Оценка иммуногенности и безопасности генно-инженерной векторной вакцины против болезни, вызванной вирусом Эбола, у здоровых добровольцев тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.09, кандидат наук Токарская Елизавета Александровна

• Токарская Елизавета Александровна
• кандидат наук
• 2019

Оглавление диссертации кандидат наук Токарская Елизавета Александровна

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Биологические особенности вируса Эбола

1.1.1. История открытия вируса Эбола

1.1.2. Структура вируса

1.1.3. Цикл репродукции вируса Эбола

1.1.4 Характеристика иммунного ответа на вирус Эбола

1.2. Клинические проявления и распространение БВВЭ

1.3. Разработка вакцин против БВВЭ

1.3.1. Вакцина на основе вируса УЕБУ

1.3.2. Вакцина на основе №^3

1.3.3. гЯЛБУ-вакцины

1.3.4. Гетерологичные вакцины

1.3.5. Вакцины на основе вируса везикулярного стоматита

1.3.6. Вакцины на основе аденовирусных векторов

1.4. Подходы к оценке безопасности и иммуногенности вакцин на основе рекомбинантных вирусных векторов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Материалы, используемые при исследовании иммуногенности

2.1.1. Характеристика исследуемого препарата

2

2.1.2. Линии клеток млекопитающих и среды

2.1.3. Антитела

2.1.4. Рекомбинантные белки

2.1.5. Реактивы и наборы

2.2. Методы

2.2.1. Общая характеристика добровольцев. Дизайн исследования

2.2.2. Оценка безопасности и реактогенности вакцины. Лабораторные исследования

2.2.3. Исследования поствакцинального иммунного ответа у здоровых добровольцев

2.2.4. Статистические методы исследования

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Безопасность и переносимость вакцины ГамЭвак-Комби у здоровых добровольцев

3.1.1. Оценка безопасности и переносимости отдельных компонентов вакцины у здоровых добровольцев (первый этап исследования)

3.1.2. Оценка безопасности и переносимости половинной дозы вакцины у здоровых добровольцев (второй этап исследования)

3.1.3. Оценка безопасности и переносимости полной дозы вакцины у здоровых добровольцев (второй этап исследования)

3.1.4. Оценка влияния вакцины на параметры гуморального и клеточного иммунитета у здоровых добровольцев

3.2. Исследования поствакцинального иммунного ответа у здоровых добровольцев

3.2.1. Исследование напряженности поствакцинального гуморального иммунного

ответа у здоровых добровольцев

3.2.2. Исследование напряженности поствакцинального клеточного иммунного ответа у здоровых добровольцев

3.2.3. Исследование влияния предсуществующего иммунного ответа к аденовирусному вектору на эффективность индукции поствакцинального иммунного ответа

3.2.4. Исследование длительности поствакцинального гуморального иммунного ответа у здоровых добровольцев

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

БЛАГОДАРНОСТИ

ПРИЛОЖЕНИЕ

ПРИНЯТЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

АГ - антиген

АД - артериальное давление

АЛТ - аланинаминотрансфераза, фермент печени

АСТ - аспартатаминотрансфераза, фермент печени

БВВЭ - болезнь, вызванная вирусом Эбола

БОЕ - бляшко-образующие единицы

ВАК - высшая аттестационная комиссия

ВИЧ - вирус иммунодефицита человека

ВНА - вирус-нейтрализующие антитела

ВОЗ - Всемирная Организация Здравоохранения

ВЧ - вирусные частицы

ВЭ - вирус Эбола

ДВС - дисеминированное внутрисосудистое свертывание ДИ - доверительный интервал ДК - дендритная клетка ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ЖКТ - желудочно-кишечный тракт ИЛ-10 - интерлейкин-10 ИЛ-2 - интерлейкин-2 ИЛ-6 - интерлейкин-6 ИЛ-8 - интерлейкин-8 ИМТ - индекс массы тела ИФА (ELISA) - иммуноферментный анализ ИФН-а (IFN-a) - интерферон-альфа ИФН-гамма (IFN gamma) - интерферон-гамма

5

КИ - клиническое исследование

КФК - креатинфосфокиназа, катализирующий фермент

ЛП - лекарственный препарат

М±м - среднее арифметическое значение

МКПК - мононуклеарные клетки периферической крови

мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота

НЕК293 - клеточная линия, полученная из эмбриональных почек человека НЯ - нежелательное явление ОП - оптическая плотность

ОРВИ - острая респираторная вирусная инфекция

ПЦР - полимеразная цепная реакция

РН - реакция нейтрализации

РНК - рибонуклеиновая кислота

СНЯ - серьезное нежелательное явление

СОЭ - скорость оседания эритроцитов

СР.ГЕОМ (Geom) - среднее геометрическое значение

ССС - сердечно-сосудистая система

ТМБ - тетраметилбензидин

ФГА - фитогемагглютинин

ФНО-альфа (ГОТ^) - фактор некроза опухоли альфа ФСБ - фосфатно-солевой буфер

ФСБТ -фосфатно-солевой буфер, содержащий 0,05% Tween20

ФТС - фетальная телячья сыворотка

ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы

ЧДД - частота дыхательных движений

ЧСС - частота сердечных сокращений

ЭКГ - электрокардиограмма

Ad26 - аденовирус человека 26 серотипа

6

Ad3 - аденовирус шимпанзе 3 серотипа

Ad35 аденовирус человека 35 серотипа

Ad5 - аденовирус человека 5 серотипа

BDBV - вирус Эбола штамм Бундибуджио

BOMV - вирус Эбола штамм Бомбали

CFSE - интернализируемая флуоресцентная метка

CV - коэффициент вариации

EBOV - вирус Эбола

F - белок слияния HPIV3

GP - гликопротеин

GP1 - субъединица 1 гликопротеина

GP2 - субъединица 2 гликопротеина

H2SO4 - серная кислота

HN - гемагглютинин-нейраминидаза

HPIV3 - вирус парагриппа человека 3 типа

IgA - иммуноглобулин класса A

IgE - иммуноглобулин класса E

IgG - иммуноглобулин класса G

IgM - иммуноглобулин класса A

IL-1b - интерлейкин 1 b

L - каталитическая субъединица вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы Median - медиана

MHC - молекулы комплекса гистосовместимости MIP-1a - макрофагальный воспалительный белок 1-альфа MVA - модифицированный вирус осповакцины Анкара NP - нуклеопротеин NPC1 - рецептор Нимана-Пика

rAd5 - рекомбинантный аденовирус человека 5 серотипа

7

ЯЛЫТЕБ - хемокин, выделяемый Т-клетками при активации

ЯЕБТУ - вирус Эбола штамм Рестон

гУБУ - рекомбинантный вирус верзикулярного стоматита

БЭ - стандартное отклонение среднего значения

бОР - секретируемый гликопротеин

ббОР - малый секретируемый гликопротеин

БТЛТ1 - фактор транскрипции

БТЛТ2 - фактор транскрипции

БЦБУ - вирус Эбола штамм Судан

ТЛБУ - вирус Эбола штамм Тай Форест

ТЫ - Т-хелперная клетка

ТЪ2 - Т-хелперная клетка

ТЬЯ4 - толл-подобный рецептор

УЕЕУ - вирус венесуэльского лошадиного энцефалита

УР24 - белок матрикса

УР30 - нуклеопротеин

УР35 - белок нуклеокапсида

УР40 - матричный белок

УБУ - вирус верзикулярного стоматита

7ЕБОУ - вирус Эбола штамм Заир

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка иммуногенности и безопасности генно-инженерной векторной вакцины против болезни, вызванной вирусом Эбола, у здоровых добровольцев»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы и степень ее разработанности. Болезнь, вызванная вирусом Эбола (БВВЭ), является одним из опаснейших заболеваний XXI века. Эпидемия, вспыхнувшая в 2014 году, является одной из крупнейших за все время с момента открытия вируса в 1976 году. В заявлении руководства ВОЗ 2014 года говорилось, что из-за продолжающейся передачи вируса Эбола в Западной Африке, высокой летальности и слабо развитых органов здравоохранения в данном регионе, БВВЭ представляет собой глобальную чрезвычайную ситуацию в области общественного здравоохранения. [Всемирная Организация Здравоохранения. 2015]. В отличие от предыдущих вспышек данного заболевания ситуация 2014 года характеризовалась поражением не только сельского, но и городского населения, а также распространением случаев заражения за пределы Африканского континента. БВВЭ была зафиксирована в таких странах как США, Великобритания, Испания, Китай [Fowler et al. 2014].

Естественными хозяевами вируса Эбола являются плодовые летучие мыши семейства Pteropodidae [Laupland et al., 2014]. Вирус Эбола обладает высокой степенью контагиозности и вирулентности. Данный вирус в 50% случаев смертелен для человека и человекообразных приматов. Заражение человека происходит при контакте с тканями и физиологическими жидкостями больного человека или животного. От человека к человеку вирус передается путем контакта с биологическими жидкостями (кровь, конъюнктивная жидкость, пот, рвотные массы). Инкубационный период составляет от 2 до 21 дня. Ранними клиническими симптомами БВВЭ является повышение температуры, миалгия, головная боль, далее следуют желудочно-кишечные симптомы: тошнота, рвота, диарея. Более поздними проявлениями являются желудочно-кишечные кровотечения, кровотечения из

конъюнктивы, носовое кровотечение, сыпь [Fowler et al., 2014; Laupland et al., 2014].

9

Риск заражения осложняется тем, что трупы умерших от БВВЭ являются источниками инфекции [Коеш§ е1 а1., 2014]. При заражении иммунный ответ развивается незамедлительно как гуморальный, так и клеточный. Постинфекционный иммунитет может сохраняться у переболевших десятки лет, что было показано в недавних исследованиях. Так, у людей, выживших после вспышки БВВЭ в 1976 году, спустя сорок лет в сыворотке крови детектировали антитела, специфичные к гликопротеину вируса Эбола [Шшот е1 а1., 2018]. Исследования постинфекционного иммунного ответа у людей, а также поствакцинального протективного ответа у животных позволили сделать ряд выводов о том, что введение вакцины против БВВЭ должно индуцировать формирование напряженного не только гуморального иммунного ответа, но и клеточного [Должикова и соавт, 2017].

Угроза распространения БВВЭ сохраняется и по сей день, вспышки БВВЭ регулярно детектируют на территории африканского континента. Наиболее эффективным способом борьбы с эпидемиями является вакцинопрофилактика. Разработки в данной области велись практически с момента идентификации вируса Эбола в 1980 году. Однако, несмотря на интенсивные исследования в области разработки вакцины против БВВЭ, на момент начала эпидемии в 2014 году в мире не было зарегистрировано ни одной профилактической вакцины или специфического терапевтического препарата.

В 2014 году в ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» была разработана

комбинированная векторная вакцина против БВВЭ. В основе вакцины лежат два

рекомбинантных вирусных вектора, экспрессирующих протективный антиген -

гликопротеин вируса Эбола: вектор на основе рекомбинантного вируса

везикулярного стоматита и вектор на основе рекомбинантного аденовируса человека

5 серотипа. Использование вакцины на основе гетерологичных вирусных векторов

позволяет сформировать мощный полноценный (гуморальный и клеточный)

иммунный ответ на целевой антиген. Доклинические исследования эффективности и

10

безопасности разработанной вакцины позволили получить разрешение на проведение клинических исследований безопасности и иммуногенности комбинированной векторной вакцины против БВВЭ.

Целью диссертационной работы являлась оценка иммуногенности и безопасности комбинированной векторной вакцины ГамЭвак-Комби против лихорадки Эбола.

Для достижения цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследование напряженности гуморального и клеточного иммунного ответа у здоровых добровольцев после вакцинации.

2. Оценка влияния предсуществующего иммунного ответа к аденовирусному вектору на эффективность индукции поствакцинального иммунного ответа.

3. Исследование длительности поствакцинального гуморального иммунного ответа у здоровых добровольцев.

4. Оценка безопасности и реактогенности вакцины ГамЭвак-Комби.

Научная новизна работы. Впервые в РФ в соответствии с рекомендациями

ВОЗ была разработана генно-инженерная векторная вакцина против ББВЭ для

введения в режиме прайм-буст, основанная на оригинальной комбинации двух

рекомбинантных вирусных векторов, экспрессирующих гликопротеин вируса Эбола:

рекомбинантном вирусе везикулярного стоматита (rVSV-GP) и рекомбинантном

аденовирусе человека 5 серотипа (rAd5-GP). В рамках диссертационной работы

было впервые проведено открытое исследование безопасности, реактогенности и

иммуногенности вакцины ГамЭвак-Комби у здоровых добровольцев. Показано, что

вакцина безопасна при использовании у здоровых добровольцев. Не

зарегистрировано ни одного случая серьезного нежелательного явления, не было

отмечено негативного влияния применения препарата на показатели общего анализа

крови, биохимического анализа крови, общего анализа мочи и параметры иммунного

статуса. Показано, что введение вакцины позволяет сформировать гуморальный и

клеточный иммунный ответ против гликопротеина вируса Эбола у всех

11

иммунизированных добровольцев. Уровень сероконверсии составил 100%. Показано, что в сыворотке крови добровольцев через 12 месяцев после иммунизации сохраняются антитела, специфичные к гликопротеину ОР вируса Эбола.

Теоретическая и практическая значимость работы. В результате проведенного исследования была проанализирована и оценена безопасность, реактогенность и иммуногенность новой вакцины ГамЭвак-Комби у здоровых добровольцев. Полученные результаты исследования безопасности, реактогенности и иммуногенности вакцины у здоровых добровольцев позволили подготовить пакет документов, на основании которого вакцина ГамЭвак-Комби была зарегистрирована для медицинского применения на территории РФ (ЛП-003390). По результатам работы было получено разрешение на проведение двойного слепого рандомизированного клинического исследования 4 фазы в Африке с участием 2000 здоровых добровольцев с целью изучения безопасности, переносимости и эффективности вакцинации [Клинические исследования. СНтса1Тпа1в.§оу ЫСТ03072030].

Результаты работы защищены Патентом РФ Яи 2381272 С2 на изобретение «СПОСОБ РАЗМНОЖЕНИЯ ВИРУСА» (Заявка: 2008107917/13. Дата подачи заявки: 04.03.2008). Шмаров М.М., Тутыхина И.Л., Логунов Д.Ю., Токарская Е.А., Народицкий Б.С., Дамшкалн Л.Г., Иванов Р.В., Лозинский В.И. Опубликовано: 10.02.2010. Бюл. № 4.

Внедрение полученных результатов в практику. По результатам проведенных клинических исследований вакцина ГамЭвак-Комби была зарегистрирована для медицинского применения в РФ (ЛП-003390). По результатам работы было получено разрешение на проведение пострегистрационных клинических исследований в Африке [Клинические исследования. СНтса^паЬ^оу ЫСТ03072030].

Методология и методы исследования. Методологической основой

исследования послужили современные подходы и требования к проведению

12

клинических исследований, теоретические и экспериментальные исследования комбинированной векторной вакцины против БВВЭ ГамЭвак-Комби. В работе использовались современные иммунологические, биохимические и статистические методы исследования, а также методы работы с культурами клеток.

Степень достоверности результатов. Для решения поставленных задач в работе были использованы современные инструментальные методы. Достоверность результатов исследования подтверждается достаточным количеством объектов исследования, достаточным количеством наблюдений, а также современными методами исследования, которые соответствуют поставленным в работе целям и задачам. Обсуждение результатов проведено с учетом современных требований и методических подходов медицинской и биологической науки. Научные положения и выводы, изложенные в диссертации, обоснованы и подтверждены фактическим материалом. Подготовка, статистический анализ и интерпретация полученных результатов проведены с использованием современных методов обработки информации и статистики. Статистические методы, примененные в работе, адекватны поставленным задачам. Проверка статистических гипотез осуществлялась при 5%-ом уровне значимости (0,05), допустимом в медико-биологических исследованиях.

Указанное выше позволяет считать полученные результаты достоверными, сделанные выводы обоснованными и вытекающими из результатов проведенных исследований.

Апробация работы. Апробация диссертации состоялась «01» марта 2018 г. на научной конференции отделов отделов иммунологии, интерферонов, генетики и молекулярной биологии бактерий, медицинской микробиологии ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России (Протокол № 3 от 01.03.2018).

Результаты диссертационной работы были представлены на совещании

исполкома ВОЗ (Женева, 2016), III Всероссийской научно-практической

конференции с международным участием «Социально-значимые и особо опасные

13

инфекционные заболевания» (Сочи, 2016), симпозиуме «China-Russia Symposium on AIDS, TB and Influenza» (Пекин, 2018), на научных конференциях отделов медицинской микробиологии, иммунологии, эпидемиологии, генетики и молекулярной биологии бактерий, бактериальных инфекций ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи» Минздрава России.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Впервые в России была разработана новая генно-инженерная векторная вакцина против ББВЭ для введения в режиме прайм-буст, основанная на оригинальной комбинации двух рекомбинантных вирусных векторов, экспрессирующих гликопротеин вируса Эбола: рекомбинантном вирусе везикулярного стоматита (rVSV-GP) и рекомбинантном аденовирусе человека 5 серотипа (rAd5-GP).

2. Иммунизация здоровых добровольцев вакциной ГамЭвак-Комби индуцирует формирование клеточного иммунного ответа к гликопротеину вируса Эбола и гуморального иммунного ответа к гликопротеину вируса Эбола, который сохраняется на протяжении не менее 12 месяцев после иммунизации.

3. Вакцина ГамЭвак-Комби имеет хороший профиль безопасности и не оказывает негативного влияния на показатели общего анализа крови, биохимического анализа крови, общего анализа мочи и параметры иммунного статуса.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертации соответствуют формуле специальности 14.03.09 -Клиническая иммунология, аллергология.

Публикации. По материалам диссертации опубликованы 3 печатные работы, 2 из которых - в рецензируемых научных изданиях, рекомендованных ВАК Минобрнауки России для публикации основных научных результатов диссертации. Имеется 1 патент РФ на изобретение № 2381272.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 154 страницах машинописного текста, включает разделы: введение, обзор литературы, материалы и методы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов, заключение, выводы, список используемой литературы (111 источников, из которых отечественных публикаций - 7, иностранных публикаций -104) и приложение. Работа содержит 26 таблиц и 24 рисунка. Приложение содержит 15 таблиц.

Личный вклад автора. Автор непосредственно участвовал в организации, проведении и контроле клинического исследования по оценке иммуногенности и безопасности генно-инженерной векторной вакцины на основе аденовируса человека 5 серотипа rAd5-GP и вируса везикулярного стоматита гУБУ^Р против болезни, вызванной вирусом Эбола, у здоровых добровольцев. Провел исследование напряженности гуморального и клеточного иммунного ответа у вакцинированных добровольцев. Оценил и проанализировал полученные результаты по безопасности, переносимости и иммуногенности препарата. Исследование проходило на базе 7 филиала ФГБУ «ГВКГ» имени Н.Н. Бурденко Министерства Обороны России. Реакцию вирус-нейтрализующей активности сывороток проводили в ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России. Исследование клеточного иммунного ответа препарата было выполнено совместно с к.б.н. Тухватулиным А.И. (лаб. клеточной микробиологии ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России). Статистический анализ результатов был выполнен совместно с д.м.н. профессором Колобухиной Л.В. (зав. лаб. респираторных вирусных инфекций с апробацией лекарственных средств ФГБУ «НИЦЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России).

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Биологические особенности вируса Эбола

1.1.1. История открытия вируса Эбола

Вирус Эбола высокопатогенен для людей. Болезнь, вызванная вирусом Эбола (БВВЭ), является смертельно опасным заболеванием для человека и приматов. Впервые официально БВВЭ была зафиксирована в 1976 году в деревне Ямбуку, северный Заир (ныне Демократическая Республика Конго) [Щелканов и соавт., 2015]. В том же году, только несколькими месяцами раньше, похожий случай по симптоматике был зафиксирован у работника на хлопко-перерабатывающем заводе в Нзаре, южный Судан (рисунок 1). Как потом стало известно, в обоих случаях заболевание было вызвано вирусом Эбола подтипом Судан (Sudan ebolavirus) и подтипом Заир (Zaire ebolavirus) соответственно [Regules et al., 2017; Peterson et al., 2004]. Свое название вирус получил по названию реки Эбола, в образцах воды которой в 1976 г. был изолирован данный вирус [Щелканов и соавт., 2014]. По своей морфологии вирус Эбола сходен с вирусом Марбург, который был идентифицирован раньше, в 1967 году в Европе [Терновой и соавт., 2015].

Природными хозяевами вируса Эбола являются крыланы, так же в

литературе можно встретить и другое название крыланов - плодовые летучие

мыши [Sanchez et al., 1993; Laupland et al., 2014]. Сами крыланы переносят

инфекцию бессимптомно, но способны выделять вирус вместе со слюной и

фекалиями, вирус является смертельным для обезьян, которые охотятся на

крыланов. Зараженное животное может стать жертвой охотника, что в

дальнейшем приводит к заражению населения, причем последующая передача

вируса происходит от человаека к человеку посредством контакта с

16

биологическими жидкостями. Так же заражение людей и приматов может происходит через фрукты, с которыми контактировали крыланы.

Вирус Эбола относится к семейству Filoviridae, род Ebolavirus. К роду Ebolavirus относятся 6 видов: Заир (Zaire ebolavirus, ZEBOV), Рестон (Reston ebolavirus, RESTV), Судан (Sudan ebolavirus, SUDV), Тай Форест (Tai Forest ebolavirus, TAFV), Бундибуджио (Bundibugyo ebolavirus, BDBV) и Бомбали (Bombali ebolavirus, BOMV). Первыми обнаруженными видами были Заир (ZEBOV) и Судан (SUDV). Вид Рестон (Reston ebolavirus), не является опасным для человека и был обнаружен на Филипинах [Feldmann et al., 2011]. О новом виде Бомбали (Bombali) было сообщено недавно, в 2018 г., вирус был изолирован из образцов, собранных в 2016 г. в Сьерра-Леоне в окрестностях деревни Бомбали. Вирус был обнаружен у летучих мышей видов Chaerephon pumilus и Mops condylurus, в настоящий момент нет подтвержденных данных свидетельствующих в пользу патогенности выявленного вида вируса Эбола для человека [Goldsteinet al., 2018].

Рисунок 1. Первые вспышки болезни, вызванной разными видами вируса Эбола, в Африке [Feldmann, Geisbert, 2011].

Наиболее патогенным для человека является вид Заир. Так же для человека являются опасными виды Судан и Бундибуджио. Заболевание, вызванное видом Тай Форест было зафиксированно один раз и характеризовалось проявлением лихорадочного состояния. Заболеваний, вызванных вирусом Эбола вида Рестон, у человека зафиксировано не было. С момента выявления и идентификации вируса и по настоящее время ВОЗ ведет эпидемиологический мониторинг данного заболевания. Отмечено, что заболевание выявляется преимущественно в сельских районах Центральной и Восточной Африки [ЫапЬо е1 а1., 2010]. С 1976 года было зафиксировано более 25 вспышек данного заболевания [Мап Баё7 е1 а1., 2014]. Наиболее значительная вспышка заболевания произошла в Гвинее, Сьерра-Леоне и Либерии в 2013-2016 годах, где, по оценкам на конец марта 2016 г. в общей сложности было зарегистрировано 28 646 случаев болезни Эбола, из которых 11 323 были фатальными [Ьо е1 а1., 2017]. Крупнейшая вспышка болезни, вызванной вирусом Эбола, официально зафиксирована первоначально в конце марта 2014 г. в странах Западной Африки: Республике Гвинея, Либерии и позднее в Сьерра-Леоне, Мали, Нигерии и Синегале. Ретроспективные исследования позволили предположить, что первый случай произошел в конце декабря 2013 года у двухлетнего ребенка, проживавшего со своей семьей в деревне Мельянду, находящейся на юго-востоке Гвинеи. Затем через несколько дней заразились и умерли второй ребенок в этой семье, а также их мать. Заражению подверглись и медработники, которые осматривали эту семью. В течение трех недель произошло три последовательных этапа передачи инфекции от человека человеку, и эпидемия распространилась на Геккедо, местный городской центр, позже - на столицу Конакри [Всемирная Организация Здравоохранения. 2014.]. Таким образом, к марту 2014 года инфекция поразила не только сельское население, но и городское. Были зафиксированы завозные случаи за пределами Африканского континента: в США, Великобритании, Испании у туристов и медицинских работников [Chertow е1 а1., 2014].

Не смотря на то что ВОЗ объявила 14 января 2016 года, что передача вируса

Эбола в трех странах прекратилась [Всемирная Организация Здравоохранения.

18

2016а], впоследствии было выявлено еще два эпидемических очага в Сьерра-Леоне и Гвинее, причем последний распространился на Либерию [Всемирная Организация Здравоохранения. 2016б]. Общее количество случаев заболевания и смерти от вируса Эбола, зарегистрированных к концу марта 2016 года в Гвинее, Либерии и Сьерра-Леоне, составляло 28616 и 11310, соответственно, при вторичной вспышке впоследствии было зарегистрировано еще 13 случаев.

Эпидемия затронула мужчин и женщин всех возрастных групп примерно в равных пропорциях. У медицинских работников, особенно на ранних стадиях эпидемического процесса, частота инфицирования была, по меньшей мере, в 100 раз выше, чем у населения в целом, и составляла до 12% всех выявленных случаев [Matanock et а1.., 2014.]. Большинство медицинских работников, вероятно, были инфицированы за пределами центров по лечению Эбола, либо в учреждениях общего здравоохранения. Население чаще всего инфицировалось в бытовых условиях при контакте с инфицированными и больными БВВЭ, в том числе, участвуя в похоронах усопших, которые подразумевают физический контакт с умершими.

Эпидемиологические данные из Либерии и Гвинеи свидетельствуют о том, что смерть в домащних условиях была связана со значительно повышенным риском заражения среди членов семьи и других лиц, контактировавших с больным, тогда как ранняя изоляция больных в центрах лечения БВВЭ, защищала от дальнейшей передачи возбудителя среди членов сообщества [ЫпёЫаёе et а1.., 2016] Показано, что изоляция больного до смерти снижала количество вторичных инфекций на 88%. Высокий риск заражения в домашних условиях обусловлен тесным контактом с умирающими и умершими больными, выделяющими в окружающую среду биологические жидкости, содержащие наиболее высокие титры вируса, в терминальной стадии болезни и после смерти. Важно отметить, что посмертные исследования приматов, погибших от БВВЭ, показали, что вирус Эбола стабилен в биологических жидкостях в течение 3 недель. Поэтому контакт с умершим является фактором высокого риска передачи инфекции [ЫпёЫаёе et а1.., 2016].

Отмечено, что погребение с участием подготовленного персонала применяющего персональное защитное снаряжение, по сравнению с погребением неподготовленными лицами связано со сниженным риском передачи заболевания. Однако возникновение вторичных случаев заболевания при инфицировании на захоронениях, квалифицированных как «безопасные», приводят к выводу, что меры предосторожности были неполными или контакт с возбудителем произошел ранее [Lindblade et al.., 2016].

1.1.2. Структура вируса

Геном вируса Эбола представлен несегментированной одноцепочечной молекулой РНК негативной полярности с молекулярной массой 4,2х106 г/моль и длиной около 19000 н.о. [Киселев и соавт., 2015]. Гешм состоит из семи генов, которые кодируют девять белков (рисунок 2), расположенных линейно: 3'-NP-VP35-VP40-GP-VP30-VP24-L-5' [Reynard et al. 2011]. Все гены кодируют по одному белку, кроме гена GP, который кодирует три гликопротеина: полноразмерный гликопротеин GP, растворимый гликопротеин sGP и малый растворимый гликопротеин ssGP. Геном имеет лидерный конец, который обозначается 3' и трейлерный - 5' [Sullivan et all., 2011, Dziubanska et.al,.2014].

Вирион вируса Эбола состоит из нуклеокапсида и липидной оболочки, которая состоит из цитоплазматической мембраны, заимствованной у клетки хозяина (рис.2). Нуклеокапсид представлен рибонуклеопротеидным комплексом, который состоит из нитевидной РНК и четырех белков: каталитической субъединицы РНК зависимой РНК полимеразы L, нуклеопротеина NP, белка VP35 и белка VP30. Белки VP24 и VP40 являются белками матрикса, участвуют в формировании вириона и отпочковывании вирионов от эукариотической клетки. На поверхности вириона находится гликопротеин GP [Koenig et al., 2014; Volchkov et al., 1998а; Volchkov et al., 1998б; Volchkov et al., 1995].

f GP1 GP2

З'-ОН-1 NP ЦУР35Ц vp40 |-|sGP~-| | vp30 Hvp24[-|

Расщепление фурином (от клетки хозяина)

GP ssGP

Редактирование мРНК

Рисунок 2. Структура вириона и схема расположения генов вируса Эбола [Вирус Эбола, У1га17опе]

Нуклеопротеин NP - структурный белок нуклеокапсидного комплекса, покрывает геномную РНК, выполняя защитные функции. Катализирует транскрипцию и репликацию вирусной РНК, участвует в упаковке генома и в формировании вириона [Muhlberger et al., 1999].

Белок VP35 является компонентом РНК-зависимой РНК-полимеразы, участвует в блокировке внутриклеточных сигналов, необходимых для синтеза интерферонов 1 типа [Киселев и соавт.,2015; Muhlberger et al., 1999; Moss 2009].

Белок VP30 - структурный компонент нуклеокапсида, является активатором транскрипции РНК [Kobinger et al., 2006].

Белок VP40 - является матричным белком, располагается под вирусной мембраной, обеспечивает структурную целостность вирусных частиц, принимает участие в сборке и отпочковывании вирионов [Milligan et al.,2016].

Гликопротеин GP - гликозилированный поверхностный белок, отвечающий за связывание и проникновение вируса в клетку хозяина. Состоит из двух субъединиц: GP1 и GP2, соединенных между собой дисульфидной связью. Трансмембранно заякоревается GP2 субъединицей. [Feldman et al., 2001]. Является иммуносупрессором [Tapia et al., 2016]. Гликопротеин sGP -нестуктурный секретируемый белок. Вырабатывается в большом коичестве, практически 80% от общего количества гликопротеина составляет sGP [Sanchez et al., 1996]. Образуется в результате редактирования мРНК, если транскрипт содержит последовательность, состоящую из 7 урацилов, то образуется pre sGP, который в аппарате Гольджи под действием фуринов расщепляется до sGP и А пептида. Из-за отсутствия способности встраиваться в мембрану клетки, sGP легко секретируется инфицированными клетками [Volchkov et al., 2000] Может связываться с нейтрофилами и ингибировать их активность. [Volchkova et.a.,1998]. А пептид - является продуктом расщепления pre sGP. Также секретируем из инфицированных клеток. Мало изучен [Feldman et al., 2001]. Гликопротеин ssGP - малый несруктурный секретируемый белок. Так же обладает функцией иммуносупрессора [Feldman et al., 2001].

Белок VP 24 является антагонистом интерферона I типа.

Белок L представляет собой каталитическую субъединицу вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы, отвечает за репликацию и транскрипцию вирусной РНК [Mühlberger et al., 1999; Moss 2009] (рис. 2).

1.1.3. Цикл репродукции вируса Эбола

Заражение вирусом Эбола начинается со взаимодействия поверхностного

гликопротеина GP вируса Эбола с рецепторами клетки хозяина. Проникновение

22

вируса в клетку хозяина осуществляется путем эндоцитоза, фагоцитоза или макропиноцитоза [Mühlberger et al., 1998]. Далее образуется эндосома-лизосома, в которой под действием клеточных протеаз (фурина и катепсинов) сначала идет расщепление гликанов GP1, затем расщепление муцинового домена GP1, после чего протеолитически обработанный GP беспрепятственно взаимодействует с рецептором Нимана-Пика (NPC1) на мембране эндосомы-лизосомы, в результате чего происходит слияние вирусной мембраны и мембраны эндосомы и, как следствие этого, высвобождение вирусного нуклеокапсида в цитоплазму клетки хозяина [Henao-Restrepo et al., 2015].

В цитоплазме клетки хозяина начинается синтез вирусной РНК вируса Эбола. С момента заражения вирусом до начала синтеза положительной РНК проходит примерно 6-7 часов. С негативной РНК с помощью собственной вирусной РНК-зависимой РНК-полимеразы синтезируется большое количество позитивных РНК. PНК-зависимая РНК-полимераза скользит вдоль мРНК, транскрибируя индивидуальные генные последовательности в направлении от 3'-конца к 5'-концу (рисунок 3). И с них с помощью рибосом, находящихся в цитоплазме клетки хозяина, начинается синтез белков. Синтезируется preGP белок, который в дальнейшем, расщепляется фурином в аппарате Гольджи клетки хозяина до субъединиц GP1 и GP2, соединенных дисульфидными связями [Cook et al., 2013]. Важно отметить, что в связи с особенностями вирусной полимеразы происходит редактирование РНК и в результате транскрипции образуются 3 транскрипта, кодирующих различные гликопротеины, из которых только 20% кодируют полноразмерный гликопротеин GP, а остальные 80% кодируют растворимые гликопротеины sGP и ssGP. Также в большом количестве синтезируется нуклеопртеин NP который будет покрывать геномную РНК и формировать нуклеокапсид (рис. 3).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Токарская Елизавета Александровна, 2019 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Вирус Эбола. Viral Zone. URL: https://viralzone.expasy.org/207?outline=all by species (дата обращения: 10.06.2018)

2. Всемирная Организация Здравоохранения. 2014. Ground zero in Guinea: the Ebola outbreak smoulders—undetected—for more than 3 months. A retrospective on the first cases of the outbreak. URL: http://www.who.int/csr/disease/ebola/ebola-6-months/ guinea/en (дата обращения 12.12.2018).

3. Всемирная Организация Здравоохранения. 2015. Ebola situation report-21 October 2015. URL: http://apps.who.int/ebola/current-situation/ebola-situation-report-21 -october-2015 (дата обращения 12.12.2018).

4. Всемирная Организация Здравоохранения. 2016а. Latest Ebola outbreak over in Liberia; West Africa is at zero, but new flare- ups are likely to occur. URL: http://www.who.int/mediacentre/news/releases/2016/ebola-zero-liberia/en/ (дата обращения 12.12.2018).

5. Всемирная Организация Здравоохранения. 2016б. Situation report. Ebola virus disease, 10 June. URL: http://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/208883/ebolasitrep 10Jun2016 e ng.pdf;jsessionid=B4A95A529DF12334685C9A393E281A7E?sequence=1 (дата обращения 12.12.2018).

6. Всемирная Организация Здравоохранения. Болезнь, вызванная вирусом Эбола. http://www.who.int/en/news-room/fact-sheets/detail/ebola-virus-disease (дата обращения: 10.06.2018).

7. Всемирная Организация Здравоохранения. Вакцины против БВВЭ. http://www.who. int/medicines/ebola-treatment/emp_ebola_vaccmes/en/ (дата обращения: 26.03.2018).

8. Должикова И.В., Токарская Е.А., Джаруллаева А.Ш., Тухватулин А.И., Щебляков Д.В., Воронина О.Л., Сыромятникова С.И., Борисевич С.В., Пантюхов В.Б., Бабира В.Ф., и др. Векторные вакцины против болезни, вызванной вирусом Эбола. // Acta Naturae. 2017. том 9, № 3 (34), с. 4-12.

9. Киселев О.И., Васин А.В., Шевырева М.П. Геморрагическая лихорадка Эбола: свойства возбудителя и разработка вакцин и химиопрепаратов // Молекулярная биология. 2015. Т. 49, № 4. С.541-554.

10. Клинические исследования. ClinicalTrial.gov URL: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03072030 (дата обращения: 30.11.2018)

11.Национальный стандарт Российской Федерации ГОСТ Р 52379-2005: Надлежащая клиническая практика. Москва. 2005.

12. Нетёсов С.В. Эпидемия лихорадки Эбола: возможные причины и меры борьбы. // Природа. 2015. № 4 (1196). С.3—12.

13. Промежуточное руководство Всемирной организации здравоохранения. INTERIM GUIDANCE Potential Ebola therapies and vaccines 5 November 2014. WHO/EVD/HIS/EMP/14.1. (дата обращения: 10.06.2018)

14. Руководство по исследованию живых рекомбинантных векторных вакцин. Guideline on quality, non-clinical and clinical aspects of live recombinant viral vectored vaccines 24 June 2010 EMA/CHMP/VWP/141697/2009 Committee for Medicinal Product for Human Use (CHMP). URL: http://www.ema.europa.eu/docs/en GB/document library/Scientific guideline/20 10/08/WC500095721.pdf (дата обращения: 12.12.2018)

15. Руководство по клиническому определению качества вакцин. Guideline on clinical evaluation of vaccines 26 April 2018 EMEA/CHMP/VWP/164653/05 Rev. 1 Committee on Human Medicinal Products (CHMP). URL: https: //www. ema. europa. eu/documents/scientific- guideline/draft- guideline-clinical-evaluation-vaccines-revision- 1 en.pdf (дата обращения: 12.12.2018)

16.Терновой В.А., Семенцова А.В., Чуб Е.В., Пьянков О. В., Локтев В.Б., Агафонов А.П. Высокоэффективное Xmap-мультиплексирование для

обнаружения и идентификации геморрагических лихорадок, включая Эбола. // Проблемы особо опасных инфекций. 2015. Т.3. С. 94-97.

17.Щелканов М.Ю., Magassouba N.F., Boiro M.Y., Малеев В.В. Причины развития эпидемии лихорадки Эбола в Западной Африке // Лечащий врач.

2014. № 11. С.30.

18.Щелканов М.Ю., Zoumanigui N., Boiro M.Y., Малеев В.В. Пять мифов о лихорадке Эбола: где кончается вымысел? // Русский медицинский журнал.

2015. Т. 23, № 2. С.58—65.

19.Agnandji S.T., Huttner A., Zinser M.E., Njuguna P., Dahlke C., Fernandes J.F., Yerly S., Dayer J.A., Kraehling V., Kasonta R.et al. Phase 1 Trials of rVSV Ebola Vaccine in Africa and Europe. // The New England journal of medicine.

2016. V. 374(17). P. 1647-1660.

20.Audet J., Wong G., Wang H., Lu G., Gao G.F., Kobinger G., Qiu X. Molecular characterization of the monoclonal antibodies composing ZMAb: a protective cocktail against Ebola virus. // Sci Rep. 2014. V. 4. P. 6881.

21.Barouch D.H., Pau M.G., Custers J.H., Koudstaal W., Kostense S., Havenga M.J., Truitt D.M., Sumida S.M., Kishko M.G., Arthur J.C.et al. Immunogenicity of recombinant adenovirus serotype 35 vaccine in the presence of pre-existing anti-Ad5 immunity. // J Immunol. 2004. V. 172. P. 6290-6297.

22.Blaney J.E., Marzi A., Willet M., Papaneri A.B., Wirblich C., Feldmann F., Holbrook M., Jahrling P., Feldmann H., Schnell M.J. Antibody quality and protection from lethal Ebola virus challenge in nonhuman primates immunized with rabies virus based bivalent vaccine. // PLoS Pathog. 2013. V. 9. e1003389. P. 1-13.

23.Bosio C.M., Aman M.J., Grogan C., Hogan R., Ruthel G., Negley D., Mohamadzadeh M., Bavari S., Schmaljohn A. Ebola and Marburg viruses replicate in monocyte-derived dendritic cells without inducing the production of cytokines and full maturation. // J Infect Dis. 2003. V. 188(11). P. 1630-8.

24.Bray M., Geisbert T.W. Ebola virus: the role of macrophages and dendritic cells in the pathogenesis of Ebola hemorrhagic fever. // Int J Biochem Cell Biol. 2005. V. 37(8). P. 1560-6.

25. Bukreyev A., Marzi A., Feldmann F., Zhang L., Yang L., Ward J.M., Dorward D.W., Pickles R.J., Murphy B.R., Feldmann H., Collins P.L. Chimeric human parainfluenza virus bearing the Ebola virus glycoprotein as the sole surface protein is immunogenic and highly protective against Ebola virus challenge. // Virology. 2009. V. 383(2). P. 348-361.

26.Chen R.T., Carbery B., Mac L., Berns K.I., Chapman L., Condit R.C., Excler J.L., Gurwith M., Hendry M., Khan A.S.et al. The Brighton Collaboration Viral Vector Vaccines Safety Working Group (V3SWG). // Vaccine. 2014. V. 33(1). P. 73-5.

27.Chertow D.S., Kleine C., Edwards J.K., Scaini R., Giuliani R., Sprecher A. Ebola virus disease in West Africa--clinical manifestations and management. // N Engl J Med. 2014. V. 371(22). P. 2054-2057.

28.Cook J.D., Lee J.E.. The Secret Life of Viral Entry Glycoproteins: Moonlighting in Immune Evasion. // PLoS Pathog. 2013 V. 9(5): e1003258. P. 1-5.

29.Dolzhikova I.V., Zubkova O.V., Tukhvatulin A.I., Dzharullaeva A.S., Tukhvatulina N.M., Shcheblyakov D.V., Shmarov M.M., Tokarskaya E.A., Simakova Y.V., Egorova D.A.et al. Safety and immunogenicity of GamEvac-Combi, a heterologous VSV- and Ad5-vectored Ebola vaccine: An open phase I/II trial in healthy adults in Russia. // Hum Vaccin Immunother. 2017. V. 13(3). P. 613-620.

30.Dziubanska P.J., Derewenda U., Ellena J.F., Engel D.A., Derewenda Z.S. The structure of the C-terminal domain of the Zaire ebolavirus nucleoprotein. // Acta Crystallographica Section D: Biological Crystallography. 2014. V 70(Pt 9). P. 2420-2429.

31.Feldmann H., Geisbert T.W. Ebola haemorrhagic fever. // Lancet. 2011. V. 377(9768). P. 849-862.

32.Feldmann H., Geisbert T.W. Ebola haemorrhagic fever. // Lancet. 2011. V. 377(9768). P. 849-62.

33.Feldmann H., Sanchez A., Geisbert T.W. Filoviridae: Marburg and Ebola viruses. In: Fields virology, Fields B.N., Knipe D.M., Howley P.M., editors. // Lippincott Williams and Wilkins; Philadelphia, PA, USA. 2013.

34.Feldmann H., Volchkov V., Volchkova V., Stroher U., Klenk H.D. Biosynthesis and role of filoviral glycoproteins. // J Gen Virol. 2001. V. 82(Pt12). P. 28392848.

35.Feng Z., Cerveny M., Yan Z., He B. The VP35 Protein of Ebola Virus Inhibits the Antiviral Effect Mediated by Double-Stranded RNA-Dependent Protein Kinase PKR. // Journal of Virology. 2007. V. 81(1). P. 182-192

36.Flyak A.I., Kuzmina N., Murin C.D., Bryan C., Davidson E., Gilchuk P., Gulka C.P., Ilinykh P.A., Shen X., Huang K.et al. Broadly neutralizing antibodies from human survivors target a conserved site in the Ebola virus glycoprotein HR2-MPER region. Nat Microbiol. 2018; 3(6): 670-677.

37.Fowler R.A., Fletcher T., Fischer W.A., Lamontagne F., Jacob S., Brett-Major D., Lawler J.V., Jacquerioz F.A., Houlihan C., O'Dempsey T.et al. Caring for Critically Ill Patients with Ebola Virus Disease. Perspectives from West Africa .// Am J Respir Crit Care Med. 2014. V. 190(7). P. 733-737.

38.Geisbert T.W., Bailey M., Hensley L., Asiedu C., Geisbert J., Stanley D., Honko A., Johnson J., Mulangu S., Pau M.Get al. Recombinant adenovirus serotype 26 (Ad26) and Ad35 vaccine vectors bypass immunity to Ad5 and protect nonhuman primates against ebolavirus challenge. // J Virol. 2011. V. 85. P. 4222-4233.

39.Geisbert T.W., Feldmann H. Recombinant vesicular stomatitis virus-based vaccines against Ebola and Marburg virus infections. // J Infect Dis. 2011. V. 204(Suppl 3). P. S1075-81.

40.Geisbert T.W., Geisbert J.B., Leung A., Daddario-DiCaprio K.M., Hensley L.E., Grolla A., Feldmann H. Single-injection vaccine protects nonhuman primates against infection with marburg virus and three species of ebola virus. // J Virol. 2009. V. 83. P. 7296-7304.

41.Geisbert T.W., Hensley L.E. Ebola virus: new insights into disease aetiopathology and possible therapeutic interventions. // Expert Rev Mol Med. 2004. V. 6(20). P. 1-24.

42.Geisbert T.W., Pushko P., Anderson K., Smith J., Davis K.J., Jahrling P.B. Evaluation in nonhuman primates of vaccines against Ebola virus. // Emerging infectious diseases. 2002. V. 8. P. 503-507.

43.Geisbert T.W., Young H.A., Jahrling P.B., Davis K.J., Kagan E., Hensley L.E.et al. Mechanisms underlying coagulation abnormalities in Ebola hemorrhagic fever: overexpression of tissue factor in primate monocytes/macrophages is a key event. // J Infect Dis. 2003. V. 188(11). P. 1618-29.

44.Gilchuk P., Kuzmina N., Ilinykh P.A., Huang K., Gunn B.M., Bryan A., Davidson E., Doranz B.J., Turner H.L., Fusco M.L.et al. Multifunctional Pan-ebolavirus Antibody Recognizes a Site of Broad Vulnerability on the Ebolavirus Glycoprotein. // Immunity. 2018. V. 49(2). P. 363-374.

45.Goldstein T., Anthony S.J., Gbakima A., Bird B. , Bangura J., Tremeau-Bravard A., Belaganahalli M.N., Wells H.L., Dhanota J.K., Liang E.et al. The discovery of Bombali virus adds further support for bats as hosts of ebolaviruses. // Nature Microbiology. 2018. V. 3. P. 1084-1089.

46.Günther S., Feldmann H., Geisbert T.W., Hensley L.E., Rollin P.E., Nichol S.T., Ströher U., Artsob H., Peters C.J., Ksiazek T.G.et al. Management of accidental exposure to Ebola virus in the biosafety level 4 laboratory, Hamburg, Germany. // J Infect Dis. 2011. V. 204(Suppl 3). P. S785-90.

47.Henao-Restrepo A.M., Longini I.M., Egger M., Dean N.E., Edmunds W.J., Camacho A., Carroll M.W., Doumbia M., Draguez B., Duraffour S.et al. Efficacy and effectiveness of an rVSV-vectored vaccine expressing Ebola surface glycoprotein: interim results from the Guinea ring vaccination cluster-randomised trial. // Lancet. 2015. V. 386(9996). P. 857-866.

48.Henao-Restrepo A.M., Preziosi M-P, Wood D., Moorthy V., Kieny M.P., the

WHO Ebola Research, Development Team. On a path to accelerate access to

Ebola vaccines: The WHO's research and development efforts during the 2014130

2016 Ebola epidemic in West Africa. // Current opinion in virology. 2016. V. 17. P. 138-144.

49.Hensley L.E., Young H.A., Jahrling P.B., Geisbert T.W. Proinflammatory response during Ebola virus infection of primate models: possible involvement of the tumor necrosis factor receptor superfamily. // Immunol Lett. 2002. V. 80(3). P. 169-79.

50.Herbert A.S., Kuehne A.I., Barth J.F., Ortiz R.A., Nichols D.K., Zak S.E., Stonier S.W., Muhammad M.A., Bakken R.R., Prugar L.I.et al. Venezuelan Equine Encephalitis Virus Replicon Particle Vaccine Protects Nonhuman Primates from Intramuscular and Aerosol Challenge with ebolavirus. // J Virol. 2013. V. 87. P. 4952-4964.

51.Iampietro M., Younan P., Nishida A., Dutta M., Lubaki N.M., Santos R.I., Koup R.A., Katze M.G., Bukreyev A. Ebola virus glycoprotein directly triggers T lymphocyte death despite of the lack of infection. // PLoS Pathog. 2017,. V. 13. P. e1006397

52.Ilinykh P.A., Santos R.I., Gunn B.M., Kuzmina N.A., Shen X., Huang K., Gilchuk P., Flyak A.I., Younan P., Alter G.et al. Asymmetric antiviral effects of ebolavirus antibodies targeting glycoprotein stem and glycan cap. // PLoS Pathog. 2018. V. 14(8). P. e1007204.

53.Kobinger G.P., Feldmann H., Zhi Y., Schumer G., Gao G., Feldmann F., Jones S., Wilson J.M. Chimpanzee adenovirus vaccine protects against Zaire Ebola virus. // Virology. 2006. V. 346. P. 394-401.

54.Kobinger G.P., Leung A., Neufeld J., Richardson J.S., Falzarano D., Smith G., Tierney K., Patel A., Weingartl H.M. Replication, pathogenicity, shedding, and transmission of Zaire ebolavirus in pigs. // J Infect Dis. 2011. V. 204(2). P. 200-8.

55.Koenig K.L., Majestic C., Burns M.J. Ebola Virus Disease: Essential Public Health Principles for Clinicians. // Western Journal of Emergency Medicine. 2014. V. 15(7). P. 728-731.

56.Laupland K.B., Valiquette L. Ebola virus disease. // Can J Infect Dis Med

Microbiol. 2014. V. 25(3). P. 128-129.

131

57.Ledgerwood J.E, Costner P., Desai N., Holman L., Enama M.E., Yamshchikov

G., Mulangu S., Hu Z., Andrews C.A., Sheets R.A.et al. A replication defective recombinant Ad5 vaccine expressing Ebola virus GP is safe and immunogenic in healthy adults. // Vaccine. 2010. V. 29(2). P. 304-313.

58.Leroy E.M., Kumulungui B., Pourrut X., Rouquet P., Hassanin A., Yaba P., Délicat A., Paweska J.T., Gonzalez J.P., Swanepoel R. Fruit bats as reservoirs of Ebola virus. // Nature. 2005. V. 438(7068). P. 575-576.

59.Lindblade K.A., Nyenswah T., Keita S., Diallo B., Kateh F., Amoah A., Nagbe T.K., Raghunathan P., Neatherlin J.C., Kinzer M.et al. Secondary Infections with Ebola Virus in Rural Communities, Liberia and Guinea, 2014-2015. // Emerg Infect Dis. 2016. V. 22(9). P. 1653-5.

60.Lo T.Q., Marston B.J., Dahl B.A., De Cock K.M. Ebola: anatomy of an epidemic. 2017. // Annu. Rev. Med. V. 68. P. 359-370.

61.Lupton H.W., Lambert R.D., Bumgardner D.L., Moe J.B., Eddy G.A.. Inactivated vaccine for Ebola virus efficacious in guineapig model. // Lancet. 1980. V. 2. P. 1294-1295.

62.Mahanty S., Hutchinson K., Agarwal S., McRae M., Rollin P.E., Pulendran B. Cutting edge: impairment of dendritic cells and adaptive immunity by Ebola and Lassa viruses. // J Immunol. 2003. V. 170(6). 2797-801.

63.Mari Saéz A., Weiss S., Nowak K., Lapeyre V., Zimmermann F., Düx A., Kühl

H.S., Kaba M., Regnaut S., Merkel K.et al. Investigating the zoonotic origin of the West African Ebola epidemic. // EMBO Mol Med. 2014. V. 7(1). P. 17-23.

64.Marsh G.A., Haining J., Robinson R., Foord A., Yamada M., Barr J.A., Payne J., White J., Yu M., Bingham J.et al. Ebola Reston virus infection of pigs: clinical significance and transmission potential. // J Infect Dis. 2011. V. 204(Suppl 3). P. S804-9.

65.Martin J.E., Sullivan N.J., Enama M.E., Gordon I.J., Roederer M., Koup R.A., Bailer R.T., Chakrabarti B.K., Bailey M.A., Gomez P.L.et al. A DNA vaccine for Ebola virus is safe and immunogenic in a phase I clinical trial. // Clin. Vaccine

Immunol. 2006. V. 13(11). P. 1267-1277.

132

66.Mast T.C., Kierstead L., Gupta S.B., Nikas A.A., Kallas E.G., Novitsky V., Mbewe B., Pitisuttithum P., Schechter M., Vardas E.et al. International epidemiology of human pre-existing adenovirus (Ad) type-5, type-6, type-26 and type-36 neutralizing antibodies: correlates of high Ad5 titers and implications for potential HIV vaccine trials. // Vaccine. 2010. V. 28. P. 950-957.

67.Matanock A., Arwady M.A., Ayscue P., Forrester J.D., Gaddis B., Hunter J.C., Monroe B., Pillai S.K., Reed C., Schafer I.J.et al. Ebola virus disease cases among health care workers not working in Ebola Treatment Units—Liberia, June-August, 2014. // Morb. Mortal. Wkly. Rep. 2014. V.63. P. 1077-81

68.McElroy A., Muhlberger E., Fontela C. Immune barriers of Ebola virus infection. // Current Opinion in Virology. 2018. V. 28. P. 152-160.

69.Milligan I.D., Gibani M.M., Sewell R., Clutterbuck E.A., Campbell D., Plested E., Nuthall E., Voysey M., Silva-Reyes L., McElrath M.J.et al. Safety and Immunogenicity of Novel Adenovirus Type 26- and Modified Vaccinia Ankara-Vectored Ebola Vaccines: A Randomized Clinical Trial. // Jama. 2016. V.315. P. 1610-1623.

70.Moss R.B. Prospects for control of emerging infectious diseases with plasmid DNA vaccines. // Journal of Immune Based Therapies and Vaccines. 2009. V. 7:3. P. 1-9.

71.Mühlberger E., Lötfering B., Klenk H.-D., Becker S. Three of the Four Nucleocapsid Proteins of Marburg Virus, NP, VP35, and L, Are Sufficient To Mediate Replication and Transcription of Marburg Virus-Specific Monocistronic Minigenomes. // Journal of Virology. 1998. V. 72(11). P. 8756-8764.

72. Mühlberger E., Weik M., Volchkov V.E., Klenk H.-D., Becker S. Comparison of the Transcription and Replication Strategies of Marburg Virus and Ebola Virus by Using Artificial Replication Systems. // Journal of Virology. 1999. V. 73(3). P. 2333-2342.

73.Murin C.D., Fusco M.L., Bornholdt Z.A., Qiu X., Olinger G.G., Zeitlin L., Kobinger G.P., Ward A.B., Saphire E.O. Structures of protective antibodies

reveal sites of vulnerability on Ebola virus. // Proc Natl Acad Sci U S A. 2014. V. 111(48). P. 17182-7.

74.Nanbo A., Imai M., Watanabe S., Noda T., Takahashi K., Neumann G., Halfmann P., Kawaoka Y. Ebolavirus is internalized into host cells via macropinocytosis in a viral glycoprotein-dependent manner. // PLoS Pathog. 2010. V. 6(e1001121). P. 1-20.

75.Ning Y., Deng F., Hu Z., Wang H. The roles ebolavirus glycoproteins in viral pathogenesis. //Virologica Sinica. 2016. V. 32(1). P. 3-15.

76.Nkoghe D., Leroy E.M., Toung-Mve M., Gonzalez J.P. Cutaneous manifestations of filovirus infections. // Int J Dermatol. 2012. V. 51(9). P. 1037-43.

77.Okumura A., Pitha P.M., Yoshimura A., Harty R.N. Interaction between Ebola virus glycoprotein and host toll-like receptor 4 leads to induction of proinflammatory cytokines and SOCS1. // J Virol. 2010. V. 84. P.27-33.

78.Peterson A.T., Bauer J.T., Mills J.N. Ecologic and Geographic Distribution of Filovirus Disease. // Emerging Infectious Diseases. 2004. V. 10(1). P. 40-47.

79.Ponomarenko J., Vaughan K., Sette A., Maurer-Stroh S. Conservancy of mAb Epitopes in Ebolavirus Glycoproteins of Previous and 2014 Outbreaks. // PLoS Curr. 2014. V. 6.

80.Pushko P., Bray M., Ludwig G.V., Parker M., Schmaljohn A., Sanchez A., Jahrling P.B., Smith J.F. Recombinant RNA replicons derived from attenuated Venezuelan equine encephalitis virus protect guinea pigs and mice from Ebola hemorrhagic fever virus. // Vaccine. 2000. V. 19. P. 142-153.

81.Reed D.S., Lackemeyer M.G., Garza N.L., Sullivan L.J., Nichols D.K. Aerosol exposure to Zaire ebolavirus in three nonhuman primate species: differences in disease course and clinical pathology. // Microbes Infect. 2011. V. 13(11). P. 9306.

82.Regules J.A., Beigel J.H., Paolino K.M., Voell J., Castellano A.R., Hu Z., Muñoz P., Moon J.E., Ruck R.C., Bennett J.W.et al. A Recombinant Vesicular Stomatitis Virus Ebola Vaccine. // The New England journal of medicine. 2017. V. 376(4). P. 330-341.

83.Reynard O., Mokhonov V., Mokhonova E., Leung J., Page A., Mateo M., Pyankova O., Georges-Courbot M.C., Raoul H., Khromykh A.A.et al. Kunjin virus replicon-based vaccines expressing Ebola virus glycoprotein GP protect the guinea pig against lethal Ebola virus infection. // J Infect Dis. 2011. V. 204. P. 1060-1065.

84.Rimoin A.W., Hotez P.J. NTDs in the heart of darkness: the Democratic Republic of Congo's unknown burden of neglected tropical diseases. // PLoS neglected tropical diseases. 2013. V. 7(e2118). P. 1-5.

85.Rimoin A.W., Lu K., Bramble M.S., Steffen I., Doshi R.H., Hoff N.A., Mukadi P., Nicholson B.P., Alfonso V.H., Olinger G.et al. Ebola Virus Neutralizing Antibodies Detectable in Survivors of the Yambuku, Zaire Outbreak 40 Years after Infection. // The Journal of Infectious Diseases. 2018. V. 217(2). P. 223231.

86.Roberts A., Buonocore L., Price R., Forman J., Rose J.K. Attenuated Vesicular Stomatitis Viruses as Vaccine Vectors. // Journal of Virology. 1999. V. 73(5). P. 3723-3732.

87.Rodriguez L.L., De Roo A., Guimard Y., Trappier S.G., Sanchez A., Bressler D., Williams A.J., Rowe A.K., Bertolli J., Khan A.S.et al. Persistence and genetic stability of Ebola virus during the outbreak in Kikwit, Democratic Republic of the Congo, 1995. // J Infect Dis. 1995. V. 179(Suppl 1). P. S170-6.

88.Rowe A.K., Bertolli J., Khan A.S., Mukunu R., Muyembe-Tamfum J.J., Bressler D., Williams A.J., Peters C.J., Rodriguez L., Feldmann H.et al. Clinical, virologic, and immunologic follow-up of convalescent Ebola hemorrhagic fever patients and their household contacts, Kikwit, Democratic Republic of the Congo. Commission de Lutte contre les Epidemies a Kikwit. // J Infect Dis. 1999. P. 179(Suppl 1). P. S28-35.

89.Sanchez A., Kiley M. P., Holloway B. P., Auperin D. D. Sequence analysis of the Ebola virus genome: organization, genetic elements, and comparison with the genome of Marburg virus. // Virus Res. 1993. V. 29. P. 215-240.

90.Sanchez A., Trappier S.G., Mahy B.W., Peters C.J., Nichol S.T. The virion glycoproteins of Ebola viruses are encoded in two reading frames and are expressed through transcriptional editing. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. V. 93. P. 3602-3607.

91.Sarwar U.N., Costner P., Enama M.E., Berkowitz N., Hu Z., Hendel C.S., Sitar S., Plummer S., Mulangu S., Bailer R.T.et al. Safety and Immunogenicity of DNA Vaccines Encoding Ebolavirus and Marburgvirus Wild-Type Glycoproteins in a Phase I Clinical Trial. // The Journal of Infectious Diseases. 2015. V. 211(4). P. 549-557.

92.Sobarzo A., Ochayon D.E., Lutwama J.J., Balinandi S., Guttman O., Marks R.S., Kuehne A.I., Dye J.M., Yavelsky V., Lewis E.C., Lobel L. Persistent Immune Responses after Ebola Virus Infection. // N Engl J Med. 2013. V. 369(5). P. 492493.

93.Sulaiman W.A.W., Mat L.N.I., Hoo F.K., Mohamed M.H., Lim S.M.S. Is Ebola a sexually transmitted disease? Implication of Ebola RNA persistence in the semen. // J Infect Public Health. 2018. V. 11(2). P.299.

94.Sullivan N.J., Geisbert T.W., Geisbert J.B., Shedlock D.J., Xu L., Lamoreaux L., Custers J.H., Popernack P.M., Yang Z.Y., Pau M.G.et al. Immune protection of nonhuman primates against Ebola virus with single low-dose adenovirus vectors encoding modified GPs. // PLoS medicine. 2006. V. 3(6). e177. P. 1-9.

95.Sullivan N.J., Hensley L., Asiedu C., Geisbert T.W., Stanley D., Johnson J., Honko A., Olinger G., Bailey M., Geisbert J.B.et al. CD8+ cellular immunity mediates rAd5 vaccine protection against Ebola virus infection of nonhuman primates. // Nat Med. 2011. V. 17(9). P. 1128-1131.

96.Tapia M.D., Sow S.O., Lyke K.E., Haidara F.C., Diallo F., Doumbia M., Traore A., Coulibaly F., Kodio M., Onwuchekwa U.et al. Use of ChAd3-EBO-Z Ebola virus vaccine in Malian and US adults, and boosting of Malian adults with MVA-BN-Filo: a phase 1, single-blind, randomised trial, a phase 1b, open-label and double-blind, dose-escalation trial, and a nested, randomised, double-blind,

placebo-controlled trial. // Lancet Infect Dis. 2016. V. 16. P. 31-42.

136

97.Tomczyk T., Orzechowska B. [Vesicular stomatitis virus (VSV) as a vaccine vector for immunization against viral infections]. // Postepy Hig Med Dosw (Online). 2013. V. 67. P. 1345-58.

98.Volchkov V. E., Chepurnov A. A., Volchkova V. A., Ternovoj V. A., Klenk H.D. Molecular characterization of guinea pig-adapted variants of Ebola virus. // Virology. 2000. V. 277. P. 147-155.

99. Volchkov V., Feldmann H., Volchkova V., Klenk H.D. Processing of the Ebola virus glycoprotein by the proprotein convertase furin. // Proc Natl Acad Sci U S A. 1998a. V. 95(10). P. 5762-5767.

100. Volchkov V., Volchkova V., Slenczka W., Klenk H.D., Feldmann H. Release of Viral Glycoproteins during Ebola Virus Infection. // Virology. 19986. V. 245(1). P. 110-119.

101. Volchkov V.E., Becker S., Volchkova V.A., Ternovoj V.A., Kotov A.N., Netesov S.V., Klenk H.D. GP mRNA of Ebola virus is edited by the Ebola virus polymerase and by T7 and vaccinia virus polymerases. // Virology. 1995. V. 214. P. 421-430.

102. Volchkova, V.A., Feldmann, H., Klenk, H.-D., Volchkov, V. E. The nonstructural small glycoprotein of Ebola virus is secreted as an antiparallel-orientated homodimer. // Virology. 1998. V. 250. P. 408-414.

103. Wang Y., Li J., Hu Y., Liang Q., Wei M., Zhub F. Ebola vaccines in clinical trial: The promising candidates // Hum Vaccin Immunother. 2017. V. 13(1). P. 153-168.

104. Watanabe S, Noda T, Halfmann P, Jasenosky L, Kawaoka Y. Ebola virus (EBOV) VP24 inhibits transcription and replication of the EBOV genome. // J Infect Dis. 2007. V. 196(Suppl 2). P. S284-S290.

105. Wec A.Z., Herbert A.S., Murin C.D.et al. Antibodies from a Human Survivor Define Sites of Vulnerability for Broad Protection against Ebolaviruses. // Cell. 2017. V. 169(5). P. 878-890.

106. Weingartl H.M., Embury-Hyatt C., Nfon C., Leung A., Smith G., Kobinger G. Transmission of Ebola virus from pigs to non-human primates. // Sci Rep. 2012. V. 2. P. 811.

107. Xu L., Sanchez A., Yang Z., Zaki S.R., Nabel E.G., Nichol S.T., Nabel G.J. Immunization for Ebola virus infection. // Nature medicine 1998. V. 4. P. 37-42.

108. Yano T., Fukuta M., Maeda C., Akachi S., Matsuno Y., Yamadera M., Kobayashi A., Nagai Y., Kusuhara H., Kobayashi T.et al. Epidemiological investigation and seroprevalence of human parainfluenza virus in Mie Prefecture in Japan during 2009-2013. // Jpn J Infect Dis. 2014. V. P. 506-508.

109. Zaki S.R., Goldsmith C.S. Pathologic features of filovirus infections in humans. // Curr Top Microbiol Immunol. 1999. V. 235. P. 97-116.

110. Zampieri C.A., Sullivan N.J., Nabel G.J. Immunopathology of highly virulent pathogens: insights from Ebola virus. // Nat Immunol. 2007. V. 8(11). P. 1159-64.

111. Zhu F.C., Hou L.H., Li J.X., Wu S.P., Liu P., Zhang G.R., Hu Y.M., Meng F.Y., Xu J.J., Tang R.et al. Safety and immunogenicity of a novel recombinant adenovirus type-5 vector-based Ebola vaccine in healthy adults in China: preliminary report of a randomised, double-blind, placebo-controlled, phase 1 trial. // Lancet. 2015. V. 385. P. 2272-2279.

БЛАГОДАРНОСТИ

Хочу выразить глубокую благодарность моему научному руководителю, доктору биологических наук, член-корреспонденту РАН, заместителю директора ФГБУ "НИЦЭМ им. Н.Ф.Гамалеи" Минздрава России Логунову Денису Юрьевичу за возможность выполнения данной диссертационной работы. Отдельно хочу поблагодарить доктора медицинских, профессора Колобухину Людмилу Васильевну за оказание помощи в выполнении данной работы. Также хочу поблагодарить кандидата медицинских наук Тухватулина Амира Ильдаровича, Должикову Инну Вадимовну, Джаруллаеву Алину Шахмировну, Симакову Яну Владимировну. Выражаю огромную благодарность доктору биологических наук, кандидату медицинских наук, член-корреспонденту РАН, начальнику филиала №7 ФГБУ «ГВКГ им. Н.Н. Бурденко» Бабире Владимиру Федоровичу, заведующей терапевтическим отделением Волчихиной Светлане Владимировне, а также начальнику группы анестезиологии и реанимации Чихляеву Олегу Геннадьевичу. Хочу поблагодарить доктора биологических наук, член-корреспондента РАН, начальника "48 ЦНИИ" Министерства обороны России Борисевича Сергея Владимировича и сотрудников "48 ЦНИИ" Министерства обороны России за оказание помощи в выполнении отдельных этапов работы. Хочу выразить благодарность рецензентам: доктору биологических наук Николаевой Татьяне Николавне, доктору биологических наук, профессору Наровлянскому Александру Наумовичу, за помощь в подготовке материала диссертации к защите и проведении апробации.

Свою глубокую признательность выражаю ученому секретарю диссертационного совета доктору медицинских наук, профессору Русаковой Екатерине Владимировне, а так же ученому секретарю Центра кандидату биологических наук Кожевниковой Людмиле Кондратьевне.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Таблица№1. Показатели (M±m) периферической крови у добровольцев первого этапа исследования в динамике наблюдения

Показатели Группа До введения 3 день 5 день 7 день

Гемоглобин (М 130-160, ж 120-150 г/л) 1А (n=12) 151,333 ± 2,717 153,417 ± 3,026 155,75 ± 2,626 154,75 ± 3,184

1Б (n=12) 149,833 ± 3,737 150,167 ± 3,157 150,167 ± 3,157 149,167 ± 3,346

Эритроциты (М 4,0-5,0; ж 3,5-4,5) 1А (n=12) 4,292 ± 0,054 4,567 ± 0,096 4,717 ± 0,105 4,492 ± 0,089

1Б (n=12) 4,2 ± 0,072 4,5 ± 0,12 4,5 ± 0,12 4,417 ± 0,089

Лейкоциты (4,0-9,0 х 109/л) 1А (n=12) 5,917 ± 0,293 5,942 ± 0,254 6,35 ± 0,257 6,083 ± 0,278

1Б (n=12) 6,183 ± 0,365 5,942 ± 0,297 5,942 ± 0,297 6,408 ± 0,182

Тромбоциты (180-320 х 109/л) 1А (n=12) 256,25 ± 7,282 265,417 ± 7,988 261,25 ± 7,861 263,75 ± 7,96

1Б (n=12) 245,5 ± 6,841 251,667 ± 11,022 251,667 ± 11,022 248,5 ± 7,393

Гематокрит (38,0-50,0 %) 1А (n=12) 44,25 ± 0,74 44,833 ± 0,851 45,417 ± 0,783 45,083 ± 0,917

1Б (n=12) 43,917 ± 1,026 43,667 ± 0,932 43,667 ± 0,932 43,417 ± 0,949

СОЭ (М 3-10, ж 5-15, мм/ч) 1А (n=12) 5,833 ± 1,127 7,75 ± 2,333 9 ± 1,43 6,417 ± 1,3

1Б (n=12) 7,917 ± 2,439 9,083 ± 2,491 9,083 ± 2,491 5,583 ± 1,345

Лимфоциты (18-38 %) 1А (n=12) 30,333 ± 1,519 33,5 ± 1,96 30,167 ± 0,991 27,583 ± 1,164

1Б (n=12) 29,917 ± 1,5 31,833 ± 1,147 31,833 ± 1,147 30,833 ± 1,492

Базофилы (0,5-1,0 %) 1А (n=12) 0,083 ± 0,083 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 0,25 ± 0,131 0 ± 0 0 ± 0 0,083 ± 0,083

Эозинофилы (1-5 %) 1А (n=12) 1 ± 0,174 1,417 ± 0,26 1,083 ± 0,193 1 ± 0,302

1Б (n=12) 1,083 ± 0,379 1,167 ± 0,474 1,167 ± 0,474 1 ± 0,213

Нейтрофилы П/Я (1-6 %) 1А (n=12) 4,667 ± 0,466 4,667 ± 0,512 3,75 ± 0,25 3,833 ± 0,441

1Б (n=12) 4,75 ± 0,524 5,5 ± 0,399 5,5 ± 0,399 4,417 ± 0,434

Нейтрофилы С/Я (50-72 %) 1А (n=12) 55,833 ± 1,45 48,833 ± 2,696 155,75 ± 2,626 154,75 ± 3,184

1Б (n=12) 56,667 ± 1,096 53,833 ± 1,37 150,167 ± 3,157 149,167 ± 3,346

Моноциты (3-11 %) 1А (n=12) 8,083 ± 0,583 9 ± 0,807 4,717 ± 0,105 4,492 ± 0,089

1Б (n=12) 7,25 ± 0,641 7,583 ± 0,866 4,5 ± 0,12 4,417 ± 0,089

Таблица№2. Показатели (M±m) биохимического анализа крови у добровольцев первого этапа исследования в динамике наблюдения

Показатели Группа До введения 3 день 5 день 7 день

КФК (М до 190 ед/л, ж до 165 ед/л) 1А (n=12) 70,333 ± 7,506 58,5 ± 5,566 53,9 ± 5,568 60,083 ± 5,566

1Б (n=12) 96,667 ± 14,984 67,083 ± 5,064 67,083 ± 5,064 86,583 ± 7,064

АЛТ (М до 38 ед, ж до 31 ед) 1А (n=12) 22,667 ± 2,224 25,167 ± 4,011 26,427 ± 3,015 25,083 ± 4,011

1Б (n=12) 24,333 ± 1,88 25,167 ± 1,74 25,167 ± 1,74 24,083 ± 1,74

АСТ (М до 40 ед, ж до 31 ед.) 1А (n=12) 24,333 ± 1,018 24,667 ± 2,108 24,512 ± 2,106 24,75 ± 2,108

1Б (n=12) 26,25 ± 1,754 24,583 ± 1,649 24,583 ± 1,649 25,666 ± 1,649

Креатинин (М 71-115 , ж 53-106 мкмоль/л) 1А (n=12) 100,75 ± 2,905 100 ± 2,73 97,5 ± 2,65 98,25 ± 2,73

1Б (n=12) 105,75 ± 2,845 105,083 ± 3,185 105,083 ± 3,185 105,083 ± 3,185

Мочевина (2,5-8,32 ммоль/л) 1А (n=12) 3,392 ± 0,167 3,467 ± 0,167 3,827 ± 0,214 3,741 ± 0,167

1Б (n=12) 3,758 ± 0,222 4,008 ± 0,254 4,008 ± 0,254 3,933 ± 0,247

Общ. Белок (65-85 г/л) 1А (n=12) 70,75 ± 1,256 70,167 ± 1,134 71,777 ± 1,574 70,833 ± 1,134

1Б (n=12) 72,583 ± 1,5 71,833 ± 0,903 71,833 ± 0,903 73,25 ± 0,135

Глюкоза (3,9-6,3 ммоль/л) 1А (n=12) 4,508 ± 0,17 4,8 ± 0,125 4,8 ± 0,125 4,9 ± 0,125

1Б (n=12) 4,633 ± 0,121 4,55 ± 0,122 4,55 ± 0,122 4,71 ± 0,122

Билирубин (8,5-20,5 мкмоль/л) 1А (n=12) 12,5 ± 1,123 11,925 ± 0,845 11,475 ± 0,845 11,925 ± 0,845

1Б (n=12) 11,717 ± 0,723 11,817 ± 0,575 11,817 ± 0,575 11,241 ± 0,455

Холестерин (До 5,2 ммоль/л) 1А (n=12) 3,833 ± 0,293 3,7 ± 0,168 3,7 ± 0,168 3,825 ± 0,168

1Б (n=12) 4,083 ± 0,206 3,85 ± 0,199 3,85 ± 0,199 3,675 ± 0,154

Таблица№3. Показатели общего анализа мочи (M±m) у добровольцев первого этапа исследования в динамике наблюдения

Показатели Группа До введения 3 день 5 день 7 день

Удельный вес (1,001 до 1,035(80) 1А (n=12) 1025,417 ± 1,3 1,02 ± 0,002 1,025 ± 0,001 1,025 ± 0,002

1Б (n=12) 1027,833 ± 1,029 1023,333 ± 1,667 1023,333 ± 1,667 1024,833 ± 1,44

Общий белок (0-следы г/л) 1А (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Лейкоциты (ед в мл, нет /возможны следы) 1А (n=12) 0,667 ± 0,355 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 0,583 ± 0,336 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Эритроциты (нет/следы, ед/мл; 0 -2 в пз/р) 1А (n=12) 0 ± 0 2,083 ± 2,083 0,25 ± 0,87 0 ± 0

1Б (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Соли (нет/следы, п/зр) 1А (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0,5 ± 0,337 0,25 ± 0,25

1Б (n=12) 0 ± 0 0,333 ± 0,256 0,333 ± 0,256 0,167 ± 0,167

Слизь (нет/следы, п/зр) 1А (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0,167 ± 0,112

Цилиндры (нет/следы, п/зр) 1А (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Бактерии (нет/следы, п/зр) 1А (n=12) 5,792 ± 0,13 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 5,917 ± 0,104 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

рН (4,6-8,0) 1А (n=12) 0 ± 0 5,808 ± 0,284 5,708 ± 0,156 5,833 ± 0,071

1Б (n=12) 0 ± 0 5,708 ± 0,096 5,708 ± 0,096 5,792 ± 0,13

Кетоны (нет, ммоль/л) 1А (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

1Б (n=12) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Таблица №4. Показатели гуморального иммунитета (M±m) у добровольцев первого этапа исследования в динамике наблюдения

Показатели Группа До введения 3 день 7 день

(0,9-5 г/л) 1А 4,53 ± 0,59 4,65 ± 0,64 3,8 ± 0,91

1Б 4,49 ± 0,34 4,77 ± 0,47 2,63 ± 0,41

(0,7-3,7 г/л) 1А 3,01 ± 1 2,9 ± 1,03 1,96 ± 0,43

1Б 3,93 ± 1,29 4,57 ± 1,46 1,72 ± 0,24

(9-20 г/л) 1А 19,21 ± 2,78 20,51 ± 1,84 18,58 ± 1,42

1Б 18,33 ± 1,96 20,11 ± 1,61 16,81 ± 1,2

Фагоцитарный показатель: латекс-тест (40-82 %) 1А 68,42 ± 0,73 68,5 ± 0,94 70,67 ± 0,72

1Б 66,25 ± 1,72 67,92 ± 1,19 70,17 ± 0,49

ЦИК с 4,5% ПЭГ (0-120 ед/л) 1А 46,58 ± 3 68,92 ± 12,69 74,92 ± 15,97

1Б 52,67 ± 18,02 67,5 ± 16,25 60,83 ± 9,19

18 Е (0-130 г/л) 1А 79,250 ± 46,25 98,083 ± 64,5 151,417 ± 115,166

1Б 27,167 ± 4,99 28,667 ± 5,379 32,833 ± 6,766

Таблица №5. Показатели клеточного иммунитета (M±m) у добровольцев первого этапа исследования в динамике наблюдения

Показатели Группа До введения 3 день 7 день

Лейкоциты (4,5-9,5 х 109/л) 1А (n=12) 5,95 ± 0,47 5,61 ± 0,31 5,85 ± 0,33

1Б (n=12) 5,89 ± 0,55 5,15 ± 0,34 6,56 ± 0,41

Лимфоциты (0,8-3,6 х 109/л) 1А (n=12) 1,66 ± 0,18 1,67 ± 0,1 2,03 ± 0,15

1Б (n=12) 1,85 ± 0,18 1,58 ± 0,16 1,85 ± 0,18

Лимфоциты (18-38, %) 1А (n=12) 28,17 ± 2,76 30,25 ± 2,34 34,33 ± 2,2

1Б (n=12) 32,33 ± 1,9 30,58 ± 1,97 28,75 ± 2,53

Нейтрофилы (1,9-6,5 х 109/л) 1А (n=12) 4,29 ± 0,4 4,03 ± 0,27 3,83 ± 0,27

1Б (n=12) 4,06 ± 0,45 3,58 ± 0,26 4,71 ± 0,39

CD3 (55-80, %) 1А (n=12) 69,33 ± 1,51 67,25 ± 0,96 67,42 ± 1,11

1Б (n=12) 67,25 ± 0,88 69 ± 1,33 69 ± 0,92

CD3 абс (800-2200 ед/л) 1А (n=12) 1143,67 ± 117,54 1125,75 ± 80,69 1374,83 ± 112,84

1Б (n=12) 1244,5 ± 114,57 979,9 ± 141,17 1286,92 ± 129,98

CD4 (31-49,%) 1А (n=12) 39,33 ± 0,96 39,17 ± 1,19 39,25 ± 0,95

1Б (n=12) 39 ± 0,64 40,17 ± 0,94 40 ± 0,54

CD4 абс (600-1600 ед/л) 1А (n=12) 649,67 ± 67,23 657,58 ± 53,57 803,92 ± 71,47

1Б (n=12) 721 ± 66,23 631,5 ± 66,73 739,25 ± 78,54

CD8 (19-37,%) 1А (n=12) 29,17 ± 0,72 27 ± 0,6 27,75 ± 0,55

1Б (n=12) 82,92 ± 55,74 28,5 ± 0,74 28,42 ± 0,66

CD8 абс (300-800 ед/л) 1А (n=12) 480,5 ± 50,44 450,42 ± 30,2 557,92 ± 44,4

1Б (n=12) 504,75 ± 48,39 448,58 ± 47,12 525,67 ± 50,83

CD19 (5-18, %) 1А (n=12) 14,58 ± 0,85 11,83 ± 0,96 14,33 ± 1,23

1Б (n=12) 12,75 ± 0,95 11,67 ± 0,96 14,42 ± 0,78

CD19 абс (100-480, ед/л) 1А (n=12) 236,17 ± 21,95 200,58 ± 27,19 289,5 ± 33,22

1Б (n=12) 238 ± 26,46 183,83 ± 22,53 261 ± 22,09

CD16 (5-20 %) 1А (n=12) 16,75 ± 0,95 15,67 ± 1,39 15,5 ± 1,31

1Б (n=12) 17,92 ± 1,5 16,42 ± 1,05 16,58 ± 1,35

Таблица №6. Показатели клинического анализа крови (M±m) у добровольцев, вакцинированных У дозы, в динамике

наблюдения (n=30)

Показатели До введения 3 день 5 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

Гемоглобин (120-140 (Ж), 130160 (М) г/л) 152,567 ± 2,229 153,767 ± 2,374 155,333 ± 2,166 153,567 ± 2,291 151,267 ± 2,331 153 ± 2,75 150,27 ± 2,39 150,37 ± 2,52 150,1 ± 2,55

Эритроциты (3,9-4,7 (Ж), 4-5 (М) х 1012/п) 4,333 ± 0,044 4,423 ± 0,075 4,673 ± 0,082 4,36 ± 0,05 4,38 ± 0,053 4,37 ± 0,06 4,37 ± 0,05 4,51 ± 0,08 4,58 ± 0,09

Лейкоциты (4-9 х 1012/п) 6,143 ± 0,16 6,033 ± 0,208 6,26 ± 0,233 5,95 ± 0,149 6,28 ± 0,143 6,23 ± 0,21 6,21 ± 0,2 6,46 ± 0,17 6,29 ± 0,17

Тромбоциты (180-320 х 1012/п) 264,31 ± 4,832 269,633 ± 4,953 259,167 ± 4,622 263,6 ± 4,511 258,133 ± 5,199 261,43 ± 5,44 262 ± 6,1 257,87 ± 6,54 257,34 ± 5,64

Гематокрит (36-48 %) 44,633 ± 0,641 44,967 ± 0,687 45,1 ± 0,617 44,733 ± 0,652 44,233 ± 0,637 44,27 ± 0,86 44 ± 0,65 43,77 ± 0,68 43,93 ± 0,74

СОЭ (0-15 мм/ч) 5,133 ± 0,693 8,433 ± 1,23 7,233 ± 1,445 8,767 ± 1,165 6,033 ± 0,809 12,27 ± 1,73 9,7 ± 1,33 9,17 ± 1,17 6,07 ± 0,85

Лимфоциты (19-37 %) 31,533 ± 0,756 28,8 ± 0,968 31,5 ± 1,041 29,567 ± 1,158 29,633 ± 0,812 29,1 ± 1,24 30,87 ± 0,85 30,6 ± 0,82 31,83 ± 0,8

Базофилы (0-0,065 %) 0,033 ± 0,033 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ±0 1 ± 0 0 ±0 0 ±0 0 ±0

Эозинофилы (0,5-5 %) 0,933 ± 0,067 0,8 ± 0,121 0,967 ± 0,112 0,867 ± 0,079 1,033 ± 0,122 0,9 ± 0,13 1,27 ± 0,19 1,13 ± 0,11 0,93 ± 0,08

Нейтрофилы П/Я (16%) 4,233 ± 0,286 5,767 ± 0,358 5,3 ± 0,311 4,7 ± 0,263 5,267 ± 0,283 5,33 ± 0,37 5,47 ± 0,3 5,23 ± 0,3 4,52 ± 0,23

Нейтрофилы С/Я (47-72 %) 54,7 ± 1,251 55,567 ± 1,071 53,933 ± 1,154 55,7 ± 0,755 54,867 ± 0,995 57,03 ± 1,35 54,03 ± 0,97 55,3 ± 0,92 55,79 ± 0,89

Моноциты (3-11 %) 7,4 ± 0,388 9,1 ± 0,35 8,333 ± 0,408 8,9 ± 0,845 8,667 ± 0,369 8,6 ± 0,78 8,4 ± 0,45 7,73 ± 0,4 6,9 ± 0,41

Таблица №7. Показатели биохимического анализа крови (M±m) у добровольцев, вакцинированных У дозы, в динамике наблюдения (n=30)_________

Показатели До введения 3 день 5 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

КФК (0-190 (М), 0-165(Ж) ед/л) 77,633 ± 13,983 55,467 ± 5,746 52,733 ± 4,181 67,3 ± 7,012 66,533 ± 7,927 57,87 ± 7,67 71,23 ± 8,57 90,6 ± 11,94 68,7 ± 6,66

АЛТ (0-40 ед/л) 21,8 ± 1,679 22,967 ± 1,794 24,867 ± 2,208 27,4 ± 2,726 19,667 ± 1,935 21,1 ± 2,09 22,5 ± 2,07 22,53 ± 2,21 23 ± 2,24

АСТ (0-40 ед/л) 24,8 ± 1,334 23,633 ± 0,956 25,033 ± 1,095 26,467 ± 1,184 20,633 ± 0,78 22,93 ± 1,05 23,87 ± 1,05 23,77 ± 0,98 24,34 ± 1,09

Креатинин (М 71-115, ж 53-106 мкМ/л) 94,5 ± 1,723 102,033 ± 2,591 103,767 ± 2,2 101,867 ± 2,093 100,5 ± 2,095 105,86 ± 2,2 103,97 ± 1,87 107,1 ± 1,84 95,55 ± 1,72

Мочевина (2,5-8,3 мМ/л) 3,547 ± 0,102 3,577 ± 0,106 3,647 ± 0,1 3,77 ± 0,9576 3,877 ± 0,126 4,14 ± 0,13 3,9 ± 0,13 4,14 ± 0,16 3,94 ± 0,11

Общий белок (65-85 г/л) 70,967 ± 0,635 71,533 ± 0,722 70,133 ± 0,79 71,267 ± 0,743 69,633 ± 0,607 72,66 ± 0,69 72,7 ± 0,73 73,47 ± 0,76 74,79 ± 0,81

Глюкоза (3,9-6,3 мМ/л) 4,667 ± 0,092 5,2 ± 0,117 5,077 ± 0,076 5,257 ± 0,103 4,687 ± 0,101 4,61 ± 0,09 4,87 ± 0,09 4,96 ± 0,1 5,17 ± 0,1

Билирубин (8,5-20,5 мкМ/л) 11,2 ± 0,354 11,097 ± 0,356 11,138 ± 0,408 13,703 ± 2,49 11,327 ± 0,415 11,16 ± 0,39 11,3 ± 0,39 11,5 ± 0,46 11,77 ± 0,5

Холестерин (3,1-6,2 мМ/л) 3,997 ± 0,143 3,727 ± 0,127 3,966 ± 0,125 4,05 ± 0,112 3,82 ± 0,115 3,38 ± 0,14 3,9 ± 0,12 3,89 ± 0,12 4,12 ± 0,13

Таблица № 8. Показатели общего анализа мочи (M±m) у добровольцев вакцинированных У дозы, в динамике наблюдения (n=30)________

Показатели До введения 3 день 5 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

Удельный вес 1,023 ± 1,023 ± 1,023 ± 1,024 ± 1,025 ± 1,02 ± 0 1,02 ± 0 1,02 ± 0 1,02 ± 0

(1,001-1,035 г/мл) 0,001 0,001 0,001 0,001 0,001

Общий белок (0-0,01 г/л) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Лейкоциты (0 в поле зрения) 0 ± 0 0,5 ± 0,5 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0,5 ± 0,5 0 ± 0

Эритроциты (0-1,14 в п/з) 0 ± 0 2,5 ± 1,393 0 ± 0 0,5 ± 0,5 0,833 ± 0,833 2,76 ± 2,76 0,83 ± 0,83 0,03 ± 0,03 0,17 ± 0,17

Соли (0-1,36 в поле зрения) 0,233 ± 0,177 0,267 ± 0,151 0,033 ± 0,033 0 ± 0 0 ± 0 0,1 ± 0,1 0,2 ± 0,17 0,37 ± 0,21 0,28 ± 0,28

Слизь (0-60 в поле зрения) 0,067 ± 0,046 0,133 ± 0,063 0,2 ± 0,139 0,433 ± 0,207 0,1 ± 0,056 1,21 ± 1,17 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Эпителий (0-1,14 п/зр) 0 ± 0 0 ± 0 0,1 ± 0,056 0,1 ± 0,056 0,083 ± 0,083 0 ± 0 1,83 ± 0,47 1,67 ± 0,43 1,52 ± 0,35

Бактерии (0-17,5 в поле зрения) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 1,433 ± 0,202 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

рН (4,6 - 8) 5,931 ± 0,077 5,733 ± 0,067 0 ± 0 0 ± 0 5,917 ± 0,08 5,84 ± 0,07 6,07 ± 0,11 6,07 ± 0,1 5,97 ± 0,1

Кетоны (0 в поле зрения) 0 ± 0 0 ± 0 5,75 ± 0,143 6,05 ± 0,094 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0,13 ± 0,13 0 ± 0

Глюкоза (0 п/зр) 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Прозрачность 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Таблица №9. Показатели гуморального иммунитета (M±m) у добровольцев, вакцинированных У дозы, в динамике

наблюдения (n=30)

Показатели До введения 3 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

1§Л (0,9-5 г/л) 3,6 ± 0,264 3,441 ± 0,268 2,331 ± 0,194 3,303 ± 0,213 3,01 ± 0,21 3,71 ± 1,48 2,81 ± 0,19 2,69 ± 0,18

1§М (0,7-3,7 г/л) 3,307 ± 0,333 3,103 ± 0,41 2,052 ± 0,151 3,107 ± 0,31 2,47 ± 0,22 2,21 ± 0,27 1,88 ± 0,15 1,97 ± 0,16

(9-20 г/л) 18,231 ± 0,504 11,631 ± 1,326 9,445 ± 0,514 18,983 ± 0,496 17,07 ± 0,71 13,12 ± 0,73 12,52 ± 0,45 11,4 ± 0,63

18 Е (0-130 г/л) 65,379 ± 21,482 110,138 ± 35,104 87,733 ± 20,886 99,08 ± 33,77 122,74 ± 47,76 117,44 ± 45,18 161,87 ± 57,86 99,76 ± 37,57

Фагоцитарный показатель: латекс-тест (40-82 %) 69,207 ± 0,891 68,448 ± 0,824 69,621 ± 0,646 69,41 ± 0,75 66,65 ± 0,78 69,52 ± 0,78 69,27 ± 1,33 69,55 ± 0,47

ЦИК с 4,5% ПЭГ (0-120 ед/л) 66,034 ± 8,924 113,138± 10,172 106,862 ± 9,706 86,24 ± 5,99 121,43 ± 7,55 85,76 ± 11,05 135,2 ± 15,79 79,34 ± 8,14

Таблица №10. Показатели клеточного иммунитета (M±m) у добровольцев, вакцинированных У дозы, в динамике наблюдения (n=30)_______

Показатели До введения 3 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

Лейкоциты 7,941 ± 0,266 6,483 ± 0,228 6,71 ± 0,233 7,366 ± 0,236 6,74 ± 0,27 7,18 ± 0,26 7,57 ± 0,22 7,37 ± 0,29

(4,5-9,5 х 109/л)

Лимфоциты (0,8- 3,069 ± 0,129 2,386 ± 0,089 2,817 ± 0,115 2,824 ± 0,136 2,67 ± 0,1 2,8 ± 0,09 2,93 ± 0,13 2,88 ± 0,14

3,6 х 109/л)

Лимфоциты 38,345 ± 37,172 ± 42,172 ± 37,69 ± 1,149 40,22 ± 1,3 39,36 ± 1,33 38,5 ± 1,19 39,07 ± 1,21

(18-38,%) 1,047 1,245 0,968

Нейтрофилы 4,872 ± 0,187 4,097 ± 0,193 5,314 ± 1,461 4,61 ± 0,193 4,14 ± 0,21 4,38 ± 0,23 4,64 ± 0,16 4,5 ± 0,3

(1,9-6,5 х 109/л)

CD 3 68,931 ± 68,069 ± 68,828 ± 68,517 ± 67,35 ± 0,7 67,4 ± 0,58 67,47 ± 0,38 68,83 ± 0,43

(55-80,%) 0,478 0,639 0,458 0,483

CD 3 абс. 2116,241 ± 1626,207 ± 1946,379 ± 1891,241 ± 1807,35 ± 1890,2 ± 1980,6 ± 1971,93 ±

(800-2200 ед/л) 89,567 63,45 86,94 71,573 80,05 68,69 91,76 94,36

CD 4 40,862 ± 0,55 40,103 ± 0,5 40,517 ± 40,241 ± 0,48 39,83 ± 0,46 39,96 ± 0,48 39,8 ± 0,27 39,79 ± 0,37

(31-49%) 0,508

CD 4 абс 1256,069 ± 956,379 ± 1150,414 ± 1113 ± 45,89 1065,04 ± 1122,04 ± 1171 ± 55,74 1145,69 ±

(600-1600 ед/л) 55,759 36,653 57,323 48,87 44,38 56,75

CD 8 27,552 ± 27,103 ± 27,621 ± 0,41 27,414 ± 26,22 ± 0,49 26,92 ± 0,48 26,87 ± 0,21 28,48 ± 0,37

(19-37,%) 0,349 0,469 0,327

CD8 абс 844,586 ± 651,897 ± 778,034 ± 754,621 ± 696,35 ± 748,16 ± 783,97 ± 818,52 ±

(300-800 ед/л) 35,802 28,203 33,53 27,333 41,64 27,98 35,01 41,66

CD 19 16,414 ± 0,74 11,448 ± 13,207 ± 0,49 15,517 ± 17,04 ± 0,59 13,04 ± 0,63 15,67 ± 0,63 16,07 ± 0,43

(5-18,%) 0,687 0,572

CD 19 абс 497,655 ± 270,69 ± 374,138 ± 432,414 ± 460,26 ± 364,4 ± 20,58 447,87 ± 459,31 ±

(100-480, ед/л) 32,5 17,23 21,884 24,57 27,75 23,04 23,06

CD 16 17,345 ± 16,586 ± 16,621 ± 0,54 17,379 ± 15,57 ± 0,53 17,28 ± 0,86 15,53 ± 0,67 18,03 ± 0,41

(5-20%) 0,723 0,676 0,631

CD 16 абс 536,345 ± 396,207 ± 468,207 ± 472,862 ± 407,61 ± 482,24 ± 452,23 ± 515,34 ±

(100-500 ед/л) 33,65 22,654 23,728 19,824 22,42 27,38 25,76 26,53

CD4/CD8 1,49 ± 0,034 1,497 ± 0,034 1,483 ± 0,036 1,486 ± 0,03 1,5 ± 0,02 1,5 ± 0,04 1,49 ± 0,02 1,39 ± 0,03

(1,2-2,5%)

Таблица №11. Клинические показатели общего анализа крови (M±m) у добровольцев, вакцинированных полной дозой, в динамике наблюдения (n=30) ________

Показатели До введения 3 день 5 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

Гемоглобин (120-140 (Ж), 130-160 (М) г/л) 157,5 ±1,964 154,9 ±2,033 154,9 ±2,111 153,714 ±2,416 151,667 ±2,497 153,167 ±2,216 151,966 ±2,446 151,724 ±2,302 151,241 ±1,814

Эритроциты (3,9-4,7 (Ж), 4-5(М) х 1012/п) 4,553 ±0,071 4,447 ±0,056 4,547 ±0,056 4,418 ±0,06 4,507 ±0,072 4,577 ±0,058 4,579 ±0,075 4,659 ±0,08 4,514 ±0,049

Лейкоциты (4-9 х 1012/п) 6,36 ±0,176 5,843 ±0,205 6,213 ±0,187 6,339 ± 0,211 6,427 ±0,233 6,167 ±0,196 6,49 ±0,175 6,5 ±0,188 6,483 ±0,168

Тромбоциты (180-320 х 1012/п) 264,8 ±5,135 267,167 ±5,505 265,467 ±4,587 255,286 ±5,437 261,2 ±5,825 252,9 ±6,025 248,448 ±5,208 257,414 ±4,997 254,517 ±5,291

Гематокрит (36-48 %) 46,167 ±0,557 45,133 ±0,583 45,367 ±0,611 45,964 ±1,354 44,2 ±0,742 44,7 ±0,597 44,345 ±0,683 44,207 ±0,634 44,069 ±0,506

СОЭ (0-15 мм/ч) 6,9 ±0,847 5,267 ±0,714 5,8 ±0,55 8,75 ±2,109 6,433 ±1,04 8,967 ±1,104 7,31 ±0,999 10,138 ±1,542 6,483 ±0,955

Лимфоциты (19-37 %) 29,233 ±0,913 29,533 ±0,877 31,1 ±0,823 32,25 ±1,303 32 ±1,388 32,133 ±1,028 30,655 ±1,124 29,241 ±1,052 29,138 ±1,014

Базофилы (0-0,065 %) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0,036 ±0,036 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0,241 ±0,241

Эозинофилы (0,5-5 %) 1,233 ±0,19 0,867 ±0,124 1,033 ±0,122 1,107 ±0,195 1,2 ±0,194 0,933 ±0,126 1,138 ±0,22 1,138 ±0,147 1,207 ±0,104

Нейтрофилы П/Я (16%) 4,9 ±0,227 5,6 ±0,344 4,767 ±0,243 5 ±0,252 5,867 ±0,348 4,467 ±0,324 5,069 ±0,347 4,241 ±0,296 4,276 ±0,237

Нейтрофилы С/Я (4772 %) 56 ±0,927 54,267 ±1,024 54,967 ±0,819 53,286 ±1,352 53,867 ±1,429 54,1 ±1,134 55,172 ±1,06 57,448 ±1,146 58,207 ±1,052

Моноциты (3-11 %) 8,433 ±0,449 9,733 ±0,465 8,133 ±0,386 9,143 ±0,74 7,433 ±0,394 8,933 ±0,452 8,586 ±0,386 8 ±0,489 7,172 ±0,46

Таблица №12. Показатели биохимического анализа крови (M±m) у добровольцев, вакцинированных полной дозой, в динамике наблюдения (n=30)________

Показатели До введения 3 день 5 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

КФК (0-190 (М), 0-165(Ж) ед/л) 85,633 ±7,628 90,067 ±16,362 77,7 ±11,41 86,786 ±7,361 69,433 ±5,246 62,1 ±5,073 85 ±11,051 84,552 ±7,885 72,241 ±7,127

АЛТ (0-40 ед/л) 23,167 ±1,408 24,467 ±2,056 28,633 ±2,744 30,286 ±3,203 20,9 ±1,839 22,567 ±1,764 20,69 ±1,335 20,966 ±1,78 21,793 ±1,738

АСТ (0-40 ед/л) 24,567 ±0,997 25,567 ±1,431 27,567 ±1,203 27,393 ±1,451 22,667 ±0,999 23,533 ±0,931 22,552 ±0,858 23,172 ±1,003 23,931 ±1,01

Креатинин (М 71-115, ж 53106 мкМ/л) 101,267 ±1,84 101,667 ±2,66 103,1 ±1,879 102,643 ±2,009 105,4 ±1,896 109,2 ±2,003 105,517 ±2,244 99,241 ±1,963 100,31 ±1,931

Мочевина (2,5-8,3 мМ/л) 4,52 ±0,148 4,5 ±0,159 4,523 ±0,148 4,346 ±0,156 4,39 ±0,166 4,773 ±0,165 4,641 ±0,228 4,569 ±0,177 4,555 ±0,16

Общий белок (65-85 г/л) 75,1 ±0,71 73,7 ±0,763 74 ±0,758 72,286 ±0,78 72,08 ±2,326 73,6 ±0,833 74,966 ±0,755 75,103 ±0,752 75,759 ±0,746

Глюкоза (3,9-6,3 мМ/л) 4,953 ±0,106 5,28 ±0,087 5,16 ±0,094 4,825 ±0,117 4,837 ±0,092 5,2 ±0,096 5,017 ±0,106 5,028 ±0,092 5,062 ±0,112

Билирубин (8,5-20,5 мкМ/л) 10,963 ±0,465 10,377 ±0,334 10,437 ±0,366 10,921 ±0,489 11,17 ±0,492 10,743 ±0,363 10,634 ±0,381 10,897 ±0,366 10,721 ±0,314

Холестерин (3,1-6,2 мМ/л) 3,79 ±0,109 4,073 ±0,109 4,017 ±0,102 4,193 ±0,122 3,66 ±0,131 3,897 ±0,133 4,059 ±0,12 4,045 ±0,101 4,386 ±0,09

Таблица № 13. Клинические показатели общего анализа мочи (M±m) у добровольцев, вакцинированных полной дозой, в динамике наблюдения (n=30)________

Показатели До введения 3 день 5 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

Удельный вес (1,001-1,035 г/мл) 1,023 ±0,001 1,022 ±0,001 1,025 ±0,001 1,025 ±0,001 1,025 ± 0,001 1,02 ± 0 1,02 ± 0 1,02 ± 0 1,02 ± 0

Общий белок (00,01 г/л) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Лейкоциты (0 в поле зрения) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0, 893 ±0, 893 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0,5 ± 0,5 0 ± 0

Эритроциты (01,14 в п/з) 0 ±0 0,5 ±0,239 1,333 ±0,957 0 ±0 0,833 ± 0,833 2,76 ± 2,76 0,83 ± 0,83 0,03 ± 0,03 0,17 ± 0,17

Соли (0-1,36 в поле зрения) 0,1 ±0,1 0,333 ±0,168 0,267 ±0,166 0 ±0 0 ± 0 0,1 ± 0,1 0,2 ± 0,17 0,37 ± 0,21 0,28 ± 0,28

Слизь (0-60 в поле зрения) 0,133 ±0,063 0,133 ±0,063 0,067 ±0,046 0 ±0 0,1 ± 0,056 1,21 ± 1,17 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Эпителий (0-1,14 п/зр) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0,083 ± 0,083 0 ± 0 1,83 ± 0,47 1,67 ± 0,43 1,52 ± 0,35

Бактерии (0-17,5 в поле зрения) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

рН (4,6 - 8) 5,883 ±0,082 5,667 ±0,05 5,683 ±0,051 0 ±0 5,917 ± 0,08 5,84 ± 0,07 6,07 ± 0,11 6,07 ± 0,1 5,97 ± 0,1

Кетоны (0 в поле зрения) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0,13 ± 0,13 0 ± 0

Глюкоза (0 п/зр) 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Прозрачность 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ±0 0 ± 0 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0 0 ± 0

Таблица №14. Показатели гуморального иммунитета (M±m) у добровольцев, вакцинированных полной дозой, в

динамике наблюдения (n=30)

Показатели До введения 3 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

1§Л 3,663 ±0,132 3,947 ±0,138 3,073 ±0,149 3,227 ±0,12 3,007 ±0,137 3,064 ±0,124 3,131 ±0,119 3,062 ±0,127

(0,9-5 г/л)

1§М 2,213 ±0,275 2,34 ±0,285 2,220 ±0,235 1,78 ±0,158 1,787 ±0,164 1,596 ±0,137 1,69 ±0,149 1,793 ±0,175

(0,7-3,7 г/л)

16,137 16,777 18,01 ±0,691 14,087 12,33 ±0,467 11,361 11,345 9,134 ±0,371

(9-20 г/л) ±0,598 ±0,765 ±0,299 ±0,388 ±0,535

18 Е 169,13 162,03 254 ±73,870 277,233 211,9 73,929 164 ±59,189 169,536

(0-130 г/л) ±65,867 ±55,829 ±79,123 ±60,285 ±9,216 ±58,92

Фагоцитарный 69,333 69,467 67,167 68,9 ±0,769 68,967 69,214 68,862 68,69 ±1,297

показатель:латекс- ±0,828 ±0,796 ±0,797 ±0,495 ±0,708 ±0,658

тест(40-82 %)

ЦИК с 4,5% ПЭГ 98,023 136,29 102 ±6,448 99,067 98 ±8,351 70,036 86,862 80,207

(0-120 ед/л) ±7,787 ±20,506 ±14,917 ±7,214 ±6,958 ±17,644

Таблица №15. Показатели клеточного иммунитета (M±m) у добровольцев, вакцинированных полной дозой, в динамике наблюдения (n=30)________

Показатели До введения 3 день 7 день 21 день 23 день 28 день 35 день 42 день

Лейкоциты 7,703 ±0,343 7,26 ±0,356 7,427 ±0,356 8,033 ±0,394 7,1 ±0,43 7,957 ±0,313 8,948 ±0,426 8,11 ±0,471

(4,5-9,5 х 109/л)

Лимфоциты 2,81 ±0,134 2,783 ±0,156 2,973 ±0,144 2,883 ±0,153 2,673 ±0,162 3,064 ±0,125 3,193 ±0,185 2,766 ±0,153

(0,8-3,6 х 109/л)

Лимфоциты 37,067 37,2 ±1,227 40,567 ±1,17 36,533 38,633 38,643 36,241 ±1,54 32,617 ±1,99

(18-38,%) ±1,339 ±1,324 ±1,258 ±1,147

Нейтрофилы 4,827 ±0,272 4,67 ±0,242 4,470 ±0,265 5,117 ±0,302 5,597 ±1,232 4,893 ±0,247 5,752 ±0,353 5,362 ±0,403

(1,9-6,5 х 109/л)

CD 3 68,667 68,533 68,676 69,767 68,4 ±0,464 66,464 68 ±0,384 68,793

(55-80,%) ±0,473 ±0,571 ±0,389 ±0,386 ±2,238 ±0,345

CD 3 абс. 1932,2 1887,533 1998,967 2013,767 1828,9 2107,036 2169,138 1906,138

(800-2200 ед/л) ±92,994 ±97,833 ±105,769 ±110,397 ±114,659 ±84,606 ±122,91 ±98,63

CD 4 (31-49%) 40,367±0,382 39,127±1,274 40,567±0,370 40,9 ±0,379 40,7 ±0,432 41,036±0,781 39,621±0,366 39,034±1,324

CD 4 абс 1136,233 1108,9 1202,200 1199,7 1088,733 1235,643 1274,241 1106,414

(600-1600 ед/л) ±57,054 ±60,69 ±60,449 ±76,986 ±68,576 ±52,732 ±74,531 ±56,25

CD 8 (19-37,%) 27,4 ±0,385 27,567±0,452 27,5 ±0,257 28,4 ±0,451 27,333±0,363 27,964±0,478 27,69 ±0,294 28 ±0,258

CD8 абс 769,3±35,709 766,133 876,069 813,8 729,767 857,714 876,069 772,828

(300-800 ед/л) ±38,31 ±47,775 ±41,619 ±46,383 ±35,147 ±47,775 ±42,576

CD 19 14,6 ±0,479 15,733 15,759 14,567 15,033 15,607 15,759 15,408