Санкт-Петербург Валаам, 1998. - С. 38^17.

78. Тюкавкина H.A., Лаптева К.И., Пентегова В.А. Флавоноиды Larix dahurica II Химия природ, соед. 1967. - № 4. - С. 278-279.

79. Тюкавкина H.A., Лаптева К.И., Модонова Л.Д. и др. Исследование экстрактивных веществ древесины даурской лиственницы // Фенольные соединения и их биологические функции. М., 1968. - С. 72-78.

80. Тюкавкина H.A., Луцкий В.И., Громова A.C. Использование полиамидного сорбента в токослойной хроматографии флавоноидов // Физиология растений. 1971.-№3.-С. 646-650.

81. Тюкавкина H.A., Погодаева H.H., Луцкий В.И. Ультрафиолетовая абсорбция флавоноидов. I. Константы ионизации тектохризина и хризина // Химия природн. соед. 1970. - № 1. - С. 24-27.

82. Тюкавкина H.A., Погодаева H.H. Ультрафиолетовая абсорбция флавоноидов.1.. Константы ионизации 7- и 4'-оксипроизводных флавона и флавонола // Химия природн. соед. 1971. -№ 1. - С. 11-15.

83. Тюкавкина H.A., Погодаева H.H. Ультрафиолетовая абсорбция флавоноидов.

84. I. Константы ионизации 5-оксигруппы в 5,п-диоксифлавонах // Химия природн. соед. 1972. -№ 2. - С. 173-176.

85. Тюкавкина H.A., Погодаева H.H. Ультрафиолетовая абсорбция флавоноидов.

86. VII. Константы ионизации кемпферола и кверцетина // Химия природн. соед. -1975. -№ 6. -С. 708-711.

87. Тюкавкина H.A., Лаптева К.И., Медведева С.А. Фенольные экстрактивные вещества рода Larix // Химия древесины. 1973. - Вып. 13. - С. 3-17.

88. Тюкавкина H.A., Литвиненко В.И., Шостаковский М.Ф. Хроматография на полиамидных сорбентах в органической химии. Новосибирск: Наука Сибирское отделение, 1973. 176 с.

89. Тюкавкина H.A., Горохова В.Г., Погодаева H. Н. и др. Жидкостная хроматография растительных фенольных соединений. 1. Обращенно-фазовая хроматография моно- и дизамещенных флавонов // Химия древесины. 1979. -№2.-С. 100-104.

90. Тюкавкина H.A., Горохова В.Г., Запесочная Г.Г. и др. Жидкостная хроматография растительных фенольных соединений. 2. Обращенно-фазовая хроматография флавоноидных агликонов // Химия древесины. 1979. - № 2. - С. 105-109.

91. Тюкавкина H.A. Использование ВЭЖХ в области фенольных соединений // Материалы V Всес. симпоз. «Фенольные соединения». Таллинн, 1987. С. 112-113.

92. Тюкавкина H.A., Руленко И.А., Колесник Ю.А. Дигидрокверцетин новая антиоксидантная и биологически активная пищевая добавка // Вопр. питания. -1997.-№6.-С. 12-16.

93. Тюкавкина Н.А, Хуторянский В.А., Сайботалов М.Ю., Баженов Б.Н. Средство для комплексной терапии заболеваний «Диквертин» и способ его получения: Патент РФ № 2088256 Россия. Опубл. в Б.И., 1997. № 24.

94. Тюкавкина H.A., Бауков Ю.И. Биоорганическая химия (учебник). М.: Дрофа, 2005.-С. 386-387.

95. Ульянова C.B., Щавлинский А.Н., Морев С.Н. и др. Анализ водорастворимых витаминов Вь В2, В6, С и никотинамида в драже «Гексавит» методом ВЭЖХ //

96. Фармация. -1993. № 3. - С. 50-51.

97. ФС 42-3853-99 «Дигидрокверцетин стандартный образец».

98. ФС 42-3867-99 «ß-Каротин».

99. ФСП 42-0542-5494-04 Асковертин®. Per. Удостоверение № ЛС-000031 от 15.03.2005 г.

100. Хавинсон В. X., Баринов В.А., Арутюнян A.B. и др. Свободнорадикальное окисление и старение. Санкт-Петербург: Наука, 2003. 327 с.

101. Хвостова А.И., Тюкавкина H.A., Геодакян C.B. и др. Изучение фармакокинетики и метаболизма феллавина методом ВЭЖХ // Между нар. научный симп. «Методы контроля лекарственных средств». Ашхабад, 1991. С. 92.

102. Хроматография в тонких слоях. Под ред. Э. Шталя. М.: Мир, 1965. С. 373-391.

103. Чолпонбаев К.С., Тюкавкина H.A., Ручкин В.Е. и др. Исследование методом ВЭЖХ лекарственного растительного сырья цветков бессмертника итальянского // Междунар. научн. симп. «Методы контроля лекарственных средств». Ашхабад, 1991. - С. 98.

104. Шабанов В.А., Левин Г.Я., Терехина Е.В. Изменение гемореологии при артериальной гипертензии // Реологические исследования в медицине. М., 1997.-Вып. 1.-С. 84-93.

105. Шатц В.Д., Сахартова О.В. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Рига: Зинатне, 1988. 390 с.

106. Шилова О.Г., Плотников М.Б., Фетисов A.A. и др. Применение нового природного антиоксиданта в комплексном лечении глазной патологии // Материалы юбилейной научно-практич. конф. «Актуальные вопросы офтальмологии». Томск, 2003. С. 26-27.

107. Шилова О.Г., Фетисов A.A., Плотников М.Б. Первый опыт использования каровертина в офтальмологической практике // Межрегион, конф.офтальмологов, посвященная 40-летию детской глазной службы Красноярского края. Сб. статей. Красноярск, 2003. С. 246.

108. Ших У.В. Витаминный статус пациентов с заболеваниями сердечнососудистой системы // Ведомости Научного центра экспертизы и государственного контроля лекарственных средств Минздрава России, 2000. -№ 3 (4). С. 76-78.

109. Шкаренков А.А., Белошапко А.А., Кузнецов Ю.Б. и др. Доклиническое токсикологическое изучение диквертина // Вопр. биол., мед. и фармацевт, химии. 1998. - № 3. - С. 36-39.

110. Штерн Э.,Тиммонс К. Электронная абсорбционная спектроскопия в органической химии. М.: Мир, 1974. С. 224.

111. Якушина J1.M., Харитончик JI.A., Бендер Е.Д. Определение ретинола, токоферола и каротиноидов в различных объектах методом выскоэффективной жидкостной хроматографии // Вопр. питания. 1993. - № 3. - С. 51-55.

112. Cao G., Sofic Е., Prior R.L. Antioxidant behavior of flavonoids: structure-activity relationships // Free Radical Biol. Med. 1997. - Vol. 22, № 5. - P. 749-760.

113. Carotinoids in human health. Ed. L.M. Canfield, N.I. Krinsky, J.A. Olson. New York: The New York Academy of sciences, 1993. 300 p.

114. The Chemistry of Flavonoid Compounds. Ed. T.A. Geissman. Oxford: Pergamon Press, 1966.-666 p.

115. Claridge T.D.W. High resolution NMR techniques in organic chemistry. Amsterdam-Tokyo: Pergamon, 1999. 382 p.129.130.131132133134.135136137138,139140141142

116. Das N.P. Naturally occurring flavonoids: structure chemistry and high performance liquid chromatography methods for separation and characterization // Methods Enzymol. 1994. - Vol. 234. - P. 410-420.

117. The Flavonoids. Ed. J.B. Harborne, T.J. Mabry, H. Mabry. London: Chapman and Hell, 1975.- 1204 p.

118. The Flavonoids: Advances in Research. Ed. J.B. Harborne, T.J. Mabry. London, New York: Chapman and Hell, 1982. 744 p.

119. The Flavonoids: Advances in Research since 1980. Ed. J.B. Harborne. London: Chapman and Hell, 1988. 621 p.

120. Flavonoids: Chemistry, Biochemistry and Applications. Ed. O.M. Andersen, K.R. Markham. CRC Press, 2005. 1256 p.

121. Free radicals in biology and medicine. Ed B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge. Oxford, 2001. -904 p. Free radicals in biology and medicine. Ed. B. Halliwell, J.M.C. Gutteridge. Oxford: University Press, 2001. P. 225-231.

122. Frei В., Traber M.G. The new US dietary reference for vitamins С and E // Redox Rep.-2001.-Vol. 6.-P. 5-9.

123. Gaffield W. Circular dichroism, optical rotatory dispersion and absolute configuration of flavanones, 3-hydroxy flavanones and their glycosides. Determination of aglycone chirality in flavanone glycosides // Tetrahedron. 1970-Vol. 26. - P. 4093-4108.

124. Haslam E. Practical polyphenolics. From structure to molecular recognition and physiological action. Cambridge: University Press , 1998. P. 306-323; 371-375.

125. HavsteenB. Biochemical effects of flavonoids//Z. Lebensm. Forsch. -1980. -B. 170.-S. 36-41.

126. Havsteen B. Flavonoids, a class of natural products of high pharmacological potency // Biochem. Pharmacol. 1983. - Vol. 32, № 7 - P. 1141-1148.

127. Hertog M.G.L. Flavonols in wine and tea and prevention of coronary heart disease // Polyphenols Communications 96. 18th International conference on polyphenols. Ed. J.Vercauteren, C. Chese, M.C. Dumon, J.F. Weber. Bordeaux (France), 1996. P. 117-131.

128. Irache J.M., Ezpeleta I., Vega F.A. HPLC determination of antioxidant synergists and ascorbic acid in some fatty pharmaceuticals, cosmetics and food // Chromatographia. 1993. -Vol. 35. - P. 232-236.

129. Jegle U. Separation of water-soluble vitamins by HPLC // J. Chromatogr. 1993. -Vol. 652.-P. 495-502.

130. Jin G-Z., Yamagata Yu., Tomito K. Structure of quercetin dihydrate // Acta Cryst. -1990.-C 46,№2.-P. 310-313.

131. Kandaswami C., Middleton E. Flavonoids as antioxidants // Natural antioxidants. Chemistry, health effects, and applications. Ed. F. Shahidi., Illinois: Champaign, 1997.-P. 174-203.

132. Kasai R., Hirono S., Chou W.-H. et al. Sweet dihydroflavonol rhamnoside from leaves of Engelhardtia chrysolepis II Chem. Pharm. Bull. 1988. - Vol. 36, № 10. - P. 41674170.

133. Khachik F., Beecher G.R., Goli M.B. Separation, identification and quantification of carotenoids in fruits, vegetables and human plasma by high performance liquid chromatography // Pure and Appl. Chem. 1991. - Vol. 63, № 1. - P. 71-80.

134. Kolhir V.K., Bykov V.A., Teselkin Yu.O. et al. Use of a new antioxidant diquertinas an adjuvant in the therapy of patients with acute pneumonia // Phytother. Res. -1998.-Vol. 12.-P. 606-608.

135. Korkina L.G., Afanasev I. B. Antioxidant and helating properties of flavonoids // Adv. Pharmacol. 1997. - Vol. 38. - P. 151-163.

136. Leschke M., Vogt M., Motz W., Strauer B.E. Blood rheology as a contributing factor in reduced coronary reserve in systemic hypertension // Amer. J. Cardiol. 1990. -Vol. 65, № 14.-P. 56G-59G.

137. Lundgren L.M., Theander O. Cis- and irarcs-dihydroquercetin glucosides from needles oiPinus sylvestris L. // Phytochemistry. 1988.- Vol. 27, № 3. - P. 829-832.

138. Mabry T.J., Markham K.R., Thomas M.B. The systematic identification of flavonoids. Berlin: Springer-Verlag, 1970. 354 p.

139. Markham K.R., Bloor S.J. Analysis and Identification of flavonoids in practice // In: Flavonoids in Health and Disease. Ed. C.A. Rice-Evans, L. Packer. New York-Basel-Hong Kong: M. Dekker, Inc., 1998. P. 1-33.

140. Merken H.M., Beecher G.R Measurement of food flavonoids by high performance liquid chromatography: a review // J. Agric. Food Chem. 2000. - Vol. 48, № 3. - P. 577-599.

141. Middleton E., Kandaswami C., Theoharides T. The effects of plant flavonoids on mammalian cells: implications for inflammation, heart disease and cancer // Pharmacol. Rev. 2000. - Vol. 52, № 4. - P. 673-751.

142. Mo J., Fan J., Guo Z. et al. A new hypothesis about the relationship betweenfree radical reactions and hemorheological properties in vivo II Med. Hypotheses. 1993. -Vol. 41, №6.-P. 516-620.

143. Nair G.V., Rudloff E. The composition of the heartwood extractives of Tamarack {Larix laricina K. Koch) // Can. J. Chem. 1959. - Vol. 37, № 9. - P. 1608-1611.

144. Nair G.V., Rudloff E. The composition of the heartwood extractives of Larix lyallii Pari.//Can. J. Chem. 1960. -Vol. 38, №2. -P. 177-181.

145. Natural antioxidants and anticarcinogens in nutrition, health and disease. Ed. J.T. Kumpulainen, J.T. Salonen. Helsinki: The Royal Society of Chemistry, 1999. 466 p.

146. Pew J.C. A flavanone from Douglas-fir heartwood // J. Amer. Chem. Soc. 1948. -Vol. 70, № 9. - P. 3031-3034.

147. Plotnikov M.B., Aliev O.I., Maslov M.Yu. et al. Correction of haemorheological disturbances in myocardial infarction by diquertin and ascorbic acid // Phytother. Res. 2003. - Vol. 17. - P. 86-88.

148. Poon R., Chu I. Urinary ascorbic acid HPLC determination // J. Biochem. Toxicology. - 1994. - № 9. - P. 297-304.

149. Stoltz J.E., Donner M. New trends in clinical hemorheology: an introduction to the concept of the hemorheological profile // Schweiz. Med. Wochenschr. 1991. - Vol. 43, Suppl. - P. 41-49.

150. Umegaki K, Inoue K., Takenchini N. et al. Improved method for the analysis of ascorbic acid in plasma by high-performance liquid chromatography with electrochemical detection // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 1994. - Vol. 40. - P. 73-79.186. USP 27-NF19.

151. Voskoboinikova I.V., Tjukavkina N.A., Kolhir V.K et al. Experimental pharmacokinetics of biologically active plant phenolic compounds. II. Pharmacokinetics of likviritin in the rat // Phytother. Res. 1993. - Vol. 7. - P. 84-86.

152. Voskoboinikova I.V., Tjukavkina N.A., Kolhir V.K et al. Experimental pharmacokinetics of biologically active plant phenolic compounds. III. Pharmacokinetics of dihydroquercetin // Phytother. Res. 1993. - Vol. 7. - P. 208-210.